槲寄生Visci Herba为桑寄生科（Loranthaceae）槲寄生属Viscum L.植物槲寄生Viscum coloratum (Kom.) Nakai的干燥带叶茎枝，常寄生于山楂树、杨树、榆树、苹果树等植物，在我国主要分布于吉林、辽宁、黑龙江、河北、安徽、山东、江苏等省^[1]。槲寄生味苦，性平，《中国药典》2015年版记载其具有祛风湿、补肝肾、强筋骨、安胎元等功效，用于治疗风湿痛、腰膝酸软、胎动不安等疾病^[2]。本实验对槲寄生干燥带叶茎枝的水部位进行了系统的化学成分研究，通过各种色谱技术分离得到9个化合物，分别鉴定为鼠李秦素-3-O-β-D-芹菜糖(1→2)-O-β-D-葡萄糖苷[rhamnazin-3-O-β-D-api (1→2)-O-β-D-glucoside，1]、鼠李秦素（rhamnazine，2）、鼠李秦素-3-O-β-D-葡萄糖苷（rhamnazin-3-O-β-D-glucoside，3）、鼠李秦素-3-O-β-D-(6″-乙酰)-O-β-D-葡萄糖苷[rhamnazin-3-O-β-D-(6″-acetyl)-O-β-D-glucoside，4]、高圣草素-7-O-β-D-葡萄糖苷（homeriodictyol-7-O-β-D-glucoside，5）、高圣草素-7-O-β-D-芹菜糖基(1→2)-O-β-D-葡萄糖苷[homeriodictyol-7-O-β-D-api (1→2)-O-β-D-glucoside，6]、高圣草-7-O-β-D-葡萄糖基-4′-O-β-D-芹菜糖苷（homeriodictyol-7-O-β-D-glucoside-4′-O-β-D-apioside，7）、圣草酚-7-O-β-D-葡萄糖苷（homeriodictyol-7-O-β-D-glucosid，8）、枫香槲寄生苷（liquidamboside，9）。其中化合物1为新的黄酮苷类化合物，命名为槲寄生新苷IX，化合物9首次从槲寄生中分离得到。

UV759S紫外分光光度仪（上海精密科学仪器有限公司）；Wzz-2s型旋光仪（上海精密科学仪器有限公司）；X-5型显微熔点测定仪（北京泰克仪器公司）；制备型液相色谱仪（LC-8A型泵，SPD-M10A型检测器，日本岛津制作所）；INOVA-400型核磁共振波谱仪（美国Varian公司）；Q-TOF microYA019型四极杆飞行时间质谱仪（美国Waters公司）；YMC-Pack ODS-AQ制备色谱柱（250 mm×20 mm，5 μm，日本YMC公司）；Sephadex LH-20（GE Healthcare公司）；GF₂₅₄薄层色谱板和柱色谱硅胶均系烟台芝罘黄务硅胶开发试验厂生产；所用色谱纯及分析纯有机试剂均为国药集团上海化学试剂公司生产。

槲寄生药材30 kg，购自安徽省安庆华氏中药饮片有限公司，产地为黑龙江尚志县，经中国医药工业研究总院吴彤研究员鉴定为槲寄生Viscum coloratum (Kom.) Nakai干燥带叶茎枝，药材批号14031901，标本（14031901）保存于上海医药工业研究院中药研究部。

槲寄生干燥带叶茎枝27.0 kg，粉碎后用95%乙醇于60 ℃提取4次，每次2 h，合并提取液，60 ℃以下减压浓缩回收溶剂得浸膏。加入约4.0 L水分散，每次再加约1.8 L的CHCl₃萃取3次，浓缩后得氯仿层流浸膏和水层流浸膏。水层流浸膏加水约3.8 L稀释，上D101大孔树脂用不同比例乙醇-水混合液洗脱得到水和10%、30%、50%、70%、95%乙醇6个部位。50%乙醇部位（70.1 g）经硅胶柱色谱，依次用醋酸乙酯-甲醇（100:0→0:100）梯度洗脱，TLC检测合并相同组分，共得到5个流分Fr. B1~B5。其中Fr. B3（23.0 g）经反复硅胶柱色谱，醋酸乙酯-甲醇（50:1→1:1）梯度洗脱，再经SephadexLH-20柱色谱及半制备HPLC分离纯化，得到化合物3（23.8 mg）、4（86.0 mg）、5（123.7 mg）、6（98.3 mg）、7（90.0 mg）；Fr. B4（8.3 g）用甲醇溶解，滤过，分为2个部位，甲醇难溶部位为Fr. B4-1（4.5 g），易溶解的部位为Fr. B4-2（3.8 g）；Fr. B4-2经反复硅胶柱色谱，石油醚-丙酮（6:1→1:2）梯度洗脱，Sephadex LH-20柱色谱、半制备型HPLC分离纯化，得到化合物1（21.2 mg）、2（35.6 mg）、8（22.1 mg）、9（30.0 mg）。

对化合物1中糖组分的酸水解和检测按照文献报道^[3]中记载的方法进行。将化合物1（1.5 mg）在2 mL盐酸二氧六环（1:1）中回流2 h，蒸干，用100 μL无水吡啶溶解后加入200 μL（0.1 mol/L）的半胱氨酸甲酯盐酸盐。混合物在60 ℃下加热1 h，再加入2.6 mL的三甲基硅化试剂HMDS-TMCS（六甲基二硅氮烷-三甲基氯硅烷-吡啶，2:1:10），在60 ℃继续加热30 min，反应完全后，混合物用2 mL环己烷萃取，萃取物进行GC-MS分析以鉴定糖的构型。

对照品单糖（β-D-葡萄糖、β-D-芹菜糖均购自麦克林试剂，质量分数分别为99%和97%）也采用上述方法处理，并对其环己烷萃取物进行GC-MS分析，测试结果作为对照。

化合物1：黄色无定形粉末。ESI-MS m/z: 647.06 [M+Na]⁺, 663.06 [M+K]⁺, 1 271.12 [2M+Na]⁺, 1 287.15 [2M+K]⁺, 515.05 [M+H-132]⁺提示相对分子质量为624。分子式为C₂₈H₃₂O₁₆。¹H-NMR (500 MHz, CD₃OD)δ: 3.86 (3H, s, 3′-OCH₃), 3.97 (3H, s, 7-OCH₃), 3.5~4.5 (糖上其他质子信号), 5.47 (1H, s, 芹菜糖C₁-H), 5.69 (1H, d, J=7.0 Hz, β-D-葡萄糖C₁-H), 6.27 (1H, d, J=2.0 Hz, H-6), 6.58 (1H, d, J=2.0 Hz, H-8), 7.96 (1H, d, J=2.0 Hz, H-2′), 6.91 (1H, d, J=8.0 Hz, H-5′), 7.63 (1H, dd, J=2.0, 8.0 Hz, H-6′), 9.12 (1H, s, 4′-OH)；¹³C-NMR (125 MHz, CD₃OD)显示有28个碳信号，其中56.6、57.0为2个甲氧基碳信号，结合DEPT谱分析：110.6 (CH, C-1′′′), 78.7 (CH, C-2′′′), 81.1 (C, C-3′′′), 75.8 (CH₂ C-4′′′), 66.9 (CH₂, C-5′′′)与文献报道^[4]中数据基本一致，提示为芹菜糖上碳信号。δ_C 100.7 (CH, C-1″), 78.4 (CH, C-2″), 78.0 (CH, C-3″), 71.9 (CH, C-4″), 78.8 (CH, C-5″), 62.6 (CH₂, C-6″)为葡萄糖上碳信号，由¹H-NMR葡萄糖C1″-H位δ_H (5.69, J=7.0 Hz)可提示为β-葡萄糖。芹菜糖δ5.47 (1H, s, C-1′′′)提示为β-芹菜糖。

将化合物1糖水解后进行GC-MS分析，进一步确认为β-D-吡喃葡萄糖和β-D-呋喃芹菜糖。由ESI-MS m/z: 515.05 [M-132+H]，提示芹菜糖连在末端，化合物1与化合物2、3苷元波谱数据基本一致，C-2位向低场位移δ9.0，C-3向高场位移约δ1.0，与化合物3一致，且葡萄糖C₁-H与C-3相关，提示母核3位被苷化，由HMBC谱可知葡萄糖C₁-H与芹菜糖C₁相关，葡萄糖C₂与芹菜糖C₁-H相关，提示连接方式为芹菜糖(1→2)-O-β-D-葡萄糖，经Scifinder数据库检索，化合物1为新化合物，鉴定为鼠李秦素-3-O-β-D-呋喃芹菜糖(1→2)-O-β-D-吡喃葡萄糖苷，命名为槲寄生新苷IX（图 1）。具体¹H-NMR，¹³C-NMR谱数据归属见表 1。

图 1 化合物1的结构和主要的HMBC相关 Fig.1 Structure and key HMBC correlations of compound 1

表 1(Table 1)

表 1 化合物1的1H-NMR和13C-NMR数据(500/125 MHz, CD3OD) Table 1 1H-NMR and 13C-NMR data of compound 1 (500/125 MHz, CD3OD) 碳位 δC DEPT δH HMBC COSY 2 158.8 C - H-6′ - 3 135.1 C - H-1″ - 4 179.5 C - - - 5 163.0 C - H-6 - 6 99.0 CH 6.27 (1H, d,  J=2.5 Hz) H-8 H-8 7 167.2 C - H-8 - 8 93.1 CH 6.58 (1H, d,  J=2.5 Hz) H-6 H-6 9 158.4 C - H-8 - 10 106.9 C - H-5 - 1′ 123.9 C - H-2′ - 2′ 114.5 CH 7.96 (1H, d, bt  J=2.5 Hz) H-6′ H-6′ 3′ 148.5 C - H-5′ - 4′ 150.8 C - H-6′ - 5′ 116.1 CH 6.91 (1H, d,   J=8.0 Hz) H-6′ H-6′ 6′ 123.5 CH 7.63 (1H, dd,   J=2.5, 8.0 Hz) H-5′ H-5′ OCH3 57.0 CH3 3.86 (3H, s) OCH3 56.6 CH3 3.97 (3H, s) 1″ 100.7 CH 5.70 (1H, d,  J=7.5 Hz) H-1′′′ 2″ 78.9 CH - 3″ 78.1 CH - 4″ 71.9 CH - 5″ 78.7 CH - 6″ 62.6 CH2 - 1′′′ 110.0 CH 5.46 (1H, s) H-1″ 2′′′ 78.7 CH - 3′′′ 81.1 C - 4′′′ 75.8 CH2 - 5′′′ 66.9 CH2 -  糖上除端基质子信号外其余质子信号重叠位于3.5~4.5  Except anomeric protons, others are overlap in 3.5-4.5

表 1 化合物1的1H-NMR和13C-NMR数据(500/125 MHz, CD3OD) Table 1 1H-NMR and 13C-NMR data of compound 1 (500/125 MHz, CD3OD)

化合物2：ESI-MS m/z: 383.07 [M+Na]⁺, 683.13 [2M+Na]⁺, 329.06 [M-H]⁻；¹H-NMR (500 MHz, CD₃OD)δ: 3.82 (6H, s, 2×OCH₃), 6.25 (1H, d, J=2.1 Hz, H-6), 6.51 (1H, d, J=2.0 Hz, H-8), 7.79 (1H, d, J=2.0 Hz, H-2′), 6.79 (1H, d, J=8.5 Hz, H-5′), 7.62 (1H, dd, J=2.0, 8.5 Hz, H-6′)；¹³C-NMR (125 MHz, CD₃OD)δ: 149.1 (C-2), 136.1 (C-3), 178.1 (C-4), 162.4 (C-5), 97.4 (C-6), 165.9 (C-7), 92.5 (C-8), 156.7(C-9), 105.4 (C-10), 123.0 (C-1′), 113.6 (C-2′), 147.4 (C-3′), 149.0 (C-4′), 115.6 (C-5′), 124.0 (C-6′), 56.0 (OCH₃), 55.9 (OCH₃)。以上数据与文献报道^[4-5]基本一致，故鉴定化合物2为鼠李秦素，结构见图 2。

图 2 化合物1~9的结构 Fig.2 Structures of compounds 1-9

化合物3：荧光黄无定形粉末。ESI-MS m/z: 515.03 [M+Na]⁺, 1 007.15 [2M+Na]⁺, 491.06 [M-H]⁻；¹H-NMR (500 MHz, DMSO-d₆)δ: 3.82 (6H, s, 2×OCH₃), 3.31~3.70为葡萄糖其他质子信号，5.34 (1H, d, J=7.5 Hz, β-D-葡萄糖C₁-H), 6.20 (1H, d, J=2.0 Hz, H-6), 6.46 (1H, d, J=2.0 Hz, H-8), 7.82 (1H, d, J=2.0 Hz, H-2′), 6.82 (1H, d, J=8.0 Hz, H-5′), 7.5 (1H, dd, J=2.0, 8.5 Hz, H-6′)；¹³C-NMR (125 MHz, DMSO-d₆)δ: 158.4 (C-2), 135.2 (C-3), 179.6 (C-4), 162.9 (C-5), 99.2 (C-6), 167.4 (C-7), 93.6 (C-8), 159.0 (C-9), 106.7 (C-10), 122.4 (C-1′), 113.8 (C-2′), 148.5 (C-3′), 151.0 (C-4′), 116.1 (C-5′), 123.0 (C-6′), 56.6 (OCH₃), 56.9 (OCH₃), 103.5 (C-1″), 76.0 (C-2″), 78.7 (C-3″), 71.6 (C-4″), 78.1 (C-5″), 60.9 (C-6″)。化合物3与化合物1苷元波谱数据一致，其C-3位与葡萄糖相连，C-2位向低场位移δ9.0，以上数据与文献报道^{[4, 6]}基本一致，故鉴定化合物3为鼠李秦素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷。

化合物4：黄色无定形粉末。ESI-MS m/z: 557.17 [M+Na]⁺, 533.16 [M-H]⁻；¹H-NMR (500 MHz, DMSO-d₆)δ: 1.70 (1H, s, 6″-COCH₃), 3.84 (6H, s, 2×OCH₃), 5.38 (1H, d, J=8.0 Hz, β-葡萄糖C₁-H), 6.27 (1H, d, J=2.0 Hz, H-6), 6.68 (1H, d, J=2.0 Hz, H-8), 6.85 (1H, d, J=8.0 Hz, H-5′), 7.47 (1H, dd, J=2.0, 8.0 Hz, H-6′), 7.80 (1H, d, J=1.5 Hz, H-2′), 9.65 (1H, s, 重水交换信号消失, OH-4′), 12.48 (1H, s, 重水交换信号消失, OH-5′)；¹³C-NMR (125 MHz, DMSO-d₆)δ: 158.6 (C-2), 135.4 (C-3), 178.5 (C-4), 163.1 (C-5), 98.6 (C-6), 165.7 (C-7), 93.3 (C-8), 156.9 (C-9), 106.4 (C-10), 122.8 (C-1′), 113.6 (C-2′), 147.6 (C-3′), 150.2 (C-4′), 115.7 (C-5′), 122.8 (C-6′), 56.2 (OCH₃), 56.8 (OCH₃), 102.9 (C-1″), 74.7 (C-2″), 77.2 (C-3″), 70.2 (C-4″), 74.3 (C-5″), 63.1 (C-6″), 170.1 (COCH₃), 21.1 (COCH₃)。以上数据与文献报道^[4]基本一致，故鉴定化合物4为鼠李秦素-3-O-β-D-(6″-乙酰)-吡喃葡萄糖苷。

化合物5：黄色无定形粉末。ESI-MS m/z: 487.05 [M+Na]⁺, 463.06 [M-H]⁻；¹H-NMR (500 MHz, DMSO-d₆)δ: 3.86 (3H, s, OCH₃), 2.73 (1H, dd, J=3.0, 17.2 Hz, H-3), 4.96 (1H, m, 葡萄糖C_l-H), 5.33 (1H, dd, J=2.8, 12.8 Hz, H-2), 6.16 (1H, d, J=2.0 Hz, H-6), 6.30 (1H, d, J=2.0 Hz, H-8), 6.90 (1H, dd, J=8.0, 1.8 Hz, H-6′), 6.81 (1H, d, J=8.0 Hz, H-5′), 7.06 (1H, d, J=1.8 Hz, H-2′), 9.35 (1H, s, 4-OH), 12.07 (1H, s, 5-OH)；¹³C-NMR (125 MHz, DMSO-d₆)δ: 81.1 (C-2), 44.3 (C-3), 198.6 (C-4), 164.9 (C-5), 97.0 (C-6), 167.0 (C-7), 98.1 (C-8), 164.6 (C-9), 105.0 (C-10), 131.5 (C-1′), 111.4 (C-2′), 149.2 (C-3′), 148.2 (C-4′), 116.2 (C-5′), 120.7 (C-6′), 56.6 (OCH₃), 103.2 (C-1″), 74.7 (C-2″), 78.2 (C-3″), 71.2 (C-4), 77.8 (C-5″), 62.4 (C-6″)。以上数据与文献报道^[7-8]基本一致，故鉴定化合物5为高圣草素-7-O-β-O-吡喃葡萄糖苷。

化合物6：黄色无定形粉末。ESI-MS m/z: 619.03 [M+Na]⁺, 1 215.01 [2M+Na]⁺, 487.03 [M+H-132]⁺, 303.01 [M+H-132-162]⁺；¹H-NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ: 2.73 (1H, dd, J=3.2, 17.0 Hz, H-3), 3.95 (3H, s, OCH₃), 5.13 (1H, d, J=7.2 Hz, β-D-葡萄糖C₁-H), 5.42 (1H, s, 芹菜糖C₁-H), 5.49 (1H, dd, J=2.8, 12.0 Hz, H-2), 6.14 (1H, d, J=2.0 Hz, H-6), 6.28 (1H, d, J=2.0 Hz, H-8), 6.83 (1H, d, J=8.0 Hz, H-5′), 7.44 (1H, dd, J=8.5, 2.0 Hz, H-6′), 7.76 (1H, d, J=2.0 Hz, H-2′), 9.12, 12.04 (各1H, s, 重水交换信号消失, OH-4′, 5)；¹³C-NMR (125 MHz, DMSO-d₆)δ: 81.0 (C-2), 44.4 (C-3), 198.6 (C-4), 165.0 (C-5), 96.9 (C-6), 166.0 (C-7), 98.0 (C-8), 164.6 (C-9), 105.0 (C-10), 130.9 (C-1′), 111.9 (C-2′), 149.2 (C-3′), 148.2 (C-4′), 116.2 (C-5′), 120.8 (C-6′), 56.6 (OCH₃), 99.8 (C-1″), 79.2 (C-2″), 78.3 (C-3″), 71.2 (C-4″), 78.41 (C-5″), 62.3 (C-6″), 108.4 (C-1′′′), 78.7 (C-2′′′), 78.4 (C-3′′′), 75.5 (C-4′′′), 66.0 (C-5′′′)。以上数据与文献报道^{[7, 9]}一致，故鉴定为高圣草素-7-O-β-D-呋喃芹菜糖基(1→2)-O-β-D-吡喃葡萄糖苷。

化合物7：土黄色无定形粉末。EI-MS m/z: 597.01 [M+H]⁺, 465.03 [M+H-132]⁺, 435.04 [M+H-162]⁺；¹H-NMR (500 MHz, DMSO-d₆)δ: 2.75 (1H, dd, J=2.4, 18.0 Hz, H-3), 3.80 (3H, s, OCH₃), 5.05 (1H, d, J=8.0 Hz, β-葡萄糖C₁-H), 5.32 (1H, s, 芹菜糖C₁-H), 5.48 (1H, dd, J=4.0, 12.0 Hz, H-2), 6.13, 6.15 (2H, s, H-6, 8), 6.80 (1H, d, J=8.0 Hz, H-5′), 7.02 (1H, dd, J=8.0, 2.0 Hz, H-6′), 7.10 (1H, d, J=2.0 Hz, H-2′), 12.03 (1H, s, 重水交换信号消失, OH-5)；¹³C-NMR (125 MHz, DMSO-d₆)δ: 79.8 (C-2), 43.5 (C-3), 197.5 (C-4), 163.2 (C-5), 96.9 (C-6), 165.3 (C-7), 95.8 (C-8), 163.1 (C-9), 103.8 (C-10), 129.6 (C-1′), 111.7 (C-2′), 148.0 (C-3′), 147.4 (C-4′), 115.7 (C-5′), 120.1 (C-6′), 56.2 (OCH₃), 102.9 (C-1″), 77.9 (C-2″), 77.3 (C-3″), 70.2 (C-4″), 77.0 (C-5″), 61.0 (C-6″), 110.2 (C-1′′′), 76.6 (C-2′′′), 79.6 (C-3′′′), 74.2 (C-4′′′), 64.5 (C-5′′′)。以上数据与文献报道^[8]一致，故鉴定化合物7为高圣草-7-O-β-D-吡喃葡萄糖基-4′-O-β-D-呋喃芹菜糖苷。

化合物8：黄色无定形粉末。EI-MS m/z: 483.04 [M+Na]⁺, 923.15 [2M+Na]⁺, 449.01 [M-H]⁻, 288.04 [苷元]⁺；¹H-NMR (500 MHz, DMSO-d₆)δ: 2.81 (2H, dd, J=4.5, 17.0 Hz, H-3), 5.39 (1H, dd, J=4.1, 12.5 Hz, H-2), 5.03 (1H, d, J=7.5 Hz, 葡萄糖C₁-H), 3.31~3.70 (葡萄糖其他质子信号), 6.20 (2H, d, J=2.0 Hz, H-6), 6.34 (1H, d, J=2.0 Hz, H-8), 6.82 (1H, d, J=2.0 Hz, H-2′), 6.8 (1H, d, J=8.5 Hz, H-5′), 6.89 (1H, dd, J=2.0, 8.5 Hz, H-6′)；¹³C-NMR (125 MHz, DMSO-d₆)δ: 80.9 (C-2), 43.8 (C-3), 198.5 (C-4), 163.8 (C-5), 97.0 (C-6), 165.1 (C-7), 96.1 (C-8), 163.1 (C-9), 104.8 (C-10), 130.1 (C-1′), 111.5 (C-2′), 147.8 (C-3′), 147.4 (C-4′), 115.7 (C-5′), 120.1 (C-6′), 102.6 (C-1″), 76.6 (C-2″), 77.3 (C-3″), 71.2 (C-4″), 77.0 (C-5″), 62.0 (C-6″)。以上数据与文献报道^[8]基本一致，故鉴定化合物8为圣草酚-7-O-β-O-吡喃葡萄糖苷。

化合物9：浅黄色无定形粉末。ESI-MS m/z: 493.06 [M+Na]⁺, 469.07 [M-H]⁻；¹H-NMR (500 MHz, DMSO-d₆)δ: 2.95, 3.71 (2H, m, H-6′), 3.59 (1H, m, H-4′), 3.85 (1H, m, H-3′), 3.82 (1H, m, H-5′), 4.91 (1H, t, J=8.4 Hz, H-2′), 5.49 (1H, d, J=8.0 Hz, 葡萄糖C₁-H), 6.29 (1H, d, J=2.4 Hz, H-6), 6.49 (1H, d, J=6.0 Hz, H-3), 6.66 (1H, d, J=16.0 Hz, H-2″), 6.72 (1H, d, J=2.4 Hz, H-8), 7.69 (1H, d, J=16.0 Hz, H-3″), 8.16 (1H, d, J=6.0 Hz, H-2)；¹³C-NMR (125 MHz, DMSO-d₆)δ: 158.6 (C-2), 112.1 (C-3), 181.9 (C-4), 163.1 (C-5), 101.0 (C-6), 163.2 (C-7), 96.0 (C-8), 159.1 (C-9), 107.1 (C-10), 99.4 (C-1′), 73.9 (C-2′), 75.4 (C-3′), 70.9 (C-4′), 77.9 (C-5′), 61.9 (C-6′), 165.8 (C-1″), 119.1 (C-2″), 146.0 (C-3″), 134.9 (C-4″), 129.2 (C-5″, 9″), 130.0 (C-6″, 8″), 131.2 (C-7″)。以上数据与文献报道^[10]基本一致，故鉴定化合物9为枫香槲寄生苷。