目的建立仙蟾胶囊中士的宁、脂蟾毒配基与华蟾酥毒基的高效液相色谱法测定。方法士的宁:采用Intersil-ODS3色谱柱;流动相:乙腈-0.01mol/L十二烷基磺酸钠-0.01mol/L磷酸二氢钾(40∶30∶30,冰醋酸调节pH值4.0);检测波长:254nm;体积流量:1.2mL/min;柱温:室温;脂蟾毒配基与华蟾酥毒基:采用Hypersil C₁₈色谱柱;流动相:0.5%醋酸铵-乙腈(50∶50,氨水调节pH值7.0);检测波长:296nm;体积流量:0.6mL/min;柱温:40℃。结果士的宁、脂蟾毒配基、华蟾酥毒基分别在4.2~41.6、10.8~108.0、9.4~94.0μg/mL与峰面积的线性关系良好。加样回收率分别为101.8%、97.6%、98.4%,RSD均小于2%。结论本方法操作简便,灵敏度高,结果准确,重现性好,为仙蟾胶囊的质量控制提供了较全面的定量分析方法。