甘草中2个新三萜皂苷

引用本文	doi: 10.7501/j.issn.0253-2670.2015.11.002

冷晶, 朱云祥, 陈璐琳, 王书芳. 甘草中2个新三萜皂苷[J]. 中草药, 2015, 46(11): 1576-1582. 复制到剪切板

LENG Jing, ZHU Yun-xiang, CHEN Lu-lin, WANG Shu-fang. Two new triterpenoid saponins from roots and rhizomes of Glycyrrhiza uralensis[J]. Chinese Traditional and Herbal Drugs, 2015, 46(11): 1576-1582. 复制到剪切板

甘草中2个新三萜皂苷

冷晶

, 朱云祥, 陈璐琳, 王书芳通讯作者

浙江大学药学院药物信息学研究所, 浙江杭州 310058

收稿日期: 2015-02-02;

基金项目：国家重点基础研究发展计划("973"计划)项目(2012CB518405)

作者简介：冷晶,女,硕士,从事中药质量控制研究。E-mail:jr0913@126.com

通讯作者：王书芳Tel:(0571)88208426E-mail:wangsf@zju.edu.cn

摘要：目的对甘草Glycyrrhiza uralensis 根及根茎的化学成分进行研究。方法采用硅胶柱、ODS柱色谱、制备液相色谱等分离技术进行分离纯化, 利用UV、MS、1D-NMR、2D-NMR等波谱数据鉴定化合物结构。结果从甘草正丁醇部分分离得到14个化合物, 分别鉴定为macedonoside E(1)、22β-乙酰基乌拉尔甘草皂苷C(2)、甘草酸(3)、乌拉尔甘草皂苷F(4)、甘草皂苷G₂(5)、22β-乙酰基甘草醛(6)、甘草酸甲酯(7)、甘草素(8)、柚皮素(9)、异甘草素(10)、芒柄花苷(11)、甘草苷(12)、异佛来心苷(13)、芹糖甘草苷(14)。结论化合物1和2为新化合物。

关键词：甘草 macedonoside E 22β-乙酰基乌拉尔甘草皂苷C 柚皮素芒柄花苷甘草苷

Two new triterpenoid saponins from roots and rhizomes of Glycyrrhiza uralensis

LENG Jing

, ZHU Yun-xiang, CHEN Lu-lin, WANG Shu-fang Corresponding author

Pharmaceutical Informatics Institute, College of Pharmaceutical Sciences, Zhejiang University, Hangzhou 310058, China

Abstract: Objective To study the chemical constituents from the roots and rhizomes of Glycyrrhiza uralensis. Methods The roots and rhizome of G. uralensis were extracted with 95% EtOH. Then the extract was partitioned with petroleum ether, ethyl acetate, and n-butanol successively. The n-butanol fraction was isolated by silica gel and ODS column chromatography and preparative HPLC. The structures of compounds were identified by spectroscopic methods (UV, MS, 1D-NMR, and 2D-NMR). Results Fourteen compounds were obtained from the n-butanol fraction. They were macedonoside E (1), 22β-acetyl-uralsaponin C (2), glycyrrhizic acid (3), uralsaponin F (4), licorice-saponin G₂ (5), 22β-acetoxyl-glycyrrhaldehyde (6), 3β-O-[β-D-(6-methyl)-glucuronopyranosyl-(1→2)-β-D-glucuronopyranosyl]-glycyrrhizic acid (7), liquiritigenin (8), naringenin (9), isoliquiritigenin (10), ononin (11), liquiritin (12), isoviolanthin (13), and liquiritin apioside (14). Conclusion Macedonoside E (1) and 22β-acetyl-uralsaponin C (2) are new compounds.

Key words: roots and rhizomes of Glycyrrhiza uralensis macedonoside E 22β-acetyl-uralsaponin C naringenin ononin liquiritin

甘草Glycyrrhizae Radix et Rhizoma是豆科（Leguminosae）甘草属Glycyrrhiza Linn. 植物的干燥根和根茎，始载于《神农本草经》，为我国传统中药，有“十方九草”之美誉，被大量应用于临床配方；被《中国药典》2010年版收录为甘草Glycyrrhiza uralensis Fisch.、胀果甘草Glycyrrhiza inflata Bat. 和光果甘草Glycyrrhiza glabra L. 的干燥根和根茎。其中甘草分布最广，主要分布于中国的华北、东北和西北地区，胀果甘草分布于新疆及甘肃西北部，而光果甘草仅产于我国新疆地区。现有研究表明，甘草主要化学成分为三萜和黄酮类，此外，还含有生物碱、香豆素等。为了更深入地研究甘草的物质基础，本实验对甘草的化学成分进行了研究，从甘草95%乙醇提取物正丁醇萃取部分分离得到14个化合物，包括7个三萜皂苷和7个黄酮类成分，分别鉴定为macedonoside E（1）、22β-乙酰基乌拉尔甘草皂苷C（22β-acetyl-uralsaponin C，2）、甘草酸（glycyrrhizic acid，3）、乌拉尔甘草皂苷F（uralsaponin F，4）、甘草皂苷G₂（licorice-saponin G₂，5）、22β-乙酰基甘草醛（22β-acetoxyl-glycyrrhal-dehyde，6）、甘草酸甲酯（3β-O-[β-D-(6-methyl)- glucuronopyranosyl-(1→2)-β-D-glucuronopyranosyl]- glycyrrhizic acid，7）、甘草素（liquiritigenin，8）、柚皮素（naringenin，9）、异甘草素（isoliquiritigenin，10）、芒柄花苷（ononin，11）、甘草苷（liquiritin，12）、异佛来心苷（isoviolanthin，13）、芹糖甘草苷（liquiritin apioside，14）。其中化合物1和2为2个新三萜皂苷类化合物。

1 仪器与材料

200 L提取罐（浙江苍南县立瓯石化设备有限公司），减压蒸馏器（浙江苍南县立瓯石化设备有限公司）；Bruker AV-500型核磁共振仪（Bruker BioSpin公司）；Buchi688型中压液相色谱系统（BÜCHI，瑞士）；Agilent 1100型制备液相色谱仪（Agilent，美国），制备用HPLC色谱柱为Zorbax SB-C₁₈（250 mm×21.2 mm，7 μm）；Agilent1100高效液相色谱仪，配在线真空脱气机、四元梯度泵、自动进样器、柱温箱、G1315B-DAD检测器，G1314A-VWD检测器（Agilent，美国），分析用色谱柱为Zorbax SB-C₁₈（250 mm×4.6 mm，5 μm）；Finnigan LCQ Daca XPplus离子阱质谱仪（Thermo Fisher，美国），Thermo Finnigan Xcalibur 1.3工作站；R-200旋转蒸发仪（BÜCHI，瑞士）；Minispin离心机（Eppendorf，德国）；KQ-250B型超声仪（40 KHz，昆山市超声仪器有限公司）；色谱纯乙腈（Merck，德国）、甲酸（ROE Scientific Inc.，美国）；超纯水（Millipore，美国）；柱色谱硅胶（100～200、200～300、300～400目）、GF₂₅₄薄层色谱硅胶板（青岛海洋化工厂）；分析纯石油醚、醋酸乙酯及甲醇（浙江常青化工有限公司）。

甘草饮片购自于浙江中医药大学中药饮片厂，产自甘肃陇西，经浙江大学药学院陈柳蓉副教授鉴定为豆科甘草属植物甘草Glycyrrhiza uralensis Fisch. 的根和根茎，原生药样本（GC-120509）存放于浙江大学药物信息学研究所。

2 提取与分离

甘草饮片20 kg，用8倍量的95%乙醇回流提取3次，每次2 h，将所得提取物回收至无醇味后，得约4 L浓缩液，依次用等体积的石油醚、醋酸乙酯、正丁醇各萃取3次，得到石油醚萃取物19 g，醋酸乙酯萃取物347 g，正丁醇萃取物409 g。将正丁醇部分进行硅胶柱色谱，用二氯甲烷-甲醇不同比例（100∶1→0∶1）进行梯度洗脱，经薄层色谱分析后，合并相同流分，得到4个部分。二氯甲烷-甲醇（1∶1）洗脱部分再经ODS柱色谱，分别用10%和20%乙腈水洗脱，得到化合物1（4.1 mg）和2（5.5 mg）；其余各部分经多次中压硅胶柱色谱、ODS柱色谱以及高效液相制备色谱等手段进一步分离纯化，得到化合物3（11.3 mg）、4（5.1 mg）、5（31.3 mg）、6（12.9 mg）、7（190.0 mg）、8（104.0 mg）、9（11.0 mg）、10（179.0 mg）、11（15.9 mg）、12（136.1 mg）、13（3.6 mg）、14（14.3 mg）。

3 结构鉴定

化合物1：白色固体。(nm): 254。Q-TOF-MS分析给出m/z 837.392 8 [M－H]^-,839.406 0 [M＋H]⁺，其分子式为C₄₂H₆₂O₁₇。其¹H-NMR (500 MHz,CD₃OD) 在δ_H 0.81 (3H,s,H-28),0.83 (3H,s,H-24),1.06 (3H,s,H-23),1.12 (3H,s,H-26),1.13 (3H,s,H-25),1.19 (3H,s,H-29) 和1.42 (3H,s,H-27) 显示有7个甲基单峰信号，这是齐墩果烷型三萜类化合物的特征。¹H-NMR中2个糖端基质子信号δ_H4.51 (1H,d,J = 7.4 Hz,H-1′) 和δ_H4.62 (1H,d,J = 7.7 Hz,H-1″) 及端基碳信号δ_C105.4 (C-1′),106.4 (C-1″) 与甘草酸（化合物3）中的2个葡萄糖醛酸β-D-GlcA-(2→1)-β-D-GlcA-端基质子和端基碳的化学位移及耦合常数基本一致，结合分子式，可推测该化合物为连有2个β-D-葡萄糖醛酸的三萜皂苷；HMBC谱中δ_H 4.51 (1H,d,J = 7.4 Hz,H-1′) 与δ_C 90.9 (C-3) 的相关信号表明糖基连接在三萜苷元的C-3位，HMBC谱中δ_H 4.62 (1H,d,J = 7.7 Hz,H-1″) 与δ_C 84.1 (C-2′) 的相关信号证明2个葡萄糖醛酸的链接顺序为β-D-GlcA-(2→1)-β- D-GlcA。双键质子信号δ_H 5.58 (1H,s,H-12)、双键次甲基碳信号δ_C 129.1 (C-12)、季碳信号173.2 (C-13) 及羰基碳信号δ_C 203.0 (C-11) 表明该化合物结构为11-oxo,Δ¹²-齐墩果烷型三萜^[1]。δ_C 180.1 (C-30) 表明结构中有1个羧基，且HMBC谱（图 1）中可见δ_H 0.81 (3H,s,H-29) 与δ_C 37.8 (C-19),71.0 (C-21),180.1 (C-30) 的相关信号；研究发现，如果C-30位为甲基，则NOESY谱（图 1）中可见H-18(β) 和C-30位甲基的相关信号，在化合物1的NOESY谱中有δ_H 2.21 (1H,d,J = 13.4 Hz,H-18) 与δ_H 0.81 (3H,s,H-28) 的相关信号，表明H-18为β-H，但未见有δ_H 2.21 (1H,d,J = 13.4 Hz,H-18) 与δ_H 1.19 (3H,s,H-29) 的相关信号，表明该齐墩果烷型三萜的C-30为羧基、C-29为甲基。NOESY谱中δ_H 3.18 (1H,dd,J = 11.6,4.4 Hz,H-3) 与1.06 (3H,s,H-23)的相关信号、δ_H4.10 (1H,brs,H-21) 与0.81 (3H,s,H-29) 的相关信号证明H-3与H-21均为α-H。综上所述，确定化合物1的结构见图 1，¹H-、¹³C-NMR及DEPT谱数据见表 1，与化合物macedonoside A的¹³C-NMR数据比较，表明该化合物与macedonoside A的结构相近^[1]。经查询，在CA中未见有该化合物结构的报道，该化合物为一新化合物，命名为macedonoside E。

图 1 化合物1和2的结构及重要相关关系Fig.1 Structures and key correlations of compounds 1 and 2

图1

化合物2：白色固体。(nm): 254。Q-TOF-MS分析给出其分子式为C₄₄H₆₆O₁₇，其正离子模式下为m/z 889.421 5 [M＋Na]⁺。与化合物1类似，在化合物2的¹H-NMR谱中的高场可见齐墩果烷型三萜特征的7个甲基单峰质子信号δ_H0.71 (3H,s,H-24),0.76 (3H,s,H-28),0.84 (3H,s,H-29),0.94 (3H,s,H-23),1.03 (6H,s,H-25,26) 和1.34 (3H,s,H-27)，此外，在δ_H1.98 (3H,s) 有1个甲基单峰信号；2个糖端基质子信号δ_H 4.32 (1H,d,J = 7.4 Hz,H-1′),4.45 (1H,d,J = 7.7 Hz,H-1″) 及端基碳信号δ_C103.5 (C-1′),104.3 (C-1″)，与22β-乙酰基甘草醛（6）中2个葡萄糖醛酸β-D-GlcA-(2→1)-β-D-GlcA-端基质子及端基碳的化学位移和耦合常数基本一致，表明化合物2中含有2个β-D-GlcA。¹H-和¹³C-NMR中显示有α,β-不饱和酮的质子信号和碳信号：δ_H5.55 (s,H-12) 和δ_C 199.1 (C-11),127.7 (C-12),168.5 (C-13)；¹³C-NMR中除了糖基上连氧碳信号外，还有2个连氧次甲基碳信号δ_C88.0 (C-3),76.6 (C-22)、1个连氧亚甲基碳信号δ_C66.3 (C-30)，这些与uralsaponin C的¹³C-NMR数据相似^[2]；另外，碳谱上还可见羰基碳信号δ_C169.8，而且HMBC谱中δ_C 169.8与δ_H 1.98 (3H,s) 和δ_H4.53 (1H,brs,H-22) 均有相关信号，表明C-22位上连有1个乙酰氧基。δ_C 88.0 (C-3) 与δ_H 4.32 (1H,d,J = 7.4 Hz,H-1′) 的相关峰及δ_C 82.1 (C-2′) 与δ_H 4.45 (1H,d,J = 7.7 Hz,H-1″) 的相关信号表明糖基位于苷元C-3位，2个β-D-GlcA为2→1连接。NOESY谱中δ_H 3.03 (H-3，^*表示与其他信号有重叠) 与δ_H 0.94 (3H,s,H-23) 的相关信号表明H-3为α构型；δ_H 4.53 (1H,brs,H-22),1.34 (3H,s,H-27) 的相关信号证明H-22为α构型；δ_H 2.27 (1H,brd,J = 11.7 Hz,H-18) 与0.76 (s,H-28) 的相关信号表明H-18为β-H，δ_H 2.27 (1H,brd,J = 11.7 Hz,H-18) 与3.23、3.36 (H-30) 的相关信号证明C-30为羟甲基，C-29为甲基。综上所述，化合物2的结构如图 1所示，¹H-、¹³C-NMR数据见表 1。经查询，化合物2为一新化合物，该化合物结构比uralsaponin C多了1个乙酰基，故将其命名为22β-乙酰基乌拉尔甘草皂苷C。

化合物3：白色胶状固体。ESI-MS m/z: 821 [M－H]^-,823 [M＋H]⁺；(nm): 254。¹H-NMR (500 MHz,CD₃OD) δ: 5.57 (1H,s,H-12),4.63 (1H,d,J = 7.7 Hz,H-1″),4.52 (1H,d,J = 7.4 Hz,H-1′),2.44 (1H,s,H-9),2.19 (1H,dd,J = 13.4,3.2 Hz,H-18),1.42 (3H,s,H-27),1.17 (3H,s,H-29),1.13 (6H,s,H-25,26),1.06 (3H,s,H-23),0.83 (6H,s,H-24,28)；¹³C-NMR (125 MHz,CD₃OD) 数据见表 2。以上数据与文献报道一致^{[3, 4]}，故鉴定化合物3为甘草酸。

化合物4：白色固体。ESI-MS m/z: 895 [M－H]^-,897 [M＋H]⁺；(nm): 254。¹H-NMR (500MHz,CD₃OD) δ: 5.65 (1H,s,H-12),4.83 (1H,d,J = 7.8 Hz,H-1″),4.55 (2H,s,H-1′,22),2.47 (1H,s,H-9),1.98 (3H,s,COCH₃),1.46 (3H,s,H-27),1.20 (3H,s,H-23),1.17 (3H,s,H-29),1.14 (3H,s,H-26),1.08 (3H,s,H-25),0.85 (3H,s,H-28)；¹³C-NMR (125 MHz,CD₃OD) 数据见表 2。以上数据与文献报道一致^[2]，故鉴定化合物4为乌拉尔甘草皂苷F。

表 1 化合物1 (CD₃OD) 和2 (DMSO-d₆) 的¹H-NMR、¹³C-NMR及DEPT谱数据 Table 1 ¹H-NMR,¹³C-NMR,and DEPT data of compounds 1 (CD₃OD) and 2 (DMSO-d₆)

碳位	1			2
碳位	δ_C	DEPT	δ_H	δ_C	DEPT	δ_H
1	40.4	CH₂	2.67 (brd,J = 13.5 Hz),1.00	38.5	CH₂	2.54,0.92
2	27.2	CH₂	1.85,1.72	26.1	CH₂	1.75,1.62
3	90.9	CH	3.18 (dd,J = 11.6,4.4 Hz)	88.0	CH	3.03
4	40.7	C	—	38.9	C	—
5	56.7	CH	0.77 (d,J = 11.4 Hz)	54.3	CH	0.71
6	18.6	CH₂	1.59,1.47	16.9	CH₂	1.49 (brd,J = 12.3 Hz),1.28
7	34.1	CH₂	1.72,1.47	32.1	CH₂	1.62,1.28
8	46.7	C	—	44.9	C	—
9	63.2	CH	2.46 (s)	61.0	CH	2.32 (s)
10	38.2	C	—	36.3	C	—
11	203.0	C	—	199.1	C	—
12	129.1	CH	5.58 (s)	127.7	CH	5.55 (s)
13	173.2	C	—	168.5	C	—
14	46.7	C	—	43.1	C	—
15	27.8	CH₂	1.85,1.72	25.7	CH₂	1.75,1.62
16	30.5	CH₂	1.16	25.5	CH₂	1.95,1.16
17	33.5	C	—	35.8	C	—
18	50.2	CH	2.21 (brd,J = 13.4 Hz)	44.0	CH	2.27 (brd,J = 13.9 Hz)
19	37.8	CH₂	1.59	38.8	CH₂	1.62,1.28
20	45.0	C	—	34.9	C	—
21	71.0	CH	4.10 (brs)	33.1	CH₂	1.62,1.38
22	45.3	CH₂	1.72,1.59	76.6	CH	4.53 (brs)
23	28.4	CH₃	1.06 (s)	27.2	CH₃	0.94 (s)
24	17.0	CH₃	0.83 (s)	16.0	CH₃	0.71 (s)
25	17.2	CH₃	1.13 (s)	16.2	CH₃	1.01 (s)
26	19.4	CH₃	1.12 (s)	18.3	CH₃	1.01 (s)
27	23.3	CH₃	1.42 (s)	23.0	CH₃	1.34 (s)
28	29.7	CH₃	0.81 (s)	20.9	CH₃	0.76 (s)
29	24.5	CH₃	1.19 (s)	27.3	CH₃	0.84 (s)
30	180.1	C	—	66.3	CH₂	3.37,3.22
22-CO	—		—	169.8	C	—
22-COCH₃	—		—	21.1	CH₃	1.97 (s)
1′	105.4	CH	4.51 (d,J = 7.4 Hz)	103.5	CH	4.32 (d,J = 7.4 Hz)
2′	84.1	CH	3.53	82.1	CH	3.30
3′	77.7	CH	3.57	76.2	CH	3.37
4′	73.3	CH	3.57	71.7	CH	3.22
5′	77.5	CH	3.74	76.2	CH	3.46
6′	173.0	C	—	170.7	C	—
1′′	106.4	CH	4.62 (d,J = 7.7 Hz)	104.3	CH	4.45 (d,J = 7.7 Hz)
2′′	76.5	CH	3.30	75.0	CH	3.03
3′′	77.3	CH	3.40 (t,J = 9.1 Hz)	75.7	CH	3.16 (t,J = 8.7 Hz)
4′′	73.2	CH	3.53	71.7	CH	3.22
5′′	76.5	CH	3.74	75.7	CH	3.46
6′′	173.0	C	—	170.7	C	—

表 1 化合物1 (CD₃OD) 和2 (DMSO-d₆) 的¹H-NMR、¹³C-NMR及DEPT谱数据 Table 1 ¹H-NMR,¹³C-NMR,and DEPT data of compounds 1 (CD₃OD) and 2 (DMSO-d₆)

表 2 化合物3～7的¹³C-NMR数据 (^aCD₃OD,^bDMSO-d₆, 125 MHz) Table 2 ¹³C-NMR data of compounds 3—7 (^aCD₃OD,^bDMSO-d₆,125 MHz)

碳位	3^a	4^a	5^b	6^b	7^a
1	40.4	40.1	32.5	38.5	40.3
2	27.2	27.2	25.6	25.6	27.2
3	90.9	90.9	88.5	88.1	91.1
4	40.7	45.1	43.4	39.0	40.7
5	56.6	56.9	54.9	54.3	56.6
6	18.6	18.9	17.9	17.0	18.6
7	33.9	33.9	38.6	31.9	33.9
8	46.9	47.0	44.9	45.0	46.9
9	63.3	63.0	61.0	61.1	63.2
10	38.2	37.9	36.2	36.3	38.2
11	202.9	202.5	199.0	199.0	202.8
12	129.1	129.4	127.3	127.7	129.1
13	173.0	171.6	169.9	168.1	173.0
14	44.7	44.9	42.9	43.1	44.7
15	27.5	27.5	26.1	25.9	27.7
16	27.7	26.4	25.8	24.6	27.5
17	33.1	37.0	31.6	35.2	33.1
18	50.0	45.8	48.1	43.2	50.0
19	42.5	40.7	40.7	35.8	42.5
20	45.0	41.5	43.1	44.2	45.0
21	32.1	35.7	30.4	33.7	32.1
22	39.2	78.7	37.6	76.0	39.2
23	28.4	23.1	22.2	27.2	28.3
24	17.0	64.1	62.0	16.0	16.8
25	17.2	17.0	16.1	16.2	17.2
26	19.4	19.2	18.1	18.3	19.4
27	24.0	24.5	23.0	23.7	24.0
28	29.4	22.4	28.5	21.2	29.4
29	28.9	29.6	27.9	23.1	28.9
30	180.6	180.6	177.8	204.2	180.5
22-CO		172.3		169.5
22-COCH₃		21.1		20.8
1′	105.4	104.4	103.0	103.5	105.4
2′	84.1	80.9	79.8	82.5	84.2
6′	172.5	172.4	170.4	170.4	172.7
1′′	106.3	104.7	103.2	104.6	106.5
2′′	76.4	75.4	74.1	75.0	76.3
6′′	172.5	172.4	170.3	170.4	170.9
6′′-COOCH₃					52.9

表 2 化合物3～7的¹³C-NMR数据 (^aCD₃OD,^bDMSO-d₆, 125 MHz) Table 2 ¹³C-NMR data of compounds 3—7 (^aCD₃OD,^bDMSO-d₆,125 MHz)

化合物5：白色固体。ESI-MS m/z: 837 [M－H]^-,839 [M＋H]⁺；(nm): 254。¹H-NMR (500 MHz,DMSO-d₆) δ: 5.39 (1H,s,H-12),4.63 (1H,d,J = 7.7 Hz,H-1″),4.41 (1H,d,J = 7.3 Hz,H-1′),2.32 (1H,s,H-9),1.32 (3H,s,H-27),1.08 (3H,s,H-29),1.06 (3H,s,H-23),1.00 (6H,s,H-25,26),0.74 (3H,s,H-28)；¹³C-NMR (125 MHz,DMSO-d₆) 数据见表 2。以上数据与文献报道一致^[5]，故鉴定化合物5为甘草皂苷G₂。

化合物6：白色固体。ESI-MS m/z: 863 [M－H]^-,865 [M＋H]⁺,865 [M＋H]⁺,689 [M＋H－Glc]⁺,513 [M＋H－2Glc]⁺,495 [M＋H－2Glc－H₂O]⁺；(nm): 254。¹H-NMR (500 MHz,DMSO-d₆) δ: 9.36 (1H,s,H-30),5.48 (1H,s,H-12),4.47 (1H,d,J = 7.7 Hz,H-1″),4.36 (1H,d,J = 7.4 Hz,H-1′),2.33 (1H,s,H-9),1.93 (3H,s,COCH₃),1.40 (3H,s,H-27),1.02 (6H,s,H-25,26),0.94 (3H,s,H-23),0.90 (3H,s,H-29),0.70 (3H,s,H-24),0.67 (3H,s,H-28)；¹³C-NMR (125 MHz,DMSO-d₆) 见表 2。以上数据与文献报道一致^[6]，故鉴定化合物6为22β-乙酰基甘草醛。

化合物7：白色固体。ESI-MS m/z: 835 [M－H]^-,837 [M＋H]⁺；(nm): 252。¹H-NMR (500 MHz,CD₃OD) δ: 5.57 (1H,s,H-12),4.63 (1H,d,J = 7.8 Hz,H-1″),4.50 (1H,d,J = 7.6 Hz,H-1′),3.74 (3H,s,COOCH₃),2.44 (1H,s,H-9),1.42 (3H,s,H-27),1.17 (3H,s,H-29),1.13 (6H,s,H-25,26),1.03 (3H,s,H-23),0.83 (3H,s,H-28),0.79 (3H,s,H-24)；¹³C-NMR (125 MHz,CD₃OD) 见表 2。以上数据与文献报道一致^[2]，故鉴定化合物7为甘草酸甲酯。

化合物8：白色针状结晶（甲醇）。ESI-MS m/z: 255 [M－H]^-,511 [2M－H]^-,135 [M－H－120]^-（甘草素特征碎片）；(nm): 236,274,318。¹H-NMR (500 MHz,CD₃OD) δ: 7.70 (1H,d,J = 8.7 Hz,H-5),7.29 (2H,d,J = 8.5 Hz,H-2′,6′),6.81 (2H,d,J = 8.6 Hz,H-3′,5′),6.48 (1H,dd,J = 8.7,2.3 Hz,H-6),6.34 (1H,d,J = 2.2 Hz,H-8),5.31 (1H,dd,J = 13.1,2.8 Hz,H-2),3.00 (1H,dd,J = 16.9,13.2 Hz,H-3),2.65 (1H,dd,J = 16.9,2.9 Hz,H-3)；¹³C-NMR (125 MHz,CD₃OD) δ: 193.5 (C-4),166.7 (C-7),165.5 (C-9),158.8 (C-4′),131.3 (C-1′),129.8 (C-5),129.0 (C-2′,6′),116.3 (C-3′,5′),114.9 (C-10),111.7 (C-6),103.8 (C-8),80.9 (C-2),44.8 (C-3)。以上数据与文献报道一致^[7]，故鉴定化合物8为甘草素。

化合物9：黄色固体粉末。ESI-MS m/z: 271 [M－H]^-,543 [2M－H]^-；(nm): 238,278,322。¹H-NMR (500 MHz,CD₃OD) δ: 7.31 (2H,d,J = 8.5 Hz,H-2′,6′),6.82 (2H,d,J = 8.6 Hz,H-3′,5′),5.89 (1H,d,J = 1.9 Hz,H-8),5.88 (1H,d,J = 1.9 Hz,H-6),5.32 (1H,dd,J = 12.9,2.9 Hz,H-2),3.10 (1H,dd,J = 17.1,13.0 Hz,H-3),2.68 (1H,dd,J = 17.1,3.0 Hz,H-3)；¹³C-NMR (125 MHz,CD₃OD) δ: 197.7 (C-4),168.7 (C-7),165.5 (C-5),164.9 (C-9),159.0 (C-4′),131.4 (C-1′),129.0 (C-2′,6′),116.3 (C-3′,5′),103.3 (C-10),97.2 (C-6),96.3 (C-8),80.5 (C-2),44.0 (C-3)。以上数据与文献报道一致^[8]，故鉴定化合物9为柚皮素。

化合物10：黄色针状结晶（甲醇）。ESI-MS m/z: 255 [M－H]^-,257 [M＋H]⁺；(nm): 240,336。¹H-NMR (500 MHz,CD₃OD) δ: 7.93 (1H,d,J = 8.9 Hz,H-6′),7.76 (1H,d,J = 15.4 Hz,H-β),7.58 (2H,d,J = 8.6 Hz,H-2,6),7.57 (1H,d,J = 15.4 Hz,H-α),6.84 (2H,d,J = 8.6 Hz,H-3,5),6.41 (1H,dd,J = 8.9,2.4 Hz,H-5′),6.29 (1H,d,J = 2.4 Hz,H-3′)；¹³C-NMR (125 MHz,CD₃OD) δ: 193.5 (C=O),167.4 (C-4′),166.3 (C-2′),161.5 (C-4),145.6 (C-β),133.3 (C-6′),131.8 (C-2,6),127.8 (C-1),118.3 (C-α),116.9 (C-3,5),114.7 (C-1′),109.1 (C-5′),103.8 (C-3′)。以上数据与文献报道一致^[9]，故鉴定化合物10为异甘草素。

化合物11：淡黄色晶体（甲醇）。ESI-MS m/z: 475 [M＋HCOO]^-,431 [M＋H]⁺；(nm): 238,266,304。¹H-NMR (500 MHz,CD₃OD) δ: 8.25 (1H,s,H-2),8.16 (1H,d,J = 8.9 Hz,H-5),7.49 (2H,d,J = 8.9 Hz,H-2′,6′),7.26 (1H,d,J = 2.3 Hz,H-8),7.23 (1H,dd,J = 8.9,2.3 Hz,H-6),7.00 (2H,d,J = 8.9 Hz,H-3′,5′),5.12 (1H,d,J = 7.5 Hz,H-1″),3.83 (3H,s,4′-OCH₃)；¹³C-NMR (125 MHz,CD₃OD) δ: 178.0 (C-4),163.5 (C-7),161.2 (C-4′),159.3 (C-8a),155.3 (C-2),131.4 (C-2′,6′),128.3 (C-5),126.0 (C-1′),125.3 (C-3),120.2 (C-4a),117.1 (C-6),114.9 (C-3′,5′),104.9 (C-8),55.7 (4′-OCH₃)；glucose: 101.8 (C-1″),74.7 (C-2″),77.8 (C-3″),71.2 (C-4″),78.4 (C-5″),62.4 (C-6″)。以上数据与文献报道一致^[10]，故鉴定化合物11为芒柄花苷。

化合物12：白色固体。ESI-MS m/z: 417 [M－H]^-,835 [2M－H]^-,419 [M＋H]⁺,837 [2M＋H]⁺；(nm): 238,276,312。¹H-NMR (500 MHz,CD₃OD) δ: 7.73 (1H,d,J = 8.7 Hz,H-5),7.44 (2H,d,J = 8.7 Hz,H-2′,6′),7.15 (2H,d,J = 8.7 Hz,H-3′,5′),6.50 (1H,dd,J = 8.7,2.3 Hz,H-6),6.37 (1H,d,J = 2.2 Hz,H-8),5.45 (1H,dd,J = 12.9,2.9 Hz,H-2),4.95 (1H,d,J = 1.59 Hz,H-1″),3.90 (1H,dd,J = 12.1,2.1 Hz,H-6″a),3.70 (1H,dd,J = 12.1,5.6 Hz,H-6″b),3.04 (1H,dd,J = 16.9,12.9 Hz,H-3a),2.73 (1H,dd,J = 16.9,3.0 Hz,H-3b)；¹³C-NMR (125 MHz,CD₃OD) δ: 193.1 (C-4),166.8 (C-7),165.3 (C-8a),159.2 (C-4′),134.4 (C-1′),129.8 (C-5),128.7 (C-2′,6′),117.7 (C-3′,5′),114.9 (C-4a),111.8 (C-6),103.8 (C-8),80.6 (C-2),44.9 (C-3)；glucose: 102.1 (C-1″),74.8 (C-2″),78.1 (C-3″),71.3 (C-4″),77.9 (C-5″),62.4 (C-6″)。该化合物的氢谱和碳谱数据与化合物8非常相似，仅比化合物8多了1组葡萄糖信号，且其核磁数据与文献报道一致^{[11, 12]}，故鉴定化合物12为甘草苷。

化合物13：黄色粉末。ESI-MS m/z: 577 [M－H]^-,579 [M＋H]⁺；(nm): 240,278,340；¹H-NMR (500 MHz,DMSO-d₆) δ: 7.87 (2H,d,J = 8.3 Hz,H-2′,6′),6.93 (2H,d,J = 8.7 Hz,H-3′,5′),6.73 (1H,s,H-3),5.15 (1H,brs,H-1′′′),4.60 (1H,d,J = 9.8 Hz,H-1″),1.23 (3H,d,J = 5.8 Hz,Rha-CH₃)；¹³C-NMR (125 MHz,DMSO-d₆) δ: 181.6 (C-4,C=O),165.5 (C-2),162.7 (C-7),161.2 (C-8a),160.1 (C-4′),153.8 (C-5),128.3 (C-2′,6′),121.5 (C-1′),116.1 (C-3′,5′),109.4 (C-6),103.5 (C-8),102.5 (C-4a),101.9 (C-3)；glucose: 73.4 (C-1″),70.8 (C-2″),79.2 (C-3″),70.1 (C-4″),81.6 (C-5″),61.5 (C-6″)；rhamnose: 77.3 (C-1′′′),74.9 (C-2′′′),74.7 (C-3′′′),72.3 (C-4′′′),72.1 (C-5′′′),18.3 (C-6′′′)。以上数据与文献报道一致^[13]，故鉴定化合物13为异佛来心苷。

化合物14：黄色粉末。ESI-MS m/z: 549 [M－H]^-,1 099 [2M－H]^-,551 [M＋H]⁺,1 101 [2M＋H]⁺；(nm): 238,278,314。¹H-NMR (500 MHz,DMSO-d₆),δ: 7.64 (1H,d,J = 8.7 Hz,H-5),7.45 (2H,d,J = 8.7 Hz,H-2′,6′),7.04 (2H,d,J = 8.7 Hz,H-3′,5′),6.50 (1H,dd,J = 8.7,2.2 Hz,H-6),6.35 (1H,d,J = 2.1 Hz,H-8),5.51 (1H,dd,J = 12.9,2.7 Hz,H-2),5.35 (1H,d,J = 0.8 Hz,H-1′′′),4.96 (1H,d,J = 7.5 Hz,H-1″),3.15 (1H,overlap,H-3),2.66 (1H,dd,J = 16.7,2.8 Hz,H-3)；¹³C-NMR (125 MHz,DMSO-d₆) δ: 190.1 (C-4,C=O),164.9 (C-7),163.2 (C-8a),157.4 (C-4′),132.4 (C-1′),128.5 (C-5),128.2 (C-2′,6′),116.1 (C-3′,5′),113.5 (C-4a),110.7 (C-6),102.7 (C-8),79.4 (C-2),43.2 (C-3)；glucose: 98.6 (C-1″),77.1 (C-2″),77.0 (C-3″),70.0 (C-4″),75.8 (C-5″),60.7 (C-6″)；apiose: 108.8 (C-1′′′),76.1 (C-2′′′),78.8 (C-3′′′),74.1 (C-4′′′),64.4 (C-5′′′)。该化合物的氢谱和碳谱数据与化合物12非常相似，仅比化合物12多了1组芹糖信号，且其核磁数据与文献报道一致^[14]，故鉴定化合物14为芹糖甘草苷。

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中草药 2015, Vol. 46 Issue (11): 1576-1582	0	PDF