中草药  2017, Vol. 48 Issue (2): 263-265
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引用本文doi: 10.7501/j.issn.0253-2670.2017.02.007
朱仝飞, 陈日荣, 孙庆文, 闫志慧. 西藏胡黄连化学成分研究[J]. 中草药, 2017, 48(2): 263-265.
ZHU Tong-fei, CHEN Jih-jung, SUN Qing-wen, YAN Zhi-hui. Chemical constituents from Picrorhiza scrophulariiflora[J]. Chinese Traditional and Herbal Drugs, 2017, 48(2): 263-265 .
西藏胡黄连化学成分研究
朱仝飞1,2, 陈日荣3, 孙庆文4, 闫志慧1,2     
1. 重庆医药高等专科学校, 重庆 401331;
2. 重庆市药物制剂工程技术研究中心, 重庆 401331;
3. 国立阳明大学, 台湾 台北 11221;
4. 贵阳中医学院, 贵州 贵阳 550025
收稿日期: 2016-07-12
基金项目: 重庆市教委科学技术研究项目（KJ1502701）
作者简介: 朱仝飞(1983-),男,讲师,研究方向为天然产物化学。Tel:(023)61969190;E-mail:396435070@qq.com;
陈日荣(1966-),男,教授,研究方向为天然产物化学。E-mail:jjchen@tajen.edu.tw
通信作者: 闫志慧(1983-),女,讲师,研究方向为天然产物化学。Tel:(023)61969190;E-mail:chuanqichuanqi@163.com
并列第一作者
摘要: 目的 对西藏胡黄连 Picrorhiza scrophulariiflora干燥根茎进行化学成分研究。 方法 采用反复硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱、制备薄层色谱及重结晶等手段进行分离纯化，运用波谱学方法鉴定化合物的结构。 结果 从西藏胡黄连的甲醇超声提取物中分离得到10个化合物，分别为β-谷甾醇（1）、棕榈酸（2）、反式阿魏酸二十八酯（3）、3β-羟基-豆甾-5-烯-7-酮（4）、6β-羟基-豆甾-4-烯-3-酮（5）、咖啡酸甲酯（6）、原儿茶酸甲酯（7）、香草酸（8）、咖啡酸（9）、云杉苷（10）。 结论 化合物2~7、9为首次从胡黄连属植物中分离得到。
关键词: 西藏胡黄连     甾体化合物     棕榈酸     反式阿魏酸二十八酯     原儿茶酸甲酯     香草酸     咖啡酸    
Chemical constituents from Picrorhiza scrophulariiflora
ZHU Tong-fei1,2, CHEN Jih-jung3, SUN Qing-wen4, YAN Zhi-hui1,2     
1. Chongqing Medical and Pharmaceutical College, Chongqing 401331, China;
2. Chongqing Engineering Research Center of Pharmaceutical Sciences, Chongqing 401331, China;
3. National Yang-Ming University, Taipei 11221, China;
4. Guiyang College of Traditional Chinese Medicine, Guiyang 550025, China
Abstract: Objective To study the constituents in the roots of Picrorhiza scrophulariiflora. Methods The constituents of P. scrophulariiflora were separated and purified with chromatographic methods. The structures were elucidated by spectroscopic methods and chemical analyses. Results Ten compounds were isolated from the roots of P. scrophulariiflora and identified as β-sitosterol(1), palmitic acid(2), octacosyl trans-ferulate(3), 3β-hydroxystigmast-5-en-7-one(4), 6β-hydroxystigmast-4-en-3-one(5), caffeic acid methyl ester(6), protocatechuic acid methyl ester(7), vanillic acid(8), caffeic acid(9), and piceoside(10). Conclusion Compounds 2-7 and 9 are obtained from the plants of Picrorhiza Royle for the first time.
Key words: Picrorhiza scrophulariiflora Pennell     steroids     palmitic acid     octacosyl trans-ferulate     protocatechuic acid methyl ester     vanillic acid     caffeic acid    

西藏胡黄连为玄参科（Scrophulariaceae）胡黄连属Picrorhiza Royle多年生草本植物西藏胡黄连Picrorhiza scrophulariiflora Pennell的干燥根茎。其味苦，性寒，是重要的清虚热药材，具有清热凉血、燥湿消疳的功效，适用于治疗骨蒸劳热、黄疸、冷热泄痢、小儿疳积、自汗、盗汗、痔瘘、疮肿等症[1]。该植物主要分布于我国西藏东南部、云南西北部和四川西南部的海拔3 600～4 400 m的高寒地区。

本实验采用反复硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱、制备薄层色谱及重结晶等方法对西藏胡黄连甲醇超声提取物的正己烷萃取部分的化学成分进行了研究，从中分离得到10个化合物，通过理化性质和波谱分析确定了化合物结构，分别鉴定为β-谷甾醇（β-sitosterol，1）、棕榈酸（palmitic acid，2）、反式阿魏酸二十八酯（octacosyl trans-ferulate，3）、3β-羟基-豆甾-5-烯-7-酮（3β-hydroxystigmast-5-en- 7-one，4）、6β-羟基-豆甾-4-烯-3-酮（6β- hydroxystigmast-4-en-3-one，5）、咖啡酸甲酯（caffeic acid methyl ester，6）、原儿茶酸甲酯（protocatechuic acid methyl ester，7）、香草酸（vanillic acid，8）、咖啡酸（caffeic acid，9）、云杉苷（piceoside，10），其中化合物2～7、9为首次从胡黄连属植物中分离得到。

1 仪器与材料

Bruker AVANCE-400型核磁共振光谱仪（瑞士Bruker公司）；旋转蒸发仪（德国IKA公司）；制备型薄层硅胶F254（德国Merck公司）；Sephadex LH-20（Amersham Pharmacia Biotech AB）；化学试剂均为分析纯。

药材购于重庆慧远药业有限公司，由贵阳中医学院孙庆文教授鉴定为西藏胡黄连Picrorhiza scrophulariiflora Pennell的根茎，样品标本（20140917）保存于重庆医药高等专科学校标本馆。

2 提取与分离

西藏胡黄连干燥生药2.5 kg，用5 L甲醇超声500 W条件下提取3次，每次2 h，提取液减压浓缩回收溶剂，得浸膏1.09 kg（收率43.6%）。浸膏用3.5 L水混悬，分别用等体积的正己烷、醋酸乙酯、正丁醇萃取3次，减压浓缩回收溶剂。得到正己烷浸膏93 g，取浸膏15 g，加二氯甲烷-丙酮（2∶1）混合溶液溶解，20 g硅胶拌样，400 g硅胶装柱，以正己烷-丙酮梯度洗脱，得到7个流分Fr. 1～7。

Fr. 1（1.3 g）经反复重结晶，得到化合物2（23.5 mg）；Fr. 2（1.6 g）经反复重结晶，得到化合物1（38.7 mg）；Fr. 4（3.7 g）经硅胶柱色谱分离，正己烷-醋酸乙酯梯度洗脱，得到5个亚流分Fr. 4-1～4-5，Fr. 4-2（36.3 mg）经二氯甲烷-甲醇（1∶1）溶解，Sephadex LH-20柱色谱、制备薄层色谱分离，得化合物3（2.3 mg），Fr. 4-4（13.3 mg）用制备薄层色谱分离得到化合物4（3.5 mg）、5（6.3 mg）；Fr. 5（2.5 g）经硅胶柱色谱分离，正己烷-丙酮梯度洗脱，得到4个亚流分Fr. 5-1～5-4，Fr. 5-3（10.7 mg）、Fr. 5-4（8.3 mg）经制备薄层色谱分离，分别得到化合物6（4.1 mg）、7（3.3 mg）；Fr. 7（5.3 g）经硅胶柱色谱分离，二氯甲烷-丙酮梯度洗脱，得到6个亚流分Fr. 7-1～7-6，Fr. 7-5（80.8 mg）经Sephadex LH-20柱色谱、制备薄层色谱分离，分别得到化合物8（9.1 mg）、9（5.8 mg），Fr. 7-6（103.3 mg）经Sephadex LH-20柱色谱、制备薄层色谱分离，得到化合物10（4.3 mg）。

3 结构鉴定

化合物1：白色针晶（甲醇），Liebermann- Burchard反应呈阳性，与已知对照品β-谷甾醇共薄层，在3种溶剂系统下展开行为一致，混合后测定熔点不下降，鉴定化合物1为β-谷甾醇。

化合物2：白色针晶（丙酮），香草醛-浓硫酸反应显淡紫色，1H-NMR (500 MHz,CDCl3) δ: 2.35 (2H,t,J = 7.5 Hz,-CH2COOH),1.63 (2H,m,-CH2CH2COOH),1.01～1.42 (24H,m,12×-CH2),0.88 (3H,t,J = 7.0 Hz,H-16)。以上波谱数据与文献报道[2]一致，故鉴定化合物2为棕榈酸。

化合物3：白色无定形粉末（甲醇），FeCl3反应均呈阳性，1H-NMR (500 MHz,CDCl3) δ: 7.61 (1H,d,J = 16.0 Hz,H-2′),7.08 (1H,dd,J = 8.5,1.5 Hz,H-6),7.04 (1H,d,J = 1.6 Hz,H-2),6.92 (1H,d,J = 8.0 Hz,H-5),6.30 (1H,d,J = 16.0 Hz,H-1′),4.19 (2H,t,J = 7.0 Hz,H-1″),3.94 (3H,s,OCH3),1.28 (52H,m,26×-CH2),0.88 (3H,t,J = 7.0 Hz,H-28″)；13C-NMR (125 MHz,CDCl3) δ: 167.3 (C-3′),147.7 (C-4),146.5 (C-3),144.5 (C-1′),127.1 (C-1),123.0 (C-6),115.6 (C-2′),114.6 (C-5),109.1 (C-2),64.5 (C-1″),55.8 (OCH3),31.9 (C-2″),29.6,29.3,29.2 (多个脂肪链上C),28.7 (C-26″),25.9 (C-3″),22.7 (C-27″),14.1 (C-28″)。以上数据与文献报道[3]一致，故鉴定化合物3为反式阿魏酸二十八酯。

化合物4：白色无定形粉末（丙酮），Liebermann- Burchard反应呈阳性，1H-NMR (500 MHz,CDCl3) δ: 0.69 (3H,s,H-18),0.80 (3H,t,J = 7.0 Hz,H-29),0.84 (3H,d,J = 7.0 Hz,H-26),0.93 (3H,d,J = 6.5 Hz,H-27),1.02 (3H,d,J = 6.5 Hz,H-21),1.20 (3H,s,H-19),3.68 (1H,m,H-3) 5.16,5.02 (各1H,dd,J = 16.0,8.0 Hz,H-22,23),5.70 (1H,d,J = 1.5 Hz,H-6)；13C-NMR (125 MHz,CDCl3) δ: 36.2 (C-1),31.1 (C-2),70.4 (C-3),41.8 (C-4),165.3 (C-5),126.0 (C-6),202.4 (C-7),45.4 (C-8),49.9 (C-9),38.6 (C-10),21.1 (C-11),38.3 (C-12),43.0 (C-13),49.8 (C-14),26.2 (C-15),28.5 (C-16),54.6 (C-17),12.0 (C-18),17.3 (C-19),36.0 (C-20),19.0 (C-21),33.9 (C-22),26.0 (C-23),45.7 (C-24),31.9 (C-25),19.0 (C-26),19.7 (C-27),23.0 (C-28),12.1 (C-29)。以上数据与文献报道[4]一致，故鉴定化合物4为3β-羟基-豆甾-5-烯-7-酮。

化合物5：白色无定形粉末（丙酮），Liebermann- Burchard反应呈阳性，1H-NMR (500 MHz,CDCl3) δ: 0.71 (3H,s,H-18),0.85 (3H,t,J = 7.5 Hz,H-29),0.86 (3H,d,J = 6.5 Hz,H-26),0.92 (3H,d,J = 7.0 Hz,H-27),0.95 (3H,d,J = 7.0 Hz,H-21),1.38 (3H,s,H-19),4.36 (1H,s,H-6),2.51 (2H,m,H-7),5.82 (1H,s,H-4),1.81 (1H,m,H-25)；13C-NMR (125 MHz,CDCl3) δ: 37.1 (C-1),34.2 (C-2),200.3 (C-3),126.3 (C-4),168.5 (C-5),73.2 (C-6),38.6 (C-7),29.8 (C-8),53.6 (C-9),38.0 (C-10),21.0 (C-11),39.6 (C-12),42.5 (C-13),55.9 (C-14),24.1 (C-15),28.2 (C-16),56.1 (C-17),11.9 (C-18),19.4 (C-19),36.1 (C-20),18.7 (C-21),33.9 (C-22),26.1 (C-23),45.8 (C-24),29.2 (C-25),19.8 (C-26),19.0 (C-27),23.1 (C-28),12.0 (C-29)。以上数据与文献报道[5]一致，故鉴定化合物5为6β-羟基-豆甾-4-烯-3-酮。

化合物6：淡黄色无定形粉末（甲醇），FeCl3反应呈阳性，1H-NMR (500 MHz,CD3OD) δ: 3.74 (3H,s,OCH3),7.02 (1H,d,J = 2.0 Hz,H-2),6.76 (1H,d,J = 8.5 Hz,H-5),6.92 (1H,dd,J = 8.5,2.0 Hz,H-6),7.53 (1H,d,J = 16.0 Hz,H-7),6.24 (1H,d,J = 16.0 Hz,H-8)；13C-NMR (125 MHz,CD3OD) δ: 51.9 (OCH3),127.7 (C-1),114.8 (C-2),146.9 (C-3),149.5 (C-4),115.2 (C-5),122.9 (C-6),146.7 (C-7),116.5 (C-8),169.7 (C-9)。以上数据与文献报道[6]一致，故鉴定化合物6为咖啡酸甲酯。

化合物7：淡黄色无定形粉末（甲醇），FeCl3反应呈阳性，1H-NMR (500 MHz,CD3OD) δ: 3.88 (3H,s,OCH3),7.57 (1H,d,J = 1.5 Hz,H-2),6.74 (1H,d,J = 8.5 Hz,H-5),7.46 (1H,dd,J = 1.5,8.5 Hz,H-6)；13C-NMR (125 MHz,CD3OD) δ: 52.4 (OCH3),122.7 (C-1),117.5 (C-2),146.3 (C-3),151.8 (C-4),116.0 (C-5),123.8 (C-6),169.0 (C-7)。以上数据与文献报道[7]一致，故鉴定化合物7为原儿茶酸甲酯。

化合物8：白色针晶（甲醇），溴甲酚绿反应和FeCl3反应均呈阳性，Gibbs反应呈阴性。1H-NMR (500 MHz,DMSO-d6) δ: 6.84 (1H,d,J = 1.2 Hz,H-2),7.44 (2H,m,H-5,6),3.81 (3H,s,OCH3)；13C-NMR (125 MHz,DMSO-d6) δ: 121.6 (C-1),115.0 (C-2),147.2 (C-3),151.1 (C-4),112.6 (C-5),123.5 (C-6),167.2 (C = O),55.5 (OCH3)。以上数据与文献报道[8]一致，故鉴定化合物8为香草酸。

化合物9：淡黄色粉末，FeCl3反应呈阳性，1H-NMR (500 MHz,CD3OD) δ: 6.20 (1H,d,J = 16.0 Hz,H-8),6.79 (1H,d,J = 8.5 Hz,H-5),6.95 (1H,dd,J = 8.5,2.0 Hz,H-6),7.02 (1H,d,J = 2.0 Hz,H-2),7.53 (1H,d,J = 16.0 Hz,H-7)；13C-NMR (125 MHz,CD3OD) δ: 127.7 (C-1),115.8 (C-2),146.9 (C-3),149.4 (C-4),116.6 (C-5),122.8 (C-6),147.0 (C-7),115.1 (C-8),171.1 (C-9)。以上数据与文献报道[9]基本一致，故鉴定化合物9为咖啡酸。

化合物10：白色粉末，Molish反应呈阳性，1H-NMR (500 MHz,CD3OD) δ: 7.16 (2H,d,J = 9.0 Hz,H-2,6),7.97 (2H,d,J = 9.0 Hz,H-3,5),5.03 (1H,d,J = 8.0 Hz,H-1′),2.56 (3H,s,-CH3)；13C-NMR (125 MHz,CD3OD) δ: 163.5 (C-1),118.0 (C-2,6),133.4 (C-3,5),132.3 (C-4),199.9 (C = O),27.1 (-CH3),102.4 (C-1′),75.5 (C-2′),78.6 (C-3′),72.0 (C-4′),79.2 (C-5′),63.1 (C-6′)。以上数据与文献报道[10]一致，故鉴定化合物10为云杉苷。

参考文献
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