[关键词]
[摘要]
灯油藤Celastrus paniculatus Willd.(CP)具有增强记忆力的作用,药理研究表明其甲醇提取物(ME)具有自由基清除作用和降低H2O2引起的细胞毒作用,预示其可缓解神经退化疾病(如阿尔茨海默氏病、帕金森综合征等)中由氧化引起的神经细胞损伤,为进一步证明其对神经细胞的保护作用,作者研究了灯油藤种子油(CPO)及ME、乙醇提取物(EE)的超氧化物清除作用和它们对H2O2及谷氨酸盐诱导的神经细胞损伤的保护作用。用对DPPH的漂白法测定CPO、ME及EE的自由基清除作用,结果显示CPO、ME、EE在20min对DPPH有漂白作用且呈剂量相关性增加,ME的作用强度大于CPO或EE,表明所有灯油藤种子的成分(CP—Cs)具有抗氧化活性;CP—Cs对超氧阴离子的清除作用采用NADH在340nm波长下吸收度的变化来测定,结果显示阳性对照组(含β-巯基乙醇)20min后,39%的NADH被氧化,对照组(不含β-巯基乙醇)NADH不被氧化,CPO、ME和EE具有剂量相关的超氧离子清除作用,且ME作用最强,EE比CPO强;用MTT法评价CP—Cs对H2O2导致的神经损伤的保护作用,结果与对照组相比,用200μmol/LH2O2处理的前脑神经细胞(FBNC)死亡率为50%,用CPO预处理FBNCs,剂量相关地提高细胞存活率,10μgCPO对H2O2导致的神经损伤的保护作用最强,存活率增至66.6%,ME与EE仅在中等剂量下有效;以MTT法测定CP—Cs对谷氨酸盐诱导的神经损伤的保护作用,结果与对照组相比,用谷氨酸盐导致FBNC死亡率约50%,用CPO预处理主要的神经细胞,细胞存活数增加(从50%增至67.8%)并呈剂量相关,虽然ME、EE的自由基清除能力比CPO强,但对谷氨酸盐诱导的细胞毒无保护作用,用96孔板微量滴定法测定AChE,细胞的AChE在任何浓度下不受CP—Cs抑制;超氧化物歧化酶(SOD)及过氧化氢酶活性由分光光度法测定,结果显示用CP—Cs前处理后加入H2O2,FBNC细胞内的SOD水平不变,但H2O2能显著降低未经处理的FBNC过氧化氢酶的活性。用CPO、ME和EE预处理后,能显著减弱HO22对过氧化氢酶活性的降低作用;MDA水平用硫代巴比妥酸法测定,结果显示H2O2处理以后,细胞内MDA增加约77%,但用CP—Cs预处理后能降低MDA水平,ME、EE同样有效,但作用强度为CPO的十分之一。结论:研究表明,CPO、ME和EE保护神经细胞对抗H2O2导致的神经细胞毒性,部分归因于其抗氧化作用,还能产生抗氧化酶作用,CPO的抗氧化作用最低,但其对H2O2及谷氨酸盐诱导的神经损伤的保护作用却最强。因此,除自由基清除作用外,CP—Cs神经保护作用的机制有待进一步研究。
[Key word]
[Abstract]
[中图分类号]
R743.31
[基金项目]