中草药  2016, Vol. 47 Issue (19): 3362-3365
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引用本文doi: 10.7501/j.issn.0253-2670.2016.19.002
阎新佳, 项峥, 温静, 张文君, 杨波, 曲中原, 徐蓓蕾, 李文兰 . 连翘的苯乙醇苷类成分研究[J]. 中草药, 2016, 47(19): 3362-3365.
YAN Xin-jia, XIANG Zheng, WEN Jing, ZHANG Wen-jun, YANG Bo, QU Zhong-yuan, XU Bei-lei, LI Wen-lan . Phenylethanoid glycosides from fruits of Forsythia Suspensa[J]. Chinese Traditional and Herbal Drugs, 2016, 47(19): 3362-3365 .
连翘的苯乙醇苷类成分研究
阎新佳, 项峥, 温静, 张文君, 杨波, 曲中原, 徐蓓蕾, 李文兰     
哈尔滨商业大学药学院, 黑龙江 哈尔滨 150076
收稿日期: 2016-04-09
基金项目: 黑龙江省教育厅科学技术研究项目（12541198）；黑龙江省应用技术研究与开发计划项目（GC13C106）
作者简介: 阎新佳, 男, 博士, 讲师, 研究方向为天然药物的药效物质基础和质量控制研究。Tel:17745602184E-mail:yanxinjia@yeah.ne
通信作者: 李文兰, 女, 教授, 博士生导师, 研究方向为中药药效物质基础的研究。Tel:(0451)84605022, E-mail:liwenlan2010@163.com
摘要: 目的 研究连翘Forsythia suspensa果实的化学成分。 方法 采用大孔吸附树脂、硅胶、Sephadex LH-20、反相HPLC等多种色谱手段对连翘果实进行分离纯化，并根据理化性质和波谱数据鉴定其结构。 结果 从连翘果实50%乙醇提取物中分离得到2个苯乙醇苷类化合物，分别鉴定为7R-suspensaside methyl ether（1）和7S-suspensaside methyl ether（2）。 结论 化合物1为新化合物，命名为连翘酯苷K。
关键词: 连翘     苯乙醇苷类     连翘酯苷K     7S-suspensaside methyl ether     结构鉴定    
Phenylethanoid glycosides from fruits of Forsythia Suspensa
YAN Xin-jia, XIANG Zheng, WEN Jing, ZHANG Wen-jun, YANG Bo, QU Zhong-yuan, XU Bei-lei, LI Wen-lan     
College of Pharmacy, Harbin University of Commerce, Harbin 150076, China
Abstract: Objective To study the chemical constituents from the fruits of Forsythia suspensa. Methods Compounds were isolated by combination of various chromatographic techniques including column chromatography over macroporous resin, silica gel, Sephadex LH-20, and reversed-phase HPLC. Their structures were elucidated by physicochemical property and spectroscopic analysis. Results Two compounds were isolated from the 50% ethanol extract of the fruits of F. suspensa and identified as 7R-suspensaside methyl ether (1) and 7S-suspensaside methyl ether (2). Conclusion Compound 1 is a new compound named forsythoside K.
Key words: fruits of Forsythia Suspensa     phenylethanoid glycosides     forsythoside K     7S-suspensaside methyl ether     structural identification    

连翘Forsythia suspensa(Thunb.)Vahl是我国传统中药，早在《本草图经》中就有记载，其味苦，性微寒，归肺、心、小肠经，具有清热解毒、消肿散结之功效，常用于风热感冒、温病初起、温热入营、高热烦渴、热淋尿闭、痈疽、瘰疬、乳痈、丹毒和肿毒等症。连翘主要分布于我国山西、陕西、山东、安徽西部、河南等地[1-2]。本课题组曾对连翘的化学成分进行过系统的研究，从中得到了一系列结构新颖且具有药理活性的化合物[3-4]。本实验继续对连翘果实的50%乙醇提取物进行研究，从中分离得到了2个单体化合物，分别鉴定为7R-suspensaside methyl ether（1）和7S-suspensaside methyl ether（2），其中化合物1为新化合物，命名为连翘酯苷K。结构见图 1。

图 1 化合物1和2的结构 Fig.1 Structures of compounds 1 and 2

1 仪器与材料

Bruker AV 600 NMR spectrometer核磁共振波谱仪（Bruker Co.，Billerica，MA，美国）；SHIMADZU UV1700紫外光谱仪（Shimadzu Corporation，日本）；241MC polarimeter旋光测定仪（PerkinElmer，美国）；Bio-LogicMOS 450CD光谱仪（Bio-Logic Co.，Claix，法国)；HR-ESI-TOF-MS（Bruker Co.，Karlsruhe，德国）；高效液相色谱仪（HITACHI，检测器655 variable wavelenth UV Monitor；Waters，检测器2489 UV/Visible Detector）；制备色谱柱（YMC ODS-A，250 mm×10 mm，5 μm）；分析色谱柱（YMC ODS-A，150 mm×4.6 mm，5 μm）。柱色谱硅胶（100～200、200～300目，青岛海洋化工厂）；薄层色谱硅胶H（300～400目）；GF254（青岛海洋化工厂）；ODS柱色谱填料（60～80 μm，德国Merck）；Sephadex LH-20（20～100 μm, Pharmacia Fine Chemical Co.，Ltd.，NJ, 美国）；AB-8大孔吸附树脂（沧州宝恩吸附材料科技有限公司）。

连翘药材2009年购于河北安国药材公司（产地山西），经哈尔滨商业大学药学院曲中原副教授鉴定为连翘Forsythia suspensa(Thunb.)Vahl的干燥果实。

2 提取与分离

连翘的干燥果实8.3 kg，粉碎过筛，以50%乙醇回流提取3次，每次2 h，合并提取液，浓缩得到浸膏（出膏率6.51%）依次用氯仿、醋酸乙酯、正丁醇萃取3次，减压回收溶剂得氯仿部位40 g、醋酸乙酯部位100 g、正丁醇部位350 g。

正丁醇部位（350 g）以适量水溶解后用大孔吸附树脂柱色谱分离，依次用纯水及10%、30%、50%、95%的乙醇梯度洗脱。其中30%乙醇部分（40 g）经硅胶柱色谱分离，依次用二氯甲烷-甲醇（100:1、50:1、30:1、20:1、10:1、8:1、5:1）梯度洗脱，得到流分Fr.1～7。Fr.2经过ODS柱色谱分离，得到8个流分Fr.2-1～2-8，Fr.2-4经Sephadex LH-20柱色谱洗脱，共得到5个流分Fr.2-4-1～Fr.2-4-5，Fr.2-4-3通过半制备液相分离纯化得到化合物1（5 mg）、2（10 mg）。

3 结构鉴定

化合物1：无色油状物，[α]D25 −28.4°(c 0.50, MeOH)。HR-ESI-MS给出分子离子峰m/z 677.202 7 [M＋Na]+(计算值677.205 7)，结合1H-NMR和13C-NMR数据，确定其分子式为C30H38O16，不饱和度为12。1H-NMR(600 MHz, DMSO-d6)谱（表 1）给出2组ABX质子信号δH 6.57(1H, d, J=1.4 Hz), 6.68(1H, dd, J=8.2, 1.4 Hz), 6.70(1H, d, J=8.2 Hz)和δH 7.50(1H, brs), 6.76(1H, d, J=8.1 Hz), 7.00(1H, brd, J=8.1 Hz)，1组烯烃质子信号δH 7.50(1H, d, J=15.8 Hz), 6.25(1H, d, J=15.8 Hz)，1个甲氧基质子信号δH 3.12(3H, s)，1个连在叔碳上的甲基质子信号δH 1.03(1H, d, J=6.0 Hz)，2个糖的端基质子信号δH 4.35(1H, d, J=7.9 Hz), 4.48(1H, brs)。1个连氧亚甲基质子信号δH 3.10, 3.63(each 1H, m)，1个连氧次甲基质子信号δH 4.25(1H, dd, J=8.4, 3.3 Hz)。13C-NMR(150 MHz, DMSO-d6)谱中显示有30个碳信号，分别为1个α，β-不饱和羰基碳信号δC 166.2，1对双键碳信号δC 146.0, 114.2，1个连氧仲碳信号δC 73.8，1个连氧叔碳信号δC 82.8，1个甲氧基碳信号δC 56.4，1个甲基信号δC 18.2和2组糖碳信号。

表 1 化合物1和2的1H-NMR和13C-NMR数据(600/150 MHz, DMSO-d6) Table 1 1H-NMR and 13C-NMR data of compounds 1 and 2 (600/150 MHz, DMSO-d6)

在HMBC谱（图 2）中，δH 6.57(H-2), 6.68(H-6)与δC 82.9相关，提示C-7与苯环相连；δH 4.35(H-1′)与δC 73.8相关，提示葡萄糖的端基质子连在C-8上；δH 4.68(H-4′)与δC 166.2相关，提示咖啡酸与葡萄糖的C-4′位相连；δH 4.48(H-1″)与δC 66.3相关，提示鼠李糖1″位质子与葡萄糖6′位相连；δH 3.12(7-OCH3)与δC 82.8相关，提示甲氧基连在C-7位上。以上波谱数据与文献报道中suspensaside methyl ether基本一致[5-6]。在CD谱中，在295 nm下为正的Cotton效应（图 3）提示7位为R构型[7-8]，化合物1鉴定为7R-suspensaside methyl ether。经系统文献检索，为1个未见报道的新立体构型化合物，命名为连翘酯苷K。

图 2 化合物1的重要HMBC相关(H→C) Fig.2 Key HMBC comelation (H→C) of compound 1

图 3 化合物1的CD图谱 Fig.3 CD curve of compound 1

化合物2：无色油状物，[α]25D −5.1°(c 0.50, MeOH)。其UV和HR-ESI-MS等波谱数据与化合物1基本一致。在NMR中略有差别（表 1）。1H-NMR(600 MHz, DMSO-d6)谱中，δHH-7(−0.02), H-8(+0.18), H-1′(−0.04), H-1″(+0.02), -OCH3(−0.01)；13C-NMR(150 MHz, DMSO-d6)谱中，δCC-7(−0.8), C-8(+0.1), C-1′(−0.5), C-1″(+0.1), -OCH3(−0.1)。化合物2为化合物1在7位的差向异构体。故鉴定化合物2为7S-suspensaside methyl ether。

4 讨论

化合物7R-suspensaside methyl ether（1）和7S-suspensaside methyl ether（2）为一对差向异构体，其UV和MS等波谱数据基本一致，NMR略有差别。但CD图谱[1在B2u(1Lb)吸收带下为正的Cotton效应]和旋光数据[1为[α]25D −28.4°(c 0.50, MeOH)；2为[α]25D −5.1°(c 0.50, MeOH)]有较大差别。

参考文献
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