白酒草化学成分研究

引用本文	doi: 10.7501/j.issn.0253-2670.2014.09.003

乔琳, 苏艳芳, 郭成云, 解笑瑜, 阙梦, 陈磊. 白酒草化学成分研究[J]. 中草药, 2014, 45(9): 1211-1218. 复制到剪切板

QIAO Lin, SU Yan-fang, GUO Cheng-yun, XIE Xiao-yu, QUE Meng, CHEN Lei. Chemical constituents of Conyza japonica[J]. Chinese Traditional and Herbal Drugs, 2014, 45(9): 1211-1218. 复制到剪切板

白酒草化学成分研究

乔琳¹, 苏艳芳^1,2 , 郭成云¹, 解笑瑜¹, 阙梦¹, 陈磊³

1. 天津大学药物科学与技术学院天津市现代药物传递及功能高效化重点实验室, 天津 300072;
2. 天津中医药大学天津市中药化学与分析重点实验室, 天津 300193;
3. 天津天士力现代中药资源有限公司, 天津 300410

收稿日期: 2014-2-17;

基金项目：国家自然科学基金资助项目（30200024）；新世纪优秀人才支持计划资助项目（NCET-09-0589）；天津市科技支撑计划国际科技合作项目（11ZCGHHZ00800）

作者简介：乔琳（1989-），女，天津大学硕士研究生，从事天然产物化学研究。E-mail：qiaolin.jolly@163.com

通讯作者：苏艳芳 Tel: (022)27402885 E-mail: suyfphd@sina.com

摘要：研究白酒草Conyza japonica的化学成分。方法运用正、反相硅胶柱色谱、D-101大孔吸附树脂柱色谱、凝胶柱色谱和RP-HPLC等方法分离纯化，并通过理化性质和波谱数据鉴定化合物的结构。结果从白酒草中分离得到12个化合物：白酒草皂苷U（1）、白酒草皂苷T（2）、白酒草皂苷O（3）、白酒草皂苷M（4）、山柰酚-3-O-葡萄糖苷（5）、木犀草素（6）、槲皮素-3-O-（6″-咖啡酰基）-β-D-半乳糖苷（7）、槲皮素-3-O-（6″-咖啡酰基）-β-D-葡萄糖苷（8）、槲皮素-3-O-半乳糖苷（9）、槲皮素-3-O-葡萄糖苷（10）、槲皮素（11）、β-谷甾醇（12）。结论化合物1～12均为首次从白酒草中分离得到，其中化合物1、2为新的三萜皂苷，分别命名为白酒草皂苷U（1）和白酒草皂苷T（2）。

关键词：白酒草白酒草属三萜皂苷白酒草皂苷U 白酒草皂苷T 白酒草皂苷O 白酒草皂苷M 槲皮素

Chemical constituents of Conyza japonica

QIAO Lin¹, SU Yan-fang^1,2, GUO Cheng-yun¹, XIE Xiao-yu¹, QUE Meng¹, CHEN Lei³

1. Tianjin Key Laboratory for Modern Drug Delivery &High-Efficiency, School of Pharmaceutical Science and Technology, Tianjin University, Tianjin 300072, China;
2. Tianjin Key Laboratory of TCM Chemistry and Analysis, Tianjin University of Traditional Chinese Medicine, Tianjin 300193, China;
3. Tianjin Tasly Modern TCM Resources Co., Ltd., Tianjin 300410, China

Abstract: Objective To study the chemical constituents of Conyza japonica. Methods Compounds were isolated and purified by normal and reverse phase silica gel, D-101 macroporous resin, Sephadex LH-20 column chromatography, and RP-HPLC. Their structures were established by the NMR spectral analysis and co-TLC with authentic samples. Results Twelve compounds were identified as conyzasaponin U (1), conyzasaponin T (2), conyzasaponin O (3), conyzasaponin M (4), kaemferol-3-O-glucoside (5), luteolin (6), quercetin-3-O-(6"-caffeoyl)-β-D-galactopyranoside (7), quercetin-3-O-(6"-caffeoyl)-β-D-glucopyranoside (8), quercetin-3-O-galactoside (9), quercetin-3-O-glucoside (10), quercetin (11), and β-sitosterol (12). Conclusion All compounds are isolated from C. japonica for the first time. Compounds 1 and 2 are new triterpenoid saponins, named conyzasaponins U (1) and T (2).

Key words: Conyza japonica(Thunb.) Less. Conyza Less. triterpenoid saponins conyzasaponin U conyzasaponin T conyzasaponin O conyzasaponin M quercetin

白酒草Conyza japonica (Thunb.) Less. 为菊科白酒草属植物，产于我国浙江、福建、台湾、江西、湖南、广东、广西、云南、贵州及西藏等省区。常生于山谷田边、山坡草地或林缘，海拔700～2 500 m。根或全草药用，治疗小儿肺炎、胸膜炎、喉炎、角膜炎等症^[1]。本课题组曾从白酒草及同属植物金龙胆草Conyza blinii Levl.、苏门白酒草Conyza sumatrensis (Retz.) Walker和小蓬草Conyza canadensis (L.) Cronq. 中分离得到多个化合物，并对白酒草属植物化学成分进行综述。迄今从该属植物中获得的天然产物有三萜皂苷类、黄酮类、鞘脂类、二萜类、倍半萜类、苯丙素类化合物等^{[2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16]}。为了明确白酒草生物活性成分，同时为植物分类学提供化学依据，本实验进一步对其进行系统的化学成分研究，从白酒草全草中分离得到12个化合物，分别鉴定为白酒草皂苷U（conyzasaponin U，1）、白酒草皂苷T（conyzasaponin T，2）、白酒草皂苷O（conyzasaponin O，3）、白酒草皂苷M（conyzasaponin M，4）、山柰酚-3-O-葡萄糖苷（kaemferol-3-O- glucoside，5）、木犀草素（luteolin，6）、槲皮素-3- O-(6″-咖啡酰基)-β-D-半乳糖苷 [quercetin-3-O-(6″- caffeoyl)-β-D-galactopyranoside，7]、槲皮素-3-O-(6″-咖啡酰基)-β-D-葡萄糖苷[quercetin-3-O-(6″- caffeoyl)-β-D-glucopyranoside，8]、槲皮素-3-O-半乳糖苷（quercetin-3-O-galactoside，9）、槲皮素-3-O-葡萄糖苷（quercetin-3-O-glucoside，10）、槲皮素（quercetin，11）、β-谷甾醇（β-sitosterol，12）。以上化合物均为首次从白酒草中获得，其中化合物1、2为2个新的三萜皂苷，分别命名为白酒草皂苷U（1）和白酒草皂苷T（2）。

1 仪器与材料

INOVA 500 FT核磁共振仪；XT4A型显微熔点测定仪（北京市科仪电光仪器厂）；Sephadex LH-20为Amersham Pharmacia生物技术公司生产；ODS（Chromatorex，20～45 μm）为Fuji Silysia化学有限公司生产；柱色谱用硅胶及薄层色谱用GF₂₅₄硅胶均为青岛海洋化工厂生产；D-101大孔吸附树脂为天津海光化工有限公司产品。所用试剂均为分析纯。

实验材料于2004年8～9月采自云南昆明，经中国科学院北京植物研究所陈艺林研究员鉴定为白酒草Conyza japonica (Thunb.) Less.，标本（S200409001）存放于天津大学药学院。

2 方法 2.1 提取与分离

白酒草干燥全草2.5 kg，粉碎，依次用95%、60%乙醇回流提取2次，每次2 h，合并提取液，滤过，回收乙醇所得浸膏用适量水分散，依次用石油醚（3 L×4）、醋酸乙酯（3 L×4）和正丁醇（3 L×4）萃取，萃取液回收溶剂，分别得到各萃取物38、55、127 g。正丁醇萃取物用水溶解后，经D-101大孔吸附树脂柱色谱，依次用水及30%、50%、95%乙醇洗脱，50%乙醇洗脱部分（45 g）经硅胶柱色谱，氯仿-甲醇-水（7∶3∶0.3→6.5∶3.5∶0.35→6∶4∶0.4→5.5∶4.5∶0.45→5∶5∶0.5→4∶6∶0.6）梯度洗脱。得到的流分32～42（5 g）经RP-HPLC得到化合物4（150 mg）。流分43～55（13 g）经过ODS柱色谱，30%、50%、70%、100%甲醇梯度洗脱得到20个流分，流分11～15经过一次ODS柱色谱，甲醇-水洗脱，得到的流分6～9经Pre-HPLC得到化合物1（100 mg），流分12～16经ODS柱色谱，甲醇-水洗脱，得到化合物2（10 mg）和3（50 mg）。醋酸乙酯部分（55 g）用硅胶柱色谱分离，用氯仿-甲醇（99∶1→97∶3→95∶5→9∶1→85∶15→8∶2→7∶3→6∶4→5∶5）梯度洗脱，共收集70个流分。流分11～14经硅胶柱色谱（氯仿-丙酮）分离所得流分10和11合并经重结晶得到化合物12（12 mg）。流分33～43经硅胶柱色谱（氯仿-甲醇）、Sephadex LH-20纯化得到化合物6（18 mg）、11（50 mg）。流分19和20经硅胶柱色谱、Sephadex LH-20纯化得到化合物5（15 mg），流分21～28经硅胶柱色谱、ODS柱色谱纯化得到化合物7和8的混合物（13 mg）以及9和10的混合物（18 mg）。

2.2 化合物1和2的薄层酸水解

取少量化合物1和2，以甲醇溶解，点于高效薄层板上，置于加有浓盐酸的烧杯中（底部放一支持物使薄层板不直接与盐酸接触），烧杯密封，于80 ℃水浴加热15 min，挥干浓盐酸，葡萄糖、阿拉伯糖、木糖、鼠李糖和芹糖对照品点样，用醋酸乙酯-甲醇-水-冰醋酸（13∶2∶1∶1）为展开剂，以苯胺-邻苯二甲酸为显色剂。

3 结构鉴定

化合物1：白色晶体（甲醇），mp 234～235 ℃，-25.7° (c 1.08,MeOH)，HR-ESI-MS m/z: 1 495.656 3（计算值1 495.654 5,[M＋Na]⁺），结合¹³C-NMR和DEPT谱确定其分子式为C₆₇H₁₀₈O₃₅。

¹H-NMR (500 MHz,C₅D₅N) 和¹³C-NMR (125 MHz,C₅D₅N) 显示6个角甲基单峰信号δ_H0.96 (3H,s),1.11 (6H,s),1.32 (3H,s),1.54 (3H,s),1.73 (3H,s) 和δ_C 15.0,17.4,17.7,24.8,27.2,33.2及双键信号δ_H 5.60 (brs) 和δ_C 123.0,144.4，提示化合物1可能为具有齐墩果烷-12-烯基本骨架的三萜皂苷，综合分析¹H-NMR谱、¹³C-NMR谱、DEPT谱、COSY谱、HMBC谱、HMQC谱、NOESY谱，并与文献报道^[11]对照，确定苷元为远志酸（polygalacic acid，2β,3β,16α,23-tetrahydroxy-olean-12-en-28-oic acid）。C-3 (δ 82.9) 和C-28 (δ 176.3) 提示化合物1在3、28位成双糖链苷。在NMR谱中显示了7个糖的端基质子信号δ_H 5.04 (1H,d,J = 8.0 Hz),5.09 (1H,d,J = 7.5 Hz),5.12 (1H,d,J = 7.5 Hz),5.17 (1H,d,J = 8.0 Hz),5.67 (1H,brs),6.38 (1H,brs),6.48 (1H,brs) 及端基碳信号δ_C 109.4,106.5,106.3,105.4,105.2,101.1,93.4。信号δ_H 1.73 (3H,d,J = 6.0 Hz),δ_C 18.5提示有1个6-去氧糖存在。薄层酸水解结果表明化合物1中含有鼠李糖、木糖、阿拉伯糖、葡萄糖、芹糖5种糖。综合分析¹H-NMR谱、¹³C-NMR谱、DEPT谱、COSY谱、HMBC谱、HMQC谱、NOESY谱，对化合物1中所有碳氢信号进行归属，将糖的核磁数据与1已知化合物白酒草皂苷M^[11]中糖的核磁数据比较，确定化合物1中含有1个β-D-吡喃葡萄糖基、2个α-L-吡喃阿拉伯糖基、2个β-D-吡喃木糖基、1个α-L-吡喃鼠李糖基和1个β-D-呋喃芹糖基（图 1）。苷元C-3位糖链连接顺序根据HMBC谱（图 2）以下相关得以确定：Xyl′的H-1 (δ 5.17) 和Glc的C-3 (δ_C 87.7),Glc的H-1 (δ_H 5.12) 和苷元C-3 (δ_C 83.0) 的HMBC相关；苷元C-28位糖链连接顺序根据HMBC谱（图 2）以下相关得以确定：Ara′的H-1 (δ 5.09) 和Api (f ) 的C-2 (δ 84.5),Api (f) 的H-1 (δ 6.38) 和Xyl的C-3 (δ 83.2),Xyl的H-1 (δ 5.04) 和Rha的C-4 (δ 83.6),Rha的H-1 (δ 5.67) 和Ara的C-2 (δ 75.5),Ara的H-1 (δ 6.48) 和苷元C-28 (δ 175.9) 有远程相关，并由NOESY谱中以下相关关系（图 2）进一步确证：Xyl′的H-1 (δ 5.17) 和Glc的H-3 (δ 4.05),Glc的H-1 (δ 5.12) 和苷元H-3 (δ4.30),Ara′的H-1 (δ 5.09) 和Api (f ) 的H-2 (δ 4.99), Api (f ) 的H-1 (δ 6.38) 和Xyl的H-3 (δ 4.08),Xyl的H-1 (δ 5.04) 和Rha的H-4 (δ 4.30),Rha的H-1 (δ 5.67) 和Ara的H-2 (δ 4.49) 相关。

图 1 化合物1～4的结构 Fig. 1 Structures of compounds 1—4

图 2 化合物1主要的HMBC和NOE相关 Fig. 2 Key HMBC and NOE correlations of compound 1

故确定化合物1的结构为：3-O-β-D-xylopyra- nosyl-(1→3)-β-D-glucopyranosyl polygalacic acid 28- O-α-L-arabinopyranosyl-(1→2)-β-D-apiofuranosyl- (1→3)-β-D-xylopyranosyl-(1→4)-α-L-rhamnopyra- nosyl-(1→2)-α-L-arabinopyranosyl ester，为新化合物，命名为白酒草皂苷U。¹H-NMR (500 MHz,C₅D₅N) 苷元: δ 3.53 (1H,overlapped,H-18),3.67,4.30 (2H,overlapped,H-23),4.30 (1H,overlapped,H-3),4.77 (1H,overlapped,H-2),5.42 (1H,brs,H-12),5.21 (1H,brs,H-16),0.96,1.73,1.32,1.54 (各3H,s,29,27,24,25-CH₃),1.11 (6H,s,30,26-CH₃)；糖部分信号归属见表 1；¹³C-NMR (125 MHz,C₅D₅N) 数据见表 2。

表 1 化合物1和4糖基的¹H-NMR数据 Table 1 ¹H-NMR spectroscopic data for sugar moieties ofcompounds 1 and 4

碳位

C₃-Glc

Xyl′

5.12 (d,J = 7.5Hz)

5.13 (d,J = 7.2Hz)

5.17( d,J = 8.0 Hz)

5.18 (d,J = 7.6 Hz)

4.00^b

4.02 ^b

3.97 ^b

4.01 ^b

4.05 ^b

4.06 ^b

4.11 ^b

4.13 ^b

4.08 ^b

4.11 ^b

4.12 ^b

4.17 ^b

3.82 ^b

3.83 ^b

4.27 ^b,3.68 ^b

4.31 ^b,3.69 ^b

4.37 ^b,4.23 ^b

4.39 ^b,4.26 ^b

Api(f )

C₂₈-Ara

5.90 (d,J = 4.4 Hz)

6.48 (brs)

6.54 (brs)

4.79 ^b

4.49 ^b

4.48 ^b

4.51 ^b

4.58 ^b

4.18 ^b

4.38 ^b

4.42 ^b

4.56 ^b

4.51 ^b,3.92 ^b

4.56 ^b,3.95 ^b

4.06 ^b

Rha

Api (f )

Api (f )′

5.67 (brs)

5.58 (brs)

6.38 (brs)

6.19 (brs)

4.51 ^b

4.71 ^b

4.99 ^b

4.77 ^b

4.52 ^b

4.38 ^b

4.30 ^b

4.48 ^b

4.15 ^b

4.29 ^b

4.34 ^b

4.32 ^b

4.59 ^b,4.18 ^b

4.73 ^b,4.17 ^b

1.69 (d,J = 6.0 Hz)

1.73 (d,J = 6.0 Hz)

Ara′

Xyl

5.09 (d,J = 7.5 Hz)

5.04 (d,J = 8.0 Hz)

5.27 (d,J = 7.6 Hz)

4.40 ^b

4.00 ^b

3.96 ^b

4.00 ^b

4.08 ^b

4.10 ^b

4.18 ^b

3.97 ^b

4.02 ^b

4.20 ^b,3.64 ^b

4.11 ^b,3.34 ^b

4.13 ^b,3.35 ^b

^b-因信号重叠未标明多重性和耦合常数，下同

^b-multiplicity and coupling constants are uncharted due to overlapping of signals,same as below

表 1 化合物1和4糖基的¹H-NMR数据 Table 1 ¹H-NMR spectroscopic data for sugar moieties ofcompounds 1 and 4

表 2 化合物1～4的¹³C-NMR数据 Table 2 ¹³C-NMR data of compounds 1—4

碳位	1	2	3	4	碳位	1	2	3	4
1	44.3	44.1	44.4	44.3	Rha
2	70.8	70.5	71.0	70.9	1	101.1	101.0	101.2	101.0
3	83.0	82.9	83.2	83.0	2	71.8	71.6	71.8	71.6
4	42.9	42.7	43.1	42.9	3	72.7	82.2	82.6	82.6
5	47.7	47.5	47.8	47.7	4	83.6	78.0	78.0	77.8
6	18.1	17.9	18.3	18.0	5	68.6	68.8	69.0	68.7
7	33.2	32.9	33.5	33.0	6	18.3	18.5	18.9	18.7
8	40.2	40.0	40.3	40.1	Xyl
9	47.8	48.4	48.8	48.6	1	106.5	105.1	105.3	105.1
10	37.0	36.8	37.2	37.0	2	75.3	75.5	75.3	75.1
11	24.0	23.9	24.3	24.1	3	83.2	78.2	84.6	84.2
12	123.0	123.1	123.5	123.1	4	69.6	71.2	69.9	69.7
13	144.4	144.1	144.5	144.2	5	67.0	67.1	66.9	66.8
14	42.2	42.2	42.5	42.3	Glc′
15	36.1	28.1	28.5	28.2	1		105.7	106.1
16	74.0	23.1	23.4	23.2	2		75.5	75.8
17	49.6	47.3	47.7	47.4	3		78.2	78.5
18	41.3	41.6	42.0	41.7	4		71.6	71.9
19	47.0	46.1	46.5	46.2	5		78.6	79.0
20	30.9	30.8	31.2	31.0	6		62.5	62.8
21	36.0	34.1	34.5	34.2	Xyl′
22	32.1	32.7	33.1	32.9	1	106.3			106.4
23	65.2	65.0	65.3	65.0	2	75.3			75.4
24	15.0	15.0	15.4	15.1	3	78.1			78.3
25	17.4	17.2	17.6	17.3	4	70.9			70.9
26	17.7	17.5	17.9	17.7	5	67.4			67.5
27	27.2	26.1	26.5	26.2	Api (f )
28	175.9	176.3	176.7	176.3	1		111.6	112.1	112.0
29	33.2	33.1	33.2	33.2	2		77.5	77.8	77.5
30	24.8	23.7	24.0	23.8	3		79.6	80.2	79.8
C₃-Glc					4		74.5	74.9	74.7
1	105.4	105.2	105.6	105.6	5		64.4	64.5	64.3
2	74.4	74.1	74.5	74.4		Api (f )		Api (f )′	Api (f)′
3	87.7	88.6	88.9	87.7	1	109.4		111.5	111.3
4	69.3	69.6	69.9	69.4	2	84.5		78.0	77.8
5	77.9	77.7	78.1	78.0	3	81.4		80.8	80.5
6	62.2	62.1	62.5	62.3	4	75.7		75.4	75.2
C₂₈-Ara					5	65.8		65.7	65.6
1	93.4	92.9	93.3	93.0	Ara′
2	75.5	75.6	75.9	75.7	1	105.2
3	69.3	68.7	69.0	68.8	2	72.7
4	65.8	65.3	65.6	65.3	3	74.7
5	62.7	61.9	62.2	61.9	4	69.7
					5	67.7

表 2 化合物1～4的¹³C-NMR数据 Table 2 ¹³C-NMR data of compounds 1—4

化合物2：白色晶体（甲醇），mp 239～241 ℃，[α]20D-26.4° (c 0.26, MeOH)，ESI-MS m/z: 1 377.638 8（计算值1 377.630 3，[M＋Na]⁺），结合¹³C-NMR和DEPT谱确定其分子式为C₆₃H₁₀₂O₃₁。

¹H-NMR (500 MHz,C₅D₅N) 和¹³C-NMR (125 MHz,C₅D₅N) 显示6个角甲基单峰信号δ_H0.87,0.98,1.11,1.20,1.28,1.51和δ_C15.0,17.2,17.5,23.7, 26.1,33.1及双键信号δ_H 5.43 (brs) 和δ_C 123.1,144.1，提示化合物2可能为具有齐墩果烷-12-烯基本骨架的三萜皂苷，结合文献报道^[11]确定苷元为贝萼皂苷元（bayogenin，2β,3β,23-trihydroxy-olean-12-en-28- oic acid）。δ_C82.9 (C-3),δ_C 176.3 (C-28) 提示化合物2在3、28位成苷。在NMR谱中显示了6个糖的端基质子信号δ_H 5.11 (1H,d,J = 7.2 Hz),5.20 (1H,d,J = 7.6 Hz),5.31 (1H,d,J = 8.0 Hz),5.97 (1H,d,J = 4.8 Hz),5.57 (1H,brs),6.50 (1H,brs) 及端基碳信号δ_C111.6,105.7,105.2,105.1,101.0,92.9。信号δ_H1.73 (3H,d,J = 6.0 Hz)，δ_C18.5提示有1个6-去氧糖存在。薄层酸水解结果表明化合物</span>2中含有鼠李糖、木糖、阿拉伯糖、葡萄糖、芹糖5种糖。综合分析¹H-NMR谱、¹³C-NMR谱、DEPT谱、COSY谱、HMBC谱、HMQC谱、NOESY谱和TOCSY谱，对化合物2中所有碳氢信号进行归属，化合物2与白酒草皂苷O^[11]的核磁数据非常相似，不同之处在于化合物2较白酒草皂苷O少了1组β-D-呋喃芹糖基的信号，对比后最终确定化合物2中含有的6个糖为2个β-D-吡喃葡萄糖基、1个β-D-吡喃木糖基、1个α-L-吡喃鼠李糖基、1个α-L-吡喃阿拉伯糖基和1个β-D-呋喃芹糖基，并且β-D-吡喃木糖基是1个末端糖。糖链的连接顺序可由HMBC谱进一步证实：Glc′的H-1 (δ 5.20) 和Glc的C-3 (δ_C 88.6)相关，Glc的H-1 (δ_H 5.11) 和苷元C-3 (δ_C 82.9) 相关确定苷元C-3位糖链连接顺序；Api (f ) 的H-1 (δ 5.97) 和Rha的C-3 (δ 82.2) 相关，Xyl的H-1 (δ 5.31) 和Rha的C-4 (δ 78.0) 相关，Rha的H-1 (δ 5.57) 和Ara的C-2 (δ 75.6) 相关，Ara的H-1 (δ 6.50) 和苷元C-28 (δ 176.3) 的远程相关可以确定苷元C-28位糖链的连接顺序。故化合物2的结构鉴定为3-O-β-D-glucopyranosyl-(1→3)-β-D-glucopyranosyl bayogenin 28-O-β-D</i>-xylopyranosyl-(1→4)-[β-D- apiofuranosyl-(1→3)]-α-L-rhamnopyranosyl-(1→2)-α-L-arabinopyranosyl ester，为新化合物，命名为白酒草皂苷T。¹H-NMR (500 MHz,C₅D₅N) 苷元: δ 3.26 (1H,overlapped,H-18),3.67,4.33 (2H,overlapped,H-23),4.26 (1H,overlapped,H-3),4.74 (1H,overlapped,H-2),5.44 (1H,brs,H-12),0.89,1.00,1.13,1.22,1.32,1.54 (各3H,s,29,30,26,27,24,25-CH₃)，糖部分信号归属见表 3；¹³C-NMR (125 MHz,C₅D₅N) 数据见表 2。

表 3 化合物2和3糖基的¹H-NMR数据 Table 3 ¹H-NMR data for sugar moieties of compounds 2 and 3

碳位	2	3	碳位	2	3
C₃-Glc			Glc′
1	5.11 (d,J = 7.2 Hz)	5.10 (d,J = 7.5 Hz)	1	5.20 (d,J = 7.6 Hz)	5.21 (d,J = 7.5 Hz)
2	4.01 ^b	4.02 ^b	2	4.03 ^b	4.04 ^b
3	4.05 ^b	4.04 ^b	3	4.21 ^b	4.24 ^b
4	4.07 ^b	4.07 ^b	4	4.12 ^b	4.18 ^b
5	3.79 ^b	3.79 ^b	5	3.98 ^b	4.00 ^b
6	4.34 ^b,4.19 ^b	4.36 ^b,4.22 ^b	6	4.51 ^b,4.24 ^b	4.51 ^b,4.28 ^b
C₂₈-Ara			Api(f )
1	6.50 (brs)	6.52 (brs)	1	5.97 (d,J = 4.8 Hz)	5.90 (d,J = 4.5 Hz)
2	4.45 ^b	4.47 ^b	2	4.77 ^b	4.79 ^b
3	4.54 ^b	4.57 ^b	3
4	4.38 ^b	4.37 ^b	4	4.15 ^b	4.16 ^b
5	4.49 ^b,3.93 ^b	4.56 ^b,3.94 ^b		4.55 ^b	4.55 ^b
Rha			5	4.04 ^b	4.03 ^b
1	5.57 (brs)	5.59 (brs)			Api (f )′
2	4.68 ^b	4.73 ^b	1		6.18 (d,J = 2.0 Hz)
3	4.41 ^b	4.36 ^b	2		4.74 ^b
4	4.48 ^b	4.48 ^b	3
5	4.32 ^b	4.30 ^b	4		4.26 ^b
6	1.73 (d,J = 6.0 Hz)	1.72 (d,J = 6.0 Hz)	5		4.70 ^b,4.14 ^b
Xyl
1	5.31 (d,J = 8.0 Hz)	5.25 (d,J = 8.0 Hz)
2	4.03 ^b	3.93 ^b
3	4.11 ^b	4.10 ^b
4	4.12 ^b	4.02 ^b
5	4.14 ^b,3.42 ^b	4.10 ^b,3.31 ^b

表 3 化合物2和3糖基的¹H-NMR数据 Table 3 ¹H-NMR data for sugar moieties of compounds 2 and 3

化合物3：白色晶体（甲醇），¹H-NMR (500 MHz,C₅D₅N) 苷元δ 3.27 (1H,overlapped,H-18),5.42 (1H,brs,H-12),0.87,0.98,1.11,1.20,1.30,1.52 (各3H,s,29,30,26,27,24,25-CH₃)，糖部分信号归属见表 3；¹³C-NMR (125 MHz,C₅D₅N) 数据见表 2。以上数据与文献报道一致^[11]，故鉴定化合物3为白酒草皂苷O。

化合物4：白色晶体（甲醇），¹H-NMR (500 MHz,C₅D₅N) 苷元: δ 3.31 (1H,dd,J = 13.5,2.6 Hz,H-18),5.44 (1H,brs,H-12),0.89,1.00,1.12,1.22,1.32,1.54 (各3H,s,29,30,26,27,24,25-CH₃)，糖部分信号归属见表 1；¹³C-NMR (125 MHz,C₅D₅N) 数据见表 2。以上数据与文献报道一致^[11]，故鉴定化合物4为白酒草皂苷M。

化合物5：黄色结晶（甲醇）。¹H-NMR (500 MHz,DMSO-d₆) δ: 8.05 (2H,d,J = 9.0 Hz,H-2′,6′),6.90 (2H,d,J = 9.0 Hz,H-3′,5′),6.47 (1H,d,J = 2.0 Hz,H-8),6.24 (1H,d,J = 2.0 Hz,H-6),5.45 (1H,d,J = 7.5 Hz,H-1″)；¹³C-NMR (125 MHz,DMSO-d₆) δ: 157.1 (C-2),133.9 (C-3),178.1 (C-4),161.6 (C-5),99.3 (C-6),164.6 (C-7),94.4 (C-8),157.0 (C-9),104.7 (C-10),121.6 (C-1′),131.6 (C-2′,6′),115.7 (C-3′,5′),160.4 (C-4′),101.5 (C-1″),74.7 (C-2″),76.8 (C-3″),70.4 (C-4″),78.0 (C-5″),61.4 (C-6″)。以上数据与文献报道一致^[17]，故鉴定化合物5为山柰酚-3- O-葡萄糖苷。

化合物6：浅黄色粉末（丙酮）。¹H-NMR (500 MHz,DMSO-d₆) δ: 7.39 (1H,dd,J = 8.0,2.0 Hz,H-6′),7.37 (1H,d,J = 2.0 Hz,H-2′),6.88 (1H,d,J = 8.0 Hz,H-5′),6.64 (1H,s,H-3),6.45 (1H,d,J = 2.0 Hz,H-8),6.18 (1H,d,J = 2.0 Hz,H-6)。以上数据与文献报道一致^[18]，故鉴定化合物6为木犀草素。

化合物7：黄色粉末（甲醇）。¹H-NMR (500 MHz,DMSO-d₆) δ: 7.65 (1H,dd,J = 8.5,2.5 Hz,H-6′),7.57 (1H,d,J = 2.0 Hz,H-2′),6.86 (1H,d,J = 9.0 Hz,H-5′),6.41 (1H,d,J = 2.0 Hz,H-8),6.17 (1H,d,J = 2.0 Hz,H-6),5.41 (1H,d,J = 7.5 Hz,H-1″),6.99 (1H,d,J = 2.0 Hz,H-2′′′),6.77 (1H,d,J = 8.0 Hz,H-5′′′),6.80 (1H,dd,J = 8.0,2.0 Hz,H-6′′′),7.30 (1H,d,J = 15.5 Hz,H-7′′′),6.06 (1H,d,J = 16.0 Hz,H-8′′′)；¹³C-NMR (125 MHz,DMSO-d₆) δ: 156.7^a (C-2),134.1 (C-3),178.0 (C-4),161.5 (C-5),99.4 (C-6),164.8 (C-7),94.2 (C-8),156.9^a (C-9),104.4 (C-10),121.7 (C-1′),115.8 (C-2′),145.3 (C-3′),148.9^b (C-4′),116.5 (C-5′),122.5 (C-6′),102.2 (C-1″),71.6 (C-2″),73.6 (C-3″),68.8 (C-4″),73.4 (C-5″),63.8 (C-6″),126.1 (C-1′′′),114.1 (C-2′′′),145.8^c (C-3′′′),148.8^b (C-4′′′),116.3 (C-5′′′),122.1 (C-6′′′),146.0^c (C-7′′′),115.1 (C-8′′′),167.0 (C-9′′′)（a、b、c表示化学位移值可互换）。以上数据与文献报道^{[17, 19]}比较，鉴定化合物7为槲皮素-3- O-(6″-咖啡酰基)-β-D-半乳糖苷。

化合物8：黄色粉末（甲醇），与化合物7以1∶2的混合物分离得到。¹H-NMR (500 MHz,DMSO- d₆) δ: 7.66 (1H,dd,J = 8.5,2.0 Hz,H-6′),7.56 (1H,d,J = 2.0 Hz,H-2′),6.86 (1H,d,J = 8.5 Hz,H-5′),6.40 (1H,d,J = 2.0 Hz,H-8),6.18 (1H,d,J = 2.0 Hz,H-6),5.49 (1H,d,J = 7.5 Hz,H-1″),7.00 (1H,d,J = 2.0 Hz,H-2′′′),6.78 (1H,d,J = 8.0 Hz,H-5′′′),6.81 (1H,dd,J = 8.5,2.0 Hz,H-6′′′),7.28 (1H,d,J = 15.5 Hz,H-7′′′),6.07 (1H,d,J = 16.0 Hz,H-8′′′)；¹³C-NMR (125 MHz,DMSO-d₆) δ: 157.0 (C-2),133.8 (C-3),178.0 (C-4),161.5 (C-5),99.3 (C-6),164.6 (C-7),94.2 (C-8),157.0 (C-9),104.5 (C-10),121.7 (C-1′),115.8 (C-2′),145.3 (C-3′),148.9^a (C-4′),116.7 (C-5′),122.2 (C-6′),101.4 (C-1″),74.5 (C-2″),76.7 (C-3″),70.4 (C-4″),74.9 (C-5″),63.7 (C-6″),126.1 (C-1′′′),114.2 (C-2′′′),145.9^b (C-3′′′),148.8^a (C-4′′′),116.3 (C-5′′′),122.0 (C-6′′′),145.7^b (C-7′′′),115.2 (C-8′′′),167.0 (C-9′′′)。以上数据与文献报道^{[17, 19]}比较，鉴定化合物8为槲皮素-3-O-(6″-咖啡酰基)-β-D-葡萄糖苷。

化合物9和10：黄色粉末（甲醇），经硅胶TLC和聚酰胺TLC检查为均显示单一斑点。NMR谱分析，并与文献报道^{[5, 17]}对照，鉴定为槲皮素-3-O-半乳糖苷和槲皮素-3-O-葡萄糖苷约2∶1的混合物。槲皮素-3-O-半乳糖苷（9）的NMR数据：¹H-NMR (500 MHz,DMSO-d₆) δ: 7.66 (1H,dd,J = 8.5,2.0 Hz,H-6′),7.59 (1H,d,J = 2.0 Hz,H-2′),6.86 (1H,d,J = 8.5 Hz,H-5′),6.46 (1H,d,J = 2.0 Hz,H-8),6.24 (1H,d,J = 2.0 Hz,H-6),5.38 (1H,d,J = 8.0 Hz,H-1″)；¹³C-NMR (125 MHz,DMSO-d₆) δ: 157.0^a (C-2),134.2 (C-3),178.1 (C-4),161.6 (C-5),99.3 (C-6),164.7 (C-7),94.3 (C-8),156.9^a (C-9),104.5 (C-10),121.8 (C-1′),115.8 (C-2′),145.3 (C-3′),148.9 (C-4′),116.6 (C-5′),122.6 (C-6′),102.5 (C-1″),71.7 (C-2″),73.7 (C-3″),68.5 (C-4″),76.4 (C-5″),60.7 (C-6″)。槲皮素-3-O-葡萄糖苷（10）的NMR数据：¹H-NMR (500 MHz,DMSO-d₆) δ: 7.66 (1H,dd,J = 8.5,2.0 Hz,H-6′),7.60 (1H,d,J = 2.0 Hz,H-2′),6.88 (1H,d,J = 8.5 Hz,H-5′),6.45 (1H,d,J = 2.0 Hz,H-8),6.24 (1H,d,J = 2.0 Hz,H-6),5.47 (1H,d,J = 8.0 Hz,H-1″)；¹³C-NMR (125 MHz,DMSO-d₆) δ: 157.0^a (C-2),134.0 (C-3),178.1 (C-4),161.6 (C-5),99.3 (C-6),164.7 (C-7),94.3 (C-8),156.9^a (C-9),104.6 (C-10),121.8 (C-1′),115.8 (C-2′),145.3 (C-3′),148.9 (C-4′),116.8 (C-5′),122.3 (C-6′),101.5 (C-1″),74.6 (C-2″),76.9 (C-3″),70.4 (C-4″),78.0 (C-5″),61.4 (C-6″)。

化合物11：黄色固体（甲醇），与槲皮素对照品^[5]在硅胶薄层和聚酰胺薄膜上3种不同条件共薄层色谱，硫酸或三氯化铝显色，Rf值及显色行为完全一致，故鉴定化合物11为槲皮素。

化合物12：白色针状结晶（丙酮），与β-谷甾醇对照品^[12]共薄层色谱，用3种不同溶剂系统展开，硫酸和磷钼酸显色，Rf值及显色行为完全一致，故鉴定化合物12为β-谷甾醇。

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