摘要:
目的 基于网络药理学分子对接及体外实验探究黄芪治疗多囊卵巢综合征(PCOS)的作用机制。方法 基于TCMSP、BATMAN、ETCM、TCMID等数据库,依据口服生物利用度(OB)和类药性(DL)标准筛选黄芪的有效成分并预测其作用靶点。通过TTD、OMIM、GeneCards数据库获取PCOS相关靶点,确定交集靶点。构建“药物-活性成分-靶点-疾病”网络模型,利用Cytoscape软件进行拓扑学分析,筛选核心成分与靶点。借助STRING数据库构建蛋白质相互作用(PPI)网络,筛选核心靶点。利用Metascape数据库进行基因本体(GO)与京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析。采用分子对接技术验证核心成分与关键靶点的结合能力。以肿瘤坏死因子-α(TNF-α)构建KGN细胞PCOS模型,设对照组、模型组及不同剂量常春藤皂苷元处理组,检测细胞活力、凋亡率、脱氢表雄酮(DHEA)、睾酮、白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-18水平及TP53、JUN基因表示水平。结果 筛选出黄芪的17种有效成分,预测其209个作用靶点,与PCOS的2 476个靶点比对后获得133个交集靶点。网络分析显示白桦脂酸、常春藤皂苷元、7-O-甲基异木犀草素等为核心成分。PPI网络分析筛选出肿瘤蛋白53(TP53)、JUN、雌激素受体1(ESR1)等核心靶点。GO富集分析显示交集靶点涉及多种生物过程、细胞组分和分子功能;KEGG富集分析揭示了磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)等关键通路。分子对接结果显示,白桦脂酸、常春藤皂苷元、7-O-甲基异木犀草素与核心靶点TP53、JUN、ESR1均有较好结合能力,其中常春藤皂苷元与ESR1结合能最低。细胞实验表明,高剂量常春藤皂苷元可显著提升模型KGN细胞活力(P<0.001)、降低细胞凋亡率(P<0.05、0.001),并下调DHEA、睾酮、IL-1β、IL-18水平和TP53、JUN基因表达(P<0.05)。结论 黄芪通过常春藤皂苷元、白桦脂酸等有效成分,结合TP53、ESR1等关键靶点,调控PI3K/Akt、MAPK等信号通路,从而改善PCOS患者的卵巢功能。