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主办：天津药物研究院 中国药学会
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2016年第47卷第5期文章目次
2016, 47(5):701-706.
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2016.05.001
摘要:
中药配伍禁忌历来是中药安全性研究的重要科学问题之一。以"十八反"为代表,从安全性评价、毒效物质、毒理毒代、药物相互作用、毒性机制等方面,我国学者对中药配伍禁忌进行过大量研究,但是由于在研究思路、研究模式、研究方法等方面缺乏系统的设计和持续深入,许多关键问题尚缺乏可靠结论,未在学科、行业内达成共识。基于"半娄贝蔹及攻乌"配伍禁忌毒效表征基础研究,发现配伍禁忌相关反药组合在功效发挥过程中引起的严重不良反应是中药配伍禁忌"毒性的主要表现。中药配伍禁忌的形成具有条件性,与其组成配比、剂量、配伍环境等要素密切相关,其中病症条件是配伍禁忌的关键影响因素,提出了基于病症条件的中药配伍禁忌毒效表征研究模式,为中药毒与效的整合分析研究提供了新的策略和方法学参考。
中药配伍禁忌历来是中药安全性研究的重要科学问题之一。以"十八反"为代表,从安全性评价、毒效物质、毒理毒代、药物相互作用、毒性机制等方面,我国学者对中药配伍禁忌进行过大量研究,但是由于在研究思路、研究模式、研究方法等方面缺乏系统的设计和持续深入,许多关键问题尚缺乏可靠结论,未在学科、行业内达成共识。基于"半娄贝蔹及攻乌"配伍禁忌毒效表征基础研究,发现配伍禁忌相关反药组合在功效发挥过程中引起的严重不良反应是中药配伍禁忌"毒性的主要表现。中药配伍禁忌的形成具有条件性,与其组成配比、剂量、配伍环境等要素密切相关,其中病症条件是配伍禁忌的关键影响因素,提出了基于病症条件的中药配伍禁忌毒效表征研究模式,为中药毒与效的整合分析研究提供了新的策略和方法学参考。
2016, 47(5):707-711.
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2016.05.002
摘要:
目的 对皂角刺Gleditsiae Spina中的黄酮类成分进行分离纯化和肿瘤细胞毒活性研究。方法 采用硅胶、Sephadex LH-20、ODS柱色谱法和HPLC制备色谱等多种技术对皂角刺黄酮类化学成分进行分离纯化,并通过理化性质和MS、NMR、圆二色谱等谱学数据鉴定化合物的结构。结果 从皂角刺中分离得到12个二氢黄酮醇类及黄酮类化合物,分别鉴定为(2R,3R)-5,3',4'-三甲氧基-7-羟基二氢黄酮醇(1)、5,7,3',4'-四羟基二氢黄酮醇(2)、5-甲氧基-3',4',7-三羟基二氢黄酮醇(3)、二氢山柰酚(4)、表儿茶素(5)、5,7,3',5'-四羟基二氢黄酮醇(6)、黄颜木素(7)、(2R,3R)-7,3',5'-三羟基-二氢黄酮醇(8)、(2R,3R)-5,7,3'-三羟基-4'-甲氧基-二氢黄酮醇(9)、槲皮素(10)、5,7,4'-三羟基黄酮-8-C-葡萄糖苷(11)、2,7-二甲基-氧杂蒽酮(12)。结论 化合物1为新化合物,命名为皂角刺二氢黄酮醇A;化合物3、8、9和12均为首次从皂角刺中分离得到。对肿瘤细胞毒活性研究结果显示,二氢黄酮醇类化合物1、2、3、7及黄酮类化合物10均表现出较强的细胞毒活性。其中化合物1和3主要作用于肝癌HepG2和食管癌EC109细胞株,化合物2主要作用于食管癌EC109细胞株,而化合物7则对肝癌、肺癌和胃癌肿瘤细胞均有较强的增殖抑制活性。
目的 对皂角刺Gleditsiae Spina中的黄酮类成分进行分离纯化和肿瘤细胞毒活性研究。方法 采用硅胶、Sephadex LH-20、ODS柱色谱法和HPLC制备色谱等多种技术对皂角刺黄酮类化学成分进行分离纯化,并通过理化性质和MS、NMR、圆二色谱等谱学数据鉴定化合物的结构。结果 从皂角刺中分离得到12个二氢黄酮醇类及黄酮类化合物,分别鉴定为(2R,3R)-5,3',4'-三甲氧基-7-羟基二氢黄酮醇(1)、5,7,3',4'-四羟基二氢黄酮醇(2)、5-甲氧基-3',4',7-三羟基二氢黄酮醇(3)、二氢山柰酚(4)、表儿茶素(5)、5,7,3',5'-四羟基二氢黄酮醇(6)、黄颜木素(7)、(2R,3R)-7,3',5'-三羟基-二氢黄酮醇(8)、(2R,3R)-5,7,3'-三羟基-4'-甲氧基-二氢黄酮醇(9)、槲皮素(10)、5,7,4'-三羟基黄酮-8-C-葡萄糖苷(11)、2,7-二甲基-氧杂蒽酮(12)。结论 化合物1为新化合物,命名为皂角刺二氢黄酮醇A;化合物3、8、9和12均为首次从皂角刺中分离得到。对肿瘤细胞毒活性研究结果显示,二氢黄酮醇类化合物1、2、3、7及黄酮类化合物10均表现出较强的细胞毒活性。其中化合物1和3主要作用于肝癌HepG2和食管癌EC109细胞株,化合物2主要作用于食管癌EC109细胞株,而化合物7则对肝癌、肺癌和胃癌肿瘤细胞均有较强的增殖抑制活性。
2016, 47(5):712-716.
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2016.05.003
摘要:
目的 对黄花角蒿Incarvillea sinensis var.przewalskii全草的化学成分进行研究。方法 采用正相硅胶、凝胶Sephadex LH-20以及半制备高效液相色谱等多种色谱技术进行分离纯化,运用NMR、MS等波谱学方法以及结合文献数据对分离得到的化合物进行结构鉴定。结果 从黄花角蒿全草80%乙醇水溶液提取物中分离得到13个化合物,包括生物碱和苯乙醇苷类化合物,其结构分别鉴定为对丁氧基红景天苷(1)、角蒿辛C(2)、角蒿酯碱(3)、7-羟基多花藤碱(4)、角蒿原碱(5)、苯乙醇葡萄糖苷(6)、地黄苷(7)、类叶升麻苷(8)、去酰基异角胡麻苷(9)、去咖啡酰基类叶升麻苷(10)、carceorioside B(11)、红景天苷(12)、去酰基类叶升麻苷二甲醚(13)。结论 化合物1为新化合物,其他化合物均为首次从该植物中分离得到。
目的 对黄花角蒿Incarvillea sinensis var.przewalskii全草的化学成分进行研究。方法 采用正相硅胶、凝胶Sephadex LH-20以及半制备高效液相色谱等多种色谱技术进行分离纯化,运用NMR、MS等波谱学方法以及结合文献数据对分离得到的化合物进行结构鉴定。结果 从黄花角蒿全草80%乙醇水溶液提取物中分离得到13个化合物,包括生物碱和苯乙醇苷类化合物,其结构分别鉴定为对丁氧基红景天苷(1)、角蒿辛C(2)、角蒿酯碱(3)、7-羟基多花藤碱(4)、角蒿原碱(5)、苯乙醇葡萄糖苷(6)、地黄苷(7)、类叶升麻苷(8)、去酰基异角胡麻苷(9)、去咖啡酰基类叶升麻苷(10)、carceorioside B(11)、红景天苷(12)、去酰基类叶升麻苷二甲醚(13)。结论 化合物1为新化合物,其他化合物均为首次从该植物中分离得到。
2016, 47(5):717-721.
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2016.05.004
摘要:
目的 对革叶山姜Alpinia coriacea全草的化学成分进行研究。方法 采用硅胶、ODS、Sephadex LH-20柱色谱及制备型HPLC等色谱方法进行分离纯化,根据波谱数据和理化性质鉴定化合物的结构。结果 从革叶山姜90%乙醇提取物中分离得到15个化合物,分别鉴定为对羟基苯甲醛(1)、4-甲氧基苯甲酸(2)、乔松素(3)、芹菜素(4)、良姜素(5)、山柰酚(6)、5,7,3',4'-四羟基二氢黄酮(7)、3,5-二羟基-7,4'-二甲氧基黄酮(8)、α-tocospiro A(9)、6α-羟基豆甾-4-烯-3-酮(10)、豆甾-4-烯-3-酮(11)、7-酮基-β-谷甾醇(12)、5α,8α-表二氧-(22E,24R)-麦角甾-6,22-二烯-3β-醇(13)、豆甾醇(14)和β-谷甾醇(15)。结论 所有化合物均为首次从革叶山姜中分离得到,其中化合物2、7、9~13为首次从山姜属植物中分离得到。
目的 对革叶山姜Alpinia coriacea全草的化学成分进行研究。方法 采用硅胶、ODS、Sephadex LH-20柱色谱及制备型HPLC等色谱方法进行分离纯化,根据波谱数据和理化性质鉴定化合物的结构。结果 从革叶山姜90%乙醇提取物中分离得到15个化合物,分别鉴定为对羟基苯甲醛(1)、4-甲氧基苯甲酸(2)、乔松素(3)、芹菜素(4)、良姜素(5)、山柰酚(6)、5,7,3',4'-四羟基二氢黄酮(7)、3,5-二羟基-7,4'-二甲氧基黄酮(8)、α-tocospiro A(9)、6α-羟基豆甾-4-烯-3-酮(10)、豆甾-4-烯-3-酮(11)、7-酮基-β-谷甾醇(12)、5α,8α-表二氧-(22E,24R)-麦角甾-6,22-二烯-3β-醇(13)、豆甾醇(14)和β-谷甾醇(15)。结论 所有化合物均为首次从革叶山姜中分离得到,其中化合物2、7、9~13为首次从山姜属植物中分离得到。
2016, 47(5):722-725.
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2016.05.005
摘要:
目的 研究金荞麦Fagopyrum dibotrys块根中的化学成分。方法 采用色谱分离技术进行分离和纯化,并根据谱学数据鉴定化合物的结构。结果 从金荞麦块根的甲醇提取物中分离得到14个化合物,分别鉴定为木犀草素(1)、苜蓿素(2)、木犀草素7,4'-二甲醚(3)、槲皮素(4)、芫花素(5)、金圣草黄素(6)、原儿茶酸(7)、原儿茶酸甲酯(8)、对羟基苯甲醛(9)、赤杨酮(10)、赤杨醇(11)、olean-12-ene-3β,7β,15α,28-tetraol(12)、juglangenin A(13)、21β-dihydroxy-olean-12-ene(14)。结论 化合物5和6为首次从金荞麦中分离得到,化合物12~14为首次从荞麦属植物中分离得到。
目的 研究金荞麦Fagopyrum dibotrys块根中的化学成分。方法 采用色谱分离技术进行分离和纯化,并根据谱学数据鉴定化合物的结构。结果 从金荞麦块根的甲醇提取物中分离得到14个化合物,分别鉴定为木犀草素(1)、苜蓿素(2)、木犀草素7,4'-二甲醚(3)、槲皮素(4)、芫花素(5)、金圣草黄素(6)、原儿茶酸(7)、原儿茶酸甲酯(8)、对羟基苯甲醛(9)、赤杨酮(10)、赤杨醇(11)、olean-12-ene-3β,7β,15α,28-tetraol(12)、juglangenin A(13)、21β-dihydroxy-olean-12-ene(14)。结论 化合物5和6为首次从金荞麦中分离得到,化合物12~14为首次从荞麦属植物中分离得到。
2016, 47(5):726-731.
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2016.05.006
摘要:
目的 研究牛蒡Arctium lappa根中的黄酮苷类化学成分及其抗氧化活性,分析构效关系。方法 采用重结晶、硅胶柱色谱、RP18柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱和PHPLC等多种分离手段,对黄酮苷类化合物进行分离纯化,通过现代波谱学方法(NMR、ESI-MS)鉴定其结构,并采用DPPH法、ABTS法和FRAP法对分离得到的化合物进行抗氧化活性测试。结果 从牛蒡根55%乙醇提取物中分离得到8个黄酮苷类化合物,分别鉴定为柚皮素-7-芸香糖苷(1)、橙皮苷(2)、淫羊藿苷(3)、芒柄花苷(4)、异芒柄花苷(5)、新甘草苷(6)、新异甘草苷(7)、甘草苷(8);经3种不同方法测试,分析了这一类化合物的抗氧化活性构效关系。结论 化合物3为首次从该植物中分离得到,其他化合物均为首次从该属植物中分离得到;化合物1和8显示出较强抗氧化活性;黄酮的B环上的3'-OH和4'-OCH3结构具有较高电子离域并且能形成氢键,很大程度提高了其结构的稳定性,增强了其抗氧化活性。
目的 研究牛蒡Arctium lappa根中的黄酮苷类化学成分及其抗氧化活性,分析构效关系。方法 采用重结晶、硅胶柱色谱、RP18柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱和PHPLC等多种分离手段,对黄酮苷类化合物进行分离纯化,通过现代波谱学方法(NMR、ESI-MS)鉴定其结构,并采用DPPH法、ABTS法和FRAP法对分离得到的化合物进行抗氧化活性测试。结果 从牛蒡根55%乙醇提取物中分离得到8个黄酮苷类化合物,分别鉴定为柚皮素-7-芸香糖苷(1)、橙皮苷(2)、淫羊藿苷(3)、芒柄花苷(4)、异芒柄花苷(5)、新甘草苷(6)、新异甘草苷(7)、甘草苷(8);经3种不同方法测试,分析了这一类化合物的抗氧化活性构效关系。结论 化合物3为首次从该植物中分离得到,其他化合物均为首次从该属植物中分离得到;化合物1和8显示出较强抗氧化活性;黄酮的B环上的3'-OH和4'-OCH3结构具有较高电子离域并且能形成氢键,很大程度提高了其结构的稳定性,增强了其抗氧化活性。
2016, 47(5):732-735.
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2016.05.007
摘要:
目的 对茄科酸浆属植物毛酸浆Physalis pubescens果实的化学成分进行研究。方法 利用多种色谱分离技术进行分离纯化,根据其理化性质和波谱数据鉴定化合物结构。结果 从毛酸浆果实80%乙醇提取物中分离并鉴定了9个化合物,分别为5-羟甲基糠醛(1)、咖啡酸乙酯(2)、β-谷甾醇(3)、反式对羟基肉桂酸乙酯(4)、槲皮素-3,5,7三甲氧基-3'-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(5)、槲皮素-3-O-(6'-O-反式对香豆酰基)-β-D-吡喃葡萄糖苷(6)、山柰酚-3-O-β-D-芸香糖苷(7)、橄榄苦苷(8)、4,4'-二羟基-2'-甲氧基查耳酮(9)。结论 化合物4~9为首次从茄科酸浆属植物中分离得到,化合物1为首次从该植物中分离得到。
目的 对茄科酸浆属植物毛酸浆Physalis pubescens果实的化学成分进行研究。方法 利用多种色谱分离技术进行分离纯化,根据其理化性质和波谱数据鉴定化合物结构。结果 从毛酸浆果实80%乙醇提取物中分离并鉴定了9个化合物,分别为5-羟甲基糠醛(1)、咖啡酸乙酯(2)、β-谷甾醇(3)、反式对羟基肉桂酸乙酯(4)、槲皮素-3,5,7三甲氧基-3'-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(5)、槲皮素-3-O-(6'-O-反式对香豆酰基)-β-D-吡喃葡萄糖苷(6)、山柰酚-3-O-β-D-芸香糖苷(7)、橄榄苦苷(8)、4,4'-二羟基-2'-甲氧基查耳酮(9)。结论 化合物4~9为首次从茄科酸浆属植物中分离得到,化合物1为首次从该植物中分离得到。
2016, 47(5):736-740.
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2016.05.008
摘要:
目的 探究蒙药复方森登-4的配伍机制。方法 蒙药文冠木与栀子、川楝子、诃子以5:3:1:1的比例配伍后得到蒙药复方森登-4;配伍前后的样品采用Waters Acquity BEH-C18柱(50 mm×2.1 mm,1.7μm)为色谱柱,0.1%甲酸水溶液-甲醇为流动相进行梯度洗脱,柱温40℃,体积流量0.4 mL/min,进样量10μL;并将超高效液相色谱-质谱联用(UPLC-MS)技术与主成分分析(PCA)、正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)相结合,对蒙药复方森登-4配伍前后组方中君药文冠木主要化学成分变化情况进行了分析。结果 在PCA与OPLS-DA模型中,文冠木与复方森登-4均可明显得到区分;配伍后8个化合物在两组间存在显著差异(P<0.05),其中儿茶素、没食子儿茶素、双氢杨梅素、槲皮素的溶出量在配伍后下降,而xanthocerasic acid、3β-hydroxytirucalla-7,24-dien-21-oic acid、3-oxotirucalla-7,24-dien-21-oic acid、芦丁的溶出量升高。结论 蒙药复方森登-4的抗炎及抗风湿活性可能与其中的君药文冠木配伍之后某些指标成分的溶出量变化有一定关系。
目的 探究蒙药复方森登-4的配伍机制。方法 蒙药文冠木与栀子、川楝子、诃子以5:3:1:1的比例配伍后得到蒙药复方森登-4;配伍前后的样品采用Waters Acquity BEH-C18柱(50 mm×2.1 mm,1.7μm)为色谱柱,0.1%甲酸水溶液-甲醇为流动相进行梯度洗脱,柱温40℃,体积流量0.4 mL/min,进样量10μL;并将超高效液相色谱-质谱联用(UPLC-MS)技术与主成分分析(PCA)、正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)相结合,对蒙药复方森登-4配伍前后组方中君药文冠木主要化学成分变化情况进行了分析。结果 在PCA与OPLS-DA模型中,文冠木与复方森登-4均可明显得到区分;配伍后8个化合物在两组间存在显著差异(P<0.05),其中儿茶素、没食子儿茶素、双氢杨梅素、槲皮素的溶出量在配伍后下降,而xanthocerasic acid、3β-hydroxytirucalla-7,24-dien-21-oic acid、3-oxotirucalla-7,24-dien-21-oic acid、芦丁的溶出量升高。结论 蒙药复方森登-4的抗炎及抗风湿活性可能与其中的君药文冠木配伍之后某些指标成分的溶出量变化有一定关系。
2016, 47(5):741-747.
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2016.05.009
摘要:
目的 制备表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)壳聚糖(CS)纳米粒(EGCG-CS-NPs),并初步评价其理化性质。方法 采用离子凝胶化法制备EGCG-CS-NPs,通过对处方优化:CS质量浓度(X1)、三聚磷酸钠(TPP)质量浓度(X2)、EGCG质量浓度(X3)为考察对象,以包封率(Y1,%)、平均粒径(Y2,nm)为评价指标,利用Box-Behnken设计-效应面法优化EGCG-CS-NPs处方;采用Malvern粒度仪测定EGCG-CS-NPs的粒径分布和Zeta电位,透射电镜考察其形态;并考察EGCGCS-NPs的体外释药行为。结果 EGCG-CS-NPs的最优处方:CS质量浓度为2.6 g/L、TPP质量浓度为1.5 g/L、EGCG质量浓度为2.7 g/L,制备的EGCG-CS-NPs的包封率为(85.8±3.1)%;粒径为(102.2±27.1) nm,Zeta电位为(25.5±4.1) mV;透射电镜显示EGCG-CS-NPs粒径均一,呈球状;EGCG-CS-NPs在24 h内平稳缓慢释药(pH 4.5 PBS)。结论 通过对处方的优化,制备得到圆整、释药缓慢的EGCG-CS-NPs,为进一步考察EGCG-CS-NPs在大鼠体内药效学奠定了基础。
目的 制备表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)壳聚糖(CS)纳米粒(EGCG-CS-NPs),并初步评价其理化性质。方法 采用离子凝胶化法制备EGCG-CS-NPs,通过对处方优化:CS质量浓度(X1)、三聚磷酸钠(TPP)质量浓度(X2)、EGCG质量浓度(X3)为考察对象,以包封率(Y1,%)、平均粒径(Y2,nm)为评价指标,利用Box-Behnken设计-效应面法优化EGCG-CS-NPs处方;采用Malvern粒度仪测定EGCG-CS-NPs的粒径分布和Zeta电位,透射电镜考察其形态;并考察EGCGCS-NPs的体外释药行为。结果 EGCG-CS-NPs的最优处方:CS质量浓度为2.6 g/L、TPP质量浓度为1.5 g/L、EGCG质量浓度为2.7 g/L,制备的EGCG-CS-NPs的包封率为(85.8±3.1)%;粒径为(102.2±27.1) nm,Zeta电位为(25.5±4.1) mV;透射电镜显示EGCG-CS-NPs粒径均一,呈球状;EGCG-CS-NPs在24 h内平稳缓慢释药(pH 4.5 PBS)。结论 通过对处方的优化,制备得到圆整、释药缓慢的EGCG-CS-NPs,为进一步考察EGCG-CS-NPs在大鼠体内药效学奠定了基础。
2016, 47(5):748-751.
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2016.05.010
摘要:
目的 优选适宜亲水性物质释放的热熔压敏胶基质的配比。方法 采用正交试验法,以胶体的黏性、亲水性药物的释放度为指标,以C5石油树脂、以苯乙烯-异戊二烯-苯乙烯(SIS)、丙烯酸乙酯-甲基丙烯酸甲酯-甲基丙烯酸氯化三甲胺基乙酯共聚物(RLPO)、液体石蜡、邻苯二甲酸二辛酯(DOP)、聚乙二醇400(PEG 400)、抗氧化剂1010为材料,筛选热熔压敏胶基质的配方。结果 最佳基质配比为SIS-C5石油树脂-RLPO-液体石蜡-PEG 400-DOP-抗氧化剂1010为3:4:6:6:5:1:0.1,所制得的热熔压敏胶黏性适宜,对亲水性药物释放度高。结论 本研究制备的热熔压敏胶是制备亲水性药物经皮给药贴剂的良好材料。
目的 优选适宜亲水性物质释放的热熔压敏胶基质的配比。方法 采用正交试验法,以胶体的黏性、亲水性药物的释放度为指标,以C5石油树脂、以苯乙烯-异戊二烯-苯乙烯(SIS)、丙烯酸乙酯-甲基丙烯酸甲酯-甲基丙烯酸氯化三甲胺基乙酯共聚物(RLPO)、液体石蜡、邻苯二甲酸二辛酯(DOP)、聚乙二醇400(PEG 400)、抗氧化剂1010为材料,筛选热熔压敏胶基质的配方。结果 最佳基质配比为SIS-C5石油树脂-RLPO-液体石蜡-PEG 400-DOP-抗氧化剂1010为3:4:6:6:5:1:0.1,所制得的热熔压敏胶黏性适宜,对亲水性药物释放度高。结论 本研究制备的热熔压敏胶是制备亲水性药物经皮给药贴剂的良好材料。
2016, 47(5):752-759.
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2016.05.011
摘要:
目的 基于HPLC法探讨炮制辅料黄酒对九蒸九晒制备得到的熟地黄的化学成分动态变化的影响差异性。方法 色谱柱为Hypersil GOLD aQ C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),体积流量为1 mL/min,柱温为25℃。梓醇定量测定:流动相为乙腈-0.1%磷酸水(1:99),检测波长为210 nm;地黄苷A定量测定:流动相为乙腈-0.1%磷酸水(3:97),检测波长为203 nm;地黄苷D和益母草苷定量测定:流动相为乙腈-0.1%磷酸水(4:96),检测波长为203 nm;毛蕊花糖苷定量测定:流动相为乙腈-0.1%磷酸水(16:84),检测波长为334 nm;5-羟甲基糠醛(5-HMF)定量测定:流动相为乙腈-0.1%磷酸水(11:89),检测波长为284 nm。糖类成分的测定:色谱柱为Accurasil NH2柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-水(72:28),体积流量为1 mL/min,柱温25℃,检测器为ELSD,Alltech2000ES,漂移管温度93℃,气体体积流量2.6 L/min。采用SPSS 20.0进行统计分析,将清蒸-九蒸九晒与酒蒸-九蒸九晒制得的不同蒸晒次数的熟地黄中12种化学成分定量测定数据进行配对样本t-检验。结果 随蒸晒次数的增加,清蒸法与酒蒸法制得熟地黄中梓醇及益母草苷、毛蕊花糖苷、水苏糖、蔗糖、棉子糖均减少;地黄苷A及地黄苷D略为增加;5-HMF、果糖、葡萄糖、甘露三糖均增加。结论 建立的方法符合方法学验证要求。在古法熟地黄九蒸九晒的炮制过程中,炮制辅料黄酒对炮制品的质量存在显著影响,且清蒸法与酒蒸法均以第3次、第4次及第6次蒸晒所得熟地黄的相关物质的量呈较大的波动性。
目的 基于HPLC法探讨炮制辅料黄酒对九蒸九晒制备得到的熟地黄的化学成分动态变化的影响差异性。方法 色谱柱为Hypersil GOLD aQ C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),体积流量为1 mL/min,柱温为25℃。梓醇定量测定:流动相为乙腈-0.1%磷酸水(1:99),检测波长为210 nm;地黄苷A定量测定:流动相为乙腈-0.1%磷酸水(3:97),检测波长为203 nm;地黄苷D和益母草苷定量测定:流动相为乙腈-0.1%磷酸水(4:96),检测波长为203 nm;毛蕊花糖苷定量测定:流动相为乙腈-0.1%磷酸水(16:84),检测波长为334 nm;5-羟甲基糠醛(5-HMF)定量测定:流动相为乙腈-0.1%磷酸水(11:89),检测波长为284 nm。糖类成分的测定:色谱柱为Accurasil NH2柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-水(72:28),体积流量为1 mL/min,柱温25℃,检测器为ELSD,Alltech2000ES,漂移管温度93℃,气体体积流量2.6 L/min。采用SPSS 20.0进行统计分析,将清蒸-九蒸九晒与酒蒸-九蒸九晒制得的不同蒸晒次数的熟地黄中12种化学成分定量测定数据进行配对样本t-检验。结果 随蒸晒次数的增加,清蒸法与酒蒸法制得熟地黄中梓醇及益母草苷、毛蕊花糖苷、水苏糖、蔗糖、棉子糖均减少;地黄苷A及地黄苷D略为增加;5-HMF、果糖、葡萄糖、甘露三糖均增加。结论 建立的方法符合方法学验证要求。在古法熟地黄九蒸九晒的炮制过程中,炮制辅料黄酒对炮制品的质量存在显著影响,且清蒸法与酒蒸法均以第3次、第4次及第6次蒸晒所得熟地黄的相关物质的量呈较大的波动性。
2016, 47(5):760-766.
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2016.05.012
摘要:
目的 建立女贞子生品及其炮制品的HPLC指纹图谱。方法 采用Purospher® STAR RP18 Endcapped(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以水-乙腈为流动相,梯度洗脱,体积流量1.0 mL/min,检测波长282 nm,柱温25℃;采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》(2012.130723版)软件进行分析。结果 优化了HPLC色谱条件,在女贞子生品及其炮制品的谱图中分别标定了19个共有指纹特征峰,确定了红景天苷、女贞苷、特女贞苷、橄榄苦苷、oleonuezhenide 5个化合物,建立了10个不同批次的女贞子生品及炮制品HPLC指纹图谱,相似度高。结论 该方法快速、简便、准确,符合指纹图谱技术要求,可作为控制女贞子质量的分析方法。
目的 建立女贞子生品及其炮制品的HPLC指纹图谱。方法 采用Purospher® STAR RP18 Endcapped(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以水-乙腈为流动相,梯度洗脱,体积流量1.0 mL/min,检测波长282 nm,柱温25℃;采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》(2012.130723版)软件进行分析。结果 优化了HPLC色谱条件,在女贞子生品及其炮制品的谱图中分别标定了19个共有指纹特征峰,确定了红景天苷、女贞苷、特女贞苷、橄榄苦苷、oleonuezhenide 5个化合物,建立了10个不同批次的女贞子生品及炮制品HPLC指纹图谱,相似度高。结论 该方法快速、简便、准确,符合指纹图谱技术要求,可作为控制女贞子质量的分析方法。
2016, 47(5):767-770.
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2016.05.013
摘要:
目的 优选麻杏止咳平喘颗粒剂的成型工艺。方法 考察不同辅料糊精、糖粉、可溶性淀粉用量对浸膏粉吸湿性的影响,用正交试验法优选制粒工艺条件,考察颗粒的流动性与吸湿性,以成型率、溶解性及吸湿率为指标,筛选处方中加入辅料的品种、配比及最佳成型工艺。结果 以糖粉加糊精作辅料的颗粒优于以糊精或糖粉或可溶性淀粉作辅料的颗粒,最佳工艺条件为主药-辅料(1:2)、辅料配比为糊精-糖粉(1:1),以80%乙醇为润湿剂,润湿剂的用量占主药的14%。结论 该颗粒剂所选辅料合理,成型制备工艺可行,本研究为麻杏止咳平喘颗粒制粒工艺条件的确定及生产环境的控制提供了科学的实验依据。
目的 优选麻杏止咳平喘颗粒剂的成型工艺。方法 考察不同辅料糊精、糖粉、可溶性淀粉用量对浸膏粉吸湿性的影响,用正交试验法优选制粒工艺条件,考察颗粒的流动性与吸湿性,以成型率、溶解性及吸湿率为指标,筛选处方中加入辅料的品种、配比及最佳成型工艺。结果 以糖粉加糊精作辅料的颗粒优于以糊精或糖粉或可溶性淀粉作辅料的颗粒,最佳工艺条件为主药-辅料(1:2)、辅料配比为糊精-糖粉(1:1),以80%乙醇为润湿剂,润湿剂的用量占主药的14%。结论 该颗粒剂所选辅料合理,成型制备工艺可行,本研究为麻杏止咳平喘颗粒制粒工艺条件的确定及生产环境的控制提供了科学的实验依据。
2016, 47(5):771-774.
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2016.05.014
摘要:
目的 采用HPLC-UV-ELSD同时测定复方红景天胶囊中大花红天素、没食子酸、红景天苷、酪醇、哈巴苷、哈巴俄苷、安格洛苷C、肉桂酸8种成分。方法 应用KromasiL色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.3%冰醋酸水溶液,梯度洗脱,体积流量1.0 mL/min,紫外检测波长275 nm,柱温30℃,蒸发光散射检测器漂移管温度40℃,载气N2,压力150 kPa。结果 大花红天素、没食子酸、红景天苷、酪醇、哈巴苷、哈巴俄苷、安格洛苷C、肉桂酸8种成分能够达到很好分离;其线性范围分别为67.084~670.84(R2=0.9992)、11.410~114.100(R2=0.9994)、78.995~789.95(R2=0.9996)、19.625~196.25(R2=0.9997)、59.368~593.68(R2=0.9998)、62.585~625.85(R2=0.9995)、55.045~550.45(R2=0.9996)、6.895~68.95μg/mL(R2=0.9998);平均回收率分别为100.8%、98.9%、100.1%、100.8%、98.9%、99.6%、100.7%、99.2%,RSD分别为0.64%、0.56%、0.35%、0.65%、0.26%、0.58%、1.00%、0.64%(n=6)。结论 该方法分析简便、准确,可作为该制剂的定量分析方法。
目的 采用HPLC-UV-ELSD同时测定复方红景天胶囊中大花红天素、没食子酸、红景天苷、酪醇、哈巴苷、哈巴俄苷、安格洛苷C、肉桂酸8种成分。方法 应用KromasiL色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.3%冰醋酸水溶液,梯度洗脱,体积流量1.0 mL/min,紫外检测波长275 nm,柱温30℃,蒸发光散射检测器漂移管温度40℃,载气N2,压力150 kPa。结果 大花红天素、没食子酸、红景天苷、酪醇、哈巴苷、哈巴俄苷、安格洛苷C、肉桂酸8种成分能够达到很好分离;其线性范围分别为67.084~670.84(R2=0.9992)、11.410~114.100(R2=0.9994)、78.995~789.95(R2=0.9996)、19.625~196.25(R2=0.9997)、59.368~593.68(R2=0.9998)、62.585~625.85(R2=0.9995)、55.045~550.45(R2=0.9996)、6.895~68.95μg/mL(R2=0.9998);平均回收率分别为100.8%、98.9%、100.1%、100.8%、98.9%、99.6%、100.7%、99.2%,RSD分别为0.64%、0.56%、0.35%、0.65%、0.26%、0.58%、1.00%、0.64%(n=6)。结论 该方法分析简便、准确,可作为该制剂的定量分析方法。
2016, 47(5):775-780.
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2016.05.015
摘要:
目的 构建以肺部苦味受体TAS2R14为靶点的高通量筛选细胞模型,为寻找高效、低毒的新型抗哮喘天然药物奠定基础。方法 利用同源重组技术将TAS2R14受体基因插入pLVX-basic质粒,构建pLVX-AcGFP1-N1-TAS2R14重组载体,并将其转染入HEK293T细胞,建立特异性高表达TAS2R14受体基因的细胞株。利用该细胞模型对120种苦味中药提取物和单体化合物进行高通量筛选。结果 建立的模型Z'因子为0.69和0.66,筛选发现陈皮提取物及其药效物质柠檬苦素,白果提取物及其药效物质芦丁、奎宁对TAS2R14受体具有显著的激动作用。结论 建立的TAS2R14受体激动剂高通量筛选模型稳定性好、灵敏度高,筛选得到的3种中药单体具有潜在的TAS2R14受体激动活性。
目的 构建以肺部苦味受体TAS2R14为靶点的高通量筛选细胞模型,为寻找高效、低毒的新型抗哮喘天然药物奠定基础。方法 利用同源重组技术将TAS2R14受体基因插入pLVX-basic质粒,构建pLVX-AcGFP1-N1-TAS2R14重组载体,并将其转染入HEK293T细胞,建立特异性高表达TAS2R14受体基因的细胞株。利用该细胞模型对120种苦味中药提取物和单体化合物进行高通量筛选。结果 建立的模型Z'因子为0.69和0.66,筛选发现陈皮提取物及其药效物质柠檬苦素,白果提取物及其药效物质芦丁、奎宁对TAS2R14受体具有显著的激动作用。结论 建立的TAS2R14受体激动剂高通量筛选模型稳定性好、灵敏度高,筛选得到的3种中药单体具有潜在的TAS2R14受体激动活性。
2016, 47(5):781-787.
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2016.05.016
摘要:
目的 探究肾脑复元汤(SFD)联合人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)移植对缺血性脑卒中的神经保护作用及机制。方法 采用大脑中动脉栓塞(MCAO)法制备脑缺血再灌注大鼠模型,大鼠随机分为假手术组、模型组、SFD组(11.6 g/kg)、hUC-MSCs组、联合组(SFD+hUC-MSCs),各组根据处死时间随机分为造模4、8、15 d 3个时相组;采用神经功能缺损评分量表评估各组大鼠神经功能改变,HE染色观察海马区脑组织病理改变,免疫组化和Werstern blotting分别检测脑源性神经营养因子(BDNF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的表达。结果 与模型组比较,SFD组、hUC-MSCs组和联合组海马区神经细胞坏死均明显减轻,SFD组(第8、15天)、hUC-MSCs组及联合组(第4、8、15天)神经功能缺损评分显著降低、BDNF和bFGF表达显著升高(P<0.01、0.05)。与SFD组和hUC-MSCs组比较,联合组第8、15天时神经功能缺损评分显著降低、BDNF和bFGF表达显著升高(P<0.05)。结论 SFD联合hUC-MSCs移植能显著改善脑缺血后大鼠神经功能恢复,其作用机制可能与促进脑缺血后神经营养因子BDNF和bFGF表达有关。
目的 探究肾脑复元汤(SFD)联合人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)移植对缺血性脑卒中的神经保护作用及机制。方法 采用大脑中动脉栓塞(MCAO)法制备脑缺血再灌注大鼠模型,大鼠随机分为假手术组、模型组、SFD组(11.6 g/kg)、hUC-MSCs组、联合组(SFD+hUC-MSCs),各组根据处死时间随机分为造模4、8、15 d 3个时相组;采用神经功能缺损评分量表评估各组大鼠神经功能改变,HE染色观察海马区脑组织病理改变,免疫组化和Werstern blotting分别检测脑源性神经营养因子(BDNF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的表达。结果 与模型组比较,SFD组、hUC-MSCs组和联合组海马区神经细胞坏死均明显减轻,SFD组(第8、15天)、hUC-MSCs组及联合组(第4、8、15天)神经功能缺损评分显著降低、BDNF和bFGF表达显著升高(P<0.01、0.05)。与SFD组和hUC-MSCs组比较,联合组第8、15天时神经功能缺损评分显著降低、BDNF和bFGF表达显著升高(P<0.05)。结论 SFD联合hUC-MSCs移植能显著改善脑缺血后大鼠神经功能恢复,其作用机制可能与促进脑缺血后神经营养因子BDNF和bFGF表达有关。
2016, 47(5):788-793.
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2016.05.017
摘要:
目的 探讨雪胆总皂苷对新西兰兔动脉粥样硬化模型(AS)的影响及其作用机制。方法 将36只雄性新西兰兔随机分为6组,即对照组,模型组,雪胆总皂苷高、中、低剂量(200、100、50 mg/kg)组及阳性药辛伐他汀(200 mg/kg)组。除对照组饲以普通饲料外,其余各组饲以配方高脂饲料(79.5%基础饲料+15%蛋黄粉+5%猪油+0.5%胆固醇)3周,再去除配方高脂饲料中胆固醇继续饲养3周。从造模开始ig给药,每日1次,连续给药6周。给药3周后检测血清三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C);第6周末次给药后检测血清TG、TC、HDL-C、LDL-C、载脂蛋白AI(ApoAI)、载脂蛋白B(ApoB)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、一氧化氮(NO)、内皮素(ET)、血栓素B2(TXB2)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、C反应蛋白(CRP)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素8(IL-8)和6酮前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)的量及血液流变学相关指标;计算主动脉脂质面积百分比,并在光镜下观察血管内膜形态学病理改变。结果 与模型组比较,雪胆总皂苷高、中剂量组在给药3周后能明显降低AS兔的血清TC和TG值,其中高剂量组能明显升高血清HDL-C值;雪胆总皂苷高剂量组6周后能明显升高HDL-C、ApoAI、SOD、GSH-Px、NO、6-keto-PGF1α和降低TC、TG和LDL-C、ApoB、ET、TXB2、TNF-α、CRP、IL-6和IL-8的量,中、低剂量组以上指标也有不同程度的升高或降低;雪胆总皂苷高、中剂量组能明显降低AS兔的全血黏度(高切和低切)、红细胞聚集指数和主动脉脂质面积百分比,明显改善血管内膜管壁脂质沉积、管壁增厚及管腔狭窄程度。结论 雪胆总皂苷能干预兔AS的发生、发展,其作用环节与调节血脂水平、抗炎作用、保护血管内皮细胞功能和改善血液流变学指标密切相关。
目的 探讨雪胆总皂苷对新西兰兔动脉粥样硬化模型(AS)的影响及其作用机制。方法 将36只雄性新西兰兔随机分为6组,即对照组,模型组,雪胆总皂苷高、中、低剂量(200、100、50 mg/kg)组及阳性药辛伐他汀(200 mg/kg)组。除对照组饲以普通饲料外,其余各组饲以配方高脂饲料(79.5%基础饲料+15%蛋黄粉+5%猪油+0.5%胆固醇)3周,再去除配方高脂饲料中胆固醇继续饲养3周。从造模开始ig给药,每日1次,连续给药6周。给药3周后检测血清三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C);第6周末次给药后检测血清TG、TC、HDL-C、LDL-C、载脂蛋白AI(ApoAI)、载脂蛋白B(ApoB)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、一氧化氮(NO)、内皮素(ET)、血栓素B2(TXB2)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、C反应蛋白(CRP)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素8(IL-8)和6酮前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)的量及血液流变学相关指标;计算主动脉脂质面积百分比,并在光镜下观察血管内膜形态学病理改变。结果 与模型组比较,雪胆总皂苷高、中剂量组在给药3周后能明显降低AS兔的血清TC和TG值,其中高剂量组能明显升高血清HDL-C值;雪胆总皂苷高剂量组6周后能明显升高HDL-C、ApoAI、SOD、GSH-Px、NO、6-keto-PGF1α和降低TC、TG和LDL-C、ApoB、ET、TXB2、TNF-α、CRP、IL-6和IL-8的量,中、低剂量组以上指标也有不同程度的升高或降低;雪胆总皂苷高、中剂量组能明显降低AS兔的全血黏度(高切和低切)、红细胞聚集指数和主动脉脂质面积百分比,明显改善血管内膜管壁脂质沉积、管壁增厚及管腔狭窄程度。结论 雪胆总皂苷能干预兔AS的发生、发展,其作用环节与调节血脂水平、抗炎作用、保护血管内皮细胞功能和改善血液流变学指标密切相关。
2016, 47(5):794-798.
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2016.05.018
摘要:
目的 从肠道菌群角度探讨姜黄素(CUR)对间歇性睡眠剥夺大鼠产生抗抑郁样作用的可能机制。方法 Wistar大鼠随机分为对照组、大平台对照组(BP)、模型组和CUR(70 mg/kg)组,采用改良的平台水环境法建立大鼠间歇性睡眠剥夺模型;通过敞箱实验和糖水偏好实验考察大鼠的抑郁样行为;同时收集粪便样本,提取肠道菌群的DNA,应用细菌16S rRNA基因序列设计引物,进行荧光定量PCR(qRT-PCR)检测。结果 行为学实验结果表明模型大鼠出现抑郁样行为,敞箱实验得分和糖水偏好率显著低于BP组(P<0.01),给予CUR可显著改善抑郁样行为;qRT-PCR检测表明,模型组粪便中的大肠杆菌、拟杆菌及有益菌双歧杆菌和乳酸杆菌,与对照组比较显著减少,有害菌产气荚膜梭菌相对量显著增加(P<0.05、0.01)。CUR组大鼠肠道菌群总量增加,除产气荚膜梭菌显著减少外,其余几种细菌相对量较模型组显著增加(P<0.05、0.01)。结论 间歇性睡眠剥夺引起大鼠抑郁样状态和肠道菌群失调,CUR改善肠道菌群失调,可能为其改善抑郁样状态的机制之一。
目的 从肠道菌群角度探讨姜黄素(CUR)对间歇性睡眠剥夺大鼠产生抗抑郁样作用的可能机制。方法 Wistar大鼠随机分为对照组、大平台对照组(BP)、模型组和CUR(70 mg/kg)组,采用改良的平台水环境法建立大鼠间歇性睡眠剥夺模型;通过敞箱实验和糖水偏好实验考察大鼠的抑郁样行为;同时收集粪便样本,提取肠道菌群的DNA,应用细菌16S rRNA基因序列设计引物,进行荧光定量PCR(qRT-PCR)检测。结果 行为学实验结果表明模型大鼠出现抑郁样行为,敞箱实验得分和糖水偏好率显著低于BP组(P<0.01),给予CUR可显著改善抑郁样行为;qRT-PCR检测表明,模型组粪便中的大肠杆菌、拟杆菌及有益菌双歧杆菌和乳酸杆菌,与对照组比较显著减少,有害菌产气荚膜梭菌相对量显著增加(P<0.05、0.01)。CUR组大鼠肠道菌群总量增加,除产气荚膜梭菌显著减少外,其余几种细菌相对量较模型组显著增加(P<0.05、0.01)。结论 间歇性睡眠剥夺引起大鼠抑郁样状态和肠道菌群失调,CUR改善肠道菌群失调,可能为其改善抑郁样状态的机制之一。
2016, 47(5):799-802.
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2016.05.019
摘要:
目的 观察腰痛宁胶囊治疗腰椎增生症(寒湿瘀阻证)的临床有效性及安全性。方法 以随机、盲法、安慰剂平行对照、多中心临床研究方法,选择符合研究标准的腰椎增生症患者144例,腰痛宁胶囊组(治疗组)72例,完成72例;安慰剂组(对照组)72例,完成70例。疗程2周,观察两组患者中医症侯、治疗后疼痛减轻的情况。结果 腰痛宁胶囊治疗腰椎增生症(寒湿瘀阻证)疗效:治疗组控显率41.5%;对照组0.0%,组间差异有统计学意义(P<0.001)。疼痛减轻情况:治疗组减轻率86.1%;对照组减轻率45.7%,组间差异有统计学意义(P<0.001)。结论 腰痛宁胶囊治疗腰椎增生症(寒湿瘀阻证)疗效显著,能够有效减轻腰椎增生引起的疼痛。
目的 观察腰痛宁胶囊治疗腰椎增生症(寒湿瘀阻证)的临床有效性及安全性。方法 以随机、盲法、安慰剂平行对照、多中心临床研究方法,选择符合研究标准的腰椎增生症患者144例,腰痛宁胶囊组(治疗组)72例,完成72例;安慰剂组(对照组)72例,完成70例。疗程2周,观察两组患者中医症侯、治疗后疼痛减轻的情况。结果 腰痛宁胶囊治疗腰椎增生症(寒湿瘀阻证)疗效:治疗组控显率41.5%;对照组0.0%,组间差异有统计学意义(P<0.001)。疼痛减轻情况:治疗组减轻率86.1%;对照组减轻率45.7%,组间差异有统计学意义(P<0.001)。结论 腰痛宁胶囊治疗腰椎增生症(寒湿瘀阻证)疗效显著,能够有效减轻腰椎增生引起的疼痛。
2016, 47(5):803-809.
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2016.05.020
摘要:
目的 从铁皮石斛Dendrobium officinale中克隆4-羟基-3-甲基-2-E-丁烯基-1-焦磷酸合成酶(4-hydroxy-3-methylbut-2-en-1-yl diphosphate synthase,HDS)基因,在大肠杆菌中诱导融合蛋白,并探究该基因在铁皮石斛不同组织中的表达规律。方法 采用RT-PCR和RACE等方法获取铁皮石斛HDS(DoHDS)的cDNA全长,利用相关软件和在线网站进行生物信息学分析,使用Real-Time PCR分析DoHDS在不同组织的表达特征,构建原核表达载体pET-28a(+)-DoHDS,转化大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达。结果 成功获得DoHDS的cDNA全长序列,GenBank登录号为KJ161312,全长2666 bp,ORF为2238 bp,编码745个氨基酸。DoHDS在各组织中均有表达,在茎中表达量最高,为原球茎的5倍;SDS-PAGE结果显示诱导产物为1个相对分子质量(82700)与理论值相符的融合蛋白。结论 克隆了DoHDS的cDNA全长序列,探究其在不同组织中的表达模式,建立了原核表达体系,为后续研究DoHDS的功能提供了一定的理论基础。
目的 从铁皮石斛Dendrobium officinale中克隆4-羟基-3-甲基-2-E-丁烯基-1-焦磷酸合成酶(4-hydroxy-3-methylbut-2-en-1-yl diphosphate synthase,HDS)基因,在大肠杆菌中诱导融合蛋白,并探究该基因在铁皮石斛不同组织中的表达规律。方法 采用RT-PCR和RACE等方法获取铁皮石斛HDS(DoHDS)的cDNA全长,利用相关软件和在线网站进行生物信息学分析,使用Real-Time PCR分析DoHDS在不同组织的表达特征,构建原核表达载体pET-28a(+)-DoHDS,转化大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达。结果 成功获得DoHDS的cDNA全长序列,GenBank登录号为KJ161312,全长2666 bp,ORF为2238 bp,编码745个氨基酸。DoHDS在各组织中均有表达,在茎中表达量最高,为原球茎的5倍;SDS-PAGE结果显示诱导产物为1个相对分子质量(82700)与理论值相符的融合蛋白。结论 克隆了DoHDS的cDNA全长序列,探究其在不同组织中的表达模式,建立了原核表达体系,为后续研究DoHDS的功能提供了一定的理论基础。
2016, 47(5):810-815.
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2016.05.021
摘要:
目的 克隆三叶青Tetrastigma hemsleyanum的扩展蛋白家族基因,对其进行器官表达分析,并初步探讨其功能。方法 根据GenBank中登录的扩展蛋白基因保守区域序列设计1对简并引物,以三叶青球形块根cDNA为模板进行RT-PCR扩增,再结合RACE技术,获得三叶青扩展蛋白基因全长cDNA序列,命名为Th-exp。采用半定量RT-PCR和荧光定量PCR分析Th-exp基因在不同器官中的表达情况。结果 克隆获得扩展蛋白家族基因,共782 bp,其中包含630 bp开放阅读框,编码209个氨基酸(GenBank登陆号KP693606)。Th-exp编码的蛋白质具有典型的扩展蛋白结构特征,N端含有8个半胱氨酸的结构域,C端含有4个保守的色氨酸结构域,中间含有组氨酸功能域。Blast分析显示,Th-exp与葡萄、醉蝶花中扩展蛋白基因具有相似性。半定量RT-PCR和荧光定量PCR分析表明,Th-exp在三叶青叶、茎、普通细根和球形块根中均有表达,但球形块根中表达强于其他器官。结论 克隆得到三叶青扩展蛋白家族基因Th-exp全长cDNA,初步预测其参与了三叶青块根的发育过程。
目的 克隆三叶青Tetrastigma hemsleyanum的扩展蛋白家族基因,对其进行器官表达分析,并初步探讨其功能。方法 根据GenBank中登录的扩展蛋白基因保守区域序列设计1对简并引物,以三叶青球形块根cDNA为模板进行RT-PCR扩增,再结合RACE技术,获得三叶青扩展蛋白基因全长cDNA序列,命名为Th-exp。采用半定量RT-PCR和荧光定量PCR分析Th-exp基因在不同器官中的表达情况。结果 克隆获得扩展蛋白家族基因,共782 bp,其中包含630 bp开放阅读框,编码209个氨基酸(GenBank登陆号KP693606)。Th-exp编码的蛋白质具有典型的扩展蛋白结构特征,N端含有8个半胱氨酸的结构域,C端含有4个保守的色氨酸结构域,中间含有组氨酸功能域。Blast分析显示,Th-exp与葡萄、醉蝶花中扩展蛋白基因具有相似性。半定量RT-PCR和荧光定量PCR分析表明,Th-exp在三叶青叶、茎、普通细根和球形块根中均有表达,但球形块根中表达强于其他器官。结论 克隆得到三叶青扩展蛋白家族基因Th-exp全长cDNA,初步预测其参与了三叶青块根的发育过程。
2016, 47(5):816-820.
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2016.05.022
摘要:
目的 以不同产地的14批连翘Forsythia suspensa为材料,运用RAPD技术对其进行遗传多样性研究并构建DNA指纹图谱。方法 采用RAPD技术,从45条RAPD随机引物中进行筛选,以14批连翘进行DNA指纹图谱的分析研究。结果 从45条RAPD随机引物中筛选出11条多态性好的引物,利用这11条RAPD引物进行PCR扩增,共获得80条谱带,平均每个引物扩增出7.27条谱带,其中多态性谱带67条,多态性条带比率为83.8%,是连翘药材资源研究的一种有效分子标记。14批连翘药材间的遗传相似系数(genetic similarity,GS)在0.4875~0.9625,表明遗传多样性比较丰富。聚类结果显示遗传多样性与连翘药材来源地有明显的相关性,而且与其亲缘关系较近有关,符合植物种群分布的一般规律。结论 以14批不同产地连翘药材资源的RAPD扩增谱带为基础,构建连翘药材资源的DNA指纹图谱并进行聚类分析。
目的 以不同产地的14批连翘Forsythia suspensa为材料,运用RAPD技术对其进行遗传多样性研究并构建DNA指纹图谱。方法 采用RAPD技术,从45条RAPD随机引物中进行筛选,以14批连翘进行DNA指纹图谱的分析研究。结果 从45条RAPD随机引物中筛选出11条多态性好的引物,利用这11条RAPD引物进行PCR扩增,共获得80条谱带,平均每个引物扩增出7.27条谱带,其中多态性谱带67条,多态性条带比率为83.8%,是连翘药材资源研究的一种有效分子标记。14批连翘药材间的遗传相似系数(genetic similarity,GS)在0.4875~0.9625,表明遗传多样性比较丰富。聚类结果显示遗传多样性与连翘药材来源地有明显的相关性,而且与其亲缘关系较近有关,符合植物种群分布的一般规律。结论 以14批不同产地连翘药材资源的RAPD扩增谱带为基础,构建连翘药材资源的DNA指纹图谱并进行聚类分析。
2016, 47(5):821-826.
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2016.05.023
摘要:
目的 研究人参根腐菌Fusarium solani和人参锈腐菌Cylindrocarpon destructans对人参总皂苷的化学趋向性响应。方法 采用平板法和孢子悬滴萌发法分别测定了2种病原菌及其孢子在3种趋化参数(质量浓度、温度和pH值)条件下对人参总皂苷的化学趋向性响应。结果 人参根腐菌对低质量浓度的人参总皂苷表现出较强的化学趋向性,趋化移动指数(CMI)为1.2948,病原菌孢子萌发率(SGR)为66%,趋化生长速率(CGR)为0.533,病原菌菌丝生长量(MG)为0.5220 mg/mL;人参锈腐菌则对中质量浓度的人参总皂苷表现出较强的化学趋向性,CMI为1.2556,病原菌SGR为63%,CGR为0.465,MG为0.4494 mg/mL。结论 低、中质量浓度(0.2~20 mg/L)的人参总皂苷对人参根腐菌的化学趋向性有促进作用,人参锈腐菌对4种质量浓度的人参总皂苷均具有化学趋向性响应,而且受此趋化影响下的2种病原菌的SGR、CGR和MG也都得到了显著的提高,但都随皂苷质量浓度的增加而减弱。
目的 研究人参根腐菌Fusarium solani和人参锈腐菌Cylindrocarpon destructans对人参总皂苷的化学趋向性响应。方法 采用平板法和孢子悬滴萌发法分别测定了2种病原菌及其孢子在3种趋化参数(质量浓度、温度和pH值)条件下对人参总皂苷的化学趋向性响应。结果 人参根腐菌对低质量浓度的人参总皂苷表现出较强的化学趋向性,趋化移动指数(CMI)为1.2948,病原菌孢子萌发率(SGR)为66%,趋化生长速率(CGR)为0.533,病原菌菌丝生长量(MG)为0.5220 mg/mL;人参锈腐菌则对中质量浓度的人参总皂苷表现出较强的化学趋向性,CMI为1.2556,病原菌SGR为63%,CGR为0.465,MG为0.4494 mg/mL。结论 低、中质量浓度(0.2~20 mg/L)的人参总皂苷对人参根腐菌的化学趋向性有促进作用,人参锈腐菌对4种质量浓度的人参总皂苷均具有化学趋向性响应,而且受此趋化影响下的2种病原菌的SGR、CGR和MG也都得到了显著的提高,但都随皂苷质量浓度的增加而减弱。
2016, 47(5):827-831.
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2016.05.024
摘要:
目的 比较过路黄Lysimachia christinae和广金钱草Desmodium styracifolium的化学成分异同,为阐明二者药效异同提供参考。方法 采用RP-HPLC建立过路黄和广金钱草的HPLC-UV指纹图谱和HPLC-ELSD指纹图谱,比较二者2种指纹图谱的差异。结果 过路黄的HPLC-UV指纹图谱和其HPLC-ELSD指纹图谱的差异很大,UV检测到的强峰并非ELSD检测到的强峰,广金钱草亦然;过路黄的HPLC-UV指纹图谱有14个共有峰,HPLC-ELSD指纹图谱有5个共有峰;而广金钱草的HPLC-UV指纹图谱有28个共有峰,HPLC-ELSD指纹图谱有18个共有峰;13批过路黄的指纹图谱相似度较13批广金钱草的相似度差;过路黄和广金钱草的HPLC-UV指纹图谱有4个共有峰,二者的HPLC-ELSD指纹图谱有2个共有峰。结论 HPLC-ELSD指纹图谱能更好地反映过路黄和广金钱草中量较高的非挥发性成分组成的全貌;市售过路黄的质量差异大,而市售广金钱草的质量稳定;过路黄和广金钱草可能含有2种量较高的相同成分,作为二者治疗相同病症的物质基础,但该2种药材应该各具偏性,各有独特的治疗功用,应明确区分。
目的 比较过路黄Lysimachia christinae和广金钱草Desmodium styracifolium的化学成分异同,为阐明二者药效异同提供参考。方法 采用RP-HPLC建立过路黄和广金钱草的HPLC-UV指纹图谱和HPLC-ELSD指纹图谱,比较二者2种指纹图谱的差异。结果 过路黄的HPLC-UV指纹图谱和其HPLC-ELSD指纹图谱的差异很大,UV检测到的强峰并非ELSD检测到的强峰,广金钱草亦然;过路黄的HPLC-UV指纹图谱有14个共有峰,HPLC-ELSD指纹图谱有5个共有峰;而广金钱草的HPLC-UV指纹图谱有28个共有峰,HPLC-ELSD指纹图谱有18个共有峰;13批过路黄的指纹图谱相似度较13批广金钱草的相似度差;过路黄和广金钱草的HPLC-UV指纹图谱有4个共有峰,二者的HPLC-ELSD指纹图谱有2个共有峰。结论 HPLC-ELSD指纹图谱能更好地反映过路黄和广金钱草中量较高的非挥发性成分组成的全貌;市售过路黄的质量差异大,而市售广金钱草的质量稳定;过路黄和广金钱草可能含有2种量较高的相同成分,作为二者治疗相同病症的物质基础,但该2种药材应该各具偏性,各有独特的治疗功用,应明确区分。
2016, 47(5):832-836.
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2016.05.025
摘要:
目的 建立透骨草药材来源中狭山野豌豆Vicia amoena超高效液相色谱(UPLC)指纹图谱,并与其余5种来源品种进行比较,为透骨草药材质量控制提供参考依据。方法 用Eclipse Plus C18 RRHD(50 mm×2.1 mm,1.8μm)色谱柱,以乙腈-0.1%甲酸溶液为流动相梯度洗脱,体积流量0.2 mL/min;柱温30℃;检测波长340 nm。测定10个不同产地狭山野豌豆指纹图谱,采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004A版)计算相似度,并用对照品和液质联用技术指认色谱峰;同条件下比较鉴别透骨草药材其他5种来源品种。结果 建立了狭山野豌豆指纹图谱,采用超高效液相色谱-电喷雾-四级杆-飞行时间串联质谱仪(UPLC-ESI-Q-TOF-MS)对14个共有峰中的6个峰进行初步归属,确定为绿原酸、杨梅苷、金丝桃苷、异槲皮苷、山柰苷、槲皮苷;透骨草药材其他5种来源品种与狭山野豌豆指纹图谱的共有模式明显不同。结论 该方法重现性好、特征性强,可用于透骨草药材全面质量评价。
目的 建立透骨草药材来源中狭山野豌豆Vicia amoena超高效液相色谱(UPLC)指纹图谱,并与其余5种来源品种进行比较,为透骨草药材质量控制提供参考依据。方法 用Eclipse Plus C18 RRHD(50 mm×2.1 mm,1.8μm)色谱柱,以乙腈-0.1%甲酸溶液为流动相梯度洗脱,体积流量0.2 mL/min;柱温30℃;检测波长340 nm。测定10个不同产地狭山野豌豆指纹图谱,采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004A版)计算相似度,并用对照品和液质联用技术指认色谱峰;同条件下比较鉴别透骨草药材其他5种来源品种。结果 建立了狭山野豌豆指纹图谱,采用超高效液相色谱-电喷雾-四级杆-飞行时间串联质谱仪(UPLC-ESI-Q-TOF-MS)对14个共有峰中的6个峰进行初步归属,确定为绿原酸、杨梅苷、金丝桃苷、异槲皮苷、山柰苷、槲皮苷;透骨草药材其他5种来源品种与狭山野豌豆指纹图谱的共有模式明显不同。结论 该方法重现性好、特征性强,可用于透骨草药材全面质量评价。
2016, 47(5):837-843.
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2016.05.026
摘要:
四君子汤为中医健脾益气的代表方剂,由人参、白术、茯苓、炙甘草4味药组成,具有调节胃肠道功能、增强免疫力、促进癌细胞凋亡、抗衰老作用,其主要化学成分为皂苷、黄酮和多糖,该方多糖成分、药效物质基础研究较少。总结了四君子汤的化学成分、药理作用研究进展,为深入研究四君子汤及其临床的合理应用提供参考。
四君子汤为中医健脾益气的代表方剂,由人参、白术、茯苓、炙甘草4味药组成,具有调节胃肠道功能、增强免疫力、促进癌细胞凋亡、抗衰老作用,其主要化学成分为皂苷、黄酮和多糖,该方多糖成分、药效物质基础研究较少。总结了四君子汤的化学成分、药理作用研究进展,为深入研究四君子汤及其临床的合理应用提供参考。
2016, 47(5):844-850.
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2016.05.027
摘要:
成纤维样滑膜细胞是类风湿关节炎滑膜组织中最主要的细胞,在类风湿关节炎发病中起关键作用,是进行类风湿关节炎病理机制及治疗药物的相关药理研究的主要载体之一。近年来,针对中药及其有效成分对成纤维样滑膜细胞增殖、凋亡的影响开展了大量研究,部分研究并对抑制增殖和诱导凋亡的相关作用机制进行了探讨。通过综述近年研究的成果,以期为类风湿关节炎的基础研究、新药开发及临床治疗提供思路和借鉴。
成纤维样滑膜细胞是类风湿关节炎滑膜组织中最主要的细胞,在类风湿关节炎发病中起关键作用,是进行类风湿关节炎病理机制及治疗药物的相关药理研究的主要载体之一。近年来,针对中药及其有效成分对成纤维样滑膜细胞增殖、凋亡的影响开展了大量研究,部分研究并对抑制增殖和诱导凋亡的相关作用机制进行了探讨。通过综述近年研究的成果,以期为类风湿关节炎的基础研究、新药开发及临床治疗提供思路和借鉴。
2016, 47(5):851-856.
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2016.05.028
摘要:
女贞子Ligustri Lucidi Fructus具有滋补肝肾作用,在古代用于骨痿等症的治疗,现代基础研究和临床研究也表明,女贞子在治疗骨质疏松方面有广阔的应用前景。通过查阅国内外相关文献,综述了关于女贞子治疗骨质疏松的相关实验研究和临床研究的进展,概括了女贞子和女贞子复方配伍治疗骨质疏松的作用机制,为进一步的实验研究和临床应用奠定了理论基础。
女贞子Ligustri Lucidi Fructus具有滋补肝肾作用,在古代用于骨痿等症的治疗,现代基础研究和临床研究也表明,女贞子在治疗骨质疏松方面有广阔的应用前景。通过查阅国内外相关文献,综述了关于女贞子治疗骨质疏松的相关实验研究和临床研究的进展,概括了女贞子和女贞子复方配伍治疗骨质疏松的作用机制,为进一步的实验研究和临床应用奠定了理论基础。
2016, 47(5):857-861.
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2016.05.029
摘要:
佛手精油是从新鲜佛手中提取出来的一种气味清新、略带花香的挥发油,是天然香料精油中的一种。其具有明显的抗菌、抗炎作用,能治疗晒伤、牛皮癣、粉刺,改善皮肤等,还能起到抗抑郁、舒缓情绪的作用。佛手精油在国外一直被认为是一种名贵的香料精油,并且在食品和化妆品中具有较高的应用价值。目前,国内外学者对佛手精油的研究主要集中在优化提取工艺、成分分析、药理作用等方面。随着佛手精油及相关产品的不断开发与应用,佛手精油的研究范围越来越广。主要综述了佛手精油的提取工艺、精油中各种成分的分析、精油的药理作用及其相关应用等方面的研究进展,并针对佛手精油研究过程中出现的各种问题进行了阐述,指出了相应的解决方案,对未来佛手精油的发展进行了展望。
佛手精油是从新鲜佛手中提取出来的一种气味清新、略带花香的挥发油,是天然香料精油中的一种。其具有明显的抗菌、抗炎作用,能治疗晒伤、牛皮癣、粉刺,改善皮肤等,还能起到抗抑郁、舒缓情绪的作用。佛手精油在国外一直被认为是一种名贵的香料精油,并且在食品和化妆品中具有较高的应用价值。目前,国内外学者对佛手精油的研究主要集中在优化提取工艺、成分分析、药理作用等方面。随着佛手精油及相关产品的不断开发与应用,佛手精油的研究范围越来越广。主要综述了佛手精油的提取工艺、精油中各种成分的分析、精油的药理作用及其相关应用等方面的研究进展,并针对佛手精油研究过程中出现的各种问题进行了阐述,指出了相应的解决方案,对未来佛手精油的发展进行了展望。
2016, 47(5):862-864.
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2016.05.030
摘要:
近年来美国草药类膳食补充剂市场的持续扩大,为中草药进入美国膳食补充剂市场提供了发展机遇。FDA规定膳食补充剂标签中可以出现符合规定的结构/功能声称(Structure/Function Claims),并列出了10条判断是否属于结构/功能声称的标准。美国市场中的中草药膳食补充由于产品标签中功能不明确、消费者对产品的功能不理解等因素,导致其真正的保健价值很难得到实现。因此,正确地表达并传递出中草药类膳食补充剂的功能,是中草药制剂进入美国膳食补充剂市场的重要环节。
近年来美国草药类膳食补充剂市场的持续扩大,为中草药进入美国膳食补充剂市场提供了发展机遇。FDA规定膳食补充剂标签中可以出现符合规定的结构/功能声称(Structure/Function Claims),并列出了10条判断是否属于结构/功能声称的标准。美国市场中的中草药膳食补充由于产品标签中功能不明确、消费者对产品的功能不理解等因素,导致其真正的保健价值很难得到实现。因此,正确地表达并传递出中草药类膳食补充剂的功能,是中草药制剂进入美国膳食补充剂市场的重要环节。
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