鸡冠花为苋科（Amaranthaceae）青葙属Celosia L. 一年生草本植物鸡冠花Celosia cristata L. 干燥花絮，又叫鸡髻花、鸡公花、鸡角枪、鸡冠头、鸡骨子花、老来少等，起源于非洲和亚洲热带地区，在我国已有大面积的种植。据《滇南本草》记载，鸡冠花味苦、微辛，性寒。现代研究表明，其具有止血、抗衰老、调血脂、抗动脉粥样硬化、增强机体抵抗力和免疫力、预防骨质疏松、保肝^[1-2]等药理作用，抗疲劳的保健功能以及良好的食疗作用^[3-5]。迄今为止，国内外关于鸡冠花的化学成分研究报道较少。本课题组前期对鸡冠花的乙醇提取物依次用石油醚、二氯甲烷、醋酸乙酯、正丁醇进行萃取得到相应的部位及水部位，采用断尾法、毛细玻管法、玻片法测定小鼠凝血时间、血浆复钙时间，检测各部位的止血作用。结果发现醋酸乙酯、正丁醇、水部位组凝血时间与空白组比较，差异有统计学意义；正丁醇和水部位组的血浆复钙时间与空白组比较，差异有统计学意义。确定醋酸乙酯、正丁醇萃取组分均能在一定程度上影响小鼠的出血时间和凝血时间，具有一定的止血作用^[6]，为鸡冠花止血有效部位。为了合理开发利用鸡冠花这一植物资源，筛选具有止血活性的化合物，本实验对鸡冠花95%乙醇提取物的醋酸乙酯萃取部位进行化学成分研究，从中分离鉴定出9个化合物，分别鉴定为northalifoline（1）、韭子碱乙（1,2,3,4-tetrahydro-4-hydroxy-4-quinolin carboxylic acid，2）、异鼠李素-3-O-β-D-葡萄糖苷（isorhamnetin-3-O-β-D-glucoside，3）、1-feruloyl-β- D-glucopyranoside（4）、阿魏酸酯6-O-β-D-吡喃葡萄糖酯 [feruloyl 6-O-β-D-glucopyranose ester，5（α构型）、6（β构型）]、2-甲氧基-4-(2-丙烯基)-苯基- β-D-吡喃葡萄糖苷 [2-methoxy-4-(2-propenyl) phenyl β-D-glucopyranoside，7]、羽扇豆醇（lupeol，8）、阿魏酸（ferulic acid，9）。所得化合物均为首次从鸡冠花植物中分离得到，也均为首次从青葙属植物中分离得到。

Burker-500型超导核磁共振光谱仪（TMS为内标，瑞士Burker公司）；Micro TOF-Q质谱仪（美国Burker公司）；Waters 2695-2996型分析型高效液相色谱仪（美国waters公司）；Agilent 1100型制备型高效液相色谱仪（美国 Agilent公司）；C₁₈反相色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm，德国Marsh公司）；柱色谱用硅胶和薄层色谱用硅胶G（100～200目、200～300目）青岛海洋化工厂有限公司；反相ODS（250 mm×10 mm，10 μm，美国Thermo公司）；ZF-I型三用紫外分析仪（上海顾村电光仪器厂）；BS124S型电子天平（北京赛多利斯仪器系统有限公司）；CP522C型电子天平（奥豪斯仪器有限公司）；R-3HB小型旋转蒸发仪（印度BUCHI有限公司）；常规试剂均为分析纯。

鸡冠花药材购于黑龙江中医药大学附属第一医院，经黑龙江中医药大学生药学教研室孙慧峰教授鉴定为苋科青葙属植物鸡冠花Celosia cristata L. 的干燥花絮。标本（20150503）保存于黑龙江中医药大学中医药研究院。

鸡冠花干燥花序粗粉（14 kg），加8倍量的95%乙醇回流提取3次，每次2 h，合并提取液，减压浓缩得醇提取物。醇提取物用4 L水（低于60 ℃）分散后，放置室温。分别用等体积的石油醚（60～90 ℃）、二氯甲烷、醋酸乙酯依次萃取3次，减压回收溶剂。

醋酸乙酯部位（104.4 g）经硅胶柱色谱，二氯甲烷-甲醇（20∶1→1∶1）梯度洗脱，得到11个组分Fr.A～K。Fr. A（4.29 g）经ODS柱色谱，甲醇-水（1∶4→4∶1）和甲醇梯度洗脱得12个组分Fr.A_1-2（37.2mg）、Fr. A_3-4（44.1 mg）、Fr. A_5-6（23.6 mg）、Fr. A_13-14（86.5 mg）、Fr. A_15-18（61.4 mg）、Fr. A_19-20（53.4 mg）、Fr. A_21-22（42.2 mg）、Fr. A_23-24（43.5 mg）、Fr. A_25-27（36.4 mg）、Fr. A_29-31（45.2 mg）、Fr. A_32-33（49.7 mg）、Fr. A_34-36（39.2 mg）；Fr. A_1-2经制备HPLC（甲醇-水3∶17）得化合物1（21.7mg）和2（25.5 mg）。Fr. B（10.4 g）经ODS柱色谱，甲醇-水（1∶4→4∶1）和甲醇梯度洗脱得12个组分Fr.B₄（49.5mg）、Fr. B_7-8（16.8 mg）、Fr. B_9-10（14.2 mg）、Fr. B_11-14（34.7 mg）、Fr. B₂₂（49.2 mg）、Fr. B_29-30（22.4 mg）、Fr. B_31-32（27.2 mg）、Fr. B_33-34（18.4 mg）、Fr. B_35-43（72.0 mg）、Fr. B_51-53（18.6 mg）、Fr. B₅₄（31.2 mg）、Fr. B_55-56（80.2 mg）；Fr. B₂₂结合重结晶方法得化合物3（49.2 mg），Fr. B₄经制备HPLC（甲醇-水3∶17）得化合物4（12.0mg）和5、6（9.0 mg）。Fr. C（5.32 g）经ODS柱色谱，甲醇-水（1∶4→4∶1）和甲醇梯度洗脱得9个组分Fr.C_2-5（24.5mg）、Fr. C_7-8（16.5 mg）、Fr. C_10-12（21.5 mg）、Fr. C_13-18（34.2 mg）、Fr. C₁₉（38.5 mg）、Fr. C_20-32（51.8 mg）、Fr. C_33-39（44.3 mg）、Fr. C_40-45（36.7 mg）、Fr. C_46-55（32.2 mg）；Fr. C₁₉、Fr. C_46-55、Fr. C_33-39结合重结晶方法分别得化合物7（38.5 mg）、8（45.4 mg）。Fr. E（2.70 g）经ODS柱色谱，甲醇-水（1∶4→4∶1）和甲醇梯度洗脱得7个组分Fr.E_7-10（124.2mg）、Fr. E_11-12（18.6 mg）、Fr. E_15-16（17.4 mg）、Fr. E_17-18（16.9 mg）、Fr. E_19-21（22.5 mg）、Fr. E₂₂（14.4 mg）、Fr. E_25-26（19.0 mg）；Fr. E₂₂经制备HPLC（甲醇-水3∶5）得到化合物9（20.0mg）。

化合物1：无色片状结晶（甲醇），mp 140～141℃，HR-MS m/z: 194.062 4 [M＋H]⁺，分子式为C₁₀H₁₁NO₃，计算不饱和度为6。¹H-NMR (500 MHz,CD₃OD) δ: 2.47 (2H,m,H-3),2.79(2H,m,H-4),6.63 (1H,s,H-5),7.32 (1H,s,H-8),3.74 (3H,s,6-OCH₃)；¹³C-NMR (125 MHz,CD₃OD) δ: 168.9 (C-1),41.1 (C-3),28.4 (C-4),102.8 (C-5),151.0 (C-6),145.3 (C-7),114.8 (C-8),121.2 (C-9),133.7 (C-10),57.0 (6-OCH₃)。以上数据与文献报道^[7-8]一致，故鉴定化合物1为northalifoline。

化合物2：白色粉末（甲醇），mp 325～328℃，HR-MS m/z:194.198 5 [M＋H]⁺，分子式为C₁₀H₁₁O₃N，计算不饱和度为6。¹H-NMR (500 MHz,CD₃OD) δ: 3.58 (2H,t,J =7.3 Hz,H-2),2.14 (2H,m,H-3),7.32 (1H,d,J = 7.5 Hz,H-5),7.05(1H,m,H-6),7.24 (1H,m,H-7),6.87 (1H,d,J = 7.8 Hz,H-8)；¹³C-NMR (125 MHz,CD₃OD) δ:58.4 (C-2),41.2 (C-3),76.4 (C-4),125.1 (C-5),123.6 (C-6),130.5 (C-7),111.2 (C-8),142.6 (C-9),132.7 (C-10),182.0 (C-11)。以上数据与文献报道^[9]一致，故鉴定化合物2为韭子碱乙。

化合物3：黄色粉末（甲醇），mp 190～192℃，HR-MS m/z:479.126 8 [M＋H]⁺，分子式为C₂₂H₂₂O₁₂，计算不饱和度为12。¹H-NMR (500 MHz,CD₃OD) δ: 6.18 (1H,d,J =2.0 Hz,H-6),6.38 (1H,d,J = 2.0 Hz,H-8),7.91 (1H,brs,H-2′),6.89(1H,d,J = 8.4 Hz,H-5′),7.57 (1H,brd,J = 8.4 Hz,H-6′),4.82 (1H,d,J = 7.2 Hz,H-1″),3.23 (1H,m,H-2″),3.45 (1H,m,H-3″),3.40 (1H,m,H-4″),3.45 (1H,m,H-5″),3.55 (1H,m,H-6″a),3.72 (1H,m,H-6″b)；¹³C-NMR (125 MHz,CD₃OD) δ:158.4 (C-2),135.3 (C-3),179.4 (C-4),163.1 (C-5),99.8 (C-6),166.0 (C-7),94.7 (C-8),158.6 (C-9),105.7 (C-10),123.1 (C-1′),115.9 (C-2′),148.4(C-3′),150.8 (C-4′),114.3 (C-5′),123.8 (C-6′),103.6 (C-1″),75.9 (C-2″),78.0 (C-3″),71.4 (C-4″),78.5 (C-5″),62.5 (C-6″)。以上数据与文献报道^[10]一致，故鉴定化合物3为异鼠李素- 3-O-β-D-葡萄糖苷。

化合物4：白色粉末（甲醇），mp 201～203℃，HR-MS m/z:357.103 6 [M＋H]⁺，分子式为C₁₆H₂₀O₉，计算不饱和度为7。¹H-NMR (500 MHz,CD₃OD) δ: 7.18 (1H,brs,H-2),6.80(1H,d,J = 8.2 Hz,H-5),7.08 (1H,brd,J = 8.2 Hz,H-6),6.38(1H,d,J = 15.9 Hz,H-7),7.71 (1H,d,J = 15.9 Hz,H-8),4.84(1H,d,J = 7.6 Hz,H-1′),3.36～3.55 (4H,m,H-2′,3′,4′,5′),3.62 (1H,m,H-6′a),3.86 (1H,m,H-6′b),3.88 (3H,s,3-OCH₃)；¹³C-NMR (125 MHz,CD₃OD) δ:127.5 (C-1),111.8 (C-2),149.3 (C-3),150.9 (C-4),114.7 (C-5),124.3 (C-6),148.2 (C-7),116.5 (C-8),167.7 (C-9),103.6 (C-1′),74.0 (C-2′),78.0 (C-3′),71.1 (C-4′),78.7 (C-5′),62.3 (C-6′),56.4 (3-OCH₃)。以上数据与文献报道^[11]一致，故鉴定化合物4为1-feruloyl-β-D-glucopyranoside。

化合物5（α构型）、6（β构型）：白色粉末（甲醇），mp 202～204 ℃，HR-MS m/z: 357.102 8 [M＋H]⁺，分子式为C₁₆H₂₀O₉，计算不饱和度为7。¹H-NMR (500 MHz,CD₃OD) δ: 7.17 (1H,brs,H-2),6.80 (1H,d,J = 8.2 Hz,H-5),7.06 (1H,brd,J = 8.2 Hz,H-6),7.62 (1H,d,J = 15.9 Hz,H-7),6.36 (1H,d,J = 15.9 Hz,H-8),4.50 (1H,d,J = 7.8 Hz,H-β-1′),3.14 (1H,dd,J = 7.8,10.2 Hz,H-β-2′),3.33 (1H,m,H-β-3′),3.58 (1H,m,H-β-4′),3.36 (1H,m,H-β-5′),4.32(1H,dd,J = 11.8,5.4 Hz,H-β-6′a),4.42 (1H,dd,J = 11.8,2.3Hz,H-β-6′b),5.09 (1H,d,J = 3.6 Hz,H-α-1′),3.35 (1H,m,H-α-2′),3.68 (1H,m,H-α-3′),3.38 (1H,m,H-α-4′),3.33 (1H,m,H-α-5′),4.29 (1H,dd,J = 12.0,5.1 Hz,H-α-6′a),4.47 (1H,dd,J = 12.0,3.5 Hz,H-α-6′b),3.88 (3H,s,3-OCH₃)；¹³C-NMR (125 MHz,CD₃OD) δ:126.8 (C-1),111.6 (C-2),148.3 (C-3),149.3 (C-4),116.4 (C-5),124.1 (C-6),146.9 (C-7),114.9 (C-8),169.1 (C-9),98.2 (C-β-1′),76.2 (C-β-2′),77.9(C-β-3′),70.8 (C-β-4′),75.4 (C-β-5′),64.8 (C-β-6′),94.0 (C-α-1′),73.8(C-α-2′),74.7 (C-α-3′),71.7 (C-α-4′),72.0 (C-α-5′),64.8 (C-α-6′),56.4 (3-OCH₃)。以上数据与文献报道^[12]一致，故鉴定化合物5、6为阿魏酸酯-6-O-α/β-D-吡喃葡萄糖酯。

化合物7：白色粉末（甲醇），mp 117～119℃，HR-MS m/z: 327.137 2 [M＋H]⁺，分子式为C₁₆H₂₂O₇，计算不饱和度为6。¹H-NMR (500 MHz,CD₃OD) δ: 6.81 (1H,brs,H-3),6.76 (1H,brd,J = 8.3 Hz,H-5),7.07 (1H,d,J = 8.3 Hz,H-6),3.46 (2H,dd,J = 8.3,1.6 Hz,H-7),5.94 (1H,m,H-8),5.01 (1H,d,J= 18.5 Hz,H-9a),5.04 (1H,d,J = 18.5 Hz,H-9b),4.84 (1H,d,J= 7.6 Hz,H-1′),3.32～3.59 (4H,m,H-2′,3′,4′,5′),3.66 (1H,m,H-6′a),3.85 (1H,brd,J= 11.9 Hz,H-6′b),3.82 (3H,s,2-OCH₃)；¹³C-NMR (125 MHz,CD₃OD)δ: 146.3 (C-1),150.7 (C-2),114.1 (C-3),136.4 (C-4),122.0 (C-5),118.2 (C-6),40.7 (C-7),138.99 (C-8),115.8 (C-9),103.0 (C-1′),74.9 (C-2′),78.1 (C-3′),71.3 (C-4′),77.8 (C-5′),62.4 (C-6′),56.6 (2-OCH₃)。以上数据与文献报道^[13]一致，故鉴定化合物7为2-甲氧基- 4-(2-丙烯基)-苯基-β-D-吡喃葡萄糖苷。

化合物8：无色粉末（甲醇），mp 173～174℃，HR-MS m/z: 492.431 2 [M＋H]⁺，分子式为C₂₃H₂₄O₁₂，计算不饱和度为12。¹H-NMR (500 MHz,CD₃OD) δ:6.33 (1H,d,J = 2.0 Hz,H-6),6.61 (1H,d,J = 2.0 Hz,H-8),7.93 (1H,d,J = 2.0 Hz,H-2′),6.90 (1H,d,J = 8.4 Hz,H-5′),7.62 (1H,dd,J = 8.4,2.0 Hz,H-6′),5.21 (1H,d,J = 7.4 Hz,H-1″),3.42 (1H,m,H-2″),3.30 (1H,m,H-3″),3.44 (1H,m,H-4″),3.21 (1H,m,H-5″),3.72 (1H,dd,J = 12.0,2.2 Hz,H-6″a),3.55 (1H,dd,J = 12.0,5.5 Hz,H-6″b),3.94(3H,s,3′-OCH₃),3.88 (3H,s,4′-OCH₃)；¹³C-NMR (125 MHz,CD₃OD) δ: 151.1 (C-2),135.4 (C-3),179.5 (C-4),159.0 (C-5),100.0 (C-6),167.3 (C-7),93.0 (C-8),158.4 (C-9),106.7 (C-10),122.9 (C-1′),114.3 (C-2′),148.4 (C-3′),151.1 (C-4′),116.0(C-5′),123.9 (C-6′),103.4 (C-1″),75.9 (C-2″),77.8 (C-3″),71.5 (C-4″),78.5(C-5″),62.5 (C-6″),56.8 (3′-OCH₃),55.1 (4′-OCH₃)。以上数据与文献报道^[14]一致，故鉴定化合物8为羽扇豆醇。

化合物9：白色粉末（甲醇），mp 170～171℃，HR-MS m/z:193.163 1 [M－H]⁺，分子式为C₁₀H₁₀O₄，计算不饱和度为6。¹H-NMR (500 MHz,CD₃OD) δ: 7.18 (1H,brs,H-2),6.80 (1H,d,J = 8.4 Hz,H-5),7.06 (1H,brd,J = 8.4 Hz,H-6),6.38 (1H,d,J = 16.0 Hz,H-7),7.71 (1H,d,J = 16.0 Hz,H-8),3.84 (3H,s,3-OCH₃)；¹³C-NMR (125 MHz,CD₃OD) δ:127.7 (C-1),111.9 (C-2),148.3 (C-3),149.3 (C-4),114.6 (C-5),124.3 (C-6),147.1 (C-7),116.5 (C-8),167.5 (C-9),56.4 (3-OCH₃)。以上数据与文献报道^[11]一致，故鉴定化合物9为阿魏酸。