中草药  2016, Vol. 47 Issue (8): 1269-1271
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引用本文doi: 10.7501/j.issn.0253-2670.2016.08.003
王李俊, 杨琴, 王飞, 朱盼. 列当中1个新的苯乙醇苷化合物[J]. 中草药, 2016, 47(8): 1269-1271.
WANG Li-jun, YANG Qin, WANG Fei, ZHU Pan. A new phenethyl alcohol glycoside from Orobanche coerulescens[J]. Chinese Traditional and Herbal Drugs, 2016, 47(8): 1269-1271.
列当中1个新的苯乙醇苷化合物
王李俊1, 杨琴1, 王飞2, 朱盼1    
1. 江西中医药高等专科学校, 江西 抚州 344000;
2. 南昌大学抚州医学院, 江西 抚州 344000
收稿日期: 2016-01-30
作者简介: 王李俊(1981—),男,江西东乡人,硕士,讲师,主管中药师,主要从事药用植物分子生物学研究。 Tel:(0794)8228608 E-mail:wwww736@163.com
摘要: 目的 研究列当Orobanche coerulescens全草的化学成分。方法 采用大孔树脂、硅胶和反相ODS柱色谱进行分离和纯化,通过HR-ESI-MS、NMR、2D-NMR等波谱数据确定化合物的结构。结果 从列当全草50%乙醇提取物中提取分离得到1个新苯乙醇苷,鉴定为2-(3-甲氧基-4-羟基)-苯基-乙醇-1-O-α-L-[(1→3)-4-O-乙酰基-鼠李糖基-4-O-阿魏酰基]-O-β-D-葡萄糖苷。结论 化合物1为新化合物,命名为列当苷A。
关键词: 列当     列当属     苯乙醇苷     列当苷A     结构鉴定    
A new phenethyl alcohol glycoside from Orobanche coerulescens
WANG Li-jun1, YANG Qin1, WANG Fei2, ZHU Pan1    
1. Jiangxi College of Traditional Chinese Medicine, Fuzhou 344000, China;
2. Fuzhou Medical College of Nanchang University, Fuzhou 344000, China
Abstract: Objective To study the chemical constituents from the whole plant of Orobanche coerulescens. Methods The constituents were isolated and purified by using various column chromatographic techniques including D101, silica gel, and ODS, and the structures were identified by spectroscopic analyses including HR-ESI-MS, NMR, and 2D-NMR. Results A new phenethyl alcohol glycoside was isolated from 50% ethanol extract in the whole plant of O. coerulescens, and its structure was identified as 2-(3-methoxy-4-hydroxy)-phenyl-ethanol-1-O-α-L-[(1→3)-4-O-acetyl-rhamnopyranosyl-4-O-feruloyl]-O-β-D-glucopyranoside. Conclusion Compound 1 is a new compound named as orobancheoside A.
Key words: Orobanche coerulescens Steph.     Orobanche L.     phenethyl alcohol glycoside     orobancheoside A     structure identification    

列当Orobanche coerulescens Steph. 为列当科（Orobanchaceae）列当属Orobanche L. 寄生草本植物，别名紫花列当、兔子拐棍、独根草，在我国内蒙古自治区各地分布，东北、华北、西北等地也有分布。列当全草药用，有补肾助阳、强筋骨、润肠的功效，主治阳痿、腰腿冷痛、神经官能症及小儿腹泻等症。列当应用历史悠久，也是传统中药肉苁蓉的代用品之一[1, 2]。根据国内外有关列当的化学成分研究报道得知，苯乙醇苷类化合物是其特征性代表成分[3, 4, 5, 6, 7]。本实验对列当50%乙醇提取物进行研究，从中分离得到1个化合物，鉴定为1个新的苯乙醇苷化合物，命名为列当苷A（orobancheoside A）。结构见图 1。

图 1 化合物1的结构 Fig. 1 Structure of compound 1
1 仪器与材料

Waters 2996 HPLC色谱仪带PDA二极管阵列检测器（Waters公司），Nicolet 6700傅里叶红外变换光谱仪（Thermo Fisher公司），DRX500核磁共振仪（Bruker公司），双压线性离子阱串联高分辨质谱orbitrap Velos Pro（Thermo Fisher公司），40～60 μm C18反相硅胶为Merck公司产品，D101大孔树脂为天津浩聚树脂科技有限公司产品，硅胶（60～100目）为青岛海洋化工厂产品，氯仿、甲醇均为AR级试剂（北京化工厂），水为自制蒸馏水。

列当药材于2009年9月采自内蒙古锡林郭勒盟西乌珠穆沁旗，由南京中医药大学王春根教授鉴定为列当Orobanche coerulescens Steph. 的全草。

2 提取与分离

列当干燥全草10 kg，粉碎，加50%乙醇50 L，加热回流提取3次，每次1.5 h，合并提取液，浓缩至约10 L。过D101大孔树脂柱，依次以水及30%、60%乙醇洗脱，收集60%乙醇洗脱部分，回收溶剂。将浸膏加100 g硅胶（100～200目）拌样，经硅胶柱色谱，以氯仿-甲醇（50∶1、20∶1、10∶1、5∶1）梯度洗脱，分别收集各洗脱馏份，以TLC 检测合并得8 组馏份Fr. A1～A8，回收溶剂。取馏份 Fr. A6（0.6 g）以少量40%甲醇溶解，经C18 反相硅胶柱分离，40%甲醇洗脱，以TLC检测得到馏份Fr. B1～B6，在Fr. B3得化合物1（10 mg）。

3 结构鉴定

化合物1：无色无定形粉末，Molish反应显蓝色，说明结构中含糖。红外光谱中1 699 cm−1处吸收显示含共轭羰基结构，而1 634 cm−1处吸收显示含烯烃结构；${\rm{UV \lambda }}_{\max }^{{\rm{MeOH}}}$(nm): 326；HR-ESI-MS m/z: 717.235 8 [M＋Na]+（计算值717.237 1 [M＋Na]+）。确定相对分子质量为694，分子式为C33H42O16，不饱和度为13。

1H-NMR（表 1）中δ 6.68 (1H,dd,J = 8.0,2.0 Hz),6.73 (1H,d,J = 2.0 Hz),6.81 (1H,d,J = 8.0 Hz) 和δ 6.83 (1H,d,J = 8.0 Hz),7.10 (1H,dd,J = 8.0,2.0 Hz),7.21 (1H,d,J = 2.0 Hz) 两组各3个芳香氢信号及其偶合常数表明化合物1含有2个独立的苯环，且2个苯环的取代类型也都是典型的1,3,4位取代；根据δ 6.38 (1H,d,J = 16.0 Hz),7.66 (1H,d,J = 16.0 Hz) 2个峰的偶合常数J = 16.0 Hz，可判断结构中存在反式双键。

根据13C-NMR（表 1）及DEPT谱中δ 168.5,173.0信号可判断存在2个酯羰基结构；根据1H-NMR中δ 1.00 (3H,d,J = 6.0 Hz),5.38 (1H,brs) 和13C-NMR中δ 18.6,102.3可确定存在α-L-鼠李糖结构，而1H-NMR中δ 4.38 (1H,d,J = 8.0 Hz) 是典型的β-D-葡萄糖端基氢信号，配合13C-NMR中δ 104.7,62.8信号可以推测β-D-葡萄糖的存在；根据DEPT谱可判断13C-NMR谱中剩余的δ 21.2,37.1,72.6分别为1个甲基碳信号和2个亚甲基碳信号；根据HMBC谱（图 2）中羰基碳信号δ 168.5与δ 6.38 (1H,d,J = 16.0 Hz),7.66 (1H,d,J = 16.0 Hz) 信号均相关可判断羰基与双键相连，δ 7.66信号与叔碳信号δ 124.6相关、δ 6.38信号与季碳信号δ 128.1相关可证明苯环与双键相连，对照阿魏酸13C-NMR数据[8]，可推断该片段应为阿魏酰基；计算以上各结构部分的不饱和度之和与计算值13相符。

表 1 化合物1的1H-NMR (400 MHz,CD3OD) 和13C-NMR (100 MHz,CD3OD) 数据 Table 1 1H-NMR (400 MHz,CD3OD) and 13C-NMR (100 MHz,CD3OD) data of compound 1

图 2 化合物1主要的HMBC和NOESY相关图 Fig. 2 Key HMBC and NOESY correlations of compound 1

HMBC谱中氢信号δ 1.67 (3H,s) 与碳信号δ 173.0相关表明二者相连，是乙酰基结构。化合物1的羰基碳信号δ 168.5与葡萄糖C-4上氢信号δ 4.97 (1H,t,J = 10.0 Hz) 相关，说明阿魏酰基与葡萄糖C-4相连；化合物1的另一个羰基碳信号δ 173.0与鼠李糖C-4上的氢信号δ 4.81 (1H,t,J = 10.0 Hz) 相关，说明乙酰基与鼠李糖C-4相连。鼠李糖端基氢δ 5.38 (1H,brs) 与葡萄糖3位碳信号δ 79.9相关，说明鼠李糖通过1位与葡萄糖3位相连接。δ 6.73 (1H,d,J = 2.0 Hz) 信号与δ 37.1相关。从而连接起整个苯乙醇苷的各个片段。经文献检索，化合物1与广防风苷A[9]的各个组成片段类似，区别主要在于化合物1的阿魏酰基连接在葡萄糖的4位，而广防风苷A的阿魏酰基是连接在葡萄糖的6位。还有就是化合物1的鼠李糖的4位被乙酰基取代。

另1H-NMR谱中的3.81 (3H,s),3.87 (3H,s) 信号与13C-NMR谱中的δ 57.1,57.1信号都说明尚有2个-OCH3信号，根据NOESY谱中δ 3.81 (3H,s) 与6.73 (1H,d,J = 2.0 Hz)、δ 3.87 (3H,s) 与7.21 (1H,d,J = 2.0 Hz) 的相关信号以及2个苯环的取代类型，可以确定2个-OCH3分别与2个苯环的3位相连。

综上所述，鉴定化合物1的结构为2-(3-甲氧基-4-羟基)-苯基-乙醇-1-O-α-L-[(1→3)-4-O-乙酰基- 鼠李糖基-4-O-阿魏酰基]-O-β-D-葡萄糖苷，结构式见图 1。经检索，该化合物为新化合物，将其命名为列当苷A。

参考文献
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