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主办：天津药物研究院 中国药学会
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2013, 44(2):199-202.
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2013.02.016
摘要:
目的 观察雷公藤甲素脂质体透皮制剂对II型胶原诱发的关节炎（CIA）的影响及不良反应。方法 制备CIA小鼠模型。造模后小鼠随机分为模型组、雷公藤片剂对照组、雷公藤甲素脂质体透皮制剂（简称透皮制剂）高、中、低剂量（200、100、50 mg/kg）组。免疫组化法计数滑膜血管翳数目；检测血清丙氨酸转氨酶（ALT）和尿素氮（BUN）水平；观察小鼠心、肝、肾、胃病理组织学改变。结果 与模型组比较，透皮制剂高剂量组和雷公藤片剂组滑膜增生血管翳数量显著减少（P＜0.01）。与模型组比较，雷公藤片剂组小鼠血清ALT和BUN水平显著升高（P＜0.01）；透皮制剂高、中、低剂量组小鼠血清ALT和BUN水平较雷公藤片剂组显著降低（P＜0.01）。雷公藤片剂组小鼠显示明显的心、肝、肾、胃细胞及组织损伤；透皮制剂高剂量组小鼠心、肝、肾、胃均未发现明显的病理改变。结论 雷公藤甲素脂质体透皮制剂高剂量和雷公藤片剂均具有抗CIA的作用；雷公藤甲素脂质体透皮制剂具有较高的生物活性，与口服给药的作用相当，且明显减少大剂量口服给药所产生的不良反应。
目的 观察雷公藤甲素脂质体透皮制剂对II型胶原诱发的关节炎（CIA）的影响及不良反应。方法 制备CIA小鼠模型。造模后小鼠随机分为模型组、雷公藤片剂对照组、雷公藤甲素脂质体透皮制剂（简称透皮制剂）高、中、低剂量（200、100、50 mg/kg）组。免疫组化法计数滑膜血管翳数目；检测血清丙氨酸转氨酶（ALT）和尿素氮（BUN）水平；观察小鼠心、肝、肾、胃病理组织学改变。结果 与模型组比较，透皮制剂高剂量组和雷公藤片剂组滑膜增生血管翳数量显著减少（P＜0.01）。与模型组比较，雷公藤片剂组小鼠血清ALT和BUN水平显著升高（P＜0.01）；透皮制剂高、中、低剂量组小鼠血清ALT和BUN水平较雷公藤片剂组显著降低（P＜0.01）。雷公藤片剂组小鼠显示明显的心、肝、肾、胃细胞及组织损伤；透皮制剂高剂量组小鼠心、肝、肾、胃均未发现明显的病理改变。结论 雷公藤甲素脂质体透皮制剂高剂量和雷公藤片剂均具有抗CIA的作用；雷公藤甲素脂质体透皮制剂具有较高的生物活性，与口服给药的作用相当，且明显减少大剂量口服给药所产生的不良反应。
2014, 45.
摘要:
目的 对连接黑三棱初生代谢及次生代谢途径的关键酶苯丙氨酸解氨酶（Phenylalanine ammonia lyase，PAL），进行基因全长的克隆和生物学信息分析。方法 以黑三棱总RNA为模板，采用同源克隆法和RACE技术克隆黑三棱PAL基因的cDNA全长，并通过DNAMAN软件和ExPASy在线分析等方法对其生物信息学进行分析。结果 获得黑三棱PAL基因全长cDNA，GenBank注册号为KF633470，序列分析表明，所克隆的cDNA全长为2 413 bp，包含一个2 151 bp的开放阅读框架，编码716个氨基酸的蛋白。预测该蛋白的相对分子质量为1.98×105，等电点为4.84，无信号肽，含有PAL酶活性中心序列GTITASGDLVPLSYIAG。结论 首次克隆并获得黑三棱PAL基因全长cDNA，为黑三棱药效成分生源合成途径的阐明和改善中药材品质提供科学依据。
目的 对连接黑三棱初生代谢及次生代谢途径的关键酶苯丙氨酸解氨酶（Phenylalanine ammonia lyase，PAL），进行基因全长的克隆和生物学信息分析。方法 以黑三棱总RNA为模板，采用同源克隆法和RACE技术克隆黑三棱PAL基因的cDNA全长，并通过DNAMAN软件和ExPASy在线分析等方法对其生物信息学进行分析。结果 获得黑三棱PAL基因全长cDNA，GenBank注册号为KF633470，序列分析表明，所克隆的cDNA全长为2 413 bp，包含一个2 151 bp的开放阅读框架，编码716个氨基酸的蛋白。预测该蛋白的相对分子质量为1.98×105，等电点为4.84，无信号肽，含有PAL酶活性中心序列GTITASGDLVPLSYIAG。结论 首次克隆并获得黑三棱PAL基因全长cDNA，为黑三棱药效成分生源合成途径的阐明和改善中药材品质提供科学依据。
2014, 45.
摘要:
目的 分离珍稀濒危药用植物铁皮石斛咖啡酰辅酶A氧甲基转移酶（caffeoyl CoA O-methyltransferase，CCoAOMT）基因（DoOMT）并进行生物信息学和表达模式分析。方法 采用RT-PCR和RACE技术获基因cDNA全长；利用生物信息学软件预测蛋白的理化性质、结构域和三维建模等分子特性；用DNASTAR 6.0和MEGA 4.0分别进行氨基酸多序列比对和进化关系分析；借助实时定量PCR检测基因表达模式。结果 分离到DoOMT（GenBank注册号KF876839），cDNA全长1 005 bp，编码一条由239个氨基酸组成的多肽，相对分子质量为2.708×104，等电点5.03；DoOMT蛋白不含跨膜域和信号肽，具有氧甲基转移酶family 3、甲基转移酶的保守结构域（13～238、31～238）和8个保守基序；DoOMT与植物CCoAOMTs蛋白一致性为49.4%～78.7%，所在分支隶属于CCoAOMTs分子进化的1b类群，与单子叶植物香草亲缘关系最近；DoOMT基因转录本在石斛根、茎、叶器官中为组成型表达，茎中相对表达量较高，为叶中的4.562倍，根和叶中无显著差异。结论 铁皮石斛咖啡酰辅酶A氧甲基转移酶基因DoOMT的分子特征为进一步研究其在铁皮石斛次生代谢和生长发育过程中的作用奠定基础。
目的 分离珍稀濒危药用植物铁皮石斛咖啡酰辅酶A氧甲基转移酶（caffeoyl CoA O-methyltransferase，CCoAOMT）基因（DoOMT）并进行生物信息学和表达模式分析。方法 采用RT-PCR和RACE技术获基因cDNA全长；利用生物信息学软件预测蛋白的理化性质、结构域和三维建模等分子特性；用DNASTAR 6.0和MEGA 4.0分别进行氨基酸多序列比对和进化关系分析；借助实时定量PCR检测基因表达模式。结果 分离到DoOMT（GenBank注册号KF876839），cDNA全长1 005 bp，编码一条由239个氨基酸组成的多肽，相对分子质量为2.708×104，等电点5.03；DoOMT蛋白不含跨膜域和信号肽，具有氧甲基转移酶family 3、甲基转移酶的保守结构域（13～238、31～238）和8个保守基序；DoOMT与植物CCoAOMTs蛋白一致性为49.4%～78.7%，所在分支隶属于CCoAOMTs分子进化的1b类群，与单子叶植物香草亲缘关系最近；DoOMT基因转录本在石斛根、茎、叶器官中为组成型表达，茎中相对表达量较高，为叶中的4.562倍，根和叶中无显著差异。结论 铁皮石斛咖啡酰辅酶A氧甲基转移酶基因DoOMT的分子特征为进一步研究其在铁皮石斛次生代谢和生长发育过程中的作用奠定基础。
2013, 44.
摘要:
摘 要：目的 对24份不同产地石斛属样品的遗传多样性和亲缘关系进行分析。方法 采用ISSR分子标记技术和非加权平均距离法（UPGMA）对24份石斛属样品进行遗传多样性和聚类分析。结果 从100条ISSR引物中共筛选出6条多态性稳定、清晰的引物， 24份石斛样品共扩增出847个DNA片段，平均每个引物扩增出141个DNA片段，其多态性为100%。结论 24份不同产地石斛样品被划分为6个类群，遗传多样性非常丰富。
摘 要：目的 对24份不同产地石斛属样品的遗传多样性和亲缘关系进行分析。方法 采用ISSR分子标记技术和非加权平均距离法（UPGMA）对24份石斛属样品进行遗传多样性和聚类分析。结果 从100条ISSR引物中共筛选出6条多态性稳定、清晰的引物， 24份石斛样品共扩增出847个DNA片段，平均每个引物扩增出141个DNA片段，其多态性为100%。结论 24份不同产地石斛样品被划分为6个类群，遗传多样性非常丰富。
2014, 45.
摘要:
目的 分析根腐病三七根内细菌的多样性。方法 用牛肉膏蛋白胨培养基分离根腐病三七根内的细菌，经细菌通用引物27F/1492R扩增16S rDNA后，分别用Rsa I和Hin6 I限制性内切酶对扩增产物进行酶切，结合限制性片段长度多态性（RFLP）分析方法和DNA测序技术，对分离自根腐病三七根内的细菌进行初步鉴定。结果 根腐病三七根内的细菌分属于8个类群，依占总菌数的比例分别是芽孢杆菌属Bacillus 22.47%、无色杆菌属Achromobacter 5.62%、寡养单胞菌属Stenotrophomonas 5.62%、类芽孢杆菌属Paenibacillus 4.49%、鞘氨醇杆菌属Sphingobacterium 1.12%、苍白杆菌属Ochrobactrum 1.12%、不动杆菌属Acinetobacter 1.12%及肠杆菌科的一些属58.43%。结论 泛菌属和芽孢杆菌属是根腐病三七根中的两大优势细菌类群。
目的 分析根腐病三七根内细菌的多样性。方法 用牛肉膏蛋白胨培养基分离根腐病三七根内的细菌，经细菌通用引物27F/1492R扩增16S rDNA后，分别用Rsa I和Hin6 I限制性内切酶对扩增产物进行酶切，结合限制性片段长度多态性（RFLP）分析方法和DNA测序技术，对分离自根腐病三七根内的细菌进行初步鉴定。结果 根腐病三七根内的细菌分属于8个类群，依占总菌数的比例分别是芽孢杆菌属Bacillus 22.47%、无色杆菌属Achromobacter 5.62%、寡养单胞菌属Stenotrophomonas 5.62%、类芽孢杆菌属Paenibacillus 4.49%、鞘氨醇杆菌属Sphingobacterium 1.12%、苍白杆菌属Ochrobactrum 1.12%、不动杆菌属Acinetobacter 1.12%及肠杆菌科的一些属58.43%。结论 泛菌属和芽孢杆菌属是根腐病三七根中的两大优势细菌类群。
2013, 44(7):829-833.
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2013.07.011
摘要:
目的 探讨全国范围内白花蛇舌草注射液物质基础的差异性。方法 采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间串联质谱（UPLC-QTOF-MS）对16批样品进行测定，对采集的数据以保留时间和质荷比作为变量，进行主成分分析（PCA）。结果 通过PCA发现不同企业生产的样品自身差异较小，相互之间差异较大；通过载荷图分析筛选出对分组影响比较大的7种标记物。结论 全国范围内不同厂家生产的白花蛇舌草注射液不仅颜色差异较大，其内在的物质基础也存在明显的差异，这种差异主要体现在黄酮类和有机酸类成分的量上。
目的 探讨全国范围内白花蛇舌草注射液物质基础的差异性。方法 采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间串联质谱（UPLC-QTOF-MS）对16批样品进行测定，对采集的数据以保留时间和质荷比作为变量，进行主成分分析（PCA）。结果 通过PCA发现不同企业生产的样品自身差异较小，相互之间差异较大；通过载荷图分析筛选出对分组影响比较大的7种标记物。结论 全国范围内不同厂家生产的白花蛇舌草注射液不仅颜色差异较大，其内在的物质基础也存在明显的差异，这种差异主要体现在黄酮类和有机酸类成分的量上。
2014, 45.
摘要:
目的 为旋覆花属8种药用植物的分子鉴定提供依据。方法 本研究对4种旋覆花属药用植物的8个样本ITS2序列进行PCR扩增和测序，同时从GenBank下载13个样本。用MEGA5.0计算其种间、种内的K2P距离，各序列变异位点并进行聚类分析。结果 旋覆花属8种药用植物ITS2的长度为210～212 bp，变异位点为60个；旋覆花药材2种不同来源药用植物有3个变异位点，与其他同属6种植物有13～43个变异位点；构建的系统发育树显示旋覆花药材的不同基原样本各聚为一支，能很好与其他6种植物区分；旋覆花Inula japonica、欧亚旋覆花I. britannica、总状土木香I. racemosa、土木香I. helenium4个物种的遗传距离值远小于与羊耳菊I. cappa、赤茎羊耳菊I. rubricaulis、显脉旋覆花I. nervosa、泽兰羊耳菊I. eupatoerioides 4个物种的遗传距离值。结论 ITS2序列能够为旋覆花属8种药用植物的鉴定和Flora of China对羊耳菊、赤茎羊耳菊、显脉旋覆花、泽兰羊耳菊分类修订提供一定的分子证据。
目的 为旋覆花属8种药用植物的分子鉴定提供依据。方法 本研究对4种旋覆花属药用植物的8个样本ITS2序列进行PCR扩增和测序，同时从GenBank下载13个样本。用MEGA5.0计算其种间、种内的K2P距离，各序列变异位点并进行聚类分析。结果 旋覆花属8种药用植物ITS2的长度为210～212 bp，变异位点为60个；旋覆花药材2种不同来源药用植物有3个变异位点，与其他同属6种植物有13～43个变异位点；构建的系统发育树显示旋覆花药材的不同基原样本各聚为一支，能很好与其他6种植物区分；旋覆花Inula japonica、欧亚旋覆花I. britannica、总状土木香I. racemosa、土木香I. helenium4个物种的遗传距离值远小于与羊耳菊I. cappa、赤茎羊耳菊I. rubricaulis、显脉旋覆花I. nervosa、泽兰羊耳菊I. eupatoerioides 4个物种的遗传距离值。结论 ITS2序列能够为旋覆花属8种药用植物的鉴定和Flora of China对羊耳菊、赤茎羊耳菊、显脉旋覆花、泽兰羊耳菊分类修订提供一定的分子证据。
2013, 44.
摘要:
摘 要：目的 获得白花丹参丙酮酸脱羧酶全长基因，分析该基因在白花丹参不同组织部位，以及缺氧胁迫处理后的该基因表达差异。方法 利用cDNA文库筛选获得丙酮酸脱羧酶SmPDC基因全长，利用半定量RT-PCR，分析SmPDC基因在白花丹参不同部位的表达情况，及缺氧处理条件下的表达情况。结果 获得的SmPDC基因由2 190个核苷酸组成，编码605个氨基酸，蛋白相对分子质量约6.485×104，等电点pI 5.49；半定量RT-PCR检测，该基因在丹参的根中表达量最高，其次是茎和叶；缺氧胁迫处理会诱导该基因的表达，随胁迫时间延长表达量逐渐增加。结论 白花丹参SmPDC基因是PDC家族新成员，其功能与植物耐缺氧代谢途径有关。
摘 要：目的 获得白花丹参丙酮酸脱羧酶全长基因，分析该基因在白花丹参不同组织部位，以及缺氧胁迫处理后的该基因表达差异。方法 利用cDNA文库筛选获得丙酮酸脱羧酶SmPDC基因全长，利用半定量RT-PCR，分析SmPDC基因在白花丹参不同部位的表达情况，及缺氧处理条件下的表达情况。结果 获得的SmPDC基因由2 190个核苷酸组成，编码605个氨基酸，蛋白相对分子质量约6.485×104，等电点pI 5.49；半定量RT-PCR检测，该基因在丹参的根中表达量最高，其次是茎和叶；缺氧胁迫处理会诱导该基因的表达，随胁迫时间延长表达量逐渐增加。结论 白花丹参SmPDC基因是PDC家族新成员，其功能与植物耐缺氧代谢途径有关。
2013, 44.
摘要:
摘 要：目的 在不同海拔进行当归Angelica sinensis生态适应性实验，探索影响当归阿魏酸积累的关键因子。方法 通过田间实验测定当归阿魏酸量的变化和生理生化指标、光合参数、生态因子。结果 当归根中阿魏酸量随海拔升高而增加，且海拔2 780 m处理比海拔2 360 m处理高14.5%，差异显著（P＜0.05）。分析影响当归阿魏酸积累的关键因子表明，降雨量（r＝0.898 8）和温度（r＝?0.799 1）是关键生态因子，可溶性糖（r＝?0.974 9）和超氧化物歧化酶（SOD）（r＝?0.840 8）是关键生理生化因子，湿度（r＝0.969 9）和光合活性辐射(r＝0.946 7)是关键光合参数因子。结论 适当升高种植海拔，增加降雨量和湿度，降低温度和可溶性糖量均有利于当归中阿魏酸的转化积累。
摘 要：目的 在不同海拔进行当归Angelica sinensis生态适应性实验，探索影响当归阿魏酸积累的关键因子。方法 通过田间实验测定当归阿魏酸量的变化和生理生化指标、光合参数、生态因子。结果 当归根中阿魏酸量随海拔升高而增加，且海拔2 780 m处理比海拔2 360 m处理高14.5%，差异显著（P＜0.05）。分析影响当归阿魏酸积累的关键因子表明，降雨量（r＝0.898 8）和温度（r＝?0.799 1）是关键生态因子，可溶性糖（r＝?0.974 9）和超氧化物歧化酶（SOD）（r＝?0.840 8）是关键生理生化因子，湿度（r＝0.969 9）和光合活性辐射(r＝0.946 7)是关键光合参数因子。结论 适当升高种植海拔，增加降雨量和湿度，降低温度和可溶性糖量均有利于当归中阿魏酸的转化积累。
2014, 45.
摘要:
目的 分析14种山药种质ITS序列，为山药种质资源分子鉴别和进化关系研究提供依据。方法 PCR克隆扩增ITS序列并进行双向测序，Clustal X（v1.83）软件进行序列比对，Mega（v4.1）计算序列核苷酸比例及遗传距离，并构建邻接树（Neighbor-joining tree，NJ Tree）和最大简约树（Maximum parsimony tree，MP Tree）。结果 14种山药种质ITS序列全长为558～594 bp，其中ITS1长度为141～165 bp，ITS2长度为146～158 bp；ITS序列存在大量的转换、颠换，转化/颠换比率为5.347，ITS1和ITS2序列均显示102个变异位点；14种山药种质K2-P遗传距离为0～0.517 2；薯蓣Dioscorea opposita、褐苞薯蓣Dioscorea persimilis、日本薯蓣Dioscore japonica关系亲密，组成单一支系；参薯Dioscorea alata与山薯Dioscorea fordii关系亲密，聚为另一分支，并位于发育树基部。结论 ITS序列系统树为澄清山药类资源进化关系奠定了基础，序列中丰富的变异位点为多基原山药鉴别提供了科学依据。
目的 分析14种山药种质ITS序列，为山药种质资源分子鉴别和进化关系研究提供依据。方法 PCR克隆扩增ITS序列并进行双向测序，Clustal X（v1.83）软件进行序列比对，Mega（v4.1）计算序列核苷酸比例及遗传距离，并构建邻接树（Neighbor-joining tree，NJ Tree）和最大简约树（Maximum parsimony tree，MP Tree）。结果 14种山药种质ITS序列全长为558～594 bp，其中ITS1长度为141～165 bp，ITS2长度为146～158 bp；ITS序列存在大量的转换、颠换，转化/颠换比率为5.347，ITS1和ITS2序列均显示102个变异位点；14种山药种质K2-P遗传距离为0～0.517 2；薯蓣Dioscorea opposita、褐苞薯蓣Dioscorea persimilis、日本薯蓣Dioscore japonica关系亲密，组成单一支系；参薯Dioscorea alata与山薯Dioscorea fordii关系亲密，聚为另一分支，并位于发育树基部。结论 ITS序列系统树为澄清山药类资源进化关系奠定了基础，序列中丰富的变异位点为多基原山药鉴别提供了科学依据。
2014, 45.
摘要:
目的 建立测定金银花药材中新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C、断氧化马钱子苷8种成分的HPLC方法。方法 采用RP-HPLC法，色谱柱为Luna 5 μ C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相为甲醇-0.1%磷酸水溶液，梯度洗脱，0～20 min，12%～30% A；20～60 min，30%～50% A，体积流量1.0 mL/min；检测波长237、324 nm，柱温30 ℃。结果 8种成分均达到基线分离，各成分均有较宽的线性范围和良好的线性关系（r＞0.999 9）；回收率在98.72%～102.50%。结论 本方法准确灵敏、重复性好，能较全面地评价金银花药材的质量。
目的 建立测定金银花药材中新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C、断氧化马钱子苷8种成分的HPLC方法。方法 采用RP-HPLC法，色谱柱为Luna 5 μ C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相为甲醇-0.1%磷酸水溶液，梯度洗脱，0～20 min，12%～30% A；20～60 min，30%～50% A，体积流量1.0 mL/min；检测波长237、324 nm，柱温30 ℃。结果 8种成分均达到基线分离，各成分均有较宽的线性范围和良好的线性关系（r＞0.999 9）；回收率在98.72%～102.50%。结论 本方法准确灵敏、重复性好，能较全面地评价金银花药材的质量。
2014, 45.
摘要:
目的 对栽培太子参的遗传多样性与药材质量进行综合评价，为合理利用太子参种质资源及优良品种选育提供依据。方法 采用ISSR分子标记分析太子参12个栽培种源的遗传多样性，并用HPLC测定各种源药材中太子参环肽B的量。结果 10条ISSR引物扩增出82条带，其中多态性条带73条，多态位点百分率（PPL）为89.02%。Nei’s遗传多样性指数（H）平均值0.257 9，Shannon’s多态性指数（I）平均值为0.388 4，遗传分化系数（Gst）为0.274 1，种源间基因流（Nm）为1.323 8。基于遗传一致度，12个种源可聚为3类。太子参环肽B量在种源间和种源内个体差异较大，种源4的太子参环肽B量（0.049 4%）明显高于其他种源，且种源内变异系数（9.51%）较小。结论 栽培太子参各产地间的换种及其生物学特性是其遗传多样性水平丰富的主要原因；综合考虑遗传多样性水平和太子参环肽B量，种源3和4种质资源优良，适宜作为太子参种质资源保存及优良品种选育的对象。
目的 对栽培太子参的遗传多样性与药材质量进行综合评价，为合理利用太子参种质资源及优良品种选育提供依据。方法 采用ISSR分子标记分析太子参12个栽培种源的遗传多样性，并用HPLC测定各种源药材中太子参环肽B的量。结果 10条ISSR引物扩增出82条带，其中多态性条带73条，多态位点百分率（PPL）为89.02%。Nei’s遗传多样性指数（H）平均值0.257 9，Shannon’s多态性指数（I）平均值为0.388 4，遗传分化系数（Gst）为0.274 1，种源间基因流（Nm）为1.323 8。基于遗传一致度，12个种源可聚为3类。太子参环肽B量在种源间和种源内个体差异较大，种源4的太子参环肽B量（0.049 4%）明显高于其他种源，且种源内变异系数（9.51%）较小。结论 栽培太子参各产地间的换种及其生物学特性是其遗传多样性水平丰富的主要原因；综合考虑遗传多样性水平和太子参环肽B量，种源3和4种质资源优良，适宜作为太子参种质资源保存及优良品种选育的对象。
2014, 45.
摘要:
目的 研究不同培养条件对铁皮石斛类原球茎在生物反应器中培养的影响。方法 采用接种量、通气量、蔗糖浓度、光照强度等单因素试验设计，烘干法测定生物量，苯酚-硫酸法测定多糖量，数据采用SPSS16.0软件分析。结果 在生物反应器培养条件下，利于铁皮石斛类原球茎增殖和多糖积累的培养基组分为：1/2 MS基本培养基添加1.0 mg/L NAA、5%椰乳、3%蔗糖，pH值为6.0。接种量为40 g/L，采用孔径为15 μm的多孔喷头，通气量用1.0 L/min和0. 5 L/min交替使用以及光照强度为2 000 lx等培养条件有效地提高类原球茎增殖系数和多糖量。结论 不同的培养条件对铁皮石斛类原球茎的生长、多糖的变化有显著影响，适宜的培养条件对铁皮石斛类原球茎的生物量和主要药用成分的生产具有重要的实践意义。
目的 研究不同培养条件对铁皮石斛类原球茎在生物反应器中培养的影响。方法 采用接种量、通气量、蔗糖浓度、光照强度等单因素试验设计，烘干法测定生物量，苯酚-硫酸法测定多糖量，数据采用SPSS16.0软件分析。结果 在生物反应器培养条件下，利于铁皮石斛类原球茎增殖和多糖积累的培养基组分为：1/2 MS基本培养基添加1.0 mg/L NAA、5%椰乳、3%蔗糖，pH值为6.0。接种量为40 g/L，采用孔径为15 μm的多孔喷头，通气量用1.0 L/min和0. 5 L/min交替使用以及光照强度为2 000 lx等培养条件有效地提高类原球茎增殖系数和多糖量。结论 不同的培养条件对铁皮石斛类原球茎的生长、多糖的变化有显著影响，适宜的培养条件对铁皮石斛类原球茎的生物量和主要药用成分的生产具有重要的实践意义。
2014, 45.
摘要:
目的 microRNAs（miRNA）是一类非编码的单链小分子RNA，在植物的生长发育、逆境适应和代谢调控等过程中发挥着至关重要的作用。本研究拟利用地黄EST数据通过生物信息学手段预测新的地黄miRNA，为今后地黄miRNA的生物学研究奠定基础。方法 本研究根据miRNA 家族在不同物种中的保守性，将miRBase数据库中的已知植物miRNA与通过高通量测序获得的93172条地黄EST序列进行同源比对，按照miRNA前体应具备的标准进行筛选。结果 预测到分属于8个家族的8条潜在地黄miRNA序列，并通过实时荧光定量PCR对8条预测的miRNA进行了检测，证实8条miRNA在地黄中真实存在。随后利用软件对8条地黄miRNA的靶基因进行预测，发现其靶基因主要编码与地黄生长发育、代谢以及胁迫响应等过程相关的蛋白。结论 新预测的地黄miRNA及其靶基因为今后研究它们在地黄中的生物学功能奠定了基础。
目的 microRNAs（miRNA）是一类非编码的单链小分子RNA，在植物的生长发育、逆境适应和代谢调控等过程中发挥着至关重要的作用。本研究拟利用地黄EST数据通过生物信息学手段预测新的地黄miRNA，为今后地黄miRNA的生物学研究奠定基础。方法 本研究根据miRNA 家族在不同物种中的保守性，将miRBase数据库中的已知植物miRNA与通过高通量测序获得的93172条地黄EST序列进行同源比对，按照miRNA前体应具备的标准进行筛选。结果 预测到分属于8个家族的8条潜在地黄miRNA序列，并通过实时荧光定量PCR对8条预测的miRNA进行了检测，证实8条miRNA在地黄中真实存在。随后利用软件对8条地黄miRNA的靶基因进行预测，发现其靶基因主要编码与地黄生长发育、代谢以及胁迫响应等过程相关的蛋白。结论 新预测的地黄miRNA及其靶基因为今后研究它们在地黄中的生物学功能奠定了基础。
2014, 45.
摘要:
目的 建立紫背金盘Ajugae nipponensis愈伤组织诱导体系，筛选出具较高再生率的植株发生途径，旨在构建高效、稳定的再生体系。方法 MS为基本培养基，添加不同种类和浓度配比的植物生长调节剂，以茎尖、带芽茎段和花序为外植体进行实验。结果 花序是较适宜诱导愈伤组织的外植体，在MS＋6-BA 0.1 mg/L＋2, 4-D 1.5 mg/L中可在1周内诱导出愈伤组织，2周后即分化出绿色小芽丛；丛生芽增殖的适宜培养基为MS＋6-BA 2.0 mg/L＋NAA 0.5 mg/L，愈伤组织芽丛再生率高达100%，再生系数为4.10，4周后增殖倍数5.0以上；生根的适宜培养基为1/2 MS＋NAA 1.0 mg/L，3周后即可获得再生植株，生根率100%；生根苗移栽至排水良好的沙土中，成活率100%。结论 紫背金盘不同外植体均可诱导出愈伤组织，其中花序愈伤发生率最好，是最适宜的外植体；本研究为保护紫背金盘野生资源和发展人工栽培奠定了良好基础，也为遗传转化研究提供重要的科学依据。
目的 建立紫背金盘Ajugae nipponensis愈伤组织诱导体系，筛选出具较高再生率的植株发生途径，旨在构建高效、稳定的再生体系。方法 MS为基本培养基，添加不同种类和浓度配比的植物生长调节剂，以茎尖、带芽茎段和花序为外植体进行实验。结果 花序是较适宜诱导愈伤组织的外植体，在MS＋6-BA 0.1 mg/L＋2, 4-D 1.5 mg/L中可在1周内诱导出愈伤组织，2周后即分化出绿色小芽丛；丛生芽增殖的适宜培养基为MS＋6-BA 2.0 mg/L＋NAA 0.5 mg/L，愈伤组织芽丛再生率高达100%，再生系数为4.10，4周后增殖倍数5.0以上；生根的适宜培养基为1/2 MS＋NAA 1.0 mg/L，3周后即可获得再生植株，生根率100%；生根苗移栽至排水良好的沙土中，成活率100%。结论 紫背金盘不同外植体均可诱导出愈伤组织，其中花序愈伤发生率最好，是最适宜的外植体；本研究为保护紫背金盘野生资源和发展人工栽培奠定了良好基础，也为遗传转化研究提供重要的科学依据。
16 檵木中银椴苷的提取及测定
2014, 45.
摘要:
目的 研究檵木中银椴苷的提取分离及对银椴苷进行质量控制。方法 采用乙醇回流法提取药材，然后经过大孔树脂、减压硅胶柱色谱、洗脱，得到银椴苷单体，采用Cosmosil C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），流动相为甲醇-0.1%磷酸水溶液（55∶45），检测波长为320 nm，体积流量1.0 mL/min。结果 银椴苷单体能够很好的分离出来，质量分数为98%，银椴苷在0.041～0.513 μg呈良好的线性关系（r＝0.999 7）；平均回收率为100.05%，RSD为1.50%；结论 运用此方法能将银椴苷较好的提取分离，同时测定方法不仅操作简单、准确，且重复性好，可用于檵木中银椴苷的测定。
目的 研究檵木中银椴苷的提取分离及对银椴苷进行质量控制。方法 采用乙醇回流法提取药材，然后经过大孔树脂、减压硅胶柱色谱、洗脱，得到银椴苷单体，采用Cosmosil C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），流动相为甲醇-0.1%磷酸水溶液（55∶45），检测波长为320 nm，体积流量1.0 mL/min。结果 银椴苷单体能够很好的分离出来，质量分数为98%，银椴苷在0.041～0.513 μg呈良好的线性关系（r＝0.999 7）；平均回收率为100.05%，RSD为1.50%；结论 运用此方法能将银椴苷较好的提取分离，同时测定方法不仅操作简单、准确，且重复性好，可用于檵木中银椴苷的测定。
2014, 45.
摘要:
目的 优化大花红景天再生体系并建立抗性筛选最佳条件，为建立大花红景天高效遗传转化体系奠定基础。方法 以大花红景天叶片为外植体，观察再生过程各阶段在不同配比的6-BA、NAA、IBA诱导下的诱导率及生长状况，并利用梯度筛选出外植体对卡那霉素（Kan）和抗潮霉素（Hyg）的抗性。结果 MS＋3.0 mg/L 6-BA＋1.0 mg/L NAA＋700 mg/L L-Pro为叶片不定芽分化的最佳培养基，分化率达到92%；MS＋700 mg/L L-Pro为根培养基；200 mg/L Kan，10 mg/L Hyg为大花红景天遗传转化的最佳筛选压；培养过程中添加10 mg/L Vc能有效抑制酚类物质的外泌。结论 优化了大花红景天植株再生体系，筛选出适宜于大花红景天遗传转化体系的Kan和Hyg筛选压。
目的 优化大花红景天再生体系并建立抗性筛选最佳条件，为建立大花红景天高效遗传转化体系奠定基础。方法 以大花红景天叶片为外植体，观察再生过程各阶段在不同配比的6-BA、NAA、IBA诱导下的诱导率及生长状况，并利用梯度筛选出外植体对卡那霉素（Kan）和抗潮霉素（Hyg）的抗性。结果 MS＋3.0 mg/L 6-BA＋1.0 mg/L NAA＋700 mg/L L-Pro为叶片不定芽分化的最佳培养基，分化率达到92%；MS＋700 mg/L L-Pro为根培养基；200 mg/L Kan，10 mg/L Hyg为大花红景天遗传转化的最佳筛选压；培养过程中添加10 mg/L Vc能有效抑制酚类物质的外泌。结论 优化了大花红景天植株再生体系，筛选出适宜于大花红景天遗传转化体系的Kan和Hyg筛选压。
2014, 45.
摘要:
目的 对菊科药用植物菊Chrysanthemum morifolium非药用部位化学成分的分布和动态积累进行分析评价，为该药用生物资源的综合利用提供科学依据。方法 分别采用超高效液相-三重四级杆质谱联用仪（UPLC-TQ/MS）、紫外可见分光光度法（UV）、超高效液相-二极管阵列检测器（UPLC-DAD），测定不同生长期菊根、茎、叶中氨基酸类、核苷类、黄酮类及有机酸类成分的存在及其量。结果 氨基酸类成分分析结果表明，菊的根、茎、叶中检测到13种氨基酸，总氨基酸的量分布顺序为：根＞叶＞茎；核苷类成分分析结果表明，菊叶中检测到4种核苷，茎和根中分别检测到2种核苷，总核苷的量分布顺序为：叶＞根＞茎；黄酮类成分分析结果表明，总黄酮类成分的量分布顺序为：叶＞根＞茎，其中叶片所含黄酮类成分量为9.94%～18.66%，根中质量分数为5.88%～8.02%，茎中质量分数为3.98%～5.41%；有机酸类成分分析表明，总有机酸的质量分数分布顺序为：叶＞根＞茎，叶中质量分数为2.44%～4.94%，根中量为1.89%～2.64%，茎中质量分数为1.20%～1.48%。不同生长期菊根、茎、叶中黄酮类和有机酸类成分量发生动态变化，在菊花采摘后达到高峰。结论 菊非药用部位尤其是叶中含有丰富的资源性化学成分，且在采摘花序后为资源丰产期。该研究结果为菊花采收后废弃物的资源化利用提供了有益的借鉴。
目的 对菊科药用植物菊Chrysanthemum morifolium非药用部位化学成分的分布和动态积累进行分析评价，为该药用生物资源的综合利用提供科学依据。方法 分别采用超高效液相-三重四级杆质谱联用仪（UPLC-TQ/MS）、紫外可见分光光度法（UV）、超高效液相-二极管阵列检测器（UPLC-DAD），测定不同生长期菊根、茎、叶中氨基酸类、核苷类、黄酮类及有机酸类成分的存在及其量。结果 氨基酸类成分分析结果表明，菊的根、茎、叶中检测到13种氨基酸，总氨基酸的量分布顺序为：根＞叶＞茎；核苷类成分分析结果表明，菊叶中检测到4种核苷，茎和根中分别检测到2种核苷，总核苷的量分布顺序为：叶＞根＞茎；黄酮类成分分析结果表明，总黄酮类成分的量分布顺序为：叶＞根＞茎，其中叶片所含黄酮类成分量为9.94%～18.66%，根中质量分数为5.88%～8.02%，茎中质量分数为3.98%～5.41%；有机酸类成分分析表明，总有机酸的质量分数分布顺序为：叶＞根＞茎，叶中质量分数为2.44%～4.94%，根中量为1.89%～2.64%，茎中质量分数为1.20%～1.48%。不同生长期菊根、茎、叶中黄酮类和有机酸类成分量发生动态变化，在菊花采摘后达到高峰。结论 菊非药用部位尤其是叶中含有丰富的资源性化学成分，且在采摘花序后为资源丰产期。该研究结果为菊花采收后废弃物的资源化利用提供了有益的借鉴。
2014, 45.
摘要:
目的 为了明确内源多胺是否介导真菌诱导子诱导白桦三萜的合成。方法 将40 μg/mL真菌诱导子、1 mmol/L腐胺（Put）和2 mmol/L多胺合成抑制剂D-精氨酸（D-Arg）添加到培养8 d的白桦悬浮培养体系中，利用高效液相色谱和比色法分析多胺量和三萜量。采用药理学和恢复实验分析多胺在真菌诱导子诱导白桦三萜合成中的作用。结果 真菌诱导子或Put处理后，白桦悬浮细胞中的多胺量、三萜量和产量均呈增加趋势，其中处理24 h时，三萜量达最大值，分别增加了68.54%和30.34%。真菌诱导子和Put共同处理虽提高了三萜量，但其产量却低于真菌诱导子单独处理。真菌诱导子和D-Arg共同处理后三萜量低于真菌诱导子单独处理，处理24 h时降低程度最高，为40.57%。恢复实验发现，随着恢复时间的延长，真菌诱导子、Put以及真菌诱导子与D-Arg对白桦三萜合成的影响效应逐渐减弱，恢复到对照水平。结论 多胺介导了真菌诱导子促进白桦悬浮细胞中三萜的合成。
目的 为了明确内源多胺是否介导真菌诱导子诱导白桦三萜的合成。方法 将40 μg/mL真菌诱导子、1 mmol/L腐胺（Put）和2 mmol/L多胺合成抑制剂D-精氨酸（D-Arg）添加到培养8 d的白桦悬浮培养体系中，利用高效液相色谱和比色法分析多胺量和三萜量。采用药理学和恢复实验分析多胺在真菌诱导子诱导白桦三萜合成中的作用。结果 真菌诱导子或Put处理后，白桦悬浮细胞中的多胺量、三萜量和产量均呈增加趋势，其中处理24 h时，三萜量达最大值，分别增加了68.54%和30.34%。真菌诱导子和Put共同处理虽提高了三萜量，但其产量却低于真菌诱导子单独处理。真菌诱导子和D-Arg共同处理后三萜量低于真菌诱导子单独处理，处理24 h时降低程度最高，为40.57%。恢复实验发现，随着恢复时间的延长，真菌诱导子、Put以及真菌诱导子与D-Arg对白桦三萜合成的影响效应逐渐减弱，恢复到对照水平。结论 多胺介导了真菌诱导子促进白桦悬浮细胞中三萜的合成。
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