狗脊来源于蚌壳蕨科Dicksoniaceae金毛狗属Ciborium L.植物金毛狗脊Ciborium barometz (L.) J. Sm. 的干燥根茎。秋冬二季采挖,除去泥沙,干燥;或去硬根、叶柄及金黄色绒毛,切厚片,干燥,为“生狗脊片”;蒸后晒至六、七成干,切厚片,干燥,为“熟狗脊片”。历年《中国药典》均收载其为常用中药,其味苦、甘,性温,具有祛风湿、补肝肾、强腰膝等功效,常与其他药材组方,用于治疗腰背酸痛、风寒湿痹、手足麻木、半身不遂等症。狗脊主要分布于浙江、江西、福建、台湾、湖南、广西、四川、重庆、贵州、云南等地,云南为主要产区。另外,顶芽狗脊Woodwaria unigemmata在湖南地区有时也被当作狗脊使用。狗脊中主要含有挥发油类、蕨素类、芳香族类、酚酸类、黄酮类、皂苷类、糖及糖苷类、氨基酸类化合物以及一些无机元素[1]。本文对狗脊中的化学成分及药理作用进行综述和总结,为深入研究提供参考。
1 化学成分 1.1 芳香族化合物早在1980年,Murakami等[2]从狗脊中分离得到绵马酚(aspidinol)和香草醛(vanillin),随后Saito等[3]和Logan等[4]从狗脊的地上部分分离得到丁香醛(syringetin)、对羟基苯甲酸和香荚兰乙酮(apocynin)。程启厚等[5]从金毛狗脊的根茎中分离得到了原儿茶酸、原儿茶醛;许枬等[6]从炮制品烫狗脊中分离得到金粉蕨亭、去甲基麦芽酚、麦芽酚、kojic acid、5-羟基麦芽酚;吴琦等[7]对金毛狗脊根茎乙醇提取物的醋酸乙酯部分进行分离纯化,得到(3R)-去-O-甲基毛狄泼老素。
谢美萍等[8]研究了狗脊茎的化学成分,从50%乙醇提取物中分离得到了9个酚酸及其苷类化合物,分别鉴定为原儿茶酸-4-O-(6′-O-原儿茶酰基)-β-D-吡喃葡萄糖苷、白藜芦醇、对羟基肉桂酸、对羟基肉桂醛、C-藜芦酰乙二醇、4-甲基邻苯二酚、原儿茶醛、对羟基苯甲酸、咖啡酸,其中原儿茶酸-4-O-(6′-O-原儿茶酰基)-β-D-吡喃葡萄糖苷为新化合物。
1.2 酚酸类化合物程启厚等[5]从金毛狗脊的根茎中分离得到原儿茶酸和咖啡酸;步显坤等[9]采用薄层色谱(TLC)和高效液相色谱(HPLC)法分别定性定量研究了烫狗脊中的原儿茶酸成分,证明不同产地药材中原儿茶酸的平均值为0.37 mg/g。原忠等[1]采用双波长薄层扫描法,测定了狗脊中的原儿茶酸和咖啡酸的量,结果表明狗脊中原儿茶酸的量高于0.02%。徐钢等[10]采用UPLC/Q-TOF-MS法分析狗脊毛甲醇提取物,结果表明其中含有抗氧化成分白藜芦醇。
1.3 黄酮类化合物许重远等[11]首次从金毛狗脊的根茎中分离得到了黄酮类成分山柰酚。徐钢等[10]采用UPLC/Q-TOF-MS法分析狗脊毛甲醇提取物,证明其中含有总黄酮类成分,还包括芒柄花黄素等单体。
1.4 皂苷类化合物徐钢等[10]采用超声、索氏提取、回流3种方法用甲醇提取狗脊毛,通过UPLC/Q-TOF-MS法对各提取物进行定性分析,证明狗脊中含有黄芪苷IV、异羟基洋地黄毒苷元、樱草甘等。吴琦等[7]从狗脊根茎乙醇提取物中分离得到金毛狗脊皂苷。
1.5 糖及糖苷类化合物杨明惠等[12]从狗脊甲醇提取物中分离得到6-苯乙烯基-2-吡喃酮-4′-O-β-D-葡萄糖苷、坡那甾酮A、山柰酚-3-O-α-L-鼠李糖基-7-O-α-L-鼠李糖苷、芹菜素-7-O-α-L-鼠李糖基-(1→3)-O-α-L-鼠李糖苷、对苯甲酸鼠李糖醇苷、1-O-β-D-半乳糖基-(6→1)-α-D-半乳糖-2,3-O-月桂酸甘油二酯、正丁基-O-α-D-呋喃果糖苷、正丁基-O-β-D-呋喃果糖苷和正丁基-O-β-D-吡喃果糖苷等糖苷类化合物。贾天柱等[13]采用硫酸苯酚法比较了狗脊炮制前后总糖量的变化,总结出狗脊中总糖量由高到低的规律是生品>单蒸>酒蒸>砂烫>盐制。吴琦等利用多种分离技术从金毛狗脊中分离得到葡萄糖、蔗糖和麦芽糖。
1.6 氨基酸类化合物许重远等[14]采用氨基酸自动分析仪测定云南、广西、福建产的金毛狗脊中氨基酸的含量及其组成,共有16种氨基酸,3个产地氨基酸总量分别为2.58%、2.08%、2.66%;其中天冬氨酸、谷氨酸和脯氨酸的含量较高(大于0.24%),组氨酸、赖氨酸和甲硫氨酸的量较低(小于0.1%)。徐钢等[10]采用UPLC/Q-TOF-MS法分析狗脊毛甲醇提取物,发现其中含有丝氨酸等氨基酸类成分。
1.7 挥发油类化合物许重远等[15]采用GC-MS法分析了狗脊中含有油酸、亚油酸、棕榈酸、十五碳酸、十六碳三烯酸甲酯、亚油酸甲酯等挥发油类成分。
1.8 蕨素类化合物吴琦等[7]对金毛狗脊的干燥根茎进行分离提取,得到了2个蕨素类成分,分别是(3R)-去-O-甲基毛狄泼老素和金粉蕨素。国外的一些学者从狗脊的地上部分分离得到了金粉蕨素(onitin)、金粉蕨素-2′-O-β-D-葡萄糖苷、金粉蕨素-2′-O-β-D-阿罗糖苷、蕨素R(pterosin R)、蕨素Y、异组织蕨素A (isohistopterosin A)。张春玲等[16]从狗脊的乙醇提取物中分离得到金粉蕨素。
1.9 无机元素许重远等[17]采用原子吸收分光光度法测定了金毛狗脊中的K、Na、Ca、Mg、Fe、Mn等无机元素的量,其中K的量最高,其次为Ca。
1.10 其他化合物另外,还从金毛狗脊中还分离得到β-谷甾醇、β-谷甾醇-3-O-(6′-正十六酰氧基)-3-β-D-葡萄糖苷、β-谷甾醇-3-O-(6′-正酰氧基)-β-D-葡萄糖苷、β-谷甾醇-β-D-葡萄糖苷即胡萝卜苷、硬脂酸,鞣质、对羟基乙酰苯胺、磷脂酰胆碱等化合物。
2 药理作用 2.1 防治骨质疏松李天清等[18]研究狗脊提取物对去势大鼠的抗骨质疏松作用,发现该提取物可以降低大鼠去势引起的股骨骨量丢失,在骨重建过程中骨转换指标骨钙素(OC)、碱性磷酸酶(ALP)、脱氧吡啶啉(DPD)降低,尿钙、磷排泄减少。狗脊提取物也可以提高骨强度,防止骨小梁微结构恶化。该研究表明狗脊提取物可能是绝经后骨质疏松症预防和治疗的一个潜在替代药。于海涛等[19]通过筛选狗脊炮制品正丁醇萃取物中促进成骨细胞增殖及ALP活性的组分,认为狗脊能够显著促进成骨细胞增殖及ALP活性的有效成分可能存在于极性较大的组分里,并且推测可能通过促进成骨细胞增殖及分化的机制来发挥抗骨质疏松作用。
2.2 抑制血小板聚集Li等[20]研究了狗脊及其不同炮制品对凝血酶诱导的兔血小板聚集作用的影响,结果表明各炮制品均有抑制血小板聚集作用,抗血小板聚集作用从高到低依次为砂烫品>盐制品>酒蒸品>单蒸品>生品。
2.3 止血与镇痛鞠成国等[21]采用热板法、扭体法、毛细玻管法、断尾法研究狗脊及其炮制品和狗脊毛(根茎上的细柔毛,有收敛止血的作用)的镇痛、止血作用,结果表明狗脊毛镇痛作用不明显,低剂量生狗脊、砂烫狗脊未表现显著镇痛作用,高剂量生狗脊、砂烫狗脊具有显著镇痛作用;狗脊、砂烫狗脊和狗脊毛未见有止血作用,说明狗脊及其炮制品和狗脊毛具有镇痛作用和不同程度的止血作用。
2.4 抑菌欧阳蒲月等[22]对湘西民间药用植物顶芽狗脊提取物的抑菌活性物质进行研究,通过不同部位提取物的抑菌试验,发现只有叶柄和根茎含有抑菌活性物质。顶芽狗脊提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、痢疾杆菌的最低抑菌浓度分别为0.8、0.6、1.0 g/mL,最小杀菌浓度均为2 g/mL,但对酵母菌无效。具有最佳抑菌效果的提取溶剂为偏碱性的60%乙醇溶液。通过不同极性溶剂的抑菌试验表明,抑菌活性物质易溶于石油醚、乙醚等非极性溶剂。顶芽狗脊的抑菌活性物质可能为黄酮类物质,且呈酸性、有表面活性,不含生物碱。该活性物质对酸、高温、紫外线稳定性良好,但在强碱条件下失活。对几种菌的敏感性由强到弱依次为金葡菌>大肠杆菌>痢疾杆菌,对酵母菌无效;顶芽狗脊的抑菌活性物质可能为黄酮类物质,且呈酸性、有表面活性,不含生物碱且稳定性良好。
王晶等[23]对单芽狗脊进行抑菌实验研究,实验结果表明,单芽狗脊提取物对革兰氏阴性菌和革兰式阳性菌均有一定的抑制效果,但是对酵母菌则没有明显的抑制效果。
2.5 抗炎、抗风湿赵敏杰等[24]以脂多糖(LPS)刺激单核巨噬细胞RAW264.7为体外模型,通过比较细胞上清液中炎性细胞因子白介素-1(IL-1β)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)以及炎性介质一氧化氮(NO)和前列腺素(PGE2)的水平和总评分,评价狗脊不同炮制品的抗炎作用,结果与空白组比较,生狗脊、烫狗脊、酒狗脊、盐狗脊、蒸狗脊对各细胞因子和炎性介质均有一定影响,综合评分由高到低依次为生狗脊>烫狗脊>酒狗脊>盐狗脊>蒸狗脊。索天娇等[25]研究狗脊生品、炮制品不同提取部位的抗炎作用。结果表明,狗脊生品的正丁醇提取物组和醋酸乙酯提取物组明显抑制二甲苯所致的小鼠耳肿胀,炮制品正丁醇组和醋酸乙酯组的作用不明显。狗脊生品的醋酸乙酯提取物组明显抑制大鼠的肉芽组织增生,生品正丁醇提取物组、炮制品正丁醇组和醋酸乙酯组的作用不明显。
2.6 保肝Oh等[26]研究还发现,狗脊中的金粉蕨素具有一定的保肝作用,可以治疗由他克林所致人肝细胞G2期的毒性。
2.7 抗氧化许枬等[27]采用氧自由基、H2O2、羟自由基等3种自由基反应体系,平行考察狗脊炮制前后清除自由基能力变化,对比研究狗脊炮制前后,化学成分变化较大的正丁醇提取物的抗氧化作用差异。结果表明生狗脊和烫狗脊均具有清除自由基的作用,但烫狗脊的作用强于生狗脊。
林燕如等[28]通过大孔吸附树脂对狗脊叶中的黄酮类成分进行提取纯化,并进行抗氧化实验研究,证明金毛狗脊具有一定的抗氧化作用。
2.8 抗癌Wu等[29]研究席氏狗脊叶的70%提取物可显著地抑制小鼠体内肉瘤S180细胞;在体外,可以抑制去氧胞核嘧啶进入癌细胞,抑制率达到98%。
3 结语狗脊中主要含有挥发油类、蕨素类、芳香族类、酚酸类、黄酮类、皂苷类、糖及糖苷类、氨基酸类化合物以及一些无机元素,但是对其药效物质基础的研究还不够深入,各类成分的含量也不甚明了。药理作用研究显示狗脊及其提取部位具有多种生物活性,主要包括防治骨质疏松、抑制血小板聚集、止血与镇痛、抑菌、抗炎、抗风湿、保肝、抗氧化及抗癌作用,但是还缺少有关作用机制的研究,更缺少随机对照的大样本临床研究。鉴于狗脊的多种药理活性,表明其是一味极具开发价值和应用前景的中药,有待于多学科联合搞深度研发。
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