2018年第49卷第2期文章目次

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  • 1  目录
    2018, 49(2):0-0. DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2018.02.0
    [摘要](357) [HTML](0) [PDF 4.58 M](1240)
    摘要:
    2  封面
    2018, 49(2):0-0. DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2018.02.000
    [摘要](360) [HTML](0) [PDF 2.42 M](1114)
    摘要:
    3  LC-MS/MS分子网络及其对中药研究的启发
    程桃芳 金慧子 刘昌孝 张卫东
    2018, 49(2):265-273. DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2018.02.001
    [摘要](2571) [HTML](0) [PDF 8.51 M](2731)
    摘要:
    近年来,LC-MS/MS的分子网络技术已广泛应用于微生物、海洋生物、真菌及植物等来源的天然产物的研究,关于分子网络在中药方面的研究应用却鲜有报道。以分子网络为主题,首先对分子网络进行简要介绍,并对分子网络方面的文献进行了调研;随后,对分子网络策略在化学成分定性表征、化学成分定量表征及质量控制、指导活性化合物的分离、提取工艺的优化以及疾病诊断和个性化治疗5个方面的应用进行综述;最后,对分子网络在中药研究方面的应用进行了展望,旨在为中药研究提供新的思路和方法,以期促进中医药的现代化发展。
    4  假升麻中2个新的单萜苷类化合物
    马雪姣 栗章彭 苏艳芳
    2018, 49(2):274-277. DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2018.02.002
    [摘要](1168) [HTML](0) [PDF 3.04 M](1350)
    摘要:
    目的 研究假升麻Aruncus sylvester根的化学成分。方法 采用大孔树脂、硅胶及反相ODS柱色谱等方法进行分离和纯化,并综合运用NMR、HR-ESI-MS等波谱手段以及ECD计算等方法鉴定化合物的结构。结果 从假升麻乙醇提取物正丁醇萃取部分中分离得到2个新的单萜苷,分别鉴定为(2E,4S,5R)-4-hydroxy-3-[2-(β-D-glucopyranosyloxy) ethylidene]-5-(2-methylprop-1-en-1-yl) dihydrofuran-2(3H)-one(1)、(2Z,4S,5R)-4-hydroxy-3-[2-(β-D-glucopyranosyloxy) ethylidene]-5-(2-methylprop-1-en-1-yl) dihydrofuran-2(3H)-one(2)。结论 化合物12 均为新化合物,分别命名为假升麻苷A和假升麻苷B。
    5  连翘中的2个多元醇类新化合物
    温静 阎新佳 梁伟 杨波 王欣晨 郑威 李国玉 孙向明 李文兰
    2018, 49(2):278-281. DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2018.02.003
    [摘要](1396) [HTML](0) [PDF 2.80 M](1337)
    摘要:
    目的 对连翘Forsythia suspensa的化学成分进行研究。方法 通过大孔吸附树脂、Sephadex LH-20、反相HPLC等多种色谱进行分离纯化,根据理化性质和波谱数据进行结构鉴定。结果 从连翘的50%乙醇提取物中分离得到2个化合物,分别鉴定为(2R,3S)-3-(4-羟基-3-甲氧基苯)-3-甲氧基丙烷-1,2-二醇(1)和2-甲基己烷-1,2,3,6-四醇(2)。结论 化合物1 为新立体构型化合物,化合物2 为新化合物,分别命名为(2R,3S)-forsythiayanoside D和连翘己四醇。
    6  定心藤枝叶中化学成分研究
    蒋芝华 冯兴阳 郭微 王伊童 王婷婷 柴玲 刘艳萍 黄泽豪 付艳辉
    2018, 49(2):282-287. DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2018.02.004
    [摘要](1149) [HTML](0) [PDF 5.27 M](1282)
    摘要:
    目的 研究定心藤属植物定心藤Mappianthus iodoides枝叶中的化学成分。方法 综合运用正相硅胶柱色谱、反相硅胶柱色谱和Sephadex LH-20凝胶柱色谱以及制备型高效液相色谱等方法进行系统分离,根据理化性质及波谱学数据鉴定化合物的化学结构。结果 从定心藤枝叶的90%乙醇提取物中分离得到了16个化合物,分别鉴定为9-hydroxy-4,6-megastigmadien-3-one(1)、9-hydroxy-4,7-megastigmadien-3-one(2)、blumenol A(3)、9,10-dihydroxy-4,7-megastigmadien-3-one(4)、5,12-epoxy-9-hydroxy-7-megastigmen-3-one(5)、5,12-epoxy-6,9-hydroxy-7-megastigmen-3-one(6)、黑麦草内酯(7)、落叶松树脂醇(8)、异落叶松树脂醇(9)、5'-甲氧基落叶松树脂醇(10)、橄榄脂素(11)、去氢双松柏醇(12)、chushizisin I(13)、3,3-didemethoxyverrucosin(14)、4-epi-larreatricin(15)和glycerol monolinoleate(16)。其中化合物1 ~7 为降碳倍半萜类化合物,化合物8 ~15 为木脂素类化合物,化合物16 为脂肪酸类化合物。结论 所有化合物均为首次从定心藤属植物中分离得到。
    7  腰痹通胶囊化学成分研究(I)
    王雪晶 宋亚玲 罗鑫 刘莉娜 黄文哲 王振中 萧伟
    2018, 49(2):288-292. DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2018.02.005
    [摘要](1198) [HTML](0) [PDF 4.09 M](1174)
    摘要:
    目的 对腰痹通胶囊醇提部位进行化学成分研究。方法 采用硅胶柱色谱、反相色谱(DAC)、Sephadex LH-20凝胶柱色谱以及制备型HPLC等方法进行分离和纯化,并结合NMR等波谱学技术对化合物进行结构鉴定。结果 从腰痹通胶囊醇提部位中共分离得到了16个化合物,分别鉴定为紫花前胡内酯(1)、哥伦比亚苷元(2)、阿魏酸(3)、伞形花内酯(4)、佛手酚(5)、花椒毒素(6)、异欧前胡素(7)、滨蒿内酯(8)、(Z)-6-hydroxy-7-methoxydihydroligustilide(9)、4-羟基-3-丁基苯酞(10)、3-(3'-羟基)-丁基苯酞(11)、洋川芎内酯C(12)、洋川芎内酯H(13)、洋川芎内酯I(14)、秦皮定(15)、异秦皮定(16)。结论 化合物1 ~16 均为首次从该复方中分离得到,化合物11 为首次通过分离手段得到的天然产物。
    8  基于UPLC-Q-TOF-MS的加参片提取物化学成分分析
    孙宁宁 张可佳 耿婉丽 鄂秀辉 高雯 何毅 李萍
    2018, 49(2):293-304. DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2018.02.006
    [摘要](1455) [HTML](0) [PDF 9.44 M](1158)
    摘要:
    目的 通过建立超高效液相色谱-质谱联用(UPLC-Q-TOF-MS)分析方法,对加参片提取物化学成分进行定性分析,确定加参片提取物的主要化学成分。方法 采用Waters ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7 μm),以0.1%甲酸水(A)-甲醇(B)为流动相梯度洗脱;体积流量0.3 mL/min,采用电喷雾离子化源(ESI),MSE扫描正负离子模式检测。结果 通过与对照品比对、数据库匹配、质谱数据分析及参考相关文献,从加参片提取物中共鉴定出68个化学成分,并发现了4个未知化合物,其中包括13个酚酸类成分、6个丹参酮类成分、11个黄酮及其苷类成分、4个强心苷类成分、15个三萜皂苷类成分、7个C21甾体类成分、12个其他类成分及4个未知成分。结论 对加参片提取物化学成分进行了较为全面的分析,为加参片的物质基础及质量控制研究打下了良好的基础。
    9  绵马贯众中间苯三酚类化合物抗流感病毒的活性筛选
    刘畅 闫艳韬 王娟 包蕾 胡京红 崔晓兰 高增平
    2018, 49(2):305-312. DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2018.02.007
    [摘要](1210) [HTML](0) [PDF 6.87 M](1030)
    摘要:
    目的 基于绵马贯众中间苯三酚类成分寻找具有良好抗流感病毒活性的化合物。方法 将25个绵马贯众中间苯三酚类化合物与12种流感病毒神经氨酸酶(neuraminidase,NA)进行分子对接,通过评价结合能、结合模式及发生相互作用的重要氨基酸等指标进行虚拟筛选。通过神经氨酸酶抑制实验验证其中4个候选化合物体外抑制NA的活性,在此基础上,采用犬肾MDCK细胞通过细胞病变(CPE)法对候选化合物M22的抗病毒活性进行进一步的验证。结果 通过分子对接筛选出5个与NA有较好结合能力的候选化合物;NA抑制实验结果表明候选化合物中M22对NA抑制作用最显著;CPE实验结果表明M22对多种流感病毒毒株均具有较好的抑制作用。结论 绵马贯众中候选化合物M22具有较好的抗流感病毒作用,为开发新的抗流感病毒药物的深入研究奠定了基础。
    10  白芷香豆素储库型贴剂的研制及其体外评价
    刘晓昱 赖瑛
    2018, 49(2):313-317. DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2018.02.008
    [摘要](642) [HTML](0) [PDF 3.72 M](1025)
    摘要:
    目的 制备白芷香豆素储库型贴剂,考察其体外释药特性和离体皮肤渗透性,筛选有效的透皮吸收促进剂,提高白芷香豆素的透皮吸收速率。方法 选取羟丙甲纤维素为储库介质,以乙烯-醋酸乙烯共聚物膜为控释膜,制备白芷香豆素储库型透皮贴剂。用Franz扩散池进行乳猪离体皮肤渗透实验,用HPLC测定欧前胡素量,考察凝胶用量、药物用量、促渗剂对药物透皮速率的影响,并对优选的贴剂进行体外释放研究。结果 最佳处方为1%羟丙基甲基纤维素(HPMC)、1%白芷香豆素、3%肉豆蔻酸异丙酯、3%氮酮;由该处方制得的贴剂稳态透皮速率(Js)达到0.713 μg/(cm2∙;h),体外释放速率接近零级。结论 储库型白芷香豆素贴剂有较高的经皮渗透速率,体外释药完全,有望成为新型的透皮制剂。
    11  蜂蜜炼制前后黄酮类成分种类和含量变化分析
    王淳 甘嘉荷 宋志前 刘元艳 宁张弛 马新玲 舒一松 刘振丽
    2018, 49(2):318-324. DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2018.02.009
    [摘要](1334) [HTML](0) [PDF 5.96 M](1114)
    摘要:
    目的 研究中药辅料蜂蜜炼制前后黄酮类成分变化。方法 参考《中药药剂学》,对不同来源的6种蜂蜜进行炼制。供试品经固相萃取法富集黄酮类成分。采用高效液相色谱-三重四级杆串联质谱(HPLC-TQ-MS)法测定,Thermo Accucore RP-MS色谱柱(100 mm×2.1 mm,2.6 μm),以0.1%甲酸水溶液-甲醇为流动相进行梯度洗脱,体积流量0.3 mL/min,柱温30℃。质谱条件:采用电喷雾离子源(ESI),正离子检测模式,多反应监测模式(MRM)扫描分析。结果 蜂蜜中共检测到12种黄酮类成分,包括黄酮苷元、二氢黄酮苷元和异黄酮苷元。黄酮苷元有8种:槲皮素、桑黄素、木犀草素、山柰酚、芹菜素、汉黄芩素、高良姜素和白杨素;二氢黄酮苷元有3种:短叶松素、柚皮素和乔松素;异黄酮苷元染料木素。不同蜜源蜂蜜所含黄酮类成分种类和含量存在明显差异。6个蜂蜜样品炼制后,都发现了蜂蜜中没有报道过的芦丁和芸香柚皮苷,12种检测到的蜂蜜黄酮类成分在炼制后其量都有不同程度的变化,椴树蜜的槲皮素、桑黄素、木犀草素、山柰酚、芹菜素、汉黄芩素、乔松素和白杨素量均有增加,短叶松素、柚皮素和高良姜素量没增加反而还有下降的;洋槐蜜中除芹菜素量增加不明显外,其余均有所增加,尤其是槲皮素和桑黄素增加的较为明显;百花蜜和枣花蜜12种黄酮类成分量均显著增加。结论 炼制可造成蜂蜜中黄酮类成分的种类和含量发生改变。
    12  基于模糊层次分析法优选复方黄芪水浸膏提取工艺路线
    孙铭忆 李冰韶 王永洁 刘葭 吴清 李园
    2018, 49(2):325-329. DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2018.02.010
    [摘要](1062) [HTML](0) [PDF 4.50 M](1091)
    摘要:
    目的 采用模糊层次分析法优选复方黄芪水浸膏最佳提取工艺路线。方法 构造多层次指标评价模型,分为目标层、准则层、方案层;选取指标性成分定量测定、药效学指标作为准则层,方中指标性成分黄芪甲苷转移率、京尼平苷酸转移率、腹水量、腹水中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、胸腺指数为方案层,采用模糊层次分析法(FAHP)为指标赋权,得到各工艺路线加权综合得分。结果 方案层指标权重(ω)由高到低依次为腹水量(ω=0.255)、腹水中VEGF量(ω=0.215)、胸腺指数(ω=0.200)、黄芪甲苷转移率(ω=0.170)、京尼平苷酸转移率(ω=0.160)。得到的评分高低顺序为工艺a > 工艺c > 工艺b,由此确立复方黄芪水浸膏的最佳提取工艺为工艺a,即全方水提。结论 选取化学指标结合药效学指标,通过模糊层次分析法赋权,优选出复方黄芪水浸膏的提取工艺路线,为临床经验方研制成药的工艺优选提供研究思路与方法。
    13  人参皂苷Re冻干脂质体的制备及贮存稳定性研究
    高金芝 焦安妮 于敏 郝悦 焦连庆 田义新
    2018, 49(2):330-336. DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2018.02.011
    [摘要](1144) [HTML](0) [PDF 5.54 M](1206)
    摘要:
    目的 建立并优化人参皂苷Re(Re)脂质体制备工艺,提高Re脂质体贮藏稳定性。方法 薄膜分散-机械震荡法制备Re脂质体,透析法分离脂质体与未包封的游离药物,HPLC法测定包封率,冷冻干燥技术制备冻干脂质体制剂;以包封率为主要筛选指标,采用正交试验设计优选脂质体处方及冻干工艺。结果 薄膜分散-机械震荡法制备的Re脂质体包封率最高,最佳处方工艺为药物与磷脂质量比1:30,磷脂与胆固醇质量比16:1,冰水浴超声30 min,双蒸水为水化液;最佳冻干工艺为以蔗糖为冻干保护剂,二糖-水质量比为1:10,−;20℃为预冻温度,0.9%的生理盐水为再水化液。结论 Re脂质体制备工艺稳定可行,以蔗糖为冻干保护剂制得的Re脂质体各指标良好,显著延长贮存时间。
    14  星点设计-响应面法优选龙钻通痹方总生物碱大孔树脂纯化工艺
    蒋林 米阿娜 罗宇东 吴玉强 李芳婵 周雅琪
    2018, 49(2):337-345. DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2018.02.012
    [摘要](1054) [HTML](0) [PDF 6.38 M](1060)
    摘要:
    目的 优选龙钻通痹方(LTR)总生物碱的最佳纯化工艺。方法 采用5种型号的大孔树脂对LTR总生物碱进行吸附与解吸,以总生物碱的吸附量、吸附率和解吸率为指标,筛选出较佳大孔树脂;然后通过单因素考察和星点设计-效应面法优选LTR总生物碱的最佳纯化工艺参数。结果 HPD100树脂纯化龙钻总生物碱的最佳工艺条件为pH值1.7的生药质量浓度0.17 g/mL,以1 mL/min体积流量上样,9倍柱体积80%乙醇以1 mL/min洗脱。在该条件下,LTR总生物碱提取物中总生物碱的质量分数达到了22.23%,产品得率为173.27 mg/g。结论 HPD100型大孔树脂能较好地用于分离纯化LTR总生物碱,为进一步的药效学研究提供依据。
    15  香橘乳癖宁胶囊UPLC特征指纹图谱研究
    李响 白雪 何毅 吕燕男 缪兴龙 周桂荣 李萍
    2018, 49(2):346-352. DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2018.02.013
    [摘要](975) [HTML](0) [PDF 5.72 M](979)
    摘要:
    目的 建立香橘乳癖宁胶囊(XRC)的UPLC指纹图谱,利用系统指纹定量法鉴定各批次制剂质量,并采用电喷雾离子源-四极杆-飞行时间质谱(ESI-Q-TOF/MSE)对其化学成分进行定性分析。方法 采用Acquty UPLC BEH C18(100 mm×2.1 mm,1.7 μm)色谱柱,以0.1%甲酸水溶液-乙腈为流动相进行梯度洗脱,体积流量为0.25 mL/min,柱温为28℃,检测波长为270 nm。以系统指纹定量法的宏定性相似度(Sm)、宏定量相似度(Pm)为评价指标,对10批制剂的整体质量进行评价。并利用UPLC-ESI-Q-TOF/MSE正、负2种离子模式扫描对共有峰成分进行定性分析。结果 建立10批XRC的UPLC对照指纹图谱,标定33个共有峰,指认其中28个成分,并分别归属药材来源。系统指纹定量法评价结果表明,9批制剂质量在5级以上。结论 建立有效、可靠的XRC制剂质量评价方法,对其质量控制方法进行提升,并为物质基础的进一步研究奠定基础。
    16  基于超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱的妇可靖胶囊中11种成分定量研究
    刘俊 朱宝平 孙志 侯朋艺 周霖
    2018, 49(2):353-359. DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2018.02.014
    [摘要](1066) [HTML](0) [PDF 5.70 M](1085)
    摘要:
    目的 建立基于超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱(ultra performance liquid chromatography-quadrupole/orbitrap high resolution mass spectrometry,UPLC-Q-Orbitrap HRMS)的妇可靖胶囊中多成分(没食子酸、丹参素、阿魏酸、迷迭香酸、丹酚酸B、木犀草素、芹菜素、芦荟大黄素、大黄素、丁烯基苯酞、欧当归内酯A)的定量分析方法。方法 液相采用Acquity UPLC®; BEH C18色谱柱(50 mm×2.1 mm,1.7 μm),以乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相,梯度洗脱,体积流量为0.2 mL/min;质谱采用HESI离子源,利用其高分辨的特点采用一级Full mass扫描的方式进行定量;并将定量测定结果导入多元数据处理软件SIMCA14.0中进行质量评价分析。结果 在优化的色谱质谱条件下,没食子酸、丹参素、阿魏酸、迷迭香酸、丹酚酸B、木犀草素、芹菜素、芦荟大黄素、大黄素、丁烯基苯酞、欧当归内酯A分别在0.15~1.50、0.80~8.00、1.50~15.00、0.04~0.40、0.015~0.150、0.10~1.00、0.004~0.040、0.004~0.040、0.02~0.20、0.01~0.10、0.04~0.40 μg/mL线性关系良好(r ≥ 0.999 5);精密度、重复性及稳定性良好(RSD ≤ 4%);加样回收率在98%~102%,RSD均小于3%;所测成分在各批次样品中的质量分数依次为没食子酸26.36~31.03 μg/g、丹参素178.85~210.79 μg/g、阿魏酸320.91~343.16 μg/g、迷迭香酸2.84~3.09 μg/g、丹酚酸B 3.55~4.25 μg/g、木犀草素27.33~32.36 μg/g、芹菜素1.89~2.13 μg/g、芦荟大黄素0.47~0.60 μg/g、大黄素3.17~3.57 μg/g、丁烯基苯酞1.99~2.54 μg/g、欧当归内酯A 7.51~8.53 μg/g;分析结果表明大多数批次药物质量较为稳定,其中丹参素和阿魏酸对药物质量具有较大影响,可对其进行重点监控以保证药物批次质量。结论 建立的定量方法灵敏度高且准确性好,方法学考察结果符合测定要求,可用于妇可靖中多种活性成分的快速测定;并为其质量评价提供新的科学依据和参考。
    17  基于代谢组学的阿霉素肾病大鼠模型损伤程度评价
    张王宁 李爱平 刘少博 李科 秦雪梅
    2018, 49(2):360-367. DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2018.02.015
    [摘要](1038) [HTML](0) [PDF 8.87 M](1172)
    摘要:
    目的 以代谢组学技术对阿霉素肾病大鼠模型损伤程度进行量化分析。方法 采用1H-NMR代谢组学技术,结合数理统计方法对不同给药剂量、给药次数的阿霉素肾病大鼠血清样本进行分析,鉴定反映肾病进程的进展性标志物,并依据相关标志物的变化率对肾脏损伤程度进行评价。结果 最终得到9个潜在的病理标志物,分别为含氧异己酸、异亮氨酸、亮氨酸、缬氨酸、丙酮酸、3-羟基丁酸、柠檬酸、肌酐和肉毒碱;其中含氧异己酸和肉毒碱存在一定的剂量依赖性,即阿霉素造模剂量越大,这些内源性代谢物的变异越大,表明肾脏损伤越严重,可作为反映肾病进程的进展性标志物。结论 这一

    18  冬虫夏草繁育品对恶性黑色素瘤B16细胞增殖及迁移能力的影响
    季宇彬 白雪莲 霍小位 李文佳 李静 肖瑛 胡雪峰 曹丽
    2018, 49(2):368-373. DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2018.02.016
    [摘要](1339) [HTML](0) [PDF 5.55 M](1055)
    摘要:
    目的 探讨冬虫夏草Cordyceps sinensis繁育品对恶性黑色素瘤B16细胞增殖及迁移能力的影响。方法 通过MTT法、平板克隆实验检测冬虫夏草繁育品对B16细胞增殖能力的影响;采用划痕实验、transwell小室实验检测其对B16细胞迁移能力的影响;通过黏附实验检测其对B16细胞黏附能力的影响;采用流式细胞仪检测其对B16细胞周期分布的影响;采用Western blotting法检测其对B16细胞中MMP-2、MMP-9、Bax、Bcl-2、CyclinD1、CDK2、CDK4、P21及p-Akt蛋白表达的影响。结果 冬虫夏草繁育品能够将B16细胞阻滞在G1/S期,从而显著抑制B16细胞的增殖,并显著降低B16细胞的迁移能力。同时可导致B16细胞MMP-9、MMP-2、Bcl-2、CyclinD1、CDK2、CDK4、p-Akt蛋白表达减少和Bax、P21蛋白表达增加。结论 冬虫夏草繁育品能显著抑制B16细胞的增殖及迁移能力,其作用机制可能与调控细胞周期相关蛋白、MMPs家族蛋白及p-Akt蛋白的表达有关。
    19  内生真菌链格孢菌醋酸乙酯提取物对大肠杆菌抑菌机制的研究
    王永刚 杨光瑞 马雪青 王鸣刚 冷非凡 王帆 马建忠 陈吉祥
    2018, 49(2):374-381. DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2018.02.017
    [摘要](1143) [HTML](0) [PDF 6.72 M](1019)
    摘要:
    目的 研究分离自药用植物白毛蛇Humata tyermanni的内生真菌链格孢菌发酵产物醋酸乙酯提取物(B06e)对大肠杆菌的抑菌机制。方法 采用倍比稀释法测定了B06e对大肠杆菌的最低抑菌浓度(MIC);测定了B06e作用前后大肠杆菌培养液电导率、核酸和蛋白质的变化;结合流式细胞仪、扫描电子显微镜、凝胶阻滞实验、圆二色谱和荧光实时定量PCR的分析方法研究了B06e对大肠杆菌细胞膜结构、形态、DNA的影响。结果 B06e对大肠杆菌的MIC为25 μg/mL,3×MIC处理组的电导率是对照组的1.01倍;3×MIC处理组的β-半乳糖苷酶活性是对照组的11.6倍;流式细胞仪分析表明3×MIC处理组被碘化丙啶(PI)染色的阳性细胞比是对照组的286.5倍;扫描电子显微镜结果显示,B06e处理后菌体表面变得粗糙,细胞膜大量塌陷;以上结果说明B06e能增大细胞膜的通透性,破坏细胞膜的完整性。凝胶阻滞、圆二色谱的结果表明,B06e能够以嵌插的方式与DNA结合,但不能降解DNA;实时定量PCR结果表明,经B06e处理后recA和recN基因的表达量分别是对照组的2.9和3.7倍,说明B06e能破坏DNA的结构,迫使大肠杆菌启动了SOS修复。结论 B06e通过破坏大肠杆菌细胞膜完整性和DNA的结构,使得细菌代谢紊乱,最终导致细菌丧失了生长繁殖的能力。
    20  草苁蓉正丁醇萃取物的抗氧化活性及物质基础初步研究
    张海丰 臧皓 沈鹏 滕坤 阮洪生
    2018, 49(2):382-388. DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2018.02.018
    [摘要](565) [HTML](0) [PDF 5.64 M](1093)
    摘要:
    目的 考察草苁蓉Boschniakia rossica正丁醇萃取部位的体内外抗氧化活性,并初步确定其抗氧化作用的物质基础。方法 以清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)、2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)自由基能力、亚铁还原能力实验(FRAP法)为指标,检测草苁蓉不同极性萃取部位的体外抗氧化活性;以D-半乳糖诱导衰老大鼠为模型,考察草苁蓉正丁醇萃取部位对大鼠肝脏组织中丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性的影响;采用高效液相色谱-质谱联用技术对草苁蓉正丁醇萃取部位化学成分进行初步分析。结果 草苁蓉正丁醇萃取部位对DPPH、ABTS自由基具有良好的清除作用,且在亚铁还原实验的FRAP测定中表现良好;与模型组比较,草苁蓉正丁醇萃取部位各剂量组大鼠肝脏组织中MDA、SOD、CAT指标均有显著改善(P<0.01),表现为MDA水平降低,SOD、CAT活性升高,并回调到正常水平以上,其体内抗氧化作用呈现剂量依赖性。经液质联用分析从草苁蓉正丁醇萃取部位中共鉴定出19种化学成分,其中14个为苯丙素苷类(PPGs)。结论 草苁蓉正丁醇萃取部位具有很好的抗氧化活性,其主要有效成分为PPGs。
    21  清燥救肺汤及其拆方对肺炎支原体感染小鼠Bax、Bcl-2、Caspase-3蛋白的影响
    吴振起 杨璐 敏娜 岳志军 贾晓儒
    2018, 49(2):389-395. DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2018.02.019
    [摘要](1011) [HTML](0) [PDF 5.65 M](1139)
    摘要:
    目的 探讨清燥救肺汤(QJD)及其拆方对肺炎支原体(MP)感染小鼠肺组织Bax、Bcl-2、Caspase-3凋亡蛋白表达的影响。方法 将Balb/c小鼠随机分成对照组、模型组、QJD组、QJD拆方I组、QJD拆方Ⅱ组、阿奇霉素组。除对照组小鼠外,其余5组采用滴鼻法对实验Balb/c小鼠进行MP感染。透射电镜观察肺组织超微结构改变和细胞凋亡,运用免疫组织化学SP法和Western blotting法检测肺组织Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白的表达,并采用qRT-PCR法检测Caspase-3 mRNA的表达。结果 MP感染后,小鼠肺组织出现炎症改变,肺泡壁增厚、肺泡上皮细胞破坏、细胞浸润,并发现凋亡的特征改变。MP感染后的小鼠肺组织Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白的表达明显升高,但是Bcl-2/Bax的值明显下降;与模型组相比,QJD组、QJD拆方I组及阿奇霉素组的Bcl-2的表达升高,Bcl-2/Bax的值也明显升高,Bax、Caspase-3的表达下降;QJD拆方Ⅱ组与模型组比较各蛋白表达差异不明显。Caspase-3 mRNA检测结果显示,QJD组、QJD拆方I组及阿奇霉素组表达较模型组降低,QJD拆方Ⅱ组的改变不明显。结论 QJD能够抑制MP感染诱导的细胞凋亡,Bax、Bcl-2可能为其效应靶点之一,其中QJD拆方I起主要作用。
    22  大鼠肠道菌群对三七总皂苷体外降解的研究
    唐岚 傅璐璐 沈丽婷 孙伯璇 朱转凤 余小兰 吕慧侠 单伟光
    2018, 49(2):396-399. DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2018.02.020
    [摘要](1076) [HTML](0) [PDF 3.44 M](1019)
    摘要:
    目的 探究雌、雄大鼠肠道菌群对三七总皂苷中3种皂苷(三七皂苷R1、人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1)的体外降解作用。方法 将三七总皂苷分别与雌、雄大鼠肠道菌群孵育液在厌氧条件下共同培养24 h,测定不同时间点孵育液中3种皂苷的量。结果 雌、雄大鼠肠道菌群对人参皂苷Rb1均有降解作用,雄鼠的降解较雌鼠稍快。雌、雄鼠肠道菌群对三七皂苷R1和人参皂苷Rg1均无明显降解作用。结论 在离体条件下,三七总皂苷中人参皂苷Rb1会被肠道菌群降解,而三七皂苷R1和人参皂苷Rg1则较为稳定。
    23  三伏贴中芥子碱及细辛挥发油促进HaCaT细胞摄取延胡索乙素的作用及其机制研究
    覃梦瑶 阮文懿 翟苑好 曹思思 于恺悦 王茵萍 吴传斌 徐月红
    2018, 49(2):400-405. DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2018.02.021
    [摘要](1039) [HTML](0) [PDF 4.99 M](1110)
    摘要:
    目的 研究三伏贴中芥子碱硫氰酸盐(SPT)及细辛挥发油(AEO)促进角质形成细胞HaCaT摄取延胡索乙素(THP)的作用及其机制。方法 采用MTT法检测SPT、AEO和THP对HaCaT细胞活力的影响;根据方中THP自发荧光的特点,采用激光共聚焦扫描显微镜可视化观察SPT及AEO促进HaCaT细胞摄取THP的作用,并用HPLC法测定HaCaT细胞中THP的量;以1,6-二苯基-1,3,5-己三烯(DPH)为荧光探针,利用荧光偏振技术研究SPT、AEO及THP对HaCaT细胞的细胞膜流动性的影响。结果 SPT及AEO均能显著促进THP被HaCaT细胞摄取,且AEO的促进作用优于SPT。SPT、THP、AEO分别作用于DPH标记的HaCaT细胞后,AEO组HaCaT细胞的荧光偏振度和细胞膜微黏度均显著降低,细胞流动性增加,证明AEO是通过提高细胞膜流动性从而促进HaCaT细胞摄取THP,而THP、SPT均不能增加细胞膜流动性。结论 三伏贴中SPT及AEO均可促进HaCaT细胞摄取THP,AEO促进机制与其提高细胞膜流动性相关,而SPT的促进作用不是通过增加细胞膜流动性实现,其具体机制有待进一步探明。
    24  白藜芦醇对肾纤维化大鼠肾组织ORP150、GRP78、GRP94蛋白表达的影响
    张翠 王丹枫 张思琪 张腾娇 周艳岩
    2018, 49(2):406-413. DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2018.02.022
    [摘要](1121) [HTML](0) [PDF 5.85 M](1181)
    摘要:
    目的 探讨白藜芦醇对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾组织内质网应激分子伴侣氧调节蛋白150(ORP150)和葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、GRP94表达的影响。方法 采用UUO大鼠模型,利用随机数字表将大鼠分为假手术组、模型组、依那普利组和白藜芦醇高、中、低剂量组,每组各10只;手术后2周将大鼠处死并收集血清和肾组织,检测肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)水平;采用HE染色观察大鼠肾组织的损害程度并计算损伤参数;采用Masson染色检测大鼠肾间质胶原沉积面积值;采用TUNEL法检测大鼠肾组织中原位细胞凋亡情况;Western blotting法测定大鼠肾组织ORP150、GRP78、GRP94蛋白表达水平。结果 与模型组比较,各治疗组大鼠血清中Scr、BUN均显著降低,肾小管损伤程度明显减轻,肾间质胶原相对面积降低,肾组织中ORP150蛋白表达水平显著升高(P<0.05、0.01),原位细胞凋亡指数和GRP78、GRP94蛋白表达水平显著降低(P<0.05、0.01)。白藜芦醇高剂量组和依那普利组比较各检测指标均差异显著(P<0.05)。结论 白藜芦醇对UUO大鼠肾功能具有保护作用,能够减轻肾脏肾盂积水,降低肾间质胶原沉积面积,诱导内质网应激过程中的关键信号分子ORP150的表达,下调分子伴侣GRP78、GRP94的表达,减缓凋亡的发展,抑制因细胞凋亡沉积而带来的肾间质纤维化进程。
    25  白桦BpTRX基因和启动子克隆及H2S处理后的表达模式
    王紫晴 黄雅婷 聂婷婷 范桂枝
    2018, 49(2):414-422. DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2018.02.023
    [摘要](955) [HTML](0) [PDF 7.34 M](987)
    摘要:
    目的 研究白桦硫氧还蛋白(Betula platyphylla thioredoxin,BpTRX)基因全长和启动子序列及其编码结构和性质,揭示其在硫化氢(H2S)处理下BpTRX的表达模式。方法 通过PCR手段克隆BpTRX基因,应用染色体步移技术获得BpTRX启动子区序列,并对BpTRX基因、启动子及其编码蛋白进行生物信息学分析,构建BpTRX系统进化树。利用实时荧光定量PCR定量分析BpTRX基因在H2S外源胁迫处理下的表达模式。结果 BpTRX基因全长351 bp,编码了由117个氨基酸组成的蛋白。BpTRX基因与蓖麻、大豆、苜蓿和葡萄TRX-H型蛋白亲缘关系紧密。获得的BpTRX启动子区序列为873 bp,包含了转录必备的元件以及大量的胁迫响应和激素响应元件等。结论 获得BpTRX基因的全长和部分启动子序列,BpTRX基因对H2S处理的响应趋势为双峰形式,即先增加后降低、再增加再降低。
    26  基于核基因ITS及叶绿体psbA-trnH和trnS-trnG基因怀地黄栽培起源探讨
    夏至 黄勇 李贺敏 周艳 高致明
    2018, 49(2):423-430. DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2017.02.024
    [摘要](566) [HTML](0) [PDF 5.73 M](971)
    摘要:
    目的 从野生型驯化为栽培品种角度分析地黄Rehmannia glutinosa的遗传多样性,探讨河南焦作地区怀地黄的栽培起源。方法 对地黄野生自然居群,栽培品种及其近缘物种ITS、psbA-trnH和trnS-trnG序列进行扩增和测序,分析比较中药材地黄野生自然居群,栽培品种间各序列的单倍型类型和核苷酸多态性,构建Neighbor-Joining(NJ)分子系统发育树。结果 单倍型分析结果显示,地黄野生居群单倍型类型数量(ITS 6个,psbA-trnH 8个,trnS-trnG 9个)明显高于怀地黄栽培品种单倍型类型数量(ITS 3个,psbA-trnH 2个,trnS-trnG 3个)。地黄野生居群的单倍型多样性和核苷酸多样性均远高于怀地黄栽培品种间,在3个基因联合系统树上,地黄野生居群和栽培品种所有样品与茄叶地黄聚在一支,支持率为90%;23个栽培品种(29个样本)与来自温县的10号地黄野生居群聚为一支,支持率为78%。结论 地黄野生型驯化为栽培品种过程发生了明显的遗传瓶颈,导致现存怀地黄栽培品种遗传基础狭窄,遗传多样性降低。怀地黄栽培品种可能起源于河南温县区域的地黄野生群体。
    27  基于EST-SSR分子标记的栀子野生群体遗传多样性研究
    邓绍勇 朱培林 温强 李康琴 王贤荣
    2018, 49(2):431-438. DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2018.02.025
    [摘要](1010) [HTML](0) [PDF 7.13 M](1059)
    摘要:
    目的 研究栀子Gardenia jasminoides野生群体遗传多样性,为栀子野生植物资源的保护和合理利用提供科学依据。方法 利用14对EST-SSR引物对栀子19个野生群体573个个体进行研究,计算遗传参数,分析遗传多样性,进行聚类分析。结果 检测到75个等位基因,发现栀子野生群体有较高的遗传多样性水平(He=0.703),栀子野生群体的基因多样度(Nei)平均为0.603,Shannon多样性指数(I)平均为1.10;群体间表现为中等程度的遗传分化(Fst=0.141)和较高水平的基因流(Nm=1.523),AMOVA方差分析结果(0.124)显示群体变异主要以群体内变异为主,Mantle检验分析结果显示地理距离与遗传距离相关程度较低,TPM检验结果显示栀子73.7%的群体在历史近期经历过瓶颈效应。结论 栀子野生群体目前保持有较高的遗传多样性水平。
    28  短柄乌头遗传多样性的AFLP分析
    杜春华 普春霞 刘小莉 杨礼攀 张爱丽 钱子刚
    2018, 49(2):439-443. DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2018.02.026
    [摘要](862) [HTML](0) [PDF 15.80 M](877)
    摘要:
    目的 对濒危药用植物短柄乌头Aconitum brachypodum遗传多样性进行研究。方法 选用3对引物对短柄乌头4个自然居群105个样品进行了AFLP分析,利用POPGENE32、MEGA4、NTSYS等生物统计软件进行相关参数计算和聚类分析。结果 在短柄乌头物种居群间的遗传多样性水平上,多态位点百分率为80.57%,Nei's基因多样性指数(He)为0.322 9±0.179 8,Shannon's信息指数(I)为0.472 0±0.251 7。在其居群内,多态位点百分率为12%,He为0.115 4±0.044,I为0.168 0±0.065 3。Nei's基因分化系数(Gst)为0.864 2。聚类分析表明,禄劝居群和东川居群聚为一支,丽江居群和会泽居群聚为一支。结论 短柄乌头物种居群间的遗传多样性丰富,居群内的多样性偏低。居群间存在显著的遗传分化。AFLP对短柄乌头的遗传多样性分析对其保护提供依据。
    29  一测多评法比较毛橘红与光橘红5种黄酮类成分含量
    李宇邦 肖凤霞 宋小欣 陈周华 林励 李海波 罗立莹
    2018, 49(2):444-449. DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2018.02.027
    [摘要](1052) [HTML](0) [PDF 4.38 M](1041)
    摘要:
    目的 建立一测多评法同时测定毛橘红与光橘红中5种黄酮类成分的含量,并进行分析。方法 采用HPLC法,以柚皮苷为内参物,建立其与新橙皮苷、野漆树苷、柚皮素和芹菜素的相对校正因子,并利用相对校正因子计算毛橘红与光橘红样品中各成分含量。同时通过外标法计算各成分含量,并比较2种方法的差异。采用t检验比较分析毛橘红与光橘红中5种黄酮类成分含量。结果 柚皮苷与新橙皮苷、野漆树苷、柚皮素、芹菜素的校正因子分别为0.898、1.519、0.313、0.406,RSD<3.0%。一测多评法与外标法计算得到的含量测定结果无显著差异。毛橘红与光橘红中的柚皮苷、野漆树苷、柚皮素含量存在显著差异。结论 以柚皮苷为内参物建立的相对校正因子准确、可行,毛橘红与光橘红黄酮类成分存在很大差异,一测多评法可用于毛橘红与光橘红的质量控制。
    30  林下仿生态种植金线莲的质量标准研究
    沈廷明 黄春情 刘知远 黄慧梅 吴军军
    2018, 49(2):450-454. DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2018.02.028
    [摘要](692) [HTML](0) [PDF 21.28 M](1159)
    摘要:
    目的 对林下仿生态种植金线莲的质量标准进行研究。方法 建立林下仿生态种植金线莲的性状、显微特征、薄层鉴别及含量测定方法,并按《中国药典》2015年版有关规定对水分、灰分和酸不溶性灰分等项目进行了测定。结果 林下仿生态种植金线莲在性状、显微特征和薄层色谱方面均具有专属性特征,经测定5个基地的金线莲水分平均为8.69%,总灰分平均为11.93%,酸不溶性成分平均为3.27%;含量测定结果槲皮素平均质量分数为0.021 0%,异鼠李素平均质量分数为0.024 7%,山柰素平均质量分数为0.027 3%。结论 上述方法简便、专属性好,重现性好,可为林下仿生态种植金线莲质量标准的制定提供依据。
    31  中药挥发油传统功效与现代研究进展
    王雅琪 杨园珍 伍振峰 熊耀坤 杨明
    2018, 49(2):455-461. DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2018.02.029
    [摘要](1855) [HTML](0) [PDF 6.27 M](1371)
    摘要:
    中药挥发油作为芳香中药的特色表现形式,具有较强的生物活性,可作用于局部或全身以防治疾病。中药挥发油的应用已有数千年的历史,大量医药典籍和传统中药复方中多有收载,是中药发挥药效的关键物质基础。目前,中药挥发油的研究仍处于探索阶段,针对中药挥发油传统治疗理念及应用方法研究相对薄弱,缺乏相关典籍的挖掘和梳理,系统性不强。以中医药古籍为工具,从传统功效与现代药理活性两方面对中药挥发油在中药材中的分布、传统应用方法、性质及特点进行归纳总结和分析,探讨中药挥发油应用开发前景,以期为中药挥发油的历史传承及现代研究开发提供参考。
    32  四君子汤复方多糖肠道免疫调节作用及其机制研究进展
    高蓓蓓 彭颖 李晓波
    2018, 49(2):462-467. DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2018.02.030
    [摘要](1278) [HTML](0) [PDF 5.51 M](1048)
    摘要:
    四君子汤复方多糖是四君子汤中含量最多的成分,具有肠道免疫调节作用。研究证实其在小肠派式结、肠系膜淋巴结、小肠上皮细胞及肠上皮内淋巴细胞等部位均能产生免疫应答,但作用机制不明。目前主要认为四君子汤复方多糖可以通过调节肠道菌群和多胺信号通路等发挥肠道免疫作用。总结近年四君子汤复方多糖对肠道免疫调节作用及其机制的相关研究进展,为深入探究四君子汤复方多糖的免疫作用机制及其临床的合理应用提供参考。
    33  喜炎平注射液联合抗生素治疗成人社区获得性肺炎疗效和安全性的Meta分析
    王一民 吕朗 范海伟 徐海凤
    2018, 49(2):468-476. DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2018.02.031
    [摘要](1136) [HTML](0) [PDF 7.13 M](1029)
    摘要:
    计算机检索PubMed、Medline、Web of Science、CBM、CNKI、VIP、Wanfang Data数据库,搜集喜炎平注射液联合抗生素药物对比单用抗生素治疗成人社区获得性肺炎(CAP)疗效和安全性的随机对照试验(RCT),检索时限均为建库至2017年8月。由2位研究者独立筛选文献、提取资料并评价纳入研究的偏倚风险后,采用RevMan 5.3软件进行Meta分析。共纳入18个RCT,共入1 924例患者。Meta分析结果显示,与抗生素单用相比,喜炎平注射液联合抗生素治疗能提高成人CAP的临床疗效[RR=1.20,95%,CI(1.15,1.25),P<0.000 01],同时能改善患者咳嗽等症状和缩短患者退热时间、住院治疗时间。在安全性方面,单用抗生素组,发生不良反应26例,不良反应主要为胃肠道反应、头晕、皮疹、静脉炎等,程度较轻,一般不经治疗可自愈。而喜炎平注射液联合抗生素治疗CAP发生了30例不良反应,反应类型和程度与单用抗生素基本一致。喜炎平注射液联合抗生素治疗CAP能提高临床疗效,改善CAP患者临床症状,其安全性尚可。受纳入研究数量和质量的限制,上述结果需要更多研究予以证实。
    34  麦冬化学成分及药理作用研究进展
    彭婉 马骁 王建 曾南 董泰玮 李雷 李敏
    2018, 49(2):477-488. DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2018.02.032
    [摘要](2424) [HTML](0) [PDF 10.20 M](1746)
    摘要:
    麦冬在中国分布广泛,资源丰富,是一种利用价值很高的药用植物,具有养阴生津、润肺清心的功效。现代研究发现麦冬的化学成分主要包括甾体皂苷类、高异黄酮类、多糖类等;具有降血糖、保护心血管系统、增强免疫力、抗皮肤衰老、抗炎、抗肿瘤等药理作用。对麦冬的化学成分、药理作用进行综述,为麦冬的开发利用提供参考。
    35  中药“发汗”炮制法的现代研究进展
    陈茹 陈成 杨兴鑫 俞捷 赵荣华 顾雯
    2018, 49(2):489-493. DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2018.02.033
    [摘要](1797) [HTML](0) [PDF 4.64 M](1335)
    摘要:
    发汗炮制法是中药材产地初加工过程中的一种重要方法,其目的是加快药材的干燥,有利于药材的保存。现代研究表明,"发汗"对药材的化学成分、药理活性和药效作用等方面也会产生影响。在"发汗"过程中,药材内部的温度逐渐升高,一系列酶促反应随之发生,药材的化学成分发生转化;随着"发汗"炮制的继续,药材内部的温度不断升高,植物的抗热胁迫反应随之启动,一些次级代谢产物生成,从而提升药材有效成分的含量。对"发汗"炮制过程中生物酶的作用以及植物抗热胁迫反应的研究进展进行综述,以揭示中药"发汗"炮制过程的内在机制,最终为"发汗"炮制法的应用及推广提供理论依据。
    36  日本汉方制剂的发展现状及其经验启示
    于翠婷 田侃 住田尚之 杨毅 曾慧婷
    2018, 49(2):494-498. DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2018.02.034
    [摘要](1350) [HTML](0) [PDF 673.10 K](3551)
    摘要:
    以日本质量管理体系(QMS)为切入点,从汉方制剂的研制、生产、销售3个环节对日本汉方制剂的发展进行综述,为我国中药的研发及质量标准化管理体系建设提供参考。研究结果表明,我国有必要参考日本良好的管理理念及完整的质量管理体系,借鉴日本汉方制剂发展的成功经验,提高中药材的种植水平、中成药的生产技术水平、中成药制备全流程的质量管理水平,从而促进中药产业的发展。
    37  中药品种保护制度的法律性质
    李慧 宋晓亭
    2018, 49(2):499-504. DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2018.02.035
    [摘要](1153) [HTML](0) [PDF 5.02 M](990)
    摘要:
    中药品种保护制度旨在保护、监管中药品种,但同时又发挥了中药知识产权的保护功能。从创设初衷及法律渊源分析,其实质为中药品种的行政监管及保护;从宗旨职能及权利特征分析,其蕴含着知识产权属性。基于其通过行政监管产生知识产权保护功效的特性,可将其认定为一种中药知识产权的行政保护制度,这与国际上以行政措施保护药品知识产权的趋势一致,将为《中药品种保护条例》的修订丰富思路,也将为中医药传统知识专门保护制度的构建提供参考。

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