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主办：天津药物研究院 中国药学会
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2017年第48卷第24期文章目次
2017, 48(24):5063-5069.
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2017.24.001
摘要:
DNA甲基化是目前研究最为广泛的一种表观遗传学现象，甲基化后的DNA可在不改变碱基序列的情况下对植物的表型进行调控。在高等植物中有CG、CHG和CHH（H代表A、C或T）3种甲基化位点，多发生于对称序列CG和重复序列中，且不同物种中的甲基化程度和模式不同。药用植物功能基因启动子区域的DNA发生甲基化后，可抑制基因的表达，进而影响其次生代谢产物的积累，导致品质差异的形成。在众多的DNA甲基化检测方法中，重亚硫酸盐测序法可在单核苷酸水平上鉴别DNA甲基化的位点和程度，是DNA甲基化分析的金标准。对其进行引物优化、技术改良后，可有效地揭示药用植物的DNA甲基化情况，这为阐明经典遗传学不能完全解释的药用植物品质差异等问题提供了技术支持，并开辟了新的研究方向。
DNA甲基化是目前研究最为广泛的一种表观遗传学现象，甲基化后的DNA可在不改变碱基序列的情况下对植物的表型进行调控。在高等植物中有CG、CHG和CHH（H代表A、C或T）3种甲基化位点，多发生于对称序列CG和重复序列中，且不同物种中的甲基化程度和模式不同。药用植物功能基因启动子区域的DNA发生甲基化后，可抑制基因的表达，进而影响其次生代谢产物的积累，导致品质差异的形成。在众多的DNA甲基化检测方法中，重亚硫酸盐测序法可在单核苷酸水平上鉴别DNA甲基化的位点和程度，是DNA甲基化分析的金标准。对其进行引物优化、技术改良后，可有效地揭示药用植物的DNA甲基化情况，这为阐明经典遗传学不能完全解释的药用植物品质差异等问题提供了技术支持，并开辟了新的研究方向。
2017, 48(24):5070-5075.
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2017.24.002
摘要:
目的 获取五加科叶绿体基因组的结构特征以及进化关系。方法 以已测序完成的10个属的20种五加科植物叶绿体基因组为研究对象，系统比较基因组间的差异，分析4个IR边界扩张与收缩情况，并以近缘物种当归为外类群，使用MEGA 4.0构建系统进化树，分析物种间的亲缘关系。结果 20种五加科植物的叶绿体基因组大小差异较小，最大差仅1 909 bp。各物种均出现基因替换现象，由cemA基因替换ycf10基因，且数量存在一定差异，主要由tRNA引起。通过比较发现，五加科物种的4个IR边界比较保守，仅野三七、三七和穗序鹅掌柴的边界基因进入IR区的长度与其他物种的差异较大。以当归为外类构建的系统进化树，各节点的支持率较高，清晰地反映了各物种间的亲缘关系。结论 叶绿体基因组涵盖的信息量大，可以用于分析关系较近与进化较快物种的系统发生问题。
目的 获取五加科叶绿体基因组的结构特征以及进化关系。方法 以已测序完成的10个属的20种五加科植物叶绿体基因组为研究对象，系统比较基因组间的差异，分析4个IR边界扩张与收缩情况，并以近缘物种当归为外类群，使用MEGA 4.0构建系统进化树，分析物种间的亲缘关系。结果 20种五加科植物的叶绿体基因组大小差异较小，最大差仅1 909 bp。各物种均出现基因替换现象，由cemA基因替换ycf10基因，且数量存在一定差异，主要由tRNA引起。通过比较发现，五加科物种的4个IR边界比较保守，仅野三七、三七和穗序鹅掌柴的边界基因进入IR区的长度与其他物种的差异较大。以当归为外类构建的系统进化树，各节点的支持率较高，清晰地反映了各物种间的亲缘关系。结论 叶绿体基因组涵盖的信息量大，可以用于分析关系较近与进化较快物种的系统发生问题。
2017, 48(24):5076-5079.
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2017.24.003
摘要:
目的 获得刺五加法尼基焦磷酸合酶（FPS）、鲨烯合酶（SS）、鲨烯环氧酶（SE）基因启动子的CpG岛分布情况和功能活性。方法 针对已克隆的FPS、SS、SE基因启动子序列，使用EMBOSS和Li Lab进行CpG岛预测，同时利用GUS基因作为报告基因，pCAMBIA1301质粒作为表达载体，利用根癌农杆菌转化拟南芥进行功能验证。结果 发现刺五加FPS、SS启动子含有2个CpG岛，长度分别是520、218 bp和108、103 bp，SE启动子含有3个CpG岛，长度为290、119、149 bp。FPS、SS、SE基因启动子均具有启动活性，但强度不一，SS启动子活性最强。结论 研究首次获得刺五加FPS、SS、SE基因启动子区域的CpG岛分布情况，以及其功能活性，为后续进一步FPS、SS、SE甲基化分析及其在刺五加中的表达调控研究奠定了基础。
目的 获得刺五加法尼基焦磷酸合酶（FPS）、鲨烯合酶（SS）、鲨烯环氧酶（SE）基因启动子的CpG岛分布情况和功能活性。方法 针对已克隆的FPS、SS、SE基因启动子序列，使用EMBOSS和Li Lab进行CpG岛预测，同时利用GUS基因作为报告基因，pCAMBIA1301质粒作为表达载体，利用根癌农杆菌转化拟南芥进行功能验证。结果 发现刺五加FPS、SS启动子含有2个CpG岛，长度分别是520、218 bp和108、103 bp，SE启动子含有3个CpG岛，长度为290、119、149 bp。FPS、SS、SE基因启动子均具有启动活性，但强度不一，SS启动子活性最强。结论 研究首次获得刺五加FPS、SS、SE基因启动子区域的CpG岛分布情况，以及其功能活性，为后续进一步FPS、SS、SE甲基化分析及其在刺五加中的表达调控研究奠定了基础。
2017, 48(24):5080-5084.
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2017.24.004
摘要:
目的 克隆多穗柯的查耳酮异构酶（chalcone isomerase，CHI）基因，并了解其表达情况。方法 根据转录组测序结果，利用PCR扩增技术获取多穗柯CHI基因的cDNA全长，并对其进行生物信息学分析，采用qRT-PCR法检测CHI基因在多穗柯不同器官的表达量。结果 多穗柯CHI基因的cDNA全长为772 bp，开放阅读框长为696 bp，编码231个氨基酸的蛋白。该蛋白不存在跨膜区域，定位于细胞质中。多穗柯CHI基因在不同部位均有表达，叶片的表达量最高，是根部最低量的9.75倍。结论 首次克隆获得多穗柯的CHI基因，明确该基因属于CHI Ⅱ型。且多穗柯CHI基因在各器官中的表达量具有显著差异。
目的 克隆多穗柯的查耳酮异构酶（chalcone isomerase，CHI）基因，并了解其表达情况。方法 根据转录组测序结果，利用PCR扩增技术获取多穗柯CHI基因的cDNA全长，并对其进行生物信息学分析，采用qRT-PCR法检测CHI基因在多穗柯不同器官的表达量。结果 多穗柯CHI基因的cDNA全长为772 bp，开放阅读框长为696 bp，编码231个氨基酸的蛋白。该蛋白不存在跨膜区域，定位于细胞质中。多穗柯CHI基因在不同部位均有表达，叶片的表达量最高，是根部最低量的9.75倍。结论 首次克隆获得多穗柯的CHI基因，明确该基因属于CHI Ⅱ型。且多穗柯CHI基因在各器官中的表达量具有显著差异。
2017, 48(24):5085-5089.
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2017.24.005
摘要:
目的 克隆多穗柯Lithocarpus polystachyus黄酮3-羟化酶（flavanone 3-hydroxylase，F3H）基因，了解其基因特征并初步探明其在各器官中的表达情况。方法 分别提取多穗柯叶片的总RNA及基因组DNA，根据转录组测序结果，设计特异性引物，PCR扩增得到多穗柯F3H基因的cDNA及DNA序列，测序后进行生物信息学分析，通过qRT-PCR法检测多穗柯F3H基因在不同器官中的表达情况。结果 多穗柯F3H基因cDNA全长1 340 bp，包含长1 092 bp的开放阅读框，编码363个氨基酸的蛋白质，定位于细胞质中。qRT-PCR结果表明F3H基因在多穗柯各器官中均有表达，但表达量具有显著性差异（P < 0.05）。结论 首次对多穗柯F3H基因进行了克隆和生物信息学分析，证实F3H基因在多穗柯不同器官中表达量差异显著，为多穗柯中黄酮类的次生代谢研究奠定了基础。
目的 克隆多穗柯Lithocarpus polystachyus黄酮3-羟化酶（flavanone 3-hydroxylase，F3H）基因，了解其基因特征并初步探明其在各器官中的表达情况。方法 分别提取多穗柯叶片的总RNA及基因组DNA，根据转录组测序结果，设计特异性引物，PCR扩增得到多穗柯F3H基因的cDNA及DNA序列，测序后进行生物信息学分析，通过qRT-PCR法检测多穗柯F3H基因在不同器官中的表达情况。结果 多穗柯F3H基因cDNA全长1 340 bp，包含长1 092 bp的开放阅读框，编码363个氨基酸的蛋白质，定位于细胞质中。qRT-PCR结果表明F3H基因在多穗柯各器官中均有表达，但表达量具有显著性差异（P < 0.05）。结论 首次对多穗柯F3H基因进行了克隆和生物信息学分析，证实F3H基因在多穗柯不同器官中表达量差异显著，为多穗柯中黄酮类的次生代谢研究奠定了基础。
2017, 48(24):5090-5098.
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2017.24.006
摘要:
目的 研究冷蒿Artemisia frigida全草的化学成分，并初步筛选其药理活性。方法 应用多种色谱技术对冷蒿全草的粗提取物进行系统的分离纯化，采用光谱学和波谱学方法鉴定化合物结构，并对部分单体化合物进行过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）激动活性及蛋白酪氨酸磷酸酯酶1B（PTP1B）抑制活性的筛选。结果 从冷蒿全草提取物中分离得到了26个化合物，分别鉴定为柳穿鱼黄素（1）、棕矢车菊素（2）、金圣草黄素（3）、麦黄酮（4）、3-羰基-吉玛-1（10），11（13）-二烯-6α，12-内酯（5）、蓍素（6）、1，10β-环氧蓍素（7）、滨蒿内酯（8）、4-羟基苯乙酮（9）、猫眼草黄素（10）、棕鳞矢车菊黄酮素（11）、11α，13-二氢魃蒿内酯（12）、chrysanthemin A（13）、异泽兰黄素（14）、泽兰黄素（15）、南艾蒿烯内酯（16）、6-甲氧基麦黄酮（17）、hanphyllin（18）、蓟黄素（19）、利得亭（20）、desacetylmatricarin（21）、subchrysine（22）、木犀草素（23）、咖啡酸（24）、藿香苷（25）、田蓟苷（26）。结论 化合物5、7、11、18、25、26 为首次从蒿属植物中分离得到，化合物10、12、13、16、17、22 为首次从该植物中分离得到；化合物2 和15 有较弱的PPARγ激动活性，化合物1 和3 对PTP1B有中等强度的抑制作用。
目的 研究冷蒿Artemisia frigida全草的化学成分，并初步筛选其药理活性。方法 应用多种色谱技术对冷蒿全草的粗提取物进行系统的分离纯化，采用光谱学和波谱学方法鉴定化合物结构，并对部分单体化合物进行过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）激动活性及蛋白酪氨酸磷酸酯酶1B（PTP1B）抑制活性的筛选。结果 从冷蒿全草提取物中分离得到了26个化合物，分别鉴定为柳穿鱼黄素（1）、棕矢车菊素（2）、金圣草黄素（3）、麦黄酮（4）、3-羰基-吉玛-1（10），11（13）-二烯-6α，12-内酯（5）、蓍素（6）、1，10β-环氧蓍素（7）、滨蒿内酯（8）、4-羟基苯乙酮（9）、猫眼草黄素（10）、棕鳞矢车菊黄酮素（11）、11α，13-二氢魃蒿内酯（12）、chrysanthemin A（13）、异泽兰黄素（14）、泽兰黄素（15）、南艾蒿烯内酯（16）、6-甲氧基麦黄酮（17）、hanphyllin（18）、蓟黄素（19）、利得亭（20）、desacetylmatricarin（21）、subchrysine（22）、木犀草素（23）、咖啡酸（24）、藿香苷（25）、田蓟苷（26）。结论 化合物5、7、11、18、25、26 为首次从蒿属植物中分离得到，化合物10、12、13、16、17、22 为首次从该植物中分离得到；化合物2 和15 有较弱的PPARγ激动活性，化合物1 和3 对PTP1B有中等强度的抑制作用。
2017, 48(24):5099-5104.
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2017.24.007
摘要:
目的 研究菝葜属植物小果菝葜Smilax davidiana根茎的化学成分。方法 采用反相硅胶（RP18）、半制备HPLC色谱法等多种方法分离纯化，并对化合物进行结构鉴定。结果 从小果菝葜根茎70%乙醇提取部位分离得到20个化合物，分别鉴定为香橙素7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（1）、黄檀素（2）、3，5，7，4'-四羟基黄酮-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（3）、山柰酚-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（4）、槲皮素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（5）、槲皮素-3-O-β-L-鼠李糖（6）、4，6-二羟基-2-O-（β-D-吡喃葡萄糖苷）苯乙酮（7）、3，5-二羟基-4-O-（β-D-吡喃葡萄糖苷）苯乙酮（8）、2，4，6-三羟基苯乙酮-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（9）、2，4，6-三羟基苯乙酮-2，4-二-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（10）、表儿茶素（11）、latifolin（12）、3'-O-（E-4-酰基）-奎尼酸（13）、5-O-咖啡酰奎宁酸丁酯（14）、5，5'-二甲氧基落叶松树脂醇4'-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（15）、1-O-二十六烷酰基甘油酯（16）、cinchonain Ib（17）、腺嘌呤核苷（18）、白藜芦醇（19）和3，4，5-三甲氧苯基-1-β-D-吡喃葡萄糖苷（20）。结论 化合物4～9、12 ～16 均为首次从菝葜属植物中分离得到，1 ～3、17、18 为首次从小果菝葜中分离得到。
目的 研究菝葜属植物小果菝葜Smilax davidiana根茎的化学成分。方法 采用反相硅胶（RP18）、半制备HPLC色谱法等多种方法分离纯化，并对化合物进行结构鉴定。结果 从小果菝葜根茎70%乙醇提取部位分离得到20个化合物，分别鉴定为香橙素7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（1）、黄檀素（2）、3，5，7，4'-四羟基黄酮-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（3）、山柰酚-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（4）、槲皮素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（5）、槲皮素-3-O-β-L-鼠李糖（6）、4，6-二羟基-2-O-（β-D-吡喃葡萄糖苷）苯乙酮（7）、3，5-二羟基-4-O-（β-D-吡喃葡萄糖苷）苯乙酮（8）、2，4，6-三羟基苯乙酮-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（9）、2，4，6-三羟基苯乙酮-2，4-二-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（10）、表儿茶素（11）、latifolin（12）、3'-O-（E-4-酰基）-奎尼酸（13）、5-O-咖啡酰奎宁酸丁酯（14）、5，5'-二甲氧基落叶松树脂醇4'-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（15）、1-O-二十六烷酰基甘油酯（16）、cinchonain Ib（17）、腺嘌呤核苷（18）、白藜芦醇（19）和3，4，5-三甲氧苯基-1-β-D-吡喃葡萄糖苷（20）。结论 化合物4～9、12 ～16 均为首次从菝葜属植物中分离得到，1 ～3、17、18 为首次从小果菝葜中分离得到。
2017, 48(24):5105-5111.
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2017.24.008
摘要:
目的 研究繁茂膜海绵Hymeniacidon perleve来源青霉属真菌Penicillium sp.HPQJ10的次级代谢产物。方法 利用正相硅胶柱色谱、葡聚糖凝胶Sephadex LH-20以及半制备高效液相等色谱分离手段进行分离纯化，根据波谱学数据鉴定化合物结构。结果 从发酵产物中共分离到14个单体化合物，分别鉴定为N-[（Z）-2-（4-hydroxyphenyl） ethenyl]formamide（1）、2，4-dimethoxyphenyl acetate（2）、6，8，5'，6'-四羟基-3'-甲基黄酮（3）、4-羟基苯乙酸（4）、cyclo-（L-Pro-L-Val）（5）、cyclo-（L-Pro-L-Leu）（6）、邻苯二甲酸二异丁酯（7）、邻苯二甲酸二丁酯（8）、7-hydroxy-2-（2-hydroxypropyl）-5-methyl chromone（9）、2-（2，4-dimethoxylphenyl）-3-（4-hydroxybenzyl）-1，2，4-triazole（10）、（22E，24R）-麦角甾-5，7，22-三烯-3β-醇（11）、cyclo-（Leu-Pro-Ile-Pro）（12）、2，4-二甲氧基苯甲酸（13）、3-甲氧基苯酚（14）。结论 除化合物1、3、10、11 以外，其他化合物均为首次从该菌种中分离得到。
目的 研究繁茂膜海绵Hymeniacidon perleve来源青霉属真菌Penicillium sp.HPQJ10的次级代谢产物。方法 利用正相硅胶柱色谱、葡聚糖凝胶Sephadex LH-20以及半制备高效液相等色谱分离手段进行分离纯化，根据波谱学数据鉴定化合物结构。结果 从发酵产物中共分离到14个单体化合物，分别鉴定为N-[（Z）-2-（4-hydroxyphenyl） ethenyl]formamide（1）、2，4-dimethoxyphenyl acetate（2）、6，8，5'，6'-四羟基-3'-甲基黄酮（3）、4-羟基苯乙酸（4）、cyclo-（L-Pro-L-Val）（5）、cyclo-（L-Pro-L-Leu）（6）、邻苯二甲酸二异丁酯（7）、邻苯二甲酸二丁酯（8）、7-hydroxy-2-（2-hydroxypropyl）-5-methyl chromone（9）、2-（2，4-dimethoxylphenyl）-3-（4-hydroxybenzyl）-1，2，4-triazole（10）、（22E，24R）-麦角甾-5，7，22-三烯-3β-醇（11）、cyclo-（Leu-Pro-Ile-Pro）（12）、2，4-二甲氧基苯甲酸（13）、3-甲氧基苯酚（14）。结论 除化合物1、3、10、11 以外，其他化合物均为首次从该菌种中分离得到。
2017, 48(24):5112-5116.
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2017.24.009
摘要:
目的 研究藏药印度獐牙菜Swertia chirayita的化学成分。方法 采用硅胶、MCI、Sephadex LH-20等色谱方法进行分离纯化，依据理化性质、波谱数据分析进行结构鉴定。结果 从印度獐牙菜85%乙醇提取物的醋酸乙酯萃取部位分离并鉴定了12个化合物，包括2个（口山）酮、4个三萜、3个裂环烯醚萜和3个其他类化合物，分别鉴定为1，5，8-三羟基-3-甲氧基（口山）酮（1）、1，3，5，8-四羟基（口山）酮（2）、齐墩果酸（3）、4-epi-hederagenin（4）、2-epi-corosolic acid（5）、熊果酸（6）、当药苦酯苷（7）、swerimilegenin I（8）、红白金花内酯（9）、儿茶酚（10）、丁香酸（11）、4-羟基-3-甲氧基苯甲酸（12）。结论 化合物4、5、11 首次从獐牙菜属植物中分离得到，化合物8、9 首次从印度獐牙菜中分离得到。
目的 研究藏药印度獐牙菜Swertia chirayita的化学成分。方法 采用硅胶、MCI、Sephadex LH-20等色谱方法进行分离纯化，依据理化性质、波谱数据分析进行结构鉴定。结果 从印度獐牙菜85%乙醇提取物的醋酸乙酯萃取部位分离并鉴定了12个化合物，包括2个（口山）酮、4个三萜、3个裂环烯醚萜和3个其他类化合物，分别鉴定为1，5，8-三羟基-3-甲氧基（口山）酮（1）、1，3，5，8-四羟基（口山）酮（2）、齐墩果酸（3）、4-epi-hederagenin（4）、2-epi-corosolic acid（5）、熊果酸（6）、当药苦酯苷（7）、swerimilegenin I（8）、红白金花内酯（9）、儿茶酚（10）、丁香酸（11）、4-羟基-3-甲氧基苯甲酸（12）。结论 化合物4、5、11 首次从獐牙菜属植物中分离得到，化合物8、9 首次从印度獐牙菜中分离得到。
2017, 48(24):5117-5124.
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2017.24.010
摘要:
目的 对牡荆子中2个木脂素单体化合物6-羟基-4-（4-羟基-3-甲氧基苯基）-3-羟甲基-7-甲氧基-3,4-二氢-2-萘醛（VB-1）和vitedoin A（VB-2）在大鼠体内的代谢情况进行研究。方法 采用超快速液相色谱-离子阱飞行时间质谱（UFLC-IT-TOF-MS）技术,鉴定大鼠分别ig给予2个木脂素单体化合物后,粪便、尿液、胆汁、血浆中的代谢产物。结果 发现并确证了2个木脂素原型及其11个代谢产物在大鼠体内的存在。通过代谢产物鉴定分析了其主要代谢途径,发现在大鼠体内这2个木脂素成分发生了葡萄糖醛酸化、硫酸化、羟化、羟化硫酸化、还原葡萄糖醛酸化和还原硫酸化等代谢反应。结论 通过对2个木脂素单体化合物代谢产物的分析,基本阐明了其在体内的代谢过程,为进一步的药理活性及其机制研究提供了依据。
目的 对牡荆子中2个木脂素单体化合物6-羟基-4-（4-羟基-3-甲氧基苯基）-3-羟甲基-7-甲氧基-3,4-二氢-2-萘醛（VB-1）和vitedoin A（VB-2）在大鼠体内的代谢情况进行研究。方法 采用超快速液相色谱-离子阱飞行时间质谱（UFLC-IT-TOF-MS）技术,鉴定大鼠分别ig给予2个木脂素单体化合物后,粪便、尿液、胆汁、血浆中的代谢产物。结果 发现并确证了2个木脂素原型及其11个代谢产物在大鼠体内的存在。通过代谢产物鉴定分析了其主要代谢途径,发现在大鼠体内这2个木脂素成分发生了葡萄糖醛酸化、硫酸化、羟化、羟化硫酸化、还原葡萄糖醛酸化和还原硫酸化等代谢反应。结论 通过对2个木脂素单体化合物代谢产物的分析,基本阐明了其在体内的代谢过程,为进一步的药理活性及其机制研究提供了依据。
2017, 48(24):5125-5129.
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2017.24.011
摘要:
目的 优选高山红景天多糖（RSP）的最佳硫酸化修饰条件，提高RSP的抗氧化活性。方法 利用氯磺酸-吡啶法对RSP进行了硫酸化修饰，并通过单因素实验确定了硫酸化反应的最佳工艺条件；应用红外光谱（IR）和扫描电子显微镜（SEM）对RSP和硫酸化高山红景天多糖（S-RSP）的理化性质进行了分析；通过测定RSP和S-RSP对1，1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）自由基的清除能力，考察了S-RSP的取代度（DS）与多糖抗氧化活性之间的关系。结果 当氯磺酸与吡啶的体积比为1∶4、反应时间为2 h、反应温度为60℃时，制得的S-RSP的含硫量最大值为18.83%，取代度最大值为2.38。RSP经硫酸化修饰后，增强了其抗氧化活性，S-RSP的DS与DPPH自由基清除能力存在一定的正比例关系。结论 氯磺酸与吡啶的体积比影响S-RSP的DS大小；RSP经硫酸化修饰后通过改变多糖的极性而增加了其抗氧化能力。
目的 优选高山红景天多糖（RSP）的最佳硫酸化修饰条件，提高RSP的抗氧化活性。方法 利用氯磺酸-吡啶法对RSP进行了硫酸化修饰，并通过单因素实验确定了硫酸化反应的最佳工艺条件；应用红外光谱（IR）和扫描电子显微镜（SEM）对RSP和硫酸化高山红景天多糖（S-RSP）的理化性质进行了分析；通过测定RSP和S-RSP对1，1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）自由基的清除能力，考察了S-RSP的取代度（DS）与多糖抗氧化活性之间的关系。结果 当氯磺酸与吡啶的体积比为1∶4、反应时间为2 h、反应温度为60℃时，制得的S-RSP的含硫量最大值为18.83%，取代度最大值为2.38。RSP经硫酸化修饰后，增强了其抗氧化活性，S-RSP的DS与DPPH自由基清除能力存在一定的正比例关系。结论 氯磺酸与吡啶的体积比影响S-RSP的DS大小；RSP经硫酸化修饰后通过改变多糖的极性而增加了其抗氧化能力。
2017, 48(24):5130-5135.
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2017.24.012
摘要:
目的 对半夏曲中4种优势微生物建立快速、有效的荧光定量PCR检测方法。方法 以枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis、宛氏拟青霉Paecilomyces variotii、丝衣霉菌Byssochlamys spectabilis、黑曲霉Aspergillus niger的重组质粒为标准质粒，设计特异性引物并进行特异性、灵敏性及重复性实验。结果 4种优势微生物的熔解曲线峰单一。枯草芽孢杆菌、宛氏拟青霉、丝衣霉菌、黑曲霉的最低检测限度分别为584、622、0.272、500拷贝/μL。不同质量浓度的标准质粒变异系数（CV）均小于5%。结论 建立的枯草芽孢杆菌、宛氏拟青霉、丝衣霉菌、黑曲霉的荧光定量PCR检测方法具有特异性强、灵敏度高、重复性好等优点，可用于发酵类中药中微生物的检测及定量。
目的 对半夏曲中4种优势微生物建立快速、有效的荧光定量PCR检测方法。方法 以枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis、宛氏拟青霉Paecilomyces variotii、丝衣霉菌Byssochlamys spectabilis、黑曲霉Aspergillus niger的重组质粒为标准质粒，设计特异性引物并进行特异性、灵敏性及重复性实验。结果 4种优势微生物的熔解曲线峰单一。枯草芽孢杆菌、宛氏拟青霉、丝衣霉菌、黑曲霉的最低检测限度分别为584、622、0.272、500拷贝/μL。不同质量浓度的标准质粒变异系数（CV）均小于5%。结论 建立的枯草芽孢杆菌、宛氏拟青霉、丝衣霉菌、黑曲霉的荧光定量PCR检测方法具有特异性强、灵敏度高、重复性好等优点，可用于发酵类中药中微生物的检测及定量。
2017, 48(24):5136-5142.
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2017.24.013
摘要:
目的 优选大孔吸附树脂同时纯化雪松松针中莽草酸和总黄酮的最佳工艺。方法 以雪松松针中莽草酸和总黄酮的质量分数为评价指标，考察了6种树脂的纯化效果；以上样质量浓度、上样体积流量、上样量、水洗脱用量、乙醇质量浓度和乙醇洗脱用量考察了最佳树脂的纯化能力；在单因素实验的基础上，采用正交试验法，通过综合评分优选最佳的纯化工艺。结果 XAD 7HP树脂对雪松松针中莽草酸和总黄酮的纯化效果最佳，水洗脱部分为莽草酸，乙醇洗脱部分为总黄酮，其最佳的纯化工艺为上样液中莽草酸的质量浓度11.59 mg/mL和总黄酮的质量浓度6.96 mg/mL、上样体积流量8 BV/h、上样量2.0 mL/g；水洗脱用量为上样液加4 BV的水洗液、70%的乙醇洗脱4 BV。纯化后莽草酸的质量分数由19.25%提升到28.98%，总黄酮的质量分数由11.92%提升到54.45%。结论 优选的纯化工艺稳定、可行，为工业化生产雪松松针中莽草酸和总黄酮提供参考。
目的 优选大孔吸附树脂同时纯化雪松松针中莽草酸和总黄酮的最佳工艺。方法 以雪松松针中莽草酸和总黄酮的质量分数为评价指标，考察了6种树脂的纯化效果；以上样质量浓度、上样体积流量、上样量、水洗脱用量、乙醇质量浓度和乙醇洗脱用量考察了最佳树脂的纯化能力；在单因素实验的基础上，采用正交试验法，通过综合评分优选最佳的纯化工艺。结果 XAD 7HP树脂对雪松松针中莽草酸和总黄酮的纯化效果最佳，水洗脱部分为莽草酸，乙醇洗脱部分为总黄酮，其最佳的纯化工艺为上样液中莽草酸的质量浓度11.59 mg/mL和总黄酮的质量浓度6.96 mg/mL、上样体积流量8 BV/h、上样量2.0 mL/g；水洗脱用量为上样液加4 BV的水洗液、70%的乙醇洗脱4 BV。纯化后莽草酸的质量分数由19.25%提升到28.98%，总黄酮的质量分数由11.92%提升到54.45%。结论 优选的纯化工艺稳定、可行，为工业化生产雪松松针中莽草酸和总黄酮提供参考。
2017, 48(24):5143-5150.
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2017.24.014
摘要:
目的 建立右归饮的HPLC指纹图谱，并同时测定9种成分（京尼平苷酸、莫诺苷、绿原酸、栀子苷、马钱苷、松脂醇二葡萄糖苷、甘草苷、芦丁和甘草酸）的量，为控制右归饮的质量提供依据。方法 采用Pursuit XRs 5 C18色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）进行分离，流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液，梯度洗脱，体积流量1.0 mL/min，检测波长230 nm，柱温30℃。建立10批右归饮样品的HPLC指纹图谱，并进行相似度评价；通过与各组方药味及对照品的保留时间和紫外光谱图比对，对共有峰进行归属和指认，并测定指认出的9个成分的量。结果 10批样品指纹图谱与对照指纹图谱的相似度均大于0.904；共标定30个共有峰，其中8个来自杜仲，8个来自甘草，6个来自山茱萸，2个来自附子，2个来自熟地黄，1个来自肉桂，山药及枸杞对共有峰贡献不明显，其中3个共有峰不能明确其来源；通过对共有峰进行指认，发现7号峰为京尼平苷酸、9号峰为莫诺苷、11号峰为绿原酸、12号峰为栀子苷、13号峰为马钱苷、14号峰为松脂醇二葡萄糖苷、18号峰为甘草苷、21号峰为芦丁及30号峰为甘草酸，并对这9种成分进行了定量测定，其定量测定结果分别为87.6～119.1 μg/g、323.6～365.6 μg/g、108.3～124.1 μg/g、79.5～85.0 μg/g、171.7～188.0 μg/g、163.0～238.3 μg/g、64.5～53.3 μg/g、159.8～168.5 μg/g、72.8～83.6 μg/g。结论 所建立的右归饮HPLC指纹图谱及定量测定方法稳定性、重复性好，可为右归饮质量控制和评价提供参考。
目的 建立右归饮的HPLC指纹图谱，并同时测定9种成分（京尼平苷酸、莫诺苷、绿原酸、栀子苷、马钱苷、松脂醇二葡萄糖苷、甘草苷、芦丁和甘草酸）的量，为控制右归饮的质量提供依据。方法 采用Pursuit XRs 5 C18色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）进行分离，流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液，梯度洗脱，体积流量1.0 mL/min，检测波长230 nm，柱温30℃。建立10批右归饮样品的HPLC指纹图谱，并进行相似度评价；通过与各组方药味及对照品的保留时间和紫外光谱图比对，对共有峰进行归属和指认，并测定指认出的9个成分的量。结果 10批样品指纹图谱与对照指纹图谱的相似度均大于0.904；共标定30个共有峰，其中8个来自杜仲，8个来自甘草，6个来自山茱萸，2个来自附子，2个来自熟地黄，1个来自肉桂，山药及枸杞对共有峰贡献不明显，其中3个共有峰不能明确其来源；通过对共有峰进行指认，发现7号峰为京尼平苷酸、9号峰为莫诺苷、11号峰为绿原酸、12号峰为栀子苷、13号峰为马钱苷、14号峰为松脂醇二葡萄糖苷、18号峰为甘草苷、21号峰为芦丁及30号峰为甘草酸，并对这9种成分进行了定量测定，其定量测定结果分别为87.6～119.1 μg/g、323.6～365.6 μg/g、108.3～124.1 μg/g、79.5～85.0 μg/g、171.7～188.0 μg/g、163.0～238.3 μg/g、64.5～53.3 μg/g、159.8～168.5 μg/g、72.8～83.6 μg/g。结论 所建立的右归饮HPLC指纹图谱及定量测定方法稳定性、重复性好，可为右归饮质量控制和评价提供参考。
2017, 48(24):5151-5157.
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2017.24.015
摘要:
目的 建立五味消毒饮口服液（WXOL）的HPLC法特征指纹图谱，并同时测定绿原酸、木犀草苷、木犀草素、蒙花苷、咖啡酸、秦皮乙素6种主要指标成分的量。方法 采用Agilent 1260高效液相色谱仪进行色谱分析，色谱柱为Agilent TC-C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相为0.5%醋酸水溶液-甲醇，梯度洗脱：0～10 min，10%～32%甲醇；10～20 min，32%甲醇；20～25 min，32%～46%甲醇；25～31 min，46%～48%甲醇；31～41 min，48%～80%甲醇；体积流量为1 mL/min；检测波长为320 nm；柱温为30℃；采用国家药典委员会出版的《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》（2012年版）对10批WXOL化学成分指纹图谱进行相似度评价，并采用多成分同时测定法对6种指标性成分进行定量测定。结果 10批WXOL HPLC特征指纹图谱相似度均大于0.98，共17个共有峰，各峰分离度较好。通过对照品比对确定了其中绿原酸（5号峰）、秦皮乙素（7号峰）、咖啡酸（8号峰）、木犀草苷（12号峰）、蒙花苷（16号峰）、木犀草素（17号峰）6个成分，10批WXOL中绿原酸量为54.038 3～105.551 1 μg/mL，秦皮乙素量为4.122 1～31.359 9 μg/mL，咖啡酸量为2.413 0～4.420 7 μg/mL，木犀草苷量为4.042 8～11.312 8 μg/mL，蒙花苷量为3.866 3～46.271 9 μg/mL，木犀草素量为0.990 8～2.126 8 μg/mL。不同批次间各指标性成分量变化较小，样品质量较稳定。结论 所建立的HPLC特征指纹图谱结合多指标成分定量测定的方法，稳定性、重复性较好，有利于保证WXOL质量均一，对其质量控制具有参考价值。
目的 建立五味消毒饮口服液（WXOL）的HPLC法特征指纹图谱，并同时测定绿原酸、木犀草苷、木犀草素、蒙花苷、咖啡酸、秦皮乙素6种主要指标成分的量。方法 采用Agilent 1260高效液相色谱仪进行色谱分析，色谱柱为Agilent TC-C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相为0.5%醋酸水溶液-甲醇，梯度洗脱：0～10 min，10%～32%甲醇；10～20 min，32%甲醇；20～25 min，32%～46%甲醇；25～31 min，46%～48%甲醇；31～41 min，48%～80%甲醇；体积流量为1 mL/min；检测波长为320 nm；柱温为30℃；采用国家药典委员会出版的《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》（2012年版）对10批WXOL化学成分指纹图谱进行相似度评价，并采用多成分同时测定法对6种指标性成分进行定量测定。结果 10批WXOL HPLC特征指纹图谱相似度均大于0.98，共17个共有峰，各峰分离度较好。通过对照品比对确定了其中绿原酸（5号峰）、秦皮乙素（7号峰）、咖啡酸（8号峰）、木犀草苷（12号峰）、蒙花苷（16号峰）、木犀草素（17号峰）6个成分，10批WXOL中绿原酸量为54.038 3～105.551 1 μg/mL，秦皮乙素量为4.122 1～31.359 9 μg/mL，咖啡酸量为2.413 0～4.420 7 μg/mL，木犀草苷量为4.042 8～11.312 8 μg/mL，蒙花苷量为3.866 3～46.271 9 μg/mL，木犀草素量为0.990 8～2.126 8 μg/mL。不同批次间各指标性成分量变化较小，样品质量较稳定。结论 所建立的HPLC特征指纹图谱结合多指标成分定量测定的方法，稳定性、重复性较好，有利于保证WXOL质量均一，对其质量控制具有参考价值。
2017, 48(24):5158-5167.
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2017.24.016
摘要:
目的 建立一测多评（QAMS）法同时测定补肾清利颗粒（BQG）中8种成分京尼平苷酸（GA）、绿原酸、栀子苷、滨蒿内酯、丹酚酸B（SAB）、黄芩苷、槲皮素7-O-α-L-鼠李糖苷（QR）及黄芩素的方法，验证该法在BQG中应用的可行性和技术适应性。方法 以8种成分为研究对象，利用QAMS 3种校正方法计算各待测成分与内参物滨蒿内酯的相对校正因子（fk/s），推算待测组分量；对回归方程和3种校正方法计算值与外标法实测值进行误差和相关性评价。结果 8种目标成分在一定范围内线性关系良好（r > 0.999 9），滨蒿内酯与GA、绿原酸、栀子苷、SAB、黄芩苷、QR及黄芩素的fk/s分别是0.562、0.818、0.627、0.877、0.935、1.113、2.339，且在不同条件下重现性良好；6批样品中各成分量分别为GA 1.633～1.736 mg/g、绿原酸1.777～1.950 mg/g、栀子苷6.017～6.422 mg/g、滨蒿内酯1.765～1.851 mg/g、SAB 2.326～2.522 mg/g、黄芩苷19.476～21.329 mg/g、QR 3.077～3.265 mg/g及黄芩素0.161～0.186 mg/g，且计算所得量与实测量测得结果无显著差异。结论 QAMS法为BQG提供了一个快捷可行的多指标同步质量评价模式。
目的 建立一测多评（QAMS）法同时测定补肾清利颗粒（BQG）中8种成分京尼平苷酸（GA）、绿原酸、栀子苷、滨蒿内酯、丹酚酸B（SAB）、黄芩苷、槲皮素7-O-α-L-鼠李糖苷（QR）及黄芩素的方法，验证该法在BQG中应用的可行性和技术适应性。方法 以8种成分为研究对象，利用QAMS 3种校正方法计算各待测成分与内参物滨蒿内酯的相对校正因子（fk/s），推算待测组分量；对回归方程和3种校正方法计算值与外标法实测值进行误差和相关性评价。结果 8种目标成分在一定范围内线性关系良好（r > 0.999 9），滨蒿内酯与GA、绿原酸、栀子苷、SAB、黄芩苷、QR及黄芩素的fk/s分别是0.562、0.818、0.627、0.877、0.935、1.113、2.339，且在不同条件下重现性良好；6批样品中各成分量分别为GA 1.633～1.736 mg/g、绿原酸1.777～1.950 mg/g、栀子苷6.017～6.422 mg/g、滨蒿内酯1.765～1.851 mg/g、SAB 2.326～2.522 mg/g、黄芩苷19.476～21.329 mg/g、QR 3.077～3.265 mg/g及黄芩素0.161～0.186 mg/g，且计算所得量与实测量测得结果无显著差异。结论 QAMS法为BQG提供了一个快捷可行的多指标同步质量评价模式。
2017, 48(24):5168-5173.
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2017.24.017
摘要:
目的 建立RP-HPLC法同时测定用于干预刀豆蛋白A（ConA）诱导的小鼠急性免疫性肝损伤的山茱萸萜类制剂（液体制剂）中莫诺苷、马钱苷、山茱萸新苷、齐墩果酸及熊果酸5种活性成分，为山茱萸萜类成分及其相关制剂的质量控制提供方法。方法 采用RP-HPLC法，Zorbax SB-C18柱（150 mm×4.6 mm，5 μm）色谱柱；以乙腈-添加2 mmol/L γ-环糊精的0.1%磷酸水溶液为流动相，梯度洗脱；体积流量1.0 mL/min；柱温30℃；检测波长240、360、210 nm；进样量3 μL。结果 莫诺苷、马钱苷、山茱萸新苷、齐墩果酸及熊果酸的线性范围分别为10.42～333.33、23.44～750.00、9.11～291.67、10.42～333.33、13.02～416.67 mg/L；供试样品中莫诺苷、马钱苷、山茱萸新苷、齐墩果酸及熊果酸的平均回收率为95.60%～98.02%，RSD为1.47%～1.89%；重复性试验RSD为1.46%～1.71%；稳定性试验RSD为1.29%～1.76%；6批山茱萸萜类制剂中含有莫诺苷、马钱苷、山茱萸新苷、齐墩果酸及熊果酸的平均质量浓度分别为669.6～680.2、850.1～869.5、94.1～96.4、164.3～166.1、85.6～87.6 mg/L。结论 该方法简便、灵敏度高、重复性好、回收率高，可用于检测山茱萸萜类制剂中莫诺苷、马钱苷、山茱萸新苷、齐墩果酸及熊果酸。
目的 建立RP-HPLC法同时测定用于干预刀豆蛋白A（ConA）诱导的小鼠急性免疫性肝损伤的山茱萸萜类制剂（液体制剂）中莫诺苷、马钱苷、山茱萸新苷、齐墩果酸及熊果酸5种活性成分，为山茱萸萜类成分及其相关制剂的质量控制提供方法。方法 采用RP-HPLC法，Zorbax SB-C18柱（150 mm×4.6 mm，5 μm）色谱柱；以乙腈-添加2 mmol/L γ-环糊精的0.1%磷酸水溶液为流动相，梯度洗脱；体积流量1.0 mL/min；柱温30℃；检测波长240、360、210 nm；进样量3 μL。结果 莫诺苷、马钱苷、山茱萸新苷、齐墩果酸及熊果酸的线性范围分别为10.42～333.33、23.44～750.00、9.11～291.67、10.42～333.33、13.02～416.67 mg/L；供试样品中莫诺苷、马钱苷、山茱萸新苷、齐墩果酸及熊果酸的平均回收率为95.60%～98.02%，RSD为1.47%～1.89%；重复性试验RSD为1.46%～1.71%；稳定性试验RSD为1.29%～1.76%；6批山茱萸萜类制剂中含有莫诺苷、马钱苷、山茱萸新苷、齐墩果酸及熊果酸的平均质量浓度分别为669.6～680.2、850.1～869.5、94.1～96.4、164.3～166.1、85.6～87.6 mg/L。结论 该方法简便、灵敏度高、重复性好、回收率高，可用于检测山茱萸萜类制剂中莫诺苷、马钱苷、山茱萸新苷、齐墩果酸及熊果酸。
2017, 48(24):5174-5178.
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2017.24.018
摘要:
目的 测定蓬莪术炮制过程中pH值及7种成分（双去甲氧基姜黄素、去甲氧基姜黄素、姜黄素、莪术二酮、莪术醇、吉马酮、β-榄香烯）量的动态变化，从而对其所含的姜黄素类和挥发油类成分在醋制过程中受水、热、酸等外界因素的作用而发生的化学成分量变化进行研究。方法 分别以蒸馏水、9°米醋、9%醋酸水溶液对蓬莪术进行炮制，并对特定时间点的水液pH值进行测定，用SPSS软件对所得数据进行分析；采用HPLC方法同时测定生品组、空白组、醋制组和参照组蓬莪术样品中7种成分的量，并对其量的变化进行分析。结果 与空白组相比，醋制组和参照组最终的pH值偏低且无显著差异；与空白组和参照组相比，醋制组中测定的3种姜黄素类成分量均增加[双去甲氧基姜黄素质量分数为（0.002 320±0.000 344） mg/g、去甲氧基姜黄素质量分数为（0.059 65±0.015 64） mg/g、姜黄素质量分数为（0.272 5±0.125 2） mg/g]，而测定的挥发油类成分有不同程度地降低。结论 在炮制过程中，药用辅料9°米醋中的主要有效成分可能是醋酸；米醋中的醋酸及其他少量有机成分可能通过调节pH值来保护蓬莪术药材中化学成分不被水、热、酸破坏；通过对不同成分保护程度的差异来调节蓬莪术醋制前后毒效成分的减加，不仅体现了9°米醋作为药用辅料的科学性，也为进一步研究蓬莪术醋制“减毒增效”物质基础提供了新思路。
目的 测定蓬莪术炮制过程中pH值及7种成分（双去甲氧基姜黄素、去甲氧基姜黄素、姜黄素、莪术二酮、莪术醇、吉马酮、β-榄香烯）量的动态变化，从而对其所含的姜黄素类和挥发油类成分在醋制过程中受水、热、酸等外界因素的作用而发生的化学成分量变化进行研究。方法 分别以蒸馏水、9°米醋、9%醋酸水溶液对蓬莪术进行炮制，并对特定时间点的水液pH值进行测定，用SPSS软件对所得数据进行分析；采用HPLC方法同时测定生品组、空白组、醋制组和参照组蓬莪术样品中7种成分的量，并对其量的变化进行分析。结果 与空白组相比，醋制组和参照组最终的pH值偏低且无显著差异；与空白组和参照组相比，醋制组中测定的3种姜黄素类成分量均增加[双去甲氧基姜黄素质量分数为（0.002 320±0.000 344） mg/g、去甲氧基姜黄素质量分数为（0.059 65±0.015 64） mg/g、姜黄素质量分数为（0.272 5±0.125 2） mg/g]，而测定的挥发油类成分有不同程度地降低。结论 在炮制过程中，药用辅料9°米醋中的主要有效成分可能是醋酸；米醋中的醋酸及其他少量有机成分可能通过调节pH值来保护蓬莪术药材中化学成分不被水、热、酸破坏；通过对不同成分保护程度的差异来调节蓬莪术醋制前后毒效成分的减加，不仅体现了9°米醋作为药用辅料的科学性，也为进一步研究蓬莪术醋制“减毒增效”物质基础提供了新思路。
2017, 48(24):5179-5185.
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2017.24.019
摘要:
目的 通过生物活性检测结合化学指纹图谱分析，探索灯盏细辛抗血小板聚集的活性成分。方法 采用UPLC-UV分析技术建立不同批次灯盏细辛药材化学指纹图谱，对不同批次灯盏细辛进行抗血小板聚集活性效价检测，基于谱效关系推测可能的活性物质，并对5个高相关性成分进行体外抗血小板聚集作用的验证，根据5种单体化合物在灯盏细辛中的含量差异，计算5个单体化合物的相对活性贡献度。结果 通过化学指纹图谱与抗血小板聚集生物效价的谱效相关分析，筛选并鉴定出与生物活性相关系数大于0.5的5个色谱峰，分别鉴定为绿原酸、咖啡酸、野黄芩苷、异绿原酸A、异绿原酸C。进一步体外实验表明5个化合物在相同质量浓度下均有不同程度的抗血小板聚集作用（抑制率16.5%～85.5%），相对活性强度顺序：野黄芩苷 > 异绿原酸C > 咖啡酸 > 异绿原酸A > 绿原酸；而5种成分从相对活性贡献度来看，异绿原酸C与野黄芩苷的活性贡献度大于另外3种成分。结论 建立了灯盏细辛体外抗血小板聚集生物效价的检测方法；且野黄芩苷和异绿原酸C是灯盏细辛体外抗血小板聚集的主要活性成分。
目的 通过生物活性检测结合化学指纹图谱分析，探索灯盏细辛抗血小板聚集的活性成分。方法 采用UPLC-UV分析技术建立不同批次灯盏细辛药材化学指纹图谱，对不同批次灯盏细辛进行抗血小板聚集活性效价检测，基于谱效关系推测可能的活性物质，并对5个高相关性成分进行体外抗血小板聚集作用的验证，根据5种单体化合物在灯盏细辛中的含量差异，计算5个单体化合物的相对活性贡献度。结果 通过化学指纹图谱与抗血小板聚集生物效价的谱效相关分析，筛选并鉴定出与生物活性相关系数大于0.5的5个色谱峰，分别鉴定为绿原酸、咖啡酸、野黄芩苷、异绿原酸A、异绿原酸C。进一步体外实验表明5个化合物在相同质量浓度下均有不同程度的抗血小板聚集作用（抑制率16.5%～85.5%），相对活性强度顺序：野黄芩苷 > 异绿原酸C > 咖啡酸 > 异绿原酸A > 绿原酸；而5种成分从相对活性贡献度来看，异绿原酸C与野黄芩苷的活性贡献度大于另外3种成分。结论 建立了灯盏细辛体外抗血小板聚集生物效价的检测方法；且野黄芩苷和异绿原酸C是灯盏细辛体外抗血小板聚集的主要活性成分。
2017, 48(24):5186-5193.
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2017.24.020
摘要:
目的 探讨黄芪及其有效成分（黄芪多糖、黄芪甲苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷）对上焦水饮内停大鼠的影响。方法 将大鼠随机分为对照组（0.5%羧甲基纤维素钠）、模型组（0.5%羧甲基纤维素钠）、黄芪水煎液组（5.40 g/kg）、黄芪多糖组（1.41 g/kg）、黄芪甲苷组（50 mg/kg）、毛蕊异黄酮葡萄糖苷组（30 mg/kg）及芪苈强心胶囊（1 g/kg）阳性对照组，每组各10只，除对照组外，其他各组采用肩胛区sc异丙肾上腺素和气管置管复合干预因素制备上焦水饮内停大鼠模型；各组ig给药2周后，观察大鼠体质量、心脏指数、肺指数、左心室质量指数、左心室射血分数（LVEF）、左心室短轴缩短分数（LVFS）、血浆肌酸激酶（CK）、心肺组织病理学、肺泡灌洗液回抽率、肺通透指数和肺干湿比的改变。结果 与模型组相比，黄芪水煎液组、各成分组均可不同程度地改善模型大鼠一般状况，体质量明显升高（P < 0.05），心脏指数、左心室质量指数、血浆CK均不同程度降低（P < 0.05、0.01），黄芪多糖、黄芪甲苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷组大鼠LVEF、LVFS、肺泡灌洗液回抽率明显升高（P < 0.05），肺指数、肺通透指数和肺干湿比明显降低（P < 0.05）。结论 黄芪及其有效成分可以改善上焦水饮内停大鼠的心肺损伤。
目的 探讨黄芪及其有效成分（黄芪多糖、黄芪甲苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷）对上焦水饮内停大鼠的影响。方法 将大鼠随机分为对照组（0.5%羧甲基纤维素钠）、模型组（0.5%羧甲基纤维素钠）、黄芪水煎液组（5.40 g/kg）、黄芪多糖组（1.41 g/kg）、黄芪甲苷组（50 mg/kg）、毛蕊异黄酮葡萄糖苷组（30 mg/kg）及芪苈强心胶囊（1 g/kg）阳性对照组，每组各10只，除对照组外，其他各组采用肩胛区sc异丙肾上腺素和气管置管复合干预因素制备上焦水饮内停大鼠模型；各组ig给药2周后，观察大鼠体质量、心脏指数、肺指数、左心室质量指数、左心室射血分数（LVEF）、左心室短轴缩短分数（LVFS）、血浆肌酸激酶（CK）、心肺组织病理学、肺泡灌洗液回抽率、肺通透指数和肺干湿比的改变。结果 与模型组相比，黄芪水煎液组、各成分组均可不同程度地改善模型大鼠一般状况，体质量明显升高（P < 0.05），心脏指数、左心室质量指数、血浆CK均不同程度降低（P < 0.05、0.01），黄芪多糖、黄芪甲苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷组大鼠LVEF、LVFS、肺泡灌洗液回抽率明显升高（P < 0.05），肺指数、肺通透指数和肺干湿比明显降低（P < 0.05）。结论 黄芪及其有效成分可以改善上焦水饮内停大鼠的心肺损伤。
2017, 48(24):5194-5199.
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2017.24.021
摘要:
目的 研究雷公藤红素对神经胶质瘤U87细胞增殖、凋亡和迁移的影响及其机制。方法 采用MTT法检测雷公藤红素对U87细胞增殖的影响；流式细胞术检测U87细胞凋亡和线粒体膜电位；Western blotting法检测U87细胞中线粒体途径相关凋亡蛋白表达水平；Transwell和划痕实验检测U87细胞的迁移能力。结果 雷公藤红素可显著抑制U87细胞的增殖、降低U87细胞线粒体膜电位并诱导U87细胞凋亡；雷公藤红素显著性地调控Bcl-2、Bax、细胞色素C（Cyt C）、Caspase-9和Caspase-3的表达水平；同时雷公藤红素显著抑制U87细胞迁移能力。结论 雷公藤红素抑制U87细胞增殖、迁移和诱导其凋亡，其中凋亡机制可能是通过调控线粒体途径相关凋亡蛋白来实现的。
目的 研究雷公藤红素对神经胶质瘤U87细胞增殖、凋亡和迁移的影响及其机制。方法 采用MTT法检测雷公藤红素对U87细胞增殖的影响；流式细胞术检测U87细胞凋亡和线粒体膜电位；Western blotting法检测U87细胞中线粒体途径相关凋亡蛋白表达水平；Transwell和划痕实验检测U87细胞的迁移能力。结果 雷公藤红素可显著抑制U87细胞的增殖、降低U87细胞线粒体膜电位并诱导U87细胞凋亡；雷公藤红素显著性地调控Bcl-2、Bax、细胞色素C（Cyt C）、Caspase-9和Caspase-3的表达水平；同时雷公藤红素显著抑制U87细胞迁移能力。结论 雷公藤红素抑制U87细胞增殖、迁移和诱导其凋亡，其中凋亡机制可能是通过调控线粒体途径相关凋亡蛋白来实现的。
2017, 48(24):5200-5205.
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2017.24.022
摘要:
目的 研究氧化苦参碱（OM）对接受转化生长因子-β1（TGF-β1）刺激的人胰腺导管癌PANC-1细胞中Smad3/Gli1通路相关因子表达的影响。方法 以TGF-β1刺激PANC-1细胞模拟胰腺纤维化模型，并观察给予OM干预对Smad3/Gli1通路相关因子表达的影响。通过细胞转染技术将Gli1及Smad3的RNA干扰质粒转染入PANC-1细胞；通过Western blotting技术检测Smad3、Gli1和α-SMA的蛋白表达，ELISA技术检测纤连蛋白（FN）和I型胶原（CoL-I）在细胞培养上清中的表达。结果 与对照组相比，PANC-1细胞接受TGF-β1刺激后Smad3、Gli1和α-SMA的蛋白表达显著升高；与TGF-β1组相比，OM和TGF-β1共同处理组Smad3、Gli1和α-SMA的蛋白表达显著降低。转染Smad3干扰质粒后，Gli1、α-SMA、FN和CoL-I表达显著下降。与TGF-β1组比较，转染Gli1干扰质粒后加TGF-β1组α-SMA、FN和CoL-I表达显著降低。结论 OM可能通过调节PANC-1细胞TGF-β1/Smad3/Gli1通路发挥抗胰腺纤维化作用。
目的 研究氧化苦参碱（OM）对接受转化生长因子-β1（TGF-β1）刺激的人胰腺导管癌PANC-1细胞中Smad3/Gli1通路相关因子表达的影响。方法 以TGF-β1刺激PANC-1细胞模拟胰腺纤维化模型，并观察给予OM干预对Smad3/Gli1通路相关因子表达的影响。通过细胞转染技术将Gli1及Smad3的RNA干扰质粒转染入PANC-1细胞；通过Western blotting技术检测Smad3、Gli1和α-SMA的蛋白表达，ELISA技术检测纤连蛋白（FN）和I型胶原（CoL-I）在细胞培养上清中的表达。结果 与对照组相比，PANC-1细胞接受TGF-β1刺激后Smad3、Gli1和α-SMA的蛋白表达显著升高；与TGF-β1组相比，OM和TGF-β1共同处理组Smad3、Gli1和α-SMA的蛋白表达显著降低。转染Smad3干扰质粒后，Gli1、α-SMA、FN和CoL-I表达显著下降。与TGF-β1组比较，转染Gli1干扰质粒后加TGF-β1组α-SMA、FN和CoL-I表达显著降低。结论 OM可能通过调节PANC-1细胞TGF-β1/Smad3/Gli1通路发挥抗胰腺纤维化作用。
2017, 48(24):5206-5210.
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2017.24.023
摘要:
目的 通过比较淫羊藿Epimedium brevicormon不同洗脱部位及其单体化合物对Aβ25-35诱导的SH-SY5Y神经细胞损伤的保护作用，筛选淫羊藿活性部位和活性成分。方法 淫羊藿提取物经大孔树脂柱、硅胶柱、Sephadex LH-20及制备液相的分离纯化，得到不同洗脱部位和单体化合物。运用Aβ25-35体外诱导的神经细胞损伤模型，采用Hoechst33342和PI双染法，对淫羊藿的不同洗脱部位和成分进行活性筛选。结果 与模型组比较，除淫羊藿95%乙醇部位外，所有洗脱部位及其中的单体化合物山柰酚-3-O-[α-L-鼠李糖基（1→6）-β-D-半乳糖苷]-7-O-α-L-鼠李糖苷、淫羊藿苷、朝藿定A、朝藿定B均对Aβ25-35所致SH-SY5Y细胞损伤有显著保护作用。结论 淫羊藿对Aβ25-35诱导的SH-SY5Y细胞损伤具有保护作用，其二氯甲烷-甲醇（5∶1）部位作用最强，其次是30%乙醇部位、50%乙醇部位。
目的 通过比较淫羊藿Epimedium brevicormon不同洗脱部位及其单体化合物对Aβ25-35诱导的SH-SY5Y神经细胞损伤的保护作用，筛选淫羊藿活性部位和活性成分。方法 淫羊藿提取物经大孔树脂柱、硅胶柱、Sephadex LH-20及制备液相的分离纯化，得到不同洗脱部位和单体化合物。运用Aβ25-35体外诱导的神经细胞损伤模型，采用Hoechst33342和PI双染法，对淫羊藿的不同洗脱部位和成分进行活性筛选。结果 与模型组比较，除淫羊藿95%乙醇部位外，所有洗脱部位及其中的单体化合物山柰酚-3-O-[α-L-鼠李糖基（1→6）-β-D-半乳糖苷]-7-O-α-L-鼠李糖苷、淫羊藿苷、朝藿定A、朝藿定B均对Aβ25-35所致SH-SY5Y细胞损伤有显著保护作用。结论 淫羊藿对Aβ25-35诱导的SH-SY5Y细胞损伤具有保护作用，其二氯甲烷-甲醇（5∶1）部位作用最强，其次是30%乙醇部位、50%乙醇部位。
2017, 48(24):5211-5216.
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2017.24.024
摘要:
目的 研究芩百清肺浓缩丸治疗支原体肺炎的作用机制。方法 采用超高效液相色谱与串联四级杆飞行时间质谱（UPLC-Q-TOF-MS）联用技术的代谢组学方法，分析肺炎支原体感染小鼠肺组织中内源性化合物的变化。采用Progenisis QI软件进行色谱峰识别及匹配，并采用主成分分析（PCA）和偏最小二乘-判别分析（PLS-DA）对获得数据进行降维，通过分析对不同组间分离贡献度较大（VIP > 1，P < 0.05）化合物的串联质谱数据，经HMDB等数据库检索，确定潜在生物标志物。结果 从肺组织中共鉴定出视黄醛、全反式维甲酸、焦谷氨酸、白三烯C4、维生素A、花生四烯酸、前列腺素I2等20个潜在生物标志物。与模型组比较，芩百清肺浓缩丸对20个潜在生物标志物均具有回调作用。结论 芩百清肺浓缩丸通过影响视黄醇代谢、亚油酸代谢、花生四烯酸代谢等通路发挥治疗支原体肺炎的作用。
目的 研究芩百清肺浓缩丸治疗支原体肺炎的作用机制。方法 采用超高效液相色谱与串联四级杆飞行时间质谱（UPLC-Q-TOF-MS）联用技术的代谢组学方法，分析肺炎支原体感染小鼠肺组织中内源性化合物的变化。采用Progenisis QI软件进行色谱峰识别及匹配，并采用主成分分析（PCA）和偏最小二乘-判别分析（PLS-DA）对获得数据进行降维，通过分析对不同组间分离贡献度较大（VIP > 1，P < 0.05）化合物的串联质谱数据，经HMDB等数据库检索，确定潜在生物标志物。结果 从肺组织中共鉴定出视黄醛、全反式维甲酸、焦谷氨酸、白三烯C4、维生素A、花生四烯酸、前列腺素I2等20个潜在生物标志物。与模型组比较，芩百清肺浓缩丸对20个潜在生物标志物均具有回调作用。结论 芩百清肺浓缩丸通过影响视黄醇代谢、亚油酸代谢、花生四烯酸代谢等通路发挥治疗支原体肺炎的作用。
2017, 48(24):5217-5223.
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2017.24.025
摘要:
目的 探讨虫草菌丝中的3种活性成分（虫草素、腺苷、麦角甾醇）对血管新生和肝内皮细胞功能的影响。方法 采用鸡胚绒毛尿囊膜实验和转基因斑马鱼实验分别观察虫草素、腺苷、麦角甾醇对新生血管面积、功能血管数量及碱性磷酸酶变化的影响；MTT法测定3个化合物对人肝癌SK-HEP-1细胞的细胞毒活性；采用血管内皮生长因子（VEGF）诱导SK-HEP-1细胞增殖为模型，以索拉非尼为阳性对照药，MTT法测定3个化合物对细胞增殖的影响，Transwell法观察细胞迁移，Matrigel管腔形成实验观察细胞管腔形成情况，荧光探针法检测胞内一氧化氮（NO）的量和一氧化氮合酶（NOS）活性。结果 虫草菌丝中腺苷、麦角甾醇能够显著抑制鸡胚绒毛尿囊膜血管新生、减少转基因斑马鱼功能血管数量，而虫草素能够促进鸡胚绒毛尿囊膜血管新生；与对照组相比，VEGF可诱导SK-HEP-1细胞增殖，促进细胞迁移和管腔形成，并可使其胞内NO水平和NOS活性显著升高；与模型组相比，虫草素、腺苷、麦角甾醇呈剂量依赖性地抑制SK-HEP-1细胞增殖，腺苷、麦角甾醇能抑制SK-HEP-1细胞迁移，3者均可不同程度地抑制SK-HEP-1细胞管腔形成，且剂量依赖性地降低胞内NO水平和NOS活性。结论 虫草菌丝中的虫草素、腺苷、麦角甾醇对SK-HEP-1细胞增殖、迁移、管腔形成有不同程度的抑制作用，其中腺苷的作用尤为明显；其机制与抑制细胞内NO水平和NOS活性有关。
目的 探讨虫草菌丝中的3种活性成分（虫草素、腺苷、麦角甾醇）对血管新生和肝内皮细胞功能的影响。方法 采用鸡胚绒毛尿囊膜实验和转基因斑马鱼实验分别观察虫草素、腺苷、麦角甾醇对新生血管面积、功能血管数量及碱性磷酸酶变化的影响；MTT法测定3个化合物对人肝癌SK-HEP-1细胞的细胞毒活性；采用血管内皮生长因子（VEGF）诱导SK-HEP-1细胞增殖为模型，以索拉非尼为阳性对照药，MTT法测定3个化合物对细胞增殖的影响，Transwell法观察细胞迁移，Matrigel管腔形成实验观察细胞管腔形成情况，荧光探针法检测胞内一氧化氮（NO）的量和一氧化氮合酶（NOS）活性。结果 虫草菌丝中腺苷、麦角甾醇能够显著抑制鸡胚绒毛尿囊膜血管新生、减少转基因斑马鱼功能血管数量，而虫草素能够促进鸡胚绒毛尿囊膜血管新生；与对照组相比，VEGF可诱导SK-HEP-1细胞增殖，促进细胞迁移和管腔形成，并可使其胞内NO水平和NOS活性显著升高；与模型组相比，虫草素、腺苷、麦角甾醇呈剂量依赖性地抑制SK-HEP-1细胞增殖，腺苷、麦角甾醇能抑制SK-HEP-1细胞迁移，3者均可不同程度地抑制SK-HEP-1细胞管腔形成，且剂量依赖性地降低胞内NO水平和NOS活性。结论 虫草菌丝中的虫草素、腺苷、麦角甾醇对SK-HEP-1细胞增殖、迁移、管腔形成有不同程度的抑制作用，其中腺苷的作用尤为明显；其机制与抑制细胞内NO水平和NOS活性有关。
2017, 48(24):5224-5229.
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2017.24.026
摘要:
目的 基于细胞自噬探讨钩藤碱对肿瘤坏死因子-α（TNF-α）诱导的人脐静脉内皮细胞（HUVECs）损伤时血栓前状态的影响。方法 采用TNF-α诱导HUVECs制备损伤模型，透射电镜和免疫荧光技术观察HUVECs自噬水平的变化，Western blotting法检测自噬标记蛋白人微管相关蛋白轻链3Ⅱ（LC3Ⅱ）/LC3I、Beclin-1、p62和凝血相关因子核转录因子-κB（NF-κB）、血管假性血友病因子（vWF）和纤溶酶原活化物抑制剂-1（PAI-1）的蛋白表达水平，ELISA法检测细胞培养上清中前列环素（PGI2）和内皮素-1（ET-1）的量。结果 TNF-α上调了HUVECs中凝血相关因子NF-κB、vWF、PAI-1蛋白的表达水平，降低了细胞培养上清液中ET-1和PGI2的量（P < 0.05），使细胞中出现自噬小体，上调LC3Ⅱ/LC3I、Beclin-1蛋白表达水平，下调p62蛋白表达水平（P < 0.05）；钩藤碱能够促进HUVECs中自噬小体的产生，并在一定程度上调LC3Ⅱ/LC3I、Beclin-1蛋白表达水平，下调p62蛋白表达水平（P < 0.05），下调凝血相关因子NF-κB、vWF、PAI-1蛋白的表达水平，上调细胞培养上清液中ET-1和PGI2的量（P < 0.05）；自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤（3-MA）能够抑制钩藤碱的作用效果（P < 0.05）。结论 钩藤碱能够通过增强自噬降低TNF-α介导的HUVECs细胞凝血相关因子的表达，抑制血管内皮炎性损伤时血栓前状态的发生。
目的 基于细胞自噬探讨钩藤碱对肿瘤坏死因子-α（TNF-α）诱导的人脐静脉内皮细胞（HUVECs）损伤时血栓前状态的影响。方法 采用TNF-α诱导HUVECs制备损伤模型，透射电镜和免疫荧光技术观察HUVECs自噬水平的变化，Western blotting法检测自噬标记蛋白人微管相关蛋白轻链3Ⅱ（LC3Ⅱ）/LC3I、Beclin-1、p62和凝血相关因子核转录因子-κB（NF-κB）、血管假性血友病因子（vWF）和纤溶酶原活化物抑制剂-1（PAI-1）的蛋白表达水平，ELISA法检测细胞培养上清中前列环素（PGI2）和内皮素-1（ET-1）的量。结果 TNF-α上调了HUVECs中凝血相关因子NF-κB、vWF、PAI-1蛋白的表达水平，降低了细胞培养上清液中ET-1和PGI2的量（P < 0.05），使细胞中出现自噬小体，上调LC3Ⅱ/LC3I、Beclin-1蛋白表达水平，下调p62蛋白表达水平（P < 0.05）；钩藤碱能够促进HUVECs中自噬小体的产生，并在一定程度上调LC3Ⅱ/LC3I、Beclin-1蛋白表达水平，下调p62蛋白表达水平（P < 0.05），下调凝血相关因子NF-κB、vWF、PAI-1蛋白的表达水平，上调细胞培养上清液中ET-1和PGI2的量（P < 0.05）；自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤（3-MA）能够抑制钩藤碱的作用效果（P < 0.05）。结论 钩藤碱能够通过增强自噬降低TNF-α介导的HUVECs细胞凝血相关因子的表达，抑制血管内皮炎性损伤时血栓前状态的发生。
2017, 48(24):5230-5241.
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2017.24.027
摘要:
目的 拟利用藤石松Lycopodiastrum casuarinoides生药与饮片中微小RNA（miRNA）表达谱，鉴定其中热稳定存在的miRNA，为今后藤石松miRNA生物药效研究奠定基础。方法 选取藤石松的2种加工形态生药与饮片全株样品（包含茎、叶、分枝），采用Illumina HiSeqTM 2500高通量测序方法，根据miRNA家族在不同物种中的保守性，将miRBase数据库中的已知植物miRNA与通过高通量测序获得的藤石松miRNA序列进行比对，利用生物信息学方法，注释藤石松中的所有miRNA序列，并鉴定生药与饮片之间的差异表达miRNA分子，同时完成它们相应的人类靶基因预测，此外，对这些miRNA及靶基因进行GO和KEGG功能注释分析。结果 生药组与饮片组分别获得9 898 332、10 099 918条序列，其长度基本呈正态分布，而且均在21、24 nt的位置上形成2个峰值。两组显著差异表达的miRNA共计25个，其中22个表达上调，3个表达下调。GO分析结果表明miRNA靶基因涉及富集与结合、催化、分子转导等分子功能以及细胞调控、代谢过程等生物过程。KEGG通路富集分析表明靶基因多集中于癌症与免疫相关通路，如pathways in cancer、proteoglycans in cancer等信号通路。结论 首次揭示了藤石松生药与饮片的miRNA表达谱，存在潜在的可利用的植物来源的稳定miRNA分子，为进一步研究藤石松中与癌症或免疫相关的miRNAs分子药理功能奠定基础。
目的 拟利用藤石松Lycopodiastrum casuarinoides生药与饮片中微小RNA（miRNA）表达谱，鉴定其中热稳定存在的miRNA，为今后藤石松miRNA生物药效研究奠定基础。方法 选取藤石松的2种加工形态生药与饮片全株样品（包含茎、叶、分枝），采用Illumina HiSeqTM 2500高通量测序方法，根据miRNA家族在不同物种中的保守性，将miRBase数据库中的已知植物miRNA与通过高通量测序获得的藤石松miRNA序列进行比对，利用生物信息学方法，注释藤石松中的所有miRNA序列，并鉴定生药与饮片之间的差异表达miRNA分子，同时完成它们相应的人类靶基因预测，此外，对这些miRNA及靶基因进行GO和KEGG功能注释分析。结果 生药组与饮片组分别获得9 898 332、10 099 918条序列，其长度基本呈正态分布，而且均在21、24 nt的位置上形成2个峰值。两组显著差异表达的miRNA共计25个，其中22个表达上调，3个表达下调。GO分析结果表明miRNA靶基因涉及富集与结合、催化、分子转导等分子功能以及细胞调控、代谢过程等生物过程。KEGG通路富集分析表明靶基因多集中于癌症与免疫相关通路，如pathways in cancer、proteoglycans in cancer等信号通路。结论 首次揭示了藤石松生药与饮片的miRNA表达谱，存在潜在的可利用的植物来源的稳定miRNA分子，为进一步研究藤石松中与癌症或免疫相关的miRNAs分子药理功能奠定基础。
2017, 48(24):5242-5246.
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2017.24.028
摘要:
目的 建立角类动物药材的DNA提取方法，使提取的DNA质量满足PCR及测序要求，同时可用于陈旧动物角类样品的DNA提取。方法 为避免取骨塞部位用EDTA脱钙造成DNA提取不完全或DNA被破坏，取角质层部位，采用二硫苏糖醇（DTT）结合化学试剂盒中的细胞裂解液及蛋白酶K处理角质层样本，其余按试剂盒操作提取DNA。考察了取样量、DTT用量对角质部位DNA质量的影响。结果 确定了取样量为25 mg，DTT用量为20μL，角质细胞裂解完全，所有样品的DNA质量均可满足PCR要求。结论 建立的DNA提取方法，提取DNA完全，可标准化操作，可应用于多种动物角的提取。
目的 建立角类动物药材的DNA提取方法，使提取的DNA质量满足PCR及测序要求，同时可用于陈旧动物角类样品的DNA提取。方法 为避免取骨塞部位用EDTA脱钙造成DNA提取不完全或DNA被破坏，取角质层部位，采用二硫苏糖醇（DTT）结合化学试剂盒中的细胞裂解液及蛋白酶K处理角质层样本，其余按试剂盒操作提取DNA。考察了取样量、DTT用量对角质部位DNA质量的影响。结果 确定了取样量为25 mg，DTT用量为20μL，角质细胞裂解完全，所有样品的DNA质量均可满足PCR要求。结论 建立的DNA提取方法，提取DNA完全，可标准化操作，可应用于多种动物角的提取。
2017, 48(24):5247-5251.
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2017.24.029
摘要:
目的 研究不同预处理方式及培养温度对北柴胡种子萌发和幼苗生长的影响，为北柴胡人工栽培提供科学依据。方法 测定种子千粒质量、净度、含水量及吸水率，采用双层滤纸培养法，将预处理后的种子置于20℃恒温40%光照的培养箱中培养，不同培养温度处理组蒸馏水浸泡24 h后在对应温度的培养箱中培养，观察种子发芽势、发芽率、发芽指数、活力指数和幼苗根长及苗高的变化。结果 种子净度约91.51%，千粒质量为（2.83±0.03）g，吸水率为自然风干种子质量的2.24倍，含水量约7.3%。不同激素对种子的处理效果不同，其中0.6 mg/L 6-BA处理效果最好；水浴能普遍提高幼苗活力指数，40℃水浴显著促进了北柴胡种子萌发，幼苗生长；15℃环境下种子的萌发率最高，但幼苗根长、苗高较低。结论 北柴胡种子预处理方式为浸泡在0.6 mg/L 6-BA中，40℃水浴2 h，初始培养温度为15℃，萌发后移至20℃下继续培养，可有效提高种子萌发率及成苗率，对北柴胡的种子育苗及人工栽培具有重要指导意义。
目的 研究不同预处理方式及培养温度对北柴胡种子萌发和幼苗生长的影响，为北柴胡人工栽培提供科学依据。方法 测定种子千粒质量、净度、含水量及吸水率，采用双层滤纸培养法，将预处理后的种子置于20℃恒温40%光照的培养箱中培养，不同培养温度处理组蒸馏水浸泡24 h后在对应温度的培养箱中培养，观察种子发芽势、发芽率、发芽指数、活力指数和幼苗根长及苗高的变化。结果 种子净度约91.51%，千粒质量为（2.83±0.03）g，吸水率为自然风干种子质量的2.24倍，含水量约7.3%。不同激素对种子的处理效果不同，其中0.6 mg/L 6-BA处理效果最好；水浴能普遍提高幼苗活力指数，40℃水浴显著促进了北柴胡种子萌发，幼苗生长；15℃环境下种子的萌发率最高，但幼苗根长、苗高较低。结论 北柴胡种子预处理方式为浸泡在0.6 mg/L 6-BA中，40℃水浴2 h，初始培养温度为15℃，萌发后移至20℃下继续培养，可有效提高种子萌发率及成苗率，对北柴胡的种子育苗及人工栽培具有重要指导意义。
2017, 48(24):5252-5262.
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2017.24.030
摘要:
自噬是一种保守的细胞自我降解方式，是将受损细胞器或大分子物质由自噬泡包绕再通过自噬溶酶体降解再利用的过程。自噬在细胞的生物合成、营养和代谢平衡及应激与存活中具有重要作用。调控自噬能够引发多重级联反应，可以应用于肿瘤治疗。黄酮类化合物作用于不同的肿瘤细胞系会诱导作用各异的自噬。黄酮类化合物可以诱导自噬通过非凋亡或非典型凋亡途径较为直接地抑制肿瘤细胞增殖，也可以在诱导自噬后进一步引发凋亡等其他致死方式间接抑制肿瘤细胞增殖，或通过抑制保护性自噬从而强化其他形式的杀伤作用，但有时也会诱导肿瘤细胞发生保护性自噬，弱化细胞杀伤作用。对近10年来黄酮类化合物调控肿瘤细胞自噬的研究进展进行了综述，为中药调控细胞自噬的相关研究提供参考。
自噬是一种保守的细胞自我降解方式，是将受损细胞器或大分子物质由自噬泡包绕再通过自噬溶酶体降解再利用的过程。自噬在细胞的生物合成、营养和代谢平衡及应激与存活中具有重要作用。调控自噬能够引发多重级联反应，可以应用于肿瘤治疗。黄酮类化合物作用于不同的肿瘤细胞系会诱导作用各异的自噬。黄酮类化合物可以诱导自噬通过非凋亡或非典型凋亡途径较为直接地抑制肿瘤细胞增殖，也可以在诱导自噬后进一步引发凋亡等其他致死方式间接抑制肿瘤细胞增殖，或通过抑制保护性自噬从而强化其他形式的杀伤作用，但有时也会诱导肿瘤细胞发生保护性自噬，弱化细胞杀伤作用。对近10年来黄酮类化合物调控肿瘤细胞自噬的研究进展进行了综述，为中药调控细胞自噬的相关研究提供参考。
2017, 48(24):5263-5269.
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2017.24.031
摘要:
挥发油以其较低的毒副作用和较强的药理活性，受到越来越多的药学工作者的关注。一些挥发油除具有一定的药理作用外，其自身也可作为一种良好的透皮吸收促进剂，因而在外用制剂中得到了广泛的应用。挥发油作为透皮吸收促进剂的促透效果及作用机制根据挥发油的种类及活性成分的不同而有所差异。经查阅及总结近几年相关文献后，就挥发油的经皮吸收促进作用及作用机制进行综述，并针对当前挥发油在外用制剂应用研究中存在的问题进行了分析与展望，以期为后期研究提供一定借鉴。
挥发油以其较低的毒副作用和较强的药理活性，受到越来越多的药学工作者的关注。一些挥发油除具有一定的药理作用外，其自身也可作为一种良好的透皮吸收促进剂，因而在外用制剂中得到了广泛的应用。挥发油作为透皮吸收促进剂的促透效果及作用机制根据挥发油的种类及活性成分的不同而有所差异。经查阅及总结近几年相关文献后，就挥发油的经皮吸收促进作用及作用机制进行综述，并针对当前挥发油在外用制剂应用研究中存在的问题进行了分析与展望，以期为后期研究提供一定借鉴。
2017, 48(24):5270-5275.
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2017.24.032
摘要:
四氢小檗碱（THB）属于四氢异喹啉类生物碱，来源于罂粟科植物延胡索的块根，也可由小檗碱氢化合成。与小檗碱比较，THB同样具有多种显著的生物活性。目前研究发现THB具有抗高血压、抗心律失常、抗纤维性颤动、抗急性心肌梗死及对缺血再灌注损伤的治疗及保护作用。也有报道称THB具有抗氧化、调节胃肠功能等作用。通过检索Pubmed、CNKI等数据库，查阅国内外相关文献，旨在对THB的药理作用进行归纳总结，为THB的深入研究提供参考。
四氢小檗碱（THB）属于四氢异喹啉类生物碱，来源于罂粟科植物延胡索的块根，也可由小檗碱氢化合成。与小檗碱比较，THB同样具有多种显著的生物活性。目前研究发现THB具有抗高血压、抗心律失常、抗纤维性颤动、抗急性心肌梗死及对缺血再灌注损伤的治疗及保护作用。也有报道称THB具有抗氧化、调节胃肠功能等作用。通过检索Pubmed、CNKI等数据库，查阅国内外相关文献，旨在对THB的药理作用进行归纳总结，为THB的深入研究提供参考。
2017, 48(24):5276-5280.
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2017.24.033
摘要:
脑血管病具有高发病率、高致残率、高死亡率及高再发率的特点，是现代研究重点。现代研究表明桂枝茯苓方具有抗炎、免疫调节、抗氧化等作用，可以用于缺血性脑血管病与出血性脑血管病的治疗，但临床主要运用于缺血性脑血管病，其中又以急性脑梗死为主，并且取得较好的临床疗效。对桂枝茯苓方在脑血管病的临床应用及作用机制研究进展进行综述，以期为桂枝茯苓方在脑血管病的深入研究提供参考。
脑血管病具有高发病率、高致残率、高死亡率及高再发率的特点，是现代研究重点。现代研究表明桂枝茯苓方具有抗炎、免疫调节、抗氧化等作用，可以用于缺血性脑血管病与出血性脑血管病的治疗，但临床主要运用于缺血性脑血管病，其中又以急性脑梗死为主，并且取得较好的临床疗效。对桂枝茯苓方在脑血管病的临床应用及作用机制研究进展进行综述，以期为桂枝茯苓方在脑血管病的深入研究提供参考。
2017, 48(24):5281-5285.
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2017.24.034
摘要:
“入盐走肾”理论是指导中药炮制的基本理论之一。近些年来，学者围绕盐炙中药做了大量研究工作，有力地推动了对“入盐走肾”炮制理论的科学阐释。从“入盐走肾”角度就近些年来盐炙中药研究进展进行综述，并对目前研究中存在问题进行分析，提出了盐炙中药的研究思路。
“入盐走肾”理论是指导中药炮制的基本理论之一。近些年来，学者围绕盐炙中药做了大量研究工作，有力地推动了对“入盐走肾”炮制理论的科学阐释。从“入盐走肾”角度就近些年来盐炙中药研究进展进行综述，并对目前研究中存在问题进行分析，提出了盐炙中药的研究思路。
2017, 48(24):5286-5292.
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2017.24.035
摘要:
随着我国中药行业的迅速发展，大量中药药渣也随之产生，中药药渣中残留大量纤维素、蛋白质、脂质及多种微量元素，是一种可循环利用的生物质资源，可用于生产有新价值的产品。应用生物技术将中药药渣转化为生物有机肥料，提高中药药渣的利用率，是一种变废为宝的好方法。在查阅国内外文献的基础上，从生物有机肥研发的现实意义、中药药渣利用价值和主要方式、中药药渣生物有机肥肥效、发酵微生物菌群、功能微生物菌群等方面对利用中药药渣生产生物有机肥的研究进展进行综述。
随着我国中药行业的迅速发展，大量中药药渣也随之产生，中药药渣中残留大量纤维素、蛋白质、脂质及多种微量元素，是一种可循环利用的生物质资源，可用于生产有新价值的产品。应用生物技术将中药药渣转化为生物有机肥料，提高中药药渣的利用率，是一种变废为宝的好方法。在查阅国内外文献的基础上，从生物有机肥研发的现实意义、中药药渣利用价值和主要方式、中药药渣生物有机肥肥效、发酵微生物菌群、功能微生物菌群等方面对利用中药药渣生产生物有机肥的研究进展进行综述。
2017, 48(24):5293-5300.
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2017.24.036
摘要:
通过分析全球中药提取物专利数据，揭示中药提取物研究的发展情况和创新趋势，为行业发展提供参考。基于Innography平台，对中药提取物全球专利进行检索和统计分析，从专利权人分布、地区分布、技术热点主题，专利强度以及专利侵权风险等角度进行深入解读，并以红豆杉为例进行了专利文本聚类分析。全球中药提取物研究总体呈上升趋势，专利申请主要集中在中国、日本、韩国和美国。美国企业综合实力最强，高价值专利量最多，在红豆杉提取物技术中处于优势地位。近年来美国专利诉讼量有所下降，大部分诉讼原告是科技型中小企业。文本聚类结果显示红豆杉提取物涉及了化学合成技术。近几年我国中药提取物专利申请量飞速增长，但申请人分布比较分散，高质量专利的申请量明显弱于美国、日本等国家。国内企业要充分利用现代科学手段不断挖掘中药新的有效成分和提取新工艺，从根本上提高中药提取物行业的竞争力。
通过分析全球中药提取物专利数据，揭示中药提取物研究的发展情况和创新趋势，为行业发展提供参考。基于Innography平台，对中药提取物全球专利进行检索和统计分析，从专利权人分布、地区分布、技术热点主题，专利强度以及专利侵权风险等角度进行深入解读，并以红豆杉为例进行了专利文本聚类分析。全球中药提取物研究总体呈上升趋势，专利申请主要集中在中国、日本、韩国和美国。美国企业综合实力最强，高价值专利量最多，在红豆杉提取物技术中处于优势地位。近年来美国专利诉讼量有所下降，大部分诉讼原告是科技型中小企业。文本聚类结果显示红豆杉提取物涉及了化学合成技术。近几年我国中药提取物专利申请量飞速增长，但申请人分布比较分散，高质量专利的申请量明显弱于美国、日本等国家。国内企业要充分利用现代科学手段不断挖掘中药新的有效成分和提取新工艺，从根本上提高中药提取物行业的竞争力。
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