猫眼草Euphorbia lunulata Bge. 为大戟科（Euphorbiaceae）大戟属Euphorbia Linn. 多年生草本植物，产于辽宁、吉林、黑龙江、山西等地，全草入药，性微寒，略带苦味，微毒，具有祛痰、镇咳、平喘、拔毒止痒等功效^[1]，被广泛应用于临床，疗效显著，其中除含有大戟醇、24-亚甲基环阿尔廷醇等大量的三萜类化合物^[2]之外，还含有多种salicifoline、salicinolide等具有抗肿瘤活性的二萜类成分^[3]，为进一步研究猫眼草中的二萜类化合物，本实验采用硅胶柱色谱、高压液相色谱等分离技术，从猫眼草全草乙醇提取液的正己烷萃取物中分离得到1个新的假白榄烷型二萜，鉴定其结构为2α,3β,5α,9α,15β-pentaacetoxy-11,12-epoxy-7β-isobutyryl-8α- benzoyloxyjatropha-6(17)-en-14-one，命名为8-苯甲酰基-猫眼草素。

Bruker VNS-600型核磁共振波谱仪；美国鲁道夫公司AUTOPOL V型旋光仪；美国Waters公司HPLC/Xevo G2 QTof型超高效液相色谱/四极杆/飞行时间串联质谱仪；HITACHI L-7100型高效液相色谱仪：半制备色谱柱PREP-ODS（250 mm×10 mm，5 μm）和PREP-SIL（250 mm×10 mm，5 μm）为日本日立公司产品；X-6型熔点测定仪，北京泰克仪器有限公司；柱色谱硅胶（200～300目）和TLC薄层板为青岛海洋化工厂产品。无水乙醇、正己烷、甲醇和醋酸乙酯等均为分析纯。

药材2010年6月12日采于齐齐哈尔市明月岛，室内阴干，经齐齐哈尔大学生命科学学院沙伟教授鉴定为猫眼草Euphorbia lunulata Bge. 全草，标本（EL-20100612）收藏于齐齐哈尔大学化学与化学工

干燥猫眼草全草4.4 kg切碎，室温下每次用无水乙醇20 L浸泡3 d，滤过，重复4次，合并乙醇浸提液，减压浓缩至小体积（约1 L），加1 L水混悬，每次用正己烷1.0 L萃取10次，合并正己烷萃取液减压浓缩至恒定质量，得正己烷萃取物194.0 g。取正己烷萃取物100.0 g用硅胶柱色谱分离，依次用正己烷-醋酸乙酯（9∶1、7∶3、0∶10）洗脱，依据TLC分析结果合并成分相近流出液，浓缩得到14个流分（F1～F14）。F13（2.7 g）用硅胶柱色谱分离，依次用正己烷-醋酸乙酯（6∶4、4∶6、0∶10）洗脱，得到9个流分（F13-1～F13-9）。Fr. 13-6（335.8 mg）用正相半制备HPLC（正己烷-醋酸乙酯6∶4，体积流量4 mL/min）分离，得到6个流分（Fr13-6-1～F13-6-6）。F13-6-5（72.4 mg）用反相半制备HPLC（甲醇-乙腈-水5∶2∶3，体积流量4 mL/min）分离，得到化合物1（23.4 mg，t_R＝17.88 min）。

化合物1：无色针晶（醋酸乙酯），mp 147.0～148.5 ℃；HR-ESI-MS m/z: 800.325 8，给出分子式C₄₁H₅₂O₁₆（计算值800.325 5）；${\rm{UV \lambda }}_{\max }^{{\rm{MeOH}}}$(nm): 202 (4.73),228 (4.08)；${\rm{IR }}\nu _{\max }^{{\rm{KBr}}}$(cm^-1): 1 721,1 604,1 590,1 492,1 468。¹H-NMR (600 MHz,CDCl₃) 在δ 8.04 (2H,d,J = 8.4. Hz),7.58 (1H,t,J = 8.4 Hz),7.45 (2H,t,J = 8.4 Hz) 给出1个可能为苯甲酰基的结构片段；在δ 2.15 (3H,s),2.14 (3H,s),2.13 (3H,s),2.11 (3H,s),2.10 (3H,s) 处给出5个可能为乙酰基上甲基的单峰信号；在δ 1.52 (3H,s),1.01 (3H,s),0.76 (3H,s) 处给出3个单峰的甲基信号；在δ 1.21 (6H,d,J = 6.9 Hz) 处给出2个双峰的甲基信号；在δ 1.22 (3H,d,J = 7.1 Hz) 处给出1个双峰的甲基信号；还在δ 6.20～4.00给出7个可能为连氧碳或双键碳上质子的信号。¹³C-NMR (150 MHz,CDCl₃) 显示有41个碳。其中，在δ 210.2有1个酮羰基；在δ 174.8,170.0,169.8,169.2,168.6,168.4和164.9给出7个酯羰基；在δ 141.4,133.4,129.9 (2C),129.2,128.5 (2C) 和112.8给出8个不饱和碳，推测可能含有1个苯环和1个双键；在δ 92.6,86.7,78.0,77.5,69.5,68.8,67.6,58.5和57.1的9个信号可能均为连氧碳。在HMQC谱中，有5个质子δ 6.14 (1H,s),5.77 (1H,d,J = 3.6 Hz),5.60 (1H,d,J = 3.6 Hz),5.49 (1H,s),5.01 (1H,d,J = 4.2 Hz) 分别与δ 58.5,69.5,78.0,68.8和67.6相关，表明它们均为连氧碳上质子；由δ 5.04 (1H,brs) 和5.01 (1H,brs) 的2个质子都与δ 112.8碳相关，表明可能存在1个端基（或环外）双键。根据以上结果，根据文献报道^[2]，推测该化合物可能具有多酰化的假白榄烷型二萜的结构。

由HMBC谱（图 1）可知，δ 1.21 (6H,d,J = 6.9 Hz) 的2个双峰甲基上质子都与羰基碳δ 174.8相关，表明可能存在1个异丁酰基；苯环上2个质子δ 8.04 (2H,d,J = 8.4. Hz) 与羰基碳δ 164.9相关，表明存在苯甲酰基；双峰甲基上质子δ 1.22 (3H,d,J = 7.1 Hz) 与酮羰基碳δ 210.2及连氧碳δ 57.1相关，表明羰基在14位，环氧环在11、12位；连氧碳上质子δ 6.14 (1H,s) 和δ 5.49 (1H,s) 都与δ_C 141.4和112.8相关，表明在6、17位存在环外双键；由δ 5.49 (1H,s) 与异丁酰基碳δ 174.8相关，推得7位连有异丁酰氧基；由δ 5.77 (1H,d,J = 3.6 Hz) 与苯甲酰基碳δ_c 164.9相关，推得8位连有苯甲酰氧基，同样，由δ 5.60 (1H,d,J = 3.0 Hz) 与δ 168.4相关、δ 6.14 (1H,s) 与δ_C 168.6相关、δ 5.01 (1H,d,J = 4.2 Hz) 与δ_C 169.2相关，推得3、5、9位都连有乙酰基。再结合¹H-¹H COSY相关，推断化合物1的平面结构为2,3,5,9,15-pentaacetoxy- 11,12-epoxy-7-isobutyryl-8-benzoyloxyjatropha-6(17)-en-14-one，见图 1。

图 1 化合物1的结构及主要NOESY和1H-1H COSY相关Fig.1 Structure and key NOESY and 1H-1H COSY correlations of compound 1

关于相对构型，由NOESY实验结果（图 1）可知，H-4与H-7相关，H-9与H-5、H-18相关，H-12与H-18、H-13相关，依据文献中esulatin A^[4]的结构，确定其结构为2α,3β,5α,9α,15β-pentaacetoxy- 11,12-epoxy-7β-isobutyryl-8α-benzoyloxyjatropha-6(17)-en-14-one，命名为8-苯甲酰基-猫眼草素，其波谱数据见表 1。

表 1(Table 1)

表 1 化合物1的核磁共振波谱数据 Table 1 NMR data of compound 1 碳位 δC δH 1H-1H COSY HMBC 1 46.1 3.75 (d,J = 16.2 Hz) H-1b,H-3 H-3,H-4,H-16 2.05 (d,J = 16.2 Hz) H-1a 2 86.7 H-1,H-3,H-4,H-16 3 78.0 5.60 (d,J = 3.6 Hz) H-1a,H-4 H-1,H-4,H-5 4 49.8 3.04 (dd,J = 3.6,1.8 Hz) H-3,H-5 H-3,H-5 5 67.6 6.14 (brs) H-4,H-17 H-3,H-17 6 141.4 H-4,H-7,H-8 7 68.8 5.49 (s) H-8,H-17 H-5,H-8,H-9,H-17 8 69.5 5.77 (d,J = 3.6 Hz) H-7,H-9 H-9 9 77.5 5.01,(d,J = 4.2 Hz) H-8 H-8,H-18,H-19 10 39.5 H-8,H-12,H-18,H-19 11 58.5 3.05 (d,J = 2.8 Hz) H-12 H-12,H-18,H-19 12 57.1 3.41 (d,J = 2.8 Hz) H-11,H-13 H-11,H-20 13 37.1 3.71 (m) H-12,H-20 H-11,H-20 14 210.2 H-1,H-4,H-20 15 92.6 H-3,H-5,H-13 16 18.1 1.52 (s) H-1,H-3 17 112.8 5.04 (s),5.01 (s) H-5,H-7 H-5,H-7 18 23.6 1.01 (s) H-11 19 17.5 0.76 (s) H-9,H-11 20 15.3 1.22 (d,J = 7.1 Hz) H-12 2-OAc 169.8,22.2 2.13 (s) 3-OAc 168.6,21.2 2.11 (s) H-3 5-OAc 168.4,21.1 2.15 (s) H-5 9-OAc 169.2,20.8 2.10 (s) H-9 15-OAc 170.0,21.2 2.14 (s) 7-O-iBu 174.8 H-7 2′ 33.9 2.62 (m) H-3′,H-4′ H-3′,H-4′ 3′ 19.0 1.21 (d,J = 6.9 Hz) H-2′ H-2′,H-4′ 4′ 18.4 1.21 (d,J = 6.9 Hz) H-2′ H-2′,H-3′ 8-OBz 164.9 H-8 1″ 133.4 2″ 129.9 8.04 (d,J = 8.4 Hz) H-3″ 3″ 128.5 7.45 (t,J = 8.4 Hz) H-2″,H-4″ 4″ 129.2 7.58 (t,J = 8.4 Hz) H-3″,H-5″ 5″ 128.5 7.45 (t,J = 8.4 Hz) H-4″,H-6″ 6″ 129.9 8.04 (d,J = 8.4 Hz) H-5″

表 1 化合物1的核磁共振波谱数据 Table 1NMR data of compound 1