地骨皮为茄科（Solanaceae）植物枸杞和宁夏枸杞的干燥根皮，春初或秋后采挖。枸杞属植物是我国非常重要的药用植物资源，本属植物在全世界共有80余种，多分布于暖温带地区，欧洲3种，亚洲7～8种，澳大利亚1种，美洲45种，南非6种^[1]，我国有7种3变种，多分布于华北和西北地区。以前，地骨皮只有一种来源，即茄科植物枸杞Lycium chinense Mill. 的根皮。《中国药典》1985年版起，将同属植物宁夏枸杞Lycium barbarum L. 的根皮也作为地骨皮的另一种资源加以收录^[2]。地骨皮性寒、味甘，为常用中药，具有凉血除蒸、清肺降火的功效，用于阴虚潮热、骨蒸盗汗、肺热咳嗽、咳血、内热消渴等症。“地骨皮”之名最初见于《外台》，是以其根的形状像细的骨头而命名的。《神农本草经》有对地骨皮的记载：“味苦、寒。主五内邪气、热中、消渴、周痹”^[3]。现代药理学研究表明其具有降血压、调血脂、降血糖及解热等作用^[4]。

为了进一步探索地骨皮药材的活性成分，为其开发利用提供科学依据，本研究对地骨皮进行了化学成分研究。采用多种色谱学分离技术，从地骨皮95%乙醇提取物的醋酸乙酯部位中分离鉴定出12个化合物，分别鉴定为反式-N-对羟基香豆酰酪胺（N-trans-coumaroyltyramine，1）、反式-N-阿魏酰酪胺（N-trans-feruloyltyramine，2）、二氢咖啡酰酪胺（dihydro-N-caffeoyltyramine，3）、芹菜素（apigenin，4）、阿魏酸（ferulic acid，5）、对羟基香豆酸（p-hydroxycinnamic acid，6）、3-羟基-1-(4-羟基苯基)-丙基-1-酮 [3-hydroxy-1-(4-hydroxyphenyl)-1- propanone，7]、3,4-二羟基苯丙酸（3,4-dihydroxy- benzenepropionic acid，8）、3,4-二羟基苯丙酸甲酯（3,4-dihydroxybenzenepropionic acid methyl ester，9）、对羟基苯甲酸（p-hydroxy-benzoic acid，10）、4-甲氧基水杨酸（4-methoxy salicylic acid，11）、烟酸（nicotinic acid，12）。其中，化合物8、9为新的天然产物，化合物1、6、11及12为首次从该植物中分离得到。

AV—300 MHz超导核磁共振仪（德国Bruker公司）；LCQ Advantage MAX质谱仪（美国Finnign公司）；Sephadex LH-20柱色谱材料（瑞典Pharmacia公司）；ODS柱色谱材料（美国Merck公司）；柱色谱硅胶（青岛海洋化工厂产品）；色谱纯甲醇（山东禹王有限公司）。

实验所用地骨皮药材于2013年4月购自广州市清平药材市场，由暨南大学药学院周光雄教授鉴定为茄科植物枸杞Lycium chinense Mill. 的干燥根皮。

地骨皮药材30 kg粉碎，用8倍量95%乙醇回流提取3次，每次2 h，滤过，合并3次提取液，减压浓缩后得浸膏1 400 g，向浸膏中加入适量水悬浮，依次用石油醚、氯仿、醋酸乙酯萃取，回收溶剂后得石油醚萃取物（150 g）、氯仿萃取物（230 g）、醋酸乙酯萃取物（70 g）。将醋酸乙酯萃取物（70 g）经硅胶柱色谱分离，以氯仿-甲醇（100∶0→0∶100）梯度洗脱，经TLC检测后合并得到8个粗组分。其中，组分A经重结晶及Sephadex LH-20凝胶柱色谱，得到化合物7（7 mg）、10（100 mg）和12（20 mg）。组分B经硅胶柱色谱分离，以氯仿-丙酮梯度洗脱（50∶1→0∶100），TLC检测后合并得到2个馏份（Fr. B-1～2），Fr. B-1经Sephadex LH-20凝胶柱色谱，得到化合物4（8 mg）、6（50 mg）和13（15 mg）；Fr. B-2经重结晶得到化合物2（200 mg）。组分C经硅胶柱色谱分离，以氯仿-丙酮（50∶1→0∶100）梯度洗脱，得到的子馏份经Sephadex LH-20凝胶柱色谱，得到化合物1（10 mg）、3（12 mg）、5（800 mg）和11（10 mg）。组分D经反相ODS柱色谱及Sephadex LH-20凝胶柱色谱，得到化合物8（40 mg）和9（500 mg）。

化合物1：黄色粉末（甲醇），ESI-MS m/z: 282 [M－H]^-，确定其相对分子质量为283。¹H-NMR (300 MHz,C₅D₅N) δ: 8.49 (1H,d,J = 15.6 Hz,H-7),7.90 (2H,d,J = 8.6 Hz,H-2,6),7.61 (2H,d,J = 8.6 Hz,H-3,5),7.51 (2H,d,J = 8.6 Hz,H-2′,6′),7.44 (2H,d,J = 8.6 Hz,H-3′,5′),7.23 (1H,d,J = 15.6 Hz,H-8),4.24 (2H,dd,J = 13.3,6.9 Hz,H-8′),3.37 (2H,t,J = 7.2 Hz,H-7′)；¹³C-NMR (75 MHz,C₅D₅N) δ: 127.3 (C-1),130.3 (C-2),116.6 (C-3),160.8 (C-4),116.6 (C-5),130.3 (C-6),140.5 (C-7),119.8 (C-8),167.1 (C-9),130.8 (C-1′),130.7 (C-2′),117.0 (C-3′),157.7 (C-4′),117.0 (C-5′),130.7 (C-6′),35.9 (C-7′),42.3 (C-8′)。综合以上信息，结合文献报道数据^[5]，鉴定化合物1为反式-N-对羟基香豆酰酪胺。

化合物2：黄色粉末（甲醇），ESI-MS m/z: 312 [M－H]^-，确定其相对分子质量为313。¹H-NMR (300 MHz,CD₃OD) δ: 7.31 (1H,d,J = 15.5 Hz,H-7),6.87 (1H,d,J = 1.5 Hz,H-2),6.84 (2H,d,J = 8.0 Hz,H-2′,6′),6.65 (1H,dd,J = 8.0,1.5 Hz,H-6),6.60 (1H,d,J = 8.0 Hz,H-5),6.58 (2H,d,J = 8.0 Hz,H-3′,5′),6.28 (1H,d,J = 15.5 Hz,H-8),3.61 (3H,s,3-OCH₃),3.31 (2H,d,J = 7.3 Hz,H-8′),2.57 (2H,t,J = 7.3 Hz,H-7′)；¹³C-NMR (75 MHz,CD₃OD) δ: 128.2 (C-1),111.5 (C-2),149.6 (C-3),149.1 (C-4),116.5 (C-5),123.3 (C-6),142.2 (C-7),118.7 (C-8),169.2 (C-9),131.3 (C-1′),130.8 (C-2′),116.3 (C-3′),156.7 (C-4′),116.3 (C-5′),130.8 (C-6′),35.7 (C-7′),42.5 (C-8′),56.3 (3-OCH₃)。综合以上信息，结合文献报道数据^[6]，鉴定化合物2为反式-N-阿魏酰酪胺。

化合物3：黄色油状物，ESI-MS m/z: 300 [M－H]^-，确定其相对分子质量为301。¹H-NMR (300 MHz,CD₃OD) δ: 6.87 (2H,d,J = 8.5 Hz,H-2′,6′),6.69 (2H,brs,H-3′,5′),6.65 (1H,d,J = 8.1 Hz,H-5),6.64 (1H,d,J = 1.9 Hz,H-2),6.47 (1H,dd,J = 8.1,1.9 Hz,H-6),3.24 (2H,t,J = 7.2 Hz,H-8′),2.73 (2H,t,J = 7.5 Hz,H-7),2.60 (2H,t,J = 7.5 Hz,H-7′),2.37 (2H,t,J = 7.5 Hz,H-8)；¹³C-NMR (75 MHz,CD₃OD) δ: 133.8 (C-1),116.5 (C-2),144.4 (C-3),146.0 (C-4),116.7 (C-5),120.8 (C-6),32.3 (C-7),39.3 (C-8),175.5 (C-9),131.3 (C-1′),130.7 (C-2′),116.2 (C-3′),156.4 (C-4′),116.2 (C-5′),130.7 (C-6′),35.5 (C-7′),42.2 (C-8′)。综合以上信息，结合文献报道数据^[7]，鉴定化合物3为二氢咖啡酰酪胺。

化合物4：淡黄色针状结晶（甲醇），ESI-MS m/z: 269 [M－H]^-，确定其相对分子质量为270。¹H-NMR (300 MHz,DMSO-d₆) δ: 7.92 (2H,d,J = 8.8 Hz,H-2′,6′),6.92 (2H,d,J = 8.8 Hz,H-3′,5′),6.77 (1H,s,H-3),6.47 (1H,d,J = 2.0 Hz,H-8),6.19 (1H,d,J = 2.0 Hz,H-6)；¹³C-NMR (75 MHz,DMSO-d₆) δ: 164.2 (C-2),103.7 (C-3),181.8 (C-4),161.4 (C-5),98.9 (C-6),163.7 (C-7),94.0 (C-8),157.3 (C-9),102.8 (C-10),121.2 (C-1′),128.5 (C-2′),116.0 (C-3′),161.2 (C-4′),116.0 (C-5′),128.5 (C-6′)。综合以上信息，结合文献报道数据^[8]，鉴定化合物4为芹菜素。

化合物5：白色针状结晶（甲醇），ESI-MS m/z: 193 [M－H]^-，确定其相对分子质量为194。¹H-NMR (300 MHz,CD₃OD) δ: 7.62 (1H,d,J = 15.9 Hz,H-7),7.11 (1H,d,J = 1.7 Hz,H-2),7.02 (1H,dd,J = 8.2,1.8 Hz,H-6),6.80 (1H,d,J = 8.2 Hz,H-5),6.29 (1H,d,J = 15.9 Hz,H-8),3.85 (3H,s,3-OCH₃)；¹³C-NMR (75 MHz,CD₃OD) δ: 127.8 (C-1),116.5 (C-2),150.5 (C-3),149.3 (C-4),115.9 (C-5),124.0 (C-6),147.1 (C-7),111.8 (C-8),171.1 (C-9),56.5 (3-OCH₃)。综合以上信息，结合文献报道数据^[9]，鉴定化合物5为阿魏酸。

化合物6：白色粉末（甲醇），ESI-MS m/z: 163 [M－H]^-，确定其相对分子质量为164。¹H-NMR (300 MHz,CD₃OD) δ: 7.65 (1H,d,J = 15.9 Hz,H-7),7.42 (2H,d,J = 8.6 Hz,H-2,6),6.80 (2H,d,J = 8.6 Hz,H-3,5),6.27 (1H,d,J = 15.9 Hz,H-8)；¹³C-NMR (75 MHz,CD₃OD) δ: 127.3 (C-1),131.2 (C-2),116.9 (C-3),161.2 (C-4),116.9 (C-5),131.2 (C-6),146.8 (C-7),115.7 (C-8),171.2 (C-9)。综合以上信息，结合文献报道数据^[10]，鉴定化合物6为对羟基香豆酸。

化合物7：黄色油状物，ESI-MS m/z: 165 [M－H]^-，确定其相对分子质量为166。¹H-NMR (300 MHz,CD₃OD) δ: 7.90 (2H,d,J = 8.8 Hz,H-2′,6′),6.85 (2H,d,J = 8.8 Hz,H-3′,5′),3.93 (2H,t,J = 6.2 Hz,H-2),3.15 (2H,t,J = 6.2 Hz,H-3)；¹³C-NMR (75 MHz,CD₃OD) δ: 199.9 (C-1),41.8 (C-2),59.0 (C-3),130.4 (C-1′),132.0 (C-2′),116.4 (C-3′),164.0 (C-4′),116.4 (C-5′),132.0 (C-6′)。综合以上信息，结合文献报道数据^[11]，鉴定化合物7为3-羟基-1-(4-羟基苯基)-丙基-1-酮。

化合物8：黄色油状物，ESI-MS m/z: 181 [M－H]^-，确定其相对分子质量为182。¹H-NMR (300 MHz,CD₃OD) δ: 6.76 (1H,d,J = 8.6 Hz,H-5),6.72 (1H,d,J = 1.5 Hz,H-2),6.53 (1H,dd,J = 8.6,1.5 Hz,H-6),2.74 (2H,t,J = 7.5 Hz,H-8),2.53 (2H,t,J = 7.5 Hz,H-7)；¹³C-NMR (75 MHz,CD₃OD) δ: 133.8 (C-1),116.5 (C-2),143.7 (C-3),145.3 (C-4),116.4 (C-5),120.8 (C-6),30.9 (C-7),36.7 (C-8),177.8 (C-9)。综合以上信息，鉴定化合物8为3,4-二羟基苯丙酸。

化合物9：黄色油状物，ESI-MS m/z: 195 [M－H]^-，确定其相对分子质量为196。¹H-NMR (300 MHz,CD₃OD) δ: 6.71 (1H,d,J = 8.0 Hz,H-5),6.67 (1H,d,J = 2.0 Hz,H-2),6.50 (1H,dd,J = 8.0,2.0 Hz,H-6),3.60 (3H,s,-OCH₃),2.74 (2H,t,J = 7.6 Hz,H-8),2.52 (2H,t,J = 7.6 Hz,H-7)；¹³C-NMR (75 MHz,CD₃OD) δ: 133.6 (C-1),116.4 (C-2),144.4 (C-3),145.9 (C-4),116.5 (C-5),120.6 (C-6),31.2 (C-7),36.8 (C-8),175.5 (C-9),51.1 (10-OCH₃)。综合以上信息，鉴定化合物9为3,4-二羟基苯丙酸甲酯。

化合物10：黄色油状物，ESI-MS m/z: 137 [M－H]^-，确定其相对分子质量为138。¹H-NMR (300 MHz,CD₃OD) δ: 7.90 (2H,d,J = 8.6 Hz,H-2,6),6.84 (2H,d,J = 8.6 Hz,H-3,5)；¹³C-NMR (75 MHz,CD₃OD) δ: 122.9 (C-1),133.1 (C-2),116.2 (C-3),163.4 (C-4),116.2 (C-5),133.1 (C-6),170.5 (C-7)。综合以上信息，结合文献报道数据^[12]，鉴定化合物10为对羟基苯甲酸。

化合物11：白色粉末（甲醇），ESI-MS给出m/z: 167 [M－H]^-，确定其相对分子质量为168。¹H-NMR (300 MHz,CD₃OD) δ: 7.71 (1H,d,J = 9.3 Hz,H-6),6.41 (1H,dd,J = 9.3,2.4 Hz,H-5),6.38 (1H,d,J = 2.4 Hz,H-3),3.76 (3H,s,4-OCH₃)；¹³C-NMR (75 MHz,CD₃OD) δ: 106.8 (C-1),165.4 (C-2),101.7 (C-3),167.1 (C-4),108.0 (C-5),132.9 (C-6),173.5 (C-7),56.0 (4-OCH₃)。综合以上信息，结合文献报道数据^[13]，鉴定化合物11为4-甲氧基水杨酸。

化合物12：白色针状结晶（甲醇），ESI-MS m/z: 122 [M－H]^-，确定其相对分子质量为123。¹H-NMR (300 MHz,C₅D₅N) δ: 9.69 (1H,d,J = 1.5 Hz,H-2),8.87 (1H,dd,J = 4.8,1.7 Hz,H-6),8.54 (1H,dt,J = 7.9,1.9 Hz,H-4),7.41 (1H,brs,H-5)；¹³C-NMR (75 MHz,C₅D₅N) δ: 151.5 (C-2),127.2 (C-3),137.8 (C-4),124.4 (C-5),154.3 (C-6),166.5 (C-7)。综合以上信息，结合文献报道数据^[14]，鉴定化合物12为烟酸。

本研究对地骨皮的醋酸乙酯部位进行了化学成分研究，分离并鉴定了12个化合物，其中生物碱类4个（1～3、12），黄酮类1个（4），简单苯丙素类5个（5～9），酚类2个（10、11）。在分离得到的化合物中，3,4-二羟基苯丙酸及3,4-二羟基苯丙酸甲酯为新的天然产物；另外有文献报道了地骨皮中酰胺类物质二氢咖啡酰酪胺具有抗真菌作用，只需5～10 μg/mL就能阻碍白色念珠菌病原体的二型转变^[15]。地骨皮作为传统中药，生物活性多种多样，对其进行更加深入的化学成分和药理活性研究，有望从中发现更多活性化合物，为其开发利用提供科学依据。