目的：建立江苏道地药材野马追中金丝桃苷、槲皮素和山柰素的定量测定方法。方法：采用Aligent Eclipse XDB-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm, 5μm), 乙腈-甲醇(10:1)-0.5%磷酸溶液为流动相, 进行梯度洗脱分离, 检测波长为370 nm。结果：金丝桃苷、槲皮素和山柰素在选定质量浓度范围内, 线性关系良好, 平均回收率分别为97.01%, 96.56%, 96.84%, RSD分别为1.2%, 1.1%, 1.2%。结论：该方法快速简便, 重现性好, 可以作为野马追中黄酮成分的测定方法, 更全面地控制野马追药材的质量。