藤合欢Celastri Orbiculati Fructus为卫矛科（Celastraceae）植物南蛇藤Celastrus orbiculatus Thunb. 的干燥果实^[1]。秋季果实成熟时采摘，除去杂质，晒干。本品原收载于《辽宁省药品标准》1987年版^[2]和《辽宁省中药材标准》第一册^[3]，在东北有悠久的药用历史，曾作为合欢花的地方习用品使用，有补脾、安神、活血之功效，用于治疗神经衰弱、失眠。现代医学研究表明，藤合欢中主要含有黄酮类和倍半萜类成分，有镇静催眠、抗炎、抑制癌细胞增殖等作用^{[4, 5, 6]}。藤合欢的主产区在东北地区，尤其是在吉林和辽宁两省。该品种拟收载入《中国药典》2015年版一部，目前尚无较好的质量控制方法。因此，本实验选定山柰苷为指标建立测定方法，并对不同产地及不同贮藏年限的藤合欢进行质量评价。

岛津LC-2010C高效液相色谱仪，安捷伦1200（G1322A Degasser，G1329A ALS，G1316A TCC，G1314B VWD，G1315D DAD）。

山柰苷对照品购自中国食品药品检定研究院，批号111775-200701，质量分数为92.3%。试剂均为色谱纯。

样品均由辽宁省药品检验检测院王维宁教授鉴定为卫矛科植物南蛇藤Celastrus orbiculatus Thunb.的干燥果实。样品信息见表 1。

表 1(Table 1)

表 1 样品信息 Table 1 Sample information 编号 来源 收集地 日期 1 采集 辽宁本溪 2012-09 2 采集 辽宁海城 2011-09 3 采集 辽宁抚顺 2013-09 4 商品 辽宁沈阳 2012-12 5 商品 河北安国 2012-12 6 商品 辽宁大连 2013-04 7 采集 吉林集安 2012-09 8 采集 吉林柳河 2011-09 9 采集 吉林抚松 2013-09 10 商品 辽宁抚顺 2012-09 11 采集 辽宁牛心台 2013-09

表 1 样品信息 Table 1Sample information

取山柰苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成含46.334 650 μg/mL山柰苷对照品溶液。

取藤合欢样品粉末0.8 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇20 mL，称定质量，超声处理（功率200 W，频率40 kHz）30 min，放冷，再次称定质量，用甲醇补足减失的质量，滤过，取续滤液，即得。

色谱柱为Agilent Zorbax Eclipse Plus C₁₈柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相为甲醇-0.01 mol/L磷酸二氢钾溶液-冰醋酸（40∶60∶1.5），体积流量1.0 mL/min，检测波长254 nm，柱温30 ℃。精密吸取对照品及供试品溶液各10 μL，按上述色谱条件分析，结果分离度均大于1.5，且不受其他组分干扰，理论板数大于5 000，表明该方法专属性良好。色谱图见图 1。

图 1 对照品 (A) 和藤合欢 (B) 的HPLC图Fig.1 HPLC of kaempferitrin (A) and Celastri Orbiculati Fructus (B)

对照品溶液分别自动进样2、5、10、15、20 μL，相当于山柰苷0.092 7、0.231 7、0.463 3、0.695 0、0.926 7 μg，以进样量为横坐标（X，μg）对峰面积（Y）进行回归处理，计算得线性回归方程为Y＝3×10⁶ X＋7 788.8（r＝0.999 8），线性范围为0.092 7～0.926 7 μg。

按照“2.3”项下条件，对照品溶液连续进样6次，每次10 μL，结果RSD值为0.1%，仪器精密度良好。

精密称取样品（样品1）6份，制备供试品溶液，于“2.3”项下条件测定，山柰苷质量分数的RSD值为0.3%，表明重复性良好。

取供试品溶液1份（样品1），分别于0、2、4、8、12、18 h共进样6次，记录色谱图。计算18 h内峰面积的RSD值为1.3%，表明供试品溶液在18 h内稳定。

精密称取6份已测定的藤合欢药材粉末（样品1）0.4 g，分别加入对照品溶液适量，按“2.2”项下方法制备供试品溶液，按“2.3”项下条件测定并计算质量分数的回收率，山柰苷加样回收率为100.8%，RSD为1.1%。

按照“2.2”项下方法制备供试品溶液，按“2.3”项下条件测定，分析和计算样品中山柰苷的量。各批样品中山奈苷的量存在差异，差异大的批次量相差约5倍，说明产地和年限等都能影响到质量分数的高低，结果见表 2。

表 2(Table 2)

表 2 藤合欢中山柰苷的质量分数 Table 2 Contents of kaempferitrin in Celastri Orbiculati Fructus 编号 贮藏年限/年 质量分数/% 1 2 0.101 2 3 0.043 3 1 0.246 4 4 0.070 5 4 0.094 6 2 0.113 7 3 0.056 8 2 0.068 9 1 0.103 10 1 0.161 11 1 0.159

表 2 藤合欢中山柰苷的质量分数 Table 2Contents of kaempferitrin in Celastri Orbiculati Fructus

上述研究表明所建立的方法简单、准确，可有效控制藤合欢的质量。结果表明采自辽宁和吉林两地的样品在山柰苷质量分数上有一定的差别，但不显著，相同年份样品横向比较，辽宁地区样品山柰苷量略高于吉林地区。分析其原因可能与成果过程中的光照时长及水分养分的充足情况有关。对不同年份样品量的纵向比较显示，贮藏时间越长，所含山柰苷的质量分数就越少，平均质量分数在0.04%～0.25%。