[关键词]
[摘要]
建立金钗石斛Dendrobiumnobile相关序列扩增多态性(SRAP)反应体系,为金钗石斛分子生物学研究提供技术支持。方法运用L25(56)正交设计对影响金钗石斛SRAP反应的5个因素:模板DNA、Mg2+、dNTPs、Taq酶、引物在5个水平上进行优化试验,对PCR结果进行极差分析。结果金钗石斛SRAP反应最佳体系为:25μL PCR体系中含有20 ng模板DNA,2.0mmol/Lmg2+,0.2mmol/LdNTPs,1UTaq酶,0.6μmol/L引物。各因素对SRAP反应的影响依次为:Taq酶>Mg2+>dNTPs>模板DNA>引物。结论所建立的金钗石斛SRAP反应体系具有标记位点清晰、多态性丰富、稳定性好等特点,可用于金钗石斛分子生物学的研究。
[Key word]
[Abstract]
establish the optimal sequence related amplified polym or phism ( SRAP) reaction system for molecular biology research in Dendrobi umnobile.
[中图分类号]
[基金项目]
国家自然科学基金资助项目(30670199,30770185,30870180);浙江省自然科学基金资助项目(X305692,X301406);浙江省科技计划资助项目(2008C12081);杭州市重点实验室项目(20080432T06);钱江人才计划资助项目