痛风性关节炎是以高尿酸血症为生化基础，继发尿酸盐结晶沉积、关节损害、结石形成所致的急慢性关节炎^[1]。严重者可造成骨质破坏、关节畸形，表现为关节红、肿，疼如刀绞，痛剧难忍。目前治疗药物如非甾体类抗炎药普遍具有难以承受的副作用，如胃肠毒性、肾毒性或胃肠道出血等^[2]。中药和天然药物具有多靶点治疗、副作用小的特征，因此从中药和天然药物中寻找能够治疗痛风性关节炎

的有效低毒药物具有重要意义。芪桂痛风片来源于临床经验方，由黄芪、五加皮、桂枝、浙贝母、刘寄奴、秦皮等8味中药组成，具有扶正祛邪、通络止痛的功效，用于慢性痛风性关节炎，症见脏腑气弱、痰瘀阻滞、经络不通导致的轻、中度疼痛。本研究以注射尿酸钠致大鼠关节炎模型观察芪桂痛风片治疗痛风性疼痛的作用效果，并以小鼠热板及醋酸扭体模型，验证芪桂痛风片的镇痛效果。

芪桂痛风片，含生药5.95 g/片，拟临床人日用量为以生药计0.64 g/kg，江苏康缘药业股份有限公司，批号20111020；阿司匹林泡腾片，含阿司匹林0.5 g/片，临床人日用量以阿司匹林计0.03 g/kg，阿斯利康制药有限公司，批号1111134；痛风定胶囊，临床人日用量以内容物计0.07 g/kg，成都中汇制药有限公司，批号100805；尿酸，美国Alfa公司，批号10137154；氢氧化钠，南京化学试剂有限公司，批号11121911646；盐酸，南京化学试剂有限公司，批号09091030448；聚山梨酯80，国药集团化学试剂有限公司，批号F20050324；冰醋酸，南京化学试剂有限公司，批号11082511054。

尿酸钠混悬液的配制：194 mL蒸馏水加1mol/L NaOH 6 mL，煮沸，加1 g尿酸，用1 mol/L盐酸调pH 7.2，搅拌冷却。4 ℃冰箱保存24 h，去上清液，用滤纸将沉淀物水分吸干，放入干燥箱，70 ℃烘2 h，取出，刮下粉末，放入研钵内研成细末，用60目的金属网筛过筛，装瓶备用。250 mg尿酸钠结晶加9 mL生理盐水，再加1 mL聚山梨酯80，加热搅拌，配成10 mL尿酸钠混悬液。

YLS—3E电子压痛仪，济南益延科技发展有限公司；MP12001型电子天平，上海市恒平科学仪器有限公司；YLS—6B智能热板仪，山东省医学科学院设备站。

SPF级SD大鼠，雄性，体质量180～220 g，由苏州工业园区爱尔麦特科技有限公司提供，生产许可证SCXK（苏）2009-0001；清洁级ICR小鼠，体质量18～22 g，由南通大学实验动物中心提供，生产许可证SCXK（苏）2008-0010，使用许可证号SYXK（苏）2003-0029。

SD大鼠72只，适应性饲养3 d后，称定质量，按照体质量随机分为6组，每组12只，即模型组，阳性药阿司匹林组，痛风定胶囊组，芪桂痛风片高、中、低剂量组。模型组ig给予蒸馏水10 mL/kg，阿司匹林组ig给予阿司匹林0.18 g/kg，痛风定胶囊组ig给予痛风定胶囊0.43 g/kg，芪桂痛风片组分别ig给予芪桂痛风片8.10、4.05、2.03 g/kg（以生药计，相当于临床等效剂量2、1、1/2倍）。各组给药容积均为10 mL/kg，1次/d，连续给药5 d。使用尿酸钠造模前，各组大鼠使用电子压痛仪进行大鼠右踝关节基础痛阈测定，为防止机械损伤，机械压力控制在 500 g以内，并在痛阈测定前2 d对各组大鼠进行训练。末次给药后，各组大鼠用足跖容积测定仪测定造模前大鼠右后足足跖容积，给药1 h后用6号注射针在各大鼠右侧踝关节背侧从45°方向插入胫骨肌腱内侧，将0.2 mL尿酸钠溶液注入到踝关节腔^[3]。各组大鼠在尿酸钠造模后1、3、5 h测定大鼠右踝关节痛阈，计算痛阈降低值和痛阈降低率。

痛阈降低值=造模前大鼠右踝关节痛阈－造模后大鼠右踝关节痛阈

痛阈降低率=（造模前大鼠右踝关节痛阈－造模后大鼠右踝关节痛阈）/造模前大鼠右踝关节痛阈

ICR小鼠130只，雌性，适应性饲养3 d。第4天筛选在5～30 s（痛阈）内发生舔足的小鼠用于实验（记录痛阈合格动物的痛阈时间）。将筛选合格的小鼠按痛阈值高低随机分为5组，每组20只，即对照组，痛风定胶囊组，芪桂痛风片高、中、低剂量组。对照组ig给予蒸馏水20 mL/kg，痛风定胶囊组ig给予痛风定胶囊0.62 g/kg；芪桂痛风片组分别ig给予芪桂痛风片11.70、5.85、2.93 g/kg（以生药计，相当于临床等效剂量的2、1、1/2倍）。各组给药容积均为20 mL/kg，1次/d，连续给药5 d。末次给药后60、90、120 min，将小鼠放在预热（52±0.5）℃的金属板上，观察并记录小鼠舔后足反应的潜伏期作为痛阈指标（以30 s作为小鼠添足潜伏期上限，以免烫伤小鼠皮肤）^[4]。

ICR小鼠112只，雄性，适应性饲养3 d后，将小鼠随机分为5组，每组20只，即对照组，痛风定胶囊组，芪桂痛风片高、中、低剂量组。对照组ig给予蒸馏水2 0mL/kg，痛风定胶囊组ig给予痛风定胶囊0.62 g/kg；芪桂痛风片组分别ig给予芪桂痛风片11.70、5.85、2.93 g/kg（以生药计，相当于临床等效剂量的2、1、1/2倍）。各组给药容积均为20 mL/kg，1次/d，连续给药5 d。末次给药后1 h，各组小鼠ip 0.7%醋酸0.2 mL/只，观察15 min内各组小鼠扭体反应次数和扭体潜伏期^[4]。

资料数据以x±s 表示，量反应资料统计方法采用t检验，质反应资料统计方法采用χ²检验。

造模1 h后，芪桂痛风片高剂量组大鼠痛阈降低值和降低率与模型组比较差异具有显著性（P＜0.01）；造模3、5 h后，大鼠右踝关节痛阈降低较为明显，各药物组大鼠右踝关节痛阈改变较模型组低，其中芪桂痛风片高、中剂量组痛阈降低值和降低率与模型组比较差异均具有显著性（P＜0.05、0.01）。结果见表 1。

表 1(Table 1)

表 1 芪桂痛风片对尿酸钠致急性关节炎大鼠右踝关节痛阈降低值的影响(x±s,n=12) Table 1 Effect of Qigui Tongfeng Tablets on pain threshold in arthritis model of rats(x±s,n=12) 组 别 剂 量/ (g·kg−1) 基础痛阈/g 痛阈降低值/g 痛阈降低率/% 1 h 3 h 5 h 1 h 3 h 5 h 模型 — 367.59±61.38 27.58±11.13 53.53±15.89 71.59±20.85 7.45±2.56 14.64±4.09 19.63±5.56 阿司匹林 0.18 364.44±63.54 16.32±11.47 36.12±14.31** 53.16±22.17 4.50±3.19 9.69±3.56** 14.56±5.33 痛风定胶囊 0.43 371.89±66.40 23.73±8.34 45.06±12.93 64.58±16.10 6.79±3.23 12.61±4.50 18.12±6.24 芪桂痛风片 2.03 375.38±57.90 21.51±9.77 47.01±17.30 70.93±34.48 5.99±3.48 12.70±4.87 19.00±8.76 4.05 373.55±56.65 19.01±10.66 39.88±12.42 54.80±16.70 5.31±3.23 10.90±3.74 14.91±4.58 8.10 379.56±35.42 12.11±22.46 28.03±18.94** 42.77±19.55** 3.22±5.90 7.49±5.35** 11.34±5.35** 与模型组比较：*P＜0.05 **P＜0.01 *P<0.05 **P <0.01vs model group

表 1 芪桂痛风片对尿酸钠致急性关节炎大鼠右踝关节痛阈降低值的影响(x±s,n=12) Table 1 Effect of Qigui Tongfeng Tablets on pain threshold in arthritis model of rats(x±s,n=12)

实验结果显示，给药后各组小鼠舔足潜伏期均比模型组延长。给药60 min后，芪桂痛风片高剂量组与对照组比较差异具有显著性（P＜0.01）；给药90 min后，芪桂痛风片各剂量组与对照组比较差异均具有显著性（P＜0.05、0.01）；给药120 min后，芪桂痛风片中、高剂量组与对照组比较差异均具有显著性（P＜0.05）；提示芪桂痛风片能减轻小鼠由热板引起的疼痛。结果见表 2。

表 2(Table 2)

表 2 芪桂痛风片对小鼠热板舔足潜伏期的影响(x±s,n=20) Table 2 Effect of Qigui Tongfeng Tablets on hot-plate test in mice(x±s,n=20) 组 别 剂量/(g·kg−1) 舔足潜伏期/s 60 min 90 min 120 min 对照 — 14.01±3.12 14.34±3.67 14.18±3.71 痛风定胶囊 0.62 16.27±5.49 18.98±6.04** 17.47±4.55** 芪桂痛风片 2.93 16.20±6.58 18.26±6.08 15.43±4.43 5.85 16.64±5.92 19.83±5.82** 16.85±3.97 11.70 18.48±4.89** 21.07±5.06** 17.36±3.78 与对照组比较：*P＜0.05 **P＜0.01 *P<0.05 **P <0.01vs normal group

表 2 芪桂痛风片对小鼠热板舔足潜伏期的影响(x±s,n=20) Table 2 Effect of Qigui Tongfeng Tablets on hot-plate test in mice(x±s,n=20)

对小鼠扭体的χ²检验结果可见，各给药组小鼠扭体率均低于模型组，其中芪桂痛风片高剂量组与模型组比较差异具有显著性（P＜0.05）；对小鼠扭体次数的t检验结果可见，各给药组小鼠扭体次数低于模型组，其中芪桂痛风片高、中剂量组与模型组比较差异具有显著性（P＜0.01）；对小鼠扭体潜伏期的t检验结果可见，各给药组小鼠扭体潜伏期高于模型组，其中芪桂痛风片高、中剂量组与模型组比较差异均具有显著性（P＜0.05、0.01）。提示芪桂痛风片能减轻小鼠由醋酸引起的疼痛。结果见表 3。

表 3(Table 3)

表 3 芪桂痛风片对小鼠扭体的影响 Table 3 Effect of Qigui Tongfeng Tablets on hot-plate test in mice 组别 剂量/(g·kg−1) 扭体动物数/只 扭体率/% 扭体次数/次 扭体潜伏期/s 模型 — 18 90 23.35±11.35 299.50±218.29 痛风定胶囊 0.62 17 85 16.05±12.07 377.90±241.87 芪桂痛风片 2.93 17 85 19.10±11.78 412.20±232.40 5.85 15 75 12.90±10.41** 486.45±286.54 11.70 12 60 10.60±9.65** 568.90±288.78**

表 3 芪桂痛风片对小鼠扭体的影响 Table 3 Effect of Qigui Tongfeng Tablets on hot-plate test in mice

痛风性关节炎是痛风病的中期阶段，西医认为该病的发病机制与遗传因素和环境因素有关，由于基因突变等原因引发酶的结构改变和/或尿酸盐转运蛋白功能改变导致尿酸合成增多和排泄减少，同时在高嘌呤饮食、酗酒、肥胖等饮食习惯和生活方式影响下出现高尿酸血症。而高尿酸血症是否引发痛风性关节炎的发作还有诱发因素，如全身因素包括精神紧张、疲劳、酗酒、感染等，局部因素包括温度、pH值、创伤，均可诱使尿酸盐结晶沉积引起急性痛风发作^[5]。

中医认为本病病因复杂，涉及先天后天、气血津液、内因外因、饮食、情志等多种因素。其中禀赋不足、脏腑功能下降是发病之本，外感、内生之邪是发病的主要条件，饮食失节是本病诱发和加重的重要因素^[6]。源于此，芪桂痛风片处方以黄芪建中汤之意为基础，结合临床证候特点和多年临床经验配伍组合而成，临床应用表明疗效确切。此外处方所含药材中五加皮有抗关节炎和镇痛作用^[7]，桂枝、浙贝母、刘寄奴均在实验性疼痛模型中表现出良好镇痛作用^{[8, 9, 10]}，秦皮具有抗炎镇痛和降低血尿酸的作用^[11]，进一步提示处方配伍的合理性。

本研究中采用尿酸钠结晶注射法造成急性大鼠关节炎模型，模拟痛风性关节炎的急性发作过程。关节腔内的尿酸盐结晶被白细胞吞噬后，细胞膜破裂，产生氧自由基，释放出溶酶体酶、激肽、组胺、趋化因子等物质，引起局部血管扩张和渗透性增加、血浆渗出、白细胞聚集等炎症反应；炎细胞释放白细胞介素-1、肿瘤坏死因子等细胞因子，激活环氧化酶-2、合成前列腺素，使炎症进一步扩大，组织被溶解侵蚀，从而表现出急性痛风性关节炎的典型症状^[12]。造模后大鼠关节出现明显的红肿热痛等炎症反应，在压痛检测中表现为痛阈降低、痛觉敏感，与临床上痛风的急性发作症状相似。

给予芪桂痛风片之后，大鼠的痛阈降低值和痛阈降低率有所下降，即痛觉过敏有所改善，且呈现一定的剂量相关性，提示芪桂痛风片对尿酸钠所致的关节炎性疼痛有一定的治疗作用。同时芪桂痛风片对小鼠热板和醋酸注射所致的疼痛均有一定的抑制作用，该结果与芪桂痛风片对大鼠关节炎的镇痛作用趋势一致。提示芪桂痛风片对于痛风引起的关节炎具有良好的镇痛作用，同时避免了化学镇痛药物的副作用，值得进一步深入研究其镇痛作用机制，并考察其对痛风疾病其他相关药效的作用。