中草药  2016, Vol. 47 Issue (21): 3769-3772
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引用本文doi: 10.7501/j.issn.0253-2670.2016.21.003
范民霞, 赵建强, 苑祥, 陶燕铎, 邵赟, 梅丽娟 . 烈香杜鹃化学成分研究[J]. 中草药, 2016, 47(21): 3769-3772.
FAN Min-xia, ZHAO Jian-qiang, YUAN Xiang, TAO Yan-duo, SHAO Yun, MEI Li-juan . Chemical constituents from Rhododendron anthopogonoides[J]. Chinese Traditional and Herbal Drugs, 2016, 47(21): 3769-3772 .
烈香杜鹃化学成分研究
范民霞1,2, 赵建强1,2, 苑祥1,2, 陶燕铎1, 邵赟1, 梅丽娟1     
1. 中国科学院西北高原生物研究所/中国科学院藏药研究重点实验室, 青海省藏药研究重点实验室, 青海 西宁 810000 ;
2. 中国科学院大学, 北京 100000
收稿日期: 2016-05-20
基金项目: 青海省重大科技专项（2014-GX-A3A-01）
作者简介: 范民霞(1990-), 女, 硕士在读, 研究方向为天然药物化学.Tel:17797185869 E-mail:1028936921@qq.com
通信作者: 梅丽娟, 女, 本科, 研究员, 主要从事植物资源研究.E-mail:meilijuan111@163.com
摘要: 目的 对烈香杜鹃Rhododendron anthopogonoides的化学成分进行研究。 方法 采用Sephadex LH-20、MCI、硅胶柱色谱和制备液相色谱等手段进行分离纯化，利用理化性质及波谱数据鉴定化合物结构。 结果 从烈香杜鹃醋酸乙酯部位分离出10个化合物，分别鉴定为咖啡酸（1）、反式阿魏酸（2）、山柰酚（3）、二氢槲皮素（4）、去甲丁香色原酮（5）、4-（3，4-二羟基苯基）-2-丁酮（6）、3，5-二羟基甲苯（7）、熊果酸（8）、3，4-二羟基苯甲酸乙酯（9）、procurcumenol（10）。 结论 化合物1~3、5~7、9、10均为首次从烈香杜鹃中分离得到，化合物2、6、9、10为首次从杜鹃属植物中分离得到。
关键词: 烈香杜鹃     咖啡酸     反式阿魏酸     山柰酚     去甲丁香色原酮     熊果酸    
Chemical constituents from Rhododendron anthopogonoides
FAN Min-xia1,2, ZHAO Jian-qiang1,2, YUAN Xiang1,2, TAO Yan-duo1, SHAO Yun1, MEI Li-juan1     
1. Key Laboratory of Tibetan Medicine Research, Chinese Academy of Sciences, Qinghai Key Laboratory of Tibetan Medicine Research, Northwest Institute of Plateau Biology, Chinese Academy of Sciences, Xining 810000, China ;
2. University of Chinese Academy of Sciences, Beijing 100000, China
Abstract: Objective To study the chemical compositions of Rhododendron anthopogonoides. Methods The chemical constituents were isolated from R. anthopogonoides by Sephadex LH-20, MCI, silica gel column chromatography, and preparative-HPLC. The structures were assigned by physicochemical property and spectroscopic data. Results Ten compounds have been isolated from R. anthopogonoides and their structures were indentified as caffeic acid (1), trans-ferulic acid (2), kaempferol (3), dihydroquercetin (4), noreugenin (5), 4-(3, 4-dihydroxyphenyl)-2-butanone (6), 3, 5-dihydroxy toluene (7), ursolic acid (8), ethyl 3, 4-dihydroxybenzoate (9), and procurcumenol (10). Conclusion Compounds 1—3, 5—7, 9, and 10 are obtained from R. anthopogonoides for the first time. Compounds 2, 6, 9, and 10 are obtained from the plants of Rhododendron L. for the first time.
Key words: Rhododendron anthopogonoides Maxim.     caffeic acid     trans-ferulic acid     kaempferol     noreugenin     ursolic acid    

烈香杜鹃Rhododendron anthopogonoides Maxim.为杜鹃花科（Ericaceae）杜鹃花属Rhododendron L.植物，俗称小叶枇杷，是藏药达理的成分之一[1]，生长于2 900～4 100 m的高山地区，主要分布于青海、甘肃、云南、山西、陕西等地，资源丰富[2]。烈香杜鹃味辛、苦，性微温，具有止咳、祛痰、平喘、清热解毒、健胃消肿之功效[3]。藏医以烈香杜鹃的花、叶、嫩枝入药。藏医用金诃甘露药浴液治疗类风湿性关节炎，具有较好的临床效果，而烈香杜鹃是金诃甘露药浴液5味藏药主要药味之一[4]。早在1971年烈香杜鹃片被全国推广，用于治疗慢性支气管炎，具有疗效高、祛痰作用好、毒性小等特点。有研究表明，烈香杜鹃的根、茎、叶、花具有多种药理活性，有较大的开发价值。

目前，烈香杜鹃中已分离鉴定出的化学成分有挥发油类、黄酮类、三萜类、甾体类、香豆素类等[5]。且有研究表明烈香杜鹃的活性部位为醋酸乙酯部位[6]。鉴于烈香杜鹃具有极高的药用价值，为了进一步完善对烈香杜鹃化学成分的研究，本实验从烈香杜鹃的醋酸乙酯部位中分离出了10个化学成分，分别鉴定为咖啡酸（caffeic acid，1）、反式阿魏酸（trans-ferulic acid，2）、山柰酚（kaempferol，3）、二氢槲皮素（dihydroquercetin，4）、去甲基丁香色原酮（noreugenin，5）、4-(3, 4-二羟基苯基)-2-丁酮[4-(3, 4-dihydroxyphenyl)-2-butanone，6]、3, 5-二羟基甲苯（3, 5-dihydroxy toluene，7）、熊果酸（ursolic acid，8）、3, 4-二羟基苯甲酸乙酯（ethyl 3, 4-dihydroxybenzoate，9）、procurcumenol（10）。其中化合物1～3、5～7、9、10均为首次从烈香杜鹃中分离得到，化合物2、6、9、10为首次从杜鹃属植物中分离得到。

1 仪器与材料

Agilent 1200高效液相色谱（Agilent公司）；柱色谱硅胶（100～200目）；NP-7100C型制备液相色谱（江苏汉邦科技有限公司）；薄层用硅胶Ｈ（青岛海洋化工厂）；Bruker AV600型核磁共振仪（Bruker公司）；Fisher色谱级甲醇；其他试剂均为分析纯。

干燥的烈香杜鹃茎叶购买于青海省西宁市中药市场，由中国科学院西北高原生物研究所梅丽娟研究员鉴定为烈香杜鹃Rhododendron anthopogonoides Maxim.。

2 提取与分离

干燥的烈香杜鹃茎叶10 kg，粉碎过40目筛，95%乙醇回流提取3次，每次3 h，料液比为1:10，提取液合并、滤过，减压浓缩，得总浸膏1.81 kg。将浸膏悬浮于水中，依次用石油醚（60～90 ℃）、醋酸乙酯和正丁醇萃取，其中醋酸乙酯部位得559 g。醋酸乙酯部位拌样上硅胶柱色谱，石油醚-丙酮（20:1→1:1）梯度洗脱，得到A（385 g）、B（48.6 g）、C（117.8 g）及D（7.6 g）4个部分。将A上硅胶柱色谱，以石油醚-醋酸乙酯（20:1→1:1）梯度洗脱，得到11个组分Fr. A1～A11，Fr. A7（60 g）过MCI，以甲醇-水（30%、50%、70%、90%、100%）梯度洗脱，得到4个组分Fr. A7-1～A7-4。Fr. A7-1（15.3 g）上硅胶柱色谱，以丙酮-氯仿（10:1→1:1）梯度洗脱得到化合物1（55.0 mg）、2（15.7 mg）、5（10.1 mg）。Fr. A7-2（18.8 g）反复过硅胶柱色谱，经HPLC制备得化合物6（5.2 mg）、7（7.3 mg）、8（3.8 mg）、9（6.4 mg）。Fr. A7-3（9.7 g）反复过硅胶柱色谱，经HPLC制备得化合物10（9.1 mg）。Fr. A9（85 g）经Sephadex LH-20，氯仿甲醇（1:1）洗脱得到化合物3（11.3 mg）、4（2.7 mg）。

3 结构鉴定

化合物1：淡黄色结晶（甲醇）。溴酚蓝颜色反应为黄色，表明有羧基存在。三氯化铁-铁氰化钾反应为蓝色，说明是酚酸类物质。1H-NMR (600 MHz, Methanol-d4) δ: 6.18 (1H, d, J=16.8 Hz, H-8), 7.84 (1H, d, J=16.8 Hz, H-7), 7.44 (1H, d, J=2.2 Hz, H-2), 6.79 (1H, dd, J=8.6, 2.2 Hz, H-6), 6.71 (1H, d, J=8.6 Hz, H-5)。同时在3种不同类型溶剂系统中与咖啡酸对照品共薄层，2者的Rf值和显色行为均吻合。基于以上波谱数据和理化性质[7]，鉴定化合物1为咖啡酸。

化合物2：针状结晶（甲醇）。溴酚蓝颜色反应为黄色，表明有羧基存在，三氯化铁-铁氰化钾反应为蓝色，说明是酚酸类物质。1H-NMR (600 MHz, Methanol-d4)δ: 6.21 (1H, d, J=15.9 Hz, H-8), 7.49 (1H, d, J=15.9 Hz, H-7), 6.99 (1H, brs, H-2), 6.89 (1H, d, J=6.6 Hz, H-5), 6.74 (1H, brs, J=6.6 Hz, H-6)。碳谱中，低场区存在9个sp2杂化碳信号。其中δ 170.2为羰基碳信号。高场区δ 53.2表明存在甲氧基碳信号。基于以上波谱数据和理化性质[8]，鉴定化合物2为反式阿魏酸。

化合物3：黄色粉末。FeCl3显色反应、HCl-Mg显色反应呈阳性，254 nm紫外灯下显蓝色荧光，说明是黄酮类。1H-NMR (600 MHz, Methanol-d4)δ: 6.17 (1H, d, J=1.8 Hz, H-6), 6.40 (1H, brs, H-8), 8.09 (2H, d, J=8.1 Hz, H-2′, 6′), 6.89 (2H, d, J=8.7 Hz, H-3′, 5′)；13C-NMR (150 MHz, Methanol-d4) δ: 148.0 (C-2), 137.1 (C-3), 177.4 (C-4), 162.7 (C-5), 99.3 (C-6), 165.6 (C-7), 94.5 (C-8), 158.3 (C-9), 104.6 (C-10), 123.7 (C-1′), 130.7 (C-2′), 116.3 (C-3′), 160.6 (C-4′), 116.3 (C-5′), 130.7 (C-6′)。基于以上波谱数据和理化性质[9]，鉴定化合物3为山柰酚。

化合物4：淡黄色粉末。HCl-Mg粉反应呈阳性。1H-NMR (600 MHz, Methanol-d4)δ: 6.96 (1H, brs, H-2′), 6.84 (1H, brd, J=7.8 Hz, H-6′), 6.80 (1H, d, J=7.8 Hz, H-5′), 5.92 (1H, brs, H-8), 5.88 (1H, brs, H-6), 4.51 (1H, brs, J=11.4 Hz, H-2), 4.49 (1H, brs, J=11.4 Hz, H-3)；13C-NMR (150 MHz, Methanol-d4) δ: 85.0 (C-2), 73.5 (C-3), 198.2 (C-4), 164.3 (C-5), 97.2 (C-6), 168.8 (C-7), 96.2 (C-8), 165.2 (C-9), 101.6 (C-10), 129.7 (C-1′), 120.8 (C-2′), 146.2 (C-3′), 147.0 (C-4′), 115.8 (C-5′), 115.9 (C-6′)。基于以上波谱数据和理化性质[10]，鉴定化合物4为二氢槲皮素。

化合物5：针状结晶（丙酮）。1H-NMR (600 MHz, Methanol-d4) δ: 2.36 (3H, s, 1′-CH3), 6.06 (1H, s, H-3), 6.18 (1H, d, J=1.8 Hz, H-6), 6.31 (1H, d, J=1.8 Hz, H-8)；13C-NMR (150 MHz, Methanol-d4) δ: 169.44 (C-2), 109.05 (C-3), 184.13 (C-4), 163.41 (C-5), 100.16 (C-6)。基于以上波谱数据和理化性质[11]，鉴定化合物5为去甲基丁香色原酮。

化合物6：无色粉末。1H-NMR (600 MHz, Methanol-d4) δ: 6.66 (1H, d, J=7.8 Hz, H-5), 6.62 (1H, d, J=1.8 Hz, H-2), 6.50 (1H, dd, J=7.9, 1.8 Hz, H-6), 2.72 (3H, brs, H-4′), 2.71 (2H, t, J=2.4 Hz, H-3′), 2.12 (3H, s, H-1′)；13C-NMR (150 MHz, Methanol-d4) δ: 134.1 (C-1), 116.5 (C-2), 146.6 (C-3), 144.6 (C-4), 116.6 (C-5), 120.6 (C-6), 30.4 (C-1′), 46.4 (C-2′), 211.6 (C-3′), 30.2 (C-4′)。基于以上波谱数据和理化性质[12]，鉴定化合物6为4-(3, 4-二羟基苯基)-2-丁酮。

化合物7：无色油状物。1H-NMR (600 MHz, Methanol-d4) δ: 6.13 (2H, s, H-2, 6), 6.08 (1H, s, H-4), 2.15 (3H, s, 1-CH3)；13C-NMR (150 MHz, Methanol-d4) δ: 141.2 (C-1), 109.4 (C-2, 6), 159.0 (C-3, 5), 100.5 (C-4), 21.5 (1-CH3)。基于以上波谱数据和理化性质[13]，鉴定化合物7为3, 5-二羟基甲苯。

化合物8：白色无定形粉末。1H-NMR (600 MHz, Methanol-d4) δ: 5.25 (1H, brs, H-12), 3.17 (1H, dd, J=11.7, 4.4 Hz, H-3), 2.22 (1H, d, J=9.7 Hz, H-18), 1.37 (3H, brs, CH3), 1.25 (3H, t, J=7.1 Hz, CH3), 1.13 (3H, s, CH3), 0.99 (3H, m, CH3), 0.90 (3H, d, J=6.3 Hz, H-30), 0.86 (3H, s, 1-CH3), 0.79 (3H, brs, H-29)；13C-NMR (150 MHz, Methanol-d4) δ: 39.8 (C-l), 27.9 (C-2), 79.7 (C-3), 40.4 (C-4), 56.7 (C-5), 19.5 (C-6), 31.8 (C-7), 43.2 (C-8), 46.7 (C-9), 34.3 (C-10), 20.9 (C-11), 126.9 (C-12), 139.6 (C-13), 40.8 (C-14), 28.7 (C-15), 24.1 (C-16), 46.4 (C-17), 54.3 (C-18), 40.0 (C-19), 39.8 (C-20), 29.2 (C-21), 38.1 (C-22), 25.3 (C-23), 14.5 (C-24), 16.0 (C-25), 16.7 (C-26), 21.6 (C-27), 181.6 (C-28), 17.7 (C-29), 19.5 (C-30)。基于以上波谱数据和理化性质[14]，鉴定化合物8为熊果酸。

化合物9：无色结晶（醋酸乙酯）。1H-NMR (600 MHz, Methanol-d4) δ: 7.42 (1H, brs, H-2), 7.41 (1H, brd, H-6), 6.80 (1H, d, J=7.9 Hz, H-5), 4.29 (2H, q, J=7.0 Hz, H-8), 1.25 (3H, t, J=7.0 Hz, H-9)；13C-NMR (150 MHz, Methanol-d4) δ: 168.5 (C=O), 151.8 (C-4), 146.3 (C-3), 123.7 (C-6), 123.0 (C-1), 117.5 (C-5), 115.9 (C-2), 61.8 (-O-CH2), 14.8 (CH3)。基于以上波谱数据和理化性质[15]，鉴定化合物9为3, 4-二羟基苯甲酸乙酯。

化合物10：棕色油状物。1H-NMR (600 MHz, Methanol-d4) δ: 1.20 (3H, s, H-15), 1.61 (1H, m, H-2a), 1.71 (3H, s, H-12), 1.76 (3H, s, H-13), 1.89 (3H, s, H-14), 1.85 (2H, m, H-3), 1.80 (1H, m, H-5), 1.97 (1H, dd, J=7.9, 3.7 Hz, H-2b), 2.23 (1H, dd, J=15.7, 12.3 Hz, H-6a), 2.43 (1H, dd, J=18.5, 9.1 Hz, H-l), 2.58 (1H, d, J=15.7 Hz, H-6b), 5.82 (1H, brs, H-9)；13C-NMR (150 MHz, Methanol-d4) δ: 21.4 (C-12), 22.6 (C-13), 23.8 (C-14), 24.4 (C-15), 27.9 (C-2), 40.4 (C-6), 29.5 (C-3), 51.6 (C-1), 54.9 (C-5), 80.7 (C-4), 129.7 (C-9), 137.6 (C-11), 137.7 (C-7), 158.7 (C-10), 201.1 (C-8)。基于以上波谱数据和理化性质[16]，鉴定化合物10为procurcumenol。

4 讨论

烈香杜鹃为常用的中药材，本实验在对其化学成分的研究中，分离鉴定了10个单体化合物，包括黄酮类、倍半萜类、三萜类、色原酮类、酚酸类等。其中化合物2、6、9、10为首次从杜鹃属植物中分离得到。本研究结果充实了杜鹃属植物化学成分研究的内容，为烈香杜鹃及相关药用植物研究提供了借鉴和参考。

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