过敏性鼻炎颗粒主治证属风邪犯肺、鼻窍失畅，或因某些致敏因素导致过敏而见鼻塞、鼻痒、喷嚏、流清涕，或因过敏性鼻炎发作，用于鼻鼽，即春季、秋冬季节性过敏性鼻炎，其功效为疏风宣肺、通利鼻窍。

过敏性鼻炎颗粒处方由辛夷、紫苏叶、荆芥、苍耳子、白芷等9味药材组成。其中辛夷、紫苏叶、荆芥、苍耳子、白芷5味药材混合提取的挥发油后包合入药。辛夷挥发油具有明显抑制实验性哮喘豚鼠气道浸润Eos细胞数，减轻哮喘气道的炎症反应的作用，表现出对气道炎症的抑制与改善^{[2, 3]}；紫苏叶的挥发油是其重要的药理活性成分；荆芥挥发油具有镇痛、抗炎、扩张支气管和抗过敏等功效。本研究参照有关文献报道^{[3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16]}采用毛细管气相色谱法建立了过敏性鼻炎颗粒挥发油的指纹图谱，为有效地控制其内在质量提供参考。

Agilent 7890A型气相色谱仪，FID检测器。

胡薄荷酮对照品(批号111706-201205，质量分数99.8%)，购自中国食品药品检定研究院，定量测定用；水为超纯水；其余试剂均为分析纯。

紫苏Perilla frutescens (L.) Britt. 的干燥叶(批号Y140501)，荆芥Schizonepeta tenuifolia Briq. 的干燥地上部分(批号Y140501)，望春花Magnolia biondii Pamp的干燥花蕾(批号Y140501)，白芷Angelica dahurica (Fisch. ex Hoffm.) Benth. et Hook. f. 的干燥根(批号Y140501)，苍耳Xanthium sibiricum Patr. 的干燥成熟带总苞的果实(批号Y140501)，由江苏康缘药业股份有限公司质量部吴州研究员提供并鉴定；过敏性鼻炎颗粒由江苏康缘药业股份有限公司提供，批号分别为150101、150102、150103、150201、150202、150203、150204、150401、150402、150403。

色谱柱为HP-5 Phenyl Methyl Siloxane(固定液为5%甲基苯基硅氧烷)毛细管柱(30 m×320 μm，0.25 μm)。载气为氮气；进样口温度200 ℃；压力10.631 psi(73.30 kPa)；自动进样，进样量1 μL，分流进样，分流比5∶1；柱流量2.5 mL/min；压力10.631 psi(73.30 kPa)；FID检测器，检测器温度250 ℃；氢气体积流量30 mL/min；空气体积流量300 mL/min；氮气流量27.5 mL/min；总流量18 mL/min。柱温采取程序升温方式，升温程序：初温50 ℃，以3 ℃/min升温至140 ℃，保持2 min，再以10 ℃/min升温至200 ℃，保持2 min。

取胡薄荷酮对照品适量，加醋酸乙酯配成含胡薄荷酮50 μg/mL的溶液，作为对照品溶液。

取本品(批号150201)10 g，加热水(温度＞90 ℃)50 mL搅拌使溶解，放冷离心，加醋酸乙酯10 mL萃取，取醋酸乙酯层离心，作为供试品溶液。

取批号为150201的过敏性鼻炎颗粒，按“2.3”项方法制备供试品溶液，照“2.1”项方法连续进样6次进行测定。考察峰面积大于总峰面积3%的色谱峰的相对保留时间和相对峰面积，结果各色谱峰相对保留时间RSD均≤0.56%，相对峰面积值RSD均≤2.31%，又以第1次进样所得指纹图谱作为参照计算后5次进样所得指纹图谱的相似度，结果相似度结果均不小于0.99，符合指纹图谱的技术要求。表明该方法精密度良好。

取批号为150201的过敏性鼻炎颗粒，按“2.3”项方法制备供试品溶液，照“2.1”项方法于0、1、2、3、6、9 h分别测定1次指纹图谱，共测6次，考察峰面积大于总峰面积3%的色谱峰的相对保留时间和相对峰面积。结果各色谱峰相对保留时间RSD均≤0.07%，相对峰面积值RSD均≤1.37%，又以第1次进样所得指纹图谱作为参照计算后5次进样所得指纹图谱的相似度，结果相似度结果均不小于0.99，表明供试品溶液在9 h内稳定。

取批号为150201的过敏性鼻炎颗粒，按“2.3”项方法制备供试品溶液，平行制备6份，照“2.1”项方法测定指纹图谱，考察峰面积大于总峰面积3%的各色谱峰的相对保留时间和相对峰面积值，结果各色谱峰相对保留时间RSD均≤0.05%，相对峰面积值RSD均≤3.71%，又以第1次进样所得指纹图谱作为参照计算后5次进样所得指纹图谱的相似度，结果相似度结果均不小于0.99，表明该方法可较好重复。

根据以上方法学考察结果，表明该方法测定过敏性鼻炎颗粒指纹图谱，精密度、重复性、稳定性均较好，能够准确测定该制剂的指纹图谱。

分别取10批不同批号的过敏性鼻炎颗粒，按“2.3”项方法制备供试品溶液，分别测定。将10批过敏性鼻炎颗粒指纹图谱导入“中药色谱指纹图谱相似度评价系统的操作规范软件(版本2004A)”，对色谱峰进行多点校正后，自动匹配，生成对照指纹图谱(R，图 1)，共标定12个共有峰，其中胡薄荷酮为参照峰(S)，批号为150101、150102、150103、150201、150202、150203、150204、150401、150402、150403的过敏性鼻炎颗粒样品与对照指纹图谱比较相似度分别为0.984、0.979、0.993、0.979、0.991、0.991、0.993、0.980、0.978、0.993，均在0.979～0.993。

图 1 10批过敏性鼻炎颗粒指纹图谱 Fig.1 Fingerprint of 10 batches of Guominxing Biyan Granules

分别取过敏性鼻炎颗粒处方中紫苏叶、荆芥、苍耳子、白芷、辛夷5味药材适量至1 L圆底烧瓶中，加水至容器体积1/3，连接挥发油提取器和球形冷凝管，用电热套加热，回流提取6 h，用醋酸乙酯溶解并分取挥发油至10 mL量瓶中，用醋酸乙酯定容至刻度，作为供试品溶液；按照成品指纹图谱方法测定。5味药材与成品相关性见图 2。

图 2 成品与药材相关性指纹图谱 Fig.2 Correlation fingerprint between Guominxing Biyan Granules and medicinal materials

由相关性图谱可知，过敏性鼻炎颗粒指纹图谱中1、2、4、6、7号峰主要来源于辛夷；3号峰主要来源于紫苏叶、辛夷；8(S)号峰主要来源于荆芥；9号峰主要来源于紫苏叶、苍耳子；10号峰主要来源于苍耳子、紫苏叶，11号峰主要来源于白芷。

应用GC-MS联用技术，对过敏性鼻炎颗粒指纹图谱中的峰进行了初步定性。气相色谱条件同“2.1”项下色谱条件；质谱条件：EI离子源(-70 eV)，离子源温度230 ℃，气相色谱仪与质谱仪连接器接口温度250 ℃，载气为氦气；总离子流图(TIC)见图 3。通过计算机内系统解卷积检索出图谱中可能存在的化合物^{[17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31]}，并根据NIST系统质谱图库检索匹配，确认结构。参考标准质谱图集及有关文献，初步确定该挥发油中12个特征峰化学成分及结构，见表 1。其中，2、4、6、7号峰与辛夷单味药相关，与文献报道一致^{[18, 19]}，5、8号峰与荆芥单味药相关，与文献报道一致^[20]，9号峰与紫苏叶相关，与文献报道一致^{[21, 22, 23]}，1、3、10、11、12号峰目前没有检索到与其一致的相关文献，有待于进一步分析鉴定。

图 3 过敏性鼻炎颗粒总离子流色谱图Fig.3 TIC ofGuominxing Biyan Granules

表 1(Table 1)

表 1 过敏性鼻炎颗粒GC共有峰化学成分归属 Table 1 Attribution of ingredients in GC common peaks of Guominxing Biyan Granules 峰号 化学成分 分子式 相对分子质量 来源 1 β-檀香醇 C15H24O 220 辛夷 2 桉叶素 C10H18O 154 辛夷 3 3,7-二甲基-1,6-辛二烯-3-醇 C10H18O 154 辛夷、紫苏叶 4 樟脑 C10H16O 152 辛夷 5 左旋薄荷酮 C10H18O 154 荆芥 6 松油烯-4-醇 C10H18O 154 辛夷 7 α-松油醇 C10H18O 154 辛夷 8 胡薄荷酮 C10H16O 152 荆芥 9 2-己酰基呋喃 C10H14O2 166 紫苏叶、苍耳子 10 4-(1,1-二甲基丙基)苯酚 C11H16O 164 苍耳子、紫苏叶 11 4-羟基-苯乙酸甲酯 C9H10O3 166 白芷 12 1-(2,4-二羟基苯基)-2-(4-甲氧基-3-硝基苯基)乙酮 C15H13NO6 303 —

表 1 过敏性鼻炎颗粒GC共有峰化学成分归属 Table 1 Attribution of ingredients in GC common peaks of Guominxing Biyan Granules

色谱条件确认过程中，对色谱条件下4种升温程序及分流比进行了考察，以“2.1”项色谱条件分离效果最好，因此选择用该条件作为过敏性鼻炎颗粒测定色谱条件。

为了能更好地建立指纹图谱，考察了直接提取挥发油、乙醇提取、醋酸乙酯提取、热水溶解醋酸乙酯萃取4种方法下获得的挥发油指纹图谱，经比较分析，确定热水溶解醋酸乙酯萃取的提取方式最佳。该提取方式简单，提取时间短，获得的挥发油成分丰富，收率高，指纹图谱中，除已知成分胡薄荷酮能够较好的辨别出外，其他成分指纹峰也能被较好地体现，且各峰分离度好，谱图清晰，所以最终选择这种提取方式。

过敏性鼻炎颗粒挥发油样品对比各药材时，5味药材中荆芥、紫苏叶、辛夷挥发油的量较高，体现在气相图谱中有明显对应峰且强度较大。针对过敏性鼻炎颗粒全面质量控制，还需要进一步研究。