西洋参为五加科人参属植物西洋参Panax quinquefolium L.的干燥根^[1]。性寒、味甘、微苦^[2]，以补益为主，具有滋阴降火的功效^[3]，现代药理学研究表明西洋参主要具有增强免疫力^[4]、提高记忆力^[5]、抗肿瘤^[6]等作用。西洋参原产于加拿大北部和美国南部^[7]，其主要有效成分为人参皂苷^[8]。随着对西洋参化学成分及药理作用研究的不断深入，西洋参的质量问题越来越受到关注，其质量的优劣主要体现在皂苷单体的种类及含量上，而不同的单体药理作用不同^{[5, 9]}，单体皂苷及稀有皂苷的研究对于新药研发及西洋参药理作用的探究具有重要意义。目前分离分析西洋参皂苷的方法主要是紫外分光光度法^{[10, 11, 12]}和高效液相色谱法^{[13, 14, 15, 16, 17]}。本实验应用高效液相色谱法，对不同来源西洋参药材及市售西洋参产品中10种皂苷单体的含量进行测定，并将其中稀有皂苷进行了对比，为西洋参人参皂苷单体的研究和开发提供依据，同时也为西洋参药材的品质评价、临床应用及质量控制提供一定的参考。

Agilent Technologies 1200 series高效液相色谱仪；Thermo Scientific Syncronis C₁₈色谱柱（100 mm×2.1 mm，1.7 μm）；电子分析天平（赛多利斯科学仪器有限公司）；人参皂苷Rg₁、人参皂苷Re、人参皂苷Rb₂、人参皂苷Rb₁、人参皂苷Rc、人参皂苷Rd、人参皂苷R₀、人参皂苷F₁、人参皂苷F₂、人参皂苷Rk₁、人参皂苷Rf对照品均购于南京泽朗医药科技有限公司；西洋参药材、饮片及产品为各产地市售，样品具体来源见表 1。乙腈为色谱纯试剂（默克），水为超纯水，其他试剂均为分析纯。

表 1(Table 1)

表 1 不同来源样品信息 Table 1 Information of samples from different origin No 名称 来源 S1 西洋参 吉林省靖宇镇 S2 西洋参 吉林省抚松县 S3 西洋参 美国威斯康星州 S4 西洋参 吉林大药房 S5 西洋参 长白山制药股份有限公司 S6 西洋参饮片 福百草大药房 S7 西洋参饮片 吉林亚泰明星制药有限公司 S8 西洋参饮片 中国吉林长白山人参基地 S9 西洋参须根 吉林省靖宇镇 S10 西洋参总皂苷 吉林省靖宇镇

表 1 不同来源样品信息 Table 1 Information of samples from different origin

Thermo Scientific Syncronis C₁₈色谱柱（100 mm×2.1 mm，1.7 μm），流动相为乙腈（A）-水（B），二元梯度洗脱（0～10 min，10%～20%B；10～20 min，20%～30% B；20～30 min，30%～38% B；30～40 min，38%～70% B；40～50 min，70%～94% B；50～60 min，94%～96% B；60～70 min，96%～100% B；体积流量为0.2 mL/min，检测波长为203 nm，柱温为35 ℃，进样量为5 μL。液相色谱图见图 1。

1～10分别为人参皂苷Re；Rg1；Rb1；Rc；Rb2；Rd；F1；R0；F2；Rk1 图 1 混合对照品A和西洋参B高效液相色谱图 Fig. 1 HPLCof reference solution (A) andP. quinquefolium extracts (B)

精密称取人参皂苷Rg₁、Rf、Rb₂、Rd、F₂、Rk₁、R₀、Rb₁、Rc、Re、F₁各1 mg分别定容至1 mL，制成质量浓度为1 mg/mL溶液备用。

取样品粉末（过三号筛）约1 g，精密称定，置索氏提取器中，加入石油醚2.5个虹吸量，脱脂2 h，甲醇浸泡过夜，连续回流提取3次，每次2 h，水饱和正丁醇萃取4次，合并正丁醇层，减压浓缩，蒸干，色谱甲醇定容至5 mL，过0.22 μm微孔滤膜，待测。

制备混合对照溶液含人参皂苷Rg₁、Rb₂、Rd、Rb₁、Rc、Re为0.1 mg/mL，人参皂苷Rf、F₁为0.5 mg/mL，人参皂苷F₂、Rk₁、R₀为1 mg/mL。分别精密吸取混合对照品溶液2、4、6、8、10、12 μL，稀释成不同浓度梯度，按“2.1”项色谱条件测定，以峰面积为纵坐标，对照品量为横坐标，进行线性回归，得回归方程及相关系数见表 2。

表 2(Table 2)

表 2 人参皂苷的线性回归方程及其相关系数 Table 2 Linear regression equations and correlation coefficients of ginsenosides 名称 线性方程 相关系数 线性范围/μg 人参皂苷Re Y＝12 911X＋309.59 r＝0.999 8 0.004 3～0.036 1 人参皂苷Rg1 Y＝2 178.6X＋184.21 r＝0.999 7 0.027 5～0.323 5 人参皂苷Rb1 Y＝6 235.7X－127.46 r＝0.999 8 0.095 3～0.181 4 人参皂苷Rc Y＝6 702.4X－64.218 r＝0.999 8 0.096 5～0.103 3 人参皂苷Rb2 Y＝3 189.6X＋323.52 r＝0.999 4 0.017 9～0.279 4 人参皂苷Rd Y＝2 614.6X－2.293 7 r＝0.999 9 0.087 0～0.468 3 人参皂苷F1 Y＝13 777X－11.466 r＝0.999 5 0.038 3～0.160 9 人参皂苷R0 Y＝9 845.7X－4 455.2 r＝0.999 7 0.002 8～0.064 6 人参皂苷F2 Y＝81.527X＋15.489 r＝0.999 0 1.623 4～2.312 7 人参皂苷Rk1 Y＝8 932.7X－232.61 r＝0.999 4 0.066 8～0.215 4

表 2 人参皂苷的线性回归方程及其相关系数 Table 2 Linear regression equations and correlation coefficients of ginsenosides

精密吸取同一混合对照品溶液5 μL，重复进样5次，重复进样5次，计算各色谱峰峰面积值的RSD，结果人参皂苷Re、Rg₁、Rb₁、Rc、Rb₂、Rd、F₁、R₀、F₂、Rk₁峰面积的RSD分别为0.61%、1.15%、0.32%、1.51%、1.17%、0.89%、0.66%、1.50%、1.07%、1.41%，表明仪器精密度良好。

分别精密吸取同一供试品溶液（吉林大药房）5 μL，分别于0、8、16、24、32、48 h进样，测定峰面积，结果人参皂苷Re、Rg₁、Rb₁、Rc、Rb₂、Rd、F₁、R₀、F₂、Rk₁峰面积的RSD分别为2.52%、2.23%、2.32%、4.25%、4.73%、0.50%、2.29%、3.06%、0.89%、0.66%，表明样品在48 h内稳定性良好。

取同一供试品（吉林大药房）5份，分别按照“2.3”项下方法制备供试品溶液，并按照上述色谱条件进行测定。结果样品中人参皂苷Re、Rg₁、Rb₁、Rc、Rb₂、Rd、F₁、R0、F₂、Rk₁，RSD分别为2.38%、2.40%、2.67%、3.09%、1.50%、2.98%、2.55%、2.87%、3.15%、1.07%，表明该方法重复性良好。

精密称取6份已知含量的同一西洋参样品（吉林大药房）1.0 g，分别精密加“2.2”项下混合对照溶液0.6、0.8、1.0 mL，加入甲醇定容。按照“2.3”项下色谱条件进样分析，结果人参皂苷Re、Rg₁、Rb₁、Rc、Rb₂、Rd、F₁、R₀、F₂、Rk₁的平均回收率分别为97.45%、98.21%、96.06%、97.63%、101.80%、96.45%、97.55%、98.07%、101.2%、99.03%，RSD分别为2.15%、2.18%、2.19%、2.15%、2.21%、2.10%、2.09%、2.17%、2.19%、2.56%。

取表 1中12个不同来源的样品，按“2.3”项下方法制备供试品溶液，按照“2.1”项下色谱条件，依法测定，结果见表 3。

表 3(Table 3)

表 3 不同来源西洋参样品中皂苷单体含量测定结果 Table 3 Contents of ginsenosides in P. quinquefoliumfromdifferent origins 样品 人参皂苷/(mg∙g−1) 10种皂苷单体 总量/(mg∙g−1) Rf Rg1 Re Rb1 Rc Rb2 Rd F1 R0 F2 Rk1 S1 － 1.18 8.58 1.05 0.18 0.36 1.29 0.10 0.32 2.21 1.00 16.27 S2 － 1.18 8.14 0.78 0.15 0.24 2.77 0.08 0.31 6.06 0.43 20.15 S3 － 1.69 5.50 0.81 0.14 0.15 2.10 0.04 0.24 0.39 0.32 11.37 S4 － 1.10 9.87 0.62 0.27 0.37 1.73 0.34 0.60 3.45 0.88 19.25 S5 － 0.87 3.95 0.44 0.09 0.11 0.78 0.13 0.26 0.62 0.34 7.60 S6 － 6.26 28.39 1.50 0.06 0.06 1.12 0.23 1.34 13.12 0.13 52.22 S7 － 1.69 9.11 0.81 0.17 0.31 2.00 0.10 0.34 2.41 0.15 17.09 S8 － 0.74 4.98 0.37 0.11 0.09 1.29 －－ 0.35 7.12 0.33 15.38 S9 － 0.35 12.98 2.57 0.40 2.60 9.63 0.29 0.55 13.28 0.04 42.69 S10 － 0.04 0.02 0.06 0.09 0.24 0.35 0.00 0.23 1.71 0.06 2.79 “－”代表未检测到；“－－”代表含量低于检出限 "—" means that did not detected; "－－" means the content is lower than the detection limit

表 3 不同来源西洋参样品中皂苷单体含量测定结果 Table 3 Contents of ginsenosides in P. quinquefoliumfromdifferent origins

西洋参的质量评价主要根据所含的皂苷种类及含量，利用含量较少但具有高效的生物活性^{[18, 19]}的稀有皂苷的种类，对西洋参进行鉴别及质量评价更具有应用价值，本实验测定了10批不同来源西洋参样品中皂苷单体的含量，实验表明仅西洋参饮片（中国吉林长白山人参基地）样品不含有人参皂苷F₁，说明样品所含皂苷的种类差异不大。据文献报道，西洋参中的伪人参皂苷F₁₁为其特有成分，可用于鉴别西洋参，由于伪人参皂苷F₁₁没有紫外吸收^{[20, 21]}，因此本方法不能对其进行含量测定，徐静等^[22]认为人参皂苷Rf可用于识别西洋参，并排除掺假，因此本实验通过人参皂苷Rf标准品与样品的HPLC谱图进行比较，确定了所测西洋参样品中均不含有人参皂苷Rf，对西洋参的真伪进行了鉴别。由于我国西洋参均为人工栽培，其质量受产地和生态环境影响较大^{[23, 24]}。因此不同产地样品含有的皂苷含量存在差异。美国药典西洋参和人参提取物的专论^[25]对使用高效液相色谱-紫外法测定样品中皂苷含量，规定西洋参根中人参皂苷的量不低于4%。通过HPLC实验结果比较，表明西洋参饮片（福百草大药房），西洋参须（吉林省靖宇县）中含有的皂苷成分含量大于4%，符合质量标准。对于单体皂苷含量，西洋参（吉林亚泰明星制药有限公司）中人参皂苷Re、Rg₁、Rb₁、R₀含量较高，西洋参（吉林大药房）含有人参皂苷Rc量较高，西洋参须根（吉林省靖宇镇）含有人参皂苷Rb₂、Rd、F₁、F₂含量高于其他样品，西洋参（吉林省抚松县）含有人参皂苷Rk₁成分较多，实验结果比较表明不同来源的西洋参中皂苷成分的含量差异较大。该方法用于测定西洋参中人参皂苷含量，准确性高、灵敏度高、重复性好，可用于评价不同来源的西洋参药材的品质。