翅荚决明Cassia alata L.别名翅荚黄槐、翅荚槐、蜡烛花，为豆科（Leguminosae）决明属Cassia Linn.多年生常绿灌木。其原产于美洲热带地区，广布于全世界热带地区，在我国分布于广东和云南南部^[1]。该植物枝叶秀丽繁茂，花冠鲜黄色，花姿优雅美观，有较高的观赏价值，常用作园林绿化树种^[2]。同时，其也是重要的药用植物，以根、叶、种子或全株入药，味淡，性寒，具有清火解毒、消肿止痛、杀虫止痒等功效^[2]。人们常采其鲜叶适量捣汁来治疗神经性皮炎、牛皮癣、湿疹、皮肤瘙痒、疮疖肿疡等症，全株入药可作缓泻剂^[3]。

目前国内外学者对翅荚决明进行了一些研究，主要报道的化学成分有黄酮、萜、甾体、蒽醌等类化合物^[4-6]。为充分利用我国丰富的资源，进一步寻找新的活性天然产物，本实验对产于西双版纳的翅荚决明细枝化学成分进行了研究，并从中分离到4个2-芳基苯并呋喃类化合物（图 1），分别鉴定为7-甲氧-2-(4-甲氧基苯基)-3, 5-二甲基苯并呋喃[7-methoxy-2-(4-methoxyphenyl)-3, 5-dimethylbenzofuran，1]，桑辛素N（moracin N，2），2-(2′-甲氧基-4′-羟基苯基)-3-甲基-6-羟基苯并呋喃[2-(2′-methoxy-4′-hydroxy-aryl)-3-methy-6-hydroxybenzofuran，3]，桑辛素P（moracin P，4），其中化合物1为新化合物，命名为翅荚决明素A，并且该化合物具有一定的细胞毒活性。

图 1 翅荚决明细枝中的2-芳基苯并呋喃类化合物 Fig.1 2-Arylbenzofuran compounds from twigs of C. alata

UV-2401A紫外光谱仪（日本岛津公司）；Bio-Rad FTS-185傅里叶变换红外光谱仪（美国伯乐BIO-RAD公司）；DRX-500型核磁共振仪（瑞士布鲁克公司）；岛津LC-8A型高效液相色谱仪，色谱柱为安捷伦公司Zorbax PrepHT GF（250 mm×21.2 mm，7 μm）制备柱和Zorbax C₁₈（250 mm×9.4 mm，5 μm）半制备柱。

拌样时使用硅胶（80～100目）、柱色谱硅胶（200～300目）、薄层色谱硅胶板GF₂₅₄（100 mm×100 mm）均为青岛海洋化工厂生产；MCI填充材料为MCI-GEL CHP-20P（75～150 μm）；Sephadex LH-20（上海仁凯生物技术有限公司）；薄层色谱显色剂为5% H₂SO₄乙醇溶液；工业用三氯甲烷、丙酮、甲醇、醋酸乙酯；色谱纯乙腈、四氢呋喃；超纯水。

翅荚决明于2013年8月购自云南西双版纳傣医院，产地为云南西双版纳洲勐腊县，经西双版纳傣医院林艳芳医师鉴定为豆科决明属植物翅荚决明Cassia alata L.。

取翅荚决明的细枝4.5 kg晒干，粉碎到30目，然后用95%的乙醇-水溶液提取4次，每次用量为5.0 L，室温浸泡、超声4次（每次30 min），滤过浓缩除去乙醇，合并提取液用醋酸乙酯萃取，醋酸乙酯相减压浓缩得浸膏82.5 g。浸膏用30 g粗硅胶（80～100目）拌样，烘干，用120 g硅胶（150～200目）柱色谱分离，三氯甲烷-丙酮（9∶1、8∶2、7∶3、6∶4、5∶5、1∶2）梯度洗脱，分成6个部分。选取8∶2洗脱部分进行HPLC进一步分离：通过Zorbax PrepHT GF反相柱，以58%甲醇-水溶液为流动相洗脱，体积流量为15 mL/min，分别收集35.2、28.7、18.7、12.6 min的色谱峰可得化合物1、4、3、2粗品。所得的4个化合物粗品再次用甲醇溶解，以甲醇为流动相，用葡聚糖凝胶柱纯化，得化合物1（12.4 mg）、2（10.5 mg）、3（18.6 mg）和4（14.3 mg）。

化合物1：黄色胶状物，UV λ_max^MeOH(nm): 210(4.05)、270 (3.08)、312 (3.38)；IR v_max^KBr(cm^-1): 3 028、2 984、1618、1 476、1 428、1 380、1 158、1 061、895、784；ESI-MS m/z: 305[M＋Na]⁺；HR-ESI-MS m/z:305.116 2 [M＋Na]⁺（计算值305.115 4，C₁₈H₁₈NaO₃）。HR-ESI-MS显示其准分子离子峰为305.116 2 [M＋Na]⁺，结合¹H-和¹³C-NMR谱确定分子式为C₁₈H₁₈O₃，不饱和度为10。紫外光谱在210、270、312 nm有最大吸收，证实化合物中存在芳环结构。化合物的¹H-、¹³C-NMR和DEPT数据（表 1）显示化合物中存在18个碳和18个氢，包含1个1, 2, 3, 5-四取代的苯环(C-1～6, H-4和H-6)，1个1, 4-取代的苯环(C-1′～6′, H₂-2′, 6′和H₂-3′, 5′)，2个甲基(C-7和C-9′, H₃-7和H₃-9′)，1组双键(C-7′和C-8′)和2个甲氧基(δ_C 56.1和55.9 q, δ_H3.85和3.81 s)。根据化合物中核磁共振数据(2个苯环, C-7′～9′和H₃-9′)和已知化合物3相似，可初步推测化合物1可能为3-甲基-2-芳基苯并呋喃^[7]。此外，可进一步通过H₃-9′和C-1、C-7′、C-8′，H₂-2′，6′和C-7′，以及H-6和C-8′的HMBC相关（图 2）确认化合物1为3-甲基-2-芳基苯并呋喃。化合物的骨架得到确认后，其余的取代基团，甲基(C-7)取代在C-5位可通过H₃-7和C-4、C-5、C-6，H-4和C-7，以及H-6和C-7的HMBC相关确定；2个甲基取代在C-3和C-4′位可通2个甲氧基氢(δ_H3.85和3.81)和C-3(δ_C 151.7)和C-4′ (δ_C160.6)的HMBC相关确认。至此化合物1的结构得到确认，并命名为翅荚决明素A。

表 1(Table 1)

表 1 化合物1的核磁共振数据(500/125 MHz, C5D5N) Table 1 1H-NMR and 13C-NMR data of compound 1 (500/125 MHz, C5D5N) 碳位 dC dH 1 126.6 (s) 2 144.1 (s) 3 151.7 (s) 4 111.5 (d) 7.37 (d, J=1.6 Hz) 5 134.9 (s) 6 116.3 (d) 7.71 (d, J=1.6 Hz) 7 25.1 (q) 2.39 (s) 1′ 121.5 (s) 2′, 6′ 129.2 (d) 7.91 (d, J=8.8 Hz) 3′, 5′ 115.2 (d) 6.79 (d, J=8.8 Hz) 4′ 160.6 (s) 7′ 152.8 (s) 8′ 111.0 (s) 9′ 8.8 (q) 2.17 (s) 3-OMe 56.2 (q) 3.85 (s) 4′-OMe 55.9 (q) 3.81 (s)

表 1 化合物1的核磁共振数据(500/125 MHz, C5D5N) Table 1 1H-NMR and 13C-NMR data of compound 1 (500/125 MHz, C5D5N)

图 2 化合物1的主要HMBC相关 Fig.2 Key HMBC (H→C) correlations of compound 1

化合物2：黄色粉末。¹H-NMR (500MHz, DMSO-d₆) δ: 6.97 (1H, s, H-3), 7.21 (1H, s, H-4), 7.04 (1H, s, H-7), 6.68 (2H, brs, H-2′, 6′), 6.22(1H, brs, H-4′), 3.27 (2H, d, J=7.0 Hz, H-1′′), 5.33 (1H, d, J=7.0 Hz, H-2′′), 1.71 (3H, s, H-4′′), 1.68 (3H, s, H-5′′)；¹³C-NMR (125MHz, DMSO-d₆) δ: 153.7 (C-2), 101.6 (C-3), 120.6 (C-3a), 120.3 (C-4), 124.6 (C-5), 153.4 (C-6), 97.0 (C-7), 153.6 (C-7a), 131.9 (C-1′), 102.2 (C-2′, 6′), 158.8 (C-3′, 5′), 102.5 (C-4′), 28.3(C-1′′), 123.2 (C-2′′), 131.3 (C-3′′), 17.7 (C-4′′), 25.6 (C-5′′)。以上数据与文献报道一致^[8]，故鉴定化合物2为桑辛素N。

化合物3：黄色非晶体粉末，¹H-NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ: 7.38 (1H, d, J =8.0 Hz, H-4), 6.85(1H, dd, J =2.0, 8.0 Hz, H-5), 7.11 (1H, d, J =2.0 Hz, H-7), 6.43(1H, d, J =2.0 Hz, H-3′), 6.33 (1H, dd, J =2.0, 8.0 Hz, H-5′), 7.14(1H, d, J =8.0 Hz, H-6′)； ^13C-NMR (125 MHz, DMSO-d₆) δ:149.0 (C-2), 110.4 (C-3), 118.9 (C-4), 110.6 (C-5), 156.3 (C-6), 95.6(C-7), 154.3 (C-8), 123.8 (C-9), 108.9 (C-1′), 157.1 (C-2′), 102.8 (C-3′), 159.0 (C-4′) 106.7 (C-5′), 131.3 (C-6′)。以上数据与文献报道一致^[7]，故鉴定化合物3为2-(2′-甲氧基-4′-羟基苯基)-3-甲基-6-羟基苯并呋喃。

化合物4：浅黄色无定形粉末，¹H-NMR (500 MHz, CD₃COCD₃) δ: 7.24 (1H, brs, H-4), 6.98 (1H, brs, H-3), 6.86 (1H, s, H-7), 6.85 (2H, d, J =2.0Hz, H-2′, 6′), 6.36 (1H, t, J=2.0 Hz, H-4′), 3.82 (1H, t, J=5.6 Hz, H-9), 3.10 (1H, dd, J=16.0, 5.6 Hz, H-8), 2.80 (1H, dd, J=16.0, 5.6 Hz, H-8), 1.37 (3H, s, H-11), 1.25 (3H, s, H-12)；¹³C-NMR (125 MHz, CD₃COCD₃) δ: 20.5 (C-12), 26.2 (C-11), 32.4 (C-8), 69.9 (C-9), 78.0 (C-10), 99.3 (C-7), 101.8 (C-3), 103.5 (C-4′), 103.8 (C-2′, 6′), 117.9 (C-5), 121.7 (C-4), 123.4 (C-3a), 133.3 (C-1′), 152.4 (C-6), 155.3 (C-2), 155.8 (C-7a), 159.7 (C-3′, 5′)。以上数据与文献报道一致^[9]，故鉴定化合物4为桑辛素P。

对化合物1进行了细胞毒活性筛选。细胞毒活性检测参照文献方法^[10]，采用改良的MTT法，以紫杉醇为阳性对照药，采用5种人源肿瘤细胞株（NB4、A549、SHSY5Y、PC3和MCF7），紫杉醇的IC₅₀值分别为0.03、0.02、0.05、0.05、0.03 μmol/L，化合物1的IC₅₀值分别为3.6、1.5、1.2、2.9、2.2 μmol/L，结果表明化合物1对所测试的人源肿瘤细胞具有一定的细胞毒活性。