金线莲Anoectochili Roxburghii Gemma Terminalis又名花叶开唇兰Anoectochilus roxburghii (Wall.) Lindl.，别名金线兰、金丝草等，闽东屏南也称“金不换”。金线莲全草可入药，在民间常用于治疗肺病、肝炎、肾炎、风湿性关节炎及神经衰弱，外用可治肿伤、创伤及毒蛇咬伤^[1-2]。近年来，金线莲在治疗肿瘤、糖尿病及高血压方面显示出一定功效，日益引起医学界的重视。现今食品安全问题日趋严重，农药残留是其中一方面。作为名贵药材，金线莲在种植过程中也难免受到农药残留污染，而建立一种准确、快速的农药残留检测方法，对保障金线莲药材质量和安全具有重要意义。本实验采用了气相色谱法（GC）对金线莲药材建立质量控制方法，建立了六六六（BHC，包括α-BHC、β-BHC、γ-BHC、δ-BHC），滴滴涕（包括PP′-DDE、PP′-DDD、OP′-DDT、PP′-DDT）8种有机氯类农药残留的分析方法^[3-6]。为金线莲中农药残留的监控提供了一种快速、可靠的监测手段。

Agilent 6890N气相色谱仪；KQ-300E型超声波提取器（300 W、40 kHz）；申科R系列旋转蒸发仪；湖南湘仪L-530离心机；梅特勒电子分析天平（XP205、XS204）。二氯甲烷、石油醚（60～90 ℃）均为色谱纯，水为超纯水，氯化钠、无水硫酸钠均为分析纯。

BHC、滴滴涕混合对照品（农业部环境保护科研监测所提供，批号SB05-068（2）-2008）。

金线莲Anoectochili Roxburghii Gemma Terminalis，药材由宁德市中医院提供。药材粉碎成细粉备用。

弹性石英毛细管柱（30 m×0.32 mm，0.25 μm）AB-1701，⁶³Ni-ECD电子捕获检测器。进样口温度230 ℃，检测器温度300 ℃，不分流进样，进样量1 μL。程序升温：初始温度80 ℃，6 ℃/min升至200 ℃，4 ℃/min升至250 ℃，保持40 min。理论塔板数按α-BHC峰计算不低于1×10⁶，2个相邻色谱峰的分离度应大于1.5。

精密称取BHC（α-BHC、β-BHC、γ-BHC、δ-BHC）、滴滴涕（PP′-DDE、PP′-DDD、OP′-DDT、PP′-DDT）农药对照品适量，用石油醚分别制成含α-BHC、β-BHC、γ-BHC、δ-BHC、PP′-DDE、PP′-DDD、OP′-DDT、PP′-DDT 均为1 μg/L的混合对照品溶液，即得。

取本品细粉，取约2 g，精密称定，置100 mL具塞锥形瓶中，加水20 mL浸泡过夜，精密加丙酮40 mL，称定质量，超声处理30 min，取出，放冷，再称定质量，用丙酮补足减失质量，加氯化钠约6 g，精密加二氯甲烷30 mL，称定质量，超声处理15 min，称定质量，用二氯甲烷补足减失质量，静置（使分层），将有机相迅速移入装有适量无水硫酸钠的100 mL具塞锥形瓶中，放置4 h。精密量取35 mL，于40 ℃水浴上减压浓缩至近干，加少量石油醚如前反复操作至二氯甲烷及丙酮除净，用石油醚溶解并转移至10 mL具塞刻度离心管中，加石油醚精密稀释至5 mL，小心加入硫酸1 mL，振摇1 min，离心（3 000 r/min）10 min，精密量取上清液2 mL，至具刻度的浓缩瓶中，将溶液自然挥发浓缩至适量，用石油醚精密稀释至2 mL，即得。

分别精密吸取供试品溶液和混合对照品溶液各1 μL，分别连续进样3次，取3次平均值，按外标法计算供试品中8种有机氯农药残留量。

以提取溶剂石油醚作为空白样品直接进气相色谱仪，考察石油醚溶剂的干扰。结果见图 1。由图 1对比可见，溶剂石油醚对供试液图谱区无干扰。对照品溶液色谱图和供试品溶液色谱图见图 1-B、C。

1-α-BHC 2-γ-BHC 3-β-BHC 4-δ-BHC 5-OP′-DDT 6-PP′-DDD 7-PP′-DDE 8-PP′-DDT 图 1 石油醚 (A)、对照品 (B) 和供试品 (C) 色谱图 Fig.1 Chromatogram of petroleum ether (A),reference solution (B),and test sample (C)

精密吸取6.4 ng/mL的混合对照品溶液0.5、1、2、3、4、5 μL，注入气相色谱仪，得各色谱峰峰面积，以对照品进样量为横坐标（X），峰面积信号值为纵坐标（Y），经线性回归，各成分的回归方程和r值，见表 1。结果表明各成分在0.003 2～0.032 ng内呈良好的线性关系。

表 1(Table 1)

表 1 线性关系 Table 1 Linear relationship 成分 回归方程 r值 检测限/(μg∙L−1) α-BHC Y＝2×108 X－58.709 0.999 7 0.006 4 γ-BHC Y＝2×108 X－6.061 8 0.999 7 0.016 0 β-BHC Y＝2×108 X－26.721 0.999 6 0.018 0 δ-BHC Y＝2×107 X＋4.245 1 0.999 3 0.021 0 PP′-DDE Y＝3×108 X＋27.678 0.999 5 0.005 3 OP′-DDT Y＝3×107 X＋8.491 5 0.999 6 0.007 1 PP′-DDD Y＝1×108 X＋7.670 9 0.999 2 0.016 0 PP′-DDT Y＝1×107 X＋0.451 8 0.998 8 0.011 0

表 1 线性关系 Table 1 Linear relationship

取同一份供试品，按照“2.3”项的方法进行供试品的制备，分别于0、12、24、48 h进行测定，测定结果表明β-BHC RSD值为2.33%（其中α-BHC、γ-BHC、δ-BHC、PP′-DDE、OP′-DDT、PP′-DDD、PP′-DDT未检出），结果表明，样品在48 h内稳定。

取同一混合对照品溶液，按“2.1”项色谱条件，连续进样6次，计算各成分峰面积的RSD值均小于2.0%。表明该方法精密度符合要求。

取金线莲样品6份，按照拟定的方法进行供试品的制备和检测，测定结果β-BHC的RSD值为2.12%（其中α-BHC、γ-BHC、δ-BHC、PP′-DDE、OP′-DDT、PP′-DDD、PP′-DDT未检出）。表明该方法重复性良好。

取已测定的金线莲样品6份，精密称定，再精密加入一定量的各成分对照品，照前述方法制备供试液，测定并计算回收率，结果表明，α-BHC、β-BHC、γ-BHC、δ-BHC、PP′-DDE、OP′-DDT、PP′-DDD、PP′-DDT回收率分别为96.5%、97.3%、97.6%、96.4%、95.4%、96.3%、98.9%、97.8%；RSD值分别为1.78%、2.27%、2.07%、1.58%、1.00%、1.43%、1.88%、2.98%。结果表明在添加质量浓度范围内各成分的加样回收率及RSD均符合规定。

按前述方法制备供试品溶液，测定，按照外标法（峰面积）计算样品中检测成分的量，测定结果见表 2。

表 2(Table 2)

表 2 6批金线莲样品测定结果 Table 2 Determination of sixbatches of Anoectochili Roxburghii Gemma Terminalis 批号 β-BHC/(ng·g−1) 160101 0.90 160201 0.63 160301 0.71 160401 0.35 160501 0.64 160502 0.53

表 2 6批金线莲样品测定结果 Table 2 Determination of sixbatches of Anoectochili Roxburghii Gemma Terminalis

本方法采用GC 法测定 BHC、滴滴涕的农药残留量，标准试样在0.003 2～0.032 ng 内呈良好的线 性关系，r为0.998 8～0.999 7，平均回收率 95.4%～98.9%，RSD 为1.00%～2.98%。检出限为0.005 3 ～ 0.021 0 μg/L，金线莲药材测定结果为β-BHC为0.9 μg/kg（其中α-BHC、γ-BHC、δ-BHC、PP'-DDE、OP'-DDT、PP'-DDD、PP'-DDT未检出）。符合《中国药典》2015年版药材农药残留标准：含总BHC（α-BHC、β-BHC、γ-BHC、δ-BHC之和）不得超过0.2 mg/kg；总滴滴涕（PP′-DDE、OP′-DDT、PP′-DDD、PP′-DDT之和）不得超过0.2 mg/kg，以上实验结果表明，本方法准确性高、重现性好，结果可靠。可应用于金线莲药材中的BHC和滴滴涕农药残留的快速分析。