防风又名屏风、风肉、茴芸、茴草，是伞形科植物防风Saponikovia cata (Turcz.) Sehischk的根^[1]。味辛、甘、温；可解表祛风、胜湿，止痉；用于感冒头痛、风湿痹痛、风疹瘙痒、破伤风。防风主产于我国黑龙江、吉林、辽宁、河北、内蒙古和山东等地，喜阳光充足、凉爽的气候条件，忌高温、雨涝及土壤过湿，较耐寒、耐旱，在风积沙土、草甸沙土和草原黑钙土种植，主根发达，侧根少，皮部棕黄色，商品质量好。

目前对防风的化学成分、药理作用、配伍及临床应用的研究进行较多，如在化学成分中对香豆素、色原酮、聚乙炔类、有机酸类^[2]、多糖类^[3]、挥发油成分，在药理方面对抗肿瘤^[4]、增强免疫功能的作用^[5]，配伍及临床应用方面都进行了详细的研究。

随着防风需求量增加，野生防风产量和品质的下降，使近年人工栽培面积不断扩大，而人工栽培的防风，由于土地疏松，肥、水充足，生长量大，有大量的营养物质积累，便出现未熟抽薹现象，抽薹早期防风根部木质化，品质降低，晚期根部腐烂，失去了药用价值，因此人工栽培防风抽薹是影响防风的质量和产量的关键因素，而对于防风抽薹是否与内源激素有关的研究还未见报道。本实验通过测定中药防风在抽薹前后内源激素生长素（IAA），赤霉素（GA），脱落酸（ABA）等量的动态变化，找出中药防风早期抽薹与内源激素量的变化关系，为进一步研究防风早期抽薹的机制提供理论依据，为抑制或解决中药防风的早期抽薹现象扩宽解决途径提供参考，从而提高防风的品质和产量。 1 材料、仪器与试药 1.1 材料

材料为吉林农业大学生态园区防风GAP基地的二年生防风，由张连学教授鉴定为正品防风Saponikovia cata (Turcz.) Sehischk。采集时间为2008年5月20日至2009年8月18日，每10天采集1次，前5次采集的样品均为未抽薹防风，后5次采集的样品均为抽薹防风。为了保证实验条件的一致性，每次采集样品时间均为15:20～15:50。 1.2 仪器与试药

Waters2695高效液相色谱仪、RE—52AA旋转蒸发器、KQ—250B超声波清洗仪、TGL—20LM高速冷冻离心机、UV—754紫外可见分光光度计。IAA、GA和ABA对照品（质量分数均为99.8 %）均购自于Sigma公司，甲醇和乙腈为色谱纯，其他试剂均为分析纯。 2 方法 2.1 色谱条件

色谱柱：CentuySILC₁₈ODS反相柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；柱温：35 ℃；检测波长为254 nm；体积流量0.7 mL/min；流动相为甲醇-乙腈-0.7%乙酸40∶15∶45。 2.2 对照品储备液的制备

分别精密称定IAA、GA、ABA 3种对照品各3 mg，置于10 mL量瓶中，用甲醇定容。超声溶解，静置备用。 2.3 标准曲线的绘制

精密吸取上述储备液，用甲醇分别制成0.300、0.600、0.900、1.50、3.00 mg/mL 5个不同质量浓度的对照品溶液，在按“2.1”项色谱条件进行分析，以对照品溶液的质量浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，进行回归分析得标准回归方程，分别为IAA：Y＝0.009 1 X－0.833 2（r＝0.999 9）；GA：Y＝0.092 1 X－12.879（r＝0.999 8）；ABA：Y＝0.039 9 X－1.051 2（r＝0.999 6）。结果表明IAA、GA和ABA在0.3～6.0 mg/mL内线性关系良好。 2.4 3种内源激素的测定

精密称定防风根、茎、叶样品各2 g，研细，加10 mL冰甲醇（80%），转入100 mL三角瓶中，加80%冰甲醇20 mL超声震荡2 h（低于4 ℃），过滤，滤渣中加80%冰甲醇20 mL，摇匀，置-20 ℃冰箱中12 h，过滤，合并滤液，于-20 ℃冰箱放置12 h，取滤液10 mL上Seppar C₁₈小柱，用20 mL乙腈洗脱，收集洗脱液，过0.45 μm微孔滤膜，滤液备用^[6,7]。在“2.1”项色谱条件下取滤液1 μL进样分析，记录峰面积。将所得的峰面积代入相应的回归方程，计算质量浓度，进而得出3种内源激素（GA、IAA、ABA）的量。每种样品设3个平行，取平均值。 3 结果与分析 3.1 防风抽薹前后IAA量的动态变化

防风在抽薹前后根、茎、叶中IAA的量变化趋势基本相同，即抽薹前IAA的量呈缓慢上升趋势，抽薹后IAA的量急剧下降，且抽薹前防风IAA的量均高于抽薹后。通过对数据分析表明，防风在抽薹前后根、茎、叶中IAA的量出现最高点的时间略有差异，根和茎的IAA量达到最高是在6月29日，分别是45.2和55.45 ng/g，叶的IAA量达到最高（46.69 ng/g）是在6月19日；到8月18日后根、茎、叶IAA的量达到最低18.23、24.36、17.44 ng/g，其中叶的IAA量最低，见图 1。

图 1 防风抽薹前后根、茎、叶中IAA的量Fig.1 Contents of IAA in roots,stems,and leaves of S.cata before and after bolting

防风在抽薹前后根、茎、叶中GA的量变化趋势基本相同，即抽薹前GA的量缓慢上升，抽薹后GA的量急剧下降。通过对数据分析表明：防风在抽薹前后根、茎、叶中GA的量出现最高点的时间基本相同，即在6月29日根、茎、叶中GA的量最高，分别是6.21、6.83、6.02 ng/g，且抽薹前防风GA的量均高于抽薹后；到8月18日后根、茎、叶GA的量达到最低，分别是1.30、1.98、1.43 ng/g，其中根的GA量最低，见图 2。

图 2 防风抽薹前后根、茎、叶中GA量Fig. 2 Contents of GA in roots,stems,and leaves of S. cata before and after bolting

防风在抽薹前后根、茎、叶中ABA的量变化趋势基本相同，即抽薹前（6月29日前）ABA的量虽略有起伏，但基本保持在同一水平，抽薹后（7月9日后）ABA的量急剧上升，明显高于抽薹前。通过对数据分析表明：在8月18日根、茎、叶ABA的量已经达到1 812、2 236、2 198 ng/g，其中茎的ABA量最高，见图 3。

图 3 防风抽薹前后根、茎、叶中ABA量Fig. 3 Contents of ABA in roots,stems,and leaves of S.cata before and after bolting

通过对防风抽薹前后3种激素IAA、GA、ABA量变化测定表明：防风抽薹前后内源激素IAA、GA、ABA量变化显著，即抽薹前IAA和GA的量均高于抽薹后，而ABA的量抽薹前明显低于抽薹后。由此可见，防风内源激素量的变化与防风抽薹有一定的关系，进而可以初步推断：防风内源激素量的变化导致了防风的早期抽薹，同时也为进一步研究防风早期抽薹机制提供一定的理论依据。 4 讨论

曾有报道指出，合理密植，适当增加育苗和定植的密度，使植株相互遮荫，减少光照强度，控制防风的快速生长，抑制花芽的分化、抽薹。在这种环境下生长，叶片稀少、瘦小，制造的营养只能维持正常的生活所需，或少有结余供缓慢生长，使防风无力抽薹开花结实^[8]。这也就是说明利用各种逆境条件，促进植物体内ABA量的增加，从而抑制植物体内IAA、GA的量^[9]。这与本实验研究IAA、GA、ABA 3种激素之间的相互关系较为一致。因此，防风的早期抽薹与IAA、GA、ABA 3种激素量可能有着直接的关系。

在本实验中，采用高效液相色谱法测定防风中IAA、GA、ABA 3种激素的量，准确、分析速度快、稳定、可靠，但测定时经常见到多种内源激素分离差，峰性不良及严重拖尾现象，因此选择合适流动相、体积流量、柱温等色谱条件是十分关键的。由于内源激素在植物体内量很低，一定要在同等条件下快速采集样品，在提取和测定的过程中，严格遵守实验步骤，尽量减少误差。