2016年第39卷第3期文章目次

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  • 1  儿童疾病负担及药物研发需求浅析
    杨娜 胡思源
    2016, 39(3):329-334. DOI: 10.7501/j.issn.1674-6376.2016.03.001
    [摘要](617) [HTML](0) [PDF 976.92 K](1596)
    摘要:
    为改善儿童用药现状,提高儿童用药水平,保障儿童健康,国家陆续推出了一系列鼓励儿童药物研发的利好政策。随着政策的推行,儿科药物的临床研究势必会越来越多。从事药物研发相关人员应该根据患儿疾病谱、死亡率及死因顺位、疾病负担等临床需求的迫切程度以及儿童用新药的研发需求,选择优先关注的领域,开发以临床价值为导向、与临床实际需求严密结合的儿童用新药。着重介绍了近年来儿童疾病的相关情况以及儿童用药研发方向,旨在为儿童药物临床研发立项的前期评估提供一定参考。
    2  临床研究药物中心化管理现场评估标准
    李树婷 杨丽 张黎 房虹 程金莲 赵侠 阎昭 严海泓 陈勇川 韩志春 孙彬贤 王菁菁 赵丹 曹彩
    2016, 39(3):335-344. DOI: 10.7501/j.issn.1674-6376.2016.03.002
    [摘要](630) [HTML](0) [PDF 1.26 M](1707)
    摘要:
    从起草背景、制定依据、检查内容、评估标准、适用范围、评分等级、结果评定等方面阐述《临床研究药物中心化管理现场评估标准》,以期能够切实促进临床研究药物标准化管理,提高药物中心化管理水平。
    3  FDA直面消费者的处方药平面广告和推广说明书公开风险信息指南的介绍
    萧惠来
    2016, 39(3):345-348. DOI: 10.7501/j.issn.1674-6376.2016.03.003
    [摘要](641) [HTML](0) [PDF 946.88 K](1155)
    摘要:
    FDA于2015年8月公布了"简短摘要和充分的使用说明:在直面消费者的处方药平面广告和推广说明书中公开风险信息"指南草案,主要推荐公开风险信息的"消费者简短摘要"的替代方法,包括对其内容和格式的要求。主要介绍这种替代方法的内容与要求,希望对我国在美国面向消费者的处方药广告的研究方面有帮助并对我国面向医疗专业人员的处方药广告风险信息的规范化要求有所启发。
    4  对乙酰氨基酚对大鼠原代肝细胞及BRL-3A细胞的毒性作用比较
    李曼 吴纯启 许赫雷 谢丽华 韩刚 王全军 王茜莎
    2016, 39(3):349-356. DOI: 10.7501/j.issn.1674-6376.2016.03.004
    [摘要](855) [HTML](0) [PDF 2.32 M](1135)
    摘要:
    目的 建立大鼠原代肝细胞提取鉴定体系,比较对乙酰氨基酚(APAP)对大鼠原代肝细胞和永生化细胞BRL-3A的毒性作用。方法 采用胶原酶原位两步灌流法提取大鼠原代肝细胞,通过过碘酸雪夫染色(PAS)和肝细胞双核结构进行鉴定;CCK 8法测定APAP对大鼠原代肝细胞及BRL-3A细胞毒性作用的IC50;光学显微镜透射电镜观察APAP对2种细胞的损伤情况;全自动生化分析仪测定细胞上清AST、ALT、LDH、ALP、ALB、BUN、TP、GLU 8项生化指标的变化。结果 PAS糖原染色鉴定获取的大鼠原代肝细胞,双核结构,细胞存活率浮动在80%~95%;最佳接种密度为60000/cm2,在第3~5天为对数生长期;APAP作用于大鼠原代肝细胞24 h的IC50为18.03 mmol/L,95%置信区间为(17.28~18.81)mmol/L,作用于BRL-3A的IC50为20.05 mmol/L,95%置信区间为(18.99~21.17)mmol/L;透射电镜结果显示,在30 mmol/L APAP作用下,2种细胞细胞器肿胀,核膜破裂,细胞膜边界模糊不清;与对照组比较,大鼠原代肝细胞分泌的天冬氨酸氨基转移酶(AST)、尿素氮(BUN)、葡萄糖(GLU)、碱性磷酸酶(ALP)、乳酸脱氢酶(LDH)随着APAP浓度增加产生显著变化,而BRL-3A细胞几乎所有的酶学指标变化均差异不显著。结论 与永生化细胞BRL-3A比较,大鼠原代肝细胞更能体现药物的肝脏毒性作用,但其体外培养存活时间较短;BRL-3A细胞缺少肝脏重要酶类,增加细胞内肝脏酶类是提升其作为肝脏毒性筛选模型的更好手段之一。
    5  毛蚶提取物的遗传毒性试验研究
    高梅 曹冲 汤连升 马会 张森 朱春花
    2016, 39(3):357-361. DOI: 10.7501/j.issn.1674-6376.2016.03.005
    [摘要](673) [HTML](0) [PDF 969.96 K](1044)
    摘要:
    目的 评价毛蚶提取物的遗传毒性,为评价其安全性提供毒理学依据。方法 选用体外细菌回复突变(Ames)试验、中国仓鼠肺细胞(CHL)体外染色体畸变试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验,进行毛蚶提取物的遗传毒性研究。Ames试验设5000.0、2500.0、1250.0、625.0、312.5 μg/皿5个剂量;体外CHL细胞染色体畸变试验,设立5.00、2.50、1.25 mg/mL 3个剂量,毛蚶提取物与CHL细胞分别接触6、24 h;小鼠骨髓微核试验,设立5000、2500、1250 mg/kg 3个剂量,给药1次。结果 Ames试验,毛蚶提取物在加与不加S9时各剂量组回变菌落数均未超过自发回变菌落数的2倍,亦无剂量相关性,结果为阴性;CHL染色体畸变试验,毛蚶提取物代谢活化组和非代谢活化组的染色体畸变率均低于5%,染色体畸变试验结果为阴性。小鼠骨髓微核试验,各剂量组的微核率与阴性对照组比较,差异不显著,结果为阴性。结论 在本试验条件下,毛蚶提取物未见潜在的遗传毒性。
    6  芒柄花素对不同亚型乳腺癌细胞周期基因和蛋白表达的影响
    周瑞娟 陈红风 叶媚娜 徐乐勤
    2016, 39(3):362-366. DOI: 10.7501/j.issn.1674-6376.2016.03.006
    [摘要](728) [HTML](0) [PDF 1.12 M](893)
    摘要:
    目的 观察芒柄花素对不同亚型乳腺癌细胞周期相关基因和蛋白表达的影响。方法 乳腺癌细胞MCF-7、SK-BR-3、MDA-MB-231经0、40、80 μmol/L芒柄花素作用48 h后,分别采用Trizol和RIPA裂解细胞,收集细胞的总RNA和总蛋白,进一步采用实时定量PCR技术和Western blotting技术检测细胞周期调控因子cyclin D1、cyclin E、p21、p27的基因和蛋白表达情况。结果 3种乳腺癌细胞cyclin D1和cyclin E的基因及蛋白表达水平随着药物浓度的增加而降低,而p21和p27的基因和蛋白表达水平随药物浓度的增加而升高,与对照组比较,差异显著(P<0.05、0.01)。结论 芒柄花素可以通过调控cyclin D1、cyclin E、p21和p27基因和蛋白的表达,将乳腺癌细胞阻滞于G1期,从而抑制乳腺癌细胞的增殖。
    7  大黄素对人肝癌Huh7细胞的凋亡作用及机制研究
    刘畅 罗英花 蒋雪园 吴丹丹 孙虎男 臧延青 金成浩
    2016, 39(3):367-371. DOI: 10.7501/j.issn.1674-6376.2016.03.007
    [摘要](948) [HTML](0) [PDF 2.19 M](1207)
    摘要:
    目的 研究大黄素对人肝癌Huh7细胞的凋亡作用及分子机制。方法 培养肝癌Huh7细胞,1、3、10、30、100 μmol/L的大黄素处理24 h,5-氟尿嘧啶(5-FU)作为阳性药,MTT法检测细胞存活率;30 μmol/L大黄素处理细胞0、3、6、24 h,光学显微镜观察细胞形态变化;Annexin V-FITC/PI双染法与流式细胞术检测细胞凋亡,Western blotting检测细胞凋亡相关蛋白的表达变化。结果 大黄素显著抑制Huh7细胞生长且呈浓度依赖性,其IC50值为11.55 μmol/L。30 μmol/L大黄素处理细胞,随着药物作用时间的增加,细胞明显固缩和凝聚,大量细胞脱离培养皿底部;细胞凋亡明显;p-Akt、Bcl-2蛋白表达量减少,cleaved caspase-3蛋白表达量增加。结论 大黄素通过Akt信号途径诱导肝癌Huh7细胞凋亡。
    8  紫花牡荆素对人宫颈癌细胞凋亡和侵袭迁移的影响
    段昕雅 王素娟 戴晶晶 夏伟 盖云
    2016, 39(3):372-376. DOI: 10.7501/j.issn.1674-6376.2016.03.008
    [摘要](641) [HTML](0) [PDF 1.80 M](1070)
    摘要:
    目的 观察紫花牡荆素(CAT)对人宫颈癌HeLa和SiHa细胞凋亡和侵袭转移的影响。方法 不同浓度CAT作用于HeLa和SiHa细胞不同时间后,采用MTT法观察药物对细胞活力的影响,流式细胞仪检测凋亡率,划痕试验观察细胞迁移率,基质胶法测定细胞粘附百分率,Transwell试验检测侵袭细胞数,Western blotting分析CAT对SiHa细胞抑制转移蛋白nm23-H1和促转移蛋白MTA1表达的影响。结果 CAT显著抑制HeLa和SiHa细胞活力,增加细胞凋亡率;降低细胞迁移百分率和黏附百分率;减少侵袭细胞数;明显增加SiHa细胞nm23-H1蛋白表达,降低MTA1蛋白表达。结论 CAT显著诱导人宫颈癌HeLa和SiHa细胞凋亡,抑制其侵袭迁移,提示其具有潜在的抗宫颈癌作用。
    9  黄芪中有效成分对人食道癌HCE-4细胞凋亡的影响
    刘阳 刘畅 罗英花 孙虎男 臧延青 金成浩
    2016, 39(3):377-381. DOI: 10.7501/j.issn.1674-6376.2016.03.009
    [摘要](769) [HTML](0) [PDF 1.22 M](1067)
    摘要:
    目的 研究黄芪有效成分芒柄花素与黄芪甲苷IV对人食道癌HCE-4细胞的凋亡作用及其分子机制。方法 MTT法检测黄芪提取物(阳性对照药)、芒柄花素与黄芪甲苷IV对人食道癌HCE-4细胞的增殖抑制作用,Annexin V-FITC/PI双染法检测3种药物诱导HCE-4细胞凋亡的能力,Western blotting法检测凋亡相关蛋白的表达变化。结果 芒柄花素与黄芪甲苷IV对HCE-4细胞具有良好的生长抑制作用,其效果呈浓度依赖性;芒柄花素与黄芪甲苷IV能够诱导HCE-4细胞的凋亡且呈时间依赖性;芒柄花素与黄芪甲苷IV处理HCE-4细胞后,抗凋亡蛋白p-AKT的表达量明显减少,促凋亡蛋白cleaved-caspase-3表达量增加。结论 黄芪有效成分芒柄花素与黄芪甲苷IV通过调控AKT信号转导途径诱导人食道癌HCE-4细胞凋亡。
    10  女贞子提取物降血糖及抗氧化活性的研究
    赵岩 徐莹 查琳 朱晓富 张连学 郜玉钢
    2016, 39(3):382-387. DOI: 10.7501/j.issn.1674-6376.2016.03.010
    [摘要](641) [HTML](0) [PDF 987.66 K](1021)
    摘要:
    目的 探讨女贞子提取物对糖尿病小鼠的降血糖作用及抗氧化活性。方法 以丁羟甲苯(BHT)、维生素C为阳性对照,铁离子还原法、DPPH·自由基清除法测定女贞子提取物体外抗氧化活性;以阿卡波糖为阳性对照,测定女贞子提取物抑制α-葡萄糖苷酶的活性。昆明种小鼠随机分为对照组、模型组、消渴丸(阳性药,1.0 g/kg)组和女贞子提取物低、高剂量(200、800 mg/kg)组,每组8只,以链脲佐菌素(STZ)结合高脂饲料诱导糖尿病小鼠模型,给药治疗3周。每周应用血糖仪检测1次空腹血糖水平;进行口服葡萄糖耐量试验(OGTT);试剂盒法检测血清胰岛素、糖化血红蛋白(HbA1c)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)、高密度脂蛋白(HDL-C)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、尿素氮(BUN)水平。结果 女贞子提取物对铁离子还原能力较BHT和Vc差,对DPPH自由基的清除能力较BHT强;对α-葡萄糖苷酶的抑制作用强于阿卡波糖;与模型组比较,女贞子提取物组小鼠血糖水平显著降低,血清TC、TG、LDL-C、HbA1c、MDA及BUN水平显著降低,胰岛素、HDL-C、SOD和GSH水平显著升高,且存在明显的剂量依赖性。结论 女贞子提取物具有显著的降血糖及抗氧化活性。
    11  夏枯草提取物对人乳头瘤病毒阳性宫颈癌细胞的凋亡作用
    范鹏莺
    2016, 39(3):388-393. DOI: 10.7501/j.issn.1674-6376.2016.03.011
    [摘要](604) [HTML](0) [PDF 1.24 M](1018)
    摘要:
    目的 研究夏枯草提取物(EPV)对人乳头瘤病毒(HPV)阳性人宫颈癌细胞的凋亡作用。方法 培养人宫颈癌细胞SiHa、HeLa(HPV阳性)及C-33-A(HPV阴性),与20、40、80 μg/mL的EPV共孵育24 h,对照组加入等体积的DMSO,采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞存活率;流式细胞术Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡及细胞周期。取对数生长期的SiHa、HeLa细胞,与40 μg/mL EPV共孵育24 h,Western blotting法检测凋亡相关蛋白caspase 3、caspase 9、Bcl-2、Bax的表达情况。结果 EPV剂量相关地抑制HPV阳性人宫颈癌细胞SiHa、HeLa活力(P<0.05、0.01、0.001);诱导SiHa、HeLa细胞凋亡(P<0.05、0.01),使SiHa、HeLa细胞周期阻滞在G0/G1期,抑制其增殖;对C-33-A细胞无显著作用。显著上调SiHa、HeLa细胞内Cle caspase 3、Cle caspase 9、Bax表达,下调Bcl-2表达(P<0.05、0.01、0.001)。结论 EPV可诱导HPV阳性人宫颈癌SiHa、HeLa细胞凋亡,对HPV阴性C-33-A细胞无显著作用,为夏枯草及其制剂在临床上治疗宫颈癌提供依据。
    12  炎调方对脓毒症急性肺损伤大鼠肺组织髓过氧化物酶和丙二醛水平的影响
    汪海慧 沈晓红 熊旭东
    2016, 39(3):394-397. DOI: 10.7501/j.issn.1674-6376.2016.03.012
    [摘要](434) [HTML](0) [PDF 1.16 M](790)
    摘要:
    目的 观察炎调方对脓毒症急性肺损伤(ALI)大鼠肺组织髓过氧化物酶(MPO)、丙二醛(MDA)水平的影响。方法 清洁级健康雄性SD大鼠随机分为对照组、假手术组、模型组、炎调方组、地塞米松组,炎调方组ig 9.9 g/kg炎调方,地塞米松组ig 0.45 mg/kg地塞米松,每天给药1次,连续给药3 d。末次ig 2 h后采用盲肠结扎穿孔术(CLP)制备脓毒症ALI模型,分别于造模后24 h处死动物,进行肺组织HE染色,测定各组大鼠湿/干重比(W/D),肺组织MPO、MDA水平。结果 模型组大鼠肺组织损伤程度、MPO及MDA水平较对照组及假手术组显著增高(P<0.01),炎调方组、地塞米松组肺组织损伤程度、MPO及MDA水平较模型组显著降低(P<0.05、0.01)。结论 炎调方可有效减轻脓毒症ALI大鼠的炎症及氧化应激反应。
    13  体外心肌毒性代谢组学研究中模型药物多柔比星浓度及受试时间筛选
    李黎 申秀萍 钱鑫 柴振海 张宗鹏 刘昌孝
    2016, 39(3):398-402. DOI: 10.7501/j.issn.1674-6376.2016.03.013
    [摘要](466) [HTML](0) [PDF 2.12 M](899)
    摘要:
    目的 筛选体外心肌毒性代谢组学研究中模型药物盐酸多柔比星(DOX)的受试浓度及受试时间。方法 采用MTS法测定DOX作用24、48、96 h后对原代心肌(PC)细胞活力的影响,确定最佳的受试总时长;并在最佳受试时间内,测定不同浓度DOX对PC细胞活力的影响。通过显微镜下观察细胞形态改变,综合分析确定DOX的低、高浓度及不同的受试时间点。结果 DOX的最佳受试总时长为48 h,作用48 h的IC50值为(1.03±0.40) μmol/L。综合分析确定DOX的受试低、高浓度分别为0.09和3.44 μmol/L,分别于药物暴露0、6、24和48 h时收获并测定样品。结论 建立了一种确定体外心肌毒性代谢组学研究中受试药物浓度及受试时间的方法,为此类体外代谢组学研究提供参考依据。
    14  吉非替尼脂质体对S180荷瘤小鼠生存时间及生命质量的影响
    何琳 马海英
    2016, 39(3):403-407. DOI: 10.7501/j.issn.1674-6376.2016.03.014
    [摘要](496) [HTML](0) [PDF 1.19 M](1162)
    摘要:
    目的 考察吉非替尼(GFB)脂质体对S180荷瘤小鼠生存时间及生命质量的影响。方法 30只小鼠制备S180荷瘤模型,随机分为5组:模型组,GFB低、高剂