中草药  2016, Vol. 47 Issue (15): 2614-2620
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引用本文doi: 10.7501/j.issn.0253-2670.2016.15.006
周学明, 刘洪新, 陈寿, 居学成, 谭海波, 邱声祥, 郑超 . 桃金娘叶的化学成分研究[J]. 中草药, 2016, 47(15): 2614-2620.
ZHOU Xue-ming, LIU Hong-xin, CHEN Shou, JU Xue-cheng, TAN Hai-bo, QIU Sheng-xiang, ZHENG Chao . Chemical constituents from leaves of Rhodomyrtus tomentosa[J]. Chinese Traditional and Herbal Drugs, 2016, 47(15): 2614-2620 .
桃金娘叶的化学成分研究
周学明1, 刘洪新2, 陈寿3, 居学成4, 谭海波2, 邱声祥2, 郑超1,3     
1. 海南师范大学化学与化工学院, 海南 海口 571158 ;
2. 中国科学院华南植物园, 广东 广州 510650 ;
3. 深圳赛欣瑞科技创新中心, 广东 深圳 518110 ;
4. 北京大学深圳研究院, 广东 深圳 518057
收稿日期: 2016-04-07
基金项目: 海南省自然科学基金资助项目（20152038）；海南省高等学校科学研究项目（Hnky2015-21）
作者简介: 周学明(1989-),男,博士研究生,从事天然产物研究。E-mail:xueming2009211@126.com
通信作者: 邱声祥,男,教授。Tel:(020)37081190 E-mail:sxqiu@scbg.ac.cn
郑超,男,博士,副教授。Tel:(0898)65730237 E-mail:zhengchaoustc@163.com
摘要: 目的 研究桃金娘Rhodomyrtus tomentosa叶的化学成分及其抗菌活性。 方法 应用各种色谱技术对桃金娘叶的粗提物进行分离纯化，并利用质谱及核磁等波谱技术鉴定化合物结构；采用微量稀释法对所得化合物进行抗菌活性测试。 结果 从桃金娘叶95%乙醇提取物中分离得到21个化合物，分别鉴定为生育酚（1）、新生育酚（2）、生育酚-对苯醌（3）、生育酚A（4）、（-）-α-tocospirone（5）、rhodomyrtosone F（6）、rhodomyrtosone C（7）、watsonianone A（8）、rhodomyrtone（9）、2,6-二羟基-苯甲酸苯甲酯（10）、肉桂酸甲酯（11）、柚皮素（12）、槲皮素（13）、杨梅素（14）、3,7,3'-三甲氧基-5,4',5'-三羟基黄酮（15）、5,7,3',5'-四羟基黄酮（16）、艾纳香素（17）、7,4'-二甲氧基二氢槲皮素（18）、4'-二甲氧基二氢槲皮素（19）、2,4,7,8,9,10-六羟基-3-甲氧基蒽-6-O-β-L-吡喃鼠李糖苷（20）、4,8,9,10-四羟基-2,3,7-三甲氧基蒽-6-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（21）。 结论 化合物6为新天然产物，化合物2～5，10～13及15～19为首次从该属植物中分离得到，抗菌实验结果显示化合物3及6～9具有一定的抗菌活性。
关键词: 桃金娘     间苯三酚     生育酚     黄酮     抗菌活性    
Chemical constituents from leaves of Rhodomyrtus tomentosa
ZHOU Xue-ming1, LIU Hong-xin2, CHEN Shou3, JU Xue-cheng4, TAN Hai-bo2, QIU Sheng-xiang2, ZHENG Chao1,3     
1. College of Chemistry & Engineering, Hainan Normal University, Haikou 571158, China ;
2. South China Botanical Garden, Chinese Academy of Sciences, Guangzhou 510650, China ;
3. Shenzhen Saixinrui Science and Technology Innovation Center, Shenzhen 518110, China ;
4. Shenzhen Graduate School, Peking University Shenzhen 518057, China
Abstract: Objective To study the chemical constituents from the leaves of Rhodomyrtus tomentosa and its antibacterial activities. Methods The compounds were isolated and purified by various column chromatographies. Their structures were elucidated by means of spectral analyses (MS and NMR). The antibacterial activity of the compounds was tested by micro dilution method Results A total of 21 compounds were isolated from the 95% ethanol extract in the leaves of R. tomentosa and identified as (2R, 4'R, 8'R)-α-tocopherol (1), (2R, 4'R, 8'R)-β-tocopherol (2), α-tocopherol-quinone (3), α-tocopherol A (4), (-)-a-tocospirone (5), rhodomyrtosone F (6), rhodomyrtosone C (7), watsonianone A (8), rhodomyrtone (9), verimol K (10), methyl cinnamate (11), naringenin (12), quercetin (13), myricetin (14), 3, 7, 3'-trimethoxy-5, 4', 5'-trihydroxy flavone (15), 5, 7, 3', 5'- tetrahydroxyflavanone (16), blumeatin (17), dihydroquercetin-7, 4'-dimethylether (18), dihydroquercetin-4'-dimethoxy (19), 2, 4, 7, 8, 9, 10-hexahydroxy-3-methoxyanthracene-6-O-β-L-rhamnopyranoside (20), and 4, 8, 9, 10-tetrahydroxy-2, 3, 7-trimethoxyanthracene-6-O-β-D-glucopyranoside (21). Conclusion Compound 6 is a new natural product and compounds 2-5, 10-13, and 15-19 are isolated from the plants of Rhodomyrtus (DC.) Reich for the first time. Compounds 3 and 6-9 exhibit the antibacterial activities.
Key words: Rhodomyrtus tomentosa (Ait.) Hassk     phloroglucinol     tocopherol     flavone     antibacterial activity    

桃金娘Rhodomyrtus tomentosa (Ait.) Hassk为桃金娘科（Myrtaceae）桃金娘属Rhodomyrtus (DC.) Reich的常青灌木，别名豆稔、山稔、稔子树等，广泛的分布于东南亚地区，在我国东南部、南部以及西南部均有分布[1]。桃金娘全株都可入药，其叶具有健脾益血和收敛解毒的功效，其根具有祛风行气和益肾的功效[2]。近年来研究表明桃金娘主要化学成分有间苯三酚类、黄酮类、甾体类、蒽类以及三萜类等，这些化合物大多具有较好的生物活性，如抗菌、抗肿瘤、抗氧化等[3-12]。本课题组在寻找具有抗菌活性天然产物过程中发现桃金娘的乙醇提取物具有较强的抗菌效果，为了进一步研究桃金娘的抗菌活性成分，本实验利用活性追踪的方法对桃金娘叶进行了系统的分离，从中分离鉴定了21个化合物，分别为生育酚 [(2R,4'R,8'R)-α-tocopherol，1]、新生育酚 [(2R,4'R,8'R)-β-tocopherol，2]、生育酚-对苯醌（α-tocopherol-quinone，3）、生育酚A（α- tocopherol A，4）、(−)-α-tocospirone（5）、rhodomyrtosone F（6），rhodomyrtosone C（7）、watsonianone A（8）、rhodomyrtone（9）、2,6-二羟基-苯甲酸苯甲酯（verimol K，10）、肉桂酸甲酯（methyl cinnamate，11）、柚皮素（naringenin，12）、槲皮素（quercetin，13）、杨梅素（myricetin，14）、3,7,3′-三甲氧基-5,4′,5′-三羟基黄酮（3,7,3′-trimethoxy-5,4′,5′-trihydroxy flavone，15）、5,7,3′,5′-四羟基黄酮（5,7,3′,5′- tetrahydroxyflavanone，16）、艾纳香素（blumeatin，17）、7,4′-二甲氧基二氢槲皮素（dihydroquercetin- 7,4′-dimethylether，18）、4′-二甲氧基二氢槲皮素（dihydroquercetin-4′-dimethoxy，19）、2,4,7,8,9,10-六羟基-3-甲氧基蒽-6-O-β-L-吡喃鼠李糖苷（2,4,7,8,9,10-hexahydroxy-3-methoxyanthracene-6-O-β-

L-rhamnopyranoside，20）以及4,8,9,10-四羟基-2,3,7-三甲氧基蒽-6-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（4,8,9,10- tetrahydroxy-2,3,7-trimethoxyanthracene-6-O-β-D-glucopyranoside，21）。其中化合物6为具有过氧桥键的新天然产物，化合物2～5，10～13以及15～19为首次从该属植物中分离得到。另外，本实验对所有化合物进行了抗菌活性测试，抗菌实验结果显示化合物3及6～9对金黄色葡萄球菌具有一定的抗菌活性。

1 仪器与材料

Bruker AV-500 MHz型核磁共振仪（瑞士布鲁克公司）；Bruker AV-400 MHz型核磁共振仪（瑞士布鲁克公司）；Agilent-1200 Bruker Esquire 6000 Ion Trap液质联用仪（瑞士布鲁克公司）；PolAAr 3005旋光仪（OA公司）；柱色谱所用填料：硅胶100～200、200～300、300～400目（青岛海洋化工厂分厂），Sephadex LH-20（Pharmacia公司）；薄层色谱板所用硅胶为Kieselgel 60 F254、Kieselgel 60、WF254S（Merck公司）；色谱用试剂均为分析纯；高效液相试剂均为色谱纯。

桃金娘叶于2013年7月采自江西省南康市，经海南师范大学生命科学技术学院钟琼芯教授鉴定为桃金娘科植物桃金娘Rhodomyrtus tomentosa (Ait.) Hassk。

2 提取分离

将采集的桃金娘叶风干，约4.3 kg，粉碎后于95%乙醇中室温浸泡提取3次，每次24 h，合并提取液，并于50 ℃条件下减压浓缩至膏状（400 g）。将所得的乙醇提取物用80～100目硅胶拌样，采用硅胶常压柱依次用石油醚-醋酸乙酯（100∶0→0∶100）和氯仿-甲醇（2∶1→1∶1）进行梯度洗脱。经TLC检测后合并相似流分后得7个组分Fr. 1～7。Fr. 2用硅胶（200～300目）拌样，以石油醚-醋酸乙酯（20∶1→1∶1）进行梯度洗脱，TLC检测后合并相似流分得3个组分Fr. 2.1～2.3；其中Fr. 2.1用凝胶Sephadex LH-20以甲醇-氯仿（1∶1）进行纯化后得到化合物6（18 mg）、11（12 mg）和13（10 mg）。Fr. 2.2经Sephadex LH-20（氯仿-甲醇，1∶1）除去色素后，再由半制备高效液相色谱制备（乙腈-水，48∶52）得到化合物1（6.3 mg）、12（8.1 mg）、15（10 mg）和2（5.8 mg）。Fr. 2.3经Sephadex LH-20凝胶柱色谱以甲醇洗脱后，再由半制备高效液相色谱纯化（乙腈-水，45∶55）得到化合物3（10 mg）及14（5.9 mg）。Fr. 3用硅胶（200～300目）拌样，以石油醚-醋酸乙酯（10∶1→1∶5）进行梯度洗脱，TLC检测后合并相似流分得3个组分Fr. 3.1～3.3，组分Fr. 3.2经Sephadex LH-20凝胶柱色谱以甲醇洗脱后，再由半制备高效液相色谱制备（乙腈-水，40∶60）得到化合物4（9.2 mg）、5（7.8 mg）、16（8.3 mg）和18（8.8 mg）。Fr. 4用硅胶（200～300目）拌样，以石油醚-醋酸乙酯（5∶1→1∶10）进行梯度洗脱，TLC检测后合并相似流分得4个组分Fr. 3.1～3.4；Fr. 3.3经半制备高效液相制备（乙腈-水，35∶65）得到化合物7（6.8 mg）、8（7.1 mg）、9（5.5 mg）、10（9.0 mg）、17（6.6 mg）和19（9.1 mg）。Fr. 5用硅胶（200～300目）拌样，以氯仿-甲醇（50∶1→10∶1）进行梯度洗脱，TLC检测后合并相似流分得2个组分Fr. 5.1～5.2；Fr. 5.1经半制备高效液相制备（乙腈-水，90∶10）得到化合物20（8.8 mg）和21（9.7 mg）。

3 结构鉴定

化合物1：淡黄色油状物，EI-MS m/z: 453.4 [M＋Na]+。1H-NMR (500 MHz,CDCl3) δ: 2.61 (2H,t,J = 7.0 Hz,H-4),2.16 (3H,s,H-5a),2.12 (6H,s,H-7a,8b),1.23 (3H,s,H-2a),0.87 (6H,d,J = 7.0 Hz,H-4′a,8′a),0.86 (3H,d,J = 5.0 Hz,12′a),0.84 (3H,d,J = 5.0 Hz,12′b)；13C-NMR (125 MHz,CDCl3) δ: 74.7 (C-2),31.7 (C-3),20.9 (C-4),118.6 (C-5),144.7 (C-6),121.1 (C-7),122.8 (C-8),117.5 (C-4a),145.7 (C-8a),39.5 (C-1′),21.2 (C-2′),37.6 (C-3′),32.9 (C-4′),37.4 (C-5′),24.6 (C-6′),37.6 (C-7′),32.9 (C-8′),37.6 (C-9′),25.0 (C-10′),40.0 (C-11′),28.1 (C-12′),23.9 (C-2a),11.4 (C-5a),12.4 (C-7a),11.9 (C-8a),19.9 (C-4′a),19.8 (C-8′a),22.9 (C-12′a),22.8 (C-12′a)。以上数据与文献报道一致[13]，故鉴定化合物1为生育酚。

化合物2：淡黄色油状物，EI-MS m/z: 439.4 [M＋Na]+。1H-NMR (500 MHz,CDCl3) δ: 6.37 (1H,s,H-7),2.67 (2H,dd,J = 11.5,6.5 Hz,H-4),2.14 (3H,s,H-5a),2.12 (3H,s,H-8b),1.25 (3H,s,H-2a),0.86 (6H,d,J = 6.5 Hz,H-4′a,8′a),0.85 (3H,d,J = 5.0 Hz,H-12′a),0.84 (3H,d,J = 5.0 Hz,H-12′b)。该化合物氢谱数据与化合物1极为相似（多出一个芳香质子氢信号，缺少一个单峰甲基氢信号）推测该化合物为新生育酚，对照其主要特征峰与文献报道一致[14]，经TLC分析与新生育酚对照品对比鉴定化合物2为新生育酚。

化合物3：淡黄色油状物，EI-MS显示m/z: 469.4 [M＋Na]+。1H-NMR (500 MHz,CDCl3) δ: 2.54 (2H,dd,J = 10.5,6.5 Hz,H-1′),2.03 (3H,s,H-3a),2.01 (3H,s,H-5a,6a),1.23 (3H,s,H-3′a),0.87 (6H,d,J = 6.5 Hz,H-7′a,11′a),0.85 (3H,d,J = 6.0 Hz,15′a),0.84 (3H,d,J = 6.0 Hz,15′b)；13C-NMR (125 MHz,CDCl3) δ: 187.4 (C-1),144.6 (C-2),140.3 (C-3),187.9 (C-4),140.7 (C-5),140.6 (C-6),12.5 (C-3a),12.5 (C-5a),12.1 (C-6a),21.6 (C-1′),40.4 (C-2′),72.9 (C-3′),42.4 (C-4′),21.5 (C-5′),37.8 (C-6′),33.0 (C-7′),37.6 (C-8′),25.0 (C-9′),37.6 (C-10′),32.9 (C-11′),37.4 (C-12′),24.6 (C-13′),39.5 (C-14′),28.1 (C-15′),22.8 (C-16′),26.7 (C-3′a),19.9 (C-7′a),19.9 (C-11′a),22.9 (C-15′a)。以上数据与文献报道一致[15]，故鉴定化合物3为生育酚-对苯醌。

化合物4：无色油状物，EI-MS m/z: 485.4 [M＋Na]+。1H-NMR (500 MHz,CDCl3) δ: 4.72 (1H,s,OH),2.43 (1H,dt,J = 12.5,6.0 Hz,Hβ-7),2.01 (3H,s,H-3a),1.90 (1H,dt,J = 12.5,7.0 Hz,Hα-8),1.83 (3H,s,H-6a),1.82 (3H,s,H-5a),1.78 (1H,dt,J = 12.5,7.0 Hz,Hα-7),1.70 (1H,dt,J = 12.5,6.0 Hz,Hβ-8),1.05 (3H,s,H-9a),0.87 (6H,d,J = 6.5 Hz,H-13a,17a),0.86 (3H,d,J = 6.0 Hz,H-21a),0.84 (3H,d,J = 6.0 Hz,H-21b)；13C-NMR (125 MHz,CDCl3) δ: 205.1 (C-1),92.3 (C-2),207.3 (C-3),89.2 (C-4),163.2 (C-5),139.5 (C-6),32.9 (C-7),36.3 (C-8),87.2 (C-9),41.6 (C-10),22.6 (C-11),37.6 (C-12),33.0 (C-13),37.7 (C-14),25.0 (C-15),37.7 (C-16),33.0 (C-17),37.4 (C-18),24.6 (C-19),39.5 (C-20),28.1 (C-21),22.9 (C-22),25.0 (C-3a),11.9 (C-5a),8.8 (C-6a),25.6 (C-9a),19.8 (C-13a),19.9 (C-17a),22.8 (C-21a)。以上数据与文献报道一致[16]，故鉴定化合物4为生育酚A。

化合物5：无色油状物，EI-MS m/z: 485.4 [M＋Na]+。1H-NMR (500 MHz,CDCl3) δ: 3.82 (1H,s,OH),2.06 (3H,s,H-6a),2.05 (3H,s,H-5a),2.03 (1H,m,H-7b),1.94 (1H,m,H-8b),1.69 (1H,m,H-7a),1.66 (1H,m,H-10b),1.60 (1H,m,H-8a),1.58 (1H,m,H-10a),1.36 (3H,s,H-3a),1.33 (3H,s,H-9a),0.87 (6H,d,J = 7.0 Hz,H-13a,17a),0.85 (3H,d,J = 5.5 Hz,H-21a),0.84 (3H,d,J = 5.5 Hz,21b)；13C-NMR (125 MHz,CDCl3) δ: 199.0 (C-1),93.5 (C-2),81.4 (C-3),201.8 (C-4),142.1 (C-5),147.1 (C-6),32.2 (C-7),36.6 (C-8),87.2 (C-9),41.5 (C-10),22.5 (C-11),37.6 (C-12),32.9 (C-13),37.6 (C-14),24.9 (C-15),37.4 (C-16),32.9 (C-17),37.4 (C-18),24.6 (C-19),39.5 (C-20),28.1 (C-21),22.8 (C-22),24.4 (C-3a),13.2 (C-5a),13.6 (C-6a),25.9 (C-9a),19.9 (C-13a),19.9 (C-17a),22.8 (C-21a)。以上数据与文献报道一致[17]，故鉴定化合物5为(−)-α-tocospirone。

化合物6：白色粉末状，EI-MS m/z: 305.1 [M＋Na]+，HR-ESI-MS显示m/z: 305.136 8 [M＋Na]+结合碳谱可以确定该化合物的分子式为C15H22O5（不饱和度为5）。1H-NMR (CDCl3,500 MHz) 谱中（表 1）显示存在1个烯氢信号δ: 7.29 (1H,d,J = 1.5 Hz,H-4)，1个连氧次甲基氢信号4.73 (1H,dd,J = 6.0,1.5 Hz,H-3) 以及1个次甲基氢信号2.01 (1H,m,H-9)，此外还有4个甲基的单峰氢信号分别为δ 1.39 (3H,s),1.37 (3H,s),1.31 (3H,s),1.02 (3H,s)，以及2个化学位移相同的甲基双峰氢信号1.05 (6H,d,J = 7.0 Hz)。13C-NMR (CDCl3,125 MHz) 结合DEPT谱可知该化合物中存在2个羰基碳信号δ 198.0 (C-6) 及210.7 (C-8)；1对双键碳信号δ 138.1 (C-4) 及134.5 (C-4a)；1个连二氧饱和碳信号δ 98.1 (C-8a)；1个连氧碳信号δ 83.7 (C-3)；2个饱和季碳信号δ 51.9 (C-5) 及55.1 (C-7)；1个饱和次甲基碳信号δ 30.7 (C-9) 以及余下6个甲基碳信号分别为δ 26.8,24.2,20.8,18.4,16.6以及15.3。以上数据说明该化合物为间苯三酚类衍生物。HMBC谱中显示H-5a,5b与C-4a,5,6相关；H-7a,7b与C-6,7,8位碳相关；H-4与C-4a,5,8a相关可以说明A环的连接方式（图 1）。1H-1H COSY谱中显示H-11,10与H-9,H-3,H-4有相关说明存在如图 1中加粗部分的片段，该片段连在C-4a位是通过HMBC相关进一步确定的。从3位和8位碳的化学位移和高分辨质谱给出的分子式可以推断出B环的连接方式。因此确定该化合物的结构如图 1所示，并将化合物6命名为rhodomyrtosone F。该化合物仅作为合成的中间产物被报道过[18]，而从未从植物中分离得到，因此化合物6为1个新的天然产物。

表 1 化合物6 1H-NMR和3C-NMR数据 Table 1 1H-NMR and 13C-NMR data for compound 6

图 1 化合物6的结构及重要的HMBC、1H-1H COSY相关 Fig.1 Structure and key correlations of HMBC and 1H-1H COSY for compound 6

化合物7：黄色粉末，EI-MS m/z: 697.4 [M＋Na]+。1H-NMR (500 MHz,CDCl3) δ: 13.5 (1H,s,8-OH),4.39 (1H,t,J = 3.5 Hz,H-7″),4.35 (1H,t,J = 5.5,H-9),3.21 (1H,dd,J = 17.5,7.0 Hz,H-2′a),3.00 (1H,dd,J = 17.5,6.5 Hz,H-2′b),1.65 (3H,s,H-14′′′),1.62 (3H,s,H-12),1.51 (3H,s,H-15′′′),1.47 (3H,s,H-13),1.43 (3H,s,H-12′′′),1.41 (3H,s,H-13′′′),1.36 (3H,s,H-3a),1.39 (3H,s,H-10),1.36 (3H,s,H-11),1.03 (3H,d,J = 6.0 Hz,H-4′),1.02 (3H,d,J = 6.5 Hz,H-5′),0.96 (3H,d,J = 6.0 Hz,H-11′′′),0.89 (3H,d,J = 6.0 Hz,H-4″),0.82 (3H,d,J = 6.5 Hz,H-10′′′)；13C-NMR (125 MHz,CDCl3) δ: 197.6 (C-1),56.2 (C-2),211.8 (C-3),47.4 (C-4),166.8 (C-4a),152.5 (C-4b),105.8 (C-5),150.6 (C-6),107.7 (C-7),160.8 (C-8),107.7 (C-8a),25.7 (C-9),114.4 (C-9a),25.0 (C-10),24.5 (C-11),24.8 (C-12),25.1 (C-13),204.7 (C-1′),54.1 (C-2′),24.7 (C-3′),25.2 (C-4′),22.8 (C-5′),45.6 (C-1″),25.4 (C-2″),23.4 (C-3″),23.5 (C-4″),197.6 (C-1′′′),56.4 (C-2′′′),211.6 (C-3′′′),47.4 (C-4′′′),166.9 (C-5′′′),113.8 (C-6′′′),25.4 (C-7′′′),47.0 (C-8′′′),25.1 (C-9′′′),23.5 (C-10′′′),23.9 (C-11′′′),24.3 (C-12′′′),24.0 (C-13′′′),25.1 (C-14′′′)。以上数据与文献报道一致[19]，故鉴定化合物7为rhodomyrtosone C。

化合物8：黄色粉末，EI-MS m/z: 455.2 [M＋Na]+。1H-NMR (500 MHz,CDCl3) δ: 13.3 (2H,s,5,5″-OH),4.09 (1H,t,J = 7.5,H-1′),1.82 (2H,t,J = 7.5,H-2′),1.43 (6H,s,H-9,9″),1.43 (6H,s,H-8,8″),1.39 (1H,m,H-3′) 1.37 (6H,s,H-7,7″),1.36 (6H,s,H-10,10″),0.84 (6H,d,J = 6.5 Hz,H-4′,5′)；13C-NMR (125 MHz,CDCl3) δ: 191.8 (C-1,1″),52.3 (C-2,2″),212.5 (C-3,3″),51.6 (C-4,4″),191.5 (C-5,5″),114.2 (C-6,6″),24.2 (C-7,7″),26.1 (C-8,8″),25.1 (C-9,9″),25.4 (C-10,10″),29.7 (C-1′),38.0 (C-2′),27.0 (C-3′),22.5 (C-4′,5′)。以上数据与文献报道一致[20]，故鉴定化合物8为watsonianone A。

化合物9：黄色粉末，EI-MS m/z: 465.2 [M＋Na]+。1H-NMR (500 MHz,CD3OD) δ: 6.13 (1H,s,H-5),4.20 (1H,t,J = 6.5,H-9),3.03 (1H,dd,J = 15.5,6.5 Hz,H-2′a),2.97 (1H,dd,J = 15.5,7.0 Hz,H-2′b),2.25 (1H,m,H-3′),1.56 (3H,s,H-12),1.44 (3H,s,H-13),1.42 (3H,s,H-10),1.38 (3H,s,H-11),0.98 (3H,d,J = 6.5 Hz,H-4′),0.98 (3H,d,J = 7.0 Hz,H-5′),0.87 (3H,d,J = 6.0 Hz,H-4″),0.84 (3H,d,J = 5.5 Hz,H-5″)；13C-NMR (125 MHz,CD3OD) δ: 199.5 (C-1),57.1 (C-2),213.5 (C-3),48.5 (C-4),168.9 (C-4a),157.4 (C-4b),95.2 (C-5),164.2 (C-6),108.9 (C-7),161.8 (C-8),106.1 (C-8a),26.5 (C-9),115.3 (C-9a),26.2 (C-10),24.1 (C-11),24.9 (C-12),24.3 (C-13),208.6 (C-1′),57.1 (C-2′),26.4 (C-3′),25.4 (C-4′),23.7 (C-5′),46.5 (C-1″),26.4 (C-2″),23.1 (C-3″),24.3 (C-4″)。以上数据与文献报道一致[3]，故鉴定化合物9为rhodomyrtosone。

化合物10：无色油状物，EI-MS m/z: 267.1 [M＋Na]+。1H-NMR (500 MHz,CDCl3) δ: 9.70 (2H,brs,1′,3′-OH),7.43 (5H,m,H-3～7),7.31 (1H,t,J = 8.0 Hz,H-5′),6.47 (2H,d,J = 8.0 Hz,H-4′,6′),2.25 (1H,m,H-3′),5.50 (2H,s,H-1)；13C-NMR (125 MHz,CDCl3) δ: 68.4 (C-1),134.0 (C-2),128.9 (C-3,7),129.2 (C-4,6),129.5 (C-5),161.1 (C-1′,3′),100.2 (C-2′),108.4 (C-4′,6′),136.9 (C-5′),169.6 (C-7′)。以上数据与文献报道一致[21]，故鉴定化合物10为2,6-二羟基-苯甲酸苯甲酯。

化合物11：无色针状结晶（甲醇），EI-MS m/z: 163.1 [M＋H]+。1H-NMR (500 MHz,CDCl3) δ: 7.69 (H,d,J = 16.0 Hz,H-2),7.52 (2H,m,H-5,9),7.38 (3H,m,H-6～8),6.44 (H,d,J = 16.0 Hz,H-3),3.81 (3H,s,OMe)；13C-NMR (125 MHz,CDCl3) δ: 167.5 (C-1),117.9 (C-2),144.9 (C-3),134.5 (C-4),128.2 (C-5,9),128.9 (C-6,8),130.4 (C-7),51.8 (OMe)。以上数据与文献报道一致[22]，故鉴定化合物11为肉桂酸甲酯。

化合物12：白色针晶（甲醇），mp 260～262 ℃，EI-MS m/z: 295.1 [M＋Na]+。1H-NMR (400 MHz,CD3OD-d4) δ: 2.68 (1H,dd,J = 13.6,2.4 Hz,H-3a),3.10 (1H,dd,J = 13.6,10.4 Hz,H-3b),5.32 (1H,dd,J = 10.4,2.4 Hz,H-2),5.88 (1H,d,J = 2.0 Hz,H-6),5.89 (1H,d,J = 2.0 Hz,H-8),6.81 (2H,d,J = 8.4 Hz,H-3′,5′),7.30 (2H,d,J = 8.4 Hz,H-2′,6′)；13C-NMR (100 MHz,CD3OD-d4) δ: 44.0 (C-3),80.5 (C-2),96.2 (C-8),97.0 (C-6),103.3 (C-10),116.3 (C-3′,5′),129.0 (C-2′,6′),131.1 (C-1′),159.0 (C-4′),164.9 (C-9),165.5 (C-5),168.3 (C-7),197.8 (C-4)。以上数据与文献报道一致[23]，故鉴定化合物12为柚皮素。

化合物13：黄色针晶（甲醇），mp 308～309 ℃，EI-MS m/z: 325.0 [M＋Na]+。1H-NMR (400 MHz,CD3COCD3) δ: 6.27 (1H,d,J = 1.6 Hz,H-6),6.54 (1H,d,J = 1.6 Hz,H-8),7.00 (1H,d,J = 8.4 Hz,H-5′),7.70 (1H,dd,J = 8.4,1.6 Hz,H-6′),7.83 (1H,d,J = 1.6 Hz,H-2′)；13C-NMR (100 MHz,CD3COCD3) δ: 94.4 (C-8),99.0 (C-6),104.0 (C-10),115.7 (C-5′),116.2 (C-2′),121.4 (C-6′),123.7 (C-1′),136.7 (C-3),145.7 (C-3′),146.9 (C-2),148.2 (C-4′),157.8 (C-9),162.0 (C-5),164.9 (C-7),176.5 (C-4)。以上数据与文献报道一致[24]，故鉴定化合物13为槲皮素。

化合物14：黄色针晶（甲醇），mp 323～324 ℃，EI-MS m/z: 341.0 [M＋Na]+。1H-NMR (400 MHz,CD3OD-d4) δ: 6.18 (1H,d,J = 1.6 Hz,H-6),6.38 (1H,d,J = 1.6 Hz,H-8),7.35 (2H,s,H-2′,6′)；13C-NMR (100 MHz,CD3OD-d4) δ: 94.4 (C-8),99.2 (C-6),104.5 (C-10),108.5 (C-2′,6′),123.1 (C-1′),137.0 (C-3),137.4 (C-4′),146.7 (C-3′,5′),148.0 (C-2),158.2 (C-9),162.5 (C-5),165.6 (C-7),177.3 (C-4)。以上数据与文献报道一致[25]，故鉴定化合物14为杨梅素。

化合物15：黄色针晶（甲醇），mp 198～199 ℃，EI-MS m/z: 383.1 [M＋Na]+。1H-NMR (400 MHz,CD3OD-d4) δ: 3.80 (3H,s,3-OMe),3.87 (3H,s,7-OMe),3.91 (3H,s,3′-OMe),6.29 (1H,d,J = 1.6 Hz,H-6),6.55 (1H,d,J = 1.6 Hz,H-8),7.31 (1H,d,J = 1.6 Hz,H-6′),7.34 (1H,d,J = 1.6 Hz,H-3′)；13C-NMR (100 MHz,CD3OD-d4) δ: 93.1 (C-8),98.9 (C-6),105.3 (C-10),106.7 (C-2′),110.9 (C-6′),121.7 (C-1′),139.1 (C-4′),139.9 (C-3),146.6 (C-5′),149.5 (C-3′),158.1 (C-2),158.2 (C-9),162.8 (C-5),167.3 (C-7),180.0 (C-4)。以上数据与文献报道一致[26]，故鉴定化合物15为3,7,3′-三甲氧基-5,4′,5′-三羟基黄酮。

化合物16：白色粉末（甲醇），mp 265～266 ℃，EI-MS m/z: 311.1 [M＋Na]+。1H-NMR (400 MHz,DMSO-d6) δ: 2.66 (1H,dd,J = 14.4,2.4 Hz,H-3a),3.17 (1H,dd,J = 14.4,12.0 Hz,H-3b),5.35 (1H,dd,J = 12.0,2.4 Hz,H-2),5.88 (2H,s,H-6,8),6.75 (2H,s,H-2′,6′),6.88 (1H,s,H-4′)；13C-NMR (100 MHz,DMSO-d6) δ: 42.0 (C-3),78.6 (C-2),95.1 (C-8),95.8 (C-6),101.9 (C-10),114.5 (C-2′),115.2 (C-6′),118.1 (C-4′),129.6 (C-1′),145.2 (C-3′),145.9 (C-5′),163.1 (C-5),163.8 (C-9),166.7 (C-7),196.4 (C-4)。以上数据与文献报道一致[27]，故鉴定化合物16为5,7,3′,5′-四羟基黄酮。

化合物17：白色粉末（甲醇），mp 217～218 ℃，EI-MS m/z: 325.1 [M＋Na]+。1H-NMR (400 MHz,DMSO-d6) δ: 2.71 (1H,dd,J = 14.0,2.4 Hz,H-3a),3.23 (1H,dd,J = 14.0,11.2 Hz,H-3b),3.79 (3H,s,7-OMe),5.44 (1H,dd,J = 11.2,2.4 Hz,H-2),6.08 (1H,d,J = 2.4 Hz,H-6),6.11 (1H,d,J = 2.4 Hz,H-8),6.75 (2H,s,H-2′,6′),6.89 (1H,s,H-4′)；13C-NMR (100 MHz,DMSO-d6) δ: 42.1 (C-3),78.9 (C-2),93.5 (C-8),94.4 (C-6),102.6 (C-10),114.2 (C-2′),115.5 (C-6′),118.3 (C-4′),129.5 (C-1′),145.3 (C-3′),145.9 (C-5′),162.8 (C-5),163.4 (C-9),167.8 (C-7),192.8 (C-4),56.1 (7-OMe)。以上数据与文献报道一致[27]，故鉴定化合物17为艾纳香素。

化合物18：白色粉末（甲醇），mp 165～167 ℃，EI-MS m/z: 355.2 [M＋Na]+。1H-NMR (400 MHz,DMSO-d6) δ: 3.78 (3H,s,4′-OMe),3.81 (3H,s,7-OMe),4.58 (1H,d,J = 11.2 Hz,H-3),5.18 (1H,d,J = 11.2 Hz,H-2),6.08 (1H,d,J = 2.4 Hz,H-6),6.10 (1H,d,J = 2.4 Hz,H-8),6.91 (1H,dd,J = 8.0,2.4 Hz,H-6′),6.93 (1H,d,J = 2.4 Hz,H-2′),7.06 (1H,d,J = 8.0 Hz,H-5′)；13C-NMR (100 MHz,DMSO-d6) δ: 71.6 (C-3),83.1 (C-2),93.7 (C-8),94.9 (C-6),101.8 (C-10),111.8 (C-5′),115.3 (C-2′),119.3 (C-6′),129.5 (C-1′),145.9 (C-3′),148.2 (C-4′),162.6 (C-9),163.2 (C-5),167.8 (C-7),198.2 (C-4),56.1 (7-OMe),55.9 (4′-OMe)。以上数据与文献报道一致[27]，故鉴定化合物18为7,4′-二甲氧基二氢槲皮素。

化合物19：白色粉末（甲醇），mp 175～176 ℃，EI-MS m/z: 341.2 [M＋Na]+。1H-NMR (400 MHz,CD3OD-d4) δ: 3.89 (3H,s,4′-OMe),4.58 (1H,d,J = 9.2 Hz,H-3),4.98 (1H,d,J = 9.2 Hz,H-2),5.90 (1H,d,J = 1.6 Hz,H-6),5.93 (1H,d,J = 1.6 Hz,H-8),6.83 (1H,d,J = 6.4 Hz,H-5′),6.97 (1H,dd,J = 6.4,1.6 Hz,H-6′),7.11 (1H,d,J = 1.6 Hz,H-2′)；13C-NMR (100 MHz,CD3OD-d4) δ: 74.0 (C-3),85.3 (C-2),97.2 (C-8),98.5 (C-6),102.8 (C-10),114.8 (C-5′),117.3 (C-2′),121.3 (C-6′),132.1 (C-1′),148.9 (C-3′),150.0 (C-4′),164.6 (C-9),165.3 (C-5),169.8 (C-7),199.2 (C-4),58.2 (4′-OMe)。以上数据与文献报道一致[27]，故鉴定化合物19为4′-二甲氧基二氢槲皮素。

化合物20：黄色粉末（甲醇），EI-MS m/z: 489.4 [M＋Na]+。1H-NMR (400 MHz,Pyridine-d5) δ: 1.68 (3H,d,J = 5.2 Hz,H-6′),4.44 (1H,m,H-4′),4.62 (1H,m,H-3′),4.79 (1H,m,H-5′),4.94 (1H,m,H-2′),4.21 (3H,s,3-OMe),6.45 (1H,d,J = 1.2 Hz,H-1′),8.06 (1H,s,H-1),8.50 (1H,s,H-5)；13C-NMR (100 MHz,Pyridine-d5) δ: 18.9 (C-6′),71.8 (C-5′),72.2 (C-3′),72.9 (C-2′),74.1 (C-4′),102.5 (C-1′),108.1 (C-8a),112.5 (C-9a),113.1 (C-1),114.6 (C-5),115.2 (C-4a),115.8 (C-10a),137.9 (C-7),141.6 (C-3),143.1 (C-4,8),148.3 (C-6),154.6 (C-2),159.8 (C-10),160.1 (C-9),61.6 (3-OMe)。以上数据与文献报道一致[8]，故鉴定化合物20为2,4,7,8,9,10-六羟基-3-甲氧基蒽-6-O-β-L-吡喃鼠李糖苷。

化合物21：黄色粉末（甲醇），EI-MS m/z: 533.3 [M＋Na]+。1H-NMR (400 MHz,DMSO-d6) δ: 3.23 (1H,m,H-4′),3.34 (2H,m,H-2′,3′),3.42 (1H,m,H-5′),3.51 (1H,d,J = 11.2 Hz,H-6′a),3.70 (1H,d,J = 11.2 Hz,H-6′b),4.00 (3H,s,2-OMe),4.04 (3H,s,3-OMe),4.10 (3H,s,7-OMe),5.18 (1H,d,J = 7.6 Hz,H-1′),7.63 (1H,s,H-1),7.83 (1H,s,H-5)；13C-NMR (100 MHz,DMSO-d6) δ: 60.6 (C-6′),69.5 (C-4′),73.4 (C-2′),76.5 (C-3′),77.3 (C-5′),101.3 (C-1′),107.6 (C-1),112.1 (C-5),112.4 (C-8a),112.7 (C-4a),112.9 (C-9a),113.7 (C-10a),141.0 (C-3),141.2 (C-4,8),141.8 (C-7),151.9 (C-6),154.4 (C-2),158.2 (C-10),158.4 (C-9),56.8 (2-OMe),61.4 (3-OMe),61.7 (7-OMe)。以上数据与文献报道一致[8]，故鉴定化合物21为4,8,9,10-四羟基-2,3,7-三甲氧基蒽-6-O-β-D-吡喃葡萄糖苷。

4 抗菌活性

采用微量稀释法[28]对分离得到的化合物1～21进行抗菌活性测试。供试菌株为大肠杆菌Escherichia coli ATCC 25922和金黄色葡萄球菌Staphyloccocus aureus ATCC 8799，阳性对照为红霉素，其对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的MIC值分别为125 μg/mL和0.63 μg/mL。结果表明化合物9对金黄色葡萄球菌有较强的抑制活性，其MIC为1.25 μg/mL，接近阳性对照组，化合物3以及6～8则对金黄色葡萄球菌具有一定的抑制活性，其MIC值分别为10、10、2.5和5 μg/mL ；其他化合物在20 μg/mL时对2种致病菌都未见有明显抑制活性。

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