螺内酯属于醛固酮竞争性抑制剂，与高效利尿药物（如噻嗪类）联合应用，既能提高药物的疗效，又能减少钾的排出，防止电解质紊乱^[1]。螺内酯联合呋塞米用于治疗舒张性心力衰竭^[2]及肝硬化复发性腹水^[3]，其作用机制为能促进水、钠、氯排除，缓解腹水，避免低血钾症或高血钾症^[4]。Lasilactone是由法国赛诺菲安万特制药公司开发的保钾利尿剂，用于原发性高血压、慢性充血性心力衰竭和肝硬化导致的水肿等疾病的治疗^[5]。本研究以螺内酯和呋塞米的溶出度为指标，采用单因素试验优选复方呋塞米螺内酯片的最佳处方。

1 仪器与试剂

UV-1801紫外-可见分光光度计（北京瑞利分析仪器公司），pHS-2C酸度计（上海理达仪器厂），KQ-100超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司），ZRS-8G智能溶出仪（天津大学无线电厂），TDP单冲压片机（上海第一制药机械厂），ZB-lE智能崩解仪（天津市天大天发科技有限公司）。

呋塞米对照品、原料药（东北制药厂有限公司提供，质量分数＞99.72%），螺内酯对照品、原料药（浙江新华制药有限公司提供，质量分数＞99.47%）；微晶纤维素PH101（批号140301）、乳糖（批号140506）、交联聚维酮（批号140603）、淀粉（批号130511）、硬脂酸镁（批号140407）均由安徽山河辅料有限公司提供；其他化学试剂均为分析纯。

2 方法与结果 2.1 溶出度的测定 2.1.1 色谱条件^[6]

Thermo Syncronis C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 m）；流动相：乙腈-1%冰醋酸水（60∶40）；检测波长：238 nm；体积流量1.0 mL/min，柱温：30℃ ；进样量：20 μL。

2.1.2 专属性试验

称取螺内酯对照品12.5 mg，精密称定，置25 mL量瓶中，加溶出介质稀释至刻度，摇匀，即得500 μg/mL贮备液。精密量取上述母液1.0 mL，置10 mL量瓶中，用溶出介质（pH 1.0盐酸溶液且含有0.1%十二烷基硫酸钠的缓冲溶液）稀释至刻度，摇匀，作为螺内酯对照品溶液。称取呋塞米对照品5.0 mg，精密称定，置25 mL量瓶中，以pH 5.8磷酸盐缓冲溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，得200 μg/mL的贮备液。精密量取上述母液1.0 mL，置10 mL量瓶中， 用溶出介质稀释至刻度，摇匀，作为呋塞米对照品溶液。按处方比例称取空白辅料适量，用溶出介质配制成一定浓度的溶液，滤过，取续滤液作为空白辅料溶液。精密吸取溶剂、空白辅料溶液、螺内酯和呋塞米对照品溶液各20 μL，注入液相色谱仪，记录色谱图。结果溶剂和辅料对螺内酯和呋塞米的测定无干扰。

2.1.3 线性关系考察

取以上制备的500 μg/mL螺内酯对照品贮备液适量，以溶出介质稀释，配制5.0、10.0、20.0、25.0、30.0、40.0、50.0、60.0 μg/mL螺内酯系列对照品溶液。精密吸取上述各溶液20 μL，注入液相色谱仪，记录峰面积。以峰面积对质量浓度进行线性回归，得回归方程Y＝47 459.4 X＋51 632.9，r＝1.000。结果表明呋塞米在5.0～60.0 μg/mL与峰面积呈良好的线性关系。

取200 μg/mL呋塞米对照品贮备液适量。以溶出介质稀释，配制2.0、4.0、8.0、10.0、12.0、16.0、20.0 μg/mL呋塞米系列对照品溶液。精密吸取上述各对照品溶液20 μL，注入液相色谱仪，记录峰面积。以峰面积对质量浓度进行线性回归，得回归方程Y＝94 279.75 X＋34 727.6，r＝0.999 9，结果表明呋塞米在2.0～20.0 μg/mL时与峰面积呈良好的线性关系。

2.1.4 溶出均一性试验

取复方呋塞米螺内酯片6片，以0.1% SDS、0.1 mol/L HCl为溶出介质，平行操作6次，测定螺内酯和呋塞米溶出度，结果RSD值分别为1.55%、2.51%；结果表明，此方法溶出均一性良好。

2.1.5 稳定性试验

取复方呋塞米螺内酯片溶出样品溶液，于室温下避光放置，分别于0、1、2、4、6、8、10 h进样测定，记录螺内酯和呋塞米峰面积，结果螺内酯峰面积RSD值＜2.0%，呋塞米峰面积RSD值＜2.0%，表明溶液8 h内稳定。

2.1.6 回收率试验

称取螺内酯对照品25.0、40.0、50.0 mg，各3份，精密称定，置100 mL量瓶中，加入处方量混合空白辅料，以溶出介质稀释至刻度，摇匀，滤过。分别精密移取上述溶液1.0 mL，置10 mL量瓶中，溶出介质稀释至刻度，作为供试品溶液。精密称取螺内酯对照品适量，用流动相配制成50 μg/mL溶液，作为对照品溶液。精密吸取供试品、对照品溶液各20 μL注入液相色谱仪，记录峰面积，计算回收率，结果平均回收率为101.86%，RSD值为1.24%（n＝9）。

称取呋塞米对照品约10.0、16.0、20.0 mg，各3份，精密称定，置100 mL量瓶中，加入处方量混合空白辅料，溶出介质稀释至刻度，超声使其完全溶解，滤过；分别精密移取上述溶液1 mL，置10 mL量瓶中，溶出介质稀释至刻度，作为供试品溶液；精密称取呋塞米对照品适量，用流动相配制20 μg/mL溶液，作为对照品溶液。精密吸取供试品和对照品溶液各20 μL注入液相色谱仪，记录峰面积，计算回收率，结果平均回收率为101.31%，RSD值为1.58%（n＝9）。

2.1.7 测定法^[7]

按照《中国药典》2015年版二部附录XC第三法，以pH 1.0盐酸溶液且含有0.1%十二烷基硫酸钠的缓冲溶液为溶出介质，转速为75 r/min，分别于5、10、15、20、30、45、60 min量取溶液10 mL，滤过，取续滤液作为供试品溶液；另取螺内酯对照品溶液，分别精密移取上述两种溶液各20 μL注入液相色谱仪，记录峰面积，以外标法计算螺内酯的溶出度。

按照《中国药典》2015年版二部附录XC第三法，以pH 5.8磷酸盐缓冲溶液为溶出介质，转速为50 r/min，依法操作，经30 min后，取溶液10 mL，滤过，取续滤液作为供试品溶液；另取呋塞米对照品溶液，分别精密移取上述两种溶液各20 μL注入液相色谱仪，记录峰面积，以外标法计算呋塞米的溶出度。

2.2 制备工艺流程

参考lasilactone胶囊的说明书^[4]，制定制剂制备工艺：称取处方量的呋塞米、螺内酯原料药，备用；称取处方量微晶纤维素、乳糖、交联聚维酮、十二烷基硫酸钠，与呋塞米、螺内酯原料药混合均匀；以8%淀粉浆制软材，并过20目筛网进行制粒；将湿颗粒在60 ℃条件下，干燥1.5～2 h；取干燥后的颗粒以16目筛网进行整粒；加入处方量的硬脂酸镁，混合均匀，以8 mm浅凹冲压片，即得。

2.3 表面活性剂用量筛选

本制剂中螺内酯静电作用强，且为难溶性药物，因此需要加入表面活性剂SDS以消除静电作用，同时促进螺内酯的溶出释放。以SDS为表面活性剂，按照工艺制备片剂，考察其在处方中所占的比例为1%、2%、3%时对溶出度的影响，结果见图 1。结果表明，当SDS的用量为1%、2%时，消除静电作用较弱，用量为3%时能够达到消除静电的作用，且能够促进螺内酯的溶出。因此将表面活性剂SDS的用量定为3%。

2.4 填充剂的选择

选择微晶纤维素和乳糖作为填充剂，调节两者的比例，考察混合填充剂对压片成形性的影响，见表 1，对螺内酯溶出度的影响见图 2。结果表明，当微晶纤维素的比例为0、5%时，压片过程中出现黏冲现象，片剂成型性较差，因此不再考察其溶出度情况。随着微晶纤维素比例的增加，处方可压性和外观亮泽度均上升，崩解时间随微晶纤维素量的增加，崩解时间变长，且随微晶纤维素比例的增加，螺内酯溶出度降低，因此选定微晶纤维素的比例为10%。

2.5 崩解剂的选择

片剂常用的崩解剂有交联聚维酮（PVPP）、低取代羟丙甲纤维素（L-HPC）、交联羧甲基纤维素纳（CCNa）、羧甲基淀粉钠（CMS-Na）。实验以崩解时限为指标考察L-HPC、PVPP、CCNa、CMS-Na在相同用量（5%）情况下的崩解行为，比较片剂的崩解效果，结果见表 2。

结果表明，L-HPC崩解较慢，PVPP崩解性能最为优越，CCNa、CMS-Na较PVPP稍差。因此选用PVPP作为崩解剂并考察其加入方法。

将崩解剂分别以全部外加法、内1%外4%法、内3%外2%法、全部内加法制备制剂，考察崩解剂不同的加入方法对压片和螺内酯溶出度的影响，见图 3。结果表明，当崩解剂PVPP全部外加法时，片剂可压性差，压力不合格；当崩解剂PVPP内1%外4%法时，片剂出现裂片情况；当PVPP加入方法为内3%外2%时，制剂溶出完全，溶出效果较好。因此最终选择5% PVPP并且以内3%外2%法加入作为崩解剂。

2.6 最优处方条件

将各辅料分别过80目筛，备用；称取处方量呋塞米、螺内酯原料药，备用；称取3%处方量十二烷基硫酸钠与呋塞米、螺内酯原料药混合均匀；称取处方量微晶纤维素、乳糖（10%∶46.5%）以及3/5处方量的交联聚维酮与前一步混合物进行混合；以8%淀粉浆制软材，过20目筛网进行制粒；将湿颗粒在60 ℃，干燥1.5～2 h；取干燥后的颗粒以16目筛网进行整粒；将0.5%处方量的硬脂酸镁和2/5处方量的PVPP加入上述干颗粒中，混合均匀，以8 mm浅凹冲，压片即得。按最优处方工艺制备3批片剂，考察外观、硬度、溶出度，见表 3。结果表明样品外观光洁，硬度较好，溶出度符合要求。

2.7 稳定性考察

将批号150406复方呋塞米螺内酯片置于适宜的密封洁净容器中，分别在40、60 ℃恒温干燥箱内放置10 d，在0、5、10 d取样，进行外观性状、溶出度的检测，见表 4。结果表明，复方呋塞米螺内酯片在40、60 ℃恒温加速考察10 d，外观性状未发生改变，溶出情况稳定。

3 讨论

实验以溶出度为指标，对复方呋塞米螺内酯片处方工艺进行优化。螺内酯的水溶性较差，为提高溶解度，将原料过80筛。处方中使用了十二烷基硫酸钠，有助于提高药物的溶出度，并消除部分静电作用。通过筛选微晶纤维素与乳糖的比例，优选出适宜的比例进行压片，使片剂成型性、可压性良好，溶出度符合要求。

对复方呋塞米螺内酯片进行初步稳定性考察结果表明，其稳定性良好，但还需要对其进行加速试验及长期试验，考察其质量的稳定性，为进一步放大研究提供参考。