摘要:
目的 探讨红景天苷对高糖诱导的视网膜神经节细胞(RGC)损伤及环磷酸腺苷/蛋白激酶A/cAMP反应元件结合蛋白(cAMP/PKA/CREB)通路的影响。方法 将RGC-5细胞分为对照组、模型组、红景天苷(0.25、0.5 mmol/L)组、红景天苷+Forskolin(0.5 mmol/L+0.02 mmol/L)组。5-乙炔基-2’-脱氧尿嘧啶核苷(Edu)检测各组细胞增殖情况;2,7-二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)荧光探针检测活性氧(ROS)水平;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测氧化应激及cAMP水平;流式细胞仪检测细胞凋亡;单丹磺酰尸胺(MDC)染色检测自噬空泡形成;蛋白免疫印迹(Western blotting)检测增殖、凋亡、自噬及cAMP/PKA/CREB通路相关蛋白表达。结果 与模型组比较,红景天苷(0.25、0.5 mmol/L)组Edu阳性率、PCNA表达及超氧化物歧化酶(SOD)活性升高,活性氧(ROS)平均荧光强度、丙二醛(MDA)含量、细胞凋亡率、cleaved半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、Caspase-3、自噬空泡绿色荧光强度、微管相关蛋白轻链3Ⅱ/LC3Ⅰ、Bcl-2同源结构域蛋白抗体(Beclin-1)、PKA、p-CREB/CREB蛋白表达及cAMP水平显著降低(P<0.05);与红景天苷0.5 mmol/L组比较,红景天苷+Forskolin组Edu阳性率、PCNA表达及SOD活性降低,ROS平均荧光强度、MDA含量、细胞凋亡率、cleaved Caspase-3、Caspase-3、自噬空泡绿色荧光强度、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin-1、PKA、p-CREB/CREB蛋白表达及cAMP水平显著升高(P<0.05)。结论 红景天苷可减轻高糖诱导的RGC-5细胞损伤,与抑制cAMP/PKA/CREB信号通路相关。