2022/3/22 14:50:55 8true 2022/3/22 14:50:55 7true 目的 研究丹红化瘀口服液对视网膜缺血再灌注损伤大鼠模型视网膜中央静脉阻塞症的保护作用及机制。方法 通过对前房加压建立大鼠视网膜缺血再灌注损伤模型,给予阿司匹林和丹红化瘀口服液干预30 d。采用苏木素-伊红(HE)染色法观察大鼠视网膜组织病理变化;采用ELISA法检测大鼠血清中白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、IL-6、IL-10、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)水平及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)活性;采用免疫组化法检测大鼠视网膜组织缺氧诱导因子-1(hypoxia inducible factor-1,HIF-1)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(cystein-asparate protease-3,Caspase-3)、血管内皮生长因子(vascular endothelial grown factor,VEGF)和核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)p65蛋白表达情况。结果 模型组大鼠视网膜结构紊乱,神经节细胞层细胞减少,视网膜萎缩变薄;丹红化瘀口服液组大鼠视网膜组织结构及神经节细胞变性程度均有所改善。与模型组比较,丹红化瘀口服液组大鼠血清SOD、GSH-Px及CAT活性明显升高(P<0.05、0.01),血清MDA水平显著降低(P<0.05);血清IL-1β、IL-6和TNF-α水平显著降低(P<0.05、0.01),IL-10水平显著升高(P<0.05、0.01);视网膜组织HIF-l、Caspase-3、NF-κB p65和VEGF阳性表达均显著降低(P<0.05)。结论 丹红化瘀口服液对视网膜缺血再灌注损伤大鼠的视网膜结构具有改善作用,对神经节细胞具有保护作用,其作用机制可能与抑制视网膜组织细胞凋亡、抗炎和抑制新生血管生成有关。]]> 2022/3/22 14:50:55 6true 目的 研究丹红化瘀口服液对气滞血瘀证大鼠眼结膜微循环的改善作用及机制。方法 采用复合因素(夹尾、束缚、冰水浴等)建立气滞血瘀证大鼠模型,造模同时给予丹红化瘀口服液和阿司匹林进行干预,3周后观察大鼠眼结膜血管数、微血管交叉数、微血管管径及血流速度;采用ELISA法检测大鼠血清中6-酮-前列腺素F1α(6-keto-prostaglandin F1α,6-keto-F1α)、血栓素B₂(thromboxane B₂,TXB₂)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、环磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate,cAMP)、环磷酸鸟苷(cyclic guanosine monophosphate,cGMP)水平及诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)活性;采用微板法测定大鼠血清中一氧化氮(nitric oxide,NO)水平;采用Western blotting法检测大鼠眼结膜组织磷酸化cAMP反应元件结合蛋白(phosphorylated cAMP response-element binding protein,p-CREB)和iNOS蛋白表达情况。结果 与模型组比较,丹红化瘀口服液组大鼠微血管管径显著增大(P<0.05),血流速度加快(P<0.05、0.01),血管数和微血管交叉数显著增多(P<0.05、0.01);血小板最大聚集率及血清中TXB₂/6-keto-F1α、VEGF、cAMP/cGMP、NO水平和iNOS活性均显著降低(P<0.05、0.01);眼结膜组织p-CREB和iNOS蛋白表达水平显著降低(P<0.05、0.01)。结论 丹红化瘀口服液对气滞血瘀模型大鼠的眼结膜微循环有改善作用,其作用机制可能与抑制视网膜组织血栓形成、减少细胞自由基生成、抗炎和抑制血管生成有关。]]> 2022/3/22 14:50:55 5true 目的 采用G蛋白偶联受体及酶活检测实验方法,探究丹红化瘀口服液对视网膜中央静脉阻塞症关键靶点的调节作用,明确其作用机制。方法 选取磷酸二酯酶3A(phosphodiesterase 3A,PDE3A)、凝血酶(Thrombin)、内皮素转化酶1(endothelin converting enzyme 1,ECE1)、血管内皮生长因子受体2(vascular endothelial growth factor receptor 2,VEGFR2)、α1A肾上腺素受体(α1A adrenergic receptor,ADRA1A)为研究载体,通过胞内钙离子荧光检测和酶抑制剂检测技术评价丹红化瘀口服液及14个主要单体成分对PDE3A、Thrombin、ECE1、VEGFR2酪氨酸激酶和ADRA1A的抑制活性。结果 丹红化瘀口服液对以上5个靶点均有显著的抑制作用(P<0.001);丹酚酸D、丹酚酸B、丹参素、迷迭香酸和柚皮苷对PDE3A有显著的抑制作用(P<0.05、0.001);14个化合物对Thrombin均有显著的抑制活性(P<0.05、0.01、0.001);丹酚酸D、丹酚酸B、丹参素、迷迭香酸、阿魏酸、羟基红花黄色素A对ECE1有显著的抑制活性(P<0.05、0.01、0.001);丹酚酸D、丹酚酸B、丹参素、迷迭香酸、柠檬苦素对VEGFR2酪氨酸激酶有显著的抑制效果(P<0.01、0.001);柴胡皂苷a可显著抑制ADRA1A活性(P<0.001)。结论 ADRA1A、VEGFR2、PDE3A、Thrombin和ECE1可能为丹红化瘀口服液治疗中央静脉阻塞症的关键作用靶点,其药效物质基础可能为丹参酮II_A、丹酚酸B、丹酚酸D、丹参素、迷迭香酸、原儿茶醛、阿魏酸、川芎嗪、洋川芎内酯I、羟基红花黄色素A、苦杏仁苷、柴胡皂苷a、柚皮苷和柠檬苦素。]]> 2022/3/22 14:50:55 4true 目的 基于网络药理学探究丹红化瘀口服液治疗视网膜静脉中央阻塞症的作用机制。方法 选取丹红化瘀口服液中的21个入血成分为研究对象,借助TCMSP和CTD数据库预测化合物的作用靶点,利用MAS 3.0生物分子功能软件获取相关通路,通过FUNRICH软件对获得靶点进行基因本体(gene ontology,GO)功能富集分析,最后利用Cytoscape软件构建"化合物-靶点-通路-疾病"网络图。结果 21个成分可作用于104个蛋白靶点和45条通路,其中多个靶点和通路与视网膜静脉中央阻塞症相关。结论 丹红化瘀口服液通过作用于与凝血过程、新血管生成、血管舒张、免疫调节和炎症反应等相关的靶点,起到活血化瘀、行气通络的功效,从而治疗视网膜中央静脉阻塞症。]]> 2022/3/22 14:50:55 3true 目的 基于网络药理学方法探讨丹红化瘀口服液治疗深静脉血栓(deep vein thrombosis,DVT)的作用机制。方法 利用中药系统药理学技术平台数据库(TCMSP)获取丹红化瘀口服液的主要化学成分及作用靶点,利用Uniprot数据库对获取的作用靶点进行规范化处理;通过DisGeNet、GeneCards、OMIM、DrugBank数据库获取DVT相关靶点;利用Venny 2.1.0绘图网站构建Venn图,得到丹红化瘀口服液与DVT的交集靶点;应用String平台构建蛋白质-蛋白质相互作用(protein-protein interaction,PPI)网络;通过David数据库对交集靶点进行基因本体(gene ontology,GO)功能及京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)通路富集分析,使用微生信网站绘制结果气泡图,并利用KEGG Mapper平台制作通路机制图;相关结果采用Cytoscape 3.7.2软件进行可视化研究及网络拓扑结构分析。结果 经过数据库分析共筛选丹红化瘀口服液化学成分130个,潜在作用靶点268个,其中涉及DVT靶点136个。"中药-成分-疾病靶点"网络显示,槲皮素、木犀草素、山柰酚等是丹红化瘀口服液治疗DVT的主要活性成分,转录因子AP-1(transcription factor AP-1,JUN)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、IL-6、信号传导与转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)等是丹红化瘀口服液治疗DVT的核心靶点。通过GO功能富集分析得到211条生物进程条目,124条分子功能条目,72条细胞成分条目。通过KEGG通路富集分析,得到3条与DVT相关的通路,即胞内磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol-3-kinase,PI3K)-蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)通路、TNF信号通路、缺氧诱导因子-1(hypoxia-inducible factor-1,HIF-1)信号通路。结论 丹红化瘀口服液可通过多成分、多靶点和多通路发挥治疗DVT的作用,为拓宽其临床用途提供基础。]]> 2022/3/22 14:50:55 2true 目的 建立一测多评(QAMS)与指纹图谱结合的方法评价丹红化瘀口服液(Danhong Huayu Oral Solution,DHOS)。方法 采用Waters XBridge C₁₈色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),以乙腈-0.5%甲酸水溶液进行梯度洗脱,柱温30℃,检测波长286 nm,体积流量1 mL/min。结果 建立了DHOS HPLC指纹图谱,确定了18个共有峰,并指认了其中丹参素钠、原儿茶醛、丹酚酸D、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、丹酚酸B、丹酚酸A共8个共有峰。通过相似度评价、主成分分析对10批DHOS HPLC指纹图谱进行综合分析,10批制剂的相似度计算均大于0.9,找到影响指纹图谱的主要成分为丹酚酸A、丹酚酸D等。以新橙皮苷为内参物,建立了可同时测定DHOS中丹参素钠、原儿茶醛、丹酚酸D、柚皮苷、丹酚酸B含量的一测多评法,6种主要成分QAMS法与外标法的测定结果间无显著差异,10批DHOS中丹参素钠、原儿茶醛、丹酚酸D、柚皮苷、新橙皮苷、丹酚酸B质量浓度分别为3.853 2~4.390 4、0.264 0~0.425 7、0.560 7~0.855 0、0.889 2~1.797 8、0.754 2~1.091 8、0.178 2~0.382 4 mg/mL。结论 建立DHOS的HPLC指纹图谱评价方法和一测多评含量测定法,为DHOS提供了切实可行的整体质量评价方法。]]> 2022/3/22 14:50:56 1true