中草药  2016, Vol. 47 Issue (24): 4336-4339
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引用本文doi: 10.7501/j.issn.0253-2670.2016.24.007
王佳, 许娇娇, 乔卫, 唐生安. 蓝桉果实一口钟化学成分研究[J]. 中草药, 2016, 47(24): 4336-4339.
WANG Jia, XU Jiao-jiao, QIAO Wei, TANG Sheng-an. Chemical Constituents from fruits of Eucalyptus globulus[J]. Chinese Traditional and Herbal Drugs, 2016, 47(24): 4336-4339 .
蓝桉果实一口钟化学成分研究
王佳1, 许娇娇1, 乔卫1, 唐生安1,2     
1. 天津医科大学药学院 天津市临床药物关键技术重点实验室, 天津 300070;
2. 中国医学科学院 北京协和医学院药物研究所 天然药物活性物质与功能国家重点实验室, 北京 100050
收稿日期: 2016-06-03
基金项目: 天津市自然科学基金重点项目（16JCZDJC32600）；中国博士后基金资助项目（2016M591399）；天然药物活性物质与功能国家重点实验室开放课题（GTZK201601）
作者简介: 王佳(1989-), 女, 河北辛集人, 硕士研究生, 从事天然药物化学研究。Tel:13602130431 E-mail:15369336866@163.com
通信作者: 乔卫(1968-), 女, 教授, 博士生导师, 研究方向为药效物质基础及作用机制。Tel:(022)83336658, E-mail:qiaowei@tmu.edu.cn
唐生安(1977-), 男, 副教授, 研究方向为天然药物化学。Tel:(022)83336658, E-mail:tangshengan@tmu.edu.cn
摘要: 目的 研究一口钟（蓝桉Eucalyptus globulus果实）中的化学成分。 方法 综合运用正相硅胶柱色谱、凝胶渗透柱色谱、半制备HPLC色谱等方法分离、纯化一口钟中的化学成分，采用NMR和质谱等波谱学方法鉴定化合物结构。 结果 从一口钟中分离得到12个化合物，分别鉴定为1，10-dioxotayloriane（1）、litseagermacrane（2）、蓝桉醇（3）、表蓝桉醇（4）、绿花白千层醇（5）、齐墩果酸（6）、白桦脂酸（7）、熊果酸（8）、11α-甲氧基熊果酸（9）、1-（2，6-dihydroxy-4-methoxy-3，5-dimethylphenyl）-2-methylbutan-1-one（10）、鞣花酸（11）、3-甲氧基鞣花酸-4'-O-α-L-吡喃鼠李糖苷（12）。 结论 化合物1和2为首次从该属植物中分离得到，化合物9和10为首次从该种植物中分离得到。
关键词: 蓝桉     一口钟     1, 10-dioxotayloriane     litseagermacrane     蓝桉醇     11α-甲氧基熊果酸    
Chemical Constituents from fruits of Eucalyptus globulus
WANG Jia1, XU Jiao-jiao1, QIAO Wei1, TANG Sheng-an1,2     
1. Tianjin Key Laboratory on Technologies Enabling Development Clinical Therapeutics and Diagnostics, School of Pharmacy, Tianjin Medical University, Tianjin 300070, China;
2. State Key Laboratory of Bioactive Substance and Function of Natural Medicines, Institute of Materia Medica, Chinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical College, Beijing 100050, China
Abstract: Objective To study the chemical constituents from the fruits of Eucalyptus globulus. Methods The chemical constituents were separated by column chromatography, such as silica gel, sephadex LH-20, and semi-preparative HPLC. On the basis of spectral data analysis, their structures were elucidated. Results Twelve compounds were isolated and purified which structures were elucidated as 1, 10-dioxotayloriane (1), litseagermacrane (2), (-)-globulol (3), (-)-epiglobulol (4), viridiflorol (5), oleanolic acid (6), betulinic acid (7), ursolic acid (8), robustanic acid (9), 1-(2, 6-dihydroxy-4-methoxy-3, 5-dimethylphenyl)-2-methylbutan-1-one (10), ellagic acid (11), and 3-O-methylellagic acid-4'-O-α-L-rhamnopyranoside (12). Conclusion Compounds 1 and 2 are isolated from the Eucalyptus L. Herit for the first time, compounds 9 and 10 are isolated from this plant for the first time.
Key words: Eucalyptus globulus Labill.     fruits of Eucalyptus globulus     1, 10-dioxotayloriane     litseagermacrane     (-)-globulol     robustanic acid    

一口钟为桃金娘科（Myrtaceae）桉属Eucalyptus L. Herit植物蓝桉Eucalyptus globulus Labill.的果实。原产于澳大利亚塔斯马尼亚岛，我国广西、云南、四川等地均有栽培[1]。一口钟民间俗称扣子七、红喇叭花、胜利果等，因其形状酷似倒挂的小钟又俗称一口钟，为我国西南民间常用中药。民间多用来治疗感冒、痢疾、肠炎、关节痛、膀胱炎、济癣、丹毒、湿疫及痈疫肿毒等疾病[2]。一口钟富含多种挥发油[3]、倍半萜[4]、三萜[5]、间苯三酚衍生物[6]、黄酮[4]和鞣质[7]等化学成分，具有抗肿瘤、抗炎、抗病毒、抗菌和抗氧化等多种药理作用[8]。为了进一步探索一口钟的有效成分，本实验对一口钟进行了化学成分研究，从其石油醚萃取物中分离得到了12个化合物，分别鉴定为1, 10-dioxotayloriane（1）、litseagermacrane（2）、蓝桉醇（globulol，3）、表蓝桉醇（epiglobulol，4）、绿花白千层醇（viridiflorol，5）、齐墩果酸（oleanolic acid，6）、白桦脂酸（betulinic acid，7）、熊果酸（ursolic acid，8）、11α-甲氧基熊果酸（robustanic acid，9）、1-(2, 6-dihydroxy-4-methoxy-3, 5-dimethylphenyl)-2-methylbutan-1-one（10）、鞣花酸（ellagic acid，11）、3-甲氧基鞣花酸-4′-O-α-L-吡喃鼠李糖苷（3-O-methylellagic acid 4′-O-α-L-rhamnopyranoside，12）。化合物1、2为首次从该属植物中分离得到，化合物9、10为首次从该种植物中分离得到。

1 仪器与材料

Bruker AV 400型核磁共振仪（Bruker公司，美国）；Alliance 2695 Quattro Micro TM ESI液质联用色谱仪（Waters公司，美国）；SSI LAB Alliance TM半制备高效液相色谱仪（Series III pump，RI 2000，UV Model 500，Scientific Systems，Inc，美国）；YMC-Pack ODS-A制备型HPLC色谱柱（250 mm×20 mm）；柱色谱和薄层色谱用硅胶均系青岛海洋化工厂生产，Sephadex LH-20由GE公司生产，所用试剂均为分析纯；CDCl3、DMSO均为美国Cambridge Isotope Laboratories公司产品。

一口钟购于河北安国药材批发市场，产地为云南省，经天津医科大学药学院唐生安博士鉴定为桉树植物蓝桉Eucalyptus globulus Labill.的干燥成熟果实，标本（D20151011）存放于天津医科大学药学院。

2 提取与分离

干燥的一口钟药材20 kg粉碎后用90%的乙醇室温浸渍提取5次，提取液减压浓缩后得乙醇提取物2 992 g；将乙醇提取物用水混悬，依次用石油醚、醋酸乙酯萃取3次，得到石油醚萃取物1 592 g，醋酸乙酯萃取物406 g。

取石油醚萃取物800 g用硅胶（100~200目）拌样后，进行硅胶（200~300目）柱色谱分离，分别用石油醚-醋酸乙酯（60:1，30:1，15:1，8:1，4:1，2:1，1:1）、醋酸乙酯、甲醇进行梯度洗脱，TLC检测合并相似组分，得到16个组分ykz0101~ykz0116。

ykz0114组分59 g进行硅胶（200~300目）柱色谱分离，用二氯甲烷-甲醇-醋酸（20:1:1）洗脱，得到14个组分ykz0201~ykz0214。取ykz0203（9 g）进行凝胶柱色谱分离，半制备高效液相ODS柱分离纯化，得到化合物4（4.3 mg）、5（82.4 mg）、6（24.0 mg）、7（1.5 mg）、8（19.1 mg）、9（15.2 mg）、10（3.3 mg）；取ykz0206组分（6 g）进行硅胶柱色谱分离，二氯甲烷-甲醇-醋酸（15:1:1）洗脱，进一步用反相半制备高效液相色谱分离纯化，得到化合物1（2.7 mg）、2（4.2 mg）、3（22.1 mg）、11（13.3 mg）、12（5.0 mg）。

3 结构鉴定

化合物1：无色油状物。ESI-MS m/z: 237 [M+H]+。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 2.04 (3H, s H-14), 1.02 (3H, s, H-12), 0.92 (3H, s, H-13), 0.90 (3H, d, J=7.2 Hz, H-15), 0.55 (1H, q, J=9.2 Hz, H-7), 0.32 (1H, dd, J=9.2, 10.8 Hz, H-6)；13C-NMR (100 MHz, DMSO-d6) δ: 220.0 (C-1), 208.6 (C-10), 49.9 (C-5), 42.8 (C-9), 34.3 (C-2), 33.2 (C-4), 29.7 (C-14), 28.7 (C-12), 27.4 (C-3), 25.8 (C-7), 23.6 (C-6), 19.1 (C-8), 16.4 (C-11), 15.7 (C-15), 15.6 (C-13)。以上数据与文献报道[9]基本一致，故鉴定化合物1为1, 10-dioxotayloriane。

化合物2：无色油状物。ESI-MS m/z: 237 [M+H]+，分子式为C15H24O2。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 5.65 (1H, brs, H-14a), 5.51 (1H, d, J=0.8 Hz, H-14b), 5.05 (1H, m, H-6), 5.01 (1H, m, H-5), 1.14 (3H, s, H-12), 1.09 (3H, s, H-13), 0.97 (3H, d, J=6.4Hz, H-15)；13C-NMR (100 MHz, CDCl3) δ: 206.2 (C-1), 155.4 (C-10), 142.9 (C-5), 130.3 (C-6), 119.8 (C-14), 71.7 (C-11), 56.9 (C-7), 41.0 (C-4), 37.7 (C-2), 37.2 (C-3), 32.8 (C-8), 28.9 (C-9), 26.9 (C-13), 20.6 (C-15)。以上数据与文献报道[10]基本一致，故鉴定化合物2为litseagermacrane。

化合物3：无色油状物。ESI-MS m/z: 223 [M+H]+。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 1.11 (3H, s, H-14), 1.01 (3H, s, H-13), 0.98 (3H, s, H-12), 0.92 (1H, d, J=6.8 Hz, H-15), 0.58 (1H, m, H-7), 0.52 (1H, m, H-6)；13C-NMR (100 MHz, CDCl3) δ: 75.4 (C-10), 57.0 (C-1), 44.6 (C-9), 39.7 (C-5), 36.3 (C-4), 34.6 (C-3), 28.6 (C-13), 28.3 (C-6), 26.7 (C-7), 26.1 (C-2), 20.2 (C-14), 20.2 (C-8), 19.4 (C-11), 16.0 (C-15), 15.8 (C-12)。以上数据与文献报道[11]基本一致，故鉴定化合物3为蓝桉醇。

化合物4：无色油状物。ESI-MS m/z: 223 [M+H]+。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 1.20 (3H, s, H-14), 1.04 (3H, s, H-12), 1.00 (3H, s, H-13), 0.91 (3H, d, J=7.2 Hz, H-15)；13C-NMR (100 MHz, CDCl3) δ: 72.4 (C-10), 56.0 (C-1), 43.0 (C-9), 37.7 (C-5), 35.9 (C-4), 34.8 (C-3), 31.2 (C-14), 28.9 (C-13), 28.8 (C-6), 27.3 (C-7), 26.8 (C-2), 20.7 (C-11), 19.3 (C-8), 16.7 (C-15), 15.9 (C-12)。以上数据与文献报道[12]基本一致，故鉴定化合物4为表蓝桉醇。

化合物5：无色油状物。ESI-MS m/z: 223 [M+H]+。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 1.15 (3H, s, H-14), 1.03 (3H, s, H-12), 1.00 (3H, s, H-13), 0.92 (3H, d, J=6.8 Hz, H-15)。以上氢谱数据与文献报道[13]基本一致，故鉴定化合物5为绿花白千层醇。

化合物6：白色无定形粉末，mp 304~305 ℃。ESI-MS m/z: 479 [M+Na]+。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 5.16 (1H, brs, H-12), 3.38 (1H, m, H-3), 3.00 (2H, m, H-2), 2.18 (3H, s, H-7), 1.10 (3H, s, H-27), 0.90 (3H, s, H-23), 0.88 (6H, s, H-29, 30), 0.86 (3H, s, H-24), 0.72 (3H, s, H-26), 0.68 (3H, s, H-25)；13C-NMR (100 MHz, DMSO-d6)数据与文献报道的齐墩果酸的波谱数据[14]基本一致，且其薄层色谱与齐墩果酸对照品的Rf值和显色斑点颜色一致，因此化合物6被鉴定为齐墩果酸。

化合物7：白色无定形粉末，mp 286~288 ℃。ESI-MS m/z: 479 [M+Na]+。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 4.69 (1H, brs, H-30a), 4.56 (1H, brs, H-30b), 1.65 (3H, s, H-30), 0.93 (3H, s, H-27), 0.87 (6H, s, H-25, 26), 0.77 (3H, s, H-24), 0.65 (3H, s, H-23)；13C-NMR (100 MHz, DMSO-d6) δ: 177.0 (C-28), 150.3 (C-20), 109.6 (C-29), 76.8 (C-3), 55.4 (C-17), 54.9 (C-5), 49.9 (C-9), 48.5 (C-18), 46.6 (C-19), 42.0 (C-14), 40.2 (C-8), 38.5 (C-1), 38.2 (C-4), 37.6 (C-13), 36.7 (C-10), 36.3 (C-22), 33.9 (C-7), 31.7 (C-16), 30.1 (C-15), 29.2 (C-21), 28.1 (C-23), 27.1 (C-2), 25.1 (C-12), 20.4 (C-11), 18.9 (C-30), 17.9 (C-6), 16.0 (C-26), 15.8 (C-25), 15.7 (C-24), 14.4 (C-27)。以上数据与文献报道[15]基本一致，故鉴定化合物7为白桦脂酸。

化合物8：白色无定形粉末，mp 255~258 ℃。ESI-MS m/z: 457 [M+H]+。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 5.13 (1H, brs, H-12), 3.00 (1H, m, H-3), 1.04 (3H, s, H-27), 0.92 (3H, d, J=6.0 Hz, H-30), 0.90 (3H, s, H-25), 0.87 (3H, s, H-26), 0.82 (3H, d, J=6.4 Hz, H-29), 0.76 (3H, s, H-23), 0.68 (3H, s, H-24)；13C-NMR (100 MHz, DMSO-d6) δ: 178.2 (C-28), 138.2 (C-13), 124.5 (C-12), 76.8 (C-3), 54.8 (C-5), 52.3 (C-18), 47.0 (C-9), 46.8 (C-17), 41.6 (C-14), 38.5 (C-8), 38.4 (C-19), 38.3 (C-4), 38.3 (C-20), 38.2 (C-1), 36.5 (C-10), 36.3 (C-22), 32.6 (C-7), 30.2 (C-21), 28.2 (C-23), 27.5 (C-15), 27.0 (C-2), 23.8 (C-16), 23.2 (C-27), 22.8 (C-11), 21.0 (C-30), 18.0 (C-6), 17.0 (C-29), 16.9 (C-26), 16.0 (C-25), 15.2 (C-24)。以上数据与文献报道[16]基本一致，故鉴定化合物8为熊果酸。

化合物9：白色无定形粉末，mp 202~203 ℃。ESI-MS m/z: 487 [M+H]+。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 12.0 (1H, brs, 28-COOH), 5.39 (1H, brs, H-12), 3.17 (3H, s, 11-OCH3), 3.00 (1H, m, H-3), 1.09 (3H, s, H-30), 0.96 (3H, s, H-25), 0.93 (3H, d, J=6.0 Hz, H-30), 0.90 (3H, s, H-26), 0.88 (3H, d, J=6.8 Hz, H-29), 0.75 (3H, s, H-23), 0.69 (3H, s, H-24)；13C-NMR (100 MHz, DMSO-d6) δ: 178.2 (C-28), 142.0 (C-13), 124.3 (C-12), 76.6 (C-3), 75.3 (C-11), 54.8 (C-OCH3), 54.1 (C-5), 52.4 (C-9), 51.7 (C-18), 46.3 (C-17), 42.0 (C-8), 41.6 (C-14), 40.1 (C-1), 39.8 (C-10), 39.3 (C-19), 39.1 (C-20), 38.6 (C-4), 36.1 (C-22), 33.0 (C-7), 30.0 (C-21), 28.3 (C-23), 27.7 (C-2), 27.7 (C-15), 23.6 (C-16), 22.4 (C-27), 21.0 (C-30), 18.5 (C-26), 18.0 (C-6), 16.7 (C-29), 16.7 (C-25), 16.0 (C-24)。以上数据与文献报道[17]基本一致，故鉴定化合物9为11α-甲氧基熊果酸。

化合物10：浅黄色无定形粉末，mp 121~123 ℃。ESI-MS m/z: 275 [M+Na]+。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 13.2 (1H, brs, 2-OH), 5.26 (1H, brs, 6-OH), 3.72 (1H, m, H-8), 3.69 (3H, s, 4-OCH3), 2.13 (3H, s, H-13), 2.10 (3H, s, H-12), 1.16 (3H, d, J=6.8 Hz, H-11), 0.89 (3H, t, J=7.2 Hz, H-10)；13C-NMR (100 MHz, CDCl3) δ: 211.3 (C-7), 161.1 (C-6), 158.7 (C-4), 158.5 (C-2), 108.5 (C-3), 108.5 (C-5), 106.5 (C-1), 62.4 (4-OCH3), 45.4 (C-8), 27.4 (C-9), 17.2 (C-11), 12.0 (C-10), 8.6 (C-13), 7.6 (C-12)。以上数据与文献报道[18]基本一致，故鉴定化合物10为1-(2, 6-dihydroxy-4-methoxy-3, 5-dimethylphenyl)-2-methylbutan-1-one。

化合物11：浅黄色无定形粉末，mp 361~363 ℃。ESI-MS m/z: 325 [M+Na]+。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 7.46 (2H, s, H-5, 5′)；13C-NMR (100 MHz, DMSO-d6) δ: 159.1 (C-7, 7′), 148.1 (C-4, 4′), 139.7 (C-3, 3′), 136.4 (C-2, 2′), 112.3 (C-1, 1′), 110.2 (C-5, 5′), 107.5 (C-6, 6′)。以上数据与文献报道[7]基本一致，故鉴定化合物11为鞣花酸。

化合物12：浅黄色粉末，mp 249~250 ℃。ESI-MS m/z: 485 [M+Na]+。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 7.75 (1H, s, H-5′), 7.54 (1H, s, H-5), 5.48 (1H, d, J=1.2 Hz, H-1″), 4.04 (3H, s, 3-OCH3), 1.13 (1H, d, J=6.4 Hz, H-6″)；13C-NMR (100 MHz, DMSO-d6) δ: 158.7 (C-7, 7′), 152.7 (C-4′), 146.4 (C-4), 141.7 (C-3′), 141.3 (C-2), 140.1 (C-3), 136.1 (C-2′), 114.0 (C-1′), 113.0 (C-6), 111.6 (C-5′), 111.4 (C-5), 111.2 (C-6′), 108.7 (C-1), 100.1 (C-1″), 71.7 (C-4″), 70.0 (C-3″), 69.9 (C-2″), 69.8 (C-5″), 60.9 (C-3-OCH3), 17.8 (C-6″)。以上数据与文献报道[19]基本一致，故鉴定化合物12为3-甲氧基鞣花酸-4′-O-α-L-吡喃鼠李糖苷。

参考文献
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