目的 对野生菱和栽培菱种rDNAITS片段进行分析,探讨该片段在两大群体中的系统学及鉴别研究意义。方法 对菱的rDNAITS区进行了PCR扩增、测序,运用Clustal、Mega2.0等软件对ITS区进行序列分析鉴别。结果 获得rDNAITS1、ITS2和 5.8SrDNA完整序列,10个居群菱的ITS1与ITS2序列的长度分别为 2.34～2.36bp和 2.2 0～ 2.2 1bp,5.8S区均为 16.4bp,不同居群的碱基差异为 0.2 2%～ 2.94%。变异位点数为 16个,信息位点数 6个。用NJ法根据ITS序列数据构建系统发生树。结论 尽管菱属各居群间rDNAITS的差异百分率较小,其亲缘关系较近,但根据ITS序列的特征可以很好地鉴别野生菱、栽培菱,菱属植物有可能都起源于同一种野生类居群。]]> 2015/1/7 10:15:48 2774true 目的 建立甘肃当归药材HPLC指纹图谱。方法 以联苯为参照物,采用C18(2 5 0mm× 4 6mm,5 μm)色谱柱,以甲醇 水 (水中含体积比为 0.5%醋酸 )为流动相,梯度洗脱,体积流量 0.6mL/min,检测波长为 2.75nm,参比波长为 4.0 0nm。结果 精密度、重现性、稳定性试验中共有峰相对峰面积、相对保留时间的RSD均小于 50%;不同产地当归相似度大于 98.5%。结论 该方法简便、实用、可靠,可以作为评价当归药材的质量标准]]> 2015/1/7 10:15:48 2773true 目的 对不同植物激素及其配比对黄花乌头体细胞胚胎诱导及植株再生进行研究,为药用植物黄花乌头的资源开发提供理论依据。方法 以黄花乌头的茎、叶、胚轴、胚根和子叶为外植体考察不同植物激素对黄花乌头愈伤组织诱导、体细胞胚胎发生及植株再生的影响。结果 外植体接种于MS +2,4 D 1mg/L +6 BA 0 5 mg/L的培养基上愈伤组织诱导率最高,愈伤组织在MS +2,4 D 0 2mg/L +6 BA 0 5mg/L的培养基上连续继代几次后,分化出淡绿色具有圆锥状或原球状突起的胚性愈伤组织。胚性愈伤组织能够在MS+6 BA 2mg/L的培养基上形成不定芽,该芽能够在MS +IBA 0 5mg/L的培养基上生根,形成完整的再生植株。结论 利用体细胞胚胎发生技术可以成功地得到再生植株,从而为濒危植物黄花乌头的资源开发和保护提供新途径]]> 2015/1/7 10:15:49 2772true 目的 研究白花曼陀罗细胞悬浮培养合成生物碱。方法 在MS液体培养基上悬浮培养细胞生产生物碱,以碳源、pH值、接种量等为影响因子进行研究。结果 蔗糖为最佳碳源,细胞接种量以鲜重 1 5～ 2 0g/L、培养液初始pH值 5 5～ 6 0对曼陀罗悬浮培养细胞生长和生物碱合成最有利,加入苯丙氨酸能促进生物碱的合成。结论 白花曼陀罗细胞悬浮培养能有效地合成生物碱]]> 2015/1/7 10:15:49 2771true 目的 通过发生规律的研究,为罂粟霜霉病的综合防治提供依据。方法 定期调查系统型和非系统型病株率,用挂片法捕捉并镜检空中罂粟霜霉病菌孢子囊Peronosporaarborescens密度。结果 苗期是罂粟霜霉病系统型病株出现的高峰期,随罂粟植株的生长,系统型病株出现率逐渐减少。再侵染主要发生在成株期,可导致罂粟霜霉病在 8～ 9d内迅速流行。连作年限越长,系统型病株率越高,连作 10余年后,系统型病株率可高达 10.6%。孢子囊通过气流传播引起再侵染,其潜育期为 6d,主要在晚间和早上成熟并传播。结论 罂粟霜霉病发病规律的研究为该病害的综合防治提供了理论依]]> 2015/1/7 10:15:49 2770true [1].香草醛广泛应用于香料工业,此外有镇静和抗癫痫的作用,又称抗癫香素.文献报道阿魏酸的含量测定方法主要采用薄层扫描法^[2,3]、高效液相法^[4]和毛细管电泳法^[5].本实验采用反相高效液相色谱法测定川芎药材中阿魏酸含量,同时建立了香草醛的含量测定方法.]]> 2015/1/7 10:15:49 2769true 中就有记载.主要用其叶,可清热解毒、利湿退黄,主治急性痢疾、黄疸性肝炎、火眼等^[1].]]> 2015/1/7 10:15:49 2768true 2015/1/7 10:15:49 2767true 目的 利用银杏细胞固定化培养法生产银杏内酯。方法 以聚胺酯泡沫为固定化材料,考察各种因素对固定化银杏细胞培养的影响。结果 用高密度、小孔径聚胺酯材料 P2 9,将其切成 0.5 cm× 0.5 cm× 0.5 cm的小块,每瓶加 0.72 g载体,加 6 5 m L 液体培养基 (MS+2,4 - D8.0 mg/L+KT0.0 4 mg/L+NAA0.4 mg/L),接种鲜重2 0 0 g/L,可得到高达 71%的固定化比例,载体上细胞密度达到干重 2 2 mg/cm³。结论 以聚胺酯泡沫为固定化材料进行银杏细胞固定化培养具有方法简便、成本低廉、细胞固定化比例高等优点,具有潜在的应用价值]]> 2015/1/7 10:16:01 2766true 目的 研究石斛属植物 DNA指纹图谱,初步探讨 AFL P分子标记技术在石斛地道性鉴别上的应用。方法采用扩增片段长度多态性 (AFL P)技术对石斛属内石斛组 4个种和一个外类群种进行基因组 DNA多态性分析。结果 从 6 4对引物组合中选出 5对引物组合构建了 5个种的 DNA指纹图谱。通过聚类分析,石斛属 4种植物聚成一个大类,彼此关系得到了很好的分辨,并获得 bootstrap校验的有力支持。结论 AFL P技术可用于药用石斛DNA指纹图谱研究]]> 2015/1/7 10:16:01 2765true 目的 探索铁皮石斛与绞股蓝原生质体杂交融合,为中药材的改良提供新途径。方法 两种原生质体通过PEG法进行成对融合,融合子培养在添加 BA2 mg/L 及 NAA1m g/L 改良的 MS液体培养基中。结果 分离得到了高产量、活力强、纯度高的铁皮石斛及绞股蓝叶肉原生质体。结论 融合获得了有活力的杂种细胞,培养 3d后,杂种细胞开始分裂,共进行了 3次分裂]]> 2015/1/7 10:16:01 2764true 目的 研究肉苁蓉药材与盐生肉苁蓉培养细胞的苯乙醇苷类成分差异。方法 利用傅里叶变换红外光谱(FTIR)和 HPL C技术进行成分对比分析。结果 FTIR的分析结果表明,盐生肉苁蓉培养细胞的红外指纹谱图与肉苁蓉药材具有一定相似性 ;HPL C的分析结果表明,盐生肉苁蓉细胞中所含的主要成分和肉苁蓉药材相似,只是含量有差异。结论 从整体上看,盐生肉苁蓉培养细胞中所含成分种类较多,且大部分含量较高,其中洋丁香酚苷(类叶升麻苷 )和松果菊苷的含量大幅度高于肉苁蓉药材]]> 2015/1/7 10:16:01 2763true [1].五味子药材主要含有挥发性成分、木脂素类及酸性成分.]]> 2015/1/7 10:16:01 2762true 列为上品.<中华人民共和国药典>2000年版一部规定秦皮为木犀科植物苦枥白蜡树Fraxinus rhynchophylla Hance、白蜡树F.chinensis RoXb.、尖叶白蜡树F.szaboana Lingelsh.或宿柱白蜡树F.stylosa Lingelsh.的干燥枝皮或干皮.]]> 2015/1/7 10:16:02 2761true [1]、绿原酸类化合物^[2]及木脂素类成分^[3],并发现其水溶性部位对心血管系统有良好的作用,能明显增加冠脉流量,而对心率的影响不明显,并对心肌缺氧有保护作用,还能降低麻醉猫的血压,抑制麻醉猫在结扎左冠状动脉前降支血清磷酸激酶(CPK)活性的升高,静脉注射以后还可产生短暂但明显的降压作用^[4].]]> 2015/1/7 10:16:02 2760true [1]提取得到的,它可提高血小板cAMP含量,具有抑制血栓形成的作用^[2],利用降香挥发油开发研究新剂型有很高的社会和经济价值.]]> 2015/1/7 10:16:02 2759true ),入药始见于<雷公炮制论>,传统上用于瘀诸症,可活血散瘀,祛风通络,清热利湿,解毒.根据<中华本草>记载:虎杖"主治妇女闭经,产后恶露不下,症瘕积聚,跌扑损伤,风湿痹痛,湿热黄疸,淋浊带下,疮疡肿毒,毒蛇咬伤,火烫伤".]]> 2015/1/7 10:16:02 2758true ,列为上品.菟丝子味辛甘,性平.入肝、肾经.补肝肾,益精髓.历来被医家视为"补脾肾肝经之要药"."菟丝子正补心、肝、肾之圣药,况又不杂之别味,则力尤专,所以能直入三经以收全效也".菟丝子做为传统的滋补壮阳药已应用了2000年.近来的药理学研究表明对心血管系统有很好的作用,并呼吁学者开发成治疗心脑血管系统的药物.]]> 2015/1/7 10:16:02 2757true .原名叫神仙对坐草,因其叶状如铜钱而名"金钱草".]]> 2015/1/7 10:16:02 2756true 目的 分析栽培管花肉苁蓉 Cistanche tubulosa的化学成分及其不同生长时间、部位化学成分的变化。方法采用 HPL C法分析不同样品的指纹图谱。结果 不同生长时间、不同部位、栽培品与野生品、花期各部位之间苯乙醇苷类成分的种类基本一致 ,只是各成分的含量有明显的差异。结论 管花肉苁蓉的栽培时间应在 3年以上 ;采挖时间应严格控制在开花以前 ;栽培管花肉苁蓉的质量仍不如野生品 ,应加强栽培技术的研究 ,提高栽培品中有效成分的含量]]> 2015/1/7 10:16:57 2755true 目的 了解肉苁蓉花粉在自然条件下的寿命。方法 采用花粉离体萌发法 ,对自然生长的肉苁蓉花粉生活力进行测定研究。结果 肉苁蓉花粉萌发的最佳条件为初花期花粉 ,在恒温 2 5℃ ,以 0 .6 %琼脂 +10 %蔗糖 +0 .1%硼酸为离体培养基进行培养 ,有利于花粉的萌发和花粉管的生长 ;低温 (4℃ )条件下可进行短期的花粉贮藏 ,延长花粉的寿命。结论 为采用肉苁蓉花粉进行优良种质资源的保存和人工育种工作提供了理论依据]]> 2015/1/7 10:16:57 2754true 目的 探索喜树的人工快繁。方法 以喜树幼苗的茎尖作为外植体 ,培养在附加不同激素的培养基上。结果 以 B5培养基附加 6 - BA 0 .2 m g/ L ,IBA 0 .0 5 mg/ L和 AS (afenine sulfate,10 mg/ L )对丛生芽的诱导与增值效果最佳 ,而附加 IBA0 .5 mg/ L,KT0 .1mg/ L 和 AS10 m g/ L 的生根效果最佳。试管苗移栽到珍珠岩 -土壤(3: 7)的基质中生长良好 ,成活率高达 96 %。结论 为喜树的开发利用提供了一条新途径。]]> 2015/1/7 10:16:58 2753true 目的 研究丽江山慈菇 Iphigenia indica遗传变异及遗传结构。方法 采用 RAPD技术 ,对产自云南的 3个居群进行 DNA指纹检测。结果 筛选出 2 0个随机引物 ,对 3居群扩增共产生 12 0条 DNA片段 ,在 0 .2～ 3kb,其中 71条谱带具有遗传多态性 ,约占 5 9.17% ,平均每个引物扩增的 DNA带数是 3.5 5。 Shannon index在丽江玉龙雪山居群 (Ca)为 0 .1994 ,大理宾川鸡足山居群 (Cb)为 0 .2 0 0 7,丽江永胜片角镇居群 (Cc)为 0 .2 5 4 8;居群平均水平为 0 .2 183,物种水平为 0 .2 886。 Nei’s genetic identity在 Ca和 Cb居群间为 0 .930 9;在 Ca和 Cc居群间为 0 .932 7;在 Cb和 Cc居群间为 0 .94 6 6。居群间基因分化系数 Gst为 0 .2 0 4 4。结论 RAPD分析可为丽江山慈菇保护对策和措施的制定 ,遗传育种和 GAP种植方法及标准的制定 ,提供理论依据和基础资料]]> 2015/1/7 10:16:58 2752true 目的 建立广金钱草中总黄酮的含量测定方法。方法 选用测定波长 2 72 nm,以 6 - C-葡萄糖 - 8- C-木糖洋芹素 (vicenin- 2 )为对照品 ,采用柱色谱 -紫外分光光度法对不同来源的广金钱草进行了总黄酮的含量测定。结果 vicenin- 2在 10 .8～ 2 5 .2 μg/ m L 具有良好的线性关系 ,回归方程为 Y=0 .0 30 9X+0 .0 16 (r=0 .9999) ,平均回收率为 10 0 .82 % ,RSD为 1.30 %。结论 该方法操作简便 ,结果准确 ,重复性好 ,可用于广金钱草的质量控制]]> 2015/1/7 10:16:58 2751true 中已有记载,陈藏器谓:"乌药生岭南、邕州、容州及江南,树生似茶,高丈余,一叶三桠,叶青阴白.根状似山芍药及乌樟,根色黑褐."苏颂谓:"以天台者为胜".主产于浙江、湖南、安徽、广东、广西等地.以浙江台州、金华所产品质最佳,奉为地道药材,故称"天台乌药"或"台乌药".1995年<中华人民共和国药典>收录本品[1].乌药功效主要为顺气、散寒、止痛.用于脘腹胀痛、小便频多、痛经、疝气等.广西有用同属植物白胶木L.chunii Merr.作乌药用.各地有用同属中根有肥大珠状的作乌药用.另外,由于乌药取于植物乌药的块根,而作为灌木的植物生长相对比较慢,加之用量增大,造成药源紧张,故各地均有以茎及直根入药的,造成乌药中大量掺杂有乌药的直根及茎.为了保证用药的安全、有效,笔者做了乌药的显微鉴定.通过本实验可看出乌药的块根、直根、茎的组织构造及粉末组成是有区别的,从而为乌药的鉴别提供依据^[1,2].]]> 2015/1/7 10:16:58 2750true [1-3].分布于云南的主要有岩白菜、舌岩白菜^[4].近期发现的还有天全岩白菜和淡红岩白菜(新变种)^[5].近10年来,因生态环境遭到破坏及人为过度采挖,岩白菜资源濒临枯竭.为满足市场需求和有效地保护资源,笔者开展了野生岩白菜驯化栽培研究.]]> 2015/1/7 10:16:58 2749true 2000年版仅有TLC鉴别,笔者采用HPLC法测定了桂枝中桂皮醛和桂皮酸的含量,并测定了4个市场样品.结果表明该法简便、准确,重现性好,可有效地控制桂枝药材的质量.]]> 2015/1/7 10:16:58 2748true ,列为中品^[1].由于历史原因,造成现代中医处方、药剂人员调剂名不符实,南北处方用药也较混乱.长江以北大部分地区以菊花植物苦菜、苣荬菜应用居多;长江以南如江、浙、广东以十字花科植物菥蓂应用者多,而败酱科植物白花败酱、黄花败酱则应用者少.]]> 2015/1/7 10:16:59 2747true 并列为下品.具有降气、消痰、行水、止呕等功效,中医用于风寒咳嗽、痰饮蓄结、胸膈痞满、喘咳痰多、呕吐噫气、心下痞硬等症.因其同科属的植物有10多种,历史上各地用药习惯有不同,故市售品混淆现象极为严重,特别是以条叶旋覆花冒充旋覆花入药,经常造成呕吐等中毒事件,应引起足够的重视.另外,市售品多数较小,直径不逾1 cm者居多,多与<中华人民共和国药典>(简称药典)规定的性状大小不符.为此,笔者根据有关资料,结合多年实践经验,试从性状上找出最普通的鉴别方法,再根据实况和现代科技的发展提出进一步健全质量标准的设想,供旋覆花真伪优劣检定和修订标准参考.]]> 2015/1/7 10:16:59 2746true 目的 建立鸡血藤的高效液相色谱指纹图谱,以评价鸡血藤的质量。方法 用 HPL C法获得鸡血藤药材的色谱图,再用聚类分析方法进行考察。结果 鸡血藤共有 11个峰,其中非共有峰 6个,共有峰 5个,共有峰的相对保留时间分别为 :0.0 4 6,0.6 6 4,1.0 0 0,1.198,1.383;相对峰面积分别为 :0.819,0.2 2 1,1.0 0 0,0.331,0.4 5 8。鸡血藤及其混淆品种的色谱指纹图谱存在明显差异,所提取的 11个色谱峰可作为指纹特征。结论 HPL C色谱指纹图谱分析技术可用于鸡血藤药材的鉴别。]]> 2015/1/7 10:16:43 2745true 目的 探讨不同产地牛膝的 ITS的序列变异,为鉴别牛膝提供 DNA分子标记。方法 利用特异性 PCR技术对牛膝的 r DNA ITS区碱基序列进行测定,报道了牛膝的 r DNA ITS区的碱基序列。结果 得到核糖体 DNA中的 ITS及 5.8S r DNA完全序列,18S和 2 6 S r DNA部分序列,共约 6 5 0 bp。牛膝与川牛膝及土牛膝碱基序列有明显差异,不同产地、不同栽培品种牛膝碱基序列无差异。结论 此法可用于牛膝种间及真伪品鉴别。]]> 2015/1/7 10:16:43 2744true 目的 揭示盾叶薯蓣根状茎不同部位和不同生长期中皂苷的积累与分布以及薯蓣皂苷元含量的差异。方法 组织化学和高效液相色谱法 (HPL C)。结果 皂苷主要分布在基本组织内,有小维管束分布的区域皂苷积累最丰富,薯蓣皂苷元的含量也最高 ;其次是无维管束分布的区域 ;有大维管束分布的区域皂苷积累最少,薯蓣皂苷元的含量最低。结论 雄株 3个区域的皂苷元含量均明显的高于雌株,雌雄同株其含量界于雄株和雌株之间。]]> 2015/1/7 10:16:43 2743true 目的 对影响青蒿丛生芽诱导因素进行基础性研究。方法 把常规的植物组织培养技术应用于调控青蒿中次生代谢产物青蒿素的生物合成代谢。结果 青蒿的基因型,激素和基本培养基对丛生芽的发生有显著影响,而光强在 10 0 0～ 6 0 0 0 lx和温度在 2 0℃～ 30℃对丛生芽的发生影响不大 ;在 5种基因型的青蒿中,0 2 5丛生芽的诱导率最高 ;诱导丛生芽的激素组合是 6-BA2.0 mg/ L 和 NAA0.15 mg/ L;另外,离子在青蒿丛生芽的诱导和青蒿素的生物合成过程中起着非常重要的作用。结论 组织培养条件下,青蒿丛生芽的诱导及青蒿素的生物合成可以通过理化因子有效地进行调控。]]> 2015/1/7 10:16:43 2742true 目的 探讨剑叶龙血树血竭的形成与微生物活动之间的关系。方法 用分离自剑叶龙血树根部的内生真菌 95 6 8D镰孢霉接种于剑叶龙血树材质 (经灭活处理)。结果 保湿培养 4～ 5个月后,在接种部位有红色血脂颗粒形成,经 UV、IR光谱分析及抗菌活性实验,初步证实该血脂与来自剑叶龙血树的天然血竭无本质差异。结论 特异性真菌作用于龙血树材质可促成血竭的形成。]]> 2015/1/7 10:16:44 2741true 2000年版一部规定辛夷为木兰科植物望春花Magnolia biondii Pamp.、玉兰M.denudata Desr.和武当玉兰M.sprengeriPamp.的干燥花蕾.其中望春花蕾为辛夷的主流品种.其含有望春花黄酮醇苷Ⅰ等化学成分^[1],但其含量测定方法至今未见报道.本实验建立了HPLC法测定辛夷主流品种望春花蕾中望春花黄酮醇苷Ⅰ含量的方法,并用该法测定了11批望春花蕾样品中望春花黄酮醇苷Ⅰ的含量,为评价和控制辛夷药材的内在质量提供参考。]]> 2015/1/7 10:16:44 2740true [1].甘草苷和异甘草苷是甘草中的两个重要黄酮类化合物,药效显著^[2],具有抗溃疡、抗艾滋病病毒等作用[3,4].甘草苷或异甘草苷的含量测定方法已有文献报道^[5～7],但两种活性成分同时用HPLC方法的测定未见报道.本实验以RP-HPLC同时测定甘草中的甘草苷和异甘草苷的含量.结果表明,甘草苷和异甘草苷在同一色谱条件下均得到较好分离,并可进行含量测定。]]> 2015/1/7 10:16:44 2739true [1～4].香加皮的主要化学成分为10余种杠柳苷,其中杠柳毒苷又名杠柳苷G、萝藦毒苷(periplocin,periploside G)为强心苷成分,其作用与毒毛旋花子苷相似.<中华人民共和国药典>2000年版中香加皮的含量测定项下采用4-甲氧基水杨醛为指标成分.由于杠柳毒苷与香加皮临床应用的功效具有较好的对应关系,本实验拟建立以杠柳毒苷为指标成分的HPLC含量测定方法,作为香加皮的质量控制标准。]]> 2015/1/7 10:16:44 2738true 目的 筛选适宜的铁皮石斛不定芽增殖与生根培养基,选择适合继代扩繁的不定芽高度。方法 在相同培养条件下,不同高度的不定芽在不同的增殖与生根培养基中生长,对结果所产生的不同生长状况,进行显著性差异检验及综合分析。结果 不同高度的不定芽之间有显著差异,不同的增殖与生根培养基之间有显著差异。结论 铁皮石斛继代以 (1.2۪ .1) cm高的不定芽为宜,增殖培养基以 MS添加 BA1.0 m g/ L、NAA0 .2 mg/ L 为佳,生根培养基以 1/ 2 MS添加 NAA 0 .2 mg/ L为佳。]]> 2015/1/7 10:17:44 2737true 目的 通过防风种子提取物对白菜、小麦、防风抑制活性的研究,探讨防风种子发芽率低,播种后出苗缓慢的原因。方法 制备防风种子粗提物并测定其对白菜、小麦、防风种子萌发和幼苗生长的抑制活性 ;制备粗提物的乙醚萃取液和乙醚萃取残余液并分别进行纸色谱分离,测定各区段的活性 ;用不同溶剂和温水 (4 1℃、4 5℃ )浸种,测定各批次浸泡液的抑制活性。结果 防风种子中存在活性较强的内源抑制物质,且其乙醚萃取液在 Rf 0 .6区段对白菜种子萌发抑制活性最强 ;防风种子粗提物对防风种子萌发和幼根生长也有较强的抑制活性 ;防风种子粗提物对小麦幼苗的地上部分生长有较强抑制作用 ;温水浸种可除去大部分内源抑制物质。结论 防风种子内源抑制物质是导致防风种子发芽率低、播种后出苗缓慢的主要原因。]]> 2015/1/7 10:17:44 2736true 目的 对比分析国家一类动物药塞隆骨和禁用传统中药材虎骨中的 19种矿物质元素的含量。方法 骨骼样品经灰化或消解处理后,采用原子吸收光谱法、氢化物原子荧光光谱法、催化极谱法等分析方法测定矿物质元素。结果 两种动物骨骼中元素含量差异显著,塞隆骨 11种元素高于虎骨,特别是 Cu、Zn、Fe、Mn、Se等生命活动必需微量元素塞隆骨极为显著地高于虎骨,而组成骨骼的主要成分 Ca、P则为虎骨高于塞隆骨。矿物质元素在头骨、脊梁骨和腿骨中分布非常不平衡,多数元素以头骨中分布最为丰富,而 5种常量元素 Ca,P,Na,Mg,K的含量为腿骨 >头骨 >脊梁骨。骨骼中主要成分 Ca和 P的存在形式主要为羟磷灰石 Ca1 0 (PO4 ) 6 (OH) 2 。结论 塞隆骨骨骼中的矿物质元素与虎骨有可比性,必需微量元素塞隆骨明显优于虎骨。]]> 2015/1/7 10:17:44 2735true 目的 考察不同产地和植株年龄对苦参干燥根中氧化苦参碱含量的影响,为选择合适的大规模人工种植场地、合理的管理及物种保护提供可考的依据。方法 采用 HPL C法测定苦参干燥根中氧化苦参碱的含量并采用SPSS 9.0及 Microsoft Excel软件进行数据统计和分析。结果 从 17个省、自治区采集的苦参根样品中氧化苦参碱的含量差异很大 (0 .4 94 %～ 4 .12 7% ),其中以黑龙江省采集的样品中氧化苦参碱的平均含量最高 (3.4 93% )。方差分析表明采自北方寒冷干燥的高纬度地区的样品中氧化苦碱的含量明显高于采自南方温暖潮湿的低纬度地区的样品。而且,植株年龄与苦参干燥根中氧化苦参碱含量呈相关。结论 不同产地和植株年龄均会明显影响苦参根中氧化苦参碱的含量 ;生长在寒冷干燥的高纬度地区的苦参根中氧化苦参碱含量较高。]]> 2015/1/7 10:17:45 2734true 目的 研究西洋参、紫苏籽和薏苡根水提物的化感作用。方法 以白菜和西洋参为测试植物,观察西洋参、紫苏籽和薏苡根水提物对其种子萌发和活力、存苗率、幼苗初期生长的影响。结果 西洋参茎叶水提物与高于 1%浓度的须根水提物严重抑制白菜和西洋参的种子萌发及活力、存苗率、幼苗初期生长,而紫苏籽和薏苡根的水提物则促进实验植物幼苗根和芽的生长。高浓度的薏苡根水提物可使西洋参的存苗率显著降低。结论 3种药用植物中存在活性较强的化感物质,其化感作用的正负效应和强度与它们的水提物浓度及植物受体种类有关。]]> 2015/1/7 10:17:45 2733true [1～3], 自古以来一直作为清热解毒药使用。据考证^[4] 《本草纲目》、《本草述钩元》和《植物名实图考》所指的大青即为马鞭草科植物大青C.cyrtop hyl-lum Turcz., 认为本种应是大青之正品。]]> 2015/1/7 10:17:45 2732true [1]。近几年有报道从细梗香草中分离得到香草内酯, 香草素、胡萝卜苷、琥珀酸、槲皮素、3', 4', 5,5', 7-五羟基黄酮、槲皮素-3-O -β-D -吡喃葡萄糖苷和山柰素^[2]; 还含挥发油等^[3]。]]> 2015/1/7 10:17:45 2731true [1] 被广泛用于中药材和中药制剂鉴别和指纹图谱的研究。有些中药材、中成药质量标准中的含量测定及薄层鉴别, 存在方法不合理, 操作复杂繁琐, 重现性差的现象。]]> 2015/1/7 10:17:45 2730true 目的 建立和优化黄芩组织培养克隆化快速繁殖技术,为保护黄芩的野生资源,发展人工资源和探讨育种新途径奠定基础。方法 在组织培养条件下进行黄芩愈伤组织的诱导、分化,试管苗复壮和生根等一系列技术优化试验。结果 黄芩试管苗的节、节间都很容易诱导出愈伤组织,诱导率均达 10 0 %,而叶片的愈伤组织诱导率低,PP333对黄芩试管苗的生长有着显著的矮壮作用。结论 黄芩试管苗的节是诱导愈伤组织的理想外植体,在培养基中适当添加 PP333能显著改善试管苗的素质 ;PP333与激素的配合使用,能十分有效地调控黄芩愈伤组织的分化、试管苗的生长与生根,并能显著提高移栽成活率。]]> 2015/1/7 10:17:30 2729true 目的 揭示山银花茎、叶及花中绿原酸的分布状况,为确定金银花药材合理的药用部位及良种选育特征提供依据。方法 利用荧光显微镜观察山银花茎、叶及花中有效成分绿原酸的分布规律。结果 绿原酸在花中主要分布于萼筒 -子房壁外表皮细胞及其下 3～ 5层细胞、花冠外表皮细胞及其下 1～ 2层细胞和花冠内表皮纤毛细胞 ;在叶片中主要分布于上表皮细胞和下表皮纤毛细胞 ;在茎中仅零星分布于次生韧皮部细胞。结论 花中绿原酸分布最为广泛、含量最丰富,叶片次之,茎中最少 ;花冠内表皮纤毛和花冠外表皮腺毛的密集程度,以及萼筒和花冠的长度可作为山银花的育种特征。]]> 2015/1/7 10:17:31 2728true 目的 筛选灯盏花优质种源,研究其种植技术及栽培习性。方法 观测了 6份灯盏花种源的主要经济性状,种子发芽、出苗与大田生育进程及其不同生育期的灯盏花乙素含量。结果 种源 QS- 3,QS- 6和 QS- 1在产量和含量方面表现较好,其大棚种植条件下的产量均高于露地 ;种子发芽率和出苗率均较低,出苗时间较长 ;引种栽培后的灯盏花个体较野生条件下大 ;不同生育期的灯盏花乙素含量不同,其中初花期含量最高。并针对上述特征,提出相应栽培技术措施。结论 通过人工种植灯盏花前景是广阔的。]]> 2015/1/7 10:17:31 2727true 目的 对植物药多舌飞蓬 Erigeron multiradiatus进行系统的生药学研究。方法 采用性状鉴定、显微鉴定、高效液相色谱鉴定。结果 详细描述了多舌飞蓬的生药性状、横切面组织构造及粉末特征和高效液相色谱法鉴定研究结果。结论 所得结果可以为生药的鉴定,质量标准的制定及进一步开发利用多舌飞蓬提供依据。]]> 2015/1/7 10:17:31 2726true 目的 研究 CO₂ 激光对大叶龙胆种子萌发及幼苗生长的影响。方法 使用不同剂量的 CO₂ 激光辐照大叶龙胆湿种子,观察不同光照条件下种子的萌发情况,并研究激光处理后的幼苗生长情况。结果 光照条件下,激光可提高大叶龙胆种子的发芽势及发芽率,但对黑暗条件培养的种子无明显促萌发作用。低剂量激光还可提高大叶龙胆幼苗的叶绿素和可溶性蛋白含量,促进幼苗生长。结论 低剂量的 CO₂ 激光可促进光照条件下的大叶龙胆种子萌发及幼苗生长]]> 2015/1/7 10:17:31 2725true [1]。]]> 2015/1/7 10:17:31 2724true [1,2]。山豆根主要有效成分为苦参碱和氧化苦参碱^[1～3]。]]> 2015/1/7 10:17:31 2723true [1]。民间用其活血祛瘀、消肿止痛,治骨折、跌打损伤^[2]。有关珍珠梅的化学成分和临床应用报道较少,现代研究报道珍珠梅中含有珍珠梅苷和黄酮类物质等^[3]。黄酮类物质具有抗氧化、扩张血管、调血脂等作用,因此,开发利用珍珠梅中黄酮类物质,在临床中有广泛的应用前景。]]> 2015/1/7 10:17:32 2722true 2015/1/7 10:17:32 2721true 2015/1/7 10:17:32 2720true 目的 研究忍冬个体生长与药材质量的关系。方法 调查忍冬不同树龄的形态指标,分析花蕾中绿原酸的含量的变化动态。结果 金银花药材的质量与其忍冬树龄关系密切。不同树龄忍冬,萌发新枝能力与花蕾生长不同,其质量差异较大。综合产量和绿原酸含量的因素,金银花药材以忍冬树龄 9～ 15年较好。结论 保证金银花优质、高产的关键技术是 :随树龄增长,适时调整密度,在 GAP基地建设中,对不同树龄植株要分类管理。本研究对人工栽培多年生药材的研究与管理具有指导意义。]]> 2015/1/7 10:18:12 2719true 目的 建立测定龙血竭中对羟基苯甲酸乙酯含量的方法。方法 以 C1 8反相键合硅胶为固定相,乙腈-1%冰醋酸 (31∶ 6 9)为流动相,检测波长为 2 5 7nm,用外标法定量。结果 对羟基苯甲酸乙酯在 0.2 0 6～ 2.884 ng有良好线性关系,r=0.9998,平均回收率为 96.0 2 %,RSD为1.87%。结论 本方法是测定龙血竭中对羟基苯甲酸乙酯含量的快速、简便、准确可靠的定量方法。]]> 2015/1/7 10:18:12 2718true 目的 探讨杜仲原生皮与再生皮的次生代谢物含量的差异性。方法 利用游标卡尺测量 17龄杜仲树的原生皮与再生皮的厚度,采用分光光度法测定桃叶珊瑚苷和总黄酮含量,采用高效液相色谱法测定绿原酸含量。结果杜仲原生皮和再生皮的内皮厚度分别为1.6 4 6和1.6 31mm;原生皮中绿原酸、桃叶珊瑚苷和总黄酮的含量分别为0.4 0 2 %,0.781%和 0.4 84 %,再生皮中绿原酸、桃叶珊瑚苷和总黄酮的含量分别为 0.4 36 %,0.84 9%和 0.5 16 %。结论 原生皮与再生皮的厚度基本相同;原生皮与再生皮的次生代谢物含量无显著差异。]]> 2015/1/7 10:18:12 2717true 目的 研究分别来源于镰刀菌 Fusarium solani和黑曲霉 Aspergillum niger的真菌诱导子 (fungal elici-tors)对长春花愈伤组织中吲哚生物碱积累的影响。方法 用真菌诱导子对长春花愈伤组织进行诱导处理后提取吲哚总碱,并用 RP-HPL C法测定其中阿玛碱和长春质碱含量。结果 两种真菌诱导子对吲哚总碱及其中阿玛碱和长春质碱的积累均有较明显的正向调节作用,并且确立了真菌诱导子最佳处理时间。结论 这两种真菌诱导子对长春花愈伤组织中吲哚生物碱的积累有显著影响。]]> 2015/1/7 10:18:13 2716true 目的 利用肉苁蓉组织培养技术生产苯乙醇苷类活性成分。方法 研究碳源、生长素和培养条件对细胞中松果菊苷、洋丁香酚苷 (类叶升麻苷)和 2′-乙酰基洋丁香酚苷 3种苯乙醇苷类化合物合成的影响。结果 葡萄糖有利于上述 3种成分的合成,6-BA1m g/ L 与 IAA1m g/ L 或 6-BA1mg/ L 与 2,4-D2 mg/ L 的激素配比有利于松果菊苷和洋丁香酚苷 (类叶升麻苷)的积累。 15℃黑暗和 2 5℃光照处理可以促进松果菊苷和洋丁香酚苷 (类叶升麻苷)的积累。其中 IAA2 m g/ L 与 6-BA1mg/ L、2 5℃黑暗条件下培养时 3种苯乙醇苷类的总产量达到 1937.7mg/ L。盐生肉苁蓉愈伤组织中的主要成分与天然肉苁蓉基本相同,而且愈伤组织中的松果菊苷、洋丁香酚苷 (类叶升麻苷)和 2′-乙酰基洋丁香酚苷含量高于天然肉苁蓉。结论 盐生肉苁蓉的愈伤组织或细胞可以代替肉苁蓉生产苯乙醇苷类活性成分。]]> 2015/1/7 10:18:13 2715true 目的 揭示梓醇在怀地黄不同营养器官中的积累规律。方法 高效液相色谱法。结果 在怀地黄根、茎和叶 3种营养器官中都含有梓醇,但不同器官中梓醇含量有显著差异。其中,茎、叶中梓醇含量较高,块根中梓醇含量较低。在同一营养器官中梓醇积累呈现规律性变化。幼叶梓醇含量低,随着叶发育成熟,其梓醇含量逐渐增高。在块根中梓醇含量随着块根的发育增粗逐渐增高。结论 怀地黄块根有效成分的含量高峰与其产量高峰一致,都在11月初地上部分枯萎时,因此,此时应为怀地黄的适宜采收期,与传统的怀地黄采收期相吻合。叶和茎中也含有梓醇,且含量高于块根,因此,建议对怀地黄地上部分进行综合开发利用。]]> 2015/1/7 10:18:13 2714true 2000年版一部收载的有百合科植物川贝母 Fritillaria cirrhosa D.Don、百合科植物平贝母 F. ussuriensis Maxim.、百合科植物伊贝母 F. pallidiflora Schrenk 及百合科植物浙贝母 F. thunbergii Miq.[1] ,<卫生部药品标准>中药材第一册还收载了百合科植物湖北贝母 F. hupehensis Hsiao et K.C.Hsia[2] ,这 5 种均为正品.]]> 2015/1/7 10:18:13 2713true 收载品种,具有补肾阳、强筋骨、祛风湿的功能.淫羊藿总黄酮 (TFE) 是其主要活性成分,目前常以 TFE 含量高低作为判断淫羊藿质量优劣和提取分离工艺的指标.TFE 的含量测定方法采用紫外分光光度法,以淫羊霍苷为对照品,在 270 nm 测定[1,2] .笔者认为上述测定方法存在一些问题,即样品是否存在 270 nm 有吸收的非黄酮成分?通过对以上问题的研究,建立了 TFE 的含量测定方法:样品经提取、三氯化铝络合后,采用分光光度法,在 413 nm 处,以淫羊藿苷为对照品测定含量.]]> 2015/1/7 10:18:13 2712true 2015/1/7 10:18:13 2711true 目的　为了开发我国珍稀动物——吉林双阳梅花鹿的基因资源 ,在分子水平上揭示鹿药材的药理作用。方法　构建了梅花鹿脾脏细胞 c DNA质粒文库 ,克隆了一些看家基因并进行了序列分析。结果　其中的一个序列在核酸及推导的氨基酸序列水平上与编码人、犬、大鼠、小鼠核蛋白体蛋白 L 2 7(ribosom al protein L 2 7) c DNA序列和对应的氨基酸序列高度同源 ,并具有完整的开放阅读框架 (ORF)。结论　发现了双阳梅花鹿核蛋白体蛋白 L2 7全长 c DNA序列 ,此序列已经在 Genbank中登录 ,登录号为 :AF3732 31。]]> 2015/1/7 10:18:24 2710true 目的　通过长春花叶内生真菌的分离 ,筛选产生长春新碱的菌株。方法　从长春花叶中分离内生真菌 ,对其发酵提取物进行 TL C和 HPL C分析。结果　从长春花叶中分离筛选到一株无孢菌群菌株 :97CY3。它能产生长春新碱 ,HPL C测定其长春新碱含量约为 0 .2 0 5 μg/ L。结论　长春花内生真菌中 ,有的菌株可产生与宿主所产相同的抗癌物质长春新碱。]]> 2015/1/7 10:18:24 2709true 目的　为确定溪黄草最佳采收期提供依据 ,为按中药材 GAP原则制定相关标准操作规程 (SOP)并实施推广应用 ,提供基础研究资料。方法　采用 RP- HPL C法测定 GAP基地产溪黄草药材不同采收期 2 α-羟基熊果酸的含量。色谱条件 :Kromasil RP- C1 8色谱柱 (2 5 0 m m× 4 .6 mm ,5μm );乙腈 - 0 .0 5 %三氟乙酸溶液 (70 .5∶ 2 9.5 )为流动相;流速 0 .8m L/min;柱温 2 5℃;检测波长 2 10 nm。结果　不同采收期狭基线纹香茶菜药材中 2 α-羟基熊果酸的含量以 8月份为高 ,即开花前期。结论　建议狭基线纹香茶菜药材在开花前枝叶繁盛时采收。]]> 2015/1/7 10:18:24 2708true 目的　利用种属特异性蛋白建立一种生药甘草的免疫学鉴定方法。方法　选用生药甘草为实验对象 ,利用抗甘草总抗原血清并结合 Western- blot的结果确定甘草种属特异性蛋白 (RGP)。分离纯化该蛋白抗原并制备和生物素标记其特异性抗体 ,建立夹心式 EL ISA法用于甘草的分析鉴定。结果　该方法灵敏度高、专属性强 ,对不同产地及品种的甘草显示了良好的特异性 ,可以用于生药的鉴定和分析。结论　以甘草自身的特异性蛋白为指标的免疫学分析方法,将为生药甘草的品种鉴定及中药材的质量管理提供一条新的途径。]]> 2015/1/7 10:18:24 2707true 目的　研究灯台树种子萌发的最适宜条件和储藏时间 ,为大量人工繁殖灯台树苗木提供借鉴。方法　不同温度 ,不同光照时间 ,不同光质及不同储藏时间 ,测量灯台树种子的萌发率。结果　灯台树种子萌发的适宜温度为30℃～ 4 0℃ ,适宜的光照时间为 8h,适宜的光质为黄光和日光 ,储藏时间为 5个月以内最好。结论　灯台树种子是高温萌发型。]]> 2015/1/7 10:18:25 2706true 目的　寻找金丝桃属中草本植物含金丝桃素而木本不含的形态学及组织化学依据 ,为该属植物资源的开发利用提供依据。方法　对金丝桃属中 6种植物叶片进行解剖学研究 ,观察透明材料 ,并进行组织化学实验和石蜡切片观察。研究分泌结构在各种植物叶片中的分布和结构。结果　存在分泌细胞团和分泌囊 (道 )两类形态结构特点不同的分泌结构 ,草本植物中两者都有 ,而木本植物中只有分泌囊 (道 )。金丝桃素储存于分泌细胞团内。结论　为金丝桃属中只有草本植物含金丝桃素提供了依据。]]> 2015/1/7 10:18:25 2705true Panax notoginseng(Burk.)F.H.Chen为五加科人参属多年生草本植物,是我国特有的传统名贵药材.对三七的开发和使用一般是经过干燥后的干三七,鲜三七的研究尚未有文献报道,由于传统三七干燥过程中需打磨,是有害物质二次污染三七的途径之一,为了充分利用产区优势,直接开发利用鲜三七,开展了鲜三七与干三七皂苷含量的比较,为鲜三七的开发提供实验依据。]]> 2015/1/7 10:18:25 2704true Pseudolarix kaempferi Gordon的干燥根皮或近根树皮,为<中华人民共和国药典>收载的常用中药,有杀虫止痒作用,常用于疥癣瘙痒.其制剂有土荆皮酊、复方土荆皮酊、复方土荆皮涂膜剂等。]]> 2015/1/7 10:18:25 2703true 2015/1/7 10:18:25 2702true Notholirion bulbuliferum(Lingelsh.)Steam的干燥小鳞茎,主产于陕西太白山,云南、西藏等省区亦产[1,2].为名贵中药材,太白山自然保护区珍惜保护植物,具有宽胸利气、止呕止咳、健胃镇痛等功效。]]> 2015/1/7 10:18:25 2701true 2015/1/7 10:00:34 2700true 2015/1/7 10:00:34 2699true 3、PEG-6000、IAA、GA₃、6-BA溶液对椭圆叶花锚浸种。结果青霉素的5、20、40mg/L，KCN的5、20mg/L，5%的PEG-6000，20mg/LGA₃和6-BA的25、75mg/L可极显著提高椭圆叶花锚种子平均发芽率、平均发芽势，其中以6-BA以25mg/L处理效果最好，可使其种子发芽率、发芽势分别提高46。0%、39。67%，IAA溶液和KNO₃对椭圆叶花锚种子的萌发无明显效果，而15%、25%的PEG-6000、80mg/LIAA、160mg/LGA₃、100mg/L6-BA则明显抑制种子萌发。用5mg/L青霉素、25mg/L6-BA分别处理椭圆叶花锚种子后进行的室内土壤播种，对种子的萌发无明显影响。结论不同药剂及同一药剂的不同浓度对椭圆叶花锚种子发芽力的影响不同。]]> 2015/1/7 10:00:34 2698true 2015/1/7 10:00:35 2697true 2015/1/7 10:00:35 2696true 2015/1/7 10:00:35 2695true 2015/1/7 10:00:35 2694true 2015/1/7 10:00:35 2693true 2015/1/7 10:00:36 2692true Rhodiola L.)的大花红景天 R.crenulata、长鞭红景天 R.fastigiata、狭叶红景天 R.kirilowii和高山红景天 R.sachalinensis 4种药用植物进行分子水平鉴定。方法 CATB法提取红景天属原植物总 DNA,以 200条随机引物进行随机扩增。结果 用 OPA4(AATCGGGCTG)、OPB7(GGTGACGCAG)、OPB18(CCACAGCAGT)、OPX14(ACAGGTGCTG)和 OPZ13(GACTAAGCCC)作随机扩增引物进行随机扩增时,可得到识别这些物种基因组 DNA的多态片段。结论 RAPD法能有效地鉴别红景天类药材,把大花红景天、长鞭红景天、狭叶红景天和高山红景天区分开。]]> 2015/1/7 10:00:22 2691true 方法 通过对陇西县及其毗邻地区黄芪产区的种植历史、基本生态环境、种质资源、良种选育的调查和试验,并取样对活性成分进行检测。结果 改变了产区传统生产中存在的不足,形成了蒙古黄芪规范化种植规程。结论　通过规范化种植生产出来的蒙古黄芪具有优良的品质。]]> 2015/1/7 10:00:22 2690true 方法 用不同浓度的甲基磺酸乙酯(EMS)处理长春花愈伤组织,挑选成活愈伤组织块继代扩大培养,比较其与对照愈伤组织生长速率、吲哚总碱积累等方面的差异。结果 用 EMS处理的长春花愈伤组织与对照相比,不仅生长快,并且吲哚总碱含量高。结论 EMS处理的愈伤组织发生了变异,变异种是所期望的比较理想的细胞系。]]> 2015/1/7 10:00:22 2689true 方法 测定一天中不同时段(7:30～ 16:30每隔 1.5 h测定一次)、不同光合有效辐射(0～ 14 0 0μm ol· m- 2· s- 1和温度(2 9.6～ 38.2℃)下的净光合速率,测定叶片中叶绿素 a和 b的含量。结果 3种石斛光合作用的净光合速率、光饱和点和光补偿点均较低;净光合速率于早晨 8:0 0～ 10 :0 0处于高峰,此后随温度升高、光照增强而迅速下降;石斛叶片中叶绿素 b的含量较高。结论　石斛的光合作用特性体现了其作为一种阴生植物对生长环境的高度适应性。]]> 2015/1/7 10:00:23 2688true (一部)收载,而其根在我国华南地区,尤其是广西、广东、福建民间应用十分普遍,有清热、凉血、解毒的功能,民间主要用于黄疸性肝炎、肾炎水肿、感冒高热、出血吐血等病症的治疗,其药材正名栀子花根来源于<福建民间草药>的记载[1],民间别名黄枝根、山枝根、三枝根等.目前国内外对其研究较少,仅知其成分主要含环烯醚萜类、齐墩果酸醋酸酯、甘露醇、豆甾醇等。本实验首次从药材性状、组织和粉末的显微特征、紫外光谱、薄层色谱和高效液相色谱等方面对其进行了生药学研究,为建立其质量标准提供科学依据。]]> 2015/1/7 10:00:23 2687true 2015/1/7 10:00:23 2686true Erigeron breviscapus(Vant.)Hand.-Mazz.的全草,是一种常用中药。具散寒解表、祛风除湿、活络止痛等功效.灯盏花乙素为灯盏细辛活性成分之一,目前在临床上用于治疗中风后瘫痪、复发性口疮及冠心病等[1]。]]> 2015/1/7 10:00:23 2685true Cirsium japonicum DC.干燥地上部分或根,具有凉血止血、祛瘀消痈的功能[1]。大蓟中含有多种化学成分:柳穿鱼叶苷、蒙花苷、绿原酸、菊糖、β-谷甾醇等[2],其中的黄酮类化合物柳穿鱼叶苷为其中的主要止血活性成分[3],大蓟各地用药品种非常复杂,市面上的混用品多为飞廉、小蓟等。]]> 2015/1/7 10:00:23 2684true 200O年版[1]记载葶苈子来源于十字花科植物独行菜Lepidiutm apetalum Willd.和播娘蒿Descurainia sophia(L.)Webb ex Prantl的干燥成熟种子,前者称为"北葶苈子"、后者称为"南葶苈子",但葶苈子的鉴别仅记载了葶苈子的性状鉴别、显微鉴别和膨胀度的测定。]]> 2015/1/7 10:00:23 2683true Dioscorea zingiberensis C.H.Wright为薯蓣科薯蓣属多年生藤本植物,俗称黄姜,以根状茎入药,是我国传统常用中药材,主治胃气痛、跌打损伤、痈肿早期未破溃,蜂螯虫咬,同时具有治疗皮肤急性化脓性感染、软组织损伤、调血脂等功效,也有降低胆固醇、抗炎、抗肿瘤等药理作用[1]。国内对于薯蓣皂苷元的含量测定报道很多,但是总皂苷的含量测定尚无文献报道.笔者用吸附树脂富集纯化总皂苷然后用库仑滴定法测定含量,该方法快速简便,重现性好。]]> 2015/1/7 10:00:24 2682true 目的 为了增强青蒿的特异药理活性，探讨人β-趋化因子RANTES基因在青蒿细胞中表达的可能性.方法 将克隆的RANTES基因经Ti质粒衍生的双元表达载体pROKII导入根癌农杆菌LBA4404菌株，通过叶盘共培养法已获得一批表现卡那霉素抗性的转基因青蒿植株.结果 PCR和Southern印迹杂交分析表明，RANTES基因已导入并整合到青蒿基因组中;RT-PCR、Northern印迹、Western印迹杂交结果证实，RANTES基因已在转基因青蒿植株中成功表达.结论 首次报道了RANTES基因在转基因青蒿植株中的表达，为基因工程改造青蒿打下了良好的基础.]]> 2015/1/7 10:14:48 2681true 目的 研究不同浓度的稀土元素镧(La³⁺)对3种大黄根生物量和蒽醌次生代谢产物产量的影响.方法采用统计学分析方法，研究稀土元素La³⁺对两种掌叶大黄单克隆毛状根DH5c、DH7a和液体培养非转化根NOR生物量和蒽醌化合物合成的影响.结果 La³⁺浓度对大黄根生物量积累有显著影响，培养基中La³⁺为10 mg/L时，对大黄根生长表现出明显的抑制作用;La³⁺浓度对3种大黄根的蒽醌产量有极显著影响，当培养基中La³⁺1.0mg/L时，蒽醌产量最高;经稀土离子处理的3种大黄根中芦荟大黄素和大黄酸显著高于大黄素、大黄酚和大黄素甲醚.结论 培养基中添加适宜浓度的稀土离子La³⁺对掌叶大黄单克隆毛状根的生物量积累和蒽醌类化合物的合成具有明显的促进作用.]]> 2015/1/7 10:14:48 2680true 目的 分析不同产地丹参水溶性成分和脂溶性成分指纹图谱的变化情况，研究丹参脂溶性成分含量与水溶性成分含量之间的相关性.方法 采用HPLC法测定不同产地丹参水溶性成分、脂溶性成分的指纹图谱以及主要成分的含量，运用SPSS统计软件分析丹参成分变化情况.结果 丹参脂溶性成分和水溶性成分指纹图谱随产地不同而变化，丹参脂溶性成分含量与水溶性成分含量高低无内在关系.结论 建议制订丹参丹酚酸类成分含量，作为适用于丹参类注射液用的丹参药材标准，以区别于供复方丹参片等制剂用的丹参.]]> 2015/1/7 10:14:48 2679true 目的 探索姜茎尖组织培养及其试管苗快速繁殖的适宜条件.方法 剥取不大于1 mm的姜茎尖生长点为外植体，以MS为基本培养基，附加不同种类和浓度的植物生长物质进行培养.结果 小于0.3 mm的姜茎尖可进行良好的分化与生长;在各类激素中，以BA对姜芽分化最为有效，培养基MS+BA 1.0mg/L+NAA 0.2～0.4mg/L最有利于芽的分化和生长;在生根培养基中添加适量的BA不仅不影响不定根的形成，且能增加成苗数，对不定根的分化和成苗最适的培养基为1/2 MS+NAA 0.1 mg/L+BA 0.15 mg/L.结论 试验为姜的茎尖离体培养提供了有效途径.]]> 2015/1/7 10:14:48 2678true 目的 研究八大品种菊花中不同成分的含量.方法 以绿原酸、木犀草素-7-O-β-葡萄糖苷及芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷为指标，采用高效液相色谱法对不同品种的菊花进行了含量测定.结果 绿原酸含量以济菊和祁菊最高，川菊最低;木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷含量以济菊最高，而毫菊最低;芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷含量以济菊最高，而最低为贡菊、毫菊和怀菊.结论 绿原酸和黄酮类成分均高者才是优良品种.]]> 2015/1/7 10:14:48 2677true 2015/1/7 10:14:49 2676true 2015/1/7 10:14:49 2675true 2015/1/7 10:14:49 2674true 2015/1/7 10:14:49 2673true 2015/1/7 10:14:49 2672true 2015/1/7 10:14:49 2671true 2015/1/7 10:14:49 2670true 目的研究丹参ITS片段遗传多样性,分析该片段在丹参药材DNA分子鉴别和鼠尾草属植物系统学研究中的意义。方法用一对引物进行PCR扩增,扩增产物纯化后用双脱氧终止法测序。结果获得核糖体DNA中ITS和5.8SrDNA完整序列,13个鼠尾草属植物ITS1与ITS2序列的长度分别为222～224bp、220～223bp。鼠尾草属植物种间ITS1序列差异百分率为0～12.16%,ITS2序列的差异百分率为0.5%～13.51%;丹参种内ITS1序列的差异百分率为0～0.9%,ITS2序列的差异百分率为0～0.5%;鼠尾草属各类群与外类群的差异百分率ITS1序列为16.07%～20.27%,ITS2序列为15.91%～20.27%。用邻接法(NJ)根据ITS1与ITS2序列数据建立系统发生树。结论两段序列在丹参种内保守,在属间有较大的差异,与外类群的差异最大,可作为中药丹参分子鉴定的标记,而鼠尾草属植物的系统发生关系尚须进一步研究。]]> 2015/1/7 9:25:52 2669true 目的采用RP-HPLC(DAD)对不同产地毛脉酸模药材进行指纹图谱比较。方法用PlanetsilC18分析柱,甲醇-0.1%磷酸水线性梯度洗脱,检测波长254nm,洗脱时间50min,体积流量1.0mL/min,柱温35℃,测定了12个不同产地的毛脉酸模药材的HPLC指纹图谱。结果方法学考察表明,本研究建立的分析方法有较好的重现性;不同产地毛脉酸模药材共有峰面积的比值有一定的差异。结论本方法可用作毛脉酸模药材的具有专属性的指纹图谱的建立。]]> 2015/1/7 9:25:52 2668true 目的比较江苏道地药材邳州银杏叶在不同采收期的指纹图谱。方法采用HPLC-DAD方法。色谱条件为:色谱柱:AlltimaC18柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相:乙腈(A)-0.5%磷酸水(B)进行梯度洗脱,15%～27%A(0～40min),27%～15%A(40～60min),15%A(60～75min);体积流量:1mL/min;柱温:20℃;检测波长:360nm。并应用计算机辅助相似性评价系统对银杏叶指纹图谱进行了相似度分析。结果同一树龄不同采收期的银杏叶中,二至四年生银杏叶分别在不同采收期指纹图谱相似度较高(>0.90);五年生和六年生银杏叶分别在不同采收期指纹图谱相似度变化范围较大(0.86～0.97)。同一采收期不同树龄的银杏叶中,5～7月不同树龄银杏叶指纹图谱相似度较高(>0.90);8～10月不同树龄银杏叶指纹图谱相似度变化范围较大(0.84～0.99)。结论本研究为控制邳州银杏叶内在质量建立了指纹图谱方法,为银杏叶的合理采收提供了科学依据。]]> 2015/1/7 9:25:52 2667true 目的利用近红外漫反射光谱技术和偏最小二乘法测定牛膝中蜕皮甾酮。方法近红外漫反射光谱技术和偏最小二乘法。结果所建立预测方程样品的预测值和真实值之间的相关系数为0.9489,该法的建立证明了近红外漫反射光谱技术应用于中药中化学成分的测定的可行性。结论同其他测定方法相比该法操作简单、速度快、效率高、无污染、费用低、无需复杂的前处理,可以直接对大量未知样品进行测定。]]> 2015/1/7 9:25:53 2666true 目的研究山麦冬Liriopespicata甲醇提取物中的物质组成情况,建立山麦冬HPLC/ESI-MS特征指纹图谱。方法山麦冬用甲醇超声提取,提取液经C18SPE固相萃取柱除去多糖成分后,用高效液相色谱-电喷雾离子阱质谱(HPLC/ESI-MS)分析提取物中的物质组成。结果山麦冬甲醇提取物色谱图中有17个共有峰的重现性与精密度的RSD<5%,建议以此为基础制作山麦冬特征指纹图谱。结论应用HPLC/ESI-MS技术建立的山麦冬指纹图谱特征性强、重现性较好,可用于山麦冬的品质评价与品种鉴别。]]> 2015/1/7 9:25:53 2665true 目的为准确使用丁公藤这一传统中药提供鉴别依据。方法原植物调查,商品丁公藤药材的收集和鉴定,并结合研究文献和实物标本。结果广西所产的丁公藤原植物为《中国药典》规定的丁公藤属(ErycibeRoxb.)的光叶丁公藤E.schmidtii,而市场流通的商品丁公藤主要为飞蛾藤属(PoranaBurm.f.)的大果飞蛾藤P.sinen-sis和近无毛飞蛾藤P.sinensisvar.delavayi,光叶丁公藤已只限于当地山区草医应用。结论大果飞蛾藤和(或)近无毛飞蛾藤已成为商品丁公藤的主流品种及事实上的《中国药典》载丁公藤的代用品。建议加快对这一代用品的深入研究。]]> 2015/1/7 9:25:53 2664true 2015/1/7 9:25:53 2663true 2015/1/7 9:25:53 2662true 2015/1/7 9:25:53 2661true 2015/1/7 9:25:53 2660true 2015/1/7 9:25:54 2659true 2015/1/7 9:25:54 2658true 目的为了能够更加充分了解贝母属药用植物,通过各种分析方法对两种贝母--浙贝母和平贝母中所包含的淀粉的物理化学性质进行了研究.方法采用X射线衍射,扫描电子显微镜(SEM)以及热分析(TGA)的方法对两种贝母中淀粉的性质进行了比较.结果通过研究发现,两种贝母淀粉的晶体类型都为典型的B型,这与马铃薯淀粉的晶体类型是-致的.浙贝母和平贝母淀粉的结晶度分别为29.9%和20.1%,而马铃薯淀粉的结晶度为44.9%.从两种贝母淀粉的结晶度可以看出,平贝母淀粉中直链淀粉的量要高于浙贝母淀粉中直链淀粉的量.两种贝母淀粉的颗粒尺寸为5~40μm,而且他们都小于马铃薯淀粉的颗粒尺寸.两种贝母淀粉颗粒的形状是圆形的和椭圆形的.热稳定性表明由于植物来源的不同导致淀粉颗粒结构不同,从而热稳定性存在明显的差异.结论两种贝母淀粉由于来源不同,物理化学性质存在明显的差异.]]> 2015/1/7 9:25:25 2657true 目的优化喜树胚轴细胞悬浮培养体系生产喜树碱.方法将由喜树种子下胚轴诱导的愈伤组织进行悬浮培养,研究了基本培养基、激素和培养条件对培养物生长的影响,测定了培养细胞生长和喜树碱积累的动态变化.结果悬浮培养细胞在MS培养基中细胞生长良好,细胞分散性和喜树碱积累优于在其他培养基中.最佳激素组合为2,4-D 0.2mg/L+NAA 0.5 mg/L+6-BA 0.5mg/L,细胞继代周期以12d左右为宜,悬浮细胞适合在22~26℃,120r/min下生长.悬浮培养细胞在第4~20天为对数生长期,细胞倍增时间为t(d)=3.92d^-1,细胞干重至第20天达到最大,为27.44g/L.在细胞对数生长期内,喜树碱积累与细胞生长呈线形正相关性,第20天喜树碱质量分数达到最大值9.319×10^-5,喜树碱产量为2.56mg/L.结论MS基本培养基适合喜树胚轴细胞悬浮培养,细胞生长前20天内,培养体系中喜树碱积累与细胞生长呈正线形相关性.]]> 2015/1/7 9:25:25 2656true 目的筛选适宜的罗汉果脱毒苗茎段增殖培养基,研究培养温度与光照对茎段增殖培养的影响.方法采用正交试验设计和完全随机实验设计筛选罗汉果脱毒苗茎段增殖培养基.正交L9(34)实验以在MS+BA 0.1mg/L+NAA 0.1mg/L上培养30d的罗汉果脱毒苗单芽姊妹系的单节茎段为外植体,以培养基中BA,NAA,IBA及蔗糖为试验因子,各因子设3个水平,以在不同处理得到的增殖系数为测定指标;在此基础上进-步研究了培养基中BA和蔗糖质量浓度对增殖效果的影响;采用完全随机实验设计研究温度,光照对茎段增殖培养生成试管苗的影响.结果通过对正交实验结果的极差分析及方差分析表明,在4个因子中,对罗汉果茎段增殖系数影响最大的是BA,其次是蔗糖的NAA,IBA的影响最小;BA,NAA,IBA及蔗糖对增殖系数的影响都达到极显著.根据新复极差检验的结果,当前研究得到的罗汉果离体茎段的最佳增殖培养基为MS+BA 0.5mg/L+NAA 0.01mg/L+IBA 0.1mg/L+蔗糖40g/L,罗汉果茎段在此培养基上培养30d后增殖系数为13.13;不同浓度BA与蔗糖对茎段培养的研究结果表明,BA在1.0 mg/L增殖系数最大.考虑为保持试管苗的遗传稳定性,BA为0.5mg/L为宜.增殖培养基中的蔗糖适宜质量浓度为4.0%;罗汉果茎段培养适宜条件为培养温度25℃,培养光强1000~3000lx.结论增殖培养基的成功筛选及培养温度与光强的选择,有助于实现罗汉果脱毒苗的工厂化生产.]]> 2015/1/7 9:25:26 2655true 目的建立粉葛的组织培养体系;培育粉葛同源四倍体新种质.方法以MS培养基为基本培养基,培养外植体茎尖或茎段获得组培再生植株;用不同体积分数的秋水仙素对无菌苗茎尖进行不同时间的处理,诱导遗传物质加倍的同源四倍体.结果其最适愈伤组织诱导培养基为MS+6-BA 1.0mg/L+2,4-D 1.0mg/L+ NAA 0.2mg/L,分化和增殖培养基为MS+6-BA 1.0mg/L+2,4-D 0.2mg/L,生根培养基为1/2 MS+IBA 0.2mg/L;从长出约1cm的丛生芽上切取0.3~0.5cm的茎尖用0.4%~ 0.5% 的秋水仙素处理48h效果较好,体积分数过低或过高和处理时间太短或太长都不易成功.结论同源四倍体粉葛为葛根中药用物质质量分数的提高提供了基础.]]> 2015/1/7 9:25:26 2654true 目的研究藏药市场上9种"藏茵陈"植物中有效化学成分,根据所含成分的差异及其生理活性,确定这些植物的药用价值.方法采用HPLC法测定7种成分的量.结果9种植物的有效成分差异很大.结论针对不同的化学成分用途,选择不同的植物,有效利用资源.]]> 2015/1/7 9:25:26 2653true Gentiana macrophylla Pall.、麻花秦艽G.straminea Maxim.、粗茎秦艽G.crassicaulis Dutlaie ex Burkill或小秦艽G.dahurica Fisch.的干燥根,主产于青海、甘肃、陕西、内蒙古、东北、四川I等地,是临床上用于祛风除湿、和血舒筋、清热利尿的常用中药材.青海省是秦艽的主产地之-,但在最近几年,由于用药需求量猛增,过度采挖,致使秦艽野生资源临近频危状态,现已被国家列为三级重点保护的野生药材,因此为保证和扩大药源,大量繁殖和引种栽培已成为急需解决的问题.本研究以秦艽的主要成分龙胆苦苷为指标,采用RP-HPLC法考察了不同产地、不同生长年限、不同采收季节和使用肥料等因素对栽培秦艽中龙胆苦苷含量的影响,以期为评价栽培秦艽的质量、开发利用秦艽资源和确保人工种植的品质提供科学的依据.]]> 2015/1/7 9:25:26 2652true Panax ginseng C.A.Meyer是我国珍贵中药材.它对人体的滋补强壮作用和对多种疾病的防治效果十分显著,久为世人瞩目,堪称当今天然补益药的代表,享有中药之王的美誉[1].因此,在我国开展中药现代化工作中,人参规范化生产被列为吉林省中药现代化科技产业(吉林)基地重大项目.本研究作为规范人参生产的-个主要内容,目的是通过研究长白人参产量形成、加工效率和人参主要有效成分-人参总皂苷的变化规律,确定人参的最佳采收期,以保证人参规范化生产(GAP)顺利进行.]]> 2015/1/7 9:25:26 2651true Rhodiola L.)植物中-种重要的活性成分,其量的高低是评价该属植物药用价值的重要指标之-.用HPLC法测定红景天苷的研究已有报道.为了配合红景天愈伤组织和细胞培养的研究,建立了红景天属植物及其愈伤组织中红景天苷测定的HPLC方法,测定了4种不同来源的红景天和来源于深红红景天R.coccinea(Royle)A.Bor.的愈伤组织中的红景天苷.]]> 2015/1/7 9:25:26 2650true Daphne giraldii Nifshe,药用其茎皮和根皮.主要产于甘肃、四川、陕西、山西等省山区.文献记载有祛风除湿、活血散瘀等作用.民间广泛用于治疗疼痛、跌打损伤、风湿性关节炎和支气管炎等症.近年来亦有将药材制成祖师麻膏药、祖师麻注射液、祖师麻风湿膏等治疗各种疼痛.紫丁香苷为其活性成分之-,为了更好地控制祖师麻及其制剂的质量,本实验采用反相高效液相色谱法,对陕西眉县、四川I、甘肃产祖师麻中紫丁香苷的测定方法进行了研究,为更好地完善该药材及其制剂的质量控制标准提供依据.]]> 2015/1/7 9:25:26 2649true Polygonum cuspidarum Sieb.et Zucc.的根茎和根,采挖时间在春秋两季.虎杖入药始见于《雷公炮制论》,《别录》列为中品,味苦、酸,性微寒,归肝、胆经.传统用于血瘀诸症,可活血散瘀,祛风通络,清热利湿,解毒.临床制剂种类较多,例如解毒降脂片(广东雷霆国药有限公司);胆宁片(上海中药一厂)等.虎杖根和根茎含游离蒽醌及蒽醌苷,主要为大黄素(emodin)、大黄酚(chrysophanol)、大黄素甲醚8-O-β-D-葡萄糖苷(physcion-8-O-β-D-gtucoside)大黄素8-O-β-D-葡萄糖苷(emodin-8-O-β-D-glucoside)、迷人醇(falacinol)、6-羟基芦荟大黄素(citreorosein)、大黄素8-甲醚(questin)、6-羟基芦荟大黄素-8-甲醚(questinol)等.还含有芪类等其他化合物.葸醌类化合物具有消炎、降血压、影响消化道括约肌张力、抗茵抗病毒、镇咳及抗肿瘤等多种活性.]]> 2015/1/7 9:25:27 2648true Scutellaria baicalensisGeorgi的干燥根,为常用中药,具有清热泄火、解毒、止血、安胎等作用,其中黄酮类化合物为主要有效成分,含量较高的成分有黄芩苷、汉黄芩营、黄芩素.因此,研究制定此3种成分含量的药材标准,对提高黄芩的整体质量水平有很大的意义.目前《中华人民共和国药典》2000年版-部中,仅对黄芩中的黄芩苷进行含量测定.本实验利用RP-HPLC梯度洗脱法,建立了同时测定黄芩中黄芩苷、汉黄芩苷和黄芩素含量的方法,该方法可为黄芩药材质量控制提供科学依据.]]> 2015/1/7 9:25:27 2647true Collocalia esculentaL.等多种同属燕类用唾液或唾液与绒羽混合粘结所筑成的巢窝.-般可分成"白燕"、"血燕"、"毛燕"和"燕根"等几种.第-次春巢纯为粘液凝固而成,色白洁净,称为"白燕";第二次筑巢正值脱毛之时,所筑之巢往往带有-些绒羽,颜色较暗,称为 "毛燕";有时亦可见有血迹,称为"血燕";窝根称为"燕根".随着人们生活水平的提高,光靠野生的燕窝根本无法满足需求,供不应求使燕窝成为物稀价高之贵重滋补品,引发不法药贩造假、掺假、混杂、制劣及兜售伪劣品现象极为严重,况且该药的质量标准很不健全,《中国药典》未收载,许多药籍也未记录,即使偶尔有记载也是极为简单,难辩真伪,难检优劣.为此,笔者根据中药地方标准、药籍文献记载和专业期刊报道等资料,再结合药品市场现状和实际工作经验综述其真伪优劣,并提出进-步健全质量标准的设想.]]> 2015/1/7 9:25:27 2646true 目的在兰科石斛属药用植物鉴定中应用新的分子标记.方法扩增并测定9种石斛属植物线粒体中NADH脱氢酶亚基1编码基因(nad 1)内含子2(intron 2)的全长序列.结果比对后的nad 1 intron 2序列长872bp,其中有17个变异位点,可以鉴别除粉花石斛Dendrobium lodd igesii以外的8种植物.结论线粒体nad 1 intron2序列可以作为-种新的分子标记用于石斛属植物的鉴定.]]> 2015/1/7 9:24:51 2645true 目的研究野生天麻总DNA对马铃薯的转化,分析马铃薯转化植株中野生天麻的药用成分天麻素.方法采用浸苗法将野生天麻总DNA导入马铃薯试管苗,通过紫外扫描法、PCR扩增筛选转化植株,对转化植株进行SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)蛋白分析,通过TLC法检测天麻素.结果(1)在200株转化的马铃薯中有21株的紫外扫描图谱与正常对照组有显著差异,且在220 nm有明显吸收峰.(2)5株经PCR扩增出野生天麻抗真菌蛋白(GAFP)基因.(3)转基因马铃薯与正常马铃薯的蛋白表达有明显差异,并且在转基因马铃薯中有-条与GAFP相同的条带.而正常马铃薯中无此条带.(4)通过薄层色谱法检测出3株转基因马铃薯表达野生天麻的有效药用成分天麻素.结论采用浸苗法进行外源总DNA导入是可行的.]]> 2015/1/7 9:24:51 2644true 目的测定雷公藤属3种植物(雷公藤、昆明山海棠和黑蔓)不同群体和个体中雷公藤甲素(triptolide),为评价雷公藤药材质量和寻找雷公藤的优质种质奠定基础.方法建立雷公藤甲素HPLC测定方法,并测定了全国主要分布区25个群体91个个体的木质部和韧皮部中的雷公藤甲素.结果黑蔓的雷公藤甲素质量分数很低;雷公藤和昆明山海棠种间的雷公藤甲素差异不明显,个体质量分数木质部为1.0×10^-6~5.83×10^-5;韧皮部为2.3×10^-6 ~1.030×10 ^-4.结论雷公藤和昆明山海棠不同个体雷公藤甲素质量分数最高值与最低值相差约50倍,不同居群雷公藤甲素质量分数最高值与最低值相差10多倍,不同来源的药材质量差异极大,严重影响用药的安全性;雷公藤甲素质量分数高的居群位于浙江西南部和中部、湖南新宁、贵州雷山和安徽黄山;湖南新宁、贵州雷山和浙江江山居群中有雷公藤甲素质量分数极高的个体,值得进-步研究,以寻找质量分数高的优良单株.]]> 2015/1/7 9:24:51 2643true 目的建立5种贝母药材的电喷雾离子阱质谱(ES I-M S)特征图谱,用于贝母药材的品种鉴别.方法用18%氨水润湿贝母药材,乙醚-氯仿-乙醇(25:8: 2.5)混合溶剂超声提取其中贝母生物碱,将提取物直接进样到电喷雾离子阱质谱检测器进行正离子全扫描分析.结果在正离子-级质谱中,贝母生物碱易形成带-个正电荷的准分子离子,并且在中性醇溶液中,贝母生物碱易形成二聚体,在酸性介质中则无此现象;二级碰撞诱导解离易使贝母生物碱脱去-分子水;5种贝母对照药材的总生物碱提取液的-级电喷雾质谱图显示,主要分子离子峰基本相同,但因品种不同相对丰度差异较大.结论5种贝母药材生物碱提取物的ESI-MS图谱特征性较强,重现性与精密度较好,可用于不同品种贝母类药材的鉴别.]]> 2015/1/7 9:24:52 2642true 目的为黄芪种子鉴定提供方法,为按中药材GAP原则制定相关标准操作过程(SOP)提供基础研究资料.方法采用肉眼直接观察、光学显微镜观察和电子显微镜进行扫描观察,比较蒙古黄芪和膜荚黄芪两种药用黄芪的种子形态特征和微观结构;通过萌发试验,比较二者的差异.结果通过肉眼和光学显微镜观察,两种黄芪种子的形态差异不明显,在电子显微镜下观察,两种黄芪种子的萌发孔形状、种脐和种皮的微观结构有明显差异;蒙古黄芪较膜荚黄芪种子硬实率高,萌发不整齐,萌发高峰滞后.结论在电子显微镜下能够对两种黄芪种子准确地做出鉴定,种脐、萌发孔、种皮的微观结构可作为鉴别两种黄芪种子的指标;种子硬实率和萌发动态规律可用于两种黄芪种子的辅助鉴别.]]> 2015/1/7 9:24:52 2641true 目的研究不同碳源对掌叶大黄毛状根生物量和蒽醌产量的影响.方法选取3个克隆的掌叶大黄毛状根和非转化根,采用统计分析方法,对7种糖作为培养基碳源时对大黄根生物量的积累和5种蒽醌类化合物的产量的影响进行了研究.结果不同糖作为碳源对大黄根生物量积累和蒽醌产量有极显著影响.大黄根类型与糖种类互作分析显示,DH7a与麦芽糖对于蒽醌产量来说是优势组合,而DH 5a和DH 5c在蔗糖和果糖差异不显著,非转化根在蔗糖作碳源的培养基中蒽醌产量极显著地高于其他6种糖.结论果糖作为碳源最利于大黄根培养的生物量的积累,蔗糖作为碳源时大黄根蒽醌产量最高.]]> 2015/1/7 9:24:52 2640true Rubus L.)是蔷薇科的-个大属,我国已经发现的种类有201种98变种,产于全国各地,但以长江流域西南地区种类最丰富,分布最集中.本属植物大部分种类的果实多浆,味甜酸,可供食用,在国外早已长期栽培作为重要水果;许多种类的果实、种子、根或叶可供药用.近年来,国内许多研究者对悬钩子属植物进行了-系列药理研究,发现悬钩子属植物具有多种药理作用,对调节机体的生命活动和医疗保健作用具有重要意义.据笔者初步统计,在全国各地中医中药中应用的悬钩子属植物有51种或变种,约占总种数的17%,其中藏医用药3种.该属植物药用部位不-,药效也不尽相似.中医常用于清热解毒、祛风利湿、止血止泻、活血化瘀等,治疗跌打损伤、阳萎、遗精、月经不调、感冒、风湿关节痛、急慢性肝炎及乳腺炎等症.]]> 2015/1/7 9:24:52 2639true Leonurus sibiricus L.为唇形科益母草属多年生草本植物,全草和果实入药,味苦、性辛、微寒.具调经活血、祛瘀生新、利尿消肿之功效.主治月经不调、闭经、产后瘀血腹痛、肾炎浮肿、小便不利、尿血等症;外用治疮疡肿毒.据《中药大辞典》(1999)、《中药志》(1988)记载:细叶益母草含有益母草碱、水苏碱、益母草定、益母草宁等多种生物碱及苯甲酸、氯化钾、月桂酸、亚麻酸、油酸、甾醇、维生素A、芸香苷等黄酮类成分;且作益母草入药,功效与益母草相同.河西走廊是细叶益母草的主产地之-,野生细叶益母草含水苏碱高达0.56%,生物碱质量分数明显高于《中国药典》2000年版中记载的益母草生物碱质量分数限度.但近年来,由于需求量增大,造成乱采滥挖,野生资源日趋减少,生境惨遭破坏,再加上细叶益母草自然更新能力低,资源面临濒危状态,为此笔者在本地区开展了引种及栽培试验.]]> 2015/1/7 9:24:52 2638true Oroxylum indicum(L.)Vent.的干燥成熟种子.具有清肺利咽、疏肝和胃作用.木蝴蝶为常用中药,也是中药复方制剂的常用药.为《中国药典》历版收载的品种,2000年版质量控制仅限于鉴别项,为此2005年版-部重新起草修定该品种.木蝴蝶其主要有效成分为黄芩苷,为控制其质量,笔者在起草质量标准时,采用RP-HPLC测定木蝴蝶的黄芩苷.通过测定20批不同产地木蝴蝶,实验结果稳定,重现性好,为新版药典木蝴蝶品种质量控制,提供了可靠的依据.]]> 2015/1/7 9:24:52 2637true Astragalus complanatusR.Br.的种子,是补益肝肾的传统中药.主要含有黄酮类、三萜类、有机酸类、氨基酸、多肽、蛋白质、甾醇、多糖及铁、锌、锰、铜等微量元素.药理研究表明,沙苑子具有保肝、调血脂、降压、抑制血小板聚集、改变血液流变学指标、抗炎、增强非特异性和特异倥免疫功能等作用.实验结果显示沙苑子具有保肝、抗肝纤维化作用,沙苑子苷为主要有效成分之-.但迄今对沙苑子有效单体成分的测定研究未见报道.本实验采用RP-HPLC法测定沙苑子中沙苑子苷,并比较了不同产地、不同批号沙苑子中沙苑子苷的质量分数.]]> 2015/1/7 9:24:52 2636true Eriobotrya japonica(Thunb.)Lindl.的干燥叶.枇杷叶入药始载于《名医别录》,列为中品.枇杷叶归肺、胃经,具清肺、止咳、降逆止呕作用,用于治疗肺热咳嗽、气逆喘急、胃热呕逆、烦热口渴之症状.其有效成分有挥发油、三萜化合物、皂苷和有机酸口].其中所含三萜化合物中的熊果酸现代药理研究表明具有镇静、抗炎和增强机体免疫等作用,而且极有可能成为有效的新型抗癌药物[2].目前国内对枇杷叶中熊果酸的测定尚未见具体报道,本实验采用薄层扫描法测定其熊果酸的质量分数,方法简单、快速、重现性好,效果令人满意.]]> 2015/1/7 9:24:53 2635true 2015/1/7 9:24:53 2634true 目的 研究苏皖产大戟属内6种药用植物的ITS长度的变异,为探讨大戟属植物的系统演化关系和大戟属植物鉴定提供DNA分子证据。方法 利用PCR技术对大戟属植物的rDNAITS区碱基序列进行测定。结果 这6种大戟属植物的ITS1的长度范围为255~262bp,ITS2的长度范围为214~236bp。运用Mega2软件进行的系统分析得到大戟属内6种植物的系统进化树。这一分析结果与来自形态学的研究结果相吻合。结论 此法可用于大戟属植物种间及真伪品鉴别。]]> 2015/1/7 9:24:36 2633true 目的 明确白芷不同生长时期干物质积累及根中异欧前胡素质量分数和积累量变化。方法 采用称重法测定白芷干物质,高效液相色谱法测定根中异欧前胡素。结果 白芷地上和地下部分干物质积累呈“S”型曲线,地上部分干物质在7月底至10月初逐渐增加,10月中旬达到高峰,随后降低;地下部分干物质前期增加较慢,8月底至9月底为快速增长期,随后增加稍有减慢。根中异欧前胡素以7月底8月初最高,为0.2453%,10月底最低,为0.1177%。异欧前胡素积累量在10月底收获时达到最大。结论 以白芷产量和异欧前胡素积累量为白芷的收获目标,10月底为白芷的收获期,与传统采收期一致。]]> 2015/1/7 9:24:36 2632true 目的 对阜南产半夏的质量进行研究。方法 分别测定4个产地半夏中游离、水解氨基酸和麻黄碱,采用高效液相色谱法对4个产地半夏的甲醇和酸性乙醇提取物的成分进行比较,用薄层色谱法对4个产地半夏的石油醚提取物的成分进行比较。结果 阜南产半夏所含氨基酸总量和种类以及麻黄碱与其他产地半夏基本一致,甲醇提取物和石油醚提取物的主要成分与其他产地半夏一致,酸性乙醇提取物的一些微量成分与其他产地半夏有所差异。结论 阜南产半夏品质与其他3个产地的半夏基本相同。]]> 2015/1/7 9:24:36 2631true 目的 比较巴戟天与常见混伪品之间的rDNA-ITS碱基序列的差异及其规律,同时为巴戟天及混伪品的指纹图谱鉴别提供分子标记。方法 对巴戟天及其常见混伪品的rDNA-ITS进行了PCR扩增、测序,并运用CLUSTALX、MEGA软件对该区进行序列分析。结果 测定了巴戟天及其混伪品的rDNA-ITS区序列,包括ITS1、5.8S和ITS2全长序列以及18S、26S部分序列。巴戟天与假巴戟天、羊角藤在ITS1和ITS2区的差异性分别为2.9%~5.8%和2.9%~4.2%,而与虎刺在ITS1和ITS2区的差异性则为21.2%和18.9%。根据ITS序列特征构建的系统树,混伪品假巴戟天与羊角藤首先聚类,然后与巴戟天聚在一起,而虎刺则单独聚为一支。结论 rDNA-ITS序列可作为巴戟天与混伪品的一种较好的分子指纹图谱的标记方法。]]> 2015/1/7 9:24:36 2630true 目的 应用近红外(NIR)光谱技术和化学计量学方法建立红参药材质量评价的新方法。方法 对红参同时进行原料定性鉴别和水分含量检测。将样品NIR光谱同标准光谱库相比较,计算相似度匹配值。以传统的干燥失重法(LOD)为参照方法,应用相关光谱法进行波长选择和多重散射校正(MSC)方法进行光谱预处理,采用偏最小二乘(PLS)回归方法建立NIR光谱预测水分含量的校正模型。结果 NIR光谱库可正确区别红参和伪品;最优PLS校正模型相关系数为0.9997。结论 此方法快速、准确,可用于中药生产企业的原料药材质量控制。]]> 2015/1/7 9:24:37 2629true 目的 研究微波辐照对菘蓝Isatisindigotica种子萌发率、淀粉酶、蛋白酶及幼苗发育的影响。方法 用微波辐照浸泡3h的菘蓝种子。结果 4种不同时间长度的处理均可以提高淀粉酶、蛋白酶活性,促进种子生理代谢,提高发芽率及促进幼苗发育。结论 低剂量微波辐照能促进菘蓝种子萌发和幼苗生长发育。]]> 2015/1/7 9:24:37 2628true 目的 对羌活和宽叶羌活进行环境生态学比较,探讨环境植物学因素对野生羌活的影响,为羌活的野生抚育和引种驯化提供理论依据。方法 对四川甘孜、阿坝、青海互助和甘肃临潭等主产区进行了长期的野生环境考察研究,并对各主产地的土壤养分状况进行了初步分析。结果 野生羌活的生长、繁殖和分布主要受到3个方面的制约,即(1)土壤发育程度和养分状况,(2)土壤水分状况,(3)生境的植被覆盖状况。前二者受到植被覆盖状况的制约和影响,这些基础研究工作的欠缺是药用羌活植物引种长期难以取得成功的重要制约因素。结论 羌活原生生境土壤有机质、氮素和有效磷与宽叶羌活有较大差异,对羌活和宽叶羌活的分布影响很大;土壤中有机质、水解性氮、有效磷对羌活和宽叶羌活的药材质量的影响极大,但其定量关系有待进一步研究。]]> 2015/1/7 9:24:37 2627true ,具有滋阴益气、凉血解毒、润肺止咳的功效.目前已经在盘龙参中分离得到了dihydrophenanthrene derivatives、甾醇类成分、阿魏酸酯成分、烷类成分及其他成分.]]> 2015/1/7 9:24:37 2626true [1].本品甘、苦、平,具有解毒消肿、散瘀止痛、化痰止咳、祛风利湿的功效.主治风湿痹痛、泄泻、痢疾、感冒、咽喉肿痛、肺热咳嗽、风毒流注、疮疡肿痛、跌打损伤、毒蛇咬伤^[2,3].]]> 2015/1/7 9:24:37 2625true [1],尚有非正品草本威灵仙(草龙胆)Veronicastrum sibiricum(L.)Pennell的干燥根及根茎和红花龙胆G.rhodantha Franch.的干燥全草.龙胆苦、寒,归肝、胆经,具有清热澡湿、泻肝胆火的功效^[1],主要分布于黑龙江、吉林、辽宁、内蒙古,浙江、湖南、江西、福建、江苏、广东、新疆也有分布.]]> 2015/1/7 9:24:37 2624true 2015/1/7 9:24:37 2623true 2015/1/7 9:24:37 2622true 目的研究半夏P inellia terna ta珠芽的萌发动态及其影响因子,为阐明半夏珠芽的生产应用和珠芽发育生物学提供依据。方法利用完全随机实验设计研究半夏珠芽的萌发动态以及珠芽大小、不同覆土深度、土壤干湿度和不同来源对半夏珠芽萌发和半夏生长的影响。结果四川南充半夏珠芽播种约14 d开始萌发,23 d萌发率达60%以上,29 d完成萌发。直径≥8 mm的珠芽的萌发率显著高于5 mm≤直径<8 mm的珠芽;两种覆土深度10和20 mm对半夏珠芽的萌发和半夏幼苗的生长没有显著性影响;保持土壤湿润的珠芽萌发率显著高于土壤见干见湿的珠芽;从播种到23 d时,四川南充半夏的珠芽萌发率极显著高于山西新绛半夏的珠芽,随后二者的萌发率没有显著性差异。另外发现不同来源的半夏珠芽在萌发时叶形会发生变化。结论培育大的珠芽对半夏繁育有重要意义,保持土壤湿度对提高萌发率和促进半夏幼苗生长有重要作用,不同来源的半夏珠芽具有不同的萌发特点和生长特性,应重视半夏不同品系的筛选。]]> 2015/1/7 9:23:50 2621true 目的建立河北道地药材热河黄芩的HPLC指纹图谱,并与不同产地黄芩药材指纹特征相比较,为科学评价与有效控制黄芩质量提供新方法。方法采用HPLC法测定了热河黄芩等11个不同产地黄芩样品。色谱条件:C18柱,乙腈-0.25%磷酸-四氢呋喃为流动相进行梯度洗脱,检测波长274 nm,体积流量1.0 mL/m in,柱温30℃。结果建立了HPLC指纹图谱共有模式,并对不同产地药材进行了相似度比较。结论色谱指纹图谱分析法能简便、快速地鉴别和区分不同来源的黄芩药材,为全面控制黄芩药材的质量提供了依据。]]> 2015/1/7 9:23:51 2620true 目的建立和优化获得量大而高紫杉醇愈伤组织的培养技术和方法。方法以山西陵川县野生和在西安栽培的南方红豆杉为材料,就最佳母株、外植体种类、基本培养基、植物激素种类及浓度对愈伤组织诱导、生长和紫杉醇的影响等因素进行了系统研究。结果幼茎外植体因诱导的愈伤组织时间早、频率高而最佳;培养基Y 5:M S+2,4-D 4.0 m g/L+K IN 1.0 m g/L或B 5Ⅲ:B 5+2,4-D 3.0 m g/L+K IN 0.1 m g/L+Phe 0.1 m o l/L为最佳诱导愈伤培养基,其诱导频率高达100%。继代培养基中质量浓度2,4-D(0.5~3 m g/L)促进愈伤组织增殖;高质量浓度(8 m g/L)则有抑制作用。当2,4-D质量浓度适宜时,愈伤组织在B 5培养基上较在M S培养基上褐化轻、生长快。HPLC分析表明紫杉醇最高的继代培养基为M SⅢ,其紫杉醇质量分数高达干重的0.004%;野生母株幼芽来源的愈伤组织,其紫杉醇普遍高于栽培母株幼茎来源的愈伤组织。结论以5月份野生红豆杉幼茎为外植体,以Y 5或B 5Ⅲ为诱导培养基和继代培养基,继代8~10代,每代培养30~35 d;用M SⅢ培养基再培养1~2代,收获愈伤组织或细胞培养物,并从中提取紫杉醇是获得大量高紫杉醇愈伤组织的较佳培养程序。]]> 2015/1/7 9:23:51 2619true 目的研究激素与诱导子对决明毛状根生长和蒽醌类化合物合成的影响。方法用发根农杆菌LBA 9402感染决明C assia obtusif olia外植体,建立决明毛状根培养系统。结果NAA为决明毛状根培养的最适外源激素,培养基中添加0.05%NAA可使毛状根中5种蒽醌类化合物总和提高4倍。黑曲霉诱导子对毛状根生长影响不大,却明显促进蒽醌类化合物的形成,其中每50 mL培养基加入2.0 mL诱导子可使蒽醌类化合物总量增加2倍多。茉莉酸(JA)对决明毛状根中蒽醌类化合物合成具有明显的促进作用,其中10μm o l/L作用最强,蒽醌类化合物总量比对照提高73%,JA对毛状根生长有抑制作用,但不太显著。结论为进一步筛选适宜的决明毛状根培养系统并调控次生代谢产物的研究奠定了基础。]]> 2015/1/7 9:23:51 2618true 目的研究氮、磷肥对丹参生长发育及次生代谢物的影响。方法采用大田试验与室内分析相结合的方法。结果氮对丹参素及丹参酮ⅡA的积累表现了负面的效应,随施氮量的增加,丹参素及丹参酮ⅡA的质量分数逐渐减小。磷肥对于丹参素和丹参酮ⅡA的积累表现正效应。施用磷肥可以缓解施氮造成的丹参素和丹参酮ⅡA的下降。丹参酮ⅡA和丹参素的积累高峰值均出现在150 d左右。结论施氮有利于丹参产量的增加,施磷有利于丹参素和丹参酮ⅡA的积累。]]> 2015/1/7 9:23:51 2617true [1～4].]]> 2015/1/7 9:23:51 2616true [1].喜树全株含抗肿瘤生物碱喜树碱(camptothecin,CPT)及衍生物^[2].1966年美国的Wall等首次从喜树中分离出喜树碱^[3],抗肿瘤实验证明这种吲哚类生物碱具有抗癌活性^[4],但由于其副作用较大,未能实现临床应用^[5].]]> 2015/1/7 9:23:51 2615true [1].有消肿排脓、祛瘀止痛的功效,临床上用于治疗急性阑尾炎初起、瘰疬、无名肿痛、宫颈糜烂、跌打损伤、骨折等症^[2].]]> 2015/1/7 9:23:51 2614true [1].主产于我国华北、华南、华东等沿海各省,传统上认为山东产蔓荆子为道地药材,品质佳^[2].]]> 2015/1/7 9:23:51 2613true [1].]]> 2015/1/7 9:23:52 2612true 目的 为了验证CodA基因是否适宜作为有效的青蒿基因打靶负选择标记.方法 用PCR法扩增大肠杆菌胞嘧啶脱氨酶基因CodA,经克隆和测序后插入植物基因表达载体pROK,并导入根癌农杆菌LBA4404(pAL4404)中.以共培养法转化青蒿叶盘,在添加25μg/mL卡那霉素(Kan)的N6培养基上选择青蒿转化愈伤组织并再生绿芽.将Kan抗性转基因青蒿芽转植到含有500μg/mL5-氟胞嘧啶(5-FC)和25μg/mLKan的MS培养基上继续培养2周.结果 转基因青蒿芽全部死亡,而未转化青蒿芽仍正常生长,表明导入CodA基因的青蒿细胞已赋予其预期的负选择表型.经RT-PCR检测,转基因青蒿芽显示CodA阳性扩增带,而未转化青蒿芽无此特异扩增带.这一结果显示,CodA基因已在青蒿细胞中转录生成相应的mRNA,从而进一步印证了表型检测结果.结论 CodA基因可作为有效的青蒿基因打靶负选择标记.]]> 2015/1/7 9:23:34 2611true 目的 分离和鉴定肉苁蓉茎腐病病原菌,研究其生物学特性,并室内筛选对该病原菌有效的杀菌剂.方法 组织分离法和菌丝尖端纯化法得到主要病原菌,通过测量不同营养条件下菌落生长直径研究其生物学特性,平皿菌丝生长抑制法进行杀菌剂的生物测定.结果 接骨木镰刀菌Fusariumsambucinum是肉苁蓉茎腐病的主要病原菌,为首次记录;适合其生长的培养基为PSA培养基,对碳和氮的吸收主要以蔗糖和蛋白胨为主,适宜生长温度为10～30℃,适宜生长pH为6～8;多菌灵、菌线威、绿享二号在室内可以有效地抑制病原菌.结论 该病原菌的分离鉴定可以为该病害原的防治提供理论依据.]]> 2015/1/7 9:23:34 2610true 目的 研究石斛的光合特性,了解其适宜栽种的光强.方法 测定霍山县3种石斛(霍山石斛Dendrobiumhuoshanens,铁皮石斛D.candium,铜皮石斛D.moniliforme)的光合速率对光强响应曲线,不同光强处理时叶绿素荧光参数的变化及3.0×10⁴ lx瞬时光强下叶片荧光猝灭诱导.结果 霍山县3种石斛属于阴生植物对光强的响应,光饱和点、光补偿点较低,净光合速率和表观量子效率都较低;大于4.0×10⁴ lx强光下石斛叶片受光抑制严重.结论 霍山县3种石斛生长光强,一般为(0.2～
2.0)×10⁴lx;可以在(
2.5～3.0)×10⁴lx光强的环境中生长;不适宜在大于4.0×10⁴lx光强的环境中生长.]]> 2015/1/7 9:23:34 2609true 目的 建立一种稳定、可靠的鉴别和控制林蛙油质量的方法.方法 利用高效液相色谱法,测定10批林蛙油药材建立指纹图谱.色谱条件:DimonsilC₁₈分析柱(250mm×4.6mm,5μm),柱温:25℃,流动相:乙腈-水(50:50),分析时间60min.结果 测10份不同林蛙油商品完整药材的丙酮提取物的HPLC图谱.结论 在本色谱条件下,可以检出17个相应位置稳定的共有峰,可作为确定鉴定林蛙油的指标峰.]]> 2015/1/7 9:23:34 2608true 目的 探讨独活种子的发芽率低的原因,以及适宜发芽条件,为大田生产奠定基础.方法 采用去果皮、清水以及GA浸种等方法处理种子,在不同的温度和光照条件下,检测种子的发芽情况.结果 清水浸种24h可提高发芽率13.7%,去果皮可提高种子发芽率10.6%;在浸种24h条件下,与暗培养相比,光照可提高发芽率16.6%;适宜发芽温度为20℃,高温对独活种子萌发具有抑制作用.结论 独活种子中存在发芽抑制物质,光照可促进种子发芽.]]> 2015/1/7 9:23:35 2607true 目的 为加速灯盏花的人工种植与品种改良,利用组织培养技术建立灯盏花快速繁殖体系.方法 利用种子直接萌发的无菌苗在培养基培养加速种苗繁殖,通过在消毒前对种子进行预处理,采用合适时间消毒种子来减少消毒剂对种子伤害从而提高发芽率;采用不同激素配比从叶片与叶柄诱导愈伤组织,并进一步分化获得再生植株.结果 种子去除冠毛后0.1%HgCl2消毒6min可获得最佳发芽率,MS0上培养一个月后即可获得生长健壮的幼苗用于移栽;利用无菌苗的叶柄在MS+6-BA
2.0mg/L+NAA1.0mg/L培养基上获得了大量分化能力强的愈伤组织,愈伤分割后在该培养基上可继续分化出苗,分化苗转接到MS₀上可形成正常植株.结论 利用种子灭菌处理获得无菌苗用于组织培养可实现灯盏花快速繁殖和缩短人工育苗时间.]]> 2015/1/7 9:23:35 2606true 目的 考察4种不同规格并头黄芩的药用价值和黄芩苷提取条件.方法 采用HPLC法测定不同规格并头黄芩的黄芩苷和汉黄芩苷含量.结果 4种不同规格并头黄芩中黄芩苷含量依次为1
2.89%、13.82%、11.75%和10.85%,汉黄芩苷含量依次为0.28%、0.22%、0.24%和0.27%;随提取溶剂中醇浓度的增加,黄芩苷提取率先增高后降低,碱性条件降低黄芩苷提取率.结论 4种不同规格并头黄芩的黄芩苷和汉黄芩苷含量差异不大,且黄芩苷含量均高于《中华人民共和国药典》要求;提取条件为50%中性乙醇提取最佳.]]> 2015/1/7 9:23:35 2605true S.microphyzla Diels的主要活性成分.]]> 2015/1/7 9:23:35 2604true 2015/1/7 9:23:35 2603true 目的 利用直接扩增片段长度多态(DALP)这一新分子标记技术建立一套稳定的红景天属植物的DALP反应体系。方法 以红景天基因组DNA为模板,对DALP反应程序的一些重要参数进行摸索和优化试验。结果 建立了一套稳定性强、可靠性高的DALP应用反应体系;经过大量重复性实验,反应体系为20μL,Mg2+浓度为2.5 mmol/L,dNTPs浓度为1.25 mmol/L,模板DNA的量为60 ng,5 pmol/L选择性引物1μL,5 pmol/L反向引物3 μL,引物浓度比为1:3,Taq酶2 U。反应过程为:95℃预变性5 min、94℃变性30 s、50℃退火30 s、72℃延伸1 min;30个循环,再72℃延伸10 min,完成整个PCR反应。结论 该体系可有效地应用于红景天属药材的分类鉴定和地道性鉴定。]]> 2015/1/7 9:23:01 2602true 目的 采用ISSR-PCR方法对石斛属9种植物进行鉴别,探讨不同种石斛在DNA分子水平上的差异。方法 选取10条由SSR组成的引物,对9种石斛进行PCR扩增及琼脂糖凝胶电泳分析。结果 10条引物中有7条扩增出多态性条带。每条引物可检测的多态性位点最少7个,最多14个,扩增片段大小为220-1260 bp。其中,引物UBC-807和UBC-864具有较高的多态性条带比率,均可以独立将所有被测种区分开来。结论ISSR-PCR作为一种简便、可靠的分子标记鉴定技术,可以作为石斛属种间鉴别的方法之一。]]> 2015/1/7 9:23:01 2601true 目的 研究霍山石斛荚果内遗传稳定性及荚果间的差异大小。方法 利用从20个随机引物筛选出来的3个稳定性较好的10碱基引物对来自5个不同荚果的霍山石斛种群进行RAPD检测。结果 5个荚果内遗传相似系数较大,在92.5926%-100.00%,其中H1、H9、H10、H14存在一定程度的变异,H23是一个较为稳定的群体;5个荚果间H1、H9、H10、H23的遗传距离较小,H14与其他4个荚果的遗传距离则较大。结论 建立霍山石斛稳定的无性快繁体系是切实可行的,同时说明霍山石斛种内存在一定的变异,H14与其他荚果的差异最大。]]> 2015/1/7 9:23:01 2600true 目的 探讨不同种质资源、贮藏条件及萌发温度对缬草种子发芽率的影响。方法 采用不同条件贮藏的缬草种子进行常规种子发芽试验,计算不同萌发条件下的种子发芽率。结果 不同来源的缬草种子发芽率有较大差异,缬草的种子发芽率要高于其变种宽叶缬草的发芽率,栽培缬草的种子发芽率要远高于野生缬草种子的发芽率。贮存时间、贮存温度、萌发温度等因素对缬草种子发芽率均会产生影响。结论 为保持缬草种子的发芽率,贮藏过程中要保持适当的低温和透气性,要长期保存缬草种子,则必须要以较低的温度保存;种子繁育要在适宜的时间和温度等条件下进行。]]> 2015/1/7 9:23:01 2599true 目的 选育盾叶薯蓣Dioscoreazingiberensis新种质资源,以期为高产、高皂苷元含量薯蓣育种打下基础。方法 以刚露出绿色芽点的盾叶薯蓣愈伤组织块为材料,采用两种方法处理:①愈伤组织块浸泡到秋水仙素水溶液中。②培养基中添加秋水仙素。结果 成功获得了染色体数加倍的薯蓣新材料,其中以1×103mg/L秋水仙素水溶液浸泡24 h效果最好,诱导率达到35.2%,四倍体植株与二倍体亲本相比,二者在外观形态、生理指标、显微结构上有明显区别。结论 四倍体植株体型大、具生长优势,离体条件下利用愈伤组织块诱导多倍体是盾叶薯蓣倍性育种的一条有效途径。]]> 2015/1/7 9:23:02 2598true 目的 寻找束花石斛快繁育苗的有效途径。方法 采用组织培养和野生自然栖息的束花石斛诱导高位腋芽萌发等途径进行探索。结果 在组织培养中,改良1/2MS培养基的原球茎形成效果最好,调整不同浓度的N、P、K及外源激素对诱导束花石斛原球增殖、生根壮苗极为明显;外源激素对诱导束花石斛的高位腋芽萌发无明显效果,高位芽萌发与茎株生理年龄和营养状况有关。结论 人工种植束花石斛采用现代生物技术组培育苗和腋芽繁殖是目前快繁育苗的最有效途径,不仅育苗量大、周期短,且生长快、成活率高,两条途径对于束花石斛的产业化发展有重要意义。]]> 2015/1/7 9:23:02 2597true 方法采用比色法和薄层扫描法,本实验采用HPLC法测定金荞麦中(-)-表儿茶素的含量。1 仪器、试药与样品]]> 2015/1/7 9:23:02 2596true 结果准确、可靠。可用于红景天药材及其制剂中没食子酸的含量分析。]]> 2015/1/7 9:23:02 2595true 2015/1/7 9:23:02 2594true 方法简便快速、灵敏准确,为该药材的质量评价提供参考依据。1 仪器与试药]]> 2015/1/7 9:23:02 2593true 2015/1/7 9:23:02 2592true 2015/1/7 9:23:02 2591true 目的 利用ISSR标记技术对怀区地黄的8个品种和2个茎尖培养脱毒系进行了遗传多样性分析。方法 用44条ISSR引物进行初选,然后用其中适合的10个ISSR引物进行ISSR分析。结果 10条ISSR引物共扩增出110条带。基于这些条带,用SPSS10.0软件分析,建立了遗传Jaccard相关系数矩阵,构建了分子树状图,将怀区地黄的8个品种和2个组培系分为2类:其中-类群含有6个材料,包括组培85.5、大田85.5、组培9302、大田9302、金状元和金白地黄;另-类群含有4个材料,包括北京1号、大红袍、地黄9104和野生地黄。而且主成分分析结果支持上述的聚类分析结果;用POPGENE32软件分析知,多态性指数为0.3775,有效等位基因数为1.4037,多态性比率为71.82%;用-个ISSR6引物建立了10个供试地黄样品的DNA指纹图谱并且能将其彼此区分出来。结论 ISSR标记适合于构建怀区地黄的DNA指纹图谱、品种鉴定和遗传多样性分析。]]> 2015/1/7 9:22:17 2590true 目的 针对青叶胆野生资源受到严重破坏的情况,系统地探讨了通过组织培养为手段进行人工繁殖的方法。方法 以幼茎和老叶为外植体,在MS培养基上添加不同的激素配比,改变培养方式。结果 在所有实验方案中,对叶片来说,较适宜诱导愈伤组织的激素组合是Zt0.5mg/L+NAA0.1mg/L+IBA0.1mg/L或BA0.5mg/L+2,4-D0.1mg/L+IBA0.1mg/L,对幼茎来说,较适宜的诱导愈伤组织的激素组合则是BA0.02mg/L+Kt0.04mg/L+IBA0.05mg/L;对于芽的增殖,较适宜的激素组合是BA2.0mg/L+NAA0.5mg/L或BA2.0mg/L+IBA0.1mg/L;而根的诱导则在MS+Kt0.01mg/L+IBA0.5mg/L+NAA1.0mg/L培养基上进行。结论 采用组织培养方式可进行青叶胆的快速繁殖,为确保这-珍稀药用植物资源的保护和可持续利用提供有效途径。]]> 2015/1/7 9:22:17 2589true 目的 探讨乙烯利、乙酰水杨酸、色氨酸3种试剂对长春花植株中药用成分积累的影响。方法 用不同质量浓度的3种试剂溶液分别处理温室盆栽长春花植株,2d后,测定叶片中的总吲哚生物碱含量,并采用RP-HPLC法测定长春碱和长春质碱的含量。结果 3种试剂处理后吲哚总碱、长春碱、长春质碱的积累均有明显的提高,并确定了最适的处理质量浓度。结论 3种试剂对长春花植物中吲哚生物碱的产生有明显的促进作用。]]> 2015/1/7 9:22:18 2588true 目的 建立荒漠肉苁蓉Cistanche deserticola的HPLC指纹图谱,评价不同来源的荒漠肉苁蓉药材的内在质量差异。方法 采用HPLC梯度洗脱的方法建立指纹图谱,“计算机辅助相似度评价系统”软件进行数据处理,据此对不同来源的药材进行比较分析。结果 方法精密度、稳定性、重现性较好;不同来源的药材指纹图谱差异较大。结论 不同来源的荒漠肉苁蓉药材的内在质量差异较大,该方法可用于评价肉苁蓉药材的质量。]]> 2015/1/7 9:22:18 2587true 目的 揭示广藿香茎的发育及不同发育阶段挥发油在其内的分布,为合理的取药、用药提供理论和实践上的指导。方法 石蜡切片法、半薄切片法、组织化学法。结果 在广藿香茎的原分生组织中,未观察到有挥发油分布;在茎的初生、分生组织和初生结构形成早期,挥发油主要分布在茎表皮上着生的腺毛中;在茎的初生结构中,挥发油主要分布在皮层薄壁组织细胞中;在茎的次生结构中,挥发油则主要分布在残存的皮层薄壁组织细胞中。结论 广藿香茎内的发挥油主要分布在茎的皮部,广藿香茎皮的厚薄可作为优良品种的选育指标。]]> 2015/1/7 9:22:18 2586true 目的 用RAPD方法对康定虫夏、人工虫草及虫草发酵菌丝体进行指纹图谱的研究,为不同虫草的品质和药效差异提供分子依据。方法 从65个随机引物中筛选出7个引物,以这7个引物进行PCR扩增,电泳得到其指纹图谱。结果 没有发现任何两个样本拥有完全相同的RAPD标记,康定冬虫夏草和人工虫草具有较高的遗传多态性,而与虫草发酵菌丝体相比差异较大。结论 来自不同产地冬虫夏草群体均表现出其独特的RAPD标记,其差异可能系虫体的不同所致。随机扩增的DNA片段的差异是否预示其药效的不同,有待进-步研究。]]> 2015/1/7 9:22:18 2585true 目的 对马蹄香进行生药鉴定,并与易混品华细辛鉴别。方法 原植物特征和药材性状描述,显微镜观察,薄层色谱、高效液相色谱和荧光实验比较。结果 马蹄香和华细辛的原植物主要在是否有地上茎、叶柄是否被毛,花的类型、颜色和果实特征方面有所不同;药材性状在形状、颜色、质地、断面以及气味上存在差异;显微特征在是否检出油细胞或木纤维群以及横断面特征、淀粉粒形态上有区别;薄层、高效液相色谱和荧光特征也有明显差异,并在马蹄香中检出马兜铃酸A。结论 为马蹄香的生药鉴定及其与华细辛鉴别提供了依据,并提示使用马蹄香应防止可能发生的马兜铃酸的毒性危害。]]> 2015/1/7 9:22:18 2584true 目的 从治疗老年痴呆药用植物千层塔中分离内生真菌,并进行初步鉴定。方法 用PDA平板培养基分离菌株,对照真菌鉴定手册,根据菌株的菌落形态、大小、颜色、生长速率、质地、生长培养基颜色变化以及菌丝体和孢子的形态特征进行鉴定。结果 从千层塔的茎中分离出4株内生真菌,分别属于顶孢霉属、单轴霉属、酵母和青霉属。结论 首次从千层塔中分离和鉴定出4株内生真菌。]]> 2015/1/7 9:22:18 2583true 2015/1/7 9:22:18 2582true Aristolochia fangchi Y.C.Wu ex L.D.Chou et S.M.Hwang的干燥根)药用标准，凡国家药品标准处方中含有广防己的中成药品种应于2004年9月30日前将处方中的广防己替换为《中华人民共和国药典》2000年版-部收载的防己(防己科植物粉防己Stephania tetrandra S.Moore的干燥根)。鉴于防己类中药同名异物或名称类似者多，为此，笔者查阅有关资料，结合20多年工作经验和市场实况，对防己类中药进行综述，并对健全防己的质量标准提出己见。]]> 2015/1/7 9:22:18 2581true 目的研究云南常见药用植物红景天的遗传背景。方法采用RAPD技术对3种6个居群59个红景天样品进行了遗传关系研究。结果大花红景天3个居群的多态位点百分率(PPB)分别为37.97%、46.15%、39.45%,Nei’s基因多样性(h)分别为0.1103、0.1437、0.1371,Shannon’s信息指数(I)分别为0.1736、0.2221、0.2067,物种水平的PPB为70.47%,I为0.2583,基因分化系数Gst为0.2630;长鞭红景天2个居群的PPB分别为43.67%、44.42%,I分别为0.2153、0.2174,物种水平的PPB为65.51%,Gst为0.3132,I为0.3139;云南红景天的PPB为36.97%,I为0.1881。结论RAPD分子标记可很好地用于红景天物种的分子鉴定和遗传背景研究。]]> 2015/1/7 9:21:59 2580true 目的用RAPD和ISSR方法分析了4种正品龙胆的亲缘关系及遗传多样性,为正品龙胆的品种鉴定及栽培育种提供了分子生物学依据。方法优化RAPD及ISSR的PCR反应体系,对产物琼脂糖凝胶电泳结果进行数据统计。结果从100个RAPD引物和32个ISSR引物中分别筛选出10个RAPD引物和4个ISSR引物。通过遗传距离系数UPGMA聚类法分析数据,构建类聚关系树系图。结论RAPD及ISSR的PCR反应体系可以获得理想的实验结果,适用于龙胆品种遗传多样性及亲缘关系的分析。]]> 2015/1/7 9:21:59 2579true 目的建立留坝西洋参药材皂苷成分的特征图谱。方法通过固相萃取小柱预处理样品,电喷雾质谱正离子模式全扫描法检测。结果从西洋参药材总提物的正离子全扫描总离子流图中选择了3个具有代表性的强峰,建立了西洋参药材皂苷成分的特征对应图谱。结论该方法有较好的重现性,能准确分析、鉴别西洋参药材。]]> 2015/1/7 9:21:59 2578true 目的研究东北红豆杉枝叶中HPLC指纹图谱,以便完整地反映东北红豆杉枝叶内在化学信息,全面评价东北红豆杉内在质量。方法采用高效液相色谱法分析东北红豆杉枝叶乙醇提取物。结果建立了东北红豆杉指纹图谱,对10批不同采收时间的东北红豆杉枝叶进行了指纹图谱分析,得出主要共有峰相对保留时间,相对峰面积作为东北红豆杉枝叶指纹谱相关技术参数。结论东北红豆杉枝叶指纹图谱可用于评价其药材质量。]]> 2015/1/7 9:21:59 2577true 目的建立了毛细管电泳高频电导法快速简便测定桂皮中桂皮酸的新方法。方法考察了实验参数对分离和检测的影响。电泳条件为:缓冲液5mmol/LTris+1mmol/LH3BO3+10%CH3OH(pH=9.0),分离电压20.0kV。结果桂皮酸的峰形良好,出峰时间快,线性范围为0.35～17.0μg/mL,检出限为0.15μg/mL。桂枝药材用缓冲溶液超声提取后测定,方法回收率达93.5%～97.0%。结论为桂皮酸的含量测定提供了一种快速和简便的方法。]]> 2015/1/7 9:21:59 2576true 目的系统调查研究云南黄连的资源分布、生物学和生态学特性、利用历史和现状,为科学保护和合理开发利用这一传统地道药材提供基础资料。方法室内文献资料和标本查阅、药用民族植物学调查和野外考察相结合的方法。结果研究报道云南黄连的生物学和生态学特性、生长发育规律、自然分布特点和利用历史及现状。结论应加强保护野生种质资源和合理开发利用这一药用植物。]]> 2015/1/7 9:22:00 2575true 目的对总序香茶菜进行组织培养和离体快速繁殖。方法以总序香茶菜带芽茎段为外植体,在附加有不同种类和不同浓度激素的MS培养基上进行培养。结果最佳芽诱导培养基:MS+BA0.05～0.5mg/L+NAA0.01～0.05mg/L;最佳芽增殖培养基:MS+BA0.5mg/L+NAA0.05mg/L(或IAA0.01mg/L);最佳生根培养基:MS+NAA0.1mg/L+活性炭0.05%;最佳愈伤组织诱导与生长培养基为:MS+2,4-D1.0～2.0mg/L+BA0.1～0.2mg/L。结论成功建立了快速无性繁殖系。]]> 2015/1/7 9:22:00 2574true 目的建立蛇床子Cnidiummonnieri中蛇床子素(osthole)、欧芹属素乙(imperatorin)和异茴芹素(isopimpinellin)的高效液相色谱测定方法。方法采用VercoparkInertsilN-5ODS柱,1%醋酸-甲醇(梯度为0～30min1%醋酸95%～5%)为流动相,检测波长254nm。结果该法回收率蛇床子素为99.1%,欧芹属素乙为95.8%,异茴芹素为97.3%;RSD蛇床子素为1.8%,欧芹属素乙为0.8%,异茴芹素为3.3%(n=5)。结论本方法为蛇床子药材、蛇床子提取物及含蛇床子药材的复方的质量评估提供了可靠的依据。]]> 2015/1/7 9:22:00 2573true 2015/1/7 9:22:00 2572true 2015/1/7 9:22:00 2571true 2015/1/7 9:22:01 2570true 2015/1/7 9:22:01 2569true 2015/1/7 9:22:01 2568true 2015/1/7 9:22:01 2567true 2015/1/7 9:22:01 2566true 2015/1/7 9:22:01 2565true 2015/1/7 9:22:02 2564true 2015/1/7 9:22:02 2563true 2015/1/7 9:22:02 2562true 2015/1/7 9:22:02 2561true 2015/1/7 9:22:02 2560true 2015/1/7 9:22:02 2559true 目的探讨青海省不同地区冬虫夏草的鉴定方法,并评价其遗传变异、亲缘关系及地域分布。方法利用形态性状和ISSR标记分析青海省11个县的冬虫夏草样品。结果青海省不同地区的冬虫夏草无论是形态性状还是ISSR多态性都存在很大的遗传变异。根据形态性状数据,青海省的冬虫夏草大致分成3个组,即分别产于环青海湖地区、青海中东部和南部,但仅基于形态性状来鉴定特定的冬虫夏草十分费力且不可靠。根据ISSR指纹图谱能够鉴定不同产地的冬虫夏草,而且ISSR分析表明青海省的冬虫夏草可分成产于环青海湖地区和其他地区两大类,其他地区一大类又可分成青海省南部、中部和东部产区3个平行分支。结论青海省的冬虫夏草在分布上表现出明显的地域性。ISSR分子标记对于冬虫夏草的鉴定和亲缘关系检测是非常有效的手段,与形态性状分布相结合效果更佳。]]> 2015/1/7 9:27:34 2558true 目的建立莨菪Hyoscyamus niger的发根培养体系。方法分别用A4、LBA9402和C58C1三种发根农杆菌菌株转化莨菪子叶受体,获得发根;测定发根的生长曲线和比较不同因素对发根生长量的影响;PCR鉴定转化发根;莨菪发根中生物碱类含量的测定。结果首次利用发根农杆菌A4、LBA9402、C58C1三种菌株成功从莨菪中诱导出发根,并建立了莨菪发根最优的培养体系;经PCR鉴定证明Ri质粒的T-DNA已转化进莨菪的发根中。结论莨菪发根培养体系的建立为利用遗传代谢工程手段调节莨菪次生代谢物含量和进行药用活性成分的工业化生产奠定了基础。]]> 2015/1/7 9:27:35 2557true 目的建立甘草药材的HPLC指纹图谱。方法采用反相高效液相色谱法,选用Zorbax SB-C₁₈柱(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱;流动相为乙腈-1.2%醋酸溶液(梯度洗脱);分析时间70min;检测波长为254nm。结果建立了甘草药材的HPLC指纹图谱,标定了甘草药材38个共有指纹峰,方法学考察结果符合指纹图谱技术要求。结论方法稳定、可靠、重复性好,可为甘草药材质控标准的制定和含甘草的中药方剂的物质基础研究提供参考。]]> 2015/1/7 9:27:35 2556true 目的通过对鱼腥草白绢病的发生发展规律和防治方法的研究,为该病的综合防治提供一定的依据。方法采用田间调查、田间试验和室内实验相结合的方式。结果种茎处理以多菌灵的效果最好,发病率最低,产量最高;PDA平板测定表明木霉对鱼腥草白绢病拮抗作用极强,优于常用农药处理;在3个木霉菌剂质量浓度中,20g/m²的防治效果最好,其防治效果达到了60.28%。结论采用多菌灵处理鱼腥草种茎和20g/m²木霉制剂处理土壤能较好地防治鱼腥草白绢病。]]> 2015/1/7 9:27:35 2555true 目的制定毛脉酸模药材质量标准,为该药用植物资源的开发利用提供科学依据。方法生药学研究,浸出物测定法,灰分测定法,水分测定法,薄层色谱法及HPLC色谱法。结果对毛脉酸模的性状、显微特征进行了描述;对14个不同产地毛脉酸模的浸出物、总灰分、酸不溶性灰分和水分进行了测定;同时进行了薄层定性鉴别和HPLC色谱的定量研究。结论通过研究制定了毛脉酸模的质量控制标准。]]> 2015/1/7 9:27:35 2554true 2015/1/7 9:27:35 2553true 2015/1/7 9:27:35 2552true 2015/1/7 9:27:35 2551true 2015/1/7 9:27:36 2550true 2015/1/7 9:27:36 2549true 目的确定病毒病对半夏植株生长的危害,通过组织培养手段对病毒进行脱毒技术研究。方法采取高温钝化结合茎尖培养的方法,用多种激素诱导茎尖成苗、长根及增殖等。结果用6-BA1.0~2.0mg/L、NAA0.2mg/L诱导成苗可有效地脱去病毒;6-BA2.0mg/L附加适量的NAA和GA3可促进珠芽增殖及试管苗的生长速度;IAA0.2~0.5mg/L可促进半夏根系的发育;6-BA2.0mg/L、GA30.2mg/L配以适当质量浓度的2,4-D和NAA可促进叶片愈伤组织形成丛生苗。结论对半夏病毒病的脱毒率达到80%,脱毒植株叶片的内部结构排列有序、清晰可见。]]> 2015/1/7 9:26:37 2548true 目的观察药用石斛根的内部结构,以期辅助鉴定生药石斛。方法利用形态组织学方法,对茎多肉质的束花石斛Dendrobium chrysanthum及其易混的玫瑰石斛D.crepidatum、报春石斛D.primulinum、重唇石斛D.hercoglossum、晶帽石斛D.crystallium;茎粗硬的流苏石斛D.fimbriatum及其易混的叠鞘石斛D.aurantiacumvar.denneanum;茎节或节间肿胀的棒节石斛D.findlayanum、杯鞘石斛D.gratiosissimum、肿节石斛D.pendulum和大苞鞘石斛D.wardianum共11种药用石斛根进行显微结构研究;对根横切面结构相似的流苏石斛和叠鞘石斛,配合进行了根被表面制片观察。结果根被细胞的形状及皮层厚度,中柱的木质部束数、导管的直径、髓的构成,晶体的类型与大小存在种间差异。流苏石斛和叠鞘石斛根被表面观结构不同。结论根的组织构造特征可用于药用石斛的辅助鉴别。]]> 2015/1/7 9:26:37 2547true 目的建立赤、白首乌HPLC指纹图谱鉴定方法。方法用RP-HPLC(DAD)法,梯度洗脱,测定赤、白首乌、加工炮制品及其何首乌粉的指纹图谱,并作相似度比较分析。结果何首乌不同样品指纹图谱相似度较好,而何首乌与白首乌的指纹图谱具有明显区别,何首乌炮制前后、白首乌加工前后也有差异。结论HPLC指纹图谱具有重现性好、特征性强、方法简便等特点,可用于赤、白首乌药材的鉴别。]]> 2015/1/7 9:26:37 2546true 目的对广州相思子(鸡骨草)实施规范化栽培(GAP)研究,探索优质丰产栽培技术。方法以国家食品药品监督管理局颁布的《中药材生产质量管理规范》为指导原则,开展鸡骨草GAP栽培。结果实施GAP栽培管理鸡骨草的浸出物和黄酮量比非GAP栽培管理的高,农残和重金属的量较低。结论开展鸡骨草GAP种植,通过严格选地、选种、选施无污染无公害肥料与农药,可有效地控制药材中有害重金属与农药残留量,提高鸡骨草的质量和产量。]]> 2015/1/7 9:26:37 2545true 目的探讨三叶木通种子品质对栽培用种价值的影响。方法用电子天平测定种子净度及饱满度,用水分仪测定种子含水量,通过发芽试验确定种子发芽率。结果三叶木通鲜种子的种子净度、百粒质量、千粒质量、含水量、生活力、发芽率及发芽势分别为98.7%、6.64g、66.6g、43.1%、94.5%、82.6%、52.8%;风干10、60d时,三叶木通种子含水量分别为28.5%、7.8%,发芽率分别为64.3%、14.7%。结论三叶木通种子宜在30℃下清水浸种24h,5~12℃室温下湿沙层积发芽,当种子含水量低于8%时,失去栽培用种价值。]]> 2015/1/7 9:26:37 2544true 目的应用种子包衣技术,探索提高新疆紫草育苗成活率的有效措施。方法以非豆科牧草种衣剂对新疆紫草种子包衣处理,采用对比分析方法,以浸种灵及空白组为对照,定期观测出苗率、成苗率以及生长量,比较各处理种子的育苗效果。结果经包衣处理后,种子的出苗率、保苗率和当年的生长量分别提高14.25%、46.31%和42.02%。结论新疆紫草种子经包衣处理后能够显著提高育苗的成活率,有效促进幼苗的生长发育。]]> 2015/1/7 9:26:37 2543true 2015/1/7 9:26:37 2542true 2015/1/7 9:26:37 2541true 2015/1/7 9:26:38 2540true 2015/1/7 9:26:38 2539true 2015/1/7 9:26:38 2538true 2015/1/7 9:26:38 2537true 2014/12/23 13:21:07 2536true 2014/12/23 13:21:07 2535true 2014/12/23 13:21:07 2534true 2014/12/23 13:21:07 2533true 2014/12/23 13:21:07 2532true 2014/12/23 13:21:07 2531true 2014/12/23 13:21:07 2530true 2014/12/23 13:21:08 2529true >2000年版一部收载芦荟为百合科植物库拉索芦荟、好望角芦荟，或者其他同属近缘植物叶的汁液浓缩干燥物。芦荟有泻下，抗肿瘤、抗炎，促免疫，抗胃溃疡，促伤口愈合，抗辐射，保肝，降血压，降血糖，抗菌等作用。]]> 2014/12/23 13:21:08 2528true 2014/12/23 13:21:08 2527true 2014/12/23 13:21:09 2526true 目的研究3株长蠕孢属真菌对苗期毛脉酸模根中7种生物活性成分的影响。方法通过长蠕孢属真菌孢子悬浮液对苗期毛脉酸模叶面进行处理,使毛脉酸模感染长蠕孢菌。采用高效液相色谱法对苗期毛脉酸模根样品中的7种生物活性成分进行测定,并对其生物活性成分的量和产量分别进行了方差分析。结果3株长蠕孢属真菌叶面侵染苗期毛脉酸模对其根中白藜芦醇苷、大黄酚苷、大黄素甲醚的量在整个处理期内都没有显著性影响;对其根中白藜芦醇、酸模素、大黄素、大黄酚的量有显著性影响。结论从生物活性成分白藜芦醇的角度考虑,选择大斑病长蠕孢001进行诱导处理,处理时间不宜超过40d。本实验结果将为中药种植及天然药物的开发提供新的思路及理论基础。]]> 2015/1/6 17:14:33 2525true 目的对肉苁蓉属4个种进行鉴别。方法采用可溶性蛋白质SDS-PAGE凝胶电泳。结果肉苁蓉属4个种的SDS-PAGE图谱存在显著差异,其多态性条带为81.82%。结论各个种的电泳图谱可以相互区别,肉苁蓉属可溶性蛋白的SDS-PAGE图谱可作为种间鉴定的蛋白指纹图谱。]]> 2015/1/6 17:14:33 2524true 目的建立天麻的液相色谱指纹图谱,为科学评价及有效控制天麻质量提供新方法。方法采用HPLC法分析不同产地的18个天麻样品,确定指纹峰并进行对照药材相似度、共有模式相似度的计算,用纯品随行对照结合LC-MS对主要指纹峰进行定性鉴定。结果建立了由27个指纹峰和17个共有峰组成的天麻液相色谱指纹图谱,指纹峰具有特征性,鉴定了其中12个主要的指纹峰。用对照药材相似度,可将天麻样品分为3类安徽河南产天麻、陕西四川产天麻和云南产天麻。两个相关系数分界点为0.80和0.58,夹角余弦分界点为0.88和0.73。结论所选指纹峰有特征性,建立的指纹谱可用来区别3个产地的天麻药材,并为进一步控制天麻质量提供依据。]]> 2015/1/6 17:14:33 2523true 目的研究不同施磷水平下接种AM真菌摩西球囊霉Glomusmosseae、苏格兰球囊霉G.caledonium和两者的混合菌剂对柴胡Bupleurumchinense生长的影响。方法采用盆栽试验与室内分析相结合的方法。结果接种AM真菌提高了柴胡根系菌根侵染率,增加了植株磷的量和根干质量;叶片叶绿素、类胡萝卜素和可溶性糖的量明显高于对照株,而接种混合菌种的柴胡根可溶性糖的量低于对照株;AM真菌接种效应因菌种和施磷量不同而变化,施磷量为0.1~0.3g/kg时接种效果最好。结论接种AM真菌有利于柴胡生长,提高磷肥利用率。]]> 2015/1/6 17:14:33 2522true 目的为桔梗Platycodongrandiflorum种质资源的保存提供一条新途径。方法采用玻璃化法研究了桔梗试管苗茎尖超低温保存及植株再生。结果桔梗嫩梢在培养基(MS+5%DMSO+103g/L蔗糖)上培养3d,切取2~3mm茎尖,室温(20℃)下装载液(60%PVS2)过渡20min,0℃下玻璃化液(PVS2)处理90min,投入液氮保存1d后,40℃水浴化冻,含410g/L蔗糖的MS培养基洗涤20min,接种于含0.6mg/LKT、0.2mg/LBA、0.05mg/LNAA的MS培养基表面的滤纸上,暗处理1d后转移到新鲜的上述再生培养基中,暗培养1周后转到正常光下,80%以上成活,植株生长正常。结论桔梗种质资源的玻璃化法超低温保存操作简单、成活率高、再生植株正常,可用于生产实践。]]> 2015/1/6 17:14:33 2521true 目的研究种植人参生长期施用多菌灵后,农药在人参叶、茎与根部的动态降解试验及人参药材中的残留情况。方法采用HPLC法测定试验期所采集的样品中多菌灵农药的量。结果将数据进行回归处理,Y=-0.1207X+5.1424,r=0.974(多菌灵0.5%);Y=-0.106X+4.3275,r=0.973(多菌灵0.2%),半衰期分别为多菌灵0.5%为6.61d,多菌灵0.2%为5.94d。结论多菌灵在人参茎叶中的动态曲线符合直线方程lnC=lnC₀-kt,人参根部的多菌灵农药动态降解在15~20d内已全部降解。]]> 2015/1/6 17:14:33 2520true 目的详细调查香加皮原植物杠柳在主产区资源分布现状和蕴藏量,为进一步开发香加皮的天然资源提供科学的依据。方法采用走访调查和现地取样相结合的方法,对文献记载的香加皮主产区5省市(河北、山西、河南、山东、天津)21个产地进行实地考察。结果传统观点“出产优质香加皮的兖州”已经不出产香加皮;香加皮的产地有较大的变化,并以山西、河北一带为主;杠柳叶多为披针形、革质;杠柳呈灌木、蔓生灌木、大藤本状的形态变化。结论通过考察确定了杠柳目前在主产区的分布情况,并提出了“杠柳叶多为披针形、革质,其植物形态呈多样性”的观点。]]> 2015/1/6 17:14:33 2519true Patrinia heterophylla Bunge或糙叶败酱Patrinia scabra Bunge根及全草^[1].有消肿排脓、祛瘀止痛^[2],及对体内、外肿瘤癌细胞有强大的杀伤作用^[3].对该植物的化学成分研究表明,主要是以齐墩果酸苷元和常春藤苷元组成的三萜皂苷。]]> 2015/1/6 17:14:34 2518true O-芸香糖苷,为一来源很广的黄酮类化合物.主要存在于豆科植物槐Sophora japonica L.的花蕾(槐花米)、果实(槐角)中.槐米主要产于天津、北京郊区、河北、山东及江苏等地区^[1,2].芦丁是其主要活性成分,具有广泛的药理活性,开发前景广阔.芦丁的分析方法,已报道有分光光度法、薄层色谱法、高效液相色谱法、毛细管电泳法等。]]> 2015/1/6 17:14:34 2517true [1],或利用其子实体的提取液制备保健食品、功能食品等方面^[2],而对其成分的测定分析报道较少.茶薪菇Agrocybe cylindracea sp.nov.又名茶树菇、茶菇、油茶菇,是一种药食两用价值很高的菌类,食味独特,营养丰富,具有祛湿、利尿、健脾胃、明目、抗衰老、降低胆固醇、防癌和抗癌的特殊功能。]]> 2015/1/6 17:14:34 2516true [1].笔者曾参加过中药资源普查工作,平时爱好采集和收集药用植物标本,并对浙江药用蕨类植物作了一些调查,发现<浙江药用植物志>、<浙江药用资源名录>有73种、1变种、1变型的药用蕨类植物未收载,为准确反映浙江药用蕨类植物资源,作如下补遗。]]> 2015/1/6 17:14:34 2515true 目的探索黄连药材DNA的提取并对其RAPD反应体系进行优化。方法采用目前较为流行的苯酚法、CTAB法、高盐低pH值法,通过电泳、紫外分光光度仪检测及RAPD扩增效果确定黄连药材基因组DNA提取的最佳方法。结果CTAB法为黄连药材基因组DNA提取的最佳方法,建立了适合黄连药材的RAPD反应体系:25μL体系中内含1×PCRbuffer、2mmol/LMg²⁺、100~150μmol/LdNTP、20ng引物、40ng模板、1UTaq酶。结论CTAB法及黄连药材的RAPD反应体系可以用于黄连药材的RAPD分析。]]> 2015/1/6 17:15:11 2514true 目的为扩大和提高肉苁蓉Cistanchedeserticola资源的利用效率。方法以肉苁蓉肉质茎的不同组织部位作为外植体,采用正交实验方法,筛选诱导愈伤组织产生的不同培养基和培养条件,并继代培养。应用HPLC方法对愈伤组织培养物中松果菊苷和洋丁香苷(毛蕊花糖苷)的量进行测定。结果肉苁蓉肉质茎的维管组织部分是诱导愈伤组织的最适外植体,鳞片叶次之,髓组织部分诱导效果较差。在暗培养、25~27℃条件下以B5为基本培养基附加6-BA(0.5~2mg/L)与IAA(0.5~1.5mg/L)诱导愈伤组织效果最佳;在半光照(光培养10h/d,暗培养14h/d)条件下,愈伤组织生长正常,最佳继代时间为25~30d。愈伤组织培养物中松果菊苷和洋丁香苷(毛蕊花糖苷)达4.37%。结论筛选出了适宜的肉苁蓉愈伤组织培养方法,且培养物中主要药用有效成分松果菊苷和洋丁香苷(毛蕊花糖苷)的量达到并超过了《中国药典》要求(0.3%)的标准。]]> 2015/1/6 17:15:11 2513true 目的考察槲寄生对光合细菌生长的促进作用。方法通过光合细菌培养液中不同槲寄生浓度及常规培养基浓度对光合细菌活菌数的影响、不同浓度槲寄生对光合细菌生长曲线的影响及槲寄生提取液对光合细菌脱氢酶活性的影响来考察槲寄生对光合细菌生长的促进作用。结果培养液中添加槲寄生最高可使光合细菌活菌数增加达8倍以上;而且可以使光合细菌不经过延迟期直接进入指数期,缩短光合细菌的生长周期;且使光合细菌脱氢酶活性提高8.4倍。结论培养液中添加槲寄生提取物可促进光合细菌生长,提高光合细菌的活力。]]> 2015/1/6 17:15:11 2512true 目的光强和光质对灯盏花生长与总黄酮量的影响。方法用遮阳网形成的不同光强以及不同颜色塑料膜下形成的不同光质的光照条件生境下,种植灯盏花试管苗至开花,取样测定生物量和黄酮的量。结果全光照和遮光20%生境中的植物生物量和黄酮的量明显高于遮光50%生境的植株;与无色塑料膜相比,黄、红、紫和蓝色塑料膜下平均植株的生物量均下降;无色和有色塑料膜下,蓝色膜下植株的黄酮量最高,而无色塑料膜下植株的黄酮产量最高。结论光强和光质影响灯盏花生长与总黄酮量,灯盏花在全阳光照射下植株有最高的生物量积累和黄酮产量。]]> 2015/1/6 17:15:11 2511true 目的对不同产地柴胡药材的挥发油成分进行GC-MS指纹图谱比较研究。方法利用GC色谱指纹图谱的方法,以道地产区河北省主产的7批北柴胡药材为基准,对比不同产地柴胡药材的色谱指纹图谱。色谱条件:HP-1非极性柱,进样口温度250℃,检测器(FID)温度270℃,程序升温50~270℃,体积流量为0.9mL/min,分流比为10∶1。质谱条件:电离方式为EI,离子源温度300℃,电子能量70eV。结果从7批道地产区柴胡药材挥发油GC指纹图谱中提取19个共有峰,用质谱分析鉴定出其成分,并对不同产地药材进行相似度的比较。结论柴胡挥发油气相色谱指纹图谱中各成分均得到了较好的分离,可作为柴胡药材质量评价的专属性的指纹图谱,并以此评价不同产地柴胡的品质。]]> 2015/1/6 17:15:11 2510true 目的建立马钱子药材的HPLC指纹图谱分析方法,为马钱子的质量控制提供新方法。方法以甲醇-水-浓盐酸(50∶50∶1)为提取溶剂,超声波震荡30min,制备马钱子药材样品溶液;采用RP-HPLC(DAD)法,选用Kro-masilKR100-5C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),体积流量1.0mL/min,检测波长254nm,流动相为乙腈(B)-0.2%三乙胺-0.2%乙酸水溶液(A),线性梯度洗脱:0min时8%∶92%,30min时17%∶83%,60min时60%∶40%。结果对10批马钱子药材进行测定,以士的宁为参照物,确定了马钱子药材指纹图谱中的12个共有峰;通过方法学考察,精密度、稳定性、重现性试验RSD均小于3%;采用相似度作为指纹图谱的评判参数,计算了不同批次与对照指纹图谱之间的相似度,均大于0.9,表明10批药材质量均一、稳定。结论该方法适用于马钱子药材的质量控制。]]> 2015/1/6 17:15:11 2509true 目的用SRAP技术探讨郁金类药材原植物分类,并为郁金类药材的种质资源提供一定的依据。方法对来源于姜科姜黄属的郁金类药材的9个样品进行了SRAP研究。结果从上、下游各10个引物形成的100个引物组合中筛选出扩增产物条带信号强、重现性好、特征性好的27个引物组合,扩增,得到847条条带,其中多态性条带397条,平均每个引物组合产生14.7条多态性条带。结论SRAP技术可以很好地分析郁金原植物的种间关系。结合形态学资料,将6个郁金品种分为了2个组,一组花序从叶鞘抽出,包括黄丝郁金和黄白丝郁金,黄白丝郁金应为黄丝郁金即姜黄的栽培变种Curcumalonga L.cv.chuanyujin;一组花序从根茎抽出,包括绿丝郁金、白丝郁金、桂郁金和温郁金,其中白丝郁金可能为绿丝郁金即蓬莪术的栽培变种C.phaeocaulis Val.cv.baisi。]]> 2015/1/6 17:15:11 2508true [1];芪类白藜芦醇、白藜芦醇苷有抑制胃酸分泌、保肝、抗血栓、降血脂、预防动脉硬化、对多种癌症发生阶段的抑制^[2]、强心扩血管、镇咳平喘^[3]、改善微循环、提高烧伤动物存活率和存活时间等作用^[4];黄酮醇苷类槲皮素-3-O-葡萄糖苷、槲皮素-3-O-阿拉伯糖苷有利尿作用^[5];缩合鞣质有抗肝脂质过氧化物^[6]、降血糖^[7]等作用。]]> 2015/1/6 17:15:11 2507true Chrysanthemum indicum L.的头状花序,作为常用中药收载于<中国药典>2005年版中.味苦、辛,性凉,清热解毒、疏风平肝,用于疔疮、痈肿、丹毒,风热感冒,咽喉肿痛,高血压眩晕,头痛等症.野菊花中富含黄酮类化合物,木犀草素-7-O-葡萄糖苷和蒙花苷为其中的代表性成分.据报道,木犀草素-7-O-葡萄糖苷对黄嘌呤氧化酶具有强的抑制活性,对cAMP磷酸二酶酯的IC50为79 μmol/L^[1].蒙花苷又名野菊花黄酮苷,其具有抑制磷酸二酯酶作用,醛糖还原酶抑制作用,保肝作用,并对慢性气管炎有一定疗效^[1].两者均为野菊花中的主要成分,量较高,本研究选择木犀草素-7-O-葡萄糖苷和蒙花苷作为指标性成分,采用RP-HPLC法同时测定木犀草素-7-O-葡萄糖苷和蒙花苷,为野菊花药材的质量控制提供方法。]]> 2015/1/6 17:15:12 2506true Mangifera indica L.,是我国常见食药两用的中药,在广西有丰富的资源^[1,2].在食品中,以果实见多,而在药用中以芒果叶的报道较多,曾有文献报道有关芒果苷的测定方法^[3～6],但关于芒果皮目前尚未有关于其质量分析方面的报道.本实验建立RP-HPLC外标法测定芒果皮中芒果苷的方法,并对不同产地的芒果皮进行考察,为进一步研究开发芒果、开展GAP种植提供科学依据。]]> 2015/1/6 17:15:12 2505true Angelica sinensis不与上述任何一组聚类，却与欧当归Levisticum officinale遗传距离相对较小。结论上述结果与当归属药用植物功效差异基本吻合，启示药用植物亲缘演化关系可能是研究药用植物功效规律的一条重要途径。]]> 2015/1/6 17:16:04 2504true 2015/1/6 17:16:04 2503true 2015/1/6 17:16:04 2502true 18色谱柱(150 mm×4.6mm，5μm)，乙腈-水二元梯度洗脱，体积流量:1 mL/min，检测波长303 nm。结果根据选择的色谱条件制订了不同产地虎杖药材的指纹图谱。结论色谱图对各产地虎杖药材中各成分得到了很好的分离，可作为虎杖药材的专属性指纹图谱。]]> 2015/1/6 17:16:04 2501true 2015/1/6 17:16:05 2500true 2015/1/6 17:16:05 2499true 2015/1/6 17:16:05 2498true Paeonia suffruticosaAndr.的干燥根皮，是我国传统常用中药材，具有清热凉血、活血化痕的功效。丹皮酚是丹皮的主要有效成分之一，具有抗炎、抗氧化、血小板凝聚抑制等药理活性，一直作为丹皮药材的质量控制指标。]]> 2015/1/6 17:16:05 2497true Dioscorea L.是薯菠科中最大的一属，分布于全球的热带和温带，我国和墨西哥为主产国。其中穿山龙D. nipponica Mak.，黄山药D. panthaica Prain et Burk.和山药D. opposita Thunb.均收载于《中国药典》2005年版一部，均以根茎人药。]]> 2015/1/6 17:16:05 2496true Actinidia Lindl.)药用植物资源种类及药理作用日益受到国内外医药界的重视，其中浙江产的主要有中华猕猴桃A. chinensisPlanch.、镊合猕猴桃A. valvata,/i> Dunn、大籽猕猴桃A. macrosperma C. F. Liang、毛花猕猴桃A. eri-antha Benth.、软枣猕猴桃A. arguta (Sieb. etZucc.)Planch. et Miq.、长叶猕猴桃A. hemsleyanaDunn、葛枣猕猴桃,i>A. polygama (Sieb. et Zucc.) Maxim.、异色猕猴桃A. callosa Lindl. var. discolorC. F. Liang等，其中前4种在浙江资源相对较丰富，药材主要有藤梨根(中华猕猴桃的根)和猫人参(镊合猕猴桃、大籽猕猴桃的根)。现代药理研究发现猕猴桃属多糖成分具有抗肿瘤、增强免疫机能、消除活性氧自由基等作用，且无副作用。]]> 2015/1/6 17:16:05 2495true 目的通过对苏北中药材种植基地射阳县7个不同栽培类型药用菊花的植物学特征、产量、有效成分的比较,为菊花良种的扩繁和菊花生产提供理论与实践依据。方法用田间小区试验,对红心白菊、长瓣白菊、湖白菊等7个不同栽培类型菊花的植物学特征、产量、有效成分(总黄酮、绿原酸)进行比较和分析。结果种植基地7个栽培类型药用菊花的植物学特征存在较大差异,单株头状花序(即花头数)数量是影响菊花产量的首要因素,产量以红心白菊最高,总黄酮和绿原酸的量均以长瓣白菊最高。结论经综合评价分析,苏北中药材种植基地菊花生产以红心白菊和长瓣白菊为首选,其次为湖白菊和黄菊花。]]> 2015/1/6 17:19:01 2494true 目的从墨西哥仙人掌、元江仙人掌、绿仙人掌的肉质茎中分离内生真菌,并进行初步鉴定及活性筛选。方法选择30种病原微生物作为指示菌进行抑菌试验。结果从3种仙人掌的茎中分离出111株内生真菌,其中49株内生真菌对一种或多种病原微生物有抑制作用,来自墨西哥仙人掌、元江仙人掌、绿仙人掌的抗菌活性菌株比例分别为48.4%、42.9%及42.3%,其中平板抑菌直径大于15mm的高抗菌株有20株。抗菌活性菌株主要分布于青霉属、曲霉属等19个属中。结论首次从仙人掌中分离和鉴定出111株内生真菌,仙人掌内生真菌中广泛分布着活性菌株。]]> 2015/1/6 17:19:01 2493true 目的研究不同生长期连翘果实干物质及叶和果实中有效成分的积累规律。方法采用百果质量研究果实干物质的积累,HPLC法测定连翘叶与果实中有效成分的量。结果5~7月是连翘果实干物质积累的重要时期。在整个生长过程中,种子、叶和壳中连翘酯苷、连翘苷、芦丁的量均呈下降趋势。8月下旬至9月上旬,果实干物质积累已趋缓,种子和壳中有效成分的量稳定,变异小。壳中有效成分的量经9~10月的快速下降后,10月20日左右质量分数趋于稳定且达最低。青翘中有效成分的量高于老翘,青翘中连翘酯苷、连翘苷与芦丁的比例与老翘存在显著差异。结论在北京地区,8月下旬至9月上旬,为青翘最佳采收期;10月20日左右为老翘的最佳采收期。]]> 2015/1/6 17:19:01 2492true 目的研究黄芩愈伤组织培养和黄芩苷合成调控的规律。方法采用植物细胞培养技术诱导愈伤组织;HPLC法测定黄芩苷的量。结果黄芩愈伤组织生长和黄芩苷积累的优势培养条件为在基本培养基MS中氮源浓度为60mmol/L(NH⁴⁺:NO^3-为1:1),KH₂PO₄浓度0.5~1.5mmol/L,附加80g/L蔗糖,0.3mg/LIAA,2mg/L6-BA和200mg/L蛋白胨,温度(25±1)℃,暗培养。培养40d后收获愈伤组织,生物量达28.7g/L,黄芩苷为167.4mg/g,明显高于野生黄芩的最高量。结论黄芩愈伤组织的生长和黄芩苷的积累并不同步,而是先生长后合成。蔗糖对黄芩苷的合成具有明显的调节作用,在蔗糖质量浓度小于3%时,能有效促进愈伤组织的生长,但对黄芩苷的合成没有刺激作用;当蔗糖质量浓度在3%~8%时,愈伤组织表现出明显的生长和次生代谢功能,黄芩愈伤组织的生长及黄芩苷合成明显增加;当蔗糖质量浓度在8%时,两者均达到最大值。]]> 2015/1/6 17:19:01 2491true 目的探索铁皮石斛根尖再生丛生芽的适宜条件及类原球茎的起源。方法切取0.3~0.5cm的根尖为外植体,以B5为基本培养基,附加不同种类和质量浓度的植物生长调节剂进行培养。结果诱导根尖形成了愈伤组织、类原球茎或直接转化成芽且获得再生植株。通过细胞学观察认为铁皮石斛的类原球茎是单细胞起源的体细胞胚。结论为铁皮石斛组织快繁建立新的体系。]]> 2015/1/6 17:19:01 2490true 目的选择甘草愈伤组织诱导和继代培养的最佳激素组合。方法以甘草无菌苗的胚根为外植体设计正交试验考察不同浓度的激素组合对愈伤组织诱导和继代的影响。结果以诱导率为指标,NAA对甘草细胞脱分化影响最显著;以相对生长速率为指标,6-BA、2,4-D、NAA对甘草细胞生长分裂影响最显著。结论甘草愈伤组织诱导及继代的最佳激素组合为2,4-D1.0mg/L+NAA1.0mg/L+6-BA1.0mg/L+KT0.3mg/L。]]> 2015/1/6 17:19:01 2489true 目的观察徐长卿植株地上部分叶片、果实、种子等器官各部位的表面超微形态,为徐长卿植株品种鉴定与生物学特性研究提供依据。方法采用扫描电子显微镜技术进行观察。结果徐长卿植株叶片上、下表皮,内、外果皮,种皮和花粉块表面的超微形态各异,并各具特征。结论各部位表面超微形态可作为徐长卿植株生物学特性研究、药材与品种鉴定的重要依据。]]> 2015/1/6 17:19:01 2488true [1].近年发现金雀根的醋酸乙酯部位具有较强的刺激成骨细胞增殖的活性,并发现该部位的主要化学成分是二苯乙烯类化合物.]]> 2015/1/6 17:19:02 2487true [1].本属植物的主要活性成分为香豆素类化合物.]]> 2015/1/6 17:19:02 2486true [1].主要含有中乌头碱、乌头碱、次乌头碱等二萜类生物碱,它们既是其有效成分,也是其毒性成分.本实验采用HPLC方法测定3种生物碱,方法简便、快速,结果准确.]]> 2015/1/6 17:19:02 2485true ,在布朗语称"麻果".具有健胃消食、涩肠止泻、杀虫止痒、收敛止血的作用.番石榴具有很好的降低血糖作用和抗轮状病毒作用^[1,2].原药材标准仅有来源及性状鉴别标准,相关报道显微和薄层色谱鉴别研究^[3],本实验研究薄层鉴别方法时发现采用方法比较好,结果与其不同;并进行槲皮素的测定方法研究,以便有效控制药材质量.]]> 2015/1/6 17:19:03 2484true 目的为了选育出适合于江苏省栽培的优质丹参品种,也为丹参品种的系统选育提供一定的研究依据。方法采用HPLC法对不同类型丹参根内的脂溶性成分丹参酮ⅡA、隐丹参酮及水溶性成分丹参素、丹酚酸B进行了分析;采用紫外分光光度法分别对其总丹参酮和总丹酚酸的量进行分析,同时对4种类型丹参后期生物量进行了分析;并采用Exce l和SPSS软件对其生物量与脂溶性、水溶性成分间的相关性进行分析。结果4种类型的丹参的后期生物量积累不完全一致,并且总丹参酮、丹参酮ⅡA、隐丹参酮、丹酚酸B、丹参素和总丹酚酸量均存在一定的差异,生物量与有效成分间的相关性分析显示生物量与成分间呈负相关,脂溶性成分间存在较好的相关性,各类型的丹参酮ⅡA与隐丹参酮间的相关系数分别为0.943(ZY)、0.942(DY)、0.715(XY)、0.960(ZC);水溶性成分间也存在一定的相关性,各类型丹参的丹参素与丹酚酸B间的相关系数分别为0.766(ZY)、0.416(DY)、0.841(XY)、0.618(ZC)。但是两大类成分间不存在明显的相关性。各类型的水溶性成分与脂溶性成分的积累也存在一定差异。结论不同类型丹参中以小叶型为最佳,其脂溶性成分和水溶性成分量均高于其他3种类型,但其他类型的质量也远高于《中国药典》标准。]]> 2015/1/6 17:20:26 2483true 目的应用悬浮培养转基因西洋参冠瘿组织生物合成熊果苷。方法向预培养20 d的西洋参冠瘿组织培养物中加入60 mg/mL对苯二酚溶液,共培养60 h后终止转化;通过TLC和HPLC方法检测产物,使用柱色谱法分离纯化产物,利用光谱数据对其结构进行鉴定。HPLC定量分析熊果苷产生的动力学变化曲线。结果产物同时在冠瘿组织培养物和培养基存在,并经过提取、分离得到其纯品,经理化性质和谱学方法将其鉴定为4-羟基苯-β-D-吡喃葡萄糖苷(熊果苷)。摩尔转化率在共培养60 h后达到最高(88.4%),同时,培养物和培养基中产物的量(63.69 mg/瓶,1.86 mg/瓶)以及产物的分泌百分率都达到最高(2.92%)。结论在国内外首次将转基因冠瘿组织用于生物转化系统并成功地得到具有多种药理活性的熊果苷。]]> 2015/1/6 17:20:27 2482true 目的建立了青海地区唐古特大黄药材的HPLC指纹图谱。方法采用反相高效液相色谱法,乙腈-水(0.04%的磷酸)为流动相,梯度洗脱,体积流量1.0 mL/min,检测波长为280 nm,柱温为40℃。结果精密度、重现性、稳定性试验中共有峰面积和保留时间的RSD均小于5%。青海不同采集地唐古特大黄的平均相似度为0.925。结论该方法简便、实用、可靠,可用于以青海果洛地区为主产地不同海拔唐古特大黄药材质量标准的分析检测,也为栽培大黄代替野生大黄提供理论基础。]]> 2015/1/6 17:20:27 2481true 目的应用HPLC法建立酉阳规范化种植白术的指纹图谱,为白术药材的质控提供依据。方法采用Symm etry C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);以甲醇-水(65%~100%)连续梯度洗脱,体积流量0.8 mL/m in;在254 nm波长下检测。测定11批药材的色谱图,确立标准指纹图谱。结果白术药材有11个共有峰,多数峰可以达到较好分离。该分析方法具有很好的精密度、重现性和稳定性,各批次间共有峰的相对保留时间的RSD均小于1%,相对峰面积符合指纹图谱相关要求。结论建立的指纹图谱检测标准可以作为白术质量评价和品种鉴别的主要依据之一。]]> 2015/1/6 17:20:27 2480true 目的用不同质量浓度2,4-D和外植体类型对刺五加体细胞胚胎诱导进行研究,为刺五加的资源保护和遗传工程提供理论依据。方法以刺五加的萌发3周幼苗和层积处理种子合子胚的胚根、下胚轴和子叶为外植体,考察不同激素对刺五加体细胞胚胎发生的影响。结果来自层积处理种子合子胚的外植体接种于附加0.5 mg/L2,4-D的MS或1/2MS培养基中体细胞胚胎诱导率(57.1%)和数量(3.3)最高。体胚在原培养基中即可发育成熟,转入降低2,4-D质量浓度的培养基后更有利于新体胚的产生和原有体胚的成熟。刺五加体胚的发育历程与合子胚相似。结论刺五加可以通过来自合子胚的外植体实现体细胞胚胎发生,体胚诱导率取决于2,4-D质量浓度和外植体的发育程度。]]> 2015/1/6 17:20:27 2479true 目的研究茯苓原生质体制备及其再生条件。方法采用不同菌龄、酶液浓度、酶解时间、稳渗剂对茯苓原生质体产率及再生条件进行研究。结果不同菌龄、酶液浓度、酶解时间、稳渗剂对茯苓原生质体产率及再生产生不同影响。结论Z_10-2原生质体制备时菌丝最适菌龄为72 h,酶液浓度为3%,稳渗剂以0.5 mol/L的甘露醇为佳。Z_10-3原生质体制备时菌丝最适菌龄为56 h,酶液浓度为3%,稳渗剂以0.6 mol/L的甘露醇为佳。Z_10-2和Z_10-3原生质体均以甘露醇作稳渗剂再生率较高,其最佳浓度为0.6 m o l/L。在该条件下Z_10-2原生质体再生率为7.5×10^-3,Z_10-3为1.3×10^-2。]]> 2015/1/6 17:20:27 2478true 2015/1/6 17:20:27 2477true 各版中也均有收载.泽泻具有利尿、降血脂、降血压等作用.临床主要用于治疗高血压、高脂血症、水肿胀满、小便不利等症^[1].文献报道,泽泻醇是泽泻利尿和降血脂的有效成分之一^[2].]]> 2015/1/6 17:20:27 2476true 1977年版和1993年版<湖南中药材质量标准>,主要分布于湖北、湖南、河南、新疆、甘肃、陕西及江南各省区,欧亚、北非亦有分布^[1],是一种分布广泛的植物品种.]]> 2015/1/6 17:20:27 2475true 2005年版规定石榴皮中鞣质不得低于10%,可见鞣质类成分是其主要成分,此类成分的变化是影响石榴皮质量的主要因素.]]> 2015/1/6 17:20:28 2474true 260/A₂₃₀为3. 16,A₂₆₀/A₂₈₀为1. 96,产量达0. 27μg/m g,电泳条带清晰,完整性良好,可筛选出明显的差异cDNA片段,分子质量在240~600 bp。结论用该方法能高质高量地提取富含多糖的药用植物总RNA。]]> 2015/1/6 17:21:04 2473true 2015/1/6 17:21:04 2472true 2015/1/6 17:21:04 2471true 2015/1/6 17:21:04 2470true 2015/1/6 17:21:04 2469true 18柱为色谱柱,蒸发光闪射检测器,运用HPLC法分离及分析彭泽贝母中的浙贝甲素和浙贝乙素。结果建立了HPLC-ELSD测定彭泽贝母中浙贝甲素、浙贝乙素的分析方法:色谱柱:Hypers il ODS₂(200 mm×4. 6 mm,5μm),柱温30℃。流动相:乙腈-0. 03%二乙胺水(65:35),体积流量1. 0 mL/m in。检测器参数:漂移管温度83. 5℃,载气体积流量2. 2 mL/min,进样量10μL。结论运用HPLC-ELSD能够同时测定彭泽贝母中浙贝甲素、浙贝乙素的量。]]> 2015/1/6 17:21:04 2468true 2015/1/6 17:21:04 2467true 2015/1/6 17:21:04 2466true 2015/1/6 17:21:05 2465true [1]。现代药理学和临床试验表明, 苦碟子具有镇痛、镇静和心血管等多方面的活性, 可用于冠心病、心绞痛、心肌梗死等症^[2]。]]> 2015/1/6 17:21:05 2464true [1,2]。]]> 2015/1/6 17:21:05 2463true [1]。其中粉防己碱(TET)和防己诺林碱(FAN)是其主要活性成分. TET能够有效抑制由胶原、凝血酶、肾上腺素等引起的血小板聚集, FAN能够在体外抑制组胺的释放。]]> 2015/1/6 17:21:05 2462true 2015/1/6 17:21:05 2461true 2015/1/6 17:24:20 2460true 2015/1/6 17:24:20 2459true 2015/1/6 17:24:20 2458true 18色谱柱(250mm×4.6mm, 5μm), 流动相为0.05%磷酸水溶液-乙腈系统, 线性梯度洗脱, 检测波长254nm, 进样量为5μL。结果建立了蒲黄药材的HPLC指纹图谱, 以香蒲新苷峰为参照峰, 确立了蒲黄药材指纹图谱中的12个共有峰, 测定了8批蒲黄HPLC指纹图谱与对照图谱的相似度。结论所建立的HPLC指纹图谱有很好的精密度、重现性和稳定性, 适用于蒲黄药材的质量控制。]]> 2015/1/6 17:24:20 2457true 2015/1/6 17:24:20 2456true [1]。]]> 2015/1/6 17:24:20 2455true 2015/1/6 17:24:20 2454true 2015/1/6 17:24:21 2453true [1]。]]> 2015/1/6 17:24:21 2452true [1]。]]> 2015/1/6 17:24:21 2451true [1], 但无定量测定项。目前报道的欧亚旋覆花的化学成分主要有黄酮类^{[2, 3]}、倍半萜内酯和萜类化合物^[4], 黄酮类化合物是一类生物活性较强的化合物, 据报道欧亚旋覆花的抗氧化活性与其含有的黄酮有关^[5]。]]> 2015/1/6 17:24:21 2450true 目的研究我国传统药用植物抗烟草花叶病毒(tobacco m osa ic v irus,TM V)的作用,为从植物中开发抗病毒类生物农药提供依据。方法采用局部枯斑法和叶碟法对我国78科162种药用植物提取物的抗TM V侵染和增殖作用进行测定。结果在10 mg/mL水平下,19种植物提取物可有效抑制TM V侵染,9种植物提取物有明显抑制TM V增殖作用。结论大多数药用植物提取物具有一定抗TM V侵染活性,仅少数药用植物提取物有较好的抗TM V增殖作用。]]> 2015/1/6 17:25:26 2449true 目的比较几种生物诱导子〔酵母提取物(yeast ex tract)、寡半乳糖醛酸(o ligoga lacturon ides)、真菌诱导子(funga l e lic itor)〕和非生物诱导子(Ag⁺、Co²⁺和α-氨基异丁酸)对丹参毛状根培养生产丹参酮的影响。方法高效液相色谱法测定3种丹参酮。结果生物诱导子一般都能有效地提高丹参酮的产量,不同诱导子的诱导效果之间存在差别。最高的丹参酮产量由100μg/mL的真菌诱导子获得,是对照组产量(0.42 mg/g)的4.7倍。非生物诱导子对丹参酮的诱导能力相对生物诱导子较差,其中50μm o l/L Co²⁺获得了最高的丹参酮产量(1.75 mg/g),是对照组产量的4.1倍。生物诱导子和非生物诱导子表现出了一定的诱导选择性。所有的生物诱导子都显著提高了隐丹参酮的量而所有的非生物诱导子都选择性地提高了丹参酮Ⅰ的量。并且在大部分情况下,添加的诱导子都没有对丹参毛状根的生长造成明显的抑制作用。结论在丹参毛状根培养中添加不同的生物和非生物诱导子都可以选择性地提高丹参酮的积累,并且不影响毛状根的生长。]]> 2015/1/6 17:25:26 2448true 目的通过对耐盐性甘草愈伤组织再生植株研究,促进在盐碱滩人工栽培甘草技术的发展。方法诱导乌拉尔甘草Glycyrrhiza uralensis无菌苗子叶块和胚轴段在含盐培养基上脱分化均成功。逐步提高盐质量浓度诱导愈伤组织扩增,继之诱生不定芽,芽经扶壮后诱根,得到大量试管苗。结果子叶块和胚轴段在MS+BA1.5 mg/L+2.4-D 1.2 mg/L+NaCl 100 mg/L中脱分化效果好,愈伤多为淡黄色,稍透明。NaCl质量浓度增至250mg/L后愈伤组织长势很快下降,色暗,有些死亡。愈伤组织经无盐培养继代两轮后,转入M S+BA 0.5 mg/L+KT1.0 mg/L+NAA 1.0 mg/L+NaCl 200 mg/L上分化出大量不定芽,说明不定芽的耐盐性是遗传所致。降温(18~22℃)、自然光照、并添加适量的GA₃有利于壮芽形成,在诱导生根的83个芽中的55个生根,其中1/2M S+IAA1.0 mg/L+NAA 1.0 mg/L+NaCl 200 mg/L最适宜生根,生根率达66.26%。结论通过对耐盐性甘草愈伤组织的诱导可得到耐盐性甘草的再生植株。]]> 2015/1/6 17:25:26 2447true 目的研究低温层积解除阜康阿魏种子休眠的规律和解除休眠过程中内源激素量的变化规律。方法种子在4℃低温层积处理,20℃培养箱发芽。高效液相色谱法进行种子内源激素Z、GA₃、IAA和ABA的测定。结果低温层积20 d时,种子发芽率为14%,40 d时种子发芽率可达60%以上。解除休眠过程中种子的内源激素量逐渐降低,在低温层积10~20 d过程中GA₃与ABA的量比值迅速增大。结论阜康阿魏种子4℃低温层积40 d解除休眠。GA₃与ABA的量比是种子休眠的关键因素。IAA和Z对种子萌发的进行有重要影响。]]> 2015/1/6 17:25:26 2446true 目的研究青钱柳叶片的形态结构。方法利用叶表皮离析方法、脉序离析法、石蜡制片和扫描电镜法对青钱柳叶片的形态结构进行了研究。结果青钱柳叶表皮有许多小乳突,腺毛,盾状鳞片和非腺毛表皮毛;气孔器不规则型,仅分布于下表面;靠近表皮的叶肉组织中有规律地分布含簇晶的细胞;主脉中维管组织环状,封闭,具有一个副维管束;二级脉在叶缘内分支,相互连接形成脉环,三级脉及顶型,脉间区内充满分支的自由结束的小细脉。结论首次研究青钱柳叶的结构,利用这些叶微观结构特征能够将青钱柳和胡桃科其他植物区分开来。]]> 2015/1/6 17:25:26 2445true 目的阐述羌活种胚后熟过程中内源激素与种胚发育和休眠解除的关系。方法激素测定用HPLC法,外标法定量,质量分数以μg/100 g表示。结果羌活种胚后熟过程中,玉米素(Z)有2个高峰和2个低谷,第1个峰值出现在层积20 d时,第2个峰值出现在层积100 d时;第1个低谷出现在层积70 d时,第2个低谷出现在层积150 d时。吲哚乙酸(IAA)层积20 d时出现高峰,层积100 d和层积150 d时没能检测到。脱落酸(ABA)的变化和IAA相似,不同在于层积220 d未完成生理后熟和层积220 d发芽的种子中都不能检测到ABA的量。赤霉素(GA₃)的量比其他激素高很多,出现2个峰值,第1个出现在层积20 d,第2个出现在层积150 d时;完成生理后熟种子中的GA₃量比未完成生理后熟种子中的高。结论层积20 d后Z、IAA、ABA和GA₃量的增加启动了羌活种胚的发育。Z能促进羌活种胚的发育和萌发。GA₃可能对打破羌活种子休眠没有直接的作用,但是能促进种胚的生长。层积中后期没有检测到ABA的量,ABA可能不是羌活种子萌发的主要抑制物质。]]> 2015/1/6 17:25:26 2444true [1,2]。]]> 2015/1/6 17:25:26 2443true 2015/1/6 17:25:26 2442true 2015/1/6 17:25:27 2441true 2015/1/6 17:25:27 2440true [1]，功能利水渗湿、健脾和胃、宁心安神；主要含有三萜酸类如茯苓酸和多糖等有效成分^[2]。]]> 2015/1/6 17:25:27 2439true 2015/1/6 17:25:27 2438true 2015/1/6 17:25:27 2437true 目的研究红花主要农艺性状间及与单株花产量和红花黄色素A间相关关系，为花用红花育种和高产栽培提供理论依据和参考。方法对来自世界各地的48份栽培红花品种(系)的单株花产量性状进行相关和通径分析;采用高效液相色谱法测定红花中红花黄色素A，并进行统计分析。结果10个主要农艺性状对单株花产量影响的顺序:单株有效花球数>单株花球数>单株总分枝数>顶花球直径>分枝高>一级分枝数>出苗到盛花期天数，平均每果粒数，单株无效花球数，株高。逐步回归分析表明，分枝高(X2)、一级分枝数(X4)、单株有效花球数(X6)、单株无效花球数(X7)、平均每果粒数(X9)、顶花球直径(X10)是影响单株花产量(Y)的主要因素，回归方程:Y=-3.037 0+0.002 7 X2+0.045 9 X4+0.074 5 X6+0.043 2 X7+0.023 0 X9+1.148 2 X10(F=21.84**)。单株有效花球数对单株花产量的直接效应最大，其次为顶花球直径。不同品种(系)的单株花产量及红花黄色素A的量存在显著差异。红花黄色素A的量与单株花产量相关不显著。结论花用红花育种中，可兼顾高产与优质。单株有效花球数、顶花球直径是花用红花品种选育的主要目标性状和高产栽培的主攻方向。单株花高产株型应是单株有效花球数、单株花球数、单株总分枝数、一级分枝数较多，顶花球直径较大，株高、分枝高、单株无效花球数适中者。PI 239226、PI 253540、PI 367833、简阳红花综合性状较好，表现突出，适宜在四川种植。]]> 2015/1/6 17:26:33 2436true 目的设计出霍山石斛的位点特异性鉴别引物，仅通过PCR就能对霍山石斛的真伪进行准确鉴别。方法利用石斛属植物基因库中rDNA ITS序列数据库进行同源性比较，在与霍山石斛差异较大的区段设计1对特异性引物，然后对19份石斛属植物DNA模板进行PCR扩增，阳性者即为霍山石斛正品。结果发现在退火温度为60℃时，该引物能把霍山石斛的模板从19份石斛属植物中扩增出来，而其他的石斛属植物均为阴性。结论运用位点特异性鉴别引物成功地对霍山石斛进行PCR鉴别，该鉴别反应重现性好，能在霍山石斛鉴别时发挥重要的作用，与形态学、DNA测序等鉴别方法相比，该方法具有高效、准确、简便、省时等优点。]]> 2015/1/6 17:26:33 2435true 目的从DNA水平分析鉴定不同薯蓣皂苷元盾叶薯蓣的遗传关系。方法从40个10 bp随机引物中筛选出12个引物，进行RAPD分析，应用POPGENE 1.31软件对扩增结果进行聚类分析。结果共扩增出73条DNA片段，其中多态性片段64条，占87.67%，盾叶薯蓣类型间具有明显的多态性差异。结论DNA分子多样性差异与薯蓣皂苷元量差异具有相关性，说明盾叶薯蓣的遗传基础可能对薯蓣皂苷元的形成和积累有显著的影响。]]> 2015/1/6 17:26:33 2434true 目的借助丹参药材TLC和HPLC图谱的条件，对河南栾川地区“白化”丹参(因生长环境影响而根部表皮及断面呈白色)与正常丹参的品质进行色谱图谱分析，比较成分的异同。方法TLC色谱条件:GF254预制薄层板，水溶性部位与脂溶性部位分别展开、显色;HPLC色谱条件:Zorbax SBC18色谱柱，水溶性部位与脂溶性部位分别进行梯度洗脱。结果栾川地区“白化”丹参脂溶性有效成分明显偏低，仅检出痕量的二萜醌类成分;水溶性部分丹参酚酸类成分较高。结论栾川地区丹参根的“白化”现象反映了生长环境可影响丹参二萜醌类成分的生物合成，具体影响因素待进一步考察，是值得丹参GAP管理注意的问题。]]> 2015/1/6 17:26:33 2433true 目的研究脂溶性丹参酮类成分的ESI-MS规律，建立丹参药材脂溶性丹参酮类成分提取物ES I-ITM S特征图谱。方法应用电喷雾离子阱质谱(ESI-ITMS)技术研究丹参酮类成分的ESI-MS规律;用95%乙醇超声提取丹参药材中丹参酮类物质，在正离子方式检测模式下，直接进样应用一级全扫描质谱建立其特征ESI-ITM S图谱。结果丹参酮类物质在ESI-MS一级正离子全扫描时，易捕获一个质子形成分子离子，且都易形成二聚体加合Na⁺离子峰;分子离子在二级质谱中易发生脱水、脱羰基和A环开环裂解。丹参药材中丹参酮类物质的ESI-ITM S图谱重现性与特征性较好，易于解析。结论丹参脂溶性成分ESI-ITMS图可用于丹参药材及复方丹参中丹参酮类成分的快速鉴别。]]> 2015/1/6 17:26:33 2432true 目的研究氮、磷、钾3种养分对福田白菊产量和品质的影响。方法采用湖北省麻城市福田河镇白菊种植基地土壤进行盆栽土培试验。结果在盆栽条件下施肥对白菊产量和品质的影响效应为氮、磷≥钾;氮、磷、钾3要素配合施用能促进白菊的正常生长发育，显著提高白菊的经济学产量、生物学产量、外观品质、茶用和药用品质。其中，白菊中可溶性总糖和总黄酮量呈显著正相关(r=0.813 1**)，说明平衡施肥可能通过促进白菊中的可溶性总糖的合成来增加总黄酮的合成与积累。结论在白菊生产上要在合理施用氮肥的基础上增施磷、钾肥。]]> 2015/1/6 17:26:33 2431true [1]。为了更好地研究生物碱在花椒属植物中的分布，建立一个有效的生物碱定量的方法非常必要。]]> 2015/1/6 17:26:34 2430true [1]。我国应用丹参已有近2000年的悠久历史，始载于东汉<神农本草经>，列为上品^[2]。]]> 2015/1/6 17:26:34 2429true [1]。]]> 2015/1/6 17:26:34 2428true 目的 通过代谢途径工程调整代谢流向,试图增大转基因青蒿Artemisia annua植株中的青蒿素产量。方法 利用青蒿鲨烯合酶(SS)基因、绿色荧光蛋白(GFP)基因和胞嘧啶脱氨酶(CodA)基因构建基因打靶载体,并通过冻融法将载体导入根癌农杆菌Agrobacterium tumefaciens。以叶盘法转化青蒿,采用"分段选择法"筛选转基因再生植株。结果 对表达GFP基因后发出绿色荧光的转基因植株,采用PCR及PCR产物杂交法,在1棵转基因植株中检测到外源GFP基因,而未检测到内源SS基因。初步证据显示,在转基因青蒿植株中,突变型SS基因已取代野生型SS基因。结论 青蒿鲨烯合酶基因打靶已取得初步成功。]]> 2015/1/6 17:12:08 2427true 目的 分析蕲蛇药材正品及其市场收集样品的Cyt b基因序列,为蕲蛇药材分子鉴别提供依据。方法 利用Cyt b基因,对蕲蛇药材及其市场收集样品进行了序列测定和分析。结果 蕲蛇药材存在着混杂现象;蕲蛇药材正品与其市售混淆品的Cyt b基因序列有着显著差异,该序列在蕲蛇种内差异率为0%~0.91%,与混淆品间的差异率为18.57%~23.78%。结论 Cyt b基因序列是一种鉴别蕲蛇药材与其混淆品较好的分子遗传标记。]]> 2015/1/6 17:12:08 2426true 目的 考察和比较湖北黄连GAP基地选育的3个不同品系黄连(大花叶、无光叶、小花叶)的产量和质量。方法 采用田间随机区组设计,连续3年采集3个品系黄连根茎样品,分别以烘干法测定其质量,用紫外分光光度法和高压液相色谱法分别测定其总生物碱和盐酸小檗碱的量。结果 在考察的3个品系药材样本中,各品系三年生黄连产量没有显著差异(P<0.05),在四年生和五年生黄连中,大花叶和无光叶品系产量均明显高于小花叶品系(P<0.05);在三年生、四年生、五年生黄连中,各品系总生物碱和盐酸小檗碱的量无明显差异(P<0.05)。结论 大花叶和无光叶品系的黄连产量高、质量合格,可作为黄连规范化种植的种子基原。]]> 2015/1/6 17:12:08 2425true 目的 探求一种准确、简便、快速鉴定金银花药材和山银花药材植物来源的方法 。方法 利用光学显微镜和扫描电子显微镜观察比较忍冬属5种植物(忍冬、华南忍冬、红腺忍冬、水忍冬、大花忍冬)的叶表皮特征。结果 在光学显微镜和扫描电镜下该属不同植物的叶表皮特征存在显著差异。结论 叶表皮特征可有效地用于金银花和山银花药材原植物的物种鉴别,并据此分别列出了光学显微镜和扫描电镜下忍冬属5种植物叶表皮特征的分种检索表。]]> 2015/1/6 17:12:08 2424true 目的 建立金莲花药材的HPLC指纹图谱。方法 以荭草苷为内标物,采用HPLC法分析10个不同产地金莲花样品的黄酮苷,并进行相似度计算。色谱条件:Hypersil C18柱(200mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-水梯度洗脱,体积流量为1.0mL/min,检测波长340nm,柱温45℃。结果 本研究建立的分析方法 有较好的重复性,不同产地的金莲花药材色谱峰面积比值有一定的差异。结论 本法操作简便,重现性好,可用于不同产地药材的指纹图谱的测定和质量评价。]]> 2015/1/6 17:12:08 2423true 目的 对甘肃秦艽习用品--管花秦艽Gentiana siphonantha进行生药学研究。方法 形态学、组织学及理化鉴定方法 。结果 管花秦艽的叶较窄,子房、果实有柄,可与其近缘种秦艽G.macrophylla相区别;其根的组织结构中出现中柱裂分现象;理化特征与麻花艽G.straminea十分相似。结论 可为管花秦艽药材的研究及秦艽新资源的开发提供资料。]]> 2015/1/6 17:12:08 2422true 目的 探讨宁夏半野生型乌拉尔甘草在不同生长期和不同生长环境中甘草酸的变化规律。方法 应用高效液相色谱法分别测定一至四年生乌拉尔甘草中的甘草酸的量。结果 在甘草的营养器官中,甘草酸主要分布于地下器官中,地上茎和叶中量甚低;且在一至四年生甘草的地下根和根状茎中甘草酸的量与其生长年限成正比;不同生长地区的甘草中甘草酸的量不同。结论 甘草的根和根状茎是甘草酸的主要积累部位,其量随生长年限而增加;光照、降水和土壤类型等环境因子综合影响甘草酸的积累。]]> 2015/1/6 17:12:08 2421true 2015/1/6 17:12:08 2420true [1]，性味酸涩、凉，有消炎、收敛、接骨之功效，在西双版纳傣医中常作为治疗烧烫伤、骨折之药用。云南移榷树皮中含有多种黄酮类化合物^[2]，白杨素是其主要组成成分，目前还没有文献报道对云南移铱树皮中的白杨素进行定量测定。]]> 2015/1/6 17:12:09 2419true 2015/1/6 17:12:09 2418true [1]。]]> 2015/1/6 17:12:09 2417true 2015/1/6 17:12:09 2416true 目的研究灵芝液体发酵产漆酶的最佳培养基和培养条件。方法以灵芝S3号菌株为试验材料,以灵芝漆酶活性为衡量指标,通过正交试验分别对灵芝液体发酵培养基及培养条件进行优化筛选。结果筛出最佳培养基组成为葡萄糖30g/L、棉花0.2%、磷酸氢二铵0.66g/L、干酪素0.5%、聚山梨酯-800.15%;优化培养条件为初始pH5.5、装液量75mL、接种量12.5%、菌龄5×24h、培养时间9×24h。结论优化培养基及培养条件后,发酵液中灵芝漆酶活性显著提高。]]> 2015/1/6 17:13:11 2415true 目的研究甘草1年生播种苗苗高、地径的生长动态变化及生物量分配模式。方法播种后动态测定甘草播种苗地上和地下部分的生长量和生物量。结果甘草整个生长期可划分为4个阶段,即出苗期、生长初期、速生期和生长后期,苗高和地径速生期的生长量分别占年生长量的63.3%和50.2%。根的生物量增长速率明显高于叶和茎的增长速率,7月20日~9月20日是甘草播种苗生物量积累较快的时期。甘草播种苗根、茎、叶的生物量分配比例为49.02∶17.75∶33.23,地下部分与地上部分生物量之比(R/T)为0.96。苗高与地下部分生物量和总生物量的相关系数分别要大于地径与两者的相关系数。结论苗高、地径的生长动态符合S型生长曲线,可用Logistic方程拟合。苗高、地径与地下部分生物量和总生物量呈线性相关。]]> 2015/1/6 17:13:11 2414true 目的研究怀山药种质资源的玻璃化超低温保存技术。方法以B号怀山药带芽茎段为材料进行玻璃化超低温保存,并采用培养法检测保存后材料的成活率,从而筛选出最佳的玻璃化超低温保存技术体系。结果B号怀山药带芽茎段玻璃化超低温保存较佳的技术体系是继代生长60d的怀山药无菌苗置4℃冰箱低温锻炼7d;在无菌条件下切取1~1.5cm的带芽茎段,转至含5%蔗糖+3%甘露糖的培养基内,置4℃冰箱预培养2d;用60%的PVS1(22%甘油+13%乙二醇+13%聚乙二醇+10%二甲基亚砜)在0℃处理60min,再用100%的PVS1在0℃条件下处理60min,随即迅速投入液氮;保存24h后,在37℃水浴中快速化冻,用含7%蔗糖的MS培养液洗涤4次,每次停留10min;转至再生培养基(MS+KT2mg/L+NAA0.02mg/L)再培养,成活率可达75%以上,再生苗与常温苗形态指标差异不大。结论本试验成功地建立了怀山药种质资源玻璃化法超低温保存的技术体系,为怀山药种质资源的长期保存提供了一条有效途径。]]> 2015/1/6 17:13:12 2413true 目的研究稀土微肥对铁皮石斛试管苗壮苗的影响。方法通过正交试验,以石斛小苗为外植体,培养在附加了3种不同稀土元素组合的1/2MS+20%的香蕉提取物的培养基上进行培养。结果3种稀土元素中的镧(La)对试管苗增质量、叶绿素b、总叶绿素和石斛多糖的量都有显著的影响;3种稀土元素都对试管苗的叶片数、根数、分蘖数以及叶绿素a的量影响不显著。结论为铁皮石斛试管苗的壮苗以及品质的提高提供了科学的依据。]]> 2015/1/6 17:13:12 2412true 目的建立蓬子菜药材的HPLC指纹图谱。方法以香叶木苷为内标物,采用高效液相色谱法分析不同产地10个蓬子菜样品,并进行相似度计算。色谱条件Hypersil ODS2柱(200mm×4.6mm,5μm);流动相为甲醇-0.4%醋酸溶液梯度洗脱;体积流量为1.0mL/min;检测波长340nm;柱温26℃。结果本研究建立了具有19个共有峰的蓬子菜药材指纹图谱,各色谱峰分离较好,达到指纹图谱要求。结论本方法重现性好,可用于不同产地蓬子菜药材的指纹图谱的测定和质量评价。]]> 2015/1/6 17:13:12 2411true 目的探索鉴别玉竹及其掺伪品热河黄精、黄精等药用植物的方法。方法采用显微鉴定和RAPD技术进行药材鉴别。结果通过所选引物进行PCR扩增,可以获得特异性的谱带,将玉竹及其主要掺伪品热河黄精、黄精区分开。结论建立的该分析方法可用作区分玉竹及其掺伪品的依据。]]> 2015/1/6 17:13:12 2410true 目的通过诱导培养短葶飞蓬毛状根产生有用次生代谢产物。方法利用发根农杆菌C58C1感染短葶飞蓬无菌苗叶盘诱导毛状根,小量提取脱农杆菌完全的毛状根DNA用于rol基因的PCR检测,经PCR检测阳性的毛状根采用4种不同液体培养基振荡扩大培养,对于获得的毛状根系测定其中总黄酮和灯盏花素的量。结果发根农杆菌感染10min共培养2d可取得较好的转化效果,继代培养约两个月后可脱菌完全,获得的毛状根PCR检测阳性率为52.9%,4种液体培养基中B5培养基更适合于毛状根的生长,毛状根中总黄酮量要明显高于正常根中的量,但灯盏乙素的量明显低于正常根中的量。结论通过短葶飞蓬毛状根大量培养可获取灯盏黄酮类药用成分。]]> 2015/1/6 17:13:12 2409true 2015/1/6 17:13:12 2408true 2015/1/6 17:13:12 2407true 2015/1/6 17:13:13 2406true 2015/1/6 17:14:01 2405true 2015/1/6 17:14:01 2404true 2015/1/6 17:14:01 2403true 2015/1/6 17:14:01 2402true 2015/1/6 17:14:01 2401true 2015/1/6 17:14:02 2400true 2015/1/6 17:14:02 2399true 2015/1/6 17:14:02 2398true 2015/1/6 17:14:02 2397true 2015/1/6 17:14:02 2396true 2015/1/6 17:14:02 2395true 目的 研究根直径与提前抽薹的关系,减少当归提前抽薹率。方法 采用不同根直径当归苗移栽,对提前抽薹率和产量进行研究。结果 6月份当归提前抽薹株就可以从田间直接观察到,6～7月是抽薹高发期,到10月2日,根直径≥0.86cm的处理抽薹率最高,达到94.65%,≤0.35cm的处理则只有1.63%;在≤0.35cm处理中,出苗率为33.62%,≥0.86cm处理的出苗率最高,达到了95.75%,收获株数只有6395株/hm²,根直径0.46～0.55cm的处理达到68398株/hm²,显著高于其他处理;最高产量出现在0.46～0.55cm移栽苗根直径范围内,其鲜、干当归产量分别为5717.58kg/hm²和1554.98kg/hm²。结论 生产上应选择根直径在0.46～0.65cm的苗进行移栽。]]> 2015/1/6 15:50:26 2394true 目的 降低怀地黄试管苗的生产成本,为工厂化生产提供理论依据。方法 比较1/2MS和MS、自来水和蒸馏水、白砂糖和蔗糖对怀地黄试管苗生长发育的影响。结果 1/2MS培养基和MS培养基对怀地黄试管苗根数、鲜质量、干质量和叶绿素的量有极显著影响,对叶片数有显著影响,1/2MS培养基明显优于MS培养基。自来水和蒸馏水对试管苗根部、冠部、鲜质量增量、干质量和叶绿素的量均有显著性影响,试管苗在添加蒸馏水的培养基中的生长状况明显优于添加自来水。白砂糖和蔗糖对试管苗根部、冠部、鲜质量增量和干质量的影响不大,但对叶绿素的量有极显著影响,选用蔗糖作为碳源时,其叶片的叶绿素的量更高。结论 1/2MS可以取代MS,白砂糖可以取代蔗糖。]]> 2015/1/6 15:50:26 2393true 目的 探讨人参农家类型的遗传多样性和亲缘关系,为人参的栽培和选育种提供遗传学依据。方法 采用ISSR分子标记分析5种人参农家类型7个居群120个样本的遗传多样性。结果 人参农家类型有较丰富的遗传多样性,平均多态位点百分率为48.85%;不同农家类型的遗传多样性水平有差异,和其他农家类型相比,长脖和竹节芦的遗传变异较小,且两者之间的相似性系数高达97%;不同产地的同一人参农家类型间也存在很大的遗传差异。结论 研究表明人参农家类型的遗传差异主要存在于各类型内部,而且可能更多地存在于同一类型的不同居群内部。为促进人参新品种的选育,有必要在现有的栽培群体中补充不同产地的同一类型的种质资源。]]> 2015/1/6 15:50:26 2392true 目的 为商陆的开发和利用提供依据。方法 利用光学显微技术、组织化学定位方法 对美洲商陆Phytolacca decandra不同生长龄的根、茎和叶进行解剖结构研究。结果 除幼根外,不同生长龄的营养器官中均有活性蛋白质分布,薄壁细胞是活性蛋白质分布的场所。结论 幼茎中蛋白质的量最为丰富,颗粒也较大,与老叶、幼叶、老茎和老根中蛋白质的数量及大小差异极显著;二年生的贮藏根中不含蛋白质,额外形成层中几乎不含蛋白质。]]> 2015/1/6 15:50:27 2391true 目的 研究不同微量元素肥料对紫锥菊生物产量、菊苣酸量、花期及种子产量质量的影响。方法 统计分析不同的微肥处理对紫锥菊生长的影响,及对种子质量的影响;HPLC法测定菊苣酸的量。结果 对紫锥菊生物产量的增加有显著促进作用的是铁肥、锰肥两个处理;各施肥处理对菊苣酸量无显著影响;铁肥处理后花期有提前趋势,且显著增加了紫锥菊的花球数;而锰肥使种子的发芽率显著降低。结论 紫锥菊生产中应该根据土壤条件和生产目的合理施用微肥,施用铁、锰肥可以增产;在良种生产中,施用锰肥可能会降低种子质量;若以观赏为目的,合理施用铁肥有益于观赏性的增加。]]> 2015/1/6 15:50:27 2390true 目的 建立人工蛹虫草药材的高效液相色谱指纹图谱。方法 利用Agilent ZOBAXSB-AqC18(250mm×4.0mm,5μm)色谱柱,甲醇5%～60%为流动相梯度洗脱,分析时间30min,检测波长260nm,进样量1μL,体积流量1.0mL/min;对样品超声提取条件以及流动相、检测波长等色谱条件进行了系统优化设计。结果 建立的指纹图谱中有11个共有峰,且方法学考察符合规定的标准,并以"中药色谱图分析和数据管理系统"软件对11个人工蛹虫草样品进行了相似度评价。结论 该法准确简便,可作为控制人工蛹虫草药材内在质量的有效手段。]]> 2015/1/6 15:50:27 2389true 目的 建立泽泻药材的GC指纹图谱。方法 采用毛细管气相色谱法测定了16个不同批次的泽泻样品。色谱条件:SGE30QC3/AC20石英毛细管色谱柱,程序升温65～185℃,进样口温度250℃,检测器(FID)温度250℃,分流比为10∶1。结果 泽泻药材的GC指纹图谱由18个特征峰构成,不同产地药材的GC指纹图谱有一定差异。结论 本研究建立的GC指纹图谱有较好的稳定性和重现性,能反映不同来源泽泻药材中挥发性成分的差异。]]> 2015/1/6 15:50:27 2388true 目的 采用HPLC法测定吡虫啉在杭白菊中的残留动态。方法 杭白菊中的吡虫啉以有机溶剂提取,经硅胶柱净化处理,以HPLC法定量。结果 吡虫啉在杭白菊中的平均回收率为87.49%,RSD为2.87%,吡虫啉在杭白菊中的半衰期为2.71d。结论 吡虫啉在杭白菊中的最终残留量低于最低检出浓度(0.02mg/kg),此值大大低于FAO规定的吡虫啉在蔬菜作物上的最高残留限量(0.5mg/kg)。]]> 2015/1/6 15:50:28 2387true [1].具有清热利湿、利尿通淋的作用,特别是对泌尿系统结石具有特殊功效,民间常用于尿路感染、急慢性肾炎、肾结石的治疗,现已有多个制药厂家把其作为治疗结石症的重要组方.]]> 2015/1/6 15:50:28 2386true [1～3].]]> 2015/1/6 15:50:28 2385true [1～3]、抗心律失常作用^[2]、抗炎作用^[3],临床上适合癌痛和各种手术后疼痛等中度以上疼痛的治疗,能够代替阿片类药物控制癌症病人的疼痛,并可减少阿片类药物所带来的呼吸抑制和成瘾症.]]> 2015/1/6 15:50:28 2384true [1,2],可以用来作为一个反应基因组表达的指标.]]> 2015/1/6 15:50:28 2383true 目的 为探索利用分子生物学技术培育新型药用植物的新途径,将外源的白藜芦醇合酶(RS)基因导入到丹参中表达,以改善或增加丹参的效用。方法 根据已公布的核苷酸序列,利用引物悬挂延伸法,经过3次扩增,最终从葡萄基因组DNA中获得完整的RScDNA基因序列;以质粒pBin438为基础,构建含有RS目的基因的组成型植物表达载体。在根癌农杆菌介导下,利用叶盘法转化丹参,进而通过PCR、PCR-Southern杂交对不同的转基因植株进行筛选与检测。结果 总共得到了45棵卡那霉素抗性植株,经PCR和PCR-Southern杂交检测,确定葡萄RS基因已整合到部分转基因丹参苗的基因组中。结论 成功建立了白藜芦醇合酶基因转化丹参的体系,并获得了转基因植株。]]> 2015/1/6 15:51:01 2382true 目的 研究继代周期对霍山石斛试管苗长势及培养基成分的影响,确定最佳的继代周期时间。方法 测定不同继代周期试管苗的株高、分蘖数、鲜质量、叶绿素量及培养基pH、含水量、含糖量的变化,并计算石斛试管苗生长所需的培养基和其他的成本。结果 继代周期为40d,试管苗的株高比继代前增加了282.86%,分蘖数比继代前增加了3.5倍,试管苗的鲜质量最大,叶绿素的量趋于最大值;培养基的含水量、可溶性糖的量最低;pH<4.75,已不适合石斛试管苗的生长,石斛苗生长所需成本较低。结论 40d为霍山石斛试管苗生长的最佳继代周期。]]> 2015/1/6 15:51:01 2381true 目的 建立乌头的快繁体系。方法 利用组织培养的方法,设置18种、9种和12种不同激素处理组合的培养基分别诱导乌头不同外植体愈伤组织、诱导愈伤组织丛生芽的分化、诱导再生苗的生根。结果 适合乌头茎尖和茎段愈伤组织诱导的培养基为:MS+NAA0.2mg/L+6-BA2.0mg/L+PVP(或AC)3.0g/L;适合叶片愈伤组织诱导的培养基为:MS+NAA0.2mg/L+6-BA4.0mg/L+PVP(或AC)3.0g/L;适合愈伤组织增殖与丛生芽诱导的培养基为:MS+NAA0.2mg/L+6-BA2.5mg/L+LH200mg/L+PVP3.0g/L和MS+NAA0.1mg/L+6-BA2.0mg/L+LH200mg/L+PVP3.0g/L。适合诱导生根的培养基为:MS+IBA1mg/L+AC3.0g/L。结论 以乌头茎尖、叶片、茎段及带或不带腋芽的茎段作为外植体进行离体培养,可以实现乌头种苗的工厂化快速繁殖。]]> 2015/1/6 15:51:01 2380true 目的 建立河北道地药材酸枣仁的HPLC-ELSD指纹图谱,为科学评价及有效控制酸枣仁药材质量提供新方法。方法 收集不同产地酸枣仁药材21批,采用HPLC-ELSD法测定其指纹图谱。色谱条件:C18柱,乙腈-水为流动相进行梯度洗脱,ELSD检测器,体积流量1.0mL/min,柱温35℃。结果 建立了道地酸枣仁药材HPLC-ELSD指纹图谱共有模式,并对不同产地酸枣仁药材进行了相似度比较。结论 方法简便、可靠,可用于不同产地酸枣仁药材的指纹图谱测定和质量评价,为有效控制酸枣仁药材的内在质量提供依据。]]> 2015/1/6 15:51:01 2379true 目的 建立阳春砂仁HPLC指纹图谱分析方法,初步拟定广东省阳春产阳春砂仁甲醇提取物指纹特征图谱指标成分群,为阳春砂仁药材内在质量评价积累数据。方法 采用Nucleodur C18 Gravity色谱柱;流动相为甲醇-2%乙酸(梯度洗脱);检测波长为260nm;柱温为30℃;体积流量1.0mL/min。结果 共标示出20个共有峰,18批阳春砂仁指纹图谱相似度较高。结论 方法准确可靠,重现性好,为阳春砂仁质量控制提供了参考。]]> 2015/1/6 15:51:01 2378true 目的 以芦丁、金丝桃苷、槲皮苷为指标成分,建立了RP-HPLC法对鱼腥草中黄酮类成分进行定量测定,并考察鱼腥草不同生长季节、不同药用部位黄酮类成分的量。方法 利用高效液相色谱法梯度洗脱。色谱条件:AgilentZORBAXSB-C18分析柱(250mm×4.6mm,5μm),柱温25℃,流动相为乙腈-0.4%磷酸溶液梯度洗脱,体积流量1.0mL/min,检测波长256nm。结果 芦丁、金丝桃苷、槲皮苷质量浓度与峰面积呈良好线性关系,线性范围分别是:芦丁0.0334～0.5344μg,r=1(n=6);金丝桃苷0.1660～2.6560μg,r=1(n=6);槲皮苷0.3805～6.0880μg,r=1(n=6);回收率芦丁为103.3%,金丝桃苷为106.6%,槲皮苷为107.6%(n=9)。结论 本方法分离度好,稳定,适合于作为鱼腥草的质量控制方法。黄酮类成分的量高低是:花>叶>果实>地上茎,地下部分基本无黄酮类成分。花期各成分的量相对高于果实期。]]> 2015/1/6 15:51:02 2377true 目的 考察17个产地3个采收期的香加皮中4-甲氧基水杨醛的量,为确定香加皮最佳采收期和优质产地提供依据。方法 采用超声提取法进行样品的制备,用HPLC法进行4-甲氧基水杨醛的测定。结果 不同采收期不同产地香加皮中4-甲氧基水杨醛的量差异较大;夏季平均量最高,为0.71%,春季为0.22%,秋季为0.39%;以夏季为香加皮最佳采收期,山西省各产地的平均量最高,为0.92%。结论 夏季是香加皮最佳采收期;山西各产地为香加皮的优质产地。传统观点"香加皮最佳采收期为春、秋两季。"及"山东兖州一带的香加皮质量最佳。"建议纠正。]]> 2015/1/6 15:51:02 2376true [1].主产于滇南、滇西、滇西南地区^[1].]]> 2015/1/6 15:51:02 2375true [1],槲皮素是蜜柑草中黄酮类化合物的主要成分之一^[2],具有抗自由基、抗氧化、抗菌、抗癌防癌^[3～5]、抗病毒等^[6,7]多种药理作用和生物活性^[8].]]> 2015/1/6 15:51:02 2374true [1].主要含有挥发油成分和内酯类成分.]]> 2015/1/6 15:51:02 2373true 2015/1/6 15:51:02 2372true 2015/1/6 15:51:47 2371true 2015/1/6 15:51:47 2370true 2015/1/6 15:51:47 2369true 2015/1/6 15:51:48 2368true 2015/1/6 15:51:48 2367true 2015/1/6 15:51:48 2366true 2015/1/6 15:51:48 2365true 2015/1/6 15:51:48 2364true 2015/1/6 15:51:49 2363true 2015/1/6 15:51:49 2362true 2015/1/6 15:51:49 2361true 目的 研究碳源、氮源和磷源对丹参Salvia miltiorrhiza不定根生长及其有效成分丹参酮ⅡA和原儿茶醛量的影响。方法 利用组织培养技术结合HPLC分析手段,通过改变培养基碳源种类和浓度、氮源和磷源浓度,研究其对丹参不定根生长和丹参酮ⅡA、原儿茶醛量的影响。结果 碳源、氮源、磷源对于不定根培养是必需的。以蔗糖为碳源,添加30g/L蔗糖,培养20d,不定根增殖倍数最高,60g/L蔗糖最适合丹参酮ⅡA合成,低质量浓度蔗糖更利于原儿茶醛合成。间歇添加蔗糖至培养25d,不定根增殖率是对照的2.3倍,丹参酮ⅡA量是对照的2.4倍。培养基NH₄⁺和NO₃^-总浓度保持60mmol/L,NH₄⁺/NO₃^-为1∶4、1∶4、1∶1时分别得到最大的不定根增殖倍数、丹参酮ⅡA和原儿茶醛的量。改变培养基KH₂PO₄浓度时,丹参不定根生长均比对照组旺盛,但高浓度KH₂PO₄抑制了丹参酮ⅡA合成。结论 本实验确定了丹参不定根悬浮培养的最佳碳源种类和浓度、氮源比例和磷源浓度,表明不同碳源、氮源和磷源对丹参不定根生长和次生代谢物合成有显著影响。]]> 2015/1/6 15:52:25 2360true 目的 研究不同产地何首乌的ITS片段遗传差异性,分析该片段在何首乌道地性的DNA分子鉴别和野生资源品种的鉴定及种质资源研究中的意义。方法 从来自不同原产地的何首乌中提取总DNA,以核基因组ITS通用引物为引物进行扩增,扩增产物经纯化后,用PCR产物直接测序法进行测序。结果 各样品rDNA的ITS及5.8S rDNA完全序列,18S和26S rDNA部分序列,共约648bp,其中ITS1长度为195bp,5.8S长度为164bp,ITS2长度为189bp。序列间共有17个变异位点。结论 ITS序列可对何首乌的道地性做出鉴别,对野生资源品种的鉴定具有较好的分辨性。]]> 2015/1/6 15:52:25 2359true 目的 解决铁皮石斛在组织培养过程中的衰老问题。方法 在原球茎增殖培养基、丛芽增殖培养基和生根培养基中分别加入AgNO₃0.12mg/L,测定乙烯的产生量,观察试管苗生长情况。结果 AgNO₃抑制乙烯的产生,提高了原球茎的增殖速度和丛芽的分化效率,明显促进种苗的生长,提高移栽成活率2倍,表现出抗衰老功能。结论 1mg/LAgNO₃可以作为铁皮石斛组织培养的抗衰老剂。]]> 2015/1/6 15:52:25 2358true 目的 探讨氮(N)、磷(P)、钾(K)不同配比施肥处理对紫锥菊生物产量和菊苣酸量的影响。方法 对N、P、K不同配比施肥栽培处理的紫锥菊生物产量和菊苣酸的量进行测定和统计。结果 第一次收获各处理全株干质量由高到低依次为N+K、CK、P、N+P、N、N+P+K、P+K、K;方差分析结果表明,N+K、CK、P、N+P、N5个处理间无显著差异,但5个处理均与P+K、K两个处理差异显著。各处理对菊苣酸的量影响不显著;第二次取样N、N+K、P、N+P各处理分别比CK组高47.7%、35.4%、33.8%、12.3%,N+P+K、P+K、K各处理分别比CK低7.7%、10.8%、28.5%;方差分析结果显示N处理与CK差异显著,K处理显著低于CK。结论 研究表明不同配施肥对紫锥菊主要有效成分菊苣酸的量影响不大;对产量的影响,N起主导效应,P效应不明显,而氯化钾导致减产。]]> 2015/1/6 15:52:25 2357true 目的 建立大青叶药材质量评价的化学模式识别方法。方法 采用RP-HPLC法定量分析国内10个不同产地的大青叶样品中邻氨基苯甲酸、丁香酸、腺苷、靛玉红4种指标成分的量,用雷达图评价指标成分的平衡分布,结合系统聚类分析法对其进行化学模式识别研究。结果 根据雷达图显示结果通过系统聚类分析法将10个样品按其质量等级划分为5类。结论 该方法可用于大青叶药材的质量评价。]]> 2015/1/6 15:52:25 2356true 目的 采用HPLC法研究并建立各产地土贝母药材的指纹图谱。方法 用Alltech C18柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相:乙腈-水,梯度洗脱;体积流量:1.0mL/min,在230和203nm波长处测定了15个不同产地的土贝母药材,并用聚类分析和相似度计算进行数据分析。结果 建立了土贝母药材的HPLC指纹图谱,标定了18个共有指纹峰,方法学考察结果符合指纹图谱技术要求,经相似度计算,各产地药材之间的相似性良好。结论 方法稳定、可靠、重现性好,可用来控制土贝母药材的质量。]]> 2015/1/6 15:52:26 2355true 目的 建立白术药材的高效液相指纹图谱分析方法。方法 采用Dikma Kromasil C18(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱,以乙腈-水梯度洗脱(45%~100%乙腈),体积流量为1.0mL/min,柱温25℃,检测波长242nm。结果 通过对13批不同产地的白术样品的测定,标定了24个共有峰,并通过"中药指纹图谱计算机辅助相似度软件"和聚类分析等辅助手段,计算相似度等相关参数。结论 该方法准确可靠,重现性好,为更好地控制白术内在质量提供了科学依据。]]> 2015/1/6 15:52:26 2354true [1].薄荷为常用药材,主要用于驱风、解热、发汗,治疗胃肠道和心脑血管疾病等;也可用作防腐剂、兴奋剂、局部麻醉剂.]]> 2015/1/6 15:52:26 2353true [1,2],在祖国医学中是治疗风湿痹痛、关节病必不可少的药物.]]> 2015/1/6 15:52:26 2352true [1].连翘是中药中最常见的药材之一,具有清热解毒、散结消肿之功效.]]> 2015/1/6 15:52:26 2351true 2015/1/6 15:53:13 2350true 2015/1/6 15:53:13 2349true 2015/1/6 15:53:13 2348true 2015/1/6 15:53:13 2347true 2015/1/6 15:53:13 2346true 2015/1/6 15:53:13 2345true 2015/1/6 15:53:13 2344true 记载有利尿、通经作用,现代研究表明含有二萜类化合物,如紫杉宁(taxinine)、紫杉宁A、紫杉宁H、紫杉宁K、紫杉宁L等[1],另外还含有包括紫杉醇在内的紫杉烷类化合物.紫杉醇(paclitaxel,商品名Taxol)是提取自红豆杉植物的能够治疗多种癌症的有效药物[2].]]> 2015/1/6 15:53:14 2343true 2015/1/6 15:53:14 2342true 记载[1],桑科植物桑Morus alba L.的叶、白皮、树枝均可入药,其中桑叶性甘、苦、寒,归肺、肝经,具有疏散风热、清肺润燥、清肝明目的功效.]]> 2015/1/6 15:53:14 2341true ,列为上品,辛、甘、温,归膀胱、肝、脾经,解表祛风、渗湿、止痉,主要用于感冒头痛、风湿痹痛、风疹瘙痒、破伤风等[1].]]> 2015/1/6 15:53:14 2340true 目的 建立基于发根培养的三分三Anisodus acutangulus遗传转化体系及在三分三发根中表达外源基因的方法 。方法 由种子直接萌发得到无菌苗,建立了三分三的无菌苗培养系统。将植物高效表达载体pCAMBI-A1304+导入经过“disarmed”改造的根癌农杆菌C58C1(携带pRiA4质粒),获得了携带外源基因表达载体的重组C58C1工程菌。取生长良好的幼嫩真叶作为外植体,在乙酰丁香酮的诱导下用重组C58C1进行感染,诱导发根。选取在无激素培养基上生长迅速,分支多的发根单克隆进行继代培养。经过3次继代培养,PCR(polymerase chain reaction,聚合酶链式反应)检测用于验证发根型质粒pRiA4和表达型质粒pCAMBIA1304+是否整合到三分三发根基因组内。结果 建立了基于发根培养的三分三遗传转化体系,发根诱导频率达到100%,PCR检测表明pRiA4和pCAMBIA1304+质粒共转化率达到32%。结论 该方法 可以用于在三分三发根中高效表达外源基因,为实现基于发根的三分三产托品烷类生物碱的代谢工程奠定了基础。]]> 2015/1/6 15:54:09 2339true 目的 研究獐牙菜属药用植物叶上表皮细胞的形态差异,为本类药材的鉴别提供新的方法 。方法 采用常规技术制片,用计算机细胞分析系统HPIAS-1000对表皮细胞形态进行二值化处理,测定其上表皮细胞垂周壁弯曲程度即形态因子(SFC)和细胞排列方式即Feret’s直径比(SLF)。分别对12种獐牙菜属药用植物含不同产地的21种材料进行了测定,并进行了方法 学考察。结果 显微镜放大倍数组合20×10下,软件系统精密度和重现性良好,不同植株茎上第3节叶片中段主脉与第1侧脉(弧行脉序)之间上表皮细胞形态在种内最为稳定,不同种植物的SFC、SLF值有显著差异,每种都有其相对恒定值。结论 计算机细胞分析系统HPIAS-1000用于药用植物叶片表皮细胞的形态分析鉴定具有简便、快速、准确、实用的特点,为全草和叶类药材的鉴定提供了一种新途径。]]> 2015/1/6 15:54:09 2338true 目的 用高效液相色谱法建立杜仲药材的指纹图谱分析方法 。方法 采用Lichrospher C18(250mm×4.6mm,5μm)分析柱,甲醇-0.1%磷酸水为流动相,梯度洗脱,体积流量为1.0mL/min,检测波长为230nm,柱温30℃。结果 共有11个共有峰,采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004A版)》,计算各被测样品的HPLC指纹图谱的整体相似度,10批被测样品的色谱指纹图谱的整体相似度在0.574~0.958,并得出了杜仲药材的对照指纹图谱。结论 该指纹图谱方法 简便、重现性好,可专属性地研究杜仲药材的指纹图谱,为有效地控制杜仲药材的内在质量提供了科学依据。]]> 2015/1/6 15:54:09 2337true 目的 研究太子参脱病毒苗与外界苗rDNAITS区碱基序列的异同。方法 运用PCR直接测序法对9种太子参脱病毒苗和4种外界苗的rDNA ITS区(包括ITS1、5.8S、ITS2)碱基序列进行了序列测定。结果 太子参脱病毒苗与外界苗的5.8S碱基序列完全一致,变异位点基本上位于ITS1的起始端与ITS2的终止端,其中江苏溧阳和安徽宣城的脱病毒苗变异位点较多。使用UPGMA法构建了系统发生树,从分子生物学角度说明了它们之间的内在联系。结论 rDNA ITS碱基序列的比较分析从分子水平上进一步阐明了脱病毒苗的遗传稳定性。]]> 2015/1/6 15:54:09 2336true 目的 研究青蒿素高产的黄花蒿植株的遗传多样性特征。方法 结合青蒿素量的测定,应用RAPD技术对10个产地黄花蒿进行遗传多样性分析。结果 发现RAPD多态位点为53.6%,证明在黄花蒿野生群体中存在较丰富的遗传多样性。UPGMA分析表明:在黄花蒿中可能至少存在具有遗传分化的4个分支,黄花蒿遗传分化与青蒿素量的变化及地理分布有一定的相关性。结论 黄花蒿具有明显的遗传分化,这些遗传分化是黄花蒿种质资源筛选的关键,是青蒿素“高量育种”和生物技术开发的基础。]]> 2015/1/6 15:54:09 2335true 目的 研究不同年生紫锥菊药用部位的结构变化和发育过程中主要药用成分多酚类化合物的分布情况,为该药用植物的栽培和综合利用提供理论依据。方法 利用石蜡切片法研究紫锥菊药用部位的结构,利用组织化学的方法 研究多酚类化合物的分布。结果 紫锥菊根和根状茎的结构类似一般多年生草本植物,薄壁细胞是紫锥菊药用部位多酚类化合物的分布储存场所,多酚类化合物在根中主要分布于皮层和韧皮部,在根状茎中主要分布于皮层、韧皮部和髓,而且根状茎中多酚类化合物合成部位明显大于根中。结论 在选优上,应该将具有发达根状茎的植株作为优良单株选育的形态指标;根据多酚类化合物的分布情况和生产成本考虑,紫锥菊以三年生采收为好。并且根以皮厚、木心细者为上品;根状茎以皮厚、髓占比例较大者为上品。]]> 2015/1/6 15:54:09 2334true 目的 筛选花叶开唇兰种子非共生萌发最佳培养基。方法 比较不同的基本培养基、蔗糖质量浓度、植物生长物质和培养方式对种子萌发的影响,观察并统计种子萌发率。结果 花叶开唇兰种子萌发最适培养基为1/4MS+NAA0.1~0.5mg/L+蔗糖20g/L,液体悬浮培养。结论 首次报道了花叶开唇兰种子萌发最佳培养基,为花叶开唇兰快速繁殖提供技术参考。]]> 2015/1/6 15:54:10 2333true 2015/1/6 15:54:10 2332true 2015/1/6 15:54:10 2331true 2015/1/6 15:54:10 2330true 2015/1/6 15:54:10 2329true 2015/1/6 15:55:01 2328true 2015/1/6 15:55:01 2327true 2015/1/6 15:55:01 2326true 2015/1/6 15:55:02 2325true 2015/1/6 15:55:02 2324true 2015/1/6 15:55:02 2323true 2015/1/6 15:55:02 2322true 2015/1/6 15:55:02 2321true 2015/1/6 15:55:02 2320true 2015/1/6 15:55:02 2319true 目的研究黄芩在中国适生地区域,为黄芩生产提供科学依据。方法应用“生物适生地分析系统”,对黄芩生长发育过程进行各种生物气候分布滑移过程的相似计算、测序与分析。结果在我国种植黄芩的不同适宜程度区域共有736个点,其中最适宜区为268个点。结论采用生物适生地分析系统,结合黄芩道地产区承德的资源,可以较好地对黄芩的适宜区进行数值分级区划。]]> 2015/1/6 15:55:48 2318true 目的研究栽培方式对当归地上部分和根的生长动态以及当归麻口病、早薹率、产量的影响。方法以垄作、沟植、覆白色地膜、覆黑色地膜4种不同的栽培方式与平作比较,分析栽培方式对当归干物质积累和生长动态的影响。结果黑色地膜覆盖对当归株高、地上部分和根部干物质积累量的影响最大,其次为白色地膜覆盖。垄作对麻口病的抑制作用最明显,黑色地膜覆盖有提高早薹率的现象。覆黑色地膜的处理产量最高,较对照平作增加4650kg/hm²,增产率达33.4%;覆白色地膜的处理产量次之,较对照增加3372.2kg/hm²,增产率达24.3%,沟植和垄作的增产作用不显著。结论在当归栽培中应大力推广黑色地膜覆盖栽培技术。]]> 2015/1/6 15:55:49 2317true 目的对刺革菌科桦褐孔菌、缝裂木层孔菌、松针层孔菌及鲍姆木层孔菌4种药用真菌rDNA ITS片段进行分析,探讨该片段在中外同类真菌的系统学及鉴别研究意义。方法对这4种药用真菌的rDNA ITS区进行了PCR扩增、测序,运用Clustal X、Mega3.1等软件对ITS区序列进行分析。结果获得rDNA ITS1、ITS2和5.8SrDNA完整序列,桦褐孔菌、缝裂木层孔菌、松针层孔菌、鲍姆木层孔菌的ITS1序列长度范围为244~324bp,ITS2序列长度范围为229~274bp。以圆瘤孢多孔菌(DQ200923)为外类群,用分子进化遗传分析软件得到了包括这4种药用真菌及GenBank中3个与这4种中3种相应真菌的ITS序列的系统发育树。这一分析结果与来自形态学的鉴别结果相吻合。结论ITS序列可作为这4种药用真菌分子鉴定的依据。]]> 2015/1/6 15:55:49 2316true 目的通过对仙茅叶片组织培养的研究与细胞学观察,为仙茅的快速繁殖提供技术依据。方法将仙茅幼叶培养在MS培养基,通过设计不同的光照条件,附加不同的激素、水解酪蛋白和活性炭成分,调查出愈率和成苗率。细胞学观察采用石蜡切片法。结果对仙茅叶片的愈伤诱导,黑暗的效果好于光照;在所试验的培养基成分中,适宜的激素配比是2.0mg/L2,4-D或6-BA1.5mg/L+2,4-D2.5mg/L,并且附加300mg/L水解酪蛋白和0.2%活性炭,对于仙茅叶片的离体成苗较好;培养后,愈伤组织主要由叶片的中脉产生,位于中脉上表皮内侧的薄壁细胞首先启动分裂,随后维管束鞘薄壁细胞及其外侧的叶肉细胞也启动分裂,参与愈伤组织的形成。愈伤分化时,芽发生于愈伤组织的表面,根发生于愈伤组织的内部。结论可以通过仙茅幼叶的组织培养进行仙茅的快速繁殖。]]> 2015/1/6 15:55:49 2315true 目的用HPLC法对防己药材指纹图谱进行研究。方法采用色谱条件Shimadzu VP-ODS柱(250mm×4.6mm);流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液,梯度洗脱进行色谱分离;检测波长为282nm;以防己诺林碱作为参照物。结果初步建立了防己药材的HPLC指纹图谱,并进行相似度评价。结论方法简单可行,能够有效地控制防己药材的内在质量。]]> 2015/1/6 15:55:49 2314true 目的为青牛胆的物种鉴定和遗传图谱的构建寻找一种新的途径。方法采用序列相关扩增多态性(Sequence related amplified polymorphism,SRAP)技术对青牛胆DNA进行PCR扩增,逐级优化反应参数。结果优化得到稳定重复性好的青牛胆SRAP反应体系。结论SRAP技术在分子水平上对青牛胆进行鉴定是一种行之有效的手段,为今后进一步的青牛胆物种鉴定、遗传图谱的构建等研究奠定基础。]]> 2015/1/6 15:55:50 2313true 目的探讨柴胡愈伤组织生长和其不定根诱导的适宜培养条件。方法以无菌苗为外植体诱导获得愈伤组织后,对不同种类和不同质量浓度的生长素进行实验,并对光和温度对柴胡愈伤组织生长和其不定根诱导的影响进行了研究。结果柴胡的愈伤组织适宜于在MS+NAA4mg/L+KT0.2mg/L培养基或MS+NAA2mg/L+KT0.2mg/L培养基上继代培养。诱导其不定根时宜采用的培养基为MS+IBA2mg/L+KT0.2mg/L。25℃条件下,黑暗培养既有利于柴胡愈伤组织的生长又有利于其不定根的诱导。结论比较适宜于柴胡愈伤组织生长的生长素为NAA,而有利于不定根诱导的生长素为IBA。温度对愈伤组织的生长影响非常明显,光照是其发根的限制因素。]]> 2015/1/6 15:55:50 2312true Radix Polygoni Multiflori为蓼科植物何首乌Polygonum multiflorum Thunb.的干燥块根.性微温,味苦、甘、涩.《中国药典》2005年版一部记载具有润肠通便之功效。]]> 2015/1/6 15:55:50 2311true Schisandra chinensis(Turcz.)Baill.的干燥成熟果实,习称北五味子。]]> 2015/1/6 15:55:50 2310true Acanthopanax giraldii Harms的干燥茎皮.资源丰富,广泛分布于四川、甘肃、青海、宁夏等地,其中四川为该药材的主要产区.其茎皮入药,有祛风除湿、强筋壮骨之功效.红毛五加含有多种皂苷成分,其多糖和挥发油量也较高。]]> 2015/1/6 15:55:51 2309true 目的探索杜仲胚轴、子叶不定芽诱导条件,建立杜仲再生体系。方法分别以杜仲种胚、胚轴切段、子叶切段、芽为外植体,将它们接种到一系列含有不同激素质量浓度的培养基中。结果在外植体的选择上,胚轴优于子叶。对于杜仲胚轴的伸长生长,以MS培养基附加2.0mg/LGA效果最好。在含有0.1mg/LNAA及0.8mg/L6-BA的MS培养基中,杜仲胚轴可直接诱导产生不定芽,诱导率达到47%。在壮芽及生根培养中,分别采用附加1.0mg/L6-BA、0.1mg/LNAA的MS培养基及附加1.5mg/LIBA、20mg/L蔗糖的1/2MS培养基效果最好,经28、14d,芽苗生长系数及生根率分别达到2.48和91.7%。结论建立了稳定高效的杜仲再生体系,为外源基因导入杜仲奠定了基础。]]> 2015/1/6 15:56:30 2308true 目的研究不同生长年份人参中木质素量的变化规律,探讨木质素的量用于判断人参生长年份的可行性。方法采用紫外分光光度法测定人参木质素的量。结果人参不同部位和组织的木质素的量存在明显差异;人参根须部的木质素量与生长年份呈极显著负相关(r=0.986**),可作为判断人参生长年份的指标;根据人参根须部木质素的量估算的人参生长年份与实际生长年份的误差范围小于2.5年。结论紫外分光光度法可快速、准确地测定人参根须的木质素的量,无需破坏人参的外形即可初步估算人参的生长年份,不仅可以作为人参生长年份的鉴定方法,同时也可供中药材年份鉴定借鉴。]]> 2015/1/6 15:56:30 2307true 目的研究种源对甘草种子生物学特性及播种苗生长的影响,揭示种源在中药材规范化生产实践应用中的重要作用。方法采用常规方法测定不同来源甘草种子的千粒质量、含水量、种皮透性、发芽率、发芽势,播种后测定幼苗和一年生苗的生长指标。结果上海庙种源种子的千粒质量大于巴音乌素种源,上海庙种源和巴音乌素种源种子的单粒质量分别为12.3和11.7mg。巴音乌素种源种子种皮的透水性较上海庙种源强,电导率测定值是上海庙种源的2倍。上海庙种源种子的硬实率较高,种子耐贮藏性和种子活力较强。巴音乌素种源未处理种子的发芽率和发芽势高于上海庙种源,但处理后的种子发芽率和发芽势均低于上海庙种源。两种源未处理和处理过的种子均以小粒种子的发芽率和发芽势最高。两种源幼苗生长指标之间的差异达到了显著和极显著水平。上海庙种源一年生播种苗的多数生长指标略高于巴音乌素种源,但两种源之间的差异未达到显著水平。结论种源对甘草种子的物理特性、种皮的透性、种子的发芽特性有一定的影响;种源和种子大小对甘草幼苗的生长有极显著的影响,但对一年生播种苗的生长量及生物量均未产生显著影响。]]> 2015/1/6 15:56:31 2306true 目的建立太子参挥发性成分GC-MS指纹图谱分析方法,为太子参质量评价提供依据。方法用GC-MS联用技术对不同产地太子参的挥发性成分进行分析,建立其指纹图谱,确定共有指纹峰,并选用模糊聚类法分析比较。结果太子参挥发性成分中含有12个特征性指标成分,初步建立了以此12个共有峰为特征指纹信息的GC-MS指纹图谱。结论方法准确可靠,重现性好,可作为太子参内在质量评价的依据。]]> 2015/1/6 15:56:31 2305true 目的揭示广藿香茎和叶中挥发油的合成场所、转运方式和储存部位。方法超薄切片法、组织化学法。结果在广藿香茎内的薄壁细胞中,质体和线粒体内观察到电子致密度高的嗜锇物质,另外,在细胞质中观察到有一些灰色小泡,在小泡的外膜上附着一些小的、电子致密高的嗜锇滴;在液泡膜外侧,聚集着大量的附着嗜锇滴的灰泡。在叶中,情况有所不同。由于栅栏组织细胞排列紧密,体积较小,且细胞内密集大量的叶绿体,因此栅栏组织细胞内无大液泡,质体、线粒体和小液泡相邻分布,而前两者内分布有电子致密度高的嗜锇物质。结论在广藿香茎内,质体是挥发油的主要合成场所,合成的挥发油主要通过灰色小泡转运到液泡内储存。在叶中,叶绿体不仅行使光合作用功能,而且还是挥发油的主要合成场所,合成的挥发油以渗透的方式进入小液泡内储存起来。]]> 2015/1/6 15:56:31 2304true 目的研究钾肥施用量对福田河白菊产量和质量的影响,为其GAP栽培合理施肥提供指导。方法在中等氮、磷和其他矿质养分为肥底的基础上,设置不同钾肥施用量进行土壤培养试验,分别测定菊花产量和花中的黄酮、绿原酸、可溶性总氨基酸和粗蛋白的量以及苯丙氨酸解氨酶活性。结果盆栽试验结果表明,适量施钾能显著提高菊花产量与质量。在施钾(K2O)量为0～4.0g/株时,菊花产量和花中总黄酮的量与累积量同施钾量及花中钾的量成正比,而与花中N/K成反比;但施钾过高(6.0～8.0g/株)会抑制白菊生长,使菊花产量和花中总黄酮的量与累积量均有不同程度的降低。菊花中绿原酸的量同施钾量及花中钾的量成正比,而与花中N/K成反比。白菊不同花期花中总黄酮和绿原酸的量同花中可溶性总氨基酸和粗蛋白的量之间呈显著负相关。结论在中等氮、磷和其他矿质营养条件下,综合考虑菊花产量和花中总黄酮与绿原酸的量及累积量等因素,福田河白菊钾肥施用量以4.0g/株比较适宜。]]> 2015/1/6 15:56:31 2303true 目的用序列相关扩增多态性(SRAP)这一新的分子标记技术建立稳定可重复的黄花蒿Artemisia annua的SRAP最佳反应体系。方法以黄花蒿DNA为模板,分析了SRAP反应体系中的一些重要参数对PCR扩增的影响。结果建立了稳定可重复的SRAP反应体系;25μL反应体系中,模板DNA为30～105ng,MgCl₂为2.0mmol/L,dNTP为0.25mmol/L,Taq酶为1.0U,引物为2.0μmol/L;扩增程序:94℃预变性3min,94℃变性1min,35℃复性1min,72℃延伸1min,5个循环;94℃变性1min,50℃复性1min,72℃延伸1min,35个循环,72℃延伸7min。结论本研究建立的黄花蒿SRAP体系重复性好,稳定性强。]]> 2015/1/6 15:56:31 2302true Scutellaria baicalensis Georgi为唇形科植物的干燥根,性寒、味苦,具有清热燥湿、泻火解毒等功效,含数种黄酮苷.黄芩苷(baicalin)是其主要有效成分,药理作用最强,具有抑菌抗炎、抗HIV-1活性、抗氧化、抗变态反应和清除自由基等药理作用.因此近年来,临床上对黄芩药材的需求量大增,黄芩野生资源破坏严重,产量日趋下降,有的产区种群已濒临灭绝,因此利用植物组织培养技术对黄芩进行组织培养来生产其有效成分是解决目前供需矛盾的有效途径之一。]]> 2015/1/6 15:56:31 2301true Chrysanthemum morifolium Ramat.属于菊科中的菊花,是一种常用的中药,也是一种提神饮品。花中含有挥发油0.13%、菊苷、腺嘌呤、黄酮、胆碱、水苏碱及微量维生素A样物质、维生素B1、氨基酸及刺槐素等,对中枢神经具镇静作用,而且有解热、增强毛细血管抵抗力、扩张冠状动脉作用,另有抗菌、抗病毒、抗炎、抗衰老、抗肿瘤的作用。]]> 2015/1/6 15:56:31 2300true 目的 通过水苏糖铵盐培养液对土壤细菌生长的影响,证明水苏糖对土壤细菌具有"筛选作用"。方法 采用比浊法,在初始菌悬液浓度一致的前提下,每2h于600nm处测定菌悬液的吸光度值并绘制生长曲线,以定量分析水苏糖对土壤细菌生长的影响情况。结果 大多数土壤细菌不能很好地利用水苏糖,仅少数土壤细菌在水苏糖培养液中生长良好。结论 大多数土壤细菌不能很好地利用水苏糖作为其能源物质,因此可能造成根际细菌的种类和数量大幅下降,仅少数可较好利用水苏糖的土壤细菌活动旺盛,这些能够良好利用水苏糖的土壤细菌有可能作为"优势菌"大量繁殖,从而造成地黄根部土壤微生物失衡。]]> 2015/1/6 15:45:49 2299true 目的 探索影响人工培养条件下桦褐孔菌菌丝体水解鞣质积累的因素。方法 以菌丝体干质量和水解鞣质的量为指标,对不同碳源、氮源、pH以及不同金属离子作用下的菌丝体干质量和水解鞣质的量进行测定。结果 最适合桦褐孔菌积累水解鞣质的碳、氮源是葡萄糖和蛋白胨,最佳pH是5.5。Cu2+在0.8mmol/L,Co2+在1.6mmol/L,Zn2+在1.6mmol/L,Mn2+在1mmol/L,NH4+在4mmol/L时都能明显地促进水解鞣质的合成。结论 以葡萄糖和蛋白胨为碳、氮源,pH为5.5的培养基有利于桦褐孔菌水解鞣质的积累。Cu2+,Co2+,Zn2+,Mn2+添加到上述培养基中是进一步提高培养产物水解鞣质积累的有效手段。]]> 2015/1/6 15:45:49 2298true 目的 测定细辛挥发油抗药用植物病原真菌的活性,探讨其抗菌作用机制。方法 以"甲霜灵"和"农抗120"为对照农药,采用菌丝生长速率法测定细辛挥发油对5种植物病原真菌的毒力作用,求得毒力方程和EC50,比较细辛挥发油与两种常用农药的作用;以枸杞炭疽病菌为作用对象,采用电导率法测定细辛挥发油对菌丝细胞膜的损伤作用。结果 在5种供试菌中,细辛挥发油对西洋参疫病菌的抑制作用最强,EC50值为59.70μg/mL,与"甲霜灵"相近;对枸杞炭疽病菌抑制作用最弱,EC50值为410.20μg/mL,介于"甲霜灵"和"农抗120"之间;对砂仁叶枯病菌、烟草赤星病菌、土生链格孢菌的EC50在296.48~334.13μg/mL,高于"甲霜灵",与"农抗120"相近。供试菌在细辛挥发油作用5.0、10.0h后,菌丝细胞外渗液电导率值随着作用时间延长而增加,分别为7.9001、9.4760μS/cm,明显高于空白对照组1.8677、1.7956μS/cm(P<0.05),与对照农药"农抗120"作用相近,略高于"甲霜灵"组。结论 细辛挥发油对5种植物病原真菌的抑制作用居于"甲霜灵"和"农抗120"之间,细辛挥发油可以造成枸杞炭疽病菌菌丝细胞膜损伤,引起内容物外渗,细胞膜是细辛挥发油对植物病原真菌的作用靶点之一。]]> 2015/1/6 15:45:49 2297true 目的 研究氮、磷、钾肥对益母草生长发育及次生代谢物的影响。方法 采用大田试验与室内分析相结合的方法。结果 益母草各项生长、产量及水苏碱和总生物碱的量基本均为复肥型高于单肥型,复肥型中又以营养平衡型大于营养失调型,但单施氮肥对以上各项指标均有很大促进作用。在复肥型中,足量磷元素与氮元素的合理配施可以提高氮的肥效。结论 以益母草株高、叶片数、分蘖数、产量及水苏碱和总生物碱的量为评价标准,根据氮、磷、钾二次肥料数学模型的计算结果,确定最佳施肥量为:N:37.5~44.0g/m2,P:37.4~54.3g/m2,K:31.6~34.4g/m2,氮、磷、钾的最佳配比为4∶4.5∶3.3。]]> 2015/1/6 15:45:49 2296true 目的 构建不同地区来源半夏栽培品的DNA指纹图谱,探讨利用AFLP分子标记在半夏遗传多样性、亲缘关系及种质鉴别上的可行性。方法 运用扩增片段长度多态性技术(AFLP),对我国17个地区的51份半夏栽培品和4份掌叶半夏样品(外群)进行基因组DNA多态性分析。结果 从64对引物组合中筛选出8对多态性丰富、鉴别效率高的AFLP引物组合,构建了51份半夏栽培品的AFLP指纹图谱。聚类分析结果表明:所有半夏栽培品完全被区分开,来源地相同的种质表现出相对密切的亲缘关系,浙江等华东地区的栽培半夏同其他地区半夏有着明显遗传差异,聚类分析结果获得了Bootstrap校验的支持。结论 AFLP分子标记可用于半夏遗传多样性、亲缘关系及种质鉴别分析,浙江、江苏等华东地区栽培半夏的遗传特性相对独立。]]> 2015/1/6 15:45:50 2295true 目的 比较广西壮、瑶医常用药材玉郎伞Millettia pulchra var.laxior与易混品种水罗伞(干花豆)For-diacauliflora的生药鉴别特征。方法 宏观(植物形态、药性性状)、微观(显微组织)及光谱、色谱技术分析方法。结果 玉郎伞与水罗伞除紫外吸收光谱较相似外,其植物形态、药材性状、显微组织及薄层色谱均有各自的鉴别特征。结论 研究结果为该类药材的鉴定、质量标准的制定和进一步开发利用提供了科学依据。]]> 2015/1/6 15:45:50 2294true 目的 建立测定蜘蛛香药材中缬草素、乙酰缬草素及其分解产物Baldrinal的HPLC定量分析方法。方法 采用C18柱,乙腈-水(60∶40)洗脱,体积流量0.95mL/min,检测波长256nm。结果 测定了15批不同产地和收集时间的蜘蛛香药材中3个成分的量,且3成分的量呈较大差异。结论 本方法简便可行,适用于蜘蛛香药材中缬草素、乙酰缬草素和Baldrinal的测定。]]> 2015/1/6 15:45:50 2293true 2015/1/6 15:45:51 2292true Cassia angustifolia Vahl的主要有效成分。番泻叶具有泻下作用，疗效显著，应用方便，但目前临床上所用的番泻叶多为进口，国内产量少，如何扩大药源，寻找新的药用部位成为目前研究的一个重要任务。]]> 2015/1/6 15:45:51 2291true 目的分析栽培与野生肉苁蓉Cistanche deserticola种质资源多样性。方法对58个种植基地和野生肉苁蓉单株进行AFLP分析,利用PopGene32软件分析群体的遗传多样性。结果栽培肉苁蓉多态位点百分率79.16%,野生居群总计多态位点百分率89.53%,4个居群平均Nei’s基因多样性指数为0.1938,Shannon’s多态性信息指数为0.3004,基因分化系数Gst为0.0979。结论栽培与野生肉苁蓉遗传多样性均较高,遗传分化很小。说明现阶段该物种的种内丰度较高,其濒危原因不在于此。因此,野生抚育和人工栽培是保护肉苁蓉资源并实现可持续利用的根本方向。]]> 2015/1/6 15:47:44 2290true 目的建立用于遗传转化的青羊参组织培养系统。方法以不同外植体部位、不同消毒剂、不同消毒时间建立无菌苗;以不同外植体部位、不同激素种类及配比、不同质量浓度的2,4-D与KT诱导青羊参愈伤组织形成、继代、分化;测定青羊参对标记基因分解物庆大霉素(Gent.)的敏感性。结果以青羊参的种子及茎段做外植体,以10%次氯酸钠消毒种子20～30min,或以0.2%HgCl₂消毒茎段3min建立无菌苗具有最好效果;青羊参的种子、根、茎、叶易于形成愈伤组织;2,4-D对青羊参愈伤组织的形成是必要的;青羊参对KT较为敏感,不论用KT诱导青羊参愈伤组织的形成,还是诱导胚芽或腋芽形成,均有较好效果;以MS为基本培养基,以2,4-D1.0mg/L+KT1.0mg/L为激素配比诱导青羊参愈伤组织的形成具有较好效果;以MS+2,4-D0.5mg/L+KT0.5mg/L继代愈伤组织具有较好效果;以MS+KT0.5mg/L+NAA0.1mg/L诱导种子的胚芽或茎段的腋芽萌发具有较好效果;青羊参的愈伤组织不论来源于种子,还是来源于根、茎、叶,不论使用激素6-BA,还是使用KT、ZT、2ip均未观察到愈伤组织分化形成不定芽;100μg/mL的庆大霉素是青羊参转基因植株筛选的最佳压力。结论通过基因枪介导转基因时,选择种子或茎段在MS+2,4-D1.0mg/L+KT1.0mg/L培养基上萌动14d,形成愈伤但未形成芽的材料作为基因枪轰击材料较好。]]> 2015/1/6 15:47:44 2289true 目的确定黄芩种子的最适超干水分和适宜回湿方法。方法本实验以黄芩种子为材料,将种子和硅胶按一定比例放在30℃干燥箱中恒温鼓风干燥,获得不同超干水分的黄芩种子,通过测定种子发芽率、发芽势等确定黄芩种子最适宜的超干水分。然后用6种不同回湿处理方法进行超干种子的适宜回湿方法研究。结果黄芩种子最适超干水分为3.6%,当超干水分为2.6%时种子活力显著下降。PEG30%的回湿方法可显著提高受到超干损伤后的种子活力。结论黄芩种子是可以通过超干来降低种子水分进行种质保存的。]]> 2015/1/6 15:47:44 2288true 目的为老瓜头Cynanchum komarovii资源利用提供前期的生物技术实验参考。方法以老瓜头的根段、茎段和叶片为外植体,采用正交试验方法,筛选诱导愈伤组织产生的最适培养基;进行愈伤组织增殖培养过程中,测定了不同时间愈伤组织的鲜、干质量,绘制愈伤生长曲线;同时进行了愈伤组织分化培养基的实验筛选。结果不同外植体诱导愈伤产生,其根诱导效果最好,各处理诱导率达90%~100%,茎段和叶片愈伤组织诱导最佳配方分别为MS+2,4-D1.0mg/L+6-BA2.0mg/L+NAA0.5mg/L和MS+2,4-D0.5mg/L+6-BA0.5mg/L+NAA0.5mg/L,茎段比叶片较容易诱导,各处理诱导出的愈伤组织质地松散,颜色鲜黄,几乎无褐化现象。愈伤组织继代生长在第10天进入对数生长期,愈伤鲜生长量最大达4.961g,干质量0.496g。愈伤组织的分化率很低,很难生芽,易分化出钉状根。结论对于诱导愈伤形成,根段是最佳的外植体,筛选出了茎段和叶片诱导愈伤的最适配方,愈伤组织生长量较大,但分化困难。]]> 2015/1/6 15:47:44 2287true 目的研究以秋水仙碱处理的长春花突变细胞在继代培养过程中的生长规律、吲哚生物碱积累的规律及营养成分的适宜浓度等方面的特征,期望得到适于工业化细胞培养的理想材料。方法将突变细胞培养于MS固体培养基上,定期称取其鲜质量,用有机溶剂萃取吲哚生物碱,应用RP-HPLC法检测药用成分阿玛碱和长春质碱。结果突变细胞培养至第30代时,生长速度和吲哚总碱积累得最快,培养至第45代时,两者均明显下降。而药用成分的量于第20代达到最高;在培养基中添加适量的色氨酸能提高药用成分的量;培养基中Ca²⁺和Zn²⁺的质量浓度分别为1760和12.6mg/L时,明显促进了药用成分的积累。结论长春花突变细胞可能是一种适于工业化细胞培养的理想材料。]]> 2015/1/6 15:47:44 2286true 目的研究绞股蓝种子发芽特性,寻找行之有效的提高种子萌发率的方法,为大田生产奠定基础。方法对绞股蓝种子分别进行机械处理、超声处理以及不同植物生长调节剂浸泡等处理,计算发芽率。结果超声处理、揉搓、剥除种皮以及3种植物生长物质处理均可以显著提高绞股蓝种子发芽率。0.1mg/L6-BA浸泡1h效果最好,其次为超声处理10min时、剥除种皮、揉搓,处理种子萌发率分别为69%、54.6%、38.5%、35.3%。结论实际操作中揉搓和剥除种皮两种方法操作性不强,0.1mg/L6-BA浸种处理对幼苗生长有负面影响,而超声处理简单易行,可作为大规模播种前处理应用于大田生产。]]> 2015/1/6 15:47:45 2285true 目的揭示桔梗种子质量对发芽、出苗及苗素质的影响。方法采用统一挂牌分期取样,调查不同成熟度种子的发芽率、出苗率及苗素质等方法。结果桔梗开花后第55天千粒质量达到最高值1.175g;成熟度在63.3%以上的种子最终发芽率可达到80%以上,且成熟度越好的种子早期发芽率越高;成熟度在81.4%以下的种子和催芽开始7d后发芽的种子对出苗率及苗素质有严重的影响。结论本试验的结果对桔梗的良种生产、种子质量标准的建立有一定的指导作用,对其他中药材的良种生产也有一定的参考价值。]]> 2015/1/6 15:47:45 2284true Magnolia biondii Pamp.、玉兰M.denudata Desr.或武当玉兰M.sprengeri Pamp.的干燥花蕾,产于四川、湖北、湖南、河北、河南、陕西、甘肃等地。辛夷既是名贵的中药材,具有散风寒、通鼻窍的功能,用于风寒头痛、鼻塞、鼻渊、鼻流浊涕等症,又是很好的香料,提取的精油能用于食用香精、烟用香精和日化香精的生产。]]> 2015/1/6 15:47:45 2283true Smilax china L.的根茎,具有祛风利湿、解毒散瘀之功效,中医临床常用来治疗妇科炎症和肿瘤。菝葜中主要含有黄酮类、芪类、皂苷类、鞣质等成分,其中芪类成分主要为白藜芦醇(Ⅰ)、3,5,2',4'-四羟基芪(Ⅱ)及其苷,为抗肿瘤的有效成分。]]> 2015/1/6 15:47:45 2282true Rehmannia glutinosa Libosch.的新鲜或干燥块根,前者习称"鲜地黄",后者习称"生地黄"。生地黄具有清热凉血,养阴,生津的功效.用于热病舌绛烦渴,阴虚内热,骨蒸劳热,内热消渴,吐血,衄血,发斑发疹。]]> 2015/1/6 15:47:45 2281true 目的 获得1，4-丁二胺-氮-甲基转移酶(putrescine N-methyltransferase，PMT)和莨菪碱-6β-羟化酶(hyoscyamine6β-hydroxylase，H6H)双基因共转化的颠茄发根的再生植株。方法 选用PMT和H6H双基因共转化的东莨菪碱高产发根单克隆T4，用1/2MS+1.0mg/LNAA固体培养基培养1、5、10d后，转入1/2MS固体培养基中诱导不定芽和不定根，培养条件均为(25±1)℃，55μmol/(m².s)，12h/d。采用PCR扩增检测再生植株的PMT、H6H和NPT-。结果 发根在1/2MS+1.0mg/LNAA固体培养基上培养5d后，转入1/2MS固体培养基上培养，60%的外植体能自发长出不定芽，1/2MS+0.1mg/LIBA固体培养基中诱导生根较1/2MS固体培养基强，15d产生的条数平均为9条，形成了完整的再生植株。PCR检测表明所有再生植株均为颠茄的转基因再生植株。结论 建立了颠茄转化发根再生体系，为实现颠茄托品烷类生物碱的代谢工程及开展分子育种奠定了基础。]]> 2015/1/6 15:49:21 2280true 目的 对茅苍术3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(3-hydroxy-3-methylglutaryl-CoA reductase，HMGR)进行基因克隆及序列分析。方法 采用cDNA末端快速扩增技术，以茅苍术嫩叶总RNA的cDNA为模板扩增茅苍术HMGR基因的保守区片断。结果 序列分析表明，所克隆的cDNA保守区序列长度为458bp，而且同时得到了两个核苷酸序列的同源性为84.28%的片段，相应的氨基酸序列的同源性为92.11%。分别命名为HMGRcr1，HMGR-cr2.推断这可能是该基因家族中的两个成员。而且同源序列比对发现，推断的HMGRcr1氨基酸序列和HMGRcr2氨基酸序列与其他植物都有较高的同源性。结论 首次分离并报道了茅苍术HMGRcDNA克隆，为进一步研究萜类生物合成机制及其在提高植物药用价值方面提供理论依据。]]> 2015/1/6 15:49:21 2279true 目的 研究石蒜属4种植物的种间亲缘关系和同一种内不同采集地材料的遗传多样性，为其种质资源评价和合理开发利用提供分子佐证。方法 用ISSR和RAPD标记分别对不同采集地的37份石蒜属植物(石蒜18份、中国石蒜10份、换锦花5份、忽地笑4份)的基因组DNA的遗传多样性进行检测。结果 (1)16条ISSR和17条RAPD引物分别扩增出229和215条带，多态比率分别为85.59%和69.77%，显然，ISSR检测出的多态性条带的能力优于RAPD；(2)ISSR和RAPD标记检测同组供试材料种间或种内的Nei′s遗传相似系数范围分别为0.5459～0.9345，0.6419～1.0000，平均为0.6836，0.7428.两者相关系数r=0.8582，达极显著水平。(3)ISSR和RAPD标记的分子聚类结果相近，两种标记均能准确地把不同来源的材料先按种聚类，种间的分子分类结果与传统经典分类相符；种内不同采集地材料间存在一定的遗传差异，其遗传多样性较为丰富。(4)用POPGENE3.2分析的种间基因分化系数(Gst)与用AMOVA进行的遗传变异巢式方差分析所得结果基本一致。结论 两种标记均可用于石蒜属植物种间亲缘关系与种内的遗传多样性研究，虽然ISSR标记在种间遗传多样性检测上分辨力较RAPD标记低，但ISSR标记能检测到更高的种内遗传差异性，更适合种下水平的遗传多样性研究。]]> 2015/1/6 15:49:21 2278true 目的 在大田条件下研究了白花蛇舌草对氮、磷、钾的吸收分配规律。方法 定期取样研究干物质积累规律，采用常规测定方法测定植株氮、磷、钾的量。结果 白花蛇舌草苗期对氮、磷、钾吸收较少，分枝开花期和结果期吸收量快速增加，成熟期氮、磷吸收减少，钾出现"负吸收"。白花蛇舌草植株对氮素吸收最多、钾次之、磷最少，全生育期植株对氮、磷、钾的吸收比率为1.00：0.16：0.54.苗期和分枝开花期氮、磷、钾主要积累在叶和茎中，其中氮素以叶中分配最多，磷和钾则主要分配在茎中；结果期和成熟期氮、磷、钾多分配在花果和茎中，氮和磷花果中最多，钾则茎中最高。结论 白花蛇舌草在苗期对肥料要求不多，可适当少施。分枝开花期和结果期吸收量骤增，要加大施肥用量，结果期对磷肥和钾肥要求较多，应适当补施磷肥和钾肥以满足此期果实生长的需要。]]> 2015/1/6 15:49:21 2277true 目的 研究河北道地药材紫菀的HPLC-UV指纹图谱以获取对照图谱，并比较不同产地紫菀药材指纹特征，测定其有效成分紫菀酮的量，为科学评价与有效控制紫菀药材质量提供方法。方法 色谱柱为Diamonsil^TMC₁₈柱(250mm×4.6mm，5μm)；柱温为30℃，检测波长为200nm，进样量20μL，流动相为乙腈-0.05%磷酸进行梯度洗脱，定量测定中流动相为乙腈等度洗脱，体积流量为2.0mL/min。结果 道地药材指纹图谱相似度均大于0.95，不同产地药材存在较大差异。紫菀酮线性范围为0.099～0.895mg/mL(r=0.9996，n=5)，平均回收率为99.27%，RSD=1.15%(n=6)。结论 本方法操作简便、快速、准确，可作为紫菀药材的质量控制方法。]]> 2015/1/6 15:49:21 2276true 目的 揭示蜕皮甾酮在牛膝不同营养器官中的积累规律。方法 高效液相色谱法。结果 在牛膝根、茎和叶3种营养器官中都含有蜕皮甾酮，但不同器官中蜕皮甾酮的量有显著差异。幼嫩的器官中蜕皮甾酮的量较高，随着营养器官发育成熟，其蜕皮甾酮的量随物候期的变化差异显著。至采收期(11月)时，牛膝营养器官中蜕皮甾酮的量为：叶>；根>；茎。结论 牛膝根中蜕皮甾酮的量高峰与其产量高峰一致，都在11月初地上部分枯萎时，因此，此时应为牛膝的适宜采收期，与传统的牛膝采收期相吻合。但此时叶和茎中也含有较高量的蜕皮甾酮，因此，建议对牛膝地上部分进行综合开发利用。]]> 2015/1/6 15:49:22 2275true [1～3]。香鳞毛蕨在中国以黑龙江省为分布中心，主要生长在高寒地区的滑石坡、火山岩浆缝中。]]> 2015/1/6 15:49:22 2274true 2005年版收载的常用中药，也是广西大宗主产优势中药材之一，其植物来源为芸香科植物两面针Zanthoxylum nitidum (Roxb.)DC.的干燥根。由于两面针具有良好的行气止痛、活血化瘀、祛风通络作用，故为常用药物，广泛应用于中医处方、中成药及精细化工产品中，两面针药材及其相关产品所属产业已经成为振兴广西经济的特色产业之一。]]> 2015/1/6 15:49:22 2273true 目的：以麻黄碱为目标产物, 探讨氮离子(N+)注入介导麻黄基因组DNA在酵母菌中的转化。方法：通过N+注入介导蓝麻黄基因组DNA分别在酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae和异常汉逊酵母Hansenula anomala中随机转化, 转化后的酵母菌经BTB指示性辅助筛选、斜面传代和液体培养后, 用铜铬盐定性检识和RP-HPLC方法, 检测重组酵母菌胞外和胞内麻黄碱的量。结果：获得了遗传稳定的以葡萄糖为碳源、NaNO3为氮源生物合成麻黄碱和(或)伪麻黄碱的重组酵母菌9株。液体培养72 h, RP-HPLC测试胞外麻黄碱和伪麻黄碱的最高量分别为18.85和2.88 mg/L;胞内麻黄碱和伪麻黄碱最高量分别为4.29和22.16 mg/g干细胞。结论：采用离子注入介导麻黄基因组DNA大分子转化技术, 通过适当的筛选方法, 可获得易于人工培养的产生麻黄碱等次生代谢产物的微生物工程菌株。]]> 2014/12/22 14:29:49 2272true 目的：分析当年生喜树Camptotheca acuminata幼苗各部位中喜树碱的量及其生物合成途径中色氨酸合酶(TSB)和色氨酸脱羧酶(TDC)的活性。方法：用HPLC检测温室内不同氮素形态下砂培喜树幼苗各部位中喜树碱的量及TSB和TDC活性。结果：不同氮素形态下喜树幼苗幼叶中喜树碱量明显高于其他器官(P<0. 01), 其次为茎皮和成叶, 根中的最低。TSB活性在不同氮素形态下以幼叶最高, 茎皮、成叶和根依次减弱, 与喜树碱量呈现良好的器官对应性。不同氮素形态下TDC活性的最高部位为茎皮, 其次为幼叶, 成叶和根很低, 与喜树碱的量缺乏器官对应性。结论：当年生喜树幼苗喜树碱量以及TSB和TDC活性存在明显的组织器官特异性, 喜树碱的量和TSB活性最高部位为幼叶, 茎皮中TDC活性最大。]]> 2014/12/22 14:29:49 2271true 目的：研究北柴胡叶片、茎段和花芽愈伤组织诱导、分化和不定芽增殖的条件, 探讨快速繁殖的新途径。方法：选择优良的北柴胡类型, 在附加不同种类、不同质量浓度和不同配比外源植物激素的MS培养基中, 进行不同外植体愈伤组织的诱导和分化培养以及愈伤组织再生植株的繁殖和生根培养。结果：附加2, 4-D 1.0 mg/L、KT0.5 mg/L和6-BA 0.5 mg/L的MS培养基最适合于叶片、茎和花芽愈伤组织的诱导, 其中以花芽愈伤组织的诱导效果最好;在附加6-BA 1.0 mg/L、NAA 0.03 mg/L和CM 15%、CH500 mg/L的培养基中, 愈伤组织的分化率最高;附加6-BA 1.5 mg/L、NAA 0. 05 mg/L和CH 250 mg/L的MS培养基为芽苗增殖的适宜培养基;附加NAA0.5 mg/L的1/2 MS培养基是生根的适宜培养基。结论：北柴胡的茎段和花芽外植体在适宜的激素组合中均可通过愈伤组织途径分化出不定芽, 继而得到正常生长、发育的再生植株。]]> 2014/12/22 14:29:49 2270true 目的：通过测定宁夏8个不同产区枸杞头茬、盛果期和秋果中总糖、多糖、甜菜碱、氨基酸、总黄酮、类胡萝卜素的量及百粒质量, 并分析总糖碱比, 研究枸杞中这些指标间以及它们与土壤肥力因子间的相互关系。方法：采用HPLC和分光光度等实验方法以及聚类分析、相关性分析和方差分析等生物统计方法。结果：枸杞中各指标被归为以总糖、甜菜碱和类胡萝卜素为代表的3类, 各指标受各种土壤肥力因子的作用不同。结论：总糖、甜菜碱和类胡萝卜素这3种成分及糖碱比值能较科学地评价枸杞的品质;施肥时应综合考虑各种肥力因子对枸杞成分的协同作用, 不宜片面考虑其单-的相关性。该研究为枸杞品质评价及合理施肥提供了依据。]]> 2014/12/22 14:29:49 2269true 目的：为构建红花的遗传连锁图谱和功能基因的研究, 探讨影响红花cDNA扩增片段长度多态性(cDNA amplified fragment length polymorphism, cDNA-AFLP)的各种因素, 建立并优化红花cDNA-AFLP反应体系。方法：以红花新鲜花瓣为材料, 针对其内含物特殊性对Trizol法加以改进提取RNA, 采用无RNase H活性的鼠源反转录酶(M-MLV RTase)结合置换合成法反转录双链cDNA;两步法酶切与连接, 优化酶切时间;连接产物和预扩产物分别设置不同稀释倍数扩增并对选扩反应体系略微调整后, 用6%的聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)电泳分离, 银染检测。结果：改进Trizol法得到的红花总RNA样品较为完整, 纯度较高, 可直接用于双链的合成;经无RNase H活性反转录酶结合置换合成法得到高质量的cDNA模板。建立优化后的红花cDNA-AFLP体系为:250 ng cDNA 37 ℃6 h经限制性内切酶MseI和EcoRI完全酶切, 16 ℃连接12 h;连接产物最佳稀释倍数为10倍;预扩产物稀释为150倍;PAGE电泳得到清晰、稳定、分辨率较高的多态性条带。结论：本研究建立的反应体系适用于红花功能基因的cDNA-AFLP研究。]]> 2014/12/22 14:29:49 2268true 目的：建立菝葜药材的脂溶性成分的HPLC指纹图谱分析方法。方法：采用Phenomenex C18柱(250 mm×4.6 mm, 5 μm), 以甲醇-0.1%的磷酸溶液梯度洗脱, 体积流量1.0 mL/min, 柱温35 ℃, 检测波长303nm。结果：不同产地菝葜药材的指纹图谱有较好的相似度, 通过比较对应了山龙眼苷A、落新妇苷、白藜芦醇及黄杞苷4个对照品。结论：建立的方法能较好地反映了菝葜中二氢黄酮醇苷及二苯乙烯两类主要成分。]]> 2014/12/22 14:29:49 2267true 目的：建立白术药材挥发性成分GC-MS指纹图谱分析方法, 为白术质量评价提供依据。方法：采用GC-MS联用技术对不同产地白术的挥发性成分进行分析, 建立其指纹图谱, 确定共有指纹峰。结果：白术挥发性成分中含有18个特征性指标成分, 初步建立了以此18个共有峰为特征指纹信息的GC-MS指纹图谱。结论：该方法准确可靠, 重现性好, 可作为白术内在质量评价的依据。]]> 2014/12/22 14:29:49 2266true 目的：比较道地产区不同品种地黄中多糖的量。方法：苯酚-硫酸比色法, 线性范围5.3~106.0 μg/mL(r=0.9997)。结果：以葡萄糖计, 北京1号、大红袍、红薯王、北京2号、9302、狮子头、金状元、85-5地黄中多糖质量分数分别为:12.73%、10.04%、8.32%、7.10%、4.87%、4.11%、2.48%、1.58%。结论：不同品种地黄中多糖的量差异明显, 其中以北京1号中多糖的量最高。]]> 2014/12/22 14:29:50 2265true 目的：建立江苏道地药材野马追中金丝桃苷、槲皮素和山柰素的定量测定方法。方法：采用Aligent Eclipse XDB-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm, 5μm), 乙腈-甲醇(10:1)-0.5%磷酸溶液为流动相, 进行梯度洗脱分离, 检测波长为370 nm。结果：金丝桃苷、槲皮素和山柰素在选定质量浓度范围内, 线性关系良好, 平均回收率分别为97.01%, 96.56%, 96.84%, RSD分别为1.2%, 1.1%, 1.2%。结论：该方法快速简便, 重现性好, 可以作为野马追中黄酮成分的测定方法, 更全面地控制野马追药材的质量。]]> 2014/12/22 14:29:50 2264true 目的：建立同时测定满山红中齐墩果酸和熊果酸的高效液相色谱方法。方法：采用Hyporsil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm, 5 μm), 以0.03 mol/L磷酸盐缓冲液(pH=3.0, 含6 mmol/L的β-环糊精)-甲醇(13:87)为流动相, 体积流量1.0 mL/min;检测波长210 nm。结果：齐墩果酸和熊果酸分别在0.026 0~0.130 mg/mL和0. 087 2~0.436 mg/mL线性关系良好, 平均回收率分别为99.2%(RSD=1.1%)和98.6%(RSD=1.2%)。结论：该方法简便快速, 结果准确可靠, 各产地满山红中熊果酸的量均高于齐墩果酸。]]> 2014/12/22 14:29:50 2263true Coryclag yanhusuo W.Twang的干燥块茎，亦名元胡，其味辛、苦，性温；归肝、脾经。具有活血、利气、止痛之功效，临床上主要用于各种疼痛、心血管及痛经等。]]> 2014/12/22 14:29:50 2262true 目的研究新林土、老参地土、人参根际土浸提物对萌芽人参种子胚根和胚轴生长的影响。方法用甲醇浸提土壤样品,每种土壤浸提物样品分6个浓度梯度对萌芽人参种子进行处理,培养一段时间后,测量人参种子胚根和胚轴长度,通过与对照对比,分析不同土壤浸提物及浓度对人参种子生长的影响。结果人参根际土浸提物对人参种子生长的抑制作用最强;种植人参、西洋参的老参地土浸提物对萌芽人参种子的生长有一定影响,表现为低浓度促进、高浓度抑制的特点;未曾种植人参、西洋参的新林土对萌芽人参种子生长的抑制作用不明显。结论人参根际土壤和老参地土中存在自毒性化学物质,对人参种子生长的抑制作用与其浓度有密切关系。]]> 2014/12/22 14:13:29 2261true 目的解决浙江雪胆栽培中的水分需求问题。方法对浙江雪胆进行不同天数干旱处理,测定叶绿素的量、气体交换和叶绿素荧光参数。结果随着土壤相对含水量的下降,净光合速率(Pn)先迅速上升,15d后开始下降,气孔导度(Gs)和蒸腾速率(E)也在胁迫5d后均有明显的下降,但是胞间CO2浓度(Ci)却明显上升,开放光系统Ⅱ(PSⅡ)反应中心激发能捕获效率(Fv'/Fm')也并没有发生明显的变化,电子传递速率(ETR)、PSⅡ实际量子产额(ΦPSⅡ)、光化学猝灭(qP)和非光化学猝灭(NPQ)则是先上升后下降,与Pn变化一致。结论轻度干旱有利于浙江雪胆的生长,这主要与轻度干旱条件下能有效地耗散过剩的激发能有关。]]> 2014/12/22 14:13:29 2260true 目的建立裕丹参愈伤组织的诱导、继代及植株再生体系。方法比较不同的外植体基本培养基及植物生长调节剂对裕丹参愈伤组织的诱导、继代及植株再生的影响。结果MS+6-BA2mg/L+NAA0.2～2mg/L有利于叶柄和叶片愈伤组织的诱导,其出愈率均为100%,但叶柄出愈量更大;MS+6-BA2mg/L有利于叶片芽的分化,其分化率达55.6%,并有直接成芽现象;B5+6-BA1mg/L+2,4-D1mg/L是愈伤组织继代培养的最佳培养基。结论愈伤组织诱导的最佳外植体为叶柄,最佳培养基为MS+6-BA2mg/L+NAA0.2～2mg/L;诱导芽分化的最佳外植体为叶片,最佳培养基为MS+6-BA2mg/L;愈伤组织继代培养的最佳培养基为B5+6-BA1mg/L+2,4-D1mg/L。]]> 2014/12/22 14:13:29 2259true 目的了解川贝母种子休眠原因及层积处理打破种子休眠的作用。方法浸种称重法测定种皮透水性;生物鉴定法检测发芽抑制物;解剖种子观察层积种子种胚发育;光照培养箱发芽检测层积种子萌发温度。结果浸种8h后川贝母种子吸水率达80%以上;种子浸提液显著抑制白菜种子的萌发和生长;层积处理促进种胚后熟,60d后胚率由处理前12%增至43%;层积种子25℃发芽率显著高于其他发芽温度。结论川贝母种皮无吸水障碍;种子休眠的主要原因是胚形态后熟及存在发芽抑制物,属于混合休眠类型;层积处理可有效打破休眠,25℃发芽适温。]]> 2014/12/22 14:13:29 2258true 目的探讨外源激素-内源激素-特异基因之间的关系,为阐明人参体细胞胚胎发生的分子机制奠定基础。方法对人参不同发生途径,不同时期的培养物进行AFLP分析,对体细胞胚胎发生不同时期培养物的内源IAA和ABA以及皂苷的量进行了测定。结果在早期胚时期IAA的量最高,在成熟胚时期ABA的量最高,而ABA/IAA的值在成熟胚时较高;不同发生途径,不同时期的培养物基因表达不同;体胚发生试管苗总皂苷的量比子叶胚时期高出4倍多。结论IAA的存在是维持人参体胚正常发育到早期胚的条件,ABA与胚性启动,体胚发生、发育相关,尤其对胚胎发育后期有较大的影响;在不同生理状态或不同的培养条件下产生了不同的基因调控类型,不同的发育过程会有特异基因表达,导致了人参分化情况的不同;随着形态建成的逐步完成,也是次生代谢产物逐渐积累的过程。]]> 2014/12/22 14:13:29 2257true 目的建立黄芪药材的HPLC-UV指纹图谱。方法采用HPLC-UV方法。色谱柱为YMC-Pack ODS-A(250mm×4.60mm,5μm);流动相:乙腈-0.1%磷酸水线性梯度洗脱(0→60min,20∶80→40∶60);体积流量:1mL/min;检测波长:210nm;柱温:室温。结果建立了黄芪药材的HPLC-UV指纹图谱,指定出16个共有指纹峰,标定了其中7个指纹峰的结构:3号峰为毛蕊异黄酮苷,5号峰为芒柄花苷,8号峰为9,10-二甲氧基紫檀烷-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷,10号峰为毛蕊异黄酮,14号峰为芒柄花素,15号峰为(6aR,11aR)-3-羟基-9,10-二甲氧基紫檀烷,16号峰为(3R)-8,2'-二羟基-7,4'-二甲氧基异黄烷。结论本法简便、准确、重现性好,可作为黄芪药材质量检测的方法。]]> 2014/12/22 14:13:29 2256true 目的揭示枸杞果实内蔗糖代谢相关糖分积累与枸杞多糖和枸杞总糖量积累的关系。方法高效液相色谱测定葡萄糖、果糖和蔗糖的量,分光光度法测定枸杞多糖量,滴定法测定枸杞总糖量。结果枸杞果实内的糖积累类型为己糖积累型,果实内的果糖量最高,葡萄糖量其次,蔗糖量最低。宁夏所产宁杞1号中枸杞多糖量高于河北巨鹿、新疆精河、内蒙古杭锦后旗所产宁杞1号及其他品种中枸杞多糖的量,不同产地宁杞1号枸杞总糖量变化幅度不大,干质量平均为554.1mg/g,新疆精杞1号多糖量也较高且其总糖量高达61.8%,河北巨鹿架杞果则在枸杞多糖和总糖量上均最低。结论枸杞果实内的枸杞多糖量与枸杞总糖、葡萄糖、果糖、蔗糖量均呈正相关,其中与枸杞总糖量相关性最大,枸杞总糖与葡萄糖、果糖、蔗糖呈极显著正相关,说明枸杞果实内的蔗糖代谢在枸杞多糖和枸杞总糖的形成过程中具有十分重要的作用。]]> 2014/12/22 14:13:30 2255true 目的通过测定不同基源及不同产地祖师麻药材中祖师麻甲素,为有效控制原药材质量及合理利用该药用植物资源提供参考。方法以甲醇为提取溶剂,色谱柱Dikma Diamonsil C18(200mm×4.6mm,5μm);流动相为乙腈-0.05%磷酸水(15∶85),检测波长UV326nm,体积流量1.0mL/min,柱温25℃。结果祖师麻甲素在15.5～930.0ng呈良好的线性关系,祖师麻甲素以陕甘瑞香量相对较高,尤其以甘肃天水的量为高。结论该方法简便可靠,可用于祖师麻药材的质量评价。]]> 2014/12/22 14:13:30 2254true 目的建立同时测定辽细辛中3种非挥发性成分的高效液相色谱方法,为该药材提供质量控制方法。方法以醋酸乙酯为溶剂,对辽细辛药材粉末进行超声提取;采用RP-HPLC法对辽细辛中的L-细辛脂素、L-芝麻脂素和卡枯醇进行同时定量测定。Diamonsil C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-水(50∶50);体积流量为1.0mL/min;检测波长为240nm;进样量为10μL;外标法定量。结果L-细辛脂素、L-芝麻脂素和卡枯醇分别在3.50～35.0μg/mL(r=0.9997),1.52～76.0μg/mL(r=0.9992)和0.38～7.60μg/mL(r=0.9999)呈良好线性关系,回收率分别为99.7%(RSD=2.7%)、96.7%(RSD=1.9%)和97.7%(RSD=1.5%)。结论该方法简便快速,结果准确,重现性好,可用于辽细辛药材的质量控制。]]> 2014/12/22 14:13:30 2253true 目的
针对三叶半夏成熟叶片化学成分复杂,富含多糖、酚类及其他多种化学物质的特点,选择优化一种简便、经济、高效的半夏成熟叶片高质量总RNA提取方法。
方法
用4种不同的RNA抽提方法如异硫氰酸胍法、皂土法、CTAB-LiCl法和改进的SDS/酚法提取总RNA,通过电泳、紫外分光光度计检测以及RT-PCR验证等对提取结果进行分析比较。
结果
4种方法均能从半夏成熟叶片中提取到总RNA。其中皂土法的提取过程只需3~4h,是其他3种提取方法所用时间的一半。提取1g叶片的成本只有其他3种方法的1/13~1/14。此法提取的总RNA18S、28S带型清晰无弥散,完整性好,无严重的蛋白质和其他杂质污染,A260/A280为1.8~2.0,A260/A230大于2.0,且总RNA的产率高,为365.744μg/g鲜重,提取的总RNA适用于RT-PCR试验。
结论
皂土法提取的RNA完全适用于DDRT-PCR、Northern blotting、cDNA文库构建等分子生物学研究,是一种快速、经济,适于抽提半夏总RNA的好方法。]]> 2014/12/22 14:11:03 2252true 目的
探讨培养方式、碳源、氮源对山药微型块茎诱导形成的影响,以期找到适宜的微型块茎诱导形成的培养方式和培养基。
方法
以B号山药试管苗为材料,运用一步培养法和两步培养法筛选最佳培养方式,在此基础上于培养基中添加不同氮源和碳源进行诱导培养,定期对微型块茎的诱导情况进行统计。
结果
两步培养法、60g/L的碳源(白砂糖或蔗糖)、[NO3-]/[NH4+]为3:1、总氮量为30mmol/L时有利于山药微型块茎的诱导形成。
结论
首次建立了两步培养法诱导山药微型块茎形成的培养模式,筛选出了适宜的碳源和氮源,为微型块茎的离体诱导形成及工厂化生产奠定了技术基础。]]> 2014/12/22 14:11:03 2251true 目的
研究离体条件下射干试管根茎诱导的最适培养基。
方法
利用植物组织培养技术,研究了碳源种类和质量浓度,NAA质量浓度和活性炭对射干试管根茎诱导的影响。
结果
射干试管根茎诱导的最佳培养基是MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.5mg/L+白糖6%,培养基中不宜添加活性炭。试管根茎接入培养基MS+BA2.0mg/L+白糖3%上,发芽率达61.03%。
结论
糖质量浓度是影响射干试管根茎诱导的主要因素。]]> 2014/12/22 14:11:03 2250true 目的
研究烟草悬浮培养细胞对呋喃橐吾酮(Ⅰ)的生物转化。
方法
将外源底物呋喃橐吾酮乙醇溶液投入预培养10d的烟草悬浮培养细胞中,共培养4d后终止转化,通过HPLC检测方法,并利用各种色谱技术分离纯化转化产物,最后根据其理化性质和光谱数据进行结构鉴定。此外,实验还考察了共培养时间对转化率的影响。
结果
呋喃橐吾酮(Ⅰ)在烟草细胞中发生了转化,分离鉴定出两个转化产物:3-oxo-eremophila-1,7(11)-dien-12,8-olide(Ⅱ)和3-oxo-8-hydroxyeremophila-1,7(11)-dien-12,8-olide(Ⅲ)。转化的最佳共培养时间为5d,此时总的摩尔转化率最高(53.1%)。
结论
首次利用烟草悬浮培养细胞转化倍半萜类化合物呋喃橐吾酮并获得成功。]]> 2014/12/22 14:11:03 2249true 目的
客观评价决明子内在质量差异。
方法
采用HPLC方法测定大黄酚的量;采用梯度洗脱法建立HPLC指纹图谱;指纹图谱色谱条件:C18柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈和1%醋酸,检测波长为254nm,柱温为室温,体积流量为1mL/min;利用中药色谱指纹图谱相似度评价软件对不同产地决明子指纹图谱进行相似度分析;以大黄酚的量和指纹图谱相似度为指标,运用SAS软件进行聚类分析。
结果
建立的指纹图谱精密度、重现性、稳定性好,不同产地决明子的大黄酚的量及化学指纹图谱不尽相同,化学成分差异与产地相关,大黄酚质量分数为0.037%~0.170%,指纹图谱相似度范围为0.864~0.962。
结论
综合指标成分定量测定及化学指纹图谱分析方法,能较全面地表征不同产地决明子的内在成分差异,可为决明子内在质量控制提供参考。]]> 2014/12/22 14:11:03 2248true 目的
采用HPLC法建立温莪术药材的指纹图谱。
方法
用Kromasil ODS-1(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱,乙腈和水为流动相,采用梯度洗脱,体积流量:0.8mL/min,柱温35℃,检测波长244nm。
结果
建立了HPLC指纹图谱共有模式,并对不同产区的温莪术药材进行了相似度比较。
结论
温莪术药材中各成分均得到了较好的分离,可作为温莪术药材专属性的指纹图谱。]]> 2014/12/22 14:11:03 2247true 目的
揭示全国主产区鱼腥草种质资源甲基正壬酮量变异规律,为鱼腥草优良品种选育提供基础。
方法
用气相色谱法测定23个种源鱼腥草中甲基正壬酮的量,并分析形态特征、地理位置、生长性状与甲基正壬酮的关系。
结果
不同种源鱼腥草中甲基正壬酮存在显著差异,与纬度呈正相关,与植物形态存在一定的关系,与植株高度和地径没有显著的相关性。
结论
鱼腥草种质资源甲基正壬酮的量存在一定的变异规律,针对鱼腥草甲基正壬酮选择新品种时,应优先考虑在纬度高、生长快的种源中选择。]]> 2014/12/22 14:11:03 2246true 目的
建立同时测定紫菀药材中阿魏酸、槲皮素和山柰酚的分析方法。
方法
色谱柱为DiamonsilTM C18柱(250mm×4.6mm,5μm),柱温为30℃,检测波长分别为310、360、365nm,进样量20μL,流动相为乙腈-0.05%磷酸进行梯度洗脱。
结果
阿魏酸、槲皮素和山柰酚分别在0.011~0.277、0.004~0.106、0.006~0.126mg/mL呈良好的线性关系。15批药材中阿魏酸、槲皮素和山柰酚质量分数分别为0.15~1.43、0.09~0.36、0.03~1.12mg/g。
结论
本方法操作简便、快速、准确,适用于紫菀药材3种活性成分的定量测定。]]> 2014/12/22 14:11:04 2245true 2014/12/22 14:11:04 2244true 目的进行翻白草Potentilla discolor种质资源的遗传多样性研究。方法对12份翻白草种质进行ISSR分析。利用POPGENE 1.32软件分析遗传相似系数,UPGMA方法聚类,构建亲缘关系系统图。结果12条引物共得到128条扩增条带,其中有101条呈现多态性,占78.91%。遗传相似系数变化范围0.1792~0.6325。聚类结果显示翻白草种质亲缘关系与地理分布有一定相关性,可以看出来源于同一地区的部分翻白草种质聚在一起,呈现出一定的地域性分布规律。结论翻白草的遗传多样性水平较高,种质间的亲缘关系和地理位置有一定关系。]]> 2014/12/22 14:08:22 2243true 目的建立北柴胡的选优育优技术体系,规模化生产北柴胡优质种苗和种子。方法应用植物组织培养技术分别对种植于山西陵川、万荣及甘肃陇西、陕西商洛等8个地区的优质北柴胡进行快速繁殖;对种植于山西万荣的中柴1号北柴胡种子进行种皮损伤和植物激素处理,比较各种处理对种子萌发率的影响。结果附加6-BA 1.0mg/L和KT 0.2 mg/L的B₅培养基适合于各地北柴胡芽的快速增殖与生长;附加NAA 0.1 mg/L、IBA 0.5 mg/L和DSC 1.0 mg/L的1/2MS培养基对北柴胡试管苗的生根有良好的促进作用;北柴胡试管苗的年繁殖系数超过1×10⁸,移栽成活率达94%~97%。植物激素处理对北柴胡种子萌发无明显作用,打磨损伤处理种皮可使种子的萌发率提高20%,并且能大幅度缩短种子的萌发时间。结论植物组织培养技术是快速、大量繁殖优质北柴胡的有效手段;一定程度的种皮损伤可以促进北柴胡种子的萌发。]]> 2014/12/22 14:08:22 2242true 目的建立高效稳定的绞股蓝受体系统,为绞股蓝基因转化研究奠定基础。方法以五叶绞股蓝Gynostemma pentaphyllum叶片作为外植体,采用不同配比激素的MS培养基进行诱导培养获得丛生芽,进而生根获得再生植株。结果采用MS+6-BA 1.0 mg/L培养基时,绞股蓝叶片分化频率最高(40%),MS+6-BA1.0 mg/L适合绞股蓝丛生芽继代增殖,1/2 MS适宜诱导生根获得健全再生植株。结论为利用根癌农杆菌介导法进行绞股蓝基因转化建立了稳定的直接分化再生系统。]]> 2014/12/22 14:08:22 2241true 目的提纯复壮广西莪术种质资源,提高良种组培苗移栽成活率,方便组培苗生产的贮藏和管理。方法调节MS培养基中大量元素和蔗糖的量,使组培苗在试管内直接诱导广西莪术小根状茎的形成。结果培养基中大量元素和蔗糖的量是试管内直接诱导广西莪术小根状茎形成的重要影响因素。以1/2 MS和6%蔗糖结根状茎率最高,根状茎最粗,组培苗壮且根系发育良好,直接移栽的成活率最高。结论能够在试管内诱导广西莪术形成根状茎。]]> 2014/12/22 14:08:23 2240true 目的对鬼臼毒素的生物转化进行研究。方法利用掌叶大黄细胞悬浮系统和根培养系统进行生物转化。采用色谱技术和波谱手段对转化产物进行分离鉴定。结果加入鬼臼毒素对掌叶大黄细胞悬浮系统和根培养系统的pH值无明显影响;两种组培系统均能转化鬼臼毒素。在本实验条件下,细胞悬浮系统使73.8%的鬼臼毒素发生了转化,根培养系统中使56.3%的鬼臼毒素发生了转化。两种系统对鬼臼毒素的转化产物不同,前者只转化生成鬼臼苦素,后者转化生成表鬼臼毒素等多种化合物。结论掌叶大黄细胞悬浮系统和根培养系统均能有效转化鬼臼毒素。]]> 2014/12/22 14:08:23 2239true 目的建立何首乌、夜交藤药材指纹图谱分析方法,并依据指纹图谱对两种药材进行比较,为科学评价与有效控制何首乌、夜交藤药材质量提供新方法。方法何首乌和夜交藤分别用甲醇和醋酸乙酯超声处理,提取液用HPLC进行测定。HPLC法采用C18色谱柱,乙腈-0.1%磷酸梯度洗脱,检测波长分别为265和290 nm,体积流量1mL/min,柱温30℃。结果建立了何首乌、夜交藤药材HPLC指纹图谱,并对不同产地何首乌、夜交藤药材进行了相似度比较。测定结果显示不同产地药材存在较大差异,化学成分组成及质量分数存在一定差异。结论所建立的方法简便、可靠,可用于不同产地何首乌、夜交藤药材的指纹图谱测定和质量评价,为全面有效控制何首乌药材的内在质量提供了依据。]]> 2014/12/22 14:08:23 2238true 目的研究野生与人工栽培岩黄连中总生物碱及脱氢卡维丁量的差异。方法采用紫外分光光度法对药材中总生物碱进行定量测定,用高效液相色谱法测定岩黄连药材中脱氢卡维丁的量,并对测定方法进行了系统的方法学考察。结果人工栽培的岩黄连药材中总生物碱的量达到3.20%以上,脱氢卡维丁的量在0.80%以上。野生的岩黄连药材中总生物碱的量在0.75%左右,脱氢卡维丁的量均在0.20%左右。结论野生岩黄连药材中总生物碱及脱氢卡维丁的量比人工栽培的要低。]]> 2014/12/22 14:08:29 2237true 目的测定龙葵中澳洲茄碱的量以评价不同产地龙葵药材质量。方法采用Agilent Zorbax SB C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-1%磷酸溶液为流动相梯度洗脱,体积流量1.0 mL/min,柱温30℃,检测波长205 nm。结果6个不同地区龙葵茎叶中澳洲茄碱的平均量在0.5445~1.5049 mg/g;果实中澳洲茄碱的平均量在0.8555~3.4408 mg/g。连云港灌南地区龙葵茎叶和果实中澳洲茄碱的量最高,分别为1.5049、3.4408 mg/g;南京栖霞地区茎叶中量最低,为0.5445 mg/g,南京江宁地区果实中量最低,为0.8555 mg/g。结论同一时期、不同产地龙葵药材茎叶和果实中澳洲茄碱量差异较大。]]> 2014/12/22 14:08:31 2236true 2005年版一部。穿龙薯蓣有活血舒筋、消食利水、祛痰截疟的功效,用于治疗风湿性关节炎、腰腿疼痛、麻木、大骨节病、跌打损伤、闪腰岔气、慢性支气管炎、咳嗽气喘。]]> 2014/12/22 14:08:33 2235true 2014/12/22 14:08:36 2234true 目的将抗草甘膦突变基因(aroA-M12)转入半夏.获得草甘膦抗性植株。方法用携带植物表达载体pASM12的根癌农杆菌LBA4404对半夏进行叶盘法转化;在选择培养基中加入10 mg/L草甘膦进行筛选.获得草甘膦抗性的再生植株;对再生植株进行PCR检测和草甘膦抗性实验。结果PCR检测表明幼叶的转化频率达23%,叶柄的转化频率达33%;对PCR阳性植株进行草甘膦抗性实验,多数植株在不同程度上表现出对草甘膦的抗性。结论本实验建立了半夏的遗传转化方法及草甘膦筛选的转化体系。为培育抗除草剂的半夏新品种及草甘膦筛选体系在半夏基因工程中的应用奠定了基础。]]> 2014/12/22 13:54:27 2233true 目的建立罗布麻叶的HPLC指纹图谱。用以控制罗布麻叶的内在质量,并对罗布麻叶药材与其混淆品进行鉴别。方法采用HPLC梯度洗脱的方法建立指纹图谱,"计算机辅助相似度评价系统"软件进行数据处理.据此对不同种属的药材进行比较。结果建立的罗布麻HPLC指纹图谱方法的精密度、稳定性和重现性较好。罗布麻叶(红麻叶) HPLC指纹图谱共标定12个共有指纹峰,与白麻属样品图谱之间呈显著差异。可以依此鉴别。结论HPLC指纹图谱可以用作罗布麻叶药材的质量控制。]]> 2014/12/22 13:54:27 2232true 目的建立河北道地药材远志的HPLC-UV指纹图谱,获得对照图谱,并与不同产地远志药材指纹图谱相比较,为有效控制远志质量提供方法。方法采用HPLC—UV法得到了19批远志样品指纹图谱。色谱条件:Waters 1525高效液相色谱仪,C₁₈柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,乙腈-0.2%甲酸溶液为流动相进行梯度洗脱.检测波长316 nm,体积流量1.0 mL/min,柱温35℃。结果建立了河北省远志药材HPLC-UV指纹图谱共有模式,并对不同产地药材进行了相似度比较。结论本方法操作简便、快速、准确,为远志药材的鉴别和质量的全面控制提供了依据。]]> 2014/12/22 13:54:28 2231true 目的研究不同杀菌剂组合对人参叶片光合特性的影响。方法应用CI-340型光合作用测定系统,对施用新型药剂组合的人参上举斜立叶片、施用常规药剂组合的人参平展有药斑叶片和清洗后平展无药斑叶片进行光合速率日变化、光响应曲线和CO₂响应曲线测定。结果五年生人参叶片的净光合速率日变化呈双峰曲线,10:00出现第一个峰值。15:00出现第二个峰值。上举斜立叶片、平展无药斑叶片和平展有药斑叶片的光补偿点（LCP）分别为11.5、21.7、41.7 mol/（m²·s）,光饱和点（LSP）分别为1 008、961、954μmol/（m²·s）,CO₂补偿点（CCP）分别为239、240、300μmol/mol,CO₂饱和点（CSP）分别为1 260、1 289、1 300μmol/mol。结论上举斜立叶片的日光合产物高,对光和CO₂环境的适应性强,叶面上的药斑对人参光合作用有负作用。]]> 2014/12/22 13:54:28 2230true 目的调查收集全国川芎的种质资源,以进行川芎优良种质资源评价研究,为川芎良种选育打下基础。方法文献研究,到全国川芎主产地实地调查、访问,收集种质资源。结果对四川省内6个县市及省外6个省区.共20个川芎及芎藭类药材的主产区进行了种质资源的调查收集,获得了川芎不同居群的生态环境、栽培及生长特性、产销和使用情况等,并在川芎道地产地都江堰建立了种质资源保护圃。结论为川芎种质资源评价研究及川芎新品种选育打下了基础。]]> 2014/12/22 13:54:28 2229true 目的通过对黄芩不同生长发育期有效成分（黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素）量的研究.为黄芩适宜采收期的确定提供实验依据。方法采用RP-HPLC法进行测定。色谱柱为Diamonsil C₁₈（250 mm×4.6 mm,5μm）,以乙腈-水-甲酸（21:78:1）（A）和乙腈-水-甲酸（80:20:1）（B）为流动相进行梯度洗脱;检测波长280 nm;柱温30℃;体积流量1.0 mL/min。结果黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素的线性范围分别为0.281～16.830μg,0.033～1.980μg,0.008～0.465μg,平均回收率分别为101.53%（RSD=1.84%）,102.73%（RSD=5.05%）,98.67% （RSD=3.02%）。黄芩苷的量在萌发期最大,黄芩素和汉黄芩素的量在展叶期达到最高值,3者总量在枯黄期最大。结论明确了黄芩不同生长发育期黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素的量和总量的动态变化规律。]]> 2014/12/22 13:54:29 2228true 目的建立北豆根中粉防己碱和青藤碱的定量测定方法,为北豆根质量标准的研究提供科学依据。方法采用高效液相色谱法测定北豆根中粉防己碱和青藤碱的量。色谱条件为Diamonsil C₁₈柱（150 mm×4.6 mm.5μm）,测定粉防己碱采用流动相:甲醇-水-三乙胺（72:28:0.05）。检测波长:282 nm;测定青藤碱采用流动相:乙腈-水-三乙胺（21:79:0.05）,检测波长:262 nm。结果线性良好,粉防己碱和青藤碱的平均加样回收率分别为98.8%,101.5%;RSD分别为2.9%,2.0%。结论本方法精密度高,分离度良好,可用于测定北豆根药材中粉防己碱和青藤碱的量。]]> 2014/12/22 13:54:29 2227true 目的测定不同种及不同产地的石斛样品中鼓槌石斛素和鼓槌联苄的量,为石斛的资源开发和质量标准制订提供科学依据。方法采用HPLC法。色谱柱Shim-pack CLC-ODS柱,甲醇-水(60:40)为流动相,检测波长237 nm。结果测定了15个石斛样品中鼓槌石斛素和鼓槌联苄的量。结论这2种酚类成分在石斛中分布很不均匀。其中。含鼓槌石斛素量最高的为云南产的流苏石斛样品.其量为0.027%;含鼓槌联苄量最高的为贵州产的流苏石斛样品,为0.028%。]]> 2014/12/22 13:54:29 2226true 目的测定川产藏药材红毛五加不同药用部位和不同产地中紫丁香苷的量。方法采用Kromasil C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,以甲醇-水（20:80）为流动相,检测波长263 nm。结果紫丁香苷在0.010 9～1.305 6μg呈良好的线性关系,平均回收率为98.16%（n=5）。RSD为0.92%,用此条件.测得川产红毛五加不同部位紫丁香苷的量:根803.2μg/g.茎皮87.66μg/g,而叶和茎刺中的量极低;川产不同产地红毛五加茎皮中紫丁香苷的量普遍较低,其中有10个产地样品中未检测到,量最高的是阿坝州小金县大板村101.8μg/g。结论该方法简便、快速、准确,可作为红毛五加药材质量的检测手段之一;有关红毛五加根开发利用的报道少见,从紫丁香苷成分的角度考虑,建议以根入药最好,而且红毛五加根可以作为紫丁香苷提取物一个新来源。,]]> 2014/12/22 13:54:29 2225true Atractylodes lancea (Thunb.)DC.或北苍术A.chinensis(DC.) Koidz.的干燥根茎,具有燥湿健脾、祛风散寒、明目、解郁辟秽之功,用于脘腹胀满、泄泻、水肿、脚气痿跫、风湿痹痛、风寒感冒、夜盲、疟疾等。药理研究表明,苍术有抑制溃疡、利胆、抑制小肠蠕动等作用,还能保肝、降血糖、抗菌、抗病毒。]]> 2014/12/22 13:54:30 2224true 2015/1/6 15:11:09 2223true 2015/1/6 15:11:10 2222true 2015/1/6 15:11:10 2221true 2015/1/6 15:11:10 2220true 2015/1/6 15:11:10 2219true 2015/1/6 15:11:10 2218true 2015/1/6 15:11:10 2217true 2015/1/6 15:11:11 2216true 2015/1/6 15:11:11 2215true 8化学键合硅胶为固定相,甲醇-水-冰醋酸(83:17:0.1)为流动相,20℃柱温进行色谱等度分离,在362nm波长下进行液相色谱定量检测。结果藤黄酸的保留时间为28.5min,在35min即可完成一次分离分析过程。色谱峰形对称,与药材中其余内源性物质分离完全,定量准确。藤黄酸在13.13～420mg/L线性良好,回收率为96.5%～101.5%。结论建立了一种简便实用的高效液相色谱法用于测定藤黄酸的量。]]> 2015/1/6 15:11:11 2214true 2015/1/6 15:11:11 2213true 目的分析雌雄栝楼植株内含物组成及量的差异,为早期性别鉴定提供依据。方法测定雌雄植株叶片生理生化指标并进行差异显著性分析,采用HPLC法分析雌雄植株叶片化学成分差异。结果雄株的光合色素,可溶性蛋白质的量,SOD、POD活性,DNA浓度高于雌株,其中光合色素的量、POD活性差异达显著性水平。雌株的MDA、可溶性糖、紫外吸收物的量高于雄株,其中紫外吸收物的量差异达显著性水平。HPLC分析结果显示雌雄植株叶片的出峰数目、时间、峰高等参数明显不同。结论栝楼雌雄植株中内含物的组成及量存在一定差异,紫外吸收物及HPLC特征峰可望作为性别鉴定的指标。]]> 2015/1/6 15:11:42 2212true 目的探讨影响青葙SRAP(sequence-related amplified polymorphism)扩增的各种因素,建立并优化青葙SRAP反应体系,为分子水平鉴定青葙子及其伪品,探讨青葙不同种质间的亲缘关系奠定基础。方法用CTAB法提取青葙DAN,设计Taq酶浓度(0.02、0.04、0.06U/μL)、dNTP浓度(0.10、0.20、0.30mmol/L)、Primer浓度(0.15、0.30、0.45μmol/L)3水平3因素试验和Mg²⁺浓度(0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0mmol/L)8水平单因素试验。在25μL体系中加入模板DNA20ng,对体系进行优化,用琼脂糖进行检测。结果建立了适合青葙的SRAP体系,在25μL体系中,DNA为20ng,Taq酶浓度为0.04U/μL,dNTP浓度为0.30mmol/L,Primer浓度为0.30μmol/L,Mg²⁺浓度为2.5mmol/L,优化后的体系目标条带增多,且比较稳定,重现性好,得到了较好的扩增效果。结论本研究建立的反应体系适合青葙SRAP的研究。为从分子水平鉴定青葙子正品与伪品以及鉴定青葙不同种质资源奠定了基础。]]> 2015/1/6 15:11:42 2211true 目的研究当归正茬、迎茬、重茬和三茬4个不同茬口对根际土壤主要微生物类群、产量及麻口病出成率的影响。方法对不同茬口根际土壤采用稀释平板法进行微生物培养,细菌用牛肉膏蛋白胨琼脂培养基,真菌用马丁氏培养基,放线菌用改良高氏1号培养基。结果迎茬、重茬和三茬根际土壤中的细菌数量分别比正茬降低了15.76%、30.67%和34.24%,真菌分别比正茬增加了24.73%、119.28%和135.77%,微生物多样性指数分别比正茬降低了47.90%、78.84%和80.63%,当归总产量分别比正茬下降了10.59%、29.52%和57.85%,麻口病出成率分别是正茬的1.37、2.52和4.12倍。结论随着连作年限增加,土壤可培养微生物总数减少,其中细菌和放线菌数量减少,真菌数量明显增加,对连作表现出较高的敏感性,微生物多样性指数明显减小,当归一等归出成率和总产量明显下降,而三等及等外当归出成率及麻口病出成率显著增加。]]> 2015/1/6 15:11:42 2210true 目的以PEG6000溶液模拟干旱胁迫条件,研究黄芩种子的萌发和幼苗生长对干旱胁迫的响应。方法分别用10%和20%PEG6000处理黄芩种子,对种子的含水量、萌发率、萌发势、萌发指数、幼苗鲜质量及各器官的长度进行测量。结果PEG6000处理对黄芩种子的含水量、萌发率和幼苗的生长均产生影响。结论10%PEG6000浸种4h、20%PEG6000浸种1h可以提高黄芩种子的萌发率,可以选择20%PEG6000处理黄芩种子8h作为模拟干旱条件,用于幼苗黄芩抗旱材料的选育工作。]]> 2015/1/6 15:11:43 2209true 目的建立夏枯草HPLC指纹图谱分析方法。方法采用高效液相色谱法,色谱柱为Betasil C₁₈(250mm×4.6mm,5μm)柱,以乙腈-0.1%磷酸梯度洗脱,0～50min时乙腈10%→25%,50～60min时乙腈25%→32%;体积流量为0.7mL/min;检测波长为210nm,柱温25℃。结果建立了夏枯草的指纹图谱,确定了16个共有峰,各夏枯草样品指纹图谱与对照指纹图谱相似度均在0.95以上,可以用于夏枯草药材的定性鉴别。结论此方法简单、准确、重现性好,为夏枯草的质量控制标准提供了有效的方法。]]> 2015/1/6 15:11:43 2208true 目的建立陈皮的HPLC指纹图谱分析色谱条件,并应用于市场陈皮的鉴定。方法采用Zorbax Esclipe XDB C₁₈色谱柱;流动相为甲醇-2%醋酸溶液,梯度洗脱;检测波长为283nm;柱温为25℃;体积流量为1.0mL/min。以广东新会产广陈皮(茶枝柑)指纹图谱为基础建立共有模式。结果陈皮共标示出7个共有峰。以广陈皮共有模式为对照,13批广陈皮相似度达0.996～1.000,而13批市场陈皮的相似度为0.964～0.989。结论方法准确可靠,重现性好,以广陈皮共有模式可鉴定市场陈皮是否为广陈皮,为广陈皮质量控制与鉴定提供了参考。]]> 2015/1/6 15:11:43 2207true 目的应用近红外光谱(NIRS)技术鉴别红参和高丽参。方法收集中国红参、韩国高丽参及朝鲜高丽参的样品,采用近红外积分球漫反射法测定光谱图,用判别分析法对其进行定性鉴别。结果近红外光谱法可正确鉴别中国红参和高丽红参。结论该方法快速、准确,可运用于高丽参药材的鉴别。]]> 2015/1/6 15:11:43 2206true 目的建立HPLC法测定半枝莲药材中二萜类生物碱scutebarbatine B的方法。方法色谱柱为YMCJapanJ′sphere ODS-H80(150mm×4.6mm,5μm),以甲醇-水(70:30)为流动相,体积流量1.0mL/min,检测波长264nm。结果二萜类生物碱scutebarbatine B的线性范围是0.0212～0.212μg(r=0.9992);平均回收率为100.69%;RSD为1.82%。结论该定量分析方法简便快速,稳定可靠,重现性好,回收率高,可用于半枝莲药材的质量控制与检验。]]> 2015/1/6 15:11:43 2205true 目的用HPLC法测定番石榴叶中番石榴苷的量。方法选用YMC-JMC₁₈色谱柱(150mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-0.2%磷酸溶液(36:64),检测波长为257nm,柱温为40℃。结果番石榴苷在0.787～11.805μg与峰面积具有良好的线性关系(r=0.9999),平均回收率为99.02%,RSD为1.21%。结论建立的定量方法可以用于药材的质量控制。]]> 2015/1/6 15:11:43 2204true 目的建立石仙桃药材中天麻素及天麻苷元的测定方法,测定新鲜石仙桃不同药用部位及石仙桃炮制品中天麻素和天麻苷元的量。方法采用Hypersil C₁₈色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),乙腈-0.05%磷酸溶液(3:97)为流动相,检测波长为220nm。结果不同药用部位中所含的量相差较大;天麻素、天麻苷元质量浓度与峰面积均呈良好的线性关系;平均回收率分别为99.61%(n=6)、97.17%(n=6)。结论本法操作简便、准确、具有良好的重现性,为石仙桃药材的合理应用及质量控制奠定基础。]]> 2015/1/6 15:11:44 2203true 目的测定北柴胡各器官中总黄酮的量,并揭示不同物候期茎叶中的总黄酮动态变化规律。方法采用可见光分光光度法。结果北柴胡中的黄酮类物质主要积累在其茎叶和生殖器官中,根中的量很少。在茎叶的发育过程中,盛花期的总黄酮量最高,座果时的量有所下降,果实成熟时的量又开始上升,在枯萎前期时,两者中的总黄酮量又恢复到一个比较高的水平。结论对北柴胡中黄酮类物质的开发利用应重点选择叶片,可以在第一年的北柴胡植株枯萎前期采收其地上部分,从而达到综合利用此种药用植物的目的。]]> 2015/1/6 15:11:44 2202true 目的建立测定结香茎皮中两种香豆素有效成分伞型花内酯和西瑞香素的方法。方法用甲醇超声提取,反相高效液相色谱法测定药材中各香豆素成分的量。以乙腈-水(0～10min,乙腈35%;10～30min,乙腈35%～65%)为流动相进行梯度洗脱,检测波长325nm,体积流量0.6mL/min。结果各香豆素成分在测定范围内线性关系良好。结论该方法准确、快速,适用于结香药材的质量控制。]]> 2015/1/6 15:11:44 2201true 目的通过基因工程育种获得抗病转基因白术株系。方法在已建立的高效白术茎尖再生体系基础上,利用基因枪介导法转化水稻几丁质酶基因(RCH10)和苜蓿β-1,3-葡聚糖酶基因(AGLU),对所获得的转基因株系进行PCR分析、GUS染色以及抗病性检测。结果获得了25个PCR检测阳性的转基因株系,其中5个株系对白术立枯病抗性增强。结论利用转基因技术获得抗病新株系,可以缩短抗病品种育种年限,同时拓宽了白术抗病育种的基因库。]]> 2015/1/6 15:12:14 2200true 目的建立宁夏枸杞黄酮类化合物高效液相色谱指纹图谱,为鉴别不同来源的宁夏枸杞提供依据。方法以10个宁夏不同产地的宁夏枸杞主栽品种"宁杞号"样品建立枸杞黄酮类化合物指纹图谱共有模式,采用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统"软件进行数据处理,对15个不同来源的枸杞样品进行了分析。结果本研究建立的方法重现性较好;16个特征峰构成了宁夏枸杞黄酮类化合物色谱指纹图谱的特征;不同产地、不同品种的枸杞样品黄酮类化合物组成与量存在差异。结论所建立的枸杞黄酮类化合物的HPLC指纹图谱对不同产地、不同品种枸杞的鉴别具有参考价值。]]> 2015/1/6 15:12:14 2199true 目的建立天山雪莲药材的HPLC指纹图谱,为雪莲药材的快速质量控制提供依据。方法以绿原酸、紫丁香苷、芦丁、木犀草素、芹菜素5种对照品为对照,采用HPLC法,测定了10批次不同产地天山雪莲的色谱图,确立参照指纹图谱。色谱条件:色谱柱DiamonsilTMC18(250mm×4.6mm,5μm),甲醇-水(0.8%醋酸,0.2%三乙胺,pH3.5~4.0)线性梯度洗脱,柱温30℃,检测波长270nm,记录时间30min,体积流量1.0mL/min。结果标示出天山雪莲的13个特征指纹峰。结论该方法准确、重现性好,为天山雪莲的指纹图谱质量控制提供了参考。]]> 2015/1/6 15:12:14 2198true 目的探讨黄檗野生种群更新困难的原因,为其种子的萌发机制研究提供参考依据。方法采用甲醇、乙醚、蒸馏水分别浸提黄檗果肉和种子,以白菜、小麦和黄檗作为受试植物,检测种子发芽及幼苗生长情况。结果黄檗果肉和种子的浸提液分别降低了白菜、小麦和黄檗种子的发芽率,对幼苗生长也有不同程度的抑制作用。抑制作用随浓度的增高而增强,以乙醚提取液抑制作用最强,水提液抑制作用不明显。将黄檗种子分离为胚、胚乳和子叶3部分用蒸馏水提取,生物测定发现子叶水提液的抑制活性最强。结论黄檗果肉和种子中均存在着活性较强的抑制物质,能够明显抑制自身及其他植物的生长,抑制物质主要存在于子叶中。]]> 2015/1/6 15:12:15 2197true 目的研究干燥方法和提取温度对板蓝根、大青叶有效成分量的影响,为确定板蓝根、大青叶规范化生产的干燥技术参数提供理论依据。方法采用晒干、阴干和不同温度的烘干方法干燥板蓝根、大青叶,采用不同温度水浴提取有效成分,HPLC法测定靛蓝、靛玉红的量。结果60℃烘干板蓝根、大青叶有效成分损失最少,以60℃烘干为标准,高温(90℃以上)干燥使板蓝根有效成分损失40%~60%、大青叶有效成分损失30%—60%,阴干也降低了板蓝根、大青叶中的有效成分的量;采用索氏提取法、以氯仿为提取溶剂、水浴温度为80~85℃时对靛蓝、靛玉红的提取率最高,其次是90、75℃,95℃的提取率最低。结论50~80℃烘干和晒干是板蓝根、大青叶适宜的干燥方法,阴干和高温烘干的方法不可取。采用索氏提取方法、以氯仿为提取溶剂时,80~85℃水浴温度较为适宜。]]> 2015/1/6 15:12:15 2196true 目的考察冬虫夏草药材的质量。方法采用高效液相色谱法测定14批不同产地冬虫夏草药材中腺苷和尿苷的量;采用原子吸收分光光度法测定砷、汞、铜、铅和镉的残留量。结果各批药材的腺苷和尿苷的量变化范围较大,其中尿苷为37~632μg/g,腺苷为53~284μg/g;重金属检测结果显示:被测的14批药材中,汞、铜、镉及铅的残留量均较低,但13批药材的砷残留量超过药用植物及制剂绿色行业标准。结论有必要确定合理的冬虫夏草药材质量控制指标,并加强对出口冬虫夏草药材重金属残留的检测。]]> 2015/1/6 15:12:15 2195true 目的测定经寡聚半乳糖醛酸(oligogalacturonic acid,OGA)诱导的云南红豆杉Taxus yunnanensis细胞悬浮培养物中10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ(10-deacetyl baccatin Ⅲ,10-DAB Ⅲ)的量。方法采用不同质量浓度的OGA处理云南红豆杉悬浮培养细胞,通过RP-HPLC法测定细胞和培养液中的10-DAB Ⅲ的量,甲醇-乙腈-水(2∶3∶8)为流动相,检测波长为232nm。结果 10-DAB Ⅲ在0.05~2.06μg与峰面积线性关系良好,回归方程为Y=89.146X+27.067(R₂=0.9996),细胞内、外样品平均回收率分别为94.96%、100.72%,RSD分别为0.44%、0.81%。OGA(40μg/mL)可显著提高云南红豆杉细胞中10-DAB Ⅲ的量。结论 10-DAB Ⅲ的RP-HPLC方法可靠简便、重现性好、灵敏度高,具有较高的实用价值,可用于对红豆杉细胞诱导培养研究中的分析,OGA是10-DAB Ⅲ细胞生产的有效诱导子。]]> 2015/1/6 15:12:16 2194true 目的建立葎草叶总黄酮的测定方法,并考察总黄酮的量随葎草不同采摘时间的动态变化。方法通过单因素试验、正交试验,考察乙醇体积分数、料液比、提取时间对提取液中总黄酮量的影响,确定最佳提取条件,然后在该条件下对不同时间采收的草叶进行总黄酮提取并进行定量测定。结果所考察的因素中,葎草总黄酮的超声提取工艺各因素影响程度为:乙醇体积分数>提取时间>料液比;最佳水平搭配为:A₂B₃C₃。不同时间采收的葎草中总黄酮的量有明显变化。结论草中黄酮类成分提取的最佳工艺为75%乙醇,料液比1∶60,超声提取50min。葎草总黄酮的量与采摘时间密切相关,以8月采收量最高。]]> 2015/1/6 15:12:16 2193true 目的探讨罗汉果花粉直感现象及亲本对果实品质的影响效应。方法采用不完全双列杂交试验,测定其果实内外品质性状进行方差分析。结果4个雌株无性品系间果形指数和内含物量存在很明显差异。同一雌株无性品系授以7种不同雄株花粉时,各授粉组合间果实横径和果形指数差异未达显著水平;内含物甜苷、水浸出物和总糖量则发生一定变化,但未存在明显差异。结论4个雌株无性品系均不存在明显花粉果实直感现象,果实品质主要取决于自身遗传特性,未受父本严重影响。]]> 2015/1/6 15:12:16 2192true Evodia lepta(Spr.)Merr.是芸香科吴茱萸属植物,又称三丫苦、三桠苦、三枝枪、小黄散、鸡骨树、三叉虎,广泛分布于我国东北至西南各地,是岭南常用中草药,始载于《岭南采药录》。]]> 2015/1/6 15:12:16 2191true Viscum coloratum(Komar.)Nakai的干燥带叶茎枝,具有祛风湿,补肝肾,强筋骨,安胎功能,主要用于风湿痹痛,腰膝酸软,胎动不安。]]> 2015/1/6 15:12:17 2190true 2015/1/6 15:12:17 2189true 目的 应用随机扩增多态性DNA(random amplified polymorphic DNA,RAPD)标记技术对广东产5个类群的栽培巴戟天进行遗传多样性研究。方法 应用15种引物对64个个体进行检测,应用Popgen32软件分析群体的遗传多样性。结果 共得到224条带,其中多态位点112个,多态百分率为50.00%。种群内多态位点百分率在37.05%～53.13%,平均为45.86%。Shannon指数和Nei指数均反映出巴戟天各类群遗传多样性有一定的变化。Shannon指数为0.287 6,各类群的Shannon指数在0.103 3～0.236 2,Nei指数为0.175 6,各类群的Nei指数在0.074 5～0.154 0。结论 目前栽培巴戟天居群间有一定的分化,并产生了多种农家类型,其中小叶巴戟天(POP2)遗传多样性明显高于其他类型,这些可能是导致目前栽培巴戟天质量产生变异的主要原因。]]> 2014/12/22 15:28:39 2188true 目的 研究人工栽培条件下水分和氮素对绞股蓝Gynostemma pentaphyllum生物量和皂苷量的影响。方法 对野生绞股蓝扦插苗进行水分和氮素控制实验。结果 在干旱和缺氮逆境下,整株植株生物量减少,但由于β-糖苷酶活性降低,导致单位干质量叶片中绞股蓝皂苷的量增加。由于干旱使生物量减少的速率大于对皂苷积累的促进作用,表现为干旱使总皂苷产量降低,与之相反,缺氮对生物量减少的速率小于对皂苷积累的促进作用,但是氮素浓度过低也不利于皂苷积累。结论 这意味着在人工种植的情况下,必须保证充足的水分供应和适度的氮肥供应才有利于绞股蓝生长,保持较高的生物量和总皂苷产量。]]> 2014/12/22 15:28:39 2187true 目的 研究离体培养时瘤菌根菌属(Epulorhiza sp.)真菌AR-15和AR-18对福建金线莲生长的影响。方法 采用琼脂作支持物,考察真菌对福建金线莲鲜质量和增高的影响;采用蛭石作支持物,考察真菌和营养液对金线莲鲜质量和增高的影响。结果 在琼脂培养基上,与对照相比,接菌AR-15和AR-18可使金线莲苗的增高分别提高97%和81.5%(P<0.01)。在蛭石基质上,真菌AR-15和蒸馏水组合极显著促进金线莲的增质量和苗的增高(P<0.01),分别是不接菌的3.26倍和1.51倍;真菌AR-15和营养液组合极显著促进金线莲增质量1.41倍(P<0.01),显著促进金线莲增高1.17倍(P<0.05)。真菌AR-18和蒸馏水组合极显著促进金线莲鲜质量的增加和苗的增高(P<0.01),分别是不接菌的3.86倍和1.45倍;真菌AR-18和营养液组合极显著促进金线莲增质量1.96倍(P<0.01),显著促进金线莲增高1.25倍(P<0.05)。结论 在离体培养条件下,真菌AR-15和AR-18可促进福建金线莲的生长;在人工栽培金线莲的过程中,使用真菌AR-15和AR-18为菌肥,有可能取得较好的效果。]]> 2014/12/22 15:28:39 2186true 目的 通过对芍药种子内源抑制物质的研究,探讨芍药种子休眠的原因。方法 采用生物测定和离体培养的方法 对芍药种子种皮、胚乳中抑制物的活性进行研究。结果 证实了芍药种子胚乳、种皮中含有一定活性的抑制物质,且两者对白菜幼根生长的抑制活性均高于对白菜种子萌发的抑制活性;胚乳乙醚萃取液纸色谱Rf值为0.5区段对白菜幼根生长抑制活性最强(根长相对百分率36.36%);接种在不同的培养基上的离体胚均能生根,但未加GA3培养基上的胚上胚轴不能伸长生长,说明离体胚也存在上胚轴休眠现象,或存在抑制物质。结论 芍药种子中的内源抑制物质是导致其休眠的主要原因。]]> 2014/12/22 15:28:40 2185true 目的 建立关木通HPLC-DAD-ESI/MS指纹图谱分析方法 ,可用于关木通质量的评价,为进一步开展关木通的肾毒性代谢研究提供药材质量依据。方法 用75%甲醇对不同产地的关木通样品进行提取,经HPLC-DAD-ESI/MS联用技术分析,建立指纹图谱,确定共有指纹峰,并选用两种相似度计算方法 进行比较。结果 关木通中含有30个特征指标成分,初步建立了30个共有峰为特征指纹信息的HPLC-DAD-ESI/MS指纹图谱。24批被测样品的指纹图谱整体相似度在0.871～0.998,各产地关木通之间相似性良好。结论 方法 准确可靠,重现性好,可应用于关木通的品质评价和质量控制。]]> 2014/12/22 15:28:40 2184true 目的 鲜品肉苁蓉渣和汁有效成分量比较及其药用研究初探。方法 采用硫酸-苯酚法测定肉苁蓉多糖的量;采用大孔树脂-紫外分光光度法测定了苯乙醇苷的量;采用《中国药典》肉苁蓉项下HPLC方法 ,测定了松果菊苷和毛蕊花糖苷的量。结果 以肉苁蓉多糖、苯乙醇总苷、松果菊苷和毛蕊花糖苷主要有效成分的量为综合评价指标,鲜品肉苁蓉渣中除多糖的量与汁中相差不明显,其余有效成分的量均明显高于其汁,最大相差依次为8、785、230倍。鲜品肉苁蓉渣部分经冷冻后多糖的量显著升高,苯乙醇总苷的量明显下降。结论 鲜品肉苁蓉渣部分与其汁相比药用性更高,为鲜品肉苁蓉科学用药及其保健食品开发提供依据。同时,鲜品肉苁蓉渣部分经冷冻后有效成分的量明显改变,为鲜品肉苁蓉的储存提供了参考。]]> 2014/12/22 15:28:40 2183true 目的 为确定水红花子最佳采收期,提高药材质量提供依据。方法 采用HPLC法对10个不同采收期水红花子中的花旗松素进行测定。色谱条件:Agilent Zorbax-C18色谱柱(200 mm×4.6 mm,5μm);甲醇-0.1%磷酸水(40∶60)为流动相;体积流量1.0 mL/min;柱温25℃;检测波长290 nm。结果 花旗松素线性范围为0.247～2.47μg(r=0.999 8),平均回收率为99.2%,RSD为1.83%。水红花子中花旗松素的量在10月中旬最高。结论 10月中旬为水红花子的最佳采收期,该测定方法 简便快捷、精密度高、准确性好。]]> 2014/12/22 15:28:40 2182true 目的 测定千斤拔的不同种、不同药用部位中β-谷甾醇的量,以期评价不同种的药材质量,为寻找新药源和新的药用部位提供实验数据。方法 采用HPLC-ELSD法。色谱柱为Kromasil C18(250 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇为流动相,体积流量1.0 mL/min;柱温25℃;蒸发光散射检测器检测参数为漂移管温度35℃,载气(N2)体积流量2 mL/min。结果 该方法 简便、快速、准确,β-谷甾醇在0.65～3.25μg呈良好的线性关系,平均回收率为99.4%(n=9),RSD为0.87%。球穗千斤拔与《中国药典》收载种蔓性千斤拔、大叶千斤拔比较,其根、茎和叶中β-谷甾醇的量低很多,蔓性千斤拔茎、叶中β-谷甾醇的量远高于其根的量,大叶千斤拔茎、叶中β-谷甾醇的量也相近或略高于其根中的量。结论 球穗千斤拔不宜替代蔓性千斤拔、大叶千斤拔入药;蔓性千斤拔和大叶千斤拔的茎、叶可以与其根同等入药。]]> 2014/12/22 15:28:40 2181true 目的 分离纯化绵马贯众素,建立RP-HPLC法测定绵马贯众中绵马贯众素的方法 。方法 采用ODS柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为异丙醇-甲醇-氯仿-水-磷酸(102∶20∶12∶24∶0.1),检测波长283 nm。结果 该方法 的线性范围为0.4～1.6μg,r=0.995(n=5),平均回收率101.23%,RSD=2.11%(n=5)。结论 绵马贯众素质量分数达到99.13%,可作为对照品。绵马贯众素定量测定方法 简便,准确,重现性好,可用于该药材及其制剂中该成分的定量测定。]]> 2014/12/22 15:28:40 2180true 目的 建立板蓝根药材抗病毒活性成分落叶松脂素-4,4′-二-O-β-D-二葡萄糖苷(直铁线莲宁B,clemas-tanin B)的定量测定方法 。方法 采用高效液相色谱法,色谱柱为Lichrospher-C18柱,流动相:甲醇-乙腈-水(24∶1∶75),体积流量:1.0 mL/min;紫外检测波长:280 nm。结果 测定了板蓝根主要产地药材中落叶松脂素-4,4′-二-O-β-D-二葡萄糖苷的量,平均质量分数为0.041%,加样回收率为98.8%,RSD为0.60%。结论 本方法 简便、灵敏、结果 可靠,可作为板蓝根药材质量控制的定量方法 。]]> 2014/12/22 15:28:41 2179true 目的 建立了用RP-HPLC对赤芍中没食子酸、儿茶素、芍药苷、芍药内酯苷、苯甲酸同时定量的方法 ,并对不同产地赤芍药材进行考察。方法 高效液相色谱法,色谱柱为Waters Sunfire columns C18(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-乙腈-0.1%磷酸梯度洗脱;检测波长采用变波长检测;柱温为40℃;进样量为10μL。同时测定了赤芍中没食子酸、儿茶素、芍药苷、芍药内酯苷、苯甲酸的量。结果 没食子酸在0.013～0.506μg线性关系良好(r=0.999 6)、儿茶素在0.025～0.993 6μg线性关系良好(r=0.999 7)、芍药苷在0.200～8.017μg线性关系良好(r=0.999 6)、芍药内酯苷在0.030～1.184μg线性关系良好(r=0.999 6)、苯甲酸在0.037～1.485μg线性关系良好(r=0.999 6)。平均回收率没食子酸为98.08%,RSD为1.65%;儿茶素为101.80%,RSD为3.07%;芍药内酯苷为99.18%,RSD为3.25%;芍药苷为95.95%,RSD为1.39%;苯甲酸为101.85%,RSD为1.35%。结论 本方法 测定了不同产地、不同批号赤芍样品中5种化学成分的量,该方法 分离度好,快速,简便,重现性好。]]> 2014/12/22 15:28:41 2178true 目的 分析半夏多倍体复合体DNA甲基化状态的变化(甲基化水平和甲基化差异模式)。方法 应用甲基化敏感扩增多态性(methylation sensitive amplified polymorphism,MSAP)技术,采用34对引物进行选择性扩增。结果 扩增共得到7708条带,其中5636条带为甲基化多态性带在半夏7倍、8倍、9倍、10倍体值株间DNA甲基化水平变化不大。总扩增位点甲基化水平在54%～58%,全甲基化率为24.1%～24.3%,高倍性植株甲基化程序相应比较高。除甲基化水平稍有变化外,半夏不同倍性株间的DNA甲基化模式也形式各异,检测到的带型分为两大类(和型)。其中,不同倍性间DNA甲基化状态保持不变的位点占52.5%,归为型;少部分检测位点(占47.5%,归为型)的DNA甲基化模式在不同倍性间存在显著差异。结论 半夏多倍体复合体各倍性植株间存在大量的胞嘧啶甲基化变异且整体甲基化水平较高。]]> 2014/12/22 15:12:29 2177true 目的 为进行药用植物次生代谢产物的生物合成基因调控研究,构建了三年生何首乌叶cDNA文库。方法 以何首乌成熟叶片为材料提取其总RNA;纯化出mRNA;反转录合成双链cDNA;钝化cDNA末端;连接上EcoR接头;经Xho酶切后,使用Sepharose CL-2B凝胶介质滤过,收集400bp以上的片段与Uni-ZAP XR载体连接,经包装蛋白包装成cDNA文库。Uni-ZAPXR载体可以在辅助噬菌体ExAssist helper phage的共感染下,快速释放出pBluescript SK-噬菌粒,经转染E.coliSOLR后,铺于氨苄青霉素抗性平板,分别利用PCR和双酶切的方法鉴定插入片段的大小。结果 测定该初始文库的滴度为1.07×10⁶pfu/mL,含有5.4×10⁵个重组子,插入片断长度为0.5～2.0kb;扩增文库的重组子为4.25×10¹¹个,重组率为98.5%。结论 经检测所构建的文库库容量满足基因筛选要求,为进行中药材相关功能基因调控研究奠定基础。]]> 2014/12/22 15:12:29 2176true 目的 以杭白菊子叶和下胚轴为外植体进行组织培养,寻找适宜诱导菊花子叶和下胚轴愈伤组织发生和分化的激素配比。方法 采用不同的激素配比MS培养基对杭白菊子叶和下胚轴分别培养。结果 试验设计的培养基均能诱导产生愈伤组织,但不同的激素配比对芽诱导分化的影响不同。其中MS+IAA0.3mg/L+6-BA12mg/L诱导菊花子叶和下胚轴得到的愈伤组织粗大且致密;MS+IAA0.3mg/L+6-BA4mg/L适宜子叶不定芽的诱导,诱导率为67.5%;MS+KT2mg/L+NAA0.2mg/L适宜下胚轴不定芽的诱导,诱导率为62.5%;生根培养采用1/2MS+NAA0.1mg/L,7d后生根率为100%。结论 本实验建立了以杭白菊子叶和下胚轴为外植体的高频快繁体系,不定芽诱导频率高且生长健壮。]]> 2014/12/22 15:12:29 2175true 目的 建立叶下珠愈伤组织培养方法。方法 采用组织培养方法,比较不同外植体、蔗糖、植物生长物质及其配比对叶下珠愈伤组织诱导的影响。结果 茎段的诱导率最高,为55.56%,叶片诱导不出愈伤组织。6-BA是叶下珠愈伤组织形成的主要影响因素,2,4-D、NAA、蔗糖次之。结论 叶下珠愈伤组织诱导及继代的适宜培养基为MS+2,4-D0.5mg/L+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L+蔗糖10g/L。]]> 2014/12/22 15:12:29 2174true 目的 利用高效毛细管电泳技术建立空心莲子草药材的指纹图谱。方法 采用60cm×75μm毛细管柱,以50mmol/L硼砂溶液-50mmol/L磷酸盐溶液为缓冲液,运行电压为20kV,检测波长220nm,柱温25℃。结果 建立的指纹图谱中共有18个共有峰,且方法学考察符合规定的标准。结论 该法准确简便,可作为控制空心莲子草药材内在质量的有效手段。]]> 2014/12/22 15:12:29 2173true 目的 筛选出适于无菌短枝快繁的培养基及研究试管苗移栽驯化技术。方法 以MS为基本培养基添加不同质量浓度的BA和NAA,对黄芪的不同外植体进行组织快繁研究。结果 一年生植株的带芽茎段在MS+BA0.1mg/L培养基上短枝长势最好;一年生植株的新生芽和两年生植株的带芽茎段,在MS+BA0.8mg/L+NAA0.1mg/L培养基上均能产生丛生芽。将短枝接种于1/2MS+0.1%活性炭或1/2MS+NAA1.5mg/L+0.1%活性炭的培养基上,经诱导产生有效根。小苗经沙培驯化后,移栽成活。结论 利用蒙古黄芪的无菌短枝快繁优良种苗是一种经济、快速、可行的育苗方式。]]> 2014/12/22 15:12:29 2172true 目的 研究不同产地和不同采收季节对美花石斛药材多糖的影响,为确定美花石斛药材的最佳产地和采收时间提供依据。方法 采用苯酚-浓硫酸比色法比较不同产地和不同采收时间美花石斛药材的多糖量,并对结果进行方差分析。结果 不同产地和生长年限美花石斛多糖量差异较大,贵州则戎产的美花石斛药材多糖量最高,为14.9%;不同采收时期美花石斛药材的多糖量2年生均高于3年生,4月时多糖量最低,从4月开始量逐渐增高,其中9月量达到最高。结论 以多糖量为指标来判断药材质量的好坏,贵州则戎所产的美花石斛药材质量较好,2年生药材的多糖量较高,采收期安排在9月至次年1月份期间比较合适,这一结果与传统石斛药材秋冬季节采收相符,并为美花石斛药材的采收和质量评价提供了科学依据。]]> 2014/12/22 15:12:30 2171true 目的 考察不同产地短瓣金莲花药材中3种黄酮苷的量。方法 采用HPLC同时测定短瓣金莲花中槲皮素-3-O-新橙皮糖苷、荭草苷及牡荆苷的量。结果 不同产地短瓣金莲花药材中槲皮素-3-O-新橙皮糖苷和荭草苷的量有较大差异。结论 所建立的分析方法准确可靠,可用于短瓣金莲花药材质量控制。本研究为短瓣金莲花的资源利用及质量控制提供了一定的科学依据。]]> 2014/12/22 15:12:30 2170true 目的 测定金银忍冬和黄花忍冬花及花蕾中绿原酸的量,为开发利用其植物资源提供科学依据。方法 采用反相HPLC法测定绿原酸的量。结果 金银忍冬、黄花忍冬花及花蕾中均含有绿原酸,花的量最高,花蕾其次,量均高于《中国药典》金银花药材标准。结论 金银忍冬和黄花忍冬花及花蕾具有较高的开发利用价值。]]> 2014/12/22 15:12:30 2169true 目的 建立板蓝根中抗病毒有效成分表告依春的HPLC测定方法,测定不同产地板蓝根中表告依春。方法 采用反相高效液相色谱法,色谱柱为ZORBAXSB-C₁₈(150mm×4.6mm,5μm);流动相为乙腈-(4.0mL磷酸+0.3mL三乙胺+500mL水)8.5:91.5;体积流量为0.7mL/min;检测波长为245nm,柱温为30℃。结果 测得6批板蓝根中表告依春的量为0.66～4.2mg/g,其中以河北安国产板蓝根药材中含表告依春的量最高,安徽阜阳和黑龙江大庆产的次之,其他几个产地的量相对较低;表告依春在0.0204～0.3060μg与峰面积线性关系良好(r=0.9998),平均加样回收率为98.99%,RSD为1.31%。结论 该方法准确、可靠,可用于板蓝根药材的测定;不同产地板蓝根中表告依春的量差异较大。]]> 2014/12/22 15:12:30 2168true 2005年版一部前胡为伞形科植物白花前胡Peucedanum praerup-torum Dumn.的干燥根及根茎,有散风清热、降气化痰的功效,用于风热咳嗽痰多,痰热喘满,咯痰黄稠^[1]。]]> 2014/12/22 15:12:30 2167true 2014/12/22 15:05:00 2166true 2014/12/22 15:05:00 2165true 2014/12/22 15:05:00 2164true 2014/12/22 15:05:01 2163true 2014/12/22 15:05:01 2162true 2014/12/22 15:05:01 2161true 2014/12/22 15:05:01 2160true 2014/12/22 15:05:01 2159true 2014/12/22 15:05:01 2158true 2014/12/22 15:05:01 2157true 目的研究不同施水处理下金荞麦的形态和生物量分配。方法采用盆栽试验方法,测定了不同施水处理下金荞麦形态指标、生物量积累及二者分配情况。结果金荞麦植株主茎长、主茎节间长、总叶数、新叶数、一级分枝数随施水量减少呈现递减趋势,而主茎直径的变化呈现出中度施水>高度施水>低度施水的趋势;金荞麦总生物量以及各构件生物量随着施水量减少呈现递减趋势。与对照相比,高施水量处理减少了金荞麦植株主茎和叶片的生物置配置,增加了植株其他构件生物量的分配;低施水量减少了金荞麦植株主茎、分枝茎和叶片的生物量配置,增加了根生物量配置。结论不同施水量显著影响金荞麦的生长、生长量积累及其分配;在金荞麦栽培管理过程中,应当适当增加施水量。]]> 2015/1/6 14:25:19 2156true 目的研究生物因子(枯草芽孢杆菌)对凤仙花离体繁殖的影响。方法采用不同浓度枯草芽孢杆菌(0,5×104、5×105、5×106、5×107、5×108个/mL)处理凤仙花后,以其叶和茎为外植体,接种于MS+0.5mg/LNAA+0.5mg/L6-BA培养基上进行愈伤组织诱导和植株再生。结果无论是叶还是茎作外植体,经5×105个/mL浓度的菌液处理后愈伤组织诱导率最高(叶:95.3%,茎:13.3%),与对照差异极显著。经5×105个/mL浓度的菌液处理后的幼苗生长速度也最快,50d便达到了移栽要求。结论适当浓度的枯草芽孢杆菌处理有利于凤仙花的离体繁殖。]]> 2015/1/6 14:25:19 2155true 目的以黄独为试材,研究不同因素对黄独茎尖培养的影响,以期找到适合黄独茎尖分化成苗的培养基和脱毒检测方法。方法采用植物组织培养的方法进行茎尖培养,采用症状学法、指示植物法和RT-PCR法对茎尖脱毒植株进行病毒检测。结果黄独茎尖的最佳消毒方式是先用70%酒精消毒30s,再用0.1%HgCl2消毒12min;在37℃中热处理7d后再切离0.5mm茎尖效果较佳。茎尖再生芽增殖的最佳培养基是MS+KT2mg/L+NAA0.5mg/L;黄独茎尖再生芽的最适生根培养基为1/2MS+NAA0.5mg/L;黄独脱毒苗最好的移栽基质为珍珠岩-蛭石(2:1);RT-PCR法是检测黄独马铃薯Y病毒(PVY)感染的主要方法,通过病毒学检测,其平均脱毒率为86.5%。结论首次建立了黄独茎尖脱毒培养的体系,为黄独脱毒苗的快速繁殖及工厂化生产奠定了技术基础。]]> 2015/1/6 14:25:20 2154true 目的以PEG6000溶液处理望江南种子,研究PEG对望江南种子萌发的影响。方法分别用5%和10%PGE6000处理望江南种子,对种子发芽率、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)活性和脂质过氧化产物丙二醛(MDA)的量进行测定。结果与同期对照相比,5%PEG6000浸种5h,提高SOD活性和POD活性,降低脂质过氧化产物MDA的量,减少自由基积累,减轻浸种吸胀对膜系统的损伤。结论5%PEG浸种5h提高望江南种子的发芽率。]]> 2015/1/6 14:25:20 2153true 目的建立枳实药材HPLC指纹图谱分析方法。方法采用Diamonsil C18柱(250mm×4.6mm,5μm),以乙腈-0.01%磷酸二氢钠水溶液梯度洗脱,测定了36批枳实药材的指纹图谱。应用相似度分析、聚类分析和主成分分析,对枳实药材进行分类,建立枳实药材指纹图谱的共有模式,并应用主成分分析对共有模式进行研究。结果在选定的色谱条件下,得到两类枳实药材HPLC指纹图谱;根据相似度分析、聚类分析和主成分分析的结果,将36批药材分为2类,分别建立指纹图谱。结论应用本方法评价枳实药材的质量是可行的。]]> 2015/1/6 14:25:20 2152true 目的研究不同光照强度处理对川贝母生长发育、生理指标和鳞茎产量及总生物碱量等的影响,为川贝母的合理栽培生产提供一定理论依据。方法用人工气候箱控制光强度,观察不同光照强度(3000、6000、9000和12000lx)下川贝母的生长发育变化,检测其叶片叶绿素、可溶性糖、丙二醛和脯氨酸量,并测定鳞茎产量以及总生物碱的量。结果6000lx贝母生长发育较好,干物质积累较多,总生物碱量也较高。光照强度过高或过低,干物质量积累量均大幅度降低。不同光照强度下可溶性糖、丙二醛、脯氨酸量差异均不显著。结论6000lx的光照强度较适宜川贝母的生长。]]> 2015/1/6 14:25:20 2151true 目的对陕西商洛地区栽培黄芩根部黄酮类成分的积累进行了动态分析,从质量和产量兼顾的观点出发确定该药材的最佳采收期。方法采用反相高效液相色谱法,测定了不同生长年限和同一生长年限不同采收时间栽培黄芩根部3种主要黄酮类成分(黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素)的量。结果不同生长年限及采收时期黄芩样品的产量及其有效成分的量均在第二年10月下旬达到最高。结论陕西商洛栽培黄芩的最佳采收时期应为栽培后第二年10月和11月。]]> 2015/1/6 14:25:20 2150true 目的研究生长期巫山淫羊藿根、茎、叶中5种黄酮类成分朝藿定C、双藿苷A、淫羊藿苷、淫羊藿属苷A和淫羊藿属苷C的量,揭示几种活性成分的动态积累规律。方法采用RP-HPLC方法,以美国WatersSunfireTM-C18为色谱柱(带预柱),检测波长270nm,流动相为乙腈-水,梯度洗脱,体积流量为1mL/min。结果在20min内分离测定了5种异戊烯基黄酮,得到了这5种异戊烯基黄酮在生长期巫山淫羊藿不同部位中的分布积累规律。发现巫山淫羊藿不同部位中双藿苷A的量分别为:根1.090%～3.661%,茎0.001%～0.033%,叶0.095%～0.217%;淫羊藿属苷A的量分别为:根0.177%～0.971%,茎0.010%～0.089%,叶0.089%～0.323%;朝藿定C的量分别为:根0.223%～0.748%,茎0.024%～0.147%,叶0.905%～2.228%;淫羊藿苷的量分别为:根0.009%～0.128%,茎0.003%～0.044%,叶0.258%～0.929%;淫羊藿属苷C的量分别为:根0.080%～1.857%,茎0.002%～0.022%,叶0.004%～0.058%。结论巫山淫羊藿叶中淫羊藿苷除4、5、7月份外,其余月份的量都低于0.5%,而朝藿定C的量平均在1.586%。巫山淫羊藿叶在其生长的任何月份都是朝藿定C的量远大于淫羊藿苷的量,积累高峰期有3个,朝藿定C是巫山淫羊藿叶中的主要成分。巫山淫羊藿根在其生长的任何月份都是双藿苷A的量远大于朝藿定C的量,质量分数平均在2.763%,双藿苷A为巫山淫羊藿根中的主要成分。]]> 2015/1/6 14:25:20 2149true 目的通过定量分析比较野生与栽培黄芪药材中毛蕊异黄酮苷的质量分数差异,为评价不同来源的黄芪药材的质量差异提供科学可靠的依据。方法采用高效液相色谱法测定10批野生与12批栽培黄芪药材中毛蕊异黄酮苷的量。色谱条件:ZORBAXSB-C18色谱柱(150mm×4.6mm,3.5μm);流动相:乙腈-0.1%磷酸,梯度洗脱;体积流量:1mL/min;检测波长:220nm;柱温:250℃。结果毛蕊异黄酮苷的工作曲线为Y=14739X-5.89,r=0.9992,线性范围为0.010～0.015μg,加样回收率为104.7%,RSD=0.78%(n=6)。10批野生与12批栽培黄芪药材中毛蕊异黄酮苷的平均质量分数分别为0.21mg/g和0.24mg/g。结论本方法测定结果准确、重现性较好,可作为评价野生与栽培黄芪药材质量的方法之一。]]> 2015/1/6 14:25:20 2148true 目的研究红凉伞中化学成分岩白菜素的积累动态。方法采用高效液相色谱法测定红凉伞中岩白菜素的量,色谱柱:HypersilODS(250mm×4.0mm,5μm),流动相为甲醇-水(25:75),体积流量:1.0mL/min,检测波长:275nm。回归方程为Y=1406.0X+7.21961,r=0.9999,线性范围:1.00～12.01μg,平均回收率为101.17%,RSD1.67%(n=5)。结果红凉伞中岩白菜素的量在不同生长时期、不同部位有明显的变化规律。不同部位岩白菜素的量由高到低的顺序为:根、叶、茎、侧枝、果丙、花、果壳、种子;一年生长期内在5月份红凉伞根、茎、叶中岩白菜素的量最高,以后逐渐下降;不同生长年限红凉伞中岩白菜素的量存在较大的差异。结论红凉伞中岩白菜素的积累动态将为研究红凉伞生物特性的形成及红凉伞的规范化种植提供科学依据。]]> 2015/1/6 14:25:21 2147true 目的通过分析北京西部山区黄芩主要有效成分在海拔梯度上的变化规律,揭示生态因子对黄芩有效成分量的影响。方法于2007年8~9月在北京西部山地采集了800~1 800 m 8个海拔上85株黄芩样本,经HPLC分析得到黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素以及千层纸素A的量;同时,实验测定了垂直梯度上各采样地的土壤养分指标,并获取了各样地相应的气候条件。结果只有黄芩苷和汉黄芩苷的量与海拔呈极显著正相关;垂直梯度上土壤养分对黄芩主要有效成分的量影响不明显,决定山地所生长黄芩质量的主要因素不是土壤养分,而是气候条件;黄芩生境的年均温和年均降水量与黄芩的黄芩苷及汉黄芩苷的量呈极显著负相关,年均太阳辐射量与这两种成分呈极显著正相关。结论年均温在2~6℃的生境,有利于提高黄芩有效成分的量,年均温在3~4℃的生境,生长的黄芩质量很有可能达到最佳,与黄芩的传统道地产区吻合。]]> 2015/1/6 14:32:55 2146true 目的通过对9份益母草种质资源的AFLP分析,探求各种质间的遗传多样性。方法采用扩增片段长度多态性(AFLP)标记,在DNA水平上进行遗传多样性研究,筛选了32对选择性扩增引物,将扩增出的条带作为原始矩阵,用NTSYS-PC软件计算并分析了益母草种质间的相似度,构建了遗传系统进化树。结果SDS法提取的益母草基因组DNA质量较佳,能够满足AFLP分析的要求;从32对选择性扩增引物中,筛选出10对多态性较强、带型较好、分辨率较高的组合;构建了益母草AFLP指纹图谱,将9个益母草种质全部区分开来;通过构建进化树,把9个种质分成2类。结论益母草种质资源有丰富的遗传多样性,某些形态特征差异和基因型存在相关性。]]> 2015/1/6 14:32:55 2145true 目的通过复壮已退化的蜜环菌,恢复其促进天麻生长及天麻素积累的作用。方法将相同来源的蜜环菌Arrmillearia mellea野生菌种、该野生菌种连续无性繁殖退化的后代菌种以及退化后复壮的菌种接种到同一品种的天麻Gastrodia elata上进行栽培试验,测定天麻的生物产量和天麻素质量分数。结果野生菌种组与退化菌种组相比较、复壮菌种组与退化菌种组相比较在天麻产量、天麻素质量分数上有显著性差异(P<0.01)。结论采用诱导子实体方法可以使退化的蜜环菌复壮,其促进天麻生长、天麻素积累的作用也得以恢复。]]> 2015/1/6 14:32:56 2144true 目的以来源广泛、原植物药用成分量可测定的刺五加叶柄为外植体,研究刺五加体细胞胚胎发生情况,为实现药用成分高产刺五加的快速繁殖奠定基础。方法以3年生植株萌发15 d以内的刺五加复叶叶柄为外植体,考察2,4-D和BA对刺五加体细胞胚胎发生的影响。结果28 d培养后,2,4-D 1.5 mg/L+BA 1.0 mg/L处理的叶柄外植体中71.4%直接产生或经由愈伤组织间接产生了8.5个体胚。两种产生方式均可在诱导培养基中进行,但间接发生比例较少。转入相同或降低2,4-D质量浓度的培养基后,体胚渐次发育成熟。同时新的体胚也在逐渐产生,经由间接途径产生的体胚所占比例也随之上升。结论刺五加可以通过萌发15 d以内的复叶叶柄外植体实现体细胞胚胎发生,体胚诱导率取决于2,4-D和BA的质量浓度。]]> 2015/1/6 14:32:56 2143true 目的建立款冬花药材中槲皮素和山柰素的定量测定方法,测定不同来源的药材中槲皮素和山柰素的量,评价产地、生长方式及炮制对款冬花中槲皮素和山柰素量的影响;并建立款冬花中黄酮醇苷类成分指纹图谱,为款冬花质量控制的制定提供依据。方法采用HPLC建立款冬花药材中槲皮素和山柰素的定量测定方法,色谱条件:Diamonsil C18(200 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-水(77∶23),检测波长:365 nm。采用HPLC法建立款冬花药材中黄酮醇苷类成分指纹图谱,色谱条件:ODS-BP C18(200 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈-0.1%H3PO4水溶液梯度洗脱;检测波长为365 nm。结果不同产地,炮制品与生品之间,其槲皮素和山柰素的量差异较大,不同生长方式的药材之间无明显差异;不同产地及批次的款冬花药材的指纹图谱相似度较高。结论本研究建立的槲皮素和山柰素的定量测定方法简便、准确、重现性好,可用于款冬花药材中黄酮醇苷类成分的质量控制;不同来源的款冬花药材中的槲皮素和山柰素的量有明显差异;所建立的黄酮醇苷类成分的指纹图谱方法操作性强、重现性好,可作为款冬花黄酮醇苷类成分指纹图谱研究的基础。]]> 2015/1/6 14:32:57 2142true 目的建立太子参HPLC指纹图谱共有模式,并进行方法学考察。方法采用HPLC分析方法,色谱柱为Kromasil C18柱;流动相:乙腈-水梯度洗脱;时间为70 min。体积流量:1.0 mL/min;柱温:25℃;检测波长:203 nm;进样体积:10μL。结果标示出21个共有峰,构成太子参指纹图谱。结论该方法准确可靠,所得指纹图谱共有模式可作为太子参药材质量控制的依据。]]> 2015/1/6 14:32:58 2141true 目的对怀地黄脱毒后品质进行评价。方法以怀地黄"85-5"脱毒试管苗和未脱毒试管苗的块茎为材料,对其梓醇及营养成分的量进行分析。结果脱毒试管苗块茎的梓醇量高于未脱毒试管苗块茎,但不同的脱毒株系间梓醇量存在较大差异,其中梓醇量最高的株系可达6.43%,较对照增加33.13%;脱毒试管苗块茎中,粗脂肪、粗蛋白质的量均得到提高。结论怀地黄脱毒后品质得到显著改善。]]> 2015/1/6 14:32:58 2140true 目的提高盾叶薯蓣药材的品质。方法采用高效液相色谱法,对组织培养条件下诱导获得的盾叶薯蓣四倍体株系试管苗薯蓣皂苷元的量和部分株系一年生田间苗薯蓣皂苷元的量进行了分析,并对部分株系一年生田间苗农艺性状进行了鉴定。结果经诱导获得的四倍体株系试管苗与对照相比薯蓣皂苷元的量有较大差异;而且四倍体株系试管苗与一年生苗薯蓣皂苷元的量有较强的相关性,大部分四倍体株系表现出典型的多倍体性状。结论在组织培养的基础上,利用多倍体育种来改善盾叶薯蓣的品质是可行的。]]> 2015/1/6 14:32:59 2139true 目的探索不同栽培类型菊茎中黄酮类成分在不同生长期量的变化。方法采用高效液相色谱法,分别测定不同栽培类型不同生长期菊茎叶中木犀草素、金合欢素-7-O-β-葡萄糖苷、木犀草素-7-O-β-葡萄糖苷和金合欢素-7-O-(6″-O-鼠李糖)-β-D-葡萄糖苷的量。结果不同栽培类型菊茎叶中黄酮类成分的量差别较大,随着生长期的改变菊茎叶中黄酮类成分的量也有较大的变化。结论采用高效液相色谱法测定菊茎叶中黄酮类成分的量,方法简单、可靠。本研究结果为测定菊茎叶中黄酮类成分的量,菊采花后茎叶的综合利用提供了一定的依据。]]> 2015/1/6 14:32:59 2138true 目的建立HPLC法测定短柱肖菝葜药材中丁香酸葡萄糖苷量的方法。方法采用C18色谱柱。乙腈-0.5%冰醋酸溶液(5∶95)为流动相;体积流量1 mL/min;柱温25℃;检测波长255 nm。结果丁香酸葡萄糖苷在0.049 4~0.592 8μg与峰面积积分值呈良好的线性关系。平均回收率为100.07%;RSD为1.74%。结论该法简便、准确,可作为短柱肖菝葜药材的定量测定方法。]]> 2015/1/6 14:33:00 2137true 目的建立苦木药材中4-甲氧基-5-羟基-铁屎米酮、4,5-二甲氧基-铁屎米酮HPLC测定方法,为苦木质量分析和评价提供依据。方法用Agilent Hypersil C18色谱柱,以乙腈-0.1%磷酸(35∶65)为流动相,210 nm为检测波长。结果4-甲氧基-5-羟基-铁屎米酮、4,5-二甲氧基-铁屎米酮与其他生物碱获得较好分离,4-甲氧基-5-羟基-铁屎米酮质量浓度在15.6~156μg/mL与峰面积呈良好的线性关系(r=0.999 7),加样回收率为98.17%,RSD=1.98%;4,5-二甲氧基-铁屎米酮在3.45~55.2μg/mL与峰面积呈良好的线性关系(r=0.999 8),加样回收率为98.40%,RSD=1.90%。结论方法简便、稳定、可靠,为控制和评价苦木质量提供了科学依据。]]> 2015/1/6 14:33:00 2136true 目的比较中国不同地区绞股蓝的nrDNAITS碱基序列的差异,以期分析绞股蓝的地理分布与ITS基因型的相关性,为我国不同地区绞股蓝的鉴别提供分子依据。方法PCR克隆测序,MegAlign(DNASTAR)软件对序列进行对位排列,PAUP4.0b10软件进行系统发育分析,构建最大简约树。结果绞股蓝ITS区长度为658～659bp,变异位点为8.48%,信息位点为2.72%。不同地区的样品在碱基的量、信息位点的碱基位置和遗传距离等方面存在一些差异。系统发育分析表明ITS基因型与绞股蓝的地理分布具有一定的相关性,但也有部分不一致,可能主要是因为绞股蓝种内复杂的倍性。结论ITS序列可作为中国不同地区绞股蓝的一种良好的分子标记,而要确定不同地区的绞股蓝合理的亲缘关系还需要结合其他方面的证据。]]> 2015/1/6 14:34:06 2135true 目的利用高山红景天组培苗叶片分离得到原生质体,经培养后获得再生植株。方法研究了外植体前期预处理、外植体大小、酶液配比、酶液中甘露醇浓度等影响原生质分离的相关因素,确定最优分离条件。结果用于原生质体分离的外植体无需黑暗预培养便可进行原生质体分离,外植体叶片长度大于1.5cm为宜。获得原生质体的酶液组成为:1.0%纤维素酶Onzuka R-10+0.5%果胶酶Macerozyme R-10+10mmol/L CaCl₂.2H₂O+0.1%MES+0.7mmol/L KH₂PO₄+0.5mol/L甘露醇,在25℃条件下酶解4h,原生质体最高产量为39.43×10⁶个/g鲜质量,原生质体活力为78.6%。原生质体培养基为1/2MS+1mg/L2,4-D+0.5mg/L ZT+0.5mol/L甘露醇+500mg/L水解酪蛋白。浅层培养40d时形成小愈伤组织。愈伤组织在MS+1mg/L6-BA+0.1mg/L NAA诱导产生不定芽,不定芽转入1/2MS基本培养基可获完整再生植株。结论本研究为高山红景天多倍体育种提供了科学依据。]]> 2015/1/6 14:34:07 2134true 目的建立并优化夏枯草ISSR-PCR反应体系和扩增程序,为探讨夏枯草种质间遗传多样性奠定基础。方法采用单因子试验和正交设计方法,研究Mg²⁺、dNTP、引物、TaqDNA聚合酶、模板DNA、退火温度及循环次数对PCR扩增的影响。结果夏枯草ISSR-PCR的最佳反应体系为:在20μL的反应体系中含模板DNA30ng,Mg²⁺2.2mmol/L、dNTP175μmol/L、引物0.75μmol/L、TaqDNA聚合酶1.0U。在此基础上,从92条引物中筛选出18条扩增稳定、多态性丰富的ISSR引物,并通过梯度PCR试验,确定引物最佳退火温度。结论采用单因子试验和正交设计方法可以快速建立ISSR-PCR反应体系,经过24份夏枯草种质检验,证明该体系稳定可靠,可用于夏枯草遗传分析。]]> 2015/1/6 14:34:07 2133true 目的对民间常用中药材金樱根原植物来源进行考证。方法查考古本草对金樱子原植物和根的记载及附图,野外调查金樱根药材的原植物来源,通过产地收集金樱根药材原植物标本,核对药材原植物标本和咨询分类专家,并对采集的样品进行TLC分析。结果古本草记载的有关金樱根药材的植物来源为金樱子Rosa laevigata一个种。目前市场上商品金樱根药材原植物来源是蔷薇科蔷薇属多种植物;通过对收集的金樱根药材进行TLC分析表明不同植物来源的金樱根TLC有差异,但具有较为相似的主斑点。结论能更好地为药厂金樱根药材收购提供依据,保证金樱根药材的质量。]]> 2015/1/6 14:34:07 2132true 目的对远志主产区山西、陕西和河北的不同产地栽培远志的药材品质进行比较。方法采用高效液相色谱法和分光光度法对主产区不同产地栽培远志药材中的皂苷元和多糖量进行测定。结果多重比较分析结果表明,主产区不同产地远志药材中的皂苷元和多糖量差异显著,各地远志药材的质量存在较大差异。从皂苷元和多糖的量综合分析,山西闻喜、新绛的量都处于较高水平,而平遥和运城两地的皂苷元和多糖的量都处于较低水平。结论主产区不同产地的远志药材皂苷元和多糖的量差异显著。]]> 2015/1/6 14:34:08 2131true 目的测定不同母株年龄及不同部位灰毡毛忍冬叶和枝中绿原酸和木犀草苷的量。方法采用HPLC-PDA测定灰毡毛忍冬中绿原酸与木犀草苷的量,应用Excel和SPSS软件进行数据分析。结果不同母株年龄的样品中,叶和枝中绿原酸及木犀草苷的量随着年龄没有明显的变化规律,上部叶的绿原酸量都高于中部和下部叶,而上部、中部、下部叶中木犀草苷的量没有明显的规律性;嫩叶绿原酸和木犀草苷的量明显高于老叶;不同个体中,叶中绿原酸的量在0.15%～3.67%,木犀草苷的量在0.056%～0.386%,枝中绿原酸的量0.09%～1.57%,木犀草苷的量在0.003%～0.051%,叶和枝的绿原酸及木犀草苷的量都有显著差异(P<0.05)。结论重庆地区灰毡毛忍冬中的绿原酸和木犀草苷的量呈规律性变化,这对后续的品种选育具有指导作用。]]> 2015/1/6 14:34:08 2130true 目的建立一种测定茯苓中猪苓酸C和去氢土莫酸的方法,并比较不同产地茯苓中猪苓酸C和去氢土莫酸量的差异。方法方法应用HPLC法测定猪苓酸C、去氢土莫酸的量,色谱柱为Alltima-C₁₈(250mm×4.6mm,5μm);流动相为乙腈-水-磷酸(70∶29.85∶0.15);体积流量为1mL/min;检测波长为244nm;进样量为20μL;柱温为30℃。结果测得8个产地茯苓中猪苓酸C、去氢土莫酸的量分别为0.1886～0.5756、0.1137～0.2167mg/g,其中以浙江产茯苓药材中猪苓酸C、去氢土莫酸量最高,四川次之,其他几个产地的量相对较低;猪苓酸C定量测定的线性范围为0.1792～2.2400μg(r²=0.9999),平均加样回收率为98.88%,RSD为1.77%;去氢土莫酸测定的线性范围为0.1372～1.7150(r²=1),平均加样回收率为97.76%,RSD为0.62%。结论所建立的色谱方法可以简便、准确测定茯苓中猪苓酸C、去氢土莫酸的量,重现性好;各产地茯苓中的猪苓酸C、去氢土莫酸的量差别较大,有必要建立猪苓酸C、去氢土莫酸的定量控制方法。]]> 2015/1/6 14:34:08 2129true 目的建立青天葵中鼠李柠檬素与鼠李秦素的定量测定方法。方法运用HPLC法测定,色谱柱为Inert-sil ODS-3 C₁₈(250mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-0.4%磷酸水溶液(63∶37),体积流量:1.0mL/min,检测波长:368nm,柱温:40℃。结果鼠李柠檬素在0.2~0.7μg线性关系良好(r=0.9999),平均回收率为100.04%,RSD为1.35%(n=6)。鼠李秦素在2.8~9.8μg线性关系良好(r=0.9999),平均回收率为100.26%,RSD为0.78%(n=6)。结论本方法简便、快速、准确,可作为青天葵药材的质量控制方法。]]> 2015/1/6 14:34:08 2128true 目的 进行药用植物桃儿七Sinopodophyllum hexandrum 的遗传多样性研究,为桃儿七资源的保护和开发利用提供分子遗传理论基础。方法 对6个桃儿七居群进行DALP 分析,利用PopGene 1.31软件分析遗传多样性相关数据,UPGMA 方法聚类,结合Treeview 软件生成树状图。结果 筛选5对引物组合,扩增共产生150条DNA 片段,其中104条谱带具有遗传多态性,占69.33%,平均每组引物扩增所得多态条带为20.8,6个居群平均多态百分率为14.22%。6居群总的观察等位基因数Na 为1.6933,平均1.1422;总的有效等位基因数Ne为1.4171,平均1.0838;基因多样性指数H 为0.2443,平均0.0488;总的Shannon 多样性指数I 为0.3643,平均0.0730;居群总的基因多样性Ht 为0.2443,居群内基因多样性Hs 为0.0487。基因分化系数Gst 为0.8005,即遗传变异有80.05%发生在居群间,19.95%发生在居群内,居群每代迁移数Nm 为0.1246。结论 桃儿七居群间存在较大的遗传分化,基因流受到阻碍,这与桃儿七的繁育系统和生存环境紧密相关。]]> 2015/1/6 14:34:50 2127true 目的 分离和鉴定见血封喉Antiaris toxicaria 根韧皮部中的内生真菌,并检测其抑菌活性。方法 以金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌methicillin-resistant Staphylococcus aureus(MRSA)和白色念珠菌Candida albicans 作为指示菌,采用杯碟法对内生真菌发酵上清液进行抑菌试验。结果 从见血封喉根的韧皮部中分离出6株内生真菌,经形态鉴定分属于聚端孢霉属(Trichothecium LK.ex Fr.)、枝顶孢霉属(Acremonium LK.ex Fr.)和丝核菌属(Rhizoctonia DC.ex Fr.)。其中内生真菌J 6的发酵上清液对MR-SA 有抑菌活性,抑菌圈直径为18mm。结论 首次对见血封喉内生真菌进行了研究,内生真菌J 6对MRSA 有明显的抑菌活性,其抑菌活性成分值得进一步研究。]]> 2015/1/6 14:34:50 2126true 目的 探讨施肥对宽叶羌活产量及品质的影响,为优质高产栽培提供理论依据。方法 通过N 和P 的不同配方施肥进行大田试验,根据《中国药典》中的测定方法,对宽叶羌活产量、浸出物的量和挥发油的量进行测定。结果 不同的施肥配方对宽叶羌活产量、浸出物的量和挥发油的量都有很大影响,其中处理N₂P₂最高,较对照(CK)分别增加了43.33%、17.95%、43.48%。施肥量的不同对单株也有一定的影响,在根质量和根粗方面,也均以处理N₂P₂较好,各处理与对照之间在根粗方面均达到了显著性差异。结论 氮肥和磷肥的施用量及配比对宽叶羌活产量及品质有较大的影响,但是不合适的施肥会降低其的产量和品质。]]> 2015/1/6 14:34:50 2125true 目的 研究黄芩植株光合特性及其生理生态影响因子,为确定合理栽培措施提供参考。方法 利用CIR-AS-1便携式光合作用测定仪测定日中不同时段、不同光子通量密度(PPFD)下的净光合速率(Pn)及部分生理生态因子变化。采用灰色关联分析确定黄芩植株Pn 与生态因子间的关联度。结果 黄芩植株不同部位叶片Pn 为中部叶片>基部叶片>顶部叶片,光饱和点为1302Lmol/(m²·s),光补偿点为101.5Lmol/(m²·s);日Pn 变化呈双峰曲线,有典型的光合"午休"现象;Pn 与气孔导度(Gs)密切相关(r=0.88,P<0.05)。结论 PPFD 和空气湿度是影响黄芩Pn 的主要生态因子。]]> 2015/1/6 14:34:51 2124true 目的 采用HPLC 法对广东土牛膝进行指纹图谱研究,为广东土牛膝药材质量控制提供依据。方法 实验采用Kromasil C₁₈柱(250mm×4.6mm,5μm),以乙腈-水为流动相梯度洗脱,体积流量1.0mL/min,柱温25℃,检测波长230nm。结果 建立广东土牛膝药材HPLC 指纹图谱,确定13个共有峰,确定其相对保留时间和相对峰面积。结论 在选定的条件下所建立的指纹图谱为广东土牛膝药材质量控制提供依据。]]> 2015/1/6 14:34:51 2123true 目的 为制订重楼重金属元素及有害元素限量标准提供一定参考,同时为其合理用药和规范化栽培基地的选择提供依据。方法 用火焰原子吸收光谱法测定Ca、Mg、Fe、Mn、Cu和Zn,用石墨炉原子吸收光谱法测定Mo、Pb、Cd和Cr。结果 所有样品中Ca、Mg和Fe的量较高,Zn、Mn、Cu、Pb、Cr、Mo和Cd的量次之。火焰法测定Ca、Mg、Fe、Mn、Cu和Zn的加样回收率为99.0%-103.6%,石墨炉法测定Mo、Pb、Cd和Cr的加样回收率为99.9%-101.8%,精密度均小于2.60%。结论 该方法操作简单,准确度高,数据结果可靠,可作为川产重楼中无机元素定量方法。]]> 2015/1/6 14:34:51 2122true 目的 进行猪苓质量标准研究,解决猪苓药材评价标准不规范、质量差异大、栽培猪苓得不到合理应用和野生资源濒危问题。方法 采用高效液相色谱法进行麦角甾醇、麦角甾-4,6,8(14),22-四烯-3-酮定量测定,结合多糖的紫外分光光度法的测定,建立以猪苓3种化学成分为指标的质量评价标准。结果 采用猪苓3种化学成分为指标的质量评价方法,考察了不同地区猪苓商品药材、栽培和野生猪苓的质量,提出了猪苓资源合理应用的建议。结论 采用麦角甾醇、麦角甾-4,6,8(14),22-四烯-3-酮和多糖3种成分为指标的质量评价方法,可以系统、全面地对不同来源的猪苓进行质量控制,为规范猪苓药材质量评价标准,提高栽培猪苓药材质量,保护野生资源提供科学方法。]]> 2015/1/6 14:34:51 2121true 目的 建立同时测定地黄中葡萄糖、半乳糖和蜜二糖的RP-HPLC 方法,为地黄药材的质量控制提供新的依据。方法 地黄药材以水超声提取,再用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)衍生化后,采用Diamonsil C₁₈柱(150mm×4.6mm,5μm)分离,流动相为乙腈和100mmol/L醋酸铵水溶液(pH 5.5)进行梯度洗脱,体积流量1.0mL/min,检测波长为245nm,柱温为23.5℃,以内标法定量。结果 葡萄糖、半乳糖和蜜二糖分别在90-900μg/mL(r=0.9993)、90-900μg/mL(r=0.9990)和27-270μg/mL(r=0.9990)线性关系良好;3种糖的平均回收率均>98.7%(n=9),RSD <3.3%。结论 该方法灵敏度高、分离效果好,可用于地黄药材的质量控制。]]> 2015/1/6 14:34:52 2120true 目的 建立同时测定蜂房药材中没食子酸、对羟基苯甲酸和原儿茶酸的方法。方法 采用HPLC 法,梯度洗脱。色谱柱为Kromasil ODS-C₁₈(250mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-水(三氟乙酸调pH至5),体积流量1.0mL/min,柱温30℃,检测波长254nm。结果 没食子酸、对羟基苯甲酸和原儿茶酸质量浓度与峰面积均呈良好的线性关系,平均回收率分别为98.9%(RSD为1.01%)、98.4%(RSD为1.18%)、97.3%(RSD为1.18)。结论 该方法准确、重现性好、专属性强,可为蜂房质量标准的控制提供依据。]]> 2015/1/6 14:34:52 2119true 目的 建立红毛五加药材中刺五加苷E 的测定方法。方法 采用Hypersil ODS2色谱柱;流动相:乙腈-0.3%磷酸二氢钠水溶液梯度洗脱系统(磷酸调节pH值为3.5);体积流量:1.0mL/min;柱温:35℃;检测波长为207nm。结果 刺五加苷E 的线性范围为0.142-1.133μg,平均回收率为101.73%,RSD 小于2%。结论 该方法简便、准确、重现性好,可为红毛五加的质量控制提供参考。]]> 2015/1/6 14:34:52 2118true 目的 建立测定赶黄草中槲皮苷、槲皮素、乔松素-7-O-葡萄糖苷等黄酮类成分的分析方法。方法 用HPLC 法;色谱柱为Luna-C₁₈柱;流动相为乙腈-0.1%磷酸水,梯度洗脱;检测波长267nm;体积流量0.8mL/min。结果 槲皮苷、槲皮素、乔松素-7-O-葡萄糖苷获得良好分离,在10.8-216.0、10.4-208.0、10.4-207.0μg/mL与峰面积积分值线性关系良好;重现性试验RSD 分别为0.19%、0.19%、0.12%;加样回收率分别为100.17%、100.06%、99.87%。结论 本方法简便快速,精密度、分离度良好,为赶黄草及其制剂质量标准的制定提供了可供借鉴的方法。]]> 2015/1/6 14:34:52 2117true 目的 采用反相高效液相色谱法测定天台乌药中乌药醚内酯。方法 色谱柱为Symmetry C₁₈柱(250mm×4.6mm,5.0μm);流动相为乙腈-水(57∶43);体积流量1mL/min;检测波长235nm。结果 该方法下乌药醚内酯线性范围为0.051-2.55μg,平均回收率为99.96%。结论 本法简便、经济,结果准确,可用于天台乌药的质量控制。]]> 2015/1/6 14:34:52 2116true 目的研究施肥和覆盖地膜等农艺措施对福田河菊花产量与品质的影响,以期为福田河菊花的规范化栽培提供指导.方法采用田间试验方法,测定不同农艺措施下菊花的产量,用比色法测定菊花中总黄酮,用HPLC法测定绿原酸.结果偏施氮肥时,菊花产量和品质均较低;将有机肥和无机肥料(氮、磷、钾、硼、锌等)配合施用时,菊花产量、品质与经济效益均大幅提高.高氮配方的肥料可显著提高菊花产量,但降低了其品质;而高钾配方的肥料可显著提高菊花中总黄酮与绿原酸的量,且菊花产量也较高.采用覆盖地膜栽培时,可促进菊花花期提前,并显著提高菊花前期花产量与总产量,从而也提高了种植菊花的经济效益.结论在福田河菊花生产上,应采用覆盖地膜栽培,并应施用高钾配方的有机-无机复混专用肥.]]> 2015/1/6 14:35:49 2115true 目的建立一种基于氢核磁共振-模式识别的不同产地麦冬鉴别新方法.方法以¹H-NMR技术测定样品的全成分信息,并转化成数据矩阵,采用模式识别法中的主成分分析(PCA)、偏最小二乘法-判别分析(PLS-DA)以及聚类分析(HCA)进行识别分析.结果氢核磁共振-模式识别法能有效地鉴别不同产地的麦冬样本.结论氢核磁共振-模式识别法是一种有效的药材分类鉴别方法,可作为药材质量控制的手段之一.]]> 2015/1/6 14:35:50 2114true 目的探讨地黄连作障碍的原因和筛选可能具有缓解作用的有益菌.方法将已分离纯化的土壤细菌菌株接种到试管苗和盆栽苗基部,分别于30 d和60 d后收获,测量苗质量等指标.结果组培试验表明48个菌株中,有11个对地黄生长具有显著促进作用,另外11个具有抑制或致死作用;盆栽试验揭示16个菌株对地黄苗具有促进作用,13个菌株具有抑制或致死作用.结论土壤细菌对地黄苗的生长具有显著影响.地黄种植可能导致根际细菌菌群失衡,施用有益细菌可能是解决地黄连作障碍的有效措施.]]> 2015/1/6 14:35:50 2113true 目的考察诱导子对黄芩毛状根生长和黄芩苷生物合成的影响.方法用非生物诱导子(Ca²⁺、Mg²⁺和Co²⁺)和从黑曲霉Aspergillus niger、米曲霉A.oryzae、蜜环菌Armillaria mellea中提取的真菌诱导子,与黄芩毛状根共培养;HPLC法测黄芩苷的量.结果各诱导子对黄芩毛状根生长和黄芩苷合成有不同影响:黑曲霉诱导子和米曲霉诱导子质量浓度为40和20 mg/L时,Co²⁺浓度为1.53×10^-4mmol/L时,黄芩苷的量从7.64%分别增至9.18%、8.81%和8.62%.结论诱导子对黄芩毛状根次生代谢产物具有特异性,可选择性地促进某一类次生代谢产物的合成.试验证实黑曲霉诱导子、米曲霉诱导子和Co²⁺是适合黄芩毛状根代谢黄芩苷调控的诱导子.]]> 2015/1/6 14:35:50 2112true 目的建立陇西产黄芪药材HPLC-DAD-ELSD指纹图谱,为全面科学地控制药材质量提供方法.方法采用HPLC-DAD-ELSD串联技术,流动相A:10%乙腈,B:90%乙腈;检测波长:265 nm;体积流量:.mL/min,柱温:35℃;进样量:20μL;增益值:20;漂移管温度:55℃;加热器级别:65%;气体压力;2.068 5×10⁵Pa.以10批甘肃陇西不同产地的黄芪药材建立黄酮类和皂苷类化合物指纹图谱共有模式,并采用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统"软件进行数据处理.结果建立的方法对黄芪药材中黄酮类成分、皂苷类成分均有良好的分离,一次进样同时测定了两类不同成分的指纹图谱,不同批次药材间的相似度符合相关规定.结论该方法可用于黄芪中黄酮类成分和皂苷类成分指纹图谱的同时测定,控制药材质量.]]> 2015/1/6 14:35:50 2111true 目的为番红花的快速繁殖提供依据.方法添加不同种类及不同浓度的激素,对番红花进行愈伤组织诱导、丛生芽诱导及球茎培养.结果愈伤组织诱导的适宜培养基为MS+2.0 mg/L NAA+0.5 mg/L 6-BA;丛生芽诱导的适宜培养基为MS+0.5 mg/L NAA+2.0 mg/L 6-BA;在光照条件下,丛生芽可分化出小球茎.结论利用组织培养技术能够实现番红花快速繁殖.]]> 2015/1/6 14:35:50 2110true 目的确立了烯酰吗啉在三七及其栽培土壤中的一种分析方法.方法三七和土壤样品用丙酮提取,正己烷和醋酸乙酯液液萃取,用固相萃取法(弗罗里硅土小柱)净化,然后用液相色谱检测.结果烯酰吗啉在三七块根内的半衰期为6.2 d,在三七茎叶内的半衰期为3.9 d,在土壤中的半衰期为5.0 d;在三七生长过程中,按常规剂量施用烯酰吗啉农药6次,间隔期25 d以上,最后一次施药距采挖时间30 d以上,三七植株中烯酰吗啉的残留量低于日本肯定列表对三七中烯酰吗啉残留限量标准(≤0..mg/kg),栽培土壤中烯酰吗啉的残留量小于0.02mg/kg.结论在三七上规范喷施烯酰吗啉可溶性粉剂,烯酰吗啉在三七植株和土壤中的降解较快,三七质量安全,不会对土壤环境造成污染.]]> 2015/1/6 14:35:50 2109true 目的建立RP-HPLC法同时测定含羞草中6种黄酮苷的量.方法采用高效液相色谱法,色谱柱为Wa-ters XBridge C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相:甲醇(A)-1%冰醋酸水溶液(B)(25∶75),体积流量0.8mL/min,柱温25℃,检测波长340 mm.结果6个成分均能达到基线分离,异荭草苷(Ⅰ)、荭草苷(Ⅱ)、5,7,3',4'-四羟基-8-C-[α-L-鼠李糖-(1→2)]-β-D-葡萄糖苷(Ⅲ)、牡荆苷(Ⅳ)、异牡荆苷(Ⅴ)、5,7,3',4'-四羟基-8-C-[β-D-芹糖-(1→4)]--βD-葡萄糖苷(Ⅵ)的线性范围分别为0.260~1.300μg(r=0.999 9),0.490~2.450μg(r=0.999 9),0.700~3.500μg(r=0.999 9),0.276~1.380μg(r=0.999 8),0.266~1.330μg(r=0.999 9),0.750~3.750μg(r=0.999 7);平均回收率分别为98.6%(RSD=2.31%),98.2%(RSD=2.04%),96.4%(RSD=1.85%),96.9%(RSD=1.47%),97.3%(RSD=2.19%),97.5%(RSD=1.76%).结论本研究所建立的方法操作简便、结果可靠,为该类药材的入药及资源的质量评价提供了实验依据.]]> 2015/1/6 14:35:50 2108true 目的考察不同品种和采收季节对紫花苜蓿中黄酮量的影响.方法以苜蓿素为对照品,对紫外分光光度法测定紫花苜蓿总黄酮的量进行方法学考察,对北京地区种植的9个紫花苜蓿品种在春、夏、秋季3个采收期总黄酮的量进行测定分析.结果9个紫花苜蓿品种中,"费纳尔"和"爱维兰"总黄酮量显著高于其他品种(P<0.05),其他7个品种间无显著差异(P>0.05);在3个采收季节中,各品种在秋季的黄酮量均高于春、夏两季,其中"费纳尔"、"爱维兰"和"爱菲尼"总黄酮的量在3个季节差异不显著(P>0.05),"美标304"、"胜利者"和"改革者"则有显著差异(P<0.05).结论品种和采收季节对紫花苜蓿中的总黄酮的量均有明显影响,而不同品种中的总黄酮对季节变化的敏感性不同.]]> 2015/1/6 14:35:50 2107true 目的建立马鞭草药材中马鞭草苷(verbenalin)及戟叶马鞭草苷(hastatoside)的测定方法.方法采用Diamonsil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),乙腈-水(15∶85)为流动相,检测波长为238 nm.结果马鞭草苷、戟叶马鞭草苷在17.2~155.2μg/mL和25.5~229.9μg/mL与峰面积均呈良好的线性关系;平均回收率分别为98.89%(RSD=1.1%)、99.00%(RSD=0.4%).结论本法操作简便、准确,具有良好的重现性,为马鞭草药材的合理应用及质量控制奠定基础.]]> 2015/1/6 14:35:50 2106true 2015/1/6 14:35:51 2105true 目的将外源苏云金芽孢杆菌杀虫蛋白基因CryIA(c)和豇豆胰蛋白酶抑制剂基因CpTI共同转入四倍体菘蓝以获得鳞翅目昆虫小菜蛾抗性。方法构建了以CaMV 35S为启动子,新霉素磷酸转移酶(Npt-Ⅱ)为选择标记,带有CryIA(c)基因和CpTI基因的植物表达载体pGBI121S4ABC并转入根癌农杆菌LBA4404。采用叶盘法遗传转化四倍体菘蓝。转基因再生植株经PCR和Southern杂交检测,并进行抗小菜蛾实验。结果T0代转化四倍体菘蓝的双基因阳性转化率达到16.67%。Southern杂交检测结果表明外源CryIA(c)基因和CpTI基因均已经随机整合到转基因菘蓝的基因组中。与野生对照相比,转基因四倍体菘蓝对小菜蛾显示出明显抗性。结论转双价抗虫基因Bt-CpTI是提高四倍体菘蓝对小菜蛾抗性的有效手段。]]> 2015/1/6 14:36:58 2104true 目的建立优化的华细辛Asarum sieboldiiAFLP反应体系,为华细辛遗传多样性的研究提供技术支持。方法以华细辛叶片为材料,对基因组DNA提取、酶切连接、PCR扩增等操作过程中各关键因素进行分析,筛选最适条件,建立完善的AFLP反应体系。结果建立了优化的华细辛AFLP分析体系:在基因组DNA提取时,提取液中添加巯基乙醇、样品温浴时间为30 min;Tru1Ⅰ和PstⅠ的酶切时间分别为3 h;在扩增反应中,Mg2+终浓度为1.5 mmol/L、TaqDNA聚合酶用量为0.2μL。结论本反应体系可获得良好的AFLP分析结果,可用于华细辛遗传多样性研究。]]> 2015/1/6 14:36:58 2103true 目的探讨不同胡芦巴种质资源生物学性状的遗传差异,初步分析其遗传多样性。方法以宁夏本地、国内其他省份及国外引进的32份胡芦巴种质资源为材料,在宁夏大学实验农场种植,调查其株高、结荚高度、主茎节数、分枝数、单株有效荚数等主要生物学性状,采用离差平方和法对欧氏距离进行聚类,分析其遗传多样性。结果在所研究的11个性状中,除荚长性状外,其余10个表型性状的方差分析均表现显著或极显著差异,变异系数最大的是总分枝数和单株有效荚数。成对种源的欧氏距离变化在1.11~9.49,平均值为4.01,单个种源欧氏距离(D)的平均值分布在2.94~6.54。在D=6.86处可以将32份种源划分成各具明显特点的3大类,与收集种源的地域基本一致。结论不同种源的胡芦巴间具有一定差异,多数国外种源与宁夏种源的遗传距离较远,国内其他省份种源与宁夏种源的遗传距离较近。]]> 2015/1/6 14:36:58 2102true 目的采用高效液相色谱法研究并建立了产于张家界的刺壳花椒药材的指纹图谱。方法Diamonsil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),乙腈-水流动相系统梯度洗脱,体积流量1.0 mL/min,检测波长278 nm。结果对所采集的10批刺壳花椒药材进行了测定,建立了刺壳花椒的指纹图谱,共有11个共有峰。结论HPLC法色谱指纹图谱分析技术可用于刺壳花椒药材质量的控制。]]> 2015/1/6 14:36:58 2101true 目的分析宽叶羌活在中国的适生区域,为人工种植适宜区划筛选提供科学依据。方法以四川、青海、甘肃野生宽叶羌活分布区最适宜生长环境因子为依据,结合中药材产地适宜性分析地理信息系统(TCMGIS-Ⅰ),区划宽叶羌活区全国的适宜产地。结果四川、西藏、青海和甘肃临近区域118个县市是宽叶羌活集中连片的最适宜产区,总面积130 051 km2,四川占最适宜区总面积比例达45%,西藏约占32%;较适宜产区包括四川、西藏、青海、甘肃、陕西、新疆等8个省区197个县市,面积242 365 km2,其中四川占较适宜产区面积35%,西藏约占36%。在相似度80%以上的适宜区范围内,四川涉及的面积最大,西藏包含的县市最多。结论应用TCMGIS-1系统进行宽叶羌活适生地分析具有一定的科学性和准确性;分析结果揭示西藏是宽叶羌活潜在重要的资源分布区;根据适生区域自然及社会经济综合评价,建议在生态脆弱、农地相对缺乏的最适宜区优先开展宽叶羌活种质保存、资源保护和野生抚育,而在四川、甘肃和青海等地选择3 000 m以下较低海拔的,农地比较充足、耕作条件和光热比较优越的较适宜区域适度发展规模化人工种植。]]> 2015/1/6 14:36:58 2100true 目的建立远志药材质量控制和资源评价方法。方法以18个不同产地、5个栽培主产区远志药材及不同商品等级和部位的远志药材为研究对象,50%甲醇超声提取,HPLC梯度检测,建立远志对照指纹图谱,峰面积-保留时间曲线分析色谱峰与质量等级之间的关系。并采用欧氏距离法进行峰面积聚类。结果18个产地野生远志具有24个共有色谱峰,相似度大于0.75;5个栽培主产区相似度大于0.95;3,6′-二芥子酰基蔗糖酯的量从大到小依次为一级筒、二级筒、三级筒、远志棍、芦头、地上和木心。结论野生远志受生态环境影响表现出一定差异,而栽培远志质量比较均一;远志质量与3,6′-二芥子酰基蔗糖酯的量呈良好的正相关,该成分可作为远志质量评价的指标成分之一。本研究可为远志药材的质量控制和新药源的开发提供参考。]]> 2015/1/6 14:36:58 2099true 目的测定五柱绞股蓝茎和叶中的总皂苷和总黄酮的量,并揭示其在不同季节内的动态变化规律。方法以绞股蓝皂苷和芦丁为对照品,采用紫外可见光分光光度计在550 nm处测定皂苷吸光度,在510 nm处测定黄酮吸光度。结果五柱绞股蓝茎、叶中的总皂苷和总黄酮的量在5月至11月的生长发育季节内,均表现为先上升后下降的变化规律,以9月的量最高,且叶中的量高于茎中的量。结论五柱绞股蓝采收可安排在8~9月的花果期进行。]]> 2015/1/6 14:36:59 2098true 目的采用HPLC法测定不同生长年限杜仲皮中松脂醇二葡萄糖苷的量。方法色谱柱为Agilent Zorb-ax Eclipse XDB-C18(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-水(25∶75),检测波长为277 nm,体积流量1 mL/min,柱温25℃。结果13、22年生杜仲内皮松脂醇二葡萄糖苷量相对较高;13年生杜仲栓皮松脂醇二葡萄糖苷量出现最低点。从杜仲皮中松脂醇二葡萄糖苷总量考虑,22年为最佳采收期。结论本实验建立的杜仲皮松脂醇二葡萄糖苷量测定方法,重现性好,结果准确可靠,为杜仲皮质量控制提供了参考。通过对不同生长年限杜仲皮松脂醇二葡萄糖苷量的研究,为杜仲的合理采收提供了科学依据。]]> 2015/1/6 14:36:59 2097true 目的从滨蒿中分离得到对羟基苯乙酮并建立其定量测定方法。方法采用硅胶柱色谱和Sephadex LH-20从滨蒿的三氯甲烷部位分离得到对羟基苯乙酮;采用DiamonsilTMC18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),甲醇-2%醋酸溶液(30∶70)为流动相,检测波长为275 nm,对不同产地滨蒿中对羟基苯乙酮的量进行测定。结果对羟基苯乙酮在0.098~0.786μg线性关系良好,精密度、稳定性、重现性、加样回收率试验的RSD均小于2%,平均加样回收率为99.80%。结论该方法准确、快速、重现性好,可用于滨蒿中对羟基苯乙酮量的测定。]]> 2015/1/6 14:36:59 2096true 目的对不同生长时期的环草石斛试管苗进行生长动态及分级标准的研究,为试管苗各生长发育时期合理调控技术措施的确定提供科学依据。方法采用常规方法,测定不同生长时期试管苗的生长指标、多糖及蛋白质的量,确定试管苗出瓶时间及分级标准。结果播种生长12个月的时间内,5~8个月是环草石斛试管苗苗高和茎粗增长最快的时期;
7~8个月时的试管苗生物量积累速率最高。环草石斛试管苗根与茎叶之比(R/T)相对较小,比值小于1。生长8个月时的试管苗多糖的量和可溶性蛋白质的量较高,7~8个月时的试管苗生长代谢旺盛。从干物质积累动态、多糖及蛋白质的量变化、试管苗活力和生产成本等方面综合考虑,环草石斛生长8~10个月的试管苗出瓶移栽较为合适。试管苗出瓶后分级再利用能够切实保证移栽成活率。以苗高、茎粗和根数作为分级指标,环草石斛试管苗可以分为3个等级。结论环草石斛的种子质量对试管苗的生长影响较大,生长8~10个月的环草石斛试管苗出瓶移栽较为合适,以苗高、茎粗和根数作为分级指标,试管苗可以分为3个等级加以利用。]]> 2015/1/6 14:37:41 2095true 目的探索一种适用于柴胡药材干根DNA提取的方法,为实现以分子标记方法辨别柴胡药材奠定基础。方法比较研究了分别用CTAB法、SDS法和高盐低pH法等3种方法提取柴胡样品基因组DNA。柴胡药材干根经过PVP以及TNE缓冲液进行不同的预处理,以CTAB法抽提DNA。以EcoRⅠ/MseⅠ双酶切琼脂糖凝胶电泳及RAPD扩增检测提取DNA的质量。采用NTSYS-pc软件计算Jaccard遗传相似系数,以非加权配对算术平均数法(UPGMA)建立聚类图。结果常规DNA提取方法提取药材干根DNA溶液经4℃放置后,黏稠并褐变,严重影响酶切和RAPD扩增。样品预处理优化条件是研磨时加入3%PVP,TNE缓冲液于0℃浸提2次,每次30min。以该优化的预处理方法处理6个柴胡药材干根样品,提取DNA条带清晰,酶切完全,RAPD扩增图谱清晰稳定,共获得有效扩增条带28条,其中多态性条带为20条,占71.43%。聚类分析表明,6个栽培品中,原产地为山西灵丘外地引种(LQWY)和甘肃陇西(LX)、山西灵丘(LQ)和山西方山(FSH)的亲缘关系较近,陕西商洛(SHL)和其他5个栽培品的亲缘关系较远。结论柴胡药材干根经过预处理后,可采用常规的DNA提取方法抽提DNA,所提DNA适合于酶切、RAPD等分子标记分析。]]> 2015/1/6 14:37:41 2094true 目的建立茅苍术悬浮细胞系,研究2种内生真菌诱导子对茅苍术悬浮细胞产挥发油的影响。方法用内生真菌诱导子对茅苍术悬浮细胞进行诱导处理后超声提取茅苍术细胞中的挥发油,利用气相色谱法测定挥发油中苍术酮、苍术醇、β-桉叶醇和苍术素的量。结果获得的茅苍术悬浮细胞生长较快,于第21天生物量达到最大,为6.95 g/L。未经诱导处理的茅苍术悬浮细胞中仅检出β-桉叶醇,其在培养21 d的细胞中的量达到最大,为17.469μg/g。添加2种内生真菌(分别属于小克银汉霉属和孔球孢霉属,编号为AL4和AL12)的粗诱导子对茅苍术悬浮细胞生物量及挥发油积累均有影响,其中AL4粗诱导子综合效果更好。添加AL4粗诱导子到14 d的茅苍术悬浮细胞培养基中,诱导子质量浓度为每升培养基含糖20 mg,诱导处理7 d后收集细胞,发现其干质量比同期对照提高3.31%,且检出细胞中苍术酮、苍术醇、β-桉叶醇和苍术素的干质量分别达到14.715、28.395、38.794、8.310μg/g。其中β-桉叶醇的量是对照的2.22倍。结论添加内生真菌诱导子对茅苍术悬浮细胞的生长及挥发油积累均有促进作用。]]> 2015/1/6 14:37:41 2093true 目的研究温室内冬季基质育苗对抑制当归早期抽薹的效应。方法设播期、基质和种子3个因子,正交设计,3次重复。结果在15个处理中有7个处理抽薹率低于1%,其中最低抽薹率为0.14%;
另有7个处理抽薹率1%~5%;
另有1个处理抽薹率为19.93%。在总计45个小区中,40%的小区完全未发生早抽薹,另有46.7%的小区抽薹率低于5%。冬季育当归苗8月初茎节开始伸长,比传统苗推迟约70 d;
冬季育当归苗9月中旬为抽薹高峰期,比传统苗推迟约100 d。在15个处理的早抽薹植株中,有6个处理100%只抽生花茎不能成花,另有8个处理50%以上不能成花,另1处理38.9%不能成花。抽样测定不能成花当归的醇溶性浸出物的量为45.93%。3个因子均极显著影响当归早薹率,影响作用的主次顺序为播期、种子、基质。结论冬季基质育苗不仅可明显降低当归早抽薹率,而且可能规避抽薹,大幅度推迟抽薹期。]]> 2015/1/6 14:37:41 2092true 目的针对獐牙菜野生资源受到严重破坏的情况,系统地探讨了通过组织培养为手段进行人工繁殖的方法。方法将种子接种于诱导培养基上,待其长成小苗后分别取其不带芽茎段、叶和带芽茎段作为外植体,在MS培养基上添加不同的激素配比,改变培养方式。结果在所有的实验方案中,不带芽茎段是理想的外植体材料。较适宜的初代培养基为MS+BA 0.5 mg/L+蔗糖3.0%,增殖培养基为MS+BA 0.5 mg/L+IBA 0.1 mg/L+蔗糖3.0%,而根的诱导则是在1/2MS+NAA 0.5 mg/L+1.5%蔗糖的培养基上进行。结论采用组织培养方式可进行獐牙菜的快速繁殖,为确保这一珍稀药用植物资源的保护和可持续利用提供有效途径。]]> 2015/1/6 14:37:41 2091true 目的研究南五味子Kadsura japonica栽培中的耐荫能力。方法对南五味子进行不同遮荫处理,利用7230G分光光度计测定叶片的叶绿素量;
利用Li-6400光合测定仪测其气体交换数据;
利用PAM-2100脉冲调制荧光仪测定叶片的叶绿素荧光参数。结果随着遮荫强度的增加,叶绿素总量、光饱和点(LSP)、净光合速率(Pn)迅速上升而后又降低,在70%遮荫处理时达最大值,分别为(2.013±0.263)mg/dm2,(749±10.84)μmol/(m2.s),(7.26±0.15)μmol/(m2.s);
光补偿点(LCP)表现为先降低后升高趋势,在70%遮荫处理时最小,为(4.92±0.20)μmol/(m2.s)。开放系统Ⅱ(PSⅡ)反应中心光化学效率FV/Fm总体变化不显著,光电子产额(Yield)、电子传递速率(ETR)、叶绿素荧光的光化学猝灭(qP)和叶绿素荧光的非光化学猝灭(qN)则是先上升后降低,与Pn变化一致,均在70%遮荫处理时达峰值,分别为0.761±0.027、(3.583±0.674)μmol/(m2.s)、0.990±0.011、0.892±0.030。结论适度遮荫有利于南五味子生长,这主要是适度遮荫条件下更有利于各种酶活性的激发。]]> 2015/1/6 14:37:41 2090true 目的比较烘干、晾干和甲醇新鲜提取对虎杖不同部位中白藜芦醇和虎杖苷量的影响。方法白藜芦醇和虎杖苷定量测定采用HPLC法,岛津LC-10AT高效液相色谱仪,shim-pack C18柱为色谱柱,甲醇-水溶液(40∶60)为流动相,柱温30℃,体积流量0.8 mL/min,检测波长304 nm。结果通过晾干和烘干处理后,虎杖根皮、叶、根髓部中的虎杖苷和白藜芦醇的量发生明显变化。结论该结果对于综合开发利用虎杖资源具有参考价值。]]> 2015/1/6 14:37:42 2089true 目的研究以HPLC-ELSD法测定不同产地的黄芪、红芪及梭果黄芪药材中黄芪皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ(黄芪甲苷)的量。方法色谱柱为Alltima C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈和0.3%甲酸溶液,梯度洗脱,体积流量:0.8 mL/min,柱温:25℃,蒸发光散射检测器,ELSD参数:漂移管温度110℃,氮气流速3.0 L/min。结果黄芪皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ的平均回收率分别为102.2%、99.5%、101.4%、99.7%,RSD分别为1.8%、2.1%、1.8%、1.9%。结论本法简单易行,方法学验证符合要求,可作为黄芪药材中皂苷类成分定量的方法,也可作为区别黄芪与红芪、梭果黄芪的依据。]]> 2015/1/6 14:37:42 2088true 目的通过HPLC-ELSD法测定8种蜂王浆中10-HDA的量,建立不同来源蜂王浆功效成分的检测和品质的评价方法。方法采用高效液相色谱-蒸发光散射检测法(HPLC-ELSD),Nucleodur C18色谱柱(250 mm×4.6mm,5μm),流动相:甲醇-水(55∶45),体积流量1.0 mL/min;
蒸发光散射检测器参数:漂移管温度40℃,气压3.5kPa。结果10-HDA在0.004~0.018 mg(r=0.999 9)线性关系良好,平均加样回收率为98.9%(RSD=1.2%,n=6),检测样品中6种蜂王浆的10-HDA的量大于1.4%,符合国家标准(GB9697-88)。结论HPLC-ELSD法简便、快速、灵敏、准确、重现性好,可作为蜂王浆的质量控制方法。]]> 2015/1/6 14:37:42 2087true 目的针对三角叶黄连ISSR的反应特点,建立稳定可靠的ISSR-PCR分子标记反应体系,为进一步研究三角叶黄连的种质资源遗传多样性奠定基础。方法通过筛选引物并设定影响三角叶黄连ISSR-PCR反应诸因子的不同梯度,检测其不同反应体系的扩增效果,分析非特异性条带的产生原因并进行条件优化,建立三角叶黄连ISSR-PCR稳定可靠的反应体系。结果建立了可用于三角叶黄连ISSR-PCR分析的最适宜的反应体系:25μLPCR反应体系中,内含0×PCR Buffer 2.5μL,.5mmol/L Mg2+,200μmol/L dNTP,0.3μmol/L引物,40ng模板,.0U Taq DNA聚合酶。扩增程序为94℃预变性5min,然后进行35个循环:94℃变性30s,(据不同引物的退火温度)复性60s,72℃延伸90s,循环结束后72℃延伸7min,4℃保存。结论所建立的三角叶黄连ISSR反应体系具有标记位点清晰、反应系统稳定、检测多态性能力强、重复性好等特点,可以较好地应用于三角叶黄连的种质资源遗传多样性及居群鉴别的研究。]]> 2015/1/6 14:38:34 2086true 目的对影响药用菊花ISSR-PCR扩增效果的一些因素进行优化,为进一步研究其遗传多样性奠定基础。方法基于方差分析方法,利用正交试验从Taq酶、Mg2+、dNTP和引物等4因素3水平对药用菊花反应体系进行优化。结果药用菊花ISSR-PCR的最佳反应体系:在20μL的反应体系中,Taq酶.00U,Mg2+2.00mmol/L,dNTP0.20mmol/L,引物0.50μmol/L。结论Taq酶、Mg2+、dNTP等对ISSR反应结果有极显著影响。所建立的药用菊花ISSR反应体系具有标记位点清晰、反应系统稳定、检测多态性能力较强、重复性好等特点,可用于药用菊花的遗传多样性研究。]]> 2015/1/6 14:38:34 2085true 目的揭示党参根的发生发育规律及储藏物质和主要药用成分在根中的积累部位。方法应用石蜡切片法研究党参根的形态发生,PAS反应和苏丹Ⅲ染色显示根中储藏物质,等量的5%香草醛-冰醋酸和高氯酸混合试剂对党参萜类及甾类物质显色。结果党参根发育过程包括原分生组织、初生分生组织、初生结构和次生结构4个阶段。党参根中存在大量乳汁管,在原生木质部导管出现时,韧皮部中已产生乳汁管细胞,而后一直与韧皮部分子相伴产生。党参根中积累了大量淀粉粒。萜类和甾类物质积累在根的薄壁细胞和乳汁管中。结论党参根中大量薄壁细胞和乳汁管是储藏物质和主要药用成分的积累部位。]]> 2015/1/6 14:38:34 2084true 目的为罗汉果Siraitia grosvenorii种质资源的保存提供一条新途径。方法以继代5d生长健壮的罗汉果试管苗0.8～cm长嫩梢进行预培养,剥取2～3mm茎尖,25℃下60%PVS2装载,再用00%PVS2在0℃脱水处理,更换新鲜00%PVS2后投入液氮保存24h,化冻,用MS+.2mol/L蔗糖的液体培养基洗涤,滤纸吸干后接种于MS+.0mg/L6-BA+0.05mg/L NAA+0.mg/L GA3+0.8%琼脂粉+45g/L蔗糖的恢复培养基上,25℃暗培养7d,转入正常光下培养。再生苗生根培养基为/2MS+0.2mg/L NAA+30g/L蔗糖。结果嫩梢于MS+0.7mol/L蔗糖的培养基上预培养3d,茎尖装载40min,脱水50min,液氮保存后于40℃水浴中快速化冻,洗涤40min,恢复培养周时存活率最高可达00%,30d时再生率最高可达78.33%。再生苗转入生根培养基可形成完整植株。结论罗汉果种质资源的玻璃化法超低温保存操作简单、成活率高、再生植株正常。]]> 2015/1/6 14:38:34 2083true 目的通过对马尿泡组织培养技术的研究,为马尿泡的快速繁殖提供技术支撑。方法以马尿泡野生植株上的休眠芽为外植体,将它们接种到一系列含有不同激素的培养基中。结果外植体野生芽不易进入正常萌发生长阶段,一旦进入正常阶段,能迅速进入生长状态,诱导野生芽分化的最适培养基是MS+6-BA2.0mg/L+NAA.0mg/L,且侧芽要比主芽分化得快,增殖率明显高于主芽的增殖率。25d转接次,增殖倍数在5倍以上。最适生根培养基是/2MS+IBA0.5mg/L,诱导生根率达96%。无菌苗幼叶诱导愈伤组织最适培养基是MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.5mg/L+2,4-D.0mg/L,诱导率达00%。结论一方面建立了稳定高效的马尿泡再生体系,另一方面通过组织培养达到了其种质资源的保存。]]> 2015/1/6 14:38:34 2082true 目的揭示桔梗种子成熟过程的生理动态变化,为桔梗良种的生产提供理论依据。方法采用统一挂牌分期取样,测定不同成熟度种子的千粒质量、发芽率、电导率、POD活性和MDA的量。结果桔梗开花后55d千粒质量达到最大为.24g,但此时种子发芽率仅为53.0%,开花后55～6d千粒质量开始逐渐下降,但发芽率却迅速上升,6d时达到最大为93.3%,此时种子细胞膜结构完整性高,POD活性也最高,种子性能达到最佳状态。结论开花后6d,桔梗种子可完全成熟,种子成熟过程中存在生理后熟现象,后熟期约为6d。]]> 2015/1/6 14:38:35 2081true 目的研究啶虫脒在枸杞中的残留动态。方法采用气相色谱法,样品经乙腈提取,弗罗里矽色谱柱净化,采用HP-5柱,载气为氮气,体积流量mL/min;进样口温度200℃、柱温80℃、检测器320℃。结果样品的添加回收率为89.5%～93.5%,RSD为2.9%。啶虫脒在枸杞中的半衰期为2.6d,施药4d后残留量降至9.3μg/kg,最终残留在4.0μg/kg以下。结论在正常喷药浓度的加倍剂量000倍条件下,根据不同标准,枸杞的安全采收间隔期为5～9d以上。]]> 2015/1/6 14:38:35 2080true 目的建立黄杞叶中落新妇苷及黄杞苷定量测定方法。方法采用HPLC法,Phenomenex Luna C8色谱柱,乙腈-水-冰醋酸(22∶78∶0.)为流动相,检测波长290nm,体积流量0.8mL/min。结果平均回收率:落新妇苷为0.6%(RSD=0.8%);黄杞苷为98.%(RSD=.4%)。线性范围:落新妇苷为0.0448～8.296μg(r=0.9998);黄杞苷为0.02204～8.86μg(r=0.9999)。结论该方法简便、快速、重现性好。]]> 2015/1/6 14:38:35 2079true 目的建立黄荆子中抗肿瘤活性成分6-羟基-4-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-3-羟甲基-7-甲氧基-3,4-二氢(3R,4S)-2-醛基萘(牡荆脂素A,VBE-)的定量测定方法。方法采用反相高效液相色谱法。Kromasil ODS(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱,乙腈-0.%冰醋酸梯度洗脱(0min,5∶85;0min,5∶85;40min,28∶72),检测波长为255nm,柱温为25℃,体积流量为mL/min。结果黄荆子中牡荆脂素A在该条件下有较好的线性关系。结论测定方法简便、准确,建立了黄荆子药材的牡荆脂素A的定量测定方法,为黄荆子质量控制及综合利用提供了可靠的依据。]]> 2015/1/6 14:38:35 2078true 目的建立反相高效液相色谱-蒸发光检测法(HPLC-ELSD)测定蒺藜呋甾皂苷B的方法。方法色谱柱Vp-ODSC8柱,柱温40℃,流动相:乙腈-水(26∶74)→(28∶72)→(3∶69)→(50∶50)梯度,体积流量mL/min,温度:05℃,气体流量:3.0mL/min。结果该方法的线性范围为2.0～0.0μg,r=0.9973,平均回收率为96.68%。结论方法准确,灵敏度高,专属性强,重现性好,可用于蒺藜药材中该成分的定量测定。]]> 2015/1/6 14:38:35 2077true 目的测定紫花苜蓿在不同生长期苜蓿素的量,为合理利用资源提供实验依据。方法采用HPLC法,色谱柱为Zorbax SB C8(250mm×4.6mm,5μm),以甲醇-水(65∶35)为流动相,体积流量为0.8mL/min,检测波长为349nm,进样量为5μL。结果在紫花苜蓿不同生长期苜蓿素的量不同,8月份量最高。结论苜蓿在不同生长期苜蓿素的量不同,如果主要利用紫花苜蓿中的苜蓿素时应在8月中旬采收。]]> 2015/1/6 14:38:35 2076true 2015/1/6 14:39:39 2075true 2015/1/6 14:39:39 2074true 2015/1/6 14:39:39 2073true 2015/1/6 14:39:40 2072true 2015/1/6 14:39:40 2071true 2015/1/6 14:39:40 2070true 2015/1/6 14:39:40 2069true 2015/1/6 14:39:40 2068true 2015/1/6 14:39:41 2067true 2015/1/6 14:39:41 2066true 目的 建立稳定可靠的SRAP分子标记反应体系，为进一步研究薏苡种质资源的分子鉴定提供依据。方法 采用改进的SDS法提取薏苡种子胚基因组DNA，并采用单因素试验分析Mg²⁺浓度、dNTP浓度、BSA浓度、模板DNA用量、引物浓度、Taq DNA聚合酶用量等6个因素对薏苡相关序列扩增多态性(SRAP)扩增结果的影响。结果 建立了薏苡最适的SRAP反应体系：10 μL PCR反应体系中，含1×Taq酶配套缓冲液(10 mmol/L Tris·HCl，pH9.0，50 mmol/L KCl，0.1%Triton X-100)，1.5 mmol/L Mg²⁺，0.15 mmol/L dNTP，10 ng模板DNA，10 pmol引物，0.5 U Taq酶。结论 所建立的薏苡SRAP反应体系具有标记位点清晰、反应系统稳定等特点，为薏苡种质资源的分子鉴定提供了良好的基础。]]> 1，李钧敏²，金则新²]]> 2065true 目的 探讨西伯利亚杏形态结构数值随不同海拔、不同纬度变化的规律；并对不同产区样本进行分类以研究不同居群间西伯利亚杏形态特征的差异。方法 运用SPSS11.5软件进行偏相关分析、主成分分析及系统聚类分析。结果 不同纬度、不同海拔，西伯利亚杏形态结构数值变化具有一定的规律，其中13个形态特征指标与纬度显著相关，4个形态特征指标与海拔显著相关。以50个居群样本的24个形态特征值进行主成分分析和聚类分析，获得了不同的聚类群，其形态特征具有显著性差异。结论 海拔及纬度对西伯利亚杏形态特征分化的影响具有一定的规律性；不同产区的西伯利亚杏根据形态特征差异可分出不同的聚类群。]]> 2064true 目的 研究怀药道地产区同期种植铁棍山药和太谷山药植株地下根状茎中山药多糖和淀粉积累量变化规律。方法 采用蒽酮-硫酸法测定两个品种怀山药各个生育时期的根状茎中山药多糖及淀粉的量。结果 在整个生育期内不论是搭架种植还是匍匐地面种植，铁棍山药的山药多糖量均高于太谷山药中的量，而铁棍山药的淀粉量又均低于太谷山药。结论 根据使用目的不同应采用搭架种植和匍匐地面种植两种不同的栽培措施；以山药多糖及淀粉为采收指标，则采收期与传统采收期一致。]]> 2063true 目的 采用GC法对10个地区的小白蒿进行指纹图谱研究，为小白蒿药材质量控制提供依据。方法 采用不同的色谱柱，以不同程序升温对小白蒿中挥发性成分进行实验研究。结果 以23个共有峰为评价指标，精密度和重现性试验中各共有峰相对保留时间和相对峰面积的RSD均小于3.0%，10个样品相似度大于0.9。结论 此方法精密度、稳定性和重现性良好，有助于蒙药小白蒿的药材质量控制。]]> 1，乌仁苏布德¹，韩石柱¹，王金辉²]]> 2062true 目的 为山核桃属植物叶类药材的品种鉴定及资源开发利用提供科学依据。方法 对4种山核桃属植物叶的药材性状和显微特征进行了鉴别研究。结果 4种山核桃属植物的叶的药材性状和显微构造具有明显的鉴别特征。结论 这些特征可作为山核桃属植物叶类药材的生药鉴别依据。]]> 2061true 目的 寻找鼓槌石斛快繁育苗的有效途径。方法 采用组织培养和野生自然栖息的鼓槌石斛诱导高位腋芽萌发等途径进行探索。结果 在组织培养中，改良1/2MS培养基对原球茎形成效果最好，调整不同浓度的N、P、K及外源激素对诱导鼓槌石斛原球增殖、生根壮苗极为明显；外源激素对诱导鼓槌石斛的高位腋芽萌发无明显效果，高位芽萌发与茎株生理年龄和营养状况有关。结论 人工种植鼓槌石斛采用现代生物技术组培和腋芽繁殖是目前快繁育苗的最有效途径，不仅育苗量大、周期短，且生长快、成活率高，两条途径对于鼓槌石斛的产业化发展有重要意义。]]> 2060true 目的 从中药材品质评价角度考察白术主根及须根的质量差别。方法 按照《中国药典》的方法，对白术主、须根分别进行GC-MS分析，TLC、白术内酯Ⅲ定量测定，浸出物量、总灰分和酸不溶性灰分检查。结果 白术须根与主根挥发油成分差别较大；其他药效物质基本一致，但在质量上略逊于主根。结论 以非挥发油类物质作为主要药效成分时，可用白术须根补充主根资源的不足，但需调整处方量。]]> 2059true 目的 检测附子离体培养愈伤组织和离体苗的生物碱量，建立附子乌头类总生物碱和同时测定新乌头碱、乌头碱、次乌头碱的分析方法。方法 用酸性染料比色法测定乌头类总生物碱的量；反相高效液相色谱法测定新乌头碱、乌头碱、次乌头碱的量，色谱柱为Zorbax extend-C₁₈(150 mm×4.6 mm,5 μm)，流动相为乙腈-0.1%乙二胺，梯度洗脱，体积流量为1 mL/min，检测波长为240 nm，柱温30 ℃。结果 愈伤组织和离体苗中总生物碱的量分别为3.972、2.904 mg/g；新乌头碱、乌头碱、次乌头碱的量分别为：0.678、0.448、0.887 mg/g，0.464、0.234、0.339 mg/g。3种生物碱得到很好分离，线性关系良好。结论 愈伤组织中生物碱的量高于离体苗，该方法快速简便、灵敏准确、回收率高，可以为附子质量控制提供科学依据。]]> 2058true 目的 探讨重庆产杜仲叶的质量及产地差异，为杜仲叶的药用提供科学依据。方法 采用PLATISIL ODS色谱柱(250 mm×4.6 mm，5 μm)，以甲醇-0.2%磷酸(30∶70)为流动相，327 nm为检测波长，测定并比较杜仲叶、皮中绿原酸的量。结果 (1)重庆市6区县杜仲叶绿原酸量差异非常显著(P＜0.01)，平均质量分数为(8.95±0.499) mg/g，其中，南川、城口两地杜仲叶绿原酸的量极显著高于万州、荣昌、武隆、长寿产(P＜0.01)，武隆与长寿间差异不显著(P＞0.01)；(2)重庆市不同产地同树龄同树株杜仲叶绿原酸的量极显著高于杜仲皮，叶绿原酸的量高达(10.150±0.260) mg/g；(3)杜仲叶绿原酸的量与树龄呈负相关。结论 杜仲叶绿原酸量因产地、树龄差异极大，杜仲叶可代替杜仲皮入药，其经济效益显著，杜仲叶值得开发利用。]]> 1，黎晓敏¹，武 煊²]]> 2057true 目的 建立板蓝根抗内毒素有效成分水杨酸的高效液相色谱测定方法，测定不同产地板蓝根药材中水杨酸的量。方法 采用反相高效液相色谱法，色谱柱为Zorbax SB-C₁₈(250 mm×4.5 mm，5 μm)；流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液(22∶78)；体积流量为1.0 mL/min；检测波长为237 nm；柱温为30 ℃。结果 水杨酸在0.081 2～0.975 4 μg与峰面积线性关系良好，r=0.998 3，平均加样回收率为99.21%，RSD为2.30%(n=9)。结论 本方法简便，重现性好，为评价板蓝根药材的质量提供科学依据；不同产地的板蓝根药材水杨酸的量差别较大。]]> 1,3，安益强³，贾晓斌^1,2,3，贾东升^1,3，陈 彦¹]]> 2056true 目的 以1～3年生人工栽培川贝母鳞茎的高、直径和单粒质量为指标进行分级，并制定采收分级标准，为后期鳞茎繁殖的规范化与标准化做指导。方法 在中国四川省康定恩威中藏药材川贝母人工栽培地川贝母采收期采用分层随机取样，调查1～3年生样方内其鳞茎的外观形态，用快速聚类法进行分类，并结合生产进行分级。结果 1年生川贝母鳞茎呈近球形，平均高为0.318 cm，直径0.303 cm，单粒质量0.029 g，分为3级；2年生鳞茎呈类圆锥形，平均高为0.59 cm，直径0.46 cm，单粒质量0.12 g，分为4级；3年生鳞茎呈类长圆锥形，平均高为0.78 cm，直径0.57 cm，单粒质量0.23 g，分为4级。结论 川贝母种子在播种后第2、3年继续萌发，导致个体数量增加；作为种源，分级指标以鳞茎单粒质量为宜。]]> 1，叶 萌¹，赵孙才¹，代 勇^2,3，向 丽³]]> 2055true 目的 研究49个不同产地的牛蒡种质资源的千粒质量、发芽势、发芽率及萌发初期的牛蒡苷与苷元的积累动态。方法 在培养箱中进行种子发芽实验。HPLC法测定萌发种芽中牛蒡苷与苷元的量，色谱柱为Agilent TC-C₁₈(250 mm×4.6 mm，5 μm)；流动相：甲醇-水(线性梯度洗脱：0 min，水55%；10 min,水 46%;20 min，水30%)；体积流量：1.0 mL/min；检测波长：280 nm。结果 成熟饱满的牛蒡种子千粒质量、发芽势、发芽率高，萌发初期的牛蒡苷的量下降，牛蒡苷元的量升高。结论 本实验建立的方法为牛蒡子药材的质量评价提供参考。]]> 2054true 目的 建立苦荞麦中手性肌醇的定量测定方法，并比较不同品种苦荞麦中手性肌醇的量。方法 NH₂柱(250 mm×4.6 mm，5 μm)，柱温30 ℃。流动相70%乙腈，体积流量1.0 mL/min。结果 手性肌醇在1.340～8.040 μg，峰面积与进样量具有良好的线性关系，回归方程A=65 017 C-6 019，r=0.999 5(n=6)，平均回收率为96.74%。不同品种的苦荞麦中手性肌醇量差异较大，其中量最高的为“威93-8”。结论 本法简便、准确、重现性好，可用于苦荞麦的质量控制。]]> 2053true 目的 测定雪地茶中松萝酸的量，为雪地茶的质量标准建立提供参考。方法 采用高效液相色谱分析，Sepax Sapphire C₁₈色谱柱(250 mm×4.6 mm，5 μm)；甲醇-(50 mmol磷酸二氢钾-三乙胺缓冲液500∶1)(70∶30)为流动相，检测波长285 nm。结果 测定了5批雪地茶中松萝酸的量，质量分数0.74%～0.91%。松萝酸在3.23～103.20 μg/mL呈良好线性关系，r=0.999 8；3个质量浓度平均回收率分别为95.98%、96.37%和100.30%；RSD分别为1.9%、1.1%、1.1%。结论 本方法操作简便，结果稳定可靠，可用于雪地茶的质量评价。]]> 1,2，宋 丹³，钟国跃³，张 彤¹，陶建生¹]]> 2052true 目的 建立用RP-HPLC对枳壳中柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷同时定量的方法，并对不同产地枳壳药材进行考察。方法 高效液相色谱法，色谱柱为Waters Sunfire columns C₁₈(150 mm×4.6 mm，5 μm)，流动相为乙腈-0.1%磷酸(19∶81)；检测波长283 nm；柱温为30 ℃；进样量为10 μL。同时测定了枳壳中柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷的量。结果 柚皮苷在0.147～2.944 μg线性关系良好(r=0.999 9)、橙皮苷在0.050～1.006 μg线性关系良好(r=0.999 9)、新橙皮苷在0.065～1.309 μg线性关系良好(r=0.999 9)。平均回收率柚皮苷为103.31%，RSD为1.45%；橙皮苷为103.13%，RSD为1.96%；新橙皮苷为97.42%，RSD为2.49%。结论 本方法测定了3个不同产地、不同批号枳壳样品中3种化学成分的量，该方法分离度好，快速，简便，重现性好。]]> 1，高文远¹，李凤阁²，高 颖¹，杨欣莹²]]> 2051true 目的 建立款冬花中款冬酮的RP-HPLC定量测定方法。方法 采用RP-HPLC法测定款冬花中款冬酮的量，色谱柱：Dikma Technologies C₁₈(200 mm×4.6 mm，5 μm)，流动相：甲醇-水(77∶23)，体积流量：1 mL/min，柱温：25 ℃，检测波长：219 nm。结果 款冬酮在0.15～6 μg线性关系良好，回归方程为Y=3E+06 X-9 588.3, r=0.999 8(n=2)，平均回收率(n=3)为99.78%，RSD为2.08%。结论 款冬酮的RP-HPLC定量测定方法简便、准确，重现性好，可用于款冬花药材中款冬酮的定量测定。]]> 1，马致洁¹，董红红¹，李震宇¹，周玉枝¹，秦雪梅^1,2]]> 2050true 目的 采用高效液相色谱法检测鹿花盘中胆固醇的量，建立鹿花盘品质的质量评价标准和方法。方法以Kromasil-C₁₈柱(250 mm×4.6 mm，5 μm)为固定相，甲醇-水(93∶7)为流动相，体积流量为1.0 mL/min，检测波长为205 nm。结果 胆固醇质量在0.4～12 μg与色谱峰面积呈良好的线性关系(r²=0.999 3)，平均加样回收率为98.5%(RSD=1.2%，n=6)。结论 此方法简便、可靠，可用于鹿花盘品质的质量评价。]]> 2049true 目的 建立雷氏盐剩余比色法测定野西瓜中水溶性生物碱量的方法。方法 采用雷氏盐剩余比色法，以盐酸水苏碱为对照品，在520 nm处定量测定。结果 盐酸水苏碱在0.060 16～0.300 8 mg/mL线性关系良好，计算得回归方程Y=0.621 7 X+0.010 8，r=0.998 6(n=5)；平均回收率为99.46%，RSD=1.83%。结论 该方法简便、准确，适于野西瓜中水溶性生物碱的测定。]]> 1,2，于 蕾^1,2,3，刘光达^1,2，庞琳琳^1,2，杨海帆^1,2]]> 2048true 目的 测定葫芦茶根和叶中总皂苷、总多酚及总黄酮的量。方法 采用分光光度法，分别以齐墩果酸、没食子酸、芦丁对照品为对照，建立葫芦茶中总皂苷、总多酚及总黄酮的分析方法。结果 葫芦茶叶的乙醇提取物中总黄酮的量最高，50%丙酮-水提取物中总多酚的量最高。结论 本方法简便、准确、稳定性好、重现性好。]]> 2047true 目的探讨N、P和K肥在植物生物量和黄酮类次生代谢产物积累中的影响作用,揭示药用植物生物量积累与次生代谢有效成分积累的关系,为建立合理的施用技术提供理论基础。方法以尿素、磷酸和氯化钾3种N、P和K肥按正交设计组成3因素3水平的9个处理组合。用盆栽法比较灯盏花开花植株的生物量、总咖啡酸酯和灯盏乙素的量。结果生物量适宜高N、P和K施肥量组合,有效成分量则偏向低施肥量组合。3肥素中,N作用最强,对生物量积累具有显著的促进作用,对有效成分积累有显著的抑制作用,对有效成分产量的作用不显著。P对有效成分量的作用高于K,但对生物量的影响低于K。K对有效成分产量的作用最大。结论N、P和K施肥提高灯盏花药材生物产量时将会导致黄酮等次生代谢有效成分量下降,但可提高其产量。]]> 2014/12/22 11:15:07 2046true 目的克隆狭叶松果菊Echinacea angustifolia 3-脱氢奎尼酸合成酶基因并考察其在各个组织中的表达情况。方法采用快速扩增cDNA末端技术,以狭叶松果菊组培苗cDNA为模板,克隆出狭叶松果菊3-脱氢奎尼酸合成酶基因全长序列并通过半定量RT-PCR分析其在不同器官中的表达模式。结果克隆到的基因(命名为EanaroB)全长为1 424 bp,编码一个442个氨基酸残基组成的多肽。其氨基酸序列与植物来源的3-脱氢奎尼酸合成酶同源性都在80%左右。将得到的序列提交Genbank,序列号为EU293857。半定量RT-PCR结果表明,狭叶松果菊EanaroB基因在狭叶松果菊的根、茎、叶、花中均有表达,但花和叶中的表达量较高,在根和茎中较少。结论采用RACE和PCR的方法从狭叶松果菊中克隆出了咖啡酸类化合物生物合成途径上的一个基因EanaroB,为进一步研究咖啡酸类衍生物生物合成代谢途径提供一定依据,为今后利用基因工程技术提高咖啡酸类衍生物,包括苯乙醇苷类物质松果菊苷的代谢工程打下一定基础。]]> 2014/12/22 11:15:07 2045true 目的分析药用菊花遗传多样性,为其种质资源评价和合理开发利用提供分子佐证。方法用ISSR分子标记对不同采集地的31份种源(菊花29份、野菊1份、菊花脑1份)进行遗传关系分析。结果22个引物共扩增出182个条带,其中149条具有多态性,多态位点百分率为81.87%,有效等位基因数(Ne)为1.348 1,Nei’s基因多样性指数(He)为0.219 1,Shannon信息指数(Ⅰ)为0.345 1。聚类分析和主坐标分析结果相近,将31份种源大致分为野菊和菊花脑、北方药用菊花、南方药用菊花3个类群。结论ISSR分子标记适合于药用菊花的品种鉴定和遗传多样性分析。]]> 2014/12/22 11:15:07 2044true 目的以黄独脱毒苗为试材,研究不同因素对黄独带芽茎段芽增殖和生根的影响,以期对黄独脱毒苗的快繁技术进行优化。方法采用植物组织培养的方法进行茎尖培养和快繁研究,采用RT-PCR法对茎尖脱毒植株进行病毒检测。结果黄独脱毒苗带芽茎段的最佳培养基是MS+KT 2 mg/L+6-BA 1 mg/L+NAA 0.5 mg/L;黄独脱毒苗带芽茎段增殖的最佳蔗糖质量浓度和琼脂质量浓度分别是30和0 g/L;黄独脱毒苗带芽茎段生根的最佳培养基是1/2 MS+IBA 0.1 mg/L+NAA 0.5 mg/L+PP₃₃₃1 mg/L;黄独试管苗移栽的最好基质是珍珠岩:蛭石（2:1）;黄独试管苗移栽时最佳的PP₃₃₃质量浓度是50 mg/L。结论首次成功建立了黄独脱毒苗的快繁技术,为黄独脱毒苗的工厂化生产奠定了技术基础。]]> 2014/12/22 11:15:07 2043true 目的研究川芎药材的质量控制方法。方法采用高效液相色谱建立了川芎药材的HPLC的指纹图谱,收集了不同批次的23批样品进行测定,并使用聚类分析和主成分分析对指纹图谱进行了模式识别研究。结果建立川芎药材的指纹图谱。结论该方法可用于川芎质量控制及综合评价。]]> 2014/12/22 11:15:07 2042true 目的研究并建立不同产地马鞭草药材的指纹图谱,为科学评价与有效控制马鞭草药材质量提供新的方法。方法色谱柱为Diamonsil^TM C₁₈柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,流动相为乙腈-0.05%磷酸水进行梯度洗脱,柱温为30℃;检测波长为265 nm,体积流量1.0 mL/min。结果建立了不同产地马鞭草药材HPLC-PDA指纹图谱共有模式,标定20个共有峰。并对12批不同产地马鞭草药材进行了相似度比较,8批马鞭草药材的相似度均在0.9以上,4批马鞭草药材相似度在0.8～0.9。结论本方法操作简便、快速、准确,可作为马鞭草药材的鉴别和质量控制方法。]]> 2014/12/22 11:15:07 2041true 目的对我国当归不同产地的药材质量进行分析与综合评价。方法采集2008年我国各主产区传统采收期的25批次当归药材样品,采用HPLC法、UV法测定当归药材中总挥发油、藁本内酯、正丁烯基酜内酯、阿魏酸、总多糖的量;运用主成分分析法对当归多指标进行综合评价。结果岷归、云归、川归、窑归的多指标成分比较分析与综合评价,以甘肃产岷归质量为优;主成分分析中藁本内酯的因子载荷量最大,说明其对当归质量的影响较为显著。结论基于我国不同产地当归药材质量的分析评价,建立了较为系统、客观的多成分类型多指标现代分析评价体系,为药材地道性科学内涵的揭示提供了依据和方法学参考。]]> 2014/12/22 11:15:07 2040true 目的测定不同产地柴胡中柴胡总皂苷及柴胡皂苷a的量。方法采用可见分光光度法和高效液相色谱法。结果不同产地北柴胡药材中的柴胡总皂苷和柴胡皂苷a的量差异较大,且两者差异不一致。但其柴胡总皂苷的量各产地药材均在1.3%～3.0%。结论分析结果表明,同一药材中柴胡总皂苷的量与柴胡皂苷a的量高低不一致未显示出相关性。为此,在评价药材的质量时,应以柴胡总皂苷量为主,兼顾其柴胡皂苷a的量为宜。]]> 2014/12/22 11:15:08 2039true 目的对白花丹参种质资源进行遗传改良,拟创造出白花丹参同源四倍体新种质。方法对未成熟种子,采用组织培养方法,用秋水仙碱进行诱变处理。结果获得了17株同源四倍体,其中一株为四倍体非整倍体。经种植观察,四倍体白花丹参在株高、冠幅、叶片大小、叶片厚度、叶柄绒毛、花、花药、花粉粒大小等方面都明显大或高于原二倍体白花丹参;每株根条数和根粗与倍性成正相关,根部药材产量四倍体株系间虽有显著差异,但多数株系都高于二倍体对照,其中4～5号四倍体单株根部药材产量是二倍体白花丹参的3.19倍;丹参多酚酸、丹参酮等主要药物成分也都高于二倍体对照。结论四倍体白花丹参新种质在丹参遗传改良和多倍体杂种优势利用方面具有重要应用价值。]]> 2014/12/22 11:15:08 2038true 目的研究黄芩愈伤组织中多酚氧化酶活性变化规律及其与黄芩苷次生合成之间的关系。方法采用紫外分光光度法测定多酚氧化酶活性,采用高效液相色谱法测定黄芩苷的量。研究不同添加物(抗坏血酸、氯化钠、苯甲酸、聚乙烯吡咯烷酮、硫酸铜)对多酚氧化酶和黄芩苷量的影响。结果在黄芩愈伤组织生长周期的前20d,黄芩苷基本没有合成,多酚氧化酶的活性低水平表达;20～35d,黄芩苷大量合成,多酚氧化酶的活性有所降低,但降低趋势较小;35～50 d,多酚氧化酶活性高水平表达,黄芩苷次生合成受到抑制。结论多酚氧化酶的高水平表达不利于黄芩苷的次生合成,抗坏血酸、氯化钠、苯甲酸等均可抑制多酚氧化酶的活性,促进黄芩苷次生合成,其中以添加0.02%的抗坏血酸效果最为明显,可使黄芩苷的量提高17.6%(82.3 mg/g),而聚乙烯吡咯烷酮、硫酸铜对多酚氧化酶的活性有着明显的促进作用,抑制了黄芩苷的积累。]]> 2014/12/22 11:05:44 2037true 目的通过对峨眉野连种子形态和萌发生理的研究,找到打破种子休眠、提高种子萌发率的最佳条件。方法观察种子外观形态,对峨眉野连种子长宽、千粒质量、含水量、吸水率、生活力和萌发等多项生理指标进行测定,考察不同温度、不同激素质量浓度对种子萌发率的影响。结果TTC（四氮唑）染色法测得的种子的生活力低,仅为56%。空粒和无生活力的种子占44%,表明峨眉野连发育完全的种子较少。种子的吸水实验表明种皮透水性较好,完全吸水时间仅为6h,从而可以判断,种皮不可能是萌发率过低的制约因素。萌发实验显示,4℃是种子较为适宜的萌发温度,发芽率可达到54.43%。5.0 mg/L的GA₃（赤霉素）处理后的萌发率提高最为显著,可达73.48%,但是过高质量浓度（7.5 mg/L）的GA₃则对种子萌发有一定的抑制效应。结论种子生活力较低,且种子休眠,这可能是导致其萌发率低的重要原因。峨眉野连种子在不同温度和不同质量浓度的激素处理下存在着很大的差异,为其人工栽培生产提供了理论依据。]]> 2014/12/22 11:05:44 2036true 目的探讨不同氮磷钾配比施肥处理对白芨产量和多糖的影响。方法通过大田试验,采用不同氮（N）、磷（P₂ O₅）、钾（K₂O）配比施肥,考察施肥对白芨产量和多糖的影响。结果每公顷施N 180kg、P₂O₅105～157.5 kg、K₂O 45～135 kg能极显著提高白芨块茎中多糖的积累,而氮磷钾施用量过高或过低则不利于白芨多糖的积累;每公顷施N 90～180 kg、P₂O₅105～157.5 kg、K₂O 45～135 kg能明显提高白芨产量。结论在肥料3因素中,磷肥供应的多少对白芨块茎多糖的量影响最大,钾对多糖量的影响最小;氮磷钾对白芨蛋白质的量影响大小为钾素>磷素>氮素;氮肥对产量的影响最大,其次是磷肥,钾肥的供应对白芨产量的影响最小。]]> 2014/12/22 11:05:44 2035true 目的为佛手种质资源的保存提供一条新途径。方法对佛手茎尖进行了玻璃化超低温保存,并对保存后的茎尖进行微嫁接试验,获得再生植株。结果佛手茎尖在含5%DMSO和5%蔗糖的MS培养基上预培养48h后,切取3～4 mm的茎尖,室温（25℃）下装载液（60%PVS₂）预处理30 min,0℃下玻璃化液PVS₂处理80 min,投入液氮保存24 h后取出,在40℃水浴快速化冻,室温下分别用1.2 mol/L蔗糖和MT基本培养基洗涤2次,每次10 min。保存后的茎尖经TTC法检测,成活率达81.25%;将茎尖嫁接到黑暗培养基的砧木上,再生率可达52.94%,且再生植株生长和分化正常,经PCR检测不含黄龙病病原。结论玻璃化超低温保存方法可用于佛手种质资源保存。]]> 2014/12/22 11:05:45 2034true 目的研究白芍药材的质量控制方法。方法采用高效液相色谱建立了白芍药材的HPLC的指纹图谱,收集了不同批次的47批样品进行测定,并使用聚类分析和主成分分析对指纹图谱进行了模式识别研究。结果主成分分析和聚类分析结果一致,样品分为药材和饮片两类。结论该方法可用于白芍质量控制及综合评价。]]> 2014/12/22 11:05:45 2033true 目的建立黄芪中20种有机氯和拟除虫菊酯类农药的检测方法。方法采用基质固相分散-气相色谱法(MSPD-GC),色谱柱为PH-5石英毛细管柱(30 m×0.25 mm×0.25μm);柱温(程序升温):150℃为起始温度,以5℃/min升至250℃,保持1 min,再以2℃/min升至270℃,保持5 min;进样口温度:230℃;ECD检测器温度:280℃;载气为氮气,测定黄芪中20种有机氯和拟除虫菊酯类农药残留量。结果有机氯和拟除虫菊酯类农药分别在5～500、10～1 000μg/L呈良好线性关系,r为0.9979～0.9997。平均回收率(n=9)为83.6%～110.3%(RSD<10%)。结论该方法操作简便快速,可作为中药材中有机氯和拟除虫菊酯类农药残留的测定方法。]]> 2014/12/22 11:05:45 2032true 目的研究油松节药材中α-蒎烯的测定方法,分析不同产地样品的量。方法采用溶剂超声提取样品、气相色谱法[HP-5弹性毛细管柱(0.32 mm×30.0 m×0.25μm)]测定油松节药材中α-蒎烯的量。结果α-蒎烯在0.01～10.0 mg/mL呈良好线性关系,r=0.999 9,平均回收率为99.7%;20批样品中α-蒎烯的平均质量分数为0.46%。结论本方法简便、准确,可用于油松节的质量控制。]]> 2014/12/22 11:05:45 2031true 目的建立同时测定返魂草药材中氢醌、绿原酸和咖啡酸量的RP-HPLC方法。方法返魂草药材先以15%乙醇回流提取,再用醋酸乙酯-丙酮（50:1）萃取后,采用Diamonsil C₁₈色谱柱（200 mm×4.6 mm,5μm）分离,以乙腈和含0.4%磷酸、0.1%三乙胺的水溶液为流动相,进行梯度洗脱,体积流量为0.8 mL/min,检测波长为286nm（氢醌）和326 nm（绿原酸和咖啡酸）。结果氢醌、绿原酸和咖啡酸的质量浓度分别在5.00～30.0、15.0～90.0、2.50～15.0μg/mL与峰面积呈良好的线性关系,回收率分别为96.3%、95.1%、97.8%,RSD分别为2.1%、2.4%、2.2%。结论该方法可用于返魂草药材的质量控制。]]> 2014/12/22 11:05:45 2030true 目的运用高效液相色谱法对不同产地山楂、夏枯草、冬凌草、柿蒂和连翘中熊果酸的量进行测定。方法采用高效液相色谱法,色谱柱:Kromasil C₁₈（200 mm×4.6 mm,5μm）;流动相:乙腈-水-乙酸胺（69:31:0.6）;体积流量:1 mL/min;检测波长:215 nm。结果对比不同产地的5种药材,连翘中熊果酸的平均质量分数最高,达0.237%;山楂、夏枯草、柿蒂稍低,平均质量分数分别为0.180%、0.158%、0.212%;冬凌草最低,为0.124%。结论本方法简便、准确、重现性好,可作为中药材中熊果酸的定量测定方法。]]> 2014/12/22 11:05:45 2029true 目的为了更加科学、准确地控制中药桔梗的质量,建立了同时测定桔梗中去芹糖桔梗皂苷D与桔梗皂昔D量的反相高效液相色谱法。方法桔梗用70%乙醇超声提取,采用Hypersil ODS2色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),乙腈-水为流动相,体积流量1.0 mL/min;检测波长210 nm,柱温30℃,以外标法检测。结果去芹糖桔梗皂昔D与桔梗皂苷D可以达到基线分离,平均回收率分别为97.81%和98.22%。结论首次报道了反相高效液相色谱同时测定桔梗中去芹糖桔梗皂苷D与桔梗皂苷D的定量测定方法,该方法操作简单,结果稳定可靠,可作为中药桔梗的质量控制依据。]]> 2014/12/22 11:05:45 2028true [1]。]]> 2014/12/22 11:05:45 2027true [1]。20世纪70年代,红景天才逐渐成为我国中医的较常用药物,并为1977年版《中国药典》所收录。]]> 2014/12/22 11:05:45 2026true 2014/12/22 10:52:21 2025true 2014/12/22 10:52:21 2024true 2014/12/22 10:52:21 2023true 2014/12/22 10:52:21 2022true 2(250mm×4.6mm，5μm)，流动相:乙腈-水梯度洗脱，柱温:室温，体积流量:1.2mL/min，以蒸发光散射检测器(ELSD)检测，检测条件:漂移管温度100℃，N2气流速度2.2L/min，He在线脱气，气流速度20mL/min。使用计算机辅助相似度评价软件进行数据处理。对不同产地的巴戟天药材指纹图谱的相似度进行比较分析。结果除两批外，其余8批巴戟天与系统生成对照指纹图谱的相似度均在0.94以上，归纳出巴戟天13个共有峰。通过与对照品的保留时间比较，1、2号峰分别为D-果糖、蔗糖。不同产地巴戟天药材中糖类化合物化学组成相似，但相对比例有明显的差异。结论所用方法稳定、重现性好，可突出巴戟天药材的内在质量特征，为更好地控制巴戟天的内在质量提供了科学依据。]]> 2014/12/22 10:52:21 2021true 5培养基主要成分对云南红豆杉Taxusyunnanensis细胞生长和产生10-去乙酰巴卡亭Ⅲ的影响。方法利用植物组织培养技术结合HPLC分析手段，通过改变B₅培养基中CaCl₂、NaH₂PO₄、(NH₄)2SO₄和KN0₃的质量浓度，研究其对云南红豆杉细胞生长及10-去乙酰巴卡亭Ⅲ量的影响。结果试验组与对照品相比，B₅培养基中高质量浓度的NaH₂PO₄能够显著促进云南红豆杉细胞生长，CaCl₂、(NH₄)2SO₄和KN0₃浓度对细胞生长无显著影响，B₅培养基中低质量浓度的CaCl₂、NaH₂PO₄、(NH₄)2SO₄和KN0₃能够显著促进10-去乙酰巴卡亭Ⅲ合成与释放。结论B₅培养基中NaH₂PO₄为300mg/L时，能够显著促进云南红豆杉细胞生长，细胞生长量是对照的1.2倍，CaCl₂、(NH₄)2SO₄和KN0₃分别在75~300、134~268和2500~5000mg/L对细胞生长无显著影响，B₅培养基中CaCl₂、NaH₂PO₄、(NH₄)2SO₄和KN0₃的质量浓度分别为75、75、33.5、625mg/L时，能够显著促进细胞中10-去乙酰巴卡亭Ⅲ合成与释放，10-去乙酰巴卡亭Ⅲ的量分别是对照的1.5、1.4、2.4倍。]]> 2014/12/22 10:52:21 2020true 2014/12/22 10:52:22 2019true 2014/12/22 10:52:22 2018true 2014/12/22 10:52:22 2017true 2014/12/22 10:52:22 2016true 2014/12/20 14:57:43 2015true (250 mm×4.6 mm, 5.0μm);流动相为乙腈-0.1%甲酸水溶液梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;柱温25℃;检测波长为254 nm(指纹图谱), 220 nm。结果建立了土木香药材的指纹图谱, 同时测定了15批药材中土木香内酯及异土木香内酯的量。结论方法稳定可靠, 重现性和精密度良好, 可作为土木香药材的指纹图谱及主成分测定的方法, 为该药材的标准化种植及质量控制提供科学依据。]]> 2014/12/20 14:57:43 2014true 2014/12/20 14:57:43 2013true 18色谱柱(250 mm×4.6 mm, 5μm), 以乙腈-0.4%磷酸水溶液(61:39)为流动相, 242 nm为检测波长, 柱温25℃, 体积流量1.0 mL/min, 高效液相色谱法测定去氢硫色多孔菌酸的量。结果阿里红中总三萜酸在0.040 4~0.242 4 mg/mL呈良好的线性关系(r=0.998 9), 加样回收率均值为98.56%。HPLC法测定去氢硫色多孔菌酸在0.022 3~0.133 7 mg/mL线性关系良好(r=0.999 7), 加样回收率均值为100.68%。结论两种方法均操作简便, 重现性好, 结果可靠, 适用于阿里红药材中三萜成分的质量控制。]]> 2014/12/20 14:57:43 2012true 2014/12/20 14:57:43 2011true Taxus chinensis细胞悬浮培养中蔗糖、柠檬酸三铵、水杨酸和氨基酸前体组合对细胞生长和紫杉醇(taxol)积累的影响。方法采用L_{9M/sub>3⁴设计试验, 考察了第9天添加蔗糖(10、16、22 g/L)、柠檬酸三铵(0、154、1 540 mg/L), 第21天添加蔗糖(20、260、g/L)和不同时间组合添加水杨酸及氨基酸前体4个因素对红豆杉细胞悬浮培养和紫杉醇合成的影响。结果当在细胞培养的第0天添加1.67 mg/L硝酸银, 第9天添加10 g/L蔗糖, 第9天添加1 540 mg/L柠檬酸三铵, 紫杉醇达到最高, 在此最优组合处理时紫杉醇质量浓度达到39.2 mg/L, 相对于最差组合处理的(2.1 mg/L)时提高18.7倍。结论促进剂组合对中国红豆杉细胞悬浮培养的生长和紫杉醇的合成都有很明显的影响。]]>} 2014/12/20 14:57:43 2010true 2014/12/20 14:57:43 2009true 2014/12/20 14:57:42 2008true 2014/12/20 14:57:42 2007true 2014/12/20 14:57:42 2006true Nothapotyes pittosporoides中的喜树碱进行组织学定位, 并测定不同产地、不同生长季节和不同部位的马比木中喜树碱的量。方法采用荧光显微技术进行喜树碱的定位, 高效液相色谱法进行测定。Hypersil ODS₂色谱柱(250 mm×4.6 mm, 5μm), 以乙腈-水(6:4)为流动相梯度洗脱, 体积流量1.0 mL/min, 柱温20℃, 检测波长254 nm。结果马比木中喜树碱主要积累于根部和茎部的韧皮部的分泌细胞内;喜树碱的量具有季节性变化规律, 夏季低, 春秋高;细根中喜树碱的量最高, 主根次之, 主茎、幼茎及叶的量依次递减。结论马比木喜树碱主要贮藏于根部树皮内, 不同产地、不同季节、不同部位的马比木植物中的喜树碱量差异较大。]]> 2014/12/20 14:57:43 2005true 目的阐明不同种源人参的遗传关系。方法用ISSR分子标记研究来自人参主要分布区17个种源样本。结果从100个ISSR引物中筛选出10个条带清晰、多态性高的引物,共扩增出95条带,其中80条带为多态性位点,多态性条带比率(PPB)为84.21%,通过聚类分析,可将17个人参种源聚为4类。结论分子标记研究结果与人参的形态性状存在显著的相关性,较好地揭示了人参种源间的遗传关系,可为人参资源保育和良种选育提供科学依据。]]> 2014/12/20 14:16:45 2004true 目的研究林荫银莲花Anemone flaccida组织培养技术,为保护与合理利用这一珍稀中药资源提供新的方法和技术途径。方法筛选适合组织培养的最佳外植体,并研究不同植物生长调节物质对林荫银莲花愈伤组织诱导和芽分化的影响。结果在MS培养基中添加2.0 mg/L 6-BA和1.0 mg/L NAA,在温度17℃条件下培养有利于愈伤组织诱导和芽的分化生长健壮的芽为最佳外植体,其愈伤组织诱导率可达85.7%,且易分化形成不定芽和拟球茎在1/2 MS+0.2 mg/L NAA培养基上,5℃条件下培养,再生拟球茎和不定芽生根良好。结论本研究为林荫银莲花种苗繁殖提供了有效途径,为其人工扩大栽培奠定了良好基础。]]> 2014/12/20 14:16:45 2003true 目的研究山楂叶HPLC指纹图谱与其抗超氧阴离子(O^2-)活性之间的相互关系。方法以山楂叶对超氧阴离子的清除活性为评价指标,分别对5种不同山楂叶HPLC指纹图谱的各指纹峰进行药效实验,建立各指纹峰峰面积与抗超氧阴离子活性之间关系(峰效关系)的数学模型,再通过数学、化学计量学、计算机编程与模拟等手段将山楂叶的HPLC指纹图谱翻译成生物活性指纹图谱(包括药效指纹图谱和效价指纹图谱)。结果建立了山楂叶的质量评价新模式,该模式预测值与实际值r=0.846(P<0.05)5个样品预测值均为实际值的70%以上。结论该模式是融化学鉴定与生物活性评价为一体的综合质量评价体系,弥补了已有中药质量评价模式的局限性,为中药现代化研究提供了一条新的思路。]]> 2014/12/20 14:16:45 2002true 目的克隆北柴胡皂苷生物合成途径关键酶异戊烯基焦磷酸异构酶(EC 5.3.3.2,isopentenyl diphosphate isomerase,IPPI)的全长cDNA,为研究柴胡皂苷的生物合成与基因调控奠定基础。方法 PCR矩阵法快速筛选北柴胡全长cDNA文库。结果获得了北柴胡IPPI的全长cDNA(GenBank No.gq433719),其核苷酸序列长1 117bp,编码319个氨基酸的蛋白。NCBI Blastx结果显示与胡萝卜Daucus carotasubsp.sativus(abb52064)的IPPI氨基酸序列相似性最高,一致性为92%,相似度为97%。保守结构域搜索显示含有IPPI共有的催化活性位点、金属结合位点及Nudix基序。TargetP1.1和SignalP3.0分析表明北柴胡IPPI N端含有长26 bp的叶绿体信号肽。结论首次克隆了北柴胡IPPI的全长cDNA,将促进后续北柴胡IPPI基因表达特性及其在柴胡皂苷合成代谢中功能的研究。]]> 2014/12/20 14:16:45 2001true 目的应用HPLC和TLC建立披针叶黄华种子中金雀花碱的定量和定性分析方法。方法采用超声提取的方法获得样品,分别采用TLC和HPLC对披针叶黄华种子中的金雀花碱进行定性鉴别和定量测定。结果 TLC采用碱性硅胶为固定相,以苯-丙酮-醋酸乙酯-甲醇(4∶2∶1∶1)为展开剂,可清晰检出金雀花碱斑点HPLC分析中,金雀花碱在0.04～1.2 mg/mL与峰面积呈良好的线性关系。结论本方法样品处理快速简便,定性与定量分析分离效果好,准确、快速、干扰少,可用于披针叶黄华种子原料和金雀花碱产品的质量控制。]]> 2014/12/20 14:16:46 2000true 目的测定不同采收期栽培藏木香中土木香内酯和异土木香内酯的量,确定最佳采收期,为提高药材质量提供依据。方法采用HPLC法,色谱柱为XDB-C18(150 mm×4.5 mm,5.0μm),流动相为乙腈-0.01%醋酸水溶液(55∶45),检测波长202 nm,体积流量1.0 mL/min,柱温30℃。结果栽培藏木香在不同采收期土木香内酯和异土木香内酯的总量不同,9月份的量最高。结论藏木香的最佳采收期为9月份。]]> 2014/12/20 14:16:46 1999true 目的建立同时测定小果博落回中7种生物碱的高效液相色谱法。方法采用高效液相色谱法,色谱柱为Waters XBridge C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相:(A)乙腈,(B)0.5%三乙胺缓冲液(磷酸调pH=2.5),梯度洗脱,体积流量0.8 mL/min,进样量5μL,柱温35℃,检测波长284 nm。结果 7种生物碱均能达到良好的分离,原阿片碱、别隐品碱、血根碱、小檗碱、白屈菜红碱、二氢白屈菜红碱、二氢血根碱的线性范围分别为0.11～22.0、0.424～84.7、0.433～86.6、0.380～75.9、0.498～99.6、0.523～104.5、0.508～101.5μg/mL平均回收率分别为97.8%、97.0%、98.9%、102.2%、98.6%、101.8%、102.9%。结论本方法操作简便、准确、灵敏度高,为该类药材资源的质量评价提供了一定的科学依据。]]> 2014/12/20 14:16:46 1998true 目的建立气相色谱法测定山蜡梅叶中桉油精和芳樟醇的方法。方法气相色谱法,DB-WAX石英毛细管柱(30.0 m×250μm,0.25μm),FID检测器,进样口温度:230℃,检测口温度250℃,体积流量1 mL/min,分流:20∶1,程序升温:起始温度60℃,保持5 min,以25℃/min升至200℃,保持2 min。结果桉油精在0.015 7～0.393 6 mg/mL与峰面积比值(桉油精/环己酮)呈良好的线性关系,回归方程为Y=13.659X+0.066 5,r=0.999 8,平均回收率为98.29%,RSD为1.53%芳樟醇在0.009 5～0.236 6 mg/mL与峰面积比值(芳樟醇/环己酮)呈良好的线性关系,回归方程为Y=13.526X+0.016 6,r=0.999 6,平均回收率为98.55%,RSD为1.96%。结论采用气相色谱法对山蜡梅叶中桉油精和芳樟醇进行定量测定,方法简便、快速、准确、重现性好。]]> 2014/12/20 14:16:46 1997true 目的研究GC法测定不同产地的地枫皮药材中芳樟醇的量。方法色谱柱:聚乙二醇弹性石英毛细管柱(30 m×0.53 mm,1μm),程序升温进样口温度230℃,检测器温度230℃。结果芳樟醇在0.02～0.25μg线性关系良好,r=0.999 4。平均加样回收率为100.5%,RSD为2.2%。结论本法简单易行,方法学验证符合要求,可作为地枫皮药材中芳樟醇的定量测定方法。]]> 2014/12/20 14:16:46 1996true 目的揭示并健全西红花的真伪优劣检定方法,特别是经验法。方法根据《中国药典》和药籍文献记载等资料,再结合药品市场现状和笔者实际工作经验阐明及论证。结果最容易混淆的菊科植物红花与西红花区别较大其他混杂优劣可增加经验法判定。结论西红花应严格检定真伪优劣,市场混乱现象亟需整肃。]]> 2014/12/20 14:16:46 1995true 目的 利用AFLP技术分析香鳞毛蕨种质资源多样性。方法 对46个香鳞毛蕨个体进行AFLP分析,利用NTSYS-PC 2.10、PopGene32软件分析各居群的遗传多样性。结果 香鳞毛蕨居群多态位点百分率(PPB)为76.67%;观测等位基因数(N_a)为1.766 7,有效等位基因数(N_e)为1.504 6,Ne′is基因多样性指数(H)为0.292 1,Shannon信息指数(I)为0.431 6;遗传分化指数(G_st)为0.412 5。结论 香鳞毛蕨遗传多样性较高。群体内的基因多样性(H_s)为0.170 5,群体间的基因多样性(D_st)为0.119 8,且由于生境特殊性,对香鳞毛蕨资源应采取就地保护策略。]]> 2014/12/20 14:01:50 1994true 目的 建立吴茱萸的RAPD分子标记技术并对吴茱萸的道地性遗传背景进行探讨。方法 应用试剂盒法提取吴茱萸基因组DNA;筛选RAPD引物;对全国3个省市5个吴茱萸产区采取的48份样品进行RAPD分子标记,应用NTSYS-PC软件进行聚类分析。结果 获得了吴茱萸的RAPD分子标记方法;通过对RAPD扩增结果进行聚类分析,发现不同品种吴茱萸差异较大,浏阳地区的吴茱萸和其他石虎品种在相似度系数为0.68时聚集为两个类群;而同一品种的石虎遗传背景差异明显,在相似度系数为0.78时,铜仁、浏阳、建德、温州的样品各自聚集在相同地域的族群。结论 吴茱萸遗传背景差异明显,RAPD技术是一种可用于吴茱萸道地性遗传背景分析的有效手段。]]> 2014/12/20 14:01:50 1993true 目的 研究佛手及属间药用植物化橘红、广陈皮的亲缘关系,同时建立了HPLC指纹图谱。方法 运用HPLC法对佛手同属的3种药用植物进行测定,对其进行主成分分析及聚类分析,实现了预分类,制定了原料药材的选择方法。结果 测定了样本的HPLC的色谱峰,从获得的17个不同产地的佛手药材的HPLC指纹图谱比较,结果从检测出17个分离度良好的共有指纹峰可以看出它们之间的相似性良好,说明佛手这一植物所含的化学成分分布及比例较稳定;使用SPSS分析软件,采用欧氏距离进行聚类分析,样品的聚类结果理想,19个样本可聚为8类,即样本1、7~10和15处于一类,样本2和3处于一类,样本4、14、16和17处于一类,样本5、6和11处于一类,样本12和样本13分别单独处于一类,而同属药用植物化橘红(样本18)和广陈皮(样本19)分别单独处于一类,可较明显地与佛手样品区分。结论 将佛手及其属间3种药用植物的中药指纹图谱及主成分聚类分析相结合,丰富了中药鉴定的理论内容。]]> 2014/12/20 14:01:51 1992true 目的 研究土壤因子对川白芷药材产量和品质的影响。方法 对川白芷道地产区四川省遂宁市15个不同采集地的川白芷药材产量性状、欧前胡素和异欧前胡素的量,以及相应生长地土壤基本养分和其他11种无机元素进行测定,通过相关分析研究土壤环境对川白芷产量及品质的影响。结果 不同采集地川白芷的根质量、根长和周径以及欧前胡素和异欧前胡素量间均存在差异,其相应不同生长地土壤间基本养分和其他11种无机元素量也存在差异。川白芷根长与土壤有效磷的量、周径与土壤有机质的量、根质量与土壤有效磷及速效钾的量间均呈显著正相关。土壤全氮则与川白芷异欧前胡素的量间呈显著负相关。川白芷欧前胡素和异欧前胡素的量与土壤中其他11种无机元素的量间相关均不显著。结论 土壤环境对川白芷产量及品质均有一定影响。]]> 2014/12/20 14:01:51 1991true 目的 以手参茎尖为外植体,研究手参体细胞胚胎发生体系。方法 应用均匀设计法筛选其最适合的胚性愈伤组织及胚性细胞复合体诱导、体细胞胚胎发育及植株再生的培养基。结果 手参茎尖胚性愈伤组织及胚性细胞复合体诱导最适宜的培养基为:CM+6-BA 1.0 mg/L+IAA 2.0 mg/L+2,4-D 0.1 mg/L,诱导率为98%;体胚发育及植株再生最适宜的培养基为:CM+6-BA 1.00 mg/L+IAA 0.10 mg/L,体胚萌发率为100%,萌发的体胚在发育培养基上继续培养50 d后全部发育成完整植株。结论 对不同阶段培养材料的形态结构及超微结构的观察证明了手参体细胞胚胎的发育过程。]]> 2014/12/20 14:01:51 1990true 目的 三七的根部颜色、茎杆颜色、复叶柄弯曲程度、复叶数、根形、叶形、茎数存在不同的变异类型,分析它们对皂苷量的影响,为三七育种确定选育目标。方法 在云南文山的6个三七产区采样289份,逐一标记植株变异类型,用HPLC法测定人参皂苷Rg₁、Rb₁和三七皂苷R₁共3个单体皂苷,在同一立地条件、同一栽培措施的基础上,对比分析7种不同变异类型对三七皂苷量的影响。结果 紫根、复叶柄平展型、长形根、宽叶等4种变异类型三七的皂苷量高,双茎三七的皂苷量低于单茎三七,三七的茎杆颜色及复叶数的多少对皂苷积累无规律性。结论 紫根三七、复叶柄平展型三七、长形根三七、宽叶三七4种变异类型三七可以作为优质三七品种选育的目标。]]> 2014/12/20 14:01:51 1989true 目的 以三白草酮和里卡灵A为指标,建立三白草质量标准。方法 采用薄层色谱法(TLC)为定性鉴别方法;HPLC法测定其中三白草酮和里卡灵A量。结果 三白草酮在80.32~803.2 ng呈良好的线性关系:Y=25 668X+19.71,R²=0.999 9;里卡灵A在40.24~402.4 ng呈良好的线性关系:Y=57 825X+42.35,R²=0.999 5。三白草酮平均回收率为100.8%,RSD为2.13%,里卡灵A平均回收率为100.5%,RSD为2.57%。结论 建立的方法简便、准确、可靠,可作为三白草质量控制方法。]]> 2014/12/20 14:01:51 1988true 目的 分析全国不同产地丹参中脂溶性成分量的变化情况及其地域分布特点。方法 采用HPLC法测定不同产地丹参脂溶性成分的量,运用SAS统计软件分析丹参脂溶性成分相关性及其地域分布特点。结果 回归分析表明,丹参药材中丹参酮Ⅱ_A量与二氢丹参酮Ⅰ量呈负相关,与其他两种呈正相关。聚类分析表明,3个野生药材与山东和河南大部分产地、四川中江集凤镇栽培药材脂溶性成分较高聚为一类。建议丹参药材中二氢丹参酮Ⅰ≥0.02%,丹参酮Ⅰ≥0.03%,隐丹参酮≥0.02%,丹参酮Ⅱ_A≥0.2%。结论 丹参的脂溶性成分呈现地域性差异,传统道地产区的量较高。丹参药材中二氢丹参酮Ⅰ≥0.045%,丹参酮Ⅰ≥0.12%,隐丹参酮≥0.10%,丹参酮Ⅱ_A≥0.35%,才能符合历史上药用的要求。]]> 2014/12/20 14:01:27 1987true 目的 研究植物外源激素赤霉素(GA₃)和吲哚乙酸(IAA)对丹参生长和丹参酮类物质积累的影响。方法 采用温室石英砂盆栽试验与室内分析相结合的方法。结果 单独施用GA₃有利于丹参地上部分生物量的增加,但对地下部分生物量表现一定抑制作用;施用低浓度和高浓度GA₃均有利于3种丹参酮(隐丹参酮、丹参酮Ⅰ、丹参酮Ⅱ_A)的累积,施用中等浓度GA₃则不利于3种丹参酮的累积。单独施用IAA对丹参地上部分和地下部分生物量的影响呈现先升后降趋势,但统计学差异不显著,且对株高、根长的影响亦不显著;总体来看,施用低质量浓度IAA(0.5mg/L)有利于丹参根中3种丹参酮的累积,但随着IAA处理浓度增加,仅隐丹参酮量有所增加,而丹参酮Ⅰ和丹参酮Ⅱ_A量反而下降。两种激素配施时,低浓度GA₃与低浓度IAA组合处理对丹参的生长表现出显著促进作用,并能显著提高丹参根中3种丹参酮的量。结论 施用适量的植物外源激素GA₃和IAA能够促进丹参的生长和丹参根中3种丹参酮类物质的积累。]]> 2014/12/20 14:01:27 1986true 目的 研究芫花药材的高效液相色谱指纹图谱。方法 采用RP-HPLC法。色谱柱:Kromasil C₁₈(250mm×4.6mm,5μm),流动相:甲醇-0.05%磷酸水,梯度洗脱,体积流量:1.0mL/min,柱温:35℃,检测波长:238nm。结果 在色谱指纹图谱中,确立了其中21个共有峰,建立了芫花药材的共有模式,在19批芫花药材中有17批样品的指纹图谱相似度在0.90以上。结论 该方法简便、准确、重现性好,为评价芫花药材的质量提供了依据。]]> 2014/12/20 14:01:27 1985true 目的 建立龙胆药材的指纹图谱研究方法并进行聚类分析。方法 色谱柱为Shimadzu C₁₈(3.0mm×75mm,1.7μm);流动相:乙腈-0.4%磷酸(5.5:94.5),体积流量:0.8mL/min;检测波长:240nm;柱温为40℃。结果 獐牙菜苦苷、龙胆苦苷分别在0.1548～1.858mg/mL,0.322～5.152mg/mL呈良好的线性关系,平均回收率分别为102.09%,RSD=1.68%(n=6);103.80%,RSD=1.11%(n=6)。指纹图谱的精密度与重现性试验中的各色谱峰的相对保留时间与相对峰面积的RSD小于2.1%,指纹图谱相似度结果与聚类分析谱系图一致。结论 建立的指纹图谱适用于龙胆药材的标准化种植及质量控制。]]> 2014/12/20 14:01:27 1984true 目的 确定丹参种子的最适超干方法和不同贮藏时间内的最适超干水分,并探索耐藏机制。方法 用硅胶常温干燥法和恒温鼓风箱50℃干燥法将丹参种子干燥到不同的含水量后进行贮藏,通过测定种子发芽率、发芽势、活力指数等指标确定最适超干方法及超干水分;通过测定可溶性糖的量和MDA量来探索种子耐藏性。结果 采用硅胶脱水比用烘箱更安全;超干丹参种子在贮藏初期耐藏性优势明显,随着贮藏时间的延长,超干种子相对于对照的耐藏性优势下降;常温密封贮藏丹参种子的最适含水量约为7.5%;种子耐藏性与种子中可溶性糖量密切相关。结论 丹参种子可以采用超干贮藏方法来保存种质资源。]]> 2014/12/20 14:01:27 1983true 目的 研究蒺藜全草中甾体皂苷和总黄酮醇苷的量。方法 以蒺藜新苷为对照,采用紫外分光光度法测定甾体皂苷的量;以槲皮素、山柰酚、异鼠李素为对照,采用高效液相法测定总黄酮醇苷的量。结果 不同产地和采收期蒺藜全草中甾体皂苷和总黄酮醇苷的量有较大差异,蒺藜全草部位中以叶中量最高,果实量最低。结论 所建立的分析方法准确可行,可用于蒺藜药材质量控制;以期为蒺藜全草的资源利用及质量控制提供一定的科学依据。]]> 2014/12/20 14:01:27 1982true 目的 建立祖师麻药材定量测定方法。方法 采用高效液相色谱法。色谱柱为Phenomenex Luna C₁₈(250mm×4.6mm,5μm);流动相:甲醇-0.5%醋酸溶液(25:75);体积流量:1.0mL/min;检测波长:327nm;柱温:30℃;进样量:10μL。结果 祖师麻甲素在0.1467～2.2005μg线性关系良好(r=0.9999),平均回收率为100.88%,RSD为1.60%(n=6)。结论 本法操作简便、准确、重现性好,可用于祖师麻药材的质量控制。]]> 2014/12/20 14:01:27 1981true 目的 建立高效液相色谱测定不同产地莲子心药材中3种生物碱的方法。方法 采用高效液相色谱法,Polaris C₁₈-A色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),甲醇-0.1%三乙胺水溶液(62:38)为流动相,检测波长为282nm,体积流量为1.0mL/min。结果 3种生物碱平均回收率为莲心碱96.99%,异莲心碱104.26%,甲基莲心碱100.71%;RSD值分别为0.47%、0.21%、0.16%。结论 该方法简便、快速、准确、重现性好,可用于莲子心中3种生物碱的测定。]]> 2014/12/20 14:01:27 1980true 目的 研究建立江西道地药材山蜡梅叶的质量标准。方法 采用薄层色谱法建立芦丁和蜡梅碱的鉴别项,采用反相高效液相色谱法建立槲皮素、山柰酚、蜡梅碱的定量测定项。结果 首次建立了山蜡梅叶中芦丁和蜡梅碱的薄层鉴别方法,并首次采用高效液相色谱法建立了槲皮素、山柰酚、蜡梅碱的测定方法,平均回收率分别为96.55%、98.72%、99.02%。结论 建立的方法操作简便,专属性好,结果准确。]]> 2014/12/20 14:01:28 1979true 目的 利用SRAP和RAPD两种分子标记技术对9份石斛种质进行遗传多样性研究。方法 用40对SRAP引物组合和36个RAPD引物分别对供试石斛的基因组DNA进行扩增。结果 SRAP引物组合共扩增条带1977条,多态性比率为90.2%,遗传相似系数GS值变化范围为0.3302～0.7892。RAPD引物共扩增出281条带,多态性比率为87.1%,GS值变化范围为0.4942～0.7731。利用两种标记得到的聚类结果存在一定的差异,SRAP聚类结果与传统的基于形态特征建立的分类结果比较一致,较好地体现了供试品种的亲缘关系、地域特性。在9个石斛供试种间,SRAP的标记指数MI值(16.46)是RAPD标记MI值(3.67)的4.5倍,表明SRAP具有更大的标记效率。结论 两种标记皆可有效应用于该属植物种质资源的遗传多样性分析。而SRAP标记在石斛的遗传多样性与亲缘关系的研究中,则表现出了极大的优越性。]]> 2014/12/20 13:53:08 1978true 目的 解决丹参育种工作中的丹参种质资源的鉴别与分类。方法 利用SRAP分子标记技术对48个不同来源的丹参种质进行了遗传多态性的分析,并对其进行了类群的划分。结果 利用筛选到的15对SRAP引物组合从材料中检测到了120个等位位点。利用不加权成对群算术平均法(UPGMA)对丹参种质进行聚类分析可以将其分为两大类群,每一类群包含3个亚群。结论 不同丹参种群间遗传距离与空间距离之间的关系较为复杂,不同地区间丹参种质的遗传分化不均衡。随着丹参种质驯化程度的增加,种质间的遗传距离有所增加。]]> 2014/12/20 13:53:09 1977true 目的 研究碳源、氮源和金属离子对秦艽悬浮细胞生长及龙胆苦苷积累的影响。方法 测定不同浓度蔗糖和葡萄糖、不同NH₄⁺/NO₃^-比及Ca²⁺、Zn²⁺影响因素下细胞干质量和龙胆苦苷量。结果 有利于秦艽悬浮细胞生长及龙胆苦苷积累的培养条件为:3%蔗糖,NH₄⁺/NO₃^-为20/40,3mmol/LCa²⁺,0.00749mmol/L Zn²⁺。结论 不同碳源及其浓度对细胞生长及龙胆苦苷积累都有显著影响,高糖不利于龙胆苦苷的合成。NO₃^-对细胞生长来说,是一种比NH₄⁺更好的氮源。Ca²⁺对细胞生长和龙胆苦苷的量都有显著影响,Zn²⁺对细胞生长影响不明显,对龙胆苦苷量影响显著。]]> 2014/12/20 13:53:09 1976true 目的 研究人参根大量营养元素及氨基酸量的动态变化规律,探讨了氮(N)、磷(P)、钾(K)与总氨基酸的相互关系。方法 以吉林抚松人参栽培基地的2～6年生人参为材料,分别于2007年4～10月共7次采样,测定不同参龄不同生育时期人参根中3种大量营养元素及总氨基酸的量,分析其变化规律及各种大量营养元素与总氨基酸积累的相互关系。结果 2～6年生人参不同生育时期根中总氨基酸的变化规律基本相近,呈现出"急降缓升"的动态变化趋势。参根对大量营养元素的吸收表现为N>K>P,均呈现出"V"字型变化趋势;相关性分析表明:2、4年生的N与氨基酸呈显著正相关,2、3、6年生的P与氨基酸呈极显著正相关,2、3年生的K与氨基酸呈极显著正相关。结论 人参根大量营养元素与氨基酸密切相关。在生产实践中根据不同参龄与生育时期,结合营养元素的动态变化,为促进参根氨基酸的积累提供理论依据。]]> 2014/12/20 13:53:09 1975true 目的 通过对广金钱草药材的指标成分和指纹图谱的测定,结合其他定性指标来综合评测药材的质量。方法 建立药材指标成分及指纹图谱的HPLC/UV测定方法,对结果进行相关性分析。结果 常规外观鉴别和颜色检查与指标成分和指纹图谱判断结果不相关。结论 一个药材需要在总体理化定性的基础上,经过性状鉴别,结合指纹图谱相似性鉴别,最终通过指标成分的量化实现对药材的综合质量评价,这样才可以在整体质量上控制好药材。]]> 2014/12/20 13:53:09 1974true 目的 建立茯苓中茯苓酸的测定方法,比较不同菌种培育的茯苓中茯苓酸的量,为评价不同菌株培育茯苓的品质提供理论依据,从而确定优良菌种,控制茯苓资源品质。方法 采用反相高效液相色谱法(RP-HPLC),Kromasil 100-5C₁₈色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),柱温30℃,流动相为乙腈-0.2%甲酸(80:20),体积流量1.0mL/min,检测波长242nm。结果 茯苓酸在0.48～2.40μg与其色谱峰面积呈良好线性关系(r=0.9997),平均回收率100.26%,RSD为1.26%。不同菌种培育茯苓中茯苓酸的量有所差异。结论 该方法简便、专属、稳定,可用于评价不同菌种培育茯苓中茯苓酸量的研究。]]> 2014/12/20 13:53:09 1973true 目的 对紫背金盘进行生药学鉴定,为其鉴别及应用提供科学依据。方法 采用原植物鉴别,显微鉴别,薄层鉴别的方法。结果 紫背金盘在原植物,显微,薄层等具有专属性特征。结论 通过原植物,显微,薄层能够很好地鉴别紫背金盘。]]> 2014/12/20 13:53:09 1972true 目的 建立HPLC法测定12批不同产地广陈皮中5种活性黄酮的量。方法 采用超声法提取药材,通过对提取工艺及色谱条件进行优化建立测定方法,同时测定不同产地广陈皮中橙皮苷(1)、川陈皮素(2)、3,5,6,7,8,3',4'-七甲氧基黄酮(3)、橘皮素(4)和5-羟基-6,7,8,3',4'-五甲氧基黄酮(5)5种活性黄酮的量。结果 12批广陈皮中橙皮苷的量在38.021～70.735mg/g,均符合药典标准(≥35mg/g),其中,产于新会的广陈皮中橙皮苷的量低于广东其他两个产地(高要和龙门);另外,广陈皮中多甲氧基黄酮类成分的量以川陈皮素、橘皮素为高。结论 该方法简单、准确,其结果可为广陈皮质量标准的制定提供一定的依据。]]> 2014/12/20 13:53:09 1971true 2014/12/20 13:53:09 1970true 目的 研究不同产地的牛蒡种质与牛蒡子药材质量的相关性。方法 采用HPLC法测定药材中牛蒡苷与苷元的量,色谱柱为Agilent TC-C₁₈(250mm×4.6mm,5μm);流动相:甲醇-水(线性梯度洗脱:0min,水55%;10min,水46%;20min,水30%);体积流量:1.0mL/min;检测波长:280nm。在培养箱中进行牛蒡种子发芽实验,测定发芽势、发芽率等。并采用SPSS13.0进行相关性分析。结果 牛蒡子的千粒质量、发芽势、发芽率与药材中牛蒡苷量成极显著正相关,与牛蒡苷元的量成极显著负相关。结论 不同产地牛蒡种质与药材的质量具有显著相关性,为牛蒡子药材的质量评价提供参考。]]> 2014/12/20 13:53:09 1969true 目的 建立胡黄连药材中胡黄连苷Ⅰ和胡黄连苷Ⅱ的HPLC定量测定方法。方法 采用Dikma Diamon-silC₁₈柱(250mm×4.6mm,5μm),乙腈-水-冰醋酸(20:80:0.5)为流动相,体积流量:1.0mL/min,检测波长:275nm,柱温:25℃。结果 胡黄连苷Ⅰ对照品在0.09～1.88μg进样量与峰面积间呈良好的线性关系,r=0.9998,平均加样回收率为99.2%,RSD为1.50%(n=6);胡黄连苷Ⅱ对照品在0.16～3.2μg进样量与峰面积间呈良好的线性关系,r=0.9999,平均加样回收率为98.9%,RSD为1.81%(n=6)。结论 该方法操作简便,结果准确,重现性好,可用于胡黄连药材的定量测定。]]> 2014/12/20 13:53:09 1968true 2014/12/20 13:38:20 1967true 2014/12/20 13:38:20 1966true 2014/12/20 13:38:20 1965true 2014/12/20 13:38:20 1964true 2014/12/20 13:38:21 1963true 2014/12/20 13:38:21 1962true 2014/12/20 13:38:21 1961true 2014/12/20 13:38:21 1960true 2014/12/20 13:38:21 1959true 2014/12/20 13:38:21 1958true 目的研究白木香Aquilaria sinensis中次生代谢产物的生物合成。方法采用组织培养的方法诱导沉香色酮类化合物的产生,采用HPLC法进行诱导物的测定。结果从白木香离体侧根中诱导出2-(2-苯乙基)色酮化合物。结论黄绿墨耳真菌提取物能诱导白木香中沉香特征化合物的产生。]]> 2014/12/20 12:27:11 1957true 目的研究叶面喷施不同质量浓度锌对半夏叶片碳氮代谢及产量的影响,找出适宜半夏的锌肥施用浓度,为半夏的合理施肥及优质高产提供参考依据。方法半夏全苗期叶面喷施不同质量浓度的锌肥,10 d后测定叶片碳氮代谢相关生理生化指标,倒苗后统计产量。结果半夏产量与叶片碳代谢指标可溶性糖和淀粉量达极显著正相关,与光合色素量和醛缩酶活性显著正相关,与淀粉酶活性负相关;半夏产量与叶片氮代谢指标硝酸还原酶活性达极显著正相关,与可溶性蛋白量显著正相关。全苗期叶面喷施硫酸锌增加了半夏叶片光合色素的量、增强了叶片光合能力;同时,提高了醛缩酶活性,降低了淀粉酶活性,促使半夏叶片可溶性糖和淀粉的积累;此外,全苗期叶面喷施硫酸锌还提高了叶片硝酸还原酶的活性和可溶性蛋白的量,最终表现为半夏产量的提高。结论在半夏生产中以全苗期叶面喷施600 mg/L ZnSO4.7H2O为佳。]]> 2014/12/20 12:27:11 1956true 目的研究中国不同地理居群鱼腥草药材的遗传多样性。方法选取分布于我国13个省市的15个不同居群288份鱼腥草样本,进行AFLP分析,POPGENE及MEGA软件分析处理数据。结果通过筛选得到10对AFLP引物,扩增得到110条带,其中70.51%条为多态性条带;有效等位基因数为1.210,Nei′s多样性指数H为0.119,Shannon多样性指数I为0.186;15个居群遗传距离系数0.008 9~0.181 8;用MEGA软件进行UPMGA聚类分析,15个居群的鱼腥草材料被分为3个大分支。其中峨眉蕺菜最先与其他居群分开,表明它与其他居群之间的亲缘关系较远。其他2个大的分支按地域聚在一起。结论我国鱼腥草居群间存在较高多态性,遗传多样性较为丰富。]]> 2014/12/20 12:27:11 1955true 目的探讨不同秋水仙素浓度和不同处理时间诱导茴香多倍体的效果。方法采用种子浸泡法以不同秋水仙素浓度、不同处理时间诱导下的种子的萌发率和诱变率、胚根诱变体的外部形态、染色体数量、内部组织构造以及精油量和成分进行了比较。结果诱导液质量浓度为0.13%,处理时间为24 h时的诱导效果最好;诱导后的突变体胚根与对照相比,表现粗大、染色体数目明显增加、胚根的内部细胞数量明显增多、4种主要精油成分中除莳萝芹菜脑略低于对照外,柠檬酸、反式-茴香脑和莰烯3种成分均显著提高。结论秋水仙素诱导的突变体可以较大幅度地提高茴香主要精油成分的量,为茴香高精油量多倍体新品种的培育提供了依据。]]> 2014/12/20 12:27:11 1954true 目的研究《中国药典》2005年版收载蓼科大黄属3种大黄(唐古特大黄、掌叶大黄和药用大黄)的亲缘关系。方法对3种大黄44份样品进行AFLP分析,同时利用NTSYSpc-2.11F软件分析其亲缘关系。结果8对选择性扩增引物中,扩增得到1 255条稳定清晰的条带,其中多态性条带1 209条,多态性带占总带数的96.2%。将44份大黄样品分为2组2个亚组。四川若尔盖唐古特大黄聚为第一组,第二组分为两个亚组,分别为药用大黄和掌叶大黄。另外,大黄的AFLP分子标记谱带显示,3种大黄和不同来源的大黄样品间除了具有共有带外,还有一些特异带,说明种间甚至不同来源的样品间有一定程度的特异性。结论《中国药典》规定的3种正品大黄中,药用大黄和掌叶大黄亲缘关系较唐古特大黄近,表明利用AFLP技术分析3种大黄的亲缘关系可行。]]> 2014/12/20 12:27:12 1953true 目的建立河北道地药材连翘的HPLC-PDA指纹图谱,得到对照图谱,与不同产地、不同采收部位连翘药材指纹图谱相比较,并测定了各批药材中连翘苷和芦丁的量,为科学评价与有效控制连翘药材质量提供方法。方法色谱柱为DiamonsilTMC18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液进行梯度洗脱,柱温30℃,检测波长为235 nm,体积流量0.8 mL/min,定量测定中连翘苷与芦丁的检测波长分别为210和254 nm。结果建立了河北省连翘药材HPLC-PDA指纹图谱共有模式,对不同产地、不同采收部位药材进行了相似度比较,并结合定量测定结果对各批药材进行评价。结论本方法操作简便、快速、准确,为连翘药材的鉴别和全面质量控制提供了依据。另外,连翘叶和花中连翘苷和芦丁量非常高,对于叶和花能否替代果实或与果实合并用药有待于进一步研究。]]> 2014/12/20 12:27:12 1952true 目的优化杜仲细胞悬浮培养及其产绿原酸的条件。方法研究基本培养基种类、激素质量浓度、碳源种类及质量浓度、pH值、接种量和摇床转速等因素对杜仲细胞生长和绿原酸产量的影响,建立了高产绿原酸的悬浮细胞培养体系。结果B5培养基+0.5 mg/L NAA+0.6 mg/L 6-BA、蔗糖30 g/L、初始pH 5.0~5.5、接种量20g.FW/L以及摇床转速110 r/min为杜仲细胞悬浮培养的适合条件。结论优化后的培养条件为杜仲细胞大规模悬浮培养生产天然活性成分奠定了基础。]]> 2014/12/20 12:27:12 1951true 目的探索不同栽培模式银杏叶在不同生长季节中总银杏酸量变化规律。方法采用HPLC测定银杏叶中总银杏酸的量。色谱条件为Allti ma C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相甲醇-1%冰醋酸水溶液(90∶10),体积流量1.0 mL/min,检测波长310 nm,柱温35℃,进样量20μL,外标法计算质量分数。结果银杏叶中总银杏酸范围为0.49%~3.43%。同一栽培模式下不同采收期银杏叶中总银杏酸量呈逐月下降趋势,5月量最高,9月底10月初量最低。剪枝和移栽对银杏酸量均有明显的影响。结论这一变化规律为确定银杏叶的栽培模式和采收期提供了科学依据。]]> 2014/12/20 12:27:12 1950true 目的建立菊花中3,5-O-双咖啡酰基奎宁酸、木犀草苷、绿原酸3种成分定量测定的方法,并对4种菊花3种成分的量进行比较。方法采用高效液相色谱法在同一色谱条件(色谱柱为Shimadzu VP-ODS 250 mm×4.6mm,5μm;流动相:乙腈-0.1%磷酸梯度洗脱;体积流量:1.0 mL/min;柱温:30℃)下对菊花中3种成分同时进行定量测定。结果3,5-O-双咖啡酰基奎宁酸、木犀草苷、绿原酸分别在0.039 1~0.781 0μg(r=1.000 0),0.013 2~0.396 0μg(r=1.000 0),0.017 0~0.510 0μg(r=0.999 3)线性关系良好。3者的平均回收率分别为97.7%(RSD=2.7%),101.7%(RSD=1.5%),98.0%(RSD=1.2%)。结论所建立的方法可在同一色谱条件下检测出3个成分,4种菊花的3种成分量有不同程度的差别。]]> 2014/12/20 12:27:12 1949true 2014/12/20 12:27:12 1948true 2014/12/20 12:27:12 1947true 2014/12/20 12:27:12 1946true 2014/12/20 12:27:13 1945true 目的和作用,阐明炮制机制,从而更好地指导临床用药。黄连是典型寒凉药,通过不同辅料炮制后,可使其寒凉之性发生变化,或以热制寒,或使寒者益寒。综合分析目前关于黄连炮制与药性相关的研究报道,从药性变化角度对黄连炮制进行探讨,以现代科学理论揭示中药药性与炮制的相关性,为深入阐明黄连炮制机制奠定基础。]]> 2014/12/20 12:27:13 1944true 2014/12/20 12:27:13 1943true 2014/12/20 12:27:13 1942true 目的研究中国浙江省道地药材浙贝母的遗传多样性。方法应用扩增片段长度多态性技术(AFLP)对具有代表性的6个浙贝母居群, 共32份个体进行分析。结果在浙贝母的物种水平上, Nei's基因多样性指数(He)为0.169 0±0.175 7, Shannon's信息指数(I)为0.269 8±0.2453, 多态位点百分率(PPB)76.85%;总遗传多样性(Ht)0.169 0±0.0309, 其居群水平上遗传多样性(Hs)0.1508±0.0240, Shannon's信息指数(I)0.2333±0.2619, 多态位点百分率(PPB)50.38%, Nei's遗传分化指数(Gst)为0.107 6, 基因流(Nm)为4.147 0。东阳和永康种群之间的遗传距离最小(0.015 0), 而象山与缙云最远(0.032 4)。结论浙江省主产区栽培浙贝母物种的遗传多样性水平丰富, 高的遗传多样性能够维持浙贝母的长期生存, 居群间的多样性水平明显低于居群内的多样性水平, 居群间遗传分化不明显, 种植资源相对比较稳定, 这些居群适宜作为浙贝母优良品种的选育基地。]]> 2014/12/20 11:25:59 1941true 目的应用不同的分子标记进行柴胡药材干根遗传多样性分析, 为柴胡栽培种鉴别和药材鉴别奠定基础。方法以柴胡栽培种干根为材料, 采用RAPD和AFLP两种分析方法。结果以筛选到的3条随机引物对9个柴胡栽培种进行RAPD分析, 共扩增出28条DNA带, 平均每条引物组合扩增9.33条带, 其中多态性带为6.67条, 多态性比率为71.43%;而在AFLP分析中, 筛选出4对特异性引物, 共获得107条DNA带, 平均每对引物扩增26.75条带, 其中多态性带为23.25条, 多态性比率为86.92%。经统计分析, 9个柴胡栽培种RAPD和AFLP分析的Jaccard遗传相似系数分别介于0.61~0.93和0.39~0.86。UPGMA聚类分析, 两种标记方法均可将9个柴胡栽培种聚为3大类群, 聚类结果相似但不完全相同。结论以柴胡药材干根为材料, RAPD和AFLP两种分子标记均可用于植物种间及种下遗传关系分析, 且AFLP条带较多, 多样性丰富, 更有利于柴胡属植物多样性的分析。]]> 2014/12/20 11:25:59 1940true 目的研究5种化感物质对人参根系酶活性的影响, 探讨化感物质对根系保护性酶活性的作用规律。方法采用营养液培养方法, 研究了苯甲酸、邻苯二甲酸二异丁酯、丁二酸二异丁酯、棕榈酸和, 2-2二(4-羟基苯基)丙烷对苗期人参根系过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)和苯丙氨酸解氨酶(PAL)酶活性的影响。结果苯甲酸在种3浓度下均抑制人参幼苗根系POD酶活性, 邻苯二甲酸二异丁酯和丁二酸二异丁酯仅在低浓度时抑制POD酶活性, 棕榈酸和, 2-2二(4-羟基苯基)丙烷3种浓度下均促进POD酶活性, 且与化感物质浓度呈正相关。除丁二酸二异丁酯和棕榈酸外, 其余3种化感物质均表现为处理浓度与CAT酶活性正相关, 且与对照相比, 化感物质对CAT酶活性的影响均表现促进作用。苯甲酸和丁二酸二异丁酯在低浓度时抑制PAL酶活性, 中浓度处理对PAL酶活性的促进作用大于高浓度处理;棕榈酸在低浓度时对PAL酶活性的促进作用最强, 2-2二(4-羟基苯基)丙烷在高浓度时对PAL酶活性的促进作用最强, 邻苯二甲酸二异丁酯对PAL酶活性的促进作用与浓度呈正相关。研究还发现, 对照及5种化感物质处理中的POD、CAT、PAL酶活性均随处理时间延长而变化, 但酶活性与处理时间无明显相关性。结论人参根系分泌物中5种化感物质对人参根系POD、CAT和PAL酶活性有显著影响。]]> 2014/12/20 11:25:59 1939true 目的研究不同产区、不同生长期明党参内生真菌的种群结构与生态分布, 以及内生真菌诱导子对明党参细胞生长与多糖积累的影响。方法采用微生物分离、培养与鉴定等生物学方法、植物细胞悬浮培养方法以及统计分析方法。结果从4个产地明党参植株中共分离到8属116株内生真菌, 其中镰孢属(Fusarium LK.exFR.)、地霉属(Geotrichum LK.)和链格孢属(Alternaria Nees)为优势种群。随着明党参生长期的不同, 内生真菌种群结构出现明显的动态变化。在苗期和孕蕾期, 内生真菌种群丰富, 数量较多, 尤其是在孕蕾期3种优势种群的分离率和分离频率分别达到30%和19%以上。部分内生真菌种群还具有明显的区域专一性和组织专一性。此外, 内生真菌Fusarium sp.3诱导子处理组, 明党参细胞生长量和多糖量分别比对照提高了31.86%和38.01%。结论明党参内生真菌具有丰富的生物多样性, 种群结构及分布与其生态环境具有密切的相关性, 且部分明党参内生真菌诱导子对其细胞生长和多糖积累均具有显著的促进作用。]]> 2014/12/20 11:25:59 1938true 目的对从野生甘草中选育出的新品种甘草(乌新Ⅰ号)进行种质评价。方法观察了其发芽率、可溶性蛋白量和过氧化物酶活性, 并与对照组进行了基因组多态性比较。结果乌新Ⅰ号可溶性蛋白量产生了变化, 过氧化物酶活性显示乌新Ⅰ号具有较高活性。通过分子标记简单序列重复技术(ISSR)进行多态性分析, 在所使用的22条随机引物中, 6条随机引物产生了不同DNA条带, 表明乌新Ⅰ号甘草与对照组相比产生了基因多态性变化。结论这些变化表明乌新Ⅰ号是一个具有前景的品种并且能在将来广泛应用。]]> 2014/12/20 11:25:59 1937true 目的以白术内酯Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ的量作为指标, 考察不同采收期白术内酯量的动态变化, 为其标准化栽培及采收加工技术提供科学依据。方法采用HPLC法测定白术中的3种内酯成分。白术内酯Ⅰ和Ⅲ色谱柱:xBridge-C₁₈柱;流动相:甲醇-水(65∶35);检测波长:220 nm;体积流量:1.0 mL/min;白术内酯Ⅱ色谱柱:Kromasil-C8柱;流动相:甲醇-水(80∶20);检测波长:276 nm;体积流量0.6 mL/min。结果白术内酯Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ平均回收率分别为103.52%、88.16%和99.61%;RSD分别为0.37%、1.8%和0.16%。不同采收期白术内酯Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ量的变化与采样时期具有相关性。结论白术中白术内酯量最高的时期在5月下旬至6月上旬摘蕾前。]]> 2014/12/20 11:25:59 1936true 目的考察市售草蒲黄质量, 探讨质量控制方法。方法通过对市售草蒲黄性状、显微特征、水分、灰分、酸不溶性灰分、浸出物、花粉量、薄层色谱、香蒲新苷和异鼠李素-3-O-新橙皮苷量的检测, 考察市售草蒲黄质量, 探讨质量控制方法。结果不同批次草蒲黄的水分、灰分、酸不溶性灰分、浸出物、花粉量、香蒲新苷和异鼠李素-3-O-新橙皮苷量都存在差异, 显微特征、薄层色谱鉴别可用于真伪鉴别, 高效液相色谱法可用于其香蒲新苷和异鼠李素-3-O-新橙皮苷的定量测定。结论所考察的项目, 不同批次之间差异明显, 可作为市售草蒲黄质量控制标准的依据。]]> 2014/12/20 11:25:59 1935true 目的建立同时测定槲寄生药材中高圣草素、槲皮素-,3 '3-二甲醚、商陆素和藿香黄酮醇量的反相高效液相色谱法。方法固定相为Diamonsil C₁₈柱(250 mm×4.6 mm, 5μm), 流动相为甲醇-0.1%磷酸溶液(40∶60)(A)和乙腈(B)梯度洗脱, 体积流量为1.0mL/min, 柱温为30℃, 检测波长为280 nm。结果在上述条件下测得高圣草素、槲皮素-3'-3二甲醚、商陆素和藿香黄酮醇的质量浓度分别在0.0412 ~0.824、0.007 6~0.152、0.036 0~0.720、0.00320~0.064 0 mg/mL时与色谱峰面积之间线性关系良好;平均回收率分别为97.63%(RSD为1.6%), 96.4%(RSD为1.9%), 97.5%(RSD为1.7%), 98.%(RSD为2.5%)。结论该方法准确、灵敏, 可作为槲寄生药材质量控制的一个有效方法。]]> 2014/12/20 11:25:59 1934true 目的采用HPLC法测定中药材肿节风中黄酮类成分落新妇苷及柚皮苷的量。方法采用Diamonsil C₁₈色谱柱(200 mm×4.6 mm, 5μm);以乙腈(A)-0.1%磷酸水溶液(B)水溶液为流动相, 采用梯度洗脱:0~10 min, A-B(10∶90);10~25 min, A-B(0∶90)→A-B(15∶85):25~35 min, A-B(15∶85)→A-B(20∶80)→B保留15min;体积流量采用程序控制0~10 min, 0.5 mL/min;10~25 min, 0.5→0.75 mL/min;25~35 min, 0.7→0.8 mL/min;保留15 min;检测波长为290 nm;柱温:30℃。结果落新妇苷及柚皮苷的平均回收率分别为97.3%、95.6%, RSD分别为2.2%、2.3%;线性范围分别为0.028~0.27μg(r=0.999 6), 0.030~0.29μg(r=0.999 5)。结论该方法简便、灵敏、快速、准确、重现性好, 为肿节风药材的质量控制及合理开发利用提供了科学依据。]]> 2014/12/20 11:25:59 1933true 目的优化南方红豆杉愈伤组织诱导与继代培养条件,获得含紫杉醇量高的红豆杉愈伤组织,明确紫杉醇合成相关基因的表达模式与紫杉醇量的关系。方法探讨了适合南方红豆杉的愈伤组织诱导及继代培养的激素组成及浓度。比较了南方红豆杉(种胚、幼茎、幼芽)、曼地亚红豆杉(种胚)和太平洋红豆杉(种胚)不同外植体来源的愈伤组织的生长特点和紫杉醇的量,分析了不同愈伤组织紫杉醇合成相关基因的表达差异。结果添加3.0 mg/L 2,4-D的Murashige&Skoog(MS)培养基有利于南方红豆杉的诱导,诱导率高于92%。添加2.0 mg/L 2,4-D与1.0 mg/L 6-苄基腺嘌呤(6-BA)的继代培养基有利于南方红豆杉的紫杉醇积累。同一培养条件下,南方红豆杉种胚来源的愈伤组织紫杉醇量最高,达到干质量的0.027%。含紫杉醇量高的愈伤组织,其紫杉醇合成途径中的=牛儿基=牛儿基焦磷酸合成酶(GGPPS)、紫杉二烯合成酶(TASY)、紫杉烷-10β-羟化酶(T10βH)、10-去乙酰巴卡亭Ⅲ-β-O-乙酰转移酶(DBAT)、苯丙氨酸氨基变位酶基因(PAM)、去苯甲酰紫杉-N-苯甲酰转移酶(DBTNBT)等酶基因的表达水平高。结论 从南方红豆杉的种胚为外植体源获得了含紫杉醇量高的愈伤组织,提高GGPPS、TASY、T10βH、DBAT、PAM、DBTNBT的表达水平将促进紫杉醇的合成。]]> 2014/12/22 9:06:28 1932true 目的通过对当归根际土壤提取液的生物学试验和有机化合物的分离鉴定,探讨当归连作障碍与自毒作用的关系。方法设置水(CK)、当归根际土水提液100、125、250、500 mg/mL共5个处理,用于当归自毒作用的生物学实验;气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)鉴定当归根际土壤有机化合物。结果 125 mg/mL当归根际土壤水提液能显著抑制当归自身种子发芽率、发芽指数及胚根和胚芽的伸长,且随水提液浓度的升高,这种抑制作用增强。在当归根际土壤水提液中鉴定到17个化合物,包括有机酸、酮、醛、酯和烃类等化感物质,其中很多被报道是化感物质。结论 当归根际土壤水提液对自身种子萌发和幼苗生长具有明显的自毒作用,且自毒效应具有一定的浓度依赖性,推断自毒作用可能是造成当归连作障碍的原因之一。]]> 2014/12/22 9:06:28 1931true 目的使用植物生长调节剂提高东北矮紫杉愈伤组织中紫杉醇和10-去乙酰巴卡亭Ⅲ的量。方法以东北矮紫杉幼茎为外植体,运用正交试验优选NAA、2,4-D和6-BA 3种植物生长调节剂组合培养植物愈伤组织,HPLC法测定愈伤组织中紫杉醇和10-去乙酰巴卡亭Ⅲ的量。结果 植物生长调节剂对东北矮紫杉愈伤组织中紫杉醇和10-去乙酰巴卡亭Ⅲ合成的影响顺序是:NAA>6-BA>2,4-D。结论 利用东北矮紫杉愈伤组织培养生产紫杉醇和10-去乙酰巴卡亭Ⅲ的最佳培养基为:B5+NAA 2.0 mg/L+2,4-D 0.5 mg/L+6-BA 0.2 mg/L。]]> 2014/12/22 9:06:28 1930true 目的以β-环糊精为流动相添加剂,拆分积雪草药材及其总苷中羟基积雪草苷和积雪草苷,建立羟基积雪草苷和积雪草苷的定量测定方法,同时建立积雪草总苷的高效液相色谱特征图谱。方法采用Dikma Diamon-silTMC18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱;流动相为乙腈-2 mmol/Lβ-环糊精溶液(24:76);柱温30℃;体积流量1.0 mL/min;检测波长205 nm;理论塔板数按积雪草苷峰计算应不低于4 000。结果 β-环糊精的加入很好地分离积雪草药材及其总苷中的羟基积雪草苷和积雪草苷,满足了定量分析的要求,其中有效成分羟基积雪草苷和积雪草苷的线性范围分别为0.181~18.1μg(r=0.999 98)和0.195~19.5μg(r=0.999 98),积雪草药材的平均加样回收率(n=9)分别为101.2%和101.6%,积雪草总苷的平均加样回收率(n=9)分别为100.3%和99.3%,11批次的积雪草总苷样品的高效液相色谱特征图谱中确定6个共有峰作为定性的指标峰。结论 本法简便快速、结果准确、重现性好,可用于积雪草药材及其总苷的质量控制。]]> 2014/12/22 9:06:28 1929true 目的为研究三叶木通种质资源遗传多样性,建立并优化三叶木通AFLP反应体系。方法以三叶木通叶片为材料,对影响AFLP反应体系中连接、预扩增和选择性扩增的各因素进行分析,建立优化的AFLP反应体系。结果 建立三叶木通AFLP反应优化体系:连接体系加入T4连接酶2 U,MseI接头100 pmol,EcoR I接头10 pmol;预扩增反应总体积20μL,加入连接产物2.0μL,E-0、M-0各100 ng,dNTPs 0.250 mmol/L,Mg²⁺1.875mmol/L,TaqDNA聚合酶2 U;选择性扩增反应总体积20μL,加入5μL稀释100倍的预扩增产物,E3、M3各50 ng,dNTPs 0.250 mmol/L,Mg²⁺1.875 mmol/L,TaqDNA酶1.5 U。结论 建立适用于三叶木通种质资源遗传多样性研究的AFLP反应优化体系。]]> 2014/12/22 9:06:29 1928true 目的研究真菌多糖激发子对深层培养的桦褐孔菌抗氧化和抗肿瘤酚类化合物积累的影响。方法在桦褐孔菌的培养基中分别加入15、45、100μg/mL的真菌多糖激发子,测定胞内外多酚的量和主要组成成分,抗氧化活性和抗肿瘤活性,并测定不同培养条件下菌丝体内苯丙氨酸解氨酶和一氧化氮合酶的活性。多酚的量以Folin-Ciocalteu法测定。利用HPLC法测定多酚的组成成分。抗氧化活性以清除超氧阴离子的能力表示。利用MTT法测定多酚对HeLa细胞的抑制率。苯丙氨酸解氨酶和一氧化氮合酶活性均以分光光度计法测定。结果 添加45μg/mL的真菌多糖激发子可使桦褐孔菌胞内、胞外酚类化合物分别达到最高水平71.8和182.1 mg/L,明显地高于正常对照组胞内(42.6 mg/g)和胞外(83.6 mg/L)。真菌多糖激发子显著提高了苯丙氨酸解氨酶和一氧化氮合酶的活性。不同培养条件下产生的胞内、胞外酚类化合物主要组成成分不同,但均具有抗氧化和抗肿瘤等活性,尤其是添加45μg/mL真菌多糖激发子的培养体系。结论 真菌多糖激发子可上调深层发酵培养的桦褐孔菌酚类化合物的积累以及抗氧化和抑制肿瘤细胞的活性。]]> 2014/12/22 9:06:29 1927true 目的建立泰山四叶参药材的指纹图谱分析方法,为泰山地区四叶参药材质量评价和合理应用提供参考依据。方法采用HPLC-ELSD检测法,对泰山四叶参药材进行测定,色谱柱为Ultimate AQ-C18(250 mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-0.2%冰醋酸水梯度洗脱,柱温30℃,漂移管温度102℃,载气流量为2.5 L/min。结果 确立7个共有峰为特征峰的泰山四叶参HPLC-ELSD指纹图谱,相似度评价结果表明,除2批药材外,其余药材的相似度在0.84以上。结论 泰山地区的四叶参药材具有很好的相似度。本方法操作简便、快速、准确,为泰山四叶参的质量控制提供了依据。]]> 2014/12/22 9:06:29 1926true 目的建立HPLC法同时测定土荆芥挥发油中驱蛔素、对伞花烃和α-萜品烯的方法。方法采用AgilentSB-C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-水(60:40);体积流量为1.0 mL/min;检测波长为224 nm;柱温为30℃。结果 驱蛔素、对伞花烃、α-萜品烯的线性范围分别为2.02~40.4 mg/mL(r=0.999 4)、0.525~10.5 mg/mL(r=0.999 8)、0.376~7.52 mg/mL(r=0.999 7);加样回收率分别为98.60%(RSD=2.06%)、102.51%(RSD=2.70%)、96.92%(RSD=2.32%)。结论 本方法简单、快速、灵敏、准确、重现性好,适用于同时测定土荆芥挥发油中驱蛔素、对伞花烃、α-萜品烯的量。]]> 2014/12/22 9:06:29 1925true 目的进行超快速液相色谱(UFLC)测定茜草中羟基茜草素和大叶茜草素的方法研究,并与HPLC方法比较,建立准确、高效的茜草药材质量分析方法。方法使用新型的UFLC系统,色谱柱为Shim-pack XR-ODSⅡ(75 mm×3.0 mm,2.2μm),流动相为乙腈-0.2%磷酸(52:48)溶液,体积流量:1.0 mL/min,柱温60℃,检测波长为250 nm。结果 UFLC法和HPLC法测定的茜草两种化学成分的量差异不大;UFLC分析时间显著缩短,羟基茜草素和大叶茜草素的分析时间由HPLC法的7.2、25.3 min缩短为1.2、10.5 min。结论 本研究建立的UFLC测定方法精密度高、重现性好、快捷简便,适用于茜草中羟基茜草素和大叶茜草素的分析,是一种高效、可行的质量评价技术。]]> 2014/12/22 9:06:29 1924true 目的对生干漆和煅干漆进行生药学研究。方法采用生药性状描述、粉末特征鉴定、理化鉴别等方法,对生干漆与煅干漆的主要性状进行了比较。结果生干漆及煅干漆在生药性状、粉末特征及化学成分上均有一定的差异。结论 可为生干漆及煅干漆的进一步开发利用提供理论依据。]]> 2014/12/22 9:06:29 1923true 目的比较金沙藤与海金沙药材主要化学成分的异同点。方法分别用薄层色谱法、高效液相色谱法、气相色谱法比较金沙藤与海金沙化学成分在色谱图中的区别。结果金沙藤与海金沙在不同的色谱中存在大的差异。结论金沙藤中的黄酮、有机酸、萜类等次生代谢产物量显著高于海金沙,作为药用有更好的物质基础。]]> 2014/12/22 9:06:30 1922true 目的研究不同年生人参、西洋参栽培土壤中微生物种群结构差异。方法采用RAPD技术对采集自吉林省抚松县的18份人参、西洋参根际土和根围土中的微生物种群结构进行遗传多样性分析。结果 栽培年限对根际土及根围土中的微生物种群结构有显著影响;人参和西洋参栽培土壤中的微生物种群结构也存在差异;寄主植物对土壤微生物种群结构的影响表现有根际效应。结论 人参或西洋参根系分泌物对土壤微生物的定向选择压力可能是造成土壤微生物种群遗传多样性变化的主要原因之一,人参或西洋参栽培土壤中微生物种群结构变化是导致土壤生态功能紊乱以及连作障碍形成的关键因子。]]> 2014/12/22 8:53:57 1921true 目的建立川产麦冬野生资源的化学模式识别方法。方法采用高效液相色谱法,建立川产麦冬野生资源的HPLC指纹图谱,使用SPSS17.0软件对26批不同来源川产麦冬样品的HPLC指纹图谱进行主成分分析,在主成分得分系数矩阵的基础上,对其进行系统聚类分析;并使用相似度评价软件进行相似度评价验证。结果 26批麦冬样品共提取出4个主成分,被分为4大类;与共有峰直接聚类相比,主成分-聚类分析更符合相似度评价结果。结论 利用SPSS软件对麦冬HPLC指纹图谱进行主成分-聚类分析,所建立的模式识别方法,操作简便,统计结果具有可靠性,可对麦冬化学计量学分类及其质量评价提供有效参考。]]> 2014/12/22 8:53:58 1920true 目的对主产区远志种质资源进行遗传多样性研究。方法利用ISSR分子标记分析来自于主产区陕西、山西和河北3个省的10个居群的远志种质资源的遗传多样性。结果 12条ISSR引物扩增出276条带,其中有271条为多态性条带,聚类分析结果表明,地理来源相同的野生居群和栽培居群先行聚合。野生和栽培远志居群的遗传变异主要发生在居群间,栽培居群的遗传多样性略低于野生居群,二者均不符合距离隔离模型。结论 聚类分析结果与栽培居群多为就地取材的事实相符。造成远志这种遗传变异型式的原因在于其本身的繁殖生物学特性以及当前的粗放栽培模式。]]> 2014/12/22 8:53:58 1919true 目的以知母种子为试验材料,对知母的组织培养进行了初步研究,以期建立知母的再生体系。方法采用植物组织培养和单因子试验的方法对知母无菌体系的建立、分蘖芽的增殖、分蘖愈伤组织的诱导和再分化以及再生苗的移栽进行研究。结果 知母种子最佳的消毒方式是75%酒精处理30 s后用0.1%HgCl2处理15 min;知母分蘖芽增殖的最佳培养基是MS+KT 1 mg/L+NAA 0.5 mg/L;知母分蘖愈伤组织诱导的最佳培养基是MS+KT 2 mg/L+NAA 0.5 mg/L;知母愈伤组织再分化的最佳培养基是MS+KT 2 mg/L+NAA 0.1 mg/L;知母愈伤组织再生芽最佳的生根培养基是1/2MS+NAA 0.5 mg/L;知母试管苗最佳的移栽基质是腐殖土。结论 本实验建立了知母的再生体系,为知母试管苗的工厂化生产奠定了技术基础。]]> 2014/12/22 8:53:58 1918true 目的测定不同品种桑叶在不同采收时间总多酚及绿原酸、芦丁、安息香酸和黄芪苷4种主要酚类单体化合物的量,初步探讨桑叶酚类物质的变化规律。方法采用Folin-Phenol法测定桑叶中总酚的量,采用HPLC法测定绿原酸、芦丁、安息香酸和黄芪苷的量。结果 6个品种桑叶总多酚量在4~10月连续7个月内变化的趋势基本相同。各品种中13种酚类单体物质的变化比较复杂:同一品种桑叶中不同酚类物质变化不一样,不同品种桑叶中相同酚类物质变化也不一样。结论 不同品种桑叶的酚类单体成分的组成及其变化规律具有品种特异性,在相同栽培条件及气候条件下,桑叶中酚类物质的量在不同品种之间有差异,但在所有品种中多酚的量均以绿原酸最高,其次为芦丁,再次为安息香酸和黄芪苷。]]> 2014/12/22 8:53:58 1917true 目的阐明不同温度及种根大小对附子萌发及苗期性状的影响。方法用光照培养箱控制附子的发芽温度,观察不同温度下不同大小附子种根的发芽情况。结果 变温处理较恒温处理的附子种根发芽时间短,发芽率、发芽势和发芽指数均较高,小种根的发芽率、发芽势、发芽指数均高于大、中种根,苗期性状表现也较好。结论 种根在10 g左右发芽的综合性能优良,早春应加强水分管理提高种根发芽率。]]> 2014/12/22 8:53:58 1916true 目的建立超高效液相色谱法(UPLC)测定杜仲中主要活性成分松脂醇二葡萄糖苷(pinoresinol diglu-coside,PDG)的方法。方法采用Acquity C18BEH(1.0 mm×100 mm,1.7μm)UPLCTM色谱柱,以乙腈-水为流动相,使用Waters Acquity UPLC system进行测定。结果 PDG的线性范围为4.655~465.5μg,R2=0.999 9,平均回收率为99.4%,RSD=1.7%。结论本方法准确、简便、高效、重现性好,可用于杜仲中PDG的定量测定。同时UPLC在分析强保留、高分离度要求、成分复杂、大批量的样品时具有非常明显的优势,尤其适合对中药复杂体系的分析。]]> 2014/12/22 8:53:58 1915true 目的研究菝葜的RAPD-PCR扩增体系最适宜的条件。方法采用CTAB提取方法,从菝葜的嫩叶中提取总基因组DNA,以此为模板,优化菝葜RAPD-PCR的反应条件。结果 最适宜的PCR扩增体系为:反应体积30μL,内含0.20μmol/L引物、200μmol/L dNTP4、0 ng模板DNA、2 UTaqDNA聚合酶、2μmol/L Mg²⁺。结论 通过扩增条件优化实验,建立了重复性好、稳定性高的药用植物菝葜RAPD-PCR扩增体系最适宜的条件,筛选出条带清晰多态性好的14条随机引物,共扩增得到144条电泳带,其中有多态性带62条,检测到了62个多态性位点,多态率为43%。]]> 2014/12/22 8:53:58 1914true 目的建立客观评价淫羊藿药材质量差异的方法。方法采用高效液相色谱法,Kromasil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-水(23:77),体积流量1 mL/min,检测波长270 nm,进样量10μL,建立不同产地、不同品种淫羊藿药材不同生长部位(茎与叶)的HPLC指纹图谱,并测定其不同生长部位中淫羊藿苷的量。结果 淫羊藿药材不同生长部位(茎与叶)的HPLC指纹图谱和淫羊藿苷的量存在差异,从其叶和茎的特征指纹图谱中分别提取出19和10个共有峰,且叶中淫羊藿苷的量是茎中的4~8倍;叶与叶、茎与茎之间的化学特征存在差异,叶与茎化学特征差异最显著。结论 建立的淫羊藿苷测定方法和指纹图谱的精密度、稳定性、重现性好,可表征淫羊藿药材质量的差异性,为淫羊藿药材的质量研究和建立淫羊藿药材的商品规格提供参考依据。]]> 2014/12/22 8:53:58 1913true 目的通过建立白芍和赤芍药材的HPLC指纹图谱,进一步完善芍药野生品与栽培品药材的质量评价方法。方法采用HPLC测定了11批白芍和和11批赤芍样品,并建立标准对照指纹图谱,按国家药典委员会提供的中药色谱指纹图谱相似度评价系统对样品的相似度进行评价。色谱条件:固定相为Kromasil 100-5C18(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-0.3%H3PO4梯度洗脱;检测波长为220 nm,参比波长为290 nm;柱温35℃;体积流量0.8 mL/min。结果 建立的HPLC指纹图谱能区别白芍和赤芍。结论本法简单、快捷,为科学评价和控制芍药野生品与栽培品药材的质量提供了依据,为同来源于芍药的赤芍和白芍的临床应用提供依据。]]> 2014/12/22 8:53:58 1912true 2014/12/22 8:53:59 1911true 目的利用绞股蓝RAPD标记有效鉴别绞股蓝及其伪品。方法用19条引物对17个绞股蓝样品和一个乌蔹莓样品进行RAPD-PCR扩增,并对绞股蓝DNA特异条带克隆测序及序列分析。结果获得一个绞股蓝RAPD标记。经克隆测序,8个序列高度保守,片段长度在766~770 bp,相似性均在97%以上。结论获得的RAPD标记可以作为合成探针的基础,用于鉴别绞股蓝及其伪品。]]> 2014/12/22 8:44:50 1910true 目的以核糖体转录间隔区(rDNA ITS)序列为分子标记,对钩藤属的2种常用中药材毛钩藤Uncariahirsute和无柄果钩藤U.sessilifructus进行遗传分析,阐明钩藤属内不同种间的分子系统发育关系。方法通过改良CTAB法对毛钩藤和无柄果钩藤进行总DNA提取,利用通用引物对rDNA ITS序列进行PCR扩增,RFLP分析和序列测定,用PAUP软件进行系统发育分析,构建最大简约树。结果获得毛钩藤和无柄果钩藤的限制性内切酶(MspⅠ&HaeⅢ)酶切图谱以及rDNA ITS区的完整序列,其序列长度均为718 bp。结论通过基于rDNAITS序列进行RFLP分析、序列测定和系统发育树构建的分子生物学方法,能够对钩藤属植物进行准确的分子鉴定,为钩藤属中药材的种类鉴定和种间的分类地位提供分子生物学依据。]]> 2014/12/22 8:44:50 1909true 目的通过对决明种子硬实和萌发特性的研究,找到打破种子硬实、提高种子萌发率的适宜条件。方法观察种子外部形态,对决明种子长宽、千粒质量、净度、硬实率、含水量和吸水率进行测定,通过研磨、预先冷冻和热水处理,找到破除种子硬实的方法,考察不同温度、不同质量浓度化学物质对种子萌发率的影响。结果决明种子含水量为10.43%,未经处理的种子吸水率为45.82%,经过研磨处理和浓硫酸处理的种子吸水率分别为154.2%、159.7%。经过98%浓硫酸处理20 min后的种子发芽率为99.8%,变温下(25℃1、4 h/15℃1、0 h)种子萌发率为98.7%,200 mg/L GA3和200 mg/L PEG处理后的萌发率分别为100%和98.9%,较高质量浓度的NNA和6-BA对种子萌发具有明显的抑制效应。结论种皮硬实是限制种子萌发的主要因素,98%的浓硫酸浸泡20 min可以较好地打破决明种子硬实,200 mg/L GA3和200 mg/L PEG能在短时间内显著提高种子的萌发率,最佳萌发温度为25℃,14 h/15℃,10 h。]]> 2014/12/22 8:44:50 1908true 目的研究陕西省不同产地秦艽的质量差异,对其遗传多样性进行检测,探讨药材质量和其遗传基础的关系。方法采用HPLC法测定不同产区秦艽药材中的指标成分,进行HPLC指纹图谱分析,计算并比较相似度。依据指纹图谱中的共有峰特征,对不同药材样品进行聚类分析。对药材中提取的总DNA进行RAPD分析,计算遗传距离并聚类。结果陕西省不同产区秦艽药材的质量具有一定的差异,不同产区秦艽药材也表现出一定的遗传多样性。陕西省不同产区的秦艽药材质量变异与遗传多样性之间不具有明显的相关性,而表现出与产地的相关性。结论产地对陕西秦艽药材质量的影响更为重要,提示道地秦艽质量的形成可能属于生境主导型。]]> 2014/12/22 8:44:50 1907true 目的通过灰色关联度分析方法系统研究了黄芪皂苷成分与环境因子之间的关系。方法采用HPLC-ELSD测定了黄芪药材中的黄芪甲苷、黄芪皂苷Ⅰ和黄芪皂苷Ⅱ,应用灰色关联度公式进行数据分析。结果灰色关联度分析表明影响黄芪甲苷的主导环境因子是年平均气温,而影响黄芪皂苷Ⅰ和黄芪皂苷Ⅱ的主导环境因子是年平均无霜期。结论为道地药材黄芪引种提供科学依据。]]> 2014/12/22 8:44:51 1906true 目的采用双波长HPLC法建立泽泻指纹图谱,为科学评价和控制泽泻的质量提供依据。方法色谱柱为Kromasil C18(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-水;检测波长:254 nm(0~13.00 min),210 nm(13.01~60.00 min);体积流量:1.0 mL/min。结果采用双波长对福建和四川两个产地20批泽泻进行指纹图谱研究,分别确定了18和23个共有峰,并指认其中3个色谱峰。结论建立的双波长HPLC法色谱指纹图谱可以为泽泻药材的鉴别和质量评价提供依据。]]> 2014/12/22 8:44:51 1905true 目的研究不同水分处理对夏枯草花期生长与生理的影响。方法采用每天定时定量称其质量的方法处理夏枯草植株,测定相关指标,结合统计方法进行分析比较。结果随水分胁迫处理时间的延长,植株以S2长势最好,S3增量最大且抽薹数最多;超氧化物歧化酶(SOD)呈现出先上升后下降趋势,脯氨酸(Pro)呈上升趋势;相同处理时间下,随水分胁迫梯度不同,SOD、丙二醛(MDA)与Pro呈先上升后下降趋势,并以S2量最低;可溶性糖量随逆境加深而下降。结论夏枯草保护酶与渗透调节物质是一个整体,当植株受到外界胁迫时,共同发挥保护与协调作用;花期夏枯草所需水分以65%~70%最有利于成花,以80%~85%抗氧化与渗透调节物指标最低,形态生长最好。]]> 2014/12/22 8:44:51 1904true 目的测定西藏产长柄秦艽Gentiana waltonii中指征性成分龙胆苦苷、马钱酸、獐牙菜苦苷和獐牙菜苷,分析其与海拔的关系,为开发秦艽替代性资源,发展中藏药产业提供依据。方法 Alltech(C18(250 mm×4.6mm,5μm);流动相为甲醇-0.5%乙酸水溶液(25:75);体积流量为1.0 mL/min;柱温:25℃;检测波长238 nm(马钱子酸和獐牙菜苦苷)、246 nm(龙胆苦苷和獐牙菜苦苷);进样量:10μL,按外标法计算。结果西藏不同产地长柄秦艽中均能检测到秦艽中的指征性成分,其中龙胆苦苷的量在4种组分中最高,马钱酸次之,獐牙菜苦苷最低。不同地区长柄秦艽中龙胆苦苷的量均高于或接近《中国药典》2005年版标准。4种指征性成分的量与海拔无明显相关性,随海拔升高活性成分呈钟状变化。其中海拔4 000 m左右地区的长柄秦艽品质最优。结论西藏产长柄秦艽含有秦艽所具有的4种指征性成分,可以作为中藏药秦艽的替代性开发资源,其中海拔4 000 m左右区域的品质最优。]]> 2014/12/22 8:44:51 1903true 目的对木豆叶药材进行质量评价。方法使用生药学研究、薄层色谱法、HPLC法对木豆叶质量进行评价。结果对木豆叶的性状、显微特征进行了描述,对牡荆苷、异美五针松双氢黄酮、木豆茋做了TLC定性鉴别和HPLC定量分析。结论通过研究制定了木豆叶的质量控制标准。]]> 2014/12/22 8:44:51 1902true 目的建立鹿衔草中水晶兰苷的测定方法。方法采用RP-HPLC法,色谱柱为Agilent Zorbax SB-Aq(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-0.1%磷酸溶液(5:95),体积流量1.0 mL/min,检测波长235 nm,柱温25℃。结果水晶兰苷在0.254 4~5.08 8μg线性良好,R2=0.999 9;平均回收率97.2%,检测限为13 ng。结论该方法稳定可靠,回收率高,可用于鹿衔草的质量控制。]]> 2014/12/22 8:44:51 1901true 目的采用RP-HPLC对不同批次的天台乌药药材进行指纹图谱研究。方法色谱柱为Symmetry C18,流动相为乙腈-水梯度洗脱,检测波长为235 nm,体积流量为1.0 mL/min,柱温25℃。结果建立的指纹图谱共确定了12个共有峰,多数峰可以达到良好分离,所建立的乌药药材指纹图谱的分析方法有良好的重现性。结论用该方法建立的指纹图谱可以作为乌药药材品种鉴别的主要依据之一。]]> 2014/12/22 8:44:51 1900true 2014/12/18 13:54:44 1899true 目的 通过测定并比较柱果铁线莲、单叶铁线莲、威灵仙、山木通、毛蕊铁线莲、转子莲、女萎和天台铁线莲的ITS序列，为铁线莲属药用植物的分子鉴定提供依据。方法 利用PCR法从叶片基因组DNA中扩增ITS，借助Clustal X、MEGA、DNASTAR等软件比较和分析ITS的序列特征。结果 铁线莲属8种药用植物ITS1与ITS2之间的长度为534～561 bp，变异位点50个，信息位点22个；天台铁线莲与转子莲的遗传距离最小，与女萎遗传距离最大，亲缘关系最远。序列已提交至NCBI数据库，登录号为JF714638－JF714645。结论 获得铁线莲属8种药用植物的ITS序列，为分子鉴定奠定了基础。]]> 蒋 明¹，周英巧¹，李嵘嵘²]]> 1898true 目的 研究干旱胁迫对苦豆子Sophora alopecuroides L. 种子吸胀萌发的影响及其幼苗抗旱性。方法 以苦豆子种子为实验材料，采用PEG-6000模拟干旱条件，测定种子吸胀速率、发芽率、种苗生长情况、组织相对含水量等指标。结果 随着胁迫程度的加剧，苦豆子种子吸胀速率、发芽率、发芽指数、生活力、苗高和根长、组织饱和含水量等指标均表现出明显降低的趋势，而苗干质量、根干质量和根冠比均呈先升后降的趋势。结论 苦豆子种子在适当的干旱胁迫下可以提高苦豆子幼苗的抗旱性，有利于培育壮苗。]]> 1，罗光宏^{1, 2} ，颜 霞¹，陈 叶¹，张新慧^3]]> 1897true 2014/12/18 13:54:44 1896true 2中反应15 min是铁皮石斛人工种子制作的较佳条件,胚乳中分别添加15 g/L木薯淀粉和10 g/L保水剂能明显提高人工种子的萌发率和成苗率,种皮中添加10g/L纳米SiO₂和10g/L纳米TiO₂均能明显提高萌发率,但添加10g/L纳米SiO₂成苗率最高。结论建立了铁皮石斛人工种子制作方法,获得了较高的萌发率和成苗率。]]> 2014/12/18 13:54:44 1895true 目的 建立铁皮石斛人工种子制作方法，并考察相关影响因素，为铁皮石斛的繁育提供一条新途径。方法 以铁皮石斛原球茎为包埋体制作人工种子，考察胚乳、种皮组分对人工种子萌发和成苗的影响。结果 以MS＋0.5 mg/L BA＋0.5 mg/L NAA＋3 g/L AC＋30 g/L海藻酸钠＋3 g/L百菌清为基本胚乳，在2% CaCl₂中反应15 min是铁皮石斛人工种子制作的较佳条件，胚乳中分别添加15 g/L木薯淀粉和10 g/L保水剂能明显提高人工种子的萌发率和成苗率，种皮中添加10 g/L纳米SiO₂和10 g/L纳米TiO₂均能明显提高萌发率，但添加10 g/L纳米SiO₂成苗率最高。结论 建立了铁皮石斛人工种子制作方法，获得了较高的萌发率和成苗率。]]> 张桂芳¹，黄 松¹，刘宏源²，刘星华²，朱彩霞¹，赖小平¹]]> 1894true 目的 分析千斤拔属植物种间亲缘关系，并对其进行初步质量评价，为筛选新药源提供理论依据。方法 应用ISSR分子标记技术，对14种千斤拔属植物进行亲缘关系分析；同时，采用紫外分光光度法测其总黄酮量。结果 从60个ISSR引物中筛选出30个引物用于试验，共扩增出367个条带，其中多态性条带363条，共有带4条，多态性条带比例（PPB）为98.91%，遗传相似系数（GS）在0.566 8～0.833 8，表现出丰富的遗传多样性；亲缘关系最近的为云南千斤拔和蔓性千斤拔，遗传距离最远的为细叶千斤拔和墨江千斤拔；总黄酮量最高的为勐捧千斤拔，其次为蔓性千斤拔，云南千斤拔总黄酮量也较高。结论 千斤拔属植物具有丰富的遗传多样性，云南千斤拔有成为药用植物蔓性千斤拔替代品的潜力。]]> 1 ，张丽霞¹，宋美芳¹，李海涛¹，高微微²]]> 1893true 2014/12/18 13:54:44 1892true 2014/12/18 13:54:44 1891true 目的 应用因子分析探讨影响甘草地理分布的生态主导因子。方法 收集统计具有甘草分布的地区以及这些地区的地理环境因素，包括经度、纬度、海拔高度、无霜期、平均风速、大风日数、年均温度、一月平均温度、七月平均温度、≥10 ℃积温、蒸发量、降水量、年日照时数、年太阳总辐射量等，应用SPSS 17.0统计软件进行因子分析。结果 提取出5个公因子，分别为热量因子、地理因子、光照因子、降水因子和风况因子，这5个因子的累积贡献率达87.64%。同时得到各个甘草分布地区的因子总得分。结论 热量因子是影响甘草地理分布的生态主导因子，因子总得分高的地区甘草生长分布的适宜性强。]]> 1，刘仁权¹，王文全¹，周应群²]]> 1890true 目的 研究不同质量浓度吲哚丁酸（IBA）和萘乙酸（NAA）以及培养方式对匍枝筋骨草生长和β-蜕皮甾酮量的影响。方法 以MS为基本培养基，添加IBA（0.5、1.0、2.0 mg/L）或NAA（0.3、0.6、0.9 mg/L）进行组织培养，HPLC法测定匍枝筋骨草中β-蜕皮甾酮量。并比较不同生长调节剂以及组织培养、水培不同培养方式下匍枝筋骨草生根情况与β-蜕皮甾酮量的变化。结果 以MS为基本培养基，添加生长调节剂IBA0.5～1 mg/L时，适宜匍枝筋骨草生根。IBA质量浓度为2 mg/L时，匍枝筋骨草根中β-蜕皮甾酮量最高。组织培养条件下，匍枝筋骨草全株及根部的蜕皮激素量均达水培苗的2倍，实生苗的3倍。结论 适宜适量浓度的IBA可以促进匍枝筋骨草根的生长，组织培养条件下，匍枝筋骨草根中β-蜕皮甾酮量最高。]]> 1889true 2014/12/18 13:54:44 1888true 2014/12/18 13:54:44 1887true 目的 建立丹参药材多指标成分测定方法，综合评价不同产地来源丹参药材的质量。方法 采用HPLC法测定，Diamonsil C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），以乙腈（A）-0.05%磷酸水（B）为流动相，梯度洗脱（0～8 min、10%～25%A；8～20 min、25%A；20～25 min、25%～40%A；25～35 min、40%～100%A；35～40 min、100%～10%A；40～45 min、10%A），体积流量1.0 mL/min，检测波长280 nm，柱温30 ℃。结果 丹参素、迷迭香酸、丹酚酸B及丹参酮II_A分别在0.037 12～0.556 8 mg/mL（r＝0.997 1）、0.022 04～1.102 mg/mL（r＝0.999 2）、0.277～8.31 mg/mL（r＝0.999 9）、0.016 08～0.804 mg/mL（r＝0.999 7）线性关系良好，平均回收率分别为101.3%（RSD＝1.72%）、102.4%（RSD＝1.05%）、102.9%（RSD＝1.67%）、97.9%（RSD＝1.42%）。结论 不同产地丹参药材各指标成分量差别较大；所建立的多指标成分测定方法准确、可靠、重复性好，可有效评价不同产地丹参药材的质量。]]> 1, 3，韦 辉¹，刘 毅²，刘素香²，张铁军²，马旭伟⁴，韩丰年⁴]]> 1886true 目的 研究我国黄花蒿天然群体种质资源的遗传多样性，并对其进行SRAP分析。方法 采用SRAP分子标记技术，以我国天然群体主要分布区域的60份黄花蒿种质资源为试验材料，运用Popgene version 1.31软件和Treeconw软件计算相关参数，UPGMA方法聚类，构建亲缘关系树状图。结果 24对SRAP引物组合扩增出232条带，多态性比率（PPB）为81.47%。SRAP标记的Nei’s基因多样性（H）为0.190 5，Shannon’s信息指数（I）为0.300 0。青蒿素量高的4个地区之间，多态位点百分率在50.00%～61.21%，平均为55.82%，SRAP标记的H值为0.155 7～0.179 3，I值为0.237 9～0.276 6；SRAP检测不同材料间遗传相似系数为0.643 2～0.872 7，平均为0.754 7。结论 SRAP标记能有效地揭示我国野生黄花蒿丰富的遗传多样性，为黄花蒿新品种选育提供了物质基础。]]> 1885true 2014/12/18 13:41:46 1884true 2014/12/18 13:41:46 1883true 目的 分离广藿香青枯病病原菌Ralstonia solanacearum，了解其细菌学性状，并进行致病性测定，为广藿香青枯病的防治提供依据。方法 在TZC培养基 [蛋白胨 10.0 g、酸水解酪蛋白 1.0 g、TTC（2，3，5-氯化三苯基四氮唑）0.05 g、葡萄糖 10.0 g、H₂O 1 L，pH 6.8～7.0] 上划线分离培养广藿香青枯菌；通过3糖3醇试验对各菌株的生化型进行划分；采用伤根浸泡接种法对分离所得菌株进行致病性测定。结果 经分离纯化，得到在细菌学性状上有明显差异的7个青枯菌菌株。其中HX5、HX7为生化型I；HX1、HX6为生化型II；HX2、HX4为生化型III；HX3为生化型V。致病性试验表明，大部分青枯菌菌株表现较强的致病性，其中以菌株HX4和HX5致病力强且致死率高。结论 广藿香青枯病菌存在多个生理小种，在菌体形态、生化分型和致病性等方面均有一定的差异。]]> 1882true 目的 综合比较不同种植区九寨刀党质量，为九寨刀党种植区域规划提供依据。方法 采用SPSS17.0分析软件对来源于九寨沟县不同种植区的38份九寨刀党样品的主要性状及化学成分进行主成分分析及聚类分析。结果 筛选出特征根累计贡献率达到85.604%的5个主成分；以主成分分析确定的主成分值为指标，采用组内连接聚类法对不同种植区九寨刀党质量指标进行聚类分析，将38份样品划分为4类。结论 通过主成分聚类分析对不同种植区九寨刀党质量进行综合评价，此方法具有较强的可行性。九寨沟县不同种植区九寨刀党质量差异较大，需要加快规范化栽培技术的研究与应用。]]> 1881true 2014/12/18 13:41:46 1880true 2014/12/18 13:41:46 1879true 目的 建立冬虫夏草的环介导等温扩增（loop-mediated isothermal amplification，LAMP）方法，实现对冬虫夏草的快速检测。方法 针对冬虫夏草的CS2 serine protease (csp2)基因设计LAMP内外引物对；利用CTAB法提取冬虫夏草DNA；优化扩增反应条件；采用包括冬虫夏草在内的6种不同虫草进行LAMP扩增，并对阳性产物酶切鉴定以检测其特异性，通过对模板DNA的10倍梯度稀释检测其灵敏度；紫外灯下观察凝胶电泳或加入荧光染料SYBR Green I的扩增产物。结果 设计的LAMP引物可以特异地针对冬虫夏草的csp2基因进行LAMP扩增，产物可被限制性内切酶Taq1酶切，且有较高的灵敏度，检出限达6 pg/mL。结论 LAMP法可以实现对冬虫夏草的快速鉴定检测，在中药鉴定中有着广阔的应用前景。]]> 1，李 琦¹，袁 媛²，陈江源¹，黄璐琦²，刘志国¹]]> 1878true 目的 考察巫山淫羊藿悬浮培养细胞的生长特性，为巫山淫羊藿资源利用提供参考。方法 选用悬浮培养所获得的均匀悬浮培养细胞为研究对象，在光照条件下进行悬浮培养，每隔3 d取样，测定相关的生理生化指标。结果 巫山淫羊藿悬浮细胞的生长曲线呈“S”型，培养基中蔗糖、磷酸盐、硝酸盐、铵盐量均呈急剧下降趋势，最后变化趋于平缓，细胞合成黄酮最佳光照时间为每天12 h，黄酮合成量为27.854 82 mg/L。结论 巫山淫羊藿细胞生长特性的研究为其大规模悬浮培养生产天然活性成分奠定了基础。]]> 1，黎云祥^2]]> 1877true 2014/12/18 13:41:46 1876true 2014/12/18 13:41:46 1875true 研究龙牙楤木体细胞胚发生、发育及植株再生过程中，胚性愈伤组织、球形胚、子叶胚、体胚苗的生长和其主要药用成分总皂苷、齐墩果酸、总黄酮的累积情况。方法 采用组织培养诱导体细胞胚发生，测量体细胞胚发育过程中各发育时期的生物生长量，并用分光光度法分析其中的总皂苷和总黄酮的量，采用高效液相法测定齐墩果酸的量。结果 随着胚性愈伤组织的分化、发育，其生长速率由胚性愈伤组织的每周0.09 g，递增到体细胞胚苗的每周0.32 g。胚性愈伤组织和各不同发育时期体胚中总皂苷和齐墩果酸量的趋势相同，即体胚苗＞球形体胚＞胚性愈伤组织＞子叶体细胞胚；与总黄酮的量不同，即体胚苗＞子叶体细胞胚＞胚性愈伤组织＞球形体胚。结论 胚性愈伤组织和各不同发育时期体胚中，总皂苷、齐墩果酸、总黄酮的生长速率最高的是体胚苗，分别为每周6.72、3.42、7.36 mg。]]> 由香玲¹，代金玲¹，谭 啸¹，李永红²，李忠良²，王雪岩¹，刘培彬¹，王紫娟¹，孙正峰¹，詹亚光¹]]> 1874true 目的 对中药材色谱指纹图谱潜在信息进行发掘研究，通过“雷达特征峰”表述指纹图谱蕴含的中药材产地信息。方法 采用黄芩指纹图谱研究数据和文献报道的其他药材指纹图谱数据进行“雷达特征峰”分析。结果 从指纹图谱中各化学成分的比例关系所映射出的“雷达图”中，可以清晰地区别不同产区的黄芩。结论 通过“雷达特征峰”可以区别不同产地的药材。]]> 1,2，张凤娥²，杜方岭¹]]> 1873true 2014/12/18 13:41:47 1872true 目的 评价几个热点DNA条形码候选序列对葫芦科植物的鉴别能力。方法 使用ITS2、rbcL、matK和psbA-trnH序列的通用引物对葫芦科植物进行PCR扩增和测序，通过比较各序列的扩增和测序成功率、种内和种间的变异、barcoding gap，并采取相似性探索BLAST 1和最近距离Nearest Distance 方法评价不同序列的鉴别能力。结果 ITS2序列对葫芦科33个属、90个物种、182个样本进行分析，其鉴定成功率较高，在属水平为100.0%，在物种水平为88.5%；psbA-trnH序列对201个样本进行分析，其鉴定成功率在属水平为93.0%，在物种水平为73.1%，但其可以补充部分ITS2不能分析的物种区域。结论 ITS2和psbA-trnH是适合葫芦科植物鉴别的一个较好的DNA条形码序列组合。]]> 1，陈士林²，刘义梅¹，陈科力¹]]> 1871true 目的评价几个热点DNA条形码候选序列对葫芦科植物的鉴别能力。方法使用ITS2、rbcL、matK和psbA-trnH序列的通用引物对葫芦科植物进行PCR扩增和测序,通过比较各序列的扩增和测序成功率、种内和种间的变异、barcodinggap,并采取相似性探索BLAST 1和最近距离Nearest Distance方法评价不同序列的鉴别能力。结果 ITS2序列对葫芦科33个属、90个物种、182个样本进行分析,其鉴定成功率较高,在属水平为100.0%,在物种水平为88.5%;psbA-trnH序列对201个样本进行分析,其鉴定成功率在属水平为93.0%,在物种水平为73.1%,但其可以补充部分ITS2不能分析的物种区域。结论 ITS2和psbA-trnH是适合葫芦科植物鉴别的一个较好的DNA条形码序列组合。]]> 2014/12/18 13:27:17 1870true 目的研究我国不同地区天门冬核DNA ITS序列差异及其与地理位置的关系,为不同居群天门冬的鉴定和道地产区的确定提供理论依据。方法运用PCR法对25个地区的75个样本ITS序列扩增后双向测序,用软件DNAMAN和MEGA 4分析测序结果。结果每个地区的3个样本的ITS序列基本相同,不同地区样本间的ITS全序列存在一定差异,ITS2片段变异高于ITS1。贵州产天门冬遗传分化度较大,变异位点和信息位点较多。ITS序列构建的系统树表明,同一个地区的3个样本优先聚类,然后是同省的样本聚类,位于北纬24.6°～36.6°和22.2°～24.4°的样本分别聚为1大支;第1大支中包括青海、湖南和贵州省的样本,第2大支则包括浙江、广东、云南和广西4省的样本。结论 ITS序列可鉴定不同产地的天门冬,贵州省是天门冬药材道地产区之一,不同地区天门冬的亲缘聚类主要与纬度相关,与经度关系不大。]]> 2014/12/18 13:27:17 1869true 目的 研究我国不同地区天门冬核DNA ITS序列差异及其与地理位置的关系，为不同居群天门冬的鉴定和道地产区的确定提供理论依据。方法 运用PCR法对25个地区的75个样本ITS序列扩增后双向测序，用软件DNAMAN和MEGA 4分析测序结果。结果 每个地区的3个样本的ITS序列基本相同，不同地区样本间的ITS全序列存在一定差异，ITS2片段变异高于ITS1。贵州产天门冬遗传分化度较大，变异位点和信息位点较多。ITS序列构建的系统树表明，同一个地区的3个样本优先聚类，然后是同省的样本聚类，位于北纬24.6°～36.6°和22.2°～24.4°的样本分别聚为1大支；第1大支中包括青海、湖南和贵州省的样本，第2大支则包括浙江、广东、云南和广西4省的样本。结论 ITS序列可鉴定不同产地的天门冬，贵州省是天门冬药材道地产区之一，不同地区天门冬的亲缘聚类主要与纬度相关，与经度关系不大。]]> 1,2,3，张人文³，谈智文³，赵婷婷³，佘朝文^1,2,3]]> 1868true 目的 通过对紫苏种子萌发和幼苗生理特性的研究，寻找提高紫苏种子及幼苗在盐胁迫条件下的抗盐能力的方法。方法 测定不同浓度亚精胺（Spd）处理后的盐胁迫下紫苏种子的发芽势（G_v）、发芽率（G_r）和发芽指数（G_i），并对紫苏幼苗叶片的相对含水量、丙二醛（MDA）和超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化物酶（POD）和过氧化氢酶（CAT）的活性进行了测定。结果 盐胁迫下的紫苏种子萌发受到显著抑制，但是经过不同浓度的Spd处理后，萌发指标均有所升高，其中经过0.25 mmol/L Spd处理，各项指标均达到最大，G_v为59.7%，G_r为69.4%，G_i为12.8。Spd处理减缓了盐胁迫下紫苏叶片的相对含水量和总黄酮降低的趋势，并且降低了叶片MDA的量。Spd处理后SOD、POD和CAT 3种酶的活性均有所增加，但在Spd为0.25 mmol/L时达到最大值，分别为72.4 U/g、8.7 U/mg、8.8 U/mg。结论 0.25 mmol/L的Spd能够有效地减缓盐胁迫对紫苏种子及幼苗产生的伤害，提高了种子及幼苗的抗盐能力。]]> 1，何 平¹，喻泽莉¹，杜丹丹¹，胡世俊²]]> 1867true 目的通过对紫苏种子萌发和幼苗生理特性的研究,寻找提高紫苏种子及幼苗在盐胁迫条件下的抗盐能力的方法。方法测定不同浓度亚精胺(Spd)处理后的盐胁迫下紫苏种子的发芽势(G_v)、发芽率(G_r)和发芽指数(G_i),并对紫苏幼苗叶片的相对含水量、丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)的活性进行了测定。结果盐胁迫下的紫苏种子萌发受到显著抑制,但是经过不同浓度的Spd处理后,萌发指标均有所升高,其中经过0.25 mmol/L Spd处理,各项指标均达到最大,G_v为59.7%,G_r为69.4%,G_i为12.8。Spd处理减缓了盐胁迫下紫苏叶片的相对含水量和总黄酮降低的趋势,并且降低了叶片MDA的量。Spd处理后SOD、POD和CAT 3种酶的活性均有所增加,但在Spd为0.25 mmol/L时达到最大值,分别为72.4 U/g、8.7 U/mg、8.8 U/mg。结论 0.25 mmol/L的Spd能够有效地减缓盐胁迫对紫苏种子及幼苗产生的伤害,提高了种子及幼苗的抗盐能力。]]> 2014/12/18 13:27:17 1866true 目的考察丹参提取液对球形红细菌(光合细菌)生长的影响。方法通过添加不同质量浓度的常规培养基和丹参提取液,培养球形红细菌,考察球形红细菌的活菌数、生长曲线、脱氢酶活性及光合色素吸收光谱,研究丹参提取液对球形红细菌生长的影响。结果培养基中添加丹参提取液后可使球形红细菌活菌数增加到之前的1.6倍,并缩短球形红细菌生长的延迟期,提前进入指数期及稳定期,可使球形红细菌脱氢酶活性提高到之前的6.6倍。低质量浓度丹参提取液基本不影响球形红细菌中光合色素的形成,高质量浓度时吸收均变低,且影响类胡萝卜素的形成,其红外光谱855 nm处红移至863 nm。结论培养基中添加丹参提取液可影响球形红细菌生长,缩短球形红细菌生长周期,提高球形红细菌的活力,高质量浓度时影响光合色素的形成。]]> 2014/12/18 13:27:17 1865true 目的 考察丹参提取液对球形红细菌（光合细菌）生长的影响。方法 通过添加不同质量浓度的常规培养基和丹参提取液，培养球形红细菌，考察球形红细菌的活菌数、生长曲线、脱氢酶活性及光合色素吸收光谱，研究丹参提取液对球形红细菌生长的影响。结果 培养基中添加丹参提取液后可使球形红细菌活菌数增加到之前的1.6倍，并缩短球形红细菌生长的延迟期，提前进入指数期及稳定期，可使球形红细菌脱氢酶活性提高到之前的6.6倍。低质量浓度丹参提取液基本不影响球形红细菌中光合色素的形成，高质量浓度时吸收均变低，且影响类胡萝卜素的形成，其红外光谱855 nm处红移至863 nm。结论 培养基中添加丹参提取液可影响球形红细菌生长，缩短球形红细菌生长周期，提高球形红细菌的活力，高质量浓度时影响光合色素的形成。]]> 1，李建文¹，宋艳红²，杨官娥^1]]> 1864true 目的 探讨移栽与摘除首花对灯盏细辛种子生产的影响。方法 采用移栽和摘除首花的正交试验设计，每3 天采种1次，测定每批种子的产量、千粒质量和发芽率。采种后测定植株地上部分产量和药用成分量。结果 移栽处理的种子成熟期延长了12 d，种子产量、千粒质量、发芽率比直播分别提高了2.33倍、26.2%和2.03倍，二者存在显著性差异（P＜0.05）。与不摘除首花植株相比，摘除首花处理的种子的产量、千粒质量、发芽率分别提高了19.4%、8.4%和58.8%，同样存在显著性差异（P＜0.05）。移栽与摘除首花具有交互作用，但无统计学意义的显著性。采种后，“直播×摘除首花”处理的植株地上部分有较高产量和药用成分。结论 移栽和摘除首花能有效地提高灯盏细辛种子产量和质量。]]> 王 馨¹，董志渊¹，刘有贵²，杨智玲²，李林玉¹，杨 斌¹，李绍平¹]]> 1863true 目的探讨移栽与摘除首花对灯盏细辛种子生产的影响。方法采用移栽和摘除首花的正交试验设计,每3天采种1次,测定每批种子的产量、千粒质量和发芽率。采种后测定植株地上部分产量和药用成分量。结果移栽处理的种子成熟期延长了12 d,种子产量、千粒质量、发芽率比直播分别提高了2.33倍、26.2%和2.03倍,二者存在显著性差异(P<0.05)。与不摘除首花植株相比,摘除首花处理的种子的产量、千粒质量、发芽率分别提高了19.4%、8.4%和58.8%,同样存在显著性差异(P<0.05)。移栽与摘除首花具有交互作用,但无统计学意义的显著性。采种后,"直播×摘除首花"处理的植株地上部分有较高产量和药用成分。结论移栽和摘除首花能有效地提高灯盏细辛种子产量和质量。]]> 2014/12/18 13:27:17 1862true 目的研究黄芪经不同真菌固体发酵后黄芪甲苷的变化,为开发新型中药及其制剂提供参考。方法选用灵芝、桑黄、姬松茸、香菇4种药(食)用真菌对黄芪进行固体发酵,用HPLC-ELSD法检测黄芪和4种黄芪固体发酵物中黄芪甲苷和异黄芪甲苷的量。结果黄芪经4种真菌固体发酵后,黄芪甲苷均不同程度地转化成异黄芪甲苷。结论在固体发酵过程中,药(食)用真菌将黄芪中黄芪甲苷主要转化为异黄芪甲苷,且转化率差异较大。]]> 2014/12/18 13:27:17 1861true 目的 研究黄芪经不同真菌固体发酵后黄芪甲苷的变化，为开发新型中药及其制剂提供参考。方法 选用灵芝、桑黄、姬松茸、香菇4种药（食）用真菌对黄芪进行固体发酵，用HPLC-ELSD法检测黄芪和4种黄芪固体发酵物中黄芪甲苷和异黄芪甲苷的量。结果 黄芪经4种真菌固体发酵后，黄芪甲苷均不同程度地转化成异黄芪甲苷。结论 在固体发酵过程中，药（食）用真菌将黄芪中黄芪甲苷主要转化为异黄芪甲苷，且转化率差异较大。]]> 1860true 目的 考察菘蓝花期不同部位的靛蓝、靛玉红和多糖的积累分布情况。方法 采用HPLC法测定菘蓝花蕾期及盛花期2个阶段植株不同部位中靛蓝、靛玉红量，并采用苯酚-硫酸法测定各部位的多糖量。结果 靛蓝、靛玉红在叶中分布较多，根、茎、花中较少，其中基部叶的量最高。花蕾期叶中靛蓝、靛玉红量均高于盛花期，花中靛蓝、靛玉红量高于花蕾中的量。多糖在菘蓝全株均有分布，花蕾期根中量最高，盛花期地上部分的上端高于下端。结论 花期的菘蓝体内有靛蓝、靛玉红的分布，且主要分布于叶片内，花蕾期靛蓝、靛玉红总量高于盛花期的总量；多糖在菘蓝中分布有一定的规律，花蕾期根中多糖分布较多，地上部分多糖量有增加趋势。]]> 1859true 目的考察菘蓝花期不同部位的靛蓝、靛玉红和多糖的积累分布情况。方法采用HPLC法测定菘蓝花蕾期及盛花期2个阶段植株不同部位中靛蓝、靛玉红量,并采用苯酚-硫酸法测定各部位的多糖量。结果靛蓝、靛玉红在叶中分布较多,根、茎、花中较少,其中基部叶的量最高。花蕾期叶中靛蓝、靛玉红量均高于盛花期,花中靛蓝、靛玉红量高于花蕾中的量。多糖在菘蓝全株均有分布,花蕾期根中量最高,盛花期地上部分的上端高于下端。结论花期的菘蓝体内有靛蓝、靛玉红的分布,且主要分布于叶片内,花蕾期靛蓝、靛玉红总量高于盛花期的总量;多糖在菘蓝中分布有一定的规律,花蕾期根中多糖分布较多,地上部分多糖量有增加趋势。]]> 2014/12/18 13:27:17 1858true 目的 研究球药隔重楼次生代谢产物甾体皂苷甲羟戊酸合成途径的一个关键酶即3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶（HMGR）的基因，有助于对活性物质的合成进行调控，从而提高产量。方法 比较NCBI上公布的11种植物11条HMGR基因mRNA的同源保守区域，设计简并引物，利用RT-PCR技术，以球药隔重楼新鲜茎总RNA反转录的cDNA为模板成功扩增出404 bp的保守区基因片段。结果 序列分析表明，球药隔重楼HMGR基因片段与其他7种植物的一致性达到76%～81%，球药隔重楼HMGR氨基酸片段与其他植物有较高的同源性，经Genbank查询为一新的cDNA。结论 通过蛋白质特征区、保守区以及进化树分析，初步确定该基因为HMGR基因，这是首次从药用植物球药隔重楼中克隆得到甲羟戊酸途径关键酶HMGR的基因片段，也是百合科植物首次获得的HMGR基因。]]> 1，刘学端¹，尹华群¹，李迪强²，张于光²]]> 1857true 2014/12/18 13:26:02 1856true 2014/12/18 13:26:02 1855true 目的 通过对紫苏种子萌发及幼苗生理特性的研究，寻找提高紫苏种子及幼苗在盐胁迫下抗性能力的途径。方法 测定盐胁迫下紫苏种子在不同浓度的外源5-氨基乙酰丙酸（ALA）处理后，发芽势、发芽率、发芽指数和活力指数的变化，并对紫苏幼苗叶片的相对含水量、幼苗总生物量、可溶性糖量、叶片丙二醛（MDA）量以及超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化物酶（POD）和过氧化氢酶（CAT）活性进行测定。结果 100 mmol/L NaCl胁迫下的紫苏种子萌发受到显著抑制，但是经过不同质量浓度的ALA处理后，各项萌发指标均有所升高，其中经过50 mg/L ALA处理后效果最为显著，各项指标均达到最大值，发芽势为71.3%，发芽率为90.5%，发芽指数为15.9，活力指数为0.129 6。各处理均提高了幼苗总生物量和可溶性糖的量，减缓了盐胁迫下紫苏叶片相对含水量下降的趋势，降低了叶片MDA的量，显著地提高了SOD、POD和CAT 3种酶的活性，且经过50 mg/L ALA处理后3种酶的活性分别达到最大值（0.79、7.69、5.84 U/mg）。结论 50 mg/L ALA能够有效地减缓盐胁迫对紫苏种子及幼苗产生的伤害，提高种子及幼苗的抗盐能力。]]> 1854true 目的 获得高山红景天同源四倍体无性体系。方法 秋水仙素诱导种子加倍，通过多次组培再生进行嵌合体分离，采用气孔大小与密度测量、染色体计数和流式细胞学分析进行倍性鉴定。结果 秋水仙素质量分数与处理时间对种子萌发率、幼苗死亡率及诱变率均有十分明显的影响，0.2%秋水仙素处理露白种子72 h的萌发率、幼苗死亡率及诱变率分别为18.2%、73.6%、68.7%；倍性变异植株气孔明显增大，气孔密度变小；正常二倍体染色体数目为2n＝2x＝26，四倍体染色体数为 2n＝4x＝52，发现非整倍体的存在；倍性变异植株经3次再生纯化后获得纯合四倍体无性系，流式细胞学检测无嵌合体存在。结论 秋水仙素处理高山红景天种子获得同源四倍体具有可行性。]]> 1，程云清¹，刘建华²，钟 雪¹，陈智文¹]]> 1853true 2014/12/18 13:26:02 1852true 2014/12/18 13:26:02 1851true 目的 考察不同质量浓度激素组合对甘西鼠尾草愈伤组织诱导、增殖及分化的影响。方法 以甘西鼠尾草叶片为外植体，采用正交试验研究2，4-D、NAA、6-BA、KT对愈伤组织诱导及增殖的影响，并探讨适宜愈伤组织分化的培养条件。结果 以诱导率和相对生长速率为指标，6-BA和2，4-D均对甘西鼠尾草细胞脱分化和细胞增殖具有显著影响，愈伤组织诱导的最佳激素组合为2，4-D 0.5 mg/L＋NAA 1.0 mg/L＋6-BA 0.5 mg/L，增殖的最佳激素组合为2，4-D 0.5 mg/L＋6-BA 2.0 mg/L＋KT 0.1 mg/L，MS＋NAA 0.5 mg/L＋6-BA 1.0 mg/L的培养基有利于不定芽的分化，而1/2 MS＋IBA 1.0 mg/L的培养基则有利于不定根的分化。结论 本实验所建立的组织培养体系，适宜甘西鼠尾草的植株再生。]]> 1，张 丽¹，谢显莉²，张 利¹]]> 1850true 目的 研究氮、磷、钾肥对黄连白绢病菌核的形成和萌发的影响，为黄连栽培过程中防治病害提供新的方法。方法 配制不同浓度的氮、磷、钾肥施加到土壤中，再接种菌丝块、菌核，观察对菌核形成、萌发的影响。结果 尿素、碳酸氢氨对菌核萌发、形成均具有显著的抑制作用，而磷酸二氢钠、氯化钾、硝酸钾对菌核的形成、萌发具有不同程度的促进作用，磷酸二氢钾对菌核的萌发作用不明显，对菌核的形成具有抑制作用。结论 生产中可采取偏施氮肥，少施钾肥、磷肥的措施来控制黄连白绢病菌核的形成及萌发。]]> 1849true 2014/12/18 13:26:03 1848true 2014/12/18 13:26:03 1847true 目的 建立红花药材的化学模式识别方法。方法 采用傅里叶红外光谱法，对5种不同产地红花样品的红外谱图，以900～1 550 cm^?1内的吸收峰为指标，应用主成分和聚类方法进行数据分析。结果 红花样品可分为4个产区，同一产区内红花的化学组分相似，可做为红花药材质量评价的依据。结论 基于FTIR谱的主成分和聚类分析能够在一定程度表征出红花在不同地理位置和气候条件的多样性分化，能对红花的合理利用提供依据。]]> 1，王 青²，王 强¹]]> 1846true 目的 对不同采收期的枇杷叶进行质量评价，并考察其稳定性。方法 对不同采收季节、树叶和落叶、野生和栽培的枇杷叶进行质量评价，考察高温、高湿和强光对其质量的影响，采用长期试验和加速试验考察其稳定性。结果 不同采收季节、野生和栽培的枇杷叶中齐墩果酸和熊果酸的量接近，落叶比树叶略高；高温、高湿和强光对枇杷叶中齐墩果酸和熊果酸的量影响不大；枇杷叶在长期6月和加速6月内基本稳定。结论 本研究为制定枇杷叶对照药材的有效期提供依据。]]> 1，李 鲲²]]> 1845true 2014/12/18 13:26:03 1844true 目的 对菘蓝45S rDNA、5S rDNA和端粒进行物理定位，并分析其核型。方法 使用多色荧光原位杂交技术（FISH）进行定位。结果 菘蓝基因组有一对45S rDNA位点位于4号染色体，一对5S rDNA位点位于5号染色体，14对端粒信号位于染色体两端；核型公式为2n＝2x＝14＝10m（2SAT）＋4sm，属2A核型。结论 为菘蓝核型分析、分子细胞遗传图谱构建提供了稳定、有效的细胞学标记。]]> 1，李立家²]]> 1843true 目的 对菘蓝45S rDNA、5S rDNA和端粒进行物理定位,并分析其核型。方法 使用多色荧光原位杂交技术(FISH)进行定位。结果 菘蓝基因组有一对45S rDNA位点位于4号染色体,一对5S rDNA位点位于5号染色体,14对端粒信号位于染色体两端;核型公式为2n=2x=14=10m(2SAT)+45m, 属2A核型。结论 为菘蓝核型分析、分子细胞遗传图谱构建提供了稳定、有效的细胞学标记。]]> 2014/12/18 11:17:23 1842true 目的 对影响翼梗五味子ISSR-PCR扩增反应的各因素进行优化，建立稳定的反应体系。方法 基于正交极差分析方法，以Taq酶、Mg²⁺、模板DNA、dNTP和引物5因素4水平的正交试验对翼梗五味子ISSR-PCR反应体系进行优化。结果 翼梗五味子ISSR-PCR的最佳反应体系（20 μL）为：Taq酶1.00 U、Mg²⁺ 1.50 mmol/L、模板DNA 40.00 ng、dNTP 0.25 mmol/L、引物0.50 μmol/L。筛选出12条扩增稳定、多态性丰富的ISSR引物，并确定了每个引物的最佳退火温度。结论 所建立的翼梗五味子ISSR反应体系具有标记位点清晰、反应系统稳定、重复性好等优点，为翼梗五味子的分子水平研究提供实验依据。^]]> 1, 3，熊宇婷^{1, 2}，谢 砚³，顾 蔚^{1, 2, 3} ]]> 1841true 目的 从分子水平研究我国仙茅属（Curculigo Gaertn.）植物的遗传关系。方法 对我国仙茅属植物7个国产种30个单株进行RAPD分析。运用Popgene Version1.31软件计算相关参数，采用UPGMA聚类法进行聚类分析。结果 11个RAPD引物共扩增出157条带，其中有145条呈多态性。我国仙茅属植物的遗传多样性极为丰富，在物种水平上，多态位点百分率（PPB）为92.36%，平均每个位点的有效等位基因数（N_e）为1.493 7, Nei’s基因多样性指数（H）为0.300 1，Shannon’s多样性信息指数H_sp为0.457 7。在种内水平上，PPB＝5.09%，N_e＝1.036 6，H＝0.020 4，种内Shannon’s多样性信息指数（H_pop）为0.029 8。Nei’s 基因多样性指数计算的种间遗传分化系数（G_st＝0.931 3）与Shannon’s分化系数（0.934 9）基本一致，均说明大部分遗传变异存在于种间。种间基因流（N_m）为0.036 9，说明种间基因流动较少，遗传分化程度较高。两种间的Nei’s遗传一致度（I）的范围为0.520 8～0.823 7。根据Nei’s遗传距离进行UPGMA聚类，基于RAPD分子标记的聚类结果与传统分类一致。结论 我国仙茅属植物的遗传多样性十分丰富，且种间的遗传差异大于种内的遗传差异。]]> 1840true 目的 探讨云南青阳参居群内、居群间和种子间的遗传多样性。方法 利用AFLP分子标记技术检测云南不同生态环境中青阳参居群间、居群内及不同植株间和同一植株不同双生蓇葖果的不同种子间遗传多样性。结果 居群内遗传多样性比居群间遗传多样性丰富，居群间有效基因等位数（N_e）、Nei’s 基因多样性（H）、Shannon’s指数（I）分别为1.172、0.105、0.161，居群内最高为1.217、0.121、0.177；种子之间遗传多样性H值为0.095，I值为0.145）高于双生蓇葖果间（H值为0.121，I值为0.182）。结论 云南青阳参遗传多样性较低，需要进行保护；在云南3个生态环境中，楚雄的青阳参遗传多样性较其他地区丰富，AFLP图谱中也出现与该生态环境相一致的特异条带。]]> 1839true 目的 培育三倍体灯盏花，并对其重要经济性状进行评估。方法 利用秋水仙素诱导获得的灯盏花四倍体植株，与二倍体栽培种杂交获得三倍体灯盏花。用染色体法鉴定灯盏花倍性，大田观察评估三倍体灯盏花形态学特征，HPLC法测定灯盏乙素量。结果 四倍体与二倍体杂交成功获得三倍体灯盏花（2n＝3x＝27）；与双亲相比，三倍体灯盏花植株在株高、叶片长、叶片宽、花瓣数、气孔大小上大于二倍体，低于四倍体，但其叶片数和花朵直径均大于双亲；三倍体植株生长旺盛，灯盏乙素质量分数1.38%，介于四倍体（1.51%）和二倍体（1.22%）之间，但其产量显著高出四倍体，为二倍体的2.14倍和四倍体的1.84倍。结论 四倍体与二倍体杂交培育的三倍体灯盏花，灯盏乙素量虽然低于四倍体，但显著高于二倍体，综合其产量远远高于二倍体和四倍体的特征，三倍体灯盏花具有重要的生产利用价值。]]> 2，梅 琳²，郑思乡¹，杨生超²，李晓波²]]> 1838true 目的 探索阳春砂杂交子代与母本的红外光谱鉴别方法。方法 采用傅里叶变换红外光谱法（FTIR）测定阳春砂杂交子代与母本的红外光谱，分别应用导数光谱和傅里叶自解卷积对图谱进行转换处理，对比寻找杂交子代与母本的特征差异吸收。结果 阳春砂杂交子代与母本的红外光谱无明显差异，经四阶导数光谱变化后于1 051.014 cm^?1处出现明显的特征差异吸收峰，傅里叶自解卷积转化后于771.563 4和1 612.432 5 cm^?1处出现了具有明显特征独立的差异吸收峰。结论 阳春砂杂交子代与母本的FTIR经过导数光谱和傅里叶自解卷积转化后可出现明显的差异，能较好地鉴别二者。]]> 1，梁欣健¹，石莹莹²，熊清平²，赖小平¹，陈蔚文³]]> 1837true 目的 研究微肥配比对附子生长及产量的影响。方法 以毛茛科植物乌头为试验材料，采用均匀设计，研究不同的锌、硼、铁、锰配比下附子的生长及产量状况。结果 锌、硼、铁、锰配比为4∶1∶1∶2是促进附子生长和提高附子产量的最佳配比。该配比条件下，附子的株高和叶干质量较对照有所降低，茎粗、须根数、须根长、子根体积及茎、须根、母根干质量均比对照有所增加，且显著或极显著高于其他肥料配比，其中须根和母根干质量较对照处理分别增加了24.5%和25.9%。相关性分析表明，株高与附子单株产量呈显著负相关，而须根、母根干质量与单株产量呈显著正相关。结论 从促进营养器官生长而提高附子产量的角度来说，锌、硼、铁、锰（4∶1∶1∶2）为最佳配比。]]> 1，陈兴福¹，杨文钰¹，舒光明²，刘 莎¹，夏燕莉²]]> 1836true 目的 通过锁阳Cynomorium songaricum及其寄主植物种类的分布调查，为锁阳人工栽培和保护沙区生态环境提供科学依据。方法 在甘肃河西沙区锁阳生长地，进行现场采集标本、查阅相关文献资料和标本鉴定。结果 发现锁阳的一个新寄主植物——霸王Zygophyllum xanthoxylon。结论 霸王是锁阳的新寄主植物，为锁阳正常生长提供了必需营养。]]> 1，罗光宏²，王 进¹，郑天翔^1]]> 1835true 摘 要：目的 从黄花蒿中分离鉴定青蒿素生物合成途径关键酶——细胞色素P450单加氧酶编码基因（cyp71av1）的启动子序列并研究其表达特性，探索提高该基因表达量并进一步促进青蒿素合成的途径。方法 采用热不对称嵌套PCR法从黄花蒿DNA中分离cyp71av1 5’端非翻译区序列，构建与β-葡萄糖苷酸酶（GUS）报告基因融合的植物表达载体，通过农杆菌介导转化烟草。采用GUS组织化学染色法和分光光度法分别定性和定量检测cyp71av1 5’端非翻译区序列调控GUS基因在正常条件和胁迫条件下的表达。结果 从黄花蒿中分离出长短2个cyp71av1 5’端非翻译区序列，分别获得与GUS基因融合表达的转基因烟草，均能检测到GUS活性且两者无明显差异。GUS活性定量检测结果还显示，在脱水、4 ℃和紫外辐射条件下，转化烟草GUS活性提高1.4～2.7倍。结论 从黄花蒿分离出的2个cyp71av1 5’端非翻译区序列都具有启动子功能，并且具有环境诱导表达特性。]]> 1834true 目的 从黄花蒿中分离鉴定青蒿素生物合成途径关键酶——细胞色素P450单加氧酶编码基因(cyp71av1)的启动子序列并研究其表达特性,探索提高该基因表达量并进一步促进青蒿素合成的途径。方法 采用热不对称嵌套PCR法从黄花蒿DNA中分离cyp71av1 5’端非翻译区序列,构建与β-葡萄糖苷酸酶(GUS)报告基因融合的植物表达载体,通过农杆菌介导转化烟草。采用GUS组织化学染色法和分光光度法分别定性和定量检测cyp71av1 5’端非翻译区序列调控GUS基因在正常条件和胁迫条件下的表达。结果 从黄花蒿中分离出长短2个cyp71av1 5’端非翻译区序列,分别获得与GUS基因融合表达的转基因烟草,均能检测到GUS活性且两者无明显差异。GUS活性定量检测结果还显示,在脱水、4℃和紫外辐射条件下,转化烟草GUS活性提高1.4-2.7倍。结论 从黄花蒿分离出的2个cyp7lav1 5’端非翻译区序列都具有启动子功能,并且具有环境诱导表达特性。]]> 2014/12/18 11:01:22 1833true 目的 对15份枸杞种质（包括7个种3个变种，5个品种品系）的亲缘关系进行初步研究。方法 应用DNA-AFLP分子标记技术和NTSYS类平均法对枸杞种质进行聚类分析。结果 8对引物共扩增出432条带，其中多态性条带为360条，多态性比率达83.3%。NTSYS类平均法聚类结果显示，以0.72、0.79和0.85的相似系数可将全部受试枸杞种质分为9种、5种和3种聚合类群。结论 在分子水平上枸杞种间的遗传多样性十分丰富；雄性不育枸杞YX-1与白花枸杞和圆果枸杞亲缘关系较近，而与宁夏枸杞栽培品种的亲缘关系较远；3个变种的聚类结果与传统的形态学分类存在着明显不同。]]> 1832true 目的 对短葶山麦冬进行遗传多样性分析。方法 利用SRAP分子标记技术对47份短葶山麦冬材料进行遗传多样性分析。结果 15对引物共扩增出323条多态性带，平均多态位点百分率为88.47%。平均引物多态信息量（PIC）为0.90。Nei’s基因多样性指数（H）为0.197 7，Shannon’s信息指数（I）为0.319 0。遗传分化系数（G_st）为0.252 8。UPGMA聚类表明遗传相似系数为0.59～0.99。结论 短葶山麦冬遗传多样性水平较高，遗传变异主要在居群内。]]> 1831true 目的 通过对三七种子后熟过程中内源激素变化规律的研究，探索内源激素在种胚发育进程和休眠解除中的作用机制，为三七种子的处理和种源保存奠定基础。方法 采用酶联免疫法（ELISA）对三七种子后熟过程中的内源激素赤霉素（GA）、吲哚乙酸（IAA）、玉米素核苷（ZR）和脱落酸（ABA）进行动态测定。结果 三七种子后熟过程中，内源GA、IAA和ZR的量随种胚的发育进程而增加，而ABA的量则减少。结论 激素平衡的变化是解除三七种子休眠、促进萌发的决定因素之一。]]> 1, 2，段银妹²，萧凤回^{1, 2}]]> 1830true 目的 以红心菊及新白菊为母本，野菊Chrysanthemum indicum及菊花脑Chrysanthemum nankingense为父本，设计4种杂交组合进行杂交并鉴定种间杂种，以了解药用菊花主要性状遗传规律。方法 采用蕾期授粉进行药用菊花种间杂交，通过形态学、细胞学手段及RAPD分子标记技术对药用菊花种间杂种进行鉴定。结果 杂种外观性状介于亲本之间，有的出现了亲本不具备的性状特征。RAPD分子标记结果表明，杂种表现出父本特异带或双亲均不具备的新谱带。杂种染色体数目为亲本平均值。结论 蕾期授粉法进行种间杂交可产生种子，红心菊及新白菊基因杂合度高，杂种表现出性状分离，染色体多为非整倍体。]]> 1829true 目的 在大田条件下，研究不同大小川半夏种茎对产量和质量的影响，为川半夏规范化栽培提供理论依据。方法 选取川半夏主产区3份不同来源地的材料，分别按种茎直径（d）大（d＞1.5 cm）、中（1.0 cm＜d≤1.5 cm）和小（0.5 cm＜d≤1.0 cm）分级，随机区组试验设计，在其生育期内定期考察出苗数、珠芽产生数和抽薹数等性状；采收后考察其增重率和增殖率，并测定其主要化学成分。结果 不同种茎大小的川半夏出苗、珠芽产生和抽薹等生长节律基本一致。但生长期间平均出苗数、平均抽薹数、平均珠芽产生数、单株增重率、单株增殖率以及生物碱和次黄嘌呤核苷量间差异达极显著水平，而β-谷甾醇量无显著差异。结论 在川半夏的生产栽培中，选取0.5 cm＜d≤1.0 cm的种茎作为种源，种茎活力旺盛，可明显达到增产效果，同时生产出的半夏次黄嘌呤核苷量较高，生物碱量也较高。]]> 1，吴 卫¹，侯 凯¹，潘红梅¹，李 敏²]]> 1828true 目的 研究滇重楼种子破休眠的方法及其内源激素水平变化规律。方法 以变温层积处理的滇重楼种子为材料，利用高效液相色谱法（HPLC）测定种胚发育过程中植物激素赤霉素（GA）、吲哚乙酸（IAA）、脱落酸（ABA）量的变化与种子胚率的关系。结果 变温层积处理可在3个月内打破滇重楼种子休眠，其GA量显著升高，ABA量显著下降。结论 内源激素ABA和GA在滇重楼种子休眠与萌发过程中起着重要的作用。]]> 1827true 目的 了解不同海拔与生长时间对人参多糖量的影响。方法 采集我国人参主产地长白山地区不同生长时间、不同海拔的人参，水煮法提取人参根中的多糖，并用苯酚-硫酸法测定人参多糖的量，比较其量随海拔的变化规律。结果 人参多糖的量随生长时间的增加而增加；海拔100～800 m，人参多糖的量随海拔的升高而增加；海拔950～1 450 m人参多糖的量随海拔的升高而减少；同海拔的抚松地区人参多糖量高于集安地区。结论 人参多糖的量与种植海拔和生长时间有密接关系，应根据实际需要合理种植。]]> 1826true 目的 了解铁皮石斛人工栽培居群的遗传多样性，为种质资源的保护与新品种的选育提供基础。方法 利用RAPD分子标记对浙江义乌、天台、建德、武义，云南麻栗坡、勐海的14个居群的铁皮石斛和1个居群的紫皮石斛进行遗传多样性分析。结果 从225个RAPD引物中筛选出15个引物，对105个铁皮石斛和3个紫皮石斛样本进行PCR扩增，共扩增出138条带，其中133条为多态性条带，多态性条带比率（PPB）为96.38%；14个铁皮石斛居群的多态位点（PPL）在10.79%～76.26%，平均为45.32%。结论 全国主产区人工栽培的铁皮石斛遗传多样性丰富，铁皮石斛种质的亲缘关系远近与其地理种源具有显著的相关性，与栽培地点无关。]]> 1，林二培¹，朱 波¹，俞巧仙²，斯金平¹]]> 1825true 目的了解铁皮石斛人工栽培居群的遗传多样性,为种质资源的保护与新品种的选育提供基础。方法利用RAPD分子标记对浙江义乌、天台、建德、武义,云南麻栗坡、勐海的14个居群的铁皮石斛和1个居群的紫皮石斛进行遗传多样性分析。结果从225个RAPD引物中筛选出15个引物,对105个铁皮石斛和3个紫皮石斛样本进行PCR扩增,共扩增出138条带,其中133条为多态性条带,多态性条带比率(PPB)为96.38%14个铁皮石斛居群的多态位点(PPL)在10.79%～76.26%,平均为45.32%。结论全国主产区人工栽培的铁皮石斛遗传多样性丰富,铁皮石斛种质的亲缘关系远近与其地理种源具有显著的相关性,与栽培地点无关。]]> 2014/12/18 10:45:37 1824true 目的对不同产地、不同表型性状的砂仁Amomi Fructus种质资源进行遗传多样性分析。方法采用简单序列重复区间(ISSR)扩增技术,对来自云南、海南、广东、福建等地区的21个砂仁样品进行遗传多样性及亲缘关系分析同时,对其中16个阳春砂仁的株高、茎粗、叶片数、叶片大小等部分植物学表型性状进行测定,利用这些数据对各居群砂仁进行聚类分析。结果 ISSR分析结果显示,从60条ISSR引物中筛选出11条用于扩增,共检测出54条DNA条带,多态性位点为22个,多态性条带比率(PPB)可达40.74%,Nei's基因多样性(H)为0.116 1,Shannon's多态性信息指数(I)为0.184 2各居群表型性状差异较小。结论砂仁种质资源的遗传多样性较低。]]> 2014/12/18 10:45:37 1823true 目的 对不同产地、不同表型性状的砂仁Amomi Fructus种质资源进行遗传多样性分析。方法 采用简单序列重复区间(ISSR)扩增技术，对来自云南、海南、广东、福建等地区的21个砂仁样品进行遗传多样性及亲缘关系分析；同时，对其中16个阳春砂仁的株高、茎粗、叶片数、叶片大小等部分植物学表型性状进行测定，利用这些数据对各居群砂仁进行聚类分析。结果 ISSR分析结果显示，从60条ISSR引物中筛选出11条用于扩增，共检测出54条DNA条带，多态性位点为22个，多态性可达40.74%，Nei’s基因多样性（H）为0.116 1，Shannon’s多态性信息指数（I）为0.184 2；各居群表型性状差异较小。结论 砂仁种质资源的遗传多样性较低。]]> 1，李学兰¹，杨春勇²，唐德英¹，王继永³，高微微²]]> 1822true 目的 探究一种北五味子快速繁殖的方法。方法 通过正交试验对北五味子的组织培养进行研究，得出北五味子的快速繁殖的最适培养基。结果 在MS培养基上附加NAA 0.3 mg/L＋ZT 0.1 mg/L＋6-BA 1.5 mg/L时芽的增殖效果最好；而附加NAA 0.2 mg/L时，生根效果最佳。最适培养条件为温度25 ℃、光照强度为2 000 lx，光周期12 h。结论 本研究所得最适培养基以及培养条件可用来提高北五味子产量及质量。]]> 1，齐 欣¹，王玉坤¹，张 丽¹，马 慧¹，郭志富¹，宋宇宁²]]> 1821true 目的探究一种北五味子快速繁殖的方法。方法通过正交试验对北五味子的组织培养进行研究,得出北五味子的快速繁殖的最适培养基。结果在MS培养基上附加NAA 0.3 mg/L+ZT 0.1 mg/L+6-BA 1.5 mg/L时芽的增殖效果最好而附加NAA 0.2 mg/L时,生根效果最佳。最适培养条件为温度25℃、光照强度为2 000 lx,光周期12 h。结论本研究所得最适培养基以及培养条件可用来提高北五味子产量及质量。]]> 2014/12/18 10:45:38 1820true 目的探讨西洋参不同组织器官中总皂苷和单体皂苷量的差异及其与人参皂苷合成途径中鲨烯合成酶(SQS)和鲨烯环氧酶(SQE)基因表达量之间的关系。方法以4年生西洋参的14个组织器官为材料,索氏回流法提取总皂苷,采用HPLC法测定6种单体皂苷(人参皂苷Rg1、Re、Rb1、Rc、Rb2和Rd)的量,用香草醛-硫酸比色法测定总皂苷量。通过实时荧光定量PCR分析SQS和SQE基因在西洋参14个组织器官中的表达量。结果总皂苷和单体皂苷量在西洋参不同组织器官中差异非常显著(P<0.01)。除人参皂苷Rb2外,各单体皂苷及总皂苷之间均呈非常显著的正相关关系(P<0.01)。SQS和SQE基因在14个组织器官中的表达量具有非常显著的差异(P<0.01)并与人参皂苷Re、Rg1、Rb1、Rd和总皂苷量之间有显著的正相关关系(P<0.05)。结论西洋参不同组织器官中皂苷的量存在差异,SQS和SQE基因在人参皂苷合成途径中起着极其重要的作用。]]> 2014/12/18 10:45:38 1819true 目的 探讨西洋参不同组织器官中总皂苷和单体皂苷量的差异及其与人参皂苷合成途径中鲨烯合成酶（SQS）和鲨烯环氧酶（SQE）基因表达量之间的关系。方法 以4年生西洋参的14个组织器官为材料，索氏回流法提取总皂苷，采用HPLC法测定6种单体皂苷（人参皂苷Rg₁、Re、Rb₁、Rc、Rb₂和Rd）的量，用香草醛-硫酸比色法测定总皂苷量。通过实时荧光定量PCR分析SQS和SQE基因在西洋参14个组织器官中的表达量。结果 总皂苷和单体皂苷量在西洋参不同组织器官中差异非常显著（P＜0.01）。除人参皂苷Rb₂外，各单体皂苷及总皂苷之间均呈非常显著的正相关关系（P＜0.01）。SQS和SQE基因在14个组织器官中的表达量具有非常显著的差异（P＜0.01）并与人参皂苷Re、Rg₁、Rb₁、Rd和总皂苷量之间有显著的正相关关系（P＜0.05）。结论 西洋参不同组织器官中皂苷的量存在差异，SQS和SQE基因在人参皂苷合成途径中起着极其重要的作用。]]> ﹡]]> 1818true 目的 建立水半夏的组培快繁体系，为快速、大量生产水半夏种苗提供基础。方法 利用不同植物激素配比的培养基，以水半夏块茎为外植体进行试验。结果 愈伤培养基MS＋NAA 0.2 mg/L＋KT 1.0 mg/L＋蔗糖3 %＋琼脂6 g/L可成功诱导水半夏愈伤组织；丛生芽培养基MS＋NAA 0.2 mg/L＋6-BA 2.0 mg/L＋蔗糖3 %＋琼脂6 g/L诱导不定芽效果较好，增殖倍数高；生根培养基1/2 MS＋NAA 0.2 mg/L＋IBA 0.4 mg/L＋KT 0.2 mg/L＋蔗糖3 %＋琼脂6 g/L＋AC 0.3 g/L，有利于水半夏不定根的快速形成，12～14周即可获得再生水半夏植株。培养基MS＋NAA 0.2 mg/L＋6-BA 1.5 mg/L＋蔗糖3 %＋琼脂6 g/L为诱导水半夏分化一次性成苗的最佳激素配比，5～6周可形成试管苗，10周后可用于炼苗。结论 建立的水半夏组培快繁体系为水半夏优良品种的快速繁殖奠定基础，且可应用于工厂化生产水半夏种苗。]]> 1,张立红¹,潘晟昊¹，陈集双^{1, 2}]]> 1817true 目的建立水半夏的组培快繁体系,为快速、大量生产水半夏种苗提供基础。方法利用不同植物激素配比的培养基,以水半夏块茎为外植体进行试验。结果愈伤培养基MS+NAA 0.2 mg/L+KT 1.0 mg/L+蔗糖3%+琼脂6 g/L可成功诱导水半夏愈伤组织丛生芽培养基MS+NAA 0.2 mg/L+6-BA 2.0 mg/L+蔗糖3%+琼脂6 g/L诱导不定芽效果较好,增殖倍数高生根培养基1/2 MS+NAA 0.2 mg/L+IBA 0.4 mg/L+KT 0.2 mg/L+蔗糖3%+琼脂6 g/L+AC 0.3 g/L,有利于水半夏不定根的快速形成,12～14周即可获得再生水半夏植株。培养基MS+NAA 0.2 mg/L+6-BA 1.5 mg/L+蔗糖3%+琼脂6 g/L为诱导水半夏分化一次性成苗的最佳激素配比,5～6周可形成试管苗,10周后可用于炼苗。结论建立的水半夏组培快繁体系为水半夏优良品种的快速繁殖奠定基础,且可应用于工厂化生产水半夏种苗。]]> 2014/12/18 10:45:38 1816true 目的大田条件下,研究铁、锰、锌肥对盾叶薯蓣根茎中薯蓣皂苷元量及根茎产量的影响。方法采用单因素施肥法,HPLC法测定薯蓣皂苷元的量,数据采用SPSS13.0软件包分析。结果 3种微肥使盾叶薯蓣根茎产量与薯蓣皂苷元量均有不同程度的增加,对薯蓣皂苷元量的影响为锰肥>锌肥>铁肥,对根茎产量的影响为铁肥>锰肥>锌肥。结论施用适当浓度的锰肥,对盾叶薯蓣的优质、高产栽培,具有重要的实践意义。]]> 2014/12/18 10:45:38 1815true 目的 大田条件下，研究铁、锰、锌肥对盾叶薯蓣根茎中薯蓣皂苷元量及根茎产量的影响。方法 采用单因素施肥法，HPLC法测定薯蓣皂苷元的量，数据采用SPSS13.0软件包分析。结果 3种微肥使盾叶薯蓣根茎产量与薯蓣皂苷元量均有不同程度的增加，对薯蓣皂苷元量的影响为锰肥＞锌肥＞铁肥，对根茎产量的影响为铁肥＞锰肥＞锌肥。结论 施用适当浓度的锰肥，对盾叶薯蓣的优质、高产栽培，具有重要的实践意义。]]> 1，林 菲¹，李艳芝¹，徐增莱²，汪 琼²，吴国荣³]]> 1814true 目的 分析石斛及其混淆品茎表皮细胞特征，评价其鉴别价值。方法 采用石蜡切片技术制作药用石斛及其混淆品的茎横切片；利用测微尺测量茎表皮细胞的显微特征。结果 39种药用石斛及其混淆品的茎细胞形状特征和细胞壁的增厚程度种间差异较大，而种内差异较小；石斛及其混淆品茎表皮细胞的细胞壁有3种增厚现象，分别为不均匀增厚型、均匀增厚型和无增厚型；金钗石斛属于无增厚型，马鞭石斛和铁皮石斛属于不均匀增厚型，但密花石豆兰和云南石仙桃属于均匀增厚型；《中国药典》收载药用石斛茎表皮细胞的切向和径向直径比值为小于1.65±0.24或大于2.39±0.49，而3种混淆品均为在（1.98±0.23）～（2.35±0.77）。结论 表皮细胞类型和大小以及切向与径向直径比值可以作为鉴别石斛的主要显微特征，尤其对《中国药典》收载的3种药用石斛能够提供更加可靠的鉴别依据。]]> 1，包英华¹，王文全²]]> 1813true 目的分析石斛及其混淆品茎表皮细胞特征,评价其鉴别价值。方法采用石蜡切片技术制作药用石斛及其混淆品的茎横切片利用测微尺测量茎表皮细胞的显微特征。结果 39种药用石斛及其混淆品的茎细胞形状特征和细胞壁的增厚程度种间差异较大,而种内差异较小石斛及其混淆品茎表皮细胞的细胞壁有3种增厚现象,分别为不均匀增厚型、均匀增厚型和无增厚型金钗石斛属于无增厚型,马鞭石斛和铁皮石斛属于不均匀增厚型,但密花石豆兰和云南石仙桃属于均匀增厚型《中国药典》收载药用石斛茎表皮细胞的切向和径向直径比值为小于1.65±0.24或大于2.39±0.49,而3种混淆品均为1.98±0.23～2.35±0.77。结论表皮细胞类型和大小以及切向与径向直径比值可以作为鉴别石斛的主要显微特征,尤其对《中国药典》收载的3种药用石斛能够提供更加可靠的鉴别依据。]]> 2014/12/18 10:45:38 1812true 目的 探讨姜黄属Curcuma L. 6种郁金类药用植物的种间及其种内不同居群间的亲缘关系。方法 采用聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE），分析超氧化物歧化酶（SOD）、多酚氧化酶（PPO）、细胞色素氧化酶（COD）的酶带，并采用UPGMA法对数据进行分析。结果 SOD、PPO和COD的酶谱能较好地区分6种郁金类药用植物；PPO和COD还能够对种内不同居群的材料进行区分。结论 同种植物不同居群间亲缘关系的远近与地理来源有关；能够通过聚类分析区分姜黄和川郁金；姜黄属郁金类植物的栽培型和野生型产生了分化。]]> 1811true 目的 探讨姜黄属Curcuma L.6种郁金类药用植物的种间及其种内不同居群间的亲缘关系。方法 采用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE),分析超氧化物歧化酶(SOD)、多酚氧化酶(PPO)、细胞色素氧化酶(COD)的酶带,并采用UPGMA法对数据进行分析。结果 SOD、PPO和COD的酶谱能较好地区分6种郁金类药用植物;PPO和COD还能够对种内不同居群的材料进行区分。结论 同种植物不同居群间亲缘关系的远近与地理来源有关;能够通过聚类分析区分姜黄和川郁金;姜黄属郁金类植物的栽培型和野生型产生了分化。]]> 2014/12/18 10:44:09 1810true 目的 建立并优化天门冬ISSR-PCR反应体系和扩增程序,为探讨天门冬种质间遗传多样性提供依据。方法 采用单因子试验和正交设计法,研究Mg2+、dNTP、引物、Taq DNA聚合酶、模板DNA、延伸时间及循环次数对PCR扩增的影响。结果 天门冬ISSR-PCR的最佳反应体系为25μL的反应体系中含模板DNA 40 ng、Mg2+1.25 mmol/L、dNTP 320μmol/L、引物1.2μmol/L、Taq DNA聚合酶1.5 U。在此基础上,从50条引物中筛选出13条扩增稳定、多态性丰富的ISSR引物,并通过梯度PCR试验,确定引物最佳退火温度。结论 建立的天门冬ISSR-PCR反应体系,经过17份天门冬种质检验,证明该体系稳定可靠,可用于天门冬遗传分析。]]> 2014/12/18 10:44:09 1809true 目的 建立并优化天门冬ISSR-PCR反应体系和扩增程序，为探讨天门冬种质间遗传多样性提供依据。方法 采用单因子试验和正交设计法，研究Mg²⁺、dNTP、引物、Taq DNA聚合酶、模板DNA、延伸时间及循环次数对PCR扩增的影响。结果 天门冬ISSR-PCR的最佳反应体系为25 μL的反应体系中含模板DNA 40 ng、Mg²⁺ 1.25 mmol/L、dNTP 320 μmol/L、引物1.2 μmol/L、Taq DNA 聚合酶1.5 U。在此基础上，从50条引物中筛选出13条扩增稳定、多态性丰富的ISSR引物，并通过梯度PCR试验，确定引物最佳退火温度。结论 建立的天门冬ISSR-PCR反应体系，经过17份天门冬种质检验，证明该体系稳定可靠，可用于天门冬遗传分析。]]> 1, 2, 3，颜 旺³，廖亚西³，梁云浩³，佘朝文^{1, 2, 3}]]> 1808true 目的 利用细胞悬浮培养技术生产霍山石斛单细胞，解决石斛药用植物资源短缺问题。方法 以霍山石斛叶片等外植体为实验材料，通过不同的制备方法获得霍山石斛单细胞，研究霍山石斛细胞培养的多种影响因素，应用正交设计优化霍山石斛细胞悬浮培养的条件。结果 在蔗糖35 g/L，NH₄NO₃ 1.3 g/L，pH 5.6，激素IAA 0.4 mg/L，6-BA 1.0 mg/L，培养时间14～18 d，在此条件下培养的霍山石斛细胞数为9.42×10⁵个/mL。结论 经过4次继代培养后石斛细胞多为圆状或椭圆状，细胞碎片减少。应用优化的细胞悬浮培养条件，能获得较大量的霍山石斛细胞。]]> 1807true 目的 利用细胞悬浮培养技术生产霍山石斛单细胞,解决石斛药用植物资源短缺问题。方法 以霍山石斛叶片等外植体为实验材料,通过不同的制备方法获得霍山石斛单细胞,研究霍山石斛细胞培养的多种影响因素,应用正交设计优化霍山石斛细胞悬浮培养的条件。结果 在蔗糖35 g/L,NH4NO3 1.3 g/L,pH 5.6,激素IAA 0.4 mg/L,6-BA 1.0 mg/L,培养时间14～18 d,在此条件下培养的霍山石斛细胞数为9.42×105个/mL。结论 经过4次继代培养后石斛细胞多为圆状或椭圆状,细胞碎片减少。应用优化的细胞悬浮培养条件,能获得较大量的霍山石斛细胞。]]> 2014/12/18 10:44:09 1806true 目的 对栝楼的遗传多样性进行分析,旨在为栝楼的遗传育种中亲本的组配奠定基础。方法 采用ISSR分子标记法对采自不同种植地区的34份栝楼种质进行多态性和聚类分析。结果 不同种植地区的栝楼的遗传多态性可达90.0%;根据ISSR聚类结果可将34份栝楼种质分为食籽用型、药食两用型和野生型3大类群。结论 栝楼种质之间存在着较高的遗传多样性,与种植地区没有相关性。]]> 2014/12/18 10:44:09 1805true 目的 对栝楼的遗传多样性进行分析，旨在为栝楼的遗传育种中亲本的组配奠定基础。方法 采用ISSR分子标记法对采自不同种植地区的34份栝楼种质进行多态性和聚类分析。结果 不同种植地区的栝楼的遗传多态性可达90.0%；根据ISSR聚类结果可将34份栝楼种质分为食籽用型、药食两用型和野生型3大类群。结论 栝楼种质之间存在着较高的遗传多样性，与种植地区没有相关性。]]> 1804true 目的 研究川东獐牙菜的种子形态和不同处理对种子萌发的影响，为川东獐牙的种子育苗、人工栽培提供科学依据。方法 采用显微镜观察种子形态，对种子设置不同培养温度、不同光质、不同贮藏时间以及不同质量浓度的赤霉素（GA₃）、KNO₃浸种处理，观察记录种子发芽率并进行统计分析。结果 川东獐牙菜种子细小，千粒质量49.5 mg；种子发芽的适宜温度是14～23 ℃，最适温度为18 ℃；光质及全黑暗条件影响种子萌发，其中红色光照最有利种子萌发，全黑暗最不利于种子萌发；GA₃、KNO₃浸种可明显促进种子苗长高，并影响种子发芽率、发芽指数；川东獐牙菜种子在室内常温下贮藏寿命仅为5个月，若将种子在低温下贮藏可延长种子寿命。结论 得到川东獐牙菜种子萌发的最适处理条件，本研究对川东獐牙菜种子育苗、人工栽培具有重要指导意义。]]> 1，刘新元²，刘 冰³，龚卫华¹，袁 波⁴，彭际淼⁴]]> 1803true 目的 研究川东獐牙菜的种子形态和不同处理对种子萌发的影响,为川东獐牙的种子育苗、人工栽培提供科学依据。方法 采用显微镜观察种子形态,对种子设置不同培养温度、不同光质、不同贮藏时间以及不同质量浓度的赤霉素(GA3)、KNO3浸种处理,观察记录种子发芽率并进行统计分析。结果 川东獐牙菜种子细小,千粒质量49.5 mg;种子发芽的适宜温度是14～23℃,最适温度为18℃;光质及全黑暗条件影响种子萌发,其中红色光照最有利种子萌发,全黑暗最不利于种子萌发;GA3、KNO3浸种可明显促进种子苗长高,并影响种子发芽率、发芽指数;川东獐牙菜种子在室内常温下贮藏寿命仅为5个月,若将种子在低温下贮藏可延长种子寿命。结论 得到川东獐牙菜种子萌发的最适处理条件,本研究对川东獐牙菜种子育苗、人工栽培具有重要指导意义。]]> 2014/12/18 10:44:09 1802true 目的 研究高温胁迫下根内球囊霉Glomus intraradices(AM真菌)对苍术根茎生物量及其根茎挥发油成分的影响。方法 采用盆栽试验,接种AM真菌,测定苍术地下部分生物量和根茎挥发油的量。结果 高温胁迫显著降低了栽培苍术在自然条件下的AM真菌侵染率,而接种AM真菌苍术根系的侵染率无影响。高温胁迫下,接种AM真菌苍术根系的侵染率与未接种的苍术相比超过4倍。高温胁迫下,接种AM真菌可显著提高苍术根茎鲜质量、根茎含水量、根干质量、地下总干质量、挥发油组分数,显著降低苍术根茎挥发油中愈创醇与茅术醇的量。结论 高温胁迫下接种AM真菌,有利于提高苍术根系侵染率、促进苍术地下部分生物量的积累,并影响苍术根茎挥发油总数和主要组分的量。]]> 2014/12/18 10:44:09 1801true 目的 研究高温胁迫下根内球囊霉Glomus intraradices（AM真菌）对苍术根茎生物量及其根茎挥发油成分的影响。方法 采用盆栽试验，接种AM真菌，测定苍术地下部分生物量和根茎挥发油的量。结果 高温胁迫显著降低了栽培苍术在自然条件下的AM真菌侵染率，而接种AM真菌 苍术根系的侵染率无影响。高温胁迫下，接种AM真菌苍术根系的侵染率与未接种的苍术相比超过4倍。高温胁迫下，接种AM真菌可显著提高苍术根茎鲜质量、根茎含水量、根干质量、地下总干质量、挥发油组分数，显著降低苍术根茎挥发油中愈创醇与茅术醇的量。结论 高温胁迫下接种AM真菌，有利于提高苍术根系侵染率、促进苍术地下部分生物量的积累，并影响苍术根茎挥发油总数和主要组分的量。]]> 1, 2，刘大会^{1, 2}，郭兰萍¹，金 航²，杨 光¹，周 洁¹]]> 1800true 目的 研究Ca²⁺对半夏类原球茎生长、高温胁迫及次生代谢产物量的影响。方法 以半夏叶柄为外植体，固体培养基培养获得类原球茎，悬浮培养，采用不同质量浓度Ca²⁺处理，测定类原球茎生长速率、抗逆性指标，以及生物碱、鸟苷、有机酸的量。结果 在（25±2）℃条件下培养，随Ca²⁺质量浓度增加，半夏类原球茎生长呈慢-快-慢变化趋势，质量浓度为440 mg/L时，生长速率达到最大值；不同处理半夏类原球茎中生物碱、鸟苷、有机酸量差异显著，Ca²⁺质量浓度为440 mg/L时，生物碱量最高（0.158%），Ca²⁺质量浓度为660 mg/L时，鸟苷、有机酸累积量最高（分别为0.017 3%、0.608%）。在（35±2）℃条件下，质量浓度为0～660 mg/L，随Ca²⁺质量浓度升高，SOD、POD活性逐渐增强，Ca²⁺质量浓度为660 mg/L时，活性最高，但Ca²⁺质量浓度为880 mg/L时，SOD、POD活性均降低；不同质量浓度Ca²⁺处理MDA量变化不显著。结论 一定质量浓度的Ca²⁺能促进半夏类原球茎生长，增强抗逆性，提高有用次生代谢产物的量。]]> 1799true 目的 研究Ca2+对半夏类原球茎生长、高温胁迫及次生代谢产物量的影响。方法 以半夏叶柄为外植体,固体培养基培养获得类原球茎,悬浮培养,采用不同质量浓度Ca2+处理,测定类原球茎生长速率、抗逆性指标,以及生物碱、鸟苷、有机酸的量。结果 在(25±2)℃条件下培养,随Ca2+质量浓度增加,半夏类原球茎生长呈慢-快-慢变化趋势,质量浓度为440 mg/L时,生长速率达到最大值;不同处理半夏类原球茎中生物碱、鸟苷、有机酸量差异显著,Ca2+质量浓度为440 mg/L时,生物碱量最高(0.158%),Ca2+质量浓度为660 mg/L时,鸟苷、有机酸累积量最高(分别为0.017 3%、0.608%)。在(35±2)℃条件下,质量浓度为0～660 mg/L,随Ca2+质量浓度升高,SOD、POD活性逐渐增强,Ca2+质量浓度为660 mg/L时,活性最高,但Ca2+质量浓度为880 mg/L时,SOD、POD活性均降低;不同质量浓度Ca2+处理MDA量变化不显著。结论 一定质量浓度的Ca2+能促进半夏类原球茎生长,增强抗逆性,提高有用次生代谢产物的量。]]> 2014/12/18 10:44:09 1798true 目的 建立一种客观有效的评价黄芩内在质量的新模式。方法 广泛收集代表性黄芩样品,制备各样品的供试液,分别测定其HPLC色谱指纹图谱及抑菌效果,并用数学方法将指纹图谱数据与抑菌率关联。结果 由建立的数学模型计算得到的20批黄芩验证样品的抑菌率值与实验测得值的偏差率全部在10%以内,其中15批样品的偏差率在5%以内。结论 运用所建立的数学模型基本能够实现通过指纹图谱数据对黄芩药材抑菌效果的评价。]]> 2014/12/18 10:44:09 1797true 目的 建立一种客观有效的评价黄芩内在质量的新模式。方法 广泛收集代表性黄芩样品，制备各样品的供试液，分别测定其HPLC色谱指纹图谱及抑菌效果，并用数学方法将指纹图谱数据与抑菌率关联。结果 由建立的数学模型计算得到的20批黄芩验证样品的抑菌率值与实验测得值的偏差率全部在10%以内，其中15批样品的偏差率在5%以内。结论 运用所建立的数学模型基本能够实现通过指纹图谱数据对黄芩药材抑菌效果的评价。]]> 1，于宗渊¹，丁晓彦¹，吕 凌¹，李 珂²，李树彬²]]> 1796true 目的 针对台湾金线莲ISSR反应的特点,建立一个稳定性高、重现性好,适合金线莲ISSR遗传差异分析的反应体系. 方法 确立金线莲ISSR初始反应体系并对引物进行初筛;设定反应体系中各因子的不同浓度并进行PCR扩增,依据稳定性高、重现性好的原则,对该反应体系进行调整与优化,最终建立稳定可靠的ISSR反应体系. 结果 首次建立了金线莲ISSR反应的最适体系(25μL):1×PCR buffer,2 mmol/L MgCl2,200μmol/L dNTP Mixture,0.2μmol/L引物,1 U Taq酶,DNA模板约20 ng;扩增程序:94℃充分变性7 min,94℃变性30 s,52℃退火45 s,72℃延伸2 min,45个循环后,最后72℃延伸10 min. 结论 所建立的金线莲ISSR反应体系具有稳定性高、重现性好、标记位点清晰、检测多态性能力强等特点,可以较好地应用于野生金线莲的居群差异研究及经长期组培繁殖后金线莲无菌苗的遗传变异研究.]]> 2014/12/18 10:20:34 1795true 目的 针对金线莲ISSR反应的特点，建立一个稳定性高、重现性好，适合金线莲ISSR遗传差异分析的反应体系。方法 确立金线莲ISSR初始反应体系并对引物进行初筛；设定反应体系中各因子的不同浓度并进行PCR扩增，依据稳定性高、重现性好的原则，对该反应体系进行调整与优化，最终建立稳定可靠的ISSR反应体系。结果 首次建立了金线莲ISSR反应的最适体系（25 μL）：1×PCR buffer，2 mmol/L MgCl₂，200 μmol/L dNTP Mixture，0.2 μmol/L引物，1 U Taq酶，DNA模板约20 ng；扩增程序：94 ℃充分变性7 min，94 ℃变性30 s，52 ℃退火45 s，72 ℃延伸2 min，45个循环后，最后72 ℃延伸10 min。结论 所建立的金线莲ISSR反应体系具有稳定性高、重现性好、标记位点清晰、检测多态性能力强等特点，可以较好地应用于野生金线莲的居群差异研究及经长期组培繁殖后金线莲无菌苗的遗传变异研究。]]> 1794true 目的 研究灰毡毛忍冬自然群体的遗传多样性。方法 以15个不同来源地的野生灰毡毛忍冬及2个花蕾型栽培品种为试材，通过SRAP分析，利用Popgene及Treeconw软件分析处理数据，UPGMA方法聚类，构建亲缘关系系统图。结果 通过筛选得到24对SRAP引物，扩增出239条条带，其中210条为多态性条带，多态性条带比率为87.8%；Nei′s多样性指数He为0.239 9，Shannon多样性指数I为0.372 4；从DNA分子水平揭示出灰毡毛忍冬存在着丰富的遗传多样性。遗传相似系数在0.442 3～0.940 2。用UPGMA法得到所有样本的聚类图，可分为两大类群。结论 灰毡毛忍冬有着丰富的遗传多样性，SRAP技术可有效运用于灰毡毛忍冬的遗传分析。]]> 1,2，李隆云^1,2，吴叶宽^1,2，张 雪^1,2，蔡应繁³]]> 1793true 目的 研究灰毡毛忍冬自然群体的遗传多样性. 方法 以15个不同来源地的野生灰毡毛忍冬及2个花蕾型栽培品种为试材,通过SRAP分析,利用Popgene及Treeconw软件分析处理数据,UPGMA方法聚类,构建亲缘关系系统图. 结果 通过筛选得到24对SRAP引物,扩增出239条条带,其中210条为多态性条带,多态性条带比率为87.8%;Nei’s多样性指数He为0.239 9,Shannon多样性指数I为0.372 4;从DNA分子水平揭示出灰毡毛忍冬存在着丰富的遗传多样性.遗传相似系数在0.442 3～0.940 2.用UPGMA法得到所有样本的聚类图,可分为两大类群. 结论 灰毡毛忍冬有着丰富的遗传多样性,SRAP技术可有效运用于灰毡毛忍冬的遗传分析.]]> 2014/12/18 10:20:34 1792true 目的 研究石蒜属13种(含2变种)植物的种间亲缘关系和同种不同采集地材料的遗传多样性,为种质资源的开发利用提供分子佐证. 方法 采用扩增长度多态性(AFLP)标记对石蒜属植物20份材料的基因组DNA进行种间亲缘关系研究. 结果 从33对选择性扩增引物组合中筛选出6对,共扩增得到330条清晰可统计的条带,其中多态性条带为320条,占总带数的96.8%;AFLP分子标记检测到石蒜属20份材料种间遗传相似系数为0.38～0.89;AFLP分子标记聚类结果显示同一采集地的材料亲缘关系更近;石蒜属植物存在较丰富的遗传多样性. 结论 AFLP分子标记能有效区分石蒜属植物种间的亲缘关系.]]> 2014/12/18 10:20:35 1791true 目的 研究石蒜属13种（含2变种）植物的种间亲缘关系和同种不同采集地材料的遗传多样性，为种质资源的开发利用提供分子佐证。方法 采用扩增长度多态性（AFLP）标记对石蒜属植物20份材料的基因组DNA进行种间亲缘关系研究。结果 从33对选择性扩增引物组合中筛选出6对，共扩增得到330条清晰可统计的条带，其中多态性条带为320条，占总带数的96.8%；AFLP分子标记检测到石蒜属20份材料种间遗传相似系数为0.38～0.89；AFLP分子标记聚类结果显示同一采集地的材料亲缘关系更近；石蒜属植物存在较丰富的遗传多样性。结论 AFLP分子标记能有效区分石蒜属植物种间的亲缘关系。]]> 1，董美芳¹，阎学燕²，尚富德¹]]> 1790true 目的 研究N、P和K肥的施用量及配比对川白芷产量和欧前胡素和异欧前胡素量的影响。方法 采用L₉(3⁴)正交组合设计田间试验，测定川白芷产量，HPLC法测定根部欧前胡素和异欧前胡素量。结果 不同N、P和K肥施用量及配比会显著影响川白芷的产量以及品质。N、P、K肥配施对川白芷的产量均表现为正效应，但对川白芷欧前胡素与异欧前胡素量的影响差异较大。在低K水平下（K₂O 120 kg/hm²），适当增加N、P肥用量可增大欧前胡素的量；在高K水平下（K₂O 240 kg/hm²），适中的N、P肥配比有利异欧前胡素的形成；在高N水平下（195 kg/hm²），无论P、K肥用量及配比多少欧前胡素、异欧前胡素量均小于空白(ck)。正交方差分析结果还表明，N、P和K肥对产量影响均达极显著水平，影响顺序为P肥＞N肥>K肥；N、P和K肥对欧前胡素量的影响均达到了极显著水平（P＜0.01），其中P、K肥影响比N肥大；但仅N肥对异欧前胡素量影响到达显著水（P＜0.05）。所有处理中，N施用量为150 kg/hm²，P₂O₅为225 kg/hm²，K₂O为120 kg/hm²，N-P₂O₅-K₂O的配比为1.3︰1.9︰1的产量和欧前胡素量最高，与ck之间的差异均达到了显著水平，同时异欧前胡素量也较高。结论 在本实验条件下，得到较适宜配施方案，从而使川白芷产量及欧前胡素和异欧前胡素量均提高。]]> 1789true 目的 研究N、P和K肥的施用量及配比对川白芷产量和欧前胡素和异欧前胡素量的影响. 方法 采用L9(3⁴)正交组合设计田间试验,测定川白芷产量,HPLC法测定根部欧前胡素和异欧前胡素量. 结果 不同N、P和K肥施用量及配比会显著影响川白芷的产量以及品质.N、P、K肥配施对川白芷的产量均表现为正效应,但对川白芷欧前胡素与异欧前胡素量的影响差异较大.在低K水平下(K₂O 120 kg/hm²),适当增加N、P肥用量可增大欧前胡素的量;在高K水平下(K₂O 240 kg/hm²),适中的N、P肥配比有利异欧前胡素的形成;在高N水平下(195 kg/hm²),无论P、K肥用量及配比多少欧前胡素、异欧前胡素量均小于空白(ck).正交方差分析结果还表明,N、P和K肥对产量影响均达极显著水平,影响顺序为P肥＞N肥＞K肥;N、P和K肥对欧前胡素量的影响均达到了极显著水平(P0.01),其中P、K肥影响比N肥大;但仅N肥对异欧前胡素量影响到达显著水(P＜0.05).所有处理中,N施用量为150 kg/hm²,P₂O₅为225 kg/hm²,K₂O为120 kg/hm²,N-P₂O₅-K₂O的配比为1.3:1.9:1的产量和欧前胡素量最高,与ck之间的差异均达到了显著水平,同时异欧前胡素量也较高. 结论 在本实验条件下,得到较适宜配施方案,从而使川白芷产量及欧前胡素和异欧前胡素量均提高.]]> 2014/12/18 10:20:35 1788true 目的 用NaCl模拟盐胁迫,研究接种内生真菌对菊花抗盐特性的影响. 方法 采用盆栽试验,以与内生真菌葡萄孢(C1菌株)、球毛壳菌(C4菌株)共生培养的菊花为材料,研究不同浓度盐胁迫对不同处理组菊花生理指标的影响. 结果 各处理组菊花根叶的含水量随着盐分胁迫的加重而降低,接菌处理组的根叶含水量减失程度比对照组小.各处理组SOD酶活力、可溶性蛋白量均随NaCl浓度提高而增加,20 g/L NaCl时均达到最大值,接菌处理组SOD酶活力、可溶性蛋白量高于对照组,C4组高于C1组.POD酶活力均先升高后降低,15 g/L NaCl时各处理组POD酶活力达到最大值,C4、C1组POD酶活力分别比对照组高25.50%、1.35%.15 g/L NaCl处理时,C4组PAL活力约是对照组的7倍. 结论 内生真菌增加了菊花的抗盐能力,C4组效果好于C1组.]]> 2014/12/18 10:20:35 1787true 目的 用NaCl模拟盐胁迫，研究接种内生真菌对菊花抗盐特性的影响。方法 采用盆栽试验，以与内生真菌葡萄孢（C1菌株）、球毛壳菌（C4菌株）共生培养的菊花为材料，研究不同浓度盐胁迫对不同处理组菊花生理指标的影响。结果 各处理组菊花根叶的含水量随着盐分胁迫的加重而降低，接菌处理组的根叶含水量减失程度比对照组小。各处理组SOD酶活力、可溶性蛋白量均随NaCl浓度提高而增加，20 g/L NaCl时均达到最大值，接菌处理组SOD酶活力、可溶性蛋白量高于对照组，C4组高于C1组。POD酶活力均先升高后降低，15 g/L NaCl时各处理组POD酶活力达到最大值，C4、C1组POD酶活力分别比对照组高25.50%、1.35%。15 g/L NaCl处理时，C4组PAL活力约是对照组的7倍。结论 内生真菌增加了菊花的抗盐能力，C4组效果好于C1组。]]> 1，宋文玲¹，蔡信之²，戴传超¹]]> 1786true 目的 研究不同质量分数的Cu²⁺、Fe³⁺、Cr³⁺和Ca²⁺对竹黄菌液体发酵产竹红菌素量和菌丝体生物量的影响。方法 向培养基中添加不同质量分数的金属离子，在27 ℃、130 r/min下培养96 h。结果 Cr³⁺的质量分数为0.005%时竹红菌素及菌丝体生物量最大；Fe³⁺的质量分数为0.003%时菌丝体生物量最高，0.005%时竹红菌素量最高；Ca²⁺的质量分数为0.03%时最有利于菌丝体生长，0.05%时最能促进竹红菌素的分泌；Cu²⁺的质量分数为0.03%时生物量及竹红菌素量均达到最大值。结论 添加金属离子后，菌丝体干质量最高达15.28 g/L，竹红菌素量最高达8.12 mg/g。]]> 1785true 目的 研究不同质量分数的Cu²⁺、Fe3+、Cr³⁺和Ca²⁺对竹黄菌液体发酵产竹红菌素量和菌丝体生物量的影响. 方法 向培养基中添加不同质量分数的金属离子,在27℃、130 r/min下培养96 h. 结果 Cr³⁺的质量分数为0.005%时竹红菌素及菌丝体生物量最大;Fe³⁺的质量分数为0.003%时菌丝体生物量最高,0.005%时竹红菌素量最高;Ca²⁺的质量分数为0.03%时最有利于菌丝体生长,0.05%时最能促进竹红菌素的分泌;Cu²⁺的质量分数为0.03%时生物量及竹红菌素量均达到最大值. 结论 添加金属离子后,菌丝体干质量最高达15.28 g/L,竹红菌素量最高达8.12 mg/g.]]> 2014/12/18 10:20:35 1784true 目的 研究盐胁迫对长春花愈伤组织生长及阿玛碱积累的影响. 方法 用浓度为0、50、100、150 mmol/L的NaCl处理长春花愈伤组织,测定其鲜质量、干质量、丙二醛(MDA)量、光合速率、呼吸速率等生理指标和阿玛碱的量. 结果 盐胁迫显著地降低了长春花愈伤组织的鲜质量和干质量,提高了MDA量、光合速率和呼吸速率;在含有不同浓度NaCl的培养基上生长30 d后,愈伤组织的阿玛碱量随NaCl浓度的增加而逐渐降低;用不同浓度的NaCl溶液喷洒生长27 d的愈伤组织,发现3 d后50 mmol/L处理的愈伤组织中阿玛碱量比对照高出近1倍. 结论 长期盐胁迫能够抑制长春花愈伤组织的生长,同时引起阿玛碱积累的减少;低浓度NaCl喷洒处理则对长春花细胞中阿玛碱的积累有较大的促进作用.]]> 2014/12/18 10:20:36 1783true 目的 研究盐胁迫对长春花愈伤组织生长及阿玛碱积累的影响。方法 用浓度为0、50、100、150 mmol/L的NaCl处理长春花愈伤组织，测定其鲜质量、干质量、丙二醛（MDA）量、光合速率、呼吸速率等生理指标和阿玛碱的量。结果 盐胁迫显著地降低了长春花愈伤组织的鲜质量和干质量，提高了MDA量、光合速率和呼吸速率；在含有不同浓度NaCl的培养基上生长30 d后，愈伤组织的阿玛碱量随NaCl浓度的增加而逐渐降低；用不同浓度的NaCl溶液喷洒生长27 d的愈伤组织，发现3 d后50 mmol/L处理的愈伤组织中阿玛碱量比对照高出近1倍。结论 长期盐胁迫能够抑制长春花愈伤组织的生长，同时引起阿玛碱积累的减少；低浓度NaCl喷洒处理则对长春花细胞中阿玛碱的积累有较大的促进作用。]]> 1782true 目的 在生长光强为1.5、10、30、55、100、270 μmol/(m²?s)下对弱光生态型盾叶薯蓣的薯蓣皂苷元和生物量分别进行测定，以探讨不同光强与盾叶薯蓣中薯蓣皂苷元和生物量的关系，并找出弱光生态型盾叶薯蓣的最适生长光强。方法 采用TLC法和RP-HPLC法测定其根状茎中薯蓣皂苷元的量。结果 不同光强对盾叶薯蓣的薯蓣皂苷元的量有显著影响。在100、55 μmol/(m²?s)的光强下，根状茎中薯蓣皂苷元的量最高，分别占其干质量的0.45%和0.55%。光照强度对盾叶薯蓣的生长有显著的影响，在30、55、100 μmol/(m²?s)下长势良好，其中在100 μmol/(m²?s)下生长最好。光照强度影响叶片的形状，随着光照强度的增加，叶片长与宽的比率也随之增加。在270 μmol/(m²?s)的强光照射下，叶片长与宽的比率最大。光照强度能显著地影响植株的总叶面积，在100 μmol/(m²?s)光强下植株总的叶面积最大，总的生物量最高，根状茎的生物量与整个植株生物量的比值最大。结论 弱光型盾叶薯蓣是一种薯蓣皂苷元量较高的薯蓣变种，这将为该药源植物的选择育种以及栽培提供理论指导。]]> 1，李鹄鸣¹，廖飞勇²，何 平³]]> 1781true 目的 在生长光强为1.5、10、30、55、100、270μmol/(m².s)下对弱光生态型盾叶薯蓣的薯蓣皂苷元和生物量分别进行测定,以探讨不同光强与盾叶薯蓣中薯蓣皂苷元和生物量的关系,并找出弱光生态型盾叶薯蓣的最适生长光强. 方法 采用TLC法和RP-HPLC法测定其根状茎中薯蓣皂苷元的量. 结果 不同光强对盾叶薯蓣的薯蓣皂苷元的量有显著影响.在100、55μmol/(m².s)的光强下,根状茎中薯蓣皂苷元的量最高,分别占其干质量的0.45%和0.55%.光照强度对盾叶薯蓣的生长有显著的影响,在30、55、100μmol/(m².s)下长势良好,其中在100μmol/(m².s)下生长最好.光照强度影响叶片的形状,随着光照强度的增加,叶片长与宽的比率也随之增加.在270μmol/(m².s)的强光照射下,叶片长与宽的比率最大.光照强度能显著地影响植株的总叶面积,在100μmol/(m².s)光强下植株总的叶面积最大,总的生物量最高,根状茎的生物量与整个植株生物量的比值最大. 结论 弱光型盾叶薯蓣是一种薯蓣皂苷元量较高的薯蓣变种,这将为该药源植物的选择育种以及栽培提供理论指导.]]> 2014/12/18 10:20:36 1780true 目的 对罗汉果甜苷V生物合成途径的关键酶法呢基焦磷酸合成酶（Farnesyl pyrophosphate synthase，FPPS）基因的全长cDNA序列进行克隆，为研究罗汉果甜苷V生物合成与基因调控奠定基础。方法 根据植物FPPS基因保守功能域设计简并引物，通过PCR和RACE方法克隆罗汉果FPPS基因的全长cDNA。结果 获得罗汉果FPPS（SgFPPS）基因的全长cDNA序列共1 354个核苷酸，包含一个1 026核苷酸的开放阅读框架（open reading frame, ORF），cDNA编码的蛋白包含342个氨基酸，推断蛋白质相对分子质量为3.92×10⁴。NCBI Blastx结果显示，SgFPPS基因编码的蛋白与苹果树来源FPPS具有最高同源性，氨基酸一致度达85.1%。SgFPPS具有异戊烯基转移酶的5个典型保守功能域。进化树分析结果显示，SgFPPS基因与苹果树的FPPS具有较近的亲缘关系。结论 首次克隆SgFPPS基因的全长cDNA序列，为分析SgFPPS基因表达特性及其在罗汉果甜苷V生物合成中的功能奠定基础。]]> 1，陈本勇¹，黎起秦²，李 惠³，陈保善¹ ]]> 1779true 目的 对党参肌动蛋白（actin）基因进行克隆及序列分析。方法 根据已经克隆的植物actin基因的保守序列设计一对简并性引物，以党参根部总RNA为模板，采用RT-PCR的方法扩增actin 基因片段并连接到pMD19-T Simple载体上，阳性克隆经PCR检测后进行测序。结果 得到一段603 bp的序列，序列分析表明，该片段编码200个氨基酸，与高等植物actin基因核苷酸序列同源性在78%以上，与其他肌动蛋白氨基酸序列同源性达90%以上。结论 首次从党参中克隆出了actin基因，为有效利用该基因奠定了基础。]]> 1，李 剑¹，许 瑞²，王引权³，张延红³，王惠珍³，张金林¹ ]]> 1778true 目的 分析不同产区吴茱萸的遗传多样性。方法 应用 SRAP 技术对吴茱萸的遗传背景进行研究，试剂盒提取吴茱萸幼嫩叶片基因组DNA，构建SRAP 试验体系，筛选引物并对35份样品进行遗传背景的研究，用NTSYS-pc 2.1 软件对SRAP扩增结果进行聚类分析。结果 从100对SRAP 引物中优选10对用于吴茱萸遗传背景的研究，其中两对引物可有效鉴别吴茱萸品种，分别为Me4＋Em1和Me9＋Em10。10对引物共扩增得到清晰条带188条，其中共有条带43条，多态性条带145条，多态性比率为77.1%。聚类结果显示在相关系数为0.52时，吴茱萸与密果吴萸分居两群；在相似系数为0.62时，共分为3大类群。吴茱萸中的石虎变种比吴茱萸原变种的遗传差异更显著；石虎品种呈现出较强的地缘相关性，特别是受海拔因素影响明显。结论 吴茱萸遗传背景差异明显，SRAP分析可有效鉴别不同品种的吴茱萸，并检测到地区间的差异。]]> 1, 2，曹 亮¹，李顺祥^{1, 3}，黄 丹^{1, 3}，卢向阳²]]> 1777true 目的 以飞船搭载的灵芝Ganoderma lucidum菌株为材料，研究不同光质对灵芝生长形态及抗氧化酶活性的效应，找出适于灵芝生长的最佳光质，为光质选择提供理论依据。方法 栽培灵芝时进行不同光质处理，在灵芝不同生长发育时期观测其形态变化，并测定抗氧化酶体系中主要酶活性。结果 不同光质处理的弹孢前期灵芝菌盖厚度与菌盖表面环纹数与对照差异显著。不同光质处理对灵芝子实体产量和灵芝孢子粉产量均有影响。红色、蓝色光质处理提高了过氧化物酶（POD）、过氧化氢酶（CAT）活性。蓝色光质处理提高了可溶性蛋白量，并且使丙二醛（MDA）在生长末期保持相对较低水平，从而延缓了灵芝子实体衰老。绿色、黄色光质抑制了抗氧化酶活性，导致灵芝子实体可溶性蛋白量下降及MDA量上升，加速了灵芝子实体的衰老过程。结论 蓝色光质可以使灵芝子实体维持较高的抗氧化酶水平，促进可溶性蛋白合成，从而增强灵芝代谢，延缓灵芝衰老。]]> 1776true 目的 研究秦艽Gentiana macrophylla地上和地下生物量与其根际微生物群落结构关系。方法 采用平板培养法测定秦艽根际微生物群落组成。结果 人工栽培秦艽根际细菌、氨化细菌和固氮菌数量均显著高于野生种类；野生和人工栽培秦艽根际细菌、氨化细菌和固氮菌数量在高海拔样点最高；人工栽培秦艽地上和地下生物量均显著高于野生种类；秦艽生物量与根际细菌、氨化细菌和固氮菌数量呈正相关。结论 秦艽人工栽培应充分满足其生态要求，尽量在秦艽适宜生长的高海拔低温山区栽培；合理供给氮肥，接种合适的菌肥并增加其土壤微生物总数量可提高秦艽的产量。]]> 1，梁 健¹，安 毅²，秦 源¹，南春燕¹]]> 1775true 目的 通过对黄花蒿干物质的积累及青蒿素与N、P、K量的动态变化研究，了解黄花蒿植株N、P、K的需求比例以及干物质的积累及N、P、K量和青蒿素量之间的关系，为肥料的合理配施提供参考。方法 以桂93001号黄花蒿为观测对象，定期采集植株样品，测定其生物量和根、茎、叶、花中的N、P、K以及叶片和花的青蒿素量。结果 黄花蒿7月中旬前干物质积累量最少，青蒿素的积累量最大，8月中旬到9月底干物质积累量较大，9月底叶片的青蒿素量达到最低；黄花蒿植株N、P、K积累量较多的时期主要在其生长前期，其中N、K是黄花蒿需要较多的营养元素，N、P、K在植株体内分配的比例为1∶0.12∶0.76，每生产100 kg黄花蒿需要N 19.6～28.2、P 2.0～3.4、K 13.6～17.3 kg。结论 施肥的重要时期主要放在生长前期，而肥料应以N、K肥为主，配施适量的P肥，根据目标产量和土壤N、P、K量确定其施肥量。]]> 1774true 目的 建立分子印迹流动注射化学发光法定量分析紫草素的新方法。方法 在酸性条件下，紫草素对高锰酸钾-甲醛体系发光反应具有明显的增敏作用，以甲基丙烯酸为功能单体、乙二醇二甲基丙烯酸酯为交联剂合成紫草素的分子印迹聚合物，并将其作为分子识别物质，利用紫草素-高锰酸钾-甲醛化学发光体系，结合流动注射化学发光分析技术，建立测定紫草素的分子印迹流动注射化学发光分析方法。结果 体系的化学发光强度与紫草素质量浓度呈线性关系，其标准曲线为Y＝43.2 X＋12.68，r＝0.999 3，线性范围为1.20～80.0 μg/mL，检出限为0.36 μg/mL。结论 利用分子印迹流动注射化学发光分析法测定紫草中的紫草素简便、快速、准确。]]> 1773true 目的 研究大盘山自然保护区内不同品系白术之间的形态学特征、遗传多样性基础，为保护和选育优质种质资源奠定基础。方法 对11个品系的白术样品进行了形态学、生理学比较分析，并利用ISSR分子标记技术分析其遗传多样性，通过UPCMA法进行聚类分析。结果 11份白术样品在叶片形状、叶色、根茎形态、产量、抗病性方面存在很大的差异，且这些差异并没有一定的相关性；各品系白术的光合速率也存在显著的差异，且产量和光合速率间高度相关。筛选出的15条ISSR引物共检测得到129个位点，其中107个为多态性位点，占82.95%，聚类分析表明白术各品系之间都发生了一定程度的分化现象，个别品系之间遗传分化现象严重。结论 大盘山白术资源丰富，各品系间具有一定遗传差异基础，为选育优质白术资源提供基础。]]> 1，陈斌龙²，陈 莉¹，郭卫东¹，陈秉初¹ ]]> 1772true 目的 研究大盘山自然保护区内不同品系白术之间的形态学特征、遗传多样性基础,为保护和选育优质种质资源奠定基础。方法 对11个品系的白术样品进行了形态学、生理学比较分析,并利用ISSR分子标记技术分析其遗传多样性,通过UPCMA法进行聚类分析。结果 11份白术样品在叶片形状、叶色、根茎形态、产量、抗病性方面存在很大的差异,且这些差异并没有一定的相关性;各品系白术的光合速率也存在显著的差异,且产量和光合速率间高度相关。筛选出的15条ISSR引物共检测得到129个位点,其中107个为多态性位点,占82.95%,聚类分析表明白术各品系之间都发生了一定程度的分化现象,个别品系之间遗传分化现象严重。结论 大盘山白术资源丰富,各品系间具有一定遗传差异基础,为选育优质白术资源提供基础。]]> 2014/12/18 14:19:12 1771true 目的 探讨绶草内生真菌与其宿主化学成分的相关性,为阐明药用植物真菌与宿主植物产生相同或相似化学成分的机制奠定基础。方法 采用HPLC法对绶草及其内生真菌各提取部位进行色谱分析,并利用SPSS16.0软件对色谱结果进行聚类,得到绶草内生真菌之间化学成分的相关性。结果 绶草内生真菌石油醚提取物的聚类规律不明显;醋酸乙酯提取物及水饱和正丁醇提取物均表现为分离自同一部位的真菌倾向于聚类在同一分支,相同种属的内生真菌同样倾向于聚类在同一分支,且以醋酸乙酯提取物表现最为明显。结论 绶草内生真菌石油醚提取物之间的相关性最小,醋酸乙酯提取物与真菌分离部位相关性最为明显,与真菌的种属同样存在较大的相关性。]]> 2014/12/18 14:19:12 1770true 目的 探讨绶草内生真菌与其宿主化学成分的相关性，为阐明药用植物真菌与宿主植物产生相同或相似化学成分的机制奠定基础。方法 采用HPLC法对绶草及其内生真菌各提取部位进行色谱分析，并利用SPSS16.0软件对色谱结果进行聚类，得到绶草内生真菌之间化学成分的相关性。结果 绶草内生真菌石油醚提取物的聚类规律不明显；醋酸乙酯提取物及水饱和正丁醇提取物均表现为分离自同一部位的真菌倾向于聚类在同一分支，相同种属的内生真菌同样倾向于聚类在同一分支，且以醋酸乙酯提取物表现最为明显。结论 绶草内生真菌石油醚提取物之间的相关性最小，醋酸乙酯提取物与真菌分离部位相关性最为明显，与真菌的种属同样存在较大的相关性。]]> 1,2，匡海学¹，高 宁¹，胡 凤¹，侯素云³，王振月¹]]> 1769true 目的 通过分析不同浓度盐胁迫下甘草酸积累量和总糖、粗蛋白、粗纤维、粗脂肪及灰分量的变化以及它们的相关性，研究盐胁迫对甘草酸积累的影响。方法 采用不同质量浓度（3、6、9 mg/mL）NaCl溶液处理一年生盆栽甘草，分别于35、70、105 d取样，测定甘草酸量，总糖、粗蛋白、粗纤维、粗脂肪及灰分5种组分的量，分析盐胁迫对各组分比例关系的影响及甘草酸量与各组分量的相关性。结果 盐胁迫70 d时，6、9 mg/mL盐溶液处理组的甘草酸量显著高于对照（CK）；6、9 mg/mL处理组的粗蛋白显著高于CK，而9 mg/mL处理组的总糖显著低于CK。盐胁迫105 d时，9 mg/mL处理组的粗脂肪显著高于CK；盐胁迫70 d和105 d时，9 mg/mL处理组的粗脂肪比例显著高于CK，但总糖比例明显低于CK；盐胁迫70 d和105 d时，甘草酸量与粗脂肪、灰分量呈正相关，与总糖量呈负相关。结论 甘草酸的积累与粗蛋白、总糖量、粗脂肪、灰分量的分配密切相关，适当的盐胁迫可以刺激甘草内的糖代谢，加速物质的分解，促进甘草的次生代谢，使甘草酸形成并积累。]]> 1，王 丹¹，侯俊玲¹ ，王文全^1,2，陈惠杰¹，刘凤波¹]]> 1768true 目的 通过分析不同浓度盐胁迫下甘草酸积累量和总糖、粗蛋白、粗纤维、粗脂肪及灰分量的变化以及它们的相关性,研究盐胁迫对甘草酸积累的影响。方法 采用不同质量浓度(3、6、9 mg/mL)NaCl溶液处理一年生盆栽甘草,分别于35、70、105 d取样,测定甘草酸量,总糖、粗蛋白、粗纤维、粗脂肪及灰分5种组分的量,分析盐胁迫对各组分比例关系的影响及甘草酸量与各组分量的相关性。结果 盐胁迫70 d时,6、9 mg/mL盐溶液处理组的甘草酸量显著高于对照(CK);6、9 mg/mL处理组的粗蛋白显著高于CK,而9 mg/mL处理组的总糖显著低于CK。盐胁迫105 d时,9 mg/mL处理组的粗脂肪显著高于CK;盐胁迫70 d和105 d时,9 mg/mL处理组的粗脂肪比例显著高于CK,但总糖比例明显低于CK;盐胁迫70 d和105 d时,甘草酸量与粗脂肪、灰分量呈正相关,与总糖量呈负相关。结论 甘草酸的积累与粗蛋白、总糖量、粗脂肪、灰分量的分配密切相关,适当的盐胁迫可以刺激甘草内的糖代谢,加速物质的分解,促进甘草的次生代谢,使甘草酸形成并积累。]]> 2014/12/18 14:19:12 1767true 目的 研究6种地被竹叶的有效成分量及其抗氧化活性。方法 分别用Folin试剂还原比色法、硝酸铝-亚硝酸钠比色法和香草醛-冰醋酸比色法测定6种地被竹叶子中总酚、总黄酮和三萜的量,采用超高效液相色谱(UPLC)定量分析荭草苷、异荭草苷、牡荆苷、异牡荆苷、对香豆酸、绿原酸、咖啡酸、阿魏酸8个特征性成分的量。同时,采用DPPH法和FRAP法调查不同竹叶提取物的抗氧化性和还原能力。结果 6种竹叶均含有较高的次生代谢产物,以干基计,总酚的质量分数为4.15%～9.12%,总黄酮为1.62%～4.00%,总萜为0.44%～0.57%;8个特征性成分在各自总酚中所占的比例依次为隈笹6.81%>铺地竹4.80%>翠竹4.35%,黄条金刚竹4.35%>倭竹1.54%>阔叶箬竹1.08%。不同地被竹种的抗氧化能力存在显著差异(P<0.05)。结论 倭竹和黄条金刚竹的总酚和总萜量以及清除DPPH自由基的能力和还原铁离子的能力均显著高于其他地被竹。]]> 2014/12/18 14:19:13 1766true 目的 研究6种地被竹叶的有效成分量及其抗氧化活性。方法 分别用Folin试剂还原比色法、硝酸铝-亚硝酸钠比色法和香草醛-冰醋酸比色法测定6种地被竹叶子中总酚、总黄酮和三萜的量，采用超高效液相色谱（UPLC）定量分析荭草苷、异荭草苷、牡荆苷、异牡荆苷、对香豆酸、绿原酸、咖啡酸、阿魏酸8个特征性成分的量。同时，采用DPPH法和FRAP法调查不同竹叶提取物的抗氧化性和还原能力。结果 6种竹叶均含有较高的次生代谢产物，以干基计，总酚的质量分数为4.15%～9.12%，总黄酮为1.62%～4.00%，总萜为0.44%～0.57%；8个特征性成分在各自总酚中所占的比例依次为隈笹6.81%＞铺地竹4.80%＞翠竹4.35%，黄条金刚竹4.35%＞倭竹1.54%＞阔叶箬竹1.08%。不同地被竹种的抗氧化能力存在显著差异（P＜0.05）。结论 倭竹和黄条金刚竹的总酚和总萜量以及清除DPPH自由基的能力和还原铁离子的能力均显著高于其他地被竹。]]> 1,2,3，刘颖坤³，龚凌霄¹，林新春³，方 伟³，张 英¹]]> 1765true 目的 研究当归正茬、迎茬、连茬对根际土壤主要酶活性和产量品质的影响。方法 采用比色法测定不同茬口当归根际土壤中脲酶、磷酸酶、多酚氧化酶活性，采用高锰酸钾滴定法测定过氧化氢酶活性。结果 苗期和收获期连茬土壤中的脲酶和磷酸酶活性显著低于正茬，脲酶活性分别降低16.53%和37.17%，中性磷酸酶活性分别降低28.01%和30.69%；多酚氧化酶活性在整个生育期均是连茬显著高于正茬，苗期、根膨大期和收获期分别比正茬增加15.10%、83.67%、38.53%。连茬当归产量、挥发油和浸出物量均显著低于正茬，分别比正茬下降49.00%、25.26%、12.58%。结论 连茬栽培中当归产量、挥发油和浸出物量显著低于正茬；连茬栽培当归根际土壤脲酶和磷酸酶活性显著降低，而过氧化氢酶和多酚氧化酶活性呈升高趋势。]]> 1,2，张恩和² ，郎多勇³，赵云生¹，王惠珍⁴]]> 1764true 目的 研究当归正茬、迎茬、连茬对根际土壤主要酶活性和产量品质的影响。方法 采用比色法测定不同茬口当归根际土壤中脲酶、磷酸酶、多酚氧化酶活性,采用高锰酸钾滴定法测定过氧化氢酶活性。结果 苗期和收获期连茬土壤中的脲酶和磷酸酶活性显著低于正茬,脲酶活性分别降低16.53%和37.17%,中性磷酸酶活性分别降低28.01%和30.69%;多酚氧化酶活性在整个生育期均是连茬显著高于正茬,苗期、根膨大期和收获期分别比正茬增加15.10%、83.67%、38.53%。连茬当归产量、挥发油和浸出物量均显著低于正茬,分别比正茬下降49.00%、25.26%、12.58%。结论 连茬栽培中当归产量、挥发油和浸出物量显著低于正茬;连茬栽培当归根际土壤脲酶和磷酸酶活性显著降低,而过氧化氢酶和多酚氧化酶活性呈升高趋势。]]> 2014/12/18 14:19:13 1763true 目的 研究在蛋白质及酶水平上的当归抽薹发育机制,为进一步阐明当归抽薹过程所发生的生理生化指标变化及预防当归抽薹提供理论依据。方法 观察当归抽薹与未抽薹植株的糖代谢及过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)等活性的变化,测定抽薹与未抽薹当归植株游离氨基酸、可溶性糖和可溶性蛋白的量。结果 在抽薹前10 d,未抽薹植株的游离氨基酸量和POD活性、PPO活性分别比抽薹植株高1.3 mg/g和0.02 U/(min.g)、0.014 U/(min.g),抽薹植株的可溶性糖和可溶性蛋白量分别比未抽薹植株高2.2%、0.5%。在抽薹期,未抽薹植株的可溶性糖和可溶性蛋白量较高,而抽薹植株的游离氨基酸量和PPO和POD活性较高。结论 当归抽薹过程多个生化指标发生变化,当归栽培中应防止早期抽薹的发生。]]> 2014/12/18 14:19:13 1762true 目的 研究在蛋白质及酶水平上的当归抽薹发育机制，为进一步阐明当归抽薹过程所发生的生理生化指标变化及预防当归抽薹提供理论依据。方法 观察当归抽薹与未抽薹植株的糖代谢及过氧化物酶（POD）、多酚氧化酶（PPO）等活性的变化，测定抽薹与未抽薹当归植株游离氨基酸、可溶性糖和可溶性蛋白的量。结果 在抽薹前10 d，未抽薹植株的游离氨基酸量和POD活性、PPO活性分别比抽薹植株高1.3 mg/g和0.02 U/(min·g)、0.014 U/(min·g)，抽薹植株的可溶性糖和可溶性蛋白量分别比未抽薹植株高2.2%、0.5%。在抽薹期，未抽薹植株的可溶性糖和可溶性蛋白量较高，而抽薹植株的游离氨基酸量和PPO和POD活性较高。结论 当归抽薹过程多个生化指标发生变化，当归栽培中应防止早期抽薹的发生。]]> 1，张金文^1,2，任丽蓉¹，黄惠英^1,2，马占川³，漆琚涛³]]> 1761true 目的 研究药用菊花的质量控制方法。方法 采用高效液相色谱法建立了药用菊花HPLC图谱，对29种药用菊花栽培类型进行测定，并使用聚类分析和主成分分析对图谱进行模式识别研究。结果 聚类分析和主成分分析结果相一致，29份药用菊花种质资源分为两类。结论 该方法可用于药用菊花质量控制及其综合评价。]]> 1,2，郭巧生¹ ，李育川¹，王佩佩²]]> 1760true 目的 研究药用菊花的质量控制方法。方法 采用高效液相色谱法建立了药用菊花HPLC图谱,对29种药用菊花栽培类型进行测定,并使用聚类分析和主成分分析对图谱进行模式识别研究。结果 聚类分析和主成分分析结果相一致,29份药用菊花种质资源分为两类。结论 该方法可用于药用菊花质量控制及其综合评价。]]> 2014/12/18 14:19:13 1759true 目的 探索热胁迫影响丹参生长和次生代谢的分子机制。方法 采用cDNA-AFLP技术对丹参热胁迫下叶片基因表达进行转录组分析。采用EcoR I和Mse I对叶片cDNA进行双酶切，256对引物组合进行选择性扩增，对差异片段进行测序、功能分析和定量RT-PCR。结果 共分离出196个差异表达转录衍生片段（transcription derived fragments，TDFs），其中增强与诱导表达的TDFs 122条，抑制表达的74条；从NCBI中鉴定出147个同源TDFs，另有49个TDFs为新发现序列。结论 热胁迫影响转录组的信号转导、转录调控、逆境响应蛋白、物质代谢等多个方面，为进一步研究丹参有效成分的代谢调控奠定了基础。]]> 1, 2，吴先军^{1, 3} ，陈 新⁴ ]]> 1758true 2014/12/18 14:08:37 1757true AeFPS)基因并进行原核表达。方法以龙牙楤木为材料,采用RT-PCR方法,设计特异引物,克隆AeFPS基因,并将该基因定向插入Sca I/BamH I切开的原核表达载体pET-28a上,转化大肠杆菌BL21,于28℃,IPTG诱导5 h,经SDS-PAGE电泳分析,检测出明显的差异条带,Western blotting进一步检测其为目的基因。结果克隆到AeFPS基因cDNA全长为1 040 bp,含有1 029 bp的开放阅读框(ORF),编码342个氨基酸,GenBank登录号为HM219226.1。成功构建了原核表达质粒pET28a/AeFPS、AeFPS蛋白在BL21中高度表达,SDS-PAGE和Western blotting鉴定了目标蛋白。结论首次获得了AeFPS基因,并将其连入原核载体中成功表达,为研究AeFPS蛋白的活性及生化功能奠定了基础。]]> 2014/12/18 14:08:37 1756true 目的 克隆龙牙楤木法呢二磷酸合成酶（AeFPS）基因并进行原核表达。方法 以龙牙楤木为材料，采用RT-PCR方法，设计特异引物，克隆AeFPS基因，并将该基因定向插入Sca I/BamH I切开的原核表达载体pET-28a上，转化大肠杆菌BL21，于28 ℃，IPTG诱导5 h，经SDS-PAGE电泳分析，检测出明显的差异条带，Western blotting进一步检测其为目的基因。结果 克隆到AeFPS基因cDNA全长为1 040 bp，含有1 029 bp的开放阅读框（ORF），编码342个氨基酸，GenBank登录号为HM219226.1。成功构建了原核表达质粒pET28a/AeFPS、AeFPS蛋白在BL21中高度表达，SDS-PAGE和Western blotting鉴定了目标蛋白。结论 首次获得了AeFPS基因，并将其连入原核载体中成功表达，为研究AeFPS蛋白的活性及生化功能奠定了基础。]]> 1755true 目的 对天麻Gastrodia elata物候期和蒴果进行研究，为克服天麻种性退化，培育优良种子，提供优质种源。方法 采用完全区组试验设计的方法，进行室内盆栽试验，分析了各栽培措施对两种天麻物候期和蒴果的影响。结果 从物候期看，3个种麻栽培时间中，12月栽培的红、绿天麻的现蕾期、开花期、结果期持续时间长（红天麻分别为12.50、9.80、7.25 d，绿天麻分别为12.80、10.75、7.00 d），种子成熟时间短（红天麻为19.50 d，绿天麻为18.50 d）；3个种麻分级中，一、二级红、绿天麻的各物候期持续时间无显著差异（P＜0.05）。从蒴果上看，现蕾初期不打尖时，3个种麻栽培时间中，12月栽培的红、绿天麻蒴果质量好，红天麻蒴果数、蒴果质量和种子生命力分别为66.50个/株、28.18 g/株、87.88%；绿天麻蒴果数、蒴果质量和种子生命力分别为63.00个/株、20.09 g/株、78.40%；3个种麻分级中，一级红天麻的蒴果质量最好（蒴果数为96.29个/株，蒴果质量达50.21 g/株），三级绿天麻的蒴果质量最差（蒴果数为40.00个/株，蒴果质量为14.90 g/株）。结论 在贵州西北地区，以一级红天麻，一、二级绿天麻作种，并于12月进行栽培，现蕾初期不采用打尖处理时，可以获得优质的天麻蒴果。]]> 1, 2，蔡传涛¹，刘贵周¹，文 平³]]> 1754true Gastrodia elata物候期和蒴果进行研究,为克服天麻种性退化,培育优良种子,提供优质种源。方法采用完全区组试验设计的方法,进行室内盆栽试验,分析了各栽培措施对两种天麻物候期和蒴果的影响。结果从物候期看,3个种麻栽培时间中,12月栽培的红、绿天麻的现蕾期、开花期、结果期持续时间长(红天麻分别为12.50、9.80、7.25 d,绿天麻分别为12.80、10.75、7.00 d),种子成熟时间短(红天麻为19.50 d,绿天麻为18.50 d);3个种麻分级中,一、二级红、绿天麻的各物候期持续时间无显著差异(P<0.05)。从蒴果上看,现蕾初期不打尖时,3个种麻栽培时间中,12月栽培的红、绿天麻蒴果质量好,红天麻蒴果数、蒴果质量和种子生命力分别为66.50个/株、28.18 g/株、87.88%;绿天麻蒴果数、蒴果质量和种子生命力分别为63.00个/株、20.09 g/株、78.40%;3个种麻分级中,一级红天麻的蒴果质量最好(蒴果数为96.29个/株,蒴果质量达50.21 g/株),三级绿天麻的蒴果质量最差(蒴果数为40.00个/株,蒴果质量为14.90 g/株)。结论在贵州西北地区,以一级红天麻,一、二级绿天麻作种,并于12月进行栽培,现蕾初期不采用打尖处理时,可以获得优质的天麻蒴果。]]> 2014/12/18 14:08:37 1753true n=28的细胞频率明显高于子叶和胚根,平均为42.38%和25.19%;且子叶、下胚轴及胚根分别在2.0 mg/L NAA、2.0mg/L 2,4-D以及1.0 mg/L 2,4-D下,2n>14和2n=28的细胞频率最高,分别为61.50%、39.20%,63.00%、36.23%,63.50%、37.50%。此外,NAA、2,4-D对愈伤组织中甘草酸、甘草总黄酮具有明显的促进效应,在1.0 mg/L NAA+1.0 mg/L 2,4-D组合下,子叶愈伤组织的甘草酸和甘草总黄酮量均达到最高,分别为52.13 mg/g和8.36 mg/g;在2 mg/L NAA下,下胚轴愈伤组织甘草酸及甘草总黄酮量最高,分别为49.01 mg/g和8.54 mg/g。相关分析表明,愈伤组织中甘草酸、甘草总黄酮量与2n=28的细胞频率呈正相关。结论 NAA、2,4-D对愈伤组织细胞染色体加倍及甘草酸、甘草总黄酮量提高具有显著的促进作用,通过染色体加倍有可能获得高产量药效成分的甘草品系。]]> 2014/12/18 14:08:37 1752true 目的 建立甘草愈伤组织细胞高频染色体加倍体系，为获得高产量药效成分的甘草品系奠定基础。方法 采用组织培养法对甘草子叶、下胚轴和胚根进行愈伤组织诱导和染色体加倍；利用紫外分光光度法检测愈伤组织甘草酸、甘草总黄酮的量。结果 NAA、2, 4-D不同质量浓度及配比对不同外植体愈伤组织染色体倍性变异具有显著的影响，其中下胚轴2n＞14和2n＝28的细胞频率明显高于子叶和胚根，平均为42.38%和25.19%；且子叶、下胚轴及胚根分别在2.0 mg/L NAA、2.0 mg/L 2, 4-D以及1.0 mg/L 2, 4-D下，2n＞14和2n＝28的细胞频率最高，分别为61.50%、39.20%，63.00%、36.23%，63.50%、37.50%。此外，NAA、2, 4-D对愈伤组织中甘草酸、甘草总黄酮具有明显的促进效应，在1.0 mg/L NAA＋1.0 mg/L 2, 4-D组合下，子叶愈伤组织的甘草酸和甘草总黄酮量均达到最高，分别为52.13 mg/g和8.36 mg/g；在2 mg/L NAA下，下胚轴愈伤组织甘草酸及甘草总黄酮量最高，分别为49.01 mg/g 和8.54 mg/g。相关分析表明，愈伤组织中甘草酸、甘草总黄酮量与2n＝28的细胞频率呈正相关。结论 NAA、2, 4-D对愈伤组织细胞染色体加倍及甘草酸、甘草总黄酮量提高具有显著的促进作用，通过染色体加倍有可能获得高产量药效成分的甘草品系。]]> 1, 4，马文芳²，陈晓燕³，王 清^{1, 2}]]> 1751true 目的 研究苦豆草中各生物碱的量随物候期的变化规律，确定苦豆草的合理采收期。方法 采用HPLC法对不同物候期苦豆草中主要生物碱的量进行系统分析。色谱条件为色谱柱X-Brige C₁₈（250 mm×4.6 mm，5 μm），以乙腈（A）-0.05 mol/L磷酸二氢钾（B）为流动相，梯度洗脱，0～10 min，94% B；10～50 min，87% B；50～55 min，94% B。检测波长205 nm，体积流量1.0 mL/min，进样量10 μL，柱温25 ℃。结果 苦豆草中不同生物碱的量随物候期呈现不同规律的变化，其中氧化槐果碱、槐胺碱量从5月至7月递减；槐定碱、氧化苦参碱量从5月至7月递增；而苦参碱、槐果碱、莱曼碱的量随物候期的变化不明显。结论 可根据苦豆草中各生物碱量随物候期的动态变化规律为工业化生产不同生物碱而确定苦豆草的合理采收期。]]> 1，马 玲²，王俊卿³，王英华²]]> 1750true 18(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈(A)-0.05 mol/L磷酸二氢钾(B)为流动相,梯度洗脱,0～10 min,94%B;10～50 min,87%B;50～55 min,94%B。检测波长205 nm,体积流量1.0 mL/min,进样量10μL,柱温25℃。结果苦豆草中不同生物碱的量随物候期呈现不同规律的变化,其中氧化槐果碱、槐胺碱量从5月至7月递减;槐定碱、氧化苦参碱量从5月至7月递增;而苦参碱、槐果碱、莱曼碱的量随物候期的变化不明显。结论可根据苦豆草中各生物碱量随物候期的动态变化规律为工业化生产不同生物碱而确定苦豆草的合理采收期。]]> 2014/12/18 14:08:37 1749true -1内测定羌活种子光谱吸收峰,应用系统聚类和SIMCA模式识别法鉴别羌活和宽叶羌活的种子。结果运用系统聚类法,当聚类距离为15时,两种羌活可明显分为2类;运用SIMCA模式识别法,所建模型对羌活和宽叶羌活的种子识别率分别达96%和97%,拒绝率均为100%,两者盲样检测准确率也在90%以上,所建模型可用于样品检测。结论应用红外光谱法结合系统聚类和SIMCA模式识别法,可以简单、快速、准确地鉴别羌活种子,该方法为鉴别羌活种子的来源及真伪提供了一种新的技术手段。]]> 2014/12/18 14:08:38 1748true 目的 采用傅里叶变换红外光谱法鉴别羌活种子。方法 在4 000～400 cm^?1内测定羌活种子光谱吸收峰，应用系统聚类和SIMCA模式识别法鉴别羌活和宽叶羌活的种子。结果 运用系统聚类法，当聚类距离为15时，两种羌活可明显分为2类；运用SIMCA模式识别法，所建模型对羌活和宽叶羌活的种子识别率分别达96%和97%，拒绝率均为100%，两者盲样检测准确率也在90%以上，所建模型可用于样品检测。结论 应用红外光谱法结合系统聚类和SIMCA模式识别法，可以简单、快速、准确地鉴别羌活种子，该方法为鉴别羌活种子的来源及真伪提供了一种新的技术手段。]]> 1, 2，蒋舜媛³，黄荣韶²，周 毅³，李良波²，孙 辉⁴，甘凤琼²]]> 1747true 目的 分析真菌诱导的白桦悬浮体系中N、P的吸收利用和三萜合成的关系。方法 在白桦悬浮细胞的生长末期添加40 μg/mL真菌诱导子，采用比色法分析真菌诱导后白桦悬浮体系中N、P和三萜量的变化。结果 白桦细胞的干质量、三萜量和产量随着真菌处理时间的延长表现为逐渐降低趋势。其中，三萜量和产量均于真菌诱导后第1天达到最高，分别为21.98 mg/g和123.82 g/L，约为对照的2倍；白桦悬浮体系的pH值和电导率在真菌诱导后第1天达到高峰，pH值增长了6.10%，电导率增加了8.20%；除细胞内磷酸根质量分数在诱导的第1、2天分别降低了28.67%、15.68%外，真菌诱导使白桦悬浮培养体系中硝酸根、铵根、磷酸根量基本呈增加趋势。进一步相关性分析发现，真菌诱导使胞外磷酸根、铵根和硝酸根质量分数与三萜量的相关性显著提高。结论 真菌诱导后白桦三萜合成的增加可能与磷酸根、硝酸根和铵根质量分数的变化相关。]]> 1746true 2014/12/18 14:08:38 1745true 2014/12/18 14:08:38 1744true 目的 对分布于我国及缅甸、老挝30个居群的珠子草进行遗传多样性分析，为珠子草遗传连锁图谱构建、种质资源保存及遗传育种等研究提供一定的理论依据。方法 采用ISSR分子标记技术，对采自我国云南、广西、广东、福建、海南及缅甸、老挝共30个珠子草居群进行多态性和聚类分析。结果 从60个ISSR引物中筛选出23条进行扩增，共扩增得到条带158条，其中共有条带43条，多样性条带115条，多态位点百分率（PPB）为72.78%，Nei’s基因多样性（H）为0.483 2，Shannon’s多态性信息指数（I）为0.676 0，多态性较高。结论 我国珠子草居群大致分为沿海及内陆两大类，个别居群呈现明显的居群特异性，种质资源遗传多样性较高。]]> 1743true 目的克隆吴茱萸Mn/Fe-SOD基因的全长cDNA序列。方法根据已获得的吴茱萸Mn/Fe-SOD基因核心片段序列设计4条特异性引物,采用RACE和巢式PCR方法克隆获得吴茱萸Mn/Fe-SOD基因全长cDNA。结果吴茱萸Mn/Fe-SOD基因全长cDNA序列共1 048 bp,包含一个687 bp的开放阅读框(open reading frame,ORF),共编码228个氨基酸。结论首次从吴茱萸中克隆得到了Mn/Fe-SOD基因的全长cDNA序列,为研究该基因在吴茱萸体内超量表达以提高植物抗逆性研究奠定基础。]]> 2014/12/18 9:09:46 1742true 目的 克隆吴茱萸Mn/Fe-SOD基因的全长cDNA序列。方法 根据已获得的吴茱萸Mn/Fe-SOD基因核心片段序列设计4条特异性引物，采用RACE和巢式PCR方法克隆获得吴茱萸Mn/Fe-SOD基因全长cDNA。结果 吴茱萸Mn/Fe-SOD基因全长cDNA序列共1 048 bp，包含一个687 bp的开放阅读框（open reading frame，ORF），共编码228个氨基酸。结论 首次从吴茱萸中克隆得到了Mn/Fe-SOD基因的全长cDNA序列，为研究该基因在吴茱萸体内超量表达以提高植物抗逆性研究奠定基础。]]> 1，罗光明¹，潘超美²，张寿文¹]]> 1741true 目的 克隆半夏凝集素基因并对其氨基酸序列生物信息与已报道相关基因进行对比分析，为抗虫基因利用和转基因育种研究奠定基础。方法 根据已报道的植物凝集素基因序列设计特异引物，以半夏叶片DNA为模板进行PCR扩增，获得特异性片段，将其连接到测序载体上，进行序列测定，用分析软件分析序列信息。结果 克隆1 069 bp的半夏凝集素基因(pta)，开放阅读框全长804 bp，编码268个氨基酸残基；预测相对分子质量和等电点分别为2.91×10⁴和7.77，功能区完整，具有1条信号肽和3个甘露糖结合区；已在GenBank中登记（登录号AY725425）。结论 克隆的半夏凝集素基因序列信息完整，具有典型的甘露糖结合位点，可以作为抗虫基因用于抗虫育种。]]> 1740true 目的克隆半夏凝集素基因并对其氨基酸序列生物信息与已报道相关基因进行对比分析,为抗虫基因利用和转基因育种研究奠定基础。方法根据已报道的植物凝集素基因序列设计特异引物,以半夏叶片DNA为模板进行PCR扩增,获得特异性片段,将其连接到测序载体上,进行序列测定,用分析软件分析序列信息。结果克隆1 069 bp的半夏凝集素基因(pta),开放阅读框全长804 bp,编码268个氨基酸残基|预测相对分子质量和等电点分别为2.91×10⁴和7.77,功能区完整,具有1条信号肽和3个甘露糖结合区|已在GenBank中登记(登录号AY725425)。结论克隆的半夏凝集素基因序列信息完整,具有典型的甘露糖结合位点,可以作为抗虫基因用于抗虫育种。]]> 2014/12/18 9:09:46 1739true 目的研究中国不同居群野生玉竹种质资源的遗传多样性。方法选取我国11个不同居群的野生玉竹样品和1个居群的栽培样品进行ISSR分析,Popgene 32及Ntsyspc-2.1软件分析处理数据。结果通过筛选得到10条ISSR引物,扩增得到115条带,其中108条为多态性条带,多态性条带百分率为93.38%|Nei’s基因多样性(H)为0.432 1±0.084 1,Shannon信息指数(I)为0.619 7±0.100 5,遗传距离(GD)变异为0.128 9～0.496 5|利用UPGMA法构建分子树状图,可将12个居群聚合为两大类。结论不同产地野生玉竹种间存在较高的多态性,遗传多样性较为丰富|野生玉竹的遗传多样性高于栽培居群的遗传多样性,可能与栽培方式和环境因素有关|药用植物玉竹对环境变化的适应能力强,地理来源相同的野生居群和栽培居群先行聚合,与其种质间的亲缘关系较近有关|聚类结果可以部分反映地理分布的特点,为种质资源的鉴定打下良好基础。]]> 2014/12/18 9:09:46 1738true 目的 研究中国不同居群野生玉竹种质资源的遗传多样性。方法 选取我国11个不同居群的野生玉竹样品和1个居群的栽培样品进行ISSR分析，Popgene 32及Ntsyspc-2.1软件分析处理数据。结果 通过筛选得到10条ISSR引物，扩增得到115条带，其中108条为多态性条带，多态性条带百分率为93.38%；Nei’s基因多样性（H）为0.432 1±0.084 1，Shannon信息指数（I）为0.619 7±0.100 5，遗传距离（GD）变异为0.128 9～0.496 5；利用UPGMA法构建分子树状图，可将12个居群聚合为两大类。结论 不同产地野生玉竹种间存在较高的多态性，遗传多样性较为丰富；野生玉竹的遗传多样性高于栽培居群的遗传多样性，可能与栽培方式和环境因素有关；药用植物玉竹对环境变化的适应能力强，地理来源相同的野生居群和栽培居群先行聚合，与其种质间的亲缘关系较近有关；聚类结果可以部分反映地理分布的特点，为种质资源的鉴定打下良好基础。]]> 1737true 目的 通过对山西浑源县仿野生栽培和野生蒙古黄芪中皂苷类和黄酮类成分的比较，评价仿野生栽培蒙古黄芪的质量。方法 采集12批野生和19批仿野生栽培蒙古黄芪样品，采用HPLC-DAD法测定毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素4种黄酮成分，UPLC-ELSD法测定黄芪皂苷I、II、III、IV 4种皂苷成分。结果 5～6年生的仿野生栽培的蒙古黄芪中的高质量分数成分毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷、黄芪皂苷I、II、III的量高于野生黄芪，相应的黄酮总量、皂苷总量高于野生黄芪，而2种低质量分数成分芒柄花素、黄芪皂苷IV的量低于野生黄芪；通过比较仿野生栽培1～6年生黄芪中8种成分的量发现，黄酮类成分随生长年限的增长不断升高，而皂苷类成分则逐渐降低。结论 仿野生栽培的方法可有效地解决优质野生浑源蒙古黄芪资源不足的问题。]]> 1, 3，郭宝林¹，周 然²，黄文华¹，曹秀娟⁴，侯美利⁴，陈安家³]]> 1736true 目的通过对山西浑源县仿野生栽培和野生蒙古黄芪中皂苷类和黄酮类成分的比较,评价仿野生栽培蒙古黄芪的质量。方法采集12批野生和19批仿野生栽培蒙古黄芪样品,采用HPLC-DAD法测定毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素4种黄酮成分,UPLC-ELSD法测定黄芪皂苷I、II、III、IV 4种皂苷成分。结果 5～6年生的仿野生栽培的蒙古黄芪中的高质量分数成分毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷、黄芪皂苷I、II、III的量高于野生黄芪,相应的黄酮总量、皂苷总量高于野生黄芪,而2种低质量分数成分芒柄花素、黄芪皂苷IV的量低于野生黄芪|通过比较仿野生栽培1～6年生黄芪中8种成分的量发现,黄酮类成分随生长年限的增长不断升高,而皂苷类成分则逐渐降低。结论仿野生栽培的方法可有效地解决优质野生浑源蒙古黄芪资源不足的问题。]]> 2014/12/18 9:09:46 1735true 目的分析林下山参与园参中无机元素特征。方法采用电感耦合等离子质谱(ICP-MS)法测定林下山参和园参药材中无机元素的量,分别建立林下山参和园参的无机元素标准谱,运用SPSS 15.0统计软件对结果进行统计分析。结果聚类分析将17份样品聚为林下山参和园参两大类,主成分分析选出3个主成分,得出林下山参与园参的特征元素为Ca、Na、Fe、Zn、Cu、Mo、V、Sn、Sr、Al、Ba、Ge。元素的分布特征与人参的生态环境、栽培方式及生长年限有关。结论主成分分析法和聚类分析法是林下山参与园参药材中无机元素分析的有效方法。]]> 2014/12/18 9:09:46 1734true 目的 分析林下山参与园参中无机元素特征。方法 采用电感耦合等离子质谱（ICP-MS）法测定林下山参和园参药材中无机元素的量，分别建立林下山参和园参的无机元素标准谱，运用SPSS 15.0统计软件对结果进行统计分析。结果 聚类分析将17份样品聚为林下山参和园参两大类，主成分分析选出3个主成分，得出林下山参与园参的特征元素为Ca、Na、Fe、Zn、Cu、Mo、V、Sn、Sr、Al、Ba、Ge。元素的分布特征与人参的生态环境、栽培方式及生长年限有关。结论 主成分分析法和聚类分析法是林下山参与园参药材中无机元素分析的有效方法。]]> 1733true 目的 探讨不同因子对罗勒Ocimum basilicum发根生长及次生代谢产物的影响。方法 用发根农杆菌1025感染罗勒叶片，建立发根培养体系，并利用紫外分光光度法测定不同培养时间及培养基中添加激素和诱导子后罗勒发根中多糖和总黄酮的量。结果 激动素（KT）为罗勒发根培养的最适外源激素；茉莉酸甲酯（MeJA）对罗勒发根的生长有抑制作用，但明显促进总黄酮的形成；水杨酸（SA）对罗勒发根的生长影响不显著，但对多糖和总黄酮的积累有明显促进作用。结论 5种外源激素和2种诱导子均能不同程度地影响罗勒发根的生长及次生代谢产物的积累，为进一步筛选适宜的罗勒发根培养系统并调控次生代谢产物的研究奠定了基础。]]> 1，杨慧洁²，闻玉莉¹]]> 1732true 目的探讨不同因子对罗勒Ocimum basilicum发根生长及次生代谢产物的影响。方法用发根农杆菌1025感染罗勒叶片,建立发根培养体系,并利用紫外分光光度法测定不同培养时间及培养基中添加激素和诱导子后罗勒发根中多糖和总黄酮的量。结果激动素(KT)为罗勒发根培养的最适外源激素|茉莉酸甲酯(MeJA)对罗勒发根的生长有抑制作用,但明显促进总黄酮的形成|水杨酸(SA)对罗勒发根的生长影响不显著,但对多糖和总黄酮的积累有明显促进作用。结论 5种外源激素和2种诱导子均能不同程度地影响罗勒发根的生长及次生代谢产物的积累,为进一步筛选适宜的罗勒发根培养系统并调控次生代谢产物的研究奠定了基础。]]> 2014/12/18 9:09:46 1731true 18(150 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-水为流动相梯度洗脱,检测波长203 nm,柱温25℃,体积流量1.0 mL/min。通过外标法对各批次样品中的重楼皂苷I、H、甾体皂苷Ⅱ、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ、薯蓣皂苷、纤细薯蓣皂苷进行测定。结果 18批滇重楼相似度小于0.9,说明不同批次样品差异较大。同时确定了6个共有峰,并通过对照品对其进行了归属。甾体皂苷Ⅱ在S₈、S₉批次中的量最高,重楼皂苷I在S₇批次中的量最高,甾体皂苷Ⅵ只在4个批次中检测出。结论该方法简便、准确,具有良好的精密度、重复性、稳定性,可用于滇重楼的质量控制及综合评价。]]> 2014/12/18 9:09:46 1730true 目的 建立滇重楼根茎的HPLC指纹图谱，控制其质量。方法 采用HPLC法，Eclipse XDB C₁₈（150 mm×4.6 mm，5 μm）色谱柱，以乙腈-水为流动相梯度洗脱，检测波长203 nm，柱温25 ℃，体积流量1.0 mL/min。通过外标法对各批次样品中的重楼皂苷I、H、甾体皂苷II、V、VI、VII、薯蓣皂苷、纤细薯蓣皂苷进行测定。结果 18批滇重楼相似度小于0.9，说明不同批次样品差异较大。同时确定了6个共有峰，并通过对照品对其进行了归属。甾体皂苷II在S₈、S₉批次中的量最高，重楼皂苷I在S₇批次中的量最高，甾体皂苷VI只在4个批次中检测出。结论 该方法简便、准确，具有良好的精密度、重复性、稳定性，可用于滇重楼的质量控制及综合评价。]]> 1，何忠俊¹，梁社往²，段艳涛¹，王 印¹]]> 1729true 2014/12/18 9:09:46 1728true 2014/12/18 9:09:46 1727true 2014/12/18 9:09:46 1726true 目的 对人参多向耐药性（PDR）转运蛋白基因进行克隆及序列分析。方法 利用其他植物PDR基因的保守区域设计简并引物，以人参根总RNA为模板，采用RT-PCR方法扩增人参PDR基因片段并连接至pGEM-T Easy载体上，阳性克隆经PCR检测后测序。结果 得到一段长693 bp的基因序列，序列分析表明，该片段编码231个氨基酸，与植物PDR基因核苷酸和氨基酸序列同源性分别在76%和80%以上。分析表明该序列属于PDR转运蛋白的核苷酸结合域，具有PDR转运蛋白的C端Walker A、ABC标签模体和C端walker B 3个保守功能域。结论 首次从人参中克隆出PDR转运蛋白基因，为研究人参次生代谢产物的转运和积累机制奠定了基础。]]> 1, 2，黄景嘉¹，谢小雷¹，陈湘晖¹，张变玲²，罗志勇¹]]> 1725true 目的 研究3种类型黄连的遗传多样性和遗传结构。方法 对3种类型黄连的90个单株进行ISSR分析，运用POPGENE 1.31软件计算相关参数。结果 22个引物共检测到164个位点，其中108个为多态位点；黄连3种类型具有较丰富的遗传多样性，在物种水平上，多态位点百分率（PPB）为65.85%，有效等位基因数（N_e）为1.229 8，Nei’s基因多样度指数（H）为0.144 0，物种水平Shannon’s多样性信息指数（H_sp）为0.230 2；在类型水平上，PPB为55.08%，N_e为1.218 9，H为0.136 0，类型水平Shannon’s多样性信息指数（H_pop）为0.215 1。Nei’s基因多样性指数计算的类型间遗传分化系数与Shannon’s类型分化系数分别为0.056 1和0.065 2，均说明大部分遗传变异存在于类型内；ISSR标记检测到类型间存在着广泛的基因流（N_m＝8.405 4），遗传分化程度较低；两两类型间的Nei’s遗传一致度（I）的范围为0.983 1～0.989 7；根据Nei’s遗传距离进行各类型间的UPGMA聚类，基于ISSR分子标记的聚类结果与形态分类基本一致。结论 3种类型的黄连遗传多样性较高，为新品种的培育提供了丰富的遗传基础。]]> 1, 2, 3，王 钰^{1, 2, 3}，张 雪^{1, 2, 3}，瞿显友^{1, 2, 3}，李隆云^{1, 2, 3}]]> 1724true 目的 建立天门冬组培快速繁殖体系，保护和合理利用天门冬资源。方法 采用不同基本培养基和不同种类及质量浓度的植物生长调节剂对天门冬不同外植体进行愈伤组织诱导、丛生芽诱导及生根培养研究。结果 愈伤组织诱导的最适培养基为1/2 MS＋1.0 mg/L 6-BA＋0.5 mg/L NAA，pH 5.8；丛生芽诱导的适宜培养基为MS＋1.5 mg/L 6-BA＋0.5 mg/L IAA，pH 5.8；生根的适宜培养基为1/2 MS＋0.5 mg/L IBA＋0.5 mg/L IAA，其中培养基中铁盐的质量浓度降低到6.95 mg/L，蔗糖的质量浓度降低至20 g/L，pH值为5.8。结论 天门冬不同外植体均可诱导出愈伤组织，其中嫩芽诱导愈伤率最高，为天门冬最适组织培养的外植体；利用组织培养技术能够实现天门冬快速繁殖，为其人工扩大栽培奠定了良好基础。]]> 1, 2, 3，欧立军^{1, 2, 3}，贺安娜^{1, 2, 3}，孙 榕¹，于广游¹]]> 1723true 目的 对云贵高原滇龙胆不同居群进行形态特征变异研究，为滇龙胆遗传多样性保护和良种选育提供依据。方法 采用野外调查取样，对27个滇龙胆居群根、茎、叶的15个形态性状指标进行测量和统计分析。结果 滇龙胆不同居群、不同产地和同一居群内不同个体间，在不同植物学性状上均有一定变异，其中，叶片数、植株生物量、株高、分枝数等形态指标变异较大。相关分析表明，滇龙胆植株根条数、根粗和根干质量同植株地上分枝数、叶片数及茎叶干质量呈显著或极显著正相关关系。聚类分析表明，27个滇龙胆居群可分为4组，其中第III组主要分布在黔西和川中南，比较适合作为高产优良品种选育的材料。主成分分析显示，茎叶干质量、根干质量、根条数、分枝数、株高、叶长这6个形态指标是造成表型差异的主要因素。结论 滇龙胆具有丰富的表型遗传多样性，并以根部表型性状变异幅度最大。在筛选高产滇龙胆种质资源时可考虑分枝数、叶片数和茎叶干质量这几个外观形态指标。]]> 1，邵爱娟²，金 航¹，欧小宏³，陈美兰²，刘大会^{1, 2}，黄璐琦²]]> 1722true 目的 探索适合杭菊扦插繁殖的条件。方法 考察质量浓度分别为250、500、750、1 000 mg/L的吲哚乙酸（IAA）、萘乙酸（NAA）、吲哚丁酸（IBA）对杭菊2个不同部位的插穗扦插的影响。结果 嫩梢和茎段扦插的生根数分别为13.63和5.96，根系效果指数分别为3.13和1.4。采用激素处理过的插条生根效果显著好于对照，其中以750 mg/L IBA处理后的生根效果最好，生根效果指数为17.8。结论 本研究为杭菊的扦插繁殖提供参考。]]> 1721true 目的 综合比较浙江不同产区白术质量，建立白术质量评价新模式。方法 采集浙江省内7个产区白术样品，采用UV法和HPLC法定量测定糖类和内酯类成分；运用主成分分析法及聚类分析法对各个指标进行综合评价。结果 筛选出分别代表内酯类和糖类指标的2个主成分，特征根累积贡献率达80.376%，得到代表白术质量的综合评价函数；采用Ward’s法，利用各产区样品糖类和内酯类指标的平均值对产区进行聚类分析。将7个产区划分为3组，磐安为最优产区，於潜、龙泉次之，其他产区白术质量相对较差。结论 通过主成分分析和聚类分析对不同产区白术药材质量进行综合评价，建立多指标综合质量评价模式，为白术资源的开发和临床合理用药提供理论基础。]]> 1，田 薇¹，王舒琳¹，王春荣¹，夏金星²]]> 1720true 目的 研究单叶蔓荆种子休眠的原因及解除休眠的方法。方法 以单叶蔓荆的果实（蔓荆子）为材料，用石蜡切片法研究单叶蔓荆种子形态解剖学特点，通过种子吸胀和抑制物测试研究其休眠原因，采用浓硫酸和赤霉素（GA₃）处理打破种子休眠。结果 打破单叶蔓荆种子休眠的方法为GA₃处理，解除休眠的最佳方法为浓硫酸处理15 min，1.0 mg/mL GA₃浸种18 h，蛭石培养床30 ℃恒温培养能够达到发芽率78.7%。结论 蔓荆具有坚硬厚实的果皮，机械束缚是休眠的主要原因；果皮中含有萌发抑制物质，GA₃处理可有效解除单叶蔓荆种子的生理休眠。]]> 1, 2，罗光明²]]> 1719true 目的克隆刺五加的环阿屯醇合酶(cycloartenol synthase,CAS)基因,并对其进行生物信息学和表达分析。方法采用cDNA末端快速扩增(rapid amplification of cDNAends,RACE)技术克隆刺五加CAS基因的全长cDNA序列。运用生物信息学方法对该基因进行分析,预测其编码蛋白的结构与功能,并通过RT-PCR法检测CAS在不同生长发育时期和不同器官中的表达情况。目的刺五加CAS基因的cDNA全长为2 758 bp,开放阅读框长2 277 bp,编码758个氨基酸的蛋白,包含三萜合成酶的标志性序列。CAS蛋白无跨膜区域,定位于细胞质中。RT-PCR的结果显示,刺五加CAS基因在各时期和器官中均有表达,但表达量具有显著差异(P<0.05)。其中果实基本成熟期的表达量最高,是最低量萌芽期的1.56倍,各器官中,叶片的表达量最高,是最低量叶柄的1.37倍。结论首次分离并报道了刺五加的CAS cDNA克隆,并证实其在不同生长发育时期和不同器官中的表达量不同,为进一步研究CAS对刺五加皂苷量的影响和表达调控奠定基础。]]> 2014/12/17 17:57:02 1718true 目的 克隆刺五加的环阿屯醇合酶（cycloartenol synthase，CAS）基因，并对其进行生物信息学和表达分析。方法采用cDNA末端快速扩增（rapid amplification of cDNA ends，RACE）技术克隆刺五加CAS基因的全长cDNA序列。运用生物信息学方法对该基因进行分析，预测其编码蛋白的结构与功能，并通过RT-PCR法检测CAS在不同生长发育时期和不同器官中的表达情况。结果 刺五加CAS基因的cDNA全长为2 758 bp，开放阅读框长2 277 bp，编码758个氨基酸的蛋白，包含三萜合成酶的标志性序列。CAS蛋白无跨膜区域，定位于细胞质中。RT-PCR的结果显示，刺五加CAS基因在各时期和器官中均有表达，但表达量具有显著差异（P＜0.05）。其中果实基本成熟期的表达量最高，是最低量萌芽期的1.56倍，各器官中，叶片的表达量最高，是最低量叶柄的1.37倍。结论 首次分离并报道了刺五加的CAS cDNA克隆，并证实其在不同生长发育时期和不同器官中的表达量不同，为进一步研究CAS对刺五加皂苷量的影响和表达调控奠定基础。]]> 1717true 目的 采用DNA条形码序列对9种常见的蒿属药用植物进行鉴定，为常见蒿属药用植物的鉴定提供分子依据。方法 对9种常见蒿属药用植物的4条候选DNA条形码序列（ITS2、rbcL、matK、psbA-trnH）进行PCR扩增和测序，比较各序列的扩增和测序效率，应用BLAST1、Distance方法来评估各序列的鉴定效率。此外，基于MEGA5分析9种常见蒿属药用植物ITS2序列种间K2P遗传距离并构建NJ树。结果 除matK外，其余3条片段的PCR扩增和测序效率均为100%，ITS2序列对9种蒿属药用植物的物种水平鉴定成功率最高，为100%，而psbA-trnH、rbcL、matK、matK＋rbcL的鉴定成功率（BLAST1法）分别为83.3%、66.7%、54.5%、75%。通过ITS2序列的种间K2P遗传距离及NJ树均能将不同物种全部区分。结论 ITS2序列可以作为鉴定蒿属药用植物的潜在条形码。]]> 1,2，宋经元¹，罗 焜¹，林余霖¹，刘 萍²，姚 辉¹]]> 1716true 目的采用DNA条形码序列对9种常见的蒿属药用植物进行鉴定,为常见蒿属药用植物的鉴定提供分子依据。方法对9种常见蒿属药用植物的4条候选DNA条形码序列(ITS2、rbcL、matK、psbA-trnH)进行PCR扩增和测序,比较各序列的扩增和测序效率,应用BLAST1、Distance方法来评估各序列的鉴定效率。此外,基于MEGA5分析9种常见蒿属药用植物ITS2序列种间K2P遗传距离并构建NJ树。目的除matK外,其余3条片段的PCR扩增和测序效率均为100%,ITS2序列对9种蒿属药用植物的物种水平鉴定成功率最高,为100%,而psbA-trnH、rbcL、matK、matK+rbcL的鉴定成功率(BLAST1法)分别为83.3%、66.7%、54.5%、75%。通过ITS2序列的种间K2P遗传距离及NJ树均能将不同物种全部区分。结论 ITS2序列可以作为鉴定蒿属药用植物的潜在条形码。]]> 2014/12/17 17:57:02 1715true 目的探索广西草珊瑚Sarcandra glabra种质资源的遗传多样性,为草珊瑚及其他中药种质资源保护、亲缘关系研究、品种选育和引种栽培提供分子生物学依据。方法利用AFLP标记对来自广西不同产地的18份草珊瑚开展遗传多样性分析,采用NTSYS软件进行聚类和主坐标分析。目的从64对AFLP引物组合中筛选出8对用于扩增,共获得319条清晰可辨条带,其中多态性条带251条,多态性位点百分率为78.68%。聚类和主坐标分析表明广西草珊瑚种质资源的遗传基础存在一定的多样性,但遗传相似性系数(0.630 3～0.836 6)较大,遗传距离较近。结论广西草珊瑚种质资源的遗传多样性偏低,应该尽快采取相应措施,对草珊瑚资源进行合理保护。]]> 2014/12/17 17:57:02 1714true 目的 探索广西草珊瑚Sarcandra glabra种质资源的遗传多样性，为草珊瑚及其他中药种质资源保护、亲缘关系研究、品种选育和引种栽培提供分子生物学依据。方法 利用AFLP标记对来自广西不同产地的18份草珊瑚开展遗传多样性分析，采用NTSYS软件进行聚类和主坐标分析。结果 从64对AFLP引物组合中筛选出8对用于扩增，共获得319条清晰可辨条带，其中多态性条带251条，多态性位点百分率为78.68%。聚类和主坐标分析表明广西草珊瑚种质资源的遗传基础存在一定的多样性，但遗传相似性系数（0.630 3～0.836 6）较大，遗传距离较近。结论 广西草珊瑚种质资源的遗传多样性偏低，应该尽快采取相应措施，对草珊瑚资源进行合理保护。]]> 1,2，韦荣昌^1,2,3，姚绍嫦^1,2，蓝祖栽^1,2，凌征柱^1,2]]> 1713true 目的 研究不同生长期健康与患病乌头根际土壤酶活性的动态变化。方法 采用紫外分光光度法测定健康与患病乌头不同生长期蔗糖酶、脲酶和磷酸酶的活性。结果 健康植株根际土壤蔗糖酶活性呈逐渐下降趋势，患病植株土壤蔗糖酶活性呈逐渐增强的趋势；在相同生长期，健康植株土壤脲酶、磷酸酶活性均低于患病植株，脲酶在3～5月均呈逐渐增强的趋势，酸性磷酸酶、碱性磷酸酶活性呈先降低后增强的趋势。结论 健康与患病乌头根际土壤酶活性差异较大，为乌头病害的进一步研究提供了科学依据。]]> 1712true 目的研究不同生长期健康与患病乌头根际土壤酶活性的动态变化。方法采用紫外分光光度法测定健康与患病乌头不同生长期蔗糖酶、脲酶和磷酸酶的活性。目的健康植株根际土壤蔗糖酶活性呈逐渐下降趋势,患病植株土壤蔗糖酶活性呈逐渐增强的趋势;在相同生长期,健康植株土壤脲酶、磷酸酶活性均低于患病植株,脲酶在3～5月均呈逐渐增强的趋势,酸性磷酸酶、碱性磷酸酶活性呈先降低后增强的趋势。结论健康与患病乌头根际土壤酶活性差异较大,为乌头病害的进一步研究提供了科学依据。]]> 2014/12/17 17:57:03 1711true 目的探讨短期干旱对黄连叶片光合作用的限制因素,为黄连栽培中抗旱研究提供科学依据。方法通过测定土壤相对含水量,设置了CK(正常水分)、LD(轻度干旱)、MD(中度干旱)、HD(重度干旱)4个处理组,测定了短期干旱下黄连叶片快速光响应曲线,气孔导度(Cond)、蒸腾速率(Tr)、胞间二氧化碳(Ci)随光强变化特性。目的随着光合有效辐射(PAR)强度的增加,LD、MD、HD组的最大荧光产量(Fm’)下降幅度,非光化学猝灭系数(qN值)的上升幅度均低于CK组,且HD组Fm’下降幅度最低为54.2%,qN值最低为0.595。相反,LD、MD、HD组Ft值上升幅度,qN、有效荧光产量(φPSII)的下降幅度均高于CK组,此外CK组的Cond和Tr高于LD、MD组,但低于HD组,且Ci也低于HD组。结论短期重度干旱胁迫对黄连叶片光合作用的限制主要是非气孔因素起主导作用(PSII反应中心失活,热耗散能力降低,电子传递速率降低等);短期轻度、中度干旱胁迫对黄连叶片光合作用的限制是非气孔因素和气孔因素共同作用。]]> 2014/12/17 17:57:03 1710true 目的 探讨短期干旱对黄连叶片光合作用的限制因素，为黄连栽培中抗旱研究提供科学依据。方法 通过测定土壤相对含水量，设置了CK（正常水分）、LD（轻度干旱）、MD（中度干旱）、HD（重度干旱）4个处理组，测定了短期干旱下黄连叶片快速光响应曲线，气孔导度（Cond）、蒸腾速率（Tr）、胞间二氧化碳（Ci）随光强变化特性。结果 随着光合有效辐射（PAR）强度的增加，LD、MD、HD组的最大荧光产量（Fm’）下降幅度，非光化学猝灭系数（qN值）的上升幅度均低于CK组，且HD组Fm’下降幅度最低为54.2%，qN值最低为0.595。相反，LD、MD、HD组Ft值上升幅度，qN、有效荧光产量（φPSII）的下降幅度均高于CK组，此外CK组的Cond和Tr高于LD、MD组，但低于HD组，且Ci也低于HD组。结论 短期重度干旱胁迫对黄连叶片光合作用的限制主要是非气孔因素起主导作用（PSII反应中心失活，热耗散能力降低，电子传递速率降低等）；短期轻度、中度干旱胁迫对黄连叶片光合作用的限制是非气孔因素和气孔因素共同作用。]]> 1709true 目的 以铁皮石斛Dendrobium officinale带芽茎段为材料，对铁皮石斛的组织培养进行系统研究，以期建立铁皮石斛的快繁技术体系。方法 采用植物组织培养的方法对铁皮石斛外植体的消毒方法、原球茎的诱导、增殖、分化、幼苗生根及瓶苗移栽等进行研究。结果 铁皮石斛外植体最佳的消毒方式为75%乙醇消毒30 s，再用0.1% HgCl₂消毒10 min；铁皮石斛带芽茎段原球茎诱导的最佳培养基为MS＋1.0 mg/L 6-BA＋0.5 mg/L NAA＋2 g/L AC，诱导率达到34.98%；原球茎增殖的最佳培养基为MS＋0.5 mg/L 6-BA＋0.8 mg/L 2, 4-D＋2 g/L AC，增殖率达到89.6%；原球茎分化的最佳培养基为MS＋1.2 mg/L 6-BA＋0.2 mg/L IBA＋2 g/L AC，分化率达到89.6%；幼苗生根的最佳培养基配方为1/2 MS＋2.5 mg/L NAA＋15%土豆汁＋2 g/L AC，生根率达到90.4%～92.8%；瓶苗移栽最佳方式为大苗、树皮块苔藓草做基质、基质中添加0.03 mg/L赤霉素，并接种适量菌根真菌Epulorhiza sp.。结论 建立了铁皮石斛的快繁技术体系，为铁皮石斛的工业化生产奠定技术基础。]]> 1，金亚征¹，王 莉²]]> 1708true 目的以铁皮石斛Dendrobium officinale带芽茎段为材料,对铁皮石斛的组织培养进行系统研究,以期建立铁皮石斛的快繁技术体系。方法采用植物组织培养的方法对铁皮石斛外植体的消毒方法、原球茎的诱导、增殖、分化、幼苗生根及瓶苗移栽等进行研究。目的铁皮石斛外植体最佳的消毒方式为75%乙醇消毒30 s,再用0.1%HgCl2消毒10 min;铁皮石斛带芽茎段原球茎诱导的最佳培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+2 g/LAC,诱导率达到34.98%;原球茎增殖的最佳培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+0.8 mg/L 2,4-D+2 g/LAC,增殖率达到89.6%;原球茎分化的最佳培养基为MS+1.2mg/L 6-BA+0.2 mg/L IBA+2 g/L AC,分化率达到89.6%;幼苗生根的最佳培养基配方为1/2 MS+2.5 mg/L NAA+15%土豆汁+2 g/LAC,生根率达到90.4%～92.8%;瓶苗移栽最佳方式为大苗、树皮块苔藓草做基质、基质中添加0.03 mg/L赤霉素,并接种适量菌根真菌Epulorhiza sp.。结论建立了铁皮石斛的快繁技术体系,为铁皮石斛的工业化生产奠定技术基础。]]> 2014/12/17 17:57:03 1707true 目的建立同时测定预知子中多种三萜皂苷成分的一测多评质量控制方法。方法采用Alltech Apollo C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);以乙腈和0.1%的磷酸水溶液为流动相梯度洗脱;以常春藤皂苷元3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖苷(皂苷P_D,saponins P_D)为内标物,考察在不同色谱柱、流动相系统、HPLC仪器条件下,皂苷P_D,与常春藤皂苷元3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→3)-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖苷(皂苷X,saponin X)、常春藤皂苷元3-O-β-D-吡喃木糖基-(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖苷(皂苷B,saponin B)、常春藤皂苷元3-O-α-L-吡喃阿拉伯糖苷(皂苷A,saponin A)之间的相对校正因子,并利用该相对校正因子(RCF)计算皂苷X、皂苷B和皂苷A量。采用外标法同时测定药材中该4种成分的量,将测定值与计算值进行多种统计学检验,以验证该质控方法的准确性和可行性。目的在不同的条件下,预知子中皂苷P_D与皂苷X、皂苷B及皂苷A的相对校正因子重现性良好,(RSD=0.70%、0.56%、0.59%),RCF分别为1.180、1.045、0.893。10批预知子中皂苷X、皂苷B及皂苷A的计算值与外标法实测值相比没有显著性差异(P>0.05)。结论采用一测多评法控制预知子的质量是准确的、可行的。]]> 2014/12/17 17:57:03 1706true 目的 建立同时测定预知子中多种三萜皂苷成分的一测多评质量控制方法。方法 采用Alltech Apollo C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；以乙腈和0.1%的磷酸水溶液为流动相梯度洗脱；以常春藤皂苷元3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖苷（皂苷P_D, saponins P_D）为内标物，考察在不同色谱柱、流动相系统、HPLC仪器条件下，皂苷P_D,与常春藤皂苷元3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→3)-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖苷（皂苷X, saponin X）、常春藤皂苷元3-O-β-D-吡喃木糖基-(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖苷（皂苷B, saponin B）、常春藤皂苷元3-O-α-L-吡喃阿拉伯糖苷（皂苷A, saponin A）之间的相对校正因子，并利用该相对校正因子（RCF）计算皂苷X、皂苷 B和皂苷 A量。采用外标法同时测定药材中该4种成分的量，将测定值与计算值进行多种统计学检验，以验证该质控方法的准确性和可行性。结果 在不同的条件下，预知子中皂苷 P_D与皂苷 X、皂苷B及皂苷A的相对校正因子重现性良好，（RSD＝0.70%、0.56%、0.59%），RCF分别为1.180、1.045、0.893。10批预知子中皂苷X、皂苷B及皂苷A的计算值与外标法实测值相比没有显著性差异（P＞0.05）。结论 采用一测多评法控制预知子的质量是准确的、可行的。]]> 1,2，张武岗^1,2，刘岩庭²，侯雄军²，李志峰^1,2，苏 丹^1,2，冯育林^1,2，杨世林^1,2]]> 1705true 目的研究河南野生柴胡遗传多样性。方法利用伏牛山区和太行山区的4个居群36份个体的ITS序列进行了遗传多样性分析。结果基于ITS序列共得到13个单倍型(A～M),单倍型多样性指数(H)为0.758±0.001 3,核酸多样性指数(π)为0.004 73,遗传分化系数(Gst)为0.319 8,种群间基因流(Nm)为0.53。结论河南野生柴胡种群具有较高的遗传多样性,但部分地区已经造成了柴胡遗传多样性的降低,柴胡种群间地理距离会限制种子介导的基因流。]]> 2014/12/17 17:40:01 1704true 目的 研究河南野生柴胡遗传多样性。方法 利用伏牛山区和太行山区的4个居群36份个体的ITS序列进行了遗传多样性分析。结果 基于ITS序列共得到13个单倍型（A～M），单倍型多样性指数（H）为0.758±0.001 3，核酸多样性指数（π）为0.004 73，遗传分化系数（Gst）为0.319 8，种群间基因流（Nm）为0.53。结论 河南野生柴胡种群具有较高的遗传多样性，但部分地区已经造成了柴胡遗传多样性的降低，柴胡种群间地理距离会限制种子介导的基因流。]]> 1，张维瑞²，尚富德²]]> 1703true 目的 研究青枯菌诱导广藿香的致病过程及防御相关酶同工酶的动态变化。方法 利用青枯菌粗毒素诱导广藿香试管苗，并用聚丙烯酰胺凝胶电泳法，对诱导植株中超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、过氧化物酶（POD）同工酶谱带的变化进行分析。结果 青枯菌诱导1～7 d后的广藿香植株，表现渐进的发病过程，开始时，植株失绿、少数叶片萎垂；逐渐植株茎杆弯曲、整株叶片萎蔫。同工酶电泳分析表明，SOD同工酶在第1、3天时分别出现了新谱带，与对照共有的谱带，强度先增后减；CAT同工酶在第3、5天时分别出现新谱带，第6天时强度达到最大；POD同工酶在第1、4天时分别出现了新谱带，强度先增后减，第7天时所有谱带消失。结论 青枯病的发生呈现渐进的过程。青枯菌诱导1～7 d，广藿香SOD、CAT和POD同工酶谱带在数目和强度上均有所不同，呈动态变化，表明SOD、CAT和POD在广藿香抵抗青枯菌入侵时可能起到较为重要的作用。]]> 1702true 目的研究青枯菌诱导广藿香的致病过程及防御相关酶同工酶的动态变化。方法利用青枯菌粗毒素诱导广藿香试管苗,并用聚丙烯酰胺凝胶电泳法,对诱导植株中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)同工酶谱带的变化进行分析。结果青枯菌诱导1～7 d后的广藿香植株,表现渐进的发病过程,开始时,植株失绿、少数叶片萎垂;逐渐植株茎杆弯曲、整株叶片萎蔫。同工酶电泳分析表明,SOD同工酶在第1、3天时分别出现了新谱带,与对照共有的谱带,强度先增后减;CAT同工酶在第3、5天时分别出现新谱带,第6天时强度达到最大;POD同工酶在第1、4天时分别出现了新谱带,强度先增后减,第7天时所有谱带消失。结论青枯病的发生呈现渐进的过程。青枯菌诱导1～7 d,广藿香SOD、CAT和POD同工酶谱带在数目和强度上均有所不同,呈动态变化,表明SOD、CAT和POD在广藿香抵抗青枯菌入侵时可能起到较为重要的作用。]]> 2014/12/17 17:40:01 1701true 目的优选出半夏总蛋白提取的最适方法并研究不同生长时期总蛋白量及成分的变化,为半夏药用成分的监控及合理采收提供科学依据。方法采用丙酮沉淀法、95%(NH₄)₂SO₄盐析法、TCA-丙酮法和Tris-饱和酚法提取半夏总蛋白,筛选半夏总蛋白提取的最佳方法。分别于半夏出芽期、全苗期、珠芽期、佛焰苞期及倒苗期采集样品,分为新鲜组和干燥处理组,提取样品总蛋白,进行SDS-PAGE电泳检测及Bradford浓度测定。结果丙酮沉淀法、95%(NH₄)₂SO₄盐析法、TCA-丙酮法和Tris-饱和酚法提取的半夏总蛋白量分别为0.369、0.678、1.082、0.493 mg/mL;新鲜半夏5个不同生长时期总蛋白量占块茎的质量分数分别为出芽期4.53 mg/g、全苗期2.28 mg/g、珠芽期2.79 mg/g、佛焰苞期7.61 mg/g、倒苗期10.21 mg/g;干燥半夏5个不同生长时期总蛋白量占块茎的质量分数分别为出芽期31.85 mg/g、全苗期18.52 mg/g、珠芽期42.08 mg/g、佛焰苞期28.56 mg/g、倒苗期56.84 mg/g;新鲜半夏块茎中蛋白含有15条蛋白带,干燥处理半夏块茎中蛋白含有5条蛋白带。结论 TCA-丙酮法是半夏总蛋白提取的最佳方法,不同生长时期的半夏块茎中蛋白成分各异,倒苗期总蛋白量最高。]]> 2014/12/17 17:40:01 1700true 目的 优选出半夏总蛋白提取的最适方法并研究不同生长时期总蛋白量及成分的变化，为半夏药用成分的监控及合理采收提供科学依据。方法 采用丙酮沉淀法、95% (NH₄)₂SO₄盐析法、TCA-丙酮法和Tris-饱和酚法提取半夏总蛋白，筛选半夏总蛋白提取的最佳方法。分别于半夏出芽期、全苗期、珠芽期、佛焰苞期及倒苗期采集样品，分为新鲜组和干燥处理组，提取样品总蛋白，进行SDS-PAGE电泳检测及Bradford浓度测定。结果 丙酮沉淀法、95% (NH₄)₂SO₄盐析法、TCA-丙酮法和Tris-饱和酚法提取的半夏总蛋白量分别为0.369、0.678、1.082、0.493 mg/mL；新鲜半夏5个不同生长时期总蛋白量占块茎的质量分数分别为出芽期4.53 mg/g、全苗期2.28 mg/g、珠芽期2.79 mg/g、佛焰苞期7.61 mg/g、倒苗期10.21 mg/g；干燥半夏5个不同生长时期总蛋白量占块茎的质量分数分别为出芽期31.85 mg/g、全苗期18.52 mg/g、珠芽期42.08 mg/g、佛焰苞期28.56 mg/g、倒苗期56.84 mg/g；新鲜半夏块茎中蛋白含有15条蛋白带，干燥处理半夏块茎中蛋白含有5条蛋白带。结论 TCA-丙酮法是半夏总蛋白提取的最佳方法，不同生长时期的半夏块茎中蛋白成分各异，倒苗期总蛋白量最高。]]> 1699true 目的 运用组织培养技术诱导平贝母四倍体。方法 采用不同质量浓度（200、500、1 000、2 000 mg/L）秋水仙素和不同的诱导时间（12～72 h）处理平贝母愈伤组织。结果 离体培养条件下，平贝母激素自养型培养材料在秋水仙素诱导下得到四倍体，四倍体染色体4n＝44，四倍体植株出现明显的多倍体特征。结论 500 mg/L秋水仙素处理24 h为最佳组合，可以诱导四倍体平贝母以平贝母子球做鉴定材料，获得较好的结果。]]> 1，许 媛¹，马玉滨²，韩永忠²，孙春玉¹，张美萍¹，王 义¹]]> 1698true 目的运用组织培养技术诱导平贝母四倍体。方法采用不同质量浓度(200、500、1 000、2 000 mg/L)秋水仙素和不同的诱导时间(12～72 h)处理平贝母愈伤组织。结果离体培养条件下,平贝母激素自养型培养材料在秋水仙素诱导下得到四倍体,四倍体染色体4n=44,四倍体植株出现明显的多倍体特征。结论 500 mg/L秋水仙素处理24 h为最佳组合,可以诱导四倍体平贝母以平贝母子球做鉴定材料,获得较好的结果。]]> 2014/12/17 17:40:01 1697true 目的建立馥芳艾纳香Blumea aromatica的快繁技术体系,为大量生产种苗提供基础。方法利用不同激素配比的培养基,筛选出馥芳艾纳香快速繁殖的最适培养基。结果带腋芽茎段是丛生芽诱导的最佳材料;丛生芽诱导的最适培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA,诱导率为100%;最佳继代增殖培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L KT+0.2mg/L NAA,增殖倍数为6.83;最适的生根培养基为1/2 MS+0.3 mg/L NAA,生根率100%,移栽成活率84.07%。最适培养条件为温度26℃、光照强度为2 000 lx、光照时间10 h。结论快繁技术体系可在短时间内提供大量种苗,并为馥芳艾纳香规模化生产种苗提供技术指导。]]> 2014/12/17 17:40:02 1696true 目的 建立馥芳艾纳香Blumea aromatica 的快繁技术体系，为大量生产种苗提供基础。方法 利用不同激素配比的培养基，筛选出馥芳艾纳香快速繁殖的最适培养基。结果 带腋芽茎段是丛生芽诱导的最佳材料；丛生芽诱导的最适培养基为MS＋2.0 mg/L 6-BA＋0.2 mg/L NAA，诱导率为100%；最佳继代增殖培养基为MS＋2.0 mg/L 6-BA＋0.5 mg/L KT＋0.2 mg/L NAA，增殖倍数为6.83；最适的生根培养基为1/2 MS＋0.3 mg/L NAA，生根率100%，移栽成活率84.07%。最适培养条件为温度26 ℃、光照强度为2 000 lx、光照时间10 h。结论 快繁技术体系可在短时间内提供大量种苗，并为馥芳艾纳香规模化生产种苗提供技术指导。]]> 1695true 目的 研究不同采收期紫锥菊质量和产量的变化。方法 通过对不同采收期的紫锥菊进行产量测定和物候期观察，并采用HPLC法对紫锥菊中的菊苣酸进行动态变化研究。结果 一年生紫锥菊地上部分的产量以11月2日（果熟期）采收的最高，比盛花期产量高38.3%，地下部分产量以9月15日（盛花期）采收的最高，从9月15日到11月2日地下部分产量有少量的降低，但变化不大；地上部分菊苣酸量从7月10日（蕾前期）到9月27日（盛花期）变化不大，但从9月27日到10月20日（果期）有一个降低的过程，从10月20日到11月2日又有所回升，地下部分菊苣酸量变化趋势与地上相似；两年生紫锥菊产量及菊苣酸量变化与一年生相似，但地下部分产量在果熟期最高，其全株产量是一年生植株的2.7倍。结论 广州产紫锥菊以果熟期为最佳采收期，栽种两年比栽种一年更为合理。]]> 1, 2，杨跃生¹，吴 鸿¹ ]]> 1694true 目的研究不同采收期紫锥菊质量和产量的变化。方法通过对不同采收期的紫锥菊进行产量测定和物候期观察,并采用HPLC法对紫锥菊中的菊苣酸进行动态变化研究。结果一年生紫锥菊地上部分的产量以11月2日(果熟期)采收的最高,比盛花期产量高38.3%,地下部分产量以9月15日(盛花期)采收的最高,从9月15日到11月2日地下部分产量有少量的降低,但变化不大;地上部分菊苣酸量从7月10日(蕾前期)到9月27日(盛花期)变化不大,但从9月27日到10月20日(果期)有一个降低的过程,从10月20日到11月2日又有所回升,地下部分菊苣酸量变化趋势与地上相似;两年生紫锥菊产量及菊苣酸量变化与一年生相似,但地下部分产量在果熟期最高,其全株产量是一年生植株的2.7倍。结论广州产紫锥菊以果熟期为最佳采收期,栽种两年比栽种一年更为合理。]]> 2014/12/17 17:40:02 1693true 2014/12/17 17:40:02 1692true 目的建立铁棒锤高效快速繁殖体系。方法以铁棒锤越冬芽为外植体,用不同的培养基、激素和附加物组合培养。结果培养基MS+2,4-D 2.0 mg/L+NAA0.4 mg/L+活性炭(AC)1.5 g/L+聚乙烯吡咯烷酮(PVP)1 g/L有利愈伤组织的形成;培养基MS+6-BA2.5 mg/L+NAA0.2 mg/L+AC 1.5 g/L+PVP 1 g/L有利于成芽;培养基MS+6-BA3.5 mg/L+NAA0.1 mg/L+2,4-D 0.1 mg/L+AC 1.5 g/L+PVP 1 g/L有利芽增殖;培养基1/2 MS+NAA 0.2 mg/L+AC 1.5 g/L+PVP 1.0 g/L有利于根的生成。结论以种子发芽苗为外植体进行离体培养,可以实现铁棒锤种苗的工业化快速繁殖。]]> 2014/12/17 17:40:02 1691true 目的 建立铁棒锤高效快速繁殖体系。方法 以铁棒锤越冬芽为外植体，用不同的培养基、激素和附加物组合培养。结果 培养基MS＋2, 4-D 2.0 mg/L＋NAA 0.4 mg/L＋活性炭（AC）1.5 g/L＋聚乙烯吡咯烷酮（PVP）1 g/L有利愈伤组织的形成；培养基MS＋6-BA 2.5 mg/L＋NAA 0.2 mg/L＋AC 1.5 g/L＋PVP 1 g/L有利于成芽；培养基MS＋6-BA 3.5 mg/L＋NAA 0.1 mg/L＋2, 4-D 0.1 mg/L＋AC 1.5 g/L＋PVP 1 g/L有利芽增殖；培养基1/2 MS＋NAA 0.2 mg/L＋AC 1.5 g/L＋PVP 1.0 g/L有利于根的生成。结论 以种子发芽苗为外植体进行离体培养，可以实现铁棒锤种苗的工业化快速繁殖。]]> 1690true 目的 研究不同种源鱼腥草种质资源的主要有效成分甲基正壬酮、黄酮类成分量及产量变化规律，综合多因素评价鱼腥草种源质量，为鱼腥草优良品种选育及高产栽培技术提供基础。方法 测定23个种源的鱼腥草中的甲基正壬酮和黄酮类成分量，并对种源与产量的变异关系进行分析。结果 不同种源鱼腥草甲基正壬酮、黄酮类成分的量及产量存在显著差异。不同种源鱼腥草挥发油类物质除与形态特征存在显著相关性外，还有地理变异规律，总量呈从西到东、从南到北逐渐增加的经、纬双向变异。而黄酮类成分除少数呈经向变异外其他均无明显的地理变异规律。结论 通过对23个鱼腥草种源主要有效成分挥发油类物质、黄酮类成分以及产量等因素研究结果，黄酮类成分总量以植株较矮的鱼腥草为优，其中以浙江长兴种源最高，浙江嵊州种源次之。]]> 1689true 目的研究不同种源鱼腥草种质资源的主要有效成分甲基正壬酮、黄酮类成分量及产量变化规律,综合多因素评价鱼腥草种源质量,为鱼腥草优良品种选育及高产栽培技术提供基础。方法测定23个种源的鱼腥草中的甲基正壬酮和黄酮类成分量,并对种源与产量的变异关系进行分析。结果不同种源鱼腥草甲基正壬酮、黄酮类成分的量及产量存在显著差异。不同种源鱼腥草挥发油类物质除与形态特征存在显著相关性外,还有地理变异规律,总量呈从西到东、从南到北逐渐增加的经、纬双向变异。而黄酮类成分除少数呈经向变异外其他均无明显的地理变异规律。结论通过对23个鱼腥草种源主要有效成分挥发油类物质、黄酮类成分以及产量等因素研究结果,黄酮类成分总量以植株较矮的鱼腥草为优,其中以浙江长兴种源最高,浙江嵊州种源次之。]]> 2014/12/17 17:40:02 1688true 目的建立金莲花茎叶HPLC指纹图谱分析方法。方法以荭草苷为对照品,采用Welch Materials Ultimate TMXB-C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以乙腈(A)-0.35%磷酸(B)梯度洗脱,0～25 min,15%A;25～60 min,15%～25%A;60～90 min,25%～30%A;90～110 min,30%～100%A;110～120 min,100%A;检测波长340 nm,体积流量为1.0 mL/min,柱温30℃;采用SPSS 19.0进行系统聚类分析。结果建立金莲花茎叶的HPLC指纹图谱,标定22个共有峰,方法学考察结果符合指纹图谱技术要求;相似度和聚类分析结果表明,药材质量主要与其产地有关,同时与采集时间也有一定关系。结论此研究方法稳定、可靠、重现性好,可用来控制金莲花茎叶的质量。]]> 2014/12/17 17:40:02 1687true 目的 建立金莲花茎叶HPLC指纹图谱分析方法。方法 以荭草苷为对照品，采用Welch Materials Ultimate TMXB-C₁₈（250 mm×4.6 mm，5 μm）色谱柱，以乙腈（A）-0.35%磷酸（B）梯度洗脱，0～25 min，15% A；25～60 min，15%～25% A；60～90 min，25%～30% A；90～110 min，30%～100% A；110～120 min，100% A；检测波长340 nm，体积流量为1.0 mL/min，柱温30 ℃；采用SPSS 19.0进行系统聚类分析。结果 建立金莲花茎叶的HPLC指纹图谱，标定22个共有峰，方法学考察结果符合指纹图谱技术要求；相似度和聚类分析结果表明，药材质量主要与其产地有关，同时与采集时间也有一定关系。结论 此研究方法稳定、可靠、重现性好，可用来控制金莲花茎叶的质量。]]> 1，苏连杰²]]> 1686true 目的从DNA水平上对仙茅种质资源进行遗传多样性分析。方法对我国25个主要分布区的仙茅进行ISSR-PCR扩增与检测。扩增结果转化为"0"、"1"矩阵后,利用Treeconw软件计算遗传距离,并采用UPGMA聚类法构建亲缘关系树状图。结果 14条引物共得到176条清晰可辨的扩增条带,其中有151条呈现多态性,占85.8%。遗传距离变化范围在0.177 2～0.403 0。25份样品分为两大类,聚类较为复杂,大多种质不具明显地理相关性,仅在小分支中呈现出一定的地域性分布规律。结论我国仙茅植物的遗传多样性十分丰富,为筛选优质种质资源提供了丰富的遗传基础。]]> 2014/12/17 17:19:46 1685true 目的 从DNA水平上对仙茅种质资源进行遗传多样性分析。方法 对我国25个主要分布区的仙茅进行ISSR-PCR扩增与检测。扩增结果转化为“0”、“1”矩阵后，利用Treeconw软件计算遗传距离，并采用UPGMA聚类法构建亲缘关系树状图。结果 14条引物共得到176条清晰可辨的扩增条带，其中有151条呈现多态性，占85.8%。遗传距离变化范围在0.177 2～0.403 0。25份样品分为两大类，聚类较为复杂，大多种质不具明显地理相关性，仅在小分支中呈现出一定的地域性分布规律。结论 我国仙茅植物的遗传多样性十分丰富，为筛选优质种质资源提供了丰富的遗传基础。]]> 1684true 目的 研究水杨酸（SA）对白桦悬浮细胞生长、齐墩果酸积累及防御酶活性的影响。方法 在白桦悬浮培养第7、10、13、15天，分别添加不同质量浓度（10、25、50、100、250 mg/L）的SA，进行细胞生长、齐墩果酸量及抗逆酶活性分析。结果 添加低质量浓度SA（10～25 mg/L）对细胞活力和生长量影响不大，高质量浓度的SA（100～250 mg/L）处理可显著抑制细胞活力和生长，但可促进齐墩果酸的积累，在第7天添加250 mg/L SA后齐墩果酸量最高，达1.71 mg/g（干质量），是对照的3.1倍；而第7天添加50 mg/L SA后齐墩果酸的产量为0.473 mg，比对照提高了42.04%。悬浮培养第7天添加50 mg/L SA，过氧化氢酶（CAT）和超氧化物歧化酶（SOD）两种酶活性分别在0～24 h和0～48 h比对照显著提高，而PAL活性在SA处理12 h后始终高于对照。结论 适宜浓度的SA可刺激白桦细胞防御酶活性提高，并促进白桦悬浮细胞中齐墩果酸的积累。]]> 1683true 目的研究水杨酸(SA)对白桦悬浮细胞生长、齐墩果酸积累及防御酶活性的影响。方法在白桦悬浮培养第7、10、13、15天,分别添加不同质量浓度(10、25、50、100、250 mg/L)的SA,进行细胞生长、齐墩果酸量及抗逆酶活性分析。结果添加低质量浓度SA(10～25 mg/L)对细胞活力和生长量影响不大,高质量浓度的SA(100～250 mg/L)处理可显著抑制细胞活力和生长,但可促进齐墩果酸的积累,在第7天添加250 mg/L SA后齐墩果酸量最高,达1.71 mg/g(干质量),是对照的3.1倍;而第7天添加50 mg/L SA后齐墩果酸的产量为0.473 mg,比对照提高了42.04%。悬浮培养第7天添加50 mg/L SA,过氧化氢酶(CAT)和超氧化物歧化酶(SOD)两种酶活性分别在0～24 h和0～48 h比对照显著提高,而PAL活性在SA处理12 h后始终高于对照。结论适宜浓度的SA可刺激白桦细胞防御酶活性提高,并促进白桦悬浮细胞中齐墩果酸的积累。]]> 2014/12/17 17:19:46 1682true 目的通过监测在不同氮铬耦合浓度下,铬在泽泻不同部位的动态积累规律及其对泽泻生长的影响,探讨施氮量对在不同土壤铬背景值下泽泻生长的影响及其与铬积累的相关性。方法对不同处理组采用动态监测法,测定不同生长时期泽泻不同部位的铬积累量及生物量的变化情况,同时利用统计学方法探讨铬积累量与氮肥施用量及土壤铬背景值的相关性。结果铬对于泽泻生长的影响呈现出浓度依赖性及部位差异性。总体上低铬水平下泽泻的生长得到一定程度的促进,而高铬水平下泽泻的生长受到抑制。氮肥的施加能够缓解铬的生物毒性,使泽泻生长正常,但同时氮肥的施加也使泽泻对于铬的积累增加。偏相关分析的结果也表明氮的施用量与铬元素在泽泻块茎的积累呈正相关性。结论泽泻规范化种植中应在保证其铬积累量不超标的情况下,尽量选择含低铬的土壤,同时氮肥的施用量应以泽泻药材安全性为前提。]]> 2014/12/17 17:19:46 1681true 目的 通过监测在不同氮铬耦合浓度下，铬在泽泻不同部位的动态积累规律及其对泽泻生长的影响，探讨施氮量对在不同土壤铬背景值下泽泻生长的影响及其与铬积累的相关性。方法 对不同处理组采用动态监测法，测定不同生长时期泽泻不同部位的铬积累量及生物量的变化情况，同时利用统计学方法探讨铬积累量与氮肥施用量及土壤铬背景值的相关性。结果 铬对于泽泻生长的影响呈现出浓度依赖性及部位差异性。总体上低铬水平下泽泻的生长得到一定程度的促进，而高铬水平下泽泻的生长受到抑制。氮肥的施加能够缓解铬的生物毒性，使泽泻生长正常，但同时氮肥的施加也使泽泻对于铬的积累增加。偏相关分析的结果也表明氮的施用量与铬元素在泽泻块茎的积累呈正相关性。结论 泽泻规范化种植中应在保证其铬积累量不超标的情况下，尽量选择含低铬的土壤，同时氮肥的施用量应以泽泻药材安全性为前提。]]> 1680true 目的 通过相关性分析和逐步回归分析方法分析海拔、经度、纬度、坡向、坡度生态环境因素对恒山产野生蒙古黄芪黄酮类和皂苷类成分的影响，筛选出影响黄芪质量的主要环境因素。方法 采用HPLC-DAD法测定了毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素4种黄酮成分；UPLC-ELSD法测定了黄芪皂苷I、黄芪皂苷II、黄芪皂苷III、黄芪甲苷4种皂苷成分。采用SPSS17.0软件对黄芪各成分进行相关性分析，并以逐步回归分析法分析各生态因素对各成分量的影响。结果 建立逐步回归方程，毛蕊异黄酮苷的量与黄酮总量相关系数为0.958，黄芪皂苷I的量与皂苷总量相关系数为0.969，毛蕊异黄酮的量与芒柄花素的量相关系数为0.896，呈极显著的正相关；皂苷总量与黄酮总量相关系数为?0.505，呈显著的负相关。随着海拔和纬度的升高，黄芪中毛蕊异黄酮和黄酮总量升高；芒柄花素的量随经度的增加而增加；种植在阴坡的黄芪中黄芪皂苷I和皂苷总量的量高，且随坡度增大而升高；黄芪皂苷II的量主要受坡度的影响。结论 影响恒山野生蒙古黄芪药材黄酮成分量的主要因素是海拔和纬度，经度也有一定的影响；坡向和坡度对黄芪的皂苷成分的量有显著的影响，纬度、海拔也有一定的影响。]]> 1, 2，陈安家¹，郭宝林²，黄文华²，曹秀娟³，侯美利³]]> 1679true 目的通过相关性分析和逐步回归分析方法分析海拔、经度、纬度、坡向、坡度生态环境因素对恒山产野生蒙古黄芪黄酮类和皂苷类成分的影响,筛选出影响黄芪质量的主要环境因素。方法采用HPLC-DAD法测定了毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素4种黄酮成分;UPLC-ELSD法测定了黄芪皂苷I、黄芪皂苷II、黄芪皂苷III、黄芪甲苷4种皂苷成分。采用SPSS17.0软件对黄芪各成分进行相关性分析,并以逐步回归分析法分析各生态因素对各成分量的影响。结果建立逐步回归方程,毛蕊异黄酮苷的量与黄酮总量相关系数为0.958,黄芪皂苷I的量与皂苷总量相关系数为0.969,毛蕊异黄酮的量与芒柄花素的量相关系数为0.896,呈极显著的正相关;皂苷总量与黄酮总量相关系数为0.505,呈显著的负相关。随着海拔和纬度的升高,黄芪中毛蕊异黄酮和黄酮总量升高;芒柄花素的量随经度的增加而增加;种植在阴坡的黄芪中黄芪皂苷I和皂苷总量的量高,且随坡度增大而升高;黄芪皂苷II的量主要受坡度的影响。结论影响恒山野生蒙古黄芪药材黄酮成分量的主要因素是海拔和纬度,经度也有一定的影响;坡向和坡度对黄芪的皂苷成分的量有显著的影响,纬度、海拔也有一定的影响。]]> 2014/12/17 17:19:46 1678true 目的通过愈伤组织细胞生长及其紫杉醇代谢动力学的研究,筛选确定南方红豆杉愈伤组织培养生产紫杉醇的最佳培养基配方与最佳收获期。方法以改良MS为基本培养基添加不同质量浓度的IBA、6-BA、GA₃组合诱导培养南方红豆杉愈伤组织,通过测定愈伤组织鲜质量进行生长动力学研究,采用HPLC法检测不同生长阶段愈伤组织中紫杉醇的积累量,进行紫杉醇代谢动力学研究。结果改良MS+0.2 mg/L IBA+0.05 mg/L 6-BA+0.3 mg/L GA₃、MS+0.2 mg/L IBA+0.01mg/L 6-BA+0.7 mg/L GA₃及MS+0.2 mg/L IBA+0.1 mg/L 6-BA+0.5 mg/L GA₃培养条件均较有利于南方红豆杉愈伤组织的诱导培养,且紫杉醇的积累量也较高,最高可达0.037 76%。结论在添加IBA及6-BA的基础上适当增补GA₃可使南方红豆杉愈伤组织诱导提前启动,缩短出愈时间,促进生长,降低褐变程度,增加愈伤组织中紫杉醇的积累量。愈伤组织的生长曲线呈S型,紫杉醇的积累呈线型增加,是一个逐渐积累的过程,但积累到一定程度就不再增加,且伴随着愈伤组织不断褐变。]]> 2014/12/17 17:19:46 1677true 目的 通过愈伤组织细胞生长及其紫杉醇代谢动力学的研究，筛选确定南方红豆杉愈伤组织培养生产紫杉醇的最佳培养基配方与最佳收获期。方法 以改良MS为基本培养基添加不同质量浓度的IBA、6-BA、GA₃组合诱导培养南方红豆杉愈伤组织，通过测定愈伤组织鲜质量进行生长动力学研究，采用HPLC法检测不同生长阶段愈伤组织中紫杉醇的积累量，进行紫杉醇代谢动力学研究。结果 改良MS＋0.2 mg/L IBA＋0.05 mg/L 6-BA＋0.3 mg/L GA₃、MS＋0.2 mg/L IBA＋0.01 mg/L 6-BA＋0.7 mg/L GA₃及MS＋0.2 mg/L IBA＋0.1 mg/L 6-BA＋0.5 mg/L GA₃培养条件均较有利于南方红豆杉愈伤组织的诱导培养，且紫杉醇的积累量也较高，最高可达0.037 76%。结论 在添加IBA及6-BA的基础上适当增补GA₃可使南方红豆杉愈伤组织诱导提前启动，缩短出愈时间，促进生长，降低褐变程度，增加愈伤组织中紫杉醇的积累量。愈伤组织的生长曲线呈S型，紫杉醇的积累呈线型增加，是一个逐渐积累的过程，但积累到一定程度就不再增加，且伴随着愈伤组织不断褐变。]]> 1676true 目的 多点采样研究并建立党参质量评价体系，采用其对不同来源的党参进行质量差异性分析。方法 对党参的总灰分、酸不溶灰分、醇溶性浸出物进行测定，采用HPLC-DAD对党参炔苷进行测定并建立HPLC指纹图谱；将指标与指纹图谱结合起来建立党参质量评价体系；用建立的质量评价体系对不同来源的党参样品进行质量评价。结果 不同产地灰分和酸不溶灰分检测结果显示，符合《中国药典》2010年版标准；而不同来源党参炔苷量具有显著性差异；不同产地的党参指纹图谱具有9个共有峰，相关系数均在0.8以上，建立的指纹图谱可用于党参质量评价。结论 本研究用多指标检测结合指纹图谱建立的党参质量评价体系可用于不同来源党参的质量评价及质量控制。]]> 1, 2，梁宗锁^{1, 2}，杨东风^{1, 2}，刘 岩³，刘峰华³]]> 1675true 目的多点采样研究并建立党参质量评价体系,采用其对不同来源的党参进行质量差异性分析。方法对党参的总灰分、酸不溶灰分、醇溶性浸出物进行测定,采用HPLC-DAD对党参炔苷进行测定并建立HPLC指纹图谱;将指标与指纹图谱结合起来建立党参质量评价体系;用建立的质量评价体系对不同来源的党参样品进行质量评价。结果不同产地灰分和酸不溶灰分检测结果显示,符合《中国药典》2010年版标准;而不同来源党参炔苷量具有显著性差异;不同产地的党参指纹图谱具有9个共有峰,相关系数均在0.8以上,建立的指纹图谱可用于党参质量评价。结论本研究用多指标检测结合指纹图谱建立的党参质量评价体系可用于不同来源党参的质量评价及质量控制。]]> 2014/12/17 17:19:47 1674true 目的研究鱼香草的种子形态和不同处理对种子萌发的影响,为鱼香草人工栽培种苗培育提供科学依据。方法测定种子长宽、千粒质量,对种子设置不同温度、不同光质以及不同浓度的赤霉素(GA₃)和KNO₃浸种处理,观察记录种子发芽数,计算发芽率、发芽指数和活力指数。结果鱼香草种子椭圆形,长(1.77±0.01)mm,宽(1.13±0.01)mm,千粒质量(1 175.5±21.02)mg,吸水量为其风干种子质量的8.8倍;种子发芽最适宜温度为30℃;白色光照最有利于种子萌发,全黑暗最不利于种子萌发;GA₃、0.25%KNO₃浸种可显著提高种子发芽率、发芽指数及活力指数。结论得到鱼香草种子萌发最适宜的处理条件,对鱼香草人工栽培种苗培育具有重要指导作用。]]> 2014/12/17 17:19:47 1673true 目的 研究鱼香草的种子形态和不同处理对种子萌发的影响，为鱼香草人工栽培种苗培育提供科学依据。方法 测定种子长宽、千粒质量，对种子设置不同温度、不同光质以及不同浓度的赤霉素（GA₃）和KNO₃浸种处理，观察记录种子发芽数，计算发芽率、发芽指数和活力指数。结果 鱼香草种子椭圆形，长（1.77±0.01）mm，宽（1.13±0.01）mm，千粒质量（1 175.5±21.02）mg，吸水量为其风干种子质量的8.8倍；种子发芽最适宜温度为30 ℃；白色光照最有利于种子萌发，全黑暗最不利于种子萌发；GA₃、0.25% KNO₃浸种可显著提高种子发芽率、发芽指数及活力指数。结论 得到鱼香草种子萌发最适宜的处理条件，对鱼香草人工栽培种苗培育具有重要指导作用。]]> 1672true 目的 采用高效液相色谱法建立两面针的HPLC色谱指纹图谱分析方法，为其品质控制提供可靠依据。方法 采用HPLC-UV分析两面针的指纹图谱。色谱柱：Ultimate^TMXB C₈柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相为水（0.2%磷酸＋0.2%三乙胺）（A）-乙腈（B），梯度洗脱：0～5 min，8%～12% B；5～7 min，12%～15% B；7～14 min，15%～21% B；14～35 min，21%～25% B；35～40 min，25%～36% B；40～60 min，36%～52% B；60～80 min，52%～100% B；80～95 min，100% B；体积流量1.0 mL/min；柱温 35 ℃；检测波长 250 nm，测定24批两面针指纹图谱，应用相似度分析、系统聚类分析，对两面针进行分类研究。结果 在色谱指纹图谱中，确定了22个共有峰，根据相似度分析、系统聚类分析的结果，将24批药材分为2类。结论 该指纹图谱检测方法方便，重现性好，可用于两面针质量控制。]]> 1，杨焕琪¹，赖茂祥³，冯 看¹，刘华钢²]]> 1671true 目的采用高效液相色谱法建立两面针的HPLC色谱指纹图谱分析方法,为其品质控制提供可靠依据。方法采用HPLC-UV分析两面针的指纹图谱。色谱柱:UltimateTMXB C8柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为水(0.2%磷酸+0.2%三乙胺)(A)-乙腈(B),梯度洗脱:0～5 min,8%～12%B;5～7 min,12%～15%B;7～14 min,15%～21%B;14～35 min,21%～25%B;35～40 min,25%～36%B;40～60 min,36%～52%B;60～80 min,52%～100%B;80～95 min,100%B;体积流量1.0 mL/min;柱温35℃;检测波长250 nm,测定24批两面针指纹图谱,应用相似度分析、系统聚类分析,对两面针进行分类研究。结果在色谱指纹图谱中,确定了22个共有峰,根据相似度分析、系统聚类分析的结果,将24批药材分为2类。结论该指纹图谱检测方法方便,重现性好,可用于两面针质量控制。]]> 2014/12/17 17:19:47 1670true 目的 对木香的饮片和新鲜药材进行DNA片段的比对分析，为木香的鉴定提供研究思路。方法 选取木香饮片和新鲜药材，利用CTAB法提取其基因组总DNA，再进行PCR扩增筛选随机引物，找出能同时扩增饮片及新鲜药材基因组总DNA的随机引物，对饮片及新鲜药材基因组总DNA扩增产生的一致性条带进行克隆，得到阳性菌落，经转化子鉴定后测序。对所测序列进行生物信息学分析和同源性比较。结果 木香饮片与新鲜药材长度均为794 bp的克隆片段序列相似度达99.75%，长度为1 116 bp的克隆片段的核苷酸水平比对及氨基酸水平比对的相似度均为100%。结论 采用分子生物学手段能对木香饮片和新鲜药材进行鉴定。]]> 1669true 目的对木香的饮片和新鲜药材进行DNA片段的比对分析,为木香的鉴定提供研究思路。方法选取木香饮片和新鲜药材,利用CTAB法提取其基因组总DNA,再进行PCR扩增筛选随机引物,找出能同时扩增饮片及新鲜药材基因组总DNA的随机引物,对饮片及新鲜药材基因组总DNA扩增产生的一致性条带进行克隆,得到阳性菌落,经转化子鉴定后测序。对所测序列进行生物信息学分析和同源性比较。结果木香饮片与新鲜药材长度均为794 bp的克隆片段序列相似度达99.75%,长度为1 116 bp的克隆片段的核苷酸水平比对及氨基酸水平比对的相似度均为100%。结论采用分子生物学手段能对木香饮片和新鲜药材进行鉴定。]]> 2014/12/17 16:58:04 1668true 目的克隆铁皮石斛Dendrobium officinale磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(pepc)基因,并对其在F型和H型铁皮石斛中的表达进行分析,为研究铁皮石斛pepc基因的结构、功能提供依据。方法基于GenBank上已知的pepc基因的同源序列设计引物,应用RT-PCR和RACE等方法,克隆铁皮石斛pepc基因全长。采用荧光定量PCR方法研究pepc基因在2种铁皮石斛中的表达。结果成功克隆了铁皮石斛pepc基因,登录号为JF423930,该基因全长为3 560 bp,其中cds序列为2 895 bp,与兰科植物的同源性为80%左右,与其他科属植物的同源性达到70%以上,编码964个氨基酸。pepc基因在F型铁皮石斛中的表达量为H型的5.55倍。结论成功克隆了铁皮石斛pepc基因,且F型铁皮石斛pepc基因的表达量高于H型。]]> 2014/12/17 16:58:05 1667true 目的 克隆铁皮石斛Dendrobium officinale磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶（pepc）基因，并对其在F型和H型铁皮石斛中的表达进行分析，为研究铁皮石斛pepc基因的结构、功能提供依据。方法 基于GenBank上已知的pepc基因的同源序列设计引物，应用RT-PCR和RACE等方法，克隆铁皮石斛pepc基因全长。采用荧光定量PCR方法研究pepc基因在2种铁皮石斛中的表达。结果 成功克隆了铁皮石斛pepc基因，登录号为JF423930，该基因全长为3 560 bp，其中cds序列为2 895 bp，与兰科植物的同源性为80%左右，与其他科属植物的同源性达到70%以上，编码964个氨基酸。pepc基因在F型铁皮石斛中的表达量为H型的5.55倍。结论 成功克隆了铁皮石斛pepc基因，且F型铁皮石斛pepc基因的表达量高于H型。]]> 1，文国松¹，徐绍忠¹，查应红²，杨生超¹，段承俐^{1, 3}]]> 1666true 目的 从遗传特性及化学成分角度研究不同产地白头翁的差异性。方法 采用RAPD方法，通过反应体系的优化，借助于Nei法，对白头翁遗传差异性进行分析；采用HPTLC法和HPLC法比较10个产地白头翁的化学成分差异。结果 在RAPD反应体系中，从100个随机引物中筛选出28个引物扩增产物具有多态性，各基因型间的Nei相似系数分布在0.080～0.839，平均相似系数为0.432。10个不同来源的白头翁明显地聚为A和B两大类群。10个产地的白头翁样品化学成分HPLC色谱图的相似度在0.757～0.989，白头翁皂苷B₄的量相差达10～20倍；HPTLC图更直观的比较样品差异，聚类分析比较与遗传多态性并不完全一致。结论 不同地区的白头翁之间遗传多样性较为丰富，遗传差异存在较明显的地域性；10个产地白头翁化学成分的组成和组分的量均存在一定的差异。]]> 1665true 目的从遗传特性及化学成分角度研究不同产地白头翁的差异性。方法采用RAPD方法,通过反应体系的优化,借助于Nei法,对白头翁遗传差异性进行分析;采用HPTLC法和HPLC法比较10个产地白头翁的化学成分差异。结果在RAPD反应体系中,从100个随机引物中筛选出28个引物扩增产物具有多态性,各基因型间的Nei相似系数分布在0.080～0.839,平均相似系数为0.432。10个不同来源的白头翁明显地聚为A和B两大类群。10个产地的白头翁样品化学成分HPLC色谱图的相似度在0.757～0.989,白头翁皂苷B4的量相差达10～20倍;HPTLC图更直观的比较样品差异,聚类分析比较与遗传多态性并不完全一致。结论不同地区的白头翁之间遗传多样性较为丰富,遗传差异存在较明显的地域性;10个产地白头翁化学成分的组成和组分的量均存在一定的差异。]]> 2014/12/17 16:58:05 1664true 目的通过对决明子萌发及幼苗生理特性的研究,寻找提高决明子及幼苗在盐胁迫条件下抗性能力的途径。方法测定盐胁迫下决明子在经过不同质量浓度的外源性5-氨基乙酰丙酸(ALA)处理后,种子的发芽势、发芽率、发芽指数和活力指数,并对决明幼苗叶片叶绿素量、叶绿素荧光参数、原生质膜透性、叶片丙二醛(MDA)量、可溶性糖量、可溶性蛋白量及脯氨酸量及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)活性进行测定。结果 100 mmol/L盐胁迫下的决明子萌发受到显著抑制,但是经过不同质量浓度的ALA处理后,萌发指标均有升高。结果表明,外源性ALA处理显著提高了决明子发芽势、发芽率、发芽指数和活力指数,提高了叶片叶绿素a、叶绿素b和总叶绿素量,显著提高了最大光化学效率(Fv/Fm),PSII有效光化学效率(Fv′/Fm′),PSII实际光化学效率(ΦPSII),光化学淬灭系数(qP),降低了原生质膜透性、叶片的MDA量及非光化学淬灭系数(NPQ),提高了盐胁迫下幼苗叶片可溶性糖、可溶性蛋白和脯氨酸量,显著提高了叶片SOD、POD、CAT活性。结论外源性ALA通过提高决明子的萌发指数,提高幼苗光合效率、渗透调节物质量及抗氧化酶活性,有效地减缓盐胁迫对决明子及幼苗产生的伤害,提高种子及幼苗的抗盐能力。]]> 2014/12/17 16:58:05 1663true 目的 通过对决明子萌发及幼苗生理特性的研究，寻找提高决明子及幼苗在盐胁迫条件下抗性能力的途径。方法 测定盐胁迫下决明子在经过不同质量浓度的外源性5-氨基乙酰丙酸（ALA）处理后，种子的发芽势、发芽率、发芽指数和活力指数，并对决明幼苗叶片叶绿素量、叶绿素荧光参数、原生质膜透性、叶片丙二醛（MDA）量、可溶性糖量、可溶性蛋白量及脯氨酸量及超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化物酶（POD）和过氧化氢酶（CAT）活性进行测定。结果 100 mmol/L盐胁迫下的决明子萌发受到显著抑制，但是经过不同质量浓度的ALA处理后，萌发指标均有升高。结果表明，外源性ALA处理显著提高了决明子发芽势、发芽率、发芽指数和活力指数，提高了叶片叶绿素a、叶绿素b和总叶绿素量，显著提高了最大光化学效率（Fv/Fm），PSII有效光化学效率（Fv′/Fm′），PSII实际光化学效率（ΦPSII），光化学淬灭系数（qP），降低了原生质膜透性、叶片的MDA量及非光化学淬灭系数（NPQ），提高了盐胁迫下幼苗叶片可溶性糖、可溶性蛋白和脯氨酸量，显著提高了叶片SOD、POD、CAT活性。结论 外源性ALA通过提高决明子的萌发指数，提高幼苗光合效率、渗透调节物质量及抗氧化酶活性，有效地减缓盐胁迫对决明子及幼苗产生的伤害，提高种子及幼苗的抗盐能力。]]> 1，何 平¹，刘海英¹，谢英赞¹，韦品祥¹，袁凤刚²，胡世俊³]]> 1662true 目的 建立长春花转基因毛状根再生植株快速繁育体系，获得生物碱量提高的长春花再生植株。方法 研究外源植物生长调节剂对长春花毛状根愈伤组织诱导、不定芽分化、不定根分化和再生植株移栽的影响，采用HPLC法测定长春花再生植株生物碱量，并采用定量PCR技术分析目的基因的表达情况。结果 转基因长春花毛状根愈伤组织诱导和不定芽诱导的最佳培养基均是MS＋6-BA 2.0 mg/L＋NAA 0.3 mg/L，不定根分化的最适培养基是1/2 MS＋NAA 0.3 mg/L。采用炼苗的改进方法可使长春花再生植株的移栽成活率达90%。HPLC分析结果表明，长春花再生植株中长春碱、长春新碱和阿吗碱量分别比对照提高4.0、5.8、1.8倍，其中，优良单株OG30-3的长春新碱和长春碱量比对照提高7倍和10倍。定量PCR分析结果表明，转基因植株orca3基因和g10h基因的表达量比非转基因植株的高。结论 转基因长春花毛状根再生植株可促进抗癌生物碱的产生。]]> 1，王何瑜¹，卢 鹏¹，袁 泉¹，王桂林²，刘建军³]]> 1661true 目的建立长春花转基因毛状根再生植株快速繁育体系,获得生物碱量提高的长春花再生植株。方法研究外源植物生长调节剂对长春花毛状根愈伤组织诱导、不定芽分化、不定根分化和再生植株移栽的影响,采用HPLC法测定长春花再生植株生物碱量,并采用定量PCR技术分析目的基因的表达情况。结果转基因长春花毛状根愈伤组织诱导和不定芽诱导的最佳培养基均是MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.3 mg/L,不定根分化的最适培养基是1/2 MS+NAA 0.3 mg/L。采用炼苗的改进方法可使长春花再生植株的移栽成活率达90%。HPLC分析结果表明,长春花再生植株中长春碱、长春新碱和阿吗碱量分别比对照提高4.0、5.8、1.8倍,其中,优良单株OG30-3的长春新碱和长春碱量比对照提高7倍和10倍。定量PCR分析结果表明,转基因植株orca3基因和g10h基因的表达量比非转基因植株的高。结论转基因长春花毛状根再生植株可促进抗癌生物碱的产生。]]> 2014/12/17 16:58:05 1660true 目的合成对青蒿素具有特异识别能力的分子印迹聚合物。方法采用分子印迹技术合成了以青蒿素为模板分子,丙烯酰胺为功能单体,乙二醇二甲基丙烯酸酯为交联剂的青蒿素分子印迹聚合物。运用平衡结合试验研究了聚合物的吸附特性和选择识别能力。结果 Scatchard模型分析表明,该分子印迹聚合物在识别青蒿素分子的过程中存在两类不同的结合位点。高亲和力结合位点的离解常数K_d1=1.87 mmol/L,最大表观结合常数Q_MAX1=27.99μmol/g;低亲和力结合位点的离解常数K_d2=48.5 mmol/L,最大表观结合常数Q_MAX2=334.4μmol/g。结论结合底物的实验结果表明,青蒿素分子印迹聚合物对青蒿素具有良好的特征吸附和选择识别性能,为天然产物中高效分离纯化活性成分青蒿素提供了一种新型材料。]]> 2014/12/17 16:58:05 1659true 目的 合成对青蒿素具有特异识别能力的分子印迹聚合物。方法 采用分子印迹技术合成了以青蒿素为模板分子，丙烯酰胺为功能单体，乙二醇二甲基丙烯酸酯为交联剂的青蒿素分子印迹聚合物。运用平衡结合试验研究了聚合物的吸附特性和选择识别能力。结果 Scatchard模型分析表明，该分子印迹聚合物在识别青蒿素分子的过程中存在两类不同的结合位点。高亲和力结合位点的离解常数K_d1＝1.87 mmol/L ，最大表观结合常数Q_MAX1＝27.99 μmol/g；低亲和力结合位点的离解常数K_d2＝48.5 mmol/L，最大表观结合常数Q_MAX2＝334.4 μmol/g。结论 结合底物的实验结果表明，青蒿素分子印迹聚合物对青蒿素具有良好的特征吸附和选择识别性能，为天然产物中高效分离纯化活性成分青蒿素提供了一种新型材料。]]> 1, 2，仝海娟¹，雷福厚^{1, 2}，庞 洁¹，俸 吉¹，李 梅¹]]> 1658true 2014/12/17 16:42:22 1657true 2014/12/17 16:42:22 1656true 2014/12/17 16:42:22 1655true 2014/12/17 16:42:22 1654true 目的 构建千里光全长cDNA文库，以期研究千里光的功能基因组学信息，为克隆药理学性状相关的功能基因提供数据资源。方法 Trizol法提取千里光叶片总RNA，通过SMART（switching mechanism at 5’ end of RNA transcript）构建全长cDNA文库，随机挑取600个单克隆测序分析文库滴度、全长率及冗余率，得到的EST序列进行Blast分析（NR、NT、Swiss-Prot、KEGG）及COG功能分类。结果 文库的库容为4.3×10⁶ cfu/mL，插入片段大小平均1.7 kb，文库重组率96.35%，全长率58.24%，冗余率10.88%；获得524条全长EST序列，含有467条独立基因（unigenes），其中5条序列与千里光次生代谢产物的合成、运输与代谢有关。结论 经检测，SMART技术成功构建了千里光全长cDNA文库，该文库可用于千里光功能基因组鉴定、新基因筛选及次生代谢产物生物合成的表达调控研究。]]> 1653true 目的 构建千里光全长cDNA文库,以期研究千里光的功能基因组学信息,为克隆药理学性状相关的功能基因提供数据资源。方法 Trizol法提取千里光叶片总RNA,通过SMART(switching mechanism at 5'end of RNA transcript)构建全长cDNA文库,随机挑取600个单克隆测序分析文库滴度、全长率及冗余率,得到的EST序列进行Blast分析(NR、NT、Swiss-Prot、KEGG)及COG功能分类。结果 文库的库容为4.3×106cfu/mL,插入片段大小平均1.7 kb,文库重组率96.35%,全长率58.24%,冗余率10.88%;获得524条全长EST序列,含有467条独立基因(unigenes),其中5条序列与千里光次生代谢产物的合成、运输与代谢有关。结论 经检测,SMART技术成功构建了千里光全长cDNA文库,该文库可用于千里光功能基因组鉴定、新基因筛选及次生代谢产物生物合成的表达调控研究。]]> 2014/12/17 16:42:21 1652true 目的 建立淫羊藿植物PCR-RFLP标记系统关系图。方法 对主要来自于四川、贵州的17种淫羊藿植物进行了系统的PCR-RFLP标记。结果 在8个引物的PCR-RFLP标记分析中,有7个标记能得到1条清晰的谱带;利用12种限制性内切酶对7个标记的扩增产物消化后,在84种引物/酶组合中,共检测到129条酶切片段,其中44条具有多态性;遗传相似系数为0.550～0.988,平均为0.821。结论 该属植物遗传关系与其地理分布关系密切。]]> 2014/12/17 16:42:21 1651true 目的 建立淫羊藿植物PCR-RFLP标记系统关系图。方法 对主要来自于四川、贵州的17种淫羊藿植物进行了系统的PCR-RFLP标记。结果 在8个引物的PCR-RFLP标记分析中，有7个标记能得到1条清晰的谱带；利用12种限制性内切酶对7个标记的扩增产物消化后，在84种引物/酶组合中，共检测到129条酶切片段，其中44条具有多态性；遗传相似系数为0.550～0.988，平均为0.821。结论 该属植物遗传关系与其地理分布关系密切。]]> 1, 2，李明军³，陈庆富¹]]> 1650true 目的 对羌活及其混伪品进行分子鉴定，以确保该药材的质量以及临床疗效。方法 利用PCR测序法，对样品进行核基因ITS2片段扩增并双向测序，所得序列经CodonCode Aligner拼接后，用软件MEGA 4.0进行相关数据分析，并构建邻接（NJ）树。利用已建立的ITS2数据库及其网站预测ITS2二级结构。结果 羌活与宽叶羌活ITS2序列长度均为228 bp，二者种内平均K2P（Kimura-2-parameter）遗传距离均远远小于其与混伪品的种间平均K2P遗传距离；由所构建的系统聚类树图可以看出，羌活与宽叶羌活均表现出了单系性，而同时又与其他混伪品明显分开；比较ITS2二级结构发现，羌活基原植物与其混伪品在4个螺旋区的茎环数目、大小、位置以及螺旋发出时的角度均有明显差异。结论 ITS2序列作为DNA条形码可以方便快捷地鉴别羌活及其混伪品，为其种质资源鉴定及临床安全用药提供了重要分子依据。]]> 1，陈士林²，姚 辉²，宋经元²]]> 1649true 目的 对羌活及其混伪品进行分子鉴定,以确保该药材的质量以及临床疗效。方法 利用PCR测序法,对样品进行核基因ITS2片段扩增并双向测序,所得序列经CodonCode Aligner拼接后,用软件MEGA4.0进行相关数据分析,并构建邻接(NJ)树。利用已建立的ITS2数据库及其网站预测ITS2二级结构。结果 羌活与宽叶羌活ITS2序列长度均为228 bp,二者种内平均K2P(Kimura-2-parameter)遗传距离均远远小于其与混伪品的种间平均K2P遗传距离;由所构建的系统聚类树图可以看出,羌活与宽叶羌活均表现出了单系性,而同时又与其他混伪品明显分开;比较ITS2二级结构发现,羌活基原植物与其混伪品在4个螺旋区的茎环数目、大小、位置以及螺旋发出时的角度均有明显差异。结论 ITS2序列作为DNA条形码可以方便快捷地鉴别羌活及其混伪品,为其种质资源鉴定及临床安全用药提供了重要分子依据。]]> 2014/12/17 16:42:21 1648true 目的 研究三叶木通表观遗传多样性,建立并优化三叶木通甲基化敏感扩增多态性(methylation sensitive amplifiedpolymorphism,MSAP)反应体系。方法 以三叶木通叶片为材料,利用正交试验建立三叶木通MSAP的预扩增和选择性扩增的最佳反应体系。结果 建立的MSAP最佳反应体系为酶切反应:HpaII/MspI 10 U,EcoR I 10 U;预扩增反应:总体积20μL,连接产物2μL,E00、HM00各125 ng,dNTPs 0.312 5 mmol/L,Mg2+1.875 mmol/L,Taq DNA聚合酶2 U;选择性扩增反应:总体积20μL,稀释200倍的预扩增产物5μL,引物E-ACT、HM-CAT各50 ng,dNTPs 0.250 mmol/L,Mg2+1.250mmol/L,Taq DNA酶1 U。利用优化的体系,最终从MSAP的80对引物中筛选出有效引物6对。结论 建立的MSAP反应体系可用于后续三叶木通DNA甲基化的相关研究。]]> 2014/12/17 16:42:21 1647true 目的 研究三叶木通表观遗传多样性，建立并优化三叶木通甲基化敏感扩增多态性（methylation sensitive amplified polymorphism，MSAP）反应体系。方法 以三叶木通叶片为材料，利用正交试验建立三叶木通MSAP的预扩增和选择性扩增的最佳反应体系。结果 建立的MSAP最佳反应体系为酶切反应：HpaII/MspI 10 U，EcoR I 10 U；预扩增反应：总体积20 μL，连接产物2 μL，E00、HM00各125 ng，dNTPs 0.312 5 mmol/L，Mg^2＋ 1.875 mmol/L，Taq DNA聚合酶2 U；选择性扩增反应：总体积20 μL，稀释200倍的预扩增产物5 μL，引物E-ACT、HM-CAT各50 ng，dNTPs 0.250 mmol/L，Mg^2＋ 1.250 mmol/L，Taq DNA酶1 U。利用优化的体系，最终从MSAP的80对引物中筛选出有效引物6对。结论 建立的MSAP反应体系可用于后续三叶木通DNA甲基化的相关研究。]]> 1，张 铮^{1, 2, 3﹡}，周 婷¹，曹向然¹，陈阳洋¹，王喆之^{1, 2, 3}]]> 1646true 目的 比较三叶青松散型和致密型愈伤组织悬浮培养细胞生长及其次生代谢产物黄酮的积累情况。方法 将三叶青叶诱导的愈伤组织在不同外源植物激素种类和配比的培养基上多次继代培养，筛选获得松散型和致密型愈伤组织，分别建立相应悬浮细胞体系，研究了两种悬浮培养细胞生长和总黄酮积累的动态。结果 三叶青松散型愈伤组织悬浮培养的继代周期为8 d，增加质量倍数最高达到3.68倍，黄酮积累的最大值11.7 mg/g，较最初接种时的浓度增加34.5%，该悬浮系继代4～5次后生命力衰退且褐化加重；而致密型愈伤组织悬浮培养的继代周期为20 d，增加质量倍数最高达到2.65倍，黄酮积累的最大值40.9 mg/g，较最初接种时的浓度增加212.2%，该悬浮系继代多次细胞无明显变化。结论 与松散型愈伤组织悬浮培养相比，致密型愈伤组织悬浮培养更有利于继代培养和次生代谢产物的积累。]]> 1，张 剑²，何军邀¹，范三微¹，凌庆枝¹]]> 1645true 目的 比较三叶青松散型和致密型愈伤组织悬浮培养细胞生长及其次生代谢产物黄酮的积累情况。方法 将三叶青叶诱导的愈伤组织在不同外源植物激素种类和配比的培养基上多次继代培养,筛选获得松散型和致密型愈伤组织,分别建立相应悬浮细胞体系,研究了两种悬浮培养细胞生长和总黄酮积累的动态。结果 三叶青松散型愈伤组织悬浮培养的继代周期为8 d,增加质量倍数最高达到3.68倍,黄酮积累的最大值11.7 mg/g,较最初接种时的浓度增加34.5%,该悬浮系继代4～5次后生命力衰退且褐化加重;而致密型愈伤组织悬浮培养的继代周期为20 d,增加质量倍数最高达到2.65倍,黄酮积累的最大值40.9 mg/g,较最初接种时的浓度增加212.2%,该悬浮系继代多次细胞无明显变化。结论 与松散型愈伤组织悬浮培养相比,致密型愈伤组织悬浮培养更有利于继代培养和次生代谢产物的积累。]]> 2014/12/17 16:42:21 1644true 目的 研究川泽泻质量及其土壤理化性质,分析二者的相关性,为提高川泽泻质量提供依据。方法 采用RP-HPLC测定川泽泻中23-乙酰泽泻醇B的量;参照《中国药典》2010年版的测定方法测定川泽泻水分、醇溶性浸出物、总灰分和酸不溶性灰分量;采用常规方法测定泽泻种植区土壤理化性质。结果 除醇溶性浸出物外,川泽泻含水量、23-乙酰泽泻醇B、总灰分和酸不溶性灰分均符合《中国药典》2010年版的规定;总灰分与醇溶性浸出物显著负相关,相关系数为0.407,与酸不溶性灰分显著正相关,相关系数为0.466;各产地泽泻速效钾量缺乏严重;土壤有机质与碱解氮,全磷与速效磷存在极显著正相关,相关系数分别达到0.555、0.806,全钾与速效钾显著正相关,相关系数为0.433;土壤各理化指标内某一因素对泽泻相应指标的影响受其他土壤因子的影响较大;土壤全钾量对川泽泻各成分量的影响最大,其次为全氮量。结论 各地之间川泽泻质量较优且稳定,可作为制定川泽泻质量标准的依据;川泽泻种植时应选择土壤全钾量、速效钾量较高的地块,以保证川泽泻质量。]]> 2014/12/17 16:42:22 1643true 目的 研究川泽泻质量及其土壤理化性质，分析二者的相关性，为提高川泽泻质量提供依据。方法 采用RP-HPLC测定川泽泻中23-乙酰泽泻醇B的量；参照《中国药典》2010年版的测定方法测定川泽泻水分、醇溶性浸出物、总灰分和酸不溶性灰分量；采用常规方法测定泽泻种植区土壤理化性质。结果 除醇溶性浸出物外，川泽泻含水量、23-乙酰泽泻醇B、总灰分和酸不溶性灰分均符合《中国药典》2010年版的规定；总灰分与醇溶性浸出物显著负相关，相关系数为?0.407，与酸不溶性灰分显著正相关，相关系数为0.466；各产地泽泻速效钾量缺乏严重；土壤有机质与碱解氮，全磷与速效磷存在极显著正相关，相关系数分别达到0.555、0.806，全钾与速效钾显著正相关，相关系数为0.433；土壤各理化指标内某一因素对泽泻相应指标的影响受其他土壤因子的影响较大；土壤全钾量对川泽泻各成分量的影响最大，其次为全氮量。结论 各地之间川泽泻质量较优且稳定，可作为制定川泽泻质量标准的依据；川泽泻种植时应选择土壤全钾量、速效钾量较高的地块，以保证川泽泻质量。]]> 1642true 目的 研究百蕊草种子萌发的适宜条件。方法 用光照培养箱人工培养的方法研究百蕊草种子萌发适宜条件。结果20～25 ℃的黑暗环境中百蕊草种子萌发率达72.5%～75%，且幼苗生长健壮；其寄主白茅根系分泌物可促进百蕊草种子萌发，萌发率可达76.67%。结论 百蕊草种子萌发的适宜条件为20～25 ℃的黑暗环境，寄主白茅根系分泌物可促进百蕊草种子萌发，提高发芽率。]]> 1, 2，郭巧生¹]]> 1641true 目的 研究百蕊草种子萌发的适宜条件。方法 用光照培养箱人工培养的方法研究百蕊草种子萌发适宜条件。结果 20～25℃的黑暗环境中百蕊草种子萌发率达72.50%～75.00%,且幼苗生长健壮;其寄主白茅根系分泌物可促进百蕊草种子萌发,萌发率可达76.67%。结论 百蕊草种子萌发的适宜条件为20～25℃的黑暗环境,寄主白茅根系分泌物可促进百蕊草种子萌发,提高发芽率。]]> 2014/12/17 16:42:22 1640true 2014/12/17 16:42:22 1639true 目的 通过测定11种石豆兰属植物的ITS序列, 为石豆兰属植物分子鉴定和遗传多样性研究提供依据。 方法 利用PCR法从叶片基因组DNA中克隆ITS序列, 并借助生物信息学软件对其进行分析。 结果 11种石豆兰属植物的ITS全长为633～645bp, 5.8S序列长度162bp, ITS1和ITS2序列变异位点丰富, 共168个, 其中信息位点95个, 序列存在大量的转换、颠换和缺失; 5.8S序列较为保守, 仅含6个变异位点和2个信息位点; 11种石豆兰属植物的遗传距离为0.0022～0.2120, 其中齿瓣石豆兰与斑唇石豆兰之间的遗传距离最小, 亲缘关系最为接近。 序列已上传至NCBI, 登录号为JN619409～JN619419。 结论 获得了11种石豆兰属植物的rDNA ITS序列, 为石豆兰属植物分子鉴定和遗传多样性研究奠定了基础。]]> 2014/12/17 16:25:37 1638true 目的 通过测定11种石豆兰属植物的ITS序列，为石豆兰属植物分子鉴定和遗传多样性研究提供依据。方法 利用PCR法从叶片基因组DNA中克隆ITS序列，并借助生物信息学软件对其进行分析。结果 11种石豆兰属植物的ITS全长为633～645 bp，5.8 S序列长度162 bp，ITS1和ITS2序列变异位点丰富，共168个，其中信息位点95个，序列存在大量的转换、颠换和缺失；5.8 S序列较为保守，仅含6个变异位点和2个信息位点；11种石豆兰属植物的遗传距离为0.002 2～0.212 0，其中齿瓣石豆兰与斑唇石豆兰之间的遗传距离最小，亲缘关系最为接近。序列已上传至NCBI，登录号为JN619409～JN619419。结论 获得了11种石豆兰属植物的rDNA ITS序列，为石豆兰属植物分子鉴定和遗传多样性研究奠定了基础。]]> 1637true 目的 研究低温处理对黄花蒿中青蒿素及其他萜类合成通路的影响。方法 以4 ℃为胁迫条件，利用高效液相色谱法测定青蒿素量；硫酸钛沉淀法和N, N-二甲基-对-亚硝基苯胺漂白反应分别检测黄花蒿叶片过氧化氢（H²O²）和单线态氧（¹O²）量；紫外分光光度法检测过氧化氢酶（CAT）活性；实时荧光定量PCR技术定量分析青蒿素合成途径及竞争途径关键酶基因的表达。结果 4 ℃处理4 h后黄花蒿叶片中¹O²和H²O²量升高，并伴随着青蒿素量和CAT活性逐步提高，4、24、48 h后青蒿素量分别提高20%、65%、80%；4 ℃处理24 h后，青蒿素合成相关基因（HMGR、FPS、ADS、CYP71AV1、CPR和DBR2）的表达普遍上调，其中ADS基因的表达提高16倍；而青蒿素合成竞争途径酶（β-石竹烯合酶）基因（CS）表达则下调近20倍。结论 低温刺激可能通过产生高浓度活性氧（ROS）促进青蒿素合成前体转化，上调青蒿素合成相关基因表达并抑制竞争途径基因表达等途径促进青蒿素合成。]]> 1636true 目的 研究低温处理对黄花蒿中青蒿素及其他萜类合成通路的影响。 方法 以4℃为胁迫条件, 利用高效液相色谱法测定青蒿素量; 硫酸钛沉淀法和N, N-二甲基-对-亚硝基苯胺漂白反应分别检测黄花蒿叶片过氧化氢(H₂O₂)和单线态氧(¹O₂)量; 紫外分光光度法检测过氧化氢酶(CAT)活性; 实时荧光定量PCR技术定量分析青蒿素合成途径及竞争途径关键酶基因的表达。 结果 4℃处理4h后黄花蒿叶片中¹O₂和H₂O₂量升高, 并伴随着青蒿素量和CAT活性逐步提高, 4、24、48 h后青蒿素量分别提高20%、65%、80%;4℃处理24h后, 青蒿素合成相关基因(HMGR、FPS、ADS、CYP71AV1、CPR和DBR2)的表达普遍上调, 其中ADS基因的表达提高16倍;而青蒿素合成竞争途径酶(β-石竹烯合酶)基因(CS)表达则下调近20倍。 结论 低温刺激可能通过产生高浓度活性氧(ROS)促进青蒿素合成前体转化, 上调青蒿素合成相关基因表达并抑制竞争途径基因表达等途径促进青蒿素合成。]]> 2014/12/17 16:25:37 1635true 目的 探讨不同光照强度下铁皮石斛类原球茎(PLBs)生物量、主要药用成分多糖和生物碱的动态变化规律。 方法 以MS为基本培养基, 采用光照强度单因素试验设计, 烘干法测定生物量, 苯酚-硫酸法测定多糖量, 酸性染料比色法测定生物碱量, 数据采用SPSS 16.0软件包分析。 结果 铁皮石斛PLBs生物量在光照强度≥2000lx下培养40～50d均较高, 生产上需要PLBs维持旺盛的分裂, 获得最高生物量的培养条件为光照强度2000lx条件下培养40d, 生物量达到0.74g; 多糖量以光照强度2000lx下培养30d最高, 达到16.88%;生物碱量以光照强度500lx下培养30d最佳, 达到0.0280%。 结论 不同的光照强度和培养时间对铁皮石斛PLBs的生长、多糖和生物碱的变化有显著影响, 适宜的光照强度和培养时间对铁皮石斛主要药用成分的生产具有重要的实践意义。]]> 2014/12/17 16:25:38 1634true 目的 探讨不同光照强度下铁皮石斛类原球茎（PLBs）生物量、主要药用成分多糖和生物碱的动态变化规律。方法 以MS为基本培养基，采用光照强度单因素试验设计，烘干法测定生物量，苯酚-硫酸法测定多糖量，酸性染料比色法测定生物碱量，数据采用SPSS 16.0软件包分析。结果 铁皮石斛PLBs生物量在光照强度≥2 000 lx下培养40～50 d均较高，生产上需要PLBs维持旺盛的分裂，获得最高生物量的培养条件为光照强度2 000 lx条件下培养40 d，生物量达到0.74 g；多糖量以光照强度2 000 lx下培养30 d最高，达到16.88%；生物碱量以光照强度500 lx下培养30 d最佳，达到0.028 0%。结论 不同的光照强度和培养时间对铁皮石斛PLBs的生长、多糖和生物碱的变化有显著影响，适宜的光照强度和培养时间对铁皮石斛主要药用成分的生产具有重要的实践意义。]]> 1633true 目的 研究波棱瓜愈伤组织诱导、分化及生根的条件，探讨波棱瓜快速繁殖新途径，为波棱瓜组织培养与离体植株再生奠定基础。方法 以波棱瓜幼嫩茎段和叶片为材料，比较不同外植体、基本培养基及植物生长调节剂对波棱瓜愈伤组织诱导、分化及生根的影响。结果 幼嫩茎段作为外植体时，其出愈率较叶片高，愈伤量大；MS基本培养基能够产生明显的愈伤组织，出愈率较高；幼嫩茎段愈伤组织诱导适宜的培养基为MS＋6-BA 2 mg/L＋NAA 0.5 mg/L，出愈率达93.3%。愈伤组织的最佳分化培养基为MS＋6-BA 2 mg/L＋NAA 0.1 mg/L＋KT 3.0 mg/L，分化率达87.2%。生根培养的适宜培养基为1/2 MS＋NAA 1.0 mg/L，生根率达95%。结论 波棱瓜幼嫩茎段在适宜的培养基中可通过愈伤组织途径分化不定芽，且极易生根，能够得到正常生长发育的再生植株。]]> 1，臧建成²，兰小中³，嘎 珍³]]> 1632true 目的 研究波棱瓜愈伤组织诱导、分化及生根的条件, 探讨波棱瓜快速繁殖新途径, 为波棱瓜组织培养与离体植株再生奠定基础。 方法 以波棱瓜幼嫩茎段和叶片为材料, 比较不同外植体、基本培养基及植物生长调节剂对波棱瓜愈伤组织诱导、分化及生根的影响。 结果 幼嫩茎段作为外植体时, 其出愈率较叶片高, 愈伤量大; MS基本培养基能够产生明显的愈伤组织, 出愈率较高; 幼嫩茎段愈伤组织诱导适宜的培养基为MS+6-BA2mg/L+NAA0.5mg/L, 出愈率达93.3%。愈伤组织的最佳分化培养基为MS+6-BA2 mg/L+NAA0.1mg/L+KT3.0mg/L, 分化率达87.2%。生根培养的适宜培养基为1/2MS+NAA 1.0 mg/L, 生根率达95%。 结论 波棱瓜幼嫩茎段在适宜的培养基中可通过愈伤组织途径分化不定芽, 且极易生根, 能够得到正常生长发育的再生植株。]]> 2014/12/17 16:25:38 1631true 目的 建立客观评价没药药材质量的分析方法, 对收集的不同批次没药药材的质量进行分析与综合评价, 为其质量控制提供参考。 方法 采用GC-MS法对没药中挥发性成分进行分析与鉴定;采用HPLC-PDA法分析没药中非挥发性成分;并采用相似度软件和SPSS 16.0软件进行相似度评价和主成分分析。 结果 GC-MS法分析鉴定了没药中28个化学成分, 建立了不同批次没药药材非挥发性成分的HPLC特征图谱;两类指纹图谱相似度分析结果均表明, 收集于不同批次的没药药材相似性较差, 其中收集于海南和广东的相似度较高; 主成分分析结果表明倍半萜烯类成分、有机酸酯类成分和二萜酸类成分对药材品质起到主导作用。 综合分析提示, 收集于海南药材公司的没药药材质量较佳。 结论 所建立的质量分析方法为没药质量控制提供了科学依据。]]> 2014/12/17 16:25:38 1630true 目的 建立客观评价没药药材质量的分析方法，对收集的不同批次没药药材的质量进行分析与综合评价，为其质量控制提供参考。方法 采用GC-MS法对没药中挥发性成分进行分析与鉴定；采用HPLC-PDA法分析没药中非挥发性成分；并采用相似度软件和SPSS 16.0软件进行相似度评价和主成分分析。结果 GC-MS法分析鉴定了没药中28个化学成分，建立了不同批次没药药材非挥发性成分的HPLC特征图谱；两类指纹图谱相似度分析结果均表明，收集于不同批次的没药药材相似性较差，其中收集于海南和广东的相似度较高；主成分分析结果表明倍半萜烯类成分、有机酸酯类成分和二萜酸类成分对药材品质起到主导作用。综合分析提示，收集于海南药材公司的没药药材质量较佳。结论 所建立的质量分析方法为没药质量控制提供了科学依据。]]> 1629true 目的 研究温度对一年生和两年生金钗石斛生长和生理代谢的影响。方法 设置4、15、25、35、45 ℃ 5个温度梯度，人工气候箱培养，观察一年生和两年生金钗石斛生长及生理代谢指标的变化情况。结果 25 ℃培养下，金钗石斛株高增长量最大，其叶片和根系中丙二醛、可溶性糖和游离脯氨酸量均最低，且随处理时间的延长并无显著变化。结论 25 ℃是一年生和两年生金钗石斛生长的最佳温度。]]> 1628true 目的 研究温度对一年生和两年生金钗石斛生长和生理代谢的影响。 方法 设置4、15、25、35、45℃5个温度梯度, 人工气候箱培养, 观察一年生和两年生金钗石斛生长及生理代谢指标的变化情况。 结果 25℃培养下, 金钗石斛株高增长量最大, 其叶片和根系中丙二醛、可溶性糖和游离脯氨酸量均最低, 且随处理时间的延长并无显著变化。 结论 25℃是一年生和两年生金钗石斛生长的最佳温度。]]> 2014/12/17 16:25:38 1627true 目的 建立三倍体丹参培育及其可持续利用的方法。 方法 应用"基因组多倍化与杂交相结合"的方法, 将二倍体白花丹参人工诱变成同源四倍体(4x=32), 然后与栽培或野生二倍体(2x=16)丹参进行杂交, 转育成三倍体(3x=24)丹参。 结果 4x♀×2x♂或2x♀×4x♂均能获得三倍体丹参, 三倍体丹参具有多倍体和杂交种双重优势, 根条数增加94.23%, 根部鲜质量增加215.33%, 主要药物成分隐丹参酮、丹参酮I、丹参酮IIA、丹酚酸B均达到或超过《中国药典》2010年版规定的水平。三倍体丹参杂交一代通过无性繁殖成为永久杂种, 长期保持不变。 结论 三倍体丹参的培育是我国丹参种质资源遗传改良、新品种选育和杂种优势可持续利用的重要途径。]]> 2014/12/17 16:25:38 1626true 目的 建立三倍体丹参培育及其可持续利用的方法。方法 应用“基因组多倍化与杂交相结合”的方法，将二倍体白花丹参人工诱变成同源四倍体（4x＝32），然后与栽培或野生二倍体（2x＝16）丹参进行杂交，转育成三倍体（3x＝24）丹参。结果 4x♀×2x♂或2x♀×4x♂均能获得三倍体丹参，三倍体丹参具有多倍体和杂交种双重优势，根条数增加94.23%，根部鲜质量增加215.33%，主要药物成分隐丹参酮、丹参酮I、丹参酮II^A、丹酚酸B均达到或超过《中国药典》2010年版规定的水平。三倍体丹参杂交一代通过无性繁殖成为永久杂种，长期保持不变。结论 三倍体丹参的培育是我国丹参种质资源遗传改良、新品种选育和杂种优势可持续利用的重要途径。]]> 1625true 目的 对产自新疆的西红花Crocus sativus L. 质量进行评价。方法 采用《中国药典》2010年版中西红花浸出物、吸光度、总苷量、重金属、农药残留的检测方法，对新疆产的西红花中的各指标进行检测。色谱柱C¹⁸柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相为甲醇-水（45∶55）；体积流量1.0 mL/min；检测波长440 nm；进样量10 μL；柱温为室温。结果 浸出物质量分数为67.8%，吸光度（A）值为0.78，含西红花苷-I为8.02%，含西红花苷-II为5.59%，砷、铅、汞、镉、六氯环己烷、双对氯苯基三氯乙烷（DDT）分别为0.480、0.762、0.028、0.163、0.013、0.027 mg/kg。结论 新疆产的西红花各项指标均符合《中国药典》中西红花的质量标准和药用植物及制剂进出口绿色行业标准的规定，西红花在新疆的无公害种植获得成功。]]> 1, 3，陶 宁²]]> 1624true 目的 对产自新疆的西红花Crocus sativus L.质量进行评价。 方法 采用《中国药典》2010年版中西红花浸出物、吸光度、总苷量、重金属、农药残留的检测方法, 对新疆产的西红花中的各指标进行检测。 色谱柱C18柱(250mm×4.6mm, 5μm);流动相为甲醇-水(45∶55); 体积流量1.0mL/min;检测波长440nm; 进样量10μL; 柱温为室温。 结果 浸出物质量分数为67.8%, 吸光度(A)值为0.78, 含西红花苷-I为8.02%, 含西红花苷-II为5.59%, 砷、铅、汞、镉、六氯环己烷、双对氯苯基三氯乙烷(DDT)分别为0.480、0.762、0.028、0.163、0.013、0.027 mg/kg。 结论 新疆产的西红花各项指标均符合《中国药典》中西红花的质量标准和药用植物及制剂进出口绿色行业标准的规定, 西红花在新疆的无公害种植获得成功。]]> 2014/12/17 16:25:38 1623true 目的　从大蒜鳞茎中克隆蒜氨酸酶基因，构建蒜氨酸酶真核表达载体，并在毕赤酵母系统中表达，进一步探讨重组蒜氨酸酶的生物学活性。方法　利用RT－PCR方法克隆大蒜鳞茎蒜氨酸酶基因，通过pPIczαC载体构建pPIczαC－蒜氨酸酶真核表达质粒，电转化法导入毕赤酵母X－33，筛选阳性克隆，经甲醇诱导后取表达上清进行SDS－PAGE和Western blotting分析。利用丙酮酸法检测重组蒜氨酸酶和提取的天然蒜氨酸酶的活性，Lowry法测2种蒜氨酸酶蛋白质量，通过比活力比较2种酶活性大小。结果　从大蒜内克隆出蒜氨酸酶基因，大小为1 500 bp，重组蒜氨酸酶相对分子质量约为5．5×10⁴，存在于毕赤酵母表达上清液中。重组蒜氨酸酶比活力为(82．09±3．89)U／mg，天然蒜氨酸酶比活力为(176．49±5．06)U／mg。结论　蒜氨酸酶基因可以在毕赤酵母表达系统中获得表达，重组蒜氨酸酶具有酶活性，但是其活性低于提取的天然蒜氨酸酶。]]> 2014/12/17 16:10:52 1622true 目的 从大蒜鳞茎中克隆蒜氨酸酶基因，构建蒜氨酸酶真核表达载体，并在毕赤酵母系统中表达，进一步探讨重组蒜氨酸酶的生物学活性。方法 利用RT-PCR方法克隆大蒜鳞茎蒜氨酸酶基因，通过pPIczαC载体构建pPIczαC-蒜氨酸酶真核表达质粒，电转化法导入毕赤酵母X-33，筛选阳性克隆，经甲醇诱导后取表达上清进行SDS-PAGE和Western blotting分析。利用丙酮酸法检测重组蒜氨酸酶和提取的天然蒜氨酸酶的活性，Lowry法测2种蒜氨酸酶蛋白质量，通过比活力比较2种酶活性大小。结果 从大蒜内克隆出蒜氨酸酶基因，大小为1 500 bp，重组蒜氨酸酶相对分子质量约为5.5×10⁴，存在于毕赤酵母表达上清液中。重组蒜氨酸酶比活力为（82.09±3.89）U/mg，天然蒜氨酸酶比活力为（176.49±5.06）U/mg。结论 蒜氨酸酶基因可以在毕赤酵母表达系统中获得表达，重组蒜氨酸酶具有酶活性，但是其活性低于提取的天然蒜氨酸酶。]]> 1621true 目的 克隆获得黄花蒿MEP途径中必需关键酶——羟甲基丁烯基-4-磷酸合成酶基因（HDS），并进行生物信息学分析和功能互补分析研究。方法 对已知的其他种子植物HDS基因的核苷酸序列进行多重序列比对，选取保守区域设计简并引物，利用同源扩增和cDNA末端快速扩增技术从黄花蒿中获得目的基因；利用BLAST进行序列比对，ORF Finder寻找开放阅读框，并用MEGA3.0中的临位相联法构建进化树。结果 得到1条长2 324 bp的HDS cDNA序列，其ORF框长1 854 bp，编码617个氨基酸残基的蛋白；生物信息学分析显示，黄花蒿HDS基因AaHDS与其他种子植物来源的HDS高度同源；功能互补分析表明，AaHDS能互补突变菌株Escherichia coli MG1655 ara＜＞HDS中缺失的HDS功能，使突变菌株恢复生长，证明AaHDS具有典型的HDS基因功能。结论 首次克隆获得黄花蒿HDS基因，为青蒿素的代谢工程研究提供相应的基础。]]> 1, 2，廖志华²，彭梅芳²]]> 1620true 目的　克隆获得黄花蒿MEP途径中必需关键酶——羟甲基丁烯基－4－磷酸合成酶基因(HDS)，并进行生物信息学分析和功能互补分析研究。方法　对已知的其他种子植物HDS基因的核苷酸序列进行多重序列比对，选取保守区域设计简并引物，利用同源扩增和cDNA末端快速扩增技术从黄花蒿中获得目的基因；利用BLAST进行序列比对，ORF Finder寻找开放阅读框，并用MEGA3．0中的临位相联法构建进化树。结果　得到1条长2 324 bp的HDS cDNA序列，其ORF框长1 854 bp，编码617个氨基酸残基的蛋白；生物信息学分析显示，黄花蒿HDS基因AaHDS与其他种子植物来源的HDS高度同源；功能互补分析表明，AaHDS能互补突变菌株Escherichia coli MG1655 ara＜＞HDS中缺失的HDS功能，使突变菌株恢复生长，证明AaHDS具有典型的HDS基因功能。结论　首次克隆获得黄花蒿HDS基因，为青蒿素的代谢工程研究提供相应的基础。]]> 2014/12/17 16:10:52 1619true 目的　对刺五加Eleutherococcus senticosus GAPDH基因进行克隆及序列分析，使其成为可用的内参照基因。方法　采用改良的异硫氰酸胍法提取刺五加总RNA，运用RT－PCR法克隆GAPDH基因的部分序列，并以其为内参照基因进行半定量PCR。结果　克隆了长度为627 bp的刺五加GAPDH基因，推测其编码209个氨基酸，与三七、人参、拟南芥的GAPDH氨基酸序列同源性分别为97％、93％、93％，核苷酸同源性分别为94％、86％、84％。其作为内参照基因的半定量PCR具有良好的扩增效果和重现性。结论　首次分离并克隆了刺五加GAPDH cDNA，证实该序列可以作为基因表达分析的内参照基因，为刺五加苷生物合成中关键酶的表达分析及调控机制研究奠定基础。]]> 2014/12/17 16:10:52 1618true 目的 对刺五加Eleutherococcus senticosus GAPDH基因进行克隆及序列分析，使其成为可用的内参照基因。方法 采用改良的异硫氰酸胍法提取刺五加总RNA，运用RT-PCR法克隆GAPDH基因的部分序列，并以其为内参照基因进行半定量PCR。结果 克隆了长度为627 bp的刺五加GAPDH基因，推测其编码209个氨基酸，与三七、人参、拟南芥的GAPDH氨基酸序列同源性分别为97%、93%、93%，核苷酸同源性分别为94%、86%、84%。其作为内参照基因的半定量PCR具有良好的扩增效果和重现性。结论 首次分离并克隆了刺五加GAPDH cDNA，证实该序列可以作为基因表达分析的内参照基因，为刺五加苷生物合成中关键酶的表达分析及调控机制研究奠定基础。]]> 1617true 目的 对分布于我国30个居群的叶下珠进行遗传多样性分析。方法 采用ISSR分子标记技术，研究来自我国重庆、陕西、河南、云南、广西、广东、浙江、贵州、福建、海南省区共30个叶下珠居群的遗传多样性。结果 从60个ISSR引物中筛选出24个用于扩增，共扩增得到264条条带，其中共有条带19条，多样性条带245条，多态位点百分率（PPB）为92.80%，遗传相似性系数（GS）值在0.579 5～0.916 7，多态性较高。UPGMA聚类结果显示我国叶下珠居群大致可以分为3支，即内陆分支、沿海分支及位于云南省区的过渡分支；个别居群呈现明显的居群特异性。结论 叶下珠种质资源遗传多样性较高。]]> 1616true 目的　对分布于我国30个居群的叶下珠进行遗传多样性分析。方法　采用ISSR分子标记技术，研究来自我国重庆、陕西、河南、云南、广西、广东、浙江、贵州、福建、海南省区共30个叶下珠居群的遗传多样性。结果　从60个ISSR引物中筛选出24个用于扩增，共扩增得到264条条带，其中共有条带19条，多样性条带245条，多态位点百分率(PPB)为92．80％，遗传相似性系数(GS)值在0．579 5～0．916 7，多态性较高。UPGMA聚类结果显示我国叶下珠居群大致可以分为3支，即内陆分支、沿海分支及位于云南省区的过渡分支；个别居群呈现明显的居群特异性。结论　叶下珠种质资源遗传多样性较高。]]> 2014/12/17 16:10:52 1615true 目的　探讨干旱胁迫对草珊瑚叶绿素荧光特性及能量分配的影响，找到延缓干旱胁迫的方法，为抗旱栽培提供理论依据。方法　考察15％PEG－6000模拟干旱胁迫条件下，经过不同浓度5－氨基乙酰丙酸(ALA)和不同时间处理后草珊瑚植株光合色素量、叶绿素荧光参数及能量参数等生理指标的变化。结果　外源ALA显著提高了叶绿素a、叶绿素b、总叶绿素和类胡萝卜素的量，提高了最大荧光(Fm)、最大光化学效率(Fv／Fm)、光系统PSII潜在活性(Fv／Fo)、PSII有效光化学效率(Fv′／Fm′)、PSII实际光化学效率(ΦPSII)、光化学淬灭系数(qP)、电子传递率(ETR)和光化学速率(PCR)的水平，有效地降低了初始荧光(Fo)，非光化学淬灭系数(NPQ)和热耗散速率(HDR)，经过ALA处理后的光化学反应能量(P)所占比例显著升高，天线色素热耗散能量(D)和非光化学耗散能量(E)则表现出相反的趋势，并且P成为能量利用的主要途径，ALA促进了能量合理的再分配。结论　100 mg／L的外源ALA能够通过减少过剩激发能的耗散，提高光合电子传递效率，有效地缓解干旱胁迫对草珊瑚叶片PSII的伤害，提高植株的抗旱能力。]]> 2014/12/17 16:10:53 1614true 目的 探讨干旱胁迫对草珊瑚叶绿素荧光特性及能量分配的影响，找到延缓干旱胁迫的方法，为抗旱栽培提供理论依据。方法 考察15% PEG-6000模拟干旱胁迫条件下，经过不同浓度5-氨基乙酰丙酸（ALA）和不同时间处理后草珊瑚植株光合色素量、叶绿素荧光参数及能量参数等生理指标的变化。结果 外源ALA显著提高了叶绿素a、叶绿素b、总叶绿素和类胡萝卜素的量，提高了最大荧光（Fm）、最大光化学效率（Fv/Fm）、光系统PSII潜在活性（Fv/Fo）、PSII有效光化学效率（Fv′/Fm′）、PSII实际光化学效率（ΦPSII）、光化学淬灭系数（qP）、电子传递率（ETR）和光化学速率（PCR）的水平，有效地降低了初始荧光（Fo），非光化学淬灭系数（NPQ）和热耗散速率（HDR），经过ALA处理后的光化学反应能量（P）所占比例显著升高，天线色素热耗散能量（D）和非光化学耗散能量（E）则表现出相反的趋势，并且P成为能量利用的主要途径，ALA促进了能量合理的再分配。结论 100 mg/L的外源ALA能够通过减少过剩激发能的耗散，提高光合电子传递效率，有效地缓解干旱胁迫对草珊瑚叶片PSII的伤害，提高植株的抗旱能力。]]> 1，何 平¹，袁凤刚²，喻泽莉¹，杜丹丹¹，韦品祥¹，胡世俊³]]> 1613true 目的 研究不同理化因素对天山雪莲组培苗生长和总黄酮生物合成的影响。方法 测定不同理化因素影响下天山雪莲组培苗干质量和总黄酮量。结果 利于天山雪莲生长及黄酮积累的培养条件：MS培养基附加6-BA 0.5 mg/L，NAA 0.05 mg/L，氮源浓度40 mmol/L，NH₄⁺-NO₃^?比例为15︰25，碳源蔗糖质量浓度40 g/L，pH值 5.0～6.0，光照强度 2 500 lx，温度25 ℃。结论 各项最佳培养条件的组合总体上可以促进天山雪莲生长和总黄酮生物合成，氮源、碳源和温度对天山雪莲生长及总黄酮量的影响最为明显。]]> 1, 2，王艳芳²，张福生¹，郭顺星¹ ]]> 1612true 目的　研究不同理化因素对天山雪莲组培苗生长和总黄酮生物合成的影响。方法　测定不同理化因素影响下天山雪莲组培苗干质量和总黄酮量。结果　利于天山雪莲生长及黄酮积累的培养条件：MS培养基附加6－BA 0．5 mg／L，NAA 0．05mg／L，氮源浓度40 mmol／L，NH₄⁺－NO3_{^{?比例为15︰25，碳源蔗糖质量浓度40 g／L，pH值5．0～6．0，光照强度2 500 lx，温度25℃。结论　各项最佳培养条件的组合总体上可以促进天山雪莲生长和总黄酮生物合成，氮源、碳源和温度对天山雪莲生长及总黄酮量的影响最为明显。]]>}} 2014/12/17 16:10:53 1611true 目的　研究广西不同产地大叶钩藤药材质量并确定其最佳采收期。方法　采用HPLC法测定21批广西不同产地和其中3个产地不同采收期大叶钩藤中钩藤碱的量。色谱柱为Gemini C₁₈柱(250 mm×4．6 mm，5μm)，流动相为甲醇－水(0．002mol／L三乙胺，pH 7．5)(64∶36)，体积流量1．0 mL／min，检测波长254 nm。结果　广西不同产地21批大叶钩藤药材钩藤碱量均较高，但产地间差异较大；不同采收期大叶钩藤中钩藤碱的动态积累略有差异。结论　广西不同产地大叶钩藤药材质量均较好，但质量随产地不同而异；大叶钩藤药材一年四季均可采收。]]> 2014/12/17 16:10:53 1610true 目的 研究广西不同产地大叶钩藤药材质量并确定其最佳采收期。方法 采用HPLC法测定21批广西不同产地和其中3个产地不同采收期大叶钩藤中钩藤碱的量。色谱柱为 Gemini C₁₈柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），流动相为甲醇-水（0.002 mol/L三乙胺，pH 7.5）（64∶36），体积流量1.0 mL/min，检测波长254 nm。结果 广西不同产地21批大叶钩藤药材钩藤碱量均较高，但产地间差异较大；不同采收期大叶钩藤中钩藤碱的动态积累略有差异。结论 广西不同产地大叶钩藤药材质量均较好，但质量随产地不同而异；大叶钩藤药材一年四季均可采收。]]> 1，覃冬杰²，张 鹏³，黄必奎⁴，陶宨平⁴，刘 婧¹]]> 1609true 2014/12/18 9:59:02 1608true 目的 对铁皮石斛的目标起始密码子（start condon targeted polymorphism，SCoT）多态性反应体系进行优化，为进一步对铁皮石斛遗传多样性的SCoT分析奠定基础。方法 以铁皮石斛的新鲜叶片为试验材料，采用控制单一变量的方法分别研究模板DNA用量、引物浓度、TaqDNA聚合酶用量、dNTPs浓度、及退火温度共5个因素对SCoT-PCR扩增结果的影响。结果 铁皮石斛SCoT 标记的20 μL优化反应体系为：DNA模板20 ng、引物浓度为30 μmol/L、Taq DNA聚合酶用量为1.0 U、dNTP浓度为100 μmol/L。适宜的PCR扩增程序为95 ℃预变性4 min；95 ℃变性50 s，56.1 ℃复性退火40 s，72 ℃延伸2 min，循环36次；72 ℃延伸5 min，4 ℃保存。1.5% 琼脂糖凝胶电泳显示扩增产物在600～2 000 bp。结论 该体系的建立为铁皮石斛种质遗传多样性分析、分子标记辅助育种等研究奠定了基础。]]> 1607true 目的 对当归肌动蛋白（Actin）基因进行克隆及序列分析。方法 根据已经克隆的植物Actin基因的保守序列设计一对简并性引物，以当归根部总RNA为模板，采用RT-PCR方法扩增Actin基因片段并连接到pMD19-T载体上，阳性克隆经PCR检测后进行测序。结果 得到一段598 bp的序列，序列分析表明，该片段编码198个氨基酸，与高等植物Actin基因核苷酸序列同源性在83%以上，与其他肌动蛋白氨基酸序列同源性达94%以上。结论 首次从当归中克隆出了Actin基因，为有效利用该基因奠定了基础。]]> 1，胡 静¹，王引权²，李 剑¹，张金林¹]]> 1606true 2014/12/18 9:59:02 1605true 2014/12/18 9:59:02 1604true 目的 研究浙江西南地区野生金银花种质资源的形态性状、有效成分及遗传特性，为金银花种质资源的开发利用及遗传育种提供依据。方法 采用形态性状调查、HPLC检测及ITS序列分析揭示野生金银花种质的特性。结果 浙江西南地区的6个野生金银花种质在形态性状上差异较小，通过ITS序列分析表明它们之间亲缘关系非常相近，能够与忍冬属其他植物明显区分。6个野生种质与栽培品种之间形态差异和有效成分量差异较大，其中有性状优良的野生种质，如产自浙江省景宁县（ZJJN1）与浙江省青田县（ZJQT）的样品，其绿原酸量分别为1.94%和2.42%，达到《中国药典》2010年版标准。结论 研究野生金银花种质的优良特性，对浙江西南地区野生金银花资源的开发及优良栽培品种的选育具有重要的现实意义。]]> 1，王庆霞²，朱云国²，戴德雄³，余 杨⁴，程 舟^{2, 4}]]> 1603true 目的 研究不同生长时期人参根中3种氧化还原同工酶的变化规律。方法 以5年生人参根为供试材料，采用聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）法得到人参根超氧化物歧化酶（SOD）同工酶、过氧化氢酶（CAT）同工酶和细胞色素氧化酶（CYT）同工酶的电泳胶片，并生成指纹图谱叠加图，对不同生长时期人参根中上述3种氧化还原同工酶图谱进行分析。结果 不同生长时期人参根中SOD同工酶和CYT同工酶的酶带条数存在明显差别，而CAT同工酶的酶带条数无明显变化，3种同工酶均具有各自的主要特征酶带。结论 SOD同工酶和CYT同工酶在人参果后参根生长期和枯萎期活性升高，CAT同工酶在人参生长发育的各个时期活性相对稳定。]]> 1602true 2014/12/18 9:59:03 1601true 2014/12/18 9:59:03 1600true 目的 探索曼陀罗种子萌发及组织培养条件的优化。方法 利用不同质量浓度GA₃及不同处理时间的曼陀罗种子，测定其发芽率和发芽势；采用正交设计法探讨不同植物激素配比及培养基对曼陀罗再生体系建立的影响。结果 种子用60 mg/L GA₃浸泡10 h后发芽率最高，达到73.33%；叶片用75%乙醇消毒15 s后用0.1% HgCl₂处理3 min时成活率最高，为70.59%；以叶片为外植体诱导出愈伤组织的最佳培养基为MS＋0.5 mg/L 6-BA＋0.1 mg/L NAA，诱导率达92.5%；丛生芽诱导的适宜培养基为MS＋2.0 mg/L 6-BA＋0.1 mg/L NAA，诱导率达到94.50%；生根为不加激素的MS培养基，15 d后根系粗壮，移栽成活率达90%以上。结论 使用GA₃促使曼陀罗种子快速萌发，用“两步法”建立了曼陀罗高效无菌再生体系。]]> ]]> 1599true 目的 考察人参总皂苷（total ginsenosides，TGS）和人参皂苷Rg₁、Rb₁、Re的生态活性。方法 从四年生的人参根中提取TGS并进一步分离出3种单体皂苷，考察了不同质量浓度（25、50、100 mg/L）的TGS和人参皂苷Re、Rg₁、Rb₁对人参幼苗生长发育的影响。结果 TGS和人参皂苷Rb₁处理对人参的幼苗和幼根的生长发育表现出明显的高质量浓度抑制而低质量浓度促进作用，而人参皂苷Rg₁和Re却对人参幼苗的各项生长指标总体表现为微弱的促进作用，4种化合物的抑制效应依次为人参皂苷Rb₁＞TGS＞人参皂苷Rg₁＞人参皂苷Re，其中TGS和人参皂苷Rb₁处理组人参生长的变化趋势相近。人参幼苗叶绿素的合成随着各皂苷质量浓度的升高而降低，但高质量浓度处理的叶绿素量仍然都高于对照。透射电镜观察到人参幼根细胞在100 mg/L TGS和人参皂苷Rb₁处理后，发生了质壁分离和细胞器降解，液泡膜也逐渐分解，核膜变得模糊不清。人参根尖在高质量浓度的人参皂苷处理后因细胞功能受损而不能完成正常的生理活动。结论 TGS和3种单体皂苷对人参幼苗生长发育的作用效应不同，TGS和人参皂苷Rb₁有较明显的化感活性。]]> 1, 2，耿艳秋¹，郜玉刚¹，张连学¹]]> 1598true 2014/12/18 9:59:03 1597true 2014/12/18 9:59:03 1596true 目的 考察一年内不同生长期杠柳各部位（根皮、根木质部、茎皮、茎木质部和叶）中主要活性成分杠柳毒苷和4-甲氧基水杨醛的量，研究其动态累积变化规律，确定其最佳采收期。方法 每月平行采样2次，超声提取法制备样品，RP-HPLC法测定杠柳毒苷和4-甲氧基水杨醛的量。结果 杠柳各部位成分累积动态变化曲线呈“双峰”型，其中茎皮中杠柳毒苷的量最高可达1.400%；根皮中4-甲氧基水杨醛累积量最高达0.781%，而其他部位均低于0.2%。结论 整个生长周期杠柳各部位中两种成分的累积变化呈一定的规律性，其变化可能与不同生长阶段及相应的生理代谢活动等密切相关；茎皮和根木质部均可作为提取杠柳毒苷的新药用部位，最佳采收期为生长期。]]> 1595true 2014/12/18 9:59:03 1594true 2014/12/18 9:59:03 1593true 2014/12/18 9:59:03 1592true 2014/12/18 9:59:04 1591true 2014/12/18 9:59:04 1590true 目的 获取滇重楼甾体皂苷合成途径关键酶环阿屯醇合酶基因（PpCAS）的全长cDNA序列，并进行序列分析。方法 利用同源克隆和RT-PCR技术获得PpCAS基因保守片段，采用RACE技术获得PpCAS基因的3’及5’末端序列，并采用生物信息学方法进行序列分析。结果 PpCAS基因全长cDNA为2 309 bp，其开放阅读框（ORF）为2 283 bp，可编码760个氨基酸的蛋白质；PpCAS推导的蛋白质相对分子质量为8.69×10⁴，等电点（pI）为6.54；其氨基酸序列与GenBank中其他植物CAS的同源性在60%～83% PpCAS蛋白。结论 从滇重楼中首次获得PpCAS基因cDNA全长序列，该基因具有CAS同源基因的典型特征。]]> 1589true 目的 从分子水平鉴别濒危药用植物毛黄堇和石生黄堇的差异。方法 分别从毛黄堇和石生黄堇的叶片中提取DNA，以核基因组通用引物为引物进行扩增，扩增产物经纯化后对PCR产物采用直接测序法进行测序。结果 获得ITS及5.8 S rDNA完全序列，分别为毛黄堇561 bp、石生黄堇552 bp；二者的ITS序列差异呈显著性，其中ITS1差异性达16.28%，ITS2差异性达21.21%。结论 ITS序列可有效地鉴别毛黄堇和石生黄堇，并可广泛应用于中药材的鉴别。]]> 1588true 目的 克隆刺五加亚精胺合成酶（spermidine synthase，SPDS）基因，并分析内生真菌对其表达的影响。方法 采用cDNA末端快速扩增（rapid amplification of cDNA ends，RACE）技术克隆刺五加SPDS基因全长cDNA序列。运用生物信息学方法对该基因进行分析。RT-PCR法检测内生真菌菌株P116-1a、P116-1b、P109-4和P312-1对SPDS基因表达的影响。结果 刺五加SPDS基因的cDNA全长为1 541 bp，开放阅读框长1 002 bp，编码333个氨基酸的蛋白，包含SPDS家族的基本结构和标志性序列。RT-PCR结果显示，内生真菌可显著提高刺五加SPDS基因的表达量（P＜0.05），最大表达量出现在菌株P116-1b回接90 d时，是对照的2.06倍。结论 首次克隆了刺五加SPDS基因的cDNA全长序列，并证实内生真菌可显著提高刺五加SPDS基因的表达，为阐明内生真菌提高刺五加三萜皂苷量的机制及刺五加的抗逆性改良奠定了基础。]]> 1587true 目的 采用ISSR标记技术从分子水平探讨皱边石杉内生真菌资源的遗传多样性，建立皱边石杉内生真菌资源遗传分化指纹图谱，为筛选可产石杉碱甲的目标菌株提供快捷的判别依据。方法 以从皱边石杉中分离的100株内生真菌为材料，建立其ISSR优化反应体系并分析其遗传多样性；TLC、HPLC检测发酵产物。结果 优化筛选的10条ISSR引物对皱边石杉内生真菌进行遗传多样性分析，共扩增出3 975条清晰条带，多态性条带占100%。遗传相似系数为0.59～0.96，在0.64水平，皱边石杉内生真菌可分为11类；在0.67水平，第I类又可分为5个亚类。采用引物UBC868对13号菌株及皱边石杉基因组DNA扩增，在500、200 bp均具有清晰的扩增条带，发酵产物经TLC和HPLC检测，发现13号菌株与宿主植物皱边石杉同样可产生石杉碱甲。结论 皱边石杉内生真菌资源遗传多样性高，遗传距离较远，遗传基础较宽，与13号菌株同属一类的内生真菌可作为石杉碱甲生产的潜力菌株进行重点筛选和诱变。]]> 1, 2，禹利君^{2, 3}，黄 璜⁴，胥锦桦^{2, 3}，朱楠楠^{2, 3}]]> 1586true 目的 优化长鞭红景天Rhodiola fastigiata细胞悬浮培养体系及生长条件。方法 研究基本培养基、激素、碳源、氮源等因素对长鞭红景天细胞生长和红景天苷产量的影响，建立高产红景天苷的细胞悬浮培养体系。结果 MS培养基＋BA 5.0 mg/L＋2, 4-D 0.1 mg/L＋蔗糖30 g/L为长鞭红景天细胞悬浮培养的最适培养条件。结论 对培养条件进行优化，为利用长鞭红景天细胞大规模生产天然活性成分奠定基础，为缓解野生长鞭红景天资源的匮乏提供可行途径。]]> 1，管江红²，史玲玲³，刘玉军³]]> 1585true 目的 建立辐照中药材的系统检测方法，为评价中药材质量及安全用药提供参考。方法 利用脉冲光激发光系统（PSL）研究不同来源不同品种中药材在一系列辐照剂量（1、2、4、6、8、10 kGy）辐射后光子计数率的变化规律。以光子计数率700为筛查阈值，对中药材样品进行辐照初筛；以1 kGy作为校正剂量对光子计数率高于700的样品进行校正PSL。结果 选定的28批中药材样品经上述一系列辐照剂量辐射后，光子计数率均比辐照前大幅增加；连续测定同一份样品4次，与第1次相比，光子计数率均呈现40%±10%、60%±10%和70%±10%的下降规律。辐照初筛的403批中药材样品中，光子计数率低于700的有307批，占76.2%；光子计数率高于700的有96批，占23.8%，其中经校正PSL法检测后依法判定为辐照过的阳性样品1批，占全部样品的0.25%。结论 本法简单可靠，准确度较高，可用于辐照中药材的系统筛查。]]> 1584true 目的 建立凉粉草特征指纹图谱，为凉粉草的质量控制提供依据。方法 采用HPLC法测定，色谱柱为Dikma Diamonsil（2）C₁₈柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相为乙腈-2%甲酸，梯度洗脱；检测波长为320 nm；体积流量为0.8 mL/min；柱温为25 ℃。结果 建立了凉粉草的特征指纹图谱，34批次凉粉草确定10个共有峰。结论 该法准确可靠，重复性好，为凉粉草质量控制提供了依据。]]> 1，黄 松^{1, 2}，张柏明¹，吕渭彰¹，赖小平^{1, 2}]]> 1583true 目的 筛选刺五加鲨烯合酶(SS)和鲨烯环氧酶(SE)基因存在的单核苷酸多态性(SNP)位点,分析各SNP位点与刺五加总皂苷量的相关性。方法 采用分光光度法测定刺五加总皂苷的量,并划分为具有显著差异(P<0.01)的高、低量组;RT-PCR法扩增刺五加SS、SE基因,根据测序结果筛选SNP位点,利用R×C表的χ²检验分析相关关系。结果 刺五加SS基因存在6处SNP,其中704 bp位点为错义突变,其他位点为同义突变,各位点均不与刺五加总皂苷量显著相关。SE基因存在9处SNP,其中导致错义突变的164、199、227、232 bp位点及同义突变的279、285 bp位点与刺五加总皂苷量显著相关(P<0.05),其他位点为同义突变,与刺五加总皂苷量间无显著相关性。结论 刺五加SS和SE基因存在SNP,SE基因164～285 bp位点的AGAACG与刺五加总皂苷高量组显著相关,TAGTTC与低量组显著相关。]]> 2014/12/18 9:23:55 1582true 目的 筛选刺五加鲨烯合酶（SS）和鲨烯环氧酶（SE）基因存在的单核苷酸多态性（SNP）位点，分析各SNP位点与刺五加总皂苷量的相关性。方法 采用分光光度法测定刺五加总皂苷的量，并划分为具有显著差异（P＜0.01）的高、低量组；RT-PCR法扩增刺五加SS、SE基因，根据测序结果筛选SNP位点，利用R×C表的χ²检验分析相关关系。结果 刺五加SS基因存在6处SNP，其中704 bp位点为错义突变，其他位点为同义突变，各位点均不与刺五加总皂苷量显著相关。SE基因存在9处SNP，其中导致错义突变的164、199、227、232 bp位点及同义突变的279、285 bp位点与刺五加总皂苷量显著相关（P＜0.05），其他位点为同义突变，与刺五加总皂苷量间无显著相关性。结论 刺五加SS和SE基因存在SNP，SE基因164～285 bp位点的AGAACG与刺五加总皂苷高量组显著相关，TAGTTC与低量组显著相关。]]> 1，劳凤云²，龙月红¹，梁能松¹，陈 龙¹，何 闪¹]]> 1581true 目的 分析蒲公英的遗传多样性。方法 采用ISSR分子标记对21个居群蒲公英遗传多样性进行分析，用软件Popgen 32分析Nei’s基因多样性指数（H）和Shannon信息指数（I），采用NTSYS 2.10e软件进行聚类分析和主坐标分析。结果 16条ISSR引物共扩增出166条条带，其中多态性条带152条，平均多态性百分率为90.4%，平均H为0.286 5，平均I为0.437 0；遗传距离和遗传一致度分别为0.156 2～0.590 2和0.554 2～0.855 4；UPMGA法进行聚类分析显示，聚类结果与地理来源有较强的一致性，可以看出来源于同一地区的蒲公英种质聚在一起，呈现出一定的地域性分布规律。结论 采用ISSR分析蒲公英遗传多样性，蒲公英表现出丰富的多态性，表明可以用ISSR标记技术对蒲公英进行分子水平的遗传多样性分析。]]> 1，邱天宝²，张红梅³，胡春月¹，胡利欣¹，郑楠楠¹，唐 露¹]]> 1580true 目的 分析蒲公英的遗传多样性。方法 采用ISSR分子标记对21个居群蒲公英遗传多样性进行分析,用软件Popgen32分析Nei's基因多样性指数(H)和Shannon信息指数(I),采用NTSYS 2.10e软件进行聚类分析和主坐标分析。结果 16条ISSR引物共扩增出166条条带,其中多态性条带152条,平均多态性百分率为90.4%,平均H为0.286 5,平均I为0.437 0;遗传距离和遗传一致度分别为0.156 2～0.590 2和0.554 2～0.855 4;UPMGA法进行聚类分析显示,聚类结果与地理来源有较强的一致性,可以看出来源于同一地区的蒲公英种质聚在一起,呈现出一定的地域性分布规律。结论 采用ISSR分析蒲公英遗传多样性,蒲公英表现出丰富的多态性,表明可以用ISSR标记技术对蒲公英进行分子水平的遗传多样性分析。]]> 2014/12/18 9:23:55 1579true 目的 评价浙南忍冬属Lonicera L.药材遗传多样性。方法 采用ISSR和SRAP分子标记技术检测5种忍冬属药材遗传多样性,NTSYS软件处理数据,UPGMA构建聚类图;Mantel检测法对2种标记进行相关性检验;用引物分辨力(RP)、多态性条带比率(PPB)等参数对标记效率进行评价。结果 16条ISSR引物和22对SRAP引物分别扩增出232、215条带;UPGMA可将5种忍冬属药材聚为2大类,一类为金银花基原植物,另一类则为山银花基原植物,两种标记技术相关系数(r)为0.970 3。结论 ISSR和SRAP均可有效地分析忍冬属药材资源的遗传多样性,且ISSR标记技术优于SRAP。]]> 2014/12/18 9:23:55 1578true 目的 评价浙南忍冬属Lonicera L. 药材遗传多样性。方法 采用ISSR和SRAP分子标记技术检测5种忍冬属药材遗传多样性，NTSYS软件处理数据，UPGMA构建聚类图；Mantel检测法对2种标记进行相关性检验；用引物分辨力（RP）、多态性条带比率（PPB）等参数对标记效率进行评价。结果 16条ISSR引物和22对SRAP引物分别扩增出232、215条带；UPGMA可将5种忍冬属药材聚为2大类，一类为金银花基原植物，另一类则为山银花基原植物，两种标记技术相关系数（r）为0.970 3。结论 ISSR和SRAP均可有效地分析忍冬属药材资源的遗传多样性，且ISSR标记技术优于SRAP。]]> 1, 2，陶正明^{1, 2}，吴志刚²，潘晓军¹，林新春³，范传颍^{1, 2}，包晓青^{1, 2}]]> 1577true 目的 建立黄花白及的SCAR标记，为黄花白及的分子鉴定提供科学依据。方法 用随机引物进行随机扩增多态性DNA（random amplified polymorphic DNA，RAPD）标记筛选，获得特异的RAPD标记条带，经回收、克隆、测序后，根据RAPD标记条带的两端序列设计特异引物进行常规PCR反应，以获得序列特征化扩增区（sequence characterized amplified region，SCAR）标记。结果 利用50对随机引物筛选得到黄花白及的一条896 bp的特异片段，可以区别于小白及、独叶白芨和白及。该序列设计特异引物后，经过多次重复试验，该RAPD标记的特异片段已成功转化为SCAR标记。结论 建立的SCAR标记条带清晰明亮，结果稳定，可作为黄花白及分子鉴定的依据。]]> 1，黄春球²，杨耀文¹，周 敏²，钱子刚¹，李明静²]]> 1576true 目的 建立黄花白及的SCAR标记,为黄花白及的分子鉴定提供科学依据。方法 用随机引物进行随机扩增多态性DNA(random amplified polymorphic DNA,RAPD)标记筛选,获得特异的RAPD标记条带,经回收、克隆、测序后,根据RAPD标记条带的两端序列设计特异引物进行常规PCR反应,以获得序列特征化扩增区(sequence characterized amplified region,SCAR)标记。结果 利用50对随机引物筛选得到黄花白及的一条896 bp的特异片段,可以区别于小白及、独叶白芨和白及。该序列设计特异引物后,经过多次重复试验,该RAPD标记的特异片段已成功转化为SCAR标记。结论 建立的SCAR标记条带清晰明亮,结果稳定,可作为黄花白及分子鉴定的依据。]]> 2014/12/18 9:23:56 1575true 目的 对壮药战骨种质资源的遗传多样性进行研究。方法 采用ISSR分子标记技术分析9个战骨种群的遗传多样性。结果 13条引物共检测到73个位点,其中65个位点具有多态性,多态位点百分率(PPL)为89.04%。战骨总的Nei’s基因多样度指数(H)为0.226 5,Shannon’s多样性信息指数(I)为0.357 2,各种群的平均H、I为0.147 6、0.221 9。种群间基因分化系数(Gst)为0.348 4,基因流(Nm)为0.935 1。9个种群可聚类划分为2个大种群组。结论 战骨种群遗传多样性为中等偏低水平;战骨种群的遗传变异主要存在于种群内;战骨的生物学特性和分布区域的片段化是导致种群间出现一定的遗传分化和种群遗传多样性较低的主要原因。]]> 2014/12/18 9:23:56 1574true 目的 对壮药战骨种质资源的遗传多样性进行研究。方法 采用ISSR分子标记技术分析9个战骨种群的遗传多样性。结果 13条引物共检测到73个位点，其中65个位点具有多态性，多态位点百分率（PPL）为89.04%。战骨总的Nei’s基因多样度指数（H）为0.226 5，Shannon’s 多样性信息指数（I）为0.357 2，各种群的平均H、I为0.147 6、0.221 9。种群间基因分化系数（G_st）为0.348 4，基因流（N_m）为0.935 1。9个种群可聚类划分为2个大种群组。结论 战骨种群遗传多样性为中等偏低水平；战骨种群的遗传变异主要存在于种群内；战骨的生物学特性和分布区域的片段化是导致种群间出现一定的遗传分化和种群遗传多样性较低的主要原因。]]> 1573true 目的 通过对不同浓度NaCl胁迫下膜荚黄芪种子萌发及幼苗生理特性的研究，寻找提高膜荚黄芪种子及幼苗在NaCl胁迫下抗性能力的途径。方法 测定不同浓度NaCl胁迫下膜荚黄芪种子的发芽势（G_v）、发芽率（G_r）、相对发芽率、相对NaCl害率，并对幼苗的叶绿素量、可溶性蛋白质量、丙二醛（MDA）量、超氧化物歧化酶（SOD）和过氧化物酶（POD）的活性进行测定。结果 低浓度的NaCl胁迫对膜荚黄芪种子的萌发具有促进作用，当NaCl胁迫浓度＞50 mmol/L时，随着NaCl浓度的增大，种子的G_v、G_r、相对发芽率逐渐降低，相对NaCl害率逐渐增大，对种子萌发有抑制作用。随着NaCl处理浓度的增大，膜荚黄芪幼苗中叶绿素量逐渐减少，可溶性蛋白质量也逐渐降低，二者都与NaCl处理浓度呈负相关；随着NaCl处理浓度的增加，幼苗中MDA量呈增加趋势，呈正相关；SOD、POD活性均不同程度地表现为先上升后下降的趋势，在75 mmol/L时达到最大值。结论 膜荚黄芪具有一定的抗NaCl胁迫能力，具有向盐碱地引种驯化的潜力。]]> 1，晋 玲²，张 勇¹]]> 1572true 目的 通过对不同浓度NaCl胁迫下膜荚黄芪种子萌发及幼苗生理特性的研究,寻找提高膜荚黄芪种子及幼苗在NaCl胁迫下抗性能力的途径。方法 测定不同浓度NaCl胁迫下膜荚黄芪种子的发芽势(Gv)、发芽率(Gr)、相对发芽率、相对NaCl害率,并对幼苗的叶绿素量、可溶性蛋白质量、丙二醛(MDA)量、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化物酶(POD)的活性进行测定。结果 低浓度的NaCl胁迫对膜荚黄芪种子的萌发具有促进作用,当NaCl胁迫浓度>50 mmol/L时,随着NaCl浓度的增大,种子的Gv、Gr、相对发芽率逐渐降低,相对NaCl害率逐渐增大,对种子萌发有抑制作用。随着NaCl处理浓度的增大,膜荚黄芪幼苗中叶绿素量逐渐减少,可溶性蛋白质量也逐渐降低,二者都与NaCl处理浓度呈负相关;随着NaCl处理浓度的增加,幼苗中MDA量呈增加趋势,呈正相关;SOD、POD活性均不同程度地表现为先上升后下降的趋势,在75 mmol/L时达到最大值。结论 膜荚黄芪具有一定的抗NaCl胁迫能力,具有向盐碱地引种驯化的潜力。]]> 2014/12/18 9:23:56 1571true 目的 建立落花生茎叶HPLC指纹图谱并对其进行化学模式识别。方法 采用HPLC法,构建不同产地13批落花生茎叶的指纹图谱;采用聚类分析和主成分分析对指纹图谱进行化学模式识别。结果 建立了以7个共有峰为特征指纹信息的HPLC指纹图谱,13批样品被聚分为两大类。结论 HPLC指纹图谱的构建为落花生茎叶内在质量的评价研究提供了参考。]]> 2014/12/18 9:23:56 1570true 目的 建立落花生茎叶HPLC指纹图谱并对其进行化学模式识别。方法 采用HPLC法，构建不同产地13批落花生茎叶的指纹图谱；采用聚类分析和主成分分析对指纹图谱进行化学模式识别。结果 建立了以7个共有峰为特征指纹信息的HPLC指纹图谱，13批样品被聚分为两大类。结论 HPLC指纹图谱的构建为落花生茎叶内在质量的评价研究提供了参考。]]> 1, 2，王丽莉²，张铁军²]]> 1569true 目的 建立RP-HPLC同时测定不同产地叶下珠中没食子酸、柯里拉京、老鹳草素和短叶苏木酚酸的方法。方法 采用Diamonsil C₁₈柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），以乙腈-0.2%醋酸水溶液为流动相，梯度洗脱，检测波长为270 nm，体积流量1 mL/min，柱温35 ℃。结果 没食子酸、柯里拉京、老鹳草素和短叶苏木酚酸的线性范围分别为0.062 2～0.622 0 μg（r＝0.999 7）、0.130 4～1.304 0 μg（r＝0.999 4）、0.246 4～2.464 0 μg（r＝0.999 2）、0.081 2～0.488 0 μg（r＝0.999 3）；平均回收率分别为103.62%、101.20%、100.09%、100.27%，RSD分别为1.29%、2.08%、1.40%、2.98%。结论 本测定方法简便、准确、重复性好，可用于叶下珠中没食子酸、柯里拉京、老鹳草素和短叶苏木酚酸的测定。]]> 1，袁永兵²，张兰珍¹，石任兵¹]]> 1568true 目的 建立RP-HPLC同时测定不同产地叶下珠中没食子酸、柯里拉京、老鹳草素和短叶苏木酚酸的方法。方法 采用Diamonsil C₁₈柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.2%醋酸水溶液为流动相,梯度洗脱,检测波长为270 nm,体积流量1 mL/min,柱温35℃。结果 没食子酸、柯里拉京、老鹳草素和短叶苏木酚酸的线性范围分别为0.0622～0.6220μg(r=0.9997)、0.1304～1.3040μg(r=0.9994)、0.2464～2.4640μg(r=0.9992)、0.0812～0.4880μg(r=0.9993);平均回收率分别为103.62%、101.20%、100.09%、100.27%,RSD分别为1.29%、2.08%、1.40%、2.98%。结论 本测定方法简便、准确、重复性好,可用于叶下珠中没食子酸、柯里拉京、老鹳草素和短叶苏木酚酸的测定。]]> 2014/12/18 9:23:56 1567true 目的 研究不同采收期金莲花茎叶中总黄酮和荭草苷量的变化规律,为合理开发利用金莲花药用资源提供实验依据。方法 采用UV法和HPLC法,分别以芦丁和荭草苷为对照品,测定不同采收期金莲花茎叶中总黄酮和荭草苷量,并绘制动态曲线。结果 从5月下旬至6月下旬,总黄酮量呈现不断升高的趋势,从4.597%上升到5.125%;从7月上旬至8月中旬,总黄酮量持续下降,从4.264%下降至1.181%。而荭草苷量从5月下旬至7月中旬一直呈上升趋势(0.095～0.332 mg/g);从7月下旬至8月中旬,呈下降趋势(0.306～0.092 mg/g)。结论 结合花的产量,并综合总黄酮和荭草苷量的动态变化,采收期以7月上旬至中旬为佳。本实验方法稳定、可行,结果可靠,为合理采收金莲花茎叶提供了理论依据。]]> 2014/12/18 9:23:56 1566true 目的 研究不同采收期金莲花茎叶中总黄酮和荭草苷量的变化规律，为合理开发利用金莲花药用资源提供实验依据。方法 采用UV法和HPLC法，分别以芦丁和荭草苷为对照品，测定不同采收期金莲花茎叶中总黄酮和荭草苷量，并绘制动态曲线。结果 从5月下旬至6月下旬，总黄酮量呈现不断升高的趋势，从4.597%上升到5.125%；从7月上旬至8月中旬，总黄酮量持续下降，从4.264%下降至1.181%。而荭草苷量从5月下旬至7月中旬一直呈上升趋势（0.095～0.332 mg/g）；从7月下旬至8月中旬，呈下降趋势（0.306～0.092 mg/g）。结论 结合花的产量，并综合总黄酮和荭草苷量的动态变化，采收期以7月上旬至中旬为佳。本实验方法稳定、可行，结果可靠，为合理采收金莲花茎叶提供了理论依据。]]> 1，张卫平²，赵 波¹，刘秀梅¹，黄永鑫¹，南 洋¹，樊锐锋¹，李 鞠¹，张水利³]]> 1565true 1564true 1563true 1562true 目的 对桑黄肌动蛋白（Actin）基因进行克隆及序列分析。方法 搜索网上已知数据库中Actin基因，与本实验室测得的桑黄转录组数据进行生物信息学比对，找到转录组数据中与Actin相似性最高的片段，并根据其设计引物，提取桑黄菌丝体总RNA为模板，采用RT-PCR的方法扩增Actin基因片段并对PCR产物进行测序。结果 得到一段839 bp的序列，序列分析表明，该片段编码279个氨基酸，与其他物种Actin基因核苷酸序列同源性在87%以上。结论 首次从桑黄中克隆出了Actin基因，为有效利用该基因奠定了基础。]]> 1561true 目的 研究聚乙二醇-6000（polyethylene glycol-6000，PEG-6000）胁迫对丹参毛状根丹参酮类成分积累的影响。方法 用发根农杆菌ATCC15834诱导生产丹参毛状根，经20 d悬浮振荡培养后，分别采用1.2%、2.0%、5.5%、10%的PEG-6000处理，并用HPLC法测定PEG-6000处理1周后丹参毛状根中丹参酮I、隐丹参酮、二氢丹参酮I、丹参酮II_A的量。结果 PEG-6000能够抑制丹参毛状根的生长，PEG-6000为1.2%、2.0%、5.5%和10%处理条件下，丹参毛状根干质量分别减少为对照组的75.1%、83.0%、76.2%、76.1%；PEG-6000处理能够显著提高丹参毛状根中4种丹参酮的量，2.0%、5.5%的PEG-6000能够显著促进丹参酮I量的提高，1.2% PEG-6000能够显著提高隐丹参酮量的；二氢丹参酮I的量以2.0% PEG-6000处理条件下最高；丹参酮II_A的量以5.5% PEG-6000处理条件下最高。结论 PEG-6000能显著促进丹参毛状根中丹参酮类成分的积累。]]> 1560true 目的 研究蒺藜总皂苷、总黄酮类物质的动态积累情况及其在根、茎、叶、果等部位的分布情况。方法 采用紫外分光光度法测定了成熟期内3种不同生长环境下蒺藜全草和各部位中总皂苷、总黄酮的量。结果 蒺藜总皂苷与总黄酮的高峰期出现时间、积累曲线等并不一致；其中，总皂苷主要集中分布在叶片中，总黄酮主要在叶片和果实中积累。结论 以蒺藜总皂苷量确定蒺藜的最佳采收期并不适用于总黄酮类物质的积累，应根据目标成分的变化掌握蒺藜的适宜采收期；其次，应重视蒺藜叶片的采集和利用。]]> 1，王国栋²，韩 梅¹]]> 1559true 目的 基于一测多评法初步建立大黄地上部位提取物质量控制方法。方法 通过薄层色谱、指纹图谱主要色谱峰指认、紫外分光光度法和HPLC法对大黄地上部位提取物进行质量控制；建立芦荟大黄素、大黄酚、大黄素甲醚对大黄素的相对校正因子，利用其相对校正因子计算其量，实现一测多评。结果 薄层色谱供试品与对照品在相同位置显相同颜色斑点，提取物指纹图谱具有6个代表性色谱峰，其中5个已指认，总蒽醌在4.944～29.664 μg/mL线性良好（r = 0.999 0），一测多评法结果显示芦荟大黄素、大黄素、大黄酚及大黄素甲醚成分的平均回收率依次为97.08%、95.78%、100.60%、97.47%，其RSD依次为3.32%、2.42%、3.72%、2.67%。一测多评法与外标法比较没有显著性差异。结论 通过薄层色谱及指纹图谱可定性鉴别大黄地上部位提取物主要化学成分，紫外分光光度法可定量提取物中总蒽醌质量分数，一测多评法可定量提取物中芦荟大黄素、大黄素、大黄酚及大黄素甲醚的质量分数，该方法准确度高，重现性好，可用于大黄地上部位提取物质量控制。]]> 1558true 目的 比较超高效液相色谱（UPLC）法与HPLC法分析化橘红总黄酮指纹图谱的效果。方法 分别采用UPLC法与HPLC法对17批化橘红药材的黄酮类成分进行指纹图谱分析。结果 分别建立了化橘红黄酮类成分的UPLC与HPLC指纹图谱共有模式。其中UPLC法标识出21个共有峰，HPLC法标识出17个共有峰，17批样品的相似度均大于0.9。结论 2种方法均可用于化橘红的质量控制，UPLC法较HPLC法更高效、快速、灵敏。]]> 1557true 目的 分析淡豆豉Sojae Semen Preparatum和大豆Glycine max中游离及水解氨基酸。方法 用0.1 mol/L HCl作溶剂超声提取得到淡豆豉和大豆中的游离氨基酸；用6 mol/L HCl水解提取得到水解氨基酸，以异硫氰酸苯酯（PITC）为柱前衍生化试剂，采用柱前衍生RP-HPLC法进行分析。结果 淡豆豉和大豆中均含有16种氨基酸，这16种氨基酸浓度在0.031～1.750 mmol/L内呈良好的线性关系，r均大于0.997 9，平均回收率91.02%～102.04%，RSD1.01%～4.81%。结论 本方法灵敏、准确，具有良好的重复性和稳定性，16种氨基酸能在样品杂质量较多的情况下得到分离，且采用普通C₁₈色谱柱成本低，可广泛应用于富含氨基酸样品的分析。]]> 1，崔元璐¹，蒋庆峰²]]> 1556true 目的 研究河南益母草野生居群遗传多样性。方法 利用SCoT分子标记对位于河南伏牛、太行、大别和桐柏4大山脉的8个益母草居群66个样品进行遗传多样性分析。结果 10对引物共扩增出240条带，其中多态性条带为238条，多态性百分率（PPB）为99.17%。Nei’s遗传多样性指数（H）平均值为0.264 2，Shannon’s多态性信息指数（I）平均值为0.39，遗传分化系数（Gst）为0.294 6，种群间基因流为1.197。Mantel Test分析表明，河南益母草居群间的亲缘关系与它们之间的地理距离有着明显的相关性（r＝0.366 3，P＜0.05）。结论 河南野生益母草种群具有较高的遗传多样性，其遗传距离与地理距离存在明显的相关性。]]> 1，韩远记²，薛愧玲¹，袁王俊¹，尚富德²]]> 1555true 目的 构建紫苏属种、变种之间系统发育关系，准确鉴别紫苏Perilla frutescens var. arguta、白苏P. frutescens与其他变种。方法 提取紫苏、白苏及其他变种的DNA，对ITS和psbA-trnH序列扩增和测序，计算物种种内（变种内）种间（变种间）Kimura 2-parameter（K2P）遗传距离。采用最简约法（MP）和邻接法（NJ）构建分子系统树，进行系统发育和鉴定分析。结果 ITS和psbA-trnH MP系统树显示白苏和紫苏的不同地域的样本聚为一单系分支（支持率为100%和93%），紫苏与回回苏构成姐妹群分支（支持率为95%和90%），野生紫苏和耳齿紫苏构成一单系分支（支持率为100%和90%）；白苏、紫苏与其他变种间的ITS和psbA-trnH序列遗传距离0.008 21～0.018 18和0.002 38～0.029 31，明显大于白苏与紫苏间遗传距离0～0.001 65和0，大于各变种内遗传距离。结论 白苏和紫苏合并为一个种紫苏；紫苏与回回苏亲缘关系最近，野生紫苏与耳齿紫苏亲缘关系最近；ITS和psbA-trnH序列可以准确鉴别紫苏与其他变种。]]> 1，李贺敏¹，张红瑞¹，李家美²，高致明¹]]> 1554true 目的 研究栽培藏红花的病毒病原。方法 综合运用病毒粒子形态和细胞病理学电镜观察、DAS-ELISA检测、RT-PCR检测及序列测定等技术进行病原鉴定。结果 透射电镜负染色观察到病株汁液含有600～900 nm的线状病毒粒子；超薄切片观察到病株细胞质内有大量线状病毒粒子、II型风轮状内含体和电子致密无定型体，符合菜豆黄花叶病毒Beam yellow mosaic virus（BYMV）的病理学特征。应用BYMV抗体进行病株DAS-ELISA检测结果为阳性，应用马铃薯Y病毒属特异性引物Sprimer和M4对病株进行RT-PCR检测结果为阳性，对阳性结果进行分子克隆及序列测定发现目标序列与BYMV有99%的同源性。结论 综合检测结果判明侵染浙江藏红花的病毒病原为BYMV。]]> 1, 2，吕明芳²，董峰丽¹，饶君凤³，毛碧增¹，洪 健¹]]> 1553true 目的 基于物质分配研究钼对药材中甘草酸积累的影响并探讨其机制。方法 采用盆栽蛭石的试验方法，以一年生的甘草移栽苗为实验材料，共设置4个钼质量浓度水平，分别为0、0.52、5.2、10.4 mg/L，其中0.52 mg/L为正常Hoagland营养液中钼的质量浓度。每周向盆内浇灌营养液，以达到处理的目的。分别在处理35、70、105 d取样，测定甘草中甘草酸的相对量和绝对量以及总糖、粗蛋白、粗纤维、粗脂肪、灰分等物质组分量。结果 钼对甘草酸的相对量影响不显著，但是对其绝对量的影响显著，施钼可以提高甘草中总糖、粗蛋白和灰分的量以及5种主要物质组分量总和，降低粗脂肪的量，对粗纤维的影响不显著。甘草酸相对量与粗蛋白为显著正相关。甘草酸绝对量与粗纤维为极显著负相关，与灰分、粗脂肪和物质总和为极显著正相关，与总糖为显著正相关。结论 甘草酸的积累与粗纤维、粗脂肪、灰分、总糖的分配密切相关，适当质量浓度的钼可以刺激甘草内的总糖、粗脂肪等物质的合成，进而促进甘草的次生代谢，导致甘草酸的形成和积累。]]> 1, 2，万春阳^{2, 3}，王文全^{2, 4, 5}，侯俊玲^{2, 5}，彭 芳²，刘凤波²]]> 1552true 目的 建立同时测定连翘中咖啡酸、连翘酯苷B、连翘酯苷A、芦丁、金丝桃苷、连翘苷、牛蒡子苷元7种化学成分的HPLC方法。方法 采用反相高效液相色谱法，以Inertsil ODS-3 C₁₈（250 mm×4.6 mm，5 μm）为色谱柱；流动相为乙腈-0.2%磷酸水，梯度洗脱，检测波长为275 nm，体积流量为1.0 mL/min，柱温为30 ℃。结果 在上述色谱条件下，咖啡酸、连翘酯苷B、连翘酯苷A、芦丁、金丝桃苷、连翘苷、牛蒡子苷元获良好分离，分别在18.24～91.20、5.88～29.40、132.60～663.00、8.34～41.70、1.96～9.80、7.60～38.00、11.34～56.70 μg/mL内线性关系良好，平均回收率分别为97.7%、96.7%、102.6%、101.3%、93.2%、91.8%、96.7%，RSD分别为2.3%、1.4%、2.4%、2.2%、1.0%、1.0%、1.3%。结论 该方法分离度好，简便快速，可用于同时检测连翘中7种成分的量，为连翘的质量评价提供依据。]]> 1551true 目的 通过测定半夏及近缘种的DNA叶绿体的非编码区序列，为半夏的分子鉴别和遗传多样性研究提供依据。方法 在我国半夏主要分布区收集到43份半夏及滴水珠和虎掌半夏2个近缘种，采用PCR法克隆叶片基因组DNA中psbK-psbI和atpF-atpH两段序列，借助生物信息学软件进行比对分析。结果 半夏atpF-atpH序列长为337～342 bp，较为保守，仅含变异位点7个，其中信息位点1个，遗传距离为0～0.024。半夏psbK-psbI序列长为432～435 bp，变异位点37个，其中信息位点17个，遗传距离为0～0.069。聚类分析结果均显示出与表型以及地理居群的不一致。结论 psbK-psbI序列较atpF-atpH有更好的鉴别能力，在半夏种内具有较丰富的变异位点。]]> 1，张君毅¹，郭巧生²]]> 1550true 目的 通过对新疆贝母属植物进行遗传多样性分析，以期获得新疆贝母属不同种之间的遗传多态性。方法 应用琼脂糖凝胶电泳法结合ISSR分子标记，对所选材料进行遗传多样性与亲缘关系的综合分析。结果 2%琼脂糖凝胶电泳扩增总条带数为185条，其中多态性条带为181条，多态性条带比率（PPB）为97.84%。基于UPGMA软件对10种贝母的遗传差异性分析表明，12个ISSR引物可以将新疆贝母不同种之间遗传差异明显区分开来，其遗传相似系数范围在0.37～0.80，以0.50为最低遗传相似系数，可将10种贝母分成4个大类。结论 揭示了10种贝母种质资源间的遗传多样性与亲缘关系，为新疆野生贝母属植物资源的收集和种间分类等提供理论依据。]]> 1549true 目的 研究不同时间、不同采集地的防风挥发油量与防风根际土壤相关性。方法 水蒸气蒸馏法提取防风挥发油，检测其成分；根据国家标准规定方法测定根际土壤pH，水解N，速效P、K，全N及有机质的量，用SPSS 13.0软件分析数据。结果 防风挥发油量随采集地不同由南至北递减，所含成分明显不同，但均以1-甲酰基-4-(1-丁烯-3基)-苯和β-没药烯为主。防风挥发油量与其根际土壤全N之间呈显著幂相关，与水解N呈显著非线性相关，而速效P、K、有机质，只一批样品之间呈较好的相关性。土壤自身pH、水解N与速效P之间，水解N、速效P与速效K之间，水解N、速效P、速效K与有机质之间显著相关（P＜0.01）；土壤pH与水解N、速效K之间显著相关（P＜0.05）。结论 防风挥发油量在不同采收期差异无规律性，但其产率受根际土壤全N量的抑制作用显著，随其量的增加而显著降低，而水解N、速效P、K及有机质量适宜时可显著提高挥发油产率。土壤pH则可以通过调节土壤其他化学性质而影响防风挥发油的量。]]> 1, 2，杨 鹤¹，刘岩硕¹，张连学¹]]> 1548true 目的 分析不同贮藏方式、炮制方法、温度、pH值和酶对梓醇量的影响。方法 采用HPLC法测定鲜地黄不同炮制品及不同贮藏条件下梓醇量的变化，并在不同温度、pH值及酶的条件下，放置一定时间后测定梓醇量。结果 鲜地黄中梓醇量明显高于其炮制品，抽真空冷冻下梓醇量几乎不变，而梓醇受pH影响较大，强酸或强碱条件下均不稳定，并随着温度升高而加剧这种变化，同时易受β-葡萄糖苷酶的影响。结论 梓醇对热稳定，对酸、碱及β-葡萄糖苷酶不稳定。]]> 1，郭建华¹，田成旺²，张铁军²]]> 1547true 目的 建立牡丹皮的HPLC指纹图谱。方法 色谱柱为Dikma Diamonsil C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；以乙腈-水（含0.085%磷酸）为流动相梯度洗脱；柱温35 ℃；体积流量1 mL/min；检测波长254 nm（0～21.5 min），230 nm（21.5～45 min），254 nm（45～60 min）；进样量20 μL。采用高分辨LC-MS/MS技术进行色谱峰指认。结果 该方法精密度、稳定性和重复性良好。采用高分辨LC-MS/MS方法对20个共有峰中的18个色谱峰进行了定性鉴别。采用该方法测定了10批不同产地的牡丹皮，其相似度均在0.96以上。结论 本实验为牡丹皮的全面质量评价奠定了基础。]]> 1, 2，孙 磊¹，乔善义¹，高 松³，车彦忠³]]> 1546true 目的 克隆大花红景天Rhodiola crenulata尿苷二磷酸葡萄糖基转移酶基因组DNA，并利用生物信息学对其编码区与启动子进行分析。方法 以大花红景天为样品，采用优化的CTAB法提取大花红景天基因组DNA，并利用hiTAIR-PCR技术经过3次步移获得大花红景天UDPGT（RcUDPGT）基因DNA序列，并利用生物信息学对其进行分析。结果 克隆得到RcUDPGT基因的DNA序列2 977 bp，其中包含1 499 bp的编码区域（包括82 bp的内含子序列）和1 500 bp的编码区5’上游侧翼域序列（包括启动子区域）。生物信息学分析证明该序列为UDPGT基因且与其他植物UDPGT同源，具有亲水性且定位于细胞质中，三级结构预测表明该基因编码的蛋白具有UDPGT功能结合位点。启动子分析表明其存在光响应、厌氧响应、热响应、低温响应、压力与防御响应和花色素苷合成响应元件等。结论 克隆的RcUDPGT基因结构完整，具有典型的功能结合位点，为红景天分子生物学与代谢工程研究提供参考。]]> 1, 2，马丽利^{1, 2}，王亚雄^{1, 2}，兰小中³，廖志华^{1, 2}]]> 1545true 目的 研究能够特异性鉴别鼓槌石斛的PCR引物，并优化PCR检测体系，确立一种快速、准确鉴别鼓槌石斛的方法。方法 从GenBank数据库中下载石斛属rDNA ITS序列170余条，运用MEGA 5.0对所有序列进行同源性比较，找出各变异位点，在非保守区设计1对特异性引物。对35份石斛属植物DNA模板进行特异性引物PCR扩增，显示阳性者为鼓槌石斛。结果 将退火温度升至58 ℃时，鼓槌石斛能被该引物特异性地扩增出来，而其他石斛属植物均为阴性，且该引物的灵敏度可达到0.69 ng/μL。结论 建立一种特异性鉴别鼓槌石斛的方法，运用该特异性引物可实现从同源物种中快速、准确地鉴定出鼓槌石斛，具有特异性好，操作简便、高效、准确等优点。]]> 1544true 目的 通过分析各萜类合成酶的表达，预测各种环境因素和逆境处理对白木香萜类合成的影响。方法 对二年生白木香植株和愈伤组织分别进行多种逆境处理，采用荧光定量PCR分析组织中萜类合成酶基因的表达模式。结果 伤害和火烙均可诱导茎干萜类合成酶转录水平的表达，火烙法诱导效果更明显；低温抑制各类萜类合成酶的转录；愈伤组织的处理中，茉莉酸甲酯（MeJA）对萜类合成酶转录的诱导效果最显著。结论 伤害和火烙均可诱导茎干中萜类的合成，但火烙效果更好，低温不利于白木香结香，多种处理均可诱导愈伤组织萜类合成，其中MeJA诱导效果最佳。]]> 1，赵文婷^{1, 3}，金 钺¹，熊换英^{1, 4}，杨 云²，黄俊卿^{1, 4}]]> 1543true 目的 研究低温砂层积处理后不同发芽温度（10、15、20、25、30 ℃）及不同质量浓度的赤霉素（GA₃）和萘乙酸（NAA）对穿龙薯蓣种子萌发的影响。方法 采用培养皿培养法，对种子设置低温层积、不同质量浓度的GA₃和NAA浸种处理，观察记录种子发芽率和发芽势并进行统计分析。结果 穿龙薯蓣种子经4 ℃低温砂层积后，在25 ℃条件下发芽率和发芽势最高，分别为80.00%和53.33%；而采用100 mg/L GA₃直接浸泡未层积种子24 h，发芽率和发芽势可达66.65%和48.35%；1 mg/L NAA浸泡12 h发芽率和发芽势为58.35%和43.35%；采用低温砂层积发芽进程最快，种子第6天开始发芽，第12天发芽完毕。结论 采用4 ℃低温砂层积60 d后在25 ℃下进行催芽或采用100 mg/L GA₃进行催芽处理有利于穿龙薯蓣种子萌发。]]> ]]> 1542true 目的 建立了同时测定蟾酥中活性成分的HPLC方法，并对5个不同产地的药材中5种活性成分进行测定。方法 采用HPLC法测定，色谱柱为Hypersil ODS柱（250 mm×4.6 mm，25 μm），流动相为醇-水（50∶50），检测波长296 nm，柱温30 ℃，体积流量1 mL/min，并在此色谱条件下测定不同产地经60%甲醇回流提取的蟾酥样品中活性成分的量。结果 各成分的质量浓度和峰面积具有良好的线性关系，且有很好的分离度。日蟾毒它灵、蟾毒灵、沙毒精、华蟾酥毒基、脂蟾毒配基平均回收率为99.9%、99.6%、97.9%、96.7%、99.5%，RSD为2.8%、3.2%、1.9%、1.0%、3.4%。不同产地蟾酥样品的HPLC色谱图差别明显，所含成分的种类和质量分数差异较大。结论 本方法简便、灵敏度高，具有实用性，可作为蟾酥药材的质量控制方法。]]> 1541true 目的 分析刺五加功能基因密码子的使用方式及其影响因素。方法 以刺五加的17条功能基因为材料，利用CodonW和SPSS软件进行多元统计分析和对应性分析。结果 刺五加功能基因密码子3个位置的GC量依次为51.03%、41.23%和40.04%，三者均与整个编码区的GC量显著相关（P＜0.05），GC12与GC3的相关系数为0.262，未达到显著水平。同义密码子的相对使用频率大于1的密码子共27个，其中22个以A或T碱基结尾。对应性分析的结果表明，第1轴显示了22.78%的差异，与GC3、密码子适应指数和密码子偏好指数均极显著相关（P＜0.01），相关系数分别为0.786、0.686和0.617，与有效密码子数的相关性未达显著水平。第2轴显示了19.28%的差异，且仅与有效密码子数极显著相关（r＝0.635）。确定了刺五加功能基因的17个最优密码子。结论 刺五加的功能基因偏好使用以A或T碱基结尾的密码子，其使用模式受选择和突变的共同影响。]]> 1540true 目的 对建泽泻原萜烷型三萜类成分生物合成关键酶鲨烯合酶（squalene synthase，SS）进行基因全长的克隆和生物信息学分析。方法 以建泽泻总RNA为模板，运用同源克隆法和RACE技术克隆建泽泻SS基因的cDNA全长，并通过DNAMAN软件及ExPASy在线分析等方法对其进行生物信息学研究。结果 获得建泽泻SS基因全长cDNA，GenBank注册号为JX866770，序列分析表明，所克隆的cDNA序列全长为1 577 bp，包含一个长1 230 bp的开放阅读框架，编码409个氨基酸的蛋白，与其他药用植物具有较高的同源性。预测该蛋白的相对分子质量为4.68×10⁴，等电点为5.97，无信号肽，包含2个富含天冬氨酸（DXXDD）的保守功能域。结论 首次克隆获得建泽泻SS基因的全长cDNA，为泽泻原萜烷型三萜类成分生物合成途径阐明与生物工程应用提供科学依据。]]> 1，谷 巍^{1, 2}，周娟娟¹，吴启南¹，徐 飞¹，高 杰¹]]> 1539true 目的 建立稳定性高、重现性好，适合地枫皮遗传差异分析的ISSR-PCR反应体系。方法 利用正交试验设计，对地枫皮ISSR-PCR反应的5个因素（Mg²⁺、dNTPs、引物、Taq酶和模板DNA浓度）进行优化，PCR结果用SPSS统计软件分析，在此基础上对PCR反应过程中的退火温度和循环次数进行梯度检测。结果 大部分因素的不同水平对PCR反应有显著影响，其中Taq酶影响最大；地枫皮ISSR-PCR最佳反应体系（20 μL）为：Mg²⁺ 1.60 mmol/L、dNTP 0.22 mmol/L、引物0.90 μmol/L、Taq酶0.50 U、模板DNA 70.00 ng；最佳退火温度和循环次数分别为51.8 ℃和40次；从62条引物中筛选出13条扩增稳定、多态性丰富的ISSR引物。结论 建立的地枫皮ISSR-PCR反应体系，经过16份地枫皮样品检验，证明该体系稳定可靠，可用于地枫皮遗传差异分析。]]> 1538true 目的 建立高效液相色谱波长切换技术同时测定葛根中3′-羟基葛根素、葛根素、大豆苷、染料木苷、大豆苷元、染料木素、芒柄花素、鹰嘴豆芽素A 8种成分的量，并建立了葛根的特征指纹图谱，为葛根质量的全面评价提供了科学依据。方法 采用Agilent Zorbax SB-C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液，梯度洗脱，体积流量1 mL/min，柱温30 ℃，进样量10 μL。结果 3′-羟基葛根素、葛根素、大豆苷、染料木苷、大豆苷元、染料木素、芒柄花素、鹰嘴豆芽素A的质量浓度分别在16.10～161.00、103.8～1 038.0、19.82～198.20、2.788～27.880、4.112～41.120、0.258 4～2.584 0、0.336 2～3.362 0、0.080 5～0.805 0 mg/L内与色谱峰峰面积呈良好的线性关系，平均回收率均在98.0%～99.4%，RSD均小于3.0%（n＝6）；在指纹图谱研究中，以葛根素为参照峰，标定了27个共有峰，指认其中7个峰，分析10个产地的葛根与共有模式之间具有良好的相似性，相似度均在0.97以上。结论 建立的测定方法及指纹图谱分析方法简便、准确、重复性好、专属性强，为葛根质量的全面评价提供了科学依据。]]> 1537true 目的 对收集的22批救必应药材进行性状、显微、HPLC指纹图谱鉴别。方法 以粉末显微特征为主，并采用HPLC法，色谱柱为Dikma C₁₈（200 mm×4.6 mm，5 μm），以乙腈（A）-0.1%磷酸水溶液（B）为流动相，进行梯度洗脱，体积流量为1.0 mL/min；检测波长210 nm；柱温35 ℃。结果 性状、粉末鉴别评价所得出的药材质量优劣结果与指纹图谱相似度评价结果相一致，所建立的指纹图谱精密度、重复性、稳定性良好，可反映救必应药材的整体特征。结论 所建立的性状、粉末鉴别方法可以用于救必应药材及其混淆品的鉴别，HPLC指纹图谱可用于救必应药材的质量评价。]]> 1，毕福钧¹，陈 蔼²]]> 1536true 目的 分析外源多胺对白桦悬浮细胞生长和三萜积累的影响。方法 在白桦悬浮细胞的生长末期添加0.1 mmol/L和1.0 mmol/L的腐胺（Put）、精胺（Spm）和亚精胺（Spd），采用比色法和RT-PCR方法分析白桦三萜量及其合成关键酶羽扇豆醇合酶（LUS）基因的表达。结果 除1.0 mmol/L Spm处理使白桦悬浮细胞的活力和干质量积累降低外，其他处理均提高了白桦悬浮细胞的活力、干质量积累和三萜产量，且随着处理时间的延长，干质量积累和三萜产量呈增加趋势。其中1.0 mmol/L Put在处理的第2天对细胞干质量和三萜产量的促进效应最大，分别比对照增加了38.89%和116.35%。LUS基因的RT-PCR检测结果进一步证实了多胺对白桦三萜积累的促进作用。结论 Put可有效促进白桦悬浮细胞生长和三萜积累。]]> 1535true 目的 研究不同质量浓度的KNO₃、KMnO₄、H₂O₂、GA₃以及蒸馏水浸种不同时间，对桔梗种子萌发及幼苗生长的影响。方法 采用双层滤纸培养法，在25 ℃恒温，12 h光照的光照培养箱中将浸种后的种子进行培养，观察记录种子的发芽势、发芽率、发芽指数及幼苗的根长和苗高，并对数据进行统计分析。结果 0.150 g/L GA₃浸种24 h是打破桔梗种子休眠、促进桔梗种子萌发和幼苗生长的最佳浸种处理方法；此外，5 mg/mL KNO₃浸种处理12 h也是有效的浸种处理方法。结论 筛选出桔梗种子萌发的最适浸种试剂及浸种时间，对桔梗的种子育苗及人工栽培具有重要指导意义。]]> 1，胡正海²]]> 1534true 目的 探寻破除西伯利亚白刺种子休眠的方法，提高其发芽率。方法 采用温水催芽、低温沙藏、98%浓硫酸、GA等不同方法对种子进行处理后的发芽试验，测定发芽率、发芽势、到达发芽高峰期的时间。结果 温水催芽的发芽率和发芽势分别为30%和10%，种子7 d开始萌动，10 d达到发芽高峰。低温沙藏37 d的发芽率和发芽势分别为55.5%、26.5%，种子2 d开始萌动，10 d达到发芽高峰。低温沙藏95 d的发芽率和发芽势分别为86.8%、60.3%，种子2 d开始萌动，7 d达到发芽高峰。98%浓硫酸处理2 h的发芽率和发芽势均为90%，种子1 d开始萌动，4 d达到发芽高峰。98%浓硫酸处理2 h后播种在MS＋0.5 g/mL GA＋0.5 g/mL BA的暗培养基上，发芽率和发芽势均为98.1%，种子1 d开始萌动，4 d达到发芽高峰。结论 西伯利亚白刺种子休眠属种壳休眠，98%浓硫酸处理2 h后接种于MS＋0.5 g/mL BA＋0.5 g/mL GA的暗培养基上培养，打破硬实种子休眠效果最好，发芽率最高。]]> 1, 2，刘 蕾¹，孙静茹¹，王宁宁¹，邓文红 ¹，沈应柏¹]]> 1533true 目的 采用变性梯度凝胶电泳（DGGE）技术对冬虫夏草促繁地土壤真菌多样性进行初步研究。方法 利用PCR方法选择特异性引物ITS3-GC和ITS4扩增ITS rDNA基因的ITS2片段，结合DGGE分离技术，并借助生物信息学软件进行分析。结果 所测的土壤样品中真菌ITS2基因序列与GenBank已报道的丝盖伞属Inocybe (Fr.) Fr.、口蘑属Tricholoma (Fr.) Staude、根肿黑粉菌属Entorrhiza C.A. Weber及未确定的子囊菌Ascomycota、土壤真菌等的序列相似性较高，土壤真菌种群结构相似性仅有19.4%～50.1%。结论 冬虫夏草促繁地土壤真菌多样性丰富。]]> 1532true 目的 研究脱落酸（ABA）和赤霉素（GA）相关的6个基因（NCED、CYP707A、ABI2、PP2C、GA20ox2、GA20ox3）在滇重楼种子休眠解除过程中的表达特点。方法 分别选取20 ℃层积和20 ℃转4 ℃层积处理后处于不同休眠解除阶段的滇重楼种子为材料，应用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）方法分析不同层积处理后6个基因在胚和胚乳中的表达水平。结果 在滇重楼种子层积过程中CYP707A、NCED、GA20ox2、GA20ox3和ABI2基因在胚和胚乳中表达有差异，而PP2C表达水平无明显变化规律；CYP707A在低温层积后表达水平显著高于高温层积，尤其是在胚中，而NCED、GA20ox2、GA20ox3和ABI2在高温和低温层积后均有较高的表达水平，且在胚中的表达水平高于胚乳中。结论 所筛选出的NCED、CYP707A、ABI2、GA20ox2、GA20ox3基因参与滇重楼种子休眠解除过程，可以作为研究滇重楼种子休眠过程的重要基因。]]> 1531true 目的 分析四倍体菘蓝Isatis indigotica基因组DNA甲基化水平和模式。方法 采用甲基化敏感扩增多态性（methylation sensitive amplification polymorphism，MSAP）方法，对四倍体菘蓝基因组DNA的甲基化水平和模式进行分析。结果 筛选36对MSAP选择性引物进行扩增，共得到1 733条清晰的条带。二倍体菘蓝基因组胞嘧啶甲基化水平为24.05%，四倍体菘蓝基因组胞嘧啶甲基化水平为23.70%。检测到83个（4.86%）CCGG位点在四倍体菘蓝基因组中发生了DNA甲基化模式的改变，其中37个（2.13%）位点发生了超甲基化，36个（2.08%）位点发生了去甲基化。结论 二倍体和四倍体菘蓝在CCGG位点上存在胞嘧啶甲基化状态的改变。]]> 1，徐延浩²]]> 1530true 目的 建立白芨愈伤组织诱导、增殖和分化再生体系。方法 以MS为基本培养基，应用正交试验方法设计植物生长调节剂组合和质量浓度配比，研究不同外植体及植物生长调节剂对白芨愈伤组织形成、增殖和分化的影响。结果 白芨假鳞茎为诱导愈伤组织形成的最佳外植体；1.0 mg/L 6-苄氨基嘌呤（6-BA）与2.0 mg/L 2, 4-二氯苯氧乙酸（2, 4-D）组合不仅可诱导白芨愈伤组织形成，还有利于愈伤组织分化成芽。1.0 mg/L 6-BA与3.0 mg/L 2, 4-D的组合促进愈伤组织增殖，增殖系数为7.8；在分化培养基中附加0.5 mg/L噻二唑苯基脲（TDZ），可提高愈伤组织分化率。结论 白芨愈伤组织诱导的最佳培养基为MS＋6-BA 1.0 mg/L＋2, 4-D 2.0 mg/L；最佳增殖培养基为MS＋6-BA 1.0 mg/L＋2, 4-D 3.0 mg/L；分化最佳培养基为MS＋6-BA 1.0 mg/L＋2, 4-D 2.0 mg/L＋TDZ 0.5 mg/L。]]> 1529true 目的 建立驴皮药材RAPD分析方法并用于伪品马皮的鉴别。方法 采用化学试剂盒法确定了驴皮药材中DNA提取的最佳条件，采用L₁₆(4⁵) 正交设计方法，针对Taq酶、Mg²⁺、dNTP、模板DNA、引物设计了5因素4水平的正交试验，优化了RAPD-PCR反应条件。结果 驴皮药材RAPD-PCR反应体系的最佳条件为25 μL反应体系中含有Taq酶1.5 U、Mg²⁺ 0.15 mmol/L、dNTP 0.25 mmol/L、模板DNA 1.5 μL、引物0.5 μmol/L；PCR反应条件为95 ℃预变性5 min，94 ℃变性30 s，37 ℃退火30 s，72 ℃延伸1 min，共30个循环，最后72 ℃延伸7 min。RAPD反应结果中300～400 bp处的条带可作为鉴别驴皮及其伪品的特异性条带。结论 所建立的RAPD分析方法具有简便快捷、稳定性好、重现性高的特点，可用于驴皮药材及其伪品马皮的鉴别。]]> 1，史碧云^{1, 2}，张福生¹，李晓伟^{1, 2}，耿伟华³，杨 永³，刘会来³，秦雪梅¹]]> 1528true 目的 利用筛选的党参多态性微卫星引物进行党参群体遗传多样性研究。方法 利用磁珠富集法分离党参核基因组微卫星引物，并选取党参4个野生居群48个样品进行遗传多样性分析。结果 筛选出了10个能成功扩增党参样品的微卫星引物；这些引物扩增产物的等位基因数目为5～14个，观察杂合度范围为0.446～0.833，期望杂合度范围为0.697～0.895；使用4个党参近缘物种（轮叶党参、球花党参、鸡蛋参和长叶党参）进行引物通用性检测，发现有5对引物（Cpi01、Cpi04、Cpi06、Cpi07和Cpi08）能同时在4个物种中成功扩增。结论 筛选出的多态性微卫星引物能用于党参的遗传多样性和群体遗传结构研究，同时也能够用于党参属其他近缘物种的群体遗传学研究。]]> 1，刘晓东²，王小琦²，范 彬²，王兴东²，赵桂仿¹]]> 1527true 目的 建立并优化水蛭ISSR-PCR反应体系及扩增程序，为水蛭进行遗传多样性研究提供依据。方法 使用引物ISSR825，采用正交优化方法对影响PCR反应的Mg²⁺、dNTP、引物、Taq DNA聚合酶、模板DNA进行了体系优化，同时对引物的最佳退火温度进行了选择。结果 在25 μL总体积中，其中包括10×PCR 缓冲液 2.5 μL、Mg²⁺ 2.0 mmol/L、dNTP 0.25 mmol/L、引物0.8 μmol/L、Taq DNA聚合酶2.5 U、模板DNA 2.0 ng/μL，最佳退火温度为49.7 ℃。结论 所建立的最佳ISSR-PCR反应体系稳定可靠，可用于水蛭遗传多样性评价、不同种源鉴定及亲缘关系分析。]]> 1，刘 庚¹，常素慧¹，白秀娟^{1, 2}，杨洪雁²，朱洪强¹]]> 1526true 目的 在不同海拔进行当归Angelica sinensis生态适应性实验，探索影响当归阿魏酸积累的关键因子。方法 通过田间实验测定当归阿魏酸量的变化和生理生化指标、光合参数、生态因子。结果 当归根中阿魏酸量随海拔升高而增加，且海拔2 780 m处理比海拔2 360 m处理高14.5%，差异显著（P＜0.05）。分析影响当归阿魏酸积累的关键因子表明，降雨量（r＝0.898 8）和温度（r＝?0.799 1）是关键生态因子，可溶性糖（r＝?0.974 9）和超氧化物歧化酶（SOD）（r＝?0.840 8）是关键生理生化因子，湿度（r＝0.969 9）和光合活性辐射(r＝0.946 7)是关键光合参数因子。结论 适当升高种植海拔，增加降雨量和湿度，降低温度和可溶性糖量均有利于当归中阿魏酸的转化积累。]]> 1，晋 玲¹，张恩和²]]> 1525true 目的 研究蛇足石杉的最高耐受温度及耐受时间，为人工栽培蛇足石杉提供温度调控参考。方法 通过在25、30、35、40 ℃的不同温度下胁迫处理蛇足石杉，测定其叶片中的可溶性糖量、可溶性蛋白质量、游离脯氨酸量及超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化物酶（POD）活性在不同处理时间的量，并对其进行相关性分析。结果 随着温度的升高，各项指标均有大幅度的变化，可溶性糖和游离可溶性脯氨酸的量呈上升的趋势，可溶性蛋白质量呈下降趋势，POD和SOD活性均呈现下降的趋势。35 ℃高温胁迫达8 d后，对蛇足石杉的各项生理指标有较大影响，外部形态表现轻度失水，继续处理至12 d后，叶片发黄，植株基本死亡；40 ℃高温胁迫6 d后，蛇足石杉的各项生理指标均出现较大幅度的变化，SOD活性显著下降，叶片发黄，第8天植株完全死亡。结论 高温对蛇足石杉的生长有明显影响，其生长温度在25～30 ℃为宜，长时间持续超过35 ℃对其生长有明显的影响，40 ℃为极限高温，短期内会引起植株死亡。]]> 1524true 目的 采用已建立的乌药HPLC指纹图谱检测方法，对不同产地乌药进行鉴别研究。方法 以Symmetry C₁₈（150 mm×4.6 mm，5 μm）为色谱柱，乙腈-水为流动相进行梯度洗脱，在235 nm波长下以乌药醚内酯为参照物测定了6个不同产地乌药的指纹图谱。按照乌药HPLC指纹图谱共有模式，标定6个共有指纹峰，并对不同产地乌药指纹图谱进行相似度比较。结果 台乌药和其他5个产地乌药的指纹图谱，存在显著的差异。同时也对该指纹图谱检测方法进行了验证。结论 通过HPLC指纹图谱方法，能够明显区别台乌药与其他产区的乌药，该方法可作为台乌药真伪鉴别的有效方法。]]> 1, 3，陈方亮²，余翠琴²，金朱明^{1, 3}，黄瑞平²]]> 1523true 目的 对怀地黄3-酮酯酰CoA-硫解酶（Rehmannia glutinosa f. hueichingensis 3-ketoacyl CoA-thiolase，RghKAT）cDNA全长基因进行克隆及分析，为怀地黄分子育种提供候选基因和理论依据。方法 根据其他植物ARGOS基因序列的保守结构域设计简并引物，采用RT-PCR和RACE技术，获得RghKAT cDNA全长序列；通过生物信息学技术对其核苷酸序列和氨基酸序列进行比对；利用实时荧光定量PCR技术检测了其在2个时期、10个组织的表达。结果 RghKAT基因全长1 713 bp，包含了1 395 bp的开放阅读框（ORF），编码464个氨基酸；同源比对和系统进化分析表明，RghKAT的核苷酸序列与葡萄、番茄、毛果杨、拟南芥和小麦的KAT核苷酸序列同源性分别达84%、82%、82%、79%、73%；RghKAT编码的氨基酸序列与矮牵牛、葡萄、黄瓜、拟南芥和小麦的KAT氨基酸同源性分别为88%、88%、86%、87%、78%；各物种KAT酶进化树符合物种进化规律；理化性质表明该蛋白为略成碱性的稳定蛋白质，蛋白质二级结构主要由α-螺旋、不规则卷曲、β-折叠和β-转角构成；在N端存在一个由70个氨基酸残基组成的信号肽；RghKAT蛋白三维结构具有硫解酶典型的特征序列；表达谱分析表明，RghKAT mRNA在各时期、各组织中均有表达，盛花期花瓣中表达最强，而在幼苗期叶中表达量最低。结论 成功克隆了RghKAT cDNA全长序列，具有KAT基因的结构特性及其产物硫解酶典型的特征序列，其在盛花期花瓣中表达量最高。]]> 1, 2，张永华^{1, 2}，张 喻^{1, 2}，陈艳梅^{1, 2}，白妍妍^{1, 2}，魏海方^{1, 2}，段红英^{1, 2}，周春娥^{1, 2}]]> 1522true 目的 对显齿蛇葡萄Ampelopsis grossedentata查耳酮合成酶（CHS）基因进行克隆及序列分析。方法 根据已经克隆的植物基因的保守序列设计一对引物，以显齿蛇葡萄总RNA为模板，采用RT-PCR的方法扩增CHS基因序列并连接到pMD18-T Simple载体上，阳性克隆经PCR检测后进行测序。结果 得到一段1 173 bp的序列，序列分析表明，该片段编码390个氨基酸，与其他高等植物CHS基因氨基酸序列同源性在67.9%以上。结论 首次从显齿蛇葡萄中克隆了CHS基因，为有效利用该基因奠定了基础。]]> 1521true 目的 获得白花丹参丙酮酸脱羧酶（SmPDC）全长基因，分析该基因在白花丹参不同组织部位，以及缺氧胁迫处理后的该基因表达差异。方法 利用cDNA文库筛选获得SmPDC基因全长，利用半定量RT-PCR，分析SmPDC基因在白花丹参不同部位的表达情况，及缺氧处理条件下的表达情况。结果 获得的SmPDC基因由2 190个核苷酸组成，编码605个氨基酸，蛋白相对分子质量约6.485×10⁴，等电点pI 5.49；半定量RT-PCR检测，该基因在丹参的根中表达量最高，其次是茎和叶；缺氧胁迫处理会诱导该基因的表达，随胁迫时间延长表达量逐渐增加。结论 白花丹参SmPDC基因是PDC家族新成员，其功能与植物耐缺氧代谢途径有关。]]> 1520true 目的 对24份不同产地石斛属样品的遗传多样性和亲缘关系进行分析。方法 采用ISSR分子标记技术和非加权平均距离法（UPGMA）对24份石斛属样品进行遗传多样性和聚类分析。结果 从100条ISSR引物中共筛选出6条多态性稳定、清晰的引物， 24份石斛样品共扩增出847个DNA片段，平均每个引物扩增出141个DNA片段，其多态性为100%。结论 24份不同产地石斛样品被划分为6个类群，遗传多样性非常丰富。]]> 1, 2, 3，卜朝阳¹，吕维莉²，苏建睦³，黄昌艳¹，李春牛¹]]> 1519true 目的 以三年生白桦为试材，研究白桦植株中三萜合成前体及其三萜组分积累变化，并对白桦植株中三萜组分积累消长特征进行分析。方法 利用高效液相色谱仪及紫外分光光度计对白桦枝皮和叶进行总三萜、白桦脂醇和黄酮等8种成分检测。结果 白桦植株枝皮和叶中三萜物质各组分积累特征显著不同。在生长季节（5～9月）枝皮中2, 3-氧化角鲨烯、白桦脂酸、白桦脂醇、齐墩果酸、达玛烯二醇、固醇及总三萜积累高峰基本为7～9月，其中2, 3-氧化角鲨烯量较低，最高为0.067 mg/g（7月），白桦脂酸量达8.34 mg/g，而齐墩果酸量高达37.51 mg/g（9月）；达玛烯二醇量最高为14.18 mg/g，总三萜量达168.17 mg/g（7月）。叶中总三萜量为8月份较高，达126.11 mg/g，而2, 3-氧化角鲨烯、白桦脂醇和齐墩果酸量均极低，甚至未能检测到。枝皮和叶片中黄酮积累高峰分别为5月和8月，其中2个月份质量分数分别为53.02 mg/g和58.49 mg/g。消长分析表明，白桦枝皮和叶中三萜组分积累与总三萜积累规律不相吻合，枝皮总三萜、达玛烯二醇、齐墩果酸、白桦脂酸呈S型曲线，白桦脂醇积累呈倒“V”曲线，且黄酮积累与总三萜积累趋势相反。叶中总三萜和黄酮物质积累趋势相近，达玛烯二醇和2, 3-氧化角鲨烯积累趋势相近。结论 明确了三年生白桦枝条和叶片中三萜及黄酮物质积累、分布特征，为白桦枝条皮和叶中三萜资源的挖掘、可持续利用及代谢调控奠定了基础。]]> 2013/12/17 9:09:54 1，尹 静¹，孙建广¹，詹亚光^{1, 2}，马泓思¹，王 艳¹，梁 甜¹]]> 1518true 目的 研究由石蒜愈伤组织建立细胞悬浮培养体系的条件及其生物碱的累积。方法 以石蒜鳞茎为外植体进行愈伤组织的诱导，筛选出优质的愈伤组织进行悬浮培养，考察了激素、接种量、肌醇和条件培养对石蒜悬浮细胞系建立的影响，并利用HPLC检测石蒜悬浮细胞和培养基中生物碱的量。结果 石蒜悬浮细胞系培养的最佳条件为：MS为基本液体培养基，添加2, 4-D 0.5 mg/L＋KT 0.1 mg/L，肌醇300 mg/L，接种量15%；对数期的培养基能明显缩短细胞系生长的延迟期；细胞系和培养基中加兰他敏分别是石蒜鳞茎中的4.18和0.69倍。结论 利用石蒜愈伤组织建立了较好的细胞悬浮培养体系，且石蒜悬浮细胞系是一种获取加兰他敏的较好途径。]]> 2013/12/17 9:09:54 1，陈 娜¹，周建辉¹，董召荣²，李 勇¹，王梅方¹，高翠云¹]]> 1517true 目的 研究光质对灵芝菌丝体生长及三萜酸量和组分的影响。方法 采用新型LED冷光源设置不同光质处理，动态观测灵芝菌丝体生长、总三萜酸量及三萜酸组分的变化情况。结果 不同光质处理灵芝菌丝体形态、生长速度、生物量和总三萜酸量及单体三萜酸在组分、相对量及各组分间的比例都有所变化。蓝光处理菌丝体在整个培养期始终保持稳定增长；红光处理菌丝体前期生长速度及生物量最大，但是中后期生长速度显著下降，生物量增加缓慢，次于蓝光；绿光处理菌丝体前中期生长速度及生物量均最小，然而培养后期增加明显，干物质迅速积累。灵芝三萜酸在菌丝体培养第7天时已大量产生，随培养时间延长种类增多，组分量降低。绿光和蓝光处理对提高灵芝菌丝体三萜酸种类和量均有明显优势。结论 光质对灵芝菌丝体生长及三萜酸量和成分均有显著影响，蓝光对促进灵菌丝体生长及三萜酸积累综合优势明显。]]> 2013/12/17 9:09:54 1，陈若芸²，李保明²，陈向东¹，赵 洲¹，兰 进¹]]> 1516true 目的 考察东北不同产地人参及其加工品种的总皂苷量和10种单体皂苷量，为其质量标准的制定和适宜种植的区域提供可供参考的依据。方法 分别测定10个不同产地生晒参以及红参的总皂苷和10种单体皂苷量，并采用DTOPSIS分析法对结果进行分析。结果 吉林长白、集安、抚松3个产地的生晒参和红参在皂苷类成分量方面均达到了《中国药典》2010年版标准，并且有较优表现，长白、集安、抚松、靖宇4个产地的生晒参和红参皂苷类成分DTOPSIS分析中综合评价值较高。结论 不同产地的生晒参以及红参药材的皂苷类成分量差异较大，质量参差不齐，长白、抚松、集安、靖宇4个产地的人参都来自国家GAP人参种植基地，从另一个侧面反映了GAP规范化种植对于保障人参质量的重要性。]]> 2013/12/17 9:09:54 1，叶正良^{1, 2}，郭巧生¹，路政民³]]> 1515true 目的 建立HPLC-DAD法同时测定并比较分析陇西地区防风类药材中升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷、升麻素、亥茅酚苷、补骨脂素、欧前胡素、佛手苷内酯、花椒毒素的量。方法 采用甲醇回流法得到提取物，HPLC-DAD法测定提取物中8种成分量，乙腈-水梯度洗脱，体积流量1.0 mL/min，检测波长为254 nm，柱温为30 ℃。结果 8种成分的回归方程r值均在0.999 2～0.999 9，平均加样回收率在96.2%～104.1%，RSD均＜3%。防风中以4种色原酮为主要成分，同时含有4种香豆素；葛缕子及白花前胡中未检测到色原酮，而香豆素量均高于防风。结论 该方法简便、准确，重复性好，可用于防风类药材中8种成分的测定。陇西地区的2种习用防风从8种主要成分量上看不能代替防风使用。]]> 2013/12/17 9:09:54 1，郜玉钢²，张秋菊³，张连学²，金 勇⁴]]> 1514true 目的 克隆鱼腥草查耳酮合成酶1（CHS1）基因并分析其蛋白质序列。方法 根据已经克隆的植物CHS基因的保守序列设计一对引物，以鱼腥草总RNA为模板，采用RT-PCR和SON-PCR的方法快速获得CHS基因序列并连接到pMD18-T Simple载体上，阳性克隆经PCR检测后进行测序。结果 得到一段1 188 bp的序列，序列分析表明，该片段编码395个氨基酸，与其他高等植物CHS基因氨基酸序列同源性在62.3%以上，生物信息学分析表明，该蛋白含有CHS家族的特征多肽序列“RLMMYQQGCFAGGTVLR”和“GVLFGFGPGL”，不含信号肽序列。相对荧光定量PCR分析表明，CHS1基因在花中的表达量最高，其次是地上茎，再次是地下茎，叶片中表达量最低。结论 首次从鱼腥草中克隆了CHS1基因，为有效利用该基因奠定了基础。]]> 2013/12/3 11:15:34 1，伍贤进¹，刘胜贵¹，唐玉莲¹，贺安娜¹，徐 杰^{1, 3}，吴成就^{1, 2}]]> 1513true 目的 研究1个白木香倍半萜合酶（ASS）的亚细胞定位，确定其功能区域，并比较3种瞬时表达体系在亚细胞定位研究中的优劣。方法 从白木香愈伤组织中提取总RNA，采用特异引物RT-PCR方法克隆倍半萜合酶ASS基因，并连接于pEZS-NL载体和pFGC5941GFP改造载体上，分别构建pFGC5941-GFP-ASS、pEZS-NL-ASS-GFP 2种植物表达载体，分别利用根癌农杆菌侵染烟草叶片、基因枪轰击洋葱表皮细胞、PEG转化白木香原生质体3种技术进行瞬时转化表达，激光共聚焦显微镜下观察表达出的绿色荧光蛋白（GFP）融合蛋白的亚细胞定位。结果 在烟草叶片表皮细胞、洋葱表皮细胞及白木香原生质体中，融合蛋白绿色荧光均能被观察到。ASS基因与GFP的融合蛋白产物在烟草叶片中定位于胞质，在洋葱表皮中定位于胞质和细胞核，白木香原生质体中定位于胞质和质体。结论 ASS基因在白木香原生质体胞质及质体定位；对3种体系的结果比较表明，应用不同体系研究蛋白的亚细胞定位可能出现不同的结果，这可能与同源或异源表达的植物细胞的特性有关。]]> 2013/12/3 11:15:34 1, 2，魏建和^{1, 4}，孟 冬³，刘晓东²，高志晖¹]]> 1512true 目的 比较传统与2年生栽培蒙古黄芪药材的化学成分，探讨化学成分差异性。方法 采集HPLC-ELSD指纹图谱信息，测定指标成分黄芪甲苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、总多糖、浸出物的量。对传统黄芪和2年生栽培黄芪样品进行指纹图谱相似度分析、代谢组学多元统计分析以及质量比较。结果 传统黄芪的毛蕊异黄酮葡萄糖苷和总多糖量明显高于2年生栽培黄芪，但二者的黄芪甲苷量和浸出物量没有差别；HPLC-ELSD代谢组学分析技术可以将传统黄芪与2年生栽培黄芪明显区分开，引起二者明显区别的主要差异性化学成分为毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花苷、峰4和5、黄芪皂苷II、峰13、黄芪皂苷I。结论 基于HPLC-ELSD代谢组学技术结合化学指标成分的测定，可用于传统黄芪与2年生栽培黄芪的质量评价研究。]]> 2013/12/3 11:15:34 1, 2，秦雪梅²，李震宇¹，何 盼^{1, 2}，高凡茸^{1, 2}，李 科¹，周 然³]]> 1511true 目的 对4种不同树种来源的桑黄菌株进行分离、鉴定，并对次生代谢物进行分析。方法 将分离纯化的菌株采用光学显微镜观察其菌丝形态特征，利用ITS序列分析技术对其进行分子鉴定，采用比色法分析次生代谢物量。结果 从松树桑黄、桑树桑黄、暴马丁香树桑黄、杨树桑黄分离的菌株，其菌丝体形态特征相同，呈有隔分支，而菌落的生长速率和外观颜色不同，其中杨树桑黄的生长速率最快，达0.47 cm/d。进一步通过ITS序列分析发现，松树桑黄菌株为松木层孔菌Phellinus pini，桑树桑黄菌株为裂蹄木层孔菌Phellinus linteus，暴马丁香桑黄菌株和杨树桑黄菌株为鲍氏木层孔菌Phellinus baumii。对多糖、黄酮、多酚和三萜物质的分析发现，子实体和菌丝体中均含有这些次生代谢物，但其量与菌株来源有关。暴马丁香树来源的子实体中多糖量最高，为98.20 mg/g；杨树来源的子实体中黄酮、三萜、多酚量最高，分别为548.49、1.48、33.70 mg/g。菌丝体中多糖、黄酮、多酚和三萜物质产量累积最高的菌株来源于桑树，分别为259.64、223.11、43.78、24.80 mg/L；同时发现，菌丝体中的三萜量高于子实体，其中桑树菌丝体中的三萜量是子实体的7倍左右。结论 4株桑黄菊菌株菌丝体形态基本无差异，rDNA ITS序列分析技术可以鉴定桑黄菌株；4株桑黄菌丝和子实体中次生代谢物量存在差异。]]> 2013/12/3 11:15:34 1510true 目的 研究吴茱萸药材水溶性化学成分的HPLC指纹图谱，并应用系统聚类分析和主成分分析建立吴茱萸药材的化学模式识别方法，以期为吴茱萸药材质量控制与品质评价提供参考。方法 色谱柱为Ultimate XB-C₁₈色谱柱（150.0 mm×4.6 mm，3 μm）；流动相为乙腈-水（含0.5%醋酸和0.04%磷酸）混合溶液，梯度洗脱；体积流量0.8 mL/min；检测波长为327 nm；进样量10 μL；柱温：25 ℃。结果 34批吴茱萸药材有27个共有峰，相似度在0.945～0.997。聚类分析能对《中国药典》2010年版规定的3种吴茱萸药材进行有效识别，并且从水溶性化学成分上揭示吴茱萸药材的种质远近关系，主成分分析结果与聚类分析结果类似。结论 建立的方法能够成功应用于吴茱萸药材的质量评价与控制及品种识别，可为制定吴茱萸质量评价与控制模式提供新的参考依据。]]> 2013/12/3 11:15:34 1509true 目的 从DNA水平对老鹳草种质进行遗传多样性分析，并建立老鹳草稳定的ISSR-PCR反应体系。方法 采用正交试验设计及单因素梯度优化相结合的方法确定老鹳草ISSR-PCR反应体系，对我国20个主要分布区的老鹳草进行ISSR-PCR扩增与检测，扩增结果转化为“0”、“1”矩阵后，利用Popgene32及Ntsyspc-2.1软件对数据进行处理计算遗传距离，并采用UPGMA聚类法构建亲缘关系树状图。结果 15条引物共得到207条清晰可辨的扩增条带，其中有197条呈现多态性，占94.6%，遗传距离变化范围在0.201 8～0.939 4。20份样品分为2大类，聚类较为复杂，大多种质遗传多样性与地理位置及生态环境具有一定的关系。结论 我国老鹳草植物的遗传多样性十分丰富，为筛选优质种质奠定了遗传基础。]]> 2013/11/18 14:47:05 1，王吉华¹，涂秀文¹，朱明慧¹，姜海燕¹，钟 鸣²]]> 1508true 目的 对西藏不同产地17份麻花艽Gentiana straminea样品的遗传多样性进行比较分析。方法 居群采样，以相同产地同属近缘种粗茎秦艽G. crassicaulis为外类群比对，nrDNA ITS区序列分析，构建UPGMA系统树。结果 西藏产麻花艽nrDNA ITS区序列有1个多态性位点；外类群粗茎秦艽6份样品序列完全一致。结论 麻花艽与外类群种间区别明显；17份不同产地麻花艽被划分为2类，遗传多样性较为丰富，为西藏麻花艽药材品质评价及麻花艽核心种质的构建提供基础资料。]]> 2013/11/18 14:47:05 1，赵志礼¹，孟千万¹，嘎 务²，米 玛²]]> 1507true 目的 研究外源NO对NaCl胁迫下水飞蓟种子萌发、幼苗生长生理的影响。方法 用0.05～0.60 mmol/L 亚硝基铁氰化钠（SNP）溶液浸种，在0.7% NaCl胁迫下发芽，观察种子发芽势、发芽率、发芽指数和活力指数。并观察幼苗生长情况，检测叶片中丙二醛（MDA）、光合色素和渗透性物质量，以及保护酶活性。结果 0.7% NaCl胁迫下，水飞蓟种子萌发和幼苗生长受到显著抑制，用0.05～0.60 mmol/L SNP溶液浸种能促进水飞蓟种子萌发和幼苗生长，降低叶片中MDA量，增加光合色素（叶绿素a、叶绿素b、叶绿素总量和类胡萝卜素）和渗透性物质（可溶性糖、可溶性蛋白和脯氨酸）量，提高保护酶[超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化物酶（POD）和过氧化氢酶（CAT）]活性。结论 0.05～0.60 mmol/L SNP浸种能提高水飞蓟种子和幼苗的抗盐能力。不同栽培类型水飞蓟对SNP敏感度不同，其中，0.10 mmol/L SNP对白色种皮处理效果最好；0.40 mmol/L SNP对黑色种皮处理效果最好。]]> 2013/11/18 14:47:05 1506true 目的 对不同来源的肉苁蓉药材进行分析，为肉苁蓉药材的质量控制及采收加工提供依据。方法 采用HPLC-UV方法，对肉苁蓉药材中的松果菊苷和毛蕊花糖苷进行测定；采用HPLC-ELSD法对肉苁蓉药材中半乳糖醇进行测定。基于3种活性成分质量分数的差异，对来源于我国内蒙古、新疆以及宁夏地区的68批肉苁蓉药材进行了分析，以期阐明不同产地、不同加工方法、不同生长期及空间搭载等因素对肉苁蓉药材中活性成分的影响。结果 不同来源肉苁蓉药材活性成分量差异较大，产地以内蒙古和新疆等道地产地药材活性成分量较高；加工方法对肉苁蓉药材不同活性成分量影响不同，松果菊苷和毛蕊花糖苷以切片杀酶的方法为佳，半乳糖醇以直接干燥的方法为佳；不同生长期的肉苁蓉药材活性成分量为花序未长出地面的样品＞花序长出地面但尚未开花的样品＞开花的样品＞花期后的样品；从对卫星搭载样品的分析结果看，毛蕊花糖苷的质量分数具有提高的趋势，而松果菊苷以及半乳糖醇的量变化很小。结论 不同产地、不同加工方法、不同生长期对肉苁蓉活性成分具有影响，为肉苁蓉药材质量控制和采收加工提供参考。]]> 2013/11/18 14:47:05 1，鲍 忠¹，姜 勇¹，孙永强²，徐新文²，屠鹏飞¹]]> 1505true 目的 建立HPLC-MS/MS法同时测定连翘叶中连翘苷、连翘脂素、连翘酯苷A、连翘酯苷F、芦丁、槲皮素、异槲皮苷、绿原酸、(＋)-表松脂素-4′-O-葡萄糖苷的量。方法 采用Dikma Diamonsil C₁₈色谱柱（150 mm×4.6 mm，5 μm），柱温30 ℃，以甲醇-0.02%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱，体积流量0.8 mL/min，进样量10 μL；采用电喷雾离子源进行负离子模式监测，多反应监测模式（MRM）用于定量分析，源喷射电压为?4 500 V，离子源温度为650 ℃。结果 9种化学成分的峰面积和浓度在测定浓度范围内均具有良好的线性关系，加样回收率为97.20%～101.2%，精密度RSD为0.54%～1.24%。结论 本法简便快速、灵敏度高、专属性好，可用于连翘叶中9种活性成分的测定。通过对结果进行分析，连翘叶以5月份采收最佳。]]> 2013/11/18 14:47:05 1504true 目的 对阳春砂姜黄素生物合成途径的关键酶二酮辅酶A合成酶（diketide CoA synthase，DCS）基因的编码cDNA序列进行克隆，为研究阳春砂姜黄素生物合成与基因调控奠定基础。方法 结合阳春砂的转录组注释，根据编码区序列设计引物，通过PCR方法克隆阳春砂DCS基因的编码区cDNA。结果 PCR扩增了一个长1 170 bp的基因片段，该片段编码由389个氨基酸组成的DCS。同源性比对结果显示基因编码蛋白与姜黄的DCS具有氨基酸一致性达96%，与水仙等植物的查耳酮合酶（chalcone synthase，CHS）氨基酸一致性达66%～69%。进化树分析结果显示，与姜黄Curcumae Longae具有较近的亲缘关系。结论 首次从阳春砂中克隆DCS基因获得其编码区序列，为分析基因表达特性及其在姜黄素生物合成中的功能奠定基础。]]> 2013/11/1 15:01:33 1，高 辉¹，吴秋红¹，王 峰^{1, 2}]]> 1503true 目的 分析杜仲及其混伪品的ITS2条形码序列，探讨杜仲及其混伪品鉴定的新方法，为杜绝市售商品药材混乱现象提供技术支撑。方法 提取样品DNA，利用PCR方法对样品进行核基因ITS2 片段扩增，采用DNA克隆测序技术对ITS2基因进行双向测序，所得序列经Seqman程序拼接后，用软件MEGA 4.1进行相关数据分析，并构建邻接（Nighbor-joining, NJ）树。利用网站已建立的ITS2数据库预测ITS2二级结构。结果 杜仲种内最大K2P遗传距离远远小于其与混伪品的种间最小K2P遗传距离；由构建的系统聚类树图可以看出，不同来源的杜仲样品聚成一支，表现为单性系，并与其他混伪品明显分开；比较ITS2二级结构发现，杜仲与其混伪品在4个螺旋区的茎环数目、大小、位置以及螺旋发出时的角度均有明显差异。结论 ITS2序列作为DNA条形码可以有效地鉴别杜仲及其混伪品，为其种质资源鉴定及临床安全用药提供了重要分子依据。]]> 2013/11/1 15:01:33 1, 2，朱金国²，谭建锡²，王利兵^{1, 2}]]> 1502true 目的 研究NaCl胁迫对披针叶黄华Thermopsis laceolata愈伤组织生长及生理特性的影响，拟从细胞水平上探讨其适应盐环境的生理机制。方法 在附加0.2%～1.2% NaCl的继代培养基上对愈伤组织进行胁迫培养，测定其中的可溶性糖、可溶性蛋白质、脯氨酸、丙二醛（MDA）量及超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化物酶（POD）和过氧化氢酶（CAT）的活性，并对其进行分析。结果 当NaCl小于或等于0.8%时，随盐离子质量分数的增加，愈伤组织生长量下降，但与对照均无显著差异，而当NaCl大于0.8%时，愈伤组织生长极为缓慢；可溶性糖和脯氨酸量随NaCl质量分数的升高总体呈先上升后下降趋势，但均高于对照；可溶性蛋白质、SOD、CAT和POD酶活性随NaCl质量分数升高呈先上升后下降趋势；丙二醛量在0.8% NaCl及以下时积累缓慢，而NaCl高于0.8%时急剧增加。结论 披针叶黄华愈伤组织具有适应一定质量分数（≤0.8% NaCl）盐渍生境的能力，其在受到盐胁迫时可以通过增加可溶性渗透调节物质如脯氨酸、可溶性糖类以降低渗透势及增强抗氧化酶活性来缓解盐伤害。]]> 2013/11/1 15:01:33 1，王桔红²，汪小东³，张超强¹ ，王兴龙¹]]> 1501true 目的 建立不同产地车前子药材的高效液相色谱指纹图谱并测定京尼平苷酸和毛蕊花糖苷2种指标成分的量。方法 Zorbax sbaq-C₁₈柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），流动相为乙腈-0.5%的醋酸水溶液，体积流量1.0 mL/min，检测波长254 nm，采用梯度洗脱，建立车前子HPLC指纹图谱。结果 建立了车前子的指纹图谱，确立13个共有峰，京尼平苷酸和毛蕊花糖苷质量分数均值为0.794 3%和0.664 2%。结论 本研究建立的指纹图谱与指标成分测定相结合分析方法快速，可用于评价车前子的质量，并为下一步建立车前子配方颗粒的质量控制方法提供依据。]]> 2013/11/1 15:01:33 1500true 目的 建立枇杷叶有效部位中蔷薇酸、委陵菜酸、马斯里酸、科罗索酸、齐墩果酸和熊果酸的一测多评HPLC-ELSD测定方法。方法 以熊果酸对照品为内参物，建立其与蔷薇酸、委陵菜酸、马斯里酸、科罗索酸、齐墩果酸的相对校正因子，采用校正因子计算这5种三萜酸成分的量，实现一测多评；同时用外标法测定有效部位中该6种成分的量，并比较计算值与实测值的差异，以验证一测多评的合理性、可行性和重复性。结果 15批有效部位中6种三萜酸成分量的计算值与实测值无显著性差异。结论 该方法操作简便，测定结果准确，实现了只用一个对照品同步测定枇杷叶总三萜酸有效部位中6个成分的量，可为中药多指标成分质量评价模式提供参考。]]> 2013/11/1 15:01:33 1, 2，李振华^{1, 2}，华俊磊^{1, 2}，鞠建明²，吕 寒³，马 丽³，李维林³]]> 1499true 目的 对民间常用中药材金沙藤Lygodii Herba原植物来源进行考证。方法 查考本草文献对金沙藤原植物和药用部位的记载及附图，野外调查金沙藤药材的原植物来源，通过产地药农收集金沙藤药材原植物标本，核对药材原植物标本和咨询分类专家。结果 目前市场上金沙藤药材原植物来源主要是海金沙科植物海金沙、曲轴海金沙、小叶海金沙的地上部分，部分地区将云南海金沙、羽裂海金沙和柳叶海金沙用做金沙藤药材；对商品金沙藤药材和不同植物来源的金沙藤TLC分析，显相似的主斑点。结论 为更好地制定金沙藤新的药材质量标准提供依据，并为药厂金沙藤药材收购提供依据，保证金沙藤药材的质量。]]> 2013/11/1 15:01:33 1498true 目的 克隆宁夏枸杞类黄酮/异黄酮生物合成途径中的关键酶查耳酮合成酶（CHS，EC2.3.1.74）。方法 以宁夏枸杞为材料，利用同源克隆和RT-PCR技术得到1条CHS基因，并对其进行生物信息学分析。结果 该家族的cDNA 片段长为1 148 bp，编码382个氨基酸，蛋白相对分子质量为4.168×10⁴，等电点为6.22。氨基酸序列和结构分析显示CHS基因家族有一个活性位点，即查耳酮和二苯乙烯合成酶活性位点。宁夏枸杞CHS（LyCHS）蛋白很可能定位在细胞质。对二级结构和三级结构进行预测，发现LyCHS蛋白中无规则卷曲126个，α螺旋和β折叠分别为166和25个，延伸链65个。系统进化分析表明，LyCHS基因与马铃薯野生种、马铃薯、番茄具有很高的同源性。该基因已在GenBank上注册，基因序列登录号为JQ964237。结论 首次克隆了LyCHS基因片段，为研究其表达特性以及功能提供了基础。]]> 2013/10/23 11:09:58 1，陈阿丽²，潘伟志³]]> 1497true 目的 构建碎米桠Isodon rubescens及其与近缘种之间系统发育关系，准确鉴别碎米桠及其近缘种。方法 提取碎米桠及其近缘种DNA，对核基因ITS片段和叶绿体基因psbA-trnH序列扩增和测序，计算物种种内、种间Kimura 2-parameter（K2P）遗传距离。采用最近距离、相似性搜索、构建Neighbor-joining（NJ）系统聚类树3种方法进行鉴定分析。结果 ITS和psbA-trnH分子系统树支持碎米桠5个居群样本聚为一单系分支，支持率为94%和68%；其中，碎米桠与毛叶香茶菜、香茶菜和内折香茶菜聚在一支，支持率为70%和51%；溪黄草和显脉香茶菜构成姐妹群分支，支持率为81%和63%。碎米桠及其近缘种种间ITS和psbA-trnH序列的K2P遗传距离为0.007 08～0.072 61和0.008 06～0.024 76，均远大于碎米桠种内的遗传距离0～0.001 76和0～0.002 68。结论 碎米桠与毛叶香茶菜、香茶菜和内折香茶菜亲缘关系较近，溪黄草和显脉香茶菜亲缘关系最近。ITS和psbA-trnH序列可以准确鉴别碎米桠及其近缘种。]]> 2013/10/23 11:09:58 1496true 目的 对北柴胡移栽试管植株和种子植株不同生长时期的遗传参数进行分析、比较，为优质北柴胡育种方法的建立和筛选提供依据。方法 将试管植株移栽至大田中，将相同类型的种子播撒至大田中。第二年植株返青后标记并对分蘖数、分枝数、叶片数、叶长、叶宽、拔节数、节间距、茎粗和、株高、花序数等性状值定时进行测量，在种子成熟后采挖根并测量根长、根粗、根质量等药材性状指标。应用SPSS 20.0软件对数据进行统计学分析。结果 北柴胡移栽试管植株在不同生长期遗传参数的相对标准偏差均较小，植株整齐一致，个体差异小，遗传性状稳定；移栽试管植株在不同生长期各性状间的相关性与种子植株存在一定的差异；与种子植株相比，移栽试管植株的根产量和种子产量均具明显优势，药材性状和质量比较均一。结论 北柴胡移栽试管植株的植物学和生药学性状优于种子植株，植物组织培养技术是优良北柴胡种质选育的有效方法。]]> 2013/10/23 11:09:58 1，赵 瑒¹，高可青¹，周 琼¹，王 梅¹，赵玉臣²]]> 1495true 目的 分析腐胺和过氧化氢调控白桦三萜合成中是否存在交互作用。方法 在白桦悬浮细胞的生长末期添加1 mmol/L腐胺（Put）、0.1 mmol/L过氧化氢（H₂O₂）和40 μg/mL真菌诱导子，采用比色法、高效液相色谱法和荧光显微镜分析白桦悬浮细胞中三萜量、多胺量和H₂O₂荧光强度变化。结果 1 mmol/L Put增加了细胞中H₂O₂的荧光强度和三萜量。0.1 mmol/L H₂O₂促进了三萜合成，却抑制了多胺中亚精胺（Spd）、精胺（Spm）的合成，而对Put无影响。Put与H₂O₂同时处理组，细胞中H₂O₂的荧光强度和多胺的量均介于Put与H₂O₂单独处理组之间，而三萜量却显著高于其单独处理组；进一步药理学实验分析发现，真菌诱导子与H₂O₂清除剂过氧化氢酶（CAT）处理后，细胞中的Put和Spd量比真菌诱导后增加了0.62%和16.05%，而对Spm无显著影响。真菌诱导子与多胺（Pas）合成抑制剂D-精氨酸（D-arg）处理组，细胞中的H₂O₂荧光强度比真菌诱导子处理组有所降低了；在真菌诱导子、CAT和D-arg同时处理下，细胞中的H₂O₂荧光强度、PAs量和三萜量均低于真菌诱导子与CAT或D-arg处理，但三萜量仍高于对照组。结论 Put与H₂O₂在促进白桦三萜合成中存在交互作用。]]> 2013/10/23 11:09:58 1494true 目的 建立锁阳种子质量评价技术体系并制定锁阳种子质量分级标准。方法 应用体视显微镜、电子天平和离体胚培养法，对锁阳种子形态、千粒质量、胚率和生活力等进行测定，应用数理统计方法分析出划分种子等级的主要指标和参考指标，运用标准差法制定锁阳种子质量分级标准。结果 种子长1.03～1.63 mm，宽为0.69～1.23 mm；种仁长0.61～1.05 mm，宽0.50～0.90 mm；种子形态指标之间极显著相关（P＜0.01），形态指标与千粒质量之间显著相关（P＜0.05），而与生活力和胚率相关性不显著（P＞0.05），千粒质量与生活力和胚率不相关（P＞0.05），但生活力和胚率极显著相关（P＜0.01）；生活力是锁阳种子质量分级的主要指标，净度、千粒质量和水分是种子质量分级的参考指标。结论 1级种子生活力不低于98%，净度不低于93%，千粒质量不低于0.8 g，含水量不高于8%；2级种子生活力95%～98%，净度不低于86%，千粒质量不低于0.7g，含水量不高于8%；3级种子生活力90%～95%，净度不低于80%，千粒质量不低于0.5 g，含水量不高于8%；达不到3级种子标准的为不合格种子。]]> 2013/10/23 11:09:58 1, 3，罗光宏^{2, 3}，张文辉¹，张贵喜¹，颜 霞³]]> 1493true 目的 对金龙胆草Conyza blinii 3-磷酸甘油醛脱氢酶（GAPDH）基因进行克隆及序列分析，并检测其是否可作为金龙胆草的内参基因。方法 采用RACE技术克隆金龙胆草GAPDH基因的cDNA全长序列，利用DNAMAN、BLAST、MEGA等工具对序列进行生物信息学分析，并以其为内参进行半定量RT-PCR。结果 克隆获得了1个全长1 418 bp的GAPDH基因，完整开放阅读框1 020 bp，编码340个氨基酸，命名为GLGAPDH。序列比对结果显示，金龙胆草的GAPDH基因与紫背天葵的同源序列相似性达到96%，与薇甘菊的同源序列相似性为93%。通过系统进化树分析发现其与紫背天葵的亲缘关系最近。半定量RT-PCR分析GLGAPDH作为内参基因在不同组织中表达稳定，扩增效果良好，重现性强。结论 首次克隆了金龙胆草GAPDH基因的全长cDNA序列，并通过半定量实验验证了其可作为内参基因用于基因表达量分析，为金龙胆草次生代谢物合成过程中关键酶表达分析及调控机制的研究奠定了基础。]]> 2013/10/12 17:47:17 1，高静雷¹，刘 姗^{1, 2}，唐自钟¹，李成磊¹，陈 惠¹]]> 1492true 目的 研究委陵菜属Potentilla L. 药用植物的亲缘关系。方法 对6份供试材料进行ISSR分析。利用POPGENE软件分析遗传相似系数，UPGMA方法聚类，构建亲缘关系系统图。结果 11条引物共得到105条扩增条带，其中有89条呈现多态性，占84.76%。遗传相似系数变化范围0.447 6～0.790 5。结论 聚类结果显示，来源于同一地区的委陵菜属药用植物种质聚在一起，呈现出一定的地域性分布规律。从分子水平对委陵菜属药用植物的鉴定和开发提供遗传基础，更好地指导种质资源的收集、评价。]]> 2013/10/12 17:47:17 1491true 目的 研究内生真菌诱导子对茅苍术悬浮细胞次生代谢途径关键酶活性的影响，探讨茅苍术次生代谢产物的诱导途径和诱导机制。方法 将内生真菌诱导子添加到茅苍术悬浮细胞中，测定NADPH氧化酶和HMGR酶活性以及H₂O₂和β-桉叶醇的量。结果 内生真菌Fusarium sp 5诱导子可提高NADPH氧化酶的活性，诱导氧化迸发，显著促进H₂O₂的积累，激活倍半萜类代谢途径中关键酶HMGR的活性，促进β-桉叶醇的生物合成，处理组的产量达到66.59 μg/g，比对照组提高了257.6%。H₂O₂淬灭剂CAT和NADPH氧化酶抑制剂DPI可以阻断Fusarium sp 5诱导子对茅苍术悬浮细胞中HMGR的活化和β-桉叶醇合成的促进作用。外源H₂O₂溶液单独处理也能够触发茅苍术细胞中HMGR活化和β-桉叶醇的合成加强。结论 H₂O₂是参与内生真菌诱导子诱发茅苍术细胞中β-桉叶醇合成所必需的信号分子，通过激活HMGR，从而触发β-桉叶醇的生物合成。]]> 2013/10/12 17:47:17 1，汪冬庚¹，濮雪莲¹，赵 喜¹，江 曙²]]> 1490true 目的 研究黄花蒿植株干物质累积规律，以及对氮、磷、钾、钙和镁营养吸收与分配规律，并为制定黄花蒿科学施肥措施提供理论依据。方法 对黄花蒿不同生育期进行取样，分别测定植株不同功能构件的干物质量及氮、磷、钾、钙和镁的量。结果 移栽后前40 d为黄花蒿幼龄期，干物质主要分配于叶片；移栽40～100 d为营养生长期，干物质主要分配于叶片及枝；移栽100～180 d为生殖生长期，其中100～140 d为生殖生长前期，干物质主要分配于枝及花蕾，140～180 d为生殖生长后期，干物质主要分配于枝和种子。黄花蒿幼龄期营养元素累积量最低；营养生长期对各营养元素的吸收量开始增加，主要分配于叶片和枝；生殖生长前期仍主要分配于叶片，但开始向花蕾转移；生殖生长后期主要分配于种子。黄花蒿干物质总量与营养元素吸收量间呈显著正相关关系，全生育期氮、钾、镁、钙、磷总累积量比约为4.21∶4.17∶0.74∶0.63∶0.24。结论 黄花蒿幼龄期应少施肥，以减少养分流失；移栽40～140 d，黄花蒿进入快速生长阶段，应及时追肥以满足植株对养分的需求，尤以氮、钾和镁肥为主；磷、钙和镁在100～120 d需求较大，应尽早施入及在现蕾期喷施速效钙镁磷肥，以保证花蕾的分化和种子的形成。]]> 2013/10/12 17:47:17 1，刘大会¹，邵爱娟³，陈美兰³，金 航¹，杨 野²]]> 1489true 目的 分析以栽培三七Panax notoginseng根为外植体诱导体细胞胚发生及植株再生过程中总皂苷及3种人参皂苷（人参皂苷Rg₁、Re、Rb₁）的累积规律。方法 采用分光光度法分析体细胞胚发生发育过程中不同时期的总皂苷累积量；采用高效液相色谱法测定3种人参皂苷（人参皂苷Rg₁、Re、Rb₁）的累积量。结果 体胚苗中的总皂苷质量分数最高，为7.79 %，占栽培三七根（8.61%）的90.48%，质量分数最低的为胚性愈伤组织，为2.47%。因材料的比生长速率存在差异，总皂苷累积效率的顺序为体胚苗＞前期体胚＞后期体胚＞胚性愈伤。对3种人参皂苷单体物质的分析显示：后期体胚中3种人参皂苷的量总和最大，为7.05 mg/g，胚性愈伤组织的最低，为2.78 mg/g；人参皂苷Rg₁在前期体胚时质量分数达到最高，为2.24 mg/g；人参皂苷Rb₁在后期体胚中的质量分数达到最高，为4.03 mg/g；人参皂苷Re在胚性愈伤组织中的量最高，为1.21 mg/g。3种人参皂苷的总累积效率在前期体胚中达到最大，为5.022 5 mg/(g·周)，在体胚苗中最低，为1.947 4 mg/(g·周)。结论 总皂苷质量分数及累计效率均在体胚苗中达到最大值；3种人参皂苷总量及总累计效率分别在后期体胚和前期体胚中达到最大值。]]> 2013/10/12 17:47:17 1488true 目的 对龙骨马尾杉Phlegmariurus carinatus法呢二磷酸合成酶（Farnesyl diphosphate synthase，FPS）基因PcFPS1编码区进行克隆及序列分析。方法 根据已获得的龙骨马尾杉转录组数据，从中获得1条编码FPS的转录本，采用RT-PCR方法获得PcFPS1的编码区序列，并对PcFPS1蛋白进行理化性质、蛋白二级结构及三维结构预测分析。结果 序列分析表明，所克隆的PcFPS1基因编码区长为1 119 bp，编码372个氨基酸残基，PcFPS1与挪威云杉Picea abies的FPS具有70%的序列相似性。生物信息学预测PcFPS1蛋白基本不含跨膜区，具有萜类合酶保守结构域，不含信号肽。结论 首次获得龙骨马尾杉PcFPS1基因的编码区序列，为进一步研究PcFPS1在石杉科植物萜类及甾醇类化合物生物合成途径中的功能及鉴定酶活性位点奠定基础。]]> 2013/9/22 11:04:24 1，罗红梅¹，殷秀梅²，宋经元¹]]> 1487true 目的 筛选出适用于鉴定七叶树属药用植物的条形码序列。方法 考察了七叶树属10个物种42份样品的核ITS、ITS2与叶绿体psbA-trnH、rbcL、matK序列的PCR扩增和测序效率、种内及种间变异、鉴定效率，对初筛后的序列进行barcoding gap检验及NJ树聚类分析。结果 psbA-trnH序列的PCR扩增和测序效率均为100%，种间最小变异大于其种内最大变异，且鉴定效率为候选序列中最高，barcoding gap检验结果表明该序列在种间、种内变异重合比例较小，且NJ树聚类分析结果也表明psbA-trnH序列能够提供充分的辨析效果。结论 psbA-trnH序列能准确鉴定七叶树属药用植物，可作为七叶树属药用植物条形码序列。]]> 2013/9/22 11:04:24 1, 2，陈士林³，姚 辉⁴，叶利春²，宋经元⁴，关小羽¹，刘享平¹]]> 1486true 目的 对河南7个野生种群的茜草遗传多样性进行调查，为茜草野生资源的保护提供科学依据。方法 通过DNA测序技术分析叶绿体基因片段psbA-trnH遗传变异。结果 psbA-trnH序列共得到40个单倍型（H1～H40），单倍型多样性指数为0.951 0±0.001 3，核酸多样性指数为0.014 77，遗传分化指数为0.081 53，种群间基因流为2.78。结论 河南地区野生茜草有很高的遗传多样性，种群间存在较强的基因流，种群间分化较小。]]> 2013/9/22 11:04:24 1，袁王俊²，韩远记¹，尚富德¹]]> 1485true 目的 蛇足石杉Huperzia serrata是治疗阿尔茨海默病的珍稀药用植物，其生长受高温限制，研究高温对蛇足石杉质膜及叶绿体结构与功能的影响，为生产实践提供参考依据。方法 分别在25、30、35、40 ℃不同温度下处理蛇足石杉，测定不同温度下的膜脂过氧化物丙二醛（MDA）的量及电导率的变化，以及叶绿素总量、叶绿素a、叶绿素b及叶绿素a/b的变化，并用透射电镜观察不同温度处理后的叶绿体的超微结构。结果 在35、40 ℃的高温处理下，MDA、电导率的值明显高于对照；40 ℃处理4 d后，叶绿素总量显著下降，6 d时至最低值，仅为对照的58%，叶绿素a、b量的变化与叶绿素总量的变化规律相似；透射电镜观察显示，35 ℃处理4 d，叶绿体结构出现变形，40 ℃处理4 d叶绿体结构受到明显破坏，被膜模糊并出现不同程度的断裂，类囊体排列紊乱，基质片层不规则，出现断裂等。结论 结合生理指标的变化、叶绿体超微结构及外部形态的变化，蛇足石杉生长的适宜温度在25～30 ℃；40 ℃是蛇足石杉生长的极限温度，胁迫4 d后就会引起植株死亡；35 ℃处理对蛇足石杉生长也有明显的影响，长时间超过35 ℃能引起植株死亡。]]> 2013/9/22 11:04:24 1，张 慧¹，王志毅¹，宋 荣²，张凤宇¹]]> 1484true 目的 研究不同采收期对金银花产量和质量的影响，为金银花的合理采收、批号划分和综合开发利用提供参考。方法 在金银花不同的发育时期、采收时间，采集不同部位的样品，测定其生长指标、产量和绿原酸、木犀草苷量。结果 金银花不同采收期和忍冬不同采收部位的各项生长指标、产量和绿原酸、木犀草苷量差异显著。结论 金银花宜在“二白”至“大白”期采摘；第一茬花产量高、质量好，其次为第二茬花；忍冬枝叶绿原酸和木犀草苷的量较高，可以进行有效成分提取和综合利用。]]> 2013/9/22 11:04:24 1, 2，王文全³，郭兰萍¹，荣齐仙¹，郝庆秀¹，李卫东⁴，兰金宝²，翁 炜²]]> 1483true 目的 为阐明广藿香类胡萝卜素代谢途径，克隆了广藿香Pogostemon cablin八氢番茄红素脱氢酶（phytoene desaturase，PDS）基因，并对其进行相关生物信息学分析。方法 搜索本课题组建立的广藿香转录组数据库，获得PDS基因全长序列，并设计全长引物进行PCR验证；利用生物信息学软件对PDS基因进行生物信息学分析。结果 本研究获得的广藿香PDS基因命名为PcPDS1（GenBank登录号为KC854409），该基因全长1 960个碱基，编码569个氨基酸。基于生物信息软件分析了PcPDS1基因编码蛋白的理化特性。系统进化树分析结果表明，PcPDS1基因与黄龙胆Gentiana lutea的PDS序列同源性最高，与烟草Nicotiana tabacum、番薯Ipomoea batatas次之，与自然进化关系保持一致。结论 成功克隆、分析了广藿香PcPDS1基因。]]> 2013/9/4 14:18:21 1，沈笑飞²，曾少华³，王 瑛³，莫小路¹]]> 1482true 目的 克隆北柴胡Bupleurum chinense 中可能参与柴胡皂苷生物合成的糖基转移酶基因BcUGT8，构建其原核表达载体，为通过体外表达和纯化蛋白的催化活性，分析验证其功能奠定基础。方法 在Roche (454) GS FLX系统高通量测序已获得部分cDNA序列基础上，通过cDNA末端快速扩增技术（RACE）和长距离PCR扩增方法（LD-PCR）克隆全长cDNA。设计含有酶切位点的PCR引物，PCR扩增其开放阅读框（ORF），酶切后，插入到pET-28a (+) 载体中，构建出原核表达载体。结果 扩增到北柴胡1个糖基转移酶（UGT）基因全长cDNA，构建了这一基因的原核表达载体。结论 通过BcUGT8基因的全长cDNA克隆、序列分析和原核表达载体的构建，为后续开展体外酶蛋白表达、纯化和催化活性分析实验，验证其生物功能奠定了基础。]]> 2013/9/4 14:18:21 1, 2，魏建和^{1, 2}，陶韵文^{1, 3}，孙 晶^{1, 4}，隋 春^{1, 2}]]> 1481true 目的 建立黄连的组培再生及遗传转化体系。方法 以黄连子叶和下胚轴为外植体，用不同的基本培养基添加不同种类及浓度的植物生长调节剂进行组培再生研究；利用基因枪转化法研究黄连胚性愈伤组织和遗传转化。结果 子叶和下胚轴在MS培养基上愈伤诱导率分别可达86.31%和54.34%；与MS培养基相比6, 7-V培养基可获得更高的愈伤诱导率和增殖率；诱导愈伤组织最适宜的激素组合为0.5 mg/L 2, 4-D＋0.5 mg/L KT；不同细胞分裂素培养的愈伤组织颜色和质地差异明显；0.5 mg/L KT＋0.5 mg/L IAA与1.0 mg/L 6-BA＋0.5 mg/L NAA组合可诱导出胚性愈伤组织，产生体细胞胚；无激素的6, 7-V培养基可维持胚性愈伤组织的不断生长；含1 mg/L GA₃＋0.5 mg/L IBA的6, 7-V培养基可使体细胞胚萌发成苗；转化后的胚性愈伤组织经3 mg/L 除草剂Basta筛选，检测到β-葡萄糖苷酸酶（GUS）阳性，PCR检测再生植株膦丝菌素乙酰转移酶基因（bar）阳性。结论 建立并完善了黄连的组织培养再生体系，并在此基础上利用转基因技术获得了具有相关性状的植株，实现了黄连的遗传转化，为黄连性状的遗传改良奠定了基础。]]> 2013/9/4 14:18:21 1480true 目的 诱导箭根薯愈伤组织及建立无性系。方法 以箭根薯野生种为材料，采用不同激素组合对不同部位（根茎、叶片、叶柄）进行诱导，对比诱导效果，筛选出最佳部位及各个生长阶段的最佳激素组合。结果 外植体的消毒以0.1% HgCl₂溶液处理8 min的效果最佳；诱导愈伤组织最佳外植体为叶柄；愈伤组织诱导的最佳培养基是MS＋6-BA 2.0 mg/L＋NAA 0.1 mg/L＋2, 4-D 1.0 mg/L，在此培养基上使用叶柄诱导愈伤组织的诱导率达到100%；不定芽诱导分化的最适培养基为MS＋ 6-BA 2.0 mg/L＋NAA 0.5 mg/L，分化率高达90%；生根诱导的最佳培养基为含1/2 MS＋NAA 0.5 mg/L，生根率高达100%。结论 筛选出诱导箭根薯愈伤组织最佳诱导外植体及激素组合。]]> 2013/9/4 14:18:22 1479true 目的 建立一种同时测定壮药剑叶龙血树中7-羟基-4′-甲氧基黄烷和紫檀茋的方法。方法 采用HPLC法，色谱柱为YMC pack ODS-AQ C₁₈（150 mm×4.6 mm，5 μm），乙腈-0.2%磷酸（36∶64）为流动相，检测波长分别为281、306 nm，柱温35 ℃。结果 7-羟基-4′-甲氧基黄烷、紫檀茋分别在0.407 6～1.528 5 μg（r＝0.999 8）、1.640 8～6.153 0 μg（r＝0.999 7）内呈良好的线性关系，平均加样回收率分别为97.88%、97.10%，RSD分别为0.82%、0.59%。结论 该方法操作简便、重复性好，可用于剑叶龙血树及其提取物的质量控制。]]> 2013/9/4 14:18:22 1, 3，周艳林^{2, 3}，邹 准³，尹文清¹，刘华钢²，邹节明³]]> 1478true 目的 从黄花蒿中克隆MEP途径关键酶2C-甲基-D-赤藓糖醇-2, 4-环焦磷酸合成酶（MCS）基因，进行序列特征分析、原核表达以及组织表达的研究。方法 根据黄花蒿MCS（AaMCS）基因EST序列，克隆MCS cDNA及基因组序列。将MCS编码区与表达载体pET-21a (+) 重组，构建pET-21a (+)-MCS的原核表达载体并转入大肠杆菌BL21（DE3），IPTG诱导获得MCS融合蛋白。半定量RT-PCR检测MCS的组织表达情况。结果 AaMCS cDNA全长994 bp，包含681 bp的开放阅读框，编码226个氨基酸，基因全长2 540 bp，包含3个外显子和2个内含子。构建pET-21a (+)-MCS重组质粒，获得稳定的pET-21a (+)-MCS原核表达体系。AaMCS在根、茎、叶、花中均有表达，其中花中表达量较高，根和茎中表达量低。结论 克隆了AaMCS基因，建立pET-21a (+)-MCS稳定的原核表达体系，为研究AaMCS蛋白的活性及其功能奠定了基础。]]> 2013/8/16 13:38:58 1，贾伟章^{2, 3}，谭明俊²，张 军²，王 丹²，刘顺会²]]> 1477true 目的 对杯萼海桑Sonneratia alba萜类化合物生物合成途径的关键酶法呢基焦磷酸合成酶（Farnesyl pyrophosphate synthase，FPS）基因的编码cDNA序列进行克隆，为研究杯萼海桑萜类化合物生物合成与基因调控奠定基础。方法 结合杯萼海桑根的转录组注释，根据编码区序列设计引物，通过PCR方法克隆杯萼海桑FPS（SaFPS）基因的编码区cDNA。结果 PCR扩增了一个长1 029 bp的基因片段，该片段编码由342个氨基酸组成的SaFPS。同源性比对结果显示基因编码蛋白与甘草的FPS具有氨基酸一致性达86%。其具有异戊烯基转移酶的2个典型保守功能域。进化树分析结果显示，与甘草Glycyrrhiza uralensis、苜蓿Medicago truncatula 、羽扇豆Lupinus albu 具有较近的亲缘关系。实时荧光定量PCR结果显示SaFPS基因在花中表达量较高，果实、茎、叶中表达量相对较低。结论 首次从红树林植物杯萼海桑中克隆FPS基因获得其编码区序列，SaFPS基因具有组织表达特异性。本研究为分析基因表达特性及其在生物合成中的功能奠定基础。]]> 2013/8/16 13:38:58 1, 2，吴秋红¹，高 辉¹，张自德¹，李秀英¹，张 光¹]]> 1476true 目的 分析ITS2、rbcL序列在牛奶菜属植物及其近缘植物间的鉴别能力，并对牛奶菜属植物及其近缘植物的系统进化进行初步分析。方法 采用直接测序法测定所分析样品的ITS2、rbcL序列，获得的序列采用软件CodonCode Aligner人工校正，Contig软件拼接，用MEGA 4.0软件分析比对并进行遗传距离等分析，用NJ法对比对的序列构建系统分支树。结果 ITS2、rbcL序列对牛奶菜属植物及其他所分析样品有较好的鉴别能力，且鉴别能力ITS2优于rbcL；南山藤属、匙羹藤属植物与牛奶菜属植物间的亲缘关系非常相近。结论 条形码ITS2、rbcL序列能很好地区分牛奶菜属植物，且鉴别能力ITS2优于rbcL；建议将南山藤属、匙羹藤属等小属植物归入牛奶菜属内。]]> 2013/8/16 13:38:58 1475true 目的 比较野山参、林下山参、趴货、园参性状特征及显微特征的区别，建立各类人参鉴别检索表。方法 观察不同生长方式人参的芦、艼、体、纹、支根、须根的性状特征以及主根、须根的横切面显微特征。结果 圆芦、下垂艼、铁线纹、分腿灵活自然、皮条须和珍珠点，是野山参和林下山参重要的鉴别性状；人参主根中的草酸钙簇晶、须根中的木质部随生长年限的增加呈显著增加趋势，而淀粉粒的数量则随生长年限的增加呈显著减少的趋势，据此可鉴别出不同类型的人参。结论 野山参、林下山参、趴货、园参的芦、艼、纹、主根、须根等具有显著区别。]]> 2013/8/16 13:38:59 1，李可欣¹，史德武²，孙启时¹]]> 1474true 目的 研究狗脊升华与挥发性成分，探寻其炮制过程中产生刺激性成分的来源。方法 采用模拟砂烫、升华、水蒸气蒸馏、直接提取挥发油4种不同方式从狗脊中收集升华与挥发性成分，并用UPLC/Q-TOF-MS法进行定性分析。结果 4种方法共检识34个化合物，得出其中26个化合物的推荐分子式和名称，主要为有机酸类、有机酸酯类、生物碱类、嘌呤类、嘧啶类、小分子醛酮类、多酚类、甾体类、单萜类等化合物，相对分子质量集中在100～400。结论 检识的共有化合物柠苹酸、6-姜辣素、5-羟甲基糠醛等具有一定刺激性，应该是狗脊炮制过程中产生的刺激性成分。]]> 2013/8/16 13:38:59 1，单国顺²，鞠成国^{1, 3}，周远征¹，张 凡¹，贾天柱^{1, 3}]]> 1473true 目的 克隆芍药肌动蛋白（Actin）基因并应用RT-PCR技术分析Actin基因在芍药不同组织中的表达情况。方法 根据近缘物种Actin基因的保守序列设计一对PCR扩增引物，以“桃花飞雪”芍药根部总RNA反转录而成的cDNA为模板，采用RT-PCR的方法扩增出芍药Actin cDNA全长并克隆至pMD18-T载体上，阳性克隆经菌落PCR、质粒PCR及酶切鉴定后进行测序。基于测序结果设计特异性PCR引物，应用RT-PCR技术分析Actin基因在芍药根、茎、花、叶不同组织中的表达情况。结果 测序结果表明芍药Actin基因全长1 134 bp序列，共编码377个氨基酸，GenBank登录号为JX310002；序列分析表明芍药Actin蛋白中存在3种肌动蛋白特征信号序列，与其他植物肌动蛋白氨基酸同源性达99%；基于同源模建预测的3D结构中含有4个结构域；生物信息学软件预测芍药肌动蛋白的相对分子质量为4.17×10⁴，等电点（pI）为5.31，是一个定位于胞液、不含跨膜域、不含信号肽分子的亲水性、稳定蛋白；半定量RT-PCR技术分析表明Actin基因在芍药根、茎、叶、花组织中的表达量保持恒定。结论 首次从芍药中克隆了Actin基因，半定量RT-PCR表达分析结果表明Actin基因适合作为芍药功能基因表达分析的内标基因，为有效利用该基因奠定了基础。]]> 2013/8/13 21:43:04 1472true 目的 通过测定和分析15种悬钩子属Rubus L. 药用植物的rDNA ITS序列，为分子鉴定和遗传多样性研究奠定基础。方法 以叶片基因组DNA和通用引物为材料，用PCR法克隆rDNA ITS全长，并利用生物信息学软件对序列进行分析。结果 15种悬钩子属植物ITS1、ITS2和5.8 S的序列长度分别为255～258、208～211和164 bp；ITS1和ITS2序列有变异位点138个，其中信息位点41个，序列存在较多的颠换、转换和缺失现象；5.8 S序列较为保守，仅含4个变异位点，没有发现信息位点；15种悬钩子属植物的遗传距离为0.139 0～0.008 1，灰毛泡和锈毛莓的遗传距离最小。结论 获得了15种悬钩子属药用植物的rDNA ITS序列，为分子鉴定和遗传多样性研究奠定了基础。]]> 2013/8/13 21:43:04 １，李嵘嵘^２，管 铭^１，李金枝¹]]> 1471true 目的 利用ITS2条形码鉴别两面针药材及其混伪品，为两面针药材鉴定提供新方法。方法 采用PCR法扩增ITS2（转录第二间隔区）序列，双向测序后运用CodonCode Aligner、MEGA软件进行数据处理，构建系统聚类树（NJ树）。结果 两面针药材及其混伪品基因组DNA降解明显，但不影响ITS2条形码的PCR扩增和测序，ITS2条形码序列分析表明种内与种间遗传距离具有较大差异，基于ITS2条形码构建NJ树可鉴别两面针药材及其混伪品。结论 ITS2条形码适用于两面针药材及其混伪品的鉴别，为两面针药材快速、准确鉴定提供新方法；为两面针基原研究提供重要的分子鉴定证据；同时为DNA条形码技术应用于其他根、茎类中药材的鉴定提供了示范作用。]]> 2013/8/13 21:43:04 1，宋经元²，姚 辉²，韩正洲¹，仰铁锤¹，邢建永¹]]> 1470true 目的 开展川续断种质资源的遗传多样性研究，为合理利用川续断种质资源提供理论依据。方法 运用SRAP分子标记方法对川黔境内川续断的遗传多样性进行分析。结果 10对引物共检测到124个位点，其中102个位点具有多态性，多态位点百分率（PPL）为82.26%。川续断总的Nei’s基因多样性指数（H）为0.280 0，Shannon’s多态性信息指数（I）为0.435 3；居群水平上川续断的PPL为53.92%，H为0.121 2～0.244 0、I为0.179 6～0.361 1，其中5个高海拔、小生境特征的居群遗传多样性指标较高。居群间的基因分化系数Gst为0.293 0，基因流（Nm）为1.206 4。基于遗传相似度，14个居群可聚为3类。结论 川续断居群的遗传多样性水平丰富，遗传变异主要存在居群内，地理位置（海拔）和气候是川续断居群遗传多样性较高的影响因素，而地理隔离（小生境）是造成居群内遗传变异高于居群间的另一因素。]]> 2013/8/13 21:43:04 1，周 涛¹，江维克¹，袁 媛²，肖承鸿¹，熊厚溪¹，贺 勇³]]> 1469true 目的 建立鱼腥草不同部位中新绿原酸、绿原酸、芦丁、金丝桃苷、异槲皮苷及槲皮苷的一测多评测定方法。方法 以Kromasil C¹⁸色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），乙腈-0.1%磷酸溶液梯度洗脱，分段变波长测定。以绿原酸为参照物建立与其余成分的相对校正因子，并计算其量，实现一测多评。同时采用外标法测定该6个成分的量，并比较二者的差异，以验证一测多评法的准确性和可行性。结果 鱼腥草中6个成分的计算值与实测值间无显著差异，鱼腥草不同部位6个成分量有所不同，绿原酸类和黄酮类主要分布在叶中。结论 鱼腥草的药效成分主要集中在叶中，本实验建立的一测多评法可行准确，可以用来对鱼腥草进行质量控制。]]> 2013/8/13 21:43:04 1，刘 艳¹，李春红¹，杨世艳²，张 燕³]]> 1468true 目的 克隆金荞麦黄酮醇合酶（FdFLS）基因的编码序列，并对该基因进行序列分析、原核表达及其活性研究。方法 采用同源克隆技术获得FdFLS基因cDNA序列，并对其进行生物信息学分析；构建FdFLS原核表达载体pET-30b (＋)-FdFLS，在大肠杆菌BL21（DE3）中诱导表达，并测定目标蛋白的酶学活性。结果 FdFLS基因开放阅读框（ORF）全长1 008 bp，编码334个氨基酸；FdFLS基因在大肠杆菌中可表达出相对分子量约4×10⁴的蛋白，并具有将二氢槲皮素和二氢山柰酚转化为槲皮素和山柰酚的催化活性。结论 首次克隆到FdFLS基因，并实现该基因在大肠杆菌中有活性的表达。]]> 2013/7/15 10:45:55 1467true 目的 筛选合适的内参基因用于青天葵实时荧光定量PCR分析的校正。方法 以毛唇芋兰3个组织（叶片、叶柄和球茎）为材料，利用实时荧光定量PCR技术探讨18S rRNA、actin、ubiquitin、EF-1α和β-tubulin 5个常用内参基因在毛唇芋兰不同组织中表达差异。利用GeNorm和NormFinder软件比较各内参基因的Ct值，以分析他们在青天葵3个组织的表达稳定性。结果 5个内参基因的表达稳定性各异，GeNorm软件分析结果表明，稳定性β-tubulin＝EF-1α＞ubiquitin＞actin＞18S rRNA；NormFinder软件结果显示β-tubulin稳定性最好，EF-1α次之，18S rRNA则最差。两个不同软件分析结果一致。结论 β-tubulin可作为毛唇芋兰不同组织中基因表达差异分析的校正内参基因。]]> 2013/7/15 10:45:55 1466true 摘 要：目的 构建国槐Sophora japonica种胚愈伤组织培养体系，并对愈伤组织中的异黄酮量进行初步分析。方法 通过添加不同浓度不同种类的植物生长调节剂，得到国槐种胚愈伤组织诱导、悬浮细胞培养、异黄酮量最高的最佳培养基；通过对愈伤组织和悬浮细胞在生长中的生长量和异黄酮量进行测定，得到悬浮细胞最佳收获期。结果 国槐种胚愈伤组织诱导的最佳培养基为B5＋2, 4-D（1.0 mg/L）＋6-BA（0.2 mg/L）＋蔗糖（20 mg/L）。固体培养基上，愈伤组织培养7 d之后组织进入迅速生长期，第35天，愈伤组织的生长量达到最高（鲜质量7.413 7 g），但其异黄酮量均无显著变化。悬浮培养中，愈伤组织培养24 d达到最高生长量（鲜质量11.563 8g），24 d后进入衰亡期，继续培养细胞其鲜质量、干质量均呈现下降趋势，且细胞逐渐变褐，最终死亡，其中异黄酮量的变化趋势与生长曲线相反，在24 d达到最低（4.826 mg/g）。结论 国槐种胚愈伤组织诱导、培养和异黄酮量与植物生长调节剂种类及浓度均具较大关联。]]> 2013/7/15 10:45:55 1, 2，刘忠华¹，魏振园¹，王晋飞¹，董倩倩¹，范亚丽¹]]> 1465true 目的 在甘肃岷县茶埠乡2 300～2 800 m进行当归海拔效应研究，为探讨当归生态适应性奠定基础。方法 采用田间试验和相关分析相结合的方法，探索海拔对当归产量形成的影响，明确影响产量的关键因子。结果 当归产量随海拔升高而增加，中海拔和高海拔处理分别比低海拔处理高30.3%和22.0%，差异达显著水平（P＜0.05）；相关分析表明，温度（R²＝?0.745 3）和降雨量（R²＝0.741 7）是影响当归产量的关键生态因子，丙二醛（MDA）（R²＝?0.911 8）和可溶性糖量（SS）（R²＝?0.883 1）是影响当归产量的关键生理生化因子，胞间CO₂浓度（Ci）（R²＝?0.739 3）和净光合速率（Pn）（R²＝?0.733 2）是影响当归产量的关键光合特性因子。结论 升高海拔、降低环境温度、增加降雨量和有效光辐射、降低植株体内MDA量、SS量和Ci均有利于提高当归产量。]]> 2013/7/15 10:45:55 1，张恩和²，高素芳¹，张延红¹，晋 玲¹，李应东¹]]> 1464true 目的 采用RP-HPLC法同时测定阿胶中13种氨基酸的量。方法 阿胶以6 mol/L盐酸于120 ℃水解3 h，以异硫氰酸苯酯柱前衍生，用反相高效液相色谱法测定氨基酸的量。采用Agilent Eclipse AAA色谱柱（75 mm×4.6 mm，3.5 μm），以乙腈-110 mmol/L醋酸胺溶液（1∶99）为流动相A、醋酸-乙腈-水（0.05∶80∶20）为流动相B进行梯度洗脱，体积流量0.6 mL/min，柱温42 ℃，检测波长为254 nm。结果 在36 min内可完成对阿胶中13种氨基酸的分离测定，各氨基酸的峰面积与浓度的线性关系良好（r＞0.997 7），加样回收率为95.2%～104.4%，RSD＜5.0%。结论 方法简便、准确，重复性好，可用于阿胶的质量控制，亦可为其他药物中氨基酸的分析提供参考。]]> 2013/7/15 10:45:55 1463true 目的 建立柱前皂化HPLC测定不同产地桃仁脂肪酸中亚油酸、油酸的测定方法，为有效控制和科学评价桃仁药材质量提供依据。方法 桃仁以0.5 mol/mL氢氧化钾乙醇溶液皂化提取亚油酸、油酸，利用HPLC测定桃仁中亚油酸、油酸的量。色谱柱：Waters-Symmetry-RP-C₁₈（250 mm×4.6 mm，5 μm），流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液（92∶8），体积流量1.0 mg/mL，检测波长205 nm，柱温30 ℃。结果 亚油酸进样量在8.193 2～163.864 μg/mL具有良好的线性关系（r＝0.999 7），平均回收率为97.3%，RSD为2.7%；油酸进样量26.4～528.0 μg/mL具有良好的线性关系（r＝0.999 5），平均回收率为98.0%，RSD为2.3%。结论 本方法准确，重复性好，简便易行，适用于桃仁脂肪酸中亚油酸、油酸的同时测定。]]> 2013/7/15 10:45:55 1, 2，张 帅¹，付小环¹，李红娟¹，萧 伟¹]]> 1462true 目的 利用DNA条形码技术通过ITS2序列对海南茜草科黎药植物进行快速鉴定。方法 对样本的核基因ITS2 片段进行PCR扩增并双向测序，所得序列经CodonCode Aligner拼接后，利用MEGA5.0软件进行数据分析，并构建聚类树。从ITS2网站上获得ITS2二级结构信息，利用TAXON DNA软件分析序列种内、种间变异并作barcoding gap分析。结果 构建的系统树各个种不同样本均分别聚在一起，表现出单系性；各ITS2二级结构种内无明显差异；种间存在明显差异；基于ITS2序列的barcoding gap图显示种内变异和种间变异存在明显的barcoding gap。结论 ITS2序列可以作为DNA条形码对海南茜草科黎药植物进行快速鉴定。]]> 2013/7/3 9:15:58 1，肖 憬²，苏振宇¹，黄 瑶³，唐历波¹]]> 1461true 目的 克隆刺五加Eleutherococcus senticosus的肌动蛋白（actin，ACT）基因并使其成为可用的内参基因。方法 运用RT-PCR法克隆ACT基因的部分序列，并以其为内参基因进行半定量PCR和real-time PCR分析。结果 克隆了长度为1 031 bp的刺五加ACT基因，推测其编码343个氨基酸，与光皮桦Betula luminifera、陆地棉Gossypium hirsutum、茶树Camellia sinensis的ACT氨基酸序列同源性分别为99.42%、98.83%、98.54%。刺五加ACT基因在不同器官和不同生长发育时期的表达量基本恒定，以其为内参基因的半定量PCR和real-time PCR均具有良好的扩增效果和重现性。结论 首次分离并报道了刺五加ACT的cDNA克隆，证实该序列可以作为基因表达分析的内参基因，建立了其real-time PCR反应体系。]]> 2013/7/3 9:15:58 1460true 目的 通过分析不同产地菊苣Cichorium intybus和毛菊苣C. glandulosum核糖体基因内部转录间隔区（ribosomal DNA internal transcribed spacer，rDNA-ITS）序列，为菊苣药材鉴定和品种鉴别提供DNA分子标记。方法 采用广谱植物基因组DNA快速提取试剂盒提取14个产地的菊苣和毛菊苣样本的总DNA，利用ITS序列扩增通用引物PCR扩增rDNA-ITS序列并测序。运用DNAMAN V6软件比较两品种菊苣样品ITS序列的差异。所有样品ITS序列上的差异碱基经数学处理后使用SPSS 17.0软件对其进行聚类分析。结果 菊苣ITS序列种内相似度基本上在99.2%以上，毛菊苣ITS序列种内相似度在99.8%以上，而两品种间ITS序列相似度在99.2%以下。两品种菊苣的ITS序列上分别有多个特异性信息位点。聚类分析实现了两品种菊苣ITS序列差异的识别。结论 rDNA-ITS序列是菊苣和毛菊苣药材鉴定和品种鉴别的有效分子标记。]]> 2013/7/3 9:15:58 1，张 冰¹，吴丽丽²，林志健¹，朱文静¹，孙博喻¹，王红坡¹]]> 1459true 目的 研究不同扩繁模式对朝鲜淫羊藿有效成分累积的影响，为朝鲜淫羊藿规范化栽培提供理论依据。方法 采用紫外可见分光光度法与HPLC法测定不同扩繁模式下朝鲜淫羊藿中总黄酮和淫羊藿苷的量。结果 不同扩繁模式下，朝鲜淫羊藿有效成分量存在显著差异，50%遮光人工栽培和自然光下人工栽培的总黄酮和淫羊藿苷量受采收期和采收年限的影响较小，有效成分量高。结论 朝鲜淫羊藿以50%遮光人工栽培扩繁模式最佳。]]> 2013/7/3 9:15:58 1，董 焱¹，何立华²，贾凌云¹，刘蓬蓬¹，路金才¹]]> 1458true 目的 获得产量高、有效成分量高、性状稳定的灯盏细辛品种。方法 采用集团选育和单株系统选育法，对选育品种田间测评和AFLP指纹分析。结果 新品种“艾瑞杰1号”平均产量为3 780 kg/hm²，灯盏乙素量为1.84%，总咖啡酸酯量为1.79%；“艾瑞杰17号”平均产量为3 075 kg/hm²，灯盏乙素量为1.71%，总咖啡酸酯量为1.50%。与经一年驯化的当地野生种（对照）相比，2个新品种经济性状更优、一致性和稳定性更高，且具有独特的AFLP指纹。结论 2个灯盏细辛新品种有较好的推广价值。]]> 2013/7/3 9:15:58 1，鸭 乔²，杨熊明²，晏朴华²，李林玉¹，董志渊¹，李绍平¹]]> 1457true 目的 建立亲水色谱-电喷雾飞行时间质谱（HILIC-ESI-TOF/MS）联用技术用于海洋中药海龙多种化学成分快速鉴定及其特征指纹图谱的研究方法。方法 以海龙水提物为研究对象，采用加速溶剂萃取法（ASE）对海龙样品进行提取制备，采用HILIC法对海龙水提物进行快速分离，ESI-TOF/MS法对海龙水提物中多种化合物进行鉴别，在对已知活性成分进行定量测定的基础上，建立海龙的HILIC特征指纹图谱。结果 应用HILIC-ESI-TOF/MS鉴定出海龙水提物中的10种成分，对其中7种核苷类成分进行了定量测定；在对多批次海龙药材分析的基础上，建立了其HILIC特征指纹图谱，结合相似度分析实现了海龙的质量评价及其与不同海洋药物的正确区分。结论 本研究为海龙真伪鉴别研究提供了一种新方法。]]> 2013/7/3 9:15:58 1, 2，东莎莎¹，崔清华³，王小如²，陈军辉²，苑金鹏¹，耿岩玲¹，王 晓¹，刘建华¹]]> 1456true 目的 通过对17个种共26个独活样本的ITS序列分析，为国内中药市场上的常见独活的分子鉴定提供依据，并探索其科学分类标准。方法 对26个样本的ITS进行PCR扩增和测序。通过MEGA 5.0软件比较各序列间的差异性，计算K2P遗传距离；采用邻接法构建NJ系统树并应用Network 4.2.0.1软件进行中间连接网法分析构建单倍型网状图。结果 NJ系统树和单倍型网状图显示，26个样本聚集为5大类群，综合分析后将17种独活归为4大类；重齿毛当归Angelica pubescens的ITS序列具有特征碱基片段，可明显区别于其他样本；除牛尾独活类中3个样本不能通过ITS序列鉴定到种以外，其他样本均可以通过ITS序列鉴定到种。结论 ITS序列可为药用独活的鉴定和分类提供有力证据，四带芹类可以作为独活的首选替补品，牛尾独活类其次，九眼独活为最后之选。]]> 1455true 目的 研究生殖生长对川泽泻源库关系及其特征指标的影响，为其高产优质栽培和育种提供参考。方法 比较留薹和去薹植株各部位干物质量、叶和块茎非结构性碳水化合物及含氮化合物量等生理指标的积累过程。结果 生殖生长的保留有利于川泽泻生殖库的积累，不利于叶源和营养库的增长，能够显著增加植株总库容，提高植株总生物量；去除生殖生长能够增加叶生长后期和块茎产量形成期的C/N值，提高叶和块茎的产量。结论 川泽泻栽培过程中应采取人工措施及时调整植株C/N值，以提高块茎产量；品种选育过程中，应选择叶片数适量且生长后期叶片C/N值高、块茎含氮量高的品系。]]> 1454true 目的 比较不同浓度的Na₂CO₃和NaCl＋Na₂CO₃处理下蒙古黄芪种子萌发和幼苗的部分生理指标，分析2种盐对蒙古黄芪的胁迫程度大小，寻找提高蒙古黄芪种子及幼苗在盐碱胁迫下抗性能力的途径。方法 测定不同浓度的Na₂CO₃和NaCl＋Na₂CO₃胁迫下蒙古黄芪种子的发芽势（Gv）、发芽率（Gr）、相对发芽率、相对盐害率，并对幼苗的叶绿素量、可溶性蛋白质量、丙二醛（MDA）量、超氧化物歧化酶（SOD）和过氧化物酶（POD）的活性进行了测定。结果 较低浓度的Na₂CO₃和NaCl＋Na₂CO₃处理，对种子的萌发具有促进作用，较高浓度的处理对种子萌发有抑制作用，且抑制程度随处理浓度的增加而加强，各处理的各项萌发指标与对照相比，都具有显著的差异（P＜0.05）。随着2种处理液浓度的增加，叶绿素量随之逐渐减少，可溶性蛋白质的量也逐渐降低，二者都与处理浓度呈负相关；但幼苗中MDA量呈增加趋势，与处理浓度呈正相关。随着2种处理浓度的增加，SOD、POD活性均不同程度地表现为先上升后下降的趋势，在50 mmol/L时，达到了最大值。结论 NaCl＋Na₂CO₃对蒙古黄芪种子及幼苗的胁迫程度大于Na₂CO₃。]]> 1，张 勇¹，晋 玲²]]> 1453true 目的 探明桃儿七内生真菌资源多样性及其抑菌活性特征。方法 通过组织块法对内生真菌进行分离，并选择5种植物病原真菌和4种细菌作为指示菌，采用对峙法和改进的菌块法测定抑菌活性。结果 从桃儿七根、茎、叶中分离出49株内生真菌，根部最多，22株，其次为茎部，18株，叶部最少，9株；经形态学分类鉴定归于2个目，3个科，9个属，梭孢霉属为优势菌属；有22株菌对1种或多种供试植物病原真菌有不同程度的抑制作用，占分离菌株数的44.8%，有8株菌对2种或多种供试植物病原真菌有明显的抑制作用，其占所分离菌株总数的16.3%，有3株菌对4种或多种供试植物病原真菌有明显抑制作用，2株内生真菌分别对2种供试指示细菌具有明显的抑制作用。结论 桃儿七内生真菌具有多样性和明显的抗外源真菌活性，抑菌活性菌株主要分布在曲霉属、单孢枝霉属、梭孢霉属，其内生真菌的研究和开发具有重要的生态和经济意义。]]> 1，何 萍²，吕 雯¹，关晓庆³，贺达汉³]]> 1452true 目的 建立小新塔花和芳香新塔花的HPLC指纹图谱分析方法，并同时测定8批小新塔花和22批芳香新塔花中金丝桃苷、槲皮素、胡薄荷酮的量。方法 采用Kromasil C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），以甲醇-0.08%甲酸水溶液进行梯度洗脱，同时测定了小新塔花和芳香新塔花中金丝桃苷、槲皮素、胡薄荷酮的量，建立了不同产地8批小新塔花和22批芳香新塔花的指纹图谱。结果 根据主成分分析、聚类分析，将30批药材分为2类，建立了2种新塔花的HPLC指纹图谱。不同产地的2种新塔花中金丝桃苷、槲皮素和胡薄荷酮等成分的量存在较大差异；芳香新塔花不含槲皮素，而小新塔花中含有；芳香新塔花中的金丝桃苷和胡薄荷酮量高于小新塔花；小新塔花中金丝桃苷量为49.72～204.33 μg/g，槲皮素量为161.06～213.22 μg/g，胡薄荷酮量为36.19～93.29 μg/g；芳香新塔花中金丝桃苷量为174.15～802.24 μg/g，胡薄荷酮量为77.43～353.45 μg/g。结论 不同品种的新塔花指纹图谱存在一定的差异，可为新塔花药材的质量控制、品种鉴定及划分提供一定的参考依据。]]> 1，丁 玲²，刘 圆²]]> 1451true 目的 克隆西洋参三萜皂苷生物合成途径关键酶β-香树脂合成酶（bAS）全长cDNA，为研究西洋参皂苷生物合成与次生代谢调控奠定基础。方法 采用大规模ESTs测序和cDNA末端扩增（RACE）技术克隆西洋参bAS基因。结果 获得了西洋参bAS基因全长cDNA，命名为PqbAS（GenBank注册号：JX185490），其核苷酸序列长度为2 309 bp，含有1个开放阅读框，编码631个氨基酸多肽。保守结构域搜索显示PqbAS含有环氧角鲨烯环化酶（OSCs）共有的活性位点和保守基序。Singal P4.0分析表明PqbAS属于非分泌型蛋白，Tmhmm 2.0分析表明其为非跨膜蛋白。实时荧光定量PCR显示PqbAS基因在各个器官中均有表达，在花和幼茎中高表达，根和叶中表达量相对较低。结论 首次克隆了PqbAS基因全长序列，为研究其表达特性以及在三萜皂苷生物合成中的功能奠定了基础。]]> 1，孙 超²，陈士林²]]> 1450true 目的 获取金荞麦总黄酮合成途径的关键酶查尔酮异构酶（chalcone isomerase，CHI）基因的全长序列，并进行序列分析；对花期金荞麦CHI基因在各组织中的表达与总黄酮量进行分析。方法 利用同源克隆技术获得金荞麦查尔酮异构酶基因（FdCHI）的cDNA序列；采用半定量RT-PCR对CHI表达量进行分析，并采用AlCl₃法测量总黄酮量。结果 金荞麦FdCHI基因cDNA包含一个750 bp的ORF，编码249个氨基酸，命名为FdCHI。生物信息学分析表明该编码蛋白与其他植物CHI氨基酸序列同源率较高。FdCHI在花期金荞麦不同组织中的表达量分析表明，其表达量花＞根＞叶＞茎，总黄酮量为花＞叶＞茎＞根。结论 在金荞麦中首次获得CHI基因的cDNA序列，编码蛋白具有CHI同源蛋白的典型特征。FdCHI基因在金荞麦茎、叶和花中的表达量与总黄酮量具有相关性，但在根中表达量与总黄酮量相关性较小。]]> 1449true 目的 探讨灵芝-淫羊藿菌质发酵的工艺及总多糖的动态变化。方法 选取4个灵芝菌株，以淫羊藿为培养基质进行固体发酵，并利用苯酚-硫酸法测定灵芝-淫羊藿菌质的总多糖量。结果 灵芝-淫羊藿菌质总多糖量明显高于对照培养的灵芝多糖量（P＜0.05）；对灵芝和淫羊藿发酵组合的多糖量进行动态变化研究，发现灵芝菌种A-淫羊藿菌质的发酵终点确定为21 d，灵芝菌种B、C和D的发酵终点确定为28 d。结论 与对照培养灵芝及未发酵的淫羊藿相比，灵芝对淫羊藿发酵可提高总多糖量3～13倍，效果良好。]]> 1，佟曦然¹，丁自勉¹，陈士林^{1, 2}，郭宝林¹，雷炳军³]]> 1448true 目的 研究泰山黄精内生真菌的分布及其多样性，并筛选具有抑菌活性的内生真菌。方法 采用平板分离法分离黄精内生真菌，采用滤纸片扩散法测试黄精内生真菌培养物抗耐药菌活性，同时采用分子生物学方法对筛选出的活性菌株进行鉴定。结果 从泰山野生黄精的根、茎、叶和果实中共分离出32株内生真菌，分属于7个属，分布最广的类群是镰刀菌属Fusarium sp.，占总菌株的31.3%，其次是不产孢真菌Sterile mycelia（28.1%）和链格孢属Alternaria sp.（21.9%）。各组织中内生真菌的分布存在一定的组织差异性，根中内生真菌的分离率最高，茎和叶中次之，果实中最少。共有来自5个属的14株内生真菌至少对1种供试菌株有抗菌活性，其中8株具有广谱抗耐药菌活性。对活性最强、抑菌谱最广的不产孢菌株HJG-10进行分子生物学鉴定，将其确定为裂褶菌Schizophyllum commune。结论 泰山黄精中蕴含着大量具有抑菌活性的内生真菌，为寻找和开发新型抑菌生物制剂开辟了一条新途径。]]> 1447true 目的 探讨N、P、K配施效应模型及对野菊花产量和蒙花苷量的影响。方法 以野菊为材料，采用“3414”不完全正交设计的N、P、K 3因子施肥试验，对野菊花N、P、K施用量进行二次回归设计，对实验结果采用方差分析和DPS数据处理进行统计分析。结果 初步建立了N、P、K肥配施效应模型与野菊花产量和品质之间的关系，在不同施肥措施中，N₂P₂K₂处理效果最佳，不施或者少施N、P、K中的任何一种养分均不同程度导致减产和质量下降；单因子效应分析表明，随着N、P、K施肥量的提高，产量和有效成分蒙花苷的量呈先升后降的趋势；双因素交互效应分析结果表明，以野菊花产量为考察对象，N、P、K肥间相互作用都存在一个值域，低于这个值域时都表现为协同促进作用，高于这个值域时则都表现为拮抗作用；以蒙花苷为考察对象，N、K和P、K肥间相互作用存在一个值域，蒙花苷量表现出与产量相同的趋势，N，P肥间一直表现为协同促进作用。结论 模型优化结果表明，野菊花适宜的N、P、K肥施用量分别为131.280～187.254、113.415～170.460、118.335～220.845 kg/hm²。]]> 1，冯彬彬¹，徐晓玉²]]> 1446true 目的 通过分析不同种质来源孩儿参ITS序列，为孩儿参种内鉴别提供DNA分子标记。方法 利用特异性引物进行PCR扩增、克隆和测序，对孩儿参的rDNA ITS区间碱基序列进行测定，比较其差异。结果 参试的9个不同种质来源孩儿参的整个ITS长度变异为623～624 bp；其中ITS1为224 bp，G＋C量为52.91%～54.26%；5.8 SrDNA为155 bp，G＋C量为54.49%～55.13%；ITS2为244～245 bp，G＋C量为55.55%～56.41%。整个ITS区共有17个变异位点（2.72%），ITS1、ITS2和5.8S的变异位点分别为7、7和3个，不同种质来源孩儿参均有若干个特异性的单核苷酸变异位点；各样品的序列同源性均在99.9%以上；序列间的遗传距离为0.003～0.013。显示了不同产地、不同种质孩儿参的变异是不超过1个种的范围内的变异。结论 可利用ITS区序列差异，鉴别不同种质来源的孩儿参。]]> 1，廖芳平²，郑伟文³]]> 1445true 目的 通过对产自宁夏、甘肃、青海、新疆和内蒙的苦豆子遗传多样性和亲缘关系的分析，为野生苦豆子资源的驯化和保护等提供依据。方法 采用ISSR分子标记技术，对22个苦豆子居群的DNA进行扩增，对其扩增条带进行遗传多样性分析，在所得遗传距离的基础上进行UPGMA聚类和主成分分析（PCA），并绘制亲缘关系树状聚类图。结果 51条ISSR引物共检测到433个位点，每条引物5～12个，平均8.49个；平均多态性位点百分率（PPB）93.30%；Nei’s遗传多样性指数（H）和Shannon信息指数（I）分别为0.335 1、0.499 8；遗传距离变幅范围0.173 6～0.650 2。结论 22个苦豆子居群间具有较高的遗传多样性，各居群间遗传距离与地理距离没有明显关系。]]> 1, 2，刘 萍¹，刘姣蓉¹，郭 蒙¹]]> 1444true 目的 研究瑞香狼毒Stellera chamaejasme不定芽生长过程黄酮类和香豆素类成分的累积规律。方法 采用组织培养筛选不定芽诱导和生长的最适培养基；分别通过分光光度法、高效液相色谱法分析不定芽生长过程总黄酮和3种香豆素类成分伞形花内酯、瑞香素和东茛菪内酯的动态累积。结果 不定芽诱导最适培养基为MS＋0.5 mg/L BA＋0.5 mg/L NAA，培养4周后，平均每个顶芽诱导35个不定芽；不定芽生长最适培养基为MS＋0.3 mg/L BA＋0.1 mg/L NAA，培养4周后，芽平均株高为2.3 cm；生长在最适培养基的不定芽，其总黄酮的累积量在第5周达到最高，为0.218 g；3种香豆素类成分的量在整个不定芽生长中均表现随培养时间而增加，到第5周，质量分数均达到最高值，但均不及野生根中的量，而且质量分数高低顺序也发生变化。结论 瑞香狼毒不定芽中黄酮类和香豆素类成分累积最高为培养后的第5周。]]> 1443true 目的 优化珐菲亚组织培养快速繁殖技术。方法 分别以MS和1/2MS为基本培养基，采用正交设计研究植物生长调节剂多因素组合（6-BA、NAA、IBA和IAA）对珐菲亚继代增殖和诱导生根的影响。结果 MS＋6-BA 1.5 mg/L＋NAA 0.1 mg/L＋IBA 0.2 mg/L利于丛生芽继代增殖，30 d繁殖系数6.0以上；1/2 MS＋NAA 1.0 mg/L＋IBA 0.2 mg/L适于诱导生根获得再生植株，生根率100%；生根苗移栽于排水良好的沙床上，成活率98%。结论 本实验为保护珐菲亚的野生资源，发展人工栽培和探讨育种新途径奠定基础。]]> 1442true 目的 研究姜黄中姜黄素、去甲氧基姜黄素、双去甲氧基姜黄素的光稳定性，并对双去甲氧基姜黄素光化学反应产物进行考察。方法 姜黄的甲醇提取液于棕色量瓶储存，在自然光/避光条件下放置0、1、2、4、6、8 h后，HPLC法测定其指标成分姜黄素、去甲氧基姜黄素、双去甲氧基姜黄素量的变化；LC-MS法分析双去甲氧基姜黄素光化学反应产物。结果 姜黄素、去甲氧基姜黄素在自然光/避光条件下均有良好的稳定性；双去甲氧基姜黄素在避光条件下稳定，见光条件下发生光化学反应。结论 姜黄素和去甲氧基姜黄素具有良好稳定性，双去甲氧基姜黄素在自然光照射下不稳定，因此，姜黄药材分析供试液应于棕色量瓶中避光保存。]]> 1，王爱里¹，袁 园²，袁 丹¹]]> 1441true 目的 克隆苦荞Fagopyrum tataricum类黄酮3’-羟化酶（flavonoid 3’-hydroxylase，F3’H）基因全长cDNA序列，对该基因进行序列分析和原核表达，以及冷胁迫条件下该基因表达量和花青素定量测定。方法 采用同源克隆和RACE技术从苦荞花蕾中克隆苦荞F3’H（FtF3’H）；构建FtF3’H原核表达载体pET-30b （+）-FtF3’H，在大肠杆菌BL21（DE3）中进行诱导表达；采用半定量RT-PCR分析FtF3’H基因在冷胁迫下芽期苦荞不同组织的表达量，并采用分光光度计法测量花青素量。结果 苦荞FtF3’H基因含有一个1 470 bp的ORF，编码489个氨基酸，编码蛋白属于细胞色素P450家族；SDS-PAGE分析表明，目的蛋白相对分子质量54 000；芽期苦荞冷胁迫处理前后子叶和胚轴中FtF3’H表达量以及花青素量的变化分析表明，冷胁迫显著增强了FtF3’H的表达和花青素的积累（P<0.05）。结论 成功克隆FtF3’H基因，并实现了FtF3’H基因的异源表达；芽期苦荞在冷胁迫下，可能通过提高FtF3’H基因表达量进而促进花青素的合成，参与其抗逆生理过程。]]> 2014/5/4 10:08:51 1440true 目的 克隆与鉴定丹参Salvia miltiorrhiza鲨烯合酶基因。方法 基于丹参基因组的基因预测结果设计引物，通过RT-PCR方法，克隆丹参鲨烯合酶基因。利用生物信息软件对基因序列进行了结构分析，对基因编码多肽进行了序列同源性比较和保守结构域分析，利用实时定量RT-PCR方法对基因进行表达模式研究。结果 通过RT-PCR方法扩增得到2个丹参鲨烯合酶基因（SmSQS1和SmSQS2），它们编码的多肽具有鲨烯合酶相关结构域和保守基序。这2个基因具有不同的外显子/内含子结构特征，具有不同的组织特异性表达模式和时间表达模式。结论 丹参基因组中存在2个鲨烯合酶基因，它们具有不同的基因结构特征和表达模式，可能在丹参甾体类和三萜类化合物生物合成中起不同作用。]]> 2014/5/4 10:08:51 1439true 目的 建立紫背金盘Ajugae nipponensis愈伤组织诱导体系，筛选出具较高再生率的植株发生途径，旨在构建高效、稳定的再生体系。方法 MS为基本培养基，添加不同种类和浓度配比的植物生长调节剂，以茎尖、带芽茎段和花序为外植体进行实验。结果 花序是较适宜诱导愈伤组织的外植体，在MS+6-BA 0.1 mg/L+2，4-D 1.5 mg/L中可在1周内诱导出愈伤组织，2周后即分化出绿色小芽丛；丛生芽增殖的适宜培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L，愈伤组织芽丛再生率高达100%，再生系数为4.10，4周后增殖倍数5.0以上；生根的适宜培养基为1/2 MS+NAA 1.0 mg/L，3周后即可获得再生植株，生根率100%；生根苗移栽至排水良好的沙土中，成活率100%。结论 紫背金盘不同外植体均可诱导出愈伤组织，其中花序愈伤发生率最好，是最适宜的外植体；为保护紫背金盘野生资源和发展人工栽培奠定了良好基础，也为遗传转化研究提供重要的科学依据。]]> 2014/5/4 10:08:51 1438true 目的 对栽培太子参的遗传多样性与药材质量进行综合评价，为合理利用太子参种质资源及优良品种选育提供理论依据。方法 采用ISSR分子标记分析太子参12个栽培种源的遗传多样性，HPLC法测定各种源药材中太子参环肽B的量。结果 10条ISSR引物扩增出82条带，其中多态性条带73条，多态位点百分率（PPL）为89.02%。Nei’s遗传多样性指数（H）平均值为0.257 9，Shannon’s多态性指数（I）平均值为0.388 4，遗传分化系数（G_st）为0.274 1，种源间基因流（N_m）为1.323 8。基于遗传一致度，12个种源可聚为3类。12个种源间及种源内个体中的太子参环肽B量差异明显，种源4的变异系数（9.51%）较小，且太子参环肽B量（0.049 4%）明显高于其他种源。结论 栽培太子参各产地间的换种及其生物学特性是其遗传多样性水平丰富的主要原因；综合考虑遗传多样性水平和太子参环肽B的量，种源3和4种质较为优良，可作为太子参种质资源保存及品种选育的对象。]]> 2014/5/4 10:08:51 1437true 目的 旨在建立采用HPLC法同时测定罗布红麻和罗布白麻叶中主要黄酮类成分的方法，同时以新疆产2种罗布麻叶为实验材料，拟揭示其与其他产地罗布麻主要黄酮类成分的差异，为罗布麻质量控制提供依据。方法 采用HPLC法，色谱柱为Agilent TC-C₁₈（150 mm×4.6 mm，5 μm），柱温40 ℃，以乙腈-0.1%磷酸溶液（16：84）为流动相，体积流量为1.0 mL/min，检测波长360 nm，进样量10 μL，测定罗布麻叶乙醇提取物中芦丁、金丝桃苷和异槲皮苷的量。结果 芦丁、金丝桃苷和异槲皮苷的线性范围分别为4.96～49.60、0.96～9.60和10.24～102.40 μg/mL，相关系数R²分别为0.999 2、0.999 0和0.997 0；加样回收率分别为98.2%、92.3%和100.1%，RSD分别为1.5%、3.2%和2.7%。结论 本方法操作简单、结果准确，具有较好的重复性和稳定性，可用于同时测定罗布红麻和罗布白麻叶中3种黄酮类成分，同时，由测定结果可知，新疆产与其他产地的罗布麻叶芦丁和异槲皮苷量差异很大，新疆产罗布红麻芦丁质量分数很高，为0.55%，与异槲皮苷量相当，但金丝桃苷质量分数很低，仅0.07%，而新疆产罗布白麻的芦丁和金丝桃苷质量分数均很低。该研究将为罗布麻叶药材及其提取物质量控制提供科学依据。]]> 2014/5/4 10:08:51 1436true 目的 拟利用地黄Rehmanniaglutinosa EST数据通过生物信息学手段预测新的地黄microRNAs（miRNA），为今后地黄miRNA的生物学研究奠定基础。方法 根据miRNA 家族在不同物种中的保守性，将miRBase数据库中的已知植物miRNA与通过高通量测序获得的93 172条地黄EST序列进行同源比对，按照miRNA前体应具备的标准进行筛选。结果 预测到分属于8个家族的8条潜在地黄miRNA序列，并通过实时荧光定量PCR对8条预测的miRNA进行了检测，证实8条miRNA在地黄中真实存在。随后利用软件对8条地黄miRNA的靶基因进行预测，发现其靶基因主要编码与地黄生长发育、代谢以及胁迫响应等过程相关的蛋白。结论 新预测的地黄miRNA及其靶基因为今后研究它们在地黄中的生物学功能奠定了基础。]]> 2014/4/21 8:52:51 1, 2，李先恩²，都晓伟¹，孙 鹏²]]> 1435true 目的 分析14种山药DioscoreaeRhizoma种质ITS序列，为山药种质资源分子鉴别和进化关系研究提供依据。方法 PCR克隆扩增ITS序列并进行双向测序，Clustal X（v1.83）软件进行序列比对，Mega(V4.1)计算序列核苷酸比例及遗传距离，并构建邻接树（Neighbor-joining，NJ）和最大简约树（Maximum parsimony，MP）。结果 14种山药种质ITS序列全长为558～594 bp，其中ITS1长度为141～165 bp，ITS2长度为146～158 bp；ITS序列存在大量的转换、颠换，转化/颠换比率为5.347，ITS1和ITS2序列均显示102个变异位点；14种山药种质K2-P遗传距离为0～0.517 2；薯蓣Dioscoreaopposita、褐苞薯蓣Dioscoreapersimilis、日本薯蓣Dioscorejaponica关系亲密，组成单一支系；参薯Dioscoreaalata与山薯Dioscoreafordii关系亲密，聚为另一分支，并位于发育树基部。结论 ITS序列系统树为澄清山药类资源进化关系奠定了基础，序列中丰富的变异位点为多基原山药鉴别提供了科学依据。]]> 2014/4/21 8:52:51 1，范传颍^{1, 2}，包晓青^{1, 2}，陶正明¹，姜 武¹]]> 1434true 目的 分离珍稀濒危药用植物铁皮石斛咖啡酰辅酶A氧甲基转移酶（caffeoyl CoA O-methyltransferase，CCoAOMT）基因（DoOMT）并进行生物信息学和表达模式分析。方法 采用RT-PCR和RACE技术获取基因cDNA全长；利用生物信息学软件预测蛋白的理化性质、结构域和三维建模等分子特性；用DNASTAR 6.0和MEGA 4.0分别进行氨基酸多序列比对和进化关系分析；借助实时定量PCR检测基因表达模式。结果 分离到DoOMT（GenBank注册号KF876839），cDNA全长1 005 bp，编码一条由239个氨基酸组成的多肽，相对分子质量为2.708×10⁴，等电点5.03；DoOMT蛋白不含跨膜域和信号肽，具有氧甲基转移酶family 3、甲基转移酶的保守结构域（13～238、31～238）和8个保守基序；DoOMT与植物CCoAOMTs蛋白一致性为49.4%～78.7%，所在分支隶属于CCoAOMTs分子进化的1b类群，与单子叶植物香草亲缘关系最近；DoOMT基因转录本在石斛根、茎、叶器官中为组成型表达，茎中相对表达量较高，为叶中的4.562倍，根和叶中无显著差异。结论 铁皮石斛CCoAOMT基因DoOMT的分子特征为进一步研究其在铁皮石斛次生代谢和生长发育过程中的作用奠定基础。]]> 2014/4/21 8:52:51 1, 2，胡本祥¹，张大为²，陈 伟¹，郭顺星²]]> 1433true 目的 利用多种方法对金银花和山银花进行鉴别，其中山银花以灰毡毛忍冬为基源，寻找差异性状，以及对2种药材的归属问题进行探讨。方法 采用生物学性状比较、扫描电镜观察花表皮结构、标识成分（绿原酸、木犀草苷、灰毡毛忍冬皂苷乙、川续断皂苷乙）差异对金银花（忍冬）和山银花（灰毡毛忍冬）进行鉴别，结合历史使用情况及市场现状对2种药材基于《中国药典》收载的归属进行分析讨论。结果 忍冬花基部含有大形的叶状苞片，花外表皮具有较多的头部倒圆锥形腺毛，未检测到灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙成分；而灰毡毛忍冬花基部无明显苞片，花外表面几乎未发现腺毛，含有灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙特征成分。结论 花基部叶状苞片、花外表皮腺毛、灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙2个特征成分可以作为区分忍冬和灰毡毛忍冬的鉴别依据。]]> 2014/4/21 8:52:51 1，冯宋岗²，曾建国^{1, 2}]]> 1432true 目的 建立同时测定红景天药材中红景天苷、大花红天素的方法，比较了不同批次药材中这2种成分的质量分数差异。方法 采用HPLC-ELSD法，Kromasil C₁₈（250 mm×4.6 mm，5 μm）为色谱柱，以乙腈-水为流动相，梯度洗脱，体积流量为1.0 mL/min，柱温为30 ℃；氮气体积流量2.0 L/min，漂移管温度45 ℃，增益为2。结果 红景天苷进样量在0.806～8.06 μg呈良好线性关系（r＝0.999 6，n＝6），平均回收率为100.56%；大花红天素进样量在2.142～21.42 μg呈良好线性关系（r＝0.999 9，n＝6），平均回收率为100.40%。结论 该方法简便准确，重复性好，可作为红景天药材中红景天苷、大花红天素的测定方法。]]> 2014/4/21 8:52:51 1, 3，张 桥^{2, 3}，杨素德^{2, 3}，孙永成^{2, 3}，张广仁^{1, 3}，王振中^{2, 3}，毕宇安^{2, 3}，萧 伟^{2, 3}]]> 1431true 目的 获取金荞麦花青素合成途径关键酶花青素合成酶（anthocyanins synthase，ANS）基因的全长序列，并进行序列分析；对花期金荞麦ANS基因在各组织中表达水平与花青素量的相关性进行分析。方法 利用同源克隆技术获得ANS基因cDNA序列；采用半定量RT-PCR对ANS表达量进行分析；采用分光光度法测量花青素量。结果 金荞麦ANS基因cDNA包含一个1 077 bp的ORF，编码358个氨基酸，命名为FdANS。生物信息学分析表明，该基因编码蛋白与其他植物ANS蛋白氨基酸序列同源率较高。FdANS在花期金荞麦不同组织中的表达量分析表明，其表达量花＞叶＞茎＞根，花青素量为花＞叶＞茎＞根。结论 在金荞麦中首次获得ANS基因的cDNA序列，编码蛋白具有ANS同源蛋白的典型特征。FdANS基因在金荞麦根、茎、叶和花中的表达量与花青素量具有相关性。]]> 2014/4/2 9:16:38 1430true 目的 克隆珍稀濒危药用植物铁皮石斛丙酮酸激酶（pyruvate kinase，PK）基因（DoPK），并进行生物信息学分析以及检测基因在不同器官中的表达情况。方法 采用RACE技术获得基因的全长cDNA；利用生物信息学软件预测蛋白的理化性质、结构域及亚细胞定位等分子特性；用DNASTAR 6.0和MEGA 4.0分别进行氨基酸多序列比对和进化关系分析；借助r实时荧光 (real-time quantitative) PCR (RT-qPCR)分析基因在不同器官中的表达情况。结果 克隆获得DoPK（GenBank注册号KC178572）的cDNA全长1 895 bp，编码一条由511个氨基酸组成的多肽，相对分子质量为55 040，等电点7.00；DoPK基因与江南卷柏、拟南芥、马铃薯和葡萄等植物的PK基因有71%、86%、89%和91%的相似性；DoPK蛋白包含保守的丙酮酸激酶结构域（21～497）和活性位点（235～247）；DoPK属于胞质型的CYTOSOLIC-1亚类，与单子叶植物亲缘关系较近；DoPK基因为组成型表达，其转录本在石斛茎中的相对表达量较高，为叶中的2.29倍，根中次之,为叶中的1.28倍。结论 克隆了胞质型的铁皮石斛DoPK基因的全长cDNA序列，为进一步研究其在铁皮石斛生长发育中的作用奠定基础。]]> 2014/4/2 9:16:38 1，蔡 茜¹，张大为²，张 岗^{1, 2}，郭顺星²]]> 1429true 目的 从不同地区采集五味子植株，分离内生细菌，并进行菌群密度、拮抗菌筛选和抑菌活性研究。方法 采用平板分离法分离内生细菌并纯化典型菌株；平板对峙法测定体外拮抗活性；生长速率法测定抑菌活性。结果 不同种植地、五味子不同器官中内生细菌的菌群密度差异较大，野生的较栽培的大；五味子各器官中，根中的内生细菌最多，其次为茎，叶片中最少。从分得的大量内生细菌中共纯化出302株内生细菌，拮抗菌比率平均为24.19%。从中选出了12株对五味子茎基腐病菌、人参根腐病菌、棉花枯萎病菌、番茄灰霉病菌、人参黑斑病菌具有较好拮抗作用的菌株。12株菌株的发酵产物对供试病原菌菌丝生长均有一定的抑制作用，其中JYg-2对人参根腐病的抑制率最高，达80.02%。结论 五味子植株体内存在大量内生细菌，并且含有一定比率的拮抗菌，拮抗活性稳定。因此五味子内生细菌可以成为开发拮抗菌资源的重要途径，并具有较大潜能。]]> 2014/4/2 9:16:38 1, 2，孙晶波³，高 洁¹]]> 1428true 目的 考察四川麦冬基地麦冬须根的产量，对麦冬及其须根进行显微特征观察比较，并对块根和须根中麦冬皂苷质量分数进行对比。方法 统计麦冬植株块根与须根质量比值，应用显微镜及显微摄影系统观察须根的表皮细胞、皮层、中柱以及髓部的显微特征；采用UV法对麦冬块根及其须根的提取物进行了总皂苷测定，HPLC-ELSD法测定麦冬块根及须根中麦冬皂苷D质量分数。结果 川麦冬植株麦冬须根与块根质量平均比值为0.68，两者在表皮细胞形状、皮层与中柱排列及比例有一定差异；麦冬与须根平均总皂苷量为1.204%和2.847%；麦冬皂苷D在0.416～10.40 μg内与峰面积呈良好线性关系（r＝0.999 3），平均回收率为99.12%，RSD为1.39%。麦冬块根与须根平均麦冬皂苷D质量分数分别为0.035%和0.041%。结论 川产麦冬须根资源量大，与麦冬组织学差异主要在于表皮细胞形状、皮层与中柱排列及比例，而粉末特征无显著差异；川产麦冬须根总皂苷质量分数明显高于麦冬，而麦冬皂苷D质量分数与麦冬块根无显著性差异。]]> 2014/4/2 9:16:38 1，王化东¹，何 礼¹，江洪波¹，左承学²]]> 1427true 目的 建立测定金银花药材中新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C、断氧化马钱子苷8种成分的HPLC方法。方法 采用RP-HPLC法，色谱柱为Luna 5 μm C₁₈柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相为甲醇（A）-0.1%磷酸水（B）溶液，梯度洗脱：0～20 min，12%～30% A；20～60 min，30%～50% A，体积流量1.0 mL/min；检测波长237、324 nm，柱温30 ℃。结果 8种成分均达到基线分离，各成分均有较宽的线性范围和良好的线性关系（r＞0.999 9）；回收率在98.72%～102.50%。结论 建立的测定方法准确灵敏、重复性好，能较全面地评价金银花药材的质量。]]> 2014/4/2 9:16:38 1, 2，王永香^{1, 2}，孟 谨^{1, 2}，付小环^{1, 2}，毕宇安^{1, 2}，王振中^{1, 2}，萧 伟^{1, 2}]]> 1426true 目的 明确五指毛桃Ficus hirta基原，以更好地控制药材质量。方法 考证五指毛桃文献，研究并记述五指毛桃植物形态、生药特征、各部分组织粉末显微特征及化学成分薄层色谱特征并进行分析。结果 提供了五指毛桃使用的历史依据，生药和薄层色谱数据，得到了五指毛桃标准中未曾记载的茎叶生药特征，提出根及茎叶不可同等使用。结论 为完善五指毛桃生药及成药质量标准提供依据。]]> 2014/4/2 9:16:38 1，严 华¹，李 韦²，魏 锋¹，马双成¹]]> 1425true 目的 构建鬼针草Bidens pilosa及其与近缘种之间系统发育关系，准确鉴别鬼针草及其近缘种。方法 提取鬼针草及其近缘种DNA，对核基因ITS片段和叶绿体基因psbA-trnH序列扩增和测序，计算物种种内、种间Kimura 2-parameter （K2P）遗传距离。采用最近距离、相似性搜索、构建Neighbor-joining（NJ）系统聚类树3种方法进行鉴定分析。结果 ITS和psbA-trnH分子系统树支持鬼针草不同居群样本聚为一单系分支，支持率为79%和87%；其中，鬼针草与白花鬼针草构成一单系分支，金盏银盘与婆婆针构成姐妹群分支，上述两分支ITS和联合数据支持率均为100%；狼把草与柳叶鬼针草、大狼把草构成一单系分支（ITS和联合数据支持率为100%，psbA-trnH数据支持率为96%）。鬼针草及其近缘种种间ITS和psbA-trnH序列的遗传距离为0.007 94～0.128 80和0.005 18～0.074 52，均远大于鬼针草种内遗传距离0～0.001 59和0～0.002 52。结论 鬼针草与白花鬼针草亲缘关系最近，金盏银盘与婆婆针构成姐妹群关系，狼把草与柳叶鬼针草、大狼把草亲缘关系较近。ITS和psbA-trnH序列可以准确鉴别鬼针草及其近缘种。]]> 2014/3/18 16:11:34 1424true 目的 建立并优化土鳖虫基因组DNA的RAMP-PCR反应体系及扩增程序，为土鳖虫遗传多样性的研究提供依据。方法 以雌性土鳖虫为材料，常规酚/氯仿提取基因组DNA。使用RAMP引物（ISSR807＋RAPD A₅），采用正交优化方法对影响PCR反应的Mg²⁺、dNTPs、引物、DNA聚合酶、模板进行体系优化，同时选择最佳的引物退火温度。结果 最适引物（ISSR807＋RAPD A₅）组合进行土鳖虫的RAMP-PCR分析的反应体系为总体积25 μL，包括10×缓冲液2.5 μL、Mg²⁺ 1.00 mmol/L、dNTPs 2.00 mmol/L、引物0.50 μmol/L、TaqDNA聚合酶1.00 U、DNA模板1.50 ng/μL，最佳退火温度为46.8 ℃。结论 本实验建立的最佳RAMP-PCR反应体系稳定、重复性好，可用于土鳖虫种质资源鉴定和遗传多样性研究。]]> 2014/3/18 16:11:34 1，苏双良¹，任慧君²，赵志壮¹，白秀娟¹]]> 1423true 目的 探索外源一氧化氮（NO）对干旱胁迫下白花蛇舌草Oldenlandia diffusa种子萌发的影响，并确定缓解干旱胁迫的硝普钠（SNP，NO外源供体）最适浓度。方法 用15% PEG 6000模拟干旱胁迫，测定不同浓度梯度SNP处理后干旱胁迫下白花蛇舌草种子的发芽势、发芽率、发芽指数和活力指数。结果 干旱胁迫显著抑制了白花蛇舌草种子的萌发过程。SNP能显著促进干旱胁迫下白花蛇舌草种子的萌发，0.3 mmol/L SNP处理可提高发芽率和活力指数2.78倍和7.77倍；从发芽势和发芽指数来看，0.1 mmol/L和0.3 mmol/L SNP处理效果最佳且二者差异不显著。结论 SNP可显著缓解干旱胁迫对白花蛇舌草种子萌发的不利影响，提高白花蛇舌草种子的抗旱能力，其中以0.3 mmol/L SNP效果最佳。]]> 2014/3/18 16:11:34 1422true 目的 探究青川产北柴胡种子的劣变机制，揭示其不耐贮藏的原因。方法 采用人工老化的方法处理柴胡种子，并分析老化过程中种子的抗氧化酶活性、电导率和营养物质量变化。结果 随老化时间延长，老化种子的过氧化物酶（POD）、超氧化物歧化酶（SOD）、抗氧化酶（CAT）活性持续下降；可溶性糖和可溶性蛋白的量降低，老化3 d后均处于低量水平；种子浸出液电导率下降；经老化处理1 d的种子即已丧失萌发能力。结论 青川产北柴胡种子劣变机制包含氧化损伤、膜损伤和营养物质过度消耗3条途径，种子不宜长期贮藏，且贮藏要避免高温、高湿环境。]]> 2014/3/18 16:11:34 1，陈兴福¹，谌琴琴¹，屈晓霞¹，王 菲¹，杨兴旺²]]> 1421true 目的 建立N-丙基乙二胺（PSA）-高效液相-三重四极杆串联质谱（HPLC-QQQ-MS/MS）法测定浙贝母中有机磷等12种农药残留的方法，并收集主产地浙江等地20批浙贝母样品进行农药残留测定。方法 浙贝母样品加乙腈提取，过PSA柱净化，采用LC-QQQ-MS/MS方法在多反应监测（MRM）模式下测定，内标法定量。结果 12种农药成分在相应的测定范围内线性关系良好，相关系数在0.998 6～0.999 8，12种农药在90、300、900 ng/mL 3个添加水平下，加样回收率范围为68.1%～108.0%，RSD为1.1%～6.1%，各农药的检出限在0.08～1.0 μg/kg。结论 该方法可应用于浙贝母药材中12种农药残留成分的同时检测。浙贝母药材农药残留量甚微，符合安全性要求。]]> 2014/3/18 16:11:35 1420true 目的 建立同时测定常山胡柚花Citrus changshan-huyou Y. B. Chang中柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷的RP-HPLC方法。方法 采用HPLC法，色谱柱为安捷伦ZORBAX SB-C₁₈柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相为乙腈-0.2%磷酸（15∶85）；检测波长为284 nm；体积流量1.0 mL/min；柱温为40 ℃；峰面积外标法定量。结果 柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷分别在28.45～284.5、18.09～180.93、85.86～858.55 ng内呈良好的线性关系，回归方程分别为Y＝1 725.2 X＋6.383 3，r＝0.999 8；Y＝1 764.6 X＋0.416 7，r＝0.999 8；Y＝1 914.7 X＋15.892，r＝0.999 6。平均回收率分别为98.83%、99.05%、98.83%；RSD分别为2.12%、2.30%、1.85%；并按该建立的方法，测得样品中柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷的量。结论 本方法简便、快速、准确、可靠，可为常山胡柚花的质量控制提供参考。]]> 2014/3/18 16:11:35 1，冯敬骞²，胡建华³，傅厚道⁴]]> 1419true 目的 明确内源多胺是否介导真菌诱导子诱导白桦三萜的合成。方法 将40 μg/mL真菌诱导子、1 mmol/L腐胺（Put）和2 mmol/L多胺合成抑制剂D-精氨酸（D-Arg）添加到培养8 d的白桦悬浮培养体系中，利用HPLC法和比色法分析多胺量和三萜量。采用药理学和恢复实验分析多胺在真菌诱导子诱导白桦三萜合成中的作用。结果 真菌诱导子或Put处理后，白桦悬浮细胞中的多胺量、三萜量和产量均呈增加趋势，其中处理24 h时，三萜量达最大值，分别增加了68.54%和30.34%。真菌诱导子和Put共同处理虽提高了三萜量，但其产量却低于真菌诱导子单独处理。真菌诱导子和D-Arg共同处理后三萜量低于真菌诱导子单独处理，处理24 h时降低程度最高，为40.57%。恢复实验发现，随着恢复时间的延长，真菌诱导子、Put以及真菌诱导子与D-Arg对白桦三萜合成的影响逐渐减弱，恢复到对照水平。结论 多胺介导了真菌诱导子促进白桦悬浮细胞中三萜的合成。]]> 2014/3/5 16:52:28 1418true 目的 研究介导内生真菌诱导子促进苍术悬浮细胞中苍术素生物合成的信号分子及信号转导途径，并探讨诱导子对苍术素合成途径关键酶活性的影响。方法 采用植物细胞悬浮培养法，考察内生真菌诱导子处理下苍术细胞中一氧化氮（NO）、水杨酸（SA）及苍术素量的变化。结果 内生真菌诱导子通过诱导苍术细胞中一氧化氮合酶（NOS）、苯丙氨酸解氨酶（PAL）以及乙酰辅酶A羧化酶（ACC）的活性，显著促进苍术细胞的NO迸发、SA和苍术素的合成。NOS抑制剂PBITU可以阻断诱导子对NO、SA和苍术素合成的促进作用，外源NO供体SNP及外源SA单独处理也能促进苍术素的合成，说明NO和SA是参与苍术素合成的信号分子，且NOS是参与诱导子诱发苍术细胞NO迸发的主要途径。NO猝灭剂cPITO可以有效清除诱导子诱发苍术细胞的NO迸发，显著阻断诱导子对苍术细胞中SA和苍术素合成的促进作用，外源SNP可以逆转cPITO对PAL、ACC活性以及SA、苍术素合成的抑制作用，表明NO是介导内生真菌诱导子诱发苍术细胞中苍术素和SA生物合成所必需的上游信号分子。结论 NO主要通过SA信号途径介导内生真菌诱导子激活ACC，显著促进苍术细胞中苍术素的生物合成。]]> 2014/3/5 16:52:28 1，汪冬庚¹，濮雪莲¹，黄金华¹，赵 喜¹，仇雯倩¹，江 曙²]]> 1417true 目的 研究不同培养条件对铁皮石斛类原球茎在生物反应器培养的影响。方法 采用接种量、通气量、蔗糖浓度、光照强度等单因素试验设计，烘干法测定生物量，苯酚-硫酸法测定多糖量，数据采用SPSS 16.0软件分析。结果 在生物反应器培养条件下，利于铁皮石斛类原球茎增殖和多糖积累的培养基组分为1/2 MS基本培养基添加1.0 mg/L NAA、5%椰乳、3%蔗糖，pH值为6.0；接种量为40 g/L，采用孔径为15 μm的多孔喷头，通气量用1.0 L/min和0. 5 L/min交替使用以及光照强度为2 000 lx等培养条件有效地提高3类原球茎增殖系数和多糖量。结论 不同的培养条件对铁皮石斛类原球茎的生长、多糖的变化有显著影响，适宜的培养条件对铁皮石斛类原球茎的生物量和主要药用成分的生产具有重要的实践意义。]]> 2014/3/5 16:52:28 1, 2, 3，李振中^{2, 3}，张 俊^{2, 3}，王 芬¹，刘幸佳¹，崔永一²]]> 1416true 目的 研究檵木中银椴苷的提取分离及对银椴苷进行质量控制。方法 采用乙醇回流法提取药材，然后经过大孔树脂、减压硅胶柱色谱、洗脱，得到银椴苷单体，采用Cosmosil C₁₈柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），流动相为甲醇-0.1%磷酸水溶液（55∶45），检测波长为320 nm，体积流量1.0 mL/min。结果 银椴苷能够很好地分离出来，质量分数为98%，银椴苷在0.041～0.513 μg呈良好的线性关系（r＝0.999 7）；平均回收率为100.05%，RSD为1.50%。结论 运用此方法能将银椴苷较好地提取分离，同时测定方法不仅操作简单、准确，且重复性好，可用于檵木中银椴苷的测定。]]> 2014/3/5 16:52:28 1，郭 强¹，冯育林¹，张武岗¹，杨世林¹，金浩鑫²，饶 毅¹]]> 1415true 目的 明确雌雄异株植物西藏赤瓟Thladiantha setispina在环境胁迫下的响应差异以及环境因素对西藏赤瓟结实和产量的影响。方法 通过对比研究不同播期处理对田间西藏赤瓟雌株率、果实性状以及种子产量的影响。结果 不同播期对西藏赤瓟雌雄株分化影响显著，适当延后播期可以显著地提高西藏赤瓟的雌株比例（P＜0.01）；播期对西藏赤瓟的结实性能的影响程度比较有限，不同播期处理间西藏赤瓟果实单果平均鲜质量、干质量及干物质量差异并不显著（P＞0.05），但播期对西藏赤瓟产量构成相关指标却有着直接影响，处理间产量差异达到极显著水平（P＜0.01）。结论 适当延后播期，有利于提高西藏赤瓟种子产量。]]> 2014/3/5 16:52:28 1414true 目的 应用核基因ITS和叶绿体psbA-trnH序列对绿绒蒿属Meconopsis Vig. 藏药进行鉴别。方法 采集欧贝3种基原植物罂粟科绿绒蒿属毛瓣绿绒蒿Meconopsis torquata、红花绿绒蒿Meconopsis punicea、全缘叶绿绒蒿Meconopsis integrifolia，才温2种基原植物罂粟科绿绒蒿属总状绿绒蒿Meconopsis racemosa、多刺绿绒蒿Meconopsis horridula，对植物核糖体DNA内转录间隔区、叶绿体psbA-trnH非编码区序列进行测定与分析。结果 ITS序列分析显示，总状绿绒蒿与多刺绿绒蒿序列一致，其余任意两种间具有变异位点；psbA-trnH序列分析显示，任意两种间均有变异位点；两者结合可有效对所有5种植物进行区分鉴定。结论 ITS和psbA-trnH序列相结合可用于绿绒蒿属藏药欧贝和才温的分子鉴定。]]> 2014/2/20 9:16:48 1，赵志礼¹，孟千万¹，嘎 务²，米 玛²]]> 1413true 目的 研究凹叶厚朴愈伤组织的诱导，并对其产生的有效成分厚朴酚与和厚朴酚总量进行检测，以期获得生产药用成分的新途径，补充药材资源的不足。方法 以不同母株种子幼苗的不同营养器官为外植体，采用不同种类及不同质量浓度的植物调节剂诱导愈伤组织，并在继代培养基中加入前体化合物L-苯丙氨酸及D, L, β-苯丙氨酸对愈伤组织进行诱导培养；HPLC法检测不同培养途径获得的愈伤组织中厚朴酚与和厚朴酚量的总和。结果 筛选出最佳愈伤组织诱导培养基为：B₅＋6-BA 2.0 mg/L＋2, 4-D 1.5 mg/L；不同母株种子幼苗诱导的愈伤组织总酚量存在显著差异，质量分数变化范围为0.004%～0.228%；不同营养器官作为外植体诱导的愈伤组织总酚量存在差异，以幼茎为外植体诱导的愈伤组织总酚量最高可达0.25%；继代培养基中添加前体化合物D, L, β-苯丙氨酸，能有效提高愈伤组织总酚量8～10倍。结论 凹叶厚朴愈伤组织中含有少量的厚朴酚及和厚朴酚，不同的母株种子幼苗及不同幼苗器官诱导的愈伤组织总酚量都有差异，D, L, β-苯丙氨酸能有效促进愈伤组织中总酚的合成。]]> 2014/2/20 9:16:48 1，许 欢¹，王志毅¹，张凤宇¹，刘江海¹，王晓明²]]> 1412true 目的 研究灵芝生长周期内不同部位基质中物质量的变化规律，并通过基质中胞外酶活性变化规律初步探究基质中物质量变化的机制。方法 采用熟料袋式栽培灵芝，将灵芝的生长期分为8个阶段，并把基质4等分，研究不同部位基质中总糖、还原糖、水溶性蛋白和游离氨基酸量的变化规律；并通过各部位基质中木质素酶系（漆酶和锰过氧化物酶）、纤维素酶系（羧甲基纤维素酶、半纤维素酶和滤纸酶）和酸性蛋白酶活性变化规律探究不同部位基质中物质量变化的机制。结果 在灵芝的生长周期内，不同部位基质中总糖量呈下降趋势；还原糖量在出原基之前呈升高趋势，出原基之后降低；不同部位基质中水溶性蛋白质总体上呈升高趋势；基质中氨基酸量在菌丝满袋之前一直降低，菌丝满袋之后到菌蕾期其量升高，并在菌蕾期达到峰值，随后其量又呈下降趋势；不同部位基质中漆酶活性变化规律呈U字形，其活性在原基时期最低，锰过氧化物酶活性在营养生长期缓慢升高，菌丝满袋之后其活性下降；不同部位基质中纤维素酶系酶活性和酸性蛋白酶活性总体上呈升高趋势。结论 在灵芝生长周期内，各部位基质中物质量随着灵芝的生长发育呈现不同的变化规律；基质中灵芝胞外酶活性能够影响物质的量，即基质中的灵芝胞外酶活性与物质量具有一定的相关性。]]> 2014/2/20 9:16:48 1，余梦瑶²，魏 巍²，许晓燕²，江 南²，郑林用³，杨志荣¹，罗 霞²]]> 1411true 目的 优化大花红景天再生体系并建立抗性筛选最佳条件，为建立大花红景天高效遗传转化体系奠定基础。方法 以大花红景天叶片为外植体，观察再生过程各阶段在不同配比的6-BA、NAA、IBA诱导下的诱导率及生长状况，并利用梯度筛选出外植体对卡那霉素（Kan）和抗潮霉素（Hyg）的抗性。结果 MS＋3.0 mg/L 6-BA＋1.0 mg/L NAA＋700 mg/L L-Pro为叶片不定芽分化的最佳培养基，分化率达到92%；MS＋700 mg/L L-Pro为根培养基；200 mg/L Kan、10 mg/L Hyg为大花红景天遗传转化的最佳筛选压；培养过程中添加10 mg/L Vc能有效抑制酚类物质的外泌。结论 优化了大花红景天植株再生体系，筛选出适宜于大花红景天遗传转化体系的Kan和Hyg筛选压。]]> 2014/2/20 9:16:48 1，蔡翠萍¹，常 凯^{2, 4}，廖志华^{2, 3}，兰小中¹]]> 1410true 目的 建立老鸦瓣芽茎愈伤组织诱导及丛生芽增殖体系。方法 以老鸦瓣冷藏芯芽产生的芽茎为外植体，MS为基本培养基，考察不同质量浓度6-BA、NAA对愈伤诱导、分化及丛生芽增殖的影响。结果 芽茎诱导愈伤的最佳培养基为MS＋6-BA 0.5 mg/L＋NAA 2.0 mg/L，愈伤诱导率78.54%，诱导出的愈伤组织在原培养基上继代培养增殖后即可进行芽分化；愈伤分化不定芽最佳培养基为MS＋6-BA 2.0 mg/L＋NAA 0.2 mg/L，芽诱导率为66.21%；丛生芽增殖培养基为MS＋6-BA 0.5 mg/L＋NAA 0.2 mg/L，增殖系数2.48。结论 筛选出芽茎诱导愈伤、分化不定芽及丛生芽增殖的培养基，初步建立了老鸦瓣芽茎组织培养体系。]]> 2014/2/20 9:16:48 1，史 俊²，朱再标¹，席刚俊²，郭巧生¹，马宏亮^{1, 3}，赵桂华²]]> 1409true 目的 对连接黑三棱初生代谢及次生代谢途径的关键酶苯丙氨酸解氨酶（phenylalanine ammonia lyase，PAL）进行基因全长的克隆和生物学信息分析。方法 以黑三棱总RNA为模板，采用同源克隆法和RACE技术克隆黑三棱PAL基因的cDNA全长，并通过DNAMAN软件和ExPASy在线分析等方法对其生物信息学进行分析。结果 获得黑三棱PAL基因全长cDNA，GenBank注册号为KF633470，序列分析表明，所克隆的cDNA全长为2 413 bp，包含一个2 151 bp的开放阅读框架，编码716个氨基酸的蛋白。预测该蛋白的相对分子质量为1.98×10⁵，等电点为4.84，无信号肽，含有PAL酶活性中心序列GTITASGDLVPLSYIAG。结论 首次克隆并获得黑三棱PAL基因全长cDNA，为黑三棱药效成分生源合成途径的阐明和改善中药材品质提供科学依据。]]> 2014/1/26 14:50:43 1408true 目的 对旋覆花属8种药用植物进行ITS2序列分析，为其分子鉴定提供依据。方法 对4种旋覆花属药用植物的8个样本ITS2序列进行PCR扩增和测序，同时从GenBank下载13个样本。用MEGA5.0计算其种间、种内的K2P距离，及各序列变异位点并进行聚类分析。结果 旋覆花属8种药用植物ITS2的长度为210～212 bp，变异位点为60个；旋覆花药材2种不同来源药用植物有3个变异位点，与其他同属6种植物有13～43个变异位点；构建的系统发育树显示旋覆花药材的不同基原样本各聚为一支，能很好与其他6种植物区分；旋覆花Inula japonica、欧亚旋覆花I. britannica、总状土木香I. racemosa、土木香I. helenium 4个物种的遗传距离值远小于其与羊耳菊I. cappa、赤茎羊耳菊I. rubricaulis、显脉旋覆花I. nervosa、泽兰羊耳菊I. eupatoerioides 4个物种的遗传距离值。结论 ITS2序列能够为旋覆花属8种药用植物的鉴定和Flora of China对羊耳菊、赤茎羊耳菊、显脉旋覆花、泽兰羊耳菊分类修订提供一定的分子证据。]]> 2014/1/26 14:50:43 1，喻 珊¹，罗 焜²，姚 辉²，陈科力¹]]> 1407true 目的 分析根腐病三七根内可培养细菌的多样性。方法 用牛肉膏蛋白胨培养基分离根腐病三七根内的细菌，经细菌通用引物27F/1492R扩增16S rDNA后，分别用Rsa I和Hin6 I限制性内切酶对扩增产物进行酶切，结合限制性片段长度多态性（RFLP）分析方法和DNA测序技术，对分离自根腐病三七根内的细菌进行初步鉴定。结果 根腐病三七根内的细菌分属于8个类群，依占总菌数的比例分别是芽孢杆菌属Bacillus 22.47%、无色杆菌属Achromobacter 5.62%、寡养单胞菌属Stenotrophomonas 5.62%、类芽孢杆菌属Paenibacillus 4.49%、鞘氨醇杆菌属Sphingobacterium 1.12%、苍白杆菌属Ochrobactrum 1.12%、不动杆菌属Acinetobacter 1.12%及肠杆菌科的一些属58.43%。结论 泛菌属和芽孢杆菌属是根腐病三七根中的两大优势细菌类群。]]> 2014/1/26 14:50:43 1，张倩茹²，付晓萍²，李凌飞²]]> 1406true 目的 研究桑黄菌发酵过程中酶活性的变化及其和胞外多糖量的关系。方法 在发酵过程中测定原始菌株和变异菌株的羧甲基纤维素酶、滤纸酶、木质素过氧化物酶（LiP）、锰过氧化物酶（MnP）、漆酶（Lac）活性变化及培养基中胞外多糖量变化。结果 2菌株的羧甲基纤维素酶和滤纸酶的活性变化呈单峰曲线，分别在第4天和第6天达到峰值；原始菌株和变异菌株的LiP、锰过氧化物酶和漆酶活性的变化呈双峰曲线，且原始菌株和变异菌株LiP的酶促反应米氏常数（K_m）分别为25.96、27.07 μg/mL；MnP的K_m分别为13.28、13.49 mmol/mL；Lac的K_m分别为0.12、0.21 mmol/mL；培养基中多糖量前期快速下降，10 d后趋于稳定。结论 桑黄菌发酵时能产生较全面的分解木质素和纤维素的酶系统，原始菌株和变异菌株产生的LiP和MnP为同种酶，Lac为同功酶。桑黄菌胞外酶活性变化和培养基中胞外多糖量变化有一定关系。]]> 2014/1/26 14:50:43 1405true 目的 对菊科药用植物菊Chrysanthemum morifolium非药用部位化学成分的分布和动态积累进行分析评价，为该药用生物资源的综合利用提供科学依据。方法 分别采用超高效液相-三重四级杆质谱联用仪（UPLC-TQ/MS）、紫外可见分光光度法（UV）、超高效液相-二极管阵列检测器（UPLC-DAD），测定不同生长期菊根、茎、叶中氨基酸类、核苷类、黄酮类及有机酸类成分的量。结果 氨基酸类成分分析结果表明，菊的根、茎、叶中检测到13种氨基酸，总氨基酸的量分布顺序为：根＞叶＞茎；核苷类成分分析结果表明，菊叶中检测到4种核苷，茎和根中分别检测到2种核苷，总核苷的量分布顺序为：叶＞根＞茎；黄酮类成分分析结果表明，总黄酮类成分的量分布顺序为：叶＞根＞茎，其中叶片所含黄酮类成分量为9.94%～18.66%，根中质量分数为5.88%～8.02%，茎中质量分数为3.98%～5.41%；有机酸类成分分析表明，总有机酸的质量分数分布顺序为：叶＞根＞茎，叶中质量分数为2.44%～4.94%，根中质量分数为1.89%～2.64%，茎中质量分数为1.20%～1.48%。不同生长期菊根、茎、叶中黄酮类和有机酸类成分量发生动态变化，在菊花采摘后达到高峰。结论 菊非药用部位尤其是叶中含有丰富的资源性化学成分，且在采摘花序后为资源丰产期。该研究结果为菊花采收后废弃物的资源化利用提供了有益的借鉴。]]> 2014/1/26 14:50:43 1, 2，郭建明²，杨念云²，钱大玮²，聂 慧^{1, 2}，宿树兰²，欧阳臻¹，段金廒^{1, 2}]]> 1404true 目的 克隆刺五加的液泡膜内在蛋白（tonoplast intrinsic proteins，TIP）基因，并对其进行生物信息学和表达分析。方法 采用cDNA末端快速扩增（RACE）技术克隆刺五加TIP基因cDNA的全长序列。以GAPDH为内参照基因，通过RT-PCR法检测TIP基因在不同生长发育时期和器官中的表达情况。结果 刺五加TIP基因cDNA的全长1 080 bp，开放阅读框长756 bp，编码251个氨基酸的蛋白，该蛋白包含TIP家族的标志性序列。刺五加的TIP蛋白具有6个跨膜螺旋，定位于液泡膜。表达分析结果显示，刺五加TIP基因在不同生长发育时期和不同器官中均有表达，但表达量具有显著差异（P＜0.05）。其中盛花期的表达量最高，是最低量果实快速生长期的2.07倍；各器官中，叶片的表达量最高，是最低量根的1.73倍。结论 首次分离到刺五加TIP基因的cDNA全长序列，并证实其在盛花期的叶中表达量最高，为进一步研究TIP基因对刺五加水分代谢的影响奠定基础。]]> 2014/1/16 15:38:04 1403true 目的 通过对猴耳环种子萌发进行人工水分胁迫处理，探讨其对种子萌发过程中生理生化指标的影响。方法 分别采用5%、10%、15%、20%聚乙二醇6000（PEG）处理猴耳环种子，测定种子的发芽率、平均发芽速度、发芽指数及萌发过程中细胞膜透性、脯氨酸量、可溶性蛋白量、丙二醛（MDA）量、超氧化物歧化酶（SOD）和过氧化物酶（POD）活性的动态变化。结果 随着PEG胁迫强度的增加，种子萌发受到明显抑制，发芽率、发芽指数显著降低，提高了平均发芽速度；萌发期间各生理指标均高于对照，细胞膜透性、脯氨酸、MDA量呈上升趋势，可溶性蛋白量呈下降趋势，SOD、POD活性均不同程度地表现为先上升后下降的趋势。结论 猴耳环在轻度水分胁迫时，具有一定的耐旱性。]]> 2014/1/16 15:38:04 1，潘超美¹，柳 跃¹，肖 斌¹，李露华¹，邹国光²，范光孝²]]> 1402true 目的 研究刺五加有效成分的提取工艺及比较不同产地刺五加中有效成分的量。方法 采用HPLC法测定刺五加中紫丁香苷、刺五加苷E和异嗪皮啶。确定提取溶媒，采用正交试验法考察加溶媒量、提取时间和提取次数对提取工艺的影响，确定最佳提取工艺。根据最佳提取工艺，比较不同产地刺五加中紫丁香苷、刺五加苷E和异嗪皮啶的量。结果 正交试验所得的最佳提取条件为加10倍量的50%乙醇，提取3次，每次2 h。黑龙江产的刺五加所含紫丁香苷、刺五加苷E和异嗪皮啶量较高。结论 该提取工艺合理、稳定、可行；不同产地刺五加药材中紫丁香苷、刺五加苷E和异嗪皮啶的量存在一定的差异。]]> 2014/1/16 15:38:04 1, 2，傅宏征 ²，金学英¹，王建斌²，高 纯²，盖春燕²，胡 荣¹]]> 1401true 目的 以高效液相色谱-二极管阵列检测器（HPLC-DAD）色谱图为基础建立地黄多波长指纹图谱，并通过熟地黄炮制终点检测分析其应用价值。方法 样品采用超声波法甲醇提取，蒸干后用15%甲醇定容，使用Waters Sunfire C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），乙腈-0.02%磷酸水溶液线性梯度洗脱，最大波长法选择多波长下重叠共有峰。用随机抽取的熟地样品多波长指纹图谱共有峰的平均值作为熟地的对照指纹图谱，通过炮制样品与熟地标准多波长指纹图谱的相似性比较获得最佳加工炮制时间。结果 结果显示205、284 nm下地黄多波长指纹图谱可获得18个共有峰。生地黄在蒸制25 h后与熟地黄对照指纹图谱相似性最大，是熟地黄蒸制的最佳时间。结论 多波长指纹图谱有利于显示样品成分细微变化及精确控制加工过程，可用于中药材加工过程中质量控制。]]> 2014/1/16 15:38:04 1，梁宗锁^{1, 2}，杨东风¹，刘永红¹，段琦梅^{1, 2}]]> 1400true 目的 研究不同采收期小叶榕叶的HPLC指纹图谱，为鉴定小叶榕药材提供依据，为确定其最佳采收期提供参考。方法 以对羟基苯甲酸仲丁酯作为参照峰将指纹图谱分为高极性和低极性2部分进行表达。Purospher^? STAR C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），Guard色谱柱：XB-C₁₈（Welch Materials，5 μm），流动相为0.2%磷酸水溶液（A）-乙腈（B），采用梯度洗脱；体积流量1.0 mL/min；柱温35 ℃；检测波长270 nm（高极性部位）和290 nm（低极性部位）。利用HPLC法测定不同采收期的12个样品的色谱图谱。结果 小叶榕叶中所含成分的各色谱峰均得到了有效分离，在测定的12批药材中，共有55个色谱峰，其中图谱显示有44个峰为12批样品所共有，确定为特征指纹峰，对其中10个共有指纹峰进行了标记；初步发现最佳采收期为秋冬季节。结论 该法建立的HPLC指纹图谱具有可靠性，可为进一步研究制定小叶榕叶的质量标准提供依据。]]> 2014/1/16 15:38:04 ]]> 1399true 目的 从白木香Aquilaria sinensis总RNA中克隆倍半萜合成酶基因，并对其进行生物信息学及表达分析。方法 对白木香总RNA进行反转录聚合酶链式反应（reverse transcription-PCR，RT-PCR）和cDNA末端快速扩增（rapid amplification of cDNA ends，RACE），获得完整的开放阅读框（ORF）。运用生物信息学的方法对该序列进行相似性比较和同源性分析，预测编码蛋白，并对其进行各种理化性质分析。通过半定量PCR检测该基因在白木香树干中不同部位的表达情况。结果 获得As-SesTPS基因，ORF长1 629 bp，编码542个氨基酸，与葡萄Vitis vinifera的大根香叶烯-D合成酶 [(-)-germacrene D synthas]相似性最高，且包含RRx₈W和DDxxD的保守序列。As-SesTPS蛋白无跨膜区域，定位于细胞质中，且仅在白木香结香部位表达。结论 首次从白木香中克隆得到可能编码大根香叶烯-D合成酶的基因，为白木香倍半萜生物合成代谢途径的研究提供参考。]]> 2014/1/2 9:36:02 1, 2，王 磊¹，何 欣^{1, 3}，白 玲²，高晓霞³，严寒静³，章卫民¹]]> 1398true 目的 通过构建茉莉酸甲酯（MeJA）处理的白木香cDNA文库，为揭示伤害诱导沉香倍半萜合成的分子机制奠定基础。方法 以MeJA处理的白木香愈伤组织为材料，以改造的pGADT为载体，利用SMART技术构建白木香全长cDNA文库。结果 构建的文库原始滴度为8.99×10⁶ pfu/mL，阳性克隆子的比例为97%，插入片段的大小在500～3 000 bp，平均大于1 000 bp。结论 构建的文库无论从库容量、克隆效率，还是全长率方面评价，均达到了高质量文库的要求。]]> 2014/1/2 9:36:02 1，杨 欣¹，梁 良¹，高志晖¹，张 争^{1, 2}，魏建和^{1, 2}]]> 1397true 目的 利用DNA条形码鉴定技术，快速、准确地鉴别黄芩及其同属近缘种（易混品）。方法 提取黄芩及其同属近缘种的DNA，对ITS和psbA-trnH序列扩增和测序，计算物种种内种间Kimura 2-parameter （K2P）遗传距离。采用相似性搜索法、最近距离法、构建Neighbor-joining（NJ）系统聚类树等方法进行鉴定分析。结果 黄芩及其同属近缘种种间的ITS和psbA-trnH序列的遗传距离为0.067 97～0.088 80和0.050 61～0.057 37，明显大于黄芩种内的遗传距离0～0.006 40和0～0.003 11。ITS和psbA-trnH分子系统树显示，黄芩8个居群个体均聚为一单系分支，支持率均为100%，与其5个同属近缘种很好地区分开。3种鉴定方法表明，ITS和psbA-trnH序列适合鉴别黄芩及其同属近缘种。结论 ITS和psbA-trnH序列可以有效准确鉴别中药材黄芩及其近缘种。]]> 2014/1/2 9:36:02 1396true 目的 筛选野生蛇足石杉引种驯化的优质种质资源，并建立其分子鉴别方法。方法 对来自福建大田、三明市郊、南靖3个不同种质资源野生蛇足石杉引种驯化，HPLC法分析不同种质资源蛇足石杉中石杉碱甲（Hup A）量；采用蛋白质双向电泳技术，分析不同种质资源蛇足石杉差异蛋白。结果 种质资源来自大田的蛇足石杉适应性较强，植株长势好，成活率为65.5%，且茎叶Hup A量也较高，分别为197.80和87.54 μg/g；遮阳成活率为77.8%，远高于未遮阳的成活率（7.1%）；黄土地成活率为75%，远高于水田沙壤土的成活率（18.8%）。不同种质资源蛇足石杉共有15个差异蛋白质点，不同种质资源蛇足石杉的差异蛋白质点丰度差异较大。结论 人工引种栽培时，土壤选择以黄土质为佳，并需要给予必要的遮阳；种质资源来自福建大田的蛇足石杉可以作为蛇足石杉优质种质资源进行引种驯化；利用蛇足石杉差异蛋白质点的丰度差异，可以作为鉴别不同蛇足石杉种质资源的依据。]]> 2014/1/2 9:36:02 1，张丹凤²，张 靖²，周以飞²，潘大仁²]]> 1395true 目的 了解外源NO对NaCl胁迫下板蓝根种子萌发和幼苗生长的影响，以便为板蓝根在栽培生产中遇到的盐害问题提供理论参考和解决方法。方法 采用霍格兰营养液培养种子，在60 mmol/L NaCl胁迫下，测定不同浓度的外源NO供体硝普钠（SNP）处理后板蓝根种子发芽势、发芽率、发芽指数、活力指数、发芽速率指数、平均发芽时间和幼苗苗高、根长、苗质量和根质量的变化，分析板蓝根叶片丙二醛（MDA）量、超氧化物歧化酶（SOD）和过氧化物酶（POD）活性的变化。结果 60 mmol/L NaCl胁迫显著抑制板蓝根的种子萌发和幼苗生长；经过0.01～0.5 mmol/L SNP处理后，种子萌发和幼苗生长指标均有升高，其中以0.1 mmol/L SNP处理时各项指标最高；1.0 mmol/L SNP处理时幼苗生长指标显著降低。与60 mmol/L NaCl处理相比，0.1 mmol/L SNP处理时板蓝根种子发芽率和发芽势分别提高12.91%和63.90%，发芽指数和活力指数分别提高16.71%和44.77%，发芽速率指数提高23.64%，平均发芽时间缩短0.1 d；幼苗苗高、根长、苗质量和根质量分别提高43.61%、35.05%、51.79%和82.14%；叶片MDA量降低34.83%，SOD和POD活性分别增加43.78%和39.85%。结论 0.1 mmol/L SNP能有效地减缓NaCl胁迫对板蓝根种子萌发和幼苗生长的抑制作用，增强叶片抗氧化能力，提高种子及幼苗的抗盐能力；高浓度（1.0 mmol/L）SNP处理加剧了NaCl胁迫对板蓝根幼苗的伤害。]]> 2014/1/2 9:36:02 1394true 目的 克隆、分析西洋参Panax quinquefolium种子萌发过程的赤霉素2-氧化酶(gibberellin 2-oxidase,GA2ox)基因.方法 从前期由高通量测序得到78 207条unigenes基因的注释信息中挖掘出与赤霉素合成和分解代谢相关的基因序列,得到11条GA2ox基因相关序列,通过序列比对分析确定GA2ox的转录本.根据选定的unigene序列设计引物,采用PCR方法扩增西洋参GA2ox的cDNA全长;利用生物信息学方法分析所得基因,并用实时荧光定量PCR技术进行表达分析.结果 得到一条长度为987 bp,编码328个氨基酸残基的西洋参GA2ox基因,命名为PqGA2ox.生物信息学预测PqGA2ox蛋白不含跨膜区,不含信号肽,具有依赖于2-酮戊二酸和Fe²⁺的双加氧酶超家族的保守结构域.实时荧光定量PCR结果显示在形态休眠中期和生理休眠中期的表达量低于其休眠起始期和解除休眠期.结论 首次获得西洋参种子PqGA2ox基因的编码区序列,为进一步研究西洋参种子解除休眠的分子机制奠定基础.]]> 2014/12/20 16:38:22 1393true 目的 克隆鱼腥草1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸还原异构酶(DXR)基因,并分析其差异表达.方法 采用RT-PCR方法获得DXR基因cDNA序列,并对DXR蛋白进行理化性质、蛋白二级结构及三维结构预测分析,并预测了该蛋白功能;利用实时荧光定量PCR方法检测了DXR基因在鱼腥草的地下茎、地上茎、叶、花中的表达情况.结果 克隆获得的DXR基因长为1 416 bp,编码471个氨基酸.生物信息学预测DXR蛋白不含跨膜区,不含信号肽.DXR基因在鱼腥草的叶片中表达丰度最高,其次是地下茎,再次是地上茎,花中表达量最低.结论 首次从鱼腥草中克隆了DXR基因,为进一步阐明该基因在鱼腥草萜类化合物代谢途径中的重要作用奠定基础.]]> 2014/12/20 16:38:22 1392true 目的 建立甜叶菊甲基磺酸乙酯(EMS)离体诱变体系,通过SRAP检测鉴定获得甜叶菊耐盐突变体.方法 将"皖甜1号"-B1甜叶菊组培苗茎段接种在含有不同质量浓度NaCl的MS培养基中,进行耐盐临界NaCl质量浓度的筛选;用不同浓度的EMS处理甜叶菊组培苗茎段不同时间,筛选EMS诱变甜叶菊的适宜浓度和时间;将经过EMS诱变过的甜叶菊组培苗茎段接种在含有临界NaCl质量浓度的MS培养基上进行耐盐变异体的筛选,对存活的变异株通过SRAP标记进行耐盐性鉴定.结果 甜叶菊组培苗耐盐临界NaCl质量浓度为1.0%;EMS 诱变甜叶菊组培苗茎段的适宜浓度和时间范围为0.8%～1.0% EMS处理8～10 h;筛选出41株甜叶菊耐盐变异株,SRAP分子标记表明,4株在DNA水平上发生了变异,突变比率为9.76%.结论 初步建立了甜叶菊EMS离体诱变体系,为甜叶菊高产耐盐新品种的选育提供了一种新的育种途径.]]> 2014/12/20 16:38:22 1391true 目的 本研究通过对黄连种子萌发及幼苗生理特性的研究,旨在寻找提高黄连种子及幼苗在盐胁迫条件下抗性能力的途径.方法 用100 mmol/L的NaCl模拟盐胁迫,在外源5-氨基乙酰丙酸(ALA)处理后,对黄连种子的各萌发指标及黄连幼苗叶片细胞质膜透性、超氧阴离子产生速率,过氧化氢(H₂O₂)量,可溶性糖、可溶性蛋白、游离脯氨酸及丙二醛(MDA)量、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)和抗坏血酸过氧化物酶(APX)活性进行测定.结果 NaCl胁迫下的黄连种子萌发受到显著抑制,但是在经过不同浓度的ALA处理后,发芽势、发芽率、发芽指数和活力指数等萌发指标均有升高.外源ALA处理显著提高了盐胁迫下黄连幼苗叶片可溶性糖、可溶性蛋白和脯氨酸量,不同程度的提高了叶片超SOD、POD和CAT活性,显著降低了MDA量、质膜透性、超氧阴离子产生速率及H₂O₂量.结论 外源ALA通过提高黄连种子的萌发指数,提高渗透调节物质含量及抗氧化酶活性,降低细胞质膜氧化程度,有效地减缓NaCl 胁迫对黄连种子及幼苗产生的伤害,提高了种子及幼苗的抗盐能力.]]> 2014/12/20 16:38:22 1390true 目的 建立高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS)测定山药中尿囊素的量.方法 采用Agilent Eclipse Plus C₁₈色谱柱(100 mm×4.6 mm,3.5 μm),以乙腈-水(90:10)为流动相,体积流量0.3 mL/min,柱温为30 ℃;采用电喷雾负模式电离(ESI^-),多反应监测扫描模式(MRM)进行定量分析,选定的母离子是m/z 156.9,定量子离子是m/z 96.7.结果 尿囊素在0.12～6.0 μg/mL范围内线性关系良好(r=0.998 5),平均加标回收率为101%(n=6),RSD为3.2%.结论 本方法灵敏、准确、专属性强,能准确有效地测定出山药中尿囊素的量.]]> 2014/12/20 16:38:22 1389true 目的 克隆珍稀濒危兰科药用植物铁皮石斛镁离子转运蛋白(magnesium transporter,MGT)基因(DoMGT1)并进行生物信息学和表达分析.方法 采用RT-PCR和RACE技术,获得基因cDNA全长;利用生物信息学软件预测蛋白的理化性质、结构域及亚细胞定位等分子特征;用DNASTAR 6.0和MEGA 4.0分别进行氨基酸多序列比对和进化关系分析;借助实时定量PCR(qPCR)检测基因表达模式.结果 克隆到DoMGT1(GenBank注册号KJ995532),cDNA全长1 625 bp,编码一条由425个氨基酸组成的肽链,相对分子质量47 400,等电点4.79;DoMGT1蛋白含有CorA家族镁离子转运蛋白保守结构域(313～420)和镁离子转运蛋白MRS2/LPE10保守域(27～420);DoMGT1与多种植物MGTs基因一致性为46%～63%,编码蛋白与水稻OsMGTD、OsMGTE、OsMGTF等聚在一起,与AtMGT4共同构成植物MGTs基因的一大类群;DoMGT1基因转录本在石斛根、茎、叶器官中为组成型表达,叶中相对表达量较高,为根中的3.46倍;茎次之,为根的1.54倍.结论 成功克隆到一个镁离子转运蛋白基因DoMGT1,其转录本在叶中高的表达特征暗示该基因可能在铁皮石斛叶的生长发育中发挥重要作用.]]> 2014/12/4 13:44:02 1388true 目的 克隆丹参碱性螺旋-环-螺旋(bHLH)类转录因子SmbHLH93,并初步探究该基因的功能.方法 采用PCR和RT-PCR技术分别从DNA和cDNA水平克隆得到了SmbHLH93基因,进一步通过BD Walking获得了该基因的5'启动子区.生物信息学分析SmbHLH93蛋白的理化性质、结构特点和系统进化关系.结合启动子区分析软件和qPCR,研究SmbHLH93在丹参不同部位和环境诱导下的表达模式.结果 获得SmbHLH93基因序列954 bp和5'启动子区1 583 bp,其中开放阅读框(ORF)657 bp,有3个内含子和4个外显子,编码218个氨基酸,含有bHLH和ACT_UUR-ACR-like结构域,无跨膜区域,可能定位于细胞核.表达模式分析结果显示该基因的表达量在根中最高,茎中最低,且随着花的形成逐渐降低.光和低温诱导SmbHLH93的高表达,而水杨酸(SA)抑制其表达.结论 克隆得到丹参bHLH类转录因子新成员SmbHLH93,初步预测其参与了丹参花的发育过程和丹参次生代谢途径的调控.]]> 2014/12/4 13:44:03 1387true 目的 建立沉香药材HPLC特征指纹图谱分析方法,为其科学鉴定和质量控制提供依据.方法 Dionex-Acclaim 120 C₁₈色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相为乙腈-0.5%甲酸水溶液梯度洗脱;体积流量0.4 mL/min;检测波长254 nm;柱温26 ℃.利用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004A版"和SPSS软件分别对其进行相似度评价和聚类分析.结果 建立了沉香药材HPLC指纹图谱共用模式,确定24个共有峰,并根据对照品指认9个共有峰.10批沉香药材相似度分析结果与聚类分析结果基本一致.结论 首次建立了沉香药材HPLC指纹图谱分析方法.该分析方法简便、快速,可较全面地反映沉香药材中化学成分的信息,为沉香药材的鉴定和质量评价提供了科学依据.]]> 2014/12/4 13:44:03 1386true 目的 分析黄皮树不同生长树龄、不同采收季节、不同采收部位中小檗碱和黄柏碱的质量分数变化规律,为增加中药材种植收益提供依据.方法 采用高效液相色谱分析方法对小檗碱和黄柏碱进行定量测定.结果 黄皮树中小檗碱和黄柏碱的累积高低顺序均为根皮>茎皮>根;2种生物碱的量逐年变化,前3年量变化趋势明显,且第3年的茎皮量接近5%,显示"幼龄黄柏"有开发价值,第3年后2种生物碱量变化趋势减缓;同一树龄10月份采收的黄柏,其黄柏碱和小檗碱较高.结论 小檗碱和黄柏碱代谢累积规律的分析和总结,为黄柏药材采收及资源的可持续利用提供了依据.]]> 2014/12/4 13:44:03 1385true 目的 研究以线粒体细胞色素C氧化酶亚基I(COI)基因作为DNA条形码检验中药制剂中羚羊角的可行性.方法 以不同厂家生产的8种含羚羊角中药制剂为材料,经充分研磨后,采用DNA提取试剂盒提取样品中DNA,以引物LCO1490和HCO2198或特异性引物0703扩增线粒体COI基因片段序列,PCR产物直接双向测序,将测序结果在GenBank中进行BLAST比对,并以DNAMAN和MEGA5.2软件构建同源树和NJ树,以赛加羚羊(gb|JN632700.1)和羚羊角标准药材序列为对照,判定制剂中羚羊角的真实性,并以Kimura-2-parameter模型计算种内、种间遗传距离.结果 8种中药制剂中羚羊角的COI基因序列长度均为658 bp,在同源树和NJ树中可与赛加羚羊和羚羊角标准药材聚成一支,并与outgroup完全分开.种内遗传距离为0～0.064,平均遗传距离为0.020,种间遗传距离为0.167～0.195.结论 以线粒体COI基因作为DNA条形码检验中药制剂中羚羊角方法是可行的,但因羚羊其他器官也含有相同基因,为保证检验结果的准确性,还需配合使用其他检验方法.]]> 2014/12/4 13:44:03 1384true 目的 研究我国自然地理分布范围内远志Polygala tenuifolia的分子谱系地理情况,揭示其地理分布格局的形成原因,推测该物种潜在的冰期避难所及冰期后的迁移扩散路线。方法 使用叶绿体非编码片段(trnL内含子序列)对远志在我国自然地理分布区内的39个居群308个个体的遗传变异分布模式进行检测。结果 共发现26个多态性位点,得到12种叶绿体单倍型。单倍型系统发育分析显示远志自然居群可划分为南、北2个地理组群:北方(包括中国东北、中部、西北地区)组群和南方组群,南北组群没有共享单倍型。居群遗传结构分析表明2个地理组群之间遗传分化较大(G_st=0.783,P<0.001),物种水平遗传多样性较高(H_t=0.755),北方组群不存在明显的谱系地理结构。结论 第四纪冰期时远志在中国北方和南方地区存在多个避难所;冰期后或间冰期,北方地区发生了明显的居群扩张事件;南、北组群的分化可能是由于长期的地理隔离所致。]]> 2014/11/21 15:08:58 1383true 目的 获得在大青属Clerodendrum L. 主要树种间具有较好通用性的SSR标记,并构建DNA指纹图谱用于该属重要民族药用植物近缘种的分子甄别和遗传学研究。方法 选用2种大青属植物伊豆大青C. izuinsulare和海州常山C. trichotomum的19对SSR引物,对大青属9个种共9个样本进行扩增检测。结果 17对引物在广布种大青中有扩增产物,通用率最高(89.5%),另有7对引物在所有样本中有扩增产物,通用率为36.8%。采用多态性较好的6对SSR引物构建9个种的DNA指纹图谱,其中引物CI140可鉴定除白花灯笼和尖齿臭茉莉之外的7个种,该引物与CI107、CI132、CI143和CT042两两组合可鉴别所有9个种;利用遗传距离进行UPGMA聚类,结果显示腋序系白花灯笼单独成一组,海通和大青成一组,其他聚类分组结果与其形态分类存在一定差别。结论 近缘种间共用SSR引物是开发大青属植物SSR标记行之有效的方法,可为大青属植物分子标记资源的使用提供参考。]]> 2014/11/21 15:08:58 1382true 目的 应用ISSR-PCR标记技术探讨不同产地菘蓝的遗传多样性,为其种质鉴定及育种提供参考。方法 对采自全国不同地区的菘蓝及其变异类型的23份样本进行ISSR-PCR分析,采用NTSYS-pc软件计算Jaccard遗传相似系数,按非加权配对算术平均法(UPGMA)建立所研究类群的系统聚类图。结果 10条引物共扩增出109个条带,其中多态性条带为88条,占总扩增条带数的80.7%,菘蓝种质具有较丰富的遗传多样性。从聚类分析图可以看出,所研究样本聚为3支,第1支包括绝大多数样本,第2支为一被毛变异类型,第3支相距最远,从相似度0.62处即被分开,表明为一独立类群。结论 ISSR标记可以为菘蓝的种质资源鉴定、遗传关系分析及栽培育种提供分子生物学依据。]]> 2014/11/21 15:08:58 1381true 目的 研究外源激素、水杨酸、茉莉酸甲酯对海巴戟天悬浮细胞生长及蒽醌类化合物合成的影响。方法 建立海巴戟天细胞悬浮培养体系,并向海巴戟天细胞悬浮培养物中添加外源激素、水杨酸和茉莉酸甲酯,测定细胞比生长速率和蒽醌产量。结果 外源激素萘乙酸(NAA)、激动素(KT)对海巴戟天悬浮细胞的生长和蒽醌类化合物的合成有显著影响,采用B5培养基时,较佳激素组合为NAA 2 mg/L+KT 0.1 mg/L。在对数生长初期(培养9 d)时,添加200 μmol/L水杨酸和50 μmol/L茉莉酸甲酯,蒽醌质量浓度分别为588.34 mg/L和595.49 mg/L,比对照分别提高了17.05%和18.47%。结论 适宜激素配比结合一定质量浓度的水杨酸和茉莉酸甲酯外源诱导对蒽醌类化合物的合成有促进作用。]]> 2014/11/21 15:08:58 1380true 目的 研究吉林产西洋参内生菌资源状况,筛选出对西洋参病原菌具有拮抗作用的内生菌。方法 采用混菌法初筛和发酵液拮抗法复筛来筛选具有拮抗活性的菌株,并用16 S rDNA和ITS方法鉴定筛选得到的内生菌株。结果 在西洋参中共分离获得34株内生菌,通过初筛和复筛后,从中选出了6株对西洋参病原菌具有较好拮抗作用的菌株,分别为B3、B11、B17、B23、B24、F10,其中B3对7种病原菌均表现出了抑菌作用,F10对锈腐病菌Cylindrocarpon destructan和黑斑病菌Alternaria panax的抑菌效果最好,其抑菌圈直径均大于35 mm,经鉴定B3和F10分别为芽孢杆菌Bacillus methylotrophicus和暗黄青霉Penicillium citreonigrum。结论 西洋参内生菌具有多样性,并有拮抗活性高的菌株存在,可以成为西洋参病害生防菌的新来源。]]> 2014/11/21 15:08:58 1379true 目的 对姜黄Curcuma longa苯丙氨酸解氨酶(phenylalanine ammonia-lyase,PAL)基因(CurPAL)全长进行克隆并开展生物信息学分析,为姜黄次生代谢产物的生物合成机制研究奠定基础。方法 利用RT-PCR和RACE相结合的方法,以姜黄叶片cDNA为模板,克隆获得CurPAL全长,进行生物信息学分析。结果 克隆的CurPAL(登录号为KJ780359)全长cDNA为1 293 bp,其中包括5'-UTR 243 bp,3'-UTR 123 bp,含有1个927 bp的完整开放阅读框(opening reading frame,ORF),编码308个氨基酸;预测蛋白质相对分子质量为33 000,理论等电点pI为5.76;CurPAL蛋白性质稳定,为可溶性蛋白;CurPAL编码的蛋白质序列包含与夹竹桃PAL蛋白质相同的脱氨基位点和催化活性位点,氨基酸序列多重比较发现,CurPAL编码的氨基酸序列与中国李、浙江红山茶、拟南芥、辣椒、小果野蕉PAL氨基酸序列的同源性达到75%以上;与姜目类的植物(如小果野蕉)的PAL聚为一支,说明两者亲缘关系较近;通过蛋白质二维、三维结构的预测,表明CurPAL蛋白为全α型蛋白,由同源四聚体构成。结论 首次克隆并获得CurPAL基因全长cDNA,为姜黄素生物合成途径的阐明和改善中药材品质提供科学依据。]]> 2014/11/5 15:02:16 1378true 目的 对主产地广东遂溪、福建漳浦及引种栽培地区江苏南京、淮安的不同生长期穿心莲Andrographis paniculata活性成分及关键酶基因表达情况进行分析,研究穿心莲活性成分积累动态,探讨其最佳采收期及分子机制。方法 用HPLC法测定穿心莲内酯及脱水穿心莲内酯量,并用实时荧光定量PCR技术从mRNA水平比较研究不同生长期穿心莲关键酶ent-柯巴基焦磷酸合酶(CPS)基因的表达情况。结果 不同产地穿心莲生长过程基本一致,在营养生长时期生长迅速,进入生殖生长后生长趋于平缓。4个产地穿心莲样品中活性成分变化趋势相近,穿心莲内酯量均在始花期达到最高,脱水穿心莲内酯量变化较平缓;穿心莲CPS基因的相对表达量在蕾期至始花期相对较高,与穿心莲内酯量呈显著正相关。4个产地穿心莲的穿心莲内酯与脱水穿心莲内酯之和均达到《中国药典》2010年版标准。结论 穿心莲最佳采收期应以物候期为评判依据,其最佳采收期为始花期。]]> 2014/11/5 15:02:16 1377true 目的 采用RAPD和ISSR分子标记技术对我国10个产地的西洋参Panax quinquefolium的遗传多样性进行分析。方法 以人参及加拿大西洋参为对照,采用CTAB法提取基因组DNA,选取13个RAPD随机引物及12个ISSR引物对样品进行PCR扩增,根据条带数目,应用NTSYS-pc2.10e软件采用UPGMA方法进行聚类分析。结果 13条RAPD引物共扩增出97条清晰条带,多态性条带81,多态性百分率为85.51%;12条ISSR引物共扩增出99条清晰条带,多态性条带64,多态性百分率为64.65%;通过聚类分析,RAPD及RAPD+ISSR综合将样品聚为4大类;ISSR将样品聚为2大类。结论 RAPD和ISSR标记构建的样品聚类树状图在分类上稍有差异,但总体趋势一致。人参与西洋参被明显区分开来;在ISSR上,吉林兴参镇与北岗镇西洋参与人参聚为一大类;在生长环境及种植条件影响下,东北部分产地西洋参与加拿大西洋参相比在遗传多样性上有所改变。]]> 2014/11/5 15:02:16 1376true 目的 采用多波长HPLC法研究67批栀子药材,对不同产地的栀子采用指纹图谱相似度评价及聚类分析和主成分分析(PCA)等化学模式识别技术进行研究,以期为栀子药材品质评控和生产区划提供参考。方法 色谱条件为Durashell C₁₈(250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液,梯度洗脱,体积流量0.8 mL/min,检测波长238、330、440 nm,进样量10 μL,柱温30 ℃。结果 67批样品有16个共有峰,共有峰保留时间的RSD<1%,峰面积的RSD比较大。各批次药材化学成分组成及量均存在一定差异。采用聚类分析及PCA从化学成分上揭示了67批样品的相似性及差异性。结论 以指纹图谱数据为基础,将聚类分析与PCA结合起来,不仅可以进行栀子药材的质量控制,还可以为下一步栀子全国生产区划研究提供理论支持。]]> 2014/11/5 15:02:16 1375true 目的 研究蝙蝠葛新病害-靶斑病的病原菌及其生物学特性和药剂敏感性。方法 组织分离法获得分离物并进行致病性测定;结合病原形态特征、培养特性及rDNA-ITS序列分析确定病菌分类地位;研究培养基种类、温度、pH值、碳氮源、光照对菌丝生长和菌核产生的影响;并用生长速率法测定病菌对14种杀菌剂的敏感性。结果 蝙蝠葛靶斑病由Streptobotrys caulophylli引起。菌丝生长最佳培养基为PDA培养基,菌核形成最佳培养基为PDA和PSA培养基;菌丝生长适宜温度为20～28 ℃,最适温度25 ℃;菌核产生适宜温度范围10～30 ℃,最适温度30 ℃;pH 4～9适宜菌丝生长,pH 5～11菌核产生数量最多;菌丝生长最佳碳源为蔗糖,氮源为L-谷氨酰胺;菌核生长最佳碳源为菊糖和蔗糖,最佳氮源为硝酸钠;全光照利于菌丝生长,全黑暗利于菌核形成。病菌对腐霉利、嘧菌环胺、异菌脲、咯菌腈、甲霜·锰锌、唑醚·代森联的敏感性较高,其有效中质量浓度(EC₅₀)<1.0 mg/L,EC₉₀<5.0 mg/L。结论 首次报道蝙蝠葛靶斑病的病原菌为S. caulophylli;确定了适合菌丝生长和菌核产生的培养基种类、温度、pH值、碳氮源以及光照条件;腐霉利、嘧菌环胺、异菌脲、咯菌晴、甲霜·锰锌、唑醚·代森联6种药剂可作为病害田间防治的备选药剂。]]> 2014/11/5 15:02:16 1374true 目的 克隆国产沉香基原植物白木香Aquilaria sinensis互作蛋白（jasmonate Zim-domain，JAZ）基因（NINJA），为深入研究其在沉香倍半萜合成途径中的功能奠定基础。方法 以白木香总RNA为模板，采用RACE法和RT-PCR方法，克隆白木香NINJA基因cDNA全长，并进行生物信息学的分析；采用实时荧光定量（qRT-PCR）方法分析经茉莉酸甲酯（MeJA）处理的白木香愈伤组织中AsNINJA1基因的表达模式。结果 获得白木香NINJA基因全长cDNA，命名为AsNINJA1。序列分析表明，该基因的序列全长为1 982 bp，包含一个1 221 bp的开放阅读框，编码406个氨基酸，蛋白质相对分子质量为43 697，等电点为6.02。qRT-PCR结果显示，经MeJA处理4 h后AsNINJA1基因相对表达量最高，是对照（未经MeJA处理的白木香愈伤组织）的近100倍，随后显著下降。结论 获得AsNINJA1基因全长cDNA序列，该基因对MeJA诱导极为敏感，且能在伤害早期响应。]]> 2014/10/20 13:42:18 1373true 目的 利用SRAP分子标记技术对天麻种质资源进行遗传多样性研究，为天麻不同亲缘物种间的分类及其优良种质资源的筛选提供依据。方法 采集7个不同生态区域的天麻种质资源，包括红杆G. elata f. elata、乌杆G. elata f. glauca和绿杆G. elata f. viridis 3种变型和红乌杂交天麻，共24份样品。运用SRAP分子标记方法构建天麻种质的DNA指纹图谱，从分子水平检测其遗传多样性。结果 33对引物扩增出637条多态性条带，多态性百分率达73.16%。24份天麻种质样品间相似度分布于0.404 0～0.908 0，整个群体之间的相似程度差异较大。其中红天麻样品间的相似度在0.906 6～0.996 4，遗传差异较小；乌天麻、杂交天麻和绿天麻样品间的相似度分别在0.410 4～0.999 6、0.541 0～0.950 4和0.578 2，遗传差异较大。AMOVA分析结果显示，天麻变型内变异大于变型间变异，天麻各变型间有很大的遗传分化（FST=0.33，P<0.05）。另外，人工栽培对遗传分化有影响，但不显著。结论 SRAP分子标记方法得到的24份天麻样品多态性丰富，能有效地反映出天麻的遗传多样性。红杆天麻的遗传性状较为稳定，与其他变型间缺乏基因交流，遗传多样性匮乏；其他2个变型具有较高的遗传多样性。]]> 2014/10/20 13:42:18 1372true 目的 通过分析不同居群草珊瑚Sarcandra glabra和金粟兰属5种近缘植物的核糖体基因内部转录间隔区（rDNA-ITS）序列，为草珊瑚鉴定和品种鉴别提供模式识别与思路。方法 采集不同产地的草珊瑚18份、金粟兰6份，所有样品提取总DNA，并对其ITS片段进行扩增、测序，并搜索GenBank数据库中收录的其他4种金粟兰属植物的ITS序列，运用ClustalX 2.1软件比较不同产地草珊瑚与其他金粟兰属植物的ITS序列差异，并对其进行聚类分析。结果 草珊瑚样品不同居群间的ITS序列相似度达99%，其中位点总突变率ITS1（2.7%）>ITS2（1.4%），而与金粟兰属其他植物相比，位点总突变率ITS2（20.3%～22.7%）>ITS1（15.9%～18.3%）。聚类分析表明18个不同种群的草珊瑚居群间变异极小，且与金粟兰属5种近缘植物具有显著差异的聚类识别。结论 草珊瑚ITS1与ITS2分别为不同居群间及与不同属近缘植物间比较有效的鉴别序列，具有较多个特异性信息位点的草珊瑚ITS序列用于鉴别金粟兰属5种近缘植物，具显著差异的聚类识别，是草珊瑚和金粟兰属近缘植物鉴定和品种鉴别的有效分子标记。]]> 2014/10/20 13:42:18 1371true 目的 运用植物代谢组学方法对一年、二年和三年生长时期的丹皮提取液进行分析，评价丹皮的品质。方法 高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱（HPLC/Q-TOF-MS）技术与代谢组学方法相结合用于寻找丹皮中与生长时期相关的代谢物。结果 根据准分子离子和二级质谱信息共归属了丹皮中的46种代谢物，主成分分析结果表明不同生长期的丹皮存在明显差异，发现了与生长时期相关的13种重要代谢物。一年生长期丹皮中苹果酸和没食子酸的量较高，表明丹皮在生长初期需要大量的能量物质以及合成复杂次生代谢物的原料；在二年和三年生长期丹皮中，丹皮酚以及一类结构相似的单萜苷类活性成分的含量不断增加，由此推断三年生长期内，丹皮的生长期越长其品质越好。结论 本研究为不同生长时期丹皮的品质评价提供依据，而且证实基于HPLC-MS技术的代谢组学方法是一种有效的中药品质评价方法。]]> 2014/10/20 13:42:19 1370true 目的 建立高效液相色谱法同时测定不同种质资源金银花中新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、3, 4-二咖啡酰奎尼酸、3, 5-二咖啡酰奎尼酸和4, 5-二咖啡酰奎尼酸等7种有机酸及断氧马钱子苷的量。方法 采用高效液相色谱法测定，色谱条件为phenomenex C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），流动相0.1% 磷酸溶液和甲醇采用梯度洗脱，检测波长225 nm，体积流量0.8 mL/min。结果 金银花中新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、3, 4-二咖啡酰奎尼酸、3, 5-二咖啡酰奎尼酸和4, 5-二咖啡酰奎尼酸及断氧马钱子苷在各自的线性范围内均呈良好的线性关系，平均加样回收率分别为99.41%、99.05%、99.01%、98.71%、98.79%、98.82%、98.89%、99.16%，RSD分别为0.56%、0.37%、0.93%、1.11%、0.90%、0.87%、0.71%、1.04%。结论 该方法快速、简便、准确，可用于不同种质金银花中7种有机酸及断氧马钱子苷的定量测定。]]> 2014/10/20 13:42:19 1369true 目的 通过分子标记技术对不同产地野生福建金线莲及近似种的遗传多样性进行分析，了解不同产福建地金线莲及近似种的遗传差异。方法 采用直接扩增片段长度多态性（DALP）分子标记技术，对产多个产地的野生福建金线莲及近似种的18个居群进行多样性检测。结果 筛选出6个引物组合，总共扩增得到355个多态性位点，遗传多态性为100%，平均每组引物扩增所得多态位点为59.2个。其中14个福建金线莲居群多态百分率为95.77%，其平均观测等位基因数（Na）为1.273 4，有效等位基因数（Ne）为1.074 4，Nei's基因多样性指数（H）为0.056 2，Shannon信息指数（I）为0.096 9，遗传分化系数（G_st）为0.423 0，基因流（Nm）为0.681 9。结论 不同福建金线莲居群之间存在较高的遗传分化、基因交流较小。地理隔离和资源锐减可能是造成福建金线莲居群间基因流动受到限制的原因。]]> 2014/9/30 21:02:18 1368true 目的 研究NaCl胁迫对银柴胡生长的影响效应及生理生化机制。方法 通过盆栽试验，定期采样测定不同NaCl胁迫下银柴胡生长指标及生理生化指标。结果 0.3%NaCl胁迫对银柴胡生长没有显著影响，而0.4%以上NaCl胁迫对银柴胡生长有显著地抑制作用，且这种抑制作用随NaCl胁迫程度的增加而增强。银柴胡叶片超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化物酶（POD）和过氧化氢酶（CAT）活性均随NaCl胁迫程度的增加呈现先增加后显著下降的趋势。丙二醛（MDA）量和脯氨酸（Pro）量随着NaCl胁迫程度的增加呈现增加的趋势，而膜透性和蛋白质量随NaCl胁迫程度的增加而呈现降低的趋势。结论 在适度的NaCl胁迫下银柴胡可以保持一定的抗渗透胁迫能力和清除活性氧的能力，进而保持膜的稳定，以致不会抑制银柴胡植株的生长。]]> 2014/9/30 21:02:18 1367true 目的 对西瓜霜中的发酵菌种进行分离、鉴定，探讨西瓜霜发酵炮制的内涵，为西瓜霜的规范化生产和质量控制方法的建立提供依据。方法 模拟传统工艺生产西瓜霜的温度、湿度等条件，以西瓜为培养基，发酵制备西瓜霜，分别用PDA、CZA及Sabourand等培养基，采用平板划线法，分离、纯化西瓜霜发酵液中的微生物。采用形态学鉴定及DNA的ITS序列对比法鉴定分离出的菌种。结果 西瓜霜炮制发酵中共分离鉴定出6种真菌，分别为镰孢霉属Fusarium的WF-1，青霉属Penicillium的WF-2，毛霉属Mucor的WF-3，交链孢霉属Alternaria的WF-4、WF-5、WF-6。结论 西瓜霜的制备是以西瓜为培养基，在特定的环境条件，尤其是高盐条件下，通过耐高盐自然真菌发酵炮制而成，而不是传统上认为的渗析制成的芒硝的细小结晶。]]> 2014/9/30 21:02:18 1366true 目的 对银杏花粉中核苷类、氨基酸类及无机元素进行分析评价，为银杏花粉资源的综合利用提供科学依据。方法 采用UPLC-TQ/MS技术测定银杏花粉中核苷类和游离氨基酸类成分，采用ICP-AES测定银杏花粉中的无机元素的量。结果 测定了银杏花粉中甲硫氨酸、天冬氨酸等24种游离氨基酸，总量高达62.316 mg/g，游离的必需氨基酸苏氨酸、赖氨酸等共6.23 mg/g，其中天冬氨酸量高达17.11 mg/g，也检测到含有少量牛磺酸0.24 mg/g。核苷类成分分析表明，银杏花粉中含有16种核苷，其中以尿苷量最高为251.99 μg/g，其他普遍较低。元素分析结果表明，银杏花粉中K的量最高26.301 mg/g，其次Ca、Fe、Mg量依次为7.076、2.545、5.361 mg/g。As、Cd等重金属元素未检测到。结论 基于核苷、氨基酸和矿物质元素的分析结果，银杏花粉可开发为氨基酸补充剂，为银杏花粉资源的开发利用提供科学依据。]]> 2014/9/30 21:02:19 1365true 目的 利用直接进样-质谱检测指纹图谱技术结合化学模式识别法研究不同产地杜仲药材的质量。方法 样品经简单提取后，不经色谱分离，直接进入质谱仪进行分析，产生的m/z 100～1 000的离子响应强度信息经预处理后由分析软件Simca-P进行主成分分析（PCA）和偏最小二乘法判别分析（PLS-DA）。结果 经PCA和PLS-DA分析得到的分布图将来源于不同产地的杜仲聚为4类，反应了其化学成分的差异性；通过载荷图则可发现在分类过程中起决定作用的化学标记物。结论 该方法作为一种极具特点的指纹图谱分析技术，可以被广泛用于药材的真伪鉴别、基源鉴定及不同产地药材的快速判别研究。]]> 2014/9/30 21:02:19 1364true 目的 分析不同加工方法对太子参Pseudostellariae Radix中化学成分的影响。方法 采用UPLC-Triple TOF-MS/MS技术对20批样品进行测定，通过多级串联质谱分析，结合Mass数据、软件数据库及相关文献对总离子流图主要分子离子峰进行归属，数据处理用SIMCA-P软件进行多元统计分析。结果 鉴定出11种化合物；主成分得分图显示，不同加工方法太子参样品间的差异得到明显区分，通过载荷图筛选出差异显著的11种标志物，且这11种标志物呈现出不同的变化规律。结论 为揭示不同加工方法对太子参代谢产物差异性的影响规律提供科学依据。]]> 2014/9/30 21:02:19 1363true 目的 从滇龙胆幼叶中克隆萜类合成相关酶基因GrCYP450-17，进行序列分析和原核表达。方法 根据滇龙胆转录组中GrCYP450-17基因序列，设计引物，通过RT-PCR扩增得到GrCYP450-17 开放阅读框（ORF）序列，并进行TA克隆、测序和序列分析；构建原核表达载体pGEX-4T-1-GrCYP450-17，转入大肠杆菌Rosetta（DE3）中，在异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）诱导下进行表达。结果 GrCYP450-17 ORF全长1 545 bp，编码514个氨基酸。序列分析表明，GrCYP450-17基因是CYP714家族成员；蛋白质序列系统发育分析表明，GrCYP450-17与番茄SlCYP450亲缘关系最近。构建pGEX-4T-1-GrCYP450-17重组质粒，获得稳定的原核表达体系。SDS-PAGE结果表明所表达蛋白与预期蛋白大小一致。结论 克隆了GrCYP450-17基因，建立其稳定的原核表达体系，为进一步纯化GrCYP450-17蛋白、研究其结构和功能奠定基础。]]> 2014/9/22 18:29:39 1362true 目的 克隆三七总皂苷甲羟戊酸合成途径中的1个关键酶3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶（3-hydroxy-3-methylglutaryl coenzyme-A reductase，HMGR）基因，为进一步研究HMGR蛋白的功能及开展三七皂苷的合成生物学研究奠定基础。方法 根据NCBI上已公布的同属人参的HMGR基因全长序列（登录号GU565097.1）设计特异性引物。利用RT-PCR技术，以三七愈伤组织总RNA反转录的cDNA为模板扩增基因片段；并对其编码的蛋白进行生物信息学预测和基因表达分析。结果 序列分析表明，获得的三七HMGR（命名为PnHMGR）基因的cDNA序列大小为1 893 bp，该序列与人参、刺五加和杜仲中HMGR基因的一致性分别达到98%、93%、80%，且含有大小为1 725 bp的开放阅读框，经Genbank查询为一新的cDNA。生物信息学预测PnHMGR基因编码蛋白包含2个跨膜区，不含信号肽，具有HMGR催化作用的活性中心结构域。实时荧光定量PCR检测到PnHMGR基因在三七细胞生长30 d表达量最高。结论 首次从药用植物三七中克隆得到HMGR基因的编码区序列，为进一步鉴定PnHMGR的功能和开展三七皂苷的合成生物学研究奠定了基础。]]> 2014/9/22 18:29:39 1361true 目的 克隆中药橘核主要来源品种椪柑Citrus reticulata的柠檬苦素-UDP-葡萄糖基转移酶（limonoid-UDP-glucosyl transferase gene，LGT）基因，并进行生物信息学及表达分析为橘核有效成分合成及调控机制研究提供基础。方法 克隆获得LGT序列，通过生物信息学对该基因蛋白的特征进行分析，构建LGT与相关物种LGT的系统进化树，利用RT-PCR分析橘皮、橘肉以及橘核中LGT基因表达量，并进行分析和比较。结果 测序所得椪柑LGT序列全长为1 530 bp，具有1 509 bp的完整开放阅读框，编码502个氨基酸。并对其蛋白二级、三级结构进行了分析和预测。基因表达分析结果发现椪柑LGT基因在橘核中表达量最低，其次为橘皮，表达量最高为橘肉。结论 成功克隆、分析并表达了椪柑LGT基因，为橘核中柠檬苦素类物质合成及调控机制研究提供基础。]]> 2014/9/22 18:29:39 1360true 目的 研究南方红豆杉愈伤组织的出愈时间、诱导率、生长率、生长状态、褐变程度，比较愈伤组织中紫杉醇等5种紫杉烷二萜类成分的量。方法 采用单因素比较、正交试验设计，研究影响南方红豆杉愈伤组织诱导和生长的各种因素；采用HPLC法测定不同来源愈伤组织中10-脱乙酰基巴卡丁Ⅲ（10-DAB）、巴卡亭Ⅲ、三尖杉宁碱、紫杉醇和东北红豆杉素5种紫杉烷二萜类成分的量；采用加权评分综合考虑以上各因素优选组织培养条件。结果 外植体脱分化形成愈伤组织的能力，以完整叶片及茎段最好；暗培养有利于紫杉醇等5种萜类成分的富集；愈伤组织诱导的最适培养基为B5+2，4-D 3.0 mg/L+6-BA 1.0 mg/L+NAA 1.0 mg/L+KT 0.5 mg/L。结论 南方红豆杉愈伤组织诱导、培养与外植体种类、培养基种类、光照有较大关联，紫杉醇等5种紫杉烷二萜类成分的富集受植物生长调节剂种类及浓度影响显著。]]> 2014/9/22 18:29:39 1359true 目的 采用HPLC测定6种不同产地的桃金娘果中5种酚类成分，并通过考察5种酚类成分和不同产地桃金娘果提取物清除自由基能力。方法 Inertsil ODS-SP 色谱柱（150 mm×4.6 mm，5 μm），流动相乙腈-1%磷酸水，梯度洗脱，检测波长为280 nm，体积流量1 mL/min，进样量10 μL；采用DPPH法测定没食子酸、原儿茶酸、儿茶素、鞣花酸、白藜芦醇及6个不同产地桃金娘果提取物清除自由基的能力。结果 5种酚类成分线性关系良好，精密度、稳定性、重复性、加样回收率均符合要求；5种酚类成分和不同产地桃金娘果提取物清除自由基能力较好，广东新丰县、广东翁源县、广西南宁、云南、广西桂林、贵州产地桃金娘果提取物的IC₅₀值分别为58.82、61.57、17.73、7.91、14.77、8.11 μg/mL，没食子酸、原儿茶酸、儿茶素、鞣花酸、白藜芦醇的IC₅₀值分别为0.02、0.04、0.03、0.05、5.7 μg/mL，阳性对照VC的IC₅₀值为6.31 μg/mL。结论 初步明确了桃金娘果清除自由基、抗氧化活性的物质基础，为桃金娘资源的综合利用和开发研究提供科学依据。]]> 2014/9/22 18:29:39 1358true 2014/9/22 18:29:39 1357true 目的 研究珠子参Panax japonicas种质资源的遗传多样性。方法 采用ISSR分子标记技术，通过聚类分析和主坐标分析，研究3个主要产地珠子参的19个样本的遗传多样性和亲缘关系。结果 13条ISSR引物扩增出181条带，其中有166条呈现多态性，占91.71%，遗传相似系数变化范围0.60～0.83。聚类分析和主坐标分析结果一致，将源于同一地区的珠子参样本聚在一起，呈现出一定的地域性分布规律。结论 珠子参样本之间的遗传多样性水平较高，种质间的亲缘关系和地理位置有一定关系。]]> 2014/9/5 18:58:11 1356true 目的 建立人参β-actin基因实时荧光定量PCR的方法。 方法 根据GenBank上其他高等植物β-actin基因保守区域设计一对特异性引物，将从人参中PCR扩增得到的β-actin基因克隆到pMD20-T载体上构建重组质粒，经1/10梯度稀释后用于制定标准曲线，并进行反应的灵敏性、特异性和重复性试验。 结果 该方法检测β-actin基因的最低拷贝数为43 拷贝/μL，在较广的范围内(43～4.3×10⁷拷贝/μL)有良好的线性关系(R²=0.995 3)；熔解曲线分析显示扩增产物为特异性单峰，其T_m值为(84.51±0.01)℃；5个不同浓度对照品组内试验变异系数为0.58%～2.79%，组间试验变异系数为2.61%～4.41%。结论 该方法具有快速、灵敏、特异、高通量及重复性强等优点，为β-actin基因作为内参基因进行人参功能基因表达的定量分析提供了方法学基础。]]> 2014/9/5 18:58:11 1355true 目的 研究外源腐胺对白桦Betula platyphylla悬浮细胞中蔗糖代谢与三萜积累间的关系。方法 在白桦悬浮细胞的生长末期添加0.1、1、5 mmol/L腐胺，采用比色法分析白桦悬浮细胞内蔗糖，果糖和葡萄糖量、蔗糖磷酸合成酶和蔗糖合成酶活性以及三萜量。为进一步明确腐胺与蔗糖对白桦三萜积累的关系，分析蔗糖(5、10、20、40 g/L)和1 mol/L腐胺＋5～40 g/L蔗糖处理对白桦三萜的影响。结果 腐胺处理提高了白桦悬浮细胞内蔗糖量，而降低了培养液中的蔗糖量。其中，5 mmol/L腐胺处理6 h时增加幅度最大，比对照增加了169.41%。与蔗糖相比，腐胺对细胞内外果糖和葡萄糖量的影响程度较小，除了处理6 h细胞内的果糖和葡萄糖增加外，其余处理时间细胞内的果糖和葡萄糖量基本呈降低趋势。除5 mmol/L腐胺降低了蔗糖合成酶活性外，腐胺处理增加了蔗糖磷酸合成酶和蔗糖合成酶的活性。5～40 g/L蔗糖处理12 h后，悬浮细胞中的三萜量呈增加趋势，其中20 g/L蔗糖处理时增加幅度最大，比对照增加了52.16%。1 mmol/L腐胺分别与不同浓度蔗糖共同处理后，除腐胺与5 g/L蔗糖共同处理三萜量比单独腐胺增加27.37%外，其他处理均降低了三萜的积累。结论 腐胺处理诱导了白桦悬浮细胞中蔗糖的合成和三萜的积累，同时推测腐胺诱导的蔗糖在一定程度上介导了三萜的积累。]]> 2014/9/5 18:58:11 1354true 目的 研究适于怀地黄Rehmannia glutinousa遗传转化的激素质量浓度和潮霉素质量浓度。方法 以地黄无菌苗叶片为外植体，以根癌农杆菌介导的叶盘法进行转化，分析了潮霉素和乙酰丁香酮(AS)对抗性愈伤诱导率和再生芽分化效率的影响。结果 潮霉素的质量浓度对抗性愈伤和抗性芽的产生影响很大，影响抗性愈伤诱导的临界质量浓度为9 mg/L，影响抗性芽分化的临界质量浓度为6 mg/L，适宜于进行地黄遗传转化的质量浓度为12 mg/L。侵染培养基和共培养培养基中添加100 μmol/L的AS可以极显著提高转化效率。PCR扩增和β-葡萄糖苷酶(GUS)染色结果表明，外源基因成功整合到地黄基因组中。结论 建立了有效的怀地黄稳定遗传转化再生体系，为地黄的分子生药学研究和遗传改良奠定基础。]]> 2014/9/5 18:58:11 1353true 目的 采用组织培养快繁技术培养五指毛桃种苗，为人工种植提供种源。方法 采用五指毛桃叶片作外植体，以MS和1/2 MS为基本培养基，采用正交设计研究植物生长调节剂多因素组合(6-BA、NAA、2, 4-D、IAA、KT和IBA)对五指毛桃初代诱导、不定芽分化和诱导生根的影响。结果 不定芽最佳诱导培养基为MS＋1.0 mg/L 6-BA＋0.3 mg/L NAA，外植体经20 d诱导培养，可分化形成不定芽72个；MS＋1.0 mg/L 6-BA＋0.3 mg/L IAA＋0.3 mg/L KT最利于不定芽继代增殖，增殖倍数6.67；1/2 MS＋1.0 mg/L IBA＋0.3 mg/L NAA最适于诱导生根获得再生植株，生根率100%；宜移栽于泥炭-珍珠岩(1：1)的基质上，成活率为93%。结论 此途径繁殖速度快、再生率高，能为栽培五指毛桃提供大量种苗。]]> 2014/9/5 18:58:11 1352true 目的 分离纯化银杏Ginkgo biloba叶中的双黄酮类成分，考察银杏叶变黄前后黄酮类成分质量分数的变化。方法 从自然脱落的银杏叶中提取分离双黄酮类成分，对其乙醇提取物的二氯甲烷部位进行了分离，通过硅胶柱色谱和半制备液相方法对目标成分进行制备，采用HPLC法对银杏叶中的双黄酮进行了测定。结果 分离的4个化合物分别为去甲银杏双黄酮、银杏双黄酮、异银杏双黄酮和金松双黄酮。对变黄前后银杏叶中4种双黄酮进行测定，结果表明，自然黄叶前3周内，银杏叶中双黄酮量逐渐降低，质量分数差别达30%左右。结论 HPLC法可用作银杏叶中双黄酮的测定，方法简便、可靠，能用于银杏叶的质量控制。同时，制备条件可对快速制备双黄酮对照品提供依据。]]> 2014/9/5 18:58:12 1351true 目的 从滇龙胆Gentiana rigescens幼叶中克隆萜类合成关键酶1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸还原异构酶基因GrDXR，进行序列分析和原核表达。方法 根据滇龙胆转录组中GrDXR基因序列，设计引物，通过RT-PCR扩增得到GrDXR 开放阅读框（ORF）序列，并进行TA克隆、测序和序列分析；构建原核表达载体pGEX-4T-1-GrDXR，转入大肠杆菌Rosetta（DE3）中，在IPTG诱导下进行表达。结果 GrDXR ORF全长1 425 bp，编码474个氨基酸。序列分析表明，GrDXR基因是DXR家族成员；蛋白质序列系统发育分析表明，GrDXR与萝芙木RvDXR、橡胶树HbDXR和长春花CrDXR亲缘关系较近。构建pGEX-4T-1-GrDXR重组质粒，获得稳定的原核表达体系。SDS-PAGE结果表明所表达蛋白与预期蛋白大小一致。结论 克隆了GrDXR基因，建立其稳定的原核表达体系，为进一步纯化GrDXR蛋白，研究其结构和功能奠定基础。]]> 2014/8/20 8:55:41 1350true 目的 克隆红花查尔酮合成酶基因（chalcone synthase，CHS），运用生物信息学分析CHS，比较花期中每天CHS的表达，为红花有效成分合成及调控机制研究提供基础。方法 从新鲜红花花冠中提取RNA，反转录为cDNA，设计特异性引物，克隆获得CHS。通过生物信息学对该基因蛋白的特征进行分析，使用MEGA5.1构建CHS与相关物种CHS的系统进化树，利用real-time PCR分析花期中每天红花CHS的表达量，并进行分析和比较。结果 克隆获得的红花CHS，序列全长为1 149 bp，具有1 041 bp的完整开放阅读框，编码346个氨基酸。将该蛋白通过NCBI上的Blastp比对发现，该蛋白属于CHS家族，比对结果显示红花CHS与100余种NCBI上登录的植物有相似性，其中与水飞蓟、翠菊、菊花、红凤菜的相似性分别达95%、95%、94%、94%。将相似性在90%以上的物种用MEGA5.1构建进化树，结果显示红花CHS与水飞蓟CHS亲缘关系最近。通过ProtParam预测红花CHS蛋白分子式为C₁₆₇₈H₂₆₉₃N₄₅₁O₄₉₃S₂₀，相对分子质量为37 700，等电点为6.10，负电荷的氨基酸残基数（Asp+Glu）为42，正电荷的氨基酸残基数（Arg+Lys）为38。基因表达分析结果表明红花CHS在花期第3天的相对表达量最高，远远高于花期其余时间。结论 成功克隆、分析并表达了红花CHS，为红花有效成分合成及调控机制研究提供基础。]]> 2014/8/20 8:55:42 1349true 目的 采用生物信息学方法分析党参转录组文库EST序列简单重复序列（SSR）位点，快速、大规模鉴定党参功能性SSR。方法 使用MicroSAtellite（MISA）软件分析党参高通量转录组SSR的分布频率和重复基元的类型特征，利用软件Primer3设计引物，并通过SSRFinder校验SSR，筛选SSR引物。结果 从45 511条Unigenes中共搜到7 327个SSR位点，分布在6 017条Unigenes序列中，发生频率为12.22%，共有415种重复基元，平均每4 520 bp含1个SSR位点，二核苷酸重复占主要地位，发生频率为58.67%，在所有重复基元中，AG/CT出现频率最高。共获得4 329条SSR引物。结论 大规模的SSR分子标记开发将有助于党参遗传多样性与分子育种研究。]]> 2014/8/20 8:55:42 1348true 目的 测定鞭杆芪、直根芪、二叉芪和鸡爪芪4种生态型黄芪中黄芪甲苷及黄酮类成分的量，分析生态型与质量之间的相关性。方法 采用超高效液相色谱（UPLC）法测定黄芪中黄酮类及黄芪甲苷量。对所测数据进行主成分分析（PCA）和聚类分析（CA）。结果 4种生态型黄芪的黄酮类成分及黄芪甲苷量高低顺序为鞭杆芪>直根芪>二叉芪>鸡爪芪；PCA分析结果表明4种生态型黄芪彼此可以很好地区分；CA结果显示直根芪与鞭杆芪聚为一支，表明直根芪与鞭杆芪质量相近，较好；而二叉芪与鸡爪芪聚为一支表明两者质量相近，较差。结论 4种生态型黄芪的质量优劣顺序鞭杆芪>直根芪>二叉芪>鸡爪芪，黄芪的质量与生态型紧密相关。]]> 2014/8/20 8:55:42 1347true 目的 建立HPLC法同时测定大黄中5种游离型蒽醌（芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚）、4种结合型蒽醌（芦荟大黄素-8-O-葡萄糖苷、大黄素-1-O-葡萄糖苷、大黄酚-1-O-葡萄糖苷和大黄素-8-O-葡萄糖苷）及没食子酸、儿茶素共计11种成分的定量方法。方法 采用Symmetry C₁₈色谱柱，流动相为甲醇-0.1%磷酸水梯度洗脱，体积流量1.0 mL/min，柱温30℃，检测波长254 nm。结果 没食子酸、儿茶素、芦荟大黄素-8-O-葡萄糖苷、大黄素-1-O-葡萄糖苷、大黄酚-1-O-葡萄糖苷、大黄素-8-O-葡萄糖苷、芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚分别在0.062 4～1.560 0、0.180 0～4.500 0、0.041 2～1.030 0、0.030 6～0.765 0、0.051 0～1.275 0、0.028 8～0.720 0、0.019 8～0.495 0、0.050 5～1.262 5、0.063 7～1.592 5、0.098 0～2.450 0和0.163 0～4.075 0 μg进样量与峰面积积分值线性关系良好（r≥0.999 5），平均加样回收率为95.37%～98.93%，RSD<2.36%。结论 该法简便、准确、专属性强，可用于大黄中11种成分的测定。]]> 2014/8/20 8:55:42 1346true 目的 研究胡黄连Picrorhiza kurrooa 2-C-甲基-D-赤藓糖-4-磷酸胞苷转移酶（MCT）基因特征并预测MCT结构与功能位点。方法 以胡黄连MCT基因为研究对象，利用NCBI网站及生物信息学软件对其碱基分布、氨基酸组成、亲疏水性、保守区及二级结构和三级结构进行预测和分析；并对9个物种的MCT基因进行多重比对与进化分析。结果 胡黄连MCT基因的mRNA序列长为1 216 bp（GenBank JQ991625.1），编码由399个氨基酸组成的蛋白质，该蛋白质相对分子质量为44 448.5，其中量最高的为Ser（10.0%）；整个多肽中疏水性氨基酸占59.5%，平均疏水值为0.050；与丹参Salvia miltiorrhiza MCT氨基酸序列对比同源性最高，达99%。结论 胡黄连MCT基因处于稳定状态，编码的蛋白为疏水性蛋白，在进化过程中是相对保守的，获得的保守区段序列信息为其他物种MCT基因的克隆奠定了基础。]]> 2014/7/24 15:25:58 1345true 目的 筛选罗汉果Siraitia grosvenorii基因表达分析的内参基因，研究苷V生物合成关键酶3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶（HMGR）时空表达特性。方法 克隆罗汉果看家基因甘油醛-3-磷酸脱氢酶（GAPDH）、微管蛋白（α-tubulin）、肌动蛋白（β-actin）和泛素（UBQ5）的基因片段，评价了4个基因在不同部位（叶、茎和果）及果实发育不同时期的稳定性，筛选内参基因，分析HMGR的时空表达特性。结果 UBQ5表达最稳定，适宜作为内参基因；叶片的HMGR相对表达量较低，茎和果实相对表达量较高；果实不同发育时期，HMGR的相对表达量呈现先升高再降低然后再升高再降低的波动式变化，70 d后HMGR的相对表达量最高，然后依次是5、30、10、50 d。结论 UBQ5是适宜的内参基因。叶片、茎和果实中，HMGR的相对表达量差异明显。果实发育不同时期，HMGR的相对表达量呈波动式变化，与苷V合成积累变化规律相似。]]> 2014/7/24 15:25:58 1344true 目的 研究金线莲Anoectochilus roxburghii种质资源及其伪品的遗传多样性。方法 采用ISSR方法，对24份试验材料进行PCR扩增，对扩增结果进行电泳检测。对条带进行“0”、“1”矩阵标记后，应用NTSYSpc软件，计算材料间的遗传距离，按照UPGMA法进行聚类分析，构建聚类图。结果 采用ISSR技术可以鉴别出台湾金线莲、福建金线莲和公石松。地理分布和形态差异较大的福建金线莲具有相近的遗传关系。结论 金线莲野生种质资源间存在较丰富的遗传多样性，为金线莲的品种选育带来巨大空间。]]> 2014/7/24 15:25:58 1343true 目的 提高射干Belamacanda chinensis种子及幼苗在盐胁迫条件下的抗逆能力。方法 采用外施亚精胺（ALA）处理，对在盐胁迫下射干种子的萌发及幼苗叶片光合特性各指标进行研究。结果 100 mmol/L NaCl胁迫下射干种子萌发受到严重影响，通过施加ALA（25～100 mg/L）处理，射干种子的各项指标都有所恢复，其中经过75 mg/L ALA处理的效果最为显著，各项指标均达最大值。外源ALA也显著提高了幼苗叶片中叶绿素a、叶绿素b、总叶绿素、类胡萝卜素的量，提高了最大荧光（Fm）、最大光化学效率（Fv/Fm），PSII有效光化学效率（Fv’/Fm’），PSII实际光化学效率（ΦPSII）、光化学淬灭系数（qP），有效降低了非光化学淬灭系数（NPQ）和热耗散速率（HDR），经过ALA处理后光化学反应能量（P）所占的比例显著升高，天线色素热耗散能量（D）和非光化学耗散能量（E）则表现出降低趋势。结论 外源ALA能够提高射干种子的萌发指数，提高幼苗叶片中光合色素量，促进了能量的合理分配，减少激发过剩能量的耗散，提高光合电子传递效率，有效缓解盐胁迫对射干幼苗PSII系统的伤害，提高植株抗胁迫能力。]]> 2014/7/24 15:25:58 1342true 目的 为紫苏合理栽培和综合利用提供科学依据。方法 从2013年7月5日开始每隔25 d测定1次光合和生长指标。结果 首次建立了紫苏干物质积累的Logistic方程。0～75 d为生长渐增期即苗期；76～84 d为花蕾期，85～95 d为开花期，花蕾期和开花期为快速生长期；96～125 d为生长缓增期即落叶期。叶绿素a、叶绿素b、叶绿素量的变化趋势一致，在开花期达到最高，而后逐渐下降；可溶性蛋白量的降低早于叶绿素量；希尔反应活力、Ca²⁺-ATP酶和Mg²⁺-ATP酶活性均为单峰曲线，均于花蕾期达到最高；苗期光合速率日变化为双峰曲线，但是其他时期的光合速率日变化呈单峰曲线；气孔导度和蒸腾速率的变化趋势一致。结论 紫苏在开花期之前或落叶期之后收获为宜，且在生长速率最快到来之前实施促长措施。]]> 2014/7/24 15:25:58 1341true 目的 从滇龙胆Gentiana rigescens幼叶中克隆单萜化合物合成的关键酶牻牛儿基焦磷酸合成酶基因GrGPPS，进行序列特征分析和原核表达。方法 根据三年生滇龙胆转录组GrGPPS基因序列，设计特异性引物，通过RT-PCR扩增得到GrGPPS cDNA序列，并进行TA克隆、测序及序列分析；构建原核表达载体pGEX-4T-1-GrGPPS，转入Escherichia coli Rosetta（DE3）中，在37℃、1.0 mmol/L IPTG诱导下进行表达。结果 GrGPPS cDNA全长1 107 bp，编码369个氨基酸；序列分析表明，GrGPPS基因是异戊烯基合成酶家族的成员；氨基酸序列系统发育分析表明，GrGPPS与金鱼草AmGPPS亲缘关系最近；构建pGEX-4T-1-GrGPPS重组质粒，获得稳定的pGEX-4T-1-GrGPPS原核表达体系。SDS-PAGE结果表明所表达蛋白与预期蛋白大小一致。结论 克隆了GrGPPS基因，建立pGEX-4T-1-GrGPPS稳定的原核表达体系，为进一步纯化和鉴定GPPS蛋白并研究其结构和功能奠定基础。]]> 2014/7/12 13:29:52 1340true 目的 克隆芍药Paeonia lactiflora肌动蛋白（Actin）基因组DNA序列并解析基因结构，分析Actin基因在芍药不同组织中的表达情况。方法 根据本课题组报道的芍药Actin基因cDNA序列（JX310002）设计特异性引物，以芍药栽培品种“桃花飞雪”总DNA为模板，用KOD-Plus高保真DNA聚合酶扩增芍药Actin基因组基因，克隆PCR产物并进行测序。应用生物信息学软件预测芍药Actin基因的外显子及内含子，基于Blastn程序分析芍药Actin基因在核苷酸水平上的同源性，应用MEGA5.0软件构建分子系统进化树；设计跨越内含子的半定量RT-PCR扩增引物，分析芍药Actin基因在芍药根、茎、叶、花中的表达情况。结果 测序结果表明芍药Actin基因组DNA序列全长1 405 bp，含4个外显子和3个内含子，3个内含子中共6个剪接位点均遵循高等真核生物5’端供位GU与3’端受位AG模式；共编码377个氨基酸，GenBank登录号为KF363830。设计了一对半定量RT-PCR扩增引物，其中上游引物跨越了芍药Actin基因的第1个内含子，可有效防止由DNA 污染而造成RT-PCR扩增的假阳性；半定量RT-PCR分析结果表明Actin基因在芍药根、茎、叶、花等不同组织中的表达量保持恒定。结论 首次克隆了芍药Actin基因组DNA序列并明确了其基因结构，半定量RT-PCR分析结果表明Actin基因可以作为芍药功能基因表达分析的内标基因。]]> 2014/7/12 13:29:52 1339true 目的 通过室内水培试验研究硅对不同程度盐胁迫下甘草种子萌发出苗和幼苗生长发育的影响效应。方法 盐胁迫设置轻度（50 mmol/L）、中度（100 mmol/L）和重度（150 mmol/L）3个梯度，硅源采用K₂SiO₃，硅处理浓度设置0、1、2、4、6、8 mmol/L共6个梯度，共计18个处理，同时设置蒸馏水为对照（CK）。结果 轻度和中度盐胁迫下，较低浓度的硅对甘草种子发芽率、发芽指数、出苗率和幼苗胚根长度没有显著影响，但对株高、根干质量、芽干质量和幼苗活力指数均有显著的促进作用；而高浓度的硅对种子萌发出苗和幼苗生长均具有显著抑制作用。在重度盐胁迫下，较低浓度的外源硅对甘草种子发芽出苗（发芽率、出苗率、发芽指数、幼苗活力指数）及幼苗生长（胚根长度和质量、胚芽长度和质量）均有显著的促进作用，但高浓度的外源硅对甘草幼苗生长有显著的抑制作用。结论 硅至少直接参与了甘草种子萌发出苗和幼苗生长的生理生化过程，且对甘草的盐害有一定的缓解作用，这种缓解作用强度因盐胁迫程度和硅浓度而异。]]> 2014/7/12 13:29:52 1338true 目的 研究葫芦素C在黄瓜植株不同部位中的代谢分布；探讨不同的前处理方式对黄瓜叶中葫芦素C的影响。方法 建立葫芦素C的HPLC-DAD检测方法并测定黄瓜植株不同部位中葫芦素C的量；同时将鲜嫩黄瓜叶分别进行100℃烘干、室温阴干2种不同的处理方式，检测葫芦素C量的变化；利用HPLC-Q-TOF-MS分析100℃烘干、室温阴干2种条件下鲜嫩黄瓜叶中葫芦素C的转化。结果 鲜嫩黄瓜叶中葫芦素C的量最高，但随着叶变枯萎，葫芦素C的量降低；黄瓜藤中葫芦素C的量自上而下逐渐降低；黄瓜根、叶柄、雌花以及黄瓜中均未检测到葫芦素C；无论是100℃烘干还是室温阴干鲜嫩黄瓜叶，其葫芦素C的量均明显下降；在阴干的过程中，葫芦素C下降的原因可能是其转化成葫芦素苷，初步鉴定为3-葡萄糖基-葫芦素C。结论 葫芦素C在黄瓜植株中不能稳定存在，鲜嫩黄瓜叶是黄瓜植株获取葫芦素C最理想的部位。]]> 2014/7/12 13:29:52 1337true 目的 采用HPLC测定山楂中熊果酸、齐墩果酸的量，比较不同产地山楂中熊果酸和齐墩果酸量的差异。方法 利用Waters Symmetry C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）在流动相为乙腈-甲醇-0.5%乙酸铵（69：12：19），体积流量为1 mL/min，检测波长为210 nm、柱温为30℃的色谱条件下对10个不同产地的山楂进行测定，并对测定结果进行方差分析和聚类分析。结果 熊果酸、齐墩果酸分别在0.078～0.780 mg/mL，r=0.999 8；0.016 9～0.169 mg/mL，r=0.999 6，呈良好的线性关系，加样回收率分别为102.6%、100.2%，均符合《中国药典》2010年版的要求。结论 该测定方法简便快速、重复性好，能够准确测定山楂中熊果酸和齐墩果酸的量；江苏、河北的山楂质量较佳，可以作为欣脉胶囊处方中山楂药材的固定来源。]]> 2014/7/12 13:29:52 1336true 目的 克隆当归Angelica sinensis 1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸还原异构酶（DXR）编码基因部分保守区序列，分析DXR基因在当归根、茎、叶中的特异性表达。方法 根据已克隆的植物DXR保守序列设计一对简并引物，以当归叶片总RNA为模板，采用RT-PCR方法扩增出DXR片段并连接到pGEM-T Easy载体上，转化大肠杆菌菌株Escherichia coli DH5α，阳性克隆经PCR检测后测序。运用RT-qPCR方法，以当归肌动蛋白基因Actin为内参基因，检测DXR在当归不同组织中的表达量。结果 得到一段564 bp的DXR基因序列，并在GenBank注册（登录号：KJ000259）。序列分析表明，该片段编码187个氨基酸，与GenBank中注册的海岛棉Gossypium barbadense等6个物种的DXR核苷酸序列同源性和氨基酸序列同源性均在80%以上；DXR在叶中表达量最高，相对表达量分别是茎和根组织中的2.5倍和3.2倍（P<0.01）。结论 本研究首次从当归中克隆出了DXR部分保守区序列，并揭示了DXR在不同组织中的差异表达，为有效利用该基因奠定前期工作基础。]]> 2014/6/30 14:43:24 1335true 目的 克隆半夏凝集素基因，并对其进行生物信息学分析和亚细胞定位。方法 以半夏Pinellia ternata新鲜叶片的DNA为模板，根据Genbank上的半夏凝集素的基因序列（GU593718.1）设计引物，克隆了半夏凝集素（PTA）基因，并构建植物表达载体pI1300-CaMV35S-PTA-GFP，在农杆菌GV3101中进行表达且观察了其在烟草中瞬时表达。结果 所克隆的PTA的开放阅读框为810 bp，其编码269个氨基酸；具有1条信号肽、2个B-lectin保守区域和3个甘露糖结合基序；PTA氨基酸序列与NCBI中所报道的半夏、掌叶半夏P. pedatisecta、滴水珠P. cordata凝集素的氨基酸序列的同源性分别达到97%、85%和83%；初步推测其定位于膜上，现已在NCBI中登记（登录号KF154979）。结论 本实验通过对半夏凝集素的生物信息学分析和亚细胞定位分析，为进一步研究半夏凝集素的抗病虫害机制奠定了基础。]]> 2014/6/30 14:43:24 1334true 目的 研究北柴胡Bupleurum chinense地上茎不同分枝对根中皂苷类成分量及根产量的影响。方法 采用HPLC和紫外分光光度法测定北柴胡地上茎不同分枝植株根中柴胡皂苷a、柴胡皂苷d及柴胡总皂苷的量，并统计分析其生长特征参数。结果 地上茎不分枝与2个分枝的北柴胡根中皂苷类成分量及根产量均最高；随着地上茎分枝数的增多，根中皂苷类成分量及根的产量均呈下降趋势。结论 地上茎不同分枝会对北柴胡根中皂苷类成分量及根产量产生影响。]]> 2014/6/30 14:43:24 1333true 目的 通过对防风抽薹前后生长素（IAA）、赤霉素（GA）和脱落酸（ABA）的测定，明确了防风抽薹前后IAA、GA和ABA的量变化，为进一步研究防风早期抽薹机制提供理论依据。方法 利用HPLC法测定抽薹前后IAA、GA和ABA量，色谱条件为C₁₈ ODS反相柱，柱温35 ℃，检测波长254 nm，体积流量0.7 mL/min，流动相为甲醇-乙腈- 0.7%乙酸（40：15：45）。结果 防风在抽薹期根、茎、叶中IAA、GA的量变化趋势基本相同，抽薹后IAA、GA的量则急剧下降，且抽薹前防风IAA、GA的量明显高于抽薹后。ABA在防风抽薹期根、茎、叶中的量变化趋势基本相同，但与IAA、GA差异较大。抽薹前取样ABA的量虽略有起伏，抽薹后ABA的量急剧上升，且明显高于抽薹前。结论 防风早期抽薹现象与防风内源激素水平有一定的关系，可以初步推断防风内源激素量的变化导致了防风的早期抽薹。]]> 2014/6/30 14:43:24 1332true 目的 探讨植物生长调节剂（NAA、2，4-D、6-BA、KT、PP₃₃₃）对黄独微型块茎诱导形成的影响，以期找到适宜的微型块茎诱导形成的植物生长调节剂浓度和组合。方法 采用植物组织培养技术、单因素试验和正交试验的方法，以黄独试管苗的带芽茎段为外植体，开展植物生长调节剂对黄独微型块茎诱导形成的影响等方面的研究。结果 生长素单独使用有利于黄独微型块茎的诱导形成，NAA和2，4-D诱导微型块茎形成的适宜浓度均为0.5 mg/L，两者的诱导效果无显著性差异。细胞分裂素单独使用不利于黄独微型块茎的形成，KT和6-BA诱导微型块茎形成的适宜浓度均为2 mg/L，但KT的诱导效果好于6-BA。生长素、细胞分裂素和PP₃₃₃组合可以显著促进黄独微型块茎的诱导形成，其中较佳的组合为MS＋NAA 0.5 mg/L＋6-BA 2.0 mg/L＋PP₃₃₃ 0.5 mg/L。结论 筛选出了诱导黄独微型块茎形成的植物生长调节剂单独使用和组合使用的适宜浓度，为黄独微型块茎的离体诱导形成及工业化生产奠定了技术基础。]]> 2014/6/30 14:43:24 1331true 目的 利用特异性引物对浙贝母Fritillaria thunbergii进行特异性PCR鉴定。方法 回收RAPD扩增筛选到的浙贝母分子标记ZB1基因，将其连接进入T-载体克隆并测序。根据测序结果设计一对特异性引物P2/P3，以贝母基因组DNA为模板进行特异性PCR扩增。结果 特异性PCR鉴定结果为浙贝母在约750 bp处出现特异性条带，其他贝母品种则未出现条带。 结论 浙贝母特异性PCR鉴定方法操作简单，准确、灵敏、重复性好，具有较好的应用前景。]]> 2014/6/16 15:56:07 1330true 目的 从药用植物秦艽Gentiana macrophylla中克隆了萜类成分合成途径的关键酶——5-磷酸脱氧木酮糖还原异构酶（1-deoxy-D-xylulose 5-phosphate reductoisomerase，DXR）基因，分析其序列特征及表达方式。方法 克隆了秦艽DXR基因（GmDXR），分析了GmDXR编码蛋白序列的特征，并采用实时定量分析了GmDXR的表达模式。结果 秦艽GmDXR基因包含1个完整的长1 428 bp的ORF框，编码475个氨基酸；GmDXR与萝芙木、番茄等植物DXR蛋白具有很高的同源性（≥85%），无跨膜结构域、信号肽等结构，主要定位于叶绿体中。定量PCR结果显示，GmDXR主要在秦艽的叶中进行表达，受到植物激素茉莉酸甲酯（methyl jasmonate，MeJA）的诱导。结论 GmDXR含有DXR蛋白的保守结构特征；在秦艽不同器官中GmDXR基因表达不同，且受到MeJA的诱导。该研究为今后研究秦艽环烯醚萜类化合物的生物合成机制提供了依据。]]> 2014/6/16 15:56:07 1329true 目的 研究甘肃不同居群中麻黄Ephedra intermedia的遗传多样性。方法 应用ISSR分子标记技术对甘肃省11个居群的中麻黄样本进行分析，利用POPGENE 32软件分析Nei’s基因多样性指数（H）等遗传信息参数，应用NTSYS软件构建亲缘关系UPGMA聚类图。结果 12条引物共检测到175个位点，其中多态性位点150个，多态位点百分率（PPL）为85.71%。中麻黄居群间的H为0.211 4，Shannon’s多样性信息指数（I）为0.332 1，种群间基因分化系数（G_st）为0.259 3，基因流（N_m）为1.428 6，遗传距离0.014 4～0.159 8。结论 甘肃中麻黄种群遗传多样性水平较高，但居群内遗传多样性水平低于居群间；中麻黄种群的遗传变异主要存在于居群内；亲缘关系与地理分布具有一定的相关性。]]> 2014/6/16 15:56:07 1328true 目的 建立凹叶厚朴Magnolia officinalis subsp. biloba快速繁殖体系。方法 以选育的优质凹叶厚朴种胚为初始外植体，采用单因素及正交试验筛选不同基本培养基，不同植物调节剂（6-BA、NAA、IBA、IAA），获取最适种胚启动培养基，丛芽增殖培养基和生根培养基。结果 适宜种胚萌发的启动培养基为B5＋6-BA 0.5 mg/L＋NAA 0.1 mg/L，出芽率达87.0%；适合丛芽增殖的培养基为MS＋6-BA 2.5 mg/L＋NAA 0.5 mg/L，增殖系数可达6.2；适合生根的培养基为1/2 MS＋NAA 0.5 mg/L，30 d生根率可达84%。结论 建立了凹叶厚朴快速繁殖体系，为凹叶厚朴优质种苗的工厂化育苗奠定了基础。]]> 2014/6/16 15:56:07 1327true 目的 测定不同采收期杠柳Periploca sepium根皮、茎皮中Mn、Cu、Zn、Fe、K、Ca、Mg量，探究元素累积变化规律及其与活性成分杠柳毒苷、4-甲氧基水杨醛的相关性，揭示影响2种成分累积的主导元素。方法 电热板湿法消解，火焰原子吸收测定元素量，SPSS 19.0处理数据。结果 7种无机元素在根皮、茎皮中分布具有一定的差异性。根皮中Ca与杠柳毒苷，Fe与4-甲氧基水杨醛的累积趋势基本同步，茎皮中Fe与4-甲氧基水杨醛，Ca与Mg的累积趋势相近，呈“双峰”型。基于杠柳毒苷，在根皮中与Ca呈极显著正相关，在茎皮中与Zn呈显著负相关。基于4-甲氧基水杨醛，在根皮中与茎皮中4-甲氧基水杨醛、Fe呈极显著正相关，与茎皮中Mn呈显著负相关，与根皮中Fe呈显著正相关；在茎皮中与根皮、茎皮中Fe呈极显著正相关。结论 Ca、Zn、Fe、Mn是杠柳2种活性成分累积的关键元素，其中杠柳毒苷的主要影响元素为根皮Ca及茎皮Zn，间接影响元素为根皮Mg，4-甲氧基水杨醛的主要影响元素为Fe及茎皮Mn，茎皮Ca、Mg为其间接影响元素。]]> 2014/6/16 15:56:07 1326true 目的 研究羽芒菊Tridax procumbens的水浸提液对4种农作物种子萌发及幼苗生长的影响。方法 采用水浸提法提取羽芒菊茎、叶、种子3个部分，用浸提液处理4种农作物种子及幼苗，以蒸馏水作为对照，在4个不同质量浓度下分析种子各项指标的差异。结果 羽芒菊水提浸液对绿豆综合作用表现为促进，并随质量浓度的增大促进作用减弱，对萝卜、油菜、莴苣表现为低促高抑。不同部位水提浸液抑制作用顺序为种子>叶>茎。对不同受试种子抑制作用呈现出莴苣>萝卜>油菜>绿豆，而对莴苣的抑制作用最为显著。结论 羽芒菊具有较强的化感作用。利用羽芒菊的化感作用将其作为竞争植物或覆盖植物，抑制其他杂草的生长，或作为开发天然除草剂的植物资源，具有一定的开发应用价值。]]> 2014/6/16 15:56:07 1325true 目的 克隆鱼腥草1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸合成酶1（DXS1）基因并分析其表达差异。方法 根据已经获得的鱼腥草DXS1转录本序列设计1对引物，采用RT-PCR方法获得DXS1基因cDNA序列并对DXS1蛋白进行理化性质、蛋白二级结构及三维结构预测分析，并预测了该蛋白功能；利用实时荧光定量PCR方法检测了DXS1基因在鱼腥草的地下茎、地上茎、叶、花中的表达情况。结果 克隆获得的DXS1基因长为2 172 bp，编码723个氨基酸。生物信息学预测DXS1蛋白不含跨膜区，不含信号肽，具有定位肽。DXS1基因在鱼腥草的花中表达丰度最高，其次是叶片，再次是地下茎，地上茎中表达量最低。结论 首次从鱼腥草中克隆了DXS1基因，为进一步阐明该基因在鱼腥草萜类化合物代谢途径中的重要作用奠定基础。]]> 2014/6/6 16:13:22 1324true 目的 采用DNA条形码技术，比较了条形码序列ITS1和ITS2在贝母属植物中的鉴定效果。方法 从8个贝母属21个样品中提取了基因组DNA，进行ITS1、ITS2序列的PCR扩增和测序，并比较了各样品DNA提取率、PCR扩增率及测序成功率。测序数据采用BLAST搜索法评价2种序列的鉴定能力，采用SPSS软件进行遗传距离分析，采用MEGA软件进行系统发育树的构建。结果 对比不同物种ITS1、ITS2序列的一级结构差异，发现其ITS1序列长度为205～229 bp，有信息位点27个（所占比例11.8%），鉴定成功率为72.2%；ITS2序列长度为236～244 bp，有信息位点20个（所占比例8.2%），鉴定成功率为100%。ITS1序列的种内及种间遗传距离分别为0.001 8和0.066 1，而ITS2序列的种内及种间遗传距离分别为0.000 5和0.046 8，且种内高度保守；系统发育树构建结果显示，2种ITS序列能准确区分出浙贝母类群、川贝母类群和北方贝母类群，而ITS2序列所构建的系统发育树准确度更高。结论 ITS2 序列能够更准确鉴定不同物种贝母，适合作为贝母属植物的通用条形码序列。]]> 2014/6/6 16:13:22 1323true 目的 分析不同质量级别的草珊瑚样品的DNA指纹图谱与其品质相关性，为进一步利用这些资源进行分子辅助育种奠定一定基础。方法 采用ISSR-PCR方法对UBC801～UBC900共100个ISSR引物进行筛选，筛选出多态性好的ISSR引物23个。利用这23个ISSR引物扩增18份草珊瑚样品，以18份草珊瑚样品的ISSR扩增谱带为基础，利用Excel文件建立供试材料扩增条带指纹数据库。结果 共获得198条谱带，平均每个引物扩增出8条谱带，其中多态性谱带184条，多态性条带比率为92.9%。从23个多态性好的ISSR引物中遴选出UBC811、UBC825 2个引物中7个位点为一个组合，UBC827、UBC834、UBC842共3个引物中7个位点为另一个组合，分别建立了18份受试草珊瑚样品的基因组的DNA 指纹图谱，并从184条多态性谱带中筛选了出u844-6条带与样品质量有一定相关性。结论 ISSR分子标记可以有效辨别18份受试草珊瑚样品的DNA指纹图谱，并筛选获得一条与其品质有一定相关性的特征条带。]]> 2014/6/6 16:13:22 1322true 目的 分离纯化水仙根茎中的内生真菌，并进行菌群组成及其多样性分析。方法 采用表面消毒、划线法从水仙鳞茎和根中分离内生真菌，基于形态学特征和核糖体转录间隔区（ITS-rDNA）序列分析，对分离株进行分类鉴定；以内生真菌的多样性指数（H）和均匀度指数（E）为指标，分析水仙内生真菌的菌群组成及其多样性。结果 共分离到18株内生真菌，其中16株来自根部，2株来自鳞茎，分别占总分离菌株的88.89%和11.11%。PCR扩增其中14株真菌ITS-rDNA，得到大小约500 bp片段，用BLAST软件对其测序结果进行相似性比对，发现4株为青霉属Penicillium，相似性95%～99%；3株为曲霉属Aspergillus，相似性99%～100%；3株为喙枝孢属Rhinocladiella，相似性为99%；其他4株分别为木霉属Trichoderma、链格孢属Alternaria、赤霉属Gibberella和镰孢霉属Fusarium，相似性都为99%。青霉菌为水仙内生真菌优势菌属。通过构建系统发育树发现这14株内生菌明显分为2大类群，Shannon多样性指数为1.778，均匀度为0.913 7。结论 水仙内生真菌菌群组成具有一定程度的多样性和差异性。]]> 2014/6/6 16:13:22 1321true 目的 建立五味子Schisandra chinensis的超高效液相色谱（UPLC）指纹图谱。方法 采用Acquity UPLC HSS T3 色谱柱（100 mm × 2.1 mm，1.8 μm）；以乙腈-水为流动相梯度洗脱；体积流量0.5 mL/min；柱温30 ℃；检测波长216 nm；进样量2 μL。结果 首次建立了五味子的UPLC特征指纹图谱共有模式，标定了21个共有峰，结合保留时间和紫外光谱分析，指认了五味子醇甲、五味子醇乙、当归酰戈米辛H、五味子酯甲、五味子酯乙、五味子甲素、五味子γ-乙素、五味子乙素和五味子丙素的峰位。19批五味子的相似度均在0.970以上。结论 该方法快速、高效，可用于五味子的质量评价。]]> 2014/6/6 16:13:22 1320true 目的 检测野菊不同部位（花、叶、嫩茎、老茎）中蒙花苷和绿原酸的量，为野菊各部位质量评价提供理论依据和检验手段。方法 采用HPLC-DAD法测定，色谱柱为Thermo C₁₈（250 mm×4.6 mm，5 μm），乙腈-0.05%磷酸为流动相，梯度洗脱，体积流量1 mL/min，柱温30 ℃，检测波长327 nm。结果 蒙花苷在0.15～3.00 μg（r=0.999 0），绿原酸在0.01～0.20 μg（r=0.999 5）与峰面积呈良好的线性关系，平均回收率分别为98.17%、97.99%；野菊叶中蒙花苷量较高，野菊花中绿原酸量较高，茎中各成分量最低。结论 本法操作简便，结果准确，可用于野菊不同部位的质量控制，定量测定结果显示野菊各部位均存在蒙花苷和绿原酸，但质量分数差异较大。]]> 2014/6/6 16:13:23 1319true 目的 克隆金铁锁Psammosilene tunicoides三萜皂苷生物合成途径中的关建酶基因——β-香树素合酶全长cDNA，并对其进行表达和分析，为研究其在三萜皂苷合成途径的关键作用及次生代谢产物工程技术在金铁锁上的应用奠定基础。方法 应用RT-PCR和RACE等方法，克隆金铁锁β-香树素合成酶基因全长，将目的片段转化大肠杆菌表达菌株BL21中，IPTG诱导表达，以2，3-氧化鲨烯为底物进行体外酶促，采用HPLC法鉴定产物。结果 克隆得到金铁锁β-香树素合成酶基因，全长2 882 bp，ORF长2 284 bp，编码760个氨基酸。表达产物具有催化2，3-氧化鲨烯生成β-香树素合酶的活性。结论 克隆所得的全长cDNA通过大肠杆菌表达β-香树素合酶，并能催化2，3-氧化鲨烯生成β-香树素，为金铁锁次生代谢工程研究提供了重要的基础。]]> 2014/5/20 15:30:21 1318true 目的 探明川楝Melia toosendan内生真菌遗传、聚酮合成酶基因（PKS）、非核糖体多肽合成酶基因（NRPS）多样性，为寻找合成生物活性物质的潜在菌株奠定基础。方法 对分离自药用植物川楝的39株内生真菌进行形态学鉴定，并通过PCR技术扩增其ITS序列、PKS基因和NRPS基因，测序后进行BLAST比较和系统发育分析。结果 39株菌株的表型鉴定和系统发育显示，川楝内生真菌分属于青霉属、曲霉属、木霉属等25个属，其中曲霉属（17.9%）、青霉属（15.4%）为川楝内生真菌的优势真菌类群；共得到12个PKS基因和6个NRPS基因，其中NRPS基因都为青霉属。结论 川楝内生真菌具有非常丰富的遗传多样性和较强合成生物活性物质的潜在能力，对青霉属和曲霉属内生真菌可以进行深入研究。]]> 2014/5/20 15:30:22 1317true 目的 分析野三七Panax vietnamensis var. fuscidiscus（PVF）转录组中的SSR位点信息，并设计简单重复序列（SSR）引物，以期为野三七分子标记辅助育种提供有力工具。方法 利用MISA工具筛选了野三七转录组测序获得的126 758条unigenes，对其SSR位点信息进行了分析；在此基础上利用Primer3设计SSR引物，并随机选择30对SSR引物对13株不同来源的野三七进行多态性扩增分析。结果 在野三七的转录组中，共搜索到21 320个SSRs，分布于17 780条unigenes，SSR位点出现频率为16.82%。SSRs位点中二核苷酸重复是主要类型，占总SSRs的52.52%；其次是三核苷酸重复基序（28.08%）。SSRs所包含的重复基元中，二核苷酸重复基元AG/CT和AT/AT是优势重复基元类型，占总SSRs的46.25%。利用Primer3共设计出39 336对SSR引物。随机选择30对引物进行PCR扩增，其中29对（96.67%）扩增出清晰、可重复的条带，15对（50.00%）扩增条带表现出多态性。利用UPGMA作图，将13个材料分为2类。结论 野三七转录组中SSR位点出现频率高，类型丰富；大量的SSR为其遗传多样性分析和遗传图谱构建提供了丰富的候选分子标记。]]> 2014/5/20 15:30:22 1316true 目的 建立同时测定裸花紫珠中5个有效成分的超高效液相色谱（UPLC）方法。方法 采用Agilent Eclipse XDB-C₁₈色谱柱（100 mm×3.0 mm，1.8 μm），流动相为乙腈（A）-0.1%甲酸水溶液（B），梯度洗脱，体积流量为0.7 mL/min。检测波长350 nm，柱温40 ℃。结果 木犀草苷、毛蕊花糖苷、木犀草素-4'-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、木犀草素、5，4'-二羟基-3，7，3'-三甲氧基黄酮分别在2.44～122.0 μg/mL（r=0.999 8）、9.06～453.0 μg/mL（r=0.999 9）、4.42～221.0 μg/mL（r=0.999 9）、3.36～168.0 μg/mL（r=0.999 8）、2.52～126.0 μg/mL（r=0.999 8）内线性关系良好；平均回收率在98.5%～100.8%。结论 所建立的UPLC法简便快速、重复性良好、结果准确可靠，可作为裸花紫珠药材质量标准控制的方法。]]> 2014/5/20 15:30:22 1315true 目的 建立用超高效液相色谱（UPLC）同时测定黄芩中黄芩苷、黄芩素、汉黄芩苷、汉黄芩素、千层纸素A 5种成分的方法。方法 采用UPLC色谱系统，BEH C₁₈色谱柱（50 mm×2.1 mm，1.7 μm）；流动相为乙腈-0.1%甲酸，梯度洗脱，体积流量为0.6 mL/min；进样量为2 μL；检测波长为280 nm。结果 本方法可在15 min内完成1次色谱分析，黄芩苷、黄芩素、汉黄芩苷、汉黄芩素、千层纸素A色谱峰之间有良好的分离度，5种成分的浓度和各自峰面积之间有着良好的线性关系，精密度、重复性及加样回收率的RSD均小于3.0%。结论 本方法快捷、准确，重复性好，能同时测定黄芩中黄芩苷、黄芩素、汉黄芩苷、汉黄芩素、千层纸素A 5种成分的量。]]> 2014/5/20 15:30:22 1314true 目的 克隆刺五加的β-香树酯醇合成酶(β-amyrin synthase,bAS)基因,并分析其表达对皂苷量的影响。方法 利用同源克隆法克隆刺五加的bAS基因。利用Real time PCR技术,分析刺五加bAS基因的表达规律,分光光度法测定总皂苷量。结果 克隆到cDNA长度分别为1 223、1 226 bp的刺五加bAS1、bAS2基因。bAS1和bAS2基因在各时期和器官中均有表达,但表达量差异显著(P < 0.05)。bAS1基因在萌芽期的表达量最高,之后迅速降低,并基本维持恒定。在整个生长期中bAS2表现出低→高→低的表达特点。bAS1基因在各器官中的表达量基本恒定,bAS2基因在叶片中的表达量最高。茉莉酸甲酯(MeJA)处理后,bAS1基因的表达未发生显著变化,bAS2的表达量显著上升。刺五加的皂苷量与bAS2呈极显著的正相关关系(P < 0.01),bAS1基因未达显著水平。结论 bAS2可能是催化刺五加三萜皂苷生物合成的关键酶。]]> 2015/5/6 16:31:47 1313true 目的 以珊瑚樱Solanum pseudo-capsicum种子为实验材料,建立珊瑚樱高效、稳定的丛芽诱导体系,优化组织培养条件,筛选出适宜的植株再生途径。方法 将消毒后的种子接种于空白MS、OM和WPM培养基中,培养45 d后获得无菌苗;在此基础上,选取茎尖、带芽茎段和叶片为外植体材料,通过正交试验研究不同基本培养基和不同植物激素种类及其质量浓度对愈伤组织诱导、丛芽发生及植株再生的影响。结果 适宜珊瑚樱生长的基本培养基为WPM;3种外植体中叶片是最适宜诱导愈伤组织的材料,在WPM+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.01 mg/L中可在7 d内诱导出分化能力极强的愈伤组织,得愈率为100%,10 d内即分化为大量绿色丛芽,愈伤组织丛芽分化率亦达100%;带芽茎段在上述培养基中亦能诱导出愈伤组织,得愈率为81.7%,20 d后开始分化出丛芽;而茎尖可以诱导出愈伤组织,但无再分化能力。适宜丛芽增殖培养基为WPM+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L+KT 1.0 mg/L,30 d增殖系数6.0以上。无菌苗生根则在1/2 WPM+NAA 0.01 mg/L中进行,30 d后可获得生长健壮的再生植株,生根率100%。生根苗移栽至排水良好的沙土中,保温保湿培养25 d后,成活率90%以上。结论 为保持珊瑚樱优良品种特性、种苗繁殖提供了有效途径,也为其优良品种的培育和遗传转化研发奠定了良好基础。]]> 2015/5/6 16:31:47 1312true 目的 建立基于近红外漫反射光谱的淫羊藿Epimedium Herba水分、灰分快速检测新方法,调查我国市售淫羊藿药材的水分、灰分量。方法 采用标准正常化+去散射处理(SNV+D)进行散射校正,采用主成分分析(PCA)进行聚类分析,采用"2,4,4,1"方式进行数学处理,采用改进偏最小二乘法进行回归分析。结果 建立的淫羊藿药材水分与灰分近红外定标模型预测效果较好,稳定性较高,水分与灰分的定标决定系数分别为0.884 3、0.938 7,交叉验证相关系数分别为0.800 9、0.851 9,预测相关系数达到了0.9,剩余预测差超过了3.0。采用近红外分析方法首次测得我国市售淫羊藿药材水分合格率为100%,灰分合格率为82%。结论 近红外分析方法具有快捷、精确、无损等优点,在淫羊藿药材质量控制中具有参考意义。]]> 2015/5/6 16:31:47 1311true 目的 建立枳实Aurantii Immaturus Fructus中4种黄酮类成分芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷的一测多评法,验证该方法在枳实质量评价中应用的准确性及可行性。方法 以橙皮苷为内标,分别建立橙皮苷与芸香柚皮苷、柚皮苷、新橙皮苷的相对较正因子,计算枳实中芸香柚皮苷、柚皮苷、新橙皮苷的量,实现一测多评。同时采用外标法测定枳实中4种黄酮类成分的量,并比较计算值与实测值的差异,以验证一测多评法在测定中的科学性及可行性。结果 各相对校正因子重复性良好,一测多评法测定结果与外标法测定结果无显著差异。结论 以橙皮苷为内标同时测定芸香柚皮苷、柚皮苷、新橙皮苷的一测多评法可用于枳实的定量分析。]]> 2015/5/6 16:31:47 1310true 目的 建立一种西红花Crocus sativus特征图谱分析方法,并用以鉴别西红花中掺假栀子Gardenia jasminoides。方法 采用HPLC法,色谱柱为ZorBax XDB-C₁₈(250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为0.5%醋酸水溶液-0.5%醋酸甲醇溶液梯度洗脱,检测波长为254 nm,分析时间为45 min,体积流量为1.0 mL/min。结果 通过多批样品的检测,共标出8个特征峰,建立的分析方法有较好的重复性,能够显著区分西红花和栀子。结论 方法稳定、可靠、简便,为西红花质量控制和真伪鉴别提供参考。]]> 2015/5/6 16:31:47 1309true 目的 克隆白桦Betula platyphylla一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS),探讨其生物信息及表达模式,并考察非生物胁迫对其NOS基因表达的影响.方法 通过RACE技术克隆了白桦NOS基因,命名为BpNOS.初步对该基因进行了生物信息学分析、分子进化分析、非生物胁迫处理以及信号诱导.结果 该基因全长1 806 bp,含有完整的开放读码框,编码601个氨基酸(Genebank登录号：KJ197336).BpNOS基因为不稳定疏水性蛋白,可能存在信号肽,具有跨膜能力,α-螺旋、延伸链、无规则卷曲分布于整个蛋白.分子进化分析结果表明,BpNOS基因与葡萄等物种的遗传距离较近,说明有着较近的亲缘关系;与大豆、苜蓿的遗传距离较远,说明其亲缘关系较远.BpNOS基因的表达具有节律性,在15:00时达到最大值,为0:00时的12倍.盐、低温、重金属镉胁迫均能抑制BpNOS基因的表达,但响应模式不同;水杨酸(SA)和外源一氧化氮可以促进BpNOS基因的表达.结论 非生物胁迫能够在一定时间范围内抑制NOS活性,SA和外源一氧化氮可以通过NOS途径调控内源一氧化氮的合成,为进一步研究白桦一氧化氮的代谢调控奠定了基础.]]> 2015/4/27 14:26:58 1308true 目的 应用ITS2条形码鉴定茅苍术Atractylodes lancea及其近缘种药材.方法 提取不同产地29份茅苍术、北苍术A. chinesis及白术A. macrocephala基因组DNA,通过PCR扩增ITS2序列并进行双向测序,测序结果提交至GenBank;从GenBank下载茅苍术及其菊科近缘种10种45条ITS2序列;对提交与下载的73条序列,应用MEGA 5.1软件进行序列比对,计算种内和种间距离,采用相似性搜索法、最近距离法进行鉴定分析,并构建Neighber-jioning(NJ)系统进化树直观反映鉴定结果.结果 茅苍术药材ITS2序列长度均为229 bp,是1个单倍型;与菊科近缘种苍术属药材距离较近,与菊科其他属近缘种之间遗传距离较远,NJ树结果显示茅苍术及其近缘种药材均可明显区分,表现出良好的单系性,依据ITS2二级结构,也可以直观地将茅苍术与菊科近缘种药材区分.结论 ITS2序列作为DNA条形码能稳定、准确鉴别茅苍术药材,为保障临床安全用药提供了新的技术手段.]]> 2015/4/27 14:26:58 1307true 目的 识别当归Angelica sinensis根药用活性物质的基因序列,阐释当归次生代谢产物生物合成的遗传基础.方法 从当归头、当归尾提取总RNA,质量鉴定合格后构建测序文库.测序文库检测合格后在Illumina HiSeq 2000测序仪上完成双端测序.采用相关生物信息学方法分析当归根的转录组特性.结果 采用Illumina HiSeq 2000高通量测序获得当归根转录组的66 431 540个原始短读序.用生物信息学方法从头组装并注释了30 432个功能基因序列(unigene).应用Uniprot蛋白数据库进行序列相似性比对,当归功能基因序列主要分布于目前研究较深入的7种重要经济作物,如葡萄、蓖麻、毛果杨、大豆、苜蓿、拟南芥和烟草.研究发现,当归根表达的127、69、70、94个unigene分别映射到类苯基丙烷生物合成、N-聚糖生物合成、黄酮类化合物生物合成和叶酸生物合成等路径,可能参与药用活性物质阿魏酸、当归多糖、当归总黄酮和叶酸的生物合成.结论 参与当归根重要药效物质(阿魏酸、当归多糖、当归总黄酮等)生物合成的功能基因序列可能是当归补血、活血功效的分子生物学基础.]]> 2015/4/27 14:26:58 1306true 目的 建立新疆不同产地雪菊的UPLC指纹图谱,为雪菊的真伪鉴别和质量控制提供依据.方法 采用Waters ACQUITY UPLC HSS T3 C₁₈(150 mm×2.1 mm,1.8 μm)色谱柱,以乙腈-pH 3.0磷酸水溶液为流动相,体积流量0.2 mL/min,检测波长280 nm,柱温30 ℃,以儿茶素、木犀草苷、3,5-O-二咖啡奎宁酸为参照物,对13批次新疆不同产地雪菊进行指纹图谱分析.结果 建立了新疆产雪菊的UPLC指纹图谱,标定共有峰17个,并用对照品指认了3个色谱峰,测定了13批次新疆产雪菊中3种成分的量.结论 13批次新疆产雪菊相似度虽然存在微小差异,但均大于0.90.根据该色谱条件构建的UPLC指纹图谱为新疆产雪菊质量评价提供了科学依据.]]> 2015/4/27 14:26:58 1305true 目的 建立测定西藏秦艽花和川西秦艽花中落干酸、6'-O-β-D-葡萄糖基龙胆苦苷、獐芽菜苦苷、龙胆苦苷、獐芽菜苷、异荭草苷、异牡荆黄素7种成分的HPLC方法.方法 采用Agilent Zorbax ODS(250 mm×4.6 mm,5 μm)色谱柱,流动相为乙腈-0.4%醋酸水溶液梯度洗脱,体积流量0.4 mL/min,检测波长254 nm,柱温30 ℃.结果 落干酸、6'-O-β-D-葡萄糖基龙胆苦苷、獐芽菜苦苷、龙胆苦苷、獐芽菜苷、异荭草苷和异牡荆黄素分别在0.228～2.280、0.680～6.800、0.220～2.200、1.476～14.760、0.200～2.000、0.436～4.360、0.276～2.760 μg进样量与峰面积积分值线性关系良好(R²≥0.999 2),落干酸、6'-O-β-D-葡萄糖基龙胆苦苷、獐芽菜苦苷、龙胆苦苷、獐芽菜苷、异荭草苷及异牡荆黄素的平均回收率(n＝9)分别为100.9%、99.4%、101.0%、105.7%、103.1%、98.4%、104.2%.结论 该法简便、准确、专属性强,可用于西藏秦艽花和川西秦艽花中7种成分的测定.]]> 2015/4/27 14:26:58 1304true 目的 克隆红花栝楼鲨烯合酶(squalene synthase, SS)的基因并进行序列分析, 为进一步研究葫芦科植物三萜合成通路关键酶SS的正选择位点与功能的关联性分析奠定基础。方法 根据绞股蓝与罗汉果SS基因cDNA比对分析的结果, 设计SS的5'端简并引物, 采用3'RACE扩增红花栝楼SS全长cDNA基因。结果 获得红花栝楼SS cDNA全长共1 466个核苷酸, 其中包括一个含有1 254个核苷酸的开放读码框, 编码417个氨基酸残基。通过NCBI的Blast比对, 发现红花栝楼SS基因编码的氨基酸序列与已知植物SS基因编码的氨基酸序列同源性为78%～94%, 核苷酸的同源性为74%～93%。结论 成功克隆了红花栝楼SS的全长cDNA, 为进一步研究红花栝楼SS基因结构、基因表达、基因突变提供了基础, 并为葫芦科植物三萜合成通路关键酶SS的正选择位点与功能的关联性分析提供了数据支持。]]> 2015/4/24 17:18:49 1303true 目的 比较锈腐病鲜参、受伤鲜参与正常鲜参加工而成的红参品质, 为人参加工利用提供依据。方法 测定锈腐病鲜参、受伤鲜参和正常鲜参加工而成的红参中10种人参皂苷、总灰分、酸不溶性灰分、挥发性醚浸出物和总蛋白、糖类成分的量。结果 锈腐病鲜参、受伤鲜参加工而成的红参中的总灰分、酸不溶性灰分、挥发性醚浸出物、蔗糖量都显著高于正常鲜参加工而成的红参, 而10种人参皂苷量均显著低于正常鲜参加工而成的红参。结论 锈腐病、受伤原料参对其加工后红参质量有显著影响。]]> 2015/4/24 17:18:50 1302true 目的 研究不同处理对党参种子萌发和幼苗发育的影响, 探讨最佳的处理方法。方法 对党参种子进行不同方式的前处理, 采用恒温进行培养, 观察记录党参种子萌发及幼苗发育情况(30 d), 并统计分析。结果 温度和土壤湿度对党参种子和幼苗发育有显著影响, 党参种子萌发和幼苗发育最佳温度在20～30 ℃, 最佳湿度在45%～75%;草木灰处理和适宜质量浓度的化学药剂、生长调节剂处理都能有效地促进党参种子萌发和幼苗发育, 但生长调节剂会改变党参幼苗的形态特征, 草木灰拌种处理党参种子萌发快, 幼苗发育快, 植株性状正常且病害少。结论 采用草木灰拌种处理有利于党参种子萌发和幼苗生长发育, 有效提高种苗产量和质量, 可广泛应用于党参大田育苗生产。]]> 2015/4/24 17:18:50 1301true 目的 建立HPLC法同时测定苦丁茶冬青Ilex kudingcha中大叶冬青苷G、大叶冬青苷H、苦丁冬青苷G、大叶冬青苷 C、苦丁冬青苷A、苦丁冬青苷E、苦丁冬青苷D 7个三萜皂苷类成分的量。方法 采用YMC C₁₈色谱柱(YMC-pack ODS-A, 250 mm×4.6 mm, 5 μm), 以乙腈-水为流动相进行梯度洗脱, 体积流量为1.0 mL/min, 检测波长为210 nm, 柱温为30 ℃。结果 7个三萜皂苷化合物均有良好的分离度, 具有良好的线性范围和线性关系(r>0.999 5), 平均加样回收率在99.25%～100.80%, RSD<2%。结论 该方法简单准确, 具有良好的重复性和稳定性, 可为苦丁茶冬青质量控制提供科学依据。]]> 2015/4/24 17:18:50 1300true 目的 建立何首乌药材Polygoni Multiflori Radix中无机元素的电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)分析方法, 并对不同产地何首乌及商品药材中无机元素进行分析比较。方法 样品经微波消解后, 采用ICP-MS法测定无机元素的量, 并用SPSS 16.0对数据进行相关性分析、主成分分析。结果 检测了何首乌药材中24种元素, 元素之间有一定的相关性, K、Fe、Mg、Ca、P的量较高, 重金属及有害元素的量应引起关注;主成分分析选出6个主因子, 得出Fe、Si、Ca、Al、K、Be、Sb、Mn、Zn、Ba是何首乌的特征无机元素。结论 为何首乌药材的质量控制及安全性评价提供依据。]]> 2015/4/24 17:18:50 1299true 目的 探索罗汉果Siraitia grosvenorii三倍体雌株与二倍体雄株的遗传背景,为无籽罗汉果优良品种的选育提供分子生物学依据。方法 利用ISSR分子标记对28份罗汉果种质进行遗传背景分析,用AFLP-SURV计算材料间遗传距离;用TSYS-pc和GenAIEx分别进行聚类和主坐标分析。结果 从100条ISSR引物中筛选出13条用于扩增,共获得131条清晰可辨条带,其中多态性条带99条,多态性位点百分率为75.57%。聚类和主坐标分析表明罗汉果三倍体雌株和二倍体雄株的遗传背景存在一定的丰富性,但大多遗传相似性系数较大,遗传距离较近。结论 罗汉果三倍体雌株和二倍体雄株遗传背景的复杂性较低,应该尽快采取相应措施,进行种质创新,丰富无籽罗汉果亲本的遗传背景。]]> 2015/3/20 19:04:00 1298true 目的 分析丹参柯巴基焦磷酸合酶(CPS)的氨基酸序列特征,并与其他植物进行比较,为丹参CPS蛋白的后续研究提供有利参考。方法 利用生物信息学方法,以丹参为主,对13科16种植物的18条CPS蛋白序列进行了序列组成、生化特性、导肽、信号肽、跨膜结构域、疏水性/亲水性、蛋白质二级、三级结构及功能域等预测分析,并进行了丹参CPS蛋白序列与其他植物的同源比对以及系统进化树构建。结果 CPS蛋白氨基酸残基数集中在730以上;相对分子质量91 610左右;平均理论等电点5.87,提示CPS为酸性蛋白。序列结构预测结果显示,CPS蛋白具有明显的疏水区和亲水区,不存在信号肽,不具有跨膜结构域,可能有叶绿体转运肽。蛋白质二级结构中最主要的结构元件是α-螺旋和无规则卷曲。蛋白同源性比对结果显示,丹参CPS与同科植物迷迭香和玄参科植物野甘草的同源性最高。结论 对丹参等植物的CPS蛋白进行了详细的生物信息学分析,可为今后深入研究该酶的结构特征和功能提供参考。]]> 2015/3/20 19:04:00 1297true 目的 建立不同产地肿节风药材超高效液相色谱指纹图谱,为建立快速而高效的肿节风药材整体质量控制方法提供实验依据。方法 采用UPLC法,色谱柱为Acquity HSS T3柱(50 mm×2.1 mm,1.8 μm),采用乙腈(D)-水(C)(各含0.1%甲酸)为流动相进行梯度洗脱,体积流量0.5 mL/min,检测波长330 nm,柱温35 ℃,建立肿节风药材指纹图谱;通过相似度评价,结合聚类分析和主成分分析(PCA),对不同批次的肿节风药材进行质量评价。结果 建立的肿节风药材UPLC指纹图谱方法确证16个共有峰,并对9个共有峰进行了明确化学成分指认;18批肿节风药材的相似度为0.869～0.979;通过聚类分析可大致聚成2类;PCA结果支持了聚类分析结果,并发现指纹图谱中迷迭香酸、新绿原酸、隐绿原酸等5个差异性较大的化合物。结论 肿节风的UPLC指纹图谱的构建和化学模式的识别为药材质量控制提供更全面的参考。]]> 2015/3/20 19:04:00 1296true 目的 比较不同产地、树龄、采收期银杏Ginkgo biloba叶的质量,固定欣脉胶囊处方中银杏叶的来源产地。方法 建立银杏叶的HPLC指纹图谱测定方法,对不同产地、树龄、采收期银杏叶的指纹图谱进行测定,并测定不同产地、树龄、采收期银杏叶总黄酮醇苷和总萜内酯的量,对各批次银杏叶主要成分的量及指纹图谱进行对比分析。结果 不同产地、树龄、采收期的银杏叶总黄酮醇苷、萜类内酯量以及指纹图谱均不同。结论 所建立的指纹图谱测定方法为银杏叶的合理采收及质量评价提供了科学依据;江苏邳州、2～3年树龄、6～8月份采集的银杏叶质量较佳,可以作为欣脉胶囊处方中银杏叶的固定来源产地。]]> 2015/3/20 19:04:01 1295true 目的 建立益智仁Alpiniae Oxyphyllae Fructus的超高效液相(UPLC)指纹图谱。方法 采用ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.8 μm);以乙腈-甲酸水溶液为流动相梯度洗脱;体积流量0.5 mL/min;样品室温度10 ℃;柱温30 ℃;检测波长254 nm;进样量2 μL。结果 首次建立了益智仁的UPLC特征指纹图谱共有模式,标定了20个共有峰,结合保留时间和紫外光谱分析,确定了原儿茶酸、α-羟甲基糠醛、oxyphyllenodiol A、teuhetenone A、teuhetenone B、白杨素、山柰素、杨芽黄素、圆柚酮共9个化合物。19批益智仁,其中15批的相似度在0.970以上。结论 该方法快速、高效,可用于益智仁的质量评价。]]> 2015/3/20 19:04:01 1294true 目的 利用DNA条形码进行玉叶金花属植物的分子鉴定。方法 对玉叶金花属20种、89份个体进行叶绿体片段rbcL、matK和trnH-psbA以及核基因片段ITS的PCR扩增和测序,计算种内和种间Kimura 2-parameter(K2-P)遗传距离,利用序列相似性法和邻接法进行单一片段、核心片段、组合片段以及ITS2片段的分析。结果 单一片段分析结果表明玉叶金花属种间遗传距离(0.002～0.012)明显大于种内遗传距离(0.000 3～0.000 7)。trnH-psbA扩增率最低,ITS2片段的分辨率最高,其次是matK和ITS片段,rbcL片段的分辨率最低。片段组合后的分辨率明显提高,基于序列相似性法和邻接法,matK+rbcL+ITS和matK+rbcL+trnH-psbA+ITS的分辨率相当,且比其他片段组的分辨率更高,分别为77%和75%,成功鉴定了15个近缘类群,包括2个药用种类广西玉叶金花和黐花。结论 鉴于trnH-psbA扩增率较低,建议matK+rbcL+ITS作为玉叶金花属物种鉴定的DNA条形码,并作为其药用种类的分子鉴定工具。]]> 2015/3/10 14:08:50 1293true 目的 基于前期对白木香Aquilaria sinensis转录组测序结果,从白木香总RNA中克隆白木香倍半萜合成酶基因(As-SesTPS1),并对其进行生物信息学及表达分析。方法 利用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)从白木香总RNA中获得倍半萜合成酶基因As-SesTPS1的cDNA全长序列;利用生物信息学手段对该序列进行相似性和同源性分析,并预测其编码蛋白的结构和功能;利用qRT-PCR技术检测该基因在白木香不同样品中的表达水平。结果 得到倍半萜合成酶基因As-SesTPS1,开放阅读框(ORF)全长1 671 bp,编码556个氨基酸,其与多条倍半萜合成酶基因具有较高相似性,并含有RRx₈W和DDxxD的保守序列;该基因在白木香的沉香样品中高表达。结论 As-SesTPS1的克隆及其生物信息学和在白木香不同部位表达差异性分析,为白木香倍半萜生物合成代谢途径的研究奠定基础。]]> 2015/3/10 14:08:51 1292true 目的 建立水飞蓟Silybum rnarianum悬浮培养体系,测定不同影响因子对水飞蓟宾量的影响。方法 采用正交试验确定水飞蓟悬浮培养体系,采用HPLC法测定水飞蓟宾的量。结果 激素配比6-BA 1.5 mg/L+NAA 1.0 mg/L+ZT 1.5 mg/L的MS培养基、光照12 h/d、pH值为7、转数110 r/min,为水飞蓟悬浮培养的最佳生长条件。当水杨酸、壳聚糖、硝普钠质量浓度分别为0.05、3、1 μg/L时水飞蓟增长量达到最大值,水飞蓟宾量也达到最大值。结论 建立的悬浮培养体系可用于水飞蓟的快速繁殖,适宜质量浓度的壳聚糖和硝普钠利于悬浮细胞的生长及水飞蓟宾的积累。]]> 2015/3/10 14:08:51 1291true 目的 研究通关藤Marsdenia tenacissima的生长发育规律,为通关藤的人工栽培育种以及规范化种植提供科学依据。方法 以采自云南省马关县的当年成熟通关藤种子为材料,研究发芽床、浸种时间、温度、光照处理及pH值对种子萌发的发芽势、发芽率及根茎长的影响。结果 砂床为通关藤种子适宜的发芽床;浸种时间对种子的发芽影响不显著;种子最适宜发芽的温度为25～30 ℃;适宜温度条件下,光照与否对通关藤种子发芽率的影响不明显,温度不适时,光照为影响种子发芽的主要因素;偏酸性的逆境对通关藤种子萌发的影响比碱性的逆境影响小。结论 适合通关藤种子萌发的条件为发芽前浸种24 h、30 ℃、pH为7.0～7.5的砂床环境下光照培养。]]> 2015/3/10 14:08:51 1290true 目的 对天津产酸枣仁Ziziphi Spinosae Semen进行质量分析评价研究,并与市售其他产地的酸枣仁进行比较分析。方法 采用系统抽样结合区域分层抽样法采集天津4个区域12批酸枣野生样品,采用HPLC法测定其中的斯皮诺素、酸枣仁皂苷A、酸枣仁皂苷B、白桦脂酸的量。结果 天津产野生酸枣仁中斯皮诺素、酸枣仁皂苷A、酸枣仁皂苷B、白桦脂酸量分别为0.810～1.925、0.695～1.708、0.201～0.390、0.651～0.789 mg/g;河北承德酸枣仁白桦脂酸量最高,达到1.654 mg/g。结论 天津产野生酸枣仁质量较优,其中八仙山酸枣仁质量优势尤为突出,其他3个区域与市场流通的酸枣仁药材平均质量水平相当。]]> 2015/3/10 14:08:51 1289true 目的 采用ITS序列进行远志属7种药用植物的分子鉴定.方法 通过测定远志Polygala tenuifolia、卵叶远志P. sibirica、瓜子金P. japonica、华南远志P. glomerata、蓼叶远志P. persicariifolia、肾果小扁豆P. furcata和小花远志P. arvensis的ITS1、ITS2序列,借助ClustalX、MEGA 3.1软件比较和分析ITS1、ITS2的序列特征.结果 远志属7种药用植物ITS1长度为279～291 bp,ITS2的长度为211～219 bp,变异位点232个,信息位点53个;远志与卵叶远志的遗传距离最小,华南远志与肾果小扁豆遗传距离最大,亲缘关系最远.结论 远志属7种药用植物的ITS1、ITS2序列可作为分子鉴定的依据.]]> 2015/2/14 13:13:31 1288true 目的 筛选北细辛Asarum heterotropoides var. mandshuricum愈伤组织诱导适宜条件,确定愈伤组织类型.方法 以北细辛叶柄和叶片为材料,研究外植体状态、培养基类型及植物生长调节剂种类和浓度配比对愈伤组织诱导发生的影响,同时利用石蜡切片法探讨不同时期愈伤组织的形态结构特点.结果 以幼期叶柄和叶片为外植体,高效的愈伤组织诱导培养基为1/2 MS＋0.6 mg/L 6-BA＋0.15 mg/L NAA;但幼期叶片愈伤组织发生所需时间较长.切片观察发现诱导形成的愈伤组织结构紧密,细胞小且排列无规则,为胚性愈伤组织.结论 幼期叶柄是北细辛愈伤组织诱导的最佳外植体材料,获得的高效愈伤组织诱导条件将为后续再生体系的成功建立奠定基础.]]> 2015/2/14 13:13:31 1287true 目的 建立叶下珠HPLC指纹图谱评价体系.方法 采用Diamonsil C₁₈(250 mm×4.6 mm,5 μm)色谱柱,乙腈-0.2%冰醋酸水溶液为流动相梯度洗脱,检测波长270 nm,体积流量1.0 mL/min.测定9个不同产地叶下珠指纹图谱,采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004A版)计算相似度,并用对照品和液质联用技术指认色谱峰.结果 建立了叶下珠指纹图谱共有模式,标定了11个共有峰,指认了其中8个主要色谱峰,用聚类分析和主成分分析对指纹图谱进行模式识别.结论 将指纹图谱和模式识别结合起来对叶下珠进行质量控制是一种有效的评价方法,为叶下珠的全面质量控制提供了基础.]]> 2015/2/14 13:13:32 1286true 目的 通过考察不同产地及采收期莲房中原花青素量的变化,确定莲房适宜的产地及采收期,为莲房的合理利用提供依据.方法 采集12产地6个采收时期及不同成熟度的莲房样品,采用不同的干燥方法进行干燥,紫外分光光度法测定原花青素量,比较质量分数差异.结果 不同成熟度的莲房中的原花青素量具有较大差异,成熟样品质量分数大于幼嫩样品;不同干燥方法对莲房中的原花青素质量分数有较大影响,其中烘干法影响较小,阴干法其次,晒干法影响最大;不同产地和采收期莲房中的原花青素质量分数具有一定差异,呈区间波动特征.结论 宜选用与莲子采收保持一致的成熟莲房,采摘后宜采用烘干或阴干法干燥处理,不宜置烈日下暴晒;浙江12产地7～9月份的莲房中的原花青素质量分数大多在6%～8%波动,均可作为莲房资源加以利用.]]> 2015/2/14 13:13:32 1285true 目的 研究水飞蓟种子的质量检验方法,为制定水飞蓟种子检验规程和质量分级标准提供依据.方法 参考《国际植物种子检验规程》和《中国农作物种子检验规程》的方法对水飞蓟种子的质量进行测定.结果 种子的净度分析采用风水选法;真实性鉴定采用外观形态比较;用千粒法测定千粒质量;发芽条件为在种子发芽前用自来水冲洗2 h,以双层滤纸为发芽床,在20 ℃条件下、8 000 lx光照培养,计数时间为4～14 d;用电导率法测定生活力.结论 建立研究的水飞蓟种子的质量检验方法简便可靠.]]> 2015/2/14 13:13:32 1284true 目的 采用RP-HPLC法测定杜仲板皮和枝皮中桃叶珊瑚苷、绿原酸、京尼平苷和松脂醇二葡萄糖苷的量.方法 采用Cosmosil C₁₈(250 mm×4.6 mm,5 μm)色谱柱,以乙腈-0.1%磷酸水溶液进行梯度洗脱,体积流量0.8 mL/min,检测波长208 nm,柱温25 ℃.结果 杜仲板皮中桃叶珊瑚苷、松脂醇二葡萄糖苷量大于枝皮,枝皮绿原酸、京尼平苷量大于板皮;在不同产地来源上,杜仲板皮和枝皮中桃叶珊瑚苷、绿原酸、京尼平苷和松脂醇二葡萄糖苷平均质量分数有一定差异性.结论 该方法简便、快速、准确可靠,为更全面合理科学地对杜仲药材质量的评价提供了技术支撑.]]> 2015/2/14 13:13:32 1283true 目的 从铁皮石斛Dendrobium officinale中克隆1-羟基-2-甲基-2-(E)-丁烯基-4-焦磷酸还原酶 [1-hydroxy-2-methyl-2-(E)-butenyl-4-diphosphatereductase,HDR] 基因,并分析其在铁皮石斛不同组织中的表达差异以及不同信号分子诱导下的表达模式.方法 采用RT-PCR和RACE等方法获得铁皮石斛HDR基因(DoHDR)全长,利用DNAMAN和MEGA6.0对其他物种的HDR基因编码的氨基酸序列进行同源性分析和进化关系分析,使用实时荧光定量分析HDR基因的表达模式.结果 成功获得DoHDR基因,GenBank登录号为KC344827,全长1 658 bp,编码460个氨基酸,与其他科属植物的同源性达到80%以上.DoHDR基因在铁皮石斛叶片中表达量最高,从高到低依次是根、茎、原球茎;且受到脱落酸(abscisic acid,ABA)、水杨酸(salicylic acid,SA)信号分子的诱导.结论 从铁皮石斛中获得DoHDR基因,为进一步阐明铁皮石斛萜类化合物合成途径中该基因的重要作用奠定了理论基础.]]> 2015/1/31 16:16:12 1282true 目的 构建虎杖查耳酮合酶(PcCHS1)基因的RNA干涉(RNAi)表达载体,获得PcCHS1表达下调的转基因虎杖植株.方法 根据GenBank中已知的PcCHS1基因序列(EF090604),设计相应引物,克隆 PcCHS1基因核心保守序列.以 PcCHS1基因为靶基因,将长度574 bp保守序列片段通过正、反2个方向插入表达载体pYLRNAi中,构建RNAi表达载体pYLRNAi-PcCHS1.通过根癌农杆菌介导法将其导入虎杖茎尖组织.对获得的转基因植株,利用Northern blotting检测 PcCHS1基因表达水平,并应用HPLC法测定虎杖中白藜芦醇苷的量.结果 成功构建 PcCHS1基因RNA干涉表达载体,获得了5株转 PcCHS1基因干涉载体的阳性植株.转基因虎杖 PcCHS1基因表达水平显著下调,并且转基因植株中白藜芦醇苷量均得到显著提高,其中最高量是对照植株的3.8倍(P < 0.05).结论 成功获得了干涉 PcCHS1基因表达下调的转化植株,抑制 PcCHS1基因的表达显著增加了转基因虎杖中白藜芦醇苷的量,为有效利用该基因提高虎杖白藜芦醇苷量奠定基础.]]> 2015/1/31 16:16:12 1281true 目的 研究天麻中天麻素和天麻多糖的量与天麻商品规格、等级和产地之间的相关性,评价天麻的质量.方法 分别采用HPLC法和苯酚-硫酸法测定了35份冬天麻、春天麻及其不同等级天麻样品中天麻素和天麻多糖量;结合性状鉴别特征,分析这2种活性成分与天麻商品规格、等级、产地等因素之间的关系.结果 冬天麻中天麻多糖的量(26.05%)高于春天麻(20.21%),而天麻素的量则是冬天麻(0.49%)低于春天麻(0.68%).在不同等级的天麻中,天麻多糖的量与等级有关,一等(32.65%)、二等天麻(32.89%)高于三等(21.71%)、四等天麻(14.57%);而天麻素的量相近,一、二、三、四等天麻中天麻素的量分别为0.46%、0.65%、0.43%和0.44%.四川、陕西、云南等天麻道地产地的样品中天麻素和天麻多糖量均较高.结论 建立的HPLC法和苯酚-硫酸法可准确测定天麻中天麻素和天麻多糖的量.天麻多糖的量与天麻商品规格、等级和经验鉴别优劣的结果相符合,可作为天麻质量评价的指标.]]> 2015/1/31 16:16:12 1280true 目的 明确雷丸菌丝生长的影响因素,为人工栽培提供依据.方法 在不同温度、碳源、氮源、pH、培养基质等培养条件下测定雷丸菌丝日生长量.结果 25 ℃、pH 6.0～7.0条件下菌丝生长快;1%～3%的碳源,菌丝生长速率差异不显著;蛋白胨、酵母粉等氮源对菌丝生长有抑制作用,玉米粉无抑制;竹叶为雷丸栽培种较适宜的栽培主料,玉米粉的促生长作用明显.结论 温度、氮源和基质对雷丸菌丝生长的影响较明显.]]> 2015/1/31 16:16:12 1279true 目的 利用HPLC法对翠菊不同部位中的5种黄酮类成分同步检测.方法 色谱柱为XUnion C₁₈(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相为乙腈(A)-水(B),梯度洗脱,0～65 min,13%～45%A;体积流量 1 mL/min;柱温25 ℃;检测波长210 nm;进样量20 μL,测定翠菊花瓣、花托、花杆75%乙醇提取物,醋酸乙酯萃取部位中芹菜素、大波斯菊苷、山柰酚、金丝桃苷、木犀草素的量.结果 金丝桃苷、大波斯菊苷、木犀草素、芹菜素、山柰酚色谱分离良好,均在2.5～200 mg/L线性关系良好,r均大于0.999 0,加样回收率为95%～105%.结论 方法快速、准确,可为翠菊不同部位的质量控制提供依据.]]> 2015/1/31 16:16:13 1278true 目的 建立同时测定金线莲中槲皮素、山柰素、异鼠李素的方法,为金线莲及其相关产品的质量控制提供科学的方法.方法 采用高效液相色谱法,选用Lanbo-Kromasil-C₁₈色谱柱;以甲醇-0.2%磷酸溶液(50:50)为流动相;检测波长360 nm,体积流量1.0 mL/min,柱温为30 ℃.结果 槲皮素在11.0～165.6 ng(r=1.000 0),山柰素在11.4～170.4 ng(r=0.999 8),异鼠李素在10.4～156.0 ng(r=0.999 5)内呈良好的线性关系.平均加样回收率槲皮素为97.69%(RSD=2.4%,n=9),山柰素为95.59%(RSD=1.5%,n=9),异鼠李素为95.86%(RSD=1.7%,n=9).结论 本法简便、快速、准确、重复性好,可作为金线莲质量控制的理想方法.]]> 2015/1/31 16:16:13 1277true 目的 克隆红花花瓣中的黄酮醇合成酶(flavonol synthase,FLS)基因并研究其在不同开花时期的表达量.方法 根据红花花瓣转录组测序结果挑选FLS基因的设计引物,以红花花瓣总 RNA为模板,采用RT-PCR的方法扩增FLS基因片段并连接到PEASY-T1载体上,阳性克隆经PCR检测后进行测序.结果 获得了224 bp的序列,将获得的序列在NCBI上进行Blast比对,该基因与其他物种的FLS基因具有较高的同源性.结论 克隆了红花FLS基因中间片段,根据FLS基因片段设计引物,对红花不同品种不同开花时期进行荧光定量PCR分析,红花FLS基因在吉红油姊妹系的盛花期表达量最高.]]> 2015/1/19 10:41:44 1276true 目的 使用核磁共振(NMR)代谢组学技术对驴Equus asinus皮及其伪品(马E. caballus皮、骡E. ferus × asinus皮)的水提物进行鉴别研究,为阿胶的鉴别和质量控制研究提供依据.方法 从去毛后的驴皮及其伪品中提取水溶性成分,然后进行核磁共振氢谱(¹H-NMR)分析,对所得的核磁数据进行水溶性成分归属指认,并进行多元统计分析. 结果 在驴皮及其伪品¹H-NMR图谱中指认出了42种水溶性成分.与驴皮比较,马皮中含较多醋酸、亮氨酸、缬氨酸、异亮氨酸,含较少乳酸、丝氨酸、焦谷氨酸、肌酸,而骡皮中含较多乳酸、肌酸、丙氨酸、胆碱,含较少甘油、醋酸,并且都具有显著性差异(P< 0.05).结论 初步建立了基于核磁代谢组学技术对阿胶原料驴皮与其伪品的鉴别研究方法,为阿胶原料驴皮的鉴别和质量控制研究提供实验依据.]]> 2015/1/19 10:41:44 1275true 目的 通过外源物质对黄连幼苗进行处理,研究黄连幼苗光合特性及叶绿素荧光特性的变化,寻找提高黄连幼苗在盐胁迫条件下抗性能力的途径.方法 测定100 mmol/L的NaCl模拟盐胁迫条件下,经过不同浓度的外源一氧化碳(CO)供体高铁血红蛋白(hematin,H)处理后,黄连幼苗光合色素量、叶绿素荧光参数及气体交换参数等光合生理指标的变化.结果 NaCl胁迫下的黄连幼苗的光合生理受到显著抑制,但是经过不同浓度的H处理后,显著提高了叶绿素a(Chl a)、叶绿素b(Chl b)、Chl (a＋b) 和类胡萝卜素等光合色素的量.盐胁迫下,黄连植株的净光合速率(P_n)、气孔导度(G_s)及叶片蒸腾速率(T_r)均下降,并且随着胁迫时间和胁迫浓度的增加,下降幅度逐渐增大,胞间CO₂浓度(C_i)则呈上升趋势.在盐胁迫下,黄连P_n降低的主要影响因素是非气孔因素.在应用H进行处理后,黄连的P_n、G_s及T_r均有不同程度地提高,C_i也有不同程度的降低,并且不同的浓度梯度存在着显著的效果差异.H处理还提高了最大荧光(Fm),最大光化学效率(Fv/Fm),光系统II(PSII)潜在活性(Fv/Fo),PSII有效光化学效率(Fv'/Fm'),PSII实际光化学效率(ΦPSII),光化学淬灭系数(qP),电子传递率(ETR)和光化学速率(PCR)的水平,有效地降低了初始荧光(Fo),非光化学淬灭系数(NPQ)和热耗散速率(HDR)的水平.结论 外源CO供体H通过提高黄连幼苗叶片的光合色素量,减少过剩激发能的耗散,提高光合电子传递效率,有效地缓解盐胁迫对黄连叶片PSII的伤害,提高植株的抗盐能力.]]> 2015/1/19 10:41:45 1274true 目的 建立一种同时测定金沙藤中绿原酸、咖啡酸和p-香豆酰葡萄糖的方法.方法 采用HPLC法,色谱柱为Phenomenex C_l8(250 mm×4.6 mm,5 μm),甲醇-乙腈-1%冰醋酸(5:5:90)为流动相,检测波长为325 nm,柱温35 ℃.结果 绿原酸、咖啡酸和p-香豆酰葡萄糖分别在0.368～2.760、0.064～0.480、0.102～0.765 μg内呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为101.48%、99.56%、101.73%,RSD分别为1.44%、0.92%、1.62%.结论 该方法操作简便、准确、重复性好,可用于金沙藤及其提取物的质量控制.]]> 2015/1/19 10:41:45 1273true 目的 对青藏高原不同产地大花红景天Rhodiola crenulata中没食子酸、红景天苷、酪醇、儿茶素、没食子酸乙酯、对香豆酸进行分析研究,建立定量分析方法,为其进一步利用提供依据.方法 采用30%乙醇提取样品;Diamonsil C₁₈色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);以乙腈-0.3%磷酸溶液为流动相进行梯度洗脱;检测波长275 nm,柱温25 ℃.结果 没食子酸、红景天苷、酪醇、儿茶素、没食子酸乙酯、对香豆酸分别在38.2～382.0 ng/mL(r=0.999 8)、301.0～3 010.0 μg/mL(r=0.999 9)、19.8～198.0 ng/mL(r=0.999 6)、17.1～171.0 ng/mL(r=0.999 6)、4.5～45.0 ng/mL(r=0.999 8)、6.38～63.80 ng/mL(r=0.999 4)呈良好的线性关系,加样回收率均符合定量测定要求.结论 该方法简便,快速,准确,可用于同时对青藏高原大花红景天中6种活性成分的测定.]]> 2015/1/19 10:41:45 1272true 目的 克隆菘蓝中肉桂酸-4-羟基化酶(C4H)基因,并进行生物信息学和表达分析.方法 采用cDNA末端快速扩增(RACE)技术克隆C4H基因全长cDNA序列,进而获得其基因组DNA序列.通过RT-PCR法检测C4H蛋白在不同器官中及受到相应刺激因素下的表达情况.结果 菘蓝C4H基因全长cDNA为1 674 bp(GenBank登录号:GU014562),包含一个1 530 bp的开放阅读框(ORF),编码509个氨基酸残基.对应的基因组分析表明,C4H基因含2个内含子,3个外显子.在根、茎、叶各器官中均有表达,其中根中最多.胁迫因素紫外照射(UV-B)、茉莉酸甲酯(MeJA)、脱落酸(ABA)和赤霉素(GA₃)在一定程度上能够诱导C4H的表达上调.结论 首次从菘蓝植物中克隆得到C4H基因的cDNA全长序列,并证实其在根中表达量最高,且在胁迫因素下表达量上调,为进一步研究菘蓝中抗病毒活性成分木质素类成分的次生代谢工程奠定基础.]]> 2015/1/4 15:13:04 1271true 目的 通过克隆鱼腥草乙酰辅酶A酰基转移酶(acetyl-CoA C-acetyltransferase,AACT)基因cDNA全长,并展开生物信息学分析和表达分析,为解析鱼腥草萜类次生代谢产物的生物合成机制奠定基础.方法 采用RT-PCR方法获得AACT基因cDNA序列并进行生物信息学分析;利用实时荧光定量PCR方法检测了AACT基因在鱼腥草的地下茎、地上茎、叶、花中的表达情况.结果 克隆获得的AACT基因cDNA全长为1 218 bp,编码405个氨基酸.生物信息学预测AACT蛋白不含跨膜区,不含信号肽.AACT基因在鱼腥草地上茎中的表达量最高,达到1.49,其次是地下茎0.96,花和叶中的表达量相对较低,分别为0.20和0.10.结论 首次从鱼腥草中克隆了AACT基因,为进一步阐明该基因在鱼腥草萜类化合物代谢途径中的重要作用奠定基础.]]> 2015/1/4 15:13:04 1270true 目的 对25个薏苡种质资源进行序列相关扩增多态性(SRAP)分子标记研究.方法 采用改良CTAB法提取的薏苡叶片基因组DNA为模板,利用优化的SRAP-PCR反应体系,从88对引物中筛选出6对理想的引物组合,对25个薏苡种质资源进行SRAP-PCR扩增.结果 获得66条清晰可重复的多态性条带,多态率达93%,根据SRAP扩增结果,运用NTSYPC2.1分析软件计算各品种间的遗传相似系数,结果表明这些材料间的遗传相似系数在0.48～0.82.结论 聚类结果发现,25个薏苡居群可分为4个类群.]]> 2015/1/4 15:13:04 1269true 目的 筛选一种可准确、高效鉴别千斤拔属Flemingia Roxb. ex Ait. et Ait. f. 药用植物的DNA条形码序列.方法 对4种14份千斤拔属药用植物的ITS2、rbcL、psbA-trnH序列进行扩增和测序,同时查找NCBI数据库中千斤拔属植物的相应序列,共计7种20份,比较不同序列的扩增效率及测序成功率,并对其进行种内、种间变异分析,barcoding gap检验及NJ聚类图分析,以评估不同序列对千斤拔属植物的物种鉴别能力.结果 测序成功率方面,ITS2与rbcL序列对所分析样品的测序成功率为100%,psbA-trnH的测序成功率为85.71%;3条序列中,只有ITS2在barcoding gap检验中具有显著gap;从NJ聚类图来看,ITS2可明显区分千斤拔属植物的不同物种(除F. philippinensis与F. stricta外).结论 ITS2序列能准确鉴别千斤拔属药用植物,可作为千斤拔药材基原植物鉴定的条形码序列.]]> 2015/1/4 15:13:04 1268true 目的 建立HPLC-MS/MS法同时测定酸枣仁中酸枣仁皂苷A、酸枣仁皂苷B、斯皮诺素、白桦脂酸、白桦脂醇、芦丁、芹菜素、橙皮苷、柚皮苷的量.方法 采用Sapphire C₁₈柱(150 mm×4.6 mm,5 μm),以水(1 mmol/L乙酸铵-0.1%的甲酸)-乙腈溶液为流动相进行梯度洗脱,体积流量1 mL/min,进样量10 μL,柱温30 ℃;采用电喷雾离子源进行负离子模式监测,多反应监测模式(MRM)用于定量分析,源喷射电压为-4 500 V,离子源温度为650 ℃.结果 9种成分的峰面积和质量浓度在测定质量浓度范围内均具有良好的线性关系,加样回收率为98.04%～101.5%,精密度RSD值为0.03%～0.74%.结论 本法简便、快速、灵敏度高、专属性好,可用于酸枣仁中9种化学成分的测定.]]> 2015/1/4 15:13:04 1267true 目的 从穿心莲中克隆穿心莲内酯合成途径中的香叶基香叶基焦磷酸合成酶(geranylgeranyl diphosphate synthase,GGPS)基因,并进行组织表达等特征研究。方法 采用CTAB-LiCl法从穿心莲茎和叶中提取总RNA,简并引物扩增获得保守区段,RACE法获得基因全长,ProtParam等软件分析基因特征,实时荧光PCR法检测不同发育时期穿心莲茎和叶中基因的表达。结果 获得了一个长1 047 bp的GGPS基因,编码一条由348个氨基酸组成的蛋白质序列,与长春花的GGPS蛋白亲缘关系较近,N端含有一个由47个氨基酸构成的质体信号肽。在穿心莲的茎和叶中,GGPS基因在花蕾期表达量较高,初花期降低;到了花果混合期表达量升高,青果期下降。表明穿心莲花蕾期和花果混合期相关代谢成分的合成可能更活跃。结论 从穿心莲中克隆了GGPS基因,为开展穿心莲内酯合成途径的调控奠定了基础。]]> 2015/12/22 8:42:09 1266true 目的 在厚朴转录组测序基础上,对厚朴1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸合成酶(DXS)基因DXS1(MoDXS1)和厚朴DXS2(MoDXS2)基因进行全面的生物信息学分析。方法 利用生物信息学方法对厚朴MoDXS1和MoDXS2基因编码氨基酸序列的理化特性、亲/疏水性、功能域、二级结构、三级结构和系统发育进化等进行分析和预测;采用实时荧光定量PCR分析厚朴MoDXS1和MoDXS2基因的相对表达量。结果 MoDXS1和MoDXS2均为不稳定的亲水蛋白,蛋白结构域分析显示MoDXS1、MoDXS2与其他植物的DXS基因有很高的同源性;二级结构均为混合型结构的蛋白质,α-螺旋是所有基因多肽链中大量的结构元件,利用同源建模法对三级空间结构进行了预测;同源序列对比显示MoDXS家族与烟草、丹参和拟南芥的DXS蛋白具有较高的同源性;系统进化树分析表明MoDXS1与其他被子植物亲缘关系较近,但MoDXS2单独聚为一支;实时荧光定量PCR结果显示DXS1在厚朴与凹叶厚朴间无显著差异,但DXS2在凹叶厚朴中的表达量要明显高于厚朴;GC-MS检测结果表明,3种指标性成分β-石竹烯、β-氧化石竹烯和β-桉叶油醇在凹叶厚朴皮或叶中的量均高于厚朴。结论 本研究结果为解析厚朴萜类次生代谢调控机制奠定了理论基础。]]> 2015/12/22 8:42:09 1265true 目的 分离红花天冬氨酸代谢途径关键酶天冬氨酸激酶(AK)基因的全长cDNA序列,进行植物超表达载体构建。方法 根据红花种子转录组文库注释和qRT-PCR鉴定的AK基因核心片段及表达分析数据,采用RACE技术获得红花AK(CtAK)基因的全长cDNA,利用DNA重组技术构建植物超表达载体。结果 生物信息学分析表明,CtAK基因全长1 703 bp,ORF区为1 626 bp,编码541个氨基酸残基,功能结构域分析推测,该基因可能为单功能反馈抑制敏感植物AK1。通过DNA重组技术成功构建以35 S为启动子和Bar抗性基因并含有叶绿体转运肽的pCAMBIA3301-CTP-AK1植物超表达载体。结论 获得CtAK1基因的编码序列并构建植物超表达载体,为进一步研究其生物学功能及其在红花氨基酸代谢调控中的作用机制奠定基础。]]> 2015/12/22 8:42:09 1264true 目的 研究不同等级老鸦瓣光合特性及生长繁殖特点,为其繁殖方案制定及高产栽培提供依据。方法 根据种球质量设4个级别处理,即1级(质量>2.0 g)、2级(质量为1.0～2.0 g)、3级(质量为0.5～1.0 g)和4级(质量<0.5 g),于生长旺期测量各处理老鸦瓣生长指标,统计各处理开花和结实率,同时采用LI-6400XT型便携式光合仪测量叶片光合基本参数,并于收获期统计各处理的产量、繁殖系数及质量增幅。结果 随着种球质量增加,老鸦瓣各项生长指标均呈现上升趋势。3级和4级种球比1级和2级种球具有较高光合效率,增产效果明显,质量增幅分别达286.37%、118.56%。种球大于1.0 g时具有较高的开花率和结果率。结论 3级和4级种球增产效果明显,作繁殖种球最佳,供生产商品鳞茎;1级和2级种球可用于种子生产。]]> 2015/12/22 8:42:09 1263true 目的 研究羊开口扦插繁殖的最佳条件。方法 通过4因素3水平正交试验,以生根率、生根数、平均根长和生根指数为指标,研究不同浸泡时间、插穗、激素种类、激素浓度对羊开口扦插生根的影响。在此基础上通过双因素和单因素试验基本摸清羊开口扦插的特性。结果 插穗对羊开口成活率影响最大。当浸泡时间为18 h、嫩枝、激素种类为IBA、处理浓度为0.1 mmol/L时,羊开口扦插的生根效果最好。结论 根据羊开口扦插试验最优组合,可进行羊开口规模化生产,为企业原药材繁育提供技术服务。]]> 2015/12/22 8:42:10 1262true 目的 研究甘肃不同产区栽培当归的遗传多样性。方法 应用ISSR分子标记技术对甘肃省41个居群的栽培当归样本进行分析,利用Popgene 32软件分析Nei's基因多样性指数(H)等遗传信息参数,应用Ntsys软件构建亲缘关系UPGMA聚类图。结果 8条引物共检测到154个位点,其中多态性位点119个,多态位点百分率(PPB)为77.27%。栽培当归居群间的H为0.222 9,Shannon's多样性信息指数(I)为0.337 4,种群间基因分化系数(G_st)为0.683 9,基因流(N_m)为0.231 1,遗传距离变化范围0.042 9～0.327 8。结论 甘肃栽培当归遗传多样性在物种水平上较高;居群间遗传多样性水平明显高于居群内;居群间遗传分化程度大,且基本无基因交流。]]> 2015/12/3 19:12:03 1261true 目的 分析茯苓转录组中简单重复序列(SSR)信息,以及含SSR的基因功能,为开发茯苓新型分子标记奠定基础。方法 利用MISA软件搜索转录组Unigene及基因组scaffold中SSR,对含SSR的Unigene使用BlastX比对nr及KEGG数据库,注释其功能,并聚类分析。结果 在转录组序列中发现4.57%的Unigene序列含有2 075个SSR,平均17 010条Unigene出现1个SSR,SSR的平均长度19.59 bp;而基因组中SSR的平均密度54.00个/Mb,平均长度20.74 bp。在转录组中发现的241种碱基重复模式中,以 (CG/CG)_n比例最高(10.97%);以六核苷酸类重复数量最多(35.64%),以 (ACCACG/CGTGGT)₁₄最长(84 bp)。在1 887条含SSR的Unigene中,115条能被基因本体(GO)分类注释到细胞代谢进程、核酸结合等;1 223条Unigene能被注释到219个KEGG通路图中,其中314条注释到新陈代谢,297条注释到遗传信息处理。结论 茯苓转录组SSR的类型丰富、多态性潜能较高,关联功能相关基因的SSR开发对茯苓目的性状的分子标记辅助育种具有巨大潜力。]]> 2015/12/3 19:12:03 1260true 目的 建立白芍UPLC指纹图谱测定方法,对不同产地白芍的质量进行较全面的评价。方法 色谱柱ACQUITY UPLC^® HSS T3(100 mm×2.1 mm,1.8 μm),以乙腈-0.05%磷酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,检测波长230 nm,柱温30 ℃,体积流量0.4 mL/min。采用相似度评价、聚类分析、主成分分析3种方法对23批白芍饮片指纹图谱进行研究。结果 建立了白芍饮片的专属性UPLC指纹图谱,确定了8个共有峰;23批白芍样品质量差异较大,不同产地间和同一产地内样品均具有一定差异。结论 该方法简便、易行,为白芍饮片的质量控制提供了较为有效的快速评价方法。]]> 2015/12/3 19:12:03 1259true 目的 对福建金线莲Anoectochilus roxburghii、台湾金线莲A. formosanus和滇越金线莲A. chapaensis进行生药学鉴别。方法 采用徒手切片、显微观察和数码照相方法,比较分析不同植物基原金线莲的植物形态特征、根、茎、叶的横切面组织构造及其组织特征,金线莲干燥药材粉末特征。结果 福建金线莲和台湾金线莲较滇越金线莲植株小,三者叶脉颜色分别为金黄色、银白色和淡红色,是外观鉴别的依据之一;滇越金线莲根木质部束数量较多,且髓部宽广,茎外韧型维管束数量较多;上表皮细胞形状、中脉上下表面形状与细胞色素分布特点是叶横切面的鉴别点;台湾金线莲上表皮细胞形状为类三角形,其他2种植物为类椭圆形;滇越金线莲中脉上表面较平整,其他2种植物微凹;福建金线莲中脉下表面呈半圆形凸出,其他2种植物微凸,福建金线莲红色物质稀少且位于上表面,台湾金线莲红色物质较多且散在,滇越金线莲有红色物质位于上表皮且集中排一列。结论 不同植物基原金线莲植物形态和显微存在差异,为建立金线莲质量标准提供依据。]]> 2015/12/3 19:12:04 1258true 目的 建立同时测定蒲公英中菊苣酸、咖啡酸和绿原酸的HPLC方法。方法 色谱柱为Phenomenex Luna C₁₈柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液,梯度洗脱,体积流量为1.0 mL/min,检测波长为325 nm,柱温为40 ℃。结果 菊苣酸、咖啡酸、绿原酸在0.24～24.00、0.092～9.200、0.14～14.00 μg/mL线性关系良好,平均回收率分别为100.07%、99.88%、101.67%,RSD均小于2.0%。结论 该方法分离度好,专属性强,重复性好,简便易行,可用于蒲公英中菊苣酸、咖啡酸和绿原酸的测定。]]> 2015/12/3 19:12:04 1257true 目的 对245份不同产地羌活Notopterygium incisum样品的遗传多样性和遗传结构进行研究。方法 采用叶绿体cpDNA trnT-trnL直接测序的方法和邻接法(NJ)对245份羌活样品进行遗传多样性和遗传结构分析。结果 物种水平上单倍型多样性(Hd)指数为0.873,核苷酸多样性(Pi)指数为0.004 07;种群水平上Hd介于0～0.900,Pi指数介于0～0.054 4,与同属的宽叶羌活Notopterygium franchetii相比,遗传多样性水平居中;分子方差分析表明,羌活大部分遗传变异(77.55%)发生在居群间,居群间的基因流(N_m＝0.145)较低,群体间变异是羌活的主要变异来源;NJ树表明,受试的31个野生种群可分为2大类群。结论 羌活的遗传多样性处于中等水平,居群间遗传分化较大。]]> 2015/11/20 16:54:26 1256true 目的 克隆药用真菌猪苓Polyporus umbellatus凋亡抑制因子基因BI-1并进行生物信息学和表达模式分析。方法 利用5'-RACE PCR方法获取基因cDNA全长;利用生物信息学软件预测蛋白的理化性质、结构域和跨膜结构等分子特性;采用Bioeditor以及MEGA 6.0分别进行氨基酸多序列比对和进化关系分析;实时荧光定量PCR分析基因表达模式。结果 猪苓细胞凋亡抑制因子BI-1(Genebank登录号JQ693683)的cDNA全长为1 091 bp,其中编码区占1 005 bp,编码334个氨基酸,推测相对分子质量为36 170,理论等电点为10.51,定名为PuBI-1。整个多肽链具5个疏水区,表现为疏水性,是疏水性蛋白。系统进化树结果显示PuBI-1所在分支隶属于担子菌群,与裂褶菌形成一单系。PuBI-1基因转录本在初始期和生长期表达量在菌核组织中显著高于未形成菌核的菌丝组织,分别为原基期菌核(SI)为3.8倍、发育期菌核(SD)为7.497倍,成熟期菌核和菌丝中的PuBI-1基因的表达量几乎无差异。结论 猪苓凋亡抑制因子基因BI-1的分子特征及表达模式为进一步研究其在猪苓菌丝形成菌核过程中的作用奠定理论基础。]]> 2015/11/20 16:54:26 1255true 目的 以分离纯化的42株野生大豆内生真菌为材料,分析内生真菌菌丝及发酵液中次生代谢产物的积累,筛选高产次生代谢产物内生菌株。方法 采用液体发酵摇瓶培养法及紫外分光光度法对不同内生真菌菌丝及发酵液中的总三萜、黄酮、多糖、多酚与总酚的量进行检测。结果 42株野生大豆内生真菌菌丝中,筛选获得高质量分数多糖菌株为Y2S9、WDL3和WDL2,质量分数最高可达85.51 mg/g;高质量分数黄酮菌株为Y1S9和Y6S8,质量分数分别为2.99和2.24 mg/g;高质量分数三萜菌株为Y6S8、Y2R1、Y6R2,质量分数分别为25.55、17.89、15.96 mg/g;而WDS7总酚量最高,为22.65 mg/g。内生真菌发酵液中,黄酮量较高菌株为Y1S8和SYS4,其质量浓度分别为3.11和4.81 mg/L;总三萜质量浓度较高的菌株为YSYL2、Y1S8、WDL3,质量浓度分别为17.46、35.00、42.98 mg/L。结论 不同生境可能是导致次生代谢产物量差异的主要原因,本研究筛选出高产次生代谢产物野生大豆内生真菌菌株11株,为野生大豆内生真菌功能挖掘及新药筛选奠定了基础。]]> 2015/11/20 16:54:26 1254true 目的 以甘肃不同产区栽培红芪药材及其生长土壤为研究对象,探讨土壤营养成分全氮、全磷、全钾、有机质、速效磷、速效钾与红芪中毛蕊异黄酮、芒柄花素量的相关性。方法 采用Duncan多重比较、相关性分析及回归分析对土壤营养成分量及红芪活性成分量进行分析。结果 毛蕊异黄酮与土壤中全氮、全钾存在显著正相关性,与有机质、速效磷呈正相关,与速效钾、全磷呈负相关;芒柄花素与土壤中全钾存在极显著正相关性,与全氮、速效磷呈正相关,与速效钾、有机质、全磷呈负相关。结论 红芪对土壤中不同营养成分具有选择性,全钾、全氮、速效磷量高的土壤适合于红芪中毛蕊异黄酮与芒柄花素成分的累积,说明全钾、全氮、速效磷较高的土壤有利于红芪药材的生长。]]> 2015/11/20 16:54:26 1253true 目的 对丹参地上茎叶、花序中7种丹酚酸类化学成分进行分析与评价,并探讨其在丹参植物生长过程中的动态积累规律,以期挖掘丹参地上部分的资源化利用价值与产业化开发前景。方法 采用UPLC-TQ/MS联用技术,以Acquity UPLC BEH C₁₈为色谱柱;乙腈-0.1%甲酸水为流动相,梯度洗脱,体积流量为0.4 mL/min,柱温35 ℃,质谱采用正、负离子模式电离,多反应检测(MRM)方式,对7种丹参酚酸类化学成分进行分析与检测。结果 丹参茎叶中含有丰富的水溶性丹酚酸类化学成分,但未检测到脂溶性的丹参酮类成分;不同生长期丹参茎叶中酚酸类化学成分的量差异较大,除丹酚酸A外,各酚酸类成分量均在7～8月积累量达到最高值,以后逐渐降低。丹参花序中的丹参酚酸类成分总量在花盛期达到峰值,其在达到花盛期前动态变化趋势不明显,但当花冠进入凋萎期时,丹酚酸类成分量急剧下降。结论 丹参非传统药用部位茎叶及花序中含有丰富的水溶性丹酚酸类资源性化学成分,尤其是迷迭香酸和丹酚酸B量较高,生长茂盛期其酚酸类成分的总量明显高于丹参根及根茎中的量。因此,丹参茎叶、花序可作为获取丹酚酸类化学物质的重要原料资源。]]> 2015/11/20 16:54:27 1252true 目的 在对长柄石杉Huperzia serrata、闽浙马尾杉Phlegariurus minchegensis、华南马尾杉Phlegariurus austrosinicus和有柄马尾杉Phlegariurus petiolatus 4种石杉科植物的L-赖氨酸脱羧酶(L-lysine decarboxylase,LDC)基因编码区进行克隆的基础上,对长柄石杉的LDC基因全长序列进行分析并预测其蛋白结构.方法 采用RT-PCR技术,以石杉科植物叶片提取的总RNA为模板克隆得到LDC基因编码区序列,通过BLAST比对和MEGA5.0软件对克隆的序列进行分析.采用RACE技术获得石杉科广布种长柄石杉的LDC基因全长序列,并对其蛋白的二级结构及三维结构进行预测分析.结果 克隆的4种石杉科植物LDC基因序列与数据库中被注释为编码LDC的基因序列保持高度的相似性,长柄石杉LDC蛋白与NCBI中的蛇足石杉LDC氨基酸序列相似度很高,与蕨类植物江南卷柏的同源性也较高.长柄石杉LDC基因编码区全长为1 266 bp,编码403个氨基酸,GenBank登录号KF040056.结论 克隆得到4种石杉科植物的LDC基因,分析了长柄石杉LDC基因的全长序列并预测其蛋白结构,为进一步阐明石杉科植物石杉碱甲生物合成途径奠定基础.]]> 2015/11/3 12:47:49 1251true 目的 为探寻药用植物灯盏花Erigeron breviscapus的遗传背景,利用低氮胁迫的灯盏花全植株构建了转录组文库,并利用新一代测序技术进行测序.方法 采用改良异硫氰酸胍-CTAB法,提取低氮胁迫灯盏花植株及其对照植株的总RNA,经富集mRNA、打断、构建测序用cDNA文库.结果 通过测序,低氮和正常样本分别获得3 587万条和2 582万条测序读长(raw reads),总数据量超过6 G,碱基错误率低于1%(Q20)的数据分别为98.37%和98.67%.经de novo组装,总共得到101、156条Unigene,平均读长768 bp,N50为1 290 bp,其中44.39%长度超过500 bp.101、156条Unigene中,58.86%在公共数据库中比对到相似序列,89.08% Unigene在Nr数据库比对到相似序列.得到灯盏花黄酮类合成途径中包括苯丙氨酸解氨酶(PAL)、肉桂酰-4-羟化酶(C4H)、查耳酮合成酶(CHS)、查耳酮异构酶(CHI)、黄烷酮3-羟化酶(F3H)、类黄酮3'-羟化酶(F3'H)、花色素还原酶(ANS)等序列.结论 灯盏花的转录组信息得到较好的保存,为下一步灯盏花遗传环境互作研究及分子辅助育种奠定基础.]]> 2015/11/3 12:47:49 1250true 目的 检测内生拮抗菌JYg07在五味子Schisandra chinensis植株内的定殖情况.方法 利用抗生素标记法获得JYg07菌株的抗链霉素和利福平的双抗突变体菌株,采用灌根、喷雾、注射和刺伤叶片等方法接种,测定JYg07菌株在五味子植株内的定殖情况.结果 JYg07菌株可以通过自然孔口和伤口进入五味子体内,并能够在土壤中长期存活;菌液浓度主要影响定殖高峰到来的时间;4种接种方式均可以使JYg07菌株在五味子体内稳定的定殖并传导,并且在根中的定殖能力要高于茎和叶.高浓度接种培养液、灌根接种的方式可以保证JYg07菌株在五味子植株中达到最佳定殖状态.结论 JYg07菌株可以在五味子体内稳定定殖并传导,能够作为新的生防菌资源开发利用.]]> 2015/11/3 12:47:49 1249true 目的 建立塔里木盆地17个引进红枣品种高效液相色谱指纹图谱方法,为红枣品质的科学评价和产品的质量控制提供科学依据.方法 采用HPLC法,色谱柱TOSOH TSKgel ODS-100V C₁₈柱(150 mm×4.6 mm,3 μm),流动相为甲醇-0.3%磷酸二氢钾缓冲水溶液,梯度洗脱,体积流量1.0 mL/min,柱温40 ℃,检测波长260 nm.对采自塔里木大学种质资源圃中17个引进品种的红枣进行指纹图谱研究,用药典委员会颁布的中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004A进行评价.结果 建立了红枣的指纹图谱,标定了22个共有峰,各峰分离度良好,并对尿嘧啶、次黄嘌呤、腺嘌呤、胞苷、尿苷、环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(cGMP)进行测定.结论 HPLC指纹图谱分析技术可用于红枣的鉴别.]]> 2015/11/3 12:47:49 1248true 目的 建立超高效液相色谱三重四级杆串联质谱法(UPLC-MS/MS)同时测定浮萍中9种核苷类成分的方法,分析比较不同产地样品中9种成分的差异.方法 采用Waters Xbridge^TM Amide色谱柱(150 mm×4.6 mm,3.5 μm);以0.1%甲酸的水(A)-0.1%甲酸的乙腈(B)溶液为流动相,梯度洗脱,体积流量为0.5 mL/min;柱温30 ℃,采用电喷雾离子源,正离子检测方式,得到相应的提取离子流图,以峰面积进行定量,用主成分分析和聚类分析方法进行综合评价.结果 9种核苷类成分具有良好的线性关系,r值均大于0.998 9,方法精密度、重复性和稳定性的RSD值均小于3.5%,加样回收率在94.4%～101.9%,RSD在1.73%～3.58%.不同产地浮萍药材中9种核苷在组成和量上均有差异,其中2'-脱氧尿苷、2'-脱氧肌苷在13个产地样品中量均较低,以胞嘧啶最低;尿苷、肌苷、黄嘌呤量较高;13个产地中安徽黄山浮萍中9种核苷总量最高.结论 该方法操作简便、准确、重复性好,可为浮萍药材的质量标准制定提供依据.]]> 2015/11/3 12:47:49 1247true 目的 克隆红花种子中的天冬氨酸激酶(aspartokinase,AK)基因并研究其在种子不同发育时期的表达量。方法 根据红花转录组文库注释信息筛选与红花天冬氨酸激酶(CtAK)基因相关的Unigenes,设计引物,以红花种子总RNA为模板,采用RT-PCR的方法扩增CtAK基因片段并连接到克隆载体上,经PCR及酶切鉴定,筛选阳性克隆进行测序。同时利用荧光定量PCR技术对其进行基因表达量的分析。结果 克隆了红花CtAK基因的核心片段,分离到486 bp的基因序列。根据CtAK基因片段设计引物,对不同品种不同发育时期红花种子进行荧光定量PCR分析,CtAK基因在红花品种川红1号初花后13 d表达量最高。结论 系统发育树分析表明,该基因与其他物种的AK基因具有较高的同源性。]]> 2015/10/24 11:08:11 1246true 目的 法呢基焦磷酸合酶(farnesyl pyrophosphate synthase,FPS)是调控黄芪甲苷生物合成途径关键酶,为该基因外源表达选择合适的宿主,进而为提高黄芪甲苷产量提供理论依据。方法 以长白山膜荚黄芪为植物材料,克隆了FPS基因的编码序列。运用EMBOSS及Codon W等在线软件分析了FPS基因的密码子偏好性,并将其与玉米、青蒿等7种植物FPS基因及大肠杆菌基因组密码子偏好性进行比较。结果 膜荚黄芪FPS基因偏好于以A或T碱基结尾的密码子,与大肠杆菌Escherichia coli基因组共有22个密码子存在差异。结论 进一步提高膜荚黄芪FPS基因在大肠杆菌中的表达水平,需对其密码子进行优化。]]> 2015/10/24 11:08:11 1245true 目的 为更好了解药用黄芪微小RNA(miRNA)被机体摄入和吸收的情况,试图建立黄芪miRNA谱,为今后黄芪饮片药理学研究奠定基础。方法 以经干燥、高温和微波处理的黄芪煎煮液为样本,采用高通量深度测序方法以获取未知的miRNA序列。结果 经测序得到药用黄芪9 931 049个小RNA读数。经与miRBase 21数据库所有植物种类潜在发卡型结构比对,分析和构建了黄芪饮片煎煮液miRNA谱,并确定了1个保守的miRNA和9个新发现的miRNA。经进一步生物学信息分析,发现12种I类小干扰性RNA(small interfering RNAs,siRNAs)序列,其5'端对热力学不稳定,3'端种子区域对热力学高度稳定。结论 首次揭示了经热力学处理后黄芪饮片的miRNA谱,I类siRNAs是潜在的可利用的植物药的生物化学分子,有助于今后中药在表观遗传学方面的深入研究。]]> 2015/10/24 11:08:11 1244true 目的 以马尿泡Przewalskia tangutica种子无菌苗带腋芽茎段为材料,建立了马尿泡的茎段快速繁殖体系。方法 在无菌条件下,将生长30 d左右的马尿泡种子无菌苗剪成2～3 cm长的带腋芽的茎段接种在不同的芽增殖培养基和生根培养基上,筛选出最适合芽增殖培养基和生根培养基,并利用HPLC法测定组培苗不同部位和愈伤组织的4种托烷类生物碱的量。结果 筛选出最适合芽增殖培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L,诱导率最高为96.67%,最适合不定芽生根培养基为MS+NAA 0.5 mg/L,根的诱导率最高,为71.67%。利用HPLC法测定试管苗不同部位4种生物碱量的结果表明,根中总生物碱量最高,高达141.25 μg/g。愈伤组织中总生物碱的量低于根、茎、叶中总生物碱的量。结论 马尿泡组培苗不同部位总生物碱的量和不同种类生物碱占总生物碱的比例不同,表明器官建成或脱分化过程可能影响马尿泡组培苗植株体内生物碱的合成和积累。]]> 2015/10/24 11:08:11 1243true 目的 比较川麦冬与杭麦冬中3种高异黄酮类活性成分的质量分数差异及麦冬水提物的抗氧化能力的差异。方法 采用超高效液相色谱与二极管阵列检测器技术,测定3种高异黄酮类活性成分。色谱柱为ACQUITY^TM UPLC BEH C₁₈色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7 μm),流动相为乙腈-0.2%甲酸水(55:45),体积流量0.2 mL/min,检测波长296 nm。采用紫外分光光度法测定麦冬水提物清除DPPH自由基的活性。结果 川麦冬中甲基麦冬高异黄酮A、甲基麦冬黄烷酮A与甲基麦冬黄烷酮B的平均质量分数分别为(3.06±0.54)、(40.10±5.63)、(29.51±5.06)μg/g;杭麦冬中3种成分平均质量分数分别为(9.22±3.52)、(106.63±27.56)、(256.97±61.79)μg/g。川麦冬水提物清除自由基的IC₅₀平均值为16.59 mg/mL,杭麦冬的IC₅₀平均值为14.48 mg/mL,阳性对照VC的IC₅₀值为7.06 μg/mL。结论 与川麦冬比较,杭麦冬中高异黄酮类成分的量较高,其水提取物对DPPH自由基的清除作用也较强,说明杭麦冬具有较强的抗氧化活性,为麦冬的质量评价及其道地性研究提供依据。]]> 2015/10/24 11:08:12 1242true 目的 采用近红外光谱技术(NIRS)建立广陈皮的定性分析模型,以建立快速鉴别广陈皮药材的方法。方法 采集广陈皮与川陈皮的NIRS图,通过标准正交变量变换(SNV)预处理后采用聚类分析方法建立广陈皮与川陈皮鉴别模型,并进行模型内验证和模型外验证,建立了广陈皮定性分析模型。结果 在4 000～10 000 cm^-1广陈皮和川陈皮能够较好地区分,内部验证的准确率高达100%,外部验证准确率达到90.91%。结论 采用近红外光谱技术对广陈皮样品进行鉴别是可行的。]]> 2015/10/24 11:08:12 1241true 目的 克隆地黄中介体亚基基因RgMed6,分析其编码的蛋白序列特征和基因表达特性。方法 利用地黄转录组数据库进行同源比对,获得拟南芥Med6的同源基因片段,通过序列拼接获得RgMed6的全长开放阅读框(ORF),在NCBI上进行BLASTp获得RgMed6的同源蛋白,用MAFFT进行多序列联配,应用MEGA 6.0构建系统进化树,以实时荧光定量PCR技术检测RgMed6在地黄不同组织以及逆境胁迫下的相对表达量。结果 获得1条924 bp的cDNA序列,包含1个771bp的完整ORF,编码256个氨基酸,具有Med6蛋白的典型结构域和1个潜在的核定位信号序列。RgMed6在检测的5个地黄组织(器官)中均有表达,其中在地黄叶片里表达强度最大,其次为花蕾,在茎中表达量最低。在连作地黄块根中RgMed6的表达量降低,NaCl胁迫处理下RgMed6的表达量升高。结论 首次克隆了地黄中介体亚基基因RgMed6,为阐明其在地黄生长发育和逆境胁迫中的分子功能奠定基础。]]> 2015/10/16 18:06:30 1240true 目的 以华重楼Paris polyphylla var. chinensis根茎为外植体,建立华重楼植物的快速繁殖技术。方法 以MS为基本培养基,通过研究激素6-BA、2,4-D、NAA、IBA、KT、IAA和头孢曲松钠、活性炭等对愈伤组织诱导、不定芽分化和不定根产生的影响,找出组培苗诱导培养的最佳培养基配方。结果 华重楼最佳愈伤组织诱导培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 1.5mg/L+2,4-D 3.0 mg/L;最佳不定芽分化培养基为MS+6-BA 3.0 mg/L+IAA 0.3 mg/L+KT 1.0 mg/L+头孢曲松钠300 mg/L;最佳生根培养基为1/2 MS+IBA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L+活性炭0.5%。当组培苗长出第1片叶且不定根长出4条以上时将组培苗取出,先放在无菌水中栽培5 d,再移栽至松软土壤中,组培苗生长健壮,成活率为100%。结论 在获得愈伤组织的基础上,进一步完成对不定芽的诱导与无根苗生根培养,筛选出了培育华重楼组培苗的最佳条件。]]> 2015/10/16 18:06:30 1239true 目的 研究北沙参内生真菌的抗菌活性,鉴定活性真菌的分类地位。方法 采用植物组织分离法从北沙参基原植物珊瑚菜Glehnia littoralis中分离内生真菌。以大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和白色假丝酵母为指示菌株,采用牛津杯法研究北沙参内生真菌的抑菌活性,对具有抑菌活性的内生真菌进行分子鉴定。结果 有4株内生真菌对大肠杆菌具有抑制作用,内生真菌发酵浓缩液抑菌圈直径与4 U/mL硫酸庆大霉素抑菌圈直径的比值(d/D)最大可达1.07;有15株内生真菌对金黄色葡萄球菌具有抑制作用,d/D值最大为0.65;有3株内生真菌对白色假丝酵母具有抑制作用,内生真菌发酵浓缩液与0.2 mg/mL氟康唑的d/D值最大可达1.27。19株具有抑菌活性的内生真菌归于4个目,5个科,7个属,8个种。结论 北沙参植物中存在多种抑菌活性的内生真菌,对于北沙参内生真菌资源的开发及药材道地性的评价具有一定的指导意义。]]> 2015/10/16 18:06:30 1238true 目的 筛选适合人参Panax ginseng花和西洋参Panax quinquefolius花采收后的加工方法,以14种人参皂苷的质量分数为考察指标,评价不同干燥方法对人参花和西洋参花药材质量的影响。方法 采用HPLC法测定人参皂苷Rg₁、Re、Rb₁、Rc、Rb₂、Rb₃、Rd及其相对应的丙二酰基人参皂苷(m-Rg₁、m-Re、m-Rb₁、m-Rc、m-Rb₂、m-Rb₃和m-Rd)的量。结果 西洋参花中人参皂苷在40℃烘干的条件下质量分数要比红外干燥、微波干燥和冷冻干燥的高,人参花中人参皂苷在40℃烘干的条件下质量分数要比冷冻干燥的高,并且随着烘干温度的升高质量分数都有不同程度降低,丙二酰基人参皂苷m-Re、m-Rg₁、m-Rb₁、m-Rc、m-Rb₂、m-Rb₃、m-Rd的质量分数在高温(>100℃)时明显下降,且丙二酰基人参皂苷的减少量与相应的人参皂苷的变化量并没有明显的对等关系,这14种皂苷的总量也都有下降的趋势。结论 40℃烘干可使人参花和西洋参花中原有人参皂苷量保持在最高水平,而高温处理则可使其转化为其他稀有皂苷。]]> 2015/10/16 18:06:30 1237true 目的 研究并建立黔产辣蓼Polygonum hydropiper药材指纹图谱。方法 采用HPLC法,Hypersil ODS2 C₁₈柱,以乙腈-0.2%磷酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,检测波长为260 nm,柱温25℃,对22批不同产地辣蓼药材及其混淆品进行检测。结果 建立辣蓼药材HPLC指纹图谱共有模式,标定12个共有峰。并对15批不同产地辣蓼药材及其7批混淆品进行了相似度比较。15批辣蓼药材相似度均大于0.95,7批混淆品均小于0.50。结论 辣蓼药材HPLC指纹图谱具有重复性好、特征性强、方法简便等特点,可作为黔产辣蓼药材的识别方法。]]> 2015/10/16 18:06:30 1236true 目的 对参与桑黄三萜合成途径的关键酶鲨烯环氧酶(squalene epoxidase,SE)进行基因全长克隆和生物信息学分析。方法 以桑黄总RNA为模板,采用RT-PCR和RACE技术克隆桑黄SE基因的全长cDNA和DNA序列,并通过ExPASy在线分析等方法对其进行生物信息学分析。结果 序列分析表明,SE基因全长2145 bp,包含6个外显子和5个内含子;所克隆的cDNA全长为1856 bp,包含1个1452 bp的开放阅读框,编码483个氨基酸的蛋白,命名为IbSE1,预测该蛋白的相对分子质量为5.3×10⁴,等电点(pI)为8.41,无信号肽。结论 首次克隆并获得桑黄鲨烯环氧酶基因全长序列,为进一步阐明桑黄三萜代谢途径和改善中药材品质奠定基础。]]> 2015/9/23 16:56:02 1235true 目的 克隆红花维生素E合成相关关键酶2-甲基-6-叶绿基-1,4-苯醌甲基转移酶(MPBQ MT)基因,并进行生物信息学及表达分析,为红花维生素E生物合成及调控机制研究奠定基础。方法 根据红花种子转录组数据库中得到的中间序列,采用RT-PCR和RACE方法从红花种子中克隆MPBQ MT基因序列,通过生物信息学对该基因蛋白的特征进行分析,构建MPBQMT与相关物种MPBQ MT的系统进化树,利用RT-PCR方法分析在红花种子不同发育时期MPBQ MT基因的表达量。结果 MPBQ MT基因全长1392 bp,命名为CtMPBQ MT,具有完整的开放阅读框(ORF),共1038 bp,编码345个氨基酸。生物信息学分析显示,该基因编码的蛋白理论相对分子质量约为38900。保守结构域预测表明,该基因编码的蛋白具有典型的SAM蛋白功能结构域。结合其他物种的MPBQ MT基因构建系统树表明,红花MPBQ MT基因与其他物种氨基酸具有一定的同源性,其中与向日葵和生菜同源性高达89%和86%。实时荧光定量PCR分析表明,MPBQ MT基因在红花开花后50 d的种子中表达量最高。结论 成功地对MPBQ MT基因进行克隆及表达分析,为红花维生素E合成及调控机制研究奠定基础。]]> 2015/9/23 16:56:03 1234true 目的 研究外源蔗糖对盐胁迫甘草Glycyrrhiza uralensis幼苗根系生长的缓解效应。方法 以甘草幼苗为实验材料,测定不同浓度的外源蔗糖处理下对盐胁迫条件下甘草幼苗生长、有效成分量、可溶性糖量、脯氨酸量及酶活性的影响及测定相关指标,数据采用SPSS 19.0软件分析。结果 在盐胁迫条件下,添加一定浓度的外源蔗糖后,甘草幼苗的日相对生长率呈升高趋势;总黄酮量和苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性呈极显著升高,外源蔗糖对盐胁迫下甘草幼苗根系生长的缓解作用在很大程度上与PAL活性的增强所引起的黄酮量的增加有关,外源蔗糖的浓度为10 mmol/L时,PAL的活性达到最大,当外源蔗糖的浓度为15 mmol/L时,PAL的活性又成下降趋势;在施加不同浓度的外源蔗糖后甘草酸量比在盐胁迫条件下高,达到未受盐胁迫时的水平,外源蔗糖的浓度梯度对甘草酸积累的影响不明显。脯氨酸和可溶性糖量的变化呈现出相关性,两者皆在施加15 mmol/L的外源蔗糖时达到对照水平,当外源蔗糖的浓度在此基础上增加时,甘草幼苗体内的可溶性糖和脯氨酸的量又呈现上升趋势。超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)的活性与未经盐胁迫处理的幼苗相比,盐胁迫下幼苗中的SOD及CAT活性均上调,一定浓度的外源蔗糖可降低盐胁迫幼苗中的SOD及CAT活性。结论 外源蔗糖可提高甘草幼苗体内抗氧化酶的活性,从而维持了幼苗体内较低的活性氧水平,降低了细胞受过氧化伤害的程度,提高了甘草幼苗对盐胁迫的耐受性。]]> 2015/9/23 16:56:03 1233true 目的 研究不同质量浓度铅(Pb)胁迫对冬凌草Rabdosia rubescens不同器官抗氧化酶活性和生长的影响,为Pb污染下的冬凌草生长调控提供依据。方法 Pb质量浓度(0、135、270、540 mg/L)、胁迫时间(50 d)分株水培试验,以超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)、生长速率、生物量和Pb质量分数为指标,用分光光度计测定抗氧化酶活性、等离子发射光谱仪测定植株Pb质量分数。结果 不同质量浓度Pb胁迫下,冬凌草叶片和根系中的SOD活性均表现为先升后降,但叶片中的SOD活性各组之间无显著性差异;叶片中的POD活性在135、270 mg/L Pb胁迫下与对照之间无显著差异,但在540 mg/L下则显著提高,而根系的POD活性在各质量浓度Pb胁迫下均显著低于对照,具体表现为先下降后又逐渐回升;叶片CAT活性随Pb质量浓度的增加而显著提高,而根系的CAT活性均随Pb质量浓度的增加而递减。中、低质量浓度Pb胁迫对冬凌草的生长无显著影响,高质量浓度(540 mg/L)Pb处理与对照组相比,生物量和相对生长速率分别降低33.33%和46.59%。结论 Pb胁迫对冬凌草叶部和根部的抗氧化酶系统活性刺激反应有明显差异;经拟合模型预测分析,比对照相对生长速率降低10%的Pb临界质量浓度为301.99 mg/L(P<0.01)。冬凌草对Pb胁迫表现为较强的抗逆性。]]> 2015/9/23 16:56:03 1232true 目的 通过建立洋常春藤及其栽培品种中皂苷类化合物的HPLC-UV指纹图谱,采用聚类分析和主成分分析方法进行统计学分析研究,同时结合标定化合物的测定,以期为常春藤属植物的药用质量评价提供参考。方法 Unitary C₁₈色谱柱(250mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈(A)-0.2%磷酸水溶液(B);二元高压梯度洗脱;检测波长205 nm;体积流量1 mL/min;进样量20μL;柱温25℃。结果 采用"中药色谱指纹图谱相似度评价软件(2004A)"标定了17份常春藤属样品的12个共有指纹峰,计算其相似度在0.715~0.992;通过聚类分析和主成分分析结果初步判断洋常春藤的综合药用质量要优于其他品种。结论 建立的方法能够成功应用于筛选高质量的常春藤原料以及进行洋常春藤及其栽培品种药材的质量评价与控制,同时可为制定洋常春藤及其栽培品种药用质量评价研究提供新的参考依据。]]> 2015/9/23 16:56:03 1231true 目的 从红花Carthamus tinctorius 花瓣中克隆转录因子基因CtMYB1,并进行序列分析和原核表达载体的构建。方法 根据红花转录组测序结果中得到的高表达的Unigene123933序列,利用RT-PCR和RACE技术从红花花瓣中扩增得到CtMYB1基因的全长cDNA序列,并进行生物信息学分析;以CtMYB1基因的全长cDNA序列为模板,PCR扩增得到CtMYB1基因的开放阅读框(ORF)序列,构建原核表达载体pEASY-E1-CtMYB1。转化大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达。结果 成功从红花中克隆1个MYB基因,命名为CtMYB1,GenBank登录号为KJ524853。CtMYB1基因全长893 bp,ORF为750 bp,编码249个氨基酸。同时,成功构建了该基因的原核表达载体。SDS-PAGE结果显示该蛋白的大小约30 000,与预测的蛋白相对分子质量一致。结论 成功克隆了CtMYB1基因,构建了原核表达载体,初步证明该基因在大肠杆菌中成功表达。]]> 2015/9/7 11:25:10 1230true 目的 以浙江台州、福建闽侯和顺昌3个产地的1年生三叶青Tetrastigma hemsleyanum叶片为实验材料,研究不同光照强度对三叶青植株的蒸腾作用与气孔结构的影响。方法 采用扫描电镜技术观察不同品种三叶青叶片的气孔结构与变化,并测定在不同光照强度 [0～2 000 μmol/(m²·s)] 条件下叶片的蒸腾速率、气孔导度、水分利用率、净光合速率,寻找三叶青栽培中最适光照强度。结果 三叶青的气孔仅存在于叶片下表皮,呈环绕类型平行分布。相同温度下加重了光照强度,浙江台州产地和福建闽侯产地三叶青的净光合速率、气孔导度以及蒸腾速率随着光照强度增加表现出先升高后下降趋势。同时,福建顺昌产地三叶青的净光合速率、气孔导度以及蒸腾速率均显示上升趋势。福建闽侯产地三叶青的光饱和点为600 μmol/(m²·s),顺昌产地三叶青的光饱和点为1 900 μmol/(m²·s),水分利用率保持较高状态。结论 产地和外界光照强度都是影响三叶青蒸腾作用的重要因素,有利于三叶青的块根生长,促进植株体内黄酮类化合物积累。]]> 2015/9/7 11:25:10 1229true 目的 通过比较9个不同株系一年生石斛苗(T5、T3、T2、YD-1、W-3、GDYS、TN、W-1和T4)的生长势及有效成分量,筛选具有较高开发利用价值的石斛株系。方法 采用生理学及生药学常规方法测定石斛苗生长情况和有效成分量,并用SPSS 11.5统计分析软件对有效成分的测定值进行系统聚类分析。结果 T4长势最好,T2长势最差,其余株系介于其间;聚类分析将9个株系分为3类:第1类包括GDYS、TN、T5、T4,该类石斛的多数有效成分的量相近且高于其他株系;第2类包括W-3、YD-1、T3,这类石斛的有效成分平均量位于第2位;第3类包括W-1和T2,这2个株系的多数有效成分的量较低。结论 GDYS、TN、T5和T4可作为优良株系进行规模化生产;W-3、YD-1、T3和T2可作为种质资源保存,不宜大规模种植;W-1的生物碱和灰分量较高,可作为专门的提取原料,也可作为回交亲本用于改良优良株系的个别不良性状。]]> 2015/9/7 11:25:11 1228true 目的 对影响黄独Dioscorea bulbifera微型块茎胚性愈伤组织小滴玻璃化法超低温保存的多种因素进行探讨,并从形态学、生理学、DNA量以及光合特性参数和叶绿素荧光参数等方面对其冻后再生苗的遗传稳定性进行检测。方法 采用微型块茎及其胚性愈伤组织进行诱导,小滴玻璃化法超低温保存,通过检测包括总叶绿素量、可溶性蛋白量、可溶性总糖量以及超氧化物歧化酶和过氧化物酶活性等植物生理指标,并采用流式细胞术的方法对遗传稳定性进行考察。结果 最佳的黄独微型块茎胚性愈伤组织超低温保存条件:室温下将黄独微型块茎胚性愈伤组织块转入MS+2 mg/L KT+0.5 mg/L NAA+0.5 mg/L 2,4-D+0.3 mol/L蔗糖的培养基中预培养1 d。预培养后的胚性愈伤组织块在(25±1)℃下转入装载液(MS+2 mol/L甘油+0.4 mol/L蔗糖,pH 5.8)中处理20 min,再用100% PVS2于0 ℃脱水40 min。脱水后将材料转入铝箔条上的PVS2小滴中,液氮冰冻后迅速将材料转入冷冻管中(装满液氮)。投入液氮罐保持1 d后,取出铝箔条,浸入37 ℃洗涤液(MS+2 mg/L KT+0.5 mg/L NAA+0.5 mg/L 2,4-D+1.2 mol/L蔗糖,pH 5.8)中,胚性愈伤组织块脱落后,室温下再用新鲜洗涤液对其洗涤3次,每次10 min。洗涤后的材料接入分化培养基(MS+2 mg/L KT+0.5 mg/L NAA+30 g/L蔗糖+5 g/L琼脂粉)中,暗培养2 d后转到12 h/d的光周期中培养,细胞存活率达89%以上。黄独微型块茎胚性愈伤组织小滴玻璃化法超低温保存后的再生苗与胚性愈伤组织常温再生苗在形态指标和生理指标等方面均无显著性差异(P> 0.05),两者的DNA量也未发生显著变化(P> 0.05)。结论 建立了黄独微型块茎胚性愈伤组织小滴玻璃化法超低温保存的技术体系,其再生植株经检测无遗传变异,为薯蓣属植物种质资源的长期保存提供了理论依据和技术基础。]]> 2015/9/7 11:25:11 1227true 目的 建立HPLC法测定续断中马钱苷酸、马钱苷和当药苷的分析方法,通过对多个产地续断的分析,完善续断药材的质量评价方法。方法 Venusil MP C₁₈色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),0.1% H₃PO₄(A)-乙腈(B)梯度洗脱:0～10 min,8%～9% B;10～30 min,9%～11% B;30～36 min,11%～100% B;体积流量1 mL/min,柱温25 ℃。结果 马钱苷酸、马钱苷和当药苷得到很好分离,并分别在18.4～368.2、2.02～40.4、17.5～349.6 μg/mL内线性关系良好;提取方法的回收率分别为99.34%、99.19%、101.61%。结论 马钱苷酸、当药苷和马钱苷为续断中的主要环烯醚萜苷类成分,同时测定续断中3种环烯醚萜苷类成分的方法简便、快捷。各主产地续断中马钱苷酸、当药苷和马钱苷的范围分别为20.4～186.8、26.4～177.7和1.9～13.2 mg/g,3个成分之和在不同样品之间变化不大,建议作为续断药材质量控制标准。]]> 2015/9/7 11:25:11 1226true 目的 克隆接骨草Sambucus chinensis 3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMGR)基因并分析其差异表达。方法 采用RT-PCR方法获得HMGR基因cDNA序列, 并对HMGR蛋白进行理化性质、蛋白二级结构及三级结构预测分析, 并预测该蛋白功能;利用实时荧光定量PCR方法检测HMGR基因在接骨草的根状茎、地上茎、叶、花中的表达情况。结果 克隆获得的HMGR基因cDNA全长为1 626 bp, 编码593个氨基酸。生物信息学预测HMGR蛋白含2个跨膜区, 不含信号肽。HMGR基因主要在接骨草的花和地上茎中表达较高, 其他器官表达相对较低。结论 首次从接骨草中克隆了HMGR基因, 为进一步阐明该基因在接骨草萜类化合物代谢途径中的重要作用奠定基础。]]> 2015/8/21 14:01:12 1225true 目的 通过测定和分析11种堇菜属药用植物的核糖体DNA内转录间隔区(rDNA ITS)序列, 为该属药用植物的分子鉴定提供依据。方法 利用PCR法克隆ITS序列, 借助生物信息学工具进行序列分析、遗传距离估算和系统发育树构建。结果 11种堇菜属植物的ITS全长为612～638 bp, ITS1与ITS2的长度为251～265 bp和198～211 bp, 5.8 S的长度十分保守, 均为163 bp;ITS1、ITS2与5.8 S的信息位点数分别为50、23和3。11种堇菜属植物的遗传距离为0.025～0.137, 紫花堇菜与七星莲的遗传距离最大, 亲缘关系最远;紫花堇菜和鸡腿堇菜的遗传距离最小, 亲缘关系最近。结论 克隆到堇菜属11种药用植物的ITS序列, 它们的信息位点丰富, 可用于分子鉴定。]]> 2015/8/21 14:01:12 1224true 目的 对不同居群栝楼Trichosanthes kirilowii的瓜蒌子、瓜蒌皮、根(天花粉)的质量进行综合评价, 建立栝楼各药材质量评价新模式。方法 采用AA3连续流动分析仪、紫外可见分光光度法、硫酸-苯酚法对栝楼各药用部位蛋白、黄酮、多糖进行测定, HPLC法对瓜蒌子中3,29-二苯甲酰基栝楼仁三醇(3,29-DR)及天花粉中葫芦素B进行测定, 并采用主成分分析法和聚类分析法对栝楼各药用部位进行综合质量评价。结果 瓜蒌子质量以河南安阳黎园栝楼最优, 其3,29-DR和粗蛋白的量最高;山西绛县栝楼作药材瓜蒌皮质量较佳, 其粗蛋白和多糖量较高;安徽岳西黑大片栝楼宜作为药材天花粉种植, 其粗蛋白量较高、淀粉量较低、葫芦素B量适中。结论 所采用的主成分分析法和聚类分析法是栝楼各药用部位质量评价的有效方法, 所建立的多指标综合评价模式在栝楼各药材研究中具有一定的现实意义。]]> 2015/8/21 14:01:12 1223true 目的 研究干燥前水洗对丹参Salvia miltiorrhiza活性成分量的影响, 为规范丹参产地加工方法提供依据。方法 将丹参鲜药材采取不洗、冲洗、浸洗、搓洗等方法处理, 采用HPLC法测定其活性成分量的变化, Diamonail C₁₈色谱柱(250 mm×4.6 mm, 5 μm), 乙腈-0.026%磷酸溶液梯度洗脱, 体积流量为1.0 mL/min, 检测波长为286和270 nm。结果 水洗后, 迷迭香酸、丹酚酸B、隐丹参酮、丹参酮I、丹参酮II_A 5种活性成分量均有所降低, 水洗力度越大, 质量分数降低幅度越大, 搓洗丹参中的活性成分量最低。结论 水洗使丹参活性成分遭受损失, 应尽量采用冲洗方式, 既要减少与水接触的时间, 又要避免药材间摩擦及人工搓揉。]]> 2015/8/21 14:01:12 1222true 目的 分析评价丹红注射液生产过程中产生的丹参固体废弃物丹参酮类及残留丹酚酸类资源性化学成分, 并研究资源性化学成分转化机制及其废弃物的循环利用价值和资源化途径, 以期为丹参固体废弃物的资源化利用提供科学依据。方法 采用甲醇超声法提取丹参药材及其药渣中的资源性化学成分;用HPLC-PDA法对其进行定量分析与测定, BDS HYPERSIL C₁₈色谱柱(250 mm×4.6 mm, 5 μm);柱温30 ℃;体积流量1 ml/min;以流动相乙腈-0.1%甲酸水进行梯度洗脱。结果 丹红注射液生产过程中产生的丹参固体废弃物中丹参酮类成分与丹参药材相比, 几乎未被利用而残留于固体药渣中;尚残留一定量的丹酚酸类成分;水提后丹参药渣中丹酚酸A、原儿茶醛的量高于丹参药材。结论 丹红注射液生产过程中生产的丹参固体废弃物中丹参酮类资源性化学成分值得进一步开发利用。]]> 2015/8/21 14:01:12 1221true 目的 建立黄芪ISSR分析最佳反应体系, 并分析内蒙古地区黄芪遗传多样性。方法 采用单因素梯度浓度实验和正交试验相结合的优化方法建立稳定、可靠的ISSR反应体系;对内蒙古9个盟市30个不同居群的黄芪样本进行遗传多样性分析, 用NTSYS2.1软件进行数据统计。结果 ISSR-PCR最佳反应体系(20 μL):10×PCR 缓冲液 2.0 μL、MgCl₂ 1.5 mmol/L、dNTP 0.4 mmol/L、引物0.5 μmol/L、Taq DNA聚合酶1.5 U、模板DNA 40 ng;15条ISSR引物共检测到169个扩增位点, 多态性位点157个, 多态位点百分率为75%～100%, 遗传距离变幅范围0.242 7～0.730 8, 聚类分析可知, 30个居群黄芪样本可分为2大类, 大多数呈现地域分布规律。结论 建立的黄芪ISSR-PCR反应体系稳定可靠;内蒙古地区黄芪具有较高的遗传多样性, 种质间的亲缘关系与地理位置具有一定的关系。]]> 2015/7/25 9:07:09 1220true 目的 采用HPLC法对箭叶淫羊藿Epimedium sagittatum 16个居群的花期样本进行测定, 以期系统全面地评价箭叶淫羊藿的质量, 为其种质筛选和资源利用提供参考。方法 采用Zorbax SB-C₈(250 mm×4.6 mm, 5 μm)色谱柱, 流动相为乙腈-1.44%醋酸水溶液, 体积流量1.0 mL/min, 柱温25 ℃, 检测波长272 nm。结果 居群间质量差异显著, 朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C和淫羊藿苷的变异范围分别为1.00～16.64、1.00～17.21、1.00～76.21、1.00～46.19 mg/g。从淫羊藿苷的量来看, 仅5个居群(HBHF、HBLT、HNLS、HNZJ和JXWN)达到《中国药典》2010年版标准, 4个居群低于标准, 7个居群未检测到。结论 不同居群箭叶淫羊藿药材质量的稳定性和均一性均不理想, 但HNZJ、HBLT、HBHF和HNLS居群质量优异, 可作为规范化栽培的优异候选种质, 同时, 其生境也可为栽培基地的选择提供参考。]]> 2015/7/25 9:07:10 1219true 目的 研究并建立不同产地冬凌草药材的HPLC-PDA指纹图谱, 并结合主成分分析法(PCA)评价不同产地的冬凌草药材质量, 为科学评价与有效控制冬凌草药材质量提供可靠的方法。方法 采用HPLC-PDA法构建冬凌草药材的指纹图谱, 同时应用PCA和相似度分析法对实验数据进行处理, 以找出4个不同产地18批冬凌草样品间的相似性及差异性。色谱柱为Diamonsil^TM C₁₈柱(250 mm×4.6 mm, 5 μm), 柱温为30 ℃;检测波长为238 nm, 流动相为乙腈-0.05%磷酸水进行梯度洗脱, 体积流量0.8 mL/min。结果 标定了冬凌草药材HPLC指纹图谱的19个共有峰, 并指认了其中的4个共有峰, 分别为冬凌草甲素、冬凌草乙素、拉西多宁和迷迭香酸, 18批冬凌草药材的相似度为0.421～0.984。PCA结果表明, 前3个因子的累积贡献率达到87.3%, 选择这3个因子对冬凌草药材进行综合评价。结论 HPLC指纹图谱结合PCA可以快速、客观地评价冬凌草药材的质量差异。]]> 2015/7/25 9:07:10 1218true 目的 建立同时测定款冬花药材中12种成分的超高效液相色谱(UPLC)方法, 并对不同产地药材的质量状况进行评价。方法 采用BEH C₁₈(100 mm×2.1 mm, 1.7 μm)色谱柱;流动相为乙腈(A)-0.03%三氟乙酸水(B), 梯度洗脱, 体积流量0.5 mL/min, 检测波长254 nm, 柱温40 ℃。通过计算不同成分的变异系数, 采用聚类分析(HCA)和主成分分析(PCA)对不同产地的款冬花药材进行分析。结果 建立的测定方法符合方法学要求, 款冬花药材中不同成分的变异系数差别较大, 其中金丝桃苷的变异系数达到0.91。PCA和HCA显示野生款冬和栽培款冬具有明显差异, 其中野生款冬中绿原酸、咖啡酸、芦丁、金丝桃苷、异绿原酸B、异绿原酸A、异绿原酸C、款冬酮等成分量相对较高。结论 不同产地款冬花药材存在较大差异, 体现在不同成分的变异范围明显不同, 野生和栽培药材存在差异, 为保证临床用药的安全有效, 款冬花药材间的差异性对临床疗效的影响有待进一步深入研究。]]> 2015/7/25 9:07:10 1217true 目的 研究外源水杨酸(SA)对盐(NaCl)胁迫下广藿香Pogostemon cablin种子萌发和幼苗生长的影响, 并筛选缓解盐胁迫的SA最适浓度。方法 用50 mmol/L NaCl溶液模拟盐胁迫, 采用纸上发芽, 研究不同浓度梯度外源SA处理对盐胁迫下广藿香种子的发芽势(GE)、发芽率(GR)、发芽指数(GI)、活力指数(VI)、苗长(SL)、根长(RL)、苗鲜质量(SFW)、苗干质量(SDW)、叶绿素量(SPAD值)、可溶性蛋白质(SP)量和丙二醛(MDA)量的变化, 并对各指标进行相对盐害率分析。结果 盐胁迫显著抑制了广藿香种子萌发和幼苗生长。0.10和0.25 mmol/L SA处理均可有效缓解广藿香盐害程度, 而0.50 mmol/L SA处理却加剧了盐害程度。综合考虑各项指标, 0.25 mmol/L SA处理的盐害缓解效果最好, 与盐对照相比, GE、GR、GI、VI、SL、RL、SFW、SDW、SPAD值和SP量分别显著提高46.02%、27.45%、30.16%、92.63%、39.80%、47.94%、26.48%、18.85%、15.94%和14.70%, 且叶片MDA量显著降低18.35%。结论 一定浓度范围的SA可明显缓解盐胁迫对广藿香种子萌发和幼苗生长的抑制作用, 提高广藿香种子的萌发能力和幼苗对环境的适应能力, 以0.25 mmol/L SA效果最佳, 但过高质量浓度SA处理会加剧盐胁迫对广藿香的不利影响。]]> 2015/7/25 9:07:10 1216true 目的 建立人参皂苷生物合成通路中的关键酶——人参达玛烯二醇合成酶(DS)基因cDNA序列的单核苷酸多态性(SNP)检测方法,为人参属植物DS基因的SNP研究以及人参类药材的品种鉴定提供参考。方法 采集不同产地、不同品种和生长年限的人参样品,提取RNA,逆转录为cDNA。采用巢式PCR进行扩增,根据人参DS基因cDNA保守序列设计1组引物用于第1轮PCR,2组DS基因上下游分段引物用于第2轮PCR,扩增产物直接测序。测序结果经BLAST同源性比较后,采用DNAMAN软件进行多重比对分析,以发掘不同样品间DS基因差异位点作为候选SNP。结果 57份人参样本共获得111个符合测序要求的DS基因上下游分段PCR产物,其中测序成功103个,序列经BLAST判定为人参DS基因,经多重比对,发现6个样品存在7个SNP位点。结论 建立了巢式PCR-直接测序法发掘人参DS基因cDNA序列的SNP,方法具有特异性好、操作简单、结果准确等优点。可用于检测人参样品的DS基因是否含有SNP及其类型,这可为人参及其相关药材和产品的质量评价新方法研究提供有价值的遗传研究工具和分子标记资源。]]> 2015/7/15 14:25:51 1215true 目的 建立黄芪单糖指纹图谱,找出速生黄芪与野生黄芪糖谱专属性差异,为不同生长方式黄芪鉴别和品质评价提供依据。方法 采用单糖指纹图谱技术,对24批不同生长方式的黄芪药材,以黄芪细胞质中游离糖、多糖和糖缀合物为研究对象,建立速生黄芪与野生黄芪的单糖指纹图谱,并对不同生长方式的黄芪中单糖的种类与量进行主成分分析和聚类分析。结果 野生黄芪中不同糖类成分的量明显高于速生黄芪,且2种黄芪可按指标成分的比例进行鉴别(速生黄芪中甘露糖-阿拉伯糖 > 3.5:1,葡萄糖-阿拉伯糖 > 4:1;野生黄芪中甘露糖-阿拉伯糖 < 3.5:1,葡萄糖-阿拉伯糖 < 4:1)。结论 该结果不仅为黄芪品质评价指标的筛选提供了依据,同时为以糖类化合物为主要活性物质的中药材质量评价标准的研究提供了思路与方法。]]> 2015/7/15 14:25:52 1214true 目的 研究吉林产人参Panax ginseng内生菌资源状况,筛选出对人参病原菌具有拮抗作用的内生菌。方法 采用混菌法初筛和发酵液拮抗法复筛来筛选具有拮抗活性的菌株,并用16 S rDNA和ITS方法鉴定筛选得到的内生菌株。结果 在人参中共分离获得133株内生菌,通过初筛和复筛后,从中选出了4株对人参病原菌具有较好拮抗作用的菌株,分别为B16、B25、B69和F32,其中B16、B25和B69对6种以上病原菌均表现出了抑菌作用,F32对菌核病菌、疫病菌和根腐病菌的抑菌效果最好,其抑菌圈直径均大于35 mm,经鉴定它们分别为甲基营养型芽孢杆菌、解淀粉芽胞杆菌、死谷芽孢杆菌和齿孢青霉。结论 人参内生菌具有多样性,并有拮抗病原菌活性高的菌株存在,可以成为人参病害生防菌的新来源。]]> 2015/7/15 14:25:52 1213true 目的 建立不同产地何首乌Polygonum multiflorum的HPLC指纹图谱。方法 采用HPLC法建立不同产地16批何首乌药材的指纹图谱,色谱条件为Extend C₁₈色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),以乙腈-0.1%甲酸溶液为流动相,梯度洗脱,体积流量1.0 mL/min,检测波长280 nm,通过Matlab软件对共有峰面积进行主成分分析,同时对16批何首乌中的二苯乙烯苷进行测定。结果 16批何首乌的相似度在0.936～0.998,说明不同产地何首乌样品质量稳定。同时确定了18个共有峰,并通过HPLC/Q-TOF/MS对何首乌共有峰进行定性分析。主成分分析结果与相似度分析结果一致,同时二苯乙烯苷量与主成分分析结果一致。结论 该方法简便、可靠,可为何首乌药材的质量控制提供指导和依据。]]> 2015/7/15 14:25:52 1212true 目的 建立同时测定紫苏Perilla frutescens叶和荆芥Schizonepeta tenuifolia中咖啡酸、迷迭香酸的方法。方法 采用反相高效液相色谱法,Agilent C₁₈色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液,梯度洗脱。检测波长327 nm,柱温30 ℃,体积流量1.0 mL/min。结果 咖啡酸、迷迭香酸2种成分达到了较好的基线分离,且峰形良好,分别在0.69～22.12、3.65～116.92 μg/mL内线性关系良好,r分别为0.999 5、1.000 0;平均加样回收率分别为紫苏叶102.9%(RSD 1.8%)、105.6%(RSD 1.9%),荆芥101.2%(RSD 2.4%)、101.0%(RSD 1.9%)。结论 本方法快速、灵敏、准确,所有待测组分峰分离度良好,可为紫苏叶、荆芥药材的质量评价提供依据。]]> 2015/7/15 14:25:52 1211true 目的 研究绞股蓝Gynostemma pentaphyllun的遗传多样性和群体遗传结构, 为绞股蓝植物资源的保护和合理利用提供理论依据。方法 利用6对SSR引物对绞股蓝28个自然居群426份个体进行研究, 计算遗传参数, 分析遗传多样性, 进行聚类分析。结果 绞股蓝遗传多样性水平较低:平均多态性位点比率(PPL)为58.33%, Nei's遗传多样性指数(H_e)平均为0.18, Shannon指数(I)在0.02～0.50。AMOVA揭示遗传变异主要存在于居群间(居群间变异78.86%, 居群内变异21.14%), 居群遗传分化(F_ST=0.673)明显, 基因流水平(N_m=0.142)较低。聚类分析表明不同倍性的居群间遗传关系较为明显。结论 绞股蓝自然居群遗传多样性较低, 群体遗传结构清晰;建议对绞股蓝遗传多样性水平较高的居群进行原地保护, 同时对一些包含特有基因型的居群进行原地和迁地重点保护。]]> 2015/7/1 17:53:12 1210true 目的 克隆丹参晚期胚胎富集蛋白(late embryogenesis abundant protein, LEA)基因, 并进行生物信息学和表达模式分析。方法 对丹参转录组数据库进行BLAST同源性比对, 发现一条新的与LEA基因家族同源性较高的序列, 命名为SmLEA2, GenBank登录号为HQ676610。进一步利用PCR和RT-PCR技术从丹参gDNA以及cDNA水平克隆得到了SmLEA2基因全长。采用软件分析蛋白质结构性质和系统进化关系。利用实时荧光定量PCR的方法对不同部位、不同发育时期以及不同处理丹参的SmLEA2表达量进行检测。结果 获得SmLEA2 gDNA长1 961 bp, 由1个外显子和1个内含子组成, 并且内含子位于ATG的上游;开放阅读框长为960 bp, 共编码319个氨基酸。生物信息学分析显示, SmLEA2是存在于细胞质中的亲水蛋白, 无跨膜结构域和信号肽, 其相对分子质量为35 340, 等电点为4.77。该基因在丹参的根、茎、叶中均有表达, 并且在茎中的表达量最高。随着花的成熟和种子的发育, 该基因表达量逐渐升高, 并且该基因的表达受茉莉酸甲酯(MeJA)以及脱落酸(ABA)的诱导作用影响。结论 克隆得到的丹参SmLEA2可能参与种子发育过程, 并在丹参防御反应中发挥作用。]]> 2015/7/1 17:53:12 1209true 目的 研究金线莲Anoectochili Roxburghii Gemma Terminalis的HPLC指纹图谱。方法 以Agilent TC-C₁₈(250 mm×4. 6 mm, 5 μm)为色谱柱, 甲醇-水为流动相进行梯度洗脱, 检测波长为260 nm, 体积流量1.0 mL/min, 柱温30 ℃。结果 在色谱指纹图谱中, 确定了22个共有峰, 建立了金线莲的共有模式, 并利用高分辨LC-MS/MS方法对22个共有峰中的7个色谱峰进行了定性鉴别。采用该方法测定10批不同产地的金线莲药材, 其相似度均在0.9以上。同时也对该指纹图谱检测方法进行了验证。结论 该方法结果 准确、重复性好, 为全面评价金线莲药材的质量提供了依据。]]> 2015/7/1 17:53:12 1208true 目的 建立象皮HPLC指纹图谱分析方法, 为其质量控制以及开发应用提供实验依据。方法 用6 mol/L盐酸溶液水解象皮中的氨基酸, 以异硫氰酸苯酯(PITC)为柱前衍生剂, 用Hypersil ODS-2 C₁₈色谱柱(250 mm×4.6 mm, 5 μm), 梯度洗脱, 体积流量为1.0 mL/min, 检测波长为254 nm, 柱温为40 ℃。利用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004A版"对其进行相似度评价。结果 建立了象皮HPLC指纹图谱共用模式, 确定18个共有峰, 并根据对照品指认17个共有峰, 10批象皮药材具有较高的相似度, 可反映象皮所含的17种氨基酸成分。结论 首次建立了象皮的指纹图谱分析方法。该分析方法简便、快速, 可为象皮质量的全面控制提供科学依据。]]> 2015/7/1 17:53:13 1207true 目的 通过对桂林地区的银杏叶Ginkgo Folium一年内的总黄酮苷与总内酯量检测, 分析总黄酮和总内酯的比例变化规律, 找到最佳"酮酯比", 为确定桂林地区银杏叶药材的最佳采收期提供科学的实验依据。方法 使用回流提取法提取样品中总黄酮苷和总内酯, 使用HPLC法对其进行定量分析, 色谱柱为Ultimate XB-C₁₈柱(250 mm×4.6 mm, 5 μm);总黄酮测定采用甲醇-0.4%磷酸溶液(48:52)为流动相;测波长360 nm;体积流量1.0 mL/min。总内酯测定以甲醇-四氢呋喃-水(25:10:65)为流动相;蒸发光散射检测器检测;体积流量0.6 mL/min。结果 桂林地区产银杏叶药材, 在1年内不同采收期银杏叶总黄酮苷和总内酯量差异较大, 但8月份2种有效部位量均较高, 二者量比例最小。结论 8月份为桂林地区银杏叶的最佳采收季节, 为指导桂林产银杏叶的采收提供实验依据。]]> 2015/7/1 17:53:13 1206true 目的 比较研究野豌豆属中入蒙药的8种药用植物山野豌豆Vicia amoena、北野豌豆V. ramuliflora、广布野豌豆V. cracca、多茎野豌豆V. multicaulis、黑龙江野豌豆V. amurensis、东方野豌豆V. japonica、大叶野豌豆V. pseudorobus和歪头菜V. unijuga的rDNA-ITS序列差异性及其规律, 寻找8种植物药之间的分子鉴别方法。方法 从野豌豆属蒙药材中提取总DNA, 用PCR法扩增ITS, 运用Clustal X、MEGA等软件比较和分析ITS的序列特征。结果 野豌豆属入蒙药的8种药用植物ITS序列长度为598～611 bp, 具变异位点40个, 其中信息位点33个, 特异性鉴别位点29个。序列已提交至NCBI数据库, 登录号为JQ309787～JQ309794, KJ417905～KJ417931。其中5种野豌豆的ITS序列为国际首次获得, 分别为黑龙江野豌豆(JQ309789)、东方野豌豆(JQ309792)、多茎野豌豆(JQ309791)、大叶野豌豆(JQ309788)和北野豌豆(JQ309793)。结论 ITS序列对野豌豆属入蒙药的8种药用植物具有较好的分辨性, 为野豌豆属蒙药药用植物分子鉴别提供了参考。]]> 2015/6/23 14:57:23 1205true 目的 建立N、P、K施肥量与巫山淫羊藿Epimedium wushanense品质的回归模型, 探索巫山淫羊藿的最佳施肥方案。方法 采用3因素4水平设计施肥方案, 布置巫山淫羊藿N、P、K肥料效应实验, 并对实验数据进行整理与统计分析。结果 建立了N、P、K肥配施效应模型与巫山淫羊藿产量和质量之间的关系, 并对各因子之间的交互作用进行了分析, 对模型进行了优化。在不同施肥措施中N₂P₂K₂处理效果最佳, 不施或者少施N、P、K中的任何一种养分均不同程度导致巫山淫羊藿减产和质量下降;单因子效应分析表明, 随着N、P和K施肥量的提高, 产量和有效成分的量呈先升后降的趋势;双因素交互效应分析表明, 以巫山淫羊藿产量为考察对象, N、P、K肥间相互作用都存在一个值域, 低于这个值域时都表现为协同促进作用, 高于这个值域时则都表现为拮抗作用;以淫羊藿苷和朝藿定C的量为考察对象, N、K和P、K肥间相互作用存在一个值域, 有效成分的量表现出与产量相同的趋势。结论 模型优化结果表明, 大田实验适宜的N、P、K肥施用量分别为224.154～269.461、176.324～214.651、152.624～197.354 kg/hm²。]]> 2015/6/23 14:57:23 1204true 目的 采用化学计量学分析方法, 建立黄芪Astragalus membranaceus药材质量评价体系。方法 收集20批不同产地不同品种黄芪药材, 建立皂苷、黄酮类成分特征图谱。运用主成分分析、聚类分析方法深入研究不同黄芪药材中化学成分量的变化趋势及规律。结果 17个特征成分中, 黄芪皂苷I、黄芪皂苷IV、芒柄花素和2个未知皂苷成分的差异显著, 可作为区分不同产地或不同品种黄芪的关键性指标成分。结论 通过化学计量学分析方法, 建立的黄芪药材中皂苷、黄酮类成分评价体系专属性强、准确性高, 可有效控制和评价黄芪药材质量。]]> 2015/6/23 14:57:23 1203true 目的 建立虎杖药材的HPLC-DAD-ELSD指纹图谱, 对10个不同产地的虎杖药材进行质量评价。方法 使用Luna C₁₈(2)色谱柱(250 mm×4.6 mm, 5 μm), 乙腈-水为流动相进行梯度洗脱, 体积流量1.0 mL/min, 柱温35 ℃, 检测波长254 nm, 进样量10 μL。蒸发光检测器漂移管温度109 ℃, 载气体积流量3.0 L/min。结果 通过10批虎杖药材建立了指纹图谱的共有模式, 其中HPLC-DAD指纹图谱共有峰19个, 相似度为0.938～0.993;HPLC-ELSD指纹图谱共有峰14个, 相似度为0.905～0.999。确认了虎杖苷、白藜芦醇、大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷、大黄素甲醚-8-O-β-D-葡萄糖苷、大黄素和大黄素甲醚。结论 方法准确、稳定, 为客观评价虎杖药材的质量提供了科学依据。]]> 2015/6/23 14:57:24 1202true 目的 研究紫花鄂北贝母Fritillaria ebeiensis var. purpurea外植体愈伤组织诱导的激素组合和配比, 并考察原药材及愈伤组织中总生物碱的量。方法 以紫花鄂北贝母新鲜鳞茎为外植体, 用抗生素和NaClO组合作消毒剂, 基于MS固体培养基添加激素2,4-D+6-BA、2,4-D+KT设计正交试验进行离体培养;采用可见-紫外分光光度法测定总生物碱量。结果 外植体适宜灭菌条件是以5% NaClO溶液消毒8 min;愈伤组织诱导激素水平为2,4-D 0.5 mg/L+6-BA 2.0 mg/L;原药材及其愈伤组织中总生物碱量分别为1.46%、1.09%。结论 愈伤组织质地疏松, 适合继代培养, 其有效成分总生物碱量低于原药材。]]> 2015/6/23 14:57:24 1201true 目的 对西洋参Panax quinquefolium种子休眠与萌发过程中赤霉素20-氧化酶(GA20ox)基因编码区进行克隆及生物信息学分析。方法 根据西洋参种子转录组的注释信息, 得到9条GA20ox相关序列, 通过比对分析确定了GA20ox的转录本。采用qRT-PCR方法得到西洋参GA20ox(PqGA20ox)的cDNA全长, 并对其编码蛋白进行生物信息学分析。采用实时荧光定量PCR方法检测PqGA20ox基因在根、茎、叶和种子休眠不同时期的表达水平。结果 生物信息学分析表明, PqGA20ox基因全长1 092 bp, 编码363个氨基酸残基, PqGA20ox编码蛋白不含跨膜区, 不含信号肽。qRT-PCR实验结果显示PqGA20ox基因在形态休眠起始期和生理休眠起始期表达量高于其他时期。结论 首次获得PqGA20ox基因的编码区序列, 为进一步研究西洋参种子解除休眠的分子机制奠定基础。]]> 2015/6/6 14:35:46 1200true 目的 构建芍药Paeonia lactiflora Actin(PlActin)基因原核表达载体, 优化PlActin基因在大肠杆菌中的高效表达体系。方法 基于PlActin基因cDNA序列及原核表达载体pET-32a (+) 多克隆位点序列, 设计一对5'末端分别插入BamH I和Hind III酶切位点的特异性PCR引物, 基于RT-PCR技术亚克隆PlActin基因;用BamH I和Hind III双酶切重组质粒pMD18-T-PlActin和原核表达载体pET-32a (+), 胶回收纯化目的基因和空载体, 连接、转化后应用菌落PCR、质粒PCR和双酶切鉴定出重组子pET-32a (+)-PlActin, 转化BL21(DE3)菌株获得基因表达工程菌;分别设置诱导剂异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)浓度梯度、诱导的菌体起始密度梯度及表达时间梯度, 诱导PlActin基因在大肠杆菌中表达, SDS-PAGE电泳、考马斯亮蓝R250染色后制备干胶并比较重组Actin蛋白的表达量。结果 亚克隆测序结果表明PlActin与目的序列完全一致, 且其编码区序列(CDS)上下游成功插入了BamH I和Hind III酶切位点;成功构建了芍药原核表达载体pET-32a (+)-PlActin;诱导剂IPTG的最佳浓度为0.1 mmol/L, 诱导的菌体起始密度(A₆₀₀)为0.4～0.6, 最佳表达时间为4 h。结论 构建了PlActin基因原核表达载体pET-32a (+)-PlActin, 建立了PlActin基因在大肠杆菌中的高效表达体系。]]> 2015/6/6 14:35:46 1199true 目的 研究绞股蓝Gynostemma pentaphyllun种质资源的遗传多样性及亲缘关系。方法 采用ISSR分子标记技术对来自全国12个省市不同生态环境的48份绞股蓝种质材料进行遗传多样性及亲缘关系分析。结果 100条ISSR引物中共筛选出15条扩增条带清晰、稳定性好且多态性明显的引物, 48份材料DNA扩增共获得214个位点, 其中多态位点206个, 多态性比率(PPL)96.26%, 平均每条引物扩增位点为14.27个;平均观察等位基因数(N_a)、有效等位基因数(N_e)、Shannon多样性信息指数(I)和Nei's基因多样性指数(H)分别为1.962 6、1.335 8、0.221 1和0.359 8;种质材料间的遗传相似系数变幅为0.57～0.96, 平均为0.72。利用UPGMA聚类分析, 以遗传相似系数0.71为界, 48份材料聚为4大类。结论 绞股蓝种质材料间的遗传多样性较高, 种质间的亲缘关系与其地理分布和生态环境并不完全一致。]]> 2015/6/6 14:35:46 1198true 目的 建立同时测定赤芍Paeoniae Rubra Radix和白芍Paeoniae Alba Radix中没食子酸、没食子酸甲酯、芍药内酯苷、芍药苷、1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖、苯甲酰芍药苷的HPLC方法, 测定和比较32批不同产地和收集地赤芍和白芍中6种化学成分的量。方法 采用HPLC法进行测定, 流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液, 体积流量0.8 mL/min, 柱温30 ℃, 检测波长为230 nm和270 nm。结果 结果显示, 没食子酸、没食子酸甲酯、芍药内酯苷、芍药苷、1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖、苯甲酰芍药苷分别在0.783～50.10、1.094～70.00、2.367～151.5、7.823～500.6、3.125～200.0和0.348～22.25 μg/mL内具有良好的线性关系(r²=0.999), 平均回收率分别为102.1%、98.88%、99.25%、100.4%、104.2%、100.6%。结论 赤芍和白芍药材样品中芍药内酯苷、1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖、没食子酸和没食子酸甲酯的量差异较显著, 除芍药苷外, 单萜苷类成分在白芍中量明显较高, 而多元酚类化合物在赤芍特别是川赤芍中量普遍居高。]]> 2015/6/6 14:35:46 1197true 目的 建立HPLC法同时测定蒙古黄芪药材中的毛蕊异黄酮苷和芒柄花素量的方法, 考察不同产地、加工方法、栽培年限对蒙古黄芪质量的影响。方法 色谱柱为Dikma C₁₈(250 mm×4.6 mm, 5 μm);流动相为乙腈-0.2%甲酸水溶液梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;检测波长260 nm;柱温30 ℃。结果 通过对蒙古地区11个不同产地的40批次蒙古黄芪药材进行分析, 比较毛蕊异黄酮苷和芒柄花素量得出, 蒙古黄芪的产地加工方式最佳为清洗后自然晾晒干燥;巴彦淖尔市乌拉特中旗明安镇头份子地区为蒙古黄芪最佳栽培种植基地;生长年限二年、三年的蒙古黄芪栽培品种质量差异不大;蒙古黄芪野生品种质量优于栽培品种。结论 该方法简单快捷, 适合于黄芪中异黄酮类化合物的定量测定研究, 为今后蒙古黄芪药材的栽培种植和加工方式合理标准的制定提供科学、可靠的依据。]]> 2015/6/6 14:35:46 1196true 目的 建立测定桔梗Platycodon grandiflorum中桔梗总皂苷和桔梗皂苷D的测定方法, 并准确测定我国不同产地桔梗药材中桔梗总皂苷和桔梗皂苷D的量。方法 采用超声波甲醇提取法, 称重法测定桔梗总皂苷量;采用HPLC法测定桔梗皂苷D量, 色谱条件:Waters Symmetry-C₁₈色谱柱, 流动相为乙腈-水(22:78), 体积流量1.0 mL/min, 检测波长为210 nm, 柱温为30 ℃。结果 不同产地的桔梗药材中桔梗总皂苷和桔梗皂苷D量差别较大。在所测的桔梗药材中, 浙江产桔梗总皂苷量最高, 为12.03%;黑龙江、辽宁、安徽、山东、江西产桔梗总皂苷量均高于《中国药典》2005年版规定的6%;而其余各省的量均低于6%, 最低的为河南, 其量仅为1.57%。对于桔梗皂苷D来说, 云南产桔梗的量最高, 为0.654%;河北产桔梗的量最低, 为0.017%。结论 建立的方法操作简便, 测定结果准确可靠, 可用于桔梗药材中桔梗总皂苷和桔梗皂苷D量的测定。在我国不同产地桔梗药材中, 桔梗总皂苷和桔梗皂苷D的量存在差异。同一药材中桔梗总皂苷与桔梗皂苷D的量, 未显示出相关性。]]> 2015/6/6 14:35:47 1195true 目的 从黄芩愈伤组织中克隆查耳酮异构酶(CHI)基因, 并对其进行生物信息学分析。方法 从黄芩愈伤组织中提取RNA, 反转录为cDNA, 设计特异性引物, 克隆得到黄芩查耳酮异构酶(sbCHI)基因。通过生物信息学对该基因蛋白的特征进行分析, 使用MEGA5.1构建sbCHI与相关物种查耳酮异构酶基因的系统进化树。结果 获得sbCHI基因(GeneBank登录号KP064512)全长648 bp, 含有1个完整的开放阅读框, 编码215个氨基酸。为不稳定亲水性蛋白, sbCHI编码蛋白相对分子质量为22 980, 等电点(pI)为5.09, 不含信号肽, 无跨膜区, 具有1个查耳酮超级家族的保守结构域。二级结构中α-螺旋(alpha helix)占37.21%、β-延伸(β-extended)占23.25%、无规则卷曲(random coil)占39.54%。同源性分析显示, sbCHI基因与黄芩(ADQ13184.1)核苷酸序列相似性为99.69%、氨基酸序列相似性为99.07%, 仅在第31、160位不同。结论 成功从黄芩愈伤组织中克隆得到sbCHI, 为进一步鉴定sbCHI基因的功能及黄芩苷的合成生物学研究提供基础。]]> 2015/6/8 15:20:54 1194true 目的 克隆中国红豆杉altered phloem development(APL)基因, 研究APL在中国红豆杉剥皮后树皮再生过程中的表达状况, 以揭示其可能的调控作用机制。方法 利用反转录PCR(RT-PCR)方法克隆得到3个中国红豆杉APL(TcAPLs)基因的cDNA全长序列, 分别命名为TcAPL1、TcAPL2和TcAPL3, 进一步利用生物信息学工具对其进行分析, 最后利用半定量 RT-PCR对中国红豆杉不同组织和qRT-PCR技术对其剥皮再生不同时期的TcAPLs进行表达分析。结果 系统进化树结果显示, TcAPL1与TcAPL2编码的蛋白与川桑的APL蛋白亲缘关系最近, 聚为一类;TcAPL3处在APL另一个大的独立分支上。组织表达谱分析表明TcAPL1和TcAPL2 2个基因主要在根、茎、叶片和韧皮部(含形成层)中均高表达;TcAPL3在叶片中表达量较高, 而在根和木质部(含形成层)表达较低。在中国红豆杉剥皮再生过程中, TcAPL1和TcAPL2 2个基因的表达水平随着时间的延长表现为先上升后下降的趋势, 均在36 d下降最明显;TcAPL3的表达则在整个组织再生过程中被抑制。结论 克隆了3个TcAPLs基因, 3个基因在中国红豆杉剥皮再生过程中均有响应, 推测它们在中国红豆杉植物剥皮后组织再生中起一定的调控作用。]]> 2015/6/8 15:20:54 1193true 目的 对黄独微型块茎鲨烯合酶(SQS)基因的表达量进行分析, 旨在为阐明黄独微型块茎不同诱导形成时期皂苷的合成机制提供理论依据。方法 以Actin基因为内参基因, 采用实时荧光定量 PCR (qRT-PCR)分析技术。通过对不同诱导形成时期的黄独微型块茎进行取样并提取RNA, 反转录获得cDNA作模板, 利用sybr Green I成功构建了目的基因SQS和Actin的扩增曲线和熔解曲线。结果 定量结果表明, SQS基因在黄独微型块茎诱导形成的初期(第18～36天)。表达量显著增加;在黄独微型块茎诱导形成的中期(第36～72天)SQS基因的表达量显著下降, 并趋于稳定;在黄独微型块茎诱导形成的后期(第72～90天)SQS基因的表达量再次显著下降。结论 在黄独微型块茎诱导形成的过程中, SQS基因的表达量呈现出"低-高-低-不变-低"的变化趋势, 推测SQS是黄独微型块茎诱导形成中皂苷生物合成的关键酶。]]> 2015/6/8 15:20:54 1192true 目的 通过考察低温胁迫后新疆紫草悬浮细胞次生代谢物量的变化, 探讨道地产区特有的环境因子对新疆紫草的作用。方法 4 ℃低温胁迫新疆紫草悬浮细胞24 h后, HPLC法分别测定胁迫前(计为0 h)和胁迫后12、24、48、72、168 h 5个时间点迷迭香酸、紫草酸B、紫草呋喃A、紫草呋喃E、乙酰紫草素、脱氧紫草素、异丁酰紫草素、β,β'-二甲基丙烯酰紫草素、异戊酰紫草素和总紫草素类化合物的量。结果 低温胁迫后不同时间点同类化合物的变化趋势基本一致, 但其量差异显著, 除β,β'-二甲基丙烯酰紫草素外, 其他化学成分量的最大值均出现在低温胁迫组。结论 低温胁迫可以促进新疆紫草悬浮细胞积累次生代谢物, 并对揭示新疆紫草道地性形成的机制有重要作用。]]> 2015/6/8 15:20:54 1191true 目的 采用HPLC法测定并比较分析藤合欢中山柰苷的量。方法 采用甲醇超声处理方法提取藤合欢, HPLC法测定山柰苷的量, 色谱柱为Agilent Zorbax Eclipse Plus C₁₈ 柱 (250 mm×4.6 mm, 5 μm), 甲醇-0.01 mol/L磷酸二氢钾溶液-冰醋酸水溶液(40:60:1.5)等度洗脱, 体积流量1.0 mL/min, 检测波长254 nm, 柱温30 ℃。结果 线性范围在0.092 7～0.926 7 μg(r=0.999 8), 平均加样回收率为100.8%, RSD为1.1%(n=6)。结论 该方法简便、准确, 重复性好, 可用于藤合欢质量控制;不同产地的藤合欢样本质量存在差异, 贮藏时间越久, 其所含的黄酮类成分越少。]]> 2015/6/8 15:20:54 1190true 目的 利用DNA条形码技术评估ITS2序列对海南大戟科植物的鉴定能力。方法 利用PCR测序法,对供试样本ITS2片段进行双向测序,所得序列经Codon Code Aligner拼接后,利用MEGA 6.0进行相关数据分析,构建邻接(NJ)树。利用TAXON DNA软件分析序列种内、种间变异并作barcoding gap分析。从ITS2数据库中获得供试样本的预测ITS2二级结构。结果 大戟科供试样本ITS2序列中变异位点与信息位点分别占总序列长度的84%和69.67%。供试各种在构建的NJ树中均各自成束,表现出单系性;基于ITS2序列的种内最大变异距离值0.0673;种间最小变异距离值0.1191,各ITS2二级结构种内无明显差异;种间存在明显差异。结论 所得ITS2条形码序列对海南大戟科植物鉴定能力强,可作为DNA条形码序列对海南大戟科植物进行快速鉴定。]]> 2016/5/4 8:53:44 1189true 目的 克隆陆英Sambucus chinensis 3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A合成酶(HMGS)基因并分析其差异表达。方法 采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)方法获得HMGS基因cDNA序列并对HMGS蛋白进行理化性质、蛋白二级结构及三维结构预测分析,并预测了该蛋白功能;利用RT-PCR方法检测了HMGS基因在陆英的根状茎、地上茎、叶、花中的表达情况。结果 克隆获得的HMGS基因cDNA全长为1401 bp,编码466个氨基酸。生物信息学预测HMGS蛋白无跨膜区,不含信号肽。HMGS基因主要在陆英的花和根状茎中表达较高,在叶中表达相对较低。结论 首次从陆英中克隆了HMGS基因,为进一步阐明该基因在陆英萜类化合物代谢途径中的重要作用奠定基础。]]> 2016/5/4 8:53:45 1188true 目的 鉴定河北中药材市场柴胡的真伪。方法 对从河北中药材市场采购的28份柴胡药材的ITS2序列进行PCR扩增,同时从GenBank下载7个样本序列。采用CodonCode Aligner软件进行序列拼接,采用软件MEGA 6.0分析比对,计算其种间、种内的K2P距离以及各序列的变异位点并进行聚类分析。结果 28份样品中有21份为柴胡,3份为黑柴胡,4份为伪品。结论 ITS2序列能够作为柴胡药材鉴别的有效方法之一,对药材市场的规范和临床用药安全具有重要意义。]]> 2016/5/4 8:53:45 1187true 目的 进一步认识两面针Zanthoxylum nitidum花粉粒形态特征和生理特性。方法 采用离体培养法测定花粉粒活性,并应用"3414"试验设计对培养条件:蔗糖质量分数、硼酸(HBO_3>)质量浓度、氯化钙(CaCl₂)质量浓度3个因素进行筛选,同时与碘-碘化钾(I₂-KI)、氯化三苯基四氮唑(TTC法)测定花粉活性的方法比较,建立测定花粉活性的适宜方法。然后应用所建立的方法,进一步研究保存方法、保存时间对花粉粒活性影响。应用电子显微镜观察花粉粒大小、形态等特征。结果 I₂-KI染色法、TTC法2种方法不适合两面针成熟花粉活性的测定。离体萌发法中最佳的组合为10%蔗糖+0.1 mg/mL硼酸+0.1 mg/mL氯化钙,测定萌发率可达66.67%。两面针花粉活性24 h内最高,4℃的低温条件下可保持约15 d,而冷冻和常温条件不太适合其保存。花粉粒形态为长椭球形,具有3个萌发沟,表面有网状纹饰。结论 初步建立了两面针花粉粒活性测定方法、贮藏条件,为了解两面针花粉粒生理特性、品种选育及分类奠定基础。]]> 2016/5/4 8:53:45 1186true 目的 测定川明参Chuanmingshen violaceum中重金属元素,并评价其安全性。方法 从8个川明参主要种植县区采集了33份川明参根,经加工后,采用微波消解-电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)法测定样品中铅(Pb)、镉(Cd)、汞(Hg)、铜(Cu)、砷(As)、铬(Cr)6种重金属元素的量;并根据地理位置和生态环境,将这8个川明参种植县区分为4个产区,经统计分析比较各产区样品中重金属元素的差异。结果 每份川明参样品中重金属元素的量分别为Pb ≤ 0.256μg/g,Cd ≤ 0.235μg/g,Hg ≤ 0.123μg/g,Cu ≤ 3.963μg/g,Cr ≤ 2.145μg/g,As未检出;均低于中国《药用植物及制剂进出口行业绿色标准》药用植物原料和饮片的标准。4个川明参产区之间比较,除Pb的量在2个产区之间有显著性差异(P<0.05)之外,其余各产区及各重金属元素的量之间均无显著性差异。结论 建立的ICP-MS方法可准确测定川明参中重金属元素的量;以重金属为指标,四川产川明参是安全的,主产区适宜川明参的种植。]]> 2016/5/4 8:53:45 1185true 目的 采用高效液相色谱-二极管阵列检测方法,建立昆仑雪菊中绿原酸、芦丁、槲皮素和木犀草素的测定方法。方法 色谱柱为安捷伦HC-C₁₈柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为甲醇-0.01%磷酸水溶液,梯度洗脱;检测波长315 nm;柱温30℃;体积流量1.0 mL/min。结果 昆仑雪菊中绿原酸、芦丁、槲皮素和木犀草素分别在2.0~60μg/mL(r=0.9998)、5.0~100μg/mL(r=0.9999)、1.0~40μg/mL(r=0.9999)和0.5~40μg/mL(r=0.9999)呈良好的线性关系,平均回收率分别为102.4%(RSD为1.05%)、98.6%(RSD为1.28%)、103.6%(RSD为0.95%)、101.2%(RSD为1.12%)。结论 该方法操作简便、易行、稳定,具有良好的灵敏性、重现性和回收率,可用于昆仑雪菊药材的质量控制。]]> 2016/5/4 8:53:45 1184true 目的 克隆红花花瓣中bZIP20(Basic region/leucine zipper motif)基因,研究其在不同组织中的表达量并构建其植物表达载体。方法 根据红花转录组测序结果挑选bZIP基因的设计引物,以红花花瓣总RNA为模板,采用RT-PCR法扩增bZIP20基因开放阅读框(ORF)片段,利用RT-PCR法分析在红花不同组织以及尖孢镰刀菌侵染后红花根部bZIP20基因的表达量,同时构建植物表达载体pBASTA-bZIP20。结果 bZIP20基因ORF长981 bp,编码326个氨基酸(GenBank登录号为KT692605)。红花bZIP20与其他物种氨基酸具有一定的同源性,其与芝麻、野茶树的氨基酸序列相似性高达85.41%和83.99%。实时荧光定量PCR分析表明,bZIP20基因在不同组织中的表达水平具有显著差异,在花中呈现高表达,而在其他组织中低表达。接种尖孢镰刀菌的红花根部组织中bZIP20基因的表达显著上调。结论 成功地对bZIP20基因进行克隆及表达分析,并构建植物表达载体pBASTA-bZIP20。]]> 2016/4/27 18:40:17 1183true 目的 采用核磁共振的代谢组学技术研究“杀青”对连翘Forsythia suspense化学成分的影响。方法 对连翘生品与杀青品的¹H-NMR图谱进行分析;将核磁数据导入SMICA-P软件进行多元统计分析,寻找二者的差异代谢物;并通过生物合成途径分析主要差异代谢物的降解途径。结果 共指认24个代谢物,主成分分析(PCA)显示连翘生品与杀青品能明显区分,说明它们的代谢物组成有显著差异。正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)的S-plot结合变异权重参数(VIP)显示生品与杀青品的化学差异主要涉及10个代谢物,杀青品中连翘酯苷A、连翘酯苷C、连翘苷、芦丁、蔗糖的量较高,而生品中连翘环己醇、连翘环己醇苷、连翘环己醇酮、α-葡萄糖、β-葡萄糖的量较高。并推测生品中连翘酯苷A大幅降低的原因在于降解为连翘环己醇。结论 从整体代谢物轮廓分析“杀青”对连翘化学组成的影响,证实了传统连翘产地加工“杀青”环节的合理性和必要性,也为连翘的活性成分群研究和多指标质量标准建立奠定了基础。]]> 2016/4/27 18:40:17 1182true 目的 深入研究川麦冬内生真菌分布的多样性和特异性,并考察其抑菌活性。方法 分别对野生川麦冬和大田栽培川麦冬的根部和叶部利用组织块法分别进行分离纯化,利用形态学和ITS序列聚类分析等分子生物学方法对所得内生真菌进行鉴定,利用菌饼法对其抑菌活性进行初步研究。结果 从川麦冬中共分离得到27株内生真菌,其中野生麦冬内生真菌(22株)明显较大田栽培麦冬内生真菌(5株)丰富,根部内生真菌(17株)明显较叶部内生真菌(10株)丰富。此外镰刀菌属和曲霉菌属为麦冬优势菌属,且镰刀菌属有根部专一定植特性,曲霉菌属却广泛分布于根部和叶部。同时,40%的麦冬内生真菌对白色念珠菌具有抑制活性,对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌和粪肠球菌抑制菌株较少。结论 川麦冬具有丰富的内生真菌多样性,并且其内生真菌分布具有明显的环境和部位特异性。所分离的内生真菌具有一定的抑菌活性,其中H5、031p和H8 3株菌表现出较强抑菌活性,值得进一步研究。]]> 2016/4/27 18:40:17 1181true 目的 建立一测多评法(QMSA)同时测定决明子中橙黄决明素、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚4种蒽醌类成分的方法,并验证该法在决明子质量控制中应用的可行性。方法 以大黄素为内参物,采用2种校正方法分别建立橙黄决明素、大黄酚与大黄素甲醚的相对校正因子(f_k/s),计算各成分的量,实现一测多评;同时采用外标法测定另3种成分的量,并比较QMSA法计算值与实测值的差异,以验证QMSA法的可行性和准确性。结果 建立了决明子中橙黄决明素、大黄酚、大黄素甲醚的f_k/s;6批决明子中4种成分QMSA法的计算值与实测值间无显著差异。结论 QMSA法能准确地测定决明子中4种蒽醌类成分,可运用于决明子蒽醌类成分的多指标质量评价。]]> 2016/4/27 18:40:18 1180true 目的 以麦角甾醇为测定指标,建立马勃Lasiosphaera seu Calvatia质量评价的HPLC方法,对42批不同商品马勃中麦角甾醇的量进行比较研究。方法 运用HPLC对多个不同产地和品种的马勃中麦角甾醇进行测定,色谱条件为BDS HYPERSIL C₁₈色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);体积流量1.0 mL/min;检测波长282 nm;柱温30 ℃;进样量20 μL;以乙腈(A)-0.1%甲酸水溶液(B)为流动相进行梯度洗脱:0～15 min,95% A,15～50 min,100% A。结果 建立了马勃中麦角甾醇的提取方法和HPLC测定方法。不同品种和产地的马勃中麦角甾醇范围为0.009 9%～0.150 3%。结论 不同商品马勃中麦角甾醇量差异明显,说明目前市售马勃药材品质不均一。因此,对于马勃药材的质量控制尚需进一步规范化和标准化。]]> 2016/4/27 18:40:18 1179true 目的 在人参属资源中研究20(R)-25-羟基-原人参三醇 [20(R)-25-OH-PPT],为人参皂苷降血糖作用的创新和研发提供科学依据。方法 色谱柱Agilent C₁₈(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相为甲醇-水(70:30);柱温35 ℃;体积流量1.0 mL/min;ELSD气化室温度87.0 ℃,载气流速2.20 L/min;进样体积10 μL。采用HPLC-ELSD法测定人参属植物不同部位提取物(以丙酮为溶剂,采用超声法提取)中20(R)-25-OH-PPT。结果 20(R)-25-OH-PPT在0.001～0.050 mg/mL线性关系良好,在人参茎叶、人参根、人参果、人参花、西洋参茎叶、西洋参根和三七芦头总皂苷中的量分别为3.74%、2.59%、2.37%、0.40%、0.68%、0.22%和0.39%,回收率为98.54%、97.54%、100.35%、101.46%、97.46%、99.14%和99.38%。结论 20(R)-25-OH-PPT存在于人参属植物多个部位中,可作为人参皂苷降血糖作用开发利用的重要依据。]]> 2016/4/27 18:40:18 1178true 目的 建立电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)测定金线莲中铜(Cu)、砷(As)、镉(Cd)、汞(Hg)、铅(Pb)5种重金属元素。方法 样品微波消解处理后,采用电感耦合等离子体质谱法测定。结果 Cu、As、Cd、Hg、Pb标液工作曲线的线性良好,相关系数大于0.998,Cu的平均回收率104.3%,RSD为4.0%,As的平均回收率102.2%,RSD为4.3%,Cd的平均回收率100.5%,RSD为0.4%,Hg的平均回收率101.0%,RSD为3.6%,Pb的平均回收率101.1%,RSD为1.1%。结论 该方法稳定可靠,灵敏度高,重现性好,准确快速,可用于同时测定金线莲中Cu、As、Cd、Hg、Pb 5种重金属的元素。]]> 2016/4/27 18:40:18 1177true 目的 克隆当归Angelica sinensis咖啡酸-O-甲基转移酶(caffeic acid O-methyltransferases,COMT)编码基因全长cDNA,并对序列进行生物信息学分析。方法 提取当归叶片总RNA为cDNA合成模板,利用同源克隆结合cDNA末端快速扩增(RACE)技术克隆当归COMT全长cDNA,并利用NCBI、ExPASy网站上的Blast N、Blast P、ORF Finder、Compute PI/Mw、ProtScale、PROSITE、SWISS-MODEL等序列在线分析工具和MEGA、DNAMAN生物信息学软件对序列进行分析。结果 获得COMT全长cDNA序列,并在GenBank注册(登录号KP188587)。序列分析表明,克隆的cDNA全长为1436 bp,其中包括5'-UTR(76 bp)和3'-UTR(362 bp),含有1个1098 bp的完整开放阅读框(opening reading frame,ORF),编码365个氨基酸的多肽链;预测蛋白质相对分子质量为40230,理论等电点(pI)为5.43;无信号肽,具有典型的Ⅱ型氧甲基转移酶结构域SAM_OMT_Ⅱ。结论 首次克隆当归COMT基因全长cDNA,为当归COMT基因功能研究和当归阿魏酸生物合成与调控的机制研究奠定基础。]]> 2016/4/1 16:24:52 1176true 目的 克隆杭菊Chrysanthemum morifolium二氢黄酮醇还原酶(dihydroflavonol 4-reductase,DFR)基因,并研究其在花芽分化期及开花期不同时期的表达特征。方法 根据已报道的菊花Chrysanthemum morifolium DFR基因序列设计引物,通过荧光定量PCR(RT-PCR)技术从杭菊头状花序中扩增出目的基因片段,连接、转化、挑取阳性克隆测序并拼接;采用基于内参基因的相对定量PCR方法,分析该基因表达量特征。结果 得到全长1152 bp的杭菊DFR基因,最大开放阅读框1029 bp,共编码342个氨基酸。NCBI上进行Blast比对,该基因与其他植物的DFR基因有很高的同源性。RT-PCR表明该基因在花芽分化时期不同阶段以及开花期不同时期花不同部位中表达量均有差异。花芽分化时期杭菊DFR基因在50 d表达量最高;开花期该基因在时期I的管状花中表达量最高,在时期Ⅱ的花序托中表达量最低。结论 克隆得到杭菊DFR基因cDNA序列,该基因表达存在时间和空间上的差异,表达量在花蕾膨大成熟到舌状花开放30%的时间段内最高。该结果为进一步进行该基因在杭菊中的表达与催化产物的关系和调控机制研究奠定了基础。]]> 2016/4/1 16:24:52 1175true 目的 深入了解和掌握湖南产牡丹Paeonia suffruticosa的亲缘关系及遗传多样性。方法 利用ISSR分子标记生物技术从100条ISSR引物中筛选出条带清晰、多态性好的引物7条,对源自湖南省内牡丹种质资源及部分实生后代共47份样品DNA进行扩增实验。结果 共扩增获得77条带型完整清晰的谱带,其中多态性带为67条,多态位点比率为87.01%,表明湖南产牡丹种质资源多态性较高,具有较高的遗传多样性。经计算机软件计算结果分析,平均有效等位基因数为1.3954,平均Nei's基因多样性指数为0.2480,平均Shannon's信息指数为0.3859;各品种间的Jaccard相似系数介于0.5325~0.9610,平均为0.7515。UPGMA作图法将47份材料划分为2个类群3个亚类,很好地将不同来源的品种区分开来。结论 从分子水平上揭示了湖南产牡丹品种间亲缘关系及较高的遗传多样性,为耐湿热牡丹的新品种选育工作提供了理论依据。]]> 2016/4/1 16:24:52 1174true 目的 建立白英Solanum lyratum毛状根诱导与培养体系,筛选出薯蓣皂苷元高产的毛状根无性系。方法 利用发根农杆菌C58C1感染白英外植体获得毛状根,建立白英毛状根遗传转化体系。采用HPLC法检测薯蓣皂苷元量。结果 菌液浸染时间为10 min、共培养时间为4 d可获得最佳转化效果,毛状根诱导率为83.33%。HPLC检测结果表明,野生型白英植株中叶片的薯蓣皂苷元量最高,为1.742 mg/g。毛状根中薯蓣皂苷元的平均质量分数为4.620 mg/g,是白英叶片的2.652倍。结论 通过白英毛状根离体培养,可以高效率地获得薯蓣皂苷元。]]> 2016/4/1 16:24:52 1173true 目的 分析不同采收期苍耳草Xanthium sibiricum中酚酸类及蒽醌类成分的动态变化。方法 采用HPLC法测定不同采收期苍耳草中酚酸类成分绿原酸、新绿原酸、原儿茶醛、原儿茶酸、隐绿原酸、咖啡酸、1,3-二咖啡酰奎宁酸、阿魏酸、3,4-二咖啡酰奎宁酸、3,5-二咖啡酰奎宁酸、4,5-二咖啡酰奎宁酸及蒽醌类成分芦荟大黄素、大黄素、大黄酚的量。结果 不同采收期苍耳草中酚酸类及蒽醌类成分的量呈动态变化,总酚酸量7月中旬较高,总蒽醌量7月下旬较高;绿原酸、原儿茶醛、阿魏酸、3,5-二咖啡酰奎宁酸、1,3-二咖啡酰奎宁酸5种主要酚酸总量7月中旬较高,其中绿原酸量以6月下旬较高,其余均以7月中旬较高。结论 为确定苍耳草药材的适宜采收期提供依据。]]> 2016/4/1 16:24:53 1172true 目的 观察钝叶决明Senna obtusifolia花粉粒形态,测定花粉活力,确定花粉萌发最适条件和花药诱导培养产生诱导愈伤组织的培养条件及其倍性鉴定,为决明单倍体育种奠定基础。方法 采用小孢子压片显微观察花粉粒形态;I₂-KI染色法观测花粉活力并确定活力最大的花蕾大小;液体培养结合显微观察确定花粉萌发的最适培养液组成、温度和萌发时间;醋酸洋红染色法确定小孢子发育时期;花药离体培养确定产生愈伤组织的条件;改良苯酚品红染色法鉴定愈伤组织倍性。结果 钝叶决明花粉粒呈椭球形并具有3条萌发沟,多为2孔萌发;花蕾纵径为1.0~1.1 cm时,花粉的活力最高;花粉萌发的最适培养液是10%蔗糖+1%硼酸,以25℃培养1~3 h为最佳萌发期;小孢子处于单核靠边期时花蕾纵径为0.9~1.1 cm;愈伤组织诱导培养基组成为MS+1.0 mg/L 6-BA+2.0 mg/L NAA+3%蔗糖+0.6%琼脂;愈伤组织增殖培养基组成为MS+1.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L IAA+1.0 mg/L 2,4-D+1.0 mg/L GA₃+3%蔗糖;愈伤组织存在倍性分离现象,具有单倍体和二倍体细胞。结论 钝叶决明花粉萌发的最适培养液是10%蔗糖+1%硼酸;花药离体培养最佳时期为花蕾纵径为0.9~1.1 cm,获得的嵌合体花药愈伤组织为进一步进行决明单倍体诱导和育种奠定了基础。]]> 2016/4/1 16:24:53 1171true 目的 利用ITS 条形码标记技术对当归属药用植物进行鉴别。方法 选取该属32 个物种158 条核糖体内转录间隔区(internal transcribed spacer,ITS)序列进行分子鉴别分析。所得序列运用MEGA 6.0 软件计算种内和种间遗传距离,同时分别构建邻接树(neighbor-joining tree,NJ)、最大似然树(maximum-likelihood tree,ML)和最大简约树(maximum-parsimonytree,MP),分析ITS 序列的鉴别能力和当归属药用植物种间的系统发育关系。结果 当归属物种间ITS 序列最小遗传距离大于种内最大遗传距离,而且系统发育结果显示,每个物种的ITS 基因型序列能较好地聚类为对应于该物种本身的分支,且具有中到高度的支持率,说明ITS 序列能够将当归属物种区分开。结论 ITS 序列可以作为当归属药用植物的DNA 分子条形码标记,将在该属物种的分子鉴定方面发挥重要潜力。]]> 2016/3/28 15:36:01 1170true 目的 研究白桦Betula platyphylla 3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A 还原酶(3-hydroxy-3-methyl-glutaryl-CoA reductase,BpHMGR)全长基因结构特征及编码蛋白性质,揭示其节律表达模式以及对外源NO 信号分子的响应机制。方法 通过RACE技术克隆白桦BpHMGR 基因,应用生物信息学软件对BpHMGR 及其编码蛋白进行详细分析,利用实时荧光定量PCR 定量分析BpHMGR 基因在昼夜节律变化中的表达模式。根据BpHMGR 氨基酸序列构建系统进化树,分析昼夜节律以及外源NO对白桦叶片中BpHMGR 转录水平的影响。结果 BpHMGR 基因全长1 764 bp,包含完整开放阅读框,已上传至NCBI,并获得登录号KJ452334,其编码蛋白由587 aa 组成。白桦BpHMGR 基因与大豆(XP_003519474.1)、葡萄(XP_002275827.1)、苜蓿(XP_003617066.1)亲缘关系较近。结论 BpHMGR 随昼夜周期变化呈现出节律表达特性,在夜晚21:00 时达到峰值。初步揭示了外源NO 能诱导白桦细胞内三萜代谢途径的关键酶BpHMGR 基因上调表达,进而促进三萜产物齐墩果酸的合成。]]> 2016/3/28 15:36:01 1169true 目的 克隆珍稀濒危药用植物铁皮石斛Dendrobium officinale 赤霉素3-氧化酶(gibberellin 3-oxidases,GA3ox)基因(DoGA3ox),并进行生物信息学和表达分析。方法 采用RACE 和RT-PCR 技术获得DoGA3ox 基因cDNA 全长;利用生物信息学软件预测其编码蛋白的理化性质、结构域及亚细胞定位等分子特性;用DNASTAR 7.0 和MEGA 6.0 软件分别对其进行氨基酸多序列比对和进化关系分析;借助实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测基因表达模式。结果 克隆到DoGA3ox基因(GenBank 注册号KT597694),cDNA 全长1 318 bp,编码一条由353 个氨基酸组成的多肽,相对分子质量为39 052.5,等电点6.21;DoGA3ox 蛋白不含跨膜域和信号肽,具有GA3ox 的保守结构域DIOX_N(40~130)和2OG-FeII_Oxy(197~299);DoGA3ox 与大葱、油棕、海枣、野茶树及蓝猪耳GA3ox 蛋白一致性分别为55%、56%、54%、51%、50%,与单子叶植物大葱、油棕和海枣的亲缘关系较近。qRT-PCR 实验结果显示DoGA3ox 基因在铁皮石斛种子共生(非共生)萌发1~3级时,其相对表达量呈现出先升高后降低再升高的趋势,分别为未萌发种子的13.44(5.21)、7.28(2.32)和9.40(6.21)倍,由此可知,该基因在共生萌发种子中的表达量高于非共生萌发种子。结论 首次克隆得到1 个DoGA3ox 基因的全长cDNA,其转录本在共生和非共生不同萌发级别种子中的表达特性说明该基因在铁皮石斛种子萌发中起着重要调控作用。]]> 2016/3/28 15:36:01 1168true 目的 对内蒙古地区野生黄芩Scutellaria baicalensis 的资源进行调查,并估算野生黄芩的储量。方法 采用3S 技术和分层实地调研相结合的方法选取了植被类型、海拔、年降雨量和年均温4 个指标,作为内蒙古地区野生黄芩重要生境划分指标。根据野生黄芩在内蒙古地区的生境适宜性情况,对4 个指标进行分层,各指标均分为最适宜、适宜、次适宜、不适宜4 个层,从不同的层里采用简单随机抽样的方法进行野外调查。结果 建立了基于4 个气象生境因子的野生黄芩资源储量估算模型,并估算内蒙古地区野生黄芩的总资源储量为1.9 万t。结论 该方法可为第4 次全国中药资源普查和基于3S 技术的中药资源多空间尺度模型估算提供重要参数。]]> 2016/3/28 15:36:02 1167true 目的 采用近红外光谱(near infrared spectroscopy,NIRS)技术对川芎药材进行快速质量评价,建立药材中阿魏酸、水分和浸出物量的定量模型,提高川芎药材的质量控制水平。方法 以HPLC 法、减压干燥法和热浸法作为参比分析方法,分别测定川芎中阿魏酸、水分和浸出物量,运用偏最小二乘(PLS)法建立阿魏酸、水分和浸出物量之间的定量校正模型,并对川芎未知样本中各指标的量进行预测。结果 川芎中3 个质控指标模型的相关系数(R)分别为0.913 0、0.905 9 和0.954 4,未知样本预测误差均方根(RMSEP)分别为0.000 3、0.305 6 和2.209 0,相对预测偏差(RSEP)均小于10%,NIRS 模型预测效果良好。结论 研究结果表明NIRS 分析技术可实现川芎药材中阿魏酸、水分及浸出物3 个关键质控指标的快速检测,结果准确可靠。]]> 2016/3/28 15:36:02 1166true 目的 研究离体蒜苗挥发物质对模拟连作胁迫下当归Angelica sinensis 种子发芽特性的影响。方法 采用当归根浸提液处理当归种子模拟连作障碍,用离体蒜苗模拟大蒜挥发物质的化感作用环境,进行当归种子发芽特性研究。结果 当归根浸提液对当归种子的发芽具有明显的抑制作用,且当归根浸提液质量浓度越大,其抑制作用越强;对于未用当归根浸提液处理的当归种子,离体蒜苗挥发物质对当归种子发芽特性的影响基本表现为低质量(蒜苗质量50 g)促进而高质量(蒜苗质量100~200 g)抑制的趋势;对于用当归根浸提液处理过的当归种子,离体蒜苗挥发物质对当归种子发芽特性的影响表现为一定的化感促进作用,当供体蒜苗质量为50~100 g 时,其对当归发芽的促进效应达到极显著水平(P < 0.01),当供体蒜苗质量为200 g 时,促进作用不显著(P < 0.05),但不存在抑制作用。结论 离体蒜苗产生的挥发物质对由当归根浸提液产生的发芽抑制作用具有一定的缓解效应。]]> 2016/3/28 15:36:02 1165true 目的 从铁皮石斛Dendrobium officinale中克隆4-羟基-3-甲基-2-E-丁烯基-1-焦磷酸合成酶(4-hydroxy-3-methylbut-2-en-1-yl diphosphate synthase,HDS)基因,在大肠杆菌中诱导融合蛋白,并探究该基因在铁皮石斛不同组织中的表达规律。方法 采用RT-PCR和RACE等方法获取铁皮石斛HDS(DoHDS)的cDNA全长,利用相关软件和在线网站进行生物信息学分析,使用Real-Time PCR分析DoHDS在不同组织的表达特征,构建原核表达载体pET-28a(+)-DoHDS,转化大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达。结果 成功获得DoHDS的cDNA全长序列,GenBank登录号为KJ161312,全长2666 bp,ORF为2238 bp,编码745个氨基酸。DoHDS在各组织中均有表达,在茎中表达量最高,为原球茎的5倍;SDS-PAGE结果显示诱导产物为1个相对分子质量(82700)与理论值相符的融合蛋白。结论 克隆了DoHDS的cDNA全长序列,探究其在不同组织中的表达模式,建立了原核表达体系,为后续研究DoHDS的功能提供了一定的理论基础。]]> 2016/3/3 15:23:05 1164true 目的 克隆三叶青Tetrastigma hemsleyanum的扩展蛋白家族基因,对其进行器官表达分析,并初步探讨其功能。方法 根据GenBank中登录的扩展蛋白基因保守区域序列设计1对简并引物,以三叶青球形块根cDNA为模板进行RT-PCR扩增,再结合RACE技术,获得三叶青扩展蛋白基因全长cDNA序列,命名为Th-exp。采用半定量RT-PCR和荧光定量PCR分析Th-exp基因在不同器官中的表达情况。结果 克隆获得扩展蛋白家族基因,共782 bp,其中包含630 bp开放阅读框,编码209个氨基酸(GenBank登陆号KP693606)。Th-exp编码的蛋白质具有典型的扩展蛋白结构特征,N端含有8个半胱氨酸的结构域,C端含有4个保守的色氨酸结构域,中间含有组氨酸功能域。Blast分析显示,Th-exp与葡萄、醉蝶花中扩展蛋白基因具有相似性。半定量RT-PCR和荧光定量PCR分析表明,Th-exp在三叶青叶、茎、普通细根和球形块根中均有表达,但球形块根中表达强于其他器官。结论 克隆得到三叶青扩展蛋白家族基因Th-exp全长cDNA,初步预测其参与了三叶青块根的发育过程。]]> 2016/3/3 15:23:05 1163true 目的 以不同产地的14批连翘Forsythia suspensa为材料,运用RAPD技术对其进行遗传多样性研究并构建DNA指纹图谱。方法 采用RAPD技术,从45条RAPD随机引物中进行筛选,以14批连翘进行DNA指纹图谱的分析研究。结果 从45条RAPD随机引物中筛选出11条多态性好的引物,利用这11条RAPD引物进行PCR扩增,共获得80条谱带,平均每个引物扩增出7.27条谱带,其中多态性谱带67条,多态性条带比率为83.8%,是连翘药材资源研究的一种有效分子标记。14批连翘药材间的遗传相似系数(genetic similarity,GS)在0.4875~0.9625,表明遗传多样性比较丰富。聚类结果显示遗传多样性与连翘药材来源地有明显的相关性,而且与其亲缘关系较近有关,符合植物种群分布的一般规律。结论 以14批不同产地连翘药材资源的RAPD扩增谱带为基础,构建连翘药材资源的DNA指纹图谱并进行聚类分析。]]> 2016/3/3 15:23:05 1162true 目的 研究人参根腐菌Fusarium solani和人参锈腐菌Cylindrocarpon destructans对人参总皂苷的化学趋向性响应。方法 采用平板法和孢子悬滴萌发法分别测定了2种病原菌及其孢子在3种趋化参数(质量浓度、温度和pH值)条件下对人参总皂苷的化学趋向性响应。结果 人参根腐菌对低质量浓度的人参总皂苷表现出较强的化学趋向性,趋化移动指数(CMI)为1.2948,病原菌孢子萌发率(SGR)为66%,趋化生长速率(CGR)为0.533,病原菌菌丝生长量(MG)为0.5220 mg/mL;人参锈腐菌则对中质量浓度的人参总皂苷表现出较强的化学趋向性,CMI为1.2556,病原菌SGR为63%,CGR为0.465,MG为0.4494 mg/mL。结论 低、中质量浓度(0.2~20 mg/L)的人参总皂苷对人参根腐菌的化学趋向性有促进作用,人参锈腐菌对4种质量浓度的人参总皂苷均具有化学趋向性响应,而且受此趋化影响下的2种病原菌的SGR、CGR和MG也都得到了显著的提高,但都随皂苷质量浓度的增加而减弱。]]> 2016/3/3 15:23:05 1161true 目的 比较过路黄Lysimachia christinae和广金钱草Desmodium styracifolium的化学成分异同,为阐明二者药效异同提供参考。方法 采用RP-HPLC建立过路黄和广金钱草的HPLC-UV指纹图谱和HPLC-ELSD指纹图谱,比较二者2种指纹图谱的差异。结果 过路黄的HPLC-UV指纹图谱和其HPLC-ELSD指纹图谱的差异很大,UV检测到的强峰并非ELSD检测到的强峰,广金钱草亦然;过路黄的HPLC-UV指纹图谱有14个共有峰,HPLC-ELSD指纹图谱有5个共有峰;而广金钱草的HPLC-UV指纹图谱有28个共有峰,HPLC-ELSD指纹图谱有18个共有峰;13批过路黄的指纹图谱相似度较13批广金钱草的相似度差;过路黄和广金钱草的HPLC-UV指纹图谱有4个共有峰,二者的HPLC-ELSD指纹图谱有2个共有峰。结论 HPLC-ELSD指纹图谱能更好地反映过路黄和广金钱草中量较高的非挥发性成分组成的全貌;市售过路黄的质量差异大,而市售广金钱草的质量稳定;过路黄和广金钱草可能含有2种量较高的相同成分,作为二者治疗相同病症的物质基础,但该2种药材应该各具偏性,各有独特的治疗功用,应明确区分。]]> 2016/3/3 15:23:05 1160true 目的 建立透骨草药材来源中狭山野豌豆Vicia amoena超高效液相色谱(UPLC)指纹图谱,并与其余5种来源品种进行比较,为透骨草药材质量控制提供参考依据。方法 用Eclipse Plus C₁₈ RRHD(50 mm×2.1 mm,1.8μm)色谱柱,以乙腈-0.1%甲酸溶液为流动相梯度洗脱,体积流量0.2 mL/min;柱温30℃;检测波长340 nm。测定10个不同产地狭山野豌豆指纹图谱,采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004A版)计算相似度,并用对照品和液质联用技术指认色谱峰;同条件下比较鉴别透骨草药材其他5种来源品种。结果 建立了狭山野豌豆指纹图谱,采用超高效液相色谱-电喷雾-四级杆-飞行时间串联质谱仪(UPLC-ESI-Q-TOF-MS)对14个共有峰中的6个峰进行初步归属,确定为绿原酸、杨梅苷、金丝桃苷、异槲皮苷、山柰苷、槲皮苷;透骨草药材其他5种来源品种与狭山野豌豆指纹图谱的共有模式明显不同。结论 该方法重现性好、特征性强,可用于透骨草药材全面质量评价。]]> 2016/3/3 15:23:06 1159true 目的 基于前期对灰毡毛忍冬Lonicera macranthoides转录组测序结果,从灰毡毛忍冬RNA中克隆灰毡毛忍冬MADS-box基因家族蕾期延长相关基因AGL15,并对其进行生物信息学及表达分析。方法 对灰毡毛忍冬总RNA进行反转录酶链式反应(reverse transcription-PCR,RT-PCR)和cDNA末端快速扩增反应(rapid amplification of cDNA ends,RACE),获得完整的开放阅读框(ORF)。运用生物信息学的方法对该序列进行同源性分析和相似性比较,预测编码蛋白,并对其进行各种理化性质分析。运用半定量PCR测得该基因在灰毡毛忍冬不同部位的表达情况。结果 获得AGL15基因,ORF长795 bp,编码264个氨基酸,与葡萄Vitis vinifera中MADS-box基因家族AGL15基因相似性最高,且包含MADS和K-box的保守序列。AGL15蛋白无跨膜区域,定位于细胞质中,在灰毡毛忍冬各部位均有表达。结论 首次从灰毡毛忍冬中克隆得到可能控制蕾期延长的基因,分析了其在灰毡毛忍冬不同部位表达差异性,为灰毡毛忍冬蕾期延长研究提供参考。]]> 2016/2/18 9:07:14 1158true 目的 评价DNA条形码通用序列对地黄属植物Rehmannia Libosch. ex Fisch. et Mey.的鉴定作用,探讨中药地黄R. glutinosa的栽培起源。方法 对地黄属物种的ITS、psbA-trnH、rbcL和matK序列扩增和测序,比较各序列在种内和种间变异。采用最近距离法、相似性搜索法、构建Neighbor-Joining(NJ)系统聚类树等方法进行鉴定分析。结果 对比地黄属各种的rbcL和matK序列,结果显示rbcL序列完全一致,matK序列同源性为99.9%~100%。ITS和psbA-trnH序列的平均种间变异均大于平均种内变异,且2条序列的种间最小变异均大于种内最大变异。在ITS系统树上,地黄的所有样品与茄叶地黄聚在一支,支持率为96%;psbA-trnH和联合树上,地黄的所有样品聚为一单系分支(支持率为55%和58%)。地黄与茄叶地黄聚在的这一分支分别与裂叶地黄和高地黄聚在一支(在ITS和联合树上支持率为55%和68%),与裂叶地黄和天目地黄聚在一支(在psbA-trnH树上支持率为80%)。ITS和联合树支持栽培地黄的3个品种与来源于河南温县、郑州、南阳和北京野生地黄居群聚在一支,支持率为51%和69%。结论 叶绿体基因rbcL和matK不适合作为条形码对地黄属进行鉴定,ITS和psbA-trnH序列可以作为中药材地黄与同属近缘种进行鉴定的条形码序列。裂叶地黄和天目地黄可能是四倍体地黄的2个亲本来源,栽培的地黄品种可能起源于河南温县区域的野生群体。]]> 2016/2/18 9:07:14 1157true 目的 克隆芍药萜类物质生物合成关键酶法呢基焦磷酸合酶(farnesyl pyrophosphate synthase,FPPS)cDNA全长序列并对其进行生物信息学分析。方法 根据芍药转录组测序数据,设计一对特异性PCR引物,应用RT-PCR技术扩增出芍药FPPS基因目标条带并克隆至pMD18-T载体上,菌落PCR和质粒PCR鉴定出阳性重组子后进行序列测定及序列同源性搜索、分子系统进化树构建、结构域搜索及3D结构预测等生物信息学分析。结果 测序结果表明芍药FPPS基因全长1315bp,含60 bp的5'-UTR、1050 bp的CDS和205 bp的3'-UTR,共编码349个氨基酸,GenBank登录号为KP708571;Blastn和Blastp分析结果显示芍药FPPS(KP708571)及其编码的蛋白(AKJ26301)在核苷酸水平和氨基酸水平上与多种植物的FPPS基因和FPPS蛋白具同源性;分子进化树分析结果表明芍药FPPS蛋白与其他物种FPPS蛋白的亲缘关系相对较远;预测芍药FPPS蛋白相对分子质量为40200,等电点为5.33,是一个定位于胞液、不含跨膜结构域、不含信号肽分子的亲水性、稳定蛋白;发现芍药FPPS含有底物结合位点、底物-Mg²⁺结合位点、催化位点、富含天冬氨酸位点1及富含天冬氨酸位点2共7个保守结构域;3D结构中α-螺旋所占比例高且α-螺旋之间由β-转角(loop)相连接;中央腔(central cavity)由大约10个核心α-螺旋排列而成。结论 首次从芍药中克隆了FPPS基因并对其进行了初步的生物信息学分析。]]> 2016/2/18 9:07:14 1156true 目的 研究重金属镉(Cd)胁迫对人参生长及生理特性的影响。方法 通过筒栽试验,对不同质量分数Cd处理(0、0.3、1.0、2.0、4.0 mg/kg)下人参的生物量、叶色值(SPAD)、抗氧化酶活性及丙二醛(MDA)进行测定与分析。结果 随着Cd胁迫质量分数的增加,人参相对生长率呈现逐渐降低的趋势,与Cd添加质量分数之间呈显著负线性相关(P<0.05);人参叶片SPAD值呈降低趋势;而人参不同部位抗氧化酶活性及MDA量均有不同程度的升高,根和叶的MDA量与Cd质量分数呈显著正线性相关(P<0.05)。同一Cd水平处理下,人参不同部位MDA量表现为叶>茎>根。结论 人参具有适应一定Cd质量分数(≤1.0 mg/kg)胁迫土壤环境的能力,此时可增强自身抗氧化酶活性等生理生化反应来清除活性氧,保持膜稳定,缓解Cd胁迫带来的伤害;然而在处理质量分数>1.0 mg/kg时,人参MDA量显著增加,氧化损伤严重,影响植物生长,导致人参生物量下降。]]> 2016/2/18 9:07:14 1155true 目的 建立菊苣Cichorium intybus中绿原酸、秦皮乙素、异绿原酸B和异绿原酸A的一测多评方法。方法 以秦皮乙素为内参物,分别建立绿原酸、异绿原酸B和异绿原酸A的相对校正因子,并用该校正因子进行绿原酸、异绿原酸B和异绿原酸A量的计算(计算法),实现一测多评;同时采用外标法测定菊苣中4种成分的量(实测法),并比较计算值与实测值间的差异性,验证所建立方法的准确性、适用性和重复性。结果 8批菊苣中绿原酸、异绿原酸B和异绿原酸A量的计算值与实测值无显著差异。实验建立的菊苣中绿原酸、秦皮乙素、异绿原酸B和异绿原酸A的一测多评法准确性、可行性、重复性好。结论 一测多评法测定菊苣中绿原酸、秦皮乙素、异绿原酸B和异绿原酸A的质量评价模式得到了验证,可用于菊苣药材的质量控制。]]> 2016/2/18 9:07:14 1154true 目的 采用RAPD和ISSR分子标记进行野生红景天种间亲缘关系及种内的遗传多样性分析。方法 用CTAB法提取基因组DNA,然后通过筛选得到的11个RAPD及11个ISSR引物对不同采集地的4种野生红景天进行遗传多样性分析。结果 11条RAPD引物共扩增出96条条带,多态性百分比为90.62%;11条ISSR引物共扩增出102条条带,多态性百分比为100%。ISSR多态性的检测能力优于RAPD;聚类分析结果表明,ISSR法、RAPD和ISSR联用法均将17个样品聚为3大类;RAPD将样品聚为4大类。结论 2种标记均可用于红景天属植物种间亲缘关系与种内遗传多样性研究;4种红景天种内存在一定的遗传差异,种间基因流较小。]]> 2016/2/2 13:17:37 1153true 目的 对木瓜属药用植物进行ITS2、psbA-trnH序列分析,为其分子鉴定提供依据。方法 对5种木瓜属药用植物的19个样本ITS2序列进行PCR扩增和测序,用MEGA6.0计算其种间、种内的Kimura 2-parameter(K2P)距离,及各序列变异位点并构建系统发育树,并预测ITS2二级结构。结果 ITS2序列间存在明显差异,psbA-trnH 序列间也存在稳定差异;构建的系统发育树显示木瓜属的不同基原样本各聚为一支,能很好将5种植物区分,显示出单系性;比较木瓜属5种植物的ITS2二级结构存在明显差异。结论 ITS和psbA-trnH序列可以有效准确鉴别5种木瓜属植物。]]> 2016/2/2 13:17:38 1152true 目的 优化青叶胆Swertia mileensis组织培养快速繁殖技术,同时比较不同交配方式后代植株的再生能力,从而探讨青叶胆片断化居群繁殖保障机制。方法 以自交、近交、远交和自然结实种子为材料,相同方法消毒后接种于空白MS培养基上,60 d后统计各组萌发率;在此基础上,以各组无菌苗带节茎段为外植体,采用正交试验考察不同来源外植体在添加不同植物激素及质量浓度组合的MS培养基中诱导愈伤组织及丛芽分化能力。结果 自交、近交、远交和自然结实种子萌发率之间无显著性差异(P>0.05);适宜的愈伤组织诱导培养基为MS+ZT 0.5 mg/L+2,4-D 0.05 mg/L,在此培养条件下,自交、近交、远交和自然结实种子苗带节茎段愈伤组织诱导率分别达100%、96.67%、96.55%和96.29%,各组间无显著性差异;适宜的丛芽发生培养基为MS+BA 2.0 mg/L+KT 0.1 mg/L+NAA 1.0 mg/L,4种来源不同的愈伤组织丛芽分化率均为100%;生根则在1/2 MS+NAA 1.0 mg/L中进行,4种来源不同的试管苗生根率均为100%,生根苗在生长势上亦无明显差别。结论 优化的青叶胆组织培养快速繁殖技术,为保护其野生资源、种苗繁殖提供了有效途径,同时从植物生理学角度初步推测青叶胆近交的获益可以补偿与近交相伴的适合度损失,其后代植株在再生能力方面与异交无显著差异。]]> 2016/2/2 13:17:38 1151true 目的 以具有产石杉碱甲能力的蛇足石杉离体叶状体为研究对象,探究蛇足石杉离体培养物累积石杉碱甲的影响因素及生产动态变化规律。方法 应用正交设计对蛇足石杉离体培养叶状体的植物生长物质浓度进行筛选,采用HPLC法对叶状体提取物中的目标成分进行定性定量检测,用Logistic模型拟合叶状体的生长曲线。结果 以白光为主要光源,光照时间为12 h/d,1/4 MS固体培养基,为蛇足石杉叶状体产石杉碱甲的最佳条件,相对增殖率达到3 174.5%,石杉碱甲累积量为72.45 μg/L;蛇足石杉离体叶状体增殖的生长曲线呈“S”形,继代周期以50 d左右为最适;60 d后生长进入稳定阶段,累积石杉碱甲量明显加快,直至85 d达到最大值7.453 μg/g,即叶状体先快速增殖,后累积石杉碱甲。结论 叶状体累积石杉碱甲与叶状体增殖呈非生长偶联型,叶状体增长规律符合Logistic生长模型,最大的比生长速率(μ_max)为0.071·d^-1。]]> 2016/2/2 13:17:38 1150true 目的 建立同时测定延胡索中原阿片碱、黄连碱、黄藤素、去氢延胡索甲素、D-四氢药根碱、延胡索乙素和延胡索甲素7种生物碱类成分的HPLC方法,在此基础上,建立一测多评法的方法学考察方式,验证该方法在延胡索质量控制中应用的可行性和技术适用性。方法 以延胡索所含的7种成分为指标成分,采用2种校正方法分别建立各成分与延胡索乙素的相对校正因子(f_k/s),计算各成分的量,实现一测多评;同时采用外标法测定延胡索中该7种成分的量,并比较2种一测多评法所得计算值与实测值的差异,以验证一测多评法的准确性和可行性。结果 建立了延胡索中7种生物碱类成分一测多评法方法学的考察模式;不同的色谱柱和仪器一测多评法的计算值与外标法实测值之间没有显著性差异。结论 同时测定延胡索中原阿片碱、黄连碱、黄藤素、去氢延胡索甲素、D-四氢药根碱、延胡索乙素和延胡索甲素7种生物碱的一测多评法可靠,结果准确,可用于延胡索药材的质量控制。]]> 2016/2/2 13:17:38 1149true 目的 克隆铁皮石斛DoWRKY5基因,并对生物信息学和表达模式进行分析。方法 通过转录组测序和RT-PCR方法相结合首次从铁皮石斛中克隆到一个WRKY基因,利用生物信息学工具对其进行分析,并利用荧光定量PCR分析其在铁皮石斛中的组织表达模式及在低温胁迫、脱落酸(ABA)胁迫和蔗糖渗透胁迫下的表达模式。结果 获得长1 336 bp的DoWRKY5基因转录因子cDNA全长序列,开放阅读框为834 bp,编码277个氨基酸残基,含有一个WRKY基因保守结构域和一个C₂H₂锌指结构域,属于WRKY基因家族的第II类成员。qRT-PCR分析表明,DoWRKY5基因在铁皮石斛根、茎、叶中均有表达,但在叶中的表达量最高。在不同低温和4 ℃不同时间诱导处理后,该基因表达量均显著升高,并且该基因在ABA胁迫和蔗糖渗透胁迫下均可被诱导表达。结论 DoWRKY5基因在铁皮石斛应答低温胁迫等多种非生物胁迫中可能起重要的调控作用,为进一步研究铁皮石斛的抗寒机制和抗寒性品种的选育提供基础。]]> 2016/1/21 14:21:31 1148true 目的 建立红花龙胆Gentiana rhodantha不同药用部位UV-Vis和UPLC指纹图谱,结合多变量分析研究红花龙胆根、茎、叶和花中化学成分的整体分布与质量分数变化。方法 Shim-pack XR-ODS III液相色谱柱(150 mm×2.0 mm,2.2 μm)。流动相为0.1%甲酸水溶液和乙腈,梯度洗脱,柱温40 ℃;检测波长242 nm,进样量0.3 μL;体积流量为1.00 mL/min。电喷雾离子源(ESI)正/负离子模式,多反应监测(MRM)模式,喷雾电压3.5 kV,脱溶剂管温度250 ℃,鞘气和干燥气体积流量分别为3.0 L/min和15.0 L/min,碰撞气体积流量0.15 mL/min;UV-Vis指纹图谱测定,检测波长200～500 nm,狭缝1.0 nm,采样间隔0.5 nm;采用偏最小二乘判别分析(PLS-DA),变量投影重要性准则(VIP)和系统聚类(CA)对不同产地药材进行分类研究。结果 UPLC和UV-Vis方法学考察显示,精密度、稳定性、重复性试验RSD均小于2.00%;马钱苷酸、芒果苷和当药苷加样回收率在97.89%～102.71%,RSD在1.09%～2.88%;11点平滑＋一阶导数预处理为最佳光谱预处理方法,PLS-DA模型R²_cal=0.931 5,RMSEE=0.302,R²_val=0.901,RMSEP=0.341,根、茎、叶和花UV-Vis光谱呈现指纹特性;UPLC指纹图谱相似度分析显示植株化学成分分别在叶部和花部较接近,根部和茎部较相似。不同产地红花龙胆根部UPLC指纹图相似性系数变化范围大,药材质量不稳定。马钱苷酸、芒果苷在叶片和花中量较高[(1.46±0.42)、(51.59±15.45)mg/g];当药苷在根中量较高 [(4.41±3.24)mg/g]。叶片总体呈现较高的化学成分量,马钱苷酸、芒果苷和当药苷量对不同药用部位的区分均有较大贡献。聚类分析显示,不同产地红花龙胆植株化学成分呈现一定地理特征,高海拔地区的药材和低海拔地区的药材成分整体差别较大,聚为不同类群。结论 UPLC和UV-Vis指纹图谱相结合可反映红花龙胆根、茎、叶和花中化学成分的整体分布与质量分数变化,研究结果为野生红花龙胆资源的质量评价提供方法和理论依据。]]> 2016/1/21 14:21:32 1147true 目的 考察不同加工方法对何首乌中多元功效物质的影响及其变化规律,以优化及建立何首乌适宜的产地加工方法及其条件。方法 采用胶束电动毛细管色谱二极管阵列检测法(MEKC-DAD)测定12种不同加工方法的何首乌药材中二苯乙烯苷、游离型蒽醌、结合型蒽醌及儿茶素;将多元功效物质分析结果标准化处理,进行主成分分析(PCA),对不同加工方法进行综合评价。结果 不同加工方法的何首乌中多元功效物质的量变化呈现一定规律性,二苯乙烯苷的量及结合蒽醌的总量在厚片晒干中最高;游离蒽醌的总量在厚片70 ℃烘干中最高;儿茶素的量在薄片40 ℃烘干中较高;何首乌药材厚片晒干综合评价指数明显高于其他加工样品。结论 加工方法对何首乌化学成分具有一定的影响,可根据目标成分优选何首乌适宜产地加工方法。]]> 2016/1/21 14:21:32 1146true 目的 建立一测多评法同时测定黄连及其炮制品中6种生物碱的量。方法 采用高效液相色谱法,以盐酸小檗碱为内参物,测定其与盐酸药根碱、盐酸非洲防己碱、盐酸表小檗碱、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀的相对校正因子,利用该相对校正因子计算其他5种生物碱的量,同时利用外标法测定黄连及其炮制品中6种生物碱的质量分数,比较2种测定方法的差异,验证一测多评法的可行性和准确性。结果 在线性范围内,盐酸小檗碱与盐酸药根碱、盐酸非洲防己碱、盐酸表小檗碱、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀的相对校正因子分别为1.131、0.999、1.011、1.076、1.025,在不同实验条件下相对校正因子重现性良好,6种生物碱成分量计算值与实测值间无显著性差异。结论 一测多评法同时测定黄连及其炮制品中6种生物碱可行而且准确。]]> 2016/1/21 14:21:32 1145true 目的 研究北苍术药材中苍术素、苍术酮和β-桉叶醇的GC测定及特征图谱研究方法,为科学评价其质量提供依据。方法 采用GC色谱法,以Agilent HP-5毛细管色谱柱,载气为氮气,FID检测器,程序升温,分流进样,进样口温度250 ℃,检测器温度250 ℃,柱温130 ℃;外标法,测定承德与其他市场采购的25批北苍术样品中苍术素、苍术酮和β-桉叶醇的量;建立特征图谱并利用中药色谱指纹图谱评价系统进行相似度分析。结果 建立了北苍术药材苍术素、苍术酮和β-桉叶醇量测定和GC特征图谱研究方法,指认了9个特征峰;β-桉叶醇线性范围20.00～406.10 μg/mL(r=0.999 9),平均加样回收率为100.75%,RSD为1.17%,最低检测限0.12 ng;苍术酮线性范围35.00～348.70 μg/mL(r=0.999 5),平均加样回收率为99.84%,RSD为1.29%,最低检测限0.04 ng;苍术素线性范围在16.46～329.30 μg/mL(r=0.999 6),平均加样回收率为100.12%,RSD为0.88%,最低检测限0.06 ng。结论 建立的苍术素、苍术酮、β-桉叶醇定量测定和特征图谱方法简便、灵敏、稳定性和重复性良好,测定结果准确可靠。]]> 2016/1/21 14:21:32 1144true 目的 对来自主要龙葵产区龙葵种质资源的转录间隔区(internal transcribed spacer,ITS)和trnH-psbA基因间隔区序列进行系统发育学分析,为龙葵资源的合理利用和道地性评价提供理论基础。方法 用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)的方法扩增龙葵ITS区和trnH-psbA的DNA序列,并与美国国家生物技术信息中心(NCBI)数据库进行比对获取ITS1+ITS2和trnH-psbA的DNA序列。用邻接法(Neighbor joining,NJ)和最大简约法(maximum parsimony,MP)构建系统发育树,用Kimura two-parameter(K2-P)模型分析遗传距离,用Clustal X和DNAman软件进行多重比对。结果 17个龙葵样品的ITS1序列长度均为230 bp,ITS2序列长度均为206 bp,trnH-psbA序列长度为446 bp或447 bp,3个序列分别存在7个、2个和3个变异位点。系统发育的方法将中国龙葵种质资源聚为3个类群,这些类群与其所处的纬度存在一定的相关性。遗传距离的分析结果显示来自广东梅州的样品与来自北京和河北等地的样品存在最大的遗传距离。结论 系统发育和变异位点的分析为中国龙葵资源的利用和进化研究,以及龙葵资源的道地性评价提供了理论基础,变异位点的分析还可应用于相关种质资源的鉴定。]]> 2016/1/7 10:20:14 1143true 目的 研究不同种质资源金线莲Anoectochilus roxburghii的遗传进化关系,开发高效、实用的分子标记方法。方法 在20个不同产地金线莲种质资源的基础上开发RAPD标记,并将其换成特异SCAR标记。结果 从100条RAPD随机引物中筛选出28条具有显著多态性的引物,扩增得到135条多态性位点。RAPD聚类分析显示,当20个金线莲种质资源平均遗传距离为0.748时,可以聚为6类,同一区域起源金线莲基本归为一类,表明不同区域金线莲种质资源存在着显著遗传差异。在此基础上,从多态性RAPD条带中挑选出5个特异位点转换为SCAR标记,并在不同金线莲种质资源中进行验证,结果显示5条SCAR标记具有显著的种质资源特异性和扩增模式。结论 所筛选的特异RAPD-SCAR标记为加快金线莲优良品种选育进程奠定坚实基础。]]> 2016/1/7 10:20:14 1142true 目的 建立一测多评(QAMS)法测定淫羊藿中的黄酮类成分,以提高淫羊藿药材的质量控制水平。方法 采用HPLC法,检测波长为270 nm,在一定的线性范围内,测定淫羊藿苷与朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C的相对校正因子,并考察不同色谱柱、不同仪器测定各成分相对校正因子的重现性,以淫羊藿苷为对照品,用所建立的相对校正因子计算淫羊藿药材中朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C的量;同时采用外标法测定100批淫羊藿药材中4种成分的量,以验证QAMS法的准确性和科学性。结果 所建立各成分的相对校正因子重现性良好,分别为1.352、1.384、1.340,其RSD值均小于5%,采用该校正因子计算的朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C的量与外标法实测值之间没有显著性差异。结论 该方法准确可靠,简便可行,且节约对照品及检测成本,该方法可以作为淫羊藿药材多指标成分测定质量控制方法。]]> 2016/1/7 10:20:14 1141true 目的 建立王不留行毛状根培养体系。方法 分别用发根农杆菌R15834、R1601、R1000、A4感染王不留行叶片产生毛状根,考察不同理化因子对其生长的影响,并利用HPLC测定王不留行中黄酮苷的量。结果 发根农杆菌R1601转化王不留行叶片的诱导率最高,pH值为6.0,蔗糖浓度为3%的MS培养基培养毛状根增殖速度最快,王不留行毛状根中王不留行黄酮苷量略高于种子中的量。结论 王不留行成功诱导毛状根,为进一步筛选适宜的王不留行发根培养体系并调控次生代谢产物的研究奠定了基础。]]> 2016/1/7 10:20:14 1140true 目的 采用UPLC-UV-ELSD法研究6个产地28个批次西洋参药材,对不同产地西洋参采用指纹图谱聚类分析、主成分分析(PCA)及相似度评价等技术进行研究,为西洋参药材的品质评价及生产区划提供参考。方法 采用Waters Acquity UPLC色谱系统,TUV检测器,ELSD检测器,色谱柱为ACQUITY UPLC^TM BEH C₁₈(50 mm×2.1 mm,1.7μm),以乙腈-水进行二元梯度洗脱,检测波长203 nm,柱温30℃,漂移管温度为50℃,喷雾器参数50%,氮气压力为275.8 kPa(40 psi)。结果 建立了西洋参的UPLC特征指纹图谱共有模式,标定12个共有峰,采用10个对照品指认了10个共有峰,PCA分析结果显示,北京、吉林、黑龙江地区的西洋参中人参皂苷Rg₁、Re、Rc、Rb₂、Rb₃等成分要区别于美国、山东、陕西地区的西洋参;而美国、山东、陕西产区西洋参中人参皂苷Rg₂、Rb₁、Rd区别于北京、吉林、黑龙江地区。结论 所建立色谱条件稳定性及重复性良好,可为西洋参药材的质量评价及质量控制提供依据。]]> 2016/1/7 10:20:15 1139true 目的 克隆三七Panax notoginseng（Burk）F.H.Chen多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白（polygalacturonase-inhibiting protein，PGIP）基因（PnPGIP）的全长cDNA序列，分析该基因的表达特性。方法 根据三七中编码PGIP的EST（expressed sequence tag）序列设计引物，采用cDNA末端快速扩增技术克隆PnPGIP基因的全长cDNA序列；用qRT-PCR分析PnPGIP基因的表达水平。结果 PnPGIP基因的cDNA全长为1 171 bp，含有981 bp的开放阅读框，13 bp的5’-非翻译区以及177 bp的3’-非翻译区，编码含326个氨基酸的蛋白质，PnPGIP蛋白的相对分子质量约为36 770，等电点约为5.83；qRT-PCR分析结果显示，PnPGIP基因的表达量分别在三七接种茄腐镰刀菌和人参链格孢后4 h和2 h内迅速上升；此外，信号分子茉莉酸甲酯（methyl jasmonate，MeJA）、乙烯利（ethylene，ETH）、H₂O₂、水杨酸（salicylic acid，SA）处理均能不同程度地诱导PnPGIP基因的表达水平。结论 PnPGIP基因在转录水平响应茄腐镰刀菌和人参链格孢的侵染，并受几种逆境胁迫相关信号分子的诱导，PnPGIP基因可能参与三七对茄腐镰刀菌和人参链格孢的防卫反应。]]> 2016/12/24 9:00:14 1138true 目的 研究外源性镉（Cd）对三七主要药效成分合成中关键酶2，3-氧化鲨烯被达玛烯二醇合成酶（DS）和细胞色素P450单加氧酶（P450）基因表达的影响。方法 设置9个Cd的质量分数梯度（0.0、0.1、0.3、0.6、1.0、3.0、6.0、10.0、30.0 mg/kg）分别对三七进行胁迫实验，两年后采集成熟三七，通过qRT-PCR检测手段对其根部DS及P450基因进行表达量测定，并以GAPDH基因作为内参基因进行DS及P450基因相对表达量的计算，通过相关性分析计算DS和P450基因表达与三七主要药效成分三七皂苷R₁、人参皂苷Rb₁、人参皂苷Rg₁以及总皂苷的相关性。结果 Cd在低质量分数下能促进DS的表达，高质量分数下抑制DS的表达；随着Cd质量分数的增加，对P450表达的抑制作用更加明显；而DS和P450基因表达与三七主要药效成分三七皂苷R₁、人参皂苷Rb₁、人参皂苷Rg₁以及总皂苷无显著相关性（P>0.5）。结论 重金属Cd对三七药效成分中关键酶DS和P450基因表达影响不同，对同一种酶，Cd质量分数不同其影响也不同。但主要药效成分并未因此受明显影响。]]> 2016/12/24 9:00:14 1137true 目的 基于ISSR分子标记技术研究药用植物月季花、玫瑰及其同属近缘种的遗传多样性，构建它们之间系统发育关系，为蔷薇属种质资源分子鉴定及育种提供参考。方法 应用ISSR分子标记技术对药用植物月季花、玫瑰及其同属近缘种的15个种33个样品进行分析，利用POPGEN软件分析Nei’s基因遗传多样性指数（H）等遗传信息参数，应用NTSYS软件构建亲缘关系UPGMA聚类图。结果 6条引物共检测到110个位点，其中多态性位点109个，多态位点百分率（PPB）为99.09%。药用植物月季花、玫瑰及其同属近缘种的种群间H平均值为0.370 5，Shannon's多样性信息指数（I）的平均值为0.546 4，种群间基因分化系数（G_st）的平均值为0.886 8，基因流（N_m）的平均值为0.063 8，遗传距离（D）的变化范围为0.169 1～0.730 2，聚类分析结果显示蔷薇属15个种，在遗传相似系数（GS）0.60处分成6个组。结论 药用植物月季花、玫瑰及其同属近缘种具有丰富的遗传多样性，聚类分析与基于形态特征的蔷薇属属下的分类学研究结果相吻合，ISSR分子标记可以有效鉴别药用植物月季花、玫瑰及其同属近缘种，为蔷薇属植物资源的收集和种间分类提供理论依据。]]> 2016/12/24 9:00:14 1136true 目的 构建红花悬浮细胞体系，为进一步研究红花的功能基因搭建平台。方法 用红花无菌子叶作为外植体进行愈伤组织培养，选择淡黄色、质地疏松、增殖速度快的愈伤组织为材料进行悬浮培养，考察激素浓度、愈伤起始接种量、pH值、细胞活力对红花悬浮细胞体系的影响以及不同浓度茉莉酸甲酯（MeJA）刺激对悬浮细胞生长曲线的变化。采用UPLC-Q-TOF/MS法对红花悬浮细胞培养体系进行初步化学成分分析。结果 红花悬浮细胞培养的最适宜配方是MS+1.0 mg/L TDZ+0.1 mg/L NAA，最适宜pH值为5.5～6.0，最适宜接种量为0.02 g/mL培养体系；不同浓度的MeJA刺激对细胞增殖率影响较大，50 μmol/L MeJA能提高悬浮细胞增殖率，500 μmol/L MeJA能对细胞增殖则有明显的抑制作用。从红花悬浮细胞培养体系中初步鉴定出13种化合物。结论 利用红花子叶能建立较好的悬浮细胞培养体系，适宜浓度的MeJA刺激可提高悬浮细胞增殖率。]]> 2016/12/24 9:00:14 1135true 目的 对川产道地药材川牛膝资源的适宜性进行评价，为中药资源监测提供参考。方法 本实验以四川省为例，利用遥感和地理信息系统（GIS）技术，结合适宜川牛膝生长的生态环境因子，采用层次分析法和空间分析法，从地形、气候、土壤、植被4个方面对川牛膝适宜性分布进行研究，按照不同指标因子分等，得到四川省川牛膝适宜区分等图，并结合野外实测进行验证，对道地药材川牛膝进行研究。结果 四川省的川牛膝资源主要适宜分布在乐山、雅安、凉山彝族自治州、宜宾等19个市、州，共包含91个县区，适宜性分布总面积约为3 633.52 km²，占四川省总面积的0.76%。根据相关数据、文献资料记载和野外调查研究可以得出，通过遥感与GIS技术分析所得适宜性结果与川牛膝资源实际分布范围基本吻合。结论 利用遥感与GIS技术能够准确、快速地对中药材进行适宜性分析，该方法具有可行性，可为全面调查川牛膝资源和其他中药材资源的分布、保护以及合理开发利用提供数据支持与科学依据。]]> 2016/12/24 9:00:14 1134true 目的 利用超高效液相色谱配置二极管阵列检测器，旨在建立同时测定黑果腺肋花楸浆果中原花青素B1、原花青素B2、原花青素B4、芦丁和槲皮素的方法。方法 色谱柱为ACQUITY UPLC^® HSS T3 C₁₈色谱柱（100 mm×2.1 mm，1.8 μm）；甲醇-0.03%磷酸水溶液为流动相，梯度洗脱；柱温35℃；体积流量为0.2 mL/min；检测波长：原花青素B1、原花青素B2和原花青素B4为280 nm，芦丁和槲皮素为360 nm。结果 原花青素B1、原花青素B2、原花青素B4、芦丁和槲皮素分别在2.2～44.0 μg/mL（r=0.999 2）、50～1 000 μg/mL（r=0.999 5）、3.6～54.0 μg/mL（r=0.999 2）、7.4～148.0 μg/mL（r=0.999 4）和2.1～42.0 μg/mL（r=0.999 7）呈良好的线性关系，平均回收率分别为101.23%、99.64%、102.31%、98.74%和103.53%，RSD分别为2.13%、1.23%、2.89%、2.96%、2.64%。黑果腺肋花楸浆果中原花青素B1、原花青素B2、原花青素B4、芦丁和槲皮素的平均质量分数分别为129.78、3 834.99、196.02、134.40、79.10 μg/g。结论 该方法操作简单、结果准确，具有较好的重复性和稳定性，可用于同时测定黑果腺肋花楸浆果中5种主要有效成分，将为黑果腺肋花楸质量控制提供科学依据。]]> 2016/12/24 9:00:14 1133true 目的 构建草珊瑚Sarcandra glabra叶片全长cDNA文库，进一步发掘与草珊瑚代谢及抗逆相关的基因，为草珊瑚功能基因的发现提供实验基础。方法 以草珊瑚的嫩叶为实验材料，利用SMART法（即Clontech公司SMARTer试剂盒）构建草珊瑚全长cDNA文库。利用ABI3730 DNA序列分析测序获得大量的EST序列，利用生物信息分析方法对EST序列进行功能注释。结果 构建了草珊瑚叶片的全长cDNA文库，经过鉴定草珊瑚cDNA文库的文库滴度为1.14×10⁷ cfu/mL，平均插入片段为1 000 bp。利用该文库测序了221个单克隆，共获得EST序列177条，拼接出151个单一序列；利用NCBI数据库进行同源比对分析，共有119条（79%）与已知基因有显著的同源性，进行GO功能注释，显示其表达术语涉及了细胞生长，信号转导，蛋白质合成、转录，抗逆反应以及能量代谢等。结论 构建了符合要求的草珊瑚叶片全长cDNA文库，并对相关EST序列进行了生物信息学分析，为草珊瑚基因组学研究提供一定的参考。]]> 2016/12/3 17:27:48 1132true 目的 克隆和分析7种斑叶兰属药用植物的ITS序列，为该属植物的分子鉴定提供依据。方法 利用PCR法克隆ITS序列，在测序的基础上，借助生物信息学软件进行序列分析和系统发育分析。结果 7种斑叶兰属植物的ITS全长为700~702 bp，ITS1的长度为239~240 bp，ITS2为298~300 bp，而5.8 S的长度十分保守，均为162 bp；序列中检测到可变位点107个，其中信息位点34个。7种斑叶兰属植物的遗传距离为0.006~0.110，大花斑叶兰与高斑叶兰的遗传距离最大，亲缘关系最远，而斑叶兰和小斑叶兰的遗传距离最小，关系最近。结论 克隆到7种斑叶兰属药用植物的ITS序列，它们信息位点丰富，这些位点可将7种植物完全区分。]]> 2016/12/3 17:27:48 1131true 目的 建立基于HPLC指纹图谱的生地黄的质量评价方法，并通过HPLC-ESI-MS技术对生地黄药材中的化学成分进行定性分析。方法 生地黄样品采用甲醇超声提取，采用Agilent Extend C₁₈（250 mm×4.6 mm，5 μm），以乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相梯度洗脱，检测波长为215 nm，对15批次不同来源生地黄药材进行相似度评价分析，并采用UPLC-LTQ-Orbitrap MS技术对生地黄的化学成分进行全面定性分析。结果 建立15批生地黄药材HPLC指纹图谱，获得10个共有色谱峰且相似度在0.910~0.982。通过对照品指认、文献比对以及高分辨质谱数据解析，初步鉴定了其中67个化学成分。结论 所建立的生地黄的HPLC指纹图谱专属性强，并结合液质联用技术的定性分析，为生地黄药材的质量控制提供了可行的方法。]]> 2016/12/3 17:27:48 1130true 目的 建立同时测定红景天中ternatumoside II、红景天欧素、红景天宁、草质素、山柰酚、大花红景天素的方法，比较不同产地红景天中6个成分的差异。方法 采用HPLC-DAD法，Kromasil C₁₈（250 mm×4.6 mm，5 μm）色谱柱，乙腈-水为流动相，梯度洗脱，体积流量为1.0 mL/min，检测波长为382 nm，柱温为35℃。结果 ternatumoside II、红景天欧素、红景天宁、草质素、山柰酚、大花红景天素进样量分别在0.015 08~0.301 6、0.123 2~2.464、0.109 5~2.190 8、0.007 8~0.156、0.021 46~0.429 2、0.006 48~0.129 6 μg与色谱峰面积呈良好的线性关系；加样回收率在98.17%~100.52%，RSD在1.64%~1.98%。结论 该方法简单准确，为红景天的全面质量控制提供了参考。]]> 2016/12/3 17:27:49 1129true 目的 以云南省不同地区云南重楼及多芽品系为材料，采用UPLC-ELSD法同时测定7种甾体皂苷量并建立高黎贡山地区样品UPLC指纹图谱，评价其质量。方法 采用UPLC-ELSD法，ACQUITY UPLC BEH C₁₈（50 mm×2.1 mm，1.7 μm）色谱柱，体积流量0.2 mL/min，漂移管温度55℃，氮气压力275.8 kPa，增益500，以乙腈-水为流动相梯度洗脱。结果 样品在23 min内能完全被分离，方法学考察均符合要求；23份样品中19份符合《中国药典》2015年版要求，《中国药典》项下4个皂苷平均质量分数为1.42%，其中高黎贡山地区的样品平均质量分数高达1.660%；10批次高黎贡山地区云南重楼（多芽品系）样品间相似度小于0.9，标定了8个共有特征峰，并对4个特征峰进行了归属；样品中7个皂苷的种类和量经PCA分析和系统聚类分析均不能明显分类。结论 该方法简便、快速、灵敏度高，可用于云南重楼的质量快速评价；云南重楼及其多芽品系在化学成分种类和量上并无明显区别；高黎贡山地区的云南重楼（多芽品系）是一个值得推广栽培和深入研究的品种。]]> 2016/12/3 17:27:49 1128true 目的 研究通关藤Marsdenia tenacissima种子检验方法，为制定通关藤种子检验规程及质量分级提供依据。方法 以当年采收的不同产地通关藤种子为材料，参照国际植物种子检验规程和中国农作物种子检验规程，对其质量进行检验，探索通关藤种子质量检验的方法。结果 通关藤种子净度分析送检样本至少900 g，实验样品至少90 g；种子千粒质量测定选用五百粒法；含水量测定选用高恒温（133±2）℃烘干法，烘干时间为6 h；发芽前自来水浸种24 h，于砂中在30℃光照条件下做发芽实验，发芽计数时间为1~8 d；生活力测定采用0.1% TTC溶液染色，于恒温35℃黑暗条件下染色3 h。结论 初步建立了包括扦样、净度分析、真实性鉴定、千粒质量、发芽条件、含水量及生活力7项指标在内的通关藤种子质量检验方法。]]> 2016/12/3 17:27:49 1127true 目的 获得刺五加Eleutherococcus senticosus转录组数据库和差异表达基因。方法 采用皂苷高含量组和低含量组2个样本作为受试材料，采用二代测序方法中的Illumina HiSeq 4000进行转录组测序，并进行系统的生物信息学分析。结果 共获得8.34 Gb数据，拼接得到77 087条Unigenes，与5个基因数据库进行比对，可归类于55个Geneontology（GO）分类中，涉及到116个KEGG标准代谢通路。通过差异性分析发现，差异性表达基因共530条，其中上调基因占42.08%，下调基因占57.92%，相差较大。进行GO和Pathway富集，得到408个GO注释和40个代谢通路。结论 对刺五加转录组进行拼接、组装和功能注释，得到大量转录本信息，为刺五加分子生物学研究提供了宝贵的基因组数据库资源。]]> 2016/11/24 10:08:28 1126true 目的 从白木香Aquilaria sinensis中克隆sHSP1和sHSP2基因，并对它们的生物信息学及表达模式进行分析。方法 根据本课题组白木香转录组数据库进行分析获得2条具有小分子热激蛋白（sHSPs）保守结构域的sHSPs基因序列，利用RT-PCR技术克隆sHSP1和sHSP2基因的全长cDNA序列，并对其进行生物信息学分析；利用实时荧光定量PCR检测sHSP1和sHSP2基因在不同组织和高盐及外源ABA、SA、MJ处理下不同时间的表达差异。结果 克隆得到的白木香sHSP1和sHSP2基因开放阅读框都为474 bp，编码157个氨基酸。组织表达分析的结果显示，sHSP1和sHSP2基因主要在根中表达，在茎和叶中的表达量较少；白木香愈伤组织在高盐处理下，sHSP1和sHSP2基因分别在36 h和24 h达到最高表达水平，而愈伤组织在外源ABA、MJ处理下，sHSP1和sHSP2基因都在12 h达到最高表达水平，在SA处理下，sHSP1和sHSP2基因分别在12、24 h达到最高表达水平。结论 获得了sHSP1和sHSP2 2基因全长cDNA序列，且2个基因在不同组织根、茎、叶中的表达存在差异性，在受到高盐和外源ABA、SA、MJ处理时，在不同时间的愈伤组织中的表达及积累情况也不同，该研究为后续深入研究白木香防御反应奠定了基础。]]> 2016/11/24 10:08:28 1125true 目的 鉴定盾叶薯蓣WRKY（DzWRKY）转录因子家族基因，分析DzWRKY蛋白的序列特征，检测DzWRKY在根和叶中的表达量。方法 以拟南芥WRKY基因的cDNA为查询序列，应用BLASTn进行比对，应用生物信息学方法进行全长开放阅读框（ORF）预测和蛋白序列特征分析，根据转录组数据检测DzWRKY的表达量。结果 共检测到27个具有全长ORF的DzWRKY家族基因，其中6个基因编码的蛋白具有2个WRKY结构域。DzWRKY蛋白均为亲水性蛋白，亚细胞预测为核蛋白，WRKY结构域序列保守程度高。进化分析均把27个DzWRKY蛋白和19个AtWRKY蛋白分为3个大类群。27个DzWRKY在叶片中的表达量均比根茎低，高表达的DzWRKY基因主要集中在第I类和第IId亚类。盾叶薯蓣WRKY与已知功能的WRKY序列相似性较低。结论 首次从盾叶薯蓣中鉴定出DzWRKY基因，为进一步阐明DzWRKY在盾叶薯蓣生长发育和药效成分代谢中的作用奠定基础。]]> 2016/11/24 10:08:28 1124true 目的 考察颠茄草不同生长期8种化合物的动态变化，探索各成分在不同部位的分布。方法 采用反相高效液相色谱法-二极管阵列检测器，以乙腈-0.05%磷酸溶液为流动相梯度洗脱，同时测定东莨菪苷、绿原酸、槲皮素-3-O-半乳糖-（6→1）鼠李糖-7-O-葡萄糖苷、槲皮素-3-O-葡萄糖-（6→1）鼠李糖-7-O-葡萄糖苷、山柰素-3-O-半乳糖-（6→1）鼠李糖-7-O-葡萄糖苷、山柰素-3-O-葡萄糖-（6→1）鼠李糖-7-O-葡萄糖苷、东莨菪内酯和芦丁的量，并比较各成分在不同生长期的变化和在不同部位的分布。结果 各成分在整个植株中的总量随植株的生长呈上升趋势，但不同成分增长速率不同，大部分成分在6月中下旬达到平衡；东莨菪苷主要分布在根部，绿原酸以叶和花中量较高，东莨菪内酯各部位分布较均匀，其他5种成分在叶和花中量较高，根部几乎不含。结论 颠茄草中各成分生长速率不同，且各部位分布不同，各成分量存在较大差异。]]> 2016/11/24 10:08:29 1123true 目的 建立不同产地藤茶的HPLC指纹图谱与一测多评方法，为藤茶的质量控制提供实验依据。方法 采用Agilent Eclipse Plus C₁₈（250 mm×4.6 mm，5 μm）色谱柱，流动相为甲醇-0.5%甲酸水溶液进行梯度洗脱，检测波长为258、292、369 nm，柱温为50℃，体积流量为0.8 mL/min，并应用SPSS 19.0软件对所得数据进行聚类分析和主成分分析，对不同产地藤茶样品进行质量分类。结果 建立了不同产地藤茶的HPLC指纹图谱，确定了24个共有峰，鉴定了3个主要共有峰，分别为二氢杨梅素、杨梅素和杨梅苷，并建立了对不同产地藤茶中二氢杨梅素、杨梅素和杨梅苷的一测多评方法。结论 建立的结合指纹图谱、模式识别和一测多评法的质量控制模式可应用于藤茶的质量评价。]]> 2016/11/24 10:08:29 1122true 目的 测定金线莲中六六六（BHC）和滴滴涕的残留情况。方法 采用气相色谱法（GC）对金线莲中BHC（α-BHC、β-BHC、γ-BHC、δ-BHC）、滴滴涕（PP'-DDE、PP'-DDD、OP'-DDT、PP'-DDT）8种有机氯类农药残留的限量检测。结果 BHC、滴滴涕标准工作曲线的线性良好，相关系数0.998 8~0.999 7，平均回收率95.4%~98.9%，RSD为1.00%~2.98%。检出限为0.005 3~0.021 μg/L。测定结果显示：β-BHC为0.000 9 mg/kg（其中α-BHC、γ-BHC、δ-BHC、PP'-DDE、OP'-DDT、PP'-DDD、PP'-DDT未检出）。结论 该方法具有较高的灵敏度和线性范围，测定结果准确可靠，科学可行，可用于金线莲中BHC和滴滴涕农药残留的质量监控。]]> 2016/11/24 10:08:29 1121true 目的 克隆并分析刺五加甲羟戊酸焦磷酸脱羧酶（mevalonate diphosphate decarboxylase，MDD）基因的启动子序列。方法 根据刺五加MDD基因的cDNA序列，采用PCR扩增和热不对称交错PCR（TAIL-PCR）技术，克隆MDD基因5'端的DNA序列及启动子序列。利用PlantCARE等软件对其进行生物信息学分析。结果 克隆得到长1423 bp的刺五加MDD基因启动子序列及长1024 bp的5'端DNA序列。该启动子序列含有49个TATA-box、25个CAAT-box。还含有脱落酸响应元件、茉莉酸甲酯响应元件、胚乳表达必须顺式作用元件、干旱胁迫响应元件、光响应元件等多种顺式作用元件，以及2个MYBHv1与2个MBY结合位点。结论 首次克隆并分析了刺五加MDD基因的启动子序列，为该基因的表达调控奠定了基础。]]> 2016/11/8 14:32:27 1120true 目的 为研究党参多糖代谢途径，从党参Codonopsis pilosula根中克隆多糖代谢关键酶尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶CpUGPase基因，并进行序列分析和原核表达。方法 根据党参转录组中CpUGPase基因序列设计引物，通过RT-PCR扩增得CpUGPase开放阅读框（ORF）序列，并进行TA克隆、测序和序列分析；构建原核表达载体PET-28a-CpUGPase，转入大肠杆菌BL21（DE3）后，在异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）诱导下进行表达。结果 CpUGPase ORF序列全长1413 bp，编码470个氨基酸。序列分析表明，CpUGPase基因具有保守的UGPase_euk催化位点，属于A型糖基转移酶蛋白家族。构建PET-28a-CpUGPase重组质粒，获得稳定的原核表达体系。SDS-PAGE结果显示该蛋白的大小约54900，与预测的蛋白相对分子质量一致。结论 从党参根中克隆得到CpUGPase基因，并建立了稳定的原核表达体系，为进一步纯化CpUGPase蛋白，研究其结构和功能奠定了基础。]]> 2016/11/8 14:32:27 1119true 目的 建立基于一测多评法（QAMS）同时测定大枣药材中多种三萜酸类成分的分析方法，为大枣药材的品质评价和质量控制提供技术支撑。方法 采用HPLC-ELSD技术，以白桦脂酸对照品为内参物，测定其与齐墩果酸、熊果酸、桦木酮酸、齐墩果酮酸、熊果酮酸的相对校正因子，采用相对校正因子计算此5种三萜酸类化学成分的量，实现一测多评；同时比较外标法所测得的大枣药材中该6种化学成分的实际值与经QAMS所得的计算值之间的差异，以验证QAMS的适用性、可行性和重复性。结果 相对校正因子的重现性较好，15批大枣药材样品中6种三萜酸类化学成分的QAMS计算值与外标法实测值之间无显著性差异。结论 以白桦脂酸为内参物建立的同时测定齐墩果酸、熊果酸、桦木酮酸、齐墩果酮酸、熊果酮酸的一测多评方法操作简便，测定结果准确，实现了采用1种对照品同步测定大枣样品中6种化学成分的量，可为大枣药材质量标准的制定和提升提供支撑，为中药多指标成分质量评价模式的建立提供借鉴。]]> 2016/11/8 14:32:28 1118true 目的 利用扩增片段长度多态性（AFLP）分子标记技术对陕西秦岭地区6个天然居群的三叶木通种质进行遗传多样性分析。方法 利用10对引物组合对111份三叶木通种质进行AFLP扩增，并评估遗传多样性。结果 AFLP扩增结果共产生221条清晰的条带，其中多态性条带132条，占59.7%。6个三叶木通居群间遗传分化系数为0.505，基因多态性指数为0.185。在Nei's遗传距离0.13处，6个天然居群被聚为4个类群。结论 陕西秦岭地区三叶木通天然居群遗传多样性水平较低，居群内与居群间的遗传变异程度基本相同。]]> 2016/11/8 14:32:28 1117true 目的 比较中国当归Angelica sinensis、日本当归A. acutiloba、韩国当归A. gigas、欧当归Levisticum officinale和圆当归A.archangelica药材中多糖的量，评价这5种当归类药材的质量。方法 从不同国家收集了46份当归类药材样品，采用优化的3，5-二硝基水杨酸法测定多糖量；比较不同当归药材之间多糖量的差异。结果 这5种药材中多糖的量差异很大，其平均量从高到低的顺序为圆当归（162.5mg/g）、欧当归（142.3mg/g）、日本当归（126.8mg/g）、韩国当归（81.38mg/g）、中国当归（80.75mg/g）。从日本、中国和韩国收集的日本当归中多糖量也不同，分别为131.37、184.29、94.98mg/g。结论 建立的3，5-二硝基水杨酸法可准确测定当归类药材中多糖的量；这5种药材中多糖的量不同，其功效也不同，不宜混用。]]> 2016/11/8 14:32:28 1116true 目的 建立同时测定鸡骨香Croton crassifolius中6个萜类成分（chettaphanin I、山藿香定、crassifolin B、cyperenoic acid、crassifolin A、cyperenol）的HPLC方法。方法 采用Kromasil 100-5 C₁₈色谱柱（250 mm×4.6mm，5μm）；以乙腈（A）-0.02%三氟乙酸水（B）梯度洗脱：0~35min，35% A；35~55min，35%~60% A；55~80 min，60% A。体积流量为1.0 mL/min；检测波长为210 nm；柱温为25℃。结果 6个萜类化合物均有良好的分离度，线性关系良好（r>0.999 7），chettaphanin I、山藿香定、crassifolin B、cyperenoic acid、crassifolin A、cyperenol的加样回收率分别为100.2%、99.13%、98.48%、99.22%、101.1%、102.5%，RSD分别为0.48%、0.48%、0.96%、1.10%、1.35%、0.95%。结论 该方法简单准确，具有良好的重复性和稳定性，可为鸡骨香质量控制提供科学依据。]]> 2016/11/8 14:32:28 1115true 目的 构建川芎咖啡酸-3-O-甲基转移酶（Ligusticum chuanxiong caffeic acid-3-O-methyltransferase，LCCOMT）的三维模型，并利用定点突变对模型进行验证。方法 利用同源建模构建LCCOMT的初始三维模型；对初始三维模型进行动力学优化；将优化后的模型对接咖啡酸，预测LCCOMT的活性位点；对预测的活性位点展开定点突变，检测突变型蛋白的生物活性。结果 LCCOMT的三维模型能够与咖啡酸成功对接，His268残基可能是LCCOMT的活性位点，推测其能够与咖啡酸3-OH形成氢键。H268N与H268Q 2种突变酶分别丧失94.85%和95.28%的催促活性。结论 同源建模能够准确预测LCCOMT的三维模型。His268为LCCOMT的关键氨基酸残基，其作用可能是作为共轭碱，参与咖啡酸3-OH的去质子化反应。]]> 2016/10/26 14:34:42 1114true 目的 通过构建羟基桂皮酰辅酶A羟基桂皮酰转移酶（hydroxycinnamoyl CoA quinate hydrocycinnamoyl transferase，HQT）基因真核表达载体以及建立金银花的遗传转化系统，阐明金银花HQT基因在真核生物细胞中对绿原酸量的调控机制。方法 应用通路克隆系统技术构建HQT基因真核表达载体，利用根癌农杆菌介导法，构建含金银花HQT基因的工程菌，对转染成功的外植体进行愈伤诱导，进而进行半定量RT-PCR检测转基因愈伤组织中HQT基因的相对表达量以及利用HPLC检测其绿原酸的量，并对二者相关性进行分析。结果 金银花愈伤组织中绿原酸的量随HQT基因表达量的升高而升高。结论 金银花HQT基因在真核生物细胞内对绿原酸的生物合成具备调控作用。]]> 2016/10/26 14:34:43 1113true 目的 分离珍稀濒危药用植物铁皮石斛蔗糖转运蛋白（sucrose transporter, SUT）基因（DoSUT1）并进行生物信息学和表达模式分析。方法 采用RT-PCR和RACE技术获基因全长；利用生物信息学软件预测蛋白的理化性质、结构域和亚细胞定位等分子特性；用DNASTAR 6.0和MEGA 4.0分别进行氨基酸多序列比对和进化关系分析；借助实时定量PCR检测基因表达模式。结果 分离到DoSUT1（GenBank注册号KF876842），cDNA全长1 920 bp，编码一条由538个氨基酸组成的多肽，相对分子质量57 400，等电点9.61；DoSUT1蛋白含12个跨膜域，具有高等植物蔗糖/H⁺共转运家族和协助扩散超家族的保守结构域（60-524、63-531）；DoSUT1与多种植物SUT基因编码蛋白有较高的一致性，与玉米、大麦等单子叶植物SUT亚家族中的SUT4聚类在一起；DoSUT1基因具有组织表达特异性，其转录本在石斛叶和茎中表达量较高，分别为根中的2.783和2.150倍。结论 DoSUT1基因的分子特征为进一步研究其在铁皮石斛糖代谢调控中的作用奠定基础。]]> 2016/10/26 14:34:43 1112true 目的 研究L-色氨酸及其衍生物5-甲基-DL-色氨酸（5-MT）对海南粗榧悬浮细胞生长及三尖杉酯类碱合成的影响。方法 在细胞培养第15天，向海南粗榧悬浮培养物中添加一定量的L-色氨酸或5-MT，测定细胞生长、产物量以及代谢途径中关键酶的活力。结果 L-色氨酸与5-MT都能促进三尖杉酯类碱的合成。添加5 mg/L 5-MT时，产物量最高（2.944 mg/L）；添加10 mg/L L-色氨酸和5 mg/L 5-MT后，三尖杉酯类碱产量分别是对照（1.343 mg/L）的1.947、2.192倍；而悬浮细胞生物量分别比对照（2.406 g/L）降低了9.35%、18.04%。同时，3-脱氧-D-阿拉伯庚酮糖-7-磷酸合成酶活性分别比对照（0.67 U/mg）降低了12.4%、5.57%；苯丙氨酸解氨酶活性分别比对照（78.21 U/mg）增加了37.72%、28.02%；酚类物质积累比对照（0.36 mg/mL）增加了19.14%、9.61%。结论 L-色氨酸及其衍生物5-MT能抑制代谢支路，促进代谢流向产物三尖杉酯类碱的方向。]]> 2016/10/26 14:34:43 1111true 目的 通过化学组分测定和特征图谱分析，评价不同干燥方式对麦冬品质的影响。方法 总皂苷、总黄酮和总多糖量采用紫外分光光度法进行测定，麦冬皂苷D和麦冬甲基黄烷酮A的量采用HPLC法进行测定；特征图谱采用HPLC法建立。结果 不同干燥方法对麦冬化学组分量的影响差异显著，变异系数在6.9%～20.8%，其中，阴干、晒干、冷藏干燥和晒半干后烘干对麦冬化学组分破坏程度均较小，远红外干燥和微波干燥对麦冬化学组分破坏最大；麦冬样品有18个HPLC特征峰，聚类分析可将14种干燥方法分为3类，聚为一类的干燥方法干燥条件相近。结论 通过化学组分量变化和HPLC图谱特征能够有效地反映干燥方法的差异，可作为麦冬产地干燥方法筛选的技术指标，在麦冬产地加工过程中建议晒干和空气源热泵烘干机烘干相结合应用。]]> 2016/10/26 14:34:43 1110true 目的 建立HPLC法同时测定葎草中木犀草苷、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷、木犀草素量，并测定不同产地、不同采收月份、雌株和雄株葎草中木犀草苷、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷、木犀草素的量，为葎草质量标准研究提供科学依据。方法 HPLC法同时测定葎草中木犀草苷、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷、木犀草素的量。系统适用性条件，色谱柱为Agilent 5 TC-C₁₈（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相为乙腈-0.2%磷酸水溶液，梯度洗脱；体积流量1.0 mL/min；检测波长340 nm；柱温25℃；进样量10 μL。结果 木犀草苷、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷、木犀草素的检测质量浓度分别在4.640～74.24、1.510～30.20、0.796 3～12.74 μg/mL与各自峰面积值呈良好线性关系（r=0.999 2、0.999 9、0.999 5），精密度、稳定性、重复性试验的RSD均≤1.99%，平均回收率分别为102.69%、100.49%、100.39%，RSD分别为1.64%、1.93%、1.65%（n=9）。结论 在河北省不同产地、不同采收月份、雌株、雄株葎草药材中，木犀草苷、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷、木犀草素的量存在较大差异。]]> 2016/10/26 14:34:43 1109true 目的 分析研究黄花蒿3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶（HMGR）启动子的活性表达及其核心序列。方法 以β-葡萄糖苷酸酶（GUS）基因作为报告基因，通过构建包括HMGR启动子全长序列在内的5个不同长度表达载体，并采用农杆菌介导法转化烟草以及对转化烟草进行GUS染色。结果 转HMGR启动子烟草的根、茎、叶、花、果荚均发现蓝色；脱水和高温胁迫会降低该启动子的表达，低温胁迫对其影响不明显；启动子片段AaGPX1、AaGPX2和AaGPX3具有驱动GUS报告基因表达的功能，而AaGPX4和AaGPX5则未有此功能。结论 HMGR启动子在烟草整个生长期内均能够稳定表达；该启动子对低温不敏感，而对高温和脱水条件敏感；该启动子的核心序列在P-HMGR-3区域，而AaGPX2与AaGPX3片段的非重叠区则存在与HMGR启动子活性强弱相关的调控元件。]]> 2016/10/10 16:50:45 1108true 目的 通过电子克隆技术对百脉根细胞亲环素（cyclophilin）基因进行预测。方法 以大豆cyclophilin序列为探针，基于NCBI中百脉根的EST数据库和CAP3在线软件进行序列拼接，利用生物信息学数据库及相关软件对其结构和功能进行预测分析。结果 百脉根cyclophilin基因全长1 346 bp，包含771 bp的开放阅读框，编码256个氨基酸，该蛋白为亲水性蛋白。结论 为进一步解释基因的分子功能奠定理论及实验基础。]]> 2016/10/10 16:50:45 1107true 目的 对来自江西的11份山药种质资源进行遗传多样性分析，并对其组培苗的遗传稳定性进行检测。方法 采用RAPD-PCR技术。结果 试验筛选出20条引物，共扩增出238个条带，其中234个为多态性带，平均每个引物扩增出多态性带11.7条，多态性条带比率为98.32%，材料间遗传相似系数为0.575 6~0.970 6，平均相似系数为0.723 1。根据UPGMA聚类分析结果，可在0.634 8的遗传相似系数上，将11份山药种质资源聚成5大类群（类群I~V）。其中第I类群只包含黄独；第Ⅱ类群只包含瑞昌山药；第Ⅲ类群包括南城淮山药1、千金薯、信州山药、永丰淮山药和铁棍山药，说明南城淮山药1、千金薯、信州山药、永丰淮山药与来源于河南焦作市温县的铁棍山药亲缘关系较近；第IV类包括南城山药、南城淮山药2、广丰药薯；第V类只包括泰和竹篙薯。这个结果表明江西山药种质资源遗传多样性还是比较丰富的。同时，江西山药带芽茎段连续继代6次后的组培苗（处理组）及其微型块茎实生苗（对照组）的RAPD分析结果也表明，11份山药品种均扩出126~179条可辨认的条带，每个品种的处理组和对照组均出现了5~18条变异条带数，表明江西山药各个品种带芽茎段连续继代6次后的组培苗存在着一定的体细胞无性系变异，但它们与微型块茎萌发实生苗的遗传相似系数还是比较高，说明它们的遗传性状还是比较稳定的，并未影响到其基因型。结论 本实验结果可为江西山药引种育种、资源改良、品种鉴定、种质保存及其种苗培育提供可靠依据。]]> 2016/10/10 16:50:45 1106true 目的 建立白术药材HPLC-PDA指纹图谱并进行定性鉴别，为全面控制白术质量提供参考。方法 白术加70%甲醇超声60 min；色谱分析采用Inertsil^® ODS-SP色谱柱（150 mm×4.6 mm，5 μm），柱温40℃，体积流量1.0 mL/min，采用Waters 2998紫外检测器，检测波长为235 nm，流动相为水（A）-乙腈（B），洗脱梯度为0~10 min，30%~45% B；10~25 min，45% B；25~50 min，45%~70% B；50~55 min，70% B；55~62 min，70%~30% B；62~75 min，30% B。质谱测定采用电喷雾离子源（ESI）的飞行时间质谱（TOF/MS）；正离子模式下；质量扫描范围m/z 50~1 500。结果 分别对不同产地的白术进行比较、拟合，标定了白术HPLC-PDA指纹图谱的6个共有峰，并通过高分辨UFLC-Q-TOF/MS对共有峰进行了指认，分别为5-羟甲基糠醛、白术内酯Ⅲ、白术内酯I、白术内酯Ⅱ、白术内酯VI和双白术内酯；对白术的色谱条件及系统适用性、提取条件进行了优化、考察，其精密度、稳定性、重复性RSD值均小于2%；测得的10批次样品与拟合指纹图谱相似度均大于0.95。结论 所建立的HPLC指纹图谱可作为规范白术的均一性和稳定性的质量控制手段。]]> 2016/10/10 0:00:00 1105true 目的 建立了高效液相色谱-电喷雾三重四极杆质谱法（HPLC-ESI-MS/MS）同时测定珠子参中15种皂苷类化合物（人参皂苷Rb₂、人参皂苷Re、人参皂苷Ro、人参皂苷Rd、人参皂苷Rg₁、人参皂苷Rb₃、人参皂苷Rb₁、人参皂苷Rc、人参皂苷Rh₂、人参皂苷F₂、人参皂苷Rg₃、人参皂苷Rf、三七皂苷R₁、姜状三七皂苷R₁、竹节参皂苷IVa）的检测方法。方法 采用Waters Sunfire TM C₁₈色谱柱（150 mm×1.5 mm，5 μm），以含0.05%甲酸的乙腈-水（10∶90）为流动相，梯度洗脱分离，HPLC-ESI-MS/MS多反应监测模式（MRM）检测，外标法定量。优化了色谱分离条件、质谱去簇电压（DP）、碰撞能量（CE）和碰撞池出口电压（CXP）等参数，并考察了浓缩温度、提取时间等对提取率的影响。结果 15种皂苷类化合物在0.000 9~2 952.592 3 μg/mL线性关系良好，r=0.999 6，检出限范围为0.003~626.554 ng/mL，定量限为0.075~1 762.150 ng/mL，平均加样回收率在98.15%~101.12%，RSD为0.82%~2.15%。结论 该方法操作简便、快速、准确、灵敏度高，可以对珠子参中多种皂苷类化合物进行分析鉴定。]]> 2016/10/10 0:00:00 1104true 目的 运用红外光谱法和二维相关光谱技术对白芍、赤芍及其醇提物所含化学成分的红外谱图整体变化规律进行解析和鉴别。方法 采用傅里叶变换红外光谱法和二维相关光谱分析技术，对白芍和赤芍及其醇提物进行鉴别分析。结果 白芍、赤芍原药材一维红外光谱显现了草酸钙特征峰和位于950~1 200 cm^-1处的淀粉阶梯峰，但峰形、峰位稍有差异；二阶导数处理后，二者在518/517、989 cm^-1等处的特征峰得以显现，另外，赤芍在989、1 015、1 052、1 078、1 105、1 161 cm^-1的峰强度均高于白芍，且峰形与白芍也不尽相同，这与两者所含淀粉的量和结构差异有关。白芍、赤芍醇提物一维光谱中都有芍药苷的特征峰（1 716、1 451、1 347、1 277、714 cm^-1）；图谱经二阶导数处理后可以看出两者的峰形、峰位相差较大，这与两者的糖（苷）类量和结构存在差异有关；在二维相关红外光谱中，两者在887、968、1 008、1 190、1 305 cm^-1处均有糖（苷）类化合物的自动峰，不同的是白芍在1 190 cm^-1处的自动峰强度最大，赤芍在968 cm^-1处的自动峰强度最大，进一步佐证了两者所含糖（苷）类化合物有差异。结论 红外光谱法和二维相关光谱技术提供了大量白芍、赤芍的整体结构信息，递进式地验证了两者所含物质结构和量的差异，可以初步地鉴定白芍和赤芍，为今后系统完整的鉴定工作打下基础。]]> 2016/10/10 16:50:46 1103true 目的 共转orca3/g10h双基因于长春花毛状根，提高抗癌生物碱量。方法 通过构建pCAMBIA1304⁺+orca3+g10h表达载体，利用发根农杆菌介导获得双转orca3/g10h基因长春花毛状根。利用RT-qPCR研究共转orca3/g10h基因长春花毛状根萜类吲哚生物碱（TIAs）生物合成途径中相关基因的转录差异。采用HPLC研究共转orca3/g10h基因长春花毛状根TIAs（包括长春碱、长春新碱和阿吗碱）量。结果 转基因长春花毛状根中与TIAs生物合成相关基因asα、ggpps、g10h、str、tdc、cpr、sgd和dat转录水平均较非转基因长春花普通根高。HPLC结果表明，转基因长春花毛状根总TIAs量达到58.23 mg/g，是非转基因长春花普通根的27.5倍。长春碱和长春新碱的平均质量分数均较非转基因普通根高。其中，长春碱平均质量分数最高，为51.30 mg/g，是非转基因普通根的197.3倍。结论 共转orca3/g10h基因能够有效提高长春花毛状根中TIAs量。]]> 2016/9/22 15:40:14 1102true 目的 构建红花查耳酮异构酶（CHI）基因的植物表达载体并在拟南芥中进行超表达验证该基因的功能。方法 将已经分离的红花CHI基因作为目的基因，在其两端引入BamH I和EcoR I酶切位点，构建含有35S启动子的植物超表达载体pBASTA-CHI，通过Flora-dip法将其转化到拟南芥中，并对转基因拟南芥T2代植株进行PCR和总黄酮量检测。结果 转基因拟南芥T2代植株的PCR检测，红花CHI基因已经初步整合到拟南芥基因组中，黄酮量检测表明，转红花CHI基因的拟南芥比野生型拟南芥中的黄酮量有所提高，最高提高到2.3倍。结论 成功构建了含有红花CHI基因的植物表达载体，并在拟南芥中进行超表达，获得了转基因拟南芥T2植株。]]> 2016/9/22 15:40:14 1101true 目的 探明3种因素对金线莲Anoectochilus roxburghii丛生芽生物量和有效物质积累的影响以及在反应器内通过大量培养丛生芽生产有效物质的可行性，为金线莲产品开发提供一种新的材料来源。方法 以金线莲丛生芽为材料，研究外植体长度、BA质量浓度和光条件对金线莲丛生芽的影响，观察利用气升式生物反应器培养金线莲丛生芽对生物量和有效物质积累的影响。结果 外植体大小为5 mm时丛生芽增殖效果显著好于1 mm。BA质量浓度为2.5 mg/L时生物量最高，但丛生芽中多糖、黄酮和总酚等有效物质的生产量在BA质量浓度为2.0 mg/L时出现最高值。明培养比暗培养更适于生物量和有效物质的积累。反应器培养的丛生芽生物量，多糖，黄酮和酚类物质的生产量（678.3、12.2、17.8 mg/L）明显高于固体培养。结论 外植体长度为5 mm、BA质量浓度为2.0 mg/L、在明培养条件下，利于丛生芽的生长，可生产较多的多糖、黄酮和酚类物质。在短时间内通过气升式生物反应器可得到大量丛生芽，反应器培养比固体培养能获得更多的生物量和有效物质。]]> 2016/9/22 15:40:14 1100true 目的 测定文山产三七Panax notoginseng茎、叶、花、果实、果梗和根中三七皂苷Fc的量，为三七皂苷Fc原料的制备和条件选择提供依据。方法 色谱柱为Agilent C₁₈（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相为甲醇-水（65∶35）；柱温35℃；体积流量1.0 mL/min；检测波长203 nm；进样体积10 μL。采用HPLC-UV法测定三七不同部位提取物（以乙醇为溶剂，采用超声法提取）中三七皂苷Fc的量。结果 三七皂苷Fc在0.005～1.000 mg/mL线性关系良好，在三七茎、叶、花、果实、果梗和根中三七皂苷Fc的质量分数分别为0.07%、1.58%、2.13%、0.39%、0.72%和0.02%，其回收率分别为98.86%、97.43%、101.03%、99.35%、99.13%和98.68%，RSD分别为1.90%、1.87%、1.80%、1.82%、1.94%、1.88%。在此条件下，三七芦头中未检测出三七皂苷Fc。结论 三七皂苷Fc存在于文山产三七不同部位中，其中三七叶和花中三七皂苷Fc的量较高，分别为1.58%和2.13%。该研究结果可为三七叶和花的综合利用和Fc的制备应用提供参考。]]> 2016/9/22 15:40:14 1099true 目的 基于高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱联用（HPLC-DAD-Q/TOF MS）方法，通过测试大量样本获取相关数据，分析食用黄花菜中是否含有秋水仙碱。方法 将不同来源黄花菜样品分部位（根、花葶、叶、花）处理，利用HPLC-DAD-Q/TOF MS对处理样进行秋水仙碱的检测。结果 156个食用黄花菜样本中均未检出秋水仙碱，而秋水仙球样本则被检出；另外，发现黄花菜样本液相色谱图中显示与秋水仙碱对照品保留时间非常接近处有一未知峰，对该未知峰的质谱图进行分析，初步显示其为多个化合物的共流出组分，其中主要离子质荷比为m/z 455.145 5（推测分子式C₂₃H₂₂N₂O₈）。结论 食用黄花菜中不含秋水仙碱，传统认为鲜食黄花菜会导致腹泻是秋水仙碱引起的结论值得商榷。]]> 2016/9/22 15:40:15 1098true 目的 通过比较天山雪莲Saussurea involucrata细胞中鲨烯合酶SiSQS1和SiSQS2的位点变异、蛋白原核表达及表达水平差异以及下游产物β-谷甾醇量的高低，探索天山雪莲细胞SiSQS1和SiSQS2催化β-谷甾醇合成的机制。方法 从天山雪莲细胞中克隆出β-谷甾醇生物合成途径上关键酶SiSQS1与SiSQS2基因，并对其进行生物信息学分析；分别对SiSQS1和SiSQS2进行原核表达与条件优化，比较二者在天山雪莲细胞中的蛋白原核表达差异；采用RT-PCR技术对二者在天山雪莲三色系细胞中的表达水平进行比较，采用GC-MS对雪莲三色系细胞中β-谷甾醇进行定量分析，并对β-谷甾醇量与SiSQS1、SiSQS2表达水平做相关性分析。结果 SiSQS1和SiSQS2在242E/D存在残基变异，原核表达及条件优化实验表明二者都有目的蛋白条带出现，但二者之间的原核表达最适体系不同；化学定量与基因表达水平的相关性分析表明β-谷甾醇量与SiSQS1、SiSQS2基因表达水平呈正相关，相关系数分别为0.92和0.89。结论 SiSQS1与SiSQS2二者242E/D残基变异可能影响SiSQS蛋白的表达，二者在催化活性以及对β-谷甾醇积累调控作用上可能存在一定的功能差异，为研究鲨烯合酶SQS调控天山雪莲细胞β-谷甾醇积累的机制提供了技术支持和奠定了理论基础。]]> 2016/9/5 10:51:23 1097true 目的 从独行菜Lepidium apetalum中克隆萜类合成途径关键酶磷酸甲羟戊酸激酶（phosphomevalonate kinase，PMK）基因，进行序列分析和原核表达。方法 根据独行菜转录组数据中LaPMK基因序列设计特异性引物，克隆得到LaPMK基因的开放阅读框（open reading frame，ORF），构建pET32a-LaPMK原核表达载体，在大肠杆菌BL21（DE3）中用IPTG诱导表达LaPMK融合蛋白。结果 LaPMK基因ORF全长为1 518 bp（Genbank注册号KT004541），编码505个氨基酸。生物信息学分析结果显示LaPMK蛋白没有跨膜区，不含信号肽，位于细胞质中，含有GHMP激酶家族特异的N末端和C末端的保守结构域。系统进化树结果显示LaPMK蛋白与芜菁的PMK蛋白具有92%的序列相似性，亲缘关系较近。构建pET32a-LaPMK原核表达载体，在大肠杆菌中成功表达LaPMK融合蛋白。结论 克隆了LaPMK基因，建立其稳定的原核表达体系，为LaPMK蛋白纯化、抗体的制备，进一步研究LaPMK基因在独行菜萜类合成途径中的作用奠定了基础。]]> 2016/9/5 10:51:23 1096true 目的 构建人参PgMYB4基因表达载体，并研究该基因对拟南芥的抗旱功能。方法 采用RT-PCR技术克隆人参PgMYB4基因，构建表达载体，通过农杆菌介导的花序浸蘸法将其转化到拟南芥中，获得转基因拟南芥，以野生型拟南芥作对照，检测植株与抗旱相关的生理指标。结果 获得的人参PgMYB4基因全长为735 bp，编码245个氨基酸，预测其相对分子质量为27 914；在干旱胁迫条件下，转基因拟南芥的生长状态明显优于野生型拟南芥，与野生型相比，转基因拟南芥叶片相对叶绿素量降低幅度小、脯氨酸量显著升高、水丢失率较低。结论 人参PgMYB4基因具有抗干旱胁迫的能力。]]> 2016/9/5 10:51:23 1095true 目的 探讨不同品种莪术的亲缘关系和遗传多样性，对其进行分子标记鉴定。方法 采用RAPD-PCR标记方法研究来源于不同地域的4个种42个样本的莪术种质资源。采用POPGEN32分析其遗传相似系数和遗传距离，UPGMA方法聚类。结果 90个随机引物中筛选出10个引物，共扩增出83个位点，其中多样性位点64个，占77.5%，遗传距离变化范围0.22～0.58，获得清晰的RAPD-PCR图谱，建立了不同种莪术亲缘关系的树状结构图。结论 莪术群体中存在较丰富的遗传多样性，具有明显的遗传分化，这些遗传分化是莪术种质资源筛选的关键，是莪术高效育种和生物技术开发的基础。]]> 2016/9/5 10:51:24 1094true 目的 蛇足石杉Huperzia serrata自然繁殖能力低，资源极其匮乏，对蛇足石杉的快速繁殖技术进行探讨。方法 取活体茎尖，依次用多种消毒剂进行表面消毒，再用孔雀石绿及原子吸收光谱（AAS）联合杀灭内生真菌，得到无菌苗接种到1/2 MS＋25 g/L蔗糖的培养基中，无菌苗在二叉分枝后的新枝长到4～5 cm时剪下进行继代培养。结果 无菌苗分别在4次二叉分枝生长继代培养后，得到了数量不等的侧芽，侧芽的发生位置位于茎段中部或上部近茎尖处，侧芽的结构与芽孢的结构明显不同；不同植株培养获得的侧芽数不同，最多的植株可产生14个侧芽，一个侧芽发生点可产生一个或多个侧芽；去除茎尖顶端优势后，茎段中部的侧芽生长速度加快；不同高度的侧芽拨离母株后，成活率差别大，5 mm以上的侧芽接种到1/2 MS＋30 g/L蔗糖的培养基上，存活率可达90%，120 d后生长为2～3 cm的幼苗，低于5 mm的侧芽，拨离接种后死亡率较高。结论 蛇足石杉在离体培养中，可打破自然生长状态下叶腋内只产生孢子囊而不产生侧芽的生长方式，可形成多个增殖侧芽，侧芽剥离后极易产生不定根，为蛇足石杉的试管苗增殖方式提供重要参考。]]> 2016/9/5 10:51:24 1093true 目的 整合UHPLC-Q Exactive轨道肼高分辨质谱与HPLC-CL技术分析酸枣叶中主要化学成分，追踪其抗氧化活性成分。方法 采用UHPLC-Q Exactive轨道肼高分辨质谱鉴定酸枣叶中化学成分；并建立不同产地酸枣叶样品HPLC-UV指纹图谱；利用HPLC-CL方法对8个不同产地的酸枣叶指纹图谱进行抗氧化活性评价。结果 酸枣叶中共鉴定10个化合物，均为黄酮苷类化合物，8批不同产地的酸枣叶相似度均大于0.9，并最终确定其中6种物质（eriodictyol-7-O-rutinoside、quercetin-3-O-robinobioside、quercetin-3-O-rutinoside、quercetin-3-O-β-D-galactoside、quercetin-3-O-β-D-glucoside、quercetin-3-O-β-L-arabinosyl-（1-2）-α-L-rhamnoside）清除自由基能力强。结论 酸枣叶中富含大量的黄酮类成分，且具有较好的抗氧化活性。酸枣叶可为市场提供一种新型绿色的、可持续的抗氧化剂来源。]]> 2016/9/5 10:51:24 1092true 目的 揭示参环毛蚓MT-2基因的转录调控机制，为今后采用基因工程技术改良参环毛蚓重金属富集性状奠定基础。方法 根据已知的MT-2cDNA序列，设计特异引物，通过PCR扩增参环毛蚓MT-2基因的编码区基因组序列，扩增产物经测序后自行比对分析。基于该序列设计3条特异引物，采用基因步移技术克隆其上游的启动子序列，同时运用Promoter Prediction在线软件分析预测其顺式元件。结果 经PCR扩增、测序后获得2 826 bp MT-2基因编码区序列，将该序列与已知MT-2 cDNA序列（登录号为KC787373.1）进行比对，发现MT-2编码区由4个外显子和4个内含子组成。基因步移技术克隆得到1 534 bp的启动子序列，经Promoter Prediction在线软件分析，结果显示该序列不仅含有TATA-box、CAAT-box等核心启动子软件，还具有3个特异响应重金属参与调控MT-2表达的MRE元件。结论 参环毛蚓的MT-2基因能被重金属诱导表达，MT-2基因转录水平的金属调控是通过MT-2基因启动子区的金属调控元件MRE来实现的。]]> 2016/8/23 10:59:32 1091true 目的 从茯苓Poria cocos中克隆出细胞色素P450还原酶（CPR）基因，并对其进行生物信息学分析。方法 利用茯苓转录组注释信息，通过RACE扩增得到茯苓CPR基因（PcCPR）全长，并PCR得到对应基因组DNA序列。通过生物信息学方法，对该基因编码蛋白的特征进行分析，I-TASSER模拟出蛋白三级结构，MEGA构建蛋白系统进化树。结果 获得含有完整开放阅读框（ORF）的cDNA全长2 514 bp（GenBank号为KP768251），PcCPR的基因组DNA 5 292 bp（GenBank号为KP896487），含4个外显子、3个内含子。基因编码732个氨基酸的蛋白，相对分子质量81 147，等电点（pI）为5.39，为不稳定性亲水蛋白，非分泌蛋白，且不具有信号识别功能。蛋白定位于内质网上，第7～22位氨基酸为跨膜区；具有2个黄素结合的保守结构域，FAD、NADP的结合位点各自在蛋白三级结构空间上相邻近。同源性分析显示，PcCPR与担子菌CPR的相似性明显高于子囊菌CPR。结论 成功从茯苓中克隆得到PcCPR基因，为进一步研究PcCPR及相关代谢提供基础。]]> 2016/8/23 10:59:32 1090true 目的 以洋常春藤Hedera helix 1年生扦插苗为材料，通过检测不同部位及1年生长周期内4种常春藤皂苷类化合物（α-常春藤皂苷、常春藤皂苷C、常春藤皂苷B和常春藤皂苷D）的量，分析洋常春藤皂苷类化合物代谢累积规律，以期为确定药用洋常春藤原料的合理采收时间提供理论依据。方法 实验通过合理设计洋常春藤材料的采样方法，采用HPLC法测定常春藤皂苷类化合物量。结果 洋常春藤不同部位皂苷类化合物量测定结果为老叶> 新叶> 茎> 根，并且在一年的生长周期内，不同常春藤皂苷类化合物在不同采样部位中的动态累积规律均有所不同。结论 洋常春藤叶片和茎均可作为高质量药用原料的采收部位，且叶片的最适宜采收时期为3月份开始的生长发育期，而茎的适宜采收时期则可以从3月份开始的生长发育期持续到低温休眠开始前的11月份。]]> 2016/8/23 10:59:32 1089true 目的 从杜仲Eucommia ulmoides叶和果实中分离具有抑菌作用的内生真菌。方法 采用平板培养法从杜仲叶片和果实中分离内生真菌，通过对峙法和生长速率法考察这些内生真菌的抑菌活性，并通过HPLC法考察其具有代谢产生杜仲有效活性成分的能力。对具有良好抑菌效果和能够代谢杜仲活性成分的内生真菌进行ITS序列测定，鉴定其归属。结果 从健康叶片和果实中分离到52株内生真菌，其中2个菌株的提取液中含有绿原酸，11个菌株至少对4种病原菌具有抑制作用，其中29号菌株（链格孢属Alternaria sp.）对芽孢杆菌Fusarium graminearum的抑制效果最好，其抑制率高达82.6%。通过与GenBank数据比对，这些内生真菌分别属于链格孢属Alternaria、黑孢属Niqrospora和座囊菌纲（Dothideomycetes）。结论 从杜仲叶和果实中分离到11株具有抑菌作用的内生真菌，这些具有抑菌作用的内生真菌可用于生物制药和农业产业。]]> 2016/8/23 10:59:32 1088true 目的 对不同品种、不同产地的重楼属药用植物中核苷（胞苷、尿苷、肌苷、鸟苷、胸苷、腺苷、2'-脱氧腺苷）和碱基（尿嘧啶、鸟嘌呤、腺嘌呤）量进行对比研究，为合理开发利用重楼属药用植物提供理论依据。方法 采用RP-HPLC法，色谱柱为Venusil MP C₁₈（2）柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），流动相为甲醇-水溶液，梯度洗脱，体积流量1.0 mL/min，柱温35 ℃，检测波长260 nm。运用上述方法对16批重楼药材进行测定，并对测定结果进行聚类分析。结果 测定了重楼药材中10种核苷和碱基的量，在线性范围内线性关系良好（r²> 0.999 1），平均回收率为96.04%～104.34%，RSD≤2.94%。采用聚类分析能将不同产地的16批重楼药材分为3类。16批重楼样品中10种核苷和碱基均可检测到，不同品种重楼药材中10种核苷和碱基的质量分数及组成结构比存在着显著性差异，各核苷和碱基总量平均值为735.390 1～1 612.807 3 μg/g，质量分数高低排序为巴山重楼> 长药隔重楼> 卵叶重楼> 五指莲重楼> 狭叶重楼> 华重楼> 滇重楼> 花叶重楼> 小重楼> 毛重楼。同一品种不同产地重楼药材中10种核苷和碱基的质量分数及组成结构比亦存在着较大差异。结论 该方法简单，准确可靠，重复性好，适用于重楼药材中10种核苷和碱基的测定。同时亦为全面客观地认识重楼药材功效物质基础，丰富和发展重楼药材多指标评价体系研究提供科学依据。]]> 2016/8/23 10:59:32 1087true 目的 建立同时测定泽泻中泽泻醇C、泽泻醇F、23-乙酰泽泻醇C、泽泻醇L、24-乙酰泽泻醇F、泽泻醇A、24-乙酰泽泻醇A、泽泻醇G、泽泻醇B、23-乙酰泽泻醇B和11-去氧泽泻醇B 11个三萜类成分的RP-HPLC-DAD分析方法。方法 采用Ultimate XB-C₁₈色谱柱（150 mm×4.6 mm，5 μm），流动相乙腈（A）-水（B）进行梯度洗脱，体积流量1 mL/min，检测波长为208、245 nm，柱温30 ℃。比较25批泽泻中11个三萜类成分的量。结果 泽泻醇C、泽泻醇F、23-乙酰泽泻醇C、泽泻醇L、24-乙酰泽泻醇F、泽泻醇A、24-乙酰泽泻醇A、泽泻醇G、泽泻醇B、23-乙酰泽泻醇B、11-去氧泽泻醇B 11个成分的线性范围分别为0.313～17.210 μg/mL（r=0.999 9）、0.504～11.880 μg/mL（r=0.999 9）、0.284～9.369 μg/mL（r=0.999 9）、0.146～2.680 μg/mL（r=0.999 9）、0.254～5.596 μg/mL（r=0.999 8）、2.500～66.000 μg/mL（r=0.999 8）、0.463～10.190 μg/mL（r=0.999 9）、1.575～20.475 μg/mL（r=0.999 9）、1.525～57.268 μg/mL（r=0.999 6）、3.035～118.362 μg/mL（r=0.999 9）、0.816～16.880 μg/mL（r=0.999 8）。平均加样回收率分别为98.76%、100.24%、97.97%、100.14%、99.88%、96.54%、97.27%、98.85%、99.45%、98.85%和98.13%。结论 该法准确、可靠、分离效果良好，为泽泻药材质量评价提供了可靠的方法。]]> 2016/8/23 10:59:32 1086true 目的 克隆绞股蓝Gynostemma pentaphyllum鲨烯合成酶基因（GpSS1），进行序列及表达分析，并研究茉莉酸甲酯（MeJA）对其调节的影响。方法 基于GenBank提供的GpSS基因序列设计GpSS1引物，利用RT-PCR方法获取GpSS1基因编码区序列；运用Protparam及Tmpred软件预测GpSS1蛋白的理化性质和跨膜结构域；采用MotifScan及BioEdit软件分析GpSS1酶催化活性保守区及蛋白多重序列比对；实时荧光定量PCR分析GpSS1基因的表达模式及MeJA对其调节的影响。结果 GpSS1（GenBank号为KU363976）编码区长1 254 bp，编码417个氨基酸；GpSS1基因具有3个与该酶催化活性相关的保守区、1个天冬氨酸富含区和1个碳端内质网锚定区。GpSS1基因在幼叶中表达最高，其次是老叶，在根状茎中的表达较低。不同浓度MeJA喷施绞股蓝植株后均引起了GpSS1基因的表达上调，其中50 μmol/L的MeJA对GpSS1基因表达的影响最大。GpSS1基因在幼叶和老叶中的表达均呈现出先逐渐上升后有所下降的趋势，但在幼叶中的表达水平高于老叶。结论 绞股蓝GpSS1基因的克隆及MeJA对其调控的分析，为进一步研究GpSS1基因的功能和MeJA对其调节的机制，以及为改善绞股蓝皂苷品质或提高其产量提供了科学理论依据。]]> 2016/7/26 8:53:31 1085true 目的 克隆刺五加GAPDH基因的DNA及启动子序列，并进行生物信息学分析。方法 以刺五加的基因组DNA为模板，采用PCR和TAIL-PCR技术克隆GAPDH基因的全长DNA序列及5’端上游启动子序列，并对其进行生物信息学分析。结果 克隆到长4 103 bp的刺五加GAPDH基因全长DNA及启动子序列。该基因共包含12个外显子和11个内含子，其剪切均符合GT-AG原则。刺五加GAPDH的启动子片段长1 304 bp，转录起始位点A位于起始密码子ATG上游61 bp处。启动子除含有TATA-box、CAAT-box等基本元件外，还有诸多与激素应答、光响应和胁迫信号等有关的顺式作用调控元件。结论 首次克隆到刺五加GAPDH基因的全长DNA及启动子序列，为深入研究GAPDH基因结构特征与功能奠定基础。]]> 2016/7/26 8:53:32 1084true 目的 筛选灰毡毛忍冬Lonicera macranthoides基因表达分析的内参基因，研究其Mads-box基因家族AGL15基因（LmAGL15）的时空表达特性。方法 克隆灰毡毛忍冬内参基因18 S rRNA、Ubiquilin、Actin和Efl-β的基因片段，评价了4个基因在不同部位叶、茎和花蕾，以及4个基因在灰毡毛忍冬生长不同时期的稳定性，筛选内参基因，分析LmAGL15基因的时空表达特性。结果 18 S rRNA表达最稳定，适宜作为内参基因，叶片、茎的LmAGL15基因相对表达量较低，花蕾相对表达量较高。花蕾不同发育时期，LmAGL15的相对表达量呈现逐渐降低的变化，20 d后LmAGL15的相对表达量最低，然后依次是花蕾初期（15 d）、青绿色花蕾期（10 d）、绿白色花蕾期（5 d）。结论 18 S rRNA是适宜的内参基因。叶片、茎和花蕾中，LmAGL15的相对表达量差异明显。花蕾发育不同时期，LmAGL15的相对表达量呈逐渐降低的变化，与花蕾开放变化规律相似。]]> 2016/7/26 8:53:32 1083true 目的 克隆颠茄Atropa belladonna精氨酸脱羧酶（arginine decarboxylase，ADC）基因并进行生物信息学、组织表达谱和诱导谱分析。方法 以颠茄总RNA反转录的cDNA为模板，采用RACE技术克隆颠茄ADC基因的全长cDNA序列，利用BLAST和PBIL等在线工具进行生物信息学分析，采用实时定量PCR（qRT-PCR）技术对ADC基因进行组织表达谱和诱导谱分析。结果 克隆到2个ADC基因，分别命名为AbADC1（登录号KT802752）和AbADC2（登录号KT802751）。AbADC1基因cDNA全长为2 817 bp，编码712个氨基酸残基；AbADC2基因cDNA全长为2 992 bp，编码715个氨基酸残基。蛋白质序列比对表明，AbADC1与马铃薯Solanum tuberosum ADC的相似性较高，为89%；AbADC2与曼陀罗Daturastramonium ADC的相似性较高，为90%。qRT-PCR检测结果表明，AbADC1在须根中的表达量最高，而AbADC2在主根中的表达量最高；AbADC1和AbADC2均不受盐胁迫响应，AbADC2受低温胁迫响应。结论 首次克隆并获得了2条颠茄ADC基因全长序列，为进一步研究颠茄托品烷类生物碱的代谢合成奠定了基础。]]> 2016/7/26 8:53:32 1082true 目的 明确四川江油地区栽培乌头霜霉病病原菌乌头霜霉Peronospora aconiti rDNA-ITS和28 S rDNA D1/D2区序列，为病害诊断和防治提供理论基础。方法 从病株收集病原菌分生孢子及菌丝，提取DNA，扩增rDNA-ITS和28 S rDNAD1/D2片段序列，进行测序分析，并构建邻接（neighbor-joining，NJ）发育树分析病原菌种类。结果 检测出的病原菌rDNA-ITS序列与NCBI数据库中霜霉属P. pulveracea、P. aparines相似度为94%，28 S rDNA D1/D2区序列与霜霉属P. pulveracea、P. ficariae、P. bulbocapni相似度达97%。结论 分子rDNA-ITS和28 S rDNA D1/D2区序列鉴定的结论和形态学鉴定的结论一致，乌头霜霉病病原菌为霜霉科霜霉属乌头霜霉Peronospora aconiti Yu，其rDNA-ITS和28 S rDNA D1/D2区序列可用于该病原物的鉴定。]]> 2016/7/26 8:53:32 1081true 目的 采用HPLC-ELSD法建立知母的指纹图谱，全面综合反映和控制知母整体质量。方法 Thermo色谱柱C₈（250mm×4.6 mm，5 μm），流动相为乙腈（A）-0.2%冰醋酸水溶液（B）梯度洗脱：0～5 min，5%～7%A；5～15 min，7%～15%A；15～36 min，15%～22%A；36～43 min，22%～35%A；43～51 min，35%～50%A；51～60 min，100%A；柱温25℃，体积流量1 mL/min，ELSD检测器雾化器（空气）体积流量2.6 L/min，漂移管温度100℃，进样量20 μL。结果 在60 min内获得了较好分离效果的特征图谱，确定12个主要特征峰作为共有峰，建立了能够使多数化学成分色谱分离的知母药材HPLC-ELSD指纹图谱。结论 该方法简便、可靠，并且同时指认了知母中皂苷类和双苯吡酮类成分，能较全面地反映知母整体性的化学成分特征，可用于全面有效地控制知母的质量。]]> 2016/7/26 8:53:32 1080true 目的 利用生物信息学手段预测甘草Glycyrrhiza uralensis 的microRNA（miRNA），并实验验证其存在，确定相应的靶基因，为理解甘草miRNA的生物学功能奠定基础。方法 下载公共核酸数据库中的甘草高通量测序序列和表达序列、标签序列，使用Trinity和Assembler等软件拼接以获得转录本数据。基于miRNA前体序列在植物物种间的保守性，将miRBase数据库中的已知植物miRNA前体与甘草转录组序列进行Blast比对，按照miRNA前体应具备的标准进行筛选。通过stem-loop qRT-PCR实验验证miRNA。使用psRNATarget软件进行miRNA的靶基因预测，并对靶基因进行功能分析。结果 序列拼接获得88 263条甘草转录组数据。使用这些数据预测到分属于17个家族的49个miRNA序列，以及相应的30个茎环结构前体，随机选取其中12个，经实验验证，确实存在。这些miRNA靶向的172个基因主要参与基因转录调控、信号转导、发育调控和防御反应等生物学过程。结论 新预测的甘草miRNA及其靶基因为进一步研究miRNA在甘草中的生物学功能奠定了基础。]]> 2016/7/19 9:19:09 1079true 目的 研究温郁金Curcuma wenyujin的SRAP-PCR扩增体系最适宜的条件。方法 以提取纯化温郁金基因组DNA为模板，利用PCR扩增技术，对SRAP反应中主要影响因素Mg²⁺浓度、dNTP浓度、模板DNA质量浓度、引物浓度、Taq聚合酶浓度进行优化。结果 根据实验确定的最佳体系为25 μL SRAP反应体系，其中Mg²⁺ 2.0 mmol/L，Taq聚合酶2.0 U，引物浓度1.6 μmol/L，模板DNA 0.4 ng/μL，dNTP 2.0 mmol/L，10×PCR缓冲液2.5 μL。结论 通过扩增条件优化实验，扩增的产物条带清晰明亮、重复性好，确定的反应体系及反应程序适用于温郁金的SRAP分子标记，为今后温郁金的遗传多样性研究奠定了基础。]]> 2016/7/19 9:19:11 1078true 目的 综合评价不同产地川产半夏资源的产量和品质，为川产半夏育种和高产栽培提供理论依据和参考。方法 对22份来源于不同产地的川产半夏资源14个主要农艺性状及3个品质性状进行主成分分析，并进一步进行综合评价及聚类分析。结果 供试川产半夏样品的增产率、单株叶质量和增殖率的变异系数较大，尿苷量、鸟苷量、尿苷及鸟苷总量的变异系数相对较小。主成分分析表明，17个主要性状可用6个主成分来表述，其累计贡献率达89.829%，分别归纳为块茎形态因子、株型品质因子、增殖率因子、大粒率因子、增产低殖因子及增产率因子。样品6的综合得分最高，为高产劣质型材料；样品13的综合得分最低，为低产优质型材料。聚类分析可将供试样品分为4类。结论 通过主成分及聚类分析对川产半夏进行综合评价的方法可靠；四川盆地半夏野生资源丰富，可从中选择优质资源，为川产半夏新品种选育提供基础。]]> 2016/7/19 9:19:11 1077true 目的 对江西地方山药（瑞昌山药、南城淮山、永丰淮山和广丰千金薯）微型块茎萌发苗耐盐胁迫的生理调节机制进行研究，比较江西4个地方山药微型块茎萌发苗的耐盐性，为瑞昌山药、南城淮山、永丰淮山和广丰千金薯的耐盐机制研究与耐盐育种提供参考。方法 采用分光光度法探究盐胁迫下江西地方山药微型块茎萌发苗部分生理生化指标的变化，同时利用模糊数学隶属函数公式和SPSS 19.0软件对江西地方山药微型块茎萌发苗的耐盐性进行隶属函数及主成分分析和聚类分析。结果 在0~300 mmol/L盐胁迫下，对于总叶绿素量和根系活力而言，江西4个山药微型块茎萌发苗的总叶绿素量和根系活力均呈显著下降的趋势。对于可溶性蛋白量而言，瑞昌山药、南城淮山和广丰千金薯微型块茎萌发苗的可溶性蛋白量呈先增后降的趋势，而永丰淮山微型块茎萌发苗的可溶性蛋白量呈显著下降。对于可溶性总糖、脯氨酸（Pro）和丙二醛（MDA）量以及PMP而言，江西4种山药微型块茎萌发苗的可溶性总糖、Pro和MDA量以及PMP均呈显著增加。对于POD、SOD和过氧化氢酶（CAT）活性而言，江西4种山药微型块茎萌发苗的POD、SOD和CAT活性均呈先增后降的趋势。基于隶属函数及SPSS 19.0软件的主成分分析，盐胁迫下江西地方山药微型块茎萌发苗10个生理生化指标被归纳成3个主成分，江西地方山药微型块茎萌发苗的耐盐性从强到弱依次为广丰千金薯 > 永丰淮山 > 瑞昌山药 > 南城淮山。通过SPSS 19.0软件的聚类分析，江西4种地方山药的耐盐性分成2种类型，广丰千金薯和永丰淮山为耐盐较强的品种，而南城淮山和瑞昌山药为耐盐较弱的品种。结论 揭示了江西4种地方山药微型块茎萌发苗耐盐胁迫的生理调节机制，同时对江西4种地方山药的耐盐性进行了客观评价，这些结果将会为江西4种地方山药微型块茎的大田播种提供理论依据。]]> 2016/7/19 9:19:11 1076true 目的 建立HPLC-MS/MS法同时测定紫菀中山柰酚、槲皮素、木犀草素、异鼠李素、东莨菪内酯、伞形花内酯、阿魏酸、咖啡酸和绿原酸9种化学成分的方法。方法 采用Diamonsil C₁₈柱（150 mm×4.6 mm，5 μm），流动相为水（0.05%甲酸）-乙腈（0.05%甲酸），梯度洗脱，体积流量0.8 mL/min，进样量10 μL，柱温30 ℃；采用电喷雾离子源进行负离子模式监测，多反应监测模式（MRM）用于定量分析，源喷射电压为-4 500 V，离子源温度为650 ℃。结果 山柰酚、槲皮素、木犀草素、异鼠李素、东莨菪内酯、伞形花内酯、阿魏酸、咖啡酸和绿原酸分别在0.970~30.30 μg/mL（r＝0.998 7）、0.498~15.55 μg/mL（r＝0.999 6）、0.014~0.438 μg/mL（r＝0.999 5）、0.022~21.95 μg/mL（r＝0.998 5）、0.011~1.100 μg/mL（r＝0.999 5）、0.008~0.247 μg/mL（r＝0.999 8）、0.194~6.050 μg/mL（r＝0.999 6）、0.197~6.150 μg/mL（r＝0.999 5）和1.459~45.609 μg/mL（r＝0.999 0）线性关系良好；平均回收率在97.43%~103.87%，精密度RSD值为1.95%~3.09%。结论 本法简便、快速、灵敏度高、专属性好，可用于紫菀中9种化学成分的同时测定。]]> 2016/7/19 9:19:11 1075true 目的 建立了飞龙掌血Toddalia asiatica根皮、茎皮高效液相色谱法指纹图谱，并运用相似度评价软件对指纹图谱进行相似度对比，从而为促进飞龙掌血综合利用提供理论依据。方法 采用乙腈-0.1%磷酸水溶液梯度系统，C₁₈柱（200 mm×4.6 mm，5 μm）色谱柱，测定波长269 nm，体积流量1.0 mL/min。通过对10批不同产地不同季节采收的飞龙掌血根皮与10批不同产地不同季节的茎皮对比研究，从而建立飞龙掌血的指纹图谱，并计算相似度。结果 不同产地及不同季节采集的飞龙掌血根皮与茎皮共有峰的相对保留时间相对一致，但相对峰面积差异较大，说明产地和采收季节的不同会导致相关物质活性成分的量有一定的差异。结论 飞龙掌血根皮与茎皮指纹图谱相似度大于0.9，其组成高度相似。]]> 2016/7/19 9:19:11 1074true 目的 采用核基因组核糖体DNA ITS区、叶绿体基因组9个DNA片段和线粒体基因组2个DNA片段构建国产枸杞属药用植物DNA条形码。方法 采集枸杞属黑果枸杞Lycium ruthenicum、黄果枸杞L. barbarum var. auranticarpum、宁夏枸杞L. barbarum、枸杞L. chinense和新疆枸杞L. dasystemum 5个分类群标本及实验样品,测定各样品的核糖体ITS区,叶绿体matK、rbcL、rpoC1、trnL(UAA)intron、psbA-trnH、atpB-rbcL、trnS(GCU)-trnG(UCC)、rpl20-rps12、trnL(UAA)-trnF(GAA)和线粒体nad1第2内含子、nad5第4内含子序列;以全萼秦艽Gentiana lhassica为外类群,进行系统学分析。结果 共获得108条序列,ITS区变异位点最为丰富;筛选出6个叶绿体DNA片段;2个线粒体DNA片段可作为该属3个物种的条形码推荐序列;构建各物种多基因组多片段组合DNA条形码。结论 ITS区及筛选的6个叶绿体DNA片段均具有物种鉴别意义;2个线粒体DNA片段具有一定鉴别意义;为枸杞类物种鉴定及遗传背景分析提供基础资料。]]> 2016/7/6 14:17:54 1073true 目的 研究茉莉酸甲酯(MeJA)和高温胁迫对白桦悬浮细胞三萜合成的影响。方法 利用不同浓度(25、50、100、150 μmol/L)MeJA和高温(50 ℃处理2 h)处理白桦细胞,进行生长量、细胞活力、抗逆酶活性、丙二醛和总三萜量及其合成关键酶基因相对表达量分析。结果 高温和MeJA的复合处理对白桦细胞三萜合成的诱导作用比单独的MeJA和高温处理更强。高温胁迫1 d后加入150 μmol/L的MeJA处理,细胞总三萜量最高,为76.6 mg/g,分别比空白对照、单独的MeJA和高温处理增加81.3%、159.9%和13.1%;三萜合成关键酶鲨烯合酶(SS)、鲨烯环氧酶(SE)、羽扇醇合酶(BPW)和β-香树酯醇合酶(BPY)基因的相对表达量也分别比空白对照增加297.1%、83.7%、1 032.6%和282.4%。高温胁迫1 d后加入MeJA处理,超氧化物歧化酶(SOD)和苯丙氨酸裂解酶(PAL)活性高于空白对照;生长量和细胞活力被抑制。结论 在高温胁迫后加入MeJA的复合处理可能通过影响白桦细胞生长量、细胞活力、丙二醛量和防御酶活性变化,调节三萜合成关键酶基因的表达,最终促进三萜物质的高效合成与积累。]]> 2016/7/6 14:17:54 1072true 目的 研究北细辛Asarum heterotropoides叶柄愈伤组织增殖培养、再生芽分化及不定根诱导的最适条件,建立高效的愈伤组织培养和再生体系。方法 以北细辛幼嫩叶柄诱导出愈伤组织,于含不同质量浓度6-苄基腺嘌呤(6-BA)和萘乙酸(NAA)的增殖培养基中扩大培养,选取嫩绿致密的愈伤组织接种在不同激素浓度配比的分化培养基上诱导再生芽及不定根,经驯化后移栽。结果 愈伤组织增殖较适培养基为1/2 MS＋0.40 mg/L 6-BA＋0.10 mg/L NAA,在含0.40 mg/L 6-BA＋0.05 mg/L NAA的1/2 MS培养基中再生芽分化率最高,无激素添加的1/2 MS培养基适于壮苗培养,不定根诱导最适培养基为1/4 MS＋0.25 mg/L IBA。结论 确定北细辛愈伤组织增殖及分化的最适培养基及激素水平,建立了完善的北细辛再生体系,成功获得再生植株。]]> 2016/7/6 14:17:54 1071true 目的 建立藏药坐珠达西中无机元素的微波消解-电感耦合等离子体原子发射光谱(ICP-OES)分析方法,并对不同批次坐珠达西和主要矿物药原料中无机元素进行比较和分析。方法 以硝酸为溶样试剂,样品经微波消解后,采用ICP-OES法测定藏药坐珠达西中无机元素的量,并用SPSS 19.0软件对数据进行相关性分析和主成分分析(PCA)。结果 检测了坐珠达西中26种无机元素,元素之间有一定的相关性,坐珠达西样品的无机元素平均量:Ca、Hg、K质量分数均高过1.000 mg/g;P、Mg、Fe、Sn质量分数均高过100 μg/g;PCA选出3个主因子,得出Al、V、Mo、Ti、Cd、Mn、P、Hg、As、Ba、Mg、Ca、Se、Si、Na为坐珠达西的特征元素。而佐塔、寒水石、渣驯膏、石灰华主要含有的元素是Sn、Ti、Ca、Hg、K、P、Fe、Mg;4种矿物原料各元素量差异较大,同种元素以佐塔中量较高;Ca在寒水石和石灰华中量最高,Hg在佐塔中量最高,K、P、Fe、Mg和Sn在渣驯膏中量最高。结论 通过无机元素在成药与矿物原料中的量分析和比较,可以为质量控制和安全性评价及临床使用提供一定参考。]]> 2016/7/6 14:17:54 1070true 目的 建立UPLC法同时测定羊耳菊Inula cappa中7种化学成分(1,3-O-二咖啡酰基奎宁酸、1,5-O-二咖啡酰基奎宁酸、3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸、4,5-O-二咖啡酰基奎宁酸、3-O-咖啡酰基奎宁酸、4-O-咖啡酰基奎宁酸、5-O-咖啡酰基奎宁酸)的方法,并基于该方法建立羊耳菊药材指纹图谱。方法 采用WATERS ACQUITY UPLC BEH C₁₈色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7 μm),流动相为0.1%乙酸水溶液-乙腈,梯度洗脱,柱温为30 ℃,样品温度为4 ℃,体积流量为0.4 mL/min,检测波长为329 nm。结果 测定了广西、贵州、云南3个省份共20批羊耳菊样品中7种成分的量,建立了羊耳菊药材指纹图谱,共确定了20个共有峰,除样品18(S18)外,样品相似度均在0.900以上。以羊耳菊中7种成分的量及与对照指纹图谱的相似度进行单因素方差分析、聚类分析和主成分分析,结果显示,仅1,3-O-二咖啡酰基奎宁酸、1,5-O-二咖啡酰基奎宁酸的量在产地间有显著差异,20批样品被聚为2类,广西壮族自治区羊耳菊质量均一性较贵州、云南省高。结论 所建立的方法快速、准确,可用于羊耳菊的质量评价。]]> 2016/7/6 14:17:54 1069true 目的 建立HPLC法同时检测大黄Rheum officinale叶中没食子酸、番泻苷B、大黄酚-1-O-葡萄糖苷、大黄素-8-O-葡萄糖苷、芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚9 种成分,探索合理开发利用大黄叶的科学依据。方法 采用武本C₁₈色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),甲醇-0.2%乙酸水作为流动相,梯度洗脱,体积流量1 mL/min,柱温30 ℃,检测波长260 nm。结果 没食子酸、番泻苷B、大黄酚-1-O-葡萄糖苷、大黄素-8-O-葡萄糖苷、芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚分别在20.2~606.0、79.3~2 379.0、10.1~301.8、14.8~443.7、0.7~2.2、0.13~3.9、12.4~372.0、38.8~1 164.0、6.2~185.4 ng与峰面积良好的线性关系(r>0.999 6);9种成分的平均回收率为95.76%~98.64%,RSD为1.46%~2.43%。结论 该方法简便、准确,分离效果好,所测为大黄叶中化学成分结果真实、可靠,可为其合理开发利用提供参考依据。]]> 2016/7/6 14:17:54 1068true 目的 获得转金属硫蛋白2(metallothionein 2,MT2)红花植株,为MT药用蛋白的生产奠定基础。方法 采用Nco I/Hind III酶切pEASY-oleosin-MT获得oleosin-MT融合基因,将其插入到植物油体高效表达载体pOP上,构建重组质粒pOP-oleosin-MT,进行PCR和双酶切鉴定。采用冻融法将重组质粒pOP-oleosin-MT转入根瘤农杆菌EHA105中,通过农杆菌介导法转化红花,对转MT基因红花植株进行PCR检测及Southern blotting检测。结果 成功构建了MT基因的植物油体表达载体pOP-oleosin-MT,获得了3株PCR检测呈阳性的转MT基因红花植株。结论 建立了完善的红花再生体系,获得了转MT基因的红花植株。]]> 2016/6/22 17:24:55 1067true 目的 剖析浑源黄芪根际微生物菌群结构特征,为研究道地黄芪品质形成提供科学依据。方法 采用核糖体内转录间隔序列法(Automated ribosomal intergenic spacer analysis,ARISA)建立微生物菌群指纹图谱,分别用软件GeneMarker 2.2.0和PAST对获得的原始图谱进行加工处理与分析。结果 与非根际土相比,种植2～3年的浑源黄芪根际微生物菌群结构发生了明显改变,主要表现为相似度降低和多样性增加;种植5年的微生物菌群结构与非根际菌群间相似度无显著差异,多样性趋于一致。与其他产地相比,浑源黄芪核心群体分类操作单元(OTUs)数较低,但相对丰富度较高。结论 浑源黄芪根际微生物菌群结构与种植年限有关,且明显不同于其他产地。]]> 2016/6/22 17:24:55 1066true 目的 建立鉴别鱼腥草Houttuynia cordata与百部还魂Gymnotheca chinensis的特异性PCR方法。方法 采集不同产地的鱼腥草与百部还魂样品各8份,所有样品提取总DNA。通过对其matK片段进行扩增、测序,进行同源比对后根据其变异位点设计特异鉴别引物,建立特异PCR鉴别方法,并通过加入SYBR Green I染料法对2种中药进行快速检测。另外,构建多重PCR体系,只经一个PCR反应,就能对鱼腥草与百部还魂进行快速分子鉴定。结果 所构建特异PCR与多重PCR体系均能产生鱼腥草185 bp的特异鉴别条带,百部还魂389 bp的特异鉴别条带,SYBR Green I染料可进行快速检测方法。结论 建立的鱼腥草与百部还魂2种中药的快速PCR鉴别方法简便、可靠。]]> 2016/6/22 17:24:55 1065true 目的 建立远志超高效液相色谱(UPLC)多成分测定方法及指纹图谱方法。方法 采用UPLC法,以乙腈-0.1%甲酸水溶液梯度洗脱,体积流量0.4 mL/min,检测波长320 nm,测定24批远志药材中sibiricose A₅、sibiricose A₆、sibiricaxanthone B、glomeratose A、polygalaxanthone III、3,6'-disinapoyl sucrose 6种成分的量,并建立远志药材指纹图谱,采用超高效液相色谱-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS^E)指认共有峰。结果 不同产地远志中3,6'-disinapoyl sucrose与sibiricose A₆量差异较大;建立的药材UPLC指纹图谱共标定37个共有峰,指认出其中33个峰,24批样品相似度在0.756～0.997。成分量及相似度综合分析结果表明不同地区远志药材质量存在一定差异。结论 建立的测定结合指纹图谱分析方法可有效、全面地用于远志药材的质量评价。]]> 2016/6/22 17:24:56 1064true 目的 克隆太子参肌动蛋白(Actin)基因片段并进行序列分析。方法 利用植物Actin基因的保守序列设计简并引物,通过RT-PCR和抑制PCR扩增太子参Actin基因核心片段。利用半定量RT-PCR分析太子参Actin基因在不同种源、不同器官、不同生长发育时期的表达情况。结果 通过RT-PCR获得3条太子参Actin基因的核心片段,长度均为760 bp,依次命名为PhACT1、PhACT2、PhACT3。通过抑制PCR及序列拼接后3条核心片段依次延长至1008、1008、975 bp,分别编码336、336、325个氨基酸残基。半定量RT-PCR分析表明PhACT2和PhACT3基因在不同种源、不同器官、不同生长发育时期的表达量基本恒定,PhACT1基因存在一定的差异。结论 首次从太子参中克隆得到3条太子参Actin基因序列,并确定PhACT2基因适合作为太子参功能基因表达分析的内参基因。]]> 2016/6/17 9:29:26 1063true 目的 利用SRAP分子标记技术对川明参Chuanmingshen violaceum种质资源进行遗传多样性研究,为不同来源的川明参亲缘关系及其优良种质资源的筛选提供依据。方法 采集5个不同生态区域的63份川明参种质资源,利用SRAP分子标记构建其DNA指纹图谱,从分子水平检测其遗传多样性。结果 37对SRAP引物组合共得到374条扩增条带,其中有283条呈现多态性,占75.67%。供试材料的遗传相似系数的变化范围0.7267~0.9239,平均值为0.8150,整个群体的遗传相似程度差异较大。基于SRAP的聚类分析可将63份材料完全分开,并划分为7类,聚类结果与材料的地理分布有一定关系,来源于阆中和金堂的材料多样性相对较为丰富。结论 川明参种质资源在分子水平上确实存在较大遗传差异,SRAP分子标记是评价川明参资源遗传多样性的有效方法。]]> 2016/6/17 9:29:26 1062true 目的 筛选出适合芦荟属6种植物的DNA条形码序列。方法 采用试剂盒法提取芦荟属6个品种基原植物的18份样本基因组DNA,应用通用引物扩增其核基因ITS2序列和叶绿体psbA-trnH、rbcL、matK基因序列并进行双向测序,采用Sequencher 4.1.4软件对测序峰图进行校对拼接,应用MEGA 5.0软件分析不同候选序列的特征,计算物种的种内、种间Kimura 2-Parameter(K2P)遗传距离,比较其种内、种间变异的大小,评估序列的条形码间距(barcoding gap),采用邻接法(neighbor-joining,NJ)构建系统聚类树。结果 共获得72条序列,ITS2、psbA-trnH、rbcL、matK基因序列各18条,测序成功率均为100%。比对后序列长度为255~723 bp,GC量范围为30.6%~68.2%。psbA-trnH基因序列的最大种内遗传距离均小于最小种间遗传距离,有明显的barcoding gap,ITS2、rbcL、matK序列的种内变异和种间变异有一些重叠,没有明显的barcoding gap。基于psbA-trnH序列的发育树能将芦荟属6个品种完全区分,而其他3个序列在区分这些芦荟属品种时存在模糊鉴定。结论 DNA条形码技术可以准确鉴别芦荟属植物,psbA-trnH序列可以作为鉴别芦荟属植物的优选序列。]]> 2016/6/17 9:29:26 1061true 目的 研究低温胁迫对人参皂苷生物合成途径的3个基因家族3-羟基-3-甲基戊二酰CoA还原酶(PgHMGR)、鲨烯合酶(PgSS)、鲨烯环氧酶(PgSE)的影响,探讨各个家族成员响应低温的机制,并推测出响应低温的关键家族基因。方法 将3周大的新鲜人参愈伤组织放置在5℃的冰箱中,分别在0、0.5、1、2、3 d后进行取样,分别记作CK、D1、D2、D3、D4,进行RNA提取和反转录实验,实时荧光定量PCR检测低温胁迫处理下不同基因的表达量。结果 PgHMGR1的表达量在D3时期达到对照组的1.3倍,PgHMGR2的表达量在D1时期达到峰值,为对照组的3.8倍;PgSS1的表达量在D3时期达到对照组的1.7倍;PgSE1和PgSE2的表达量均在D1时期分别达到对照组的6.9倍和6倍。其他家族基因(PgHMGR3、PgSS2、PgSE3)的表达量均无显著性变化。结论 人参皂苷生物合成途径各个基因家族积极响应低温胁迫处理,推测PgHMGR1、PgHMGR2、PgSS1、PgSE1和PgSE2是人参愈伤组织响应低温胁迫时的关键家族基因。]]> 2016/6/17 9:29:26 1060true 目的 利用电子鼻和电子舌技术对辛味中药、物质组群、单体的嗅觉、味觉(即气、味)进行表征,建立辛味中药的药味物质基础分析的方法。方法 选用代表性的5种辛味中药,以药材、物质组群及单体成分作为待测样品,对样品的嗅觉及味觉进行电子鼻及电子舌检测,采用主成分分析法对数据进行分析。结果 电子鼻主成分分析结果中,各个样品能很好地被区分,识别指数为98,具有明显辛味的成分归为一类;电子舌主成分分析结果中,不同滋味的样品在图中分布位置不同。结论 电子鼻及电子舌能够对中药样品进行区分,结合主成分分析及药物功效,可以对药物物质组群的嗅觉及味觉进行初步的表征。]]> 2016/6/17 9:29:27 1059true 目的 建立秦艽中马钱苷酸、獐牙菜苦苷、6'-O-β-D-葡萄糖基龙胆苦苷、龙胆苦苷、獐牙菜苷、异荭草苷和异牡荆苷测定的UPLC方法。方法 采用色谱柱ACQUITY UPLC^® BEH C₁₈(50 mm×2.1 mm,1.7μm);流动相甲醇-0.04%磷酸水溶液梯度洗脱,体积流量0.3 mL/min;检测波长242 nm;柱温30℃。结果 马钱苷酸、獐牙菜苦苷、6'-O-β-D-葡萄糖基龙胆苦苷、龙胆苦苷、獐牙菜苷、异荭草苷和异牡荆苷分别在2.100~537.100、1.050~270.000、0.920~236.000、11.100~2830.000、0.750~192.000、0.167~102.000、0.216~52.800μg进样量与峰面积积分值线性关系良好(r ≥ 0.9995),平均回收率97.83%~100.08%,RSD ≤ 3.76%。结论 UPLC较HPLC更简便、更有效,可用于秦艽中7种指标成分的同时测定。]]> 2016/6/17 9:29:27 1058true 目的 研究蕨类植物中4CL基因的表达与分析,为蕨类植物次级代谢产物的积累和调控奠定理论基础。方法 运用CHIPS、CUSP和CodonW在线程序对自主克隆的香鳞毛蕨4CL基因(Df4CL)序列进行分析,并与大肠杆菌、酵母菌、拟南芥、烟草等基因进行比较,对了解Df4CL基因密码子使用特性,为其选择合适的表达系统具有重要意义。结果 Df4CL基因对ATGC选择没有偏向性,并且与小立碗藓的密码子使用偏好性相一致。在密码子使用频率上,Df4CL基因与拟南芥的差异小于与烟草、大肠杆菌、酵母的差异;基于4CL基因的密码子使用偏性的系统聚类分析表明,香鳞毛蕨与小立碗藓、拟南芥聚为一类。结论 预示Df4CL基因更适合在拟南芥中外源表达。]]> 2016/5/23 9:52:31 1057true 目的 分析鱼腥草Houttuynia cordata转录组中的SSR位点信息,并设计简单重复序列(SSR)引物,以期为鱼腥草分子标记辅助育种提供有力工具。方法 利用MISA工具筛选了鱼腥草转录组测序获得的63954条unigenes,对其SSR位点信息进行了分析;在此基础上利用Primer 3设计SSR引物,并随机选择50对SSR引物对16株不同来源的鱼腥草进行多态性扩增分析。结果 在鱼腥草的转录组中,共搜索到4800个SSRs,分布于4413条unigenes,SSR位点出现频率为7.51%。SSRs位点中三核苷酸重复是主要类型,占总SSRs的41.54%;其次是单核苷酸重复基序(占27.35%)。SSRs所包含的重复基元中,单核苷酸重复基元A/T是优势重复基元类型,占总SSRs的27.0%。利用Primer3共设计出3068对SSR引物。随机选择50对引物进行PCR扩增,其中43对(86.0%)扩增出清晰、可重复的条带,且表现出多态性。利用UPGMA作图,将16个样品分为2类。结论 鱼腥草转录组中SSR位点出现频率高,类型丰富;大量的SSR为其遗传多样性分析和遗传图谱构建奠定基础。]]> 2016/5/23 9:52:31 1056true 目的 建立蒺藜Tribulus terrestris愈伤组织培养体系,并考察种子、全草及愈伤组织中总黄酮醇苷量。方法 采用正交试验研究不同外植体、培养基、光照条件、激素种类及其配比等对蒺藜愈伤组织诱导和增殖的影响,确定蒺藜愈伤组织培养体系,采用HPLC测定其种子、全草及愈伤组织中总黄酮醇苷量。结果 以蒺藜茎段为外植体,诱导愈伤组织的适宜培养基为MS+2,4-D 0.5 mg/L+6-BA 0.1 mg/L,25℃全天恒温暗培养;最佳增殖培养基为MS+2,4-D 1.0 mg/L+6-BA 0.2mg/L+ZT 1.0 mg/L,12 h/d光培养,pH 6.2,继代周期为35 d。种子、全草及愈伤组织中总黄酮醇苷量分别为1.46%、2.01%、5.22%。结论 愈伤组织质地疏松,适合建立稳定高效的组织培养体系,其有效成分总黄酮醇苷量高于种子和全草。]]> 2016/5/23 9:52:32 1055true 目的 建立并比较河北省不同产地葎草Humulus scandens的HPLC特征图谱。方法 色谱柱为Agilent 5 TC-C₁₈(250mm×4.6 mm,5 μm);流动相为乙腈-0.2%磷酸水溶液;体积流量1.0 mL/min;检测波长340 nm;柱温25℃;进样量10 μL。收集河北省不同产地11批葎草药材进行测定,建立11批药材的特征图谱,并利用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004版)》对11批样品的相似度进行评价。结果 从葎草药材特征图谱中分析得出9个共有峰,其中7号峰为木犀草苷,8号峰为芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷。经分析,其中7批药材的相似度0.900以上,4批药材的相似度在0.900以下。结论 该方法简便、准确、重复性好,可为有效控制葎草药材的内在质量标准提供科学依据。]]> 2016/5/23 9:52:32 1054true 目的 通过OPA-FMOC在线自动衍生化,建立土鳖虫的HPLC指纹图谱分析方法。方法 色谱柱为Durashell-AA柱(150 mm×4.6 mm,3 μm);流动相组成为A:0.01 mol/L磷酸氢二钠及四硼酸钠水溶液(盐酸调节pH值至8.2);流动相B:甲醇-乙腈-水(45:45:10);体积流量1.6 mL/min;检测波长:0~24 min,338 nm;24~27 min,228 nm;柱温45℃;梯度洗脱。结果 共得到28个共有峰,指认了其中15个化学成分,建立了土鳖虫及其混淆品HPLC指纹图谱并计算相似度,根据SPSS聚类分析结果,将其分为2类,第Ⅰ类药材为地鳖或冀地鳖,第Ⅱ类为金边地鳖。结论 所建立的土鳖虫HPLC指纹图谱快速、准确、重复性好,为土鳖虫的质量控制提供科学依据。]]> 2016/5/23 9:52:32 1053true 目的 建立激光显微切割结合HPLC-MS/MS技术测定博落回根不同组织中血根碱、原阿片碱、别隐品碱、白屈菜红碱、二氢白屈菜红碱和二氢血根碱的定量分析方法,开展博落回根的组织化学研究。方法 利用激光显微切割技术将两年生不同生长期博落回根的木栓层、皮层、韧皮部、木质部维管束和木射线进行切割,HPLC-MS/MS对切割的组织进行目标生物碱的检测。结果 6种生物碱均有较宽的线性范围和良好的线性关系(r²>0.9966);日内、日间精密度RSD均小于2.4%;检出限和定量限最高分别为0.29、0.57 ng/mL;重复性试验RSD均小于13.2%;加样回收率为85.1%~133.9%,RSD值为9.4%~20.7%。苗期根的上述5个组织中6种生物碱的总量分别为0.14、0.10、0.07、0.16、0.11 μg/mm²;花期分别为0.38、0.22、0.15、0.41、0.26 μg/mm²;果期分别为0.46、0.29、0.27、0.55、0.22 μg/mm²;果后期分别为0.52、0.29、0.24、0.41、0.23 μg/mm²。结论 基于激光显微切割和LC-MS/MS的组织中生物碱的定量分析方法分辨率高、专属性强、灵敏度好、准确可靠;博落回根中6种生物碱主要分布在木栓层和木质部维管束。]]> 2016/5/23 9:52:32 1052true 目的 研究滇重楼Paris polyphylla var.yunnanensis自然居群的遗传多样性，为滇重楼资源的保护和合理利用提供数据。方法 采用SSR分子标记对滇重楼5个不同居群共115份样品进行遗传多样性分析。结果 筛选出8对可用SSR引物，多态位点百分率（PPB）为100%，多态信息量（PIC）为0.745 6。在居群水平和物种水平上，观测等位基因数（N_a）分别为8.425 0和17.750 0，有效等位基因数（N_e）分别为4.960 9和7.500 7，观测杂合度（H_o）分别为0.295 5和0.294 8，期望杂合度（H_e）分别为0.654 8和0.774 4，Shannon's信息指数（I）分别为1.520 1和2.038 6。遗传分化系数（F_st）为0.172 8，基因流（N_m）为1.196 6。利用UPGMA聚类分析，将5个居群分为2类。结论 滇重楼遗传多样性水平较高，居群内和居群间具有一定的遗传分化。对保护和发展滇重楼资源提出若干措施，为滇重楼的保护和科学可持续利用提供参考。]]> 2017/5/10 17:15:43 1051true 目的 克隆滇重楼Paris polyphylla var.yunnanensis三萜皂苷生物合成途径中的关键酶鲨烯环氧酶（squalene epoxidase，SE）基因，并进行原核表达。并用Real-time PCR法检测cDNA样本中SE1基因和SE2基因的相对量。方法 以滇重楼根为材料提取总RNA并反转录为cDNA。以cDNA为模板，根据转录组数据中的2组SE基因全长序列设计特异性引物，对SE基因进行克隆后转入到pEASY-T1 Simple Cloning Vector中，经测序鉴定正确后，构建pEASY-E1-SE表达载体，利用ArtMedia protein Expression/Amp+培养基自动诱导表达。Real-time PCR法检测cDNA样本中SE1和SE2基因的相对量。结果 获得了2条滇重楼SE基因，命名为ppSE1和ppSE2。ppSE1的全长为1 932 bp，开放阅读框（ORF）为1 578 bp，编码525个AA；ppSE2的全长为1 828 bp，ORF长为1 548 bp，编码515个氨基酸。荧光定量PCR结果显示ppSE1基因和ppSE2基因在茎和叶中的表达具有显著差异，ppSE1的表达在叶中最为显著。酶切和测序结果表明，原核表达载体pEASY-E1-SE构建成功；SDS-PAGE分析显示，在BL21（DE3）表达感受态细胞中成功诱导表达了SE基因的2种融合蛋白。结论 克隆了滇重楼的SE基因，获得了在体外具有生物学活性的SE蛋白。ppSE1基因和ppSE2基因在滇重楼中具有不同的表达模式，在滇重楼次生代谢产物的合成中起着不同的作用。]]> 2017/5/10 17:15:43 1050true 目的 通过qRT-PCR分析对比红花开花后不同发育时期的种子中内参基因的表达稳定性，筛选出红花种子成熟过程中最稳定的内参基因。方法 应用实时荧光定量PCR技术，分析6个传统内参基因ACT、EF1α、GAPDH、UBI、TUA、TUB在红花种子不同发育时期的mRNA表达差异情况；利用GeNorm和Normfinder软件评价上述内参基因在红花开花后不同发育阶段的种子中的表达稳定性。结果 荧光定量及GeNorm软件分析结果显示，6种内参基因的表达性各异，但表达最为稳定的内参基因是EF1α，表达最稳定的内参组合是EF1α和TUB。为了数据的真实可靠又选用了Normfinder软件分析，结果显示UBI基因表达不太稳定，EF1α、ACT、TUB、TUA和GAPDH内参的表达稳定性都小于0.15，相对比较稳定。结论 为红花开花后不同发育时期种子的荧光定量PCR分析提供了详尽的内参基因参考。]]> 2017/5/10 17:15:43 1049true 目的 从罗马洋甘菊Chamaemelum nobile中克隆萜类化合物合成关键酶吉马烯A合成酶（germacrene A synthase，GAS）cDNA全长，并对其进行生物信息学和组织表达分析。方法 基于前期对罗马洋甘菊转录组测序结果，设计特异性引物，利用反转录聚合酶链式反应（RT-PCR）扩增得到GAS的cDNA全长，利用生物信息学手段对其核苷酸和编码的氨基酸序列进行分析，并预测其编码的蛋白质的理化性质和功能。通过实时定量PCR技术（qRT-PCR）检测罗马洋甘菊GAS基因（CnGAS）在罗马洋甘菊不同组织的表达水平。结果 扩增得到的罗马洋甘菊吉马烯A合成酶基因的cDNA全长为1 785 bp，命名为CnGAS（GenBank登录号为KU589283），包含1个1 683 bp的开放阅读框（ORF），编码561个氨基酸，预测的相对分子质量和等电点分别为6 470和5.21。CnGAS基因编码的氨基酸序列与其他植物的GAS蛋白高度同源，且含有DDxxD保守序列。系统进化树表明CnGAS基因与菊科植物的GAS基因的亲缘关系最近。qRT-PCR结果显示CnGAS基因在罗马洋甘菊各组织中均有表达，且花中表达量最高。结论 从罗马洋甘菊中克隆得到CnGAS基因，分析了该基因在不同组织中的表达水平，为罗马洋甘菊萜类化合物的生物合成代谢途径的研究奠定了基础。]]> 2017/5/10 17:15:43 1048true 目的 采用UPLC技术结合定量分析、系统聚类分析（HCA）和主成分分析（PCA），评价、鉴别3种民族药用植物川东獐牙菜Swertia davidii、狭叶獐牙菜S.angustifolia和紫红獐牙菜S.punicea Hemsl.。方法 采集3种獐牙菜共27株样品色谱图，将色谱图导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件，确定样品保留时间和峰面积数据，对3组样品进行相似度分析。峰面积数据导入SPSS和SIMCA-P⁺软件进行HCA和PCA，从树状图和主成分得分图中判断聚类效果。结果 该方法线性关系良好（R²>0.999 3，仪器精密度高（RSD为0.19%~2.45%），方法重现性好（RSD为0~1.77%），加样回收率在95.8%~102.3%，RSD为0.45%~2.81%。不同物种獐牙菜植物中指示化合物的量差异大，同一物种不同个体中指示化合物量差异明显。獐牙菜苦苷在川东獐牙菜中为0.54~10.05 mg/g，狭叶獐牙菜中未检出，紫红獐牙菜中为1.76~15.62 mg/g；龙胆苦苷在川东獐牙菜中为4.27~11.18 mg/g，狭叶獐牙菜中为0.26~3.58 mg/g，紫红獐牙菜中为1.13~16.11 mg/g；当药苷在川东獐牙菜中为0.02~0.28 mg/g，狭叶獐牙菜中为0.02~0.14 mg/g，紫红獐牙菜中为0.11~44.52 mg/g；芒果苷在川东獐牙菜中为0.14~0.55 mg/g，狭叶獐牙菜中为0.03~0.04 mg/g，紫红獐牙菜中为0.01~13.49 mg/g。HCA树状图分类准确率为85.2%，误判的紫红獐牙菜样品中化合物量较低。PCA得分图可以区分3种獐牙菜，紫红獐牙菜聚类效果分散，个体之间差异较大。结论 采用UPLC技术分析指示化合物的量，结合化学计量学能够评价和鉴别3种獐牙菜属药用植物。在本研究中，紫红獐牙菜表现出更高的药用价值。]]> 2017/5/10 17:15:43 1047true 目的 建立菏泽地区丹凤牡丹花瓣的HPLC指纹图谱，并将其应用于不同品种牡丹花的质量评价，同时测定不同品种牡丹花中8种成分的量，为科学评价牡丹花质量提供依据。方法 采用纳微Nano-Micro C₁₈（250 mm×4.6 mm，5 μm）色谱柱；以乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相，梯度洗脱，体积流量1.0 mL/min，检测波长270 nm，柱温25℃。运用中药色谱指纹图谱相似度评价系统进行分析。结果 6批次丹凤牡丹花瓣样品得到的指纹图谱相似度大于0.993，标定共有峰14个，并对其中8个色谱峰进行了归属。同时对6批不同品种牡丹样品与丹凤牡丹进行相似度分析比较，整体相似度较高。同时对牡丹花瓣中没食子酸、没食子酸甲酯、山柰酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（紫云英苷）、芹菜素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（大波斯菊苷）、野漆树苷、二氢山柰酚-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、芍药苷、氧化芍药苷8种主要代谢产物进行了定量测定，其质量分数分别在0.05~1.41、1.01~4.41、0.70~5.55、4.60~18.30、10.05~33.87、0.09~1.76、3.16~11.12、0.85~2.02 mg/g。结论 HPLC指纹图谱结合定量测定能全面反映内在质量，该方法简便可行、快速准确，为牡丹花质量评价提供参考。]]> 2017/5/10 17:15:44 1046true 目的 建立一测多评法（QAMS）同时测定布渣叶总黄酮部位中多种化学成分的方法，用于其质量控制。方法 采用QAMS，以牡荆苷对照品为参照，计算芹菜素-6，8-二-C-葡萄糖苷、芹菜素-6-C-阿拉伯糖-8-C-葡萄糖苷、芹菜素-6-C-葡萄糖-8-C-阿拉伯糖苷、芹菜素-6-C-木糖-8-C-葡萄糖苷、异牡荆苷、紫云英苷和异鼠李素-3-O-芸香糖苷的相对保留时间和相对校正因子；利用该相对较正因子计算其他7种黄酮苷的量。结果 8种黄酮苷的相对保留时间和相对校正因子有较好的重复性，以牡荆苷为参照，相对校正因子分别为1.01、0.60、0.76、2.02、1.05、1.14和2.42。10批布渣叶总黄酮部位中8种黄酮苷量的QAMS计算值与外标法测定值无显著差异。结论 以牡荆苷为参照，采用QAMS能同时测定布渣叶总黄酮部位中8种黄酮苷的量，该方法简单、可靠，为其量效关系研究和制剂开发提供了参考。]]> 2017/5/10 0:00:00 1045true 目的 克隆红花赖氨酸生物合成途径关键酶二氢吡啶二羧酸合酶（dihydrodipicolinate synthase DHDPS）基因的全长cDNA序列，构建植物超表达载体。方法 根据红花转录组文库注释信息获得红花DHDPS（CtDHDPS）基因的中间序列，通过RT-PCR与RACE技术从红花种子中克隆CtDHDPS基因全长cDNA序列。采用DNA重组技术构建pBASTA-CtDHDPS植物超表达载体。结果 分离CtDHDPS基因全长1 309 bp，开放阅读框954 bp，编码317个氨基酸，编码蛋白理论等电点为5.93，相对分子质量约为34 750.79。通过DNA重组技术成功构建了植物超表达载体pBASTA-CtDHDPS。结论 获得CtDHDPS基因全长cDNA序列并成功构建植物超表达载体，为阐明CtDHDPS基因的生物学功能及其在红花赖氨酸生物合成途径中作用机制提供科学依据。]]> 2017/4/26 8:41:53 1044true 目的 比较生长于山西北部恒山及其周边地区的蒙古传统黄芪和移栽黄芪化学成分差异。方法 采用¹H-NMR代谢组学技术结合HPLC-UV-ELSD联用技术分别对两种种植模式黄芪的初级代谢物和次级代谢物进行差异性比较。结果 从核磁图谱中共指认出25个代谢物，其中甲醇水相中主要为氨基酸和有机酸等初级代谢物，氯仿相中主要为脂肪酸类物质；多元统计结果显示二者的初级代谢物差异不大，但8，2'-羟基-7，4'-甲氧基异黄烷只在传统黄芪中检测到。采用HPLC-UV-ELSD联用技术测定不同黄芪样本中6种黄酮和4种皂苷的量，结果显示传统黄芪中毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花苷和黄芪皂苷III量显著高于移栽黄芪，而移栽黄芪中黄芪皂苷I的量显著高于传统黄芪，传统黄芪总黄酮量显著高于移栽黄芪，总皂苷量无显著性差异。结论 恒山地区蒙古传统黄芪和移栽黄芪差异性主要体现在次级代谢物上，说明不同种植方式对黄芪次级代谢物的积累影响较大，为恒山地区发展优质的传统黄芪资源奠定了基础。]]> 2017/4/26 8:41:53 1043true 目的 筛选蕺菜属植物优异种质。方法 以产自中国不同地理类群的蕺菜属植物为材料，比较其形态特性，并通过Li-6400便携式光合仪测定其光合特性，分析正常及高温（40 ℃）、低温（5 ℃）、干旱（土壤饱和持水量70%）逆境条件下的差异。结果 6个类群的形态差异主要表现在植株颜色、主茎高度、地上茎节间长和叶长及叶宽上。正常条件下，6个类群的光合速率（Pn）无显著差异，蒸腾速率（Tr）、气孔导度（Gs）和水分利用系数（WUE）在个别类群间存在显著差异；经逆境处理后，各类群Pn、Tr、Gs均出现较大幅度的下降，多个类群间的差异达到了极显著水平，但各类群的WUE均有增加且差异极显著。峨眉蕺菜（EM）和湖南怀化蕺菜（HH）居群逆境处理后，叶绿素荧光参数的变化趋势十分相似，PSII作用中心光能传递和转换效率显著降低，光能用于非光化学反应比例显著增加。结论 较高纬度的江苏如皋蕺菜（RG）对低温的耐性较强，西南和中南地区居群的蕺菜对高温和低温耐性较强。各类群光合作用抗逆性与其原产地的生态气候条件关系较密切，中国西南和中南等地具有抗逆性较强的蕺菜属资源，是鱼腥草栽培抗性品种选育的良好材料。]]> 2017/4/26 8:41:53 1042true 目的 建立超高效液相色谱-串联质谱法（UPLC-MS/MS）同时测定中药材中23种植物生长调节剂残留量的分析方法。方法 样品经乙腈提取后无需净化，直接进UPLC-MS/MS分析，用基质匹配标液外标法定量。结果 23种植物生长调节剂在基质中线性关系良好，r均大于0.990，检出限为0.01～20.80 ng/mL。在0.01、0.04、0.1 mg/kg 3个质量分数水平下，空白党参、白芷基质中23种植物生长调节剂的平均回收率为71.0%～101.4%，RSD为0.8%～15.2%。采用该法对8种63批次常用中药材中植物生长调节剂残留情况进行了筛查。结论 该方法前处理简单、快速、灵敏、准确，可用于中药材中植物生长调节剂的残留检测。]]> 2017/4/26 8:41:53 1041true 目的 建立一测多评法（QAMS）测定类叶牡丹Caulophyllum robustum中cauloside G、cauloside H、leonticin D、cauloside D、cauloside B和cauloside C的量。方法 以类叶牡丹皂苷成分cauloside G为内参物，计算该成分与cauloside H、leonticin D、cauloside D、cauloside B和cauloside C的相对校正因子，并用获得的相对校正因子计算指标性皂苷的量，实现QAMS。同时用外标法测定药材中6种成分的量，考察QAMS的可行性。结果 相对校正因子的重现性良好，8个产地的17批药材的QAMS计算值与外标法实测值没有显著性差异。结论 在对照品缺乏的情况下，QAMS可用于类叶牡丹药材的质量评价，方法准确、可靠。]]> 2017/4/26 8:41:54 1040true 目的 建立同时测定夏枯草Prunella vulgaris中迷迭香酸、异迷迭香酸苷、咖啡酸、芦丁、木犀草素5种活性成分的方法，并对不同产地野生与栽培夏枯草进行测定研究，比较夏枯草野生品与栽培品在酚酸和黄酮类成分量上的差异。方法 采用Agilent 5HC-C₁₈（250 mm×4.6 mm，5 μm）色谱柱，以乙腈（A）-0.1%磷酸水溶液（B）为流动相；柱温30 ℃；体积流量1.0 mL/min；检测波长280 nm。以独立样本t检验，辅以聚类分析和相关性分析方法进行评价。结果 独立样本t检验表明，夏枯草野生品与栽培品在迷迭香酸、芦丁、咖啡酸和木犀草素4种成分量上差异显著（P< 0.01），而异迷迭香酸苷量无差异（P >0.05）。聚类分析结果显示，大部分产地野生与栽培夏枯草能被正确区分。相关性分析结果表明，果穗长度与夏枯草主要成分量无明显关系。结论 所建立的测定方法简单、可行，可以作为夏枯草品质评价方法之一。]]> 2017/4/26 8:41:54 1039true 目的 建立高效阴离子交换色谱-脉冲安培检测法（HPAEC-PAD）测定多花黄精多糖的单糖组成。方法 多花黄精多糖经提取后，用硫酸水解，用CarboPac PA1色谱柱（250 mm×4 mm，10.0 μm）进行分离，采用梯度洗脱，HPAEC-PAD测定多花黄精多糖中单糖的组成。结果 测得各单糖在1～100 mg/L线性关系良好（r >0.999），最低检出限为0.015～0.025 mg/L，RSD为1.35%～2.80%，加样回收率为88.36%～111.3%。结果表明不同产地的多花黄精多糖均由鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、甘露糖和果糖组成。结论 本实验所建立的方法分离效果好，灵敏度高，可用于多花黄精多糖的单糖组成和测定的分析研究。]]> 2017/4/26 8:41:54 1038true 目的 获得雷公藤Tripterygium wilfordii磷脂酰肌醇-3，4，5-三磷酸肌醇3-磷酸酶（Phosphatidylinositol-3，4，5-trisphosphate 3-phosphatase，PTEN）基因的cDNA全长，并预测其生物学功能。方法 根据雷公藤转录组数据设计引物，对雷公藤PTEN（TwPTEN）基因进行全长克隆；通过生物信息学方法对得到的TwPTEN基因进行分析，主要包括多重序列比对，蛋白结构预测和构建进化树分析等。结果 根据分析结果TwPTEN基因全长为2 247 bp，共编码614个氨基酸，等电点为5.84，相对分子质量为66 900，多重序列比对显示其与其他植物的PTEN基因具有较高的同源性。雷公藤悬浮细胞经外源茉莉酸甲酯（MeJA）诱导后，实时荧光定量结果显示，TwPTEN的表达量明显增加，并在12 h达到最高，提示PTEN基因与植物的次生代谢产物的产生有关。结论 本研究首次从雷公藤悬浮细胞中克隆得到PTEN基因，为进一步研究TwPTEN基因的功能奠定基础。]]> 2017/4/8 17:54:57 1037true 目的 筛选出适合唇形科常见药用植物的DNA条形码序列。方法 通过对33种唇形科常见药用植物的核糖体ITS序列和40种唇形科常见药用植物的叶绿体matK基因进行PCR扩增和测序，用MEGA 6.0软件计算其种间、种内的Kimura 2-parameter（K2P）距离及各序列变异位点，评估序列的条形码间距（barcoding gap），采用邻接法（neighbor-joining，NJ）构建系统聚类树。结果 ITS序列长度为620~698 bp，平均（G＋C）量为62.8%，叶绿体matK基因序列长度为859~932 bp，平均（G＋C）量为34%，ITS序列与matK基因都有明显的barcoding gap，但matK基因的barcoding gap要小于ITS序列，从聚类分析来看，matK基因能更好地鉴定唇形科不同物种。结论 推荐matK基因序列作为唇形科植物鉴定的优选序列之一。]]> 2017/4/8 17:54:57 1036true 目的 探讨破布叶Microcos paniculata不同地理居群间的DNA序列变异与地理分布的关系，为其种质资源评价和基原植物的分子鉴定提供参考。方法 对破布叶14个居群14份个体样品以改良的3×CTAB法提取基因组DNA，选择特异的引物扩增ITS2和psbA-trnH序列；PCR扩增产物直接双向测序分析。DNAMAN 8.0软件处理测序数据，MEGA6.0软件计算K2P遗传距离，运用NJ法构建系统聚类树。结果 破布叶14个居群的ITS2序列均为462 bp，共检测到14个变异位点，居群间遗传距离0.000 0~0.019 8。除云南景洪居群样本的psbA-trnH序列存在8 bp缺失外，其他13个居群样本的psbA-trnH序列均长387 bp，无变异，居群间遗传距离为0.000 0。结论 不同地理居群破布叶的psbA-trnH较ITS2更为保守，二者PCR扩增引物特异性好，扩增效率和测序成功率高，对其药材及基原植物的分子鉴定可采用psbA-trnH为主，ITS2序列为辅的DNA条形码技术。]]> 2017/4/8 17:54:57 1035true 目的 拟对当归Angelica sinensis不同部位的化学成分进行比较。方法 运用核磁代谢组学技术对当归的不同部位进行了代谢组学化学成分比较。并采用主成分分析、正交偏最小二乘法、单变量分析等统计方法对当归不同部位的代谢产物进行了比较分析。结果 通过核磁图谱共指认出包括初级和次级代谢产物共36种。多种统计分析发现，当归头部量较高的成分包括缬氨酸、异亮氨酸等；主要分布于尾部的成分包括Z-丁烯基苯肽、cis-Z，Z'-3α，7α'，7α，3α'-dihydroxyligustilide等；主要分布于身部的成分包括色氨酸、阿魏酸松柏酯；在头部和尾部量均较高的成分包括天冬氨酸、Z-藁本内酯等；在3个部分无明显差异的成分包括丙氨酸、精氨酸等。结论 采用的核磁共振指纹可同时表征当归中的初级和次级代谢产物，研究结果可为进一步揭示当归不同部位功效与化学成分的相关性奠定基础。]]> 2017/4/8 17:54:57 1034true 目的 建立皂角刺的HPLC指纹图谱，并同时测定皂角刺中7，3'，5'-三羟基-5-甲氧基二氢黄酮醇、3，3'，5，5'，7-五羟基二氢黄酮醇、槲皮素3种黄酮类成分的量。方法 采用Waters symmetry C₁₈（250 mm×4.6 mm，5 μm）色谱柱，流动相为乙腈（A）-0.1%甲酸水（B）溶液，梯度洗脱，0~5 min，5%~13% A；5~20 min，13%~16% A；20~45 min，16%~20% A；45~50 min，20%~25% A；50~65 min，25% A；65~80 min，25%~40% A；体积流量0.9 mL/min；柱温25 ℃；检测波长338 nm。结果 对13批皂角刺药材进行研究，所得HPLC指纹图谱共标定14个共有峰，并对其中3个成分进行了测定，其质量浓度分别在0.091 3~5.840 0、0.176 3~11.280 0、0.014 0~0.895 0 mg/mL与峰面积呈良好线性关系（r≥0.999 2），平均加样回收率为98.97%~99.66%，RSD<2.5%。结论 该法具有较好的稳定性和重复性，为皂角刺药材的质量控制提供科学依据。]]> 2017/4/8 17:54:57 1033true 目的 研究2龄级百蕊草Thesium chinense地上茎不同分枝数量对其药材品质的影响。方法 以江苏句容、谷里、茅山等地野生2龄级百蕊草为材料，按照其根茎分枝数量划分为5个级别。其中1~3分枝为1级，4~6分枝为2级，7~9分枝为3级，10~20分枝为4级，20分枝以上为5级。采用HPLC法测定其有效成分量，同时结合其生长指标、产量等因素综合分析。结果 不同分枝数量百蕊草之间的药材品质存在显著差异，其中5级分枝百蕊草单株干质量最高，可达5.710 6 g，而1级分枝最低，为0.224 5 g，单株产量相差高达25.4倍；百蕊草植株内总黄酮量总体随分枝数量的增加而减少，其中1级分枝质量分数最高，为4.02%，显著高于其他级别。山柰酚量也随着分枝数的增大而减少，其中1级分枝量最高为3.38 mg/g，显著高于4级分枝和5级分枝；在不同分枝级别中，百蕊草总黄酮和山柰酚之间为显著正相关关系。山柰酚与百蕊草根直径之间为显著负相关。结论 百蕊草分枝数量对其药材品质影响较大，从外在品质考虑，百蕊草分枝数量越多其产量越高，且种子数量也越多，但其有效成分的量却越低。]]> 2017/4/8 17:54:58 1032true 目的 筛选适用于显齿蛇葡萄Ampelopsis grossedentata实时荧光定量PCR（real-time fluorescence quantitative PCR，qRT-PCR）的内参基因。方法 设计简并引物，采用RT-PCR从显齿蛇葡萄中克隆6个候选内参基因片段，包括肌动蛋白基因（Actin）、3-磷酸甘油醛脱氢酶基因（GAPDH）、18 S核糖体rRNA基因（18 S-rRNA）、α-微管蛋白基因（α-Tubulin）、β-微管蛋白基因（β-Tubulin）和多聚泛素酶基因（UBQ）。应用qRT-PCR技术检测这6个候选内参基因在显齿蛇葡萄不同组织器官中（茎尖、嫩叶、成熟叶、老叶、茎和根）的表达情况。借助GeNorm、NormFinder和BestKeeper 3种统计学软件综合评价6个内参基因的表达稳定性。通过苯丙氨酸解氨酶基因（AgPAL）的表达分析对筛选出的内参基因进行稳定性验证。结果 18 S-rRNA、GAPDH和Actin的表达稳定性较好，适合作为显齿蛇葡萄不同组织基因表达研究的内参基因，以这3个基因为内参基因分析AgPAL基因的相对表达量，结果发现它们在各组织器官中的表达变化趋势基本一致。结论 确定显齿蛇葡萄qRT-PCR分析的合适内参基因，为后续相关基因表达研究奠定基础。]]> 2017/4/10 15:23:02 1031true 目的 研究华重楼皂苷类成分及药材生物量积累速度的时间、空间分布规律（随植株生长年限、采挖季节的变化规律及在不同部位的积累特征），明确最佳种植年限、采收季节、入药部位。方法 建立了基于高效液相色谱法-蒸发光散射检测器（HPLC-ELSD）同时测定华重楼6种皂苷（重楼皂苷I、II、VI、VII、V、H）量的方法以检测皂苷量的变化；采用烘干法测定药材折干率以指示生物量积累速度。结果 华重楼根茎折干率同生长年限呈正相关，8年生最高；随着采收月份呈波浪式，6月和1月为波峰；总皂苷构成以重楼皂苷VII、H为主，总皂苷量随着生长年限呈“V”字型，2年和8年为顶点；随着采收季节呈波浪式，3月和11月为波峰；植株不同部位的总皂苷分布差异明显，茎叶总皂苷量 > 根茎尖段总皂苷量 > 根茎中段总皂苷量≈根茎尾段总皂苷量，其中重楼皂苷VII的分布从茎叶向根茎尾端呈明显下降趋势，而重楼皂苷H则呈显著上升趋势。结论 生长年限、采收季节、植株部位对华重楼皂苷的累积有明显影响，人工栽培华重楼最佳种植年限为8年、最佳采收季节为11月；仅采用根茎尾段入药会降低商品药材质量；重楼皂苷VII可能同华重楼的萌芽和茎叶生长有关；茎叶可作为获取重楼皂苷的重要资源，对于扩大药源，提高资源利用效率有重要意义。]]> 2017/4/10 15:23:02 1030true 目的 建立柿Diospyros kaki叶的HPLC指纹图谱，并进行多成分测定，为柿叶及其相关产品的质量控制提供科学依据。方法 采用HPLC法，Diamonsil C₁₈（250 mm×4.6 mm，5 μm）色谱柱；以乙腈-0.2%甲酸水为流动相梯度洗脱；体积流量1.0 mL/min；柱温35℃；检测波长360 nm；进样量10 μL；对22批柿叶药材进行指纹图谱研究，用中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2004A版）进行评价，系统聚类分析和PCA分析将22批柿叶药材分为两类，同时对金丝桃苷、异槲皮苷、槲皮素和山柰素成分测定方法进行方法学考察。结果 建立了柿叶的指纹图谱，共标定了12个色谱峰为柿叶药材指纹图谱的特征峰，金丝桃苷在0.044～0.880 μg，异槲皮苷在0.078～1.560 μg，槲皮素在0.040～0.800 μg，山柰素在0.035～0.700 μg线性关系良好，r均大于0.999 8，平均回收率分别为97.59%、98.97%、100.55%、99.96%。结论 HPLC指纹图谱结合多成分测定可为柿叶及其相关产品的质量控制提供参考。]]> 2017/4/10 15:23:02 1029true 目的 建立藏药毛诃子药材HPLC指纹图谱，测定毛诃子中没食子酸、柯里拉京、鞣花酸和没食子酸甲酯量，为毛诃子药材质量控制提供依据。方法 采用Atlantic T3（250 mm×4.6 mm，5 μm）色谱柱，乙腈-0.2%冰醋酸水溶液为流动相，梯度洗脱，体积流量1.0 mL/min，进样量20 μL，柱温30℃。建立11批毛诃子药材HPLC指纹图谱共有模式，并采用化学计量学分析方法分析隐藏信息。采用HPLC-MSⁿ对毛诃子药材色谱峰进行指认，并对特征峰进行定量分析。结果 得到毛诃子HPLC指纹图谱，标示出21个共有峰，相似度均在0.9以上。采用HPLC-MSⁿ方法指认了18个化合物。主成分分析和聚类分析将样品大致分为3类。并结合偏最小二乘判别分析方法发现区分毛诃子样品的5个标志性化合物，其中指认出12号峰为诃子鞣酸。定量分析条件通过方法学验证，平均加样回收率在97.24%～98.58%。结论 对HPLC指纹图谱和主要成分量同时进行分析，方法快速、简便、重复性好，可作为藏药毛诃子质量控制有效方法之一。]]> 2017/4/10 15:23:03 1028true 目的 测定五味子果核表面颜色的数值即L^*、a^*、b^*值与五味子果核有效成分的量，研究五味子果核色泽与化学成分的相关性。方法 用数理统计方法即运用数理统计软件SPSS 20.0建立五味子果核表面色度值即L^*、a^*、b^*值与五味子甲素、五味子乙素、五味子醇甲、五味子酯甲之间的多元线性回归方程，再进行F检验，确定各色度值分别对五味子有效成分的影响程度。结果 色度值L^*与五味子甲素呈显著性负相关（r≥0.5），其它色度值与木脂素呈极低度（r≤0.2）或低度（0.2 < r < 0.5）相关。结论 利用五味子的色度值可推测其有效成分量高低，可用于五味子商品等级的划分，为更好地评价五味子质量提供科学依据。]]> 2017/4/10 15:23:03 1027true 目的 采用免疫亲和净化HPLC柱后光化学衍生荧光检测法测定动物药中黄曲霉毒素，考察该方法在动物药黄曲霉毒素测定中的可行性。并对动物药中黄曲霉毒素污染情况进行筛查，为动物药的监管提供依据。方法 样品经有机溶剂提取、免疫亲和柱净化后，利用高效液相色谱-光化学衍生-荧光检测器进行分析测定。对部分动物药，尤其是可能污染黄曲霉毒素的动物药进行加样回收率考察，测定动物药中黄曲霉毒素残留量，并对测定结果进行分析。结果 动物药中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的回收率均在70%～120%。16种64批动物药中有6种24批动物药检出了黄曲霉毒素，检出率为37.5%，其中4种13批动物药均出现了超过《中国药典》2015年版限度的现象，不合格率为20.3%。结论 免疫亲和净化HPLC柱后光衍生荧光检测法适用于动物药中黄曲霉毒素的测定。动物药的个别品种黄曲霉毒素污染情况较为严重，应尽快完善动物药的质量标准，保障用药安全。]]> 2017/4/10 15:23:03 1026true 目的 研究土壤中无机元素对不同产地黄芩中无机元素和黄芩苷量的影响。方法 测定山西、河北、山东、甘肃4个地区的黄芩中黄芩苷量、无机元素量及土壤中无机元素量，采用SPSS 17.0软件对所得数据进行统计分析。结果 不同产地黄芩中黄芩苷的量顺序依次为河北承德 > 山西运城 > 山东临沂 > 甘肃定西。黄芩中K、Fe、Mg量较高。各地黄芩中无机元素量和土壤中无机元素均成正相关，其中山东临沂所产黄芩和土壤中无机元素相关系数为0.953，呈显著正相关。黄芩苷仅与K、Fe、Mn呈正相关，与Cu、Zn、Mg均呈负相关。结论 土壤中无机元素量的多少对黄芩中无机元素量存在一定影响，且黄芩中无机元素量与黄芩苷量具有一定相关趋势。]]> 2017/4/10 15:23:03 1025true 目的 从川西獐牙菜Swertia mussotii中克隆牻牛儿基焦磷酸合成酶（SmGPPS）编码基因，并进行生物信息分析及该基因的表达研究。方法 根据川西獐牙菜转录组SmGPPS基因序列，设计特异性引物，通过RT-PCR扩增得到cDNA序列，通过生物信息对该序列进行分析；构建原核表达载体pET-28a-SmGPPS，转入大肠杆菌BL-21（DE3）中，在37℃、1 mmol/L IPTG诱导下进行表达。采用半定量RT-PCR方法检测SmGPPS基因在川西獐牙菜不同组织中的表达强度。结果 SmGPPS cDNA全长1 119 bp，编码372个氨基酸。并对其蛋白二级、三级结构进行了分析和预测。SmGPPS蛋白与其他植物中GPPS蛋白具有高度的相似性。SDS-PAGE结果表明所表达蛋白与预期蛋白大小一致。半定量RT-PCR结果表明SmGPPS在叶中表达量最高。结论 为进一步研究该基因的功能和利用基因工程手段提高川西獐牙菜中环烯醚萜类化合物产量提供了基础。]]> 2017/3/6 18:28:12 1024true 目的 克隆出浙贝母法呢基焦磷酸合酶（Farnesyl pyrophosphate synthase，FPS）基因，并对其表达量与生物碱积累量之间的相关性进行分析，以探究FPS基因在浙贝母生物碱合成代谢过程中的调控作用。方法 本研究采用RACE技术克隆出浙贝母FPS基因的全长序列；以浙贝母狭叶、宽叶和新梅园3个品种6个组织及10个不同发育时期的新鳞茎为材料，采用RT-qPCR和HPLC-ELSD技术分别测定了FPS基因的表达量与生物碱（浙贝甲素和浙贝乙素）的量，并对其进行相关性分析。结果 FPS基因cDNA序列全长1 629 bp，开放阅读框为1 056 bp，编码351个氨基酸；3个不同浙贝母品种中FPS基因组织特异性表达趋势相同，花中的表达量最高，其次为新鳞茎；不同发育时期新鳞茎FPS基因表达量与生物碱量相关性分析显示，在宽叶和新梅园品种中，FPS基因表达量与浙贝甲素、浙贝乙素量均具有明显的正相关性（相关系数分别为0.289、0.613，0.427、0.622），但在狭叶品种中，该相关性相对较低（0.054、0.236）；狭叶、宽叶和新梅园3个品种不同组织中FPS基因表达量与生物碱量具有正相关性（相关系数分别为0.057、0.476，0.085、0.495，0.375、0.432）。结论 本研究成功克隆出浙贝母FPS基因的全长序列，FPS基因参与了浙贝母生物碱的合成代谢调控。]]> 2017/3/6 18:28:12 1023true 目的 对我国不同产区的23份独蒜兰的遗传多样性进行分析，为后续资源利用奠定基础。方法 利用ISSR分子标记技术和类平均法（UPGMA）对23份独蒜兰资源进行PCR扩增和数据分析。结果 从100条ISSR引物中筛选出12条多态性较好的引物，在23份独蒜兰资源中扩增出86条DNA片段，其中多态性片段80条，多态位点百分率（PPB）为93.0%。23份独蒜兰资源被划分为2个类群，同一地区来源的大部分资源聚在同一类群或亚类群，也存在不同地区来源的资源间遗传关系较近的情况。结论 ISSR标记可为独蒜兰种质资源鉴定、遗传关系分析及品种培育提供一定依据。]]> 2017/3/6 18:28:12 1022true 目的 测定不同产地浮萍Spirodela polyrriza中5个黄酮类成分的量，并对其抗氧化活性进行评价。方法 采用HPLC法，以乙腈-0.1%甲酸为流动相测定8个产地17批浮萍药材中荭草素、牡荆素、木犀草苷、大波斯菊苷、木犀草素的量；采用DPPH清除率法比较不同产地浮萍的抗氧化活性，并结合聚类分析和主成分分析等化学模式识别技术对浮萍质量进行评价。结果 不同产地浮萍中5个黄酮类成分量存在一定差异，聚类分析和主成分分析均可将不同产地浮萍分为3类，且分类结果一致。其中陕西和山西产地的浮萍中荭草素、牡荆素、木犀草苷的量均较其他产地明显偏高；相关性分析表明，氧化清除率与黄酮类成分量呈显著正相关。结论 陕西和山西产地的浮萍黄酮类成分量高，抗氧化能力较强。所建立的分析方法稳定可靠，可为浮萍药材的产地识别和质量控制提供参考。]]> 2017/3/6 18:28:12 1021true 目的 建立冬虫夏草水溶性成分的HPLC指纹图谱方法，为冬虫夏草的真伪鉴别及质量评价提供依据。方法 采用HPLC法建立冬虫夏草及其主要混淆品（凉山虫草、古尼虫草、蛹虫草）水溶性成分的指纹图谱，标记了16个共有峰，并通过超高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱（UPLC/Q-TOF-MS）技术对指纹图谱中16个共有峰进行鉴定。结果 建立了冬虫夏草水溶性成分的HPLC指纹图谱方法，该方法能区分冬虫夏草及其混淆品，鉴定出其中12个共有峰，分别为胞嘧啶、尿嘧啶、胞苷、次黄嘌呤+鸟嘌呤、尿苷、胸腺嘧啶、腺嘌呤、肌苷、鸟苷、胸苷、腺苷和虫草素。结论 该方法简便易行，为冬虫夏草的真伪鉴别提供了科学依据。]]> 2017/3/6 18:28:12 1020true 目的 建立红花Carthamus tinctorius超高效液相色谱（UPLC）指纹图谱，为评价不同产地和不同品种红花的质量提供参考。方法 对产地来自新疆和河南共34批红花样品应用UPLC建立其指纹图谱，按“中药指纹图谱相似度评价系统”建立对照图谱，并进行相似度评价。运用SAS 9.30和Matlab软件对新疆不同品种和不同产地红花的UPLC指纹图谱特征峰进行聚类分析和主成分分析。结果 建立了红花药材的专属性UPLC指纹图谱，确立了26个共有峰；30批新疆红花样品和4批河南红花样品质量差异较大，新疆不同产地间和同一产地不同品种间具有一定差异。聚类分析和主成分分析均实现了新疆红花指纹图谱差异的识别。结论 该方法简便、高效、可靠，为红花药材的质量控制提供了有效的快速评价方法。]]> 2017/3/6 18:28:12 1019true 目的 克隆茅苍术Atractylodes lancea倍半萜类成分生物合成关键酶法呢基焦磷酸合酶（FPPS）基因全长并分析其表达规律。方法 以茅苍术总RNA为模板，运用同源克隆法和RACE技术克隆茅苍术FPPS基因（AlFPPS）的cDNA全长，并进行生物信息学分析；用qRT-PCR和GC-MS分析不同生长阶段FPPS在茅苍术根茎中的表达及倍半萜类成分量变化，并分析二者的相关性。结果 获得AlFPPS基因全长cDNA为1 320 bp（GenBank accession no.KX443242），含一个长1 029 bp的开放阅读框，编码342个氨基酸，包含5个保守功能域，其中2个富含天冬氨酸（DXXDD）。qRT-PCR及GC-MS结果显示不同时期茅苍术AlFPPS基因表达量与倍半萜类成分量呈显著正相关。结论 首次克隆获得AlFPPS基因的全长cDNA，初步证明AlFPPS基因是茅苍术倍半萜类成分生物合成途径中的重要调控位点，为茅苍术倍半萜类成分生物合成途径阐明与生物工程应用提供科学依据。]]> 2017/2/25 17:53:15 1018true 目的 研究并建立不同产地丹参茎叶UPLC指纹图谱，采用电喷雾离子源-四极杆-飞行时间质谱（ESI-QTOF/MS）对其特征峰进行定性研究，为丹参地上茎叶资源的综合开发利用提供科学依据。方法 采用UPLC法构建丹参茎叶的指纹图谱，色谱条件为ACQUITY UPLC BEH C₁₈（100 mm×2.1 mm，1.7 μm）色谱柱，以乙腈-0.1%甲酸水为流动相梯度洗脱，体积流量0.4 mL/min，检测波长280 nm，柱温35℃。质谱检测采用负离子模式；电压3.0 kV；离子源温度120℃；雾化温度400℃；雾化气800 L/h。同时应用相似度评价、聚类分析和主成分分析（PCA）对实验数据进行处理，以分析5个不同产地12批丹参茎叶样品间的相似性及差异性，并通过UPLC/Q-TOF/MS对丹参茎叶共有峰进行了定性分析。结果 获得丹参茎叶UPLC特征图谱，共有峰13个。12批丹参茎叶的相似度为0.823～0.997，聚类分析、PCA结果与相似度分析结果一致。结论 丹参茎叶UPLC指纹图谱的构建和化学模式的识别为其质量控制和丹参非药用部位利用价值的挖掘提供科学依据。]]> 2017/2/25 17:53:15 1017true 目的 建立金银花的HPLC对照指纹图谱，并在相同色谱条件下测定山银花的HPLC指纹图谱，通过计算相似度来区分山银花与金银花。方法 色谱柱Phenomenex Luna 5 μm C₁₈（2）100 A（250 mm×4.6 mm，5 μm）；柱温40℃，以乙腈-0.5%磷酸溶液为流动相梯度洗脱，体积流量1 mL/min，检测波长为350 nm，相似度计算采取屏蔽大峰积分的方法。结果 建立了金银花的HPLC对照指纹图谱，12批金银花相似度均在0.95以上，山银花相似度均小于0.80。结论 350 nm下金银花的HPLC指纹图谱能有效区分金银花与山银花药材，屏蔽大峰积分的相似度评价方法比较准确地反映了金银花与山银花间化学成分的差异。]]> 2017/2/25 17:53:15 1016true 目的 建立葛根药材中5种异黄酮类成分大豆苷元、大豆苷、葛根素、葛根素芹菜糖苷、葛根素-6"-O-木糖苷的一测多评法，验证该方法在葛根质量分析中应用的准确性及可行性。方法 以葛根素为内标，分别建立葛根素与葛根素芹菜糖苷、葛根素-6"-O-木糖苷、大豆苷、大豆苷元的相对校正因子，计算葛根中葛根素芹菜糖苷、葛根素-6"-O-木糖苷、大豆苷、大豆苷元的量，实现一测多评。同时采用外标法测定葛根药材中5种异黄酮类成分的量，并比较计算值与实测值的差异，以验证一测多评法在测定中的科学性及可行性。结果 各相对校正因子重复性良好，一测多评法测定结果与外标法测定结果无显著差异。结论 以葛根素为内标同时测定葛根素芹菜糖苷、葛根素-6"-O-木糖苷、大豆苷、大豆苷元的一测多评法可用于葛根药材的定量分析。]]> 2017/2/25 17:53:15 1015true 目的 控制五指毛桃Fici Hirtae Radix药材质量，制订药材质量标准。方法 通过植物形态、产地、历史沿革、功效、近年研究结果等的全面查考，修正《中国药典》1977年版五指毛桃药材的基原错误；采用性状、显微、薄层鉴别不同来源的商品药材；采用HPLC法测定药材中指标成分的量；按《中国药典》2010年版附录方法检测各检查项。结果 五指毛桃药材基原并非极简榕Ficus simplicissima Lour.，而是粗叶榕Ficus hirta Vahl。20批五指毛桃商品药材中除规定药用部位粗叶榕的根外，有约40%非药用部位的茎枝样品；不同部位性状、显微特征及薄层色谱区别明显。药材中补骨脂素量为0.008 48%～0.150%，佛手柑内酯为0.005 87%～0.026 3%，根类样品2种指标成分量显著高于非药用部位的茎枝样品。药材水分量为4.73%～8.27%，总灰分为2.58%～4.37%，酸不溶性灰分为0.054%～0.710%，醇溶性浸出物为6.23%～8.34%。结论 修正《中国药典》1977年版五指毛桃药材基原错误，规范其药用部位为粗叶榕的根。建立的五指毛桃药材的质量标准可全面、有效地控制药材质量，为临床合理、有效、安全用药提供参考。]]> 2017/2/25 17:53:15 1014true 目的 克隆滇龙胆Gentiana rigescens香叶醇-10-羟化酶（geraniol-10-hydroxylase，G10H）基因，对其进行定量表达以及生物信息学分析。方法 采用PCR技术获得G10H的cDNA序列，对G10H蛋白进行理化性质、二级结构和三级结构等生物信息学分析，并利用实时荧光定量PCR方法检测G10H基因在滇龙胆根、茎、叶中的表达情况。结果 克隆得到滇龙胆G10H基因，全长为1 400 bp，ORF 1 248 bp，编码415个氨基酸。生物信息学预测该基因编码蛋白质分子式为C₂₁₃₁H₃₃₉₀N₅₈₆O₆₁₅S₁₇，等电点为7.62，不稳定系数为44.20，疏水性系数GRAVY为-0.245。G10H基因在滇龙胆根、茎、叶中均有表达，其中在根中表达量最高，茎中最低。结论 首次从滇龙胆中克隆得到了G10H基因，为进一步阐明该基因的羟基化功能在滇龙胆龙胆苦苷生物合成途径中的重要作用奠定基础。]]> 2017/2/6 17:13:24 1013true 目的 对武当山区重楼属植物进行种内分子鉴定研究，以DNA条形码技术解决重楼因种内形态差异小而难以鉴别的问题，规范重楼的正品来源，确保本地药材的质量以及临床用药的有效性。方法 对ITS（internal transcribed spacers）序列进行克隆测序，以核基因ITS2片段作为DNA条形码，对研究材料进行PCR（polymerase chain reaction）扩增并双向测序，所得序列经CodonCode Aligner拼接后，用软件MEGA6.0（Molecular Evolutionary Genetics Analysis 6.0）进行相关数据分析，并构建NJ邻接树（neighbor-joining tree），利用Keller等建立的ITS2数据库及其网站预测ITS2的二级结构。结果 经BLAST鉴定，采集的武当山区重楼样本来源准确；武当山区重楼属植物ITS2序列长度均为232 bp，与七叶一枝花的基因序列相比，球药隔重楼有16个变异位点，华重楼只有1个变异位点；武当山区重楼的ITS2序列种内K2P（Kimura-2-parameter）距离为0~0.073 6，种内平均K2P距离为0.027 2；由所构建的系统聚类树可以看出，本地区重楼主要分为七叶一枝花和球药隔重楼2大类，华重楼为七叶一枝花的变种，宽叶重楼、狭叶重楼与七叶一枝花为一支，不支持宽叶重楼、狭叶重楼成为独立的变种；比较ITS2二级结构发现，武当山区重楼属植物螺旋区的茎环数目、大小、位置有明显差异。结论 DNA条形码为重楼属药用植物鉴别开辟一条新途径，不论是相似性搜索法、最近距离法还是NJ系统发育树等方法，其分析结果均充分表明，ITS2序列可将不同品种重楼药材很好地区分开；七叶一枝花、狭叶重楼、宽叶重楼的ITS2基因232个碱基序列完全相同，MEGA 6.0的分析结果也表明宽叶重楼、狭叶重楼与七叶一枝花属于一支，不支持宽叶重楼、狭叶重楼成为独立的变种，建议作为七叶一枝花的变型处理；ITS2作为DNA条形码序列能够有效地区别重楼属植物，在中药材的鉴定中具有重要的应用前景，在实现规范化种植规程中可用于种质种源的正确鉴定。]]> 2017/2/6 17:13:24 1012true 目的 筛选效率最高的酵母前体饲喂方式，为在酵母中进行基因功能验证提供方法学指导。方法 首先构建含PsP6H基因和PsCPR基因重组酵母工程菌，然后用4种不同的方法进行前体饲喂，最后质谱检测下游产物二氢血根碱来确定最优方案。结果 最优的前体饲喂方法是将酵母工程菌经过半乳糖诱导31 h后在pH 8.0的Tris EDTA溶液中孵育24 h。结论 不同的前体饲喂方式对酵母工程菌下游产物产生不同影响，经优化后的酵母前体饲喂方法较稳定，重复性好。]]> 2017/2/6 17:13:24 1011true 目的 对蓼科植物掌叶大黄Rheum palmatum的不同组织器官（主根、根头、支根、根皮、叶柄和叶片）的主要资源性成分进行分析评价。方法 采用高效液相色谱（HPLC）法、紫外可见分光光度（UV）法、粗纤维检测（Weende）法、电感耦合等离子体原子发射光谱（ICP-AES）法对掌叶大黄不同组织器官中的蒽醌类、可溶性多糖类、总纤维素和无机元素进行测定。结果 掌叶大黄主根、根头、支根、根皮中分别含芦荟大黄素3.22~4.33、1.33~2.32、3.21~3.68、3.22~3.76 mg/g，大黄酸0.77~1.36、2.46~2.52、1.16~1.46、1.02~1.21 mg/g，大黄素0.27~0.39、0.28~0.34、0.30~0.42、0.31~0.67 mg/g，大黄酚2.85~3.70、2.78~3.01、4.02~4.81、4.05~4.72 mg/g，大黄素甲醚1.88~2.44、1.82~2.01、2.48~3.02、3.61~4.46 mg/g。而叶中含芦荟大黄素0.56~1.07 mg/g，大黄酸0.45~0.69 mg/g，大黄素1.41~1.91 mg/g。主根、叶柄、叶片中可溶性多糖质量分数分别为9.76%~10.42%、5.76%~7.63%和3.50%~5.72%。叶柄和叶片中纤维素质量分数分别为15.54%和10.20%。掌叶大黄叶片中Ca量最高，达88.53 mg/g，K、Mg、Al、Fe依次为32.42、12.93、1.22、1.17 mg/g；叶柄中Ca、K量分别为80.60、28.73 mg/g，高于主根21.08、14.09 mg/g；叶柄中Na量为2.66 mg/g，高于主根0.26 mg/g和叶片0.57 mg/g。结论 蒽醌类成分在根中的种类和量总体高于叶柄和叶片，符合传统入药部位的认识。叶片中大黄素量大致为根中的5倍，叶柄、叶片中还含有一定量的纤维素和可溶性多糖类成分，元素种类丰富，可进一步深入开发利用。]]> 2017/2/6 17:13:24 1010true 目的 建立姜黄一测多评测定方法，同时测定其中3种姜黄素类成分量，并进行方法学考察。方法 采用高效液相色谱法，Chromstar^TM C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），流动相为乙腈-4%冰醋酸溶液（48：52），检测波长为422 nm，体积流量为1.0 mL/min，柱温为30℃；以姜黄素为参照物，建立其与去甲氧基姜黄素、双去甲氧基姜黄素相对校正因子，分别以外标法和一测多评法计算3种姜黄素类成分质量分数。结果 该方法可同时测定姜黄中3种姜黄素类成分量，且测定结果与外标法相比无显著性差异（RSD<2.0%）。结论 本法简便、可行、重复性好，可为进一步完善姜黄的质量标准提供参考。]]> 2017/2/6 17:13:24 1009true 目的 比较不同产地薏苡Coix lacrymajobi有效成分甘油三油酸酯和薏苡素量的差异。方法 甘油三油酸酯的检测以Discovery C₁₈为色谱柱，乙腈-二氯甲烷（66：34）为流动相，体积流量0.7 mL/min，柱温30℃，蒸发光散射检测器，漂移管温度45℃，氮气体积流量1.5 L/min；薏苡素检测采用HPLC法，以Agilent ZORBAX SB-C₁₈为色谱柱，乙腈-水（25：75）为流动相，体积流量1 mL/min，柱温25℃，检测波长232 nm。结果 浙江泰顺薏苡仁中甘油三油酸酯量最高，达到1.04%，质量分数最低的是安徽亳州产薏苡仁，为0.53%；上海产薏苡中的薏苡素量最高，达到3.469 7 mg/g，但安徽产薏苡中的薏苡素质量分数最低，为0.619 3 mg/g。结论 8个不同产地的薏苡中甘油三油酸酯和薏苡素的量均存在较大差异，其中浙江、福建2地产薏苡甘油三油酸酯和薏苡素量相对较高，药材品质较佳。]]> 2017/2/6 17:13:25 1008true 目的 研究橘核传统药用品种大红袍Citrus reticulata ‘Dahongpao’中柠檬苦素类化合物生物合成机制与转运规律。方法 利用UPLC法测定橘种子生长发育过程中茎、叶、果皮及种子中的柠檬苦素、诺米林、黄柏酮等柠檬苦素类化合物的量，采用灰色关联度分析方法，与克隆获得的角鲨烯合成酶基因（ss）、角鲨烯环氧酶基因（se）、葡萄糖基转移酶基因（lgt）表达量进行关联度分析。结果 不同器官中柠檬苦素类化合物在种子中得到最大积累；不同器官中柠檬苦素类化合物的积累与ss、se、lgt基因表达均有较大的关联，但在种子中柠檬苦素的积累与ss、se、lgt基因表达最密切，其中ss基因表达对柠檬苦素、诺米林、黄柏酮的积累贡献最大。结论 本实验为柠檬苦素类化合物合成机制与转运规律提供可靠、科学的依据。]]> 2017/1/21 10:23:36 1007true 目的 克隆红花Carthamus tinctorius赖氨酸合成途径关键酶二氢吡啶二羧酸合酶（dihydrodipicolinate synthase，DHDPS）基因并研究其在不同发育时期红花籽粒中的表达量。方法 根据红花转录组文库注释信息筛选出与红花DHDPS（CtDHDPS）基因相关的Unigenes，设计引物，以红花总RNA的反转录产物为模板，采用RT-PCR技术克隆CtDHDPS基因片段，连接pEASY-T1克隆载体，经PCR和酶切鉴定，筛选阳性克隆并测序。同时利用荧光定量PCR技术对其在红花籽粒不同发育时期基因表达量进行分析。结果 分离到长度为396 bp的CtDHDPS基因片段，系统发育树分析表明该基因与其他物种的DHDPS基因具有较高的同源性。结论 克隆了CtDHDPS基因的核心片段，根据CtDHDPS基因片段设计引物，对不同品种不同发育时期红花种子进行基因表达量分析，CtDHDPS基因在红花品种川红1号初花后14 d表达量最高。]]> 2017/1/21 10:23:36 1006true 目的 研究刺五加内生放线菌株13-85抑菌活性及活性稳定性，检测菌株活性物质合成相关功能基因，对菌株进行鉴定。方法 采用平板纸片法测定菌株抑菌活性及发酵液稳定性；PCR扩增其活性物质合成相关功能基因片段（PKS I、PKS Ⅱ、NRPS、Halo、CYP），克隆并测序分析。通过菌株表型特征及分子特征对其鉴定。结果 菌株13-85发酵液具有广谱较强的抗病原菌活性，抑菌活性较为稳定；菌株基因组含有PKS Ⅱ、NRPS基因。经比对，PKS Ⅱ片段与已知Streptomyces fradiae PKS序列（登录号AFO70128.1）相似度为89%，NRPS片段与Streptomyces virginiae NRPS序列（登录号WP_033225509.1）相似度达95%。菌株13-85与Streptomyces amritsarensis（登录号GQ906975）16 S rRNA基因序列相似率高达99.65%。结论 菌株13-85发酵液有较为广泛的抑菌活性且稳定性较好，菌株含有PKS Ⅱ、NRPS基因，初步鉴定该放线菌为链霉菌属有效发表种Streptomyces amritsarensis的一个菌株，具进一步开发应用价值。]]> 2017/1/21 10:23:36 1005true 目的 研究河北省秦皇岛市柽柳居群遗传多样性和亲缘关系，也为柽柳的杂交育种和个体鉴定提供依据。方法 采用ISSR分子标记技术，以白花柽柳、松柏柽柳和刚毛柽柳为对照研究秦皇岛29份柽柳的遗传多样性。结果 筛选的9条ISSR引物扩增出114个DNA位点，110个多态位点，占总位点的96.49%。32份柽柳的平均有效等位基因数为1.5437，平均Nei's基因多样性指数为0.3203，平均Shannon信息指数为0.4842。基于ISSR分子标记数据建立的UPGMA亲缘关系聚类图，32份柽柳在遗传距离28.79处将32份柽柳分成2大类群；同时利用多态性ISSR引物构建32份柽柳的分子指纹图谱。结论 秦皇岛柽柳遗传多样性非常丰富，ISSR分子标记技术可以有效地用于柽柳资源评价和指纹图谱构建。]]> 2017/1/21 10:23:36 1004true 目的 比较不同种质金线莲中氨基酸和矿物质元素的差异。方法 采用全自动氨基酸分析仪和原子吸收光谱仪测定11个不同种质金线莲中氨基酸和矿物质元素的量。结果 不同种质金线莲必需氨基酸为2.81%~4.47%，总氨基酸量为11.38%~17.06%，其中天门冬氨酸、谷氨酸和精氨酸的量明显高于其他氨基酸组分。矿物质元素中钾元素的量最高，其顺序为K > Ca > Mg > Fe > Mn > Zn > Cr > Cu > Pb > Cd。主成分分析表明丙氨酸、丝氨酸、谷氨酸、天门冬氨酸、苏氨酸、异亮氨酸、丙氨酸、苯丙氨酸、亮氨酸为金线莲的特征性氨基酸，Fe、Zn、Mn、Ca、Cr、Mg为金线莲的特征性元素。结论 金线莲中氨基酸和矿物质元素量存在地域性差异。]]> 2017/1/21 0:00:00 1003true 目的 通过比较野山参与园参在抗坏血酸-谷胱甘肽（AsA-GSH）循环中代谢相关酶活性及代谢物的量，探讨野山参与园参抗氧化能力差异。方法 氮蓝四唑法测定超氧化物歧化酶（SOD）活性，高锰酸钾滴定法测定过氧化氢酶（CAT）活性，UV法测定抗氧化酶活性和抗氧化物的量，利用氨基酸自动分析仪检测谷氨酸、半胱氨酸、甘氨酸量。结果 野山参中SOD、CAT活性高于园参，在AsA-GSH循环中野山参抗坏血酸过氧化物酶（APX）、单脱氢抗坏血酸还原酶（MDHAR）、谷胱甘肽还原酶（GR）等抗氧化酶活性均高于园参，谷胱甘肽（GSH）、抗坏血酸（AsA）、脱氢抗坏血酸（DHA）等抗氧化物的量有高于园参的趋势。比较谷胱甘肽合成前体的上游氨基酸（谷氨酸、半胱氨酸、甘氨酸）量，发现野山参亦高于园参，保障了AsA-GSH再循环的平衡。结论 AsA-GSH循环中关键抗氧化酶活性及抗氧化物量均为野山参高于园参，导致野山参抗氧化能力强于园参，为野山参与园参功效差异研究提供了理论依据。]]> 2017/1/21 10:23:36 1002true 目的 利用生物信息学手段预测黄芪Astragalus membranaceus的miRNA及其靶基因，应用定量PCR分析其干旱胁迫表达模式，为黄芪miRNA研究奠定基础。方法 下载公共核酸数据库中的黄芪高通量测序序列，使用Trinity软件拼接获得转录本数据。利用生物信息学预测方法进行黄芪miRNA及其靶基因的预测，并对靶基因进行功能分类分析。利用茎环引物荧光定量PCR方法验证miRNA的存在，并分析miRNA在干旱胁迫下的表达模式。结果 序列拼接获得88 263条黄芪转录组数据。使用这些数据预测到分属于17个家族的17个miRNA序列以及相应的茎环结构前体。这些miRNA靶向的145个基因主要参与基因转录调控、物质代谢、信号转导、胁迫应答和蛋白翻译后修饰等生物学过程。随机选取8个miRNA进行茎环引物荧光定量PCR验证，其干旱逆境表达模式分析表明miR2118和miR166可能参与了黄芪的干旱胁迫应答。结论 预测的黄芪miRNA、靶基因以及干旱应答miRNA，为理解miRNA在黄芪中的生物学功能提供了重要数据。]]> 2017/1/6 11:20:27 1001true 目的 比较单拷贝核基因、叶绿体基因及ITS等DNA条形码在地黄属的物种分辨率，探讨地黄属种间亲缘关系。方法 利用距离法与建树法分析了地黄属植物13个居群的12个单拷贝核基因、6个叶绿体基因以及ITS片段物种鉴定成功率，构建了地黄属系统发育树。结果 叶绿体matk和rbcL、单拷贝核基因物种分辨率普遍较低，多基因联合分析有助于物种鉴定成功率的提高。在NJ树中，地黄-茄叶地黄聚为一支，其他物种都是单系群，裂叶地黄位于系统发育树基部。结论 ITS是地黄属物种鉴定的核心条形码，psbA-trnH、trnL-F、trnM-V、trnS-G可以作为备选方案，核基因RR255与R257可用作地黄专用鉴定条形码。四倍体地黄起源方式有待进一步澄清。]]> 2017/1/6 11:20:27 1000true 目的 对蛭类转录组进行SSR分析，是开发功能分子标记、开展对药用蛭类资源的开发利用及进行遗传背景监测的必要手段。方法 利用与医学密切相关的医蛭科棒纹牛蛭Poecilobdella javanica和日本医蛭Hirudo nipponia、黄蛭科宽体金线蛭Whitmania pigra和山蛭科洞穴山蛭Heamadipsa cavatuses sp.nov.共14个样本，通过RNA测序及转录组分析，筛选吸血差异unigene，并比较4个种的SSR标记特征和分布，用于挖掘抗凝血相关功能EST-SSR。结果 通过SSR密度分析发现，SSR在棒纹牛蛭、日本医蛭、宽体金线蛭和洞穴山蛭转录组中的间隔长度为4 723、6 026、8 059、8 144 bp；SSR组成分析发现三碱基重复的基序占蛭类SSR类型组成中绝大多数；另外，洞穴山蛭的SSR组成与其他3种存在明显区别。比较4种吸血蛭吸血前后转录组中表达丰度显著差异的unigene群，发现4种蛭中包含SSR且抗凝血相关的重叠unigene类群在转录组中呈较高的片段多态性。结论 unigene片段长度、SSR的密度、组成和分布特点能反映物种之间的分类关系；4种蛭重叠的抗凝血相关分子功能对应的EST-SSR，可作为抗凝血相关的功能分子标记侯选EST-SSR。]]> 2017/1/6 11:20:27 999true 目的 建立UPLC-DAD法测定黄芪中4种黄酮类成分的测定方法，结合化学计量学方法快速鉴别黄芪的产地。方法 采用UPLC法测定5个省份20批黄芪药材中毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素4种黄酮类成分，运用聚类分析、主成分分析、判别分析方法综合分析不同产地黄芪质量。结果 以毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素4种黄酮类成分的量为标准，进行聚类分析与主成分分析，两者结果一致，可将不同黄芪产地区分为3大类。判别分析进一步以Fisher判别函数的形式将内蒙古、四川、吉林产地较准确进行区分，甘肃与陕西的样品出现了误判，初始分组的正确率为85%。结论 UPLC结合化学计量法可快速、准确鉴别黄芪产地，研究结果也可为不同产地黄芪的质量评价提供科学的依据。]]> 2017/1/6 11:20:28 998true 目的 建立不同产地广东紫珠Callicarpa kwangtungensis的HPLC指纹图谱，用于广东紫珠药材质量的评价。方法 采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2004A版）对5省15批不同产地的广东紫珠药材的HPLC指纹图谱进行相似度评价，并使用SPSS 19.0软件进行聚类分析和主成分分析。结果 选取了12个色谱峰作为指纹图谱共有峰，15批样品的相似度计算结果均大于0.900，说明各产地的药材有较好的一致性；通过聚类分析可将15批样品聚为4类；主成分分析用3个主成分对广东紫珠药材进行综合评价，综合得分结果显示，湖南会同、广西桂林、江西武宁、江西南昌、江西萍乡、江西宜春的广东紫珠药材在所有样品中的综合得分位于前6名。结论 本实验建立的广东紫珠质量评价方法操作简便，重复性好，结果可靠，可以用于广东紫珠药材的质量控制和评价。]]> 2017/1/6 11:20:28 997true 目的 建立HPLC-ESI-MS/MS法同时测定连翘心中连翘酯苷A、连翘苷、连翘脂素、芦丁、槲皮素、异槲皮苷、阿魏酸和橙皮苷的量。方法 色谱柱为Diamonsil C₁₈柱（150 mm×4.6 mm，5 μm），流动相为甲醇-0.1%甲酸水，梯度洗脱，体积流量800 μL/min，进样量10 μL；质谱采用电喷雾离子源（ESI源），负离子模式监测，源喷射电压-4 500 V，离子源温度650℃，定量分析采用多反应监测模式（MRM）。结果 连翘心中8种成分在线性范围内峰面积与质量浓度均呈良好的线性关系，加样回收率为98.1%～101.8%，精密度RSD值小于0.84%。连翘酯苷A、连翘苷、连翘脂素和芦丁的量较高，平均质量分数分别为1 609.78、80.08、86.64和373.86 μg/g，槲皮素、异槲皮苷、阿魏酸和橙皮苷的量较低。结论 该法灵敏度高、专属性好、结果可靠，适用于连翘心中多组分的测定。]]> 2017/1/6 11:20:28 996true 目的 拟利用藤石松Lycopodiastrum casuarinoides生药与饮片中微小RNA（miRNA）表达谱，鉴定其中热稳定存在的miRNA，为今后藤石松miRNA生物药效研究奠定基础。方法 选取藤石松的2种加工形态生药与饮片全株样品（包含茎、叶、分枝），采用Illumina HiSeq^TM 2500高通量测序方法，根据miRNA家族在不同物种中的保守性，将miRBase数据库中的已知植物miRNA与通过高通量测序获得的藤石松miRNA序列进行比对，利用生物信息学方法，注释藤石松中的所有miRNA序列，并鉴定生药与饮片之间的差异表达miRNA分子，同时完成它们相应的人类靶基因预测，此外，对这些miRNA及靶基因进行GO和KEGG功能注释分析。结果 生药组与饮片组分别获得9 898 332、10 099 918条序列，其长度基本呈正态分布，而且均在21、24 nt的位置上形成2个峰值。两组显著差异表达的miRNA共计25个，其中22个表达上调，3个表达下调。GO分析结果表明miRNA靶基因涉及富集与结合、催化、分子转导等分子功能以及细胞调控、代谢过程等生物过程。KEGG通路富集分析表明靶基因多集中于癌症与免疫相关通路，如pathways in cancer、proteoglycans in cancer等信号通路。结论 首次揭示了藤石松生药与饮片的miRNA表达谱，存在潜在的可利用的植物来源的稳定miRNA分子，为进一步研究藤石松中与癌症或免疫相关的miRNAs分子药理功能奠定基础。]]> 2017/12/26 17:34:07 995true 目的 建立角类动物药材的DNA提取方法，使提取的DNA质量满足PCR及测序要求，同时可用于陈旧动物角类样品的DNA提取。方法 为避免取骨塞部位用EDTA脱钙造成DNA提取不完全或DNA被破坏，取角质层部位，采用二硫苏糖醇（DTT）结合化学试剂盒中的细胞裂解液及蛋白酶K处理角质层样本，其余按试剂盒操作提取DNA。考察了取样量、DTT用量对角质部位DNA质量的影响。结果 确定了取样量为25 mg，DTT用量为20μL，角质细胞裂解完全，所有样品的DNA质量均可满足PCR要求。结论 建立的DNA提取方法，提取DNA完全，可标准化操作，可应用于多种动物角的提取。]]> 2017/12/26 17:34:07 994true 目的 研究不同预处理方式及培养温度对北柴胡种子萌发和幼苗生长的影响，为北柴胡人工栽培提供科学依据。方法 测定种子千粒质量、净度、含水量及吸水率，采用双层滤纸培养法，将预处理后的种子置于20℃恒温40%光照的培养箱中培养，不同培养温度处理组蒸馏水浸泡24 h后在对应温度的培养箱中培养，观察种子发芽势、发芽率、发芽指数、活力指数和幼苗根长及苗高的变化。结果 种子净度约91.51%，千粒质量为（2.83±0.03）g，吸水率为自然风干种子质量的2.24倍，含水量约7.3%。不同激素对种子的处理效果不同，其中0.6 mg/L 6-BA处理效果最好；水浴能普遍提高幼苗活力指数，40℃水浴显著促进了北柴胡种子萌发，幼苗生长；15℃环境下种子的萌发率最高，但幼苗根长、苗高较低。结论 北柴胡种子预处理方式为浸泡在0.6 mg/L 6-BA中，40℃水浴2 h，初始培养温度为15℃，萌发后移至20℃下继续培养，可有效提高种子萌发率及成苗率，对北柴胡的种子育苗及人工栽培具有重要指导意义。]]> 2017/12/26 17:34:07 993true 目的 克隆铁皮石斛Dendrobium officinale倍半萜合成酶（sesquiterpene synthase，SES）基因，分析其在铁皮石斛不同组织中的表达差异以及在信号分子茉莉酸甲酯（methyl jasmonate，MeJA）诱导下的表达模式。方法 采用RACE技术克隆铁皮石斛SES（DoSES）cDNA全长，利用相关软件和在线网站对其进行生物信息学分析，并使用实时荧光定量PCR技术分析DoSES的表达模式。结果 获得的DoSES cDNA序列（GenBank登录号为KX278311）全长1 890 bp，含有1个1 659 bp的完整开放阅读框（ORF），编码552个氨基酸的多肽链，与其他科属植物的同源性达到60%左右。DoSES基因在铁皮石斛茎中表达量最高，从高到低依次是叶、花、原球茎、根；且受到MeJA的诱导。结论 克隆了铁皮石斛DoSES基因，为进一步研究调控铁皮石斛萜类代谢奠定了理论基础。]]> 2017/12/19 14:41:23 992true 目的 初步探索接种不同外源性丛枝菌根（AM）真菌对滇重楼Paris polyphylla var.yunnanensis幼苗内源激素水平变化规律。方法 以灭菌土壤为生长基质，于室温盆栽条件下对滇重楼新鲜种子与28种AM真菌共培养后采样，采用HPLC测定和比较分析各处理组滇重楼根茎和须根内源激素玉米素核苷（ZR）、赤霉素（GA）、吲哚乙酸（IAA）和脱落酸（ABA）的量。结果 接种外源性AM真菌能提高滇重楼幼苗菌根侵染率和成苗率，AM真菌对滇重楼幼苗根茎和须根中ZR、GA、IAA、ABA 4种激素量的变化表现出不同的规律，但具有偏好性。与对照组相比，整体上接种AM真菌处理组根茎中ZR、GA量呈现增长的趋势，IAA量变化规律不明显，而ABA量呈现减少的趋势，接种AM真菌处理组根茎中ABA/ZR、ABA/GA、ABA/IAA值呈现减少的趋势，但须根与根茎的变化趋势相反。结论 AM真菌能促进滇重楼幼苗的存活率，且不同AM真菌菌株影响滇重楼内源激素量。]]> 2017/12/19 14:41:23 991true 目的 分析和比较5个不同产地、不同生长年限曼地亚红豆杉中3种紫杉烷类活性成分量的差异。方法 利用甲醇和三氯甲烷混合液超声浸提后再用甲醇溶解得到样品溶液；通过高效液相色谱法测定和比较10-脱乙酰基巴卡亭Ⅲ（10-DAB Ⅲ）、三尖杉宁碱和紫杉醇量及3者总量。结果 不同产地、不同生长年限的曼地亚红豆杉中3种紫杉烷类及其总量间存在极显著性差异（P < 0.01）；10-DAB Ⅲ、三尖杉宁碱、紫杉醇和3种紫杉烷类总量相对较高的3个产地及生长年限分别依次为HK4 > SM3 > SM2、ZL3 > HK4 > ZL4、ZL3 > SM2 > HK4、HK4 > ZL3 > ZL6。除10-DAB Ⅲ与三尖杉宁碱量间不存在显著的相关性外，其余各成分间均存在极显著的正相关关系（P < 0.01）；不同产地及生长年限间紫杉醇与3种紫杉烷类总量间呈现出同升同降的趋势；聚类分析表明福建福州产区紫杉醇量具有一定的特殊性，而河南开封3种紫杉烷类总量有别于其他产区。结论 产地和生长年限对曼地亚红豆杉中3种紫杉烷类量的变化具有明显的影响，可以通过对生物合成途径进行调控，继而达到获得更多紫杉醇原料药的目的。]]> 2017/12/19 14:41:23 990true 目的 对不同居群野罂粟Papaver nudicaule的全草及不同部位（根、茎、叶、花、果）总生物碱及3种主要生物碱（野罂粟碱、黑龙辛甲醚、瑞芙热米定）进行测定，为野罂粟药材的科学利用与质量评价提供科学依据。方法 采用HPLC-MS-IT-TOF法对野罂粟全草进行定性分析，分别采用溴甲酚绿酸性染料比色法和UPLC-MS法对野罂粟的总生物碱及3种主要生物碱进行定量测定。结果 通过定性分析，初步得到13个生物碱成分，基本确定了其中6个主要生物碱成分；定量分析结果表明，各成分的量均表现出较大的变异性，其中以乌兰布统、黄岗梁和多伦地区的综合品质较好，其中乌兰布统的野罂粟品质最佳；并且其全草和花中所含有的生物碱类成分量最高。结论 评价野罂粟品质特征时建议以总生物碱和野罂粟碱为主要参考指标；建议选择乌兰布统、黄岗梁和多伦开展野罂粟优良品种选育和药材质量标准制定及道地产地规划等研究，而最佳采收期应选在7月下旬至8月上旬为宜，采收部位应选择花和全草。]]> 2017/12/19 14:41:23 989true 目的 建立大黄Rheum palmatum13个有效成分的HPLC测定方法以及不同产地大黄的质量评价模式。方法 采用ZORBAX C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm，5μm），以甲醇-0.1%磷酸水为流动相，梯度洗脱，体积流量1.0 mL/min，254 nm波长下对没食子酸、表儿茶素、儿茶素、芦荟大黄素苷、大黄酸苷、大黄素苷、大黄酚苷、大黄素甲醚苷、芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚进行测定，对结果进行主成分分析。结果 建立了大黄13个成分的线性回归方程，精密度以及重复性的RSD值在5.00%以内，加样回收率在95.54%～103.19%，样品24 h内稳定；27批样品大黄的量存在较大差异，主成分分析得到5个特征根，主成分综合模型值在0.335～1.905，四川绵阳大黄值最高。结论 建立了大黄13个主要成分的测定方法。主成分分析为大黄药材质量评价提供一种手段，主成分综合模型值可作为大黄质量的评价依据。]]> 2017/12/19 14:41:24 988true 目的 采用高效液相色谱-二极管阵列检测器-蒸发光检测器（HPLC-DAD-ELSD）联用技术，建立苦丁茶冬青叶的指纹图谱。方法 岛津C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm，5μm），以乙腈-水为流动相进行梯度洗脱，体积流量1.0 mL/min，检测波长210 nm，柱温35℃。结果 通过10批苦丁茶冬青药材的指纹图谱，建立了共有模式，其中HPLC-DAD指纹图谱共有峰18个，相似度为0.911～0.970，HPLC-ELSD指纹图谱共有峰11个，相似度为0.914～0.962。结论 方法精密度、重现性、稳定性好，为客观评价苦丁茶冬青药材的质量提供了科学依据。]]> 2017/12/19 14:41:24 987true 目的 克隆猪苓Polyporus umbellatus菌核无机磷酸盐转运蛋白基因并进行生物信息学和表达模式分析。方法 采用RT-PCR技术从猪苓菌核中克隆得到1个无机磷酸盐转运蛋白（inorganic phosphate transporter）基因，利用生物信息学软件预测蛋白的理化性质、结构域、信号肽和跨膜结构等分子特性；采用Clustal W2以及MEGA 6.0分别进行氨基酸多序列比对和进化关系分析；实时荧光定量PCR分析基因表达模式。结果 猪苓无机磷酸盐转运蛋白基因命名为PuPiT（NCBI登录号：KU179154）。该基因开放读码框全长为1 590 bp，编码530个氨基酸。PuPiT蛋白相对分子质量为57 552，等电点6.82。氨基酸序列分析表明，PuPiT蛋白具有12个跨膜区。氨基酸序列多重比对及系统发育树结果显示PuPiT与Moniliophthora rorer亲缘关系最近，与Moniliophthora roreri、双色蜡蘑Laccaria bicolor、Heterobasidion irregulare有较高的同源性，荧光定量PCR结果表明，PuPiT在与蜜环菌共生的猪苓菌核及未与蜜环菌共生的菌核中都有表达，其中共生部分的表达量显著上调，约是未共生部位的12倍，说明其参与猪苓与蜜环菌共生过程。结论 PuPiT基因克隆和分子特征为进一步研究揭示其在猪苓菌核磷元素转运及与蜜环菌共生过程中的调控作用奠定基础。]]> 2017/11/25 13:19:30 986true 目的 获得瑞香狼毒Stellera chamaejasme转录组数据库代谢途径基因序列、SSR以及转座子等信息。方法 以瑞香狼毒根作为受试材料，采用二代测序方法中的Illumina HiSeq 2000进行转录组测序，并进行系统的生物信息学分析。结果 共获得26 785 872个Clean reads片段，拼接得到47 053条Unigenes，平均长度为419 nt。将拼装所得到的Unigene序列利用BLAST工具分别与Nr、Swiss-Prot、KEGG、COG和GO数据库进行比对，分别有11 138和24 744条Unigene在Nr和Swiss-Prot数据库中比对得到了注释信息，可归于36个GO分类，涉及119个KEGG标准代谢通路，进一步分析发现15条萜类生物合成途径的关键酶基因。利用MISA软件发现3 480个SSR，数量最高的SSR类型为单碱基重复，为1 986条，出现频率为57.07%，最少的是六碱基重复SSR，只有5条，出现频率仅为0.14%。利用RepeatMasker在线工具针对瑞香狼毒转录组序列进行转座子预测分析，结果共发现有1 497条转座子，其中E值<1×10⁻⁵的序列有827条，包含22种类型转座子，数目最多的为LINE/L1类型（405条），占比为48.97%，占比最少的为DNA/Ginger、DNA/hAT、DNA/PIF-ISL2EU和LINE/Jockey以及LTR/Lenti类型分别只有1条。结论 对瑞香狼毒进行高通量测序，获得了大量基因序列信息以及SSR和转座子信息，为今后分离克隆瑞香狼毒中佛波酯等有效成分生物合成的关键酶基因以及开展相关分子机制研究提供了数据资源和理论基础。]]> 2017/11/25 13:19:31 985true 目的 利用CDDP标记技术对43份铁皮石斛Dendrobium officinale野生和栽培种质进行初步抗性筛选和遗传多样性分析，为铁皮石斛产业以及优良品种筛选保护提供理论基础。方法 从21条CDDP引物中筛选出产物清晰、多态性好的引物对供试材料基因组DNA进行扩增。结果 16条引物共扩增出了151条带，其中多态性条带144条，多态性比率95.7%，表明供试材料具有丰富的遗传多样性。种群遗传多样性结果表明，3个种群多态性位点比例（PPL）为65.56%~82.12%，种群间基因分化系数（G_st）为0.110 2，基因流（N_m）为4.035 4，说明人为选择亦可能促进铁皮石斛的遗传多样性。结论 铁皮石斛人工栽培种具有丰富的遗传多样性，同时统计结果分析表明，43份材料中可以初步筛选出8份具有潜在优良抗性的植株。]]> 2017/11/25 13:19:31 984true 目的 探讨七叶一枝花Paris polyphylla var.chinensis种子萌发不同阶段的酶和内源激素调控机制，为其种子解除休眠、萌发不同阶段采取有效处理措施，提高出苗率提供科学依据。方法 通过观察和测定变温层积处理后七叶一枝花种子萌发不同阶段形态差异，采用常规的生理生化方法测定超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、过氧化物酶（POD）、苹果酸脱氧酶（MDH）、6-磷酸葡萄糖脱氢酶（G-6-PDH）5种酶活性，采用质谱定量方法测定吲哚乙酸（IAA）、赤霉素（GA₃）、脱落酸（ABA）、水杨酸（SA）、反玉米素（TZ）、茉莉酸（JA）量；研究种子萌发过程中胚率与酶活性和内源激素量变化之间的相关性。结果 七叶一枝花种子从未萌动、上胚轴休眠到即将出苗阶段，种子质量和胚率逐步上升；SOD和POD活性逐步升高；CAT和MDH活性逐步减弱，G-6-PDH活性出现双峰，未萌动阶段和萌动后上胚轴未伸长阶段显著高于其他阶段；IAA、GA₃、ABA、JA的量逐步升高，IAA和JA量在即将出苗阶段显著高于其他阶段（P<0.01）；TZ和SA的量先升高后降低，TZ的量在子叶分化形成期和胚乳成熟期显著高于其他阶段（P<0.01），SA出苗前期量最高，已萌动胚根刚突破种皮阶段和胚乳形成阶段量次之；CAT酶活性变化与胚率呈显著负相关，IAA和JA的量变化与胚率呈显著正相关。结论 CAT对种胚的生长有抑制作用，IAA与JA对种胚的生长有正向促进作用。]]> 2017/11/25 13:19:31 983true 目的 以多个指标对三七Panax notoginseng进行优质种源筛选，提高三七的整体质量评价水平。方法 通过测定云南省12个产地三七样品中三七皂苷R₁、人参皂苷Rg₁、人参皂苷Re、人参皂苷Rb₁、总黄酮和总多糖的量，结合逼近理想解排序法（TOPSIS）建立整体质量评价模型。结果 文山、红河、玉溪、昆明和曲靖三七样品与最优方案接近程度C_i的平均值分别为0.300 2、0.341 1、0.279 5、0.338 7与0.323 0，表明云南不同产地三七的整体质量较为接近，道地产地文山与其余产地三七的整体质量差别较小。样品编号为S₄₆、S₁₆及S₃₃的C_i值在所有样品中排名前3，表明这3个样品的整体质量较高，可作为优质种源进一步开发利用。结论 熵权TOPSIS模型排除了人为因素的干扰，并将多维问题转化为一维问题，提高了多指标决策分析的科学性与准确性，可对三七进行整体质量评价及优质种源筛选。该方法理论完善、易于操作，可推广于其他中药的相关研究，为保证中药安全、稳定及有效提供研究基础。]]> 2017/11/25 13:19:31 982true 目的 建立苗药虎耳草药材的HPLC指纹图谱及5种成分定量测定方法，为虎耳草质量控制提供参考。方法 采用Agilent Eclipse XDB-C₁₈（150 mm×4.6 mm，5 μm）色谱柱，以乙腈（A）-0.1%磷酸水溶液（B）为流动相，进行梯度洗脱；体积流量1.0 mL/min，检测波长254 nm，柱温35℃。对21批不同产地的虎耳草建立HPLC指纹图谱，采用国家药典委员会"中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2004A）"对结果进行分析处理，并选取主要成分建立多指标测定方法。结果 指纹图谱研究所建立的方法结果良好。21批不同产地虎耳草的HPLC指纹图谱中，确定11个共有峰，并指认了其中5个色谱峰，分别是原儿茶酸、没食子酸、岩白菜素、槲皮素-5-O-β-D-葡萄糖苷和槲皮苷，21批虎耳草药材与对照药材的相似度差异较大。将5个指认成分作为主成分建立多指标测定方法，其线性关系良好，范围分别为0.052 8~0.844 8、0.020 96~0.335 36、0.241 6~3.865 6、0.130 8~2.092 8和0.023 68~0.378 88 μg；5种成分的回收率分别为96.64%、100.72%、96.62%、103.71%、96.75%，RSD均小于2%。21批药材中5种成分的质量分数分别在0.07~0.40、0.19~4.36、1.42~5.98、0.42~6.86、0.11~1.51 mg/g。结论 所建立的方法简便可靠、耐用性好，可作为虎耳草药材质量控制方法。]]> 2017/11/25 13:19:31 981true 目的 获得赶黄草Penthorum chinense转录基因参考序列和表达量信息，探索赶黄草药用活性成分生物合成的遗传基础，为赶黄草的重要功能基因研究提供参考。方法 采用Illumina HiSeq 2000高通量测序技术，对赶黄草进行转录组测序，对获得的数据进行过滤组装，对得到的unigene进行比对注释，同时对本研究获得赶黄草活性成分合成相关代谢通路基因进行分析。结果 共获得了40 005 442条有效的短读序，通过de novo拼接得到42 306个unigene，开放阅读框（ORF）分析共计得到518个ORF，其中75个ORF具有转录因子结构域。通过KEGG分析，检测到33、32、59、68个unigene分别参与黄酮类生物合成、固醇类生物合成、萜类骨架生物合成和羧酸代谢。结论 本研究发现的这些基因对赶黄草遗传改良和药用活性物质的生物合成路径相关基因研究有着重要意义。]]> 2017/11/9 13:16:07 980true 目的 注释并分类红花Carthamus tinctorius中转录因子家族，分析其在不同组织间的表达水平差异。方法 使用红花不同组织转录组测序数据组装Unigene，利用Nr数据库中转录因子信息比对并注释红花转录因子，同时对MYB转录因子家族的基因表达、蛋白保守结构域及系统发育树等内容重点分析。结果 红花转录组测序数据中共获得731个转录因子，分属42个转录因子家族。MYB转录因子家族成员的表达及蛋白结构分析显示，MYB转录因子家族在花冠中表达差异显著，氨基酸序列中存在3个保守的蛋白核心结构，系统发育树分析显示聚为2类MYB亚族。结论 红花MADs-box、bHLH、MYB、AP2转录因子家族成员最多，在不同组织间表达差异显著，MYB转录因子家族具有一定保守性。]]> 2017/11/9 13:16:08 979true 目的 在红花Carthamus tinctorius中克隆调控类黄酮合成的MYB转录因子基因，通过序列及表达分析初步鉴定参与调控类黄酮合成的MYB转录因子基因。方法 对已报道调控类黄酮合成MYB转录因子进行序列比对，设计简并引物克隆核心序列，采用RACE技术克隆MYB转录因子基因全长，利用生物信息学方法分析基因序列，采用半定量PCR分析基因在红花不同组织及不同花期的表达情况。结果 克隆得到3个调控类黄酮合成候选MYB转录因子基因，命名为CtFRMYB1、CtFRMYB2及CtFRMYB3。序列全长分别为1 223、1 080、1 348 bp，蛋白质相对分子质量分别为17 878.15、28 766.45、27 987.89。序列分析表明3个转录因子都具DNA结合功能，属MYB转录因子家族。进化分析表明CtFRMYB1和CtFRMYB2同AtMYB12关系较近。表达分析表明CtFRMYB1和CtFRMYB2仅在花中表达且在花期3（开花第3天）表达量较高。结论 成功克隆3个调控类黄酮合成候选MYB转录因子基因CtFRMYB1、CtFRMYB2及CtFRMYB3，经生物信息学及表达分析初步鉴定到2个调控红花类黄酮合成MYB转录因子基因CtFRMYB1及CtFRMYB2，为红花类黄酮合成的调控机制研究奠定基础。]]> 2017/11/9 13:16:08 978true 目的 建立鸡血藤Spatholobus suberectus的HPLC指纹图谱分析方法，为其质量控制提供依据。方法 采用ZORBAX SB-C₁₈柱（150 mm×4.6 mm，5μm），以乙腈（A）-0.2%磷酸水溶液（B）为流动相进行梯度洗脱，体积流量为1 mL/min，检测波长260 nm，柱温为30℃。并运用聚类分析和主成分分析对鸡血藤指纹图谱进行模式识别研究。结果 建立了鸡血藤药材HPLC指纹图谱的共有模式，确定35个共有峰，并根据对照品指认6个共有峰。17批药材的相似度分析结果与聚类分析、主成分分析结果基本一致。结论 HPLC指纹图谱结合聚类分析、主成分分析可以快速、高效地评价不同产地鸡血藤药材的质量差异。]]> 2017/11/9 13:16:08 977true 目的 对蜘蛛香药材的指纹图谱进行研究，为有效控制其质量提供可靠的方法。方法 以Phenomenex Gemini C₁₈（250 mm×4.6 mm，5μm）为色谱柱，乙腈（A）-0.1%磷酸水溶液（B）为流动相，梯度洗脱，体积流量为1.0 mL/min，检测波长254 nm，柱温25℃，测定蜘蛛香药材的HPLC指纹图谱。结果 建立的蜘蛛香药材HPLC指纹图谱有17个共有峰，并对6个共有峰进行了化学成分指认；18批蜘蛛香药材中有15批相似度大于0.89；主成分分析用3个主成分抽象代表17个成分进行评价。结论 该方法简便、快速、可靠，可以有效地评价该药材的质量。]]> 2017/11/9 13:16:08 976true 目的 建立龙血竭中5种有效成分的一测多评法，探讨一测多评法在龙血竭质量控制中的应用。方法 采用高效液相色谱法，使用Fortis Xi C₁₈（250 mm×4.6 mm，5μm）色谱柱，流动相为乙腈（A）-1.0%冰醋酸水溶液（B），梯度洗脱，0~10 min，25%~30% A；10~60 min，30%~50% A，体积流量1.0 mL/min；检测波长278 nm；柱温30℃；进样量10 μL。以紫檀茋为内参，分别建立7，4'-二羟基黄酮、白藜芦醇、龙血素A和龙血素B相对于紫檀茋的相对校正因子，分别采用外标法和一测多评法测定5种成分的量，并比较二者结果的相对误差。结果 7，4'-二羟基黄酮质量浓度在10.23~102.27 μg/mL、白藜芦醇质量浓度在11.01~110.14μg/mL、龙血素A质量浓度在9.47~94.72 μg/mL、龙血素B质量浓度在11.59~115.90 μg/mL、紫檀茋质量浓度在24.35~243.52μg/mL线性关系良好；4种化学成分相对于紫檀茋的相对校正因子分别为0.626、1.064、1.154、0.837；且在不同实验条件下耐用性良好（RSD<3.0%）；一测多评法的计算结果与外标法测得结果无显著差异。结论 建立的一测多评法可作为龙血竭中5种有效成分的测定方法，一测多评法为龙血竭质量控制提供了新的模式与方法。]]> 2017/11/9 13:16:08 975true 目的 研究生态因子和人参皂苷合成关键酶表达对人参皂苷合成、积累的影响。方法 以人工栽培的4年生人参为研究对象，用实时荧光定量PCR法对在不同生长时期根组织中8个关键酶基因（HMGR、FPS、SS、SE、DS、β-AS、CYP82D47、CYP716A47）表达量进行测定；采用HPLC法测定根中8种单体皂苷（人参皂苷Rg₁、Re、Rf、Rb₁、Rb₂、Rb₃、Rc、Rd）的量；以小型气象站对人参样地气象数据进行采集；采用SPSS软件进行相关性分析。结果 人参皂苷合成关键酶基因在人参皂苷积累的重要时期（开花期至果熟期）的表达高于果后参根生长期和枯萎期，人参皂苷合成关键酶基因的表达相互影响，协同增减，人参根组织中关键酶基因的表达对人参皂苷积累多表现出了正相关关系；人参根中人参皂苷Rg₁、Rb₁、Re、Rc量较高，8种单体皂苷量动态变化趋势并不相同；温度、光合有效辐射、土壤水势是影响根部人参皂苷合成的重要生态因子，温度与人参皂苷Rb₁、Rd显著负相关（P<0.05），光合有效辐射对人参皂苷Rg₁的生成有显著的促进作用（P<0.05），土壤水势与人参皂苷Rb₁显著负相关（P<0.05）；灰色关联度分析结果表明温度、光合有效辐射、相对湿度是影响人参皂苷量的主导生态因子，人参皂苷合成关键酶基因的表达是次要因子，在生态因子主导下人参皂苷合成关键酶基因调控人参皂苷的合成与积累。生态因子与关键酶基因的表达共同调控了人参皂苷的合成，对人参皂苷的积累有重要影响。结论 明确了人参皂苷合成关键酶基因表达和人参皂苷量在人参中的动态变化，为人参皂苷合成生理生态机制的明晰及对人参药材质量的调控提供了理论依据。]]> 2017/10/27 16:53:41 974true 目的 克隆灯盏花MYB基因的全长序列，为解析灯盏花MYB基因的功能奠定基础。方法 根据灯盏花转录组的相关信息，利用RACE方法从灯盏花中克隆到一个可能参与灯盏花乙素合成的MYB基因，在对其cDNA序列、核苷酸序列的相似性、理化性质、疏水性、跨膜结构、二级结构及三级结构进行分析预测的基础上，对其进行多序列比对并构建系统树。同时，还构建了该基因与绿色荧光蛋白的融合表达载体，并进行了初步转化研究。结果 克隆获得灯盏花MYB基因，命名为ebMYB06，其开放阅读框为783 bp，编码260个氨基酸残基，相对分子质量为63 800，理论等电点（pI）为5.18，属稳定蛋白。其蛋白二级结构主要由无规卷曲、α-螺旋和β-折叠构成。根据灯盏花MYB与拟南芥MYB（AtMYB）的系统树比对分析结果，发现ebMYB基因与拟南芥中的AtMYB4、7、32、6、8和AtMYB11、12、111 2亚群的基因聚类，推测所克隆基因在结构或功能上，可能与这两组具有共同性。实验还表明所构建的表达可用于灯盏花的高效转化。结论 首次从灯盏花中克隆到可能参与其苯丙烷代谢或环境响应调控的MYB基因。]]> 2017/10/27 16:53:41 973true 目的 分析不同来源籽用栝楼资源的遗传多样性。方法 应用SRAP分子标记技术并结合ITS序列分析对11份籽用栝楼资源30个样本进行遗传特征研究，并分别应用mega 5.0和NTSYS-pc 2.1软件对ITS序列及SRAP扩增条带进行聚类分析。结果 栝楼与双边栝楼ITS序列存在稳定的碱基差异；15对SRAP分子标记引物扩增得到清晰条带165条，其中多态条带136条，多态率为82.4%，聚类结果显示在相似度为0.18时栝楼与双边栝楼资源分为2大类群，双边栝楼来源的主栽品种遗传相似度较大，在相似度为0.90时分为3个分支。结论 籽用瓜蒌来源品种多样，主要来源于双边栝楼，且各地栽培资源遗传差异较小。]]> 2017/10/27 16:53:41 972true 目的 建立超高效液相色谱-高分辨质谱法（UPLC-FT/MS）同时测定类叶牡丹Cauorlhyllum robustum中9种三萜皂苷类成分的方法。方法 采用正离子模式；色谱柱：ACE Excel 3 C₁₈（100 mm×2.1 mm，3.0 μm）；保护柱：ACE Excel 3 C₁₈（12.5 mm×4.6 mm，3.0 μm）；流动相为0.1%甲酸水（A）-乙腈（B）溶液，梯度洗脱，体积流量0.40 mL/min，柱温35℃。结果 定量分析的类叶牡丹中三萜皂苷类成分在考察的浓度范围内呈良好的线性关系（r>0.996）；加样回收率和RSD分别在98.49%~107.03%和1.00%~3.33%。结论 本研究建立的同时测定类叶牡丹中9种三萜皂苷类成分的UPLC-FT/MS定量分析方法灵敏度高、分辨率高、质量稳定并且简便、准确，可为综合评价类叶牡丹的质量提供参考。]]> 2017/10/27 16:53:42 971true 目的 对冬虫夏草进行转录组测序，为虫草素生物合成提供依据。方法 利用Illumina/Solexa HiSeq 2500高通量测序平台对冬虫夏草菌丝体和子实体转录组进行测序、数据组装，分析并预测虫草素生物合成途径、相关基因及差异表达量，发现代谢途径中多数酶在菌丝体发育阶段的表达水平较高。采用cDNA克隆技术从新鲜冬虫夏草子实体中克隆到核糖核苷酸还原酶（RNR）基因亚基。结果 其中RNR是腺苷代谢的关键酶，从转录组数据中挖掘到RNR大、小亚基各1条，及4条RNR同源序列。RNR大亚基（RNRL）cDNA全长2 733 bp，编码910 aa，RNR小亚基（RNRM）cDNA全长1 257 bp，编码418 aa。通过保守区域和功能结构域分析发现主要催化活性位点位于RNRL，RNRM含有铁结合蛋白保守位点，大小亚基均含有二聚体和亚基结合区域。结论 基于转录组测序预测，以RNR为切入点研究虫草素合成途径，为最终揭示虫草素生物合成机制提供数据支持。]]> 2017/9/30 18:54:41 970true 目的 分析不同居群对叶百部Stemona tuberosa的亲缘关系和遗传多样性。方法 应用ISSR分子标记技术研究长江流域以南各省对叶百部的遗传多样性；采用POPGENE32进行亲缘关系分析，NTSYSpc-2.10E进行UPGMA聚类分析。结果 7条ISSR引物共检测到74个清晰的扩增位点，多态性位点74个，多态性位点百分率100%；有效等位基因数（N_e）为1.524 4，平均Nei's基因多样性指数（H_e）为0.314 6，平均Shannon多样性指数（I）为0.478 6，各居群间的遗传距离介于0~0.950 2，平均值为0.416 3。结论 从分子角度揭示了对叶百部具有较高的遗传多样性，其居群间亲缘关系与地理环境有一定的相关性，实验结果将为后续对叶百部引种栽培及根用药植物资源的持续利用，特异生物碱的筛选及其运用于化学分类，以及对叶百部道地药材产区的科学选择奠定理论基础。]]> 2017/9/30 18:54:41 969true 目的 以铁皮石斛Dendrobium officinale实生种子为外植体，研究铁皮石斛原球茎的增殖、分化、诱导生根等条件，筛选出适宜铁皮石斛原球茎高效再生的诱导条件，建立高效的再生体系。方法 以铁皮石斛种子为外植体，在培养基上诱导产生原球茎，经过增殖培养后，转移到分化培养基中诱导芽苗分化，待分化的芽苗长到1~2 cm时，转移到生根培养基诱导生根，最终长成完整的再生植株。结果 适宜铁皮石斛生长的基本培养基为1/2 MS；原球茎诱导的培养基为1/2 MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+50 g/L土豆泥；原球茎增殖的最适培养基为1/2 MS+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA，最高增殖系数达23；最佳分化培养基为1/2 MS+2.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA，平均分化率最高达95%；最佳生根培养基为1/2 MS+0.3 mg/L NAA+50 g/L土豆泥，生根率达100%。结论 铁皮石斛实生种子是铁皮石斛离体繁殖的优良外植体来源。以铁皮石斛种子诱导获得的高效再生技术体系可以为铁皮石斛快速繁殖和工厂化生产提供理论基础。]]> 2017/9/30 18:54:41 968true 目的 探索北柴胡Bupleurum chinense侧根发育过程及影响侧根发育的因素，为北柴胡产量提升及商品性改良提供技术支撑。方法 对北柴胡品种川北柴1号主根进行石蜡切片观察侧根原基发育动态图，以及添加不同浓度生长调节物质后进行根系参数考察。结果 北柴胡侧根原基起源于中柱鞘细胞，部分内皮层细胞也参与侧根原基发育；施加10 μmol/L IAA和Ca²⁺浓度均最大化促进北柴胡根系发育，而浓度过高则抑制侧根发育；施加0.1 μmol/L TIBA和10 μmol/L EDTA显著促进柴胡根系发育，浓度过高则起抑制效果。结论 本研究方法还可以广泛应用于人参、当归等以根入药的药用植物中，对药用植物栽培及育种工作具有重大意义。]]> 2017/9/30 18:54:41 967true 目的 建立了基于仿生嗅觉技术的枳壳气味指纹图谱鉴别方法，为枳壳质量控制提供参考。方法 采用仿生嗅觉系统电子鼻（PEN3）检测不同产地枳壳气味信息，用线性判别分析（LDA）进行气味指纹图谱构建与分析，采用MATLAB 2013实现鉴别仿真。结果 不同产地枳壳气味指纹图谱的整体"相貌"是相似，但各自的特征指纹峰值有明显差异。建立的枳壳气味指纹图谱可实现对不同产地枳壳的已知样品和未知样品96%的准确分类。结论 该方法操作简单、重复性好、检测速度快，建立的枳壳气味指纹图谱可为其质量控制提供方法。]]> 2017/9/30 18:54:42 966true 目的 以黄酮类化合物蒙花苷和倍半萜类化合物豚草素A为指标成分，对不同产地的野菊花药材进行定性定量研究，提高野菊花的质量标准。方法 采用薄层色谱法（TLC）对蒙花苷和豚草素A进行定性分析；采用高效液相法（HPLC）测定蒙花苷和豚草素A的量；YMC C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相为乙腈（A）-0.05%磷酸水溶液（B）；梯度洗脱，0~18 min，25%~26% A；18~26 min，26%~32% A；26~33 min，32%~34% A；33~35 min，34%~40% A；35~65 min，40%~50% A；体积流量0.8 mL/min；检测波长203、340 nm；柱温35℃。结果 蒙花苷和豚草素A的TLC鉴别特征较为明显，不同产地二者的量有所不同，其中信阳野菊花药材中蒙花苷和豚草素A的量最高，分别为6.53%和0.81%。结论 首次建立了野菊花药材不同类指标成分的TLC和HPLC法测定综合评价方法，该方法简单、准确、重复性好，研究表明蒙花苷和豚草素A的量能够反映野菊花药材的品质，为提高野菊花现有的质量标准提供了科学的实验依据。]]> 2017/9/30 18:54:42 965true 目的 分析华重楼Paris polyphylla健株和茎腐病感病植株内生可培养内生细菌的多样性。方法 用牛肉膏蛋白胨培养基分离华重楼茎腐病及健康植株根茎、茎、叶等不同部位的细菌，采用16 S rRNA通用引物27F/1492R进行PCR扩增结合DNA测序技术，对分离自华重楼健株及茎腐病植株不同部位的细菌进行初步鉴定。结果 从华重楼的健康植株和感病植株中分离到11属23种细菌。从健株分离到4属11种内生细菌，其中根茎、茎、叶分别分离到9、10和5种内生细菌。从病株分离得到10属14种内生细菌，其中根茎、茎、叶分别分离到11、8和3种内生细菌。华重楼健株的根茎部内生细菌量最高，达2.999×10⁵ cfu/g，叶部内生细菌量较低，为7.32×10⁴ cfu/g，华重楼健株根茎、茎、叶中的芽孢杆菌量最高，比例分别为73.3%、67.1%和81.8%。华重楼病株的茎部内生细菌量最高，达2.817×10⁵ cfu/g，叶部内生细菌量较低，为2.76×10⁴ cfu/g，华重楼病株的根茎、茎、叶部的假单胞菌量最高，比例分别为35.6%、50.3%和60.5%。华重楼健株不同部位的多样性指数和均匀度指数均高于病株。结论 华重楼健康植株以芽孢杆菌为优势细菌类群，华重楼茎腐病植株以假单胞菌为优势细菌类群。华重楼健株相比病株具有更为丰富的内生细菌群落多样性。]]> 2017/9/22 8:41:10 964true 目的 克隆鱼腥草3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶（HMGR）基因并分析其差异表达。方法 采用实时荧光定量PCR（RT-PCR）方法获得HMGR基因cDNA序列并对HMGR蛋白进行理化性质、蛋白二级结构及三维结构预测分析，并预测该蛋白功能；利用RT-PCR方法检测HMGR基因在鱼腥草的地下茎、地上茎、叶、花中的表达情况。结果 克隆获得的HMGR基因cDNA全长为1 626 bp，编码541个氨基酸。生物信息学预测HMGR蛋白含2个跨膜区，不含信号肽。HMGR基因主要在鱼腥草的花中表达，其他器官中表达相对较低，地下茎中表达量最低。结论 首次从鱼腥草中克隆了HMGR基因，为进一步阐明该基因在鱼腥草萜类化合物代谢途径中的作用奠定基础。]]> 2017/9/22 8:41:10 963true 目的 筛选出在北柴胡不同生长时期及不同器官中表达均稳定的内参基因并进行验证。方法 利用实时荧光定量PCR获得18个候选内参基因所有C_t值，通过3种不同算法（Bestkeeper、NormFinder、GeNorm）的软件对内参基因稳定性进行分析，采用皮尔森相关系数（Pearson correlation coefficient）分析3个软件给出的稳定性排名结果。结果 所有候选内参基因的C_t值相对宽泛，ADF1b、ADF5、ADF7、eIF2b和ACT2为最为合适的内参基因，而eIF6被认为稳定性最差的内参基因。3个软件计算结果均呈现显著性相关。结论 采用实时荧光定量PCR结合3种不同算法进行北柴胡内参基因的筛选及验证是可行的。在北柴胡柴胡分子遗传研究中，发掘到的内参基因对目的基因进行均一化处理有助于提高目的基因表达分析的精确性及可信度。]]> 2017/9/22 8:41:10 962true 目的 建立两基原（决明、小决明）中药决明子的UPLC指纹图谱，为决明子药材质量控制和评价提供依据。方法 采用Agilent ZORBAX EP C₁₈（100 mm×3.0 mm，1.8 μm）色谱柱；以乙腈-0.01%甲酸水溶液为流动相，梯度洗脱，体积流量0.4 mL/min，检测波长285 nm，柱温30℃，进样量为1 μL。结果 首次建立了决明子UPLC指纹图谱共有模式，运用相似度评价软件标定了20个共有峰，结合保留时间和紫外光谱分析，指认了7个峰；20批决明子药材相似度均大于0.9；聚类分析结果为当欧式距离平方和为5时，20批决明子样品可分为4类；主成分分析降维得到3个主成分，根据主成分得分将样品进行划分归类，与聚类分析结果一致；通过拟合归纳第一主成分的载荷因子模型，筛选出红链霉素-6-O-β-龙胆二糖苷等具有评价决明子质量优劣的特征峰。结论 决明与小决明共有化学成分存在共性差异，该方法可以用于决明子药材质量控制和评价。]]> 2017/9/22 8:41:10 961true 目的 建立不同商品等级远志的主要成分分析方法，探索远志商品等级性状与主要化学成分指标间的关联性。方法 采用HPLC法对河北安国药材市场、西安万寿路药材市场、四川荷花池药材市场、安徽亳州药材市场商品等级的远志进行主要成分测定，利用数据处理软件进行各等级与成分间的相关性分析研究。结果 不同市场商品等级远志的主要成分测定结果与其商品等级不完全相符。结论 药材市场上远志商品等级的划分标准具有一定的局限性，为准确评价远志质量，还需制定新的远志药材等级质量标准，本研究也为远志的综合定量评价提供了一定的参考依据。]]> 2017/9/22 8:41:11 960true 目的 考察春、秋两采收期道地产区内蒙古阿拉善盟肉苁蓉Cistanche deserticola中松果菊苷、毛蕊花糖苷、半乳糖醇、甜菜碱、可溶性多糖及其浸出物的量，并研究其道地性。方法 采用HPLC-UV法测定松果菊苷及毛蕊花糖苷量，采用HPLC-ELSD法测定半乳糖醇及甜菜碱量，采用UV-VIS法测定可溶性多糖量，采用醇溶性浸出物测定法测定浸出物。结果 春季、秋季肉苁蓉中指标成分总量均达到《中国药典》2015年版规定水平，且春季的量较高，达12.21 mg/g，是秋季样品量的3倍多，为《中国药典》2015年版规定量的4倍。毛蕊花糖苷的量在春季样品显著高于秋季，约为秋季的30倍，波动极大；甜菜碱的量在春季样品中也显著高于秋季；可溶性多糖的量在春、秋季样品中均处于较高水平，尤其是秋季样品中高达13.7%；半乳糖醇及浸出物的量在秋季样品中显著高于春季。结论 肉苁蓉春季、秋季样品中毛蕊花糖苷量波动极大；本品含有丰富的可溶性多糖、半乳糖醇，而"油亮、体重、肥厚、质柔润、味甘"为肉苁蓉道地性内在品质特征，丰富的多糖、半乳糖醇是其品质形成的物质基础，可增加多糖作为评价其质量特征的指标成分之一。]]> 2017/9/22 8:41:11 959true 目的 采用DNA条形码分子鉴定技术鉴别市售柴胡药材及其混伪品，以确保柴胡药材质量及临床用药安全。方法 共收集85份柴胡药材，对其ITS2序列进行PCR扩增并双向测序，所得序列经CodonCode Aligner校对拼接后，利用MEGA 6.0对序列进行分析比对，计算种内、种间遗传距离，利用邻接法（NJ）构建系统聚类树，并应用ITS2数据库网站预测其ITS2二级结构。结果 柴胡种内遗传距离明显小于柴胡与其近缘物种种间遗传距离，基于ITS2建立的NJ树和网站预测的ITS2二级结构，均能将柴胡药材及其混伪品区分开。85份样品中，55份符合《中国药典》2015年版规定的柴胡正品来源，正品率为64.7%。结论 基于ITS2序列可以准确可靠地鉴别柴胡药材及其混伪品，为确保临床用药安全提供新的技术手段。]]> 2017/9/4 17:14:34 958true 目的 克隆丹参Salvia miltiorrhiza中第14亚群R2R3 MYB转录因子基因SmMYB87的全长序列，并对其进行生物信息学和表达分析。方法 以丹参总RNA为模板，利用同源克隆和cDNA快速扩增（RACE）技术获得SmMYB87 cDNA全长序列。运用生物信息学软件对该基因及其编码蛋白进行结构和理化性质分析，利用qRT-PCR测定SmMYB87在各器官中的表达并构建融合表达载体pTF-486-SmMYB87分析SmMYB87蛋白的亚细胞定位。结果 SmMYB87基因含有2个内含子和1个732 bp的开放阅读框（ORF），编码243个氨基酸。该基因在根、茎、叶和花中均有表达，且4个器官中的表达量没有显著差异。SmMYB87蛋白在细胞核和细胞膜上均有分布。结论 SmMYB87的序列结构和表达分析为进一步研究其在丹参中的生物学作用奠定了理论基础。]]> 2017/9/4 17:14:34 957true 目的 对石斛属叶绿体IRa（trnV-GAC~trnR-ACG）序列进行系统发育和变异位点分析，深入了解石斛属10个物种此序列所含9个基因的异同，为石斛属植物的系统进化历程及DNA条形码的研究作重要探索。方法 用改良试剂盒法提取石斛属10个样本总DNA，自行设计引物，采用聚合酶链式反应（polymerase chain reaction，PCR）及T载体对PCR产物进行克隆转化，扩增石斛属叶绿体IRa序列的DNA序列，并与NCBI数据库进行序列比对完成序列拼接；绘制此区域序列的基因结构图，对10条目的序列进行差异位点、遗传距离、系统进化关系等分析。结果 目的序列长约7 800 bp，10条目的序列共存在55个差异位点，在基因trnV-GAC、rrn16、trnI-GAU、trnA-UGC、orf42、rrn23及基因间隔区上分布的个数分别是1、8、12、6、1、9和18个；系统发育分析将石斛属10个样本聚为4个类群。结论 建立了测定石斛属叶绿体IRa序列的方法，对石斛属这一序列的系统发育和变异位点分析表明，此区域序列丰富，且较为集中分布的变异位点将为石斛属DNA条形码的进一步研究、石斛属资源的道地性评价及相关的种质资源鉴定提供较好的理论依据。]]> 2017/9/4 17:14:34 956true 目的 系统了解罗勒Ocimum basilicum花和叶的转录组特征，丰富罗勒转录组数据信息。方法 选取罗勒新鲜花朵和叶片为材料，利用Illumina HiSeq^TM 2500进行高通量测序，构建罗勒花和叶转录组文库，并用测序评估、转录组数据组装和基因功能注释等生物信息学方法进行分析。结果 对原始数据进行除杂之后，共获得86 331 137个reads片段，包含了6 455 365 309个核苷酸序列信息；将质控后得到的高质量序列进行de novo拼接，得到了90 341个Unigene片段。将Unigene与COG数据库进行比对表明，罗勒的花和叶转录组中的Unigene根据功能可大致分为25类；根据GO功能分类可大致分为生物过程、细胞组分和分子功能3大类43分支；利用KEGG数据库作为参考，依据代谢通路可以将转录组中的数据分成111类，包括生化代谢通路、植物病原体互作、DNA剪切、植物激素生物合成、苯丙氨酸生物合成、萜类化合物与类固醇类化合物合成、脂类代谢、RNA降解等。MISA软件成功设计15 617对SSR引物，检测到10 254个SNP位点。结论 研究结果为后期罗勒功能基因的挖掘、代谢途径及调控机制的研究奠定了理论基础。]]> 2017/9/4 17:14:34 955true 目的 采用电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）法测定天麻中As、Ba、Be、Cd、Co、Cr、Cu、Ga、Hg、Mg、Mn、Mo、Ni、Pb、Se、Sn、Sr、Ti、Tl、V 20种元素的量。方法 采用浓硝酸与双氧水作为混合溶剂，结合微波消解处理天麻样品。经过仪器工作条件的优化，进行了方法学考察，并测定了30批不同产地天麻样品中20种元素的量。结果 20种待测元素的线性关系良好（r ≥ 0.998 2），重复性试验RSD均≤ 6.34%，稳定性试验RSD均≤ 6.00%，精密度试验RSD均≤ 5.78%，加样回收率在91.62%~108.10%，RSD均≤ 5.21%。结论 该方法具有前处理简便、多种元素同时测定、分析速度快、灵敏度高、准确度高、精密度好等优点，可为天麻中元素的快速分析以及药材质量评价提供技术支持和科学依据。]]> 2017/9/4 17:14:34 954true 目的 对牡荆Viter negundo var.cannabifolia子及黄荆Vitex negundo子进行比较研究，为其鉴别提供实验依据。方法 采用原植物外观、性状、显微、薄层和HPLC鉴别方法，对黄荆子与牡荆子进行定性定量研究。结果 黄荆子与牡荆子在原植物形态、药材性状上相似，通过原植物和性状进行鉴别存在一定困难；显微鉴别中石细胞特征可为两者的有效鉴别提供实验依据；薄层鉴别中以黄荆子素为对照品，黄荆子中黄荆子素丰度明显高于牡荆子；HPLC测定中，黄荆子中所含黄荆子素的量高于牡荆子。结论 可采用显微、薄层和HPLC方法，结合药材粉末的石细胞特征和黄荆子素量差异对黄荆子与牡荆子进行有效地鉴别。]]> 2017/9/4 17:14:34 953true 目的 克隆太子参Pseudostellariae Radix赤霉素2-氧化酶（gibberellin2-oxidase，GA2ox）基因，并进行生物信息学和表达分析。方法 通过对太子参转录组数据库的分析，得到2个太子参GA2ox基因PhGA2ox1和PhGA2ox8。。采用反转录PCR（RT-PCR）和特异PCR技术获得2个基因的蛋白编码区（coding sequence，CDS），并对其编码的蛋白进行生物信息学分析。采用实时荧光定量PCR（qPCR）检测基因的表达模式。结果 生物信息学分析表明，PhGA2ox1和PhGA2ox8的CDS区分别长981和1 056 bp，编码326和351个氨基酸残基，蛋白相对分子质量分别为36 871.3和40 169.9，理论等电点为8.66和6.91，具有GA2ox的保守结构域DIOX_N和20G-Fell_Oxy，但均无明显疏水区，无跨膜结构域，无信号肽，为稳定蛋白。序列系统进化分析显示植物GA2ox蛋白可被分为3个亚类，PhGA2ox1和PhGA2ox8分别归入Class Ⅰ和Class Ⅲ亚类。qPCR分析显示，PhGA2ox1在不同组织器官中的表达基本恒定，而PhGA2ox8在块根木质部的表达量却显著高于在其他组织器官中的表达量（P< 0.05）。结论 首次获得PhGA2ox1和PhGA2ox8基因的编码区序列，为进一步分析2个基因在太子参生长发育过程中的作用奠定了基础。]]> 2017/8/2 11:19:16 952true 目的 克隆铁皮石斛Dendrobium officinale ABC（ATP-binding cassette）转运蛋白F家族基因并进行生物信息学分析。方法 利用RACE从铁皮石斛叶片cDNA中分离ABC基因，并进行编码蛋白相对分子质量、等电点、结构域、信号肽、跨膜域及亚细胞定位等生物信息学分析；采用DNASTAR和MEGA6进行氨基酸多序列比对和分子进化分析；借助实时荧光定量PCR技术检测基因组织表达模式。结果 从铁皮石斛中分离到2个F家族ABC转运蛋白基因DoABCF1和DoABCF2（GenBank注册号KU160474和KU160475），全长为2 104 bp和2 193 bp，各编码1条由600和659个氨基酸组成的肽链，相对分子质量67 030 和74 140，等电点6.20和5.71；DoABCF1和DoABCF2蛋白均包含2个保守的ABC结构域（分别为74～314、385～600和65～323、392～607）和多个基元；2个蛋白不含信号肽或跨膜域，预测均定位在叶绿体。2个基因与植物F家族ABC转运蛋白基因相似性高达80%以上，与玉米和水稻等单子叶植物F家族ABC转运蛋白基因亲缘关系较近。DoABCF1和DoABCF2基因转录本在石斛3个器官中差异表达且均在叶中高度表达，茎和根中相对表达量差异不显著；以茎为校正样本，前者在根中相对表达量为茎中的1.74倍，后者在叶中表达量为茎中的3.44倍。结论 成功获得DoABCF1和DoABCF2基因全长cDNA，二者在铁皮石斛叶中的高表达特征暗示其可能在铁皮石斛生长发育过程中起一定作用。]]> 2017/8/2 11:19:16 951true 目的 获得华细辛Asarum sieboldii转录组数据库和差异表达基因，识别华细辛甲基丁香酚生物合成相关基因。方法 以华细辛地下部分（根）和地上部分（叶片）2个样本作为供试材料，采用Illumina Hiseq 4000进行转录组测序，并从头拼接，对Unigene进行功能注释和差异性分析。结果 共获得12.25 Gb数据，拼接得到129 003个Unigene，可归类于52个GO分类，涉及363条KEGG代谢通路。分析发现，共有439个差异表达基因，其中上调基因占38.3%，下调基因占61.7%，差异较大；136个Unigene与苯丙素类次生代谢途径相关，其中44个Unigene参与甲基丁香酚的生物合成过程。结论 本研究得到大量华细辛转录本信息，所发掘的与甲基丁香酚生物合成相关的Unigene为相关基因的分离、功能验证及其表达调控机制的阐明提供了重要依据。]]> 2017/8/2 11:19:16 950true 目的 探讨秦艽基原植物之一麻花艽Gentiana straminea的遗传多样性，并构建DNA指纹谱。方法 在其自然分布区广泛取样，共涉及西藏、青海、甘肃及四川等地28个居群83份样本，应用ISSR分子标记技术，POPGEN软件分析遗传信息参数，NTSYS软件构建亲缘关系UPGMA聚类图。结果 从100条引物中筛出7条多态性好、条带清晰的引物用于ISSR分析。共检测到95个条带，其中多态性条带88个，多态性条带百分率（PPL）为92.63%；麻花艽居群间的期望杂合度（H_e）为0.288 2，多样性信息指数（I_m）为0.437 1，种群间基因分化系数（G_st）为0.678 3，基因流（N_m）为0.237 1，遗传距离为0.074 3～0.490 0。UPGMA树将麻花艽居群主要分为2大支。结论 麻花艽种群遗传多样性水平较高，居群间遗传多样性水平高于居群内；其遗传变异主要存在于居群间；遗传特性与地理分布具有一定相关性。该工作可为麻花艽品种鉴定、物种就地保护、探讨环境等因素对于遗传分化的影响及药材道地性研究提供基础资料。]]> 2017/8/2 11:19:16 949true 目的 研究蒙药阿格希日嘎与中药藜芦在化学成分和毒性方面的差异，为蒙药阿格希日嘎质量标准的制定奠定基础。方法 建立藜芦甾体生物碱类和茋类成分的HPLC指纹图谱，测定不同来源的8批蒙药阿格希日嘎和6批中药藜芦，所得色谱图导入“中药指纹图谱相似度评价系统”，建立蒙药阿格希日嘎和中药藜芦指纹图谱共有模式并进行相似度评价。选取藜芦特征色谱峰，包括甾体生物碱类32个和茋类16个，以各峰面积占总峰面积的百分比为变量，运用SPSS 20.0软件进行聚类分析。采用小鼠急性毒性实验法评价蒙药阿格希日嘎和中药藜芦的毒性。结果 建立了藜芦甾体生物碱类和茋类成分的HPLC指纹图谱测定方法，得到了蒙药阿格希日嘎和中药藜芦指纹图谱共有模式，各样品与其共有模式之间相似度良好。以甾体生物碱类和茋类成分为指标的聚类分析，均将14批药材聚成蒙药阿格希日嘎与中药藜芦2大类。蒙药阿格希日嘎比中药藜芦的急性毒性大，LD₅₀分别为0.503 0和17.934 3 g/kg。结论 蒙药阿格希日嘎与中药藜芦在功效主治、产地、化学成分和毒性方面具有很大差异，应区分入药并制定蒙药阿格希日嘎质量标准。]]> 2017/8/2 11:19:16 948true 目的 通过探索不同发育时期金银花颜色和每个花蕾活性成分量的相关性，为金银花药材的质量评价提供参考依据。方法 采用色度计测量不同发育时期金银花的颜色；HPLC法测定金银花样品中酚酸类、黄酮类、环烯醚萜类等14种化合物的量；采用SPSS 17.0软件分析金银花颜色与化学成分之间的相关性。结果 随着花蕾的发育，酚酸类、黄酮类化合物量在二白期、大白期最高，环烯醚萜类化合物量在大白期、银花期最高，从活性成分量结果考虑，金银花的最佳采收期为大白期；金银花发育过程中酚酸类、黄酮类化合物量与亮度（L^*）呈显著正相关，酚酸类、黄酮类和环烯醚萜类成分量均与褐变指数（BI）呈极显著负相关。结论 金银花的颜色与活性成分量密切相关，L^*与BI可以更好地将外观指标与内在质量联系起来。]]> 2017/8/2 11:19:16 947true 目的 克隆珍稀濒危药用植物铁皮石斛转录因子基因DoWRKY3，并进行生物信息学和表达模式分析。方法 采用RT-PCR和RACE技术获取基因全长；利用生物信息学软件预测蛋白的理化性质、结构域和亚细胞定位等分子特性；用软件DNASTAR 6.0和MEGA 6.0分别进行氨基酸多序列比对和进化关系分析；借助定量PCR检测基因表达模式。结果 分离到DoWRKY3基因（GenBank注册号KT957549），cDNA全长2 065 bp，编码1条由509个氨基酸组成的多肽，相对分子质量55 580，等电点6.58；推定的DoWRKY3氨基酸序列具有植物WRKY蛋白家族保守的2个WRKY结构域（217～279、381～449）、2个WRKYGQK位点和2个C₂H₂型锌指结构元件（C-X₄-C-X_22-23-H-X₁-H）；该蛋白预测无信号肽或跨膜域，定位在细胞核；DoWRKY3蛋白与多种植物WRKY蛋白一致性较高（46.3%～57.4%），与拟南芥AtWRKY3、AtWRKY4和丹参SmWRKY54蛋白等亲缘关系近，聚在WRKY分子进化树的Group 1分支；DoWRKY3基因具有组织表达特异性，其转录本在石斛根和叶中表达量较高，分别为茎中的2.32倍和1.69倍。结论 DoWRKY3基因全长的分子克隆与特征分析，为深入研究该基因在铁皮石斛生长发育、逆境生理以及次级代谢调控中的生物学功能奠定基础。]]> 2017/7/25 17:33:04 946true 目的 克隆和分析8种细辛属药用植物的ITS序列，为开展该属植物分子鉴定和遗传多样性研究奠定基础。方法 以基因组DNA为模板，利用PCR法克隆ITS全长序列，借助生物信息学软件对序列进行比对分析，并构建系统发育树。结果 测序结果表明，8种细辛属植物的ITS全长为637～646 bp，其中的5.8 S序列最为保守，长度和碱基组成完全一致；ITS1与ITS2均存在一定的变异，它们的长度分别为255～257 bp和226～232 bp，序列中出现大量插入/缺失和转换/颠换现象，ITS1、ITS2的可变位点和简约信息位点数分别为46/30和14/9。系统发育分析结果表明，8种细辛属植物在进化树上可分为4组，与传统分类结果完全一致，I～IV分别对应细辛组、华细辛组、长花组和杜衡组。结论 8种细辛属植物ITS序列具有丰富的信息位点，可用于这些植物的分子鉴定。]]> 2017/7/25 17:33:04 945true 目的 对福建省23个不同地理种源的南方红豆杉Taxus chinensis var. mairei进行分析，以揭示其种源和种群的遗传多样性，为南方红豆杉资源的收集与保护提供一定的理论依据。方法 利用RAPD分子标记技术，对福建省23个不同地理种源的南方红豆杉的遗传多样性进行分析。结果 物种水平上的观测等位基因数（N_a）为1.974 4，有效等位基因数（N_e）为1.603 8，Nei's基因多样性指数（H）为0.351 3，Shannon多样性指数（I）为0.522 8。不同种源的南方红豆杉的遗传多样性相对较高。通过对种源和种群的遗传多样性分析，发现23个不同种源的南方红豆杉的遗传距离变化幅度为0.240 4～0.912 0，遗传相似度的变化幅度为0.401 7～0.786 3。7个不同种群的南方红豆杉群体的遗传距离变化幅度为0.021 0～0.379 4，遗传相似度的变化幅度为0.684 3～0.979 2。根据Nei法计算南方红豆杉7个种群遗传多样性遗传相似度（D_st）为0.108 8，分化指数（G_st）为0.369 0，基因流系数（N_m）为0.855 0，总的遗传变异中有36.9%的变异存在于群体间，群体内的变异63.1%，种群内存在明显分化。结论 不同种源间的南方红豆杉存在一定的遗传变异，但不同种群间的南方红豆杉群体的相似度又比较高，亲缘关系较近。]]> 2017/7/25 17:33:04 944true 目的 发掘乌头子根质量相关分子标记，为乌头新品种选育提供技术支撑。方法 研究利用280个AFLP分子标记位点对126份乌头的自然群体进行了第一、二子根质量的分子标记-性状关联分析。结果 STRUCTURE软件基于k值变化推导出供试自然群体的最佳亚群数为2，关联分析识别到19个目标性状关联位点，分别解释了0.87%～6.69%的表型变异。其中P1M1-27、P3M3-30及P1M1-20在GLM模式、MLM模式、GLM+K模式及GLM+Q模式中均被识别到。结论 研究发掘到的目标性状关联位点对乌头分子标记辅助育种具有重要意义。]]> 2017/7/25 17:33:04 943true 目的 建立一测多评法（QAMS）同时测定苦丁茶冬青Ilex kudingcha中6种成分的方法。方法 采用液质联用法确定了供试品中山柰酚-3-O-β-D-芸香糖苷、异鼠李素-3-O-β-D-芸香糖苷、苦丁冬青皂苷C、苦丁冬青皂苷A、苦丁冬青皂苷E、苦丁冬青皂苷D的质量分数。采用HPLC法，以苦丁冬青皂苷C为内参物，测定了另外5种成分的相对校正因子，并利用相对校正因子计算其他5种成分的量。同时采用外标法（ESM）对这6种成分进行测定，比较ESM和QAMS的差异，验证QAMS的可行性及准确性。结果 利用QAMS法计算得到的苦丁茶冬青中6种成分的量与ESM测定值之间无显著性差异。结论 采用QAMS测定苦丁茶冬青中6种成分的量简便、可行、准确。]]> 2017/7/25 17:33:04 942true 目的 建立同时测定黄花獐牙菜Swertia kingii根中獐牙菜苷、龙胆苦苷、异荭草苷、1，3，7，8-四羟基 酮-1-O-β-D-葡萄糖、当药醇苷、1，3，7，8-四羟基 酮、去甲基雏菊叶龙胆酮和1，5，8-三羟基-3-甲氧基 酮8种成分的HPLC方法。方法 采用Agilent Zorbax ODS（250 mm×4.6 mm，5 μm）色谱柱，乙腈-0.5%磷酸水梯度洗脱，体积流量为1.0 mL/min，检测波长254 nm，柱温30 ℃。结果 獐牙菜苷、龙胆苦苷、异荭草苷、1，3，7，8-四羟基 酮-1-O-β-D-葡萄糖、当药醇苷、1，3，7，8-四羟基 酮、去甲基雏菊叶龙胆酮和1，5，8-三羟基-3-甲氧基 酮分别在3.84～96.00 μg/mL（r=0.999 6）、3.36～84.00 μg/mL（r=0.999 2）、5.92～148.00 μg/mL（r=0.999 8）、4.81～118.00 μg/mL（r=0.999 2）、4.32～108.00 μg/mL（r=0.999 3）、4.16～104.00 μg/mL（r=0.999 2）、5.12～128.00 μg/mL（r=0.999 4）、4.80～120.00 μg/mL（r=0.999 6）与峰面积积分值呈良好的线性关系；平均回收率分别为99.59%、98.95%、98.61%、99.63%、99.31%、99.50%、99.80%、98.50%，RSD分别为0.99%、3.37%、1.87%、1.93%、1.21%、1.62%、0.54%、1.87%。结论 所建方法简便、高效、准确，重复性好，可用于对黄花獐牙菜的质量控制，有利于对该植物的综合利用开发。]]> 2017/7/25 17:33:05 941true 目的 分析厚朴转录组中的SSR位点，并设计引物初步验证，对含SSR的序列进行功能分析，为厚朴分子辅助标记育种和资源保护提供了有利工具。方法 将通过厚朴高通量转录组测序获得的Unigene序列进行SSR位点挖掘，利用Primer.03进行引物设计，随机挑选45对引物进行PCR，并利用Blast软件对含有SSR的Unigene进行功能分析。结果 在16 369条厚朴转录组序列中共获得8 635个SSR位点，出现频率为52.75%。SSR序列中单核苷酸、二核苷酸和三核苷酸为优势重复类型，重复比例最高为10次，主导重复基元类型为A/T（47.16%）、AG/CT（31.74%）、AAG/CTT（6.53%）。45对引物中22对（48.89%）可以扩增出预期大小的条带。含SSR的Unigene与能量和氧化还原等代谢过程，以及RNA转运、剪接体和植物激素信号转导等通路有关。结论 厚朴高通量转录组序列的SSR位点具有类型丰富、特异性强和潜能高等特点，同时SSR序列的功能分析将为厚朴基因挖掘和分子标记辅助育种提供有利的工具。]]> 2017/7/8 13:49:57 940true 目的 对太子参三萜类皂苷生物合成关键调控酶鲨烯环氧酶1（SQE1）基因进行全长cDNA克隆和功能分析。方法 基于其他植物SQE基因的同源序列设计简并引物，以太子参块根总RNA为模板，RT-PCR结合RACE技术克隆太子参SQE1基因的全长cDNA，并进行生物信息学分析。利用农杆菌叶盘转化法将SQE1基因转化烟草，研究其对烟草总三萜量的影响。结果 获得太子参SQE1基因全长cDNA序列2 038 bp，该序列包含1 554 bp的开放阅读框，编码517个氨基酸，相对分子质量为5.67×10⁴，等电点为8.8，与其他药用植物的SQE蛋白具有较高的同源性，含有FAD结合结构域和4个跨膜区域，转太子参SQE1基因的烟草的总三萜量明显高于非转基因植株。结论 首次克隆获得太子参SQE1基因的全长cDNA，该基因的异源表达可一定程度提高转基因植物的总三萜量，为阐明与应用太子参三萜类成分生物合成途径提供科学依据。]]> 2017/7/8 13:49:57 939true 目的 利用ITS2条形码序列对市售中药材冬葵子、苘麻子进行分子鉴定，以保证药材使用的正确性和临床药效。方法 收集冬葵子、苘麻子及其3种混伪品样品共87份。对实验样品进行ITS2基因片段扩增并双向测序，利用HMMer注释方法获得ITS2序列，再经CodonCode Aligner 6.0.2拼接，使用MEGA6.0进行种内、种间变异分析，遗传距离计算并构建NJ系统发育树；将所得序列转换成二维码图片，扫描识读后通过中药材DNA条形码数据库进行验证。结果 冬葵子和苘麻子外观形态相似；冬葵子ITS2序列长度232 bp；GC量为67.6%；苘麻子ITS2序列长度231 bp，GC量为54.1%，二者均无种内变异。冬葵子和苘麻子ITS2序列比对后长度为233 bp，共存在50个变异位点。鉴定结果显示，收集的56份冬葵子药材中26份均为苘麻子，剩余30份为正品。冬葵子和苘麻子与其他3个混伪品的K2P遗传距离为0.224~0.868，平均距离为0.630，种间遗传距离远大于种内遗传距离。基于ITS2序列构建系统发育树可见冬葵子、苘麻子及其3个混伪品各自单独聚成一支，ITS2序列能够明显将其区分；此外，使用二维DNA条形码扫描可准确验证5个物种。结论 ITS2序列能够成功鉴定冬葵子、苘麻子及其常见混伪品，为种子类药材鉴别提供了新工具；二维码技术与DNA条形码技术的结合可以为药材的基原物种提供准确唯一的二维DNA条形码信息，可更好实现药材市场的信息化监管。]]> 2017/7/8 13:49:57 938true 目的 建立杜仲Eucommia ulmoides雄花6种活性成分的测定方法，分析杜仲雄花生长发育动态及活性成分的变化规律。方法 采用超声法进行提取，采用AlCl₃比色法测定总黄酮，采用HPLC法测定其他6种成分，色谱柱为Thermo hypersil gold柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），以甲醇-0.5%磷酸水溶液为流动相，梯度洗脱；检测波长：206 nm（0~15 min）、236 nm（15~55 min）、255 nm（55~100 min）；体积流量1.0 mL/min。结果 花径、花高、鲜质量、干质量、雄蕊长度和雄蕊数均在盛花期达到最大值；总黄酮、绿原酸以及活性成分总量均以花蕾期最高，始花期最低；桃叶珊瑚苷量总体呈下降趋势；京尼平苷酸量花蕾期最低，至盛花期达到最高值，末花期有所下降；京尼平苷、异槲皮苷和紫云英苷量均以盛花期最高，始花期最低。结论 花期对杜仲雄花形态、产量、活性成分量及质量均有很大影响，为杜仲雄花质量控制及相关产品开发提供了重要依据。]]> 2017/7/8 13:49:57 937true 目的 建立桃儿七的HPLC指纹图谱分析方法，为该药材的鉴别及质量评价提供依据。方法 采用Thermo HyPURITY C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），以甲醇-0.4%磷酸水溶液为流动相，进行梯度洗脱，柱温25 ℃，体积流量0.8 mL/min，检测波长290 nm，进样量10 μL。采用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”（2004 A）和SPSS 19.0统计软件中的聚类分析对指纹图谱进行相似度分析。结果 建立桃儿七的HPLC指纹图谱，确定了17个共有峰，并指认了其中8个共有峰，经相似度评价，19批桃儿七药材指纹图谱与共有模式比较的相似度均在0.9以上，整体相似度较好，聚类结果与相似度评价结果基本一致。结论 该研究建立的桃儿七HPLC指纹图谱可为该药材的鉴别及质量评价提供更全面的参考。]]> 2017/7/8 13:49:57 936true 目的 研究积雪草Centella asiatica人工种植技术。方法 以积雪草产量及药材中积雪草苷和羟基积雪草苷的总量为评价指标，考察土壤类型、种植密度、基肥、施肥方式及荫蔽度等不同因素对种植效果的影响。结果 积雪草适合种植于泥炭土-珍珠岩（1∶1）中，种植密度为20 cm×20 cm，基肥为有机肥/复合肥（1∶1），基肥用量为7.5 g/m²，定植4个月后施尿素（18 g/m²）、5个月后施复合肥（45 g/m²），适宜荫蔽度为75%。结论 本实验研究可为建立积雪草GAP种植基地奠定基础。]]> 2017/7/8 13:49:58 935true 目的 克隆金钗石斛Dendrobium nobile中3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A合酶（3-hydroxy-3-methylglutaryl-CoA synthase，HMGS）基因DnHMGS，并进行生物信息学和表达分析。方法 采用反转录聚合酶链式反应（RT-PCR）、cDNA末端快速扩增（RACE）技术获得DnHMGS基因cDNA全长；生物信息学分析编码蛋白的理化特性、结构域等特征；用DNASTAR、MEGA软件分别进行氨基酸多序列比对和进化树构建分析；借助实时荧光定量PCR（qRT-PCR）技术检测基因组织表达模式。结果 DnHMGS基因全长为1 816 bp（GenBank注册号KX789180），编码一条由474个氨基酸组成的多肽，相对分子质量为52 458.47，等电点5.98。DnHMGS蛋白具有植物HMGS酶的典型结构域和活性中心，与凤梨、稻、玉米等单子叶植物亲缘关系较近。DnHMGS基因具有组织表达特异性，接菌前，DnHMGS转录本在金钗石斛叶中的表达量最高，为根、茎中的2倍以上。但接菌后DnHMGS基因表达情况转变为茎 > 叶 > 根。结论 首次从金钗石斛中克隆得到HMGS基因的全长cDNA，该基因的分子鉴定为进一步揭示该基因在金钗石斛萜类物质合成代谢途径中的作用及菌根真菌影响石斛碱生物合成的调控机制奠定了基础。]]> 2017/6/24 9:37:34 934true 目的 研究单盐胁迫对蒙古扁桃Amygdalus mongolica种子萌发和幼苗生长的影响。方法 以天然生长于祁连山自然保护区的濒危植物蒙古扁桃去内果皮的种子为研究材料，以不同浓度NaCl、Na₂SO₄、CaCl₂溶液模拟单盐胁迫条件，采用纸卷发芽的方法，测定发芽指标和幼苗生长指标。结果 3种盐在0.02~0.04 mol/L，蒙古扁桃种子发芽率、幼苗鲜质量、幼苗干质量呈增大趋势，在0.06~0.18 mol/L呈降低趋势；种子发芽指数、活力指数、饱和含水量、苗高、初生根长度、根长、次生根个数、幼苗根干质量随盐胁迫的加剧呈现显著下降趋势（P<0.05）。结论 蒙古扁桃种子萌发和幼苗生长对盐碱的变化很敏感，NaCl、CaCl₂溶液处理下，种子萌发的半致死浓度（P₅₀）均为0.12 mol/L，幼苗成长的P₅₀也均为0.10 mol/L，Na₂SO₄溶液处理下，种子萌发的P₅₀为0.10 mol/L，幼苗成长的P₅₀为0.06 mol/L，在高浓度单盐胁迫后，致使部分种子休眠而保持生活力，未能萌发的种子复水后萌发率高达82%~89%。]]> 2017/6/24 9:37:34 933true 目的 从定性、定量2个方面分别研究金银花和山银花中主要成分及其量的差异。方法 采用UHPLC法对金银花和山银花中9种成分新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、木犀草苷、异绿原酸B、异绿原酸A、异绿原酸C、灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙进行定性鉴别。定量测定绿原酸、木犀草苷、灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙4种成分的量。采用Luna C₁₈-HST柱（100 mm×3.0 mm，2.5 μm）；柱温40 ℃；流动相为0.1%甲酸水溶液-0.1%甲酸乙腈溶液，梯度洗脱；体积流量1 mL/min；进样体积1 μL；检测波长为327 nm（0~3 min）、350 nm（3~5 min），皂苷类化合物（5~8 min）用蒸发光散射检测器检测。结果 各成分线性关系良好（r=0.997 6~0.999 9）。加样回收率为98.71%~100.8%，RSD为0.53%~1.87%。测定20批样品，并比较其色谱图。结论 该方法操作简单、可靠、重现性好，可在8 min内通过检测皂苷类化合物快速鉴别金银花和山银花，同时可准确测定绿原酸、木犀草苷、灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙的量。]]> 2017/6/24 9:37:34 932true 目的 通过构建大风藤Cocculus orbiculatus根与茎的指纹图谱，对比两者相似度，为科学评价大风藤根与茎药用价值及临床应用提供参考。方法 采用高效液相色谱法对贵州省14个产地20批的大风藤根与茎进行色谱分离，色谱条件为Agilent ODS C₁₈（250 mm×4.6 mm，5 μm）色谱柱；流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液，梯度洗脱，运行时间为95 min，体积流量1.0 mL/min，测定波长254 nm，柱温30 ℃。使用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统2.0”进行数据处理，对大风藤根与茎进行相似度分析。结果 建立了大风藤根与茎指纹图谱共有模式，归纳出大风藤根与茎共有峰8个，指纹图谱相似度为0.985~0.998。结论 大风藤根与茎化学成分相近，但不同产地和部位的大风藤所含活性物质的量具有一定差异。]]> 2017/6/24 9:37:34 931true 目的 建立同时测定“麦味参”（按人参-麦冬-五味子为1：3：1配伍）中20种活性成分的HPLC方法。方法 采用色谱柱（150 mm×4.6 mm，5 μm），乙腈（A）-水（B）为流动相，梯度洗脱，体积流量为1.0 mL/min，检测波长203 nm，柱温35 ℃。结果 人参皂苷Rg₁、Re、Rf、Rb₁、Rg₂、Rc、Rb₂、Rb₃、Rh₂、F₁、Rd、F₂、Rg₃，原人参三醇，compound K，原人参二醇，3种五味子木脂素五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素和麦冬皂苷D均得到良好的线性关系（r≥0.999 6），平均回收率均在96%~102%，RSD均小于2%。结论 方法准确可靠，灵敏度高，专属性强，结果稳定，重复性好，可用作“麦味参”的多成分质量控制。]]> 2017/6/24 0:00:00 930true 目的 一测多评（QAMS）法测定畲药食凉茶中4种黄酮类成分，并以其研究食凉茶黄酮类物质的动态变化规律。方法 以芦丁为参照物，分别建立其与山柰酚-3-O-芸香糖苷、槲皮素、山柰素的相对校正因子（f），并计算食凉茶中各成分量，实现QAMS。同时采用外标法验证QAMS法的准确性和可行性。结果 芦丁与山柰酚-3-O-芸香糖苷、槲皮素和山柰素的f分别为1.158、0.475 6、0.431 9，RSD分别为0.73%、1.55%、1.58%；QAMS法测定结果与外标法测定结果无显著差异。不同月份食凉茶中黄酮类成分质量分数差异明显，2个来源食凉茶之间的量差异亦较明显。结论 以芦丁为参照物同时测定山柰酚-3-O-芸香糖苷、槲皮素、山柰素的QAMS法可用于畲药食凉茶的定量分析。以黄酮类物质为指标，食凉茶的最佳采收期为7月和8月。]]> 2017/6/24 9:37:34 929true 目的 为了研究地黄萜类化合物生物合成途径的功能基因，从地黄中克隆了一条新的地黄GGPPS基因（RgGGPPS2），进行生物信息学分析，原核表达、纯化以及基因表达模式分析。方法 根据地黄转录组数据中RgGGPPS2基因的序列信息，设计特异性引物，克隆了RgGGPPS2基因的开放阅读框（ORF）序列，构建pET32a-RgGGPPS2原核表达载体，用IPTG在大肠杆菌BL21（DE3）中诱导表达RgGGPPS2重组蛋白，荧光定量PCR检测RgGGPPS2基因的组织特异性表达。结果 RgGGPPS2基因的ORF为867 bp，编码289个氨基酸。生物信息学分析结果发现RgGGPPS2蛋白含有2个富含天冬氨酸的基序FARM（first aspartate-rich motif）和SARM（second aspartate-rich motif），RgGGPPS2与芝麻、长春花等双子叶植物中GGPPS蛋白的同源性较高。通过构建pET-32a-RgGGPPS2原核表达载体在大肠杆菌中成功表达RgGGPPS2重组蛋白，利用Ni²⁺亲和色谱得到了纯化的RgGGPPS2重组蛋白。荧光定量PCR结果显示RgGGPPS2基因在根中表达量最高，其次是叶，茎中最低。结论 克隆了RgGGPPS2基因，获得了纯化的RgGGPPS2重组蛋白，为研究RgGGPPS2基因在地黄萜类化合物生物合成途径中的功能奠定了基础。]]> 2017/6/7 15:46:41 928true 目的 傅里叶变换红外光谱（fourier transform infrared spectroscopy，FTIR）结合化学计量学方法分析云南重楼Paris polyphylla var. yunnanensis及其近缘种的亲缘关系，为重楼属药用植物资源的开发利用提供理论依据。方法 采集云南重楼、白花重楼Paris polyphylla var. alba、毛重楼Paris mairei、南重楼Paris vietnamensis、五指莲Paris axialis var. axialis共50份样品的红外光谱信息，对光谱数据进行自动基线校正、自动平滑、纵坐标归一化、多元散射校正、二阶求导等预处理，采用主成分分析（principal component analysis，PCA）、偏最小二乘判别分析（partial least squares discriminant analysis，PLS-DA）及系统聚类分析（hierarchical cluster analysis，HCA）分析光谱数据。结果 原始红外光谱中，1 653、1 156、1 082、1 021、925、851、759、572、524 cm^-1等为重楼属植物的共有峰，主要归属为黄酮、淀粉和糖苷类成分的吸收峰；毛重楼和五指莲分别在1 535和1 369 cm^-1附近有特征吸收峰，可与另外3种重楼属植物相区分。以全波段光谱数据进行PLS-DA和PCA，PLS-DA对重楼属植物分类效果优于PCA，能够准确区分5种野生重楼属植物。系统聚类分析（HCA）及向量夹角余弦相关性分析能够反映5个重楼属植物的亲缘关系，云南重楼与白花重楼和南重楼的亲缘关系较近，与毛重楼和五指莲的关系较远。结论 FTIR结合化学计量学方法，能够快速区分不同种类重楼属植物，明确云南重楼及其近缘种之间的亲缘关系，为重楼属植物亲缘关系研究提供一种快速、有效的方法，同时为重楼种质资源开发和利用提供理论基础。]]> 2017/6/7 15:46:42 927true 目的 分析生长年限、海拔、光照因素对大黄中蒽醌和鞣质类等8种成分量的影响，为大黄种植最佳生长条件的选择提供理论依据。方法 采用HPLC法同时测定人工种植的54批药用大黄样品中芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚、大黄酚-1-O-葡萄糖苷、大黄素-8-O-葡萄糖苷、（+）-儿茶素8种成分的量，并采用方差分析进行不同生长年限、不同海拔、不同光照环境（阴坡、阳坡）与各成分量的相关性分析。结果 1、2、3年生的游离型蒽醌质量分数平均值分别为4.26、5.18、8.10 mg/g，结合型蒽醌质量分数平均值分别为4.67、5.62、6.76 mg/g，（+）-儿茶素质量分数平均值分别为3.12、4.18、4.72 mg/g。在海拔（1 300±50）、（1 500±50）、（1 700±50）m 3个不同的范围，1年生与2年生和3年生比较，大黄中8种成分的量有极显著性差异（P<0.01）。在3个不同的生长年限之中，海拔（1 300±50）m处的大黄中8种成分的量与（1 500±50）m和（1 700±50）m处大黄比较，有极显著性差异（P<0.01）。在3个不同的生长年限和3个不同海拔范围，阴坡和阳坡的大黄中8种成分的量相比，无显著性差异（P>0.05）。结论 在同一生长年限，随海拔的升高，以及同一生长海拔范围，随生长年限的增加，大黄中蒽醌和鞣质类的量都呈现明显的上升趋势，有显著性差异。而光照（阴坡、阳坡）不同时，大黄中蒽醌和鞣质类的量无显著性差异，但其蒽醌和鞣质类量的均数阳坡高于阴坡。大黄人工种植宜选择海拔在1 400 m以上，生长年限不低于3年，阳光直接照射的阳坡环境，有利于提高药用大黄中蒽醌和和鞣质类化学成分的总量。]]> 2017/6/7 15:46:42 926true 目的 通过对不同产地荆芥Schizonepeta tenuifolia中6种黄酮类成分的检测，为其质量控制提供依据。方法 采用高效液相色谱（HPLC）法建立荆芥药材中黄酮类成分的检测方法，并以6种黄酮类成分的量为数据来源，对其进行聚类分析。结果 不同产地荆芥中6种黄酮类成分的量差异较大，木犀草苷、槲皮苷、橙皮苷、木犀草素、芹菜素、香叶木素的线性范围分别是0.030~0.148 μg、0.222~1.108 μg、0.357~1.784 μg、0.058~0.292 μg、0.054~0.269 μg、0.050~0.247 μg，加样回收率为96.32%~99.97%，RSD<2.20%；其中，安徽产地聚为一类，河南1与广东产地为聚一类，河南2、河北、云南、四川、湖北、甘肃产地聚为一类。结论 建立的方法简单、灵敏，可用于荆芥的多指标成分的质量控制；其次，河南1、河南2、河北、云南、四川、湖北、广东、甘肃的亲缘关系较近，可以作为同一药用来源。]]> 2017/6/7 15:46:42 925true 目的 在大叶冬青Ilex latifolia化学成分研究基础上，建立测定大叶冬青中大叶冬青皂苷F（latifoloside F）、大叶冬青皂苷H（latifoloside H）、大叶冬青皂苷C（latifoloside C）、大叶冬青皂苷D（latifoloside D）、苦丁冬青皂苷F（kudinoside F）、苦丁茶冬青皂苷E（ilekudinoside E）6种三萜皂苷的HPLC测定方法。方法 采用Wonda Cract ODS-2（250 mm×4.6 mm，5 μm）色谱柱，乙腈-水为流动相，梯度洗脱，体积流量1 mL/min，检测波长为210 nm，柱温35℃。结果 6个皂苷分离度良好，具有良好的线性关系（r>0.999 2），平均加样回收率在99.52%~100.96%，RSD<2%。结论 该方法简单、准确，具有良好的重复性和稳定性，可为大叶冬青药材质量控制提供实验依据。]]> 2017/6/7 15:46:42 924true 目的 运用HPLC-DAD-ESI-Q-TOF/MS法鉴别和测定金银忍冬中主要化学成分。方法 采用HPLC-DAD-ESI-Q-TOF/MS技术对金银忍冬中化学成分进行鉴别，采用HPLC-DAD法分析测定金银忍冬中的主要化学成分的量。结果 从金银忍冬中检测到31个色谱峰，并鉴定出19种化学成分，测定了金银忍冬3个花期中10种主要成分（马钱酸、绿原酸、马钱苷、莫诺苷、断氧化马钱苷、芦丁、金丝桃苷、木犀草苷、异绿原酸A、异绿原酸C）的量。结论 金银忍冬花蕾期的主要化学成分量高于白花期和黄花期；金银忍冬花蕾与金银花中10种化学成分的量及分布特征相近；为开发利用金银忍冬药用资源提供数据支持。]]> 2017/6/7 15:46:42 923true 目的 研究新疆荒地阿魏Ferula syreitschikowii 种质资源的亲缘关系及遗传多样性。方法 以96份新疆荒地阿魏种质资源为材料，从33条ISSR引物中筛选出条带清晰、多态性好的引物15条，进行ISSR分子标记分析。结果 共扩增获得292条完整、清晰的谱带，其中多态性条带为289条，多态位点比率为99.01%，表明新疆荒地阿魏种质资源多态性较高，具有较高的遗传多样性。经相关统计软件计算结果分析，平均有效等位基因数为1.725 6，平均Nei's基因多样性指数为0.404 8，平均Shannon's信息指数为0.587 9，遗传相似性系数为0.500 0～0.828 7。UPGMA聚类结果显示96份材料分为2个类群13个亚类，能够将不同来源的种质资源区分开来。结论 从分子水平上揭示了新疆荒地阿魏地理分布与种质资源间的亲缘关系及较高的遗传多样性，为荒地阿魏品种鉴定提供相关依据。]]> 2017/5/31 16:19:57 922true 目的 分析不同采收时间何首乌Polygonum multiflorum代谢产物积累的动态变化。方法 采用超高效液相色谱-串联四极杆飞行时间高分辨质谱（UPLC-Triple TOF-MS/MS）技术对不同采收时间何首乌15批样品进行测定，通过多级串联质谱分析，对其质谱数据进行峰匹配、峰对齐、滤噪处理等进行特征峰提取；采用主成分分析（PCA）和偏最小二乘法-判别分析（PLS-DA）进行数据处理；通过一级质谱精确质荷比和二级质谱碎片信息，结合软件数据库搜索及相关文献进行成分鉴别。结果 不同采收时间何首乌样品间的化学组成得到明显区分；初步筛选出不同采收时间何首乌样品间25种差异显著的化学成分并鉴定出24个成分，其中共有9种差异化学成分呈现不同的变化规律。结论 为揭示不同采收时间何首乌中代谢物积累动态规律及确定其药材合理采收期提供基础资料。]]> 2017/5/31 16:19:57 921true 目的 探讨温度、内源激素、授粉方式等条件对云南重楼及其多芽品系种子萌发和出苗的影响进行研究，建立促进云南重楼种子萌发技术体系，为重楼种子育苗提供科学指导，缓解目前重楼优质种源严重不足、商品药材严重供不应求、市场价格高居不下的瓶颈问题。方法 采用湿沙培养各条件下处理过的云南重楼种子，测定发芽率和平均发芽时间，并将催芽后的种子播种于大田，考察出苗率、平均出苗时间。结果 经4～18 ℃变温湿沙培养处理的重楼种子获得了较高的发芽率和出苗率；赤霉素处理能促进云南重楼种子的萌发，缩短平均发芽时间，100、200 mg/L赤霉素处理效果较好；人工授粉的种子发芽率和出苗率显著高于自然授粉的种子（P< 0.05）；云南重楼及其多芽品系间发芽率和出苗率无明显差别。结论 将除去外种皮的人工授粉的种子用100 mg/L赤霉素处理，经4～18 ℃变温湿沙培养至萌芽，萌芽种子播种于大田，可缩短云南重楼种子的出苗周期1年，获得高达80%以上的出苗率。]]> 2017/5/31 16:19:57 920true 目的 克隆获得洋常春藤Hedera helix鲨烯合成酶基因（HhSS）cDNA全长序列并进行生物信息学分析及表达分析。方法 根据洋常春藤转录组数据信息设计引物，通过RACE克隆方法获得HhSS基因序列；采用DNAMAN、PROTPARAM、TMHMM、PSORT、ScanProsite、SOPMA、SWISS-MODEL等生物信息学工具分析序列信息及编码蛋白的理化特性、结构域等特征；通过实时荧光定量PCR（qRT-PCR）技术进行HhSS基因的检测分析。结果 RACE克隆获得HhSS（GenBank登录号KX056078）基因cDNA序列全长1 889 bp，包含一个从248～1 477 bp的完整开放阅读框（ORF）以及247 bp的5’非编码区（5’UTR）和412 bp的3’非编码区（3’UTR）。该基因编码409个氨基酸，相对分子质量为46 800，等电点为5.68。HhSS蛋白具有植物SS蛋白的特征结构域和跨膜区，与刺五加、人参等同科植物亲缘关系较近。qRT-PCR结果表明洋常春藤叶片中HhSS基因的相对表达量与常春藤皂苷含量存在正相关性。结论 洋常春藤HhSS基因的成功克隆及表达分析研究，为阐明HhSS基因在常春藤皂苷生物合成途径中的作用及代谢调控研究提供理论依据和技术基础。]]> 2018/5/9 11:05:15 919true 目的 构建国产沉香基原植物白木香AsMAPK3基因的原核表达载体，诱导重组蛋白正确表达，并研究AsMAPK3的亚细胞定位情况，为抗体制备准备材料，为筛选其互作蛋白及进一步研究其功能奠定基础。方法 通过PCR方法克隆AsMAPK3基因的部分编码序列，构建重组原核表达载体pET-28a-AsMAPK3，并诱导蛋白表达。克隆AsMAPK3基因全长编码区，构建绿色荧光蛋白（GFP）瞬时表达载体pAN580-AsMAPK3，通过基因枪法转化洋葱表皮，荧光显微镜观察GFP的发光情况。结果 含有重组表达载体的大肠杆菌BL21（DE3）在37℃经0.5 mmol/L异丙基硫代β-D-半乳糖苷（IPTG）诱导4 h后，可获得相对分子质量约为39 000的融合蛋白，该融合蛋白在上清和包涵体中均有表达。瞬时转化洋葱表皮的GFP荧光观察发现，AsMAPK3主要在细胞核和质膜表达。结论 成功实现了AsMAPK3的体外表达和纯化，明确了AsMAPK3的亚细胞定位，为后续开展其功能研究奠定了基础。]]> 2018/5/9 11:05:15 918true 目的 建立基于品质特征的贝母类药材品种分类。方法 采用本草学、生态学、中药学、植物化学、中药鉴定学，以及结合生物计量学等方法开拓性地对中药贝母地理生态分布、性状及化学成分等品质特征进行研究，并对《中国药典》2015年版贝母药材进行分类。结果 结果表明贝母类药材可分为“浙贝”“川贝”2个系列，建议川贝母、平贝母、伊贝母归为川贝系，浙贝母、湖北贝母归为浙贝系。结论 对于《中国药典》2015年版同类多基原品种中药的“分”与“合”及贝母资源的合理开发和利用提供依据。]]> 2018/5/9 11:05:15 917true 目的 建立不同成熟度南五味子中6种主要木脂素类成分的同时定量方法，并基于化学模式识别技术，对不同成熟度南五味子进行分类，为南五味子合理采收加工提供科学依据。方法 采用超高效液相色谱（UPLC）法建立不同成熟度五味子中6种木脂素类化合物的同时定量方法，色谱条件为ACQUITY UPLC BEH C₁₈（50 mm×2.1 mm，1.7 μm）色谱柱，以乙腈-0.1%甲酸水为流动相梯度洗脱，体积流量0.4 mL/min，检测波长254 nm，柱温35℃。同时以南五味子的指标成分五味子酯甲为监测因子，采用主成分分析（PCA）和分层聚类法（HCA）对不同成熟度的南五味子样品进行聚类分析。结果 6种木脂素类化合物在1.257～156.250μg/mL线性关系良好（r<0.999），重复性、稳定性、精密度试验RSD均<3%。根据不同成熟度主要成分的变化，PCA和HCA分析将6个不同成熟度的五味子及混合样品主要分为3类：60%以下红，70%红以及全红的样品。结论 60%红样品的木脂素类化合物具有较高含量，说明基于UPLC技术的聚类分析及PCA联合分析方法能够较好地区分不同成熟度的南五味子药材质量，为其质量控制和采收期选择提供了技术支持和科学依据。]]> 2018/5/9 11:05:15 916true 目的 建立HPLC-DAD同时测定迷迭香叶和茎中11种抗氧化活性成分含量的方法。方法 采用Zorbax SB-Aq C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；以甲醇（A）-磷酸二氢钾缓冲盐（B）溶液为流动相，梯度洗脱，体积流量1.0 mL/min，柱温30℃，绿原酸、咖啡酸、迷迭香酸、木犀草素、芹菜素和芫花素的检测波长为328 nm，丹皮酚、迷迭香酚、橙皮素、鼠尾草酚和鼠尾草酸的检测波长为284 nm，进样量10μL。结果 绿原酸、咖啡酸、迷迭香酸、丹皮酚、迷迭香酚、橙皮素、木犀草素、芹菜素、鼠尾草酚、芫花素和鼠尾草酸分别在2.02～64.64 μmol/mL，r=0.999 97；1.74～55.68 μmol/mL，r=0.999 97；2.76～88.32μmol/mL，r=0.999 97；0.24～7.68μmol/mL，r=0.996 63；0.46～14.72μmol/mL，r=0.999 97；0.22～7.04μmol/mL，r=0.998 64；0.72～23.04μmol/mL，r=0.999 37；3.74～119.68μmol/mL，r=0.999 80；5.1～163.28μmol/mL，r=0.996 18；0.4～12.8μmol/mL，r=0.996 35；5.22～167.04μmol/mL，r=0.996 98内有良好的线性关系；平均加样回收率为98.1%～100.5%，RSD为0.67%～2.14%。结论 该方法准确，实用性好，可用于迷迭香叶和茎中抗氧化活性成分的定性与定量分析。]]> 2018/5/9 11:05:15 915true 目的 建立栀子的指纹图谱并采用电喷雾离子源-四极杆-飞行时间质谱（ESI-Q-TOF MS）对其共有峰进行定性分析。方法 采用Kromasil 100-5 C₁₈柱，以乙腈-0.1%磷酸梯度洗脱，体积流量为1 mL/min，柱温为35℃，检测波长为238、327、440 nm。使用Matlab 7.1软件编程，对3波长下的CSV格式数据进行全时段融合。结果 各色谱峰分离度良好，3波长融合指纹图谱全面体现了栀子238、327、440 nm特征吸收波长的指纹信息，标定20个共有峰，并完成其中16个成分的鉴定。10批不同批次的栀子指纹图谱与对照指纹图谱之间相似度较好，相似度大于0.90以上。结论 实现了栀子融合指纹图谱的测定，同时解析了图谱中的化学组成，并制定了主成分与栀子苷相对峰面积的范围，为全面控制药材质量提供了数据支撑。]]> 2018/5/9 11:05:16 914true 目的 从人参中克隆出核黄素激酶基因，进行相关的生物信息学分析，构建原核表达载体并在大肠杆菌诱导表达。方法 根据人参转录组数据库筛选出序列comp61599_c0_seq12，经相关软件对其进行序列分析；该序列3'末端缺失，利用3'RACE技术获得3'端序列；通过PCR技术获得人参核黄素激酶基因的全长cDNA序列，并构建原核表达载体pET-32a-PgRFK，通过热激法转化到大肠杆菌BL-21中进行诱导表达。结果 从人参中成功克隆出1条长度为1 200 bp的核黄素激酶基因，其编码399个氨基酸，同时成功构建该基因的原核表达载体，SDS-PAGE电泳结果显示该蛋白大小与预测蛋白相对分子质量一致。结论 成功克隆了人参核黄素激酶基因，并在大肠杆菌中成功表达。]]> 2018/4/24 17:40:30 913true 目的 获得茜草Rubia cordifolia转录组学信息及挖掘其蒽醌类化合物生物合成的关键酶基因，为茜草的功能基因克隆与分析提供参考。方法 采用Illunima Hiseq^TM 2000 150PE高通量测序技术对茜草进行转录组测序，使用Trinity软件完成Unigene的de novo拼接，基于BLAST实现Unigene的分类、功能注释、代谢通路分析和蛋白功能注释等。结果 最终获得7.3 Gb数据，通过de novo拼接注释得到Unigene 66 646条，平均长度为1 424 bp，所有Unigene能被NCBI nonredundant protein sequences（NR）、NCBI nucleotide sequences（NT）、kyoto encyclopedia of genes and genomes（KEGG）、A manually annotated and reviewed protein sequence database（Swissprot）、gene ontology（GO）、euKaryotic ortholog groups（KOG）和protein family（Pfam）数据库所注释，注释成功率100%，找到与茜草蒽醌类化合物生物合成相关的基因64条。结论 首次对茜草转录组进行了分析，并获得了茜草蒽醌类化合物生物合成相关的候选基因，为茜草的分子生物学研究提供了丰富的数据资源，也为后期开展茜草蒽醌类化合物次生代谢途径解析奠定了基础。]]> 2018/4/24 17:40:30 912true 目的 以菌根生活力、根茎生物量和活性成分为指标，筛选适宜滇重楼幼苗生长发育的优良丛枝菌根（arbuscular mycorrhizal，AM）真菌。方法 以灭菌土壤为生长基质，采用室温盆栽试验，研究接种28种外源性AM真菌对滇重楼幼苗菌根生活力、根茎生物量和重楼皂苷产量（单株幼苗所含的重楼皂苷量、重楼皂苷含量与幼苗生物量的乘积）、根茎重楼皂苷与核苷含量的影响。结果 接种的28种AM真菌与滇重楼幼苗均形成了共生体系并且发育良好，并能提高滇重楼幼苗菌根生活力，但具有偏好性。大多数AM真菌处理组能提高滇重楼根茎生物量，促进了滇重楼幼苗重楼皂苷和重楼核苷的积累，表现为重楼皂苷含量和产量的提高。菌根形成对滇重楼幼苗次生代谢的影响还表现在重楼皂苷和重楼核苷的器官分配上，菌根化滇重楼幼苗须根中4种重楼皂苷总量具有高于根茎的趋势，而根茎中9种核苷总量明显高于须根。结论 本研究中不同AM菌株的表现，对进一步提高滇重楼幼苗生物量和品质的菌株筛选具有重要的借鉴作用，巨大巨孢囊霉Gigaspora gigantea、美丽盾巨孢囊霉Scutellospora calospora、沾屑多孢囊霉Diversispora spurca、异配盾孢囊霉Dentiscutata heterogama、沙荒球囊霉Septoglomus deserticola、薄壁两性囊霉Ambispora leptoticha可望能作为培育滇重楼菌根化苗的理想菌株。]]> 2018/4/24 17:40:30 911true 目的 探讨麦冬块根膨大及药材形成规律，为麦冬新品种选育奠定基础。方法 大田栽培，间隔7~10 d连续采样。以测定15株均值计算麦冬各部分干物质分配和积累规律，以测定15粒均值计算块根数量、大小变化，采用光学显微镜对麦冬块根纤维特征进行观察，并参照《中国药典》2015年版麦冬项下性状描述对麦冬药材性状变化进行观测记录。结果 在四川地区麦冬块根从10月份开始膨大至次年4月结束。最初形成的生长于麦冬茎基的不定根多为营养根，可膨大形成块根的不定根多为后期茎基部四周生长出的不定根。麦冬单株块根基本在5~20个，多数在8~10个，极个别超过20个。不定根一般从根尖一端开始膨大逐渐延长形成纺锤形块根，块根形成后根尖可继续生长形成不定根，新形成的不定根可进行2次膨大，极个别不定根可出现3次膨大，形成串珠状。显微观察结果显示麦冬块根膨大主要是由皮层细胞体积增大和细胞层数增加形成，其中皮层细胞体积增大起主导作用。麦冬块根开始膨大，须根和茎叶部分干物质积累快速减缓至最终停止，块根干物质积累在前期增长速率快至3月中下旬基本呈动态平衡，药材性状整体表现为从干瘪向饱满变化的过程。结论 研究结果全面反映了麦冬块根膨大过程的表观变化规律，为麦冬块根发育机制的研究探明了方向。]]> 2018/4/24 17:40:30 910true 目的 建立鹿血聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）种间及种内鉴定方法并确定检测限度。方法 根据梅花鹿、马鹿、猪、牛、羊、鸭的细胞色素b（cytb）基因序列的差异，设计并选取DNA限制性内切酶EcoRV和MseI分别作为区分鹿和非鹿，梅花鹿和马鹿的工具。采用试剂盒法提取样品基因组DNA，经PCR扩增cytb片段后，分别进行RFLP分析；在梅花鹿血基因组DNA中分别加入不同比例非鹿类动物血基因组DNA或马鹿血基因组DNA，PCR产物用限制性内切酶EcoRV和MseI进行切割，确定检测限。结果 经PCR-RFLP分析，EcoRV切割鹿和非鹿cytb片段，前者得到2个片段（287、185 bp），后者未被切割；MseI切割梅花鹿与马鹿cytb片段，前者被切成2个片段（281、191 bp），后者被切成3个片段（281、126、65 bp），191 bp的片段作为梅花鹿血的特征片段，126 bp的片段作为马鹿血的特征片段。梅花鹿血中加入非鹿类动物血基因组DNA的检测限为3%，加入马鹿血基因组DNA的检测限为6%。结论 建立的PCR-RFLP方法可以快速鉴定鹿血及相关伪品或掺伪品，也可区分鉴定梅花鹿源的鹿血或马鹿源的鹿血，为鹿血相关产品的质量控制提供了新的技术手段。]]> 2018/4/24 17:40:31 909true 目的 建立基于UPLC-DAD-TOF/MS结合HPLC-UV法检测麻黄样品化学成分的方法，以明确麻黄"先煎去沫"样品化学成分间的差异。方法 UPLC-DAD-TOF/MS：Waters ACQUITY UPLC^® BEH C₁₈（50 mm×2.1 mm，1.7μm）色谱柱，以甲醇-0.1%甲酸水溶液为流动相梯度洗脱，体积流量0.3 mL/min，柱温40℃，正、负离子模式扫描；HPLC-UV：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（150 mm×4.6 mm，5μm），以0.1%磷酸水溶液（含0.05%三乙胺）-乙腈溶液（99：1）为流动相，等度洗脱，体积流量1 mL/min，检测波长为210 nm，柱温30℃。结果 上沫中所含成分较少，去沫下液和全煎煮液中化学成分基本一致。同时，三者均可鉴定出去甲基麻黄碱、去甲基伪麻黄碱、麻黄碱、伪麻黄碱和甲基麻黄碱5个生物碱类成分和1个羧酸类成分（4-羟基-7-甲氧基-2-喹啉羧酸）。但上沫中生物碱含量极低，而全煎煮液中3种生物碱的含量略高于去沫下液。结论 麻黄"先煎去"沫理论可能与生物碱类成分关系不大，但仍需后期进行更深入的研究验证。]]> 2018/4/24 17:40:31 908true 目的 克隆灰毡毛忍冬突变型品种AP1基因（Lm-XL-AP1），并对其进行生物信息学和时空表达分析。方法 通过RACE技术克隆Lm-XL-AP1基因全长，运用生物信息学的方法进行基因同源性和相似性比较分析，预测其编码蛋白，并对其进行各种理化性质分析。运用荧光定量PCR（qRT-PCR）检测该基因在灰毡毛忍冬突变型植株不同花期和不同器官的相对表达量。结果 获得AP1基因，开放阅读框（ORF）长729 bp，编码242个氨基酸，与甘菊中MADS-box基因家族AP1基因相似性达80%，且包含MADS和K-box的保守序列。AP1蛋白无跨膜区域，定位于细胞核中；在灰毡毛忍冬突变型植株第6花期相对表达量最高，同时茎、叶中也有表达。结论 成功从灰毡毛忍冬突变型植株总RNA中克隆到可能参与控制花器官表达的AP1基因。]]> 2018/4/9 10:48:13 907true 目的 克隆珍稀濒危兰科药用植物铁皮石斛蛋白磷酸酶（protein phosphatase，PP）DoPP2C1基因，并进行生物信息学和表达模式分析。方法 采用实时定量PCR（qRT-PCR）和RACE技术获基因全长；利用生物信息学软件预测蛋白的理化性质、结构域和亚细胞定位等分子特性；用DNASTAR 7.0和MEGA 6.0分别进行氨基酸多序列比对和进化关系分析；借助qRT-PCR检测基因表达模式。结果 分离到DoPP2C1基因（GenBank注册号KJ995533），cDNA全长1 221 bp，编码1条由285个氨基酸组成的多肽，相对分子质量31 080，等电点6.18；推定的DoPP2C1氨基酸序列具有植物PP2C蛋白家族保守的1个PP2C结构域（27-285）；该蛋白预测无信号肽或跨膜域，定位在细胞质；DoPP2C1蛋白与多种植物PP2C蛋白一致性较高（56.3%~73.7%），与水稻OsPP2C62、高粱XP_002462907、大麦BAK00362和乌拉尔图小麦EMS47641蛋白等亲缘关系近，聚在PP2C分子进化树的F1分支；DoPP2C1基因具有组织表达特异性，其转录本在石斛根和茎中表达量较高，分别为叶中的7.57倍和1.79倍。结论 获得DoPP2C1基因分子特征，为深入研究该基因在铁皮石斛生长发育、逆境生理以及次级代谢调控中的生物学功能奠定基础。]]> 2018/4/9 10:48:13 906true 目的 通过测定葛根类药材中3'-羟基葛根素、葛根素、大豆苷、大豆苷元、染料木苷、染料木素6种成分含量，结合抗氧化活性评价，综合评价葛根类药材质量。方法 采用UPLC-DAD法测定样品的主要成分含量，AgiLent Zorbax SB-C₁₈（5 mm×2.1 mm，1.8μm），以乙腈-0.1%乙酸水溶液作为流动相洗脱，柱温30℃，体积流量0.4 mL/min；采用紫外分光光度法，以DPPH清除活性进行抗氧化活性评价；以样品中3'-羟基葛根素、葛根素、大豆苷、大豆苷元、染料木苷、染料木素6种成分含量，结合其半数抑制浓度（IC₅₀），进行7个指标的综合加权评分，并进行聚类分析。结果 粉葛以8、9、50、51号样品综合加权评分较高，质量较好，产自四川简阳、江油地区；19、20、29~31号人工种植峨眉葛样品质量较差；葛根以33~37、65~69号样品综合加权评分较高，质量较好，产自平武、北川、青川地区。结论 UPLC波长切换技术多成分同时测定方法操作简单、简便快捷、重复性好，专属性强；综合加权评价法能够较全面地分析药材质量，为葛根类药材质量综合评价提供参考依据。]]> 2018/4/9 10:48:13 905true 目的 建立金银花药材在抗菌活性方面质量优劣的评价模型。方法 采用琼脂打洞扩散法研究21批金银花抗菌活性，建立活性数据库，采用HPLC测定21批金银花药材指纹图谱，建立化学成分群数据库。采用偏最小二乘法（PLS）分析金银花药材活性和化学成分的相关性，计算每批金银花药材的谱效关系（YZL）值（正系数相关峰峰面积与对应系数乘积之和/负系数相关峰峰面积与对应系数乘积之和），对YZL值进行正态拟合并界定，确定判断金银花药材优劣的YZL区间值。另取10批金银花药材对该YZL区间值进行验证。结果 从金银花药材指纹图谱中提取了14个共有峰，采用PLS法建立了金银花药材活性与各共有峰峰面积的回归模型，得到各峰的标准化回归系数。当YZL值≥ 2.53时，为抗菌优质金银花，当YZL值≤ 1.79时，为抗菌劣质金银花。10批金银花药材验证了该结果。结论 YZL值评价金银花药材在抗菌活性方面的质量优劣具有重现性。]]> 2018/4/9 10:48:13 904true 目的 研究麦冬块根发育过程中有效组分的积累规律，为麦冬生产和质量控制提供理论支持。方法 采用高效液相色谱法进行分析。DAD检测器：柱温30℃，检测波长203 nm，进样量15 μL，以乙腈（A）-水（B）为流动相梯度洗脱，0~20 min，25%~40% A；20~50 min，40%~50% A；50~60 min，50%~70% A；60~70 min，70% A；70~80 min，70%~100% A，80~90 min，100% A，体积流量1.0 mL/min。ELSD检测器：柱温35℃，漂移管温度100℃，气体体积流量3.0 L/min；进样量15 μL，流动相为乙腈（A）-0.1%磷酸水（B）溶液，梯度洗脱：0~60 min，35%~65% A，体积流量1.0 mL/min。结果 2种不同检测条件色谱图中主要代表组分均能较好分离，203 nm条件下有14个有效峰，主要峰为黄酮类成分，ELSD条件下有11个有效峰，主要峰为皂苷类成分，黄酮类成分中以麦冬甲基黄烷酮A为代表，皂苷类成分中以麦冬皂苷D为代表，根据峰面积可以判断出麦冬药材中各组分在不同生长阶段其积累特征各不相同，但其整体变化特征呈增大至平衡后小幅下降趋势。结论 HPLC特征图谱能够比较全面地反映麦冬块根有效组分积累特征，可为指导麦冬生产和药材质量控制提供丰富的信息。]]> 2018/4/9 10:48:13 903true 目的 阳春砂是中药砂仁的主要来源植物，其转录组中已筛选出预测与萜类合成相关的候选转录因子unigene，对其进行克隆、序列分析和原核表达，以进一步认识阳春砂药效物质萜类合成的调控元件。方法 根据阳春砂转录组数据中预测为AvMYC4b的Unigene0074125序列设计特异引物，提取阳春砂叶片RNA并反转录成cDNA，以此为模板经PCR扩增得到AvMYC4b的核心片段，再通过RACE技术获得全长cDNA，然后进行编码区全长的GATEWAY TOPO克隆。通过LR反应构建原核表达载体，转化大肠杆菌Rosetta（DE3）细胞，以异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）和阿拉伯糖在16℃下培养诱导融合蛋白表达，收集菌体，经过裂解、超声、纯化，用SDS-PAGE检测蛋白表达结果。结果 克隆获得的AvMYC4b全长有2 579 bp，包含195 bp的5'UTR，1 995 bp的ORF和389 bp的3'UTR，编码664个氨基酸，预测蛋白相对分子质量为72 211。经过生物信息学分析，AvMYC4b氨基酸序列与其他植物的MYC相似，含有转录因子MYC家族的保守结构域，预测可定位于细胞核中。成功构建重组表达载体pDEST17-AvMYC4b并转化Rosetta（DE3）细胞，经诱导表达得到AvMYC4b融合蛋白，SDS-PAGE结果显示蛋白相对分子质量约80 000，与预测相符。结论 从阳春砂中克隆得到bHLH家族转录因子AvMYC4b，并建立了AvMYC4b原核表达系统，为该转录因子的生物功能研究奠定了基础。]]> 2018/3/28 15:36:40 902true 目的 以滇龙胆Gentiana rigescens带叶茎尖、带芽茎段、叶片、根为外植体，建立滇龙胆高效、稳定的丛芽诱导体系，筛选出适宜的植株再生途径。方法 以MS为基本培养基，在单因素实验的基础上，通过L₁₆（4⁵）正交及完全组合实验研究不同外植体和不同植物激素种类及其质量浓度对愈伤组织诱导、丛芽发生及植株再生的影响。结果 带芽茎段为间接器官发生最佳材料，其在MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 1.5 mg/L+KT 0.05 mg/L中培养10 d、节上腋芽开始萌发后，基部可诱导出再分化能力极强的愈伤组织，得愈率为97.73%；15 d后愈伤组织开始分化出绿色丛芽，分化率100%；30 d后不定芽分化系数达18.65，增殖系数可达63.58。带叶茎尖为直接器官发生最佳材料，其在MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 1.0 mg/L+KT 0.5 mg/L中培养30 d后，增殖系数亦可达44.36。2种材料培养获得的试管苗茎细瘦弱，不利于生根培养，试管苗在MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 1.5 mg/L+KT 0.05 mg/L+PP₃₃₃ 10 mg/L中培养60 d后可获得健壮度大为改善的复壮苗。复壮苗生根则在1/2 MS+6-BA 0.1 mg/L+NAA 2.0 mg/L中进行，45 d后可获得生长健壮的再生植株，生根率100%。再生苗移栽成活率达95%以上。结论 建立的滇龙胆无性快速繁殖体系，为保护滇龙胆野生资源、优质种苗繁育提供了有效途径，也为其遗传转化研究奠定了实验基础。]]> 2018/3/28 15:36:40 901true 目的 利用3S技术寻找独一味Lamiophlomis rotata在四川省的生长适宜区，为独一味资源的合理开发与保护提供依据。方法 通过野外实地考察和查阅相关文献的方式，确定独一味生境特征，利用3S技术中的遥感技术（RS）、地理信息系统（GIS）软件提取适宜独一味生长的气候、土壤、地形地貌、群落等环境因子，对各个环境因子进行空间叠加分析，确定独一味在四川省的生长适宜区分布，统计适宜区面积，并结合全球定位系统（GPS）实地调查进行验证。结果 验证结果表明，运用3S技术提取的独一味生长适宜区与实际独一味生长分布基本吻合。四川省独一味适宜区主要分布在阿坝县、理塘县等20个县范围内，适宜区总面积约135 200 hm²，占区域国土面积的0.71%。结论 在适宜区范围内进行独一味种植和保护，将有利于独一味资源的合理开发与持续利用；该研究方法具有科学性、准确性等特点，可以将其推广到其他中药材适宜区研究领域。]]> 2018/3/28 15:36:40 900true 目的 建立可用于人参Panax ginseng中6个成分的一测多评法（QAMS）。方法 采用高效液相色谱法，使用Phenomenex Luna C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm，5μm），以乙腈-0.1%磷酸水为流动相，梯度洗脱，体积流量1.0 mL/min，柱温25℃，检测波长203 nm。以人参皂苷Rb₁为参照物，建立其与人参皂苷Rg₁、Re、Rc、Rb₂、Rd的相对校正因子，外标法与QAMS分别测定6个成分含量，t检验评价QAMS的可行性和适用性。结果 在一定线性范围内，人参皂苷Rb₁相对人参皂苷Rg₁、Re、Rc、Rb₂、Rd的相对校正因子重复性好，2种方法所得6个成分的含量无明显差异，实验得相对校正因子可供参考。结论 该法用于人参多种成分的同步质量评价是准确、可行的，可作为一种新的质量评价模式为中药及中药制剂实现多成分同时监控提供有益借鉴。]]> 2018/3/28 15:36:40 899true 目的 测定并分析陕西不同产地野生茜草中重金属元素，对其安全性进行评价。方法 从陕西省7个主要野生茜草产区收集了35份茜草药材样品，采用微波消解-电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）法测定样品中铜（Cu）、锰（Mn）、铬（Cr）、锌（Zn）、镉（Cd）、铁（Fe）、铅（Pb）、汞（Hg）、砷（As）9种重金属元素的含量，统计分析不同产地样品中重金属元素含量的差异。同时，采用主成分分析对所有样本进行聚类以及皮尔逊相关性系数分析，阐明9种重金属元素之间的相关性。结果 陕西省不同产地野生茜草药材中重金属元素的含量存在差异性，Cu、Cd、Pb、Hg、As含量均低于重金属限量标准。主成分分析可将所有样品按关中、陕北和陕南归为3类，不同重金属元素之间存在一定的相关性。结论 ICP-MS方法可准确测定陕西野生茜草中重金属元素的含量，不同产地间存在差异。以重金属元素为指标，陕西产茜草是安全的。]]> 2018/3/28 15:36:40 898true 目的 建立霍山石斛Dendrobium huoshanense的HPLC指纹图谱，同时测定不同生长年限霍山石斛中丁香酸、芦丁、石斛酚、柚皮素含量，为霍山石斛药材质量的评价提供依据。方法 采用Agilent C₁₈（250 mm×4.6 mm，5 μm）色谱柱，流动相为甲醇-0.1%磷酸水溶液，梯度洗脱，体积流量1.0 mL/min，检测波长240 nm，柱温30℃；将色谱图导入《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》（2012.1），对不同年限的霍山石斛样品进行相似度分析；峰面积导入SPSS软件进行聚类分析，从树状图上判断聚类效果。结果 本方法建立的指纹图谱共有13个共有峰，指认了其中4个共有峰，分别为丁香酸、芦丁、石斛酚、柚皮素；不同年限的栽培霍山石斛相似度结果小于0.900，不同年限的仿野生霍山石斛相似度结果大于0.900。结论 HPLC指纹图谱结合化学计量学方法能够评价和鉴别不同年限的霍山石斛，为霍山石斛药材的采收、开发、评价等提供参考。]]> 2018/3/28 15:36:41 897true 目的 阐明珍贵药用植物走马胎Ardisia gigantifolia所在群落的物种组成、结构特征、龄级结构及物种多样性指数特征，为其保护和规模化繁育提供科学依据。方法 设置11个10 m×10 m的样方，采用每木调查法，对样方内所有胸径≥ 2 cm、树高≥ 2 m的立木进行检测，记录种类、胸径、树高和冠幅；采用物种多样性指数进行数据处理。结果 1 100 m²的样地内共有维管束植物213种，隶属78科153属；植物区系以热带-亚热带区系性质为主；群落乔木层优势种为荷木Schima superba、拟赤杨Alniphyllum fortune、枫香Liquidambar formosana、马尾松Pinus massoniana等，灌木层优势种为走马胎、鼠刺Itea chinensis、玉叶金花Mussaenda pubescens等；走马胎种群在灌草层中均有分布，种群龄级结构呈金字塔型，I龄级幼苗储备丰富，但IV龄级成苗个体少；群落的物种丰富度（Magarlef指数）为30.04，变化度（Shannon-Wienner指数）为3.79，优势度（Simpson指数）为0.88，均匀度（Pielou指数）为0.71；群落各层次的Magarlef指数表现为草本层 > 灌木层 > 乔木层 > 藤本植物，Simpson指数表现为藤本植物 > 灌木层 > 乔木层 > 草本层，Shannon-Wienner指数表现为藤本植物 > 灌木层 > 乔木层 > 草本层，Pielou指数表现为藤本植物 > 灌木层 > 乔木层 > 草本层。这表明草本层的物种丰富度最高，但分布最不均匀，优势种的优势地位突出。结论 走马胎呈聚集分布在群落下层，为灌木和草本层的优势种，生长良好；喜温暖湿润的环境，耐阴，需散射光，喜酸性、疏松的土壤。]]> 2018/3/28 15:36:41 896true 目的 克隆珊瑚菜Glehnia littoralis补骨脂素合成酶（psoralen synthase，PS）基因全长cDNA序列，并进行生物信息学和表达量分析。方法 在前期珊瑚菜转录组测序的基础上，筛选出表达量较高的2条PS基因GlPS1和GlPS2序列。利用cDNA末端快速扩增（rapid amplification of cDNA ends，RACE）方法对2个基因cDNA序列3'端进行克隆，DNAMAN拼接后得到基因全长cDNA序列，并对其编码蛋白进行生物信息学分析。利用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）方法检测GlPS1和GlPS2基因的组织特异性表达。结果 GlPS1和GlPS2基因cDNA序列全长分别为1 885 bp和1 971 bp，编码495和502个氨基酸残基，蛋白相对分子质量分别为55 740.7和56 363.9，等电点为8.28和6.62，均属于细胞色素P450超家族，含有1个跨膜区，为亲水性蛋白。系统进化分析表明，GlPS1和GlPS2与伞形科欧防风Pastinaca sativa、旱芹Apium graveolens、大阿米芹Ammi majus PS蛋白亲缘关系较近。RT-qPCR结果显示GlPS1基因在根中表达量较高，在叶中表达量较低，而GlPS2基因在花中表达量较高，在根中表达量较低。结论 首次获得珊瑚菜GlPS1和GlPS2基因的全长cDNA序列并进行了表达分析，为进一步开展珊瑚菜补骨脂素合成酶基因的功能和遗传调控机制研究奠定基础。]]> 2018/3/7 17:23:04 895true 目的 采用叶绿体基因psb A-trnH间隔区序列探讨不同产地何首乌的分子鉴定方法。方法 分别提取7省区15个居群116份何首乌样品的总DNA，经PCR扩增psb A-trnH间隔区序列，纯化后测序，采用MEGA 6.06软件对序列进行分析。结果 何首乌各居群间的遗传距离为0.001~0.187，最大似然法系统树中何首乌15个居群样品聚为2支。结论 何首乌的遗传变异较显著，psbA-trnH序列可作为道地种源德庆种源与其他种源分子鉴定的依据。]]> 2018/3/7 17:23:04 894true 目的 建立远志药材UPLC指纹图谱及多指标性成分测定的方法，用于不同规格等级远志药材的质量评价。方法 采用UPLC法，建立不同规格等级远志药材的指纹图谱，并测定远志药材中sibiricose A₅、sibiricose A₆、lancerin、sibiricoxanthone B、glomeratose A、7-O-methyl mangiferin、polygalaxanthone Ⅲ、3，6'-disinapoyl sucrose、tenuifoliside A、tenuifoliside C 10种指标性成分的含量，同时建立综合质量评价函数。结果 建立的指纹图谱及含量测定方法符合方法学要求，指纹图谱共标定37个共有峰，指认出其中22个峰；不同规格等级远志药材样品间的相似度在0.927~0.971；10种指标性成分含量均有不同程度的差异，综合质量评价函数表明大筒远志药材样品的整体质量优于中筒远志药材样品，野生远志药材样品的整体质量优于栽培品。结论 建立的指纹图谱结合多指标成分测定的方法可用于远志药材样品的综合质量评价。]]> 2018/3/7 17:23:04 893true 目的 建立10个不同批次线叶菊有效部位醋酸乙酯层的HPLC特征图谱，并测定5种成分的含有量。方法 线叶菊有效部位的分析采用色谱柱Thermo Acclaim^TM120 C₁₈（250 mm×4.6 mm，5 μm），流动相：乙腈（B）-PBS（A）系统（0.1 mol/L磷酸二氢钠和2%冰醋酸1：1混合），梯度洗脱，检测波长360 nm，体积流量0.8 mL/min，柱温35℃。结果 建立了线叶菊有效部位HPLC特征图谱，确立了10个共有峰。测定的5种成分异荭草素、异牡荆苷、异槲皮苷、木犀草苷、异鼠李素-3-O-β-D-葡萄糖分别在0.018~0.108、0.066 8~0.400 8、0.088~0.528、0.118 4~0.710 4、0.017 6~0.105 6 μg范围内线性关系良好，平均加样回收率分别为98.67%、97.93%、98.95%、99.81%、97.33%，RSD分别为1.10%、0.93%、1.10%、0.62%、1.48%。10批药材中8个批次样品的相似度在0.9以上，其中2批样品的相似度为0.688、0.695，含量偏低，差异性较大。各采收期样品中5种成分含有量差异明显，开花率高的药材黄酮类成分的含量高，提示线叶菊药材黄酮类成分的高低与采收期开花率有关。结论 该方法建立了线叶菊有效部位的HPLC特征图谱，确定了共有特征峰，可用于线叶菊药材的质量控制。]]> 2018/3/7 17:23:04 892true 目的 采用HPLC法对10批不同厂家的千年健药材进行指纹图谱研究，并采用相似度计算的方法，评价千年健药材的质量。方法 采用HPLC法测定不同厂家的10批千年健药材。Phenomenex Gemini 110A C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm，5μm），乙腈（A）-0.01%磷酸水溶液（B）为流动相进行梯度洗脱，柱温30℃，体积流量1.0 mL/min，检测波长290 nm。利用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004A版"对指纹图谱进行相似度评价。结果 建立了千年健药材HPLC指纹图谱，确定了11个共有峰，指认了1个峰，除了S4和S10两批，指纹图谱的相似度达到0.887以上；所建立的千年健药材指纹图谱测定方法精密度、稳定性和重复性良好。结论 首次建立了千年健药材的HPLC特征指纹图谱，不仅为千年健药材的鉴别、质量控制等提供了新的科学依据，还对千年健药材的质量评价具有重要的意义。]]> 2018/3/7 17:23:04 891true 目的 对血人参不同施肥量下的植株生长情况进行研究，确定血人参药材最佳施肥量，为其规范化种植技术奠定基础。方法 按照同一种植密度，不同施肥量种植血人参，观察记录血人参生长情况，3年后统计产量和生物量并对不同植密度下血人参药材进行水分、灰分、浸出物测定和鉴别检查，确定血人参最佳施肥量。结果 不同施肥量下血人参非药用部位没有明显差异；当施肥量为225 kg/hm²时，血人参药材产量最高。结论 血人参的最佳施肥量为225 kg/hm²。]]> 2018/3/7 17:23:04 890true 目的 提高药用植物颠茄Atropa belladonna有效成分的产量，为颠茄在实际生产中提供经济高效的处理方法，为相关药用植物次生代谢的机制研究提供基础性参考。方法 通过向培养基中添加4种不同诱导子，包括茉莉酸甲酯（MJ）、硝酸银（AgNO₃）、水杨酸（SA）、酵母提取物（YE），研究诱导子对颠茄毛状根有效成分的积累及代谢途径中的关键酶基因1，4-丁二氨-氮-甲基转移酶（putrescine N-methyl transferase，pmt）基因、托品酮还原酶-I（tropinone reductase-I，trI）基因和莨菪碱6-β-羟化酶（hyoscyamine-6-β-hydroxylase，h6h）基因表达的影响。实验将0.5 g新鲜颠茄毛状根接种于盛有B5液体培养基的三角瓶中，暗培养12 d后，将培养基更换为含有诱导子的4种新培养基，相同条件下再培养2 d后采集毛状根样品，测定每瓶毛状根的鲜质量、干质量、部分生理指标、托品烷类生物碱的量及3种关键酶基因的表达量。结果 MJ抑制了颠茄毛状根的生长及托品烷类生物碱的产生，pmt、trI基因的表达量与对照组相比也有所下降；AgNO₃虽然抑制了毛状根的生长，但却显著提高了托品烷类生物碱的含量，同时pmt、trI、h6h基因的表达量均升高；SA对颠茄毛状根的生长影响不显著，但使东莨菪碱的含量提高；YE对颠茄毛状根的生长及托品烷类生物碱的含量均有促进作用，pmt、trI、h6h基因的表达量也相应升高。结论 AgNO₃是提高颠茄毛状根中托品烷类生物碱含量的最佳诱导子，YE在促进颠茄毛状根生长的同时也可促进其次生代谢。推断诱导子通过调控某种或某几种关键酶基因的表达来影响生物碱的代谢合成，为生产中提高颠茄毛状根药用成分含量提供了可参考的方法。]]> 2018/2/12 15:10:10 889true 目的 研究9种川续断属药用植物的亲缘关系。方法 采用ISSR、SCoT、SRAP 3种分子标记进行多态性检测，TREECONW分析软件计算遗传距离，UPGMA方法构建树状聚类图。结果 ISSR、SCoT、SRAP标记揭示的多态百分率差异不大，分别为90.4%、88.5%、88.2%，均表明供试材料的遗传多态性极为丰富；3种标记均揭示日本续断与大头续断之间遗传距离最大，表明二者亲缘关系最远；3种标记均将川续断属9种药用植物聚为3类，即大头续断与丽江续断、深紫续断与日本续断分别聚为一类，峨眉续断单独为一支，其余4个种聚为一类；ISSR标记和SRAP标记的聚类结果基本相同，仅是大理续断和川续断聚类先后略有差异。结论 3种标记的聚类结果与经典分类具有很好的吻合度，证实了分子标记技术的可靠性，可作为川续断属植物亲缘关系研究的有效方法之一。]]> 2018/2/12 15:10:11 888true 目的 利用代谢组学技术探讨与铁皮石斛炭疽病病程相关的代谢物及其可能的作用机制，为铁皮石斛抗病品种选育提供依据。方法 分别采集铁皮石斛正常叶片与经胶孢炭疽菌处理的感病叶片，经样本前处理、GC-MS分析、生物信息学分析等找出差异代谢物，初步探讨参与病程的差异代谢物并分析代谢通路。结果 成功建立了各分析组的多维统计分析模型，选取VIP>1.0的分散点为潜在差异物质，同时结合单维统计分析（test）中P<0.05为标准加以验证，从鉴定出的305个代谢物中共筛选出84个差异代谢产物，被认为是病程相关代谢物；通过对差异代谢物进行通路富集分析，共有34个差异代谢物参与了代谢途径，且获得的正常-感病代谢通路具有显著意义。结论 基于GC-MS技术对铁皮石斛不同处理组（正常/感病）样本进行了代谢组学分析，并找出与铁皮石斛炭疽病病程相关的代谢物，可为从分子水平研究铁皮石斛病害及培育抗病品种奠定基础。]]> 2018/2/12 15:10:11 887true 目的 在甘松野生资源保护的前提下，其全草是否可等同药典中规定的根及根茎入药，探讨市场流通的甘松药材为全草的科学性。方法 收集全国4省区的31批样品，常规方法测定植株根长、株高、干质量、挥发油含量、水溶性浸出物、甘松新酮含量、水分、总灰分、酸不溶性灰分等数据。运用灰色关联度法、回归分析法以及主成分分析（PCA）、层序聚类分析（HCA）法对反映药材质量的数据进行深入分析，综合评价野生甘松“全草”和“根及根茎”的药材质量。结果 甘松药材质量优劣主要与根及根茎挥发油含量、根及根茎水溶性浸出物含量有较明显的相关性；甘松药材的根及根茎、全草具有差异的8个自变量中，水溶性浸出物、挥发油2个自变量对因变量有显著影响（P<0.01）。结论 通过多维统计分析法对甘松全草、根及根茎的药材质量进行综合评价，甘松全草与根及根茎的挥发油与水溶性浸出物含量存在明显差异。再次证实甘松仍然以历版《中国药典》规定的根及根茎入药为佳；表明甘松全草不能完全替代甘松的根及根茎入药。]]> 2018/2/12 15:10:11 886true 目的 建立基于超高效液相色谱（UPLC）法的大黄中10个蒽醌衍生物同时定量分析方法。方法 采用Waters Acquity超高效液相色谱仪，BEH C₁₈色谱柱（100 mm×2.1 mm，1.7μm），柱温为34℃；甲醇和0.1%磷酸水溶液的混合溶液为流动相，梯度洗脱；体积流量为0.20 mL/min；进样量为2.0 μL；检测波长为410 nm。通过考察柱温和体积流量对保留时间、分离度、理论塔板数和对称因子4个重要的色谱参数的影响，以此获得5个蒽醌糖苷的最佳的色谱分离度和稳健性。结果 优化得到柱温34℃和体积流量0.20 mL/min为最佳分离条件，根据最优参数，建立一种新的基于UPLC的大黄中10个蒽醌衍生物同时定量分析方法。20批次大黄测定结果显示，2种不同基原的大黄药材中芦荟大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷、大黄酸-8-O-β-D-葡萄糖苷的含量差异最大，分别可超过60、77倍，表明2种不同基原的大黄存在较大的质量差异。结论 基于UPLC最佳分离参数建立的10个蒽醌衍生物同时定量分析方法具有较好的稳健性，对更加全面地从化学表征的角度评控不同来源的大黄药材的质量具有参考价值。]]> 2018/2/12 15:10:11 885true 目的 建立同时测定陕西产不同生长年限野生和栽培黄芩中野黄芩苷、黄芩苷、野黄芩素、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素、芹菜素、白杨素和千层纸素A 9种化学成分的HPLC方法。方法 黄芩药材粉末经乙醇（每次30 min）超声提取2次，合并提取液。色谱条件采用Ultrasil C₁₈色谱柱（250 mm×4.6μm，5 μm），乙腈-0.1%甲酸水溶液作为流动相，梯度洗脱；体积流量1 mL/min，检测波长为274 nm；柱温30℃。结果 所测9种主要有效成分在测定质量浓度范围内线性关系良好，r均大于0.999 5；精密度、重复性和稳定性良好；平均回收率为95.94%～99.88%，RSD为0.68%～1.90%。结论 建立的HPLC方法可用于同时测定黄芩中9种主要化学成分，该方法准确、简便、灵敏度高、专属性好，可为黄芩质量评价提供一定的参考。]]> 2018/2/12 15:10:11 884true 目的 通过生物信息学方法，克隆黄芩Scutellaria baicalensis bHLH基因，并初步探究其功能。方法 使用BLAST软件从黄芩cDNA文库中筛选出bHLH基因，克隆其全长cDNA序列，测序验证后使用ORF Finder预测开放阅读框，并进行蛋白序列特征分析，使用荧光定量PCR方法比较bHLH基因在不同器官以及受赤霉素刺激下的表达情况。结果 克隆的6个bHLH转录因子基因（bHLH1~3，bHLH5~7），分属6个亚家族，其中2个有完整的开放阅读框。bHLH基因相对表达水平分析发现，100 μmol/L GA₃处理后bHLH2、bHLH3表达量升高，bHLH1、bHLH5~7表达量降低；bHLH基因在黄芩的根与花中表达量较高，其中bHLH1、bHLH2、bHLH5、bHLH7在花中表达量最高，bHLH3在根中表达量最高；bHLH基因与黄酮类成分生物合成及调控基因表达水平具有一定相关性。结论 为进一步完善黄芩黄酮类成分的分子调控网络奠定基础。]]> 2018/2/2 13:53:39 883true 目的 研究橘核种质资源遗传多样性与柠檬苦素类化合物含量的相关性，为筛选橘核的主要基原品种提供参考。方法 以四川不同产地、不同品种的35份橘核样品为材料，首先利用NTSYSpc2.10e软件对ISSR标记结果进行多态性分析；再采用UPLC法测定橘核样品中柠檬苦素类化合物（柠檬苦素、诺米林、黄柏酮）的含量；最后通过SPSS 21.0软件对二者数据进行相关性分析。结果 筛选出的33条ISSR引物共扩增出240条清晰可辨DNA带，遗传相似系数变化范围为0.72~0.92；其中椪柑与大红袍亲缘关系最近，且柠檬苦素类化合物含量类似，而其余品种橘核与大红袍亲缘关系较远，柠檬苦素类化合物含量差异较大。结论 与大红袍亲缘关系越接近的品种其类柠檬苦素含量越高，可考虑将椪柑作为橘核的主要基原品种。]]> 2018/2/2 13:53:39 882true 目的 建立胡黄连UPLC指纹图谱，为科学评价及有效控制其质量提供可靠方法。方法 采用Waters Acquity UPLC BEH C₁₈色谱柱（100 mm×2.1 mm，1.7μm），以0.5%乙酸水溶液（A）-乙腈（B）为流动相梯度洗脱；体积流量0.3 mL/min，柱温为32℃，检测波长为295 nm，对25批以胡黄连名称出售的药材进行检测。通过相似度评价，结合聚类分析（HCA）和主成分分析（PCA），对不同批次胡黄连药材进行质量评价。ESI-Q-TOF/MS正、负2种离子模式扫描对其化学成分定性分析。结果 22批胡黄连药材与3批混淆品的指纹图谱明显不同。通过建立的22批胡黄连药材UPLC指纹图谱确证了16个共有峰，并对12个共有峰进行了明确化学成分指认；胡黄连药材的相似度为0.939~0.998；通过聚类分析可大致聚成3类；PCA结果支持了HCA结果；并结合偏最小二乘法判别分析（PLS-DA）方法发现区分胡黄连样品的4个标志性化合物，指认出1、9、12号峰分别为藏黄连酚苷C、胡黄连苷I和胡黄连苷Ⅲ。结论 胡黄连的UPLC指纹图谱的构建和化学模式的识别为药材质量控制提供更全面的参考。]]> 2018/2/2 13:53:39 881true 目的 建立天麻药材中天麻素、对羟基苯甲醇、巴利森苷A、巴利森苷B、巴利森苷C、巴利森苷E 6种天麻素类成分的一测多评测定方法。方法 采用Agilent Zorbax SB-C₁₈（250 mm×4.6 mm，5μm）色谱柱，以乙腈（A）-0.05%磷酸水溶液（B）为流动相，梯度洗脱，0~5 min，2% A；5~20 min，2%~30% A，20~25 min，30%~2% A，检测波长220 nm，体积流量1.0 mL/min，柱温25℃。以天麻素为内参物，分别建立对羟基苯甲醇、巴利森苷A、巴利森苷B、巴利森苷C、巴利森苷E的相对校正因子，利用该相对校正因子计算其他5种成分的量，同时利用外标法测定天麻素、对羟基苯甲醇、巴利森苷A、巴利森苷B、巴利森苷C、巴利森苷E的量，比较2种测定方法的差异，验证一测多评法的可行性和准确性。结果 在线性范围内，天麻素与对羟基苯甲醇、巴利森苷A、巴利森苷B、巴利森苷C、巴利森苷E的相对校正因子分别为0.663、1.278、1.435、1.389、1.591，在不同实验条件下相对校正因子重现性良好，6种天麻素类成分的计算值与实测值无显著性差异。结论 一测多评法测定天麻药材中6种天麻素类成分准确且可行，可用于天麻药材的质量控制。]]> 2018/2/2 13:53:39 880true 目的 建立近红外光谱法（NIR）测定芍药根中芍药苷和芍药内酯苷含量的方法，快速评价其质量。方法 从四川、安徽、浙江采集了65份芍药根样品，晒干。先用UPLC测定样品中芍药苷和芍药内酯苷的含量，并测定其近红外光谱。选择53份为校正集样品，12份为验证集样品；以UPLC测定的含量为参考值，运用偏最小二乘法，通过优化波段、光谱预处理方法和主因子数等参数，建立校正集样品芍药苷和芍药内酯苷含量与NIR之间的多元校正模型。根据未知样品（验证集）的NIR预测这2种药效成分的含量。结果 53份校正集样品芍药苷和芍药内酯苷的NIR预测值与UPLC测定值之间的标准偏差分别为1.437 2%和0.784 3%，相关系数分别为0.990 2和0.994 4。12份验证集样品芍药苷和芍药内酯苷的NIR预测值与UPLC测定值之间的标准偏差分别为0.714 5%和0.632 4%，相关系数分别为0.988 0和0.994 6。四川、安徽、浙江样品中这2种成分之和分别为5.49%、5.33%、4.81%。结论 NIR可快速同时测定芍药根中芍药苷和芍药内酯苷的含量，评价其质量。以这2种药效成分之和为指标，四川、安徽、浙江栽培的芍药根的质量相近，无显著性差异。]]> 2018/2/2 13:53:39 879true 目的 建立高效液相色谱（HPLC）同时测定赤芍提取物中9个活性成分（芍药苷、氧化芍药苷、芍药内酯苷、苯甲酰芍药苷、苯甲酸、儿茶素、丹皮酚、没食子酸、1，2，3，4，6-O-没食子酰葡萄糖）的方法。方法 采用C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相为乙腈和0.1%磷酸水溶液，梯度洗脱，体积流量1.0 mL/min，检测波长230 nm，柱温30℃。结果 没食子酸、氧化芍药苷、儿茶素、芍药内酯苷、芍药苷、1，2，3，4，6-O-没食子酰葡萄糖、苯甲酸、苯甲酰芍药苷、丹皮酚进样量分别在0.004~1.200、0.010~1.500、0.044~0.660、0.038~1.140、0.042~2.100、0.050~1.250、0.040~0.600、0.042~1.260和0.004~1.080 mg/mL与峰面积呈良好线性关系，有良好的精密度、稳定性、重复性和回收率。结论 该方法同时测定赤芍中9个活性成分的含量高效、准确、重复性好，可用于赤芍药材的质量控制。]]> 2018/2/2 13:53:40 878true 目的 研究白桦硫氧还蛋白（Betula platyphylla thioredoxin，BpTRX）基因全长和启动子序列及其编码结构和性质，揭示其在硫化氢（H₂S）处理下BpTRX的表达模式。方法 通过PCR手段克隆BpTRX基因，应用染色体步移技术获得BpTRX启动子区序列，并对BpTRX基因、启动子及其编码蛋白进行生物信息学分析，构建BpTRX系统进化树。利用实时荧光定量PCR定量分析BpTRX基因在H₂S外源胁迫处理下的表达模式。结果 BpTRX基因全长351 bp，编码了由117个氨基酸组成的蛋白。BpTRX基因与蓖麻、大豆、苜蓿和葡萄TRX-H型蛋白亲缘关系紧密。获得的BpTRX启动子区序列为873 bp，包含了转录必备的元件以及大量的胁迫响应和激素响应元件等。结论 获得BpTRX基因的全长和部分启动子序列，BpTRX基因对H₂S处理的响应趋势为双峰形式，即先增加后降低、再增加再降低。]]> 2018/1/19 15:53:08 877true 目的 从野生型驯化为栽培品种角度分析地黄Rehmannia glutinosa的遗传多样性，探讨河南焦作地区怀地黄的栽培起源。方法 对地黄野生自然居群，栽培品种及其近缘物种ITS、psbA-trnH和trnS-trnG序列进行扩增和测序，分析比较中药材地黄野生自然居群，栽培品种间各序列的单倍型类型和核苷酸多态性，构建Neighbor-Joining（NJ）分子系统发育树。结果 单倍型分析结果显示，地黄野生居群单倍型类型数量（ITS 6个，psbA-trnH 8个，trnS-trnG 9个）明显高于怀地黄栽培品种单倍型类型数量（ITS 3个，psbA-trnH 2个，trnS-trnG 3个）。地黄野生居群的单倍型多样性和核苷酸多样性均远高于怀地黄栽培品种间，在3个基因联合系统树上，地黄野生居群和栽培品种所有样品与茄叶地黄聚在一支，支持率为90%；23个栽培品种（29个样本）与来自温县的10号地黄野生居群聚为一支，支持率为78%。结论 地黄野生型驯化为栽培品种过程发生了明显的遗传瓶颈，导致现存怀地黄栽培品种遗传基础狭窄，遗传多样性降低。怀地黄栽培品种可能起源于河南温县区域的地黄野生群体。]]> 2018/1/19 15:53:08 876true 目的 研究栀子Gardenia jasminoides野生群体遗传多样性，为栀子野生植物资源的保护和合理利用提供科学依据。方法 利用14对EST-SSR引物对栀子19个野生群体573个个体进行研究，计算遗传参数，分析遗传多样性，进行聚类分析。结果 检测到75个等位基因，发现栀子野生群体有较高的遗传多样性水平（H_e=0.703），栀子野生群体的基因多样度（N_ei）平均为0.603，Shannon多样性指数（I）平均为1.10；群体间表现为中等程度的遗传分化（F_st=0.141）和较高水平的基因流（N_m=1.523），AMOVA方差分析结果（0.124）显示群体变异主要以群体内变异为主，Mantle检验分析结果显示地理距离与遗传距离相关程度较低，TPM检验结果显示栀子73.7%的群体在历史近期经历过瓶颈效应。结论 栀子野生群体目前保持有较高的遗传多样性水平。]]> 2018/1/19 15:53:08 875true 目的 对濒危药用植物短柄乌头Aconitum brachypodum遗传多样性进行研究。方法 选用3对引物对短柄乌头4个自然居群105个样品进行了AFLP分析，利用POPGENE32、MEGA4、NTSYS等生物统计软件进行相关参数计算和聚类分析。结果 在短柄乌头物种居群间的遗传多样性水平上，多态位点百分率为80.57%，Nei's基因多样性指数（H_e）为0.322 9±0.179 8，Shannon's信息指数（I）为0.472 0±0.251 7。在其居群内，多态位点百分率为12%，H_e为0.115 4±0.044，I为0.168 0±0.065 3。Nei's基因分化系数（G_st）为0.864 2。聚类分析表明，禄劝居群和东川居群聚为一支，丽江居群和会泽居群聚为一支。结论 短柄乌头物种居群间的遗传多样性丰富，居群内的多样性偏低。居群间存在显著的遗传分化。AFLP对短柄乌头的遗传多样性分析对其保护提供依据。]]> 2018/1/19 15:53:08 874true 目的 建立一测多评法同时测定毛橘红与光橘红中5种黄酮类成分的含量，并进行分析。方法 采用HPLC法，以柚皮苷为内参物，建立其与新橙皮苷、野漆树苷、柚皮素和芹菜素的相对校正因子，并利用相对校正因子计算毛橘红与光橘红样品中各成分含量。同时通过外标法计算各成分含量，并比较2种方法的差异。采用t检验比较分析毛橘红与光橘红中5种黄酮类成分含量。结果 柚皮苷与新橙皮苷、野漆树苷、柚皮素、芹菜素的校正因子分别为0.898、1.519、0.313、0.406，RSD<3.0%。一测多评法与外标法计算得到的含量测定结果无显著差异。毛橘红与光橘红中的柚皮苷、野漆树苷、柚皮素含量存在显著差异。结论 以柚皮苷为内参物建立的相对校正因子准确、可行，毛橘红与光橘红黄酮类成分存在很大差异，一测多评法可用于毛橘红与光橘红的质量控制。]]> 2018/1/19 15:53:08 873true 目的 对林下仿生态种植金线莲的质量标准进行研究。方法 建立林下仿生态种植金线莲的性状、显微特征、薄层鉴别及含量测定方法，并按《中国药典》2015年版有关规定对水分、灰分和酸不溶性灰分等项目进行了测定。结果 林下仿生态种植金线莲在性状、显微特征和薄层色谱方面均具有专属性特征，经测定5个基地的金线莲水分平均为8.69%，总灰分平均为11.93%，酸不溶性成分平均为3.27%；含量测定结果槲皮素平均质量分数为0.021 0%，异鼠李素平均质量分数为0.024 7%，山柰素平均质量分数为0.027 3%。结论 上述方法简便、专属性好，重现性好，可为林下仿生态种植金线莲质量标准的制定提供依据。]]> 2018/1/19 15:53:08 872true 目的 从布渣叶中克隆黄酮碳苷合成途径关键酶黄烷酮-2-羟化酶（flavanone 2-hydroxylase，F2H）基因，构建原核表达载体，对其进行生物信息学和表达模式分析。方法 根据布渣叶转录组数据中注释为F2H的Unigene设计特异性引物，利用PCR法扩增MpF2H基因的开放阅读框（open reading frame，ORF），基于在线工具对cDNA序列进行生物信息学分析。同时，依据F2H序列，设计特异引物，采用RT-qPCR方法对其在芽、叶、枝、花、果等组织中的表达进行测定。结果 MpF2H基因ORF全长为1 557 bp（Genbank登录号KY652921），编码518个氨基酸；相对分子质量54 500，理论等电点5.49，含有信号肽，不含跨膜域，可能定位于叶绿体。同时，MpF2H基因在不同组织中均有表达，其中在叶中表达量最高，在枝和花中表达量最低。结论 MpF2H基因在不同组织中表达量差异较大。克隆了MpF2H基因cDNA，构建了其原核表达载体pET30a-MpF2H，为MpF2H基因的原核表达和功能验证奠定了基础。]]> 2018/1/8 10:51:52 871true 目的 对丹参Salvia miltiorrhiza基因组中存在的Pht1基因家族成员进行挖掘、鉴定和功能预测分析，为进一步研究和利用Pht1这一功能基因家族奠定基础。方法 基于丹参基因组数据库及NCBI数据库，借助生物信息学方法，首先筛选获得丹参Pht1家族候选基因的序列，进而对其进行多重序列比对、保守结构查找及系统进化树构建，最后完成其特征性分析和生物学功能预测。结果 从丹参基因组中共挖掘出了12个新的Pht1候选基因，加上已报道的Smpht1，共13个Pht1成员，其同源性高达74.34%，并对9个成员提供了比较可靠的功能注释。该家族基因中，Smpht1&Sm1、Sm4&Sm6、Sm5&Sm11这3对成员可能属于彼此协同进化的同功能基因；Smpht1、Sm1、Sm3、Sm5、Sm7及Sm11这6个成员在丹参根部表达，除了受缺磷特异性诱导表达的Sm7和不受磷素供缺因素所影响的Sm3以外，其余4个均有可能属于缺磷诱导增强表达型基因，进而对丹参磷素吸收起着重要作用；另外，Sm7与Sm16还有可能在丹参花器官中表达而参与植株花期磷素平衡的调节；Sm14则很有可能是一个菌根诱导特异性表达的磷转运基因。结论 首次系统地从丹参基因组中挖掘筛选出Pht1基因家族，并发现了具有特征性生物学功能的成员，这将为进一步阐明Pht1在丹参生长发育和药效成分代谢中所起作用的相关研究提供背景支持和思路参考。]]> 2018/1/8 10:51:52 870true 目的 对可能参与花青素代谢调控的黑果枸杞R1-MYB转录因子基因进行克隆、生物信息学分析和不同品种、同一品种不同器官及盐胁迫条件下差异表达分析。方法 通过同源基因克隆和RACE方法得到黑果枸杞R1-MYB转录因子编码区全长，通过转录组数据获得宁夏枸杞同源基因序列。通过Prot、Param、Smart、PSORT和SOPMA进行生物信息学分析，通过MEGA 5.0构建NJ系统进化树。同时采用Real-time PCR的方法进行基因表达分析。结果 获得黑果枸杞LrMYB1R1（KY568981）及宁夏枸杞LbMYB1R1（KY568982）基因全长cDNA，cDNA编码区全长1 496 bp，编码区为927 bp，编码产物包含308个氨基酸，编码蛋白相对分子质量分别为33 400和33 490，理论等电点分别为7.80和7.78，属于R1-MYB转录因子，经预测其编码蛋白位于细胞核中；LrMYB1R1和LbMYB1R1与茄科植物番茄、马铃薯、烟草中的MYB1R1-like蛋白具有高度相似性。LrMYB1R1的表达表现出器官和发育阶段中差异性，具有品种特异性，LrMYB1R1的表达受盐胁迫抑制。结论 丰富了对R1-MYB转录因子的研究，为接下来的基因功能研究及利用基因工程手段提高黑果枸杞中花青素含量奠定基础。]]> 2018/1/8 10:51:52 869true 目的 比较野生当归Angelica sinensis与栽培当归的遗传多样性。方法 应用ISSR分子标记对48个栽培当归居群和7个野生当归居群1 038个样本进行扩增，利用Popgen 1.32软件对其Shannon's多样性信息指数（I）等遗传信息参数进行分析，并利用SPSS 19.0中的独立样本t检验进行差异显著性检验；运用GenAlEx 6.5软件对野生和栽培当归2个组群遗传变异进行AMOVA分析；应用NTSYS软件构建当归野生和栽培各居群的Nei's遗传距离UPGMA聚类树状图，并使用GenAlEx6.5软件中的Mental test分析遗传距离与地理距离的相关性。结果 野生当归居群和栽培当归居群的多态位点百分率（PPB）为83.77%和96.10%，I平均值为0.221 7和0.282 8，Nei's基因多样性指数（H）平均值为0.344 4和0.434 3，且存在极显著差异（P<0.001）；野生和栽培当归居群的种群间遗传分化指数（G_st）、基因流（N_m）值分别为0.299 1、1.171 8和0.733 4、0.181 7，组间变异百分比为15.85%，居群间变异百分比为54.3%，居群内变异百分比为29.85%；遗传距离变化范围0.014 4~0.730 7。结论 当归野生居群的遗传多样性低于栽培居群，野生居群间的遗传分化程度明显低于栽培居群，当归总的遗传变异来自于居群间，野生居群与栽培居群亲缘关系较远，且遗传距离与地理距离存在相关性。]]> 2018/1/8 10:51:52 868true 目的 通过对甘肃、青海山莨菪Anisodus tanguticus遗传多样性研究，为野生山莨菪资源的保护提供依据。方法 采用ISSR分子标记技术，对11个野生山莨菪居群的127份DNA进行扩增，对其扩增条带进行遗传多样性分析，在所得遗传距离的基础上进行UPGMA聚类和Mantel检验地理距离，对野生山莨菪居群间遗传多样性差异进行分析。结果 10条ISSR引物共检测到131个条带，每条引物11~15个，平均13.1个，共858个多态性位点；居群平均多态性位点百分率（PPB）59.54%；Nei's遗传多样性指数（H）为0.220 4，Shannon信息指数（I）为0.325 4；遗传距离变化范围0.073 3~0.306 2；Mantel检验P=0.002。结论 11个野生山莨菪居群间具有较高的遗传多样性，各居群间遗传距离与地理距离显著相关，甘肃，青海山莨菪居群间存在较高多态性，物种遗传多样性较为丰富，对野生山莨菪资源的保护与可持续利用提供了参考。]]> 2018/1/8 10:51:52 867true 目的 建立同时测定南方菟丝子Cuscuta australis中绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、金丝桃苷、异槲皮苷、紫云英苷、山柰酚的一测多评法，验证该方法在南方菟丝子质量分析中应用的科学性及可行性。方法 采用高效液相色谱法，以金丝桃苷为内参物，建立该成分与绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、异槲皮苷、紫云英苷和山柰酚的相对校正因子，采用相对校正因子来计算各成分的质量分数，同时用外标法测定南方菟丝子及其炮制品中7种活性成分的质量分数，对南方菟丝子一测多评的计算结果与外标法实测值进行比较，评价一测多评法在南方菟丝子中应用的准确性和科学性。结果 各相对校正因子重复性良好，一测多评法测定结果与外标法测定结果无显著差异。结论 以金丝桃苷为内标同时测定绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、异槲皮苷、紫云英苷、山柰酚的一测多评法可用于南方菟丝子的定量分析。]]> 2018/1/8 10:51:53 866true 目的 预测磷脂酰肌醇4-磷酸5-激酶（PIP5Ks）基因家族7个基因的表达部位；测定Lm型雌性系蓖麻aLmAB2 3种品系不同时期的蓖麻花序中PIP5Ks各成员相对表达量。方法 利用生物信息学分析在线软件进行蛋白质理化性质分析、蛋白质疏水性分析、亚细胞定位预测、跨膜区分析。采用荧光定量PCR方法进行蓖麻PIP5Ks基因家族的生物信息学分析和采用DNAMAN程序进行序列比对。结果 蓖麻PIP5Ks共有7个成员，分别为PIP5K1、PIP5K2、PIP5K4、PIP5K6、PIP5K8、PIP5K9、PIP5K11；蓖麻PIP5K对应的蛋白之间的氨基酸序列同源性达到48.06%，蓖麻PIP5Ks所对应蛋白均为亲水性蛋白，除PIP5K9和PIP5K11为不稳定蛋白质其余均为稳定蛋白质；PIP5Ks对应蛋白均不存在跨膜结构域，均为非跨膜蛋白。亚细胞定位结果显示PIP5K1、PIP5K4、PIP5K6、PIP5K9、PIP5K11蛋白具有导肽的可能性较低，并且无对应的氨基酸切割位点，即定位在其他细胞器或者可能为胞浆蛋白；PIP5K2蛋白定位在叶绿体，叶绿体转运肽数值较高；PIP5K8蛋白定位在分泌通路。利从PIP5Ks在差异表达的相对表达量变化上来看，除PIP5K4并未检测到荧光，其余PIP5Ks均有一定的差异表达，PIP5Ks的相对表达量的变化趋势均较为相近，PIP5K1、PIP5K2的相对表达量较多，其次为PIP5K8、PIP5K9的相对表达量，PIP5K6及PIP5K11只有少量的表达。结论 PIP5Ks在蓖麻中对花序轴性状可能有一定的影响，PIP5Ks在花序轴上的差异含量与花序发育具有一定的规律性。]]> 2018/12/29 14:59:50 865true 目的 采用ITS2条形码鉴定滨海白首乌及其近缘种药用植物。方法 采集滨海白首乌Cynanchum auriculatum及其近缘种植物样品共54份，分别提取基因组DNA，通过PCR扩增ITS2序列并进行双向测序，测序结果提交至GenBank；从GenBank下载萝藦科植物16种47条序列，并通过ITS2数据库注释出ITS2序列；对提交与下载的101条序列，应用MEGA 5.0软件进行序列比对，计算种内和种间距离，采用相似性搜索法、最近距离法进行鉴定分析，并构建neighber-joining（NJ）系统进化树直观反映鉴定结果。结果 滨海白首乌ITS2序列长度均为249 bp，是1个单倍型，与萝藦科鹅绒藤属植物距离较近，与萝藦科其他属近缘种之间遗传距离较远，NJ树结果显示滨海白首乌及其近缘种药用植物均可明显区分，表现出良好的单系性，依据ITS2二级结构，也可以直观地将滨海白首乌与萝藦科近缘种区分。结论 ITS2序列作为DNA条形码能稳定、准确鉴别滨海白首乌，为保障安全用药提供了新的技术手段。]]> 2018/12/29 14:59:51 864true 目的 基于广西地不容转录组序列开发SSR引物，并用于该物种自然居群遗传多样性的研究。方法 从广西地不容转录组测序获得的unigene序列中挖掘SSR位点，采用Oligo 7.0软件设计引物，通过电泳法筛选得到多态性高的SSR引物用于遗传多样性研究。结果 从广西地不容转录组20 637条unigene序列中，搜索到6 833个SSR位点，出现频率为33.11%。基于转录组序列设计50对引物，筛选得到10对多态性高的引物。10对引物在5个居群63个样本中共扩增得到83个条带，有效条带百分率为100%，多态性信息量（PIC）为0.688 9。在物种水平和居群水平上，Nei基因多样性指数（H）分别为0.725 2和0.613 4，Shannon多样性指数（I）分别为1.576 6和1.220 3，观察杂合度（H_o）分别为0.584 5和0.558 4，期望杂合度（H_e）分别为0.731 2和0.643 5。居群的遗传分化系数（F_st）为0.146 5，基因流（N_m）为1.456 9。UPGMA聚类分析表明，5个居群可分为3支系。结论 开发的SSR标记适用于广西地不容的遗传多样性分析。广西地不容在物种和居群水平上均具较高的遗传多样性，遗传分化主要存在于居群内部。]]> 2018/12/29 14:59:51 863true 目的 采用灰色关联度法和FCM（Fuzzy C-Means）算法相结合的模式识别模型进行木香质量多指标综合评价研究。方法 HPLC法测定木香烃内酯、去氢木香内酯的含量及水蒸气蒸馏法测定木香挥发油的含量作为木香评价考察指标。采用灰色关联度法进行中药质量排序，FCM算法进行中药质量分类。结果 不同产地木香平均关联度排序为云南>广东>广西>湖南>四川>安徽亳州>北京>河北，FCM算法将不同产地木香样品分为3类。由2种方法结合分析可知云南、广东、广西在质量高的类组中；湖南、四川在质量中等的类组中；北京、安徽亳州、河北在质量低的类组中。结论 构建了用于评价中药材质量的综合模式识别模型体系，首次在木香药材中采用模糊聚类算法，旨在形成一种木香质量评价研究方法，为现代模式识别、数据挖掘等新方法在中药质量评价方面的应用提供思路引领和经验借鉴。]]> 2018/12/29 14:59:51 862true 目的 比较18批黄丝郁金挥发油含量及指纹图谱，为黄丝郁金药材质量控制标准提供依据。方法 采用水蒸气蒸馏法提取并测定挥发油含量，同时采用气相色谱（GC）法建立了黄丝郁金挥发油指纹图谱，并用气相色谱-质谱联用（GC-MS）技术确定指纹图谱特征峰，采用相似度评价、聚类分析、主成分分析3种方法对18批黄丝郁金药材指纹图谱进行研究。结果 建立了黄丝郁金药材的GC指纹图谱，确定了22个共有峰；通过相似度评价、聚类分析和主成分分析结果可知不同批次黄丝郁金的指纹图谱既有相似性，又有其特征性，不同产区间和同一产区内药材均有一定差异。结论 该方法为黄丝郁金药材的质量控制提供了较为全面、有效的评价方法。]]> 2018/12/29 14:59:51 861true 目的 对川产姜黄颜色值与主要化学成分姜黄素类成分（姜黄素、去甲氧基姜黄素、双去甲氧基姜黄素、总姜黄素）含量之间的相关性进行研究。方法 基于"辨状论质"理论，采用分光测色计对川产姜黄的切片与粉末颜色值进行测量，结合药材主要化学成分的含量，对二者进行相关性分析。结果 川产姜黄粉末的颜色值L^*、b^*、ΔE^*ab与姜黄素类各成分含量呈现极显著的负相关关系，相关系数均在0.4左右；颜色值a^*与姜黄素类各成分含量呈现极显著的正相关关系，相关系数均在0.7左右。结论 川产姜黄的颜色值a^*相较于其他值相关程度更高，提示可通过姜黄粉末a^*值预测和判断川产姜黄药材品质，从而验证"辨状论质"理论在姜黄药材鉴别中的科学性，为建立快速鉴别姜黄品质的评价体系奠定基础。]]> 2018/12/29 14:59:51 860true 目的 为了研究独行菜黄酮类化合物生物合成途径的关键基因，从独行菜中克隆了黄烷酮-3-羟化酶（flavanone-3-hydroxylase，F3H）基因，命名为LaF3H，并进行序列分析、原核表达和纯化。方法 根据独行菜转录组数据中LaF3H基因序列设计特异性引物，克隆LaF3H基因的cDNA序列，构建pET-32a-LaF3H原核表达载体并在大肠杆菌中诱导表达LaF3H重组蛋白。结果 LaF3H基因开放阅读框（ORF）长1 080 bp，编码359个氨基酸，其蛋白质相对分子质量为40 320。序列分析结果表明LaF3H具有F3H蛋白的5个保守基序，系统进化分析结果显示LaF3H蛋白与拟南芥等十字花科植物F3H蛋白同源性较高。通过构建原核表达载体pET-32a-LaF3H，在大肠杆菌BL21（DE3）菌株中成功表达LaF3H重组蛋白，利用Ni²⁺亲和色谱得到了纯化的LaF3H重组蛋白。结论 克隆了LaF3H基因，获得LaF3H纯化蛋白，为下一步制备LaF3H蛋白抗体、酶学活性检测，研究LaF3H基因在独行菜黄酮类化合物生物合成途径中的功能奠定基础。]]> 2018/12/15 14:37:25 859true 目的 对银杏进行转录组测序，分析银杏生长发育不同时期类黄酮生物合成关键基因的表达。方法 以银杏幼年树和成年树不同时期叶片作为供试材料，利用Illumina HiSeq 2000进行转录组测序，对Unigene进行功能注释，分析银杏类黄酮生物合成关键基因的表达特征。结果 转录组测序共获得43 073条Unigene，其中35 179条被注释，基因差异表达（DEG）筛选得到5 117个基因。通过对类黄酮合成相关KEGG途径进行分析，筛选出50条候选基因。分析50条候选基因的表达规律，发现类黄酮合成关键基因均在银杏幼叶中高表达，但在成年树与幼年树同时期叶片之间表达差异不显著。分析与类黄酮合成关系密切的13个基因发现，其中肉桂酸4-羟化酶（C4H）、查耳酮合成酶（CHS）、花青素合成酶（ANS）、花青素还原酶（ANR）和类黄酮O-甲基转移酶（FOMT）基因的表达量较高，类黄酮3'-羟化酶（F3'H）、类黄酮3'，5'-羟化酶（F3'5'H）和黄酮醇合成酶（FLS）基因的表达量则相对较低。结论 通过转录组高通量测序，筛选分析了银杏类黄酮生物合成的关键基因及其表达特征，为提高银杏类黄酮产量提供了分子生药学理论基础。]]> 2018/12/15 14:37:25 858true 目的 对参与多糖合成途径的茶树尿苷二磷酸-葡萄糖-脱氢酶基因（Camellia sinensis UDP-glucose-dehydrogenase gene，CsUGD）进行克隆、生物信息学分析、组织表达特异性分析及测定茶树不同器官组织多糖含量。方法 通过转录组数据获得茶树同源基因序列。利用ProtParam、TMpred、signalP、NetPhos、SMART、SSPro 4.0等在线软件进行生物信息学分析。VMD编辑CsUGD基因蛋白质三维结构；Jalview软件进行多序列比对；MEGA5.0构建系统进化树。采用qRT-PCR对不同器官组织进行基因表达差异分析，通过蒽酮硫酸比色法测定不同器官的多糖含量。结果 获得茶树CsUGD基因（MG366591）全长cDNA序列，该序列全长1 866 bp，编码480个氨基酸。CsUDP蛋白属于稳定亲水蛋白，不含信号肽，具有跨膜结构，并与柿树亲缘关系最近。荧光定量PCR显示，CsUGD在茶树的侧根中表达量最高；蒽酮硫酸比色法测定显示，在侧根中多糖含量最高。结论 首次从茶树中克隆出CsUGD基因，阐明该基因在茶树生长发育中的重要作用，在茶树多糖合成途径中起到关键作用，为茶树育种并提高茶叶药用价值提供科学依据。]]> 2018/12/15 14:37:26 857true 目的 研究三叶青64个种质的遗传多样性和亲缘关系。方法 利用SSR荧光标记对其进行PCR扩增，利用POPGENE32软件分析三叶青64个种质的遗传多样性和亲缘关系，利用UPGMA法构建其亲缘关系树状图，利用NTSYS软件构建其主成分分析二维图和三维散点图。结果 从14对引物中筛选出8对条带清晰、重复性好的引物，对64份供试材料的基因组DNA进行扩增。8个SSR标记的观察等位基因数（N_a）变化范围为3~13，均值为7.875 0；有效等位基因数（N_e）变化范围为1.424 9~6.087 4，均值3.605 2；Shannon信息指数（I）变化范围为0.689 5~2.082 4，均值1.424 0；观测杂合度（H_o）变化范围为0.206 3~0.734 4，均值0.524 7；期望杂合度（H_e）变化范围为0.300 6~0.842 4，均值0.658 4；Nei's基因多样性（H）0.298 2~0.835 7，均值0.653 2；多态信息含量（PIC）变化范围为0.288 0~0.817 5，均值0.614 5，遗传相似系数变化范围为0.115 4~0.954 5，遗传距离变化范围为0.000 0~3.218 1，说明64份三叶青种质亲缘关系较远，遗传分化程度较大。在遗传距离1.018 9处，64份三叶青种质可分为5大组。结论 地理差异与种质遗传差异无必然联系。三叶青种质资源具有丰富的遗传多样性，SSR荧光标记分析结果可为三叶青种质资源的利用和品种选育提供一定的参考。]]> 2018/12/15 14:37:26 856true 目的 建立UPLC法同时测定附子和川乌中尿嘧啶、腺苷、鸟嘌呤核苷和尿嘧啶核苷4种核苷类成分含量的方法，并采用多元统计分析方法比较附子和川乌中的核苷类成分的含量差异。方法 水超声提取附子和川乌中的核苷类成分，采用BEH C₁₈（100 mm×2.1 mm，1.7 μm）色谱柱；乙腈-水梯度洗脱；体积流量0.2 mL/min，柱温30℃；进样体积4 μL；检测波长260 nm。采用差异显著性分析、聚类热图分析、主成分分析和TOPSIS分析进行数据处理，综合评价附子和川乌的质量。结果 方法学考察结果符合规定，尿嘧啶、腺苷、鸟嘌呤核苷和尿嘧啶核苷线性关系良好（r²>0.999 3），平均加样回收率分别为99.86%、99.14%、99.74%和98.71%，RSD均小于2.0%。以4种核苷类成分为评价指标，18号附子样品质量最优，23号川乌样品质量最优。结论 建立的方法操作简单、准确可靠，具有良好的精密度、稳定性、重复性，可用于附子和川乌中核苷类化合物的定量测定，为附子和川乌水溶性成分的研究提供依据。]]> 2018/12/15 14:37:26 855true 目的 建立天麻饮片UPLC指纹图谱和同时测定天麻饮片中天麻素、对羟基苯甲醇、巴利森苷B、巴利森苷C、巴利森苷A的超高效液相色谱分析方法。方法 采用Waters Acquity超高效液相系统，Waters ACQUITY UPLC BEH C₁₈（50 mm×2.1 mm，1.7 μm）色谱柱，流动相为乙腈-0.1%甲酸水，梯度洗脱，检测波长270 nm（指纹图谱）、220 nm（含量测定），体积流量为0.3 mL/min，柱温35℃。通过相似度评价、主成分分析、偏最小二乘判别分析对28批天麻饮片指纹图谱进行分析，通过对照品比对对主要共有峰进行指认和含量测定。结果 建立了不同产地天麻的指纹图谱，标定了20个共有峰，并指认了其中6个共有峰：天麻素（1号峰）、对羟基苯甲醇（3号峰）、对羟基苯甲醛（7号峰）、巴利森苷B（14号峰）、巴利森苷C（15号峰）、巴利森苷A（18号峰）。28批样品相似度均在0.90以上，主成分分析将不同产地天麻分为5组，并发现对羟基苯甲醇、对羟基苯甲醛、巴利森苷A等6个差异成分。同一成分在各产地天麻饮片中的含量差异明显，不同成分的波动范围不同，各产地5种成分总量贵州（2.52%） > 云南（2.49%） > 陕西（2.33%） > 湖北（2.10%） > 浙江（1.90%） > 安徽（1.65%）。结论 建立不同产地天麻UPLC指纹图谱结合多成分含量测定方法为完善天麻饮片的质量控制提供了参考。]]> 2018/12/15 14:37:26 854true 目的 对不同来源的苹果属植物叶片进行化学成分分析比较，为苹果属植物叶片的综合利用及资源开发奠定基础。方法 采用UPLC-DAD技术测定5种主要成分（根皮苷、三叶苷、根皮素、芦丁和槲皮苷）的含量，采用UPLC-Q-TOF-MS代谢组学技术对苹果属不同种（品种）、不同产地来源的20种共40份叶片进行了化学成分检测，并结合统计软件对各组间化学成分进行了比较分析。结果 5种成分在苹果属不同来源植物叶片中含量差异较大，其中根皮苷普遍含有，质量分数相对较高，在1.01%～17.15%，根皮素、芦丁和槲皮苷也较广泛存在，而三叶苷则仅在真正苹果组的山荆子系和花楸苹果组中存在，苹果系和栽培品种中未检测到。代谢组学分析结果表明真正苹果组中苹果系和山荆子系化学成分差异显著，共发现26个差异标志物；不同产地来源的植物叶片化学成分有所不同；野生种与栽培种植物叶片化学成分相似。结论 苹果属植物叶片普遍含有根皮苷等多酚类成分，是潜在的药物和保健产品资源；该属植物叶片的化学成分种类和含量在不同组、系及产地间具有一定的差异，为合理利用该属植物奠定基础；另外，苹果属植物叶片资源丰富且可再生，值得进一步深入研究和开发。]]> 2018/11/28 17:35:16 853true 目的 评价云南草果居群的遗传多样性及亲缘关系。方法 运用7对微卫星引物对24个草果居群进行分析；首先应用GenALEx计算遗传多样性参数，并进行PCoA和AMOVA分析；采用NTsys软件绘制居群聚类图；最后利用Structure软件计算出最佳的K值。结果 24个草果居群的Shannon多样性指数（H）的平均值为0.49，期望杂合度（H_e）的平均值为0.32；遗传分化系数（F_st）为0.090，基因流（N_m）为2.930。24个草果居群的遗传分化有81%存在于居群内，仅有19%存在于居群间；黄花草果23个居群的遗传一致度（I）为0.631 8～0.982 4，遗传距离（D）的范围为0.017 7～0.459 2，而白花草果居群（MG5）与其他23个黄花草果居群一致度均较小，为0.369 7～0.609 0；而居群聚类分析，在遗传距离0.49处，明显地把白花草果与黄花草果分开；Structure聚类得出K=4时，209份黄花草果资源可被分为4个类群。结论 云南黄花草果居群的遗传多样性水平平均偏高；遗传变异主要存在于居群内，而非居群间。根据基因型，黄花草果和白花草果被明显地划分成2类，遗传距离很远；而黄花草果大致被分为4个类群。]]> 2018/11/28 17:35:17 852true 目的 对黄连根腐病病株及健株根际土壤真菌种群组成、丰富度及多样性进行分析。方法 利用Illumina高通量测序技术来分析黄连根腐病病株及健株根际土壤真菌种群组成、丰度和多样性。用Spearman分析土壤理化性质和土壤真菌丰富度前35个属的相关性进行分析。结果 高通量测序共获得106 267个有效标签（effective tags），主要分为子囊菌门、接合菌门、担子菌门、球囊菌门、壶菌门和Neocallimastigomycota。健株和病株土样真菌种群多样性差异不显著。病株土样中，子囊菌门、担子菌门和壶菌门的相对丰度显著高于健株土壤；而接合菌门、球囊菌门和Neocallimastigomycota在病株土样的相对丰度则显著低于健株土样。在属水平上，病株土壤中镰刀菌属的相对丰度显著高于健株土样。Spearman分析结果表明，镰刀菌属与pH值和速效磷的含量呈显著正相关，与碱解氮的含量呈显著负相关。结论 土壤理化性质的改变与土壤真菌多样性变化相关。]]> 2018/11/28 17:35:17 851true 目的 采用HPLC特征指纹图谱结合化学计量学方法比较1～6年生川牛膝的的化学成分特征差异。方法 采用HPLC法测定1～6年生川牛膝的色谱图，建立6×54峰面积数据矩阵并进行特征峰差异分析，运用中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2004A版）对样品进行相似度分析，运用SPSS 22.0软件进行聚类分析和主成分分析。结果 特征峰差异分析得出，1年生川牛膝在4个色谱峰处和6年生川牛膝在5个色谱峰处表现出组分专属性差异，1年生样品在4个色谱峰处峰面积明显高于其他年限样品，表现出较大的组分累积量差异。相似度分析得出3、4、5年生川牛膝相似度均大于0.98，1、2、6年生川牛膝相似度均小于0.85，聚类分析的树状图和主成分分析的得分三维图均将3、4、5年生川牛膝样品聚为一类。结论 不同生长年限川牛膝间化学组分存有一定的差异，其中3、4、5年生川牛膝化学组分趋于一致，为川牛膝采收时期提供科学的参考依据。]]> 2018/11/28 17:35:17 850true 目的 建立HPLC法对4种常见虫草类样本[蛹虫草、发酵虫草菌粉（Cs-4）、中华被毛孢和冬虫夏草]中尿苷、鸟苷、腺苷、虫草素和N6-（2-羟乙基）-腺苷5种核苷类成分进行含量测定，比较成分差异，确定蛹虫草的特征成分，为控制蛹虫草及其提取物的质量提供科学依据。方法 采用岛津ODS-3 C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），流动相为乙腈-水进行梯度洗脱，体积流量为0.8 mL/min，检测波长为260 nm，柱温为30℃。结果 蛹虫草样品均含有尿苷、鸟苷、腺苷、虫草素和N6-（2-羟乙基）-腺苷，而CS-4、中华被毛孢和冬虫夏草中未检测到虫草素和N6-（2-羟乙基）-腺苷。供试品制备方法对核苷类成分的影响较大，蛹虫草粉采用6种方法制备供试品溶液，发现用水超声提取180 min获得的尿苷、鸟苷和腺苷的含量最高，且在24 h内稳定。虫草素性质稳定，而N6-（2-羟乙基）-腺苷对热和酸都不太稳定；其中4种制备方法测得的虫草素和N6-（2-羟乙基）-腺苷含量一致。结论 为蛹虫草及其提取物的质量分析提供了依据，以特征成分虫草素和N6-（2-羟乙基）-腺苷为指标可更好地对蛹虫草及其提取物的质量进行控制。]]> 2018/11/28 17:35:17 849true 目的 建立黄芩茎叶中无机元素的电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）分析方法，并对其中无机元素进行分析与评价。方法 采用微波消解样品，ICP-MS测定8个产地35批黄芩茎叶中的23种无机元素的含量，并用SPSS 19.0对不同产地样品进行主成分分析（PCA）及相关性分析。结果 不同产地黄芩茎叶中无机元素种类组成无差异，但含量差异较大，其中Fe、Zn、Cu、Mn、Cr、Co、Ni、Sr、B和Ni 10种为人体必需微量元素，Al与Fe含量最高，其次为B、Ti、Mn、Sr和Ba；重金属及有害元素的总量除样品S10超出标准，其余均低于标准；单元素Cd的含量除样品S2、S10和S22～S30超出标准，其余均低于限定标准。以23种元素含量为变量，进行PCA，绘制PCA得分图，结果表明35批黄芩茎叶样品被分成8组，相同产地的样品能够较好地聚集在一起，提示不同产地黄芩茎叶样品无机元素含量的差异可能与产地生态环境诸多生态因子密切相关。选择前4个因子（F₁～F₄）对黄芩茎叶进行综合评价，其综合评价函数为F=0.444 2 F₁+0.166 6 F₂+0.129 1 F₃+0.056 4 F₄，结果显示山西和陕西的样品得分排在前列，表明从无机元素角度考虑，以上2个产地药材品质较好。结论 本研究建立了准确高效分析评价不同产地黄芩茎叶中无机元素的方法，并为黄芩茎叶标准建立、质量控制、安全评价以及资源综合开发利用提供科学依据。]]> 2018/11/28 17:35:17 848true 目的 克隆获取冬虫夏草指标蛋白氰酸酶（IP4）的cDNA全长及对其抗原表位预测。方法 结合课题组前期采用蛋白组学法筛选得到的冬虫夏草指标性蛋白IP4和冬虫夏草转录组数据，挖掘IP4 mRNA序列，并克隆IP4 cDNA全长，通过NCBI结构分析服务系统对IP4进行保守区和功能区分析，利用DNAMAN 6.0和DNAStar软件分别进行序列比对和抗原表位分析。结果 从转录组数据中挖掘到IP4的2个可变剪接体，属于内含子保留的可变剪接。RT-PCR结果显示，IP4 cDNA全长465 bp，编码154 aa（氨基酸）。IP4蛋白的保守区和主要催化活性位点位于87～154 aa，该区域为氰酸酶家族保守核心区域和二聚体结合区域，DNAMAN 6.0分析结果表明1～39 aa和55～81 aa区具有较高种属特异性，DNAStar预测IP4蛋白的抗原表位区主要分布于25～90 aa。结论 最终确定IP4的25～39 aa和55～81 aa为最佳抗原特异区，为后续规模化制备IP4蛋白特异抗原区及免疫法鉴定冬虫夏草奠定基础。]]> 2018/10/24 16:39:24 847true 目的 获得牛樟芝聚酮合酶基因（AcPKS1）全长，对其进行生物学分析并分析该基因在不同培养基上的表达差异。方法 通过对牛樟芝基因组分析获得牛樟芝聚酮合酶基因，通过设计含有起始密码子和终止密码子的特异引物并以牛樟芝cDNA为模板克隆得到AcPKS1基因全长，并对该基因进行生物信息学分析及在不同培养基上的表达谱分析。结果 AcPKS1全长6 348 bp，含有6个内含子和7个外显子，外显子编码2 115个氨基酸；通过生物信息学分析，推测该基因为真菌I型非还原型PKS，结构域为SAT-KS-PT-ACP-ACP-TE，系统树分析显示AcPKS1与其他未知功能的聚酮合酶（PKS）聚为一支，说明AcPKS1可能是一种新的聚酮化合物环化方式；表达谱分析表明，葡萄糖为AcPKS1基因表达的必要条件，且葡萄糖含量与AcPKS基因表达量呈正相关。结论 本研究为AcPKS1功能鉴定以及牛樟芝基因资源利用奠定基础。]]> 2018/10/24 16:39:24 846true 目的 利用核糖体rRNA基因内转录间隔区（ITS2）序列，对甘肃道地药材岷县当归（岷归）及其混伪品和近缘属药材进行鉴定分析。方法 对供试材料ITS2序列进行PCR并双向测序，所得序列经Codon Code Aligner校对拼接后，利用MEGA 6.0对序列进行分析比对，计算种内、种间遗传距离，利用邻接法（NJ）构建系统聚类树，并应用ITS2数据库网站预测其ITS2二级结构。结果 经PCR扩增测序，15份甘肃栽培当归与标准样品岷归1号序列比对无差异，序列长度230 bp，GC含量为55.46%，37份当归混伪品与近缘属药材ITS2序列长度为228～233 bp，GC含量为51.53%～65.65%。岷归与混伪品、近缘属药材共53条序列中共检测到变异位点220个，保守位点10个，信息位点213个。根据K2P遗传距离计算，岷县当归种内遗传距离明显小于种间遗传距离，基于ITS2序列构建的NJ树和网站预测的ITS2二级结构，均能将岷归与其混伪品和近缘属药材区分。结论 ITS2序列可作为当归鉴定的DNA条形码，为当归市场的健康可持续发展提供有效的技术手段。]]> 2018/10/24 16:39:24 845true 目的 对我国三叶青种质资源64个样本的遗传多样性进行分析。方法 利用ISSR-PCR技术进行扩增，然后利用POPGENE 32软件及NTSYS软件分析三叶青种质资源64个样本的遗传多样性及亲缘关系，并根据UPGMA法，构建亲缘关系树状图。结果 从30条引物中筛选出10条条带清晰、重复性好的引物对64份供试材料的基因组DNA进行扩增。扩增出了83个多态位点，多态百分数为71.43%～100.00%，平均多态百分数为94.31%，引物S17扩增得到的多态位点最多，为11个；引物P6扩增得到的多态位点最少，为5个，10条引物扩增得到的多态位点平均为8.3个；遗传多样性分析显示，平均检测等位基因数（N_a）为1.943 1，平均有效等位基因数（N_e）为1.381 08，64个样本的平均Nei’s基因多样性指数（H）为0.242 98，平均Shannon多样性指数（I）为0.385 83。64个样本遗传相似系数的变异范围为0.431 8～0.988 6。根据相似系数矩阵按UPGMA法进行聚类，在遗传相似性系数为0.715 5处，64份供试材料可分为6组；另外，根据10个ISSR引物的扩增结果，筛选出引物ISSR 20、UBC857和S17扩增的DNA指纹图谱可用于64个三叶青样本种质的鉴定。结论 我国三叶青种质资源拥有丰富的遗传多样性和基因的相对稳定性，ISSR分析可揭示我国三叶青种质资源间的亲缘关系，为评价、鉴定和新品种选育提供一定的参考依据。]]> 2018/10/24 16:39:24 844true 目的 建立玄参药材中哈巴苷、类叶升麻苷、安格洛苷C、哈巴俄苷、肉桂酸5种成分的一测多评法，验证该法在玄参质量评价中的准确性和可行性。方法 以哈巴苷为内参物，分别建立肉桂酸、类叶升麻苷、安格洛苷C、哈巴俄苷的相对校正因子（f），并计算其含量，实现一测多评。与外标法所得结果进行比较，对一测多评价法的可行性进行验证。结果 建立的相对校正因子分别为f_{哈巴苷/肉桂酸}=0.060（RSD=0.81%）、f_{哈巴苷/类叶升麻苷}=0.068（RSD=0.53%）、f_{哈巴苷/安格洛苷C}=0.197（RSD=1.82%）、f_{哈巴苷/哈巴俄苷}=0.142（RSD=1.17%），差异性较小；25批玄参中肉桂酸、类叶升麻苷、安格洛苷C、哈巴俄苷含量的实测值与计算值无显著差异。结论 一测多评法控制玄参药材的质量是准确、可行的。]]> 2018/10/24 16:39:25 843true 目的 建立一测多评法同步测定茯苓中4种三萜类成分的含量，并验证该方法的准确性和可行性。方法 以茯苓酸为内参物，建立其与去氢茯苓酸、去氢土莫酸和松苓新酸的相对校正因子（f）与相对保留时间，计算3种成分的含量，实现一测多评，并将一测多评法测得的结果与外标法比较，验证一测多评的可行性。结果 17批不同产地茯苓样品中4个活性成分，采用f的计算值与外标法的实测值之间无显著性差异。结论 在对照品缺乏的情况下，以茯苓酸为内参物同时测定去氢茯苓酸、去氢土莫酸、松苓新酸的含量是可行的，一测多评法可用于茯苓中三萜类成分的定量评价研究。]]> 2018/10/24 16:39:25 842true 目的 乌头属藏药植物变异极为复杂，品种繁多，商品来源复杂，极易造成药材混乱，且大多乌头属藏药具有较大的毒性，使安全用药面临巨大挑战。采用ITS2序列为DNA条形码，建立一种快速、准确鉴定乌头属藏药药材的方法。方法 从青藏高原地区采集展花乌头、凉山乌头、工布乌头、露蕊乌头、铁棒锤、甘青乌头、木里乌头、弯喙乌头、多裂乌头、缩梗乌头等乌头属藏药样品50份，分别提取样品DNA，对ITS2目标序列进行PCR扩增、测序，获得其ITS2序列信息；运用MEGA 6.0对50条ITS2序列进行对比，计算种间、种内遗传距离，构建neighbor joining（NJ）系统进化树，并比较样本ITS2序列间的二级结构差异。结果 乌头属藏药植物样本种间最小距离大于种内最大距离，NJ树显示各种乌头属植物种内之间各单独形成一个分支，ITS2序列二级结构也有明显差异，能够将乌头属各种植物区分开。结论 ITS2序列作为DNA条形码可以将乌头属藏药植物进行准确、快速的识别和鉴定，为乌头属藏药的安全使用提供可靠的技术手段。]]> 2018/10/9 14:22:01 841true 目的 建立荧光定量PCR（qRT-PCR）检测苦豆子内生真菌诱导子促进宿主生物碱合成关键酶—赖氨酸脱羧酶（LDC）基因的表达的方法。方法 根据苦豆子LDC和Lectin基因序列设计目的基因引物QLDC-F/QLDC-R和内参基因引物Lectin-F/Lectin-R；以5倍梯度稀释的cDNA作为标准样品，建立目的基因QLDC-F/QLDC-R和内参基因Lectin-F/Lectin-R的标准曲线，优化qRT-PCR反应体系与反应条件，分析比较半定量PCR与qRT-PCR的灵敏度；在苦豆子内生真菌NDZKDF₁₃诱导子不同诱导时间下，高效液相色谱（HPLC）测定宿主氧化苦参碱（oxymatrine，OMA）的含量，qRT-PCR检测LDC基因的表达量，分析在内生真菌诱导下LDC基因与OMA合成积累的关系。结果 在qRT-PCR体系中cDNA质量浓度为200 ng/μL，退火温度为61℃时检测结果最好；构建的目的基因和内参基因标准曲线，其循环阈值与模板浓度均呈良好的线性关系，扩增效率都在99%以上，灵敏度是半定量PCR的25倍；在内生真菌NDZKDF₁₃诱导子诱导作用下，宿主LDC基因的表达量在第6天达到峰值，为对照的25.58倍；OMA含量的增加滞后于LDC基因表达量的变化，在诱导子处理第9天达到最高峰。结论 成功将qRT-PCR技术应用于苦豆子的功能基因研究。通过对各种条件的优化探索，建立了准确和简单易行的检测苦豆子的功能基因表达的平台。]]> 2018/10/9 14:22:01 840true 目的 克隆表达蚬壳花椒种子萌发过程中油脂代谢关键调控基因，研究该基因在蚬壳花椒种子外源激素赤霉素（GA）促萌发下调控蚬壳花椒种子人工萌发分子机制。方法 根据蚬壳花椒转录组测序结果，筛选克隆油脂代谢关键基因，并利用原核表达体系表达纯化目的蛋白，对其编码产物进行生物信息学分析和预测。种子萌发实验分为清水对照组与GA促萌发实验组，设定0、6、12、24、48 h为萌发取样点，相对荧光定量分析该基因表达量变化。结果 通过克隆该基因片段及序列分析，确定该基因编码异柠檬酸裂解酶（ICL），将其命名为ZdICL。该基因开放阅读框全长为1 728 bp，编码产物包含575个氨基酸。构建原核表达载体pET-28a-ZdICL，并在大肠杆菌BL21（DE3）中获得高效表达，对该基因编码产物的氨基酸序列进行聚类分析表明，其与甜橙同源性最高，而与模式生物拟南芥同源性最低。在种子萌发过程中其表达量在GA促萌发过程中第48小时前逐步降低，到第48小时表达量升高，与外源激素GA对种子萌发过程中脂肪动员代谢调控相吻合。结论 通过对ZdICL基因进行克隆表达以及表达量分析，初步认为蚬壳花椒种子自然繁育率低下的原因之一可能是自身内源激素GA含量不足，导致ICL活性不足，无法有效保护种子抵御氧化损伤，致死种现象较多，同时为探索该基因在蚬壳花椒种子萌发过程中的调控功能奠定基础。]]> 2018/10/9 14:22:01 839true 目的 从南方红豆杉Taxus chinensis获得紫杉醇生物合成途径关键酶1-脱氧-D-木糖醇-5-磷酸合成酶（1-deoxy-D-xylulose 5-phosphate synthase，DXS）基因（TcDXS）并进行生物信息学和表达模式分析以及亚细胞定位和功能鉴定。方法 采用RACE技术获得TcDXS全长；利用qRT-PCR分析TcDXS在南方红豆杉不同部位的表达情况；采用亚细胞定位分析TcDXS在细胞中的位置；用颜色功能互补实验检测TcDXS功能。结果 获得的TcDXS由3 031个核苷酸组成，包含了2 229 bp编码区，编码742个氨基酸，其蛋白相对分子质量为79 400，等电点（pI）为7.99；qRT-PCR检测表明TcDXS在南方红豆杉的嫩叶柄中表达量最高，其次是叶和皮，根和茎中的表达量较低；亚细胞定位结果表明，TcDXS定位在叶绿体中；功能互补实验结果表明，在共同转化pAC-BETA和pTrc-TcDXS的大肠杆菌菌落呈现出橘黄色。结论 TcDXS的克隆和功能分析为深入研究紫杉醇生物合成途径和实现其代谢工程奠定了基础。]]> 2018/10/9 14:22:01 838true 目的 以连续2年收集于不同产地的槐米样品为材料，建立槐米HPLC指纹图谱，并采用HPLC法同时测定5种黄酮类组分含量，结合总黄酮含量及抗氧化能力评价不同产地槐米的品质。方法 采用HPLC法和分光光度法对已收集54份槐米样品的芦丁、槲皮素、染料木素、山柰酚、异鼠李素和总黄酮组分含量及DPPH、羟自由基、超氧阴离子清除能力和脂质过氧化抑制能力等指标进行测定，运用相似度、聚类分析、主成分分析方法综合分析不同产地槐米的品质。结果 建立了HPLC指纹图谱，样品组分分离良好，方法学考察均符合要求，共有峰28个，确定了峰面积之和占共有峰总峰面积80%以上的5个组分；以总黄酮和5个黄酮类组分的含量以及4个抗氧化能力指标为依据，将54份样品进行聚类分析和主成分分析，两者结果一致，不同产地的样品没有表现出显著的地域特性。结论 HPLC结合化学计量学及抗氧化能力可准确、综合地对槐米进行品质评价，通过分析表明不同生产年度同一产地间的样品品质有差异，同一生产年度不同产地间样品品质有差异，说明槐米品质受气候的影响；还表明同一生产年度同一产地的不同样品品质也有差异，充分说明了槐米的品质也受关键生产技术环节的影响。]]> 2018/10/9 14:22:01 837true 目的 建立栀子的HPLC指纹图谱，为其真伪鉴别及质量评价提供依据。方法 采用HPLC法建立栀子及其主要混淆品（水栀子、大红栀子）的指纹图谱，并通过HPLC-ESI-MS对指纹图谱中的色谱峰进行鉴定。同时采用聚类分析及主成分分析对样品进行分类分析。结果 获得了栀子的HPLC指纹图谱，共有峰17个，鉴定出15个共有峰。聚类分析及主成分分析能将22批栀子类药材区分为栀子、水栀子、大红栀子。结论 栀子指纹图谱的构建和化学模式识别为栀子的真伪鉴别和质量控制提供科学依据。]]> 2018/10/9 14:22:02 836true 目的 对卷叶贝母Fritillaria cirrhosa中参与生物碱合成的关键酶环阿屯醇合成酶（cycloartenol synthase，CAS）基因进行克隆，并对其进行生物信息学和表达分析。方法 基于转录组测序结果，通过PCR技术克隆卷叶贝母CAS基因（FcCAS）开放阅读框（open reading frame，ORF）序列，并基于在线工具对cDNA序列进行生物信息学分析。通过荧光定量（qRT-PCR）手段检测FcCAS在野生鳞茎与愈伤组织（通过激素组合刺激获得的组织培养物）中的表达情况并测定总生物碱的含量。结果 FcCAS编码区ORF长为2 271 bp，编码756个氨基酸，并与NCBI上公布的天门冬、芭蕉、油棕等植物CAS蛋白的相似性达80%以上；qRT-PCR与总生物碱含量测定实验表明FcCAS的表达水平与总生物碱含量的变化趋势一致，都是愈伤组织高于野生鳞茎。结论 FcCAS在不同组织状态下表达量差异较大，FcCAS是一个有生物学功能的蛋白质，受激素组合诱导表达，为进一步研究CAS对卷叶贝母生物碱含量的影响和表达调控奠定基础。]]> 2018/9/27 11:29:59 835true 目的 从滇龙胆叶片中克隆单萜合成关键酶环烯醚萜氧化酶（GrIDO）基因及其启动子序列，并进行序列分析。方法 根据滇龙胆转录组GrIDO基因序列设计基因特异性引物，使用RT-PCR方法克隆GrIDO基因的开放阅读框（open reading frame，ORF）序列，基于在线软件对GrIDO基因序列进行生物信息学分析。同时，根据GrIDO基因ORF序列，设计特异性引物，采用PCR法对该基因启动子序列进行扩增，并进行序列分析。结果 GrIDO基因（GenBank登录号KP722034）ORF全长1 557 bp，编码518个氨基酸；GrIDO蛋白相对分子质量58 920，理论等电点8.40，属于细胞色素P450超家族成员，可能定位于叶绿体；无信号肽，为亲水不稳定蛋白，主要由α-螺旋（51.07%）和环（42.69%）构成；GrIDO蛋白与长春花CrIDO蛋白具有较高的相似性（85.83%），且亲缘关系较近。GrIDO基因启动子（GenBank登录号KT428570）长720 bp，具有TATA-box和CAAT-box，还具有参与脱落酸和茉莉酸甲酯应答的顺式作用元件、光应答元件和MYB结合位点。结论 GrIDO基因表达受多种因素调控。克隆了GrIDO基因ORF及其启动子，为GrIDO基因的功能验证奠定基础。]]> 2018/9/27 11:29:59 834true 目的 建立维吾尔药毛菊苣及其易混品菊苣的位点特异性PCR鉴别方法。方法 采集不同地理区域的毛菊苣及其易混品，提取样品基因组总DNA。通过对其叶绿体rbcL基因片段进行扩增、测序，进行多重序列比对后根据其变异位点设计位点特异性鉴别引物，对其反应条件进行优化，确定检出限，建立位点特异性PCR鉴别方法。结果 建立的位点特异性PCR鉴别体系优化结果为30 μL反应体系包含Taq酶0.25 U、10×buffer 2.5 μL、dNTP 2.0 μL、正、反向引物各0.5 μL、总DNA 2 μL、ddH₂O 22.25 μL。适宜的扩增条件为94℃预变性3 min；94℃变性30 s，55℃退火30 s，72℃延伸1 min，32个循坏；最后72℃延伸7 min。对20份毛菊苣与菊苣药材进行扩增，其中毛菊苣能够扩增出约230 bp目的片段条带，而菊苣样品则不能扩增出明显的目的条带。结论 建立并优化了毛菊苣及其易混品菊苣位点特异性PCR鉴别技术，能够准确而可靠的达到2种药材的有效鉴别。]]> 2018/9/27 11:29:59 833true 目的 研究健康西洋参和患根腐病西洋参的根际土壤细菌群落结构变化，为查明西洋参根腐病发生机制提供线索。方法 以未种过西洋参的土壤（C组）、4年生健康参根际土壤（N组）和4年生根腐病参根际土壤（R组）为研究对象，采用Illumina Miseq高通量测序技术分析了土壤细菌群落结构的变化。结果 9个土壤样品基因组经16 S测序共获得有效序列636 654条，用于物种分类的OTUs 8 422个，涵盖了42门、106纲、180目、158科、246属。在门的水平上，3组细菌主要类群基本一致，主要有变形菌门（Proteobacteria）、放线菌门（Actinobacteria）、酸杆菌门（Acidobacteria）和绿弯菌门（Chloroflexi）等，但不同组中各类群相对丰度存在明显差异；在属的水平上，3组细菌群落组成及相对丰度差别很大，其中红游动菌属Rhodoplanes、Kaistobacter属、鞘脂菌属Sphingobium等可能是引起西洋参根腐病发生的关键菌群，后续研究应重点关注。结论 西洋参根腐病株和健株根际土壤微生物组成具有显著性差异，对于探究西洋参根腐病发生的微生态机制和改良种植西洋参土壤微生物具有理论指导作用。]]> 2018/9/27 11:29:59 832true 目的 明晰黄芪花中资源性化学成分组成，探讨其资源潜在利用价值。方法 采用分光光度法对黄芪花中总多糖、水溶性蛋白进行分析评价；采用HPLC-PDA/ELSD法对黄芪花中单糖寡糖组成及含量进行分析；采用GC-MS法对黄芪花中挥发性成分及脂肪酸类成分和含量进行分析；采用UPLC-TQ-MS法对黄芪花中核苷类及氨基酸类组成及含量进行分析。结果 黄芪花中含有多糖类（47.02 mg/g）、水溶性蛋白质（470.66 mg/g）、果糖（45.46 mg/g）、葡萄糖（8.71 mg/g）、蔗糖（1.05 mg/g）营养物质；检测出黄芪花中32种挥发性成分，其中以含氧衍生物为其主要组成成分；6种核苷类和15种游离氨基酸类资源性化学成分，总量分别达2.77和6.52 mg/g。在黄芪花中还检出8种脂肪酸类成分，其中肉豆蔻酸、棕榈酸和油酸为其主要组成成分。结论 阐明了黄芪花中各类型营养成分的组成及含量，为黄芪花的系统利用与精细化开发提供了科学依据。]]> 2018/9/27 11:30:00 831true 目的 构建博落回Macleaya cordata果化学成分指纹图谱，建立博落回果品质评价方法。方法 根据湖南省长沙市地方标准2009年版测定博落回中原阿片碱、别隐品碱、血根碱和白屈菜红碱含量；采用高效液相色谱法构建基于不同产地的博落回果化学成分指纹图谱；利用主成分分析和聚类分析方法，分析博落回果中共有指纹峰、产地和药材品质的关联性。结果 构建不同产地博落回果化学成分指纹图谱，确定11个共有指纹峰；主成分分析和聚类分析将8个产地的博落回果分为2大类，其中共有峰5、7、8、9和11对指纹图谱差异贡献较大，6号峰是指纹图谱参照峰的最佳选择。结论 本实验建立的博落回果化学成分指纹图谱具有良好的精密度、重复性和稳定性，能够对不同产地博落回果进行品质评价。]]> 2018/9/27 11:30:00 830true 目的 克隆布渣叶查耳酮合酶基因（MpCHS）全长cDNA，并对其在不同部位和不同生长阶段叶片中的表达模式进行分析。方法 以布渣叶叶片总RNA逆转录合成cDNA为模板，根据其转录组数据设计特异引物序列，PCR扩增MpCHS基因全长cDNA，经质粒连接、转化、扩培，挑选阳性克隆测序、分析并构建原核表达载体。同时，采用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）对MpCHS基因的表达模式进行分析。结果 成功克隆得到MpCHS基因全长cDNA（GenBank：KY472608）。生物信息学分析表明其开放阅读框为1 176 bp，编码含391个氨基酸的蛋白，其相对分子质量为42 700，理论等电点6.11，具有CHS家族蛋白3个保守的功能活性位点（165 C、304 H和337 N）和特征多肽标签序列RLMMYQQGCFAGGTVLR和GVLFGFGPGL。系统进化树分析发现MpCHS与可可、陆地棉等木本植物的亲缘关系比较近。RT-qPCR结果表明，MpCHS基因在不同部位均有表达，在叶片中的表达量随着生长过程逐步降低。结论 首次克隆得到MpCHS基因，并分析了MpCHS基因在布渣叶不同部位和不同生长阶段叶片中的表达模式，为MpCHS基因的原核表达和功能验证奠定了基础，也为进一步解析布渣叶黄酮类生物合成途径提供了参考。]]> 2018/9/10 9:30:21 829true 目的 以蜜环菌和昭通乌天麻营养繁殖茎为实验材料，通过转录组测序比较分析，初步揭示蜜环菌天麻共生的分子机制。方法 采用Trizol Reagent（Invitrogen）提取营养繁殖茎样品中的RNA，建立测序文库并进行测序。结果 蜜环菌与天麻共生时有38 838条序列得到注释，在FDR（False Discovery Rate）<0.05和log2|FC|>1筛选条件下，共有23 333条基因发生显著差异表达，其中1 595条基因呈上调表达，21 738条呈下调表达。基于转录组数据分析结果，与胞外酶纤维素酶、木聚糖酶、漆酶以及多聚半乳糖醛酸酶相关的Unigene分别有21、6、39和6个，集中差异表达基因分别有9、3、23和4个，除1个纤维素酶基因上调表达外，其他均呈下调表达；与抗氧化酶超氧化物歧化酶、过氧化物酶和过氧化氢酶有关的Unigene基因分别有13、7和17个，其中差异表达的基因分别有6、7和7个，都呈下调表达。此外，qRT-PCR分析验证了这些基因呈下调表达。结论 蜜环菌侵染天麻与其共生的过程中，蜜环菌的生命活动减弱，同时未受到天麻胁迫作用。这为进一步研究天麻蜜环菌共生分子机制提供了大量有价值的基因资源。]]> 2018/9/10 9:30:21 828true 目的 探究滇重楼对高温抗性适应能力，为滇重楼在中南地区规模化引种栽培提供依据。方法 以滇重楼生长健壮苗为实验材料，在25℃/20℃（昼温/夜温）、33℃/28℃（昼温/夜温）、39℃/34℃（昼温/夜温）的不同温度条件下连续胁迫处理7 d，测定其叶片生理指标，并进行显著性与相关性分析。结果 随着温度的升高与胁迫时间的持续延长，在33℃/28℃与39℃/34℃下处理7 d后，滇重楼叶相对含水量明显下降，分别比对照（25℃/20℃）低17.38%、58.25%；相对电导率与丙二醛（MDA）含量均持续上升，其中39℃/34℃处理下上升幅度最大，电导率比对照高3.59倍，MDA含量比对照高2.55倍；39℃/34℃处理下可溶性糖含量逐渐下降，比对照低33.25%；可溶性蛋白含量均呈波浪状变化，33℃/28℃处理组波动幅度较大，7 d后上升为对照的1.32倍；处理组超氧化物歧化酶（SOD）活性均先升高后下降，39℃/34℃处理组4 d后达到峰值，比对照高2.35倍；处理组过氧化物酶（POD）活性均逐渐上升，39℃/34℃处理组4 d后上升为对照的2.33倍，之后变化幅度逐渐减缓。结论 温度对滇重楼的各项生理指标均有明显的影响，温度为25℃/20℃条件下，植物生长状态良好，为适宜生长温度，33℃/28℃温度条件下，长时间的持续胁迫处理会引起植株叶片损伤，39℃/34℃持续高温胁迫则会严重损伤植株生理活性与形态结构，严重时甚至会导致植株死亡。]]> 2018/9/10 9:30:21 827true 目的 对大头续断Dipsacus chinensis蕴藏量进行研究，为中药资源量化提供新方法。方法 以全国大头续断的主要分布区的实地调研数据为依据，分别利用MaxEnt模型和空间插值法建立大头续断物种密度栅格数据和单株生物量栅格数据，借助ArcGIS空间分析功能对大头续断资源分布进行空间量化分析和评估。结果 全国大头续断野生资源适生区面积3.34×10⁵ km²左右，资源药材蕴藏量约3.08×10⁷ kg，主要分布在横断山脉及青海高原东南部地区，其中四川省大头续断资源蕴藏量约为全国的69.48%，尤以四川省的阿坝州境内资源蕴藏量高；大头续断分布密度较高区段主要分布在四川省的阿坝州、甘孜州和凉山州境内，此区域为大头续断的核心分布区，并以此区域为中心向周围呈递减趋势；单株生物量地理分布整体特征呈现以横断山脉的垂直面为分界面，向两侧递增的趋势；生物量与温度季节性变异系数、年均温变化范围和4月份降水量呈显著正相关，与12月份均温、月均（7、8月）降水量、季节降水量变异系数呈显著负相关。结论 该研究为大头续断新资源的开发及利用提供有力的数据支撑，为中药资源可视量化评估提供了新方法。]]> 2018/9/10 9:30:21 826true 目的 建立运用超高效液相色谱-串联四极杆质谱联用技术同时测定西洋参花蕾中4种皂苷类成分（人参皂苷Re、拟人参皂苷F₁₁、人参皂苷Rb₃、人参皂苷Rd）含量的分析方法。方法 采用Waters Acquity UPLC BEH C₁₈（50 mm×2.1 mm，1.7μm）色谱柱；以乙腈和0.05%氨水为流动相进行梯度洗脱；体积流量为0.45 mL/min；柱温35℃；采用电喷雾离子源（ESI）负离子检测方式，多反应监测模式（MRM）。结果 该分析方法的精密度、稳定性、重复性和加样回收率考察结果均符合要求，各对照品在相应的浓度范围内，线性关系良好。结论 建立的方法快速，简便，准确度高，可靠性强，可用于西洋参花蕾中皂苷类成分的分析。]]> 2018/9/10 9:30:21 825true 目的 分析林下山参制浆后人参皂苷Re、Rg₁、Rb₁、Rg₃、Rh₁、Rh₂含量的变化情况。方法 采用HPLC-UV法，Innoval ODS-2色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相为乙腈-水溶液进行梯度洗脱；柱温30℃；体积流量1.0 mL/min；进样体积20 μL；检测波长203 nm。结果 林下山参中6种人参皂苷Re、Rg₁、Rb₁、Rg₃、Rh₁、Rh₂质量分数分别由制浆前的0.651、0.506、0.363、0.014、0.023、0.031 mg/g变化为制浆后的0.517、0.413、0.105、0.122、0.214、0.098 mg/g。人参皂苷Re、Rg₁、Rb₁、Rg₃、Rh₁、Rh₂分别在2.5～100 mg/L具有良好的线性关系，r²均大于0.999 5；精密度、稳定性及重复性良好；平均加样回收率为95%～105%，RSD为1.25%～3.05%。结论 林下山参中6种人参皂苷Re、Rg₁、Rb₁、Rg₃、Rh₁、Rh₂的含量在制浆前、后发生变化。林下山参制浆后人参皂苷Re、Rg₁、Rb₁的含量降低，稀有人参皂苷Rg₃、Rh₁、Rh₂的含量分别增高8.7、9.3、3.2倍。基于HPLC最佳分离参数建立的6种人参皂苷成分同时分析的方法具有较好的准确性和可靠性，可为林下山参浆的质量评价提供科学依据。]]> 2018/9/10 9:30:21 824true 目的 分析比较盾叶薯蓣根茎与叶片的转录组，挖掘与盾叶薯蓣中皂苷元生物合成途径相关的关键酶基因。方法 利用Illumina HiSeq2000高通量测序技术对盾叶薯蓣根茎与叶片进行转录组测序，对测序结果进行注释分析；并结合根茎与叶片中皂苷元的含量测定结果，挖掘与盾叶薯蓣中皂苷元生物合成途径相关的关键酶基因；最后利用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）技术对部分候选基因的表达模式进行分析。结果 共获得了81 660个Unigene，有64.33%在NT、NR、Swiss-Prot、KOG、GO、KEGG数据库中得到注释；根据其表达量与代谢通路分析筛选出29种共227个可能参与盾叶薯蓣中皂苷元生物合成途径的催化酶基因，部分催化酶基因的表达模式与皂苷元含量具有一定相关性；并发现5个盾叶薯蓣内生菌基因。结论 研究初步获得了盾叶薯蓣中参与皂苷元生物合成的候选关键酶基因，部分候选酶基因可能参与盾叶薯蓣中皂苷类成分的后修饰过程，并发现盾叶薯蓣根茎中内生菌可能参与其皂苷元的生物合成，为进一步阐明盾叶薯蓣中皂苷元生物合成的分子机制奠定基础。]]> 2018/8/22 16:22:54 823true 目的 分析云贵地区金铁锁Psammosilene tunicoides遗传多样性和变异情况。方法 采用转录组测序技术开发金铁锁的EST-SSR引物，并利用筛选出的分子标记对金铁锁进行多态性分析。结果 共获得了17 530条含SSR位点的EST序列；筛选出了14对具有较高多态性的EST-SSR引物，对云贵地区的17份金铁锁进行多样性分析，发现其在位点水平上多态性信息含量（PIC）范围为0.350 0~0.795 0，具有较高的多态性；在群体水平上明显偏低，多态位点百分率（PPB）为64.29%~100%，Nei's基因多样性指数的范围为0.188 2~0.477 7，平均0.323 2；云贵地区金铁锁群体内基因流（N_m）较小（N_m均值为0.302 0），群体间存在较大的遗传分化（Fst均值为0.452 9）。结论 转录组测序丰富了金铁锁EST数据库；云贵地区金铁锁的遗传多样性可能与其繁殖方式、分布区较长的进化历史有关，群体间遗传分化大可能是地理阻隔截断了不同群体间的基因交流。]]> 2018/8/22 16:22:54 822true 目的 通过分析5种鬼臼类中药材八角莲、南方山荷叶、桃儿七、小八角莲和六角莲的ITS2（internal transcribed spacer 2）条形码序列，探讨鬼臼类药材鉴定新方法。方法 共收集26份样品，以ITS2作为条形码序列，对各鬼臼类中药材提取基因组DNA，PCR扩增ITS2序列并进行双向测序。所得序列经CodonCode Aligner拼接并剪切后，采用MEGA5.1软件进行序列对比分析，计算遗传距离，分析比较种内、种间序列差异，并构建系统邻接树。结果 5种药材种间存在明显差异，各个种的种内最大遗传距离均小于种间最小遗传距离；构建的系统树各个种不同样本均分别聚在一起，表现出单系性。结论 ITS2序列作为DNA条形码可较好地用于鬼臼类中药材DNA条形码的鉴定研究。]]> 2018/8/22 16:22:54 821true 目的 分析光、暗培养的杜仲愈伤组织转录组测序结果，验证杜仲愈伤组织转录组测序结果中与类黄酮合成相关基因的表达水平。方法 利用Illumina HiSeq^TM 2500测序平台对光暗培养的2种杜仲愈伤组织进行转录组高通量测序，利用Trinity软件对测序结果进行De novo组装，使用BLAST软件将Unigenes序列与NR、Swiss-Prot、GO、COG、KOG、KEGG、Pfam等数据库比对，利用FPKM值估算基因表达丰度，利用qRT-PCR验证与类黄酮合成相关基因的表达水平。结果 杜仲愈伤组织转录组测序共获得13.00 Gbp的clean data。De novo组装后共获得62 030条Unigenes，平均长度为736.40 bp。使用BLAST软件将Unigenes序列与相关数据库比对，共获得25 417条Unigenes的注释结果。其中，25 167条Unigenes注释到Nr。4 794条Unigenes和它们相关的酶（enzyme commission numbers）注释到82条KEGG通路。共获得差异表达基因1 986条。在白光（光强为12 000 lx，16 h光照，8 h黑暗）培养的愈伤组织中，有1 139条基因表达上调，847条基因表达下调。在KEGG富集分析中发现，有7个Unigenes与类黄酮合成相关，其中有6个Unigenes在白光培养的杜仲愈伤组织中上调表达，它们编码的酶分别为查耳酮异构酶（EC 5.5.1.6，chalcone isomerase，CHI），查耳酮合成酶（EC 2.3.1.74，chalcome synthase，CHS），类黄酮3'-羟化酶（EC 1.14.13.21，flavonoid 3'-monooxygenase，F3'H），反肉桂酸4-单加氧酶（EC 1.14.13.11，trans-cinnamate 4-monooxygenase，CYP），黄酮醇合成酶（EC 1.14.11.23，flavonol synthase，FLS），莽草酸邻羟基肉桂转移酶（EC 2.3.1.133，shikimate-O-hydroxycinnamoyl transferase，HQT）。1个Unigene下调表达，它编码的酶为无色花青素加氧酶（EC 1.14.11.19，leucocyanidin oxygenase，LDOX）。qRT-PCR分析表明，与类黄酮合成相关的7个Unigenes的表达情况与转录组测序分析结果是一致的。结论 白光条件（光强为12 000 lx，16 h光照，8 h黑暗）可以促进类黄酮代谢途径中相关化合物的积累。]]> 2018/8/22 16:22:54 820true 目的 建立基于核磁共振技术¹H-NMR指纹图谱-化学模式识别的四裂红景天和大花红景天的品种分类和鉴别方法。方法 采用高分辨（600 MHz）的核磁共振（NMR）指纹图谱技术，测定四裂红景天和大花红景天的全成分信息¹H-NMR指纹图谱，结合相似性分析、层次聚类分析、主成分分析（PCA）和偏最小二乘法-判别分析（PLS-DA）进行化学模式识别分析。结果 ¹H-NMR指纹图谱-化学模式识别方法是一种有效的区分、鉴别四裂红景天和大花红景天的方法。四裂红景天和大花红景天的¹H-NMR指纹图谱差异性较明显，能够真实、全面地反映红景天中的特征性成分和内在品质，四裂红景天和大花红景天主要差异成分为萜类、黄酮类，尤其萜类成分大花红天素是鉴别四裂红景天和大花红景天的特征性成分，可作为四裂红景天和大花红景天的分类和鉴别指标。结论 ¹H-NMR指纹图谱-化学模式识别方法是一种有效的红景天品种分类和鉴别方法，为红景天属药用植物的品种鉴别和品质评价奠定基础。]]> 2018/8/22 16:22:55 819true 目的 研究川明参生产中氮（N）、磷（P）、钾（K）最佳施肥组合及施肥量，为川明参大田栽培合理施肥提供技术支撑和理论依据。方法 采用L₉（3⁴）正交试验设计，研究N、P、K配施对川明参产量和主要有效成分的影响。结果 合理的N、P、K配施可显著提高川明参的产量，并有利于总多糖及欧前胡素的积累。其中，以N₂P₁K₂的产量最高，其产量为75.22 kg/hm²，增产率达60.67%，总多糖质量分数为25.46%，欧前胡素质量分数为0.489 mg/g；N₃P₂K₂的产量最低，其产量为44.82 kg/hm²，总多糖质量分数为2.40%，欧前胡素质量分数为0.379 mg/g。N、P、K 3种肥料配施对川明参产量影响的大小顺序为N>P>K，N肥增产效应最明显，P肥次之，K肥最差。结论 最佳施肥组合为N₂P₁K₂或N₂P₃K₁，最佳施肥量为N、P₂O₅、K₂O施用量分别为1.08、0.73、0.83 kg/hm²或1.08、1.10、0.50 kg/hm²。]]> 2018/8/22 16:22:55 818true 目的 筛选适宜狭叶柴胡Bupleurum scorzonerifolium组织表达分析的内参基因，分析柴胡皂苷合成关键酶基因的组织表达模式。方法 选取Actin、α-tubulin、β-tubulin、Cyclophilin、EF-1α 5个常用的内参基因作为候选，分别使用Delta CT、BestKeeper、NormFinder、geNorm软件对各候选内参基因的稳定性进行评价，并对候选内参基因的稳定性进行验证，利用实时荧光定量PCR技术，以筛选得到的内参基因分析狭叶柴胡根、茎、叶、果中柴胡皂苷合成关键酶基因HMGR、IPPI、FPS、SS、β-AS基因的组织表达模式。结果 候选内参基因平均表达稳定性由高到低排序为β-tubulin > Cyclophilin > Actin > EF-1α > α-tubulin，β-tubulin是狭叶柴胡基因组织表达分析的适宜内参基因。HMGR基因表达量由高到低为根 > 茎/果 > 叶，IPPI基因表达量由高到低为根 > 茎 > 果 > 叶，FPS基因表达量由高到低为叶 > 根 > 茎 > 果，SS基因表达量由高到低为叶 > 果 > 根 > 茎，β-AS基因表达量高低为叶 > 根 > 果 > 茎，其中HMGR与IPPI及FPS与β-AS基因的表达显著呈正相关（P < 0.05）。结论 筛选得到了狭叶柴胡不同组织基因表达分析的最适内参基因为β-tubulin，为狭叶柴胡基因组织表达分析奠定方法学基础。柴胡皂苷合成关键酶基因有不同的组织表达模式，可能参与调控狭叶柴胡不同组织中柴胡皂苷合成与积累的流向。]]> 2018/8/6 15:56:26 817true 目的 克隆珍稀濒危兰科药用植物铁皮石斛中性/碱性转化酶（alkaline/neutral invertase，NI）家族基因成员，并对其进行定量表达以及生物信息学分析。方法 采用转录组测序和RACE技术相结合克隆NI基因的cDNA序列，利用生物信息学工具对其进行分析，并采用实时荧光定量PCR方法检测NI基因在铁皮石斛根、茎和叶中的表达情况。结果 克隆获得1个新的铁皮石斛NI基因，命名为DoNI2（GenBank登录号KY794404），全长2 397 bp，开放阅读框（ORF）为1 836 bp，编码611个氨基酸。DoNI2蛋白预测的理论相对分子质量和等电点分别为69 050和6.38，不稳定系数为42.95，疏水性系数为−0.232。DoNI2基因在铁皮石斛根、茎和叶中均有表达，其中在茎中表达量最高，根中最低。不同生长年限茎中DoNI2基因表达量与NI酶活性呈显著正相关。结论 克隆了线粒体型的DoNI2基因的全长cDNA序列，为进一步阐明该基因在铁皮石斛蔗糖代谢途径中的重要作用奠定基础。]]> 2018/8/6 15:56:26 816true 目的 为研究GGPPS基因在三七中的功能，从三七中克隆GGPPS基因CDS序列，并进行原核表达。方法 以3年生三七叶组织为材料，依据Genbank中已报道的GGPPS基因序列设计引物，利用RT-PCR技术，克隆得到编码区序列；克隆片段连接到pET-30α（+）表达载体，转入大肠杆菌BL21后，在异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）诱导下进行表达。结果 三七GGPPS基因CDS序列全长1 032 bp，编码343个氨基酸。SDS-PAGE结果表明，所构建的原核表达载体表达的融合蛋白大小在29 000～44 000，且表达产物主要以不溶性包涵体形式存在。结论 成功克隆了三七GGPPS基因CDS序列，建立了稳定的原核表达体系，为进一步研究其在三七中的生物学功能奠定了基础。]]> 2018/8/6 15:56:26 815true 目的 对竹节参及其近缘物种和混伪品进行分子鉴定，为竹节参现代化鉴定提供科学依据和保证临床疗效与用药准确性。方法 对竹节参样品进行ITS2基因片段扩增和正向测序，并从GenBank数据库下载竹节参、近缘物种和混伪品的ITS2序列，通过ITS2 database剪切最终共获得24个物种102条序列，使用DAMBE软件进行序列替代饱和度检测，利用MEGA 6.06软件进行比对、分析变异位点、计算GC含量、种内和种间遗传距离、构建NJ系统发育树，并预测ITS2二级结构。结果 竹节参ITS2序列长度均为230 bp，平均GC含量63.7%，ITS2序列平均遗传距离分析、NJ树、二级结构特征均显示竹节参与非同属混伪品和部分近缘物种（屏边三七、假人参、三叶参、野三七和越南人参）存在极大差异，能有效区分，而鉴定近缘物种西洋参、人参、三七、珠子参、羽叶三七、Panax assamicus、Panax variabilis和狭叶竹节参序列分辨率较低，具有一定局限性。结论 ITS2序列可作为鉴定竹节参与其非同属混伪品DNA条形码之一，对非同属混伪品鉴定分辨率极高，而对于鉴定其近缘物种的通用性仍有待考证，这为后续竹节参及其近缘物种种间遗传关系和亲缘关系鉴定、非同属混伪品鉴别区分和临床安全用药提供重要参考。]]> 2018/8/6 15:56:27 814true 目的 建立土茯苓Smilax glabra中新落新妇苷、落新妇苷、新异落新妇苷、异落新妇苷和黄杞苷的一测多评测定方法（QAMS）并研究不同生长年限土茯苓中各成分含量的动态变化规律。方法 采用高效液相色谱法，以土茯苓中的落新妇苷为内参物，计算该成分与新落新妇苷、新异落新妇苷、异落新妇苷和黄杞苷的相对校正因子，用获得的相对校正因子计算各指标成分的含量并与外标法的测定结果进行对比，考察方法的准确性和可行性。采用建立的QAMS法测定不同生长年限土茯苓中各指标成分的含量，研究其动态变化规律。结果 共测定不同生长年限样品5批23份，各指标成分一测多评法与外标法计算结果偏差均小于1.0%。各指标成分含量与生长年限具有一定相关性，落新妇苷的含量与生长年限呈负相关，新落新妇苷、新异落新妇苷和异落新妇苷的含量与生长年限呈正相关，两者的变化趋势相反。结论 建立的QAMS法准确、可靠，可用于土茯苓中5个成分的定量分析。生长年限对土茯苓中4种落新妇苷类成分含量均具一定影响。]]> 2018/8/6 15:56:27 813true 目的 研究施用磷酸二铵对延胡索产量品质的影响。方法 设计不同梯度的磷酸二铵用量，在相同种植条件下，观察并记录不同施肥量下延胡索的主要生长指标。采收后按照《中国药典》2015年版要求，测定总灰分、醇溶性浸出物和延胡索乙素含量，并进行分析比较。结果 磷酸二铵用量为375 kg/hm²时延胡索长势最旺，折干率最高，为33.7%，块茎最大，直径为2.57 cm/个，鲜产量最高，为5 482.2 kg/hm²，比对照增产38.2%，总灰分最低，为3.0%，醇溶性浸出物和延胡索乙素含量最高，分别为24.8%、0.128%。结论 施用磷酸二铵能提高延胡索的产量和质量。]]> 2018/8/6 15:56:27 812true 目的 通过比对11种虾脊兰属药用植物的rDNA ITS序列，为该属植物的分子鉴定奠定基础。方法 以叶片基因组DNA为材料，利用PCR法克隆虾脊兰属植物的ITS序列，利用Clustal、GenDoc和Mega等软件进行生物信息学分析。结果 11种虾脊兰属植物的ITS全长为652～661 bp，其中ITS1为228～230 bp，ITS2为256～264 bp，5.8 S的长度则完全一致，均为167 bp；ITS1和ITS2分别有44与46个变异位点，其中信息位点数为22和24个，而5.8 S中没有检测到变异位点和信息位点；系统发育分析结果表明，11种虾脊兰属植物之间的遗传距离为0.002～0.081，在发育树上可分为3组，I～Ⅲ组的物种数量分别为5、4和2。结论 11种虾脊兰属植物的ITS序列具有丰富的信息位点，可用于这些药用植物的分子鉴定。]]> 2018/7/23 14:02:49 811true 目的 利用SCoT标记对47份栀子种质资源的亲缘关系及遗传多样性进行了研究。方法 采用NTSYS version 2.1软件计算遗传相似性系数，利用UPGMA法构建聚类树状图。结果 从36条引物中筛选出20条多态性丰富的引物对供试材料进行PCR扩增，共获得154条谱带，其中多态性条带120条，多态性条带所占的比率（PPL）达78.14%，Nei-Li相似系数（GS）在0.655 8～0.980 5，平均值为0.784 1；聚类结果显示栀子遗传多样性丰富且亲缘关系复杂。结论 研究表明SCoT标记技术可以很好地应用于栀子种质资源的遗传多样性分析，研究结果可为栀子育种、分类、保存和利用提供可靠的理论依据。]]> 2018/7/23 14:02:49 810true 目的 研究水分对垂盆草生长发育、有效成分积累及体外抗氧化能力的影响，探索高产优质垂盆草的水分条件。方法 设置5个水分处理，分别为田间持水量的15%～20%（S1）、35%～40%（S2）、55%～60%（S3）、75%～80%（S4）、95%～100%（S5），收获时测定生长指标、产量、多种活性成分含量及多种体外抗氧化能力。结果 S4处理显著提高垂盆草最大分枝长、叶片层数、分枝数，而S1处理导致植株生长受抑。总黄酮含量以S4处理最高，S3处理次之，S5处理最低。总酚含量以S3处理最高，但与S4处理无显著差异。各处理槲皮素、山柰素、异鼠李素及三者总含量的差异达到显著水平，均以S1处理最高，S4、S3处理次之，S5处理最低。S4处理获得最高活性成分产量，S5处理次之，S1处理最低。垂盆草水提物清除DPPH自由基、抑制脂质过氧化能力（TBARS法）及还原能力均以S4处理最强。抑制脂质过氧化能力与槲皮素含量、异鼠李素含量、3种黄酮类成分总含量均呈显著正相关。结论 综合比较垂盆草药材产量、活性成分含量和抗氧化能力，75%～80%田间持水量的土壤水分利于垂盆草高产优质兼得。]]> 2018/7/23 14:02:49 809true 目的 综合评价不同产地川明参资源的产量和品质，为川明参育种和高产栽培提供理论依据和参考。方法 对25份来源于不同产地的川明参栽培居群8个主要农艺性状及2个品质性状进行主成分分析，进一步进行综合评价及聚类分析。结果 供试材料的茎叶鲜质量、茎叶干质量、根鲜质量、根干质量、多糖量的变异系数较大，株高、主根长及主根粗的变异系数相对较小。主成分分析表明，10个主要性状可用4个主成分来表述，其累积贡献率达87.304%，分别归纳为高产因子、品质因子、株型因子和株高因子。样品1的综合得分最高，为矮杆高产优质型材料；样品13的综合得分最低，为高杆低产优质型材料。聚类分析可将供试样品分为5类，分别为长根高产优质型、根重劣质型、低产劣质型、高杆低产优质型及矮杆高产优质型材料。结论 通过主成分分析及聚类分析对川明参进行综合评价的方法可靠；四川川明参资源丰富，可从中选择优质资源，为川明参新品种选育提供基础。]]> 2018/7/23 14:02:49 808true 目的 建立基于QuEChERS-GC-QQQ-MS/MS的知母中58种农药残留同时定量分析方法。方法 采用岛津TQ8050三重四极杆气质联用仪，Shimadzu SH-Rxi-5Sil MS毛细管柱（30 m×0.25 mm，0.25 μm）为色谱柱；进样口温度为250℃，进样量为1.0 μL，不分流进样，高压进样压力为250 kPa；载气为高纯氦气，载气控制方式为恒线速度模式；色谱柱体积流量为1.69 mL/min，线速度为47.2 cm/s，吹扫流量为5 mL/min；程序升温：初始温度为50℃，保持1 min，先以25℃/min升温至125℃，再以10℃/min升温至300℃，保持15 min；柱平衡时间为0.5 min。采用QuEChERS法提取、净化供试品溶液；配制基质匹配标准曲线；使用稳定的同位素内标进行校正等3个措施共同消除基质效应。结果 成功建立并验证了一种基于QuEChERS-GC-QQQ-MS/MS的知母中58种农药残留同时定量分析方法。通过对不同产地、野生与栽培品种、不同规格的知母药材进行58种农药残留量的定量测定，结果显示30个批次内共有6个批次知母药材检测到了微量的p，p'-滴滴伊（p，p'-DDE），3个批次检测到了氟乐灵，2个批次检测到了毒死蜱，1个批次检测到了微量的仲丁灵。结论 建立的基于QuEChERS-GC-QQQ-MS/MS的知母中58种农药残留同时定量分析方法具有较好的适用性，对其他中药材农药多残留检测方法的建立具有参考价值。]]> 2018/7/23 14:02:49 807true 目的 建立同时测定枳壳中伞形花内酯、芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、川陈皮素、3，5，6，7，8，（3，4）-七甲氧基黄酮、橘红素、橙皮油素的HPLC方法，测定和比较不同周长大小枳壳中的9种化学成分的量。方法 采用Diamonsil C₁₈（250 mm×4.6 mm，5 μm），流动相为甲醇（A）-水（用磷酸调pH至3.0）；梯度洗脱为0～25 min，30%～50% A；25～35 min，50%～70% A；35～40 min，70%～75% A；40～55 min，75%～100% A。体积流量为1.0 mL/min；柱温30℃；检测波长320 nm；进样量20 μL。结果 伞形花内酯、芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、川陈皮素、3，5，6，7，8，（3，4）-七甲氧基黄酮、橘红素和橙皮油素分别在0.002 18～0.07μg（r=0.999 8）、0.021 8～0.70μg（r=0.999 9）、0.242 5～7.76μg（r=0.999 8）、0.024 38～0.78μg（r=0.999 4）、0.523 76～16.76μg（r=0.999 3）、0.004 13～0.132μg（r=0.999 6）、0.003 13～0.10μg（r=0.999 3）、0.002 75～0.088μg（r=0.999 6）和0.000 93～0.03μg（r=0.999 3）呈良好的线性关系；其平均回收率（n=6）分别为98.50%、98.80%、99.51%、98.43%、99.64%、99.21%、100.03%、98.75%和101.11%。结论 该法简便，重复性好，可用于枳壳中伞形花内酯、3，5，6，7，8，（3，4）-七甲氧基黄酮等成分的含量测定。]]> 2018/7/23 14:02:49 806true 目的 比较不同生长时期款冬叶中苯丙素类成分生物合成相关基因的表达，推测苯丙素类成分的最佳合成积累时期，为款冬叶资源的合理利用提供科学依据。方法 利用Illumina HiSeq2500测序技术对不同时期的款冬叶进行转录组测序，获得转录组数据后进行基因功能注释等生物信息学分析，对苯丙素类生物合成相关基因在不同时期的表达进行比较。结果 通过转录组测序技术获得46 793个Unigenes，平均长度为952.144 8 bp，其中有4 774个可以被NR、Swiss-Prot、eggNOG、GO、KEGG等公共数据库共同注释。对注释得到的Unigenes进行KEGG代谢通路分析，结果显示款冬叶转录组中有144条Unigenes参与萜类、黄酮类和苯丙素类生物合成，其中萜类65条，苯丙素类64条，黄酮类15条。进一步对参与苯丙素类生物合成相关基因进行动态比较，发现其关键酶PAL、4CL、HCT、CCoAOMT等在9月的表达量最高，即苯丙素类成分在9月的生物合成量可能最高。结论 为苯丙素类成分的生物合成途径及调控分析奠定了基础，也为款冬叶资源的开发利用奠定了科学依据。]]> 2018/7/4 13:50:15 805true 目的 基于ITS2条形码序列对畲药搁公扭根及其同属易混种进行分子鉴定，以保证药材使用的正确性和临床疗效。方法 分别于浙江、广西、江西和安徽等地采集搁公扭根基原植物掌叶覆盆子及其9种同属易混种高粱泡、山莓、蓬蘽、茅莓、插田泡、寒莓、东南悬钩子、三花悬钩子和武夷悬钩子样品共140份。对采集样品进行基因组DNA提取、ITS2基因片段PCR扩增并双向测序、拼接获得相应序列，基于HMMer方法注释获取ITS2序列，同时下载GenBank相应物种ITS2序列37条，使用Gene Tool软件分析ITS2序列长度、GC量、变异位点等情况，利用Clustal X和MEGA7.0软件计算种内、种间遗传距离，构建邻接（NJ）系统发育树。结果 搁公扭根及其9种同属易混种ITS2序列长度为211～213 bp，GC量为52.1%～58.0%；搁公扭根基原植物与其他物种共有14个变异位点，一处插入/缺失；搁公扭根种内平均K2P遗传距离为0.007 2，显著小于其他9个易混种，其中与山莓和武夷悬钩子进化距离最近，与蓬蘽最远；NJ进化树中搁公扭根各单倍型序列单独聚为一支，可与其他物种成功区分。结论ITS2序列能够成功鉴别搁公扭根基原植物及其9种同属易混种，为畲药DNA条形码分子鉴别提供了有力佐证，助力畲药流通信息监管。]]> 2018/7/4 13:50:15 804true 目的 开发EST-SSR标记，分析其在党参属及近缘属种间的通用性。方法 利用MISA软件对轮叶党参在NCBI公布的EST序列进行SSR位点查找，Primer 3.0软件设计引物，经PCR扩增和琼脂糖凝胶电泳对引物进行初步筛选，聚丙烯酰胺凝胶电泳对所筛选的引物进行多态性检测。结果 共查找到204个EST-SSR位点，总长5 263 bp，平均长度25.80 bp，出现频率为22.97%，其中单核苷酸、二核苷酸和六核苷酸重复占比最多，分别为36.8%、24.8%和15.3%。单核苷酸、二核苷酸、六核苷酸中的主要重复基元类型是A、TG和CAGCTC/GTGGCA。共设计引物112对，以党参为模板，能够扩增出清晰稳定条带的引物有67对，有效引物比率59.82%，其中27对能扩增出多态性条带，多态引物比率24.11%。随机选取5对引物对党参属及桔梗共12份材料进行PCR扩增，聚类结果将党参属和桔梗属分为2大类。结论 研究筛选出的EST-SSR标记能够在党参属及近缘属内进行区分鉴别，研究结果为党参种质鉴别、遗传多样性分析及资源的评价利用等提供了重要技术手段。]]> 2018/7/4 13:50:15 803true 目的 以药用植物细叶石仙桃为材料，利用SRAP分子标记技术进行遗传多样性研究，为进一步开展该物种的保护奠定基础。方法 从81对SRAP引物组合中，共筛选出7对用于SRAP-PCR，对浙江省境内5个自然居群的68份细叶石仙桃进行了遗传多样性分析。结果 共获得197个电泳谱带，其中多态性条带为190条，每对引物平均提供27.29个标记信息，平均有效等位基因数目（N_e）为1.238 1。在物种水平上，多态位点百分率（PPB）为96.45%，Nei's基因多样性指数（H）为0.188 2，Shannon's信息指数（I）为0.312 5；在居群水平上，PPB为30.46%～46.19%，平均为40%，H为0.089 1～0.155 9，平均0.120 8，I为0.138 7～0.234 9，平均0.186 4；5个居群的基因分化系数（G_st）为35.81%，基因流（N_m）为0.896 3。UPGMA聚类结果表明，68份样品可分成5组，同一居群的细叶石仙桃聚于同一分支。结论 细叶石仙桃具有较高的遗传多样性水平，居群间也存在一定的遗传分化和基因交流，但大部分遗传变异存在于居群内。]]> 2018/7/4 13:50:15 802true 目的 对贵州不同产地粗毛淫羊藿样品的遗传多样性和亲缘关系进行分析。方法 利用PopGene 32软件及NTsys2.10e软件分析贵州5个不同产地粗毛淫羊藿的遗传多样性及亲缘关系，并根据UPGMA法，构建亲缘关系树状图。结果 从100个随机引物中筛选出13条多态性稳定、条带清晰的引物，结果表明，共扩增出211个位点，从物种水平上看，共有205个多态性位点，多态性百分率（PPB）为97.16%，Shannon's信息指数（I）为0.455 7，Nei's基因多样性指数（H_e）为0.297 3，有效等位基因数（N_e）为1.490 2，5个居群间总的遗传多样性（H_t）为0.297 3，而居群内的遗传多样性（H_s）为0.207 5，表明粗毛淫羊藿的遗传变异主要存在于群体内，种群内的遗传分化大于种群间。利用UPGMA法构建的居群遗传距离聚类树，表明，5个居群被分为2支，其中来自安顺、花溪、高坡的3个居群聚在一支，来自龙里和雷山的2个居群共同聚为一支。结论ISSR分子标记技术可以用于贵州不同产地的粗毛淫羊藿植物的遗传多样性和亲缘关系分析。]]> 2018/7/4 13:50:15 801true 目的 建立防风Saposhnikovia divaricate再生体系。方法 研究不同外植体、温度、培养基、光照条件对诱导防风愈伤组织的影响，采用响应面试验设计，优化愈伤组织诱导及增殖的激素配比。结果 以防风的叶片为外植体，诱导愈伤组织最适培养基为MS＋6-BA 0.90 mg/L＋2，4-D 1.05 mg/L＋KT 0.96 mg/L，25℃恒温12 h/d光照培养；最适增殖培养基为MS＋6-BA 0.56 mg/L＋2，4-D 0.48 mg/L＋KT 0.40 mg/L，继代周期为35 d；诱导丛生芽最适培养基为MS＋NAA 0.6 mg/L＋6-BA 1.0 mg/L；最适生根培养基为MS＋NAA 0.4 mg/L＋6-BA 0.1 mg/L。结论 成功诱导防风愈伤组织并建立稳定高效的植株再生体系。]]> 2018/7/4 13:50:16 800true 目的 构建桑黄三萜生物合成途径中的关键酶——鲨烯环氧酶（squalene epoxidase，SE）基因的原核表达和过表达载体。方法 将克隆到的桑黄SE基因构建到原核表达载体pET-32a （+）上，转化大肠杆菌BL21（DE3），使用异丙基硫代-β-D-呋喃半乳糖苷（IPTG）诱导表达2~10 h后，通过SDS-PAGE进行检测。根据GenBank中提交的香菇3-磷酸甘油醛脱氢酶基因（gpd）启动子序列设计引物，利用PCR技术克隆获得香菇gpd启动子片段，以植物双元表达载体pCAMBIA1301为基础载体，通过酶切、连接等方法将其中的35 S启动子替换为香菇gpd启动子，再将SE基因编码区序列构建到gpd启动子下游，构建桑黄SE基因的过表达载体。结果 成功构建了SE基因的原核表达载体pET-32a-SE，SDS-PAGE结果显示该蛋白的大小约为55 000，与预测的蛋白相对分子质量基本一致。PCR检测、酶切鉴定和测序分析可知，成功构建了适宜食用菌遗传转化的中间载体pCAMBIA1301-gpd-gpd及SE基因的过表达载体pCAMBIA1301-gpd-gpd-SE。结论 为后期研究SE基因在桑黄三萜生物合成方面所发挥的功能奠定基础。]]> 2018/6/11 9:03:14 799true 目的 分析黄芪内生细菌群落多样性，为筛选菌种发酵转化黄芪中活性成分的定向炮制工艺研究提供参考依据。方法 应用Illumina MiSeq高通量测序技术测定黄芪内生细菌的16 S rDNA V3-V4区域序列并进行物种丰度等生物信息分析。结果 获得有效序列40 051条，操作分类单元（OTUs）967个，测序数量接近于饱和，测序数据量合理。黄芪内生细菌主要分布于Anderseniella属、芽孢杆菌属Bacillus、伯克氏菌属Burkholderia、不动杆菌属Acinetobacter、寡养单胞菌属Stenotrophomonas、海洋芽胞杆菌属Oceanobacillus 6个属。结论 黄芪内生细菌群落多样性较低，Anderseniella属和芽孢杆菌属Bacillus是黄芪内生细菌的优势种群。]]> 2018/6/11 9:03:14 798true 目的 对西南不同产区3种天麻变型的主要化学成分含量进行比较和主成分分析，为进一步开发利用天麻资源和评价药材质量提供理论依据。方法 采用苯酚-浓硫酸法测定天麻多糖含量，茚三酮显色法测定游离氨基酸含量，Folin-Ciocaileu比色法测定总多酚含量，HPLC法测定天麻中天麻素、对羟基苯甲醇含量，并利用主成分分析法对天麻药材质量进行评价。结果 不同产区天麻资源材料的主要化学成分含量差异较大。变异系数以天麻多糖含量最小，为18.025%，对羟基苯甲醇含量的变异系数最高，达48.978%。其中，四川北川的乌天麻游离氨基酸、总多酚和天麻素含量均最高，分别为2.873%、0.805%和0.862%，与其他产区样品间差异均达极显著水平；贵州大方的绿天麻多糖含量最高，为29.225%，显著高于北川的乌天麻，并极显著高于其余天麻；对羟基苯甲醇含量最高的为云南昭通的乌天麻，其次为四川广元的红天麻，两者间差异不显著。结论 天麻中各成分在地区或变型间差异不显著，从主要化学成分角度分析，四川北川的乌天麻药材质量最好。]]> 2018/6/11 9:03:14 797true 目的 采用近红外光谱（NIRS）技术结合偏最小二乘法（PLS）建立丹参中多种成分的快速无损检测方法，以更好地控制丹参药材和饮片的质量。方法 共收集来自不同产地的丹参样品106批。采用前期研究所建立的UPLC方法测定所有丹参样品中丹参素、原儿茶醛、咖啡酸、迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸B、丹酚酸A、二氢丹参酮、隐丹参酮、丹参酮I和丹参酮Ⅱ_A共11种化学成分的含量；以积分球漫反射模式采集丹参样品的NIRS图；通过PLS等化学计量学手段，分别对校正集和验证集的选择、不同预处理方法、不同光谱区段以及因子数的确定进行优化，尝试建立近红外光谱与待测成分含量间的线性关系模型，从而实现用NIRS对待测成分含量的快速计量。结果 丹参中丹酚酸B、二氢丹参酮、丹参酮I、隐丹参酮和丹参酮Ⅱ_A 5种成分的NIRS预测值与UPLC实测值之间具有良好的线性关系，模型预测效果良好，其相关系数分别为0.981 1、0.936 3、0.960 5、0.910 9、0.978 0；预测均方差（RMSEP）分别为0.957 0、0.037 7、0.041 6、0.114 0、0.063 9；其余成分的近红外建模未达到定量要求。结论 NIRS法结合PLS可以快速、无损地对丹参中的丹酚酸B、二氢丹参酮、丹参酮I、隐丹参酮和丹参酮Ⅱ_A进行定量分析。这为开发丹参药材、饮片的快速现场检测方法奠定了基础。]]> 2018/6/11 9:03:14 796true 目的 对离子辐射选育当归新品种进行安全性评价。方法 采用气相色谱法测定有机氯类农药残留量；电感耦合等离子体质谱法测定Pb、Cd、Cu含量；测汞仪测定Hg含量；原子荧光法测定As含量。以总灰分、酸不溶性灰分、重金属及有害元素含量为指标，利用灰色关联度法，结合小鼠急性毒性实验，对样品安全性进行综合评价。结果 辐射选育当归新品种岷归3号、岷归4号药材中有机氯类农药残留量、重金属和有害元素含量符合《中华人民共和国药用植物及制剂进出口绿色行业标准》规定。灰色关联度法对样品安全性进行综合评价表明，岷归3号、岷归4号整体安全性优于其他样品。当归不同部位对重金属及有害元素的富集程度不同，归头对重金属Pb、Cd、Cu的富集程度较高，归尾对重金属As、Hg的富集程度较高，归身对重金属的富集程度相对较低。小鼠急性毒性实验未测得ig给药小鼠半数致死量（LD₅₀），而小鼠对其最大耐受量为120 g/kg，相当于临床成人（60 kg）最大用量的480倍。结论 当归辐射选育品种药材无明显毒性，临床常用量安全可行。]]> 2018/6/11 9:03:14 795true 目的 建立超快速液相色谱-串联四级杆/线性离子阱质谱（QTRAP-UFLC-MS/MS）同时测定不同产地番荔枝子中氨基酸和核苷类成分含量的方法，分析比较不同产地样品中25种成分的差异，为番荔枝子资源的综合利用提供科学依据。方法 采用Waters XBridge Amide色谱柱（100 mm×2.1 mm，3.5μm）；以0.2%甲酸水（A）-0.2%甲酸乙腈（B）为流动相，梯度洗脱，体积流量0.6 mL/min；柱温30℃，正离子多反应监测（MRM）模式测定。采用主成分分析（PCA）和TOPSIS分析对不同产地番荔枝子进行综合性评价。结果 15种氨基酸和10种核苷类成分的浓度与峰面积呈良好的线性关系（r²>0.994 7）；方法精密度、重复性和稳定性的RSD值均小于3.87%；平均加样回收率在94.90%~98.78%，RSD在0.84%~3.01%。不同产地番荔枝子中氨基酸和核苷类成分存在一定的差异性，其中海南产的综合质量最高。结论 该方法简便、准确、可靠，可根据目标成分优选不同产地的番荔枝子，也为其质量评价提供了可靠的依据。]]> 2018/6/11 9:03:14 794true 目的 采用SCoT分子标记方法对茶枝柑及近缘种进行遗传多态性分析。方法 使用正交设计方法，对Mg²⁺、dNTPs、ExTaq DNA聚合酶、引物浓度及模板DNA用量5个因素进行筛选，筛选适合茶枝柑及近缘种的SCoT-PCR反应体系，同时通过梯度温度筛选最佳退火温度，并验证其多态性引物。结果 得到适于茶枝柑的SCoT标记PCR反应体系，最终筛选出12条清晰、条带丰富的作为茶枝柑及近缘种SCoT分子标记的引物，同时通过NTSYS软件分析得到茶枝柑及近缘种的相似系数表和UPGMA聚类树。结论 运用3个不同地域柑橘基因组DNA对优化的SCoT-PCR反应体系进行验证，获得了多态性丰富、条带清晰的扩增图谱，表明茶枝柑SCoT分子标记技术体系稳定可靠。而聚类分析结果能够直观、科学地从分子角度对茶枝柑及近缘种13种材料进行初步区分。]]> 2018/5/30 15:54:37 793true 目的 研究甘肃野生红芪种质资源的遗传结构及遗传多样性。方法 收集15份武都、宕昌红芪自然分布区野生种质样本，采用ISSR标记技术扩增，POPGENE 1.32软件计算遗传多样性参数，NTSYS软件进行UPGMA与PCoA分析，采用Arlequin 31开展分子变异分析，运用structure 2.3.4软件开展居群结构分析。结果 9条引物总共扩增出173条条带，多态性条带数为126，多态性比率为72.83%，取样野生红芪种群的多态性位点比率（PPL）为49.71%~61.85%，平均多态性比率为55.78%。红芪种群的总体物种水平的等位基因观察数（N_a）为1.728 3，有效等位基因数（N_e）为1.364 6，Nei's基因多样性指数（H）为0.224 2，Shannon's指数（I）为0.334 5。野生红芪种质的Nei总基因多样性为0.223 0，Nei's种群内基因多样性为0.192 1，Nei's基因分化系数为0.138 9，基因流为3.099 4。野生红芪种质种群间的变异为16.36%，种群内的变异占83.64%，遗传变异主要发生在种群内。UPGMA、PCoA与居群结构分析均表明取样野生红芪种质种群可分为2类，Mantel相关性检测发现，遗传分化与地理距离呈中等程度相关性。结论 取样野生红芪种质具有丰富的遗传多样性，遗传结构呈现出遗传分化主要发生在种群内与多年生的特征，为保护与开发利用红芪种质资源提供了理论基础。]]> 2018/5/30 15:54:37 792true 目的 克隆牛樟芝三萜合成途径中鲨烯环氧酶基因（AcSE），并进行生物信息学和表达差异分析。方法 以牛樟芝菌丝体cDNA为模板，利用快速末端扩增（RACE）进行AcSE序列扩增，利用生物信息学分析AcSE基因的理化性质并预测其蛋白二级结构、三级结构及其功能；同时利用实时荧光定量PCR （qRT-PCR）测定不同培养时间的液体牛樟芝菌丝体及子实体中AcSE基因的表达情况。结果 AcSE的cDNA全长1 446 bp （GenBank编号：KT070558），编码481个氨基酸，相对分子质量为53 300，等电点为6.36。结构域分析表明AcSE内含3个跨膜的结构域，无卷曲螺旋结构，且疏水区和亲水区交替存在。AcSE的gDNA全长为1 607 bp，含4个外显子和3个内含子。AcSE在液体培养7 d的牛樟芝菌丝体中表达量最高，为子实体的7.89倍，且随着培养时间的延长逐渐下降。结论 首次从牛樟芝中克隆了AcSE基因，为进一步阐明该基因在牛樟芝三萜合成途径中的作用奠定基础。]]> 2018/5/30 15:54:37 791true 目的 建立HPLC-MS/MS法同时测定体外培育牛黄Calculus Bovis Sativus（CBS）和天然牛黄Calculus Bovis（CB）中26种胆汁酸成分。方法 Symmetry C₁₈色谱柱（150 mm×2.1 mm，3.5μm），流动相为水（0.1%甲酸+10 mmol/L乙酸铵）-甲醇（0.1%甲酸+10 mmol/L乙酸铵），体积流量0.15 mL/min，梯度洗脱，进样量为10 μL。质谱采用电喷雾离子源，负离子模式监测，喷射电压-4 500 V，离子源温度350℃，采用多反应监测模式（MRM）。结果 牛黄中26种胆汁酸在线性范围内峰面积与摩尔浓度均呈良好的线性关系（r ≥ 0.991 4），加样回收率为98.2%~102.3%，精密度RSD值小于0.95%，CBS和CB的胆汁酸类成分在种类和含量上存在一定差异。结论 该法灵敏度高、专属性好、结果可靠，适用于牛黄中胆汁酸成分的测定。]]> 2018/5/30 15:54:37 790true 目的 建立西藏木瓜的HPLC多指标定量指纹图谱，为西藏木瓜的质量控制和真伪鉴别提供方法和技术支持。方法 采用高剪切分散乳化（HSDE）法提取木瓜鲜样，采用Agilent Zorbax SB-C₁₈（250 mm×4.6 mm，5.0μm）色谱柱，乙腈-0.5%冰乙酸+10 mmol/L乙酸铵水溶液为流动相，进行梯度洗脱，体积流量为0.8 mL/min，柱温为25℃，检测波长为280 nm。利用ESI-TOF/MS法对西藏木瓜提取物中多种化合物进行鉴别，在对多指标活性成分进行定量测定的基础上，建立西藏木瓜的HPLC指纹图谱。结果 西藏木瓜HPLC指纹图谱共有30个共有峰，指认了其中9个峰，分别为绿原酸、香草酸、咖啡酸、藜芦酸、芸香苷、槲皮苷、金丝桃苷、齐墩果酸和熊果酸，并对其进行了定量测定。指纹图谱中相似度分析表明，10批西藏木瓜的相似度较为接近，而西藏木瓜与其他品种木瓜的相似度差别较大。结论 HSDE-HPLC-DAD-ESI-TOF/MS法可以用于木瓜鲜样的快速提取和分析，在此基础上建立的指纹图谱结合相似度分析可用于其质量评价，为提高西藏木瓜的质量控制水平提供了方法和技术支持。]]> 2018/5/30 15:54:37 789true 目的 分别克隆灰毡毛忍冬野生型与湘蕾型ACS3基因，并进行生物信息学和表达模式分析。方法 筛选灰毡毛忍冬转录组数据库中与ACS蛋白同源性较高的Unigene序列，设计引物，利用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）及RACE技术对该Unigene进行全长克隆；用生物信息学软件分析蛋白的理化性质、结构域和同源性等特性；借助qRT-PCR检测1-氨基环丙烷-1-羧酸合酶（ACS3）基因在不同品种、不同花期灰毡毛忍冬中表达模式。结果 从灰毡毛忍冬野生品种及湘蕾品种中分别克隆得Lm-ACS3（GenBank：MH724196）及Lm-XL-ACS3（GenBank：MH724197），开放阅读框长度均为1 452 bp，编码483个氨基酸，包含保守的Aminotran_1_2结构域，与其他植物的ACC合酶具较高相似度；qRT-PCR结果显示，野生型ACS3基因不同花期间表达差异显著，从花期3开始呈整体明显上升趋势，湘蕾型中花期间表达差异相对较小。结论 分别克隆得到灰毡毛忍冬野生型和湘蕾型ACS3基因，该基因在2品种中具不同表达模式；推测ACS3基因或为导致灰毡毛忍冬不同品种间差异表型的可能功能基因之一，为进一步验证该基因在调控蕾期长短及花表型的生物学功能提供实验基础。]]> 2019/5/9 13:11:46 788true 目的 挖掘夏枯草中可能调控三萜和酚酸类产物生物合成的MYB转录因子。方法 从夏枯草转录组数据库中筛选MYB转录因子，并对蛋白基序、理化性质、功能注释、系统进化、表达特性等进行分析，并预测其功能。结果 在夏枯草转录组水平上共鉴定出参与27个MYB转录因子基因，c32045.graph_c0可能通过对肉桂酸4-羟化酶基因表达的抑制作用，阻碍迷迭香酸的生物合成，从而作为转录抑制子对酚酸类产物生物合成起负调控作用。c26895.graph_c0可能通过调节三萜类和迷迭香酸类产物合成过程中的代谢中间产物的流向，从而阻碍三萜类和酚酸类的生物合成。结论 该研究预测了调控夏枯草三萜类和酚酸类产物生物合成的相关MYB转录因子，也为进一步研究夏枯草MYB转录因子在次生代谢产物中的调控功能奠定了基础。]]> 2019/5/9 13:11:46 787true 目的 探讨多重实时荧光PCR检测方法对川贝母及伪品鉴别的可行性。方法 通过对常见贝母属植物的ITS、psbA-trnH、rbcL和matK基因序列种间变异、遗传距离及系统发育关系分析，选择进化速率快、种间变异大、种内变异小的基因作为靶基因，设计川贝母及伪品贝母的特异性引物和Taqman探针，建立一种多重实时荧光PCR检测方法。通过特异性、灵敏度及混合样本检测与测序方法比较进行方法评估。结果 贝母属ITS和psbA-trnH变异位点高于rbcL和matK，通过遗传距离分析rbcL和matK基因显著低于ITS和psbA-trnH基因，以ITS作为靶基因，建立多重实时荧光PCR检测方法特异性强，灵敏度达0.01 ng，对18份样本抽查检出4份伪品贝母，检测结果与构建的NJ树聚类分析结果完全一致。结论 基于ITS区域序列为靶基因建立多重实时荧光PCR检测方法能够成功鉴定川贝母及其混伪品，为川贝母真伪鉴别提供依据。]]> 2019/5/9 13:11:46 786true 目的 获得药用植物阳春砂Amomum villousm的萜类合酶基因AvTPS1的启动子并进行活性分析。方法 从阳春砂叶片基因组DNA（gDNA）中克隆获得AvTPS1基因，再通过FPNI-PCR的方法从阳春砂叶片gDNA中克隆AvTPS1的启动子并进行序列分析，构建由该启动子驱动β-葡萄糖苷酸酶基因（GUS）的重组表达载体pCAM-AvTPS1p，利用农杆菌介导法注射侵染烟草Nicotiana benthamiana叶片进行瞬时表达来验证AvTPS1启动子的活性。结果 获得AvTPS1的gDNA序列长度为2 444 bp，经过序列比对发现AvTPS1含有7个外显子和6个内含子；通过FPNI-PCR成功获得568 bp的AvTPS1启动子序列，其含有10种顺式作用元件，包括保守元件TATA-box和CAAT-box，以及可被转录因子MYC结合的G-box等；通过GUS染色发现AvTPS1启动子启动了GUS基因的表达，使转基因烟草叶片呈现蓝色。结论 AvTPS1启动子被成功克隆，且通过实验验证其具有启动基因表达的功能，为进一步研究AvTPS1在萜类合成途径的功能及其受转录因子调节的机制奠定了基础。]]> 2019/5/9 13:11:47 785true 目的 基于DNA条形码技术建立人参与西洋参种子的分子鉴别方法。方法 采用生药鉴定方法研究其性状、显微特征，并结合DNA条形码技术，基于中药材DNA条形码数据库，通过ITS2序列比对、遗传距离比较和构建临接（NJ）系统发育树，对人参与西洋参的种子进行鉴别研究。结果 人参与西洋参种子的种内遗传距离分别小于种间遗传距离，系统发育树图中各物种均聚为一支，来自9个产地的42份人参及西洋参的种子均为正品，且容易区分。结论 基于ITS2序列DNA条形码技术可以快速、准确、有效地鉴别人参与西洋参种质资源。]]> 2019/5/9 13:11:47 784true 目的 建立陈皮饮片HPLC指纹图谱分析方法，为其质量控制提供技术参考。方法 采用HPLC法建立17批陈皮饮片的指纹图谱，通过聚类分析（cluster analysis，CA）、主成分分析（principal component analysis，PCA）、正交偏最小二乘判别分析（orthogonal partial least square discrimina te analysis，OPLS-DA）对指纹图谱进行评价。结果 建立了陈皮饮片指纹图谱，相似度均>0.9，确定了25个共有峰，其中14个峰的变量投影重要性（variable importance projection，VIP）均>1，通过与对照品谱图比对，确定了13号峰为芸香柚皮苷、14号峰为橙皮苷、23号峰为川陈皮素、24号峰为3，5，6，7，8，3'，4'-七甲氧基黄酮、25号峰为桔皮素。结论 该方法简单可靠，可用于陈皮饮片鉴别和质量控制。]]> 2019/5/9 13:11:47 783true 目的 研究千里光过氧化物酶（peroxidase，POD）基因结构特征和功能的关系，并根据其核苷酸序列设计SSR引物，进一步验证其在多个千里光地方种中的多态性。方法 从千里光全长cDNA文库中分离到POD全长序列，运用系列生物信息学软件进行核苷酸与氨基酸的序列特征分析，分析序列中的SSR位点并对多个千里光品系进行PAGE检测和验证。结果 基因具有典型的POD结构特征，表现出高度的保守性。PAGE电泳显示该引物在不同地方品系的千里光中扩增稳定，且存在明显多态性。结论 研究结果拓展了对千里光POD基因序列和功能的认识，新开发标记能有效应用于POD基因的检测和育种鉴定，同时也可为其他物种的POD研究提供参考。]]> 2019/4/19 11:30:03 782true 目的 克隆珍稀濒危兰科药用铁皮石斛F-box蛋白基因即S期激酶相关蛋白（S phase kinase-associated protein）基因DoSKP2A，并进行生物信息学和表达特征分析。方法 采用RACE技术获基因全长；利用生物信息软件预测基因编码蛋白的理化性质、结构域和亚细胞定位等分子特性；用DNASTAR 7.0和MEGA 7.0分别进行氨基酸多序列比对和进化树构建；借助定量PCR检测基因表达模式。结果 克隆到DoSKP2A（GenBank注册号KU160472），cDNA全长1 507 bp，开放阅读框（ORF）长1 101 bp，编码蛋白含366个氨基酸，相对分子质量39 590，等电点7.9。DoSKP2A蛋白不含跨膜域和信号肽，包含F-box核心结构域（26～88）、亮氨酸重复序列LRR（202～226）和多个保守基序；DoSKP2A与植物SKP2As蛋白一致性为64.6%～72.4%，所在分支隶属于SKP2As分子进化的单子叶植物分支，与小兰屿蝴蝶兰SKP2A亲缘关系近；DoSKP2A基因转录本在石斛3种器官中为组成型表达，根中相对表达量较高，为叶中的6.16倍，茎中次之，叶中表达量很低。结论 获得一个全新的铁皮石斛F-box蛋白基因DoSKP2A全长、生物信息及其表达特征，为研究其在铁皮石斛生长发育、信号传导和抗逆境胁迫的分子机制提供基础。]]> 2019/4/19 11:30:03 781true 目的 对不同来源的野生白及遗传多样性进行分析，为白及种质的选育、保护和开发提供参考。方法 以全国不同地区的50份野生白及样品为材料，利用序列相关多态性扩增（SRAP）分子标记技术进行遗传多样性分析，使用UPGMA法进行白及亲缘关系的聚类分析。结果 利用筛选出的15对SRAP引物组合，50份样品扩增获得共117个条带，平均每个引物产生7.8个条带，其中多态性条带106条，多态性比率为90.60%。聚类结果表明供试50份白及样品的遗传相似系数为0.59～0.87，以遗传系数0.66为基准可以分成6大类。遗传距离最近的2份紫花白及分别来自云南丽江市2号和湖北京山县2号，其遗传距离与地理距离无直接关联。结论 野生白及资源间存在较丰富的遗传多样性，且地理距离与遗传距离并无直接关联，SRAP技术可为白及的资源保护、品种选育提供理论依据，为白及后续开发利用提供参考。]]> 2019/4/19 11:30:03 780true 目的 测定姜黄饮片中姜黄素的含量，并建立姜黄的HPLC指纹图谱，评价⁶⁰Co-γ辐照对姜黄化学成分的影响。方法 对⁶⁰Co-γ辐照前后13批次姜黄饮片粉末中姜黄素含量进行测定；建立姜黄饮片HPLC指纹图谱并对其方法学进行考察。采用配对样本t检验和中药色谱指纹图谱相似度评价软件对辐照前后姜黄化学成分变化进行分析，结合聚类分析（HCA）和主成分分析（PCA）对辐照前、后样品进行综合评价，并对3批次姜黄样品辐照后3、6个月的稳定性进行了考察。结果 13批次姜黄粉末辐照前后姜黄素含量无统计学差异（P>0.05）；姜黄HPLC指纹图谱确定了16个共有峰，各批次姜黄辐照前后指纹图谱的相似度均大于0.998；同批次辐照前与辐照后样品聚类一致性较好，3批次辐照前后姜黄样品放置3、6个月后与0个月相比姜黄素含量变化RSD<5%，指纹图谱相似度均大于0.95。结论 ⁶⁰Co-γ辐照对姜黄中姜黄素含量和整体化学成分一致性基本无影响，且不影响其稳定性，通过指纹图谱结合指标成分含量分析可以更好地评价⁶⁰Co-γ辐照对姜黄化学成分的影响，为姜黄辐照灭菌方式的选择提供了实验依据。]]> 2019/4/19 11:30:03 779true 目的 建立香鳞毛蕨Dryopteris Fragrans有效部位中10种间苯三酚类成分的一测多评测定方法。方法 采用高效液相色谱法，以绵马素BB为内参物，测定其与绵马素PB、绵马素AB、黄绵马酸BB、田基黄绵马酸A、黄绵马酸PB、异黄绵马酸PB、黄绵马酸AB、Compound VI和绵马酚B的相对校正因子，采用相对校正因子计算这9种间苯三酚成分的量，实现一测多评。同时采用外标法测定有效部位中该10种成分的量，并比较2种测定方法的差异，以验证一测多评法的可行性和准确性。结果 各相对校正因子重复性良好，12批有效部位中10种间苯三酚成分量的计算值与实测值无显著性差异。结论 在缺少对照品的情况下，以绵马素BB为内参物，建立的一测多评法可用于香鳞毛蕨有效部位的定量分析，为香鳞毛蕨多指标成分质量评价提供参考。]]> 2019/4/19 11:30:03 778true 目的 研究川乌茎、叶中生物碱类成分在不同生长期的含量变化。方法 采用Phenomenex C₁₈色谱柱（150 mm×4.6 mm，5 μm），流动相为0.1%甲酸水溶液（A）-乙腈（B），质谱采用ESP多反应监测（multiple reaction monitoring，MRM）模式扫描；建立HPLC-MS/MS方法同时测定川乌茎叶中乌头碱、新乌头碱、印乌头碱、次乌头碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱、乌头原碱、尼奥林、附子灵、宋果灵、塔拉乌头胺、去甲乌药碱、去甲猪毛菜碱14种生物碱的含量。结合主成分分析（PCA）追踪川乌茎叶在生长过程中不同生物碱的含量变化规律。结果 14种生物碱在各自浓度范围内线性关系良好（r²>0.990 0），定量限为2.27～18.27 ng/mL，平均回收率在94.73%～104.50%。结果表明，川乌茎叶中均含有相当量的生物碱，且茎中生物碱总量高于叶，茎在5、6、7、8月的生物碱总量分别为0.087 1%、0.182 8%、0.141 0%、0.199 4%，呈现波浪形上升趋势，8月份到达峰值；叶在5、6、7、8月生物碱总量分别为0.074 7%、0.075 9%、0.081 4%、0.058 9%，呈现出先上升后下降的变化趋势，叶中生物碱的总量7月最高。结论 PCA发现茎、叶中生物碱含量在不同时期表现出不同的变化趋势。茎中生物碱在采收期达到峰值，生物碱含量可观，具有成为新药用资源的潜力与开发价值。]]> 2019/4/19 11:30:03 777true 目的 克隆膜荚黄芪苯丙氨酸解氨酶（PAL）基因家族成员，分析它们在不同组织中的表达模式与毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量变化，为揭示膜荚黄芪毛蕊异黄酮葡萄糖苷积累的分子机制提供理论依据。方法 以膜荚黄芪总RNA为模板，采用同源克隆法和RACE技术克隆PAL基因并进行生物信息学分析；利用实时荧光定量PCR技术测定PAL基因在根、茎、叶中的表达量；采用HPLC法测定了根、茎、叶中的毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量。结果 从膜荚黄芪中克隆了3个PAL基因AmPAL1、AmPAL2、AmPAL3，Genbank登陆号分别为KY086279、KY086280、KY086281。AmPAL1、AmPAL2和AmPAL3的全长cDNA长度分别为2 508、2 401、2 498 bp，均含有2 157 bp的完整开放阅读框，编码718个氨基酸。蛋白质序列分析表明，它们均含典型的PAL酶活中心序列，与植物PAL蛋白同源，且与同属于豆科的植物PAL蛋白相似性最高。系统进化树表明，AmPAL1与AmPAL2和AmPAL3聚为不同的亚类。实时荧光定量PCR分析发现，这些基因在根、茎、叶中表达模式不同，在检测的所有组织中AmPAL1的表达量最高、AmPAL2的表达量次之、AmPAL3的表达量最低，只有AmPAL2的表达水平与毛蕊异黄酮葡萄糖苷积累变化一致（即根 > 茎 > 叶）。结论 从膜荚黄芪中克隆的AmPAL1、AmPAL2和AmPAL3是典型的PAL基因家族成员，推测它们在膜荚黄芪各组织发育过程中起着不同的作用，且AmPAL2可能参与了毛蕊异黄酮葡萄糖苷的积累。]]> 2019/4/8 17:29:57 776true 目的 从甘草Glycyrrhiza uralensis中克隆1个新的NADPH细胞色素P450还原酶基因（GuCPR，登录号：MH401048）并进行生物信息学分析。方法 提取甘草根部总RNA后逆转录为cDNA，通过转录组数据库筛选得到GuCPR基因全长，利用NCBI ORF finder得到其开放阅读框并翻译得氨基酸序列，设计引物进行PCR扩增，构建克隆重组质粒。利用生物信息分析预测蛋白性质、结构等及模拟蛋白三级结构，并构建同源系统进化树。结果 克隆得到GuCPR基因cDNA全长2 118 bp，编码705个氨基酸残基，相对分子质量78 450，等电点（pI）5.19。GuCPR蛋白为非分泌蛋白，不具有信号识别功能。跨膜预测结果显示蛋白的第44~64位氨基酸为跨膜区，同时，亚细胞定位预测结果显示蛋白位于内质网上。结论 克隆得到一个新的GuCPR，并进行了生物信息学分析，为进一步研究提供了理论基础。]]> 2019/4/8 17:29:57 775true 目的 基于HPLC指纹图谱、多成分定量与化学计量学相结合的方法建立不同产地三棱质量评价方法。方法 采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2004A版）对7省12批不同产地的三棱药材的HPLC指纹图谱进行相似度评价；通过对照品比对指认9种化学成分，并测定样品中9种成分含量；使用SPSS 20.0软件进行聚类分析和主成分分析。结果 选取了12个色谱峰作为指纹图谱共有峰，12批样品的相似度计算结果均大于0.800，说明各产地的药材有较好的一致性；测定了5-羟甲基糠醛、香草酸、阿魏酸、对羟基苯甲醛、对羟基苯甲酸、香兰素、原儿茶酸、对香豆酸、异阿魏酸9种成分的含量；通过聚类分析可将12批样品聚为4类；主成分分析用4个主成分对三棱药材进行综合评价，综合得分结果显示，河南新乡、江苏镇江、河北沧州、湖南岳阳、浙江金华、河南郑州的三棱药材在所有样品中的综合得分位于前6名；12批饮片主成分综合得分与含量测定结果存在相关性。结论 建立的三棱质量评价方法操作简便、重复性好、结果可靠，可用于全面评价三棱药材的质量。]]> 2019/4/8 17:29:57 774true 目的 分析1、2、3年生药用大黄Rheum officinale根、根茎、叶片中10种成分的含量及变化规律，为大黄质量评价和药材高效生产提供理论依据。方法 采用HPLC法测定大黄中各成分的含量；借助SPSS 24.0进行单因素方差分析和多重比较。结果 建立的HPLC分析体系线性范围良好（r²>0.997），精密度、稳定性、重复性RSD均小于2%，加样回收率96.10%~107.10%。含量分析结果表明，同一部位中，没食子酸的含量逐年或次年下降（P<0.05），大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚、大黄素-8-O-葡萄糖苷、番泻苷B的含量逐年或第3年显著增加（P<0.05）；根中大黄酚-8-O-葡萄糖苷、芦荟大黄素含量次序为3年生 > 1年生 > 2年生、1年生 > 3年生 > 2年生（P<0.05），二者在根茎及叶片中逐年或第3年增加（P<0.05）；根或根茎儿茶素含量随年份增加，叶片中降低。同一年限内，除大黄素甲醚、大黄酚-8-O-葡萄糖苷外，根或根茎其他8种成分的含量显著高于叶片（P<0.05）；根中大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素-8-O-葡萄糖苷、没食子酸、儿茶素的含量高于根茎（P<0.05）或与之相当；2年生大黄酚-8-O-葡萄糖苷根茎中含量高于根中（P<0.05）；2、3年生大黄番泻苷B的含量在根、根茎、叶片依次显著降低（P<0.05），芦荟大黄素的含量依次为根茎 > 根 > 叶片（P<0.05）。结论 基于HPLC分析的药用大黄10种成分在不同年限、不同部位样品中差异积累；同一部位样品中多数成分含量随生长年限延长而增加；同一年份的根或根茎中多数成分含量高于叶片；3年生大黄根及根茎中成分含量最高。]]> 2019/4/8 17:29:58 773true 目的 以延长活化部分凝血活酶时间（APTT）为指标，建立定量测定川芎抗凝血作用的方法，评价川芎及其中成药的质量。方法 川芎先后用乙醇和水定量提取，以总提取物为供试品，体外测定延长APTT值。家兔心脏取血，制备血浆，加入APTT试剂后，测定凝结时间。以APTT延长率为抗凝血活性的评价指标，用阿魏酸钠标定川芎的延长APTT活性。根据量反应平行线法（2.2）计算川芎的抗凝血活性。并测定了9份川芎药材、饮片及中成药的抗凝血活性。结果 阿魏酸钠和川芎总提取物均具有显著的抗凝血活性，且可靠性检验结果成立。阿魏酸钠的给药质量浓度（1~5 mg/mL）与其APTT延长率呈良好的线性关系（r=0.995 5）。供试品重复测定抗凝血活性的RSD为9.34%（n=6），可信限率为15.98%（n=6）。不同川芎样品的抗凝血活性不同，5份川芎药材的抗凝血效价分别为5.431~7.620 U/g，川芎饮片及川芎酒炙饮片分别为5.910、3.017 U/g，通脉颗粒和血府逐瘀丸分别为14.516、29.035 U/g。结论 建立的方法能准确测定川芎药材、饮片及其中成药的抗凝血活性并评价其质量。]]> 2019/4/8 17:29:58 772true 目的 采用HPLC对15批不同采集地的蒙药肋柱花药材进行指纹图谱研究，并采用相似度评价蒙药肋柱花药材的质量。方法 采用HPLC进行测定，色谱柱为YMC C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），流动相为乙腈-0.4%磷酸水-甲醇，梯度洗脱，体积流量0.8 mL/min，检测波长254 nm，柱温30℃。运用色谱软件对指纹图谱进行相似度评价。结果 建立了蒙药肋柱花药材的HPLC指纹图谱，确定了15个共有峰，指认了5个共有峰，15批次肋柱花药材与生成对照指纹图谱的相似度在0.881~0.997。结论 首次建立肋柱花药材的HPLC特征指纹图谱，所建立的指纹图谱测定方法精密度、稳定性和重复性良好。]]> 2019/4/8 17:29:58 771true 目的 皂苷是滇重楼的主要药效成分，获取滇重楼皂苷合成途径中关键基因（MVD）的cDNA全长序列，并对该序列进行生物信息学及表达量分析。方法 通过同源克隆法得到滇重楼MVD cDNA的保守片段，利用RACE技术获得MVD cDNA全长序列，命名为PpMVD，并进行生物信息学分析，通过实时荧光定量（RT-PCR）法检测PpMVD在滇重楼不同组织中的表达情况。结果 PpMVD基因cDNA全长1 583 bp，开放阅读框（ORF）长1 269 bp，编码422个氨基酸，该蛋白质的相对分子质量为46 820，等电点为5.69，不稳定指数为45.40；滇重楼PpMVD蛋白质二级结构中含有159个α-螺旋，占37.68%；19个β折叠，占4.50%；69个延伸链，占16.35%；175个无规卷曲，占41.47%；该蛋白没有跨膜螺旋区，且不存在信号肽，其全部氨基酸都位于细胞膜表面；该基因包含MVD1-Superfamily家族的保守结构域，属于GHMP激酶蛋白家族成员；RT-PCR结果显示，滇重楼PpMVD基因在种子、叶片、茎和块茎中均有表达，但表达量呈显著差异（P>0.05），由高到低依次为块茎 > 叶片 > 种子 > 茎，其中主要药用组织块茎中表达量最高，为最低表达量（茎）的3.3倍。结论 首次克隆了滇重楼PpMVD cDNA全长序列，并检测了该基因在滇重楼各组织中的表达量，为进一步研究PpMVD基因在提高皂苷生物合成过程中的影响提供了基础，并对重楼药用资源的可持续利用提供了支持。]]> 2019/3/29 15:41:57 770true 目的 克隆山茱萸转录因子CobHLH7的cDNA序列。方法 以转录组数据中unigene c15204_g1序列为参考，在其开放阅读框两端设计特异引物，提取山茱萸果实总RNA，并反转录成cDNA，以此为模板，经RT-PCR扩增、连接pMD19-T克隆载体并测序，获得CobHLH7的cDNA序列。通过Protparatam、ProtScale、SOPMA等软件，对其进行生物信息学分析。结果 CobHLH7的cDNA长度为941 bp，编码266个氨基酸，其相对分子质量为29 220，等电点为6.32。经SOPMA在线软件预测，该蛋白为不稳定蛋白，其高级结构以α-螺旋和无规卷曲为主，含有少量的β-转角和延伸带。多序列比对和亲缘关系比较显示，CobHLH7氨基酸序列与马铃薯和模式植物烟草的bHLH类转录因子亚家族的ILR3同源性较高。结论 在首次对山茱萸叶片和果实转录组测序的基础上，对筛选并预测的可能与环烯醚萜苷合成相关的转录因子CobHLH7进行克隆与生物信息学分析，为进一步研究其功能奠定基础。]]> 2019/3/29 15:41:58 769true 目的 使用流式细胞术与K-mer分析估测黄芪基因组的大小及复杂程度，为黄芪基因组测序奠定基础。方法 以番茄为内标，用流式细胞仪测定经碘化丙啶（PI）染色的番茄细胞核和黄芪细胞核混合样品的PI荧光强度，通过比较黄芪与番茄细胞DNA含量峰值的倍数关系，计算黄芪的基因组大小。采用高通量测序技术进行黄芪基因组调查测序，利用生物信息学方法估计黄芪杂合率、重复序列和GC含量等信息。结果 采用流式细胞术测得黄芪基因组大小约为1 426 Mb。通过基因组调查测序，获得了95 Gb黄芪基因组DNA测序数据，K-mer分析表明黄芪基因组约为1 456 Mb，测序深度为39×。K-mer分布曲线有明显的杂合峰，基因组杂合率为2.1%。结论 黄芪基因组大小为1.45 Gb左右，杂合率较高。这一结果可为黄芪基因组学研究提供参考。]]> 2019/3/29 15:41:58 768true 目的 探究植物激素及木质素对牛樟芝菌丝体生长情况的影响，并对其培养产物进行粗多糖、粗三萜含量及抗氧化活性测定研究。方法 采用皿式培养法培育牛樟芝，超声提取培养产物，选用苯酚-硫酸法测定粗多糖含量、香草醛-冰醋酸法测定粗三萜含量，并以DPPH自由基、ABTS自由基的半数清除浓度（IC₅₀）作为培养产物抗氧化活性的评价指标。结果 菌种活化方法为培养20 d后靠近菌丝层边缘取样，可获得生长活力好的接种原料；改良PCA培养基上牛樟芝菌丝长势较好、粗三萜及粗多糖含量高；以改良PCA培养基为基础，向其中添加0.5 g/L木质素时菌丝生长最快，菌丝层直径为对照组的1.19倍；当IBA添加质量浓度为0.5 mg/L时，菌丝体干质量较对照组增加了89.51%，粗多糖产量较对照组提升了130.57%，远高于其他组别，与此同时，菌丝体粗三萜含量及产量也显著提升，其含量较对照组提高了61.31%，粗三萜产量达到133.24 mg/L；添加牛樟树粉末0.5 g/L时，菌丝体粗三萜含量最高，为5.62%，较对照组提升了84.26%；此外，向培养基中加入植物激素及木质素对牛樟芝菌丝体的抗氧化能力提升有一定作用，整体来说加入不同物质后实验组抗氧化活性良好。结论 通过向改良PCA培养基中添加植物激素及木质素，可有效促进牛樟芝菌丝体生长、提高活性成分含量并提升其抗氧化活性。]]> 2019/3/29 15:41:58 767true 目的 建立UPLC法同时测定附子和川乌中苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱、新乌头碱、乌头碱和次乌头碱6种生物碱含量的方法，并采用多元统计分析方法比较附子和川乌中的6种生物碱的含量差异。方法 采用0.05 mol/mL盐酸水超声提取附子和川乌中的生物碱类成分，BEH C₁₈（100 mm×2.1 mm，1.7 μm）色谱柱；乙腈-水梯度洗脱；体积流量0.1 mL/min，柱温35℃；进样体积4 μL；检测波长235 nm。采用差异显著性分析、效/毒值分析、毒性成分指数分析、相关性分析、聚类热图分析、主成分分析和TOPSIS分析进行数据处理，综合评价附子和川乌的质量。结果 方法学考察结果符合规定，附子和川乌中苯甲酰次乌头原碱、新乌头碱、次乌头碱和MDAs含量差异极显著，苯甲酰新乌头原碱和苯甲酰乌头原碱含量差异显著，乌头碱和双酯型生物碱（DDAs）含量差异不显著。以6种生物碱为评价指标，15号附子样品质量最优，7号川乌样品质量最优。结论 建立的方法操作简单、准确可靠，具有良好的精密度、稳定性、重复性，可用于附子和川乌中生物碱类化合物的定量测定；效/毒值、毒性成分指数的运用能更精确、简便地实现附子和川乌的质量控制；基于多元统计分析可更准确地进行药材质量评价。可为进一步完善《中国药典》附子和川乌中酯型生物碱的分析测定提供参考，为附子和川乌的质量控制及评价提供科学依据。]]> 2019/3/29 15:41:58 766true 目的 分析不同海拔、光照因素对黄芩中7种黄酮类有效成分量的影响，为黄芩种植最佳生长条件的选择提供理论依据。方法 采用HPLC法同时测定人工种植的24批黄芩样品中野黄芩苷、黄芩苷、汉黄芩苷、芹菜素、黄芩素、汉黄芩素、千层纸素A 7种成分的含量，并采用方差分析法进行不同海拔、光照环境（阴坡、阳坡）与各成分量的相关性分析。结果 同一生长年限，在海拔（550±30）、（650±30）m 2个范围，对黄芩中7种成分的量进行比较，其中黄芩苷、汉黄芩苷有极显著性差异（P<0.01），野黄芩苷、黄芩素、千层纸素A、汉黄芩素、芹菜素有显著性差异（P<0.05）；阴坡和阳坡2种不同的光照条件下，黄芩中7种成分的量相比，无显著性差异（P>0.05）。结论 在同一生长年限，随海拔的升高，黄芩中黄酮类成分的量都呈现明显的上升趋势，有显著性差异。而光照（阴坡、阳坡）不同时，黄芩中黄酮类成分的量无显著性差异，但除汉黄芩苷、黄芩素外，其他黄酮类成分含量的均数阳坡高于阴坡。黄芩人工种植宜选择阳光直接照射的平地或阳坡，同时及海拔偏高有利于提高黄芩中黄酮类化学成分总量的积累。]]> 2019/3/29 15:41:58 765true 目的 探讨DNA条形码技术在民族药紫丹参及其近缘物种鉴定中的应用，为紫丹参药材鉴定提供参考。方法 建立紫丹参及其混伪品DNA条形码参照数据库，通过比对序列、分析变异位点、计算遗传距离和构建邻接树等分析数据，并应用该数据库对市场药材进行鉴定。结果 DNA条形码技术可有效鉴别紫丹参及其混伪品。结论 ITS2序列可作为紫丹参及其混伪品的鉴定条形码，该技术在民族药物种基原鉴定、标准制定和市场监管等实际应用中具有重要的应用价值。]]> 2019/3/9 16:50:11 764true 目的 克隆霍山石斛β-1，4-木糖基转移酶（IRX9）基因，并进行生物信息学、密码子偏性分析。方法 根据霍山石斛转录组数据获得的IRX9基因序列设计特异性引物，通过RT-PCR技术得到IRX9基因cDNA的全长序列，并进行生物信息学分析。结果 霍山石斛IRX9基因全长1 553 bp，包含一个长度为1 047 bp的开放阅读框，编码348个氨基酸，理论相对分子质量为39 350，等电点为7.26，为不含信号肽的亲水性稳定蛋白，定位于质膜，具有多个磷酸化位点和糖基化位点。系统进化树表明，该序列与同科植物铁皮石斛的同源性最高，且具有GT-A超家族的保守区域“DXD”。密码子偏性分析表明，该基因偏好使用以A/T结尾的密码子，具有27个偏性密码子，烟草为该基因最适合的外源表达宿主。结论 成功克隆IRX9基因，为从分子水平调控霍山石斛的生长发育和改善药材产量和品质提供理论基础。]]> 2019/3/9 16:50:11 763true 目的 获得夏枯草转录组信息，探索夏枯草次生代谢产物生物合成的分子基础。方法 利用Illumina HiSeq 2000高通量测序技术对夏枯草果穗、茎和叶等部位进行转录组测序，经Trinity软件组装后获得Unigene，并进行系统的生物信息学分析。结果 共获得77 863条Unigene，平均长度为716.72 nt。通过与NR、Swiss-Prot、COG等7个公共数据库进行BLAST比对，共有41 367个Unigene获得注释，注释率为53.13%。在KEGG数据库中，有1 406条Unigene被注释到次生代谢产物合成。通过对转录组数据深入挖掘发现，参与夏枯草三萜类骨架合成的Unigene共有60个，参与酚酸类合成的Unigene共有24个，参与次生代谢后修饰的Unigene共有259个，参与其他次生代谢合成的Unigene共有118个。结论 夏枯草转录组数据为探索夏枯草次生代谢产物的生物合成机制提供了重要的资源，也为利用代谢工程增加夏枯草中重要次生代谢产物含量提供了基础信息。]]> 2019/3/9 16:50:11 762true 目的 克隆刺五加香叶基焦磷酸合成酶（geranyl pyrophosphate synthase，GPS）基因的cDNA序列并分析基因序列特征、不同器官中基因表达水平及其与皂苷含量的相关性。方法 提取刺五加的RNA，逆转录为cDNA。根据转录组测序结果中编码GPS的unigene（c37362.graph_c0），设计特异性引物，经过PCR扩增GPS基因的cDNA全长。利用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）分析GPS基因在不同器官中的表达水平，并通过分光光度法检测刺五加总皂苷含量。结果 克隆得到长1 260 bp、编码419个氨基酸的刺五加GPS基因cDNA。GPS蛋白定位于线粒体内且不存在跨膜区域。GPS基因在各个器官中均有表达，在叶片中的表达量最高，是根中表达量的5.26倍。GPS基因的相对表达量与皂苷量呈现出同升同降的变化趋势，表现为显著正相关关系（r=0.851，P<0.05）。结论 首次克隆获得刺五加GPS基因的cDNA全长序列，明确了刺五加GPS基因的表达量与皂苷含量之间存在正相关关系。]]> 2019/3/9 16:50:11 761true 目的 寻找能促进宿主植物活性代谢产物合成的微生物，为后续功能菌群的建立及功能基因的发掘，提供理论支持。方法 应用Illumina Miseq PE250高通量测序技术对重楼根际土壤真菌、根及根茎内生真菌ITS1区进行序列测定，并进行生物信息学分析。结果 测序结果共获得154 228条序列，这些序列对应的根际土、根茎、根分别被聚类为408、119、57个OTUs。结论 重楼根际及内生真菌多样性的关系为根际土 > 根茎 > 根，在重楼药用部位根茎中发现Mucoromycota门较非药用部位根中的门为特有门，Ascomycota门为优势门，Roseodiscus属真菌为重楼根茎内生真菌优势菌群，根茎和根部的特有种群及优势菌群可能与重楼活性产物合成密切相关。]]> 2019/3/9 16:50:11 760true 目的 建立玄参药材的HPLC指纹图谱，并同时进行多成分含量测定，为玄参药材等级质量标准的制定提供方法和依据。方法 采用HPLC-DAD法，Elipse XDB-C₁₈（250 mm×4.6 mm，5 μm）色谱柱，柱温25℃，以乙腈（A）-0.03%磷酸水溶液（B）为流动相进行梯度洗脱，体积流量1.0 mL/min，进样量10 μL，指纹图谱检测波长207 nm，含量测定的检测波长为哈巴苷210 nm、哈巴俄苷280 nm、肉桂酸264 nm。获取30批不同等级玄参药材的指纹图谱，采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012版）进行分析，同时对3种主要化学成分进行含量测定。结果 指纹图谱分析共指认7个共有峰，相对保留时间RSD值均小于2.0%，相对峰面积RSD值差异较大，提示玄参药材中的主要化学成分稳定存在，但含量差异较大；相似度分析中，约有5%的指纹图谱与对照药材的相似度低于0.7，12.5%的相似度在0.7～0.8，40%处于0.8～0.9，42.5%大于0.9，提示不同产地玄参药材的质量差异较大；不同批次玄参药材中3种化学成分含量差异较大，质量分数分别为哈巴苷0.18%～2.89%、哈巴俄苷0.01%～0.35%、肉桂酸0.01%～0.24%。结论 建议在原有等级划分标准的基础上，增加指纹图谱和主要化学成分的含量测定两项指标。]]> 2019/3/9 16:50:11 759true 目的 研究黄芩秋季采收期药效成分的动态变化及生态因子和关键酶表达对其的影响。方法 以人工栽培的一年生黄芩为研究对象，采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）法测定秋季连续时间黄芩根组织中9种关键酶基因（PAL、C4H、4CL、CHS、CHI、FNS、F6H、UBGAT、GUS）的表达量；采用HPLC法测定黄芩根中4种主要黄酮类化合物（黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素）的含量；以生态气象站对黄芩样地气象数据进行采集；采用SPSS统计软件和DPS统计软件进行数据分析。结果 4种黄酮类化合物含量在一年生黄芩秋季呈缓慢下降的趋势，因此黄芩秋季最佳采收时间应在9月初；灰色关联度分析结果表明影响4种黄酮类药效成分较大的生态因子为土壤含水量、最高空气温度、空气湿度、光合有效辐射；C4H、UBGAT基因的表达对黄芩秋季根部黄酮类化合物的积累具有重要影响；最大降雨强度可能通过对关键酶基因表达的影响来间接影响黄芩药效成分的积累。结论 明确了一年生黄芩秋季采收期4种主要黄酮类药效成分的动态变化和黄酮类化合物关键酶基因的表达，为黄芩黄酮类化合物合成生理生态机制的明晰和黄芩药材质量的提高提供了理论依据。]]> 2019/2/23 15:01:48 758true 目的 分析鉴定人参miRNA靶基因。方法 采用降解组测序技术对石柱参（Shizhu ginseng）、园参（Yuan ginseng）的miRNA及靶基因进行检测；利用公共数据库KEGG/NR/GO数据库对降解组基因进行功能注释；通过荧光实时定量PCR（qRT-PCR）技术验证石柱参、园参的miRNA及靶基因表达量。结果 共得到8个miRNA家族的13个靶基因；利用KEGG/NR/GO数据库分析发现该miRNA的靶基因类型主要是转录因子、应答因子及信号转导通路等。对5个差异表达miRNAs：aqc-miR-159、bdi-miR162、cpa-miR319、pgi-miR4376、smo-miR396及其靶基因进行的qRT-PCR验证结果与降解组测序结果一致。结论 明确了部分人参miRNA的靶基因，为进一步研究人参miRNA的可能功能奠定基础。]]> 2019/2/23 15:01:48 757true 目的 建立一种快速鉴别何首乌真伪的方法。方法 通过何首乌及其混伪品的psbA-trnH基因序列，寻找SNP位点并设计特异性引物，对来自于不同产地的何首乌及其3个同属混伪品进行PCR扩增，优化反应体系条件，并对此方法进行考察。结果 建立了何首乌特异性PCR的方法，在退火温度48℃、循环次数30时仅有何首乌能扩增得到191 bp的特异性条带，伪品则无。结论 等位基因特异性PCR鉴别何首乌真伪方法简单、可靠。]]> 2019/2/23 15:01:49 756true 目的 研究不同产地玄参内生真菌的种群结构差异。方法 通过形态和分子手段相结合的方式对来自浙江磐安、陕西安康、湖北武穴、湖南邵东、四川达州和安徽亳州共6个产地的玄参进行内生真菌的分离、鉴定及种群结构分析。结果 共分离得到3 052株内生真菌划分为153个形态型，经分子系统学分析，共划分为84个分类单元，分属于25个属，其中间座壳属、镰刀菌属、黑孢属、链格孢属、茎点霉属、棒孢属、附球菌属、枝孢属为6个产地内生真菌共有属，各产地的优势属不同。相似性分析表明，不同产地玄参内生真菌的组成结构上存在差异。Shannon-wiener多样性指数及Simpson指数分析表明浙江磐安产地玄参内生真菌多样性较高，四川达州产地的多样性稍低。结论 系统研究玄参内生真菌的多样性与群落结构，阐明内生真菌在植物组织中的分布规律，可为玄参内生真菌的开发利用提供基础资料和科学依据。]]> 2019/2/23 15:01:49 755true 目的 克隆1条红花AP2/ERF家族转录因子编码区序列，并构建植物表达载体。方法 在红花转录组测序基础上，利用RT-PCR方法克隆1条红花AP2/ERF家族转录因子编码区序列（CtERF1）并进行生物信息学分析，利用ClustalW 1.83软件构建系统进化树，在CtERF1基因序列两端引入Spe I和XbaI酶切位点，构建含有35 S启动子的植物超表达载体pBASTA-CtERF1。结果 CtERF1基因编码297个氨基酸，且具有典型的AP2/ERF基因的功能结构域，含有1个AP2区域，为ERF亚族蛋白，亚细胞定位分析推测其定位在细胞质和细胞核上。系统进化分析表明，CtERF1基因编码氨基酸与其他物种氨基酸具有一定的同源性，其中与杨树和人参的亲缘关系最近。通过分子生物学方法，成功构建pBASTA-CtERF1植物表达载体。结论 成功克隆了1条红花AP2/ERF家族转录因子编码区基因CtERF1，并构建了植物表达载体pBASTA-CtERF1。]]> 2019/2/23 15:01:49 754true 目的 建立同时测定不同产地牡丹皮中没食子酸、5-羟甲基糠醛、没食子酸甲酯、氧化芍药苷、儿茶素、芍药苷、1，2，3，6-O-四没食子酰葡萄糖、1，2，4，6-O-四没食子酰葡萄糖、苯甲酸、1，2，3，4，6-O-五没食子酰葡萄糖、牡丹皮苷C、苯甲酰氧化芍药苷、丹皮酚13种化学成分的HPLC方法。方法 采用50%甲醇回流提取，色谱条件采用C₁₈柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），以乙腈-0.5%磷酸水溶液为流动相，梯度洗脱，体积流量1.0 mL/min，检测波长254 nm，柱温30℃。结果 所测13种化学成分在测定的质量浓度范围内线性关系良好，r均大于0.999 5，有良好的精密度、稳定性、重复性和回收率。结论 所建立的HPLC方法可用于同时测定牡丹皮中13种化学成分的含量，该方法高效、准确、重复性好，可用于牡丹皮药材的质量控制。]]> 2019/2/23 15:01:49 753true 目的 克隆茶树WRKY转录因子（CsWRKYs）家族中的8个成员，并对其进行生物信息学和非生物胁迫下的表达分析。方法 采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）技术从"铁观音"茶树品种中克隆8个WRKY基因，运用生物信息学的方法对8个WRKY基因编码的蛋白进行理化性质分析，同时通过与拟南芥同源基因的比较进行进化树的构建、多序列比对及保守基序分析。采用qRT-PCR方法检测8个WRKY基因在低温、干旱和脱落酸（abscisic acid，ABA）胁迫处理下的表达量。结果 8个WRKY转录因子基因开放阅读框（ORF）长度分别为1 407、2 208、1 302、849、978、879、1 443和810 bp，分别编码468、735、433、282、325、292、480和269个氨基酸，GenBank登录号分别为MG298951、MG298952、MG298955、MG298956、MG298957、MG298959、MG298960和MG298963。系统进化树及序列比对分析显示，8个CsWRKYs可以分成了2个大组；除CsWRKY39缺少锌指结构外，其他CsWRKYs均含有WRKYGQK保守七肽结构域及锌指结构组成的WRKY结构域。非生物胁迫下的表达模式显示，CsWRKYs基因在低温、干旱和ABA胁迫处理下均有表达且表达受到不同程度的诱导；CsWRKY2、CsWRKY21、CsWRKY23、CsWRKY44和CsWRKY65基因在低温处理后表达量上调超过2，显著响应低温胁迫；CsWRKY21、CsWRKY23、CsWRKY39和CsWRKY65在干旱胁迫处理12 h及ABA处理6 h时均上调表达。结论 克隆获得来自不同组的8个茶树WRKY基因，推测与茶树抗逆密切相关。]]> 2019/2/15 13:58:40 752true 目的 苯丙氨酸解氨酶（PAL）是植物次生代谢与抗逆反应的关键酶类之一，研究PAL基因的序列信息与逆境胁迫响应模式，揭示其蛋白结构与功能及抗逆信号网络。方法 采用RT-PCR、RACE技术获得白及PAL基因cDNA全长；Protparam、SOPMA、SWISS-MODEL等生物信息学软件分析其编码蛋白的理化特性、结构域等特征；DNAMAN、MEGA软件分别进行氨基酸多序列比对与系统进化分析；实时荧光定量PCR（qRT-PCR）技术进行PAL基因时空表达特异性与外源激素胁迫下响应检测。结果 克隆得到的BsPAL基因cDNA全长为2 708 bp，编码1条797个氨基酸组成的多肽，预测蛋白质相对分子质量为86 216.94，等电点6.24，具有植物PAL酶的典型结构域和活性中心，不具有跨膜结构域，与铁皮石斛、蝴蝶兰的PAL基因亲缘关系最近。qRT-PCR结果表明白及根中PAL表达量显著高于叶与茎。在MeJA处理下，PAL表达量呈逐渐上升再下降的趋势；SA处理下，则是先下降再上升的趋势。结论 白及PAL基因的克隆与序列特征分析、表达检测及响应MeJA和SA胁迫后的表达变化为阐明白及苯丙烷代谢途径与激素信号通路研究提供实验基础。]]> 2019/2/15 13:58:40 751true 目的 基于形态和红外光谱法建立云南重楼及近似种的鉴别方法，并进一步分析其亲缘关系，为资源开发利用提供依据。方法 对云南重楼及其近似种进行了原植物形态比较，并对光谱数据进行自动基线校正、自动平滑、纵坐标归一化、二阶求导等预处理，采用主成分分析（principal component analysis，PCA）、偏最小二乘判别分析（partial least squares discriminant analysis，PLS-DA）及系统聚类分析（hierar chicalcluster analysis，HCA）分析光谱数据。结果 云南重楼与近似种在植株大小、叶片、叶脉、萼片、花瓣、花亭和雄蕊等形态特征上存在典型的鉴别特征，可为其提供形态鉴别依据。6种重楼的二阶导数在3 000~2 000 cm^-1和指纹区1 800~500 cm^-1波段内差异明显，HCA和PLS-DA均能较好地区分云南重楼及近似种，可为其提供红外光谱鉴别证据。HCA结果表明云南重楼、七叶一枝花、狭叶重楼、矮重楼和多叶重楼亲缘关系较近。结论 傅里叶变换红外光谱（FTIR）结合原植物形态鉴定能够快速鉴别云南重楼及其近似种，为指导重楼栽培、临床应用和资源开发提供科学依据。]]> 2019/2/15 13:58:40 750true 目的 研究铜胁迫对茅苍术药效成分β-桉叶醇、苍术酮和苍术素积累及其生物合成关键酶3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶（HMGR）、法呢基焦磷酸合酶（FPPS）基因表达的影响。方法 在铜胁迫下，采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）法测定茅苍术HMGR、FPPS的表达量；采用高效液相色谱法测定茅苍术3种药效成分的含量；采用SPSS软件对两者进行相关性分析，DPS软件进行灰色关联度分析。结果 当铜胁迫在100 mg/kg以内时，茅苍术根茎内FPPS表达量与苍术酮含量略有增加；但铜浓度继续增加时，HMGR、FPPS表达量与3种药效成分含量呈不同程度的下降趋势。铜胁迫下HMGR、FPPS的表达量与β-桉叶醇、苍术酮和苍术素的含量呈显著正相关（P<0.05）。灰色关联度分析发现铜胁迫下茅苍术根茎中β-桉叶醇、苍术酮的含量与HMGR、FPPS的表达量关联较大，FPPS基因的表达对β-桉叶醇和苍术酮合成贡献较大，但苍术素含量与这2种关键酶基因的表达关联度较小。结论 阐明了铜胁迫下茅苍术2种关键酶基因表达量与3种药效成分含量的变化规律，揭示了铜胁迫下茅苍术药效成分β-桉叶醇、苍术酮与萜类生物合成关键酶HMGR、FPPS的关系，有助于进一步深入研究铜胁迫下茅苍术药效成分合成的分子调控机制，为提高茅苍术药材的品质提供理论基础。]]> 2019/2/15 13:58:41 749true 目的 研究内生真菌破除刺五加种子休眠的方法及其内源激素和酶的变化规律。方法 用内生真菌侵染刺五加种子后对种子进行变温层积处理，利用高效液相色谱法测定刺五加种子中内源激素赤霉素（GA₃）、脱落酸（ABA）、吲哚乙酸（IAA）、吲哚丁酸（IBA）及水杨酸（SA）的含量，并且检测体内酶[过氧化氢酶（CAT）、超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化物酶（POD）、丙二醛（MDA）]活力变化。结果 5株刺五加内生真菌对种子萌发有明显的促进作用，在变温层积过程中，GA₃、IAA、IBA、SA均有不同程度的上升，ABA呈现明显的下降趋势。POD活力和MDA水平显著下降，CAT和SOD的酶活力显著上升。结论 内生真菌可调控刺五加种子激素和酶的含量，促进种子萌发。]]> 2019/2/15 13:58:41 748true 目的 通过研究N、P、K配比对丹参产量、生长及质量的影响，探寻鲁中南地区丹参最佳N、P、K配比及用量，为鲁中南地区棕壤土质下丹参精准施肥提供理论指导。方法 采用"3414"随机区组设计N、P、K 3种肥料不同配施组合，共14个施肥处理，测定丹参产量、生长性状、生物活性成分含量。分析不同施肥处理对丹参产量和质量的影响，并通过逐步回归分析建立鲁中南丹参的肥料效应模型，估测该地区丹参最大产量施肥量及最佳经济施肥量。结果 N、P、K缺素处理较最高产量处理分别减产27.29%、22.09%、23.83%，增收最佳处理为N₂P₂K₂，产量为16 740 kg/hm²；单因素肥料效应分析表明丹参产量随单种肥料施用量的增加呈先增加后减少的趋势，限制山东地区丹参产量及效益的主要营养元素依次为N > K > P；两因素交互效应分析表明，在较低施入水平下，N、P、K肥之间相互促进，且交互效应NP > NK > PK；N、P、K配施对生长性状影响分析得出N肥显著促进丹参根部物质积累，K肥对丹参株幅、根粗有促进作用；对活性成分含量影响分析得出P肥对酚酸类成分积累均有促进作用，促进丹参酮类成分积累，K肥对其有抑制作用。结论 丹参施肥量与产量之间二次函数拟合结果均符合报酬递减定律，能较好反映施肥量与产量的关系，通过建立三元二次效应函数估测鲁中南地区最佳经济施肥量为N 195.63 kg/hm²、P₂O₅ 116.64 kg/hm²、K₂O 153.84 kg/hm²。]]> 2019/2/15 13:58:41 747true 目的 通过叶绿体基因psbA-trnH序列分析，探讨我国忽地笑种质资源的系统进化关系及分子鉴定方法。方法 分别提取15省（市）52个忽地笑居群的DNA，经PCR扩增叶绿体基因psbA-trnH序列及测序，并用Mega 5.0等软件对测序结果进行分析。结果 52条psbA-trnH序列长度为544~656 bp，GC含量为35.8%~37.0%，遗传距离为0.000 00~0.009 47；核苷酸变异（多态性）位点数共33个，其中简约信息位点9个，单一突变位点18个，插入/缺失片段6个；单倍型数量（H）10个，单倍型多态性水平（H_d）0.749，核苷酸多态性（π）0.002 63，收集的忽地笑资源具有较高的遗传多样性。最大简约法（maximum parsimony，MP）系统树中52个居群聚为4类，并且该聚类结果与其地理分布基本一致。结论 不同产地忽地笑居群的遗传变异较大，psbA-trnH序列可作为忽地笑种源分子鉴定的依据；我国忽地笑种质资源在进化上具有明显的地域性特征。]]> 2019/1/26 16:34:05 746true 目的 建立一种无设备快速30 s提取中药材DNA的方法。方法 使用常规定性滤纸作为核酸吸附的载体，通过裂解液的裂解，释放核酸并吸附在滤纸上，利用洗脱液进行核酸纯化，即可完成不到30 s的整个核酸提取过程，吸附核酸的滤纸可直接放入反应体系进行扩增。结果 此方法可以成功提取不同药用部位的中药材核酸，提取得到的核酸经扩增验证，可获得与传统提取方法相一致的检测结果。结论 此新型快速中药材DNA提取方法简单易行、速度快、成本低，可使核酸提取变得越来越大众化，不再局限于专业人员和实验室环境，为分子生药学的应用和发展提供了新思路。]]> 2019/1/26 16:34:05 745true 目的 对栀子遗传多样性进行研究，为栀子资源保护和新品种培育提供依据。方法 采用12条ISSR和9对SRAP分子标记，以3个居群21份栀子种质资源为材料，通过多态性检测水平、遗传多样性比较和聚类分析，揭示栀子种质资源遗传多样性。结果 ISSR引物和SRAP引物分别扩增出125和80条带数，多态性条带数分别为100和74，多态性比率（PPB）分别为80.00%和92.50%，栀子居群的总体物种水平的等位基因观察数（N_a）分别为1.461 3和1.579 2，有效等位基因数（N_e）分别为1.307 7和1.342 1，Nei's基因多样性指数（H）分别为0.173 1和0.197 4，Shannon's指数（I）分别为0.254 5和0.295 9；遗传多样性分析结果表明，ISSR和SRAP标记中3个居群之间的遗传多样性（H_t）分别为0.239 1和0.289 9，种间遗传多样性（H_s）分别为0.173 1和0.197 4，基因分化系数（G_st）分别为0.276 2和0.318 9，即72.38%和68.11%的遗传变异在种群内进行，居群间基因流（N_m）分别为1.310 3和1.068 0，证明居群间存在一定的基因流动（N_m>1）；UPGMA聚类分析表明，ISSR和SRAP标记将栀子资源分为2个类群，且以SRAP分析的聚类结果更符合实际居群。结论 取样栀子种质有丰富的遗传多样性，遗传分化主要发生在居群内，SRAP标记更适合用于栀子遗传多样性分析，对栀子资源的保护和育种提供了参考。]]> 2019/1/26 16:34:06 744true 目的 依据国内甘草种质主要的形态性状和化学成分，对其遗传多样性进行综合分析。方法 收集移植于同一地点的42份多年生甘草种质的12个地上部分性状和5种化学成分含量，计算其遗传多样性指数和变异系数，运用聚类分析和主成分分析进行统计分析。结果 5种化学成分中，甘草苷含量的遗传多样性指数最高为2.05，异甘草苷含量的变异系数最大为99.50%，甘草苷含量与异甘草苷含量呈中度相关关系；在12个形态性状中，株高的遗传多样性指数最高为2.08，实际果序长的变异系数最大为37.09%，果型和株型性状的变异大于叶型性状；聚类分析将42份种质分为3类，第Ⅱ类群种质品质较优；主成分分析将17个指标简化为6个因子，累积贡献率为72.96%，因子6为代表甘草酸、甘草苷、异甘草苷的因子。结论 甘草种质主要形态性状和化学成分的遗传多样性较为丰富，筛选出V08、V10、V17、V34、V36、V38共6个品质优异的甘草种质。]]> 2019/1/26 16:34:06 743true 目的 挖掘具有药用价值的优异重楼属植物资源，缓解药用重楼资源压力，为促进重楼的可持续利用提供材料基础。方法 在四川盆周山地采集21份重楼资源，根据表型筛选出大块茎资源GQ与MH，多芽资源GK。初步形态鉴定后，利用DNA条形码ITS、psbA-trnH序列，采用Kimura双参数模型构建ML系统聚类树，进行系统发育分析。采用HPLC法检测其主要活性成分皂苷的含量，以预测其潜在药用价值。结果 形态学结合分子鉴定结果表明，GQ、GK和MH分别依次为华重楼、滇重楼和长柱重楼。GQ、GK、MH和对照滇重楼（CK）的重楼皂苷I、Ⅱ、VI、VⅡ的含量及其比例表现各异，其中总含量表现为GQ > MH > CK > GK，重楼皂苷I在GQ和MH中占比较高，分别较CK高出67.61%和73.25%，而重楼皂苷VⅡ在GK中占比最高，表现为56.38%。结论 GQ、GK和MH分别为产于四川盆周山地特定居群的华重楼、滇重楼和长柱重楼，引种至成都平原后性状表现优良，为后续的重楼的育种研究提供了材料基础；同时3个资源均具药用潜力，其中长柱重楼MH居群资源的重楼皂苷I及重楼皂苷总含量较高，为滇重楼、华重楼替代药材的筛选提供了新选择。]]> 2019/1/26 16:34:06 742true 目的 探索N、P、K肥用量及配比对野菊药用部位生长及活性成分积累的影响。方法 利用N肥（尿素，H₂NCONH₂）、P肥（过磷酸钙，CaP₂H₄O₈）、K（氯化钾，KCl）不同水平及其配比设计正交试验，在采收期观察测量野菊花部位性状，同时使用HPLC测量干燥后野菊花活性成分含量。结果 14个组合间野菊头状花序数、头状花序直径、管状花直径、单株产量、总黄酮含量及蒙花苷含量存在显著性差异，且不同矿质元素的肥效不同。适当的增大N肥浓度、K肥浓度与降低P肥浓度有利于野菊花的生长发育、提高干花产量；低浓度的N、P、K配施对野菊花总黄酮与蒙花苷含量的提高有促进作用；各处理下的野菊花蒙花苷含量均符合《中国药典》标准。结论 综合比较发现营养液浓度在N-P-K 15：0.1：3时为野菊花序生长最优N、P、K配比，总黄酮含量与蒙花苷含量在未施肥处理下最高。]]> 2019/1/26 16:34:06 741true 目的 克隆灰毡毛忍冬苯丙氨酸解氨酶（LmPAL1）基因全长序列，并进行生物信息学和表达模式分析。方法 提取灰毡毛忍冬花总RNA，通过实时荧光定量PCR（qRT-PCR）和RACE技术克隆LmPAL1基因的全长cDNA序列；运用相关软件对该基因序列进行生物信息学分析；利用qRT-PCR测定灰毡毛忍冬茎、叶和不同花期花中该基因的相对表达量。结果 克隆的LmPAL1基因开放阅读框（ORF）长度为2 145 bp，编码714个氨基酸，生物信息学分析预测为亲水性蛋白，定位于叶绿体中，包含PAL shielding结构域（527~641 aa），并且含有PAL/HAL活性中心序列GTITASGDLVPLSYIAG（196~212 aa），与其他LmPAL1具有较高的相似度；LmPAL1基因qRT-PCR结果显示，7个花期材料以金黄色开花期相对表达量较高；与茎、叶比，白色花蕾期花的相对表达量最高，叶的最低。结论 成功克隆了LmPAL1基因，为进一步研究该基因的功能以及遗传改良灰毡毛忍冬品质奠定基础，同时为探究灰毡毛忍冬绿原酸生物合成和调节机制提供了依据。]]> 2019/1/11 17:05:43 740true 目的 研究北柴胡Bupleurum chinense、狭叶柴胡B.scorzonerifolium不同组织中黄酮类成分含量及其关键酶基因表达量的关系。方法 以北柴胡及狭叶柴胡的根、茎、叶、果实为实验材料，采用HPLC法测定不同组织中黄酮类成分（芦丁、槲皮素、山柰素、异鼠李素）的含量，用紫外分光光度法测定总黄酮含量，用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）法检测黄酮类成分关键酶基因IFS、F3H、DFR表达量，用SPSS软件进行相关性分析。结果 北柴胡、狭叶柴胡地上部分（茎、叶、果实）黄酮类成分含量显著高于根，其中黄酮类成分主要为芦丁，芦丁在北柴胡叶中含量最高可达106.961 mg/g；北柴胡、狭叶柴胡中总黄酮分布有明显的组织差异，含量由高到低为叶 ≥ 果实>茎>根；北柴胡IFS、F3H、DFR基因地上部分表达量远高于根，其中IFS基因表达量与芦丁含量呈显著正相关（P<0.05），F3H基因和DFR基因的组织表达量呈显著正相关（P<0.05），而狭叶柴胡各组织IFS、F3H、DFR基因表达均处于较低水平。结论 北柴胡、狭叶柴胡黄酮类成分组织含量与关键酶基因的组织表达有一定的一致性，关键酶基因的组织差异表达调控了黄酮类成分在不同组织中的合成与积累。]]> 2019/1/11 17:05:43 739true 目的 研究18个苦玄参种群的遗传多样性及亲缘关系，为苦玄参的资源评价及开发利用提供依据。方法 采用EST-SSR引物开发技术，利用SSR分子标记，分析18个种群的遗传多样性，并基于遗传距离对其进行聚类分析，明确各种群间的亲缘关系。结果 从100对EST-SSR标记中，筛选出具有多态性的引物48对。随机抽取20对具有多态性的引物对18个种群进行扩增，共扩增出71个等位基因，平均每对引物3.55个。各引物间多态位点百分数（P）为0~40.7%，平均19.9%；多态信息含量（PIC）为0~0.794 1，平均0.397 7；Shannon信息指数（I）为0~1.814 3，平均0.808 4。观测杂合度（Obs_Het）为0~0.442 3，平均值0.212 7；预期杂合度（Exp_Het）变化范围0~0.826 9，平均值0.455 8。18个种群群内近交系数（F_is）值为-0.095 3~0.663 9，平均0.159 2；总群体内亚群间近交系数（F_it）值为0.062 6~0.858 7，平均0.537 2；遗传分化系数（F_st）为0~0.686，平均0.449 6。基因流（N_m）在0.114 4~0.759 4，平均值为0.306 1。各种群基因多样性指数（Nei）为0~0.401 6、I为0~0.620 9，广西梧州最高，云南普洱龙潭乡最低。云南景洪勐龙镇和云南景洪景哈乡遗传距离最近，仅0.031 9；广西龙州和云南勐海县打洛镇遗传距离最大，为0.963 8。在遗传距离0.321 3处，可将18个种群分成4个群体，其中广西3个种群归入同一群体，云南勐满镇、勐伦镇及勐遮镇归为同一个群体，第3个群体为云南勐海县勐宋乡，其余种群归入第4个群体。结论 18个种群遗传分化水平不一致，各种群杂合度差异较大。种群间N_m较小，群体基因交换不大；群体内存在一定的近交率，种群亲缘关系受地理隔离影响较大。]]> 2019/1/11 17:05:43 738true 目的 研究艾纳香植株不同叶位叶片中4种内源激素含量和3种抗氧化酶活性以及L-龙脑的含量与诱导剂的浓度、采样时间之间的规律。方法 以0.01、0.10、1.00、10.00 mmol/L的茉莉酸甲酯（MeJA）作为外源诱导剂，艾纳香不同叶位的叶片（嫩叶、成熟叶、老叶）为实验对象，以生长素（IAA）、脱落酸（ABA）、赤霉素（GA₃）、玉米素（ZT）4种内源激素含量和过氧化物酶（POD）、过氧化氢酶（CAT）、超氧化物歧化酶（SOD）3种抗氧化酶的活力以及活性成分L-龙脑的含量作为检测指标。结果 1.00 mmol/L的MeJA对L-龙脑的积累效果较好；不同浓度的MeJA诱导下，抗氧化酶的变化比较复杂。对于POD来说，除了10.00 mmol/L MeJA浓度处理下的艾纳香3个叶位的叶片中其含量低于对照外，其他浓度处理下，POD在72 h均显著高于对照（P<0.05）。对于CAT来说，10.00 mmol/L MeJA诱导下，艾纳香3个叶位叶片其含量在24 h时达到最高，之后随着时间的推移，CAT活力极速下降。在其他浓度处理下，嫩叶和老叶中的CAT酶活力在72 h，显著低于对照，而在成熟叶中除了0.10 mmol/L MeJA处理，均在72 h时高于对照。对于SOD来说，除了1.00 mmol/L MeJA处理的3个叶位的叶片在48 h之后，SOD含量均高于对照，且与对照组有显著差异（P<0.05）外，其余浓度处理下的SOD均低于对照。低浓度的MeJA（≤ 0.10 mmol/L）可以促进艾纳香叶片中的IAA、GA₃和ZT的积累，而高浓度的MeJA（≥ 10.00 mmol/L）促进ABA的积累。结论 艾纳香植株在外源MeJA（1.00 mmol/L）诱导下可以促进活性成分积累，为其栽培生产提供理论依据。]]> 2019/1/11 17:05:43 737true 目的 对3个不同产地山银花和金银花中绿原酸、总黄酮含量及抗氧化活性进行分析，并比较之间的差异。方法 对绿原酸提取条件进行优化，最佳提取条件为65℃下60%乙醇溶液按料液比1：20超声提取30 min；总黄酮最佳提取条件为65℃下用60%甲醇溶液按料液比1：10超声提取30 min。分别采用高效液相色谱法和紫外分光光度法对样品的绿原酸和总黄酮进行含量测定，并用DPPH自由基清除率来检测山银花、金银花的抗氧化活性。结果 建立了良好的绿原酸和总黄酮含量分析方法，绿原酸在0.119~1.190 mg/mL内线性关系良好，r²为0.999 2（n=6）；总黄酮在8.48~50.88 μg/mL内线性关系良好，r²为0.999 5（n=6）。湖南产地山银花绿原酸量、总黄酮量及自由基清除率分别为3.99%、13.43%、62.41%。重庆产地山银花绿原酸量、总黄酮量及自由基清除率分别为3.29%、10.08%、51.48%。广西产地金银花绿原酸量、总黄酮量、自由基清除率分别为2.55%、7.10%、39.51%。结论 提出了结合化学成分分析和抗氧化性活性来比较不同产地山银花和金银花之间区别的分析方法，从"谱-效"结合思路，为山银花和金银花质量控制及鉴别提供一种新的模式。]]> 2019/1/11 17:05:43 736true 目的 建立并识别不同产地白三七药材HPLC指纹图谱，为其质量控制及标准制定提供参考。方法 采用HPLC法建立白三七指纹图谱，同时应用相似度评价、聚类分析和主成分分析（PCA）对实验数据进行识别，以分析不同产地白三七药材间及同科同属5种药材的相似性及差异性，并通过总量统计矩法对白三七药材共有峰进行定性定量分析。结果 白三七指纹图谱共标定16个共有峰，并指认了人参皂苷Rg₁、Re、Rb₁及竹节参皂苷V、IV、IVa色谱峰；其中竹节参皂苷V和IV在不同批次白三七样品中的质量波动较小；各产地白三七样品除产自四川大凉山样品（S7）外相似度在0.90以上；聚类分析及主成分分析均将白三七样品分为3类；五加科人参属5种药材成分总量统计矩参数差异较大。结论 建立的白三七HPLC指纹图谱和化学识别模式可为其质量控制和区分同科同属5种药材提供科学依据。]]> 2019/1/11 17:05:44 735true 目的 筛选适用于不同生长年限和不同部位的栽培远志实时荧光定量PCR分析（quantitative real time PCR，qRT-PCR）的稳定内参基因，为远志体内各个基因表达分析提供合适内参基因。并对4个细胞色素P450单加氧酶（cytochrome P450 monooxygenase，P450s）基因在上述远志样品中的差异表达进行分析，明确4个P450s基因在栽培远志中的时空表达分布。方法 通过qRT-PCR获取Tubulin 1、Tubulin 2、Elongation 1、Elongation 2、Actin 1、Actin 2、GAPDH和cdc-42 8个候选内参基因在上述远志样品中的熔解曲线与C_t值；利用软件geNorm和NormFinder对候选内参基因的表达稳定性进行评价；通过qRT-PCR分析4个P450s基因CYP709B2、CYP71AP39、CYP88A85、CYP714E38在上述远志样品中的相对表达情况。结果 geNorm分析结果表明，在远志（1~3年生）根、茎、叶、花中稳定表达的为Tubulin 2与Elongation 1；NormFinder结果显示，Elongation 1是最稳定的内参。CYP709B2、CYP71AP39基因在远志茎、叶（1~3年生）中的mRNA表达量最高，在根与花中的表达量则较少。而CYP88A85、CYP714E38基因则在远志根（1~3年生）中的mRNA表达水平较高。结论 Elongation 1适合作为栽培远志体内基因表达分析的内参基因。栽培远志中的P450s基因在远志根、茎、叶、花中的表达趋势不一致。]]> 2019/12/26 10:53:50 734true 目的 筛选与评价适用于云南草果居群的DNA条形码。方法 以云南省草果种质资源为样本对ITS、psbA-trnH、matK、rbcL和ycf1 5条DNA条形码常用序列进行筛选与评价，并对草果居群进行扩增，测序，测序序列用Genestar进行拼接，然后用Mega进行数据处理，并对草果多样性及其鉴定进行分析。结果 引物ITS5和ITS4对草果的扩增片段长度大约为520 bp；rbcLa-F和rbcLa-R对草果的扩增片段长度大约为498 bp；引物ycf1-bF和ycf1-bR对草果的扩增片段长度大约为800 bp；引物psbA-trnH-1F和psbA-trnH-1R对草果的扩增片段长度大约为400 bp；引物matK-2F和matK-2R对草果的扩增片段长度大约为470 bp。扩增及测序的成功率均较高，结果大多可用。通过对草果ITS、psbA-trnH、matK和ycf1序列的扩增结果进行分析，草果与其他豆蔻属植物都可以被清晰地区分开；ITS序列所有样本分为MG5白花草果居群和其他居群；psbA-trnH序列所有样本分为MG5白花草果居群，MG6黄花草果居群和其他居群；matK序列所有样本分为MG6黄花草果居群和其他居群，MG5白花草果样本扩增失败；ycf1序列所有样本分为MG6黄花草果居群和其他居群，MG5白花草果居群与其他22个草果居群聚为一支；rbcL序列对所有样本的扩增均一致。结论 ITS、matK、psbA-trnH及ycf1序列均能将草果与其他同属植物进行准确区分；MG6的matK、psbA-trnH及ycf1序列发现了序列位点的变异，为草果品种的选育做出贡献。ITS和psbA-trnH序列可将黄花和白花草果序列区分开；草果白花黄花所有样本rbcL序列无任何变异，且用rbcL序列无法鉴别草果与其他同属植物，可将其舍去。]]> 2019/12/26 10:53:50 733true 目的 采用流式细胞术与K-mer分析方法对苦豆子基因组大小及杂合率进行估测，为其全基因组测序提供参考。方法 以大豆为内标，通过流式细胞仪检测大豆与苦豆子细胞DNA含量的倍数关系，计算苦豆子的基因组大小。采用二代测序技术进行苦豆子基因组调查测序，使用K-mer分析估测苦豆子基因组大小与杂合率。结果 采用流式细胞术测得苦豆子基因组大小约为1 749 Mb。K-mer分析结果表明，苦豆子基因组大小约为1 648 Mb，基因组杂合率为1.12%，杂合率较高。结论 苦豆子基因组大小约为1.7 Gb，杂合率较高，后续研究可采用三代PacBio进行80~100 X深度的测序开展全基因组测序研究。]]> 2019/12/26 10:53:50 732true 目的 研究不同梯度水平氮、磷、钾肥对华重楼根茎的产量和品质的影响，确定华重楼植物的最适施肥方案，为合理施肥提供科学依据。方法 采用3因素5水平2次通用旋转组合设计进行田间试验，研究氮、磷、钾肥配施对华重楼根茎的产量总皂苷含量、灰分、水分和浸出物的影响。结果 建立的回归方程均达到显著水平；当施用氮肥41.66~52.60 kg/hm²、磷肥181.38~244.38 kg/hm²、钾肥24.16~35.20 kg/hm²时，华重楼根茎的增重率大于81.72%；当施用氮肥45.48~53.83 kg/hm²、磷肥179.98~236.83 kg/hm²、钾肥29.80~39.95 kg/hm²时，华重楼根茎的总皂苷含量大于11.09%；当施用氮肥28.01~37.79 kg/hm²、磷肥127.18~209.18 kg/hm²、钾肥25.27~34.09 kg/hm²时，华重楼根茎的浸出物含量大于14.31%。结论 氮、磷、钾肥配施有利于华重楼根茎的增重率、总皂苷含量和浸出物含量的提高，华重楼植物的最佳施肥量为氮肥37.79~45.48 kg/hm²、磷肥181.38~209.18 kg/hm²、钾肥29.80~34.09 kg/hm²。]]> 2019/12/26 10:53:50 731true 目的 采用电子鼻技术建立气味指纹图谱，对不同产地木香进行定性鉴别。方法 收集8个不同产地木香样品48批，采用电子鼻获取各样品气味信息，采用基于Fisher鉴别准则的LDA算法和非线性降维LLE+SMA算法区别不同产地木香。结果 基于Fisher鉴别准则的LDA算法并不能对不同产地木香进行很好地区分，部分产地样品存在大量重叠现象，而采用LLE+SMA算法判别效果极为显著，可以完全把8个不同产地木香区分开。结论 电子鼻技术应用于不同产地木香的区分是可行的，为木香质量评价提供一种新的思路与方法，具有重要理论价值与实际意义。]]> 2019/12/26 10:53:50 730true 目的 在同时测定人参花中7种人参皂苷含量的基础上，建立7种人参皂苷成分一测多评方法，验证一测多评方法在人参花中人参皂苷含量测定上的可行性。方法 采用HPLC-UV法，以10批不同来源的人参花药材为研究对象，以人参皂苷Re为内参物测定其与人参皂苷Rg₁、Rg₂、Rb₁、Rc、Rb₂、Rd的相对校正因子，计算出各皂苷的含量，比较计算值与外标法实测值的差异。结果 人参花中6种人参皂苷Rg₁、Rg₂、Rb₁、Rc、Rb₂、Rd的相对校正因子分别为1.07、1.05、0.81、0.80、0.64、0.84，10批药材中6种人参皂苷的相对校正因子重复性良好，含量用一测多评方法测定与采用外标法测定时的实测值差异不显著。结论 在短缺人参皂苷对照品的情况下，可采用一测多评法方法，通过相对校正因子测定人参花中人参皂苷Rg₁、Re、Rg₂、Rb₁、Rc、Rb₂、Rd的含量。]]> 2019/12/26 10:53:50 729true 目的 对参与桑黄三萜合成途径的关键酶羟甲基戊二酰辅酶A合酶（3-hydroxy-3-methylglutary CoA synthase，HMGS）进行基因全长克隆、分子特性及差异表达分析研究。方法 采用RACE技术克隆HMGS基因全长，并对其序列进行生物信息学分析；构建桑黄HMGS基因到表达载体pET-32a（+）上，转化大肠杆菌BL21（DE3），IPTG诱导表达后SDS-PAGE检测；用荧光定量PCR的方法分析其不同发育阶段表达特性。结果 HMGS基因cDNA全长为1 930 bp，包含1个1 458 bp的完整开放阅读框，编码485个氨基酸。该基因编码蛋白的相对分子质量约为52 750，理论等电点是5.60，为亲水性蛋白，不具有跨膜结构，不含信号肽序列；系统发育分析表明，桑黄HMGS与地中海拟层孔菌Fomitiporia mediterranea中的HMGS同源性最高，属于一个分支。SDS-PAGE结果显示该蛋白的大小与预测的蛋白相对分子质量基本一致。HMGS基因的转录水平在桑黄不同发育阶段呈动态变化，该基因在菌丝体阶段的转录水平要高于原基及子实体阶段的转录水平。HMGS基因的最高转录水平出现在第14天，为对照第5天的2.33倍。结论 HMGS基因的分子鉴定为进一步解析该基因在桑黄三萜类物质合成代谢途径中的分子调控作用奠定基础。]]> 2019/12/10 15:41:55 728true 目的 应用ITS2条形码鉴定东北透骨草及其混伪品，为东北透骨草药材鉴定提供新方法。方法 提取35份东北透骨草及其混伪品的基因组DNA，通过PCR扩增ITS2序列并进行双向测序，测序结果提交至GenBank；从GenBank下载13种东北透骨草及其混伪品ITS2序列42条；对提交与下载的77条序列，应用MEGA 7.0软件进行序列比对，计算种内和种间遗传距离，构建Neighber-jioning（NJ）系统进化树，并预测ITS2二级结构。结果 东北透骨草3种基原的种内最大K2P遗传距离均远远小于其与混伪品的种间最小K2P遗传距离；NJ树结果显示东北透骨草及其混伪品药用植物均可明显区分，表现出良好的单系性；比较ITS2二级结构发现，东北透骨草与其混伪品在4个螺旋区的茎环数目、大小、位置以及螺旋发出时的角度均有明显差异。结论 ITS2序列作为DNA条形码能稳定、准确鉴别东北透骨草，为保障安全用药提供了新的技术手段。]]> 2019/12/10 15:41:56 727true 目的 分析内生真菌菌株GXRz2、GXRz3和GXRz10对铁皮石斛多糖含量和多糖合成途径关键酶尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶（UDP-glucose pyrophosphorylase，UGPase）基因表达以及生物碱含量和生物碱合成途径中关键酶3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶（3-hydroxy-3-methylglutaryl coenzyme-A reductase，HMGR）、法尼基焦磷酸合酶（farnesyl pyrophosphate synthase，FPS）基因表达的影响。方法 铁皮石斛幼苗施加内生真菌菌液，采用分光光度法测定铁皮石斛多糖和生物碱含量。以18 S rRNA为内参照基因，荧光定量PCR（qRT-PCR）法检测多糖、生物碱关键酶基因表达的变化。结果 铁皮石斛活性成分多糖含量较高，主要集中于茎，根中最低；而生物碱含量较低，主要存在于叶，根中最低，3株内生真菌处理均能在一定程度上促进铁皮石斛多糖及生物碱的积累。qRT-PCR技术检测UGPase、HMGR和FPS基因在不同内生真菌处理下的相对表达，结果显示，内生真菌GXRz3和GXRz10均可显著提高铁皮石斛UGPase、HMGR和FPS基因的表达量；其中，多糖合成途径中，UGPase基因在茎中的相对表达量最高，叶次之，根中最少；生物碱合成途径中，HMGR基因在茎中的相对表达量最高，叶次之，根中最少，而FPS基因在叶中的相对表达量最高，茎次之，根中最少。结论 内生真菌可能通过调控UGPase的表达，影响多糖的合成，结合多糖积累情况，推测UGPase可能是铁皮石斛多糖合成途径中的关键酶；内生真菌可能通过调控HMGR、FPS的表达，影响生物碱的合成，而结合生物碱积累情况，推测FPS可能是生物碱合成途径中的关键酶。]]> 2019/12/10 15:41:56 726true 目的 为了解射干内生真菌Fusarium proliferatum的遗传多样性。方法 选用了52条ISSR引物和90条SRAP引物对17株射干内生真菌F.proliferatum进行了遗传多样性分析。筛选出了27条ISSR引物和38条SRAP引物可用于遗传多样性分析。结果 结果，27条ISSR引物共扩增出了178个条带，其中131条（63%）具有多态性；38条SRAP引物能够扩增出357条稳定性较好的条带，其中323条（91%）具有稳定性差异。27条ISSR引物PCR扩增产物的多态性信息量（PIC）介于0.19~0.91，平均为0.70；38条SRAP引物PCR扩增产物的多态性信息量PIC介于0~0.93，平均为0.73。聚类分析结果表明，根据27个ISSR、38个SRAP及ISSR+SRAP遗传位点分析得出遗传相似系数变化范围分别为0.73~0.99、0.72~0.95和0.73~0.95，平均分别为0.84、0.85和0.85。根据材料间的遗传相似系数聚类，三者之间的聚类有较小的差异，但总体上，17株内生真菌被聚为3大类，分离自根的内生真菌F.proliferatum聚为一类，分离自茎和叶的F.proliferatum聚集于另外两类。研究表明，内生真菌F.proliferatum遗传相似性较大，其亲缘关系较近，与传统方法鉴定出的结果一致。结论 采用分子标记技术比传统的方法鉴定更为有效，同时，ISSR和SRAP标记可更真实地反映射干内生真菌F.proliferatum的遗传多样性，为该内生真菌在分子生物技术方面的研究等提供一定参考。]]> 2019/12/10 15:41:56 725true 目的 建立不同产地金银花中7种有机酸、1种黄酮及2种环烯醚萜类成分的含量测定方法。方法 利用UPLC测定不同产地的金银花中10种成分含量。采用Agilent Eclipise Plus C₁₈（50 mm×2.1 mm，1.8 μm）色谱柱，流动相为0.1%磷酸水溶液-甲醇；梯度洗脱，体积流量为0.3 mL/min，柱温30℃。结果 建立了UPLC同时测定金银花药材中7种有机酸、1种黄酮及2种环烯醚萜类成分的方法。采用主成分分析（PCA）及偏最小二乘法（PLS-DA）分析了所收集不同产地金银花10种成分的分布规律及特点，山东、江苏及陕西3个产区各自聚在一大类。结论 该方法稳定、可行，为更全面地评价金银花质量提供参考。]]> 2019/12/10 15:41:56 724true 目的 研究不同产地赤芍的指纹图谱，测定其中没食子酸、芍药内酯苷、芍药苷、苯甲酸、苯甲酰芍药苷的含量并对其进行系统聚类，应用灰色关联度分析产地与含量的关系，为赤芍的质量评价提供参考。方法 采用高效液相色谱法构建21个不同产地赤芍药材指纹图谱，并利用主成分分析及系统聚类分析对测定结果进行分类，灰色关联度法处理各指标性成分，计算其相对关联度。结果 建立了21个产地赤芍的HPLC指纹图谱，标定11个共有峰，指认其中5个（没食子酸、芍药内酯苷、芍药苷、苯甲酸、苯甲酰芍药苷）共有峰，北赤芍相似度均大于0.9，川赤芍相似度均小于0.9，主成分分析结合聚类分析将其分为二类，灰色关联度分析结果显示相对关联度（r_i）最大的为甘肃陇南，其次为四川甘孜。结论 不同产地赤芍具有较大差异，通过建立指纹图谱，主成分结合系统聚类分析和灰色关联度分析方法对21个产地赤芍综合评价，为赤芍质量评价提供科学依据。]]> 2019/12/10 15:41:56 723true 目的 解析金铁锁叶绿体基因组结构和确定其在石竹科的系统位置。方法 基于二代测序技术Illumina Hiseq平台，对金铁锁叶绿体基因组进行测序，使用生物信息学分析软件进行组装和注释，并以苋科植物千穗谷为外类群，通过RAxML 8.2.11软件构建ML系统发育树，分析石竹科属间的亲缘关系。结果 金铁锁叶绿体基因组总长为153 977 bp。LSC和SSC区被2个反向重复区域IRs隔开，其大小分别为84 385、17 526、26 033 bp。除去重复后，共编码109个基因，包含75个PCGs，30个tRNA和4个rRNA基因。总的CG含量为36.5%，IR区（42.4%）GC含量明显高于LSC（34.2%）和SSC（30.1%）区。在系统进化树中，金铁锁与长萼瞿麦互为姊妹类群，且各节点的支持率较高，能够清晰反映属间的亲缘关系。结论 本研究对金铁锁叶绿体基因组结构进行了解析，并探讨了石竹科属间系统发育关系，为金铁锁种质资源综合评价、系统进化等研究提供有效的科学数据。]]> 2019/11/29 9:41:48 722true 目的 探究控制青藤碱含量的表达基因、青藤碱合成途径中的控制位点以及表达路径。方法 利用HPLC法对6个种群共49株青风藤的根和茎分别进行了青藤碱含量的测定，选定青藤碱含量差异倍数大的2个种群，即陕西宝鸡与贵州遵义，分别选取其中最具代表性的青风藤植株，并取其根和茎进行转录组测序，命名为HR/LR、HS/LS。结果 将clean reads进行拼接得到355 201个转录本，其中包括275 491个Unigene。在HR/LR和HS/LS中差异基因分别有23 562和37 143个。GO分析显示这些差异基因功能明显富集在天冬氨酸型肽链内切酶活性与天冬氨酸肽酶活性上，推测这些差异基因可能编码这2种酶。KEGG富集结果表明HR与LR以及HS与LS 2组中的差异基因共同参与糖类代谢、蛋白质与细胞膜结合、维生素C合成。qRT-PCR验证了异喹啉生物碱合成途径上游关键基因表达情况，发现与青藤碱的积累呈正相关。结论 本研究初步了解了造成青藤碱含量差异的分子机制，为深入了解青藤碱积累规律与合成途径提供了参考。]]> 2019/11/29 9:41:48 721true 目的 获得野生唐古特大黄叶绿体全基因组信息特征，并对相关物种亲缘关系进行研究。方法 本实验采用Illumina高通量测序技术构建了唐古特大黄叶绿体全基因组图谱。结果 唐古特大黄基因组大小为161 054 bp，大（LSC）、小（SSC）单拷贝区大小分别为86 441 bp和12 745 bp，反向互补重复区（IR）大小为30 934 bp，共注释叶绿体基因132个，包括88个蛋白编码基因，36个转运RNA基因和8个核糖体RNA基因，其中每个IR区19个。结论 选取唐古特大黄在内的7个蓼科物种、4个其他科物种构建系统发育树，形态极其相似的唐古特大黄与掌叶大黄在分子上亲缘关系也最近，但rpl32等基因存在差异位点，对有效区分近缘物种提供新依据。]]> 2019/11/29 9:41:48 720true 目的 建立三斑海马Hippocampus trimaculatus的COI、16 S rRNA和ATP6的条形码序列数据库，应用DNA条形码技术从分子水平快速准确鉴定三斑海马和其他正伪品海马，探讨海马属药材鉴定的新方法。方法 提取三斑海马药材的基因组DNA，PCR扩增COI、16 S rRNA和ATP6的序列并进行双向测序，所得序列采用软件Codon Code Aligner V4.2对测序峰图进行校对拼接，应用Clustal X软件进行序列比对，MAGA 5.0软件计算三斑海马的种内种间遗传距离（Kimura 2-Parameter，K2P），构建邻接树（Neighbor-joing tree，NJ Tree）聚类分析不同品种海马药材的鉴定结果。结果 获得的三斑海马线粒体COI、16 S rRNA、ATP6序列长度分别649、572、603~605 bp，其中3个条形码序列的种内变异位点碱基数分别为8、4和15，种内的变异率较小，COI、16 S rRNA、ATP6序列的平均种内K2P遗传距离0.002、0.001和0.006，均远小于三斑海马的种间K2P距离；NJ树结果显示三斑海马与其他海马均可明显区分，具有良好的单系性。结论 COI、16 S rRNA、ATP6序列作为条形码均可以鉴定三斑海马及其他混伪品海马药材，为动物类药材及其混伪品和近源物种的分子鉴定提供依据，为对保障海马临床用药安全提供了新的技术手段。]]> 2019/11/29 9:41:48 719true 目的 评价以ITS2和matK序列作为DNA条形码对峨眉山区唇形科药用植物的鉴定效果。方法 从峨眉山区采集23种唇形科药用植物样本，提取DNA，PCR扩增ITS2序列，并从Genbank上分别下载54与51条唇形科植物的ITS2及matK序列；使用MEGA 5.0软件计算全部序列的种间、种内遗传距离及序列变异位点，构建Neighbor Joining（NJ）系统进化树，最后开展barcoding gap分析。结果 峨眉山唇形科药用植物的ITS2序列长度为190~237 bp，GC含量为53%~73%，具有较为明显的barcoding gap，对唇形科植物的识别率为94%，而matK序列的barcoding gap不显著，有明显重叠现象，对唇形科植物的识别率为96%。结论 ITS2从种水平上对唇形科植物有更好的鉴定能力，但matK序列对唇形科植物的识别率更高，因此，以ITS2为主，matK序列为辅的鉴定方法能够对唇形科药用植物进行快速、准确的鉴定和识别，准确阐明物种之间的亲缘关系，对峨眉山区唇形科药用植物资源的有效保护和合理开发提供了理论依据。]]> 2019/11/29 9:41:48 718true 目的 基于抗炎活性成分研究苗药羊耳菊药材质量控制方法。方法 建立羊耳菊有效组分中代表性、特征性化学成分作为指标成分的多指标定量指纹图谱研究。通过多指标成分定量结合指纹图谱分析评价贵州不同产地羊耳菊的质量。结果 建立了35批贵州产羊耳菊的高效液相指纹图谱和多指标含量测定方法；指认了羊耳菊药材液相色谱指纹图谱17个共有峰中的8个，结果显示相似度在0.898~0.997，以8个化学成分作为指标，对其进行含量测定，结果显示绿原酸、新绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸B、异绿原酸A、异绿原酸C、洋蓟素、木犀草苷的质量分数分别为0.353~3.765、0.056~0.495、0.086~0.526、0.306~2.526、0.861~7.353、0.729~4.268、0.052~0.424、0.148~1.102 mg/g。结论 所建立的基于抗炎活性成分的指纹图谱和多指标含量测定研究方法，灵敏度高、准确度好、稳定可靠，可用于苗药羊耳菊药材的质量控制。]]> 2019/11/29 9:41:49 717true 目的 克隆铁皮石斛Dendrobium officinale类受体激酶（receptor-like kinase，RLK）基因，命名为DoRLK（GenBank注册号ANC68272.1）。方法 采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）和RACE技术获取基因全长；利用生物信息学软件预测蛋白的理化性质、结构域和亚细胞定位等分子特性；用软件DNASTAR 6.0和MEGA 7.0分别进行氨基酸多序列比对和进化关系分析；借助定量PCR检测基因表达模式。结果 DoRLK基因cDNA全长1 715 bp，编码1条由423个氨基酸组成的多肽，相对分子质量47 800.88，等电点为9.47。DoRLK蛋白包含RLK蛋白家族的1个蛋白激酶结构域（85~370）和一个跨膜基序（250~270）。DoRLK基因与多种植物RLK基因相似性很高（43.62%~63.35%），与小兰屿蝴蝶兰、海枣、芦笋等植物亲缘关系较近。DoRLK基因具有组织表达特异性，其转录本在石斛根中表达量较高，分别为叶和茎中的2.22、2.75倍。结论 DoRLK基因的分子鉴定为进一步揭示RLK在铁皮石斛与环境互作中的功能奠定基础。]]> 2019/11/15 9:04:35 716true 目的 研究不同强度的白光、红光和蓝光对丹参根系形态和有效成分积累的影响。方法 分别利用4个光照强度的白光、红光和蓝光处理丹参植株，测定各处理组中丹参侧根数、侧根直径等根系形态学指标和7种有效成分的含量。结果 在选定的光强范围内，不同的光质对丹参地上部分形态指标的影响不同。100、200 μmol/（m²·s）的红光可以促进侧根的发生，200、300 μmol/（m²·s）的蓝光则可显著提高根生物量。不同成分的积累对光质和光强的响应不同，丹参酮类成分的合成积累较酚酸类成分对光响应更为敏感。结论 光对丹参根系形态和有效成分积累具有双重的调控作用，合理地利用光质和光强是提高丹参药材产量和品质的有效途径之一。]]> 2019/11/15 9:04:35 715true 目的 建立熟三七粉的HPLC特征图谱，并对其8种稀有皂苷的含量进行测定，结合偏最小二乘法判别分析（PLS-DA）和聚类分析，为熟三七粉质量的科学评价提供方法。方法 采用Agilent Zorbax SB-C₁₈（250 mm×4.6 mm，5 μm）色谱柱，以乙腈（A）-水（B）为流动相洗脱梯度：0~10 min，19%~33% A；10~30 min，33%~38% A；30~45 min，38%~50% A；45~60 min，50%~60% A，体积流量1.0 mL/min，检测波长203 nm，柱温40℃，进样量10 μL，建立熟三七粉的HPLC特征图谱，并对其人参皂苷20（S）-Rh₁、20（R）-Rh₁、Rk₃、Rh₄、20（S）-Rg₃、20（R）-Rg₃、Rk₁和Rg₅共8种指标性成分定量测定方法进行方法学考察，对63批熟三七粉进行含量测定。结果 建立了熟三七粉的HPLC特征图谱，共标定19个共有峰。同时测定8种稀有皂苷成分含量，色谱峰达到了较好的分离，且线性关系良好，8种皂苷线性回归方程的相关系数分别为0.999 9、0.999 5、0.999 4、0.999 3、0.999 1、0.999 3、0.999 1、0.999 3；平均加样回收率为95%~105%；RSD值均低于2%。63批样品按色泽分为棕红色与淡黄色2组，棕红色组质量明显优于淡黄色组。结论 熟三七粉的质量优劣与色泽有关，该方法灵敏、准确、重现性好，可为熟三七粉的质量评价提供参考。]]> 2019/11/15 9:04:35 714true 目的 基于指纹图谱和多成分含量测定对丹参药材皮部和木部的化学成分进行分析与比较，阐明丹参药材不同部位活性成分的分布规律。方法 采用高效液相色谱法对不同批次的丹参皮部和木部样品进行分析，分别建立丹参皮部和木部指纹图谱；在此基础上，对丹参皮部和木部样品中的丹参素、迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸B、二氢丹参酮I、隐丹参酮、丹参酮I和丹参酮II_A 8个活性成分进行含量测定，并结合聚类分析、主成分分析和正交偏最小二乘判别分析等化学计量学方法对丹参皮部和木部化学成分进行比较。结果 建立了丹参药材皮部和木部化学指纹图谱，共标定了10个共有峰；含量测定和化学计量学分析结果表明，丹参皮部和木部样品的化学成分存在差异，其中丹酚酸类成分差异不大，而丹参酮类成分差异较大，丹参皮部样品中丹参酮类成分明显高于丹参木部样品。结论 通过指纹图谱结合多成分含量测定方法，明确了丹参药材不同部位活性成分的分布差异，为丹参药材资源的开发和利用提供了科学依据。]]> 2019/11/15 9:04:35 713true 目的 建立石斛7种化学成分反相高效液相色谱-紫外光谱（RP-HPLC-UV）检测方法，探寻21种石斛属植物中的化学成分组成差异联系，为石斛质量控制和资源开发提供参考。方法 采用Agilent 1200高效液相色谱仪，XDB-C₁₈色谱柱，进样量5 μL，根据不同化学成分选择流动相，采用SPSS 20.0软件进行主成分分析和聚类分析。结果 21种石斛中7种化学成分组成及含量差异明显，有10种石斛未检测出毛兰素，其余11种石斛种质中鼓槌石斛的毛兰素量显著高于其他种；12种石斛未检测出槲皮素，11种石斛未检测出没食子酸，4种石斛未检测出香草醛，1种石斛未检测出柚皮素，21种石斛均检测出丁香酸和香豆素成分，其中以尖刀唇石斛香豆素含量显著高于其他种；通过主成分分析显示21种石斛化学成分在三维空间分布散乱，在类间距离为5左右时才能将21种石斛聚为6类，因此不同的石斛种在这7种化学成分组成及含量上存在明显区别，在使用这7种成分表征药理药效功能时不同石斛应当区别对待。结论 建立的RP-HPLC-UV法检测7种化学成分能在石斛质量控制以及不同种质资源开发策略方面提供参考。]]> 2019/11/15 9:04:35 712true 目的 建立网果酸模Rumex chalepensis中6个成分的含量测定方法。方法 采用HPLC法，色谱柱Agilent Extend-C₁₈（250 mm×4.6 mm，5 μm），254 nm波长处二极管阵列检测器检测，流动相为甲醇-0.1%甲酸，梯度洗脱，体积流量1 mL/min，柱温25℃，进样量5 μL。结果 对照品大黄酚-8-O-β-D-葡萄糖苷、大黄素-8-β-D-吡喃葡萄糖苷、酸模素、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚分别在208~3 120、22.40~336.35、178.9~2 908.8、16.7~250.8、104.4~1 566.0、45.2~677.7 ng，线性关系良好，平均回收率（n=6）分别为97.66%、97.10%、98.78%、97.38%、102.48%和95.51%。16批网果酸模中大黄酚-8-O-β-D-葡萄糖苷、大黄素-8-β-D-吡喃葡萄糖苷、酸模素、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚的质量分数分别为0.6~7.1、0~2.7、1.0~6.5、0.1~0.6、0.7~4.3、0.1~0.4 mg/g；对比分析不同生长年限、不同采收期、不同地块样品含量，2年生网果酸模初春或夏末初秋采集，6个成分含量总和较高，为12.2 mg/g。结论 所建立的方法可用于同时测定网果酸模中6个成分含量，确定了网果酸模的采收年限和季节，为网果酸模药材质量评价标准的制定提供了科学依据。]]> 2019/11/15 9:04:35 711true 目的 分析款冬转录组数据的简单重复序列标记（SSR）位点信息并设计特异引物，以期为款冬分子标记辅助育种提供有力工具。方法 对款冬转录组测序数据库中长度1 kb以上的18 938条unigene，利用MISA软件搜索SSR位点信息，利用Primer3设计引物，并随机选择55对SSR引物分析18份不同来源款冬材料的多态性。结果 共搜索到4 688个SSR位点，分布于3 844条unigene中，SSR出现频率为24.75%，平均7 979 bp含1个SSR位点。SSR位点中三核苷酸重复类型出现频率最高（37.12%），其次是单核苷酸重复（32.36%）和二核苷酸重复（28.20%）。共有60种重复基元，其中A/T（31.42%）、AG/CT（12.80%）、ATC/ATG（9.62%）是优势重复基元。随机选择55对引物进行多态性验证分析，其中42对有扩增产物，14对具稳定可重复的多态性；利用UPGMA作图，将18份样品分为3类。结论 款冬转录组中SSR位点出现频率高，类型丰富，多态性高，为其遗传多样性分析、遗传图谱构建和分子标记辅助育种等研究提供了候选分子标记。]]> 2019/11/5 14:37:49 710true 目的 研究重楼属植物遗传多样性，并为其种质资源的快速鉴定提供有效方法。方法 采用CDDP分子标记方法对13份不同的重楼种质资源的遗传多样性进行分析，并按照CODE128条形码编码规则为重楼属植物进行编码。结果 11条引物共扩增了80个条带，其中多态性条带73个，多态性比率91.25%，等位基因数（N_a）为1.912 5，有效等位基因数（N_e）为1.589 6，Nei's遗传多样性指数（H）为0.342 3，Shannon信息指数（I）为0.507 0。UPGMA聚类分析表明，重楼属植物遗传多样性丰富。在CDDP分子标记的基础上依据CODE128条形码编码规则为重楼属植物构建了条形码分子身份证。结论 重楼属资源遗传多样性丰富，CDDP分子标记可用于重楼属种质资源的鉴定及遗传多样性分析，且构建的条形码分子身份证检测灵敏、快捷，可用于相关科研工作和工业生产中重楼属植物的鉴定。]]> 2019/11/5 14:37:50 709true 目的 建立木香药材UPLC指纹图谱及3，5-O-二咖啡酰基奎宁酸含量测定方法，对不同产地木香的质量进行较全面的评价。方法 采用YMC Trait C₁₈（100 mm×2.1 mm，1.9 μm）色谱柱，以乙腈-0.05%磷酸水溶液为流动相梯度洗脱，指纹图谱检测波长为254 nm，3，5-O-二咖啡酰基奎宁酸含量测定检测波长为327 nm，柱温30℃，体积流量0.30 mL/min。采用相似度评价、聚类分析和主成分分析对13批木香药材指纹图谱进行研究。结果 建立了木香药材的UPLC指纹图谱，确定了8个共有峰；相似度评价、聚类分析和主成分分析结果表明，13批木香药材质量存在差异，不同产地以及同一产地药材均有一定差异。结论 本研究为木香药材的质量控制提供了较为全面、有效的快速评价方法。]]> 2019/11/5 14:37:50 708true 目的 基于UPLC-QTOF/MS代谢组学技术，鉴定不同区段鹿茸差异代谢小分子物质，结合组织学形态观察，分析差异代谢物参与的代谢途径。方法 梅花鹿标准三叉茸冻干处理，切片观察组织形态学表现，从上至下分为3个区段，分别为VAU、VAM和VAB，基于UPLC-QTOF/MS技术，结合主成分分析及最小二乘判别分析方法，解析鹿茸不同区段之间的差异代谢物。结果 共鉴定出鹿茸中代谢小分子物质124种，基于差异代谢物中差异倍数（FC）数值高于2.2进一步筛选出在鹿茸不同区段相对含量差异较大的16种物质，分别对比了不同区段中各物质的相对含量。结论 基于非靶向代谢组学分析冻干鹿茸代谢小分子物质组成，通过相邻分区比较发现，各分区之间内源性代谢物有一定差异，为揭示其功能提供了数据支持。]]> 2019/11/5 14:37:50 707true 目的 建立委陵菜的指纹图谱及多指标含量测定方法，为委陵菜的质量标准提升提供实验依据。方法 采用HPLC法，色谱柱Diamonsil C₁₈（250 mm×4.6 mm，5 μm），以乙腈-0.1%磷酸水为流动相，梯度洗脱；体积流量1.0 mL/min；柱温25℃；进样量10 μL；检测波长260 nm；建立10批委陵菜的指纹图谱，用中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件（2004版）进行评价，聚类分析将10批药材分为2类；建立同时测定委陵菜药材中没食子酸、槲皮素及山柰酚3种成分的含量测定方法。结果 建立了委陵菜的HPLC指纹图谱，共标定了12个共有峰；没食子酸、槲皮素和山柰酚线性关系良好，相关系数（r）均大于0.999。精密度、稳定性、重复性的RSD均小于3%，平均回收率分别为97.44%、97.64%、99.19%。结论 建立的委陵菜的指纹图谱及多指标含量测定方法专属性强、重复性好，能有效地控制委陵菜的内在质量，为提高委陵菜的质量评价方法提供参考。]]> 2019/11/5 14:37:51 706true 目的 采用HPLC色谱法建立地黄指纹图谱，优化梓醇含量的测定方法，为地黄药材质量标准的提升提供依据。方法 选用Atlantis T3-特色硅胶C₁₈色谱柱，流动相为0.1%磷酸水-乙腈，检测波长为203 nm，体积流量1.0 mL/mL，柱温为35℃，梓醇为对照峰，建立20批地黄指纹图谱。采用指纹图谱相似度评价软件进行数据评价，同法测定20批地黄中梓醇的含量。结果 所建立的标准对照指纹图谱，20批地黄的相似度均在0.917以上，20批地黄中梓醇质量分数均在0.2%以上。结论 建立的地黄HPLC指纹图谱测定方法，重复性、精密度和稳定性良好，梓醇含量测定符合要求，可有效避免《中国药典》2015年版收载方法检测时糖类物质的干扰，为提升地黄药材质量评价水平提供科学参考。]]> 2019/11/5 14:37:51 705true 目的 克隆人参Panax ginseng中质体ATP/ADP转运蛋白基因（ATP/ADP transporter protein，AATP），为深入研究其在人参中的生物学功能奠定基础。方法 利用人参14个组织部位转录组测序的转录组数据库，通过与NCBI下载的其他植物中AATP的mRNA序列进行本地Blast比对，从中筛选出质体ATP/ADP转运蛋白基因。利用PCR技术克隆获得该基因的全长，通过生物信息学软件分析该基因编码蛋白的信息。利用人参14个组织部位的转录组数据库分析该基因在人参不同组织中的表达模式，并利用实时荧光定量PCR检测茉莉酸甲酯处理条件下该基因的表达模式。结果 获得人参AATP1基因全长cDNA，命名为PgAATP1，该基因长度为1 866 bp，编码621个氨基酸，蛋白质相对分子质量为67 897.23，等电点为9.58。该蛋白与其他物种中的质体ATP/ADP转运蛋白比较类似，分析发现PgAATP1在人参中所有组织中表达量均比较高，在果肉和叶片中表达量最高。实时荧光定量PCR检测发现PgAATP1基因在茉莉酸甲酯处理条件下表达持续上调。结论 获得PgAATP1基因全长cDNA序列，该基因在淀粉合成旺盛的组织中表达量较高，且响应茉莉酸甲酯处理。]]> 2019/9/20 11:00:12 704true 目的 分析遮阴对地黄块根性状和叶片光合特性的影响，并通过转录组测序阐明遮阴抑制地黄块根膨大的分子机制。方法 对地黄进行全光照、60%遮阴、90%遮阴处理，测块根性状及光合特性。利用高通量测序技术对90%遮阴处理和自然光照的地黄块根进行转录组测序，筛选差异表达的基因，同时，利用实时荧光定量PCR对部分基因在根和叶中的表达特性进行分析。结果 遮阴后块根长度、直径和单株块根产量均显著降低，90%遮阴处理块根几乎不膨大。地黄块根中薄壁细胞层数减少，导管比例升高。随遮阴程度增加叶绿素a、b及总叶绿素含量逐渐降低，光合能力下降。转录组分析共获得3 348个差异表达的基因，其中1 396个下调，1 952个上调；通过KEGG代谢通路富集分析，将遮阴后差异表达的1 668个基因（53.4%）富集到117个代谢通路中，其中17个代谢通路富集达到显著水平。植物激素信号传导通路最先得到富集，其次是植物病原菌互作通路，苯乙醇苷生物合成通路、淀粉和蔗糖代谢通路也得到了显著富集。在激素信号通路中，多数基因上调表达。遮阴后差异表达的16个扩展蛋白基因中11个下调表达，仅有5个上调表达，与淀粉降解有关的2个β-淀粉酶基因（Bmy）基因均上调表达，而蔗糖磷酸合成酶基因（SPS）下调表达，参与木质素合成的多数基因下调表达，纤维素合成基因多数上调表达。结论 遮阴后地黄光合能力下降，光合产物减少，地黄通过一系列激素通路基因的差异表达对遮阴作出响应调控，使块根膨大受阻。]]> 2019/9/20 11:00:12 703true 目的 研究掌叶大黄种子形态和发芽特性并构建无菌苗和愈伤组织培养体系，为其快繁和次生代谢调控研究提供基础。方法 从大小、净度、千粒质量、生活力、发芽率及发芽势等方面进行10批掌叶大黄种子特性分析；利用正交试验筛选大黄无菌苗建立的消毒体系及愈伤组织诱导的激素配比；HPLC法分析无菌苗和愈伤组织中10种有效成分的含量。结果 10批不同产地来源掌叶大黄的果实及种子外观形态无显著差异，含水量、生活力、发芽率及发芽势有明显差异，和政县与渭源县大黄发芽特性最高；75%乙醇30 s、10% H₂O₂ 15 min为大黄种子无菌苗建立的最佳消毒组合；愈伤组织诱导最佳激素为6-苄氨基腺嘌呤（1.0 mg/L）+6-糠氨基嘌呤（2.0 mg/L）+1-萘乙酸（1.5 mg/L）；不同消毒剂处理种子对无菌苗10种成分的积累无显著影响（P>0.05），愈伤组织可检测出7种有效成分，含量显著低于无菌苗，大黄酚-8-O-葡萄糖苷含量较其他成分高。结论 以千粒质量、生活力、发芽率及发芽势等指标明确甘肃和政县与渭源县种子特性优良，成功建立掌叶大黄无菌苗与愈伤组织培养体系，为掌叶大黄下一步研究奠定基础。]]> 2019/9/20 11:00:12 702true 目的 研究不同接种时期对丛枝菌根（AM）真菌侵染的滇重楼幼苗生长发育及重楼皂苷含量的影响，为栽培驯化出高品质的滇重楼奠定基础。方法 采用HPLC测定不同接种时期滇重楼中重楼皂苷I、Ⅱ、VI、VⅡ的含量；采用曲利苯蓝染色法、紫外分光光度法等方法对不同接种时期及不同AM真菌组合的滇重楼的侵染率、生理指标、根茎生物量等进行分析。结果 不同接种时期的AM真菌侵染率较强，保护酶活性、光合色素和可溶性糖含量提高，可溶性蛋白无明显变化，丙二醛含量降低，滇重楼幼苗的抗逆性提高，生长发育良好；栽培种源1年实生苗（2015年8月采收，T7时期）的品质相对较低，栽培种源1年实生苗（2015年6月、7月采收，T5、T6时期）的与栽培种源2年实生苗（2015年8月采收，T8时期）的品质最佳；不同的AM真菌混合组中，S2、S3和S6处理组的效果更佳。结论 接种时期对AMF侵染的滇重楼幼苗生长发育及重楼皂苷含量存在一定的影响。]]> 2019/9/20 11:00:13 701true 目的 采用UPLC法建立金银花、忍冬叶和忍冬藤指纹图谱，对忍冬不同部位采用指纹图谱相似度评价及聚类分析和主成分分析等化学模式识别技术进行研究，以期为忍冬药材的综合利用提供科学依据。方法 采用ACQUITY UPLC BEH C₁₈（100 mm×2.1 mm，1.7μm）色谱柱，以乙腈-0.1%磷酸溶液为流动相梯度洗脱，体积流量0.3 mL/min，柱温30℃，样品室温度8℃，检测波长326、238、350 nm，进样量1 μL。结果 28批样品有14个共有峰，与对照品色谱峰比对，指认了10个色谱峰，分别为新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、马钱苷、芦丁、木樨草苷、异绿原酸B、异绿原酸A和异绿原酸C，金银花（10批）、忍冬叶（9批）和忍冬藤（9批）化学成分组成及量均存在一定差异。采用聚类分析及主成分分析从化学成分上揭示了忍冬不同部位28批样品的相似性及差异性。结论 金银花与忍冬叶化学成分较为相似，而与忍冬藤间存在差异，所建立的指纹图谱方法可为金银花、忍冬叶、忍冬藤的质量控制提供参考。]]> 2019/9/20 11:00:13 700true 目的 明确不同干旱胁迫程度对金樱子幼苗叶片生理指标及生物量变化的影响，为金樱子大面积人工种植的干旱诊断和合理灌溉提供理论依据。方法 设置盆栽土壤含水量分别达到田间含水率的100%、90%、80%、70%、60%、50% 6个水平，测定不同干旱胁迫下金樱子叶片丙二醛（MDA）、脯氨酸（Pro）、光合色素含量及生物量指标。结果 随着干旱胁迫程度的增加，金樱子叶片MDA、Pro含量分别至重度干旱（W5，田间含水率60%）、严重干旱（W6，田间含水率50%）时才显著升高；光合色素含量除Car/（Chla+Chlb）比值外，均在轻中度干旱（W3，田间含水率80%）处理时达顶峰；株高在W6时才显著下降，地茎在W3时升至最大；根、茎、叶的鲜质量和干质量也是在W3时达到最大值。结论 金樱子对干旱胁迫的抗逆性较强，在轻中度干旱（W3，田间含水率的80%）时植株生长达到最佳状态，最有利于干物质积累及产量的形成。而田间含水率不宜低于60%，否则产生胁迫，同时生物产量也下降明显。]]> 2019/9/20 11:00:13 699true 目的 对陕西产重楼属6个类群的遗传多样性和亲缘关系进行分析。方法 采用SCoT分子标记技术和非加权平均距离法（UPGMA）对陕西产重楼属6个类群48份样品进行遗传多样性和聚类分析。结果 从82条SCoT引物中共筛选出12条多态性稳定、清晰的引物，48份重楼样品共扩增出152个DNA片段，多态性片段数为135，平均每个引物扩增出12.67个DNA片段，其多态性为88.82%；重楼属植物在物种水平上具有较高的遗传多样性，Nei's基因多样性指数（H）为0.267 4，Shannon指数（I）平均值为0.404 1，居群间遗传分化系数（G_st）为0.517 9，种群间基因流（N_m）为0.465 4；6个类群重楼按遗传多样性水平排序为七叶一枝花 > 宽叶重楼 > 具柄重楼 > 狭叶重楼 > 宽瓣重楼 > 北重楼，聚类分析可将北重楼组和其他重楼组区分开来，当遗传距离一定时，重楼属6个类群被完全区分开来。结论 SCoT分子标记可获得多态性丰富、清晰的条带扩增图谱，表明该技术可用于陕西产重楼属主要类群物种分子鉴定和亲缘关系研究，为筛选与药典收载种类近缘的可替代资源种类、指导合理利用地方种类自然资源提供了科学依据。]]> 2019/8/21 9:08:42 698true 目的 选取甘肃代表性区域（河西、陇中、陇东地区）野生和栽培甘草进行多指标成分测定并结合化学计量学综合分析甘肃产甘草质量，为评价适宜生产区域提供依据。方法 建立了多波长检测HPLC测定甘草样品中7种三萜类和黄酮类成分（甘草酸、甘草苷、异甘草苷、芹糖甘草苷、芹糖异甘草苷、甘草素、异甘草素）含量的方法，结合因子和聚类分析综合评价甘肃代表性区域产甘草样品的质量。结果 因子分析中，第1公因子与甘草酸、甘草苷、异甘草苷有较强的相关性，第2公因子与甘草素、异甘草素有较强的相关性，2个公因子的方差累积贡献率达到84.28%，能较全面地反映甘草的质量；聚类分析结果将25批不同区域甘草质量分为3类：I类甘草质量最好，主要是野生甘草及产自内蒙古杭锦旗的甘草；Ⅱ类甘草质量较好，主要产自甘肃河西地区及甘肃陇西；Ⅲ类甘草质量较差，主要产自甘肃陇中地区（白银）。结论 甘肃河西地区及陇西较适宜大力发展甘草产业。通过多指标成分结合化学计量法可用于进一步评价甘草质量，判别适宜甘草生产的产地区划。]]> 2019/8/21 9:08:42 697true 目的 调查不同产地滇黄精根系中丛枝菌根真菌（AMF）和深色有隔内生真菌（DSE）定殖情况，并探讨其与主要功效成分之间的相关性。方法 以产自于云南省5个样地的滇黄精为研究对象，采用碱解离-酸性品红染色法，调查AMF和DSE在滇黄精须根部位的定殖情况，并对典型形态结构进行拍照分析；采用硫酸苯酚法、香草醛-冰醋酸-高氯酸比色法、分光光度法和醇溶热浸法测定滇黄精根状茎中多糖、薯蓣皂苷元、总黄酮和浸出物含量，并通过皮尔森相关系数法分析AMF及其典型结构定殖率、DSE及其典型结构定殖率与4种功效成分含量之间的相关性。结果 在5个样地中，AMF和DSE在滇黄精须根中的平均定殖率范围分别为26.25%~57.54%、31.67%~45.19%，其中样地红河州蒙自县（HHMZ）AMF和DSE定殖率均高于其他样地。4种功效成分与AMF、DSE定殖率及典型结构定殖率之间均呈正相关，其中多糖、薯蓣皂苷元和总黄酮含量与AMF、DSE定殖率相关性相对较高，AMF/DSE相关系数分别为0.838/0.887、0.819/0.703、0.785/0.855，且多糖含量与AMF菌丝定殖率、DSE定殖率呈显著相关。此外，AMF及典型结构定殖率与DSE及典型结构定殖率之间、4种功效成分含量两两之间均存有较高的相关性。结论 AMF和DSE在滇黄精须根中有着较高的定殖率，且与主要功效成分含量之间呈正相关。本研究为实施滇黄精生态种植、采用生物手段增产增收提供了数据支持和实验依据。]]> 2019/8/21 9:08:42 696true 目的 建立补骨脂中16个化学成分的一测多评分析方法，结合化学计量学评价不同批次补骨脂药材的质量差异。方法 采用高效液相色谱法，以异补骨脂素为内参物，测得待测成分的相对校正因子，在不同色谱仪和色谱柱上考察每个化学成分的相对校正因子的稳定性和耐用性；比较一测多评法和外标法测定结果的差异，以此验证一测多评法在补骨脂中应用的准确性。结果 在建立的色谱条件下，补骨脂中15种化学成分相对于异补骨脂素的相对校正因子准确性较高，耐用性较好，且在不同实验条件下重现性良好；2种分析方法所得结果无显著差异。不同批次间补骨脂的化学成分群一致性较好，但不同化学成分的含量差异较大。结论 新建立的同时测定补骨脂中16个化学成分的一测多评法，能为更加全面地评价不同来源补骨脂的整体质量提供参考。]]> 2019/8/21 9:08:43 695true 目的 应用近红外光谱（NIRS）技术结合偏最小二乘法（PLS）建立当归中多指标成分的快速无损检测方法，以更好地控制当归药材和饮片的质量。方法 采集购买不同产地的当归样品共108批。建立同时测定当归中7种成分含量的超高效液相色谱（UPLC）方法，并以其测定值为参比；以积分球漫反射模式采集当归样品的NIRS图；采用PLS等化学计量学手段建立各指标性成分的参比值与NIRS图的定量校正模型。分别对建模过程的各个阶段进行优化，包括样本集的选择、不同预处理方法和不同光谱区段的选择。结果 所建立的绿原酸、阿魏酸、异绿原酸A、藁本内酯、丁烯基苯肽、洋川芎内酯I和欧当归内酯A的模型校正集相关系数分别为0.937 6、0.970 2、0.963 4、0.991 1、0.962 4、0.966 6和0.947 6；预测均方差分别为0.072 1、0.038 9、0.011 3、0.483 0、0.017 5、0.178 0和0.097 0。NIRS模型预测值与UPLC测定值具有良好的线性相关关系，模型预测效果良好。结论 采用NIRS技术结合PLS可以快速对当归中绿原酸、阿魏酸、异绿原酸A、藁本内酯、丁烯基苯肽、洋川芎内酯I和欧当归内酯A 7种成分的含量进行检测，方法操作简便、结果可靠。]]> 2019/8/21 9:08:43 694true 目的 对芫青科昆虫南方大斑蝥Mylabris phalerata和黄黑小斑蝥Mylabri scichorii中药材性状、微性状、粉末显微及微量升华结晶物显微特征进行研究，为其鉴定工作以及《中国药典》2020年版的制定工作提供科学依据。方法 采用性状鉴别法、微性状鉴别法、常规显微鉴别法、偏振光显微鉴别法及微量升华法，对6批南方大斑蝥和4批黄黑小斑蝥进行系统的生药学研究。结果 首次获取了南方大斑蝥和黄黑小斑蝥微性状鉴别特征（体长、触角、鞘翅、内翅等）、粉末显微鉴别特征（刚毛、体壁碎片、鞘翅碎片、内翅碎片、肌纤维、气管壁组织、未消化的植物组织）及其微量升华结晶物特征的全息彩色影像数据。结论 微性状鉴别研究结果补充完善了传统宏观性状鉴别的细微构造特征，显微及微量升华鉴别研究结果可作为中药材及中成药中斑蝥鉴定的专属性标志物。]]> 2019/8/21 9:08:43 693true 目的 克隆红花WD40（CtWD40）转录因子，分析其在不同组织间的表达水平及与红花羟基黄色素含量的相关性。方法 以红花花瓣转录组WD40候选基因为参考，克隆获得CtWD40基因序列。同时对该转录因子保守结构域、蛋白三维结构及系统发育等内容进行生物信息学分析，荧光定量PCR方法研究了该基因在红花不同组织中基因表达差异，并采用HPLC法测定红花各花期花瓣中羟基红花黄色素A含量。结果 成功克隆CtWD40基因并且发现该蛋白序列中8个保守WD结构域，通过系统发育分析发现CtWD40与菊科WD40蛋白亲缘关系最近。结论 CtWD40基因在在不同花期花瓣组织中出现先升高后降低表达趋势，皮尔森相关系数分析揭示CtWD40在花瓣中基因表达水平与羟基黄花黄色素A含量具有显著相关性。]]> 2019/8/12 15:05:51 692true 目的 探讨植物的形态特征及ITS2、psbA-trnH序列在薄荷及其近缘物种鉴定中的应用，为薄荷及近缘物种的鉴定提供参考。方法 观察薄荷及其近缘物种叶片形状、叶缘形状、绒毛密度、腺鳞密度等形态特征并对供试材料ITS2序列、psbA-trnH序列进行PCR并测序，通过对比植物形态特征、分析DNA序列、计算遗传距离、构建邻接树等方法对数据进行整理分析，并对植物进行鉴定。结果 植物的形态特征结合ITS2序列、psbA-trnH序列构建的邻接树显示香水薄荷与夏香薄荷、丹参与紫苏、胡椒薄荷与美国薄荷、大叶薄荷与猫薄荷亲缘关系近，该方法能将薄荷及其近缘物种区分。结论 ITS2序列、psbA-trnH序列可作为薄荷及其近缘物种的DNA条形码，与叶的形态特征相结合鉴定效果更佳。]]> 2019/8/12 15:05:51 691true 目的 研究不同居群连翘的遗传多样性。方法 采用ISSR分子标记技术对连翘25个自然居群的样本进行分析，利用POPGENE 32软件分析多态位点百分率（P）、Nei’s基因多样性指数（H）及Shannon多样性指数（I）；居群间遗传一致度采用NTSYSpc-2.10软件进行聚类分析。结果 选出13条ISSR引物，扩增出353条清晰条带，物种水平P为100%，H为0.252 3，I为0.394 0，遗传分化系数（G_st）为0.331 8，居群间基因流（N_m）为1.007 0，遗传距离0.031 0～0.155 5；NTSYSpc软件进行系统聚类，将25个聚群划分为2大类，7分组；连翘个体间进行聚类分析，195份连翘样品划分为2大类，5分组。结论 连翘种群遗传多样性水平较高，但连翘种群间遗传距离与地理距离没有相关性，与生态因子和生长环境有关。]]> 2019/8/12 15:05:52 690true 目的 分析外源一氧化碳（CO）对白桦悬浮细胞生长和三萜累积的影响。方法 在白桦悬浮细胞培养的第8天添加5、10、20、30 μmol/L的CO供体高铁血红素处理0.25～8 d，采用高效液相色谱法、比色法和实时荧光定量PCR方法分析白桦三萜含量及其合成关键酶基因的表达。结果 除20和30 μmol/L CO处理2 d后显著降低白桦悬浮细胞干质量外，CO处理未对白桦悬浮细胞干质量产生显著影响。除30 μmol/L CO处理提高pH值和丙二醛含量外，CO处理未对pH值和丙二醛含量产生显著影响。CO处理不同程度地增加了三萜、白桦酯醇和齐墩果酸含量，其中，30 μmol/L CO处理1 d时三萜积累量达最大值，为同期对照的1.3倍；10 μmol/L CO处理4 d时白桦酯醇含量达最高值，为对照的1.5倍；10 μmol/L CO处理2 d时齐墩果酸含量达最高值，为对照的4.2倍。三萜合成关键酶FPPS、LUS、CAS1、CAS2和β-AS基因的实时荧光定量PCR检测结果进一步证实了CO对白桦三萜累积的促进作用。结论 CO处理促进了白桦悬浮细胞中三萜的合成。]]> 2019/8/12 15:05:52 689true 目的 建立快速、简便、灵敏、准确的高效液相色谱-串联质谱（HPLC-MS）测定干蟾皮中华蟾酥毒基和酯蟾毒配基含量方法。方法 采用HPLC-MS正离子多反应监测模式测定，Zorbax SB-C₁₈液相色谱柱（50 mm×2.1 mm，1.8 μm）；流动相为乙腈-0.1%甲酸水溶液（41∶59），体积流量200 μL/min，柱温30℃。质谱条件：氮气温度350℃，氮气体积流量12 L/min，雾化器压力为101.316 kPa（35 psi）。华蟾酥毒基碎裂电压160 V，碰撞能15 eV，母离子、子离子分别为m/z 443.2、364.8；酯蟾毒配基碎裂电压130 V，碰撞能15 eV，母离子、子离子分别为m/z 385.2、366.9。结果 华蟾酥毒基和酯蟾毒配基分别在0.99～7.92μg/mL和1.04～8.32 μg/mL内线性关系良好。检测限（S/N≥3）均为0.3 ng/g。华蟾酥毒基、酯蟾毒配基回收率分别为97.96%～103.7%、96.86%～102.4%。日内及日间精密度RSD均小于3%。结论 所建方法灵敏、可靠，能满足干蟾皮有毒物质分析的需要。]]> 2019/8/12 15:05:52 688true 目的 对五加科药用植物的鲨烯合酶（squalene synthase，SS）进行适应性进化分析。方法 利用PAML软件的分支模型、位点模型、分支-位点模型以及MEC模型、SLAC、FEL和REL等方法对五加科7种药用植物的23条SS基因进行适应性进化分析。结果 在PAML与MEC模型的分析中发现多数分支与位点处于较强的负选择下，未发现正选择位点；通过SLAC、FEL和REL分析同样显示存在大量的负选择位点，仅412P、413N、415K为正选择位点。结论 负选择对五加科SS基因起主导作用，而发现的412P、413N、415K位点可能与SS的活性有关。]]> 2019/7/25 18:00:24 687true 目的 基于细辛转录组测序结果，克隆甲基丁香酚合成相关酶基因，了解相应的序列信息。方法 以细辛叶片为材料，通过RT-PCR扩增得到苯丙氨酸裂解酶（PAL）、肉桂酸-4-羟化酶（C4H）、4-羟基肉桂酰辅酶A连接酶（4CL）、肉桂醇脱氢酶（CAD）等基因的cDNA全长，并进行生物信息学分析。结果 AhPAL、AhC4H、Ah4CL和AhCAD基因的ORF长度分别为2 157、1 278、1 623、1 071 bp，编码718、425、540、356个氨基酸。4种蛋白均具有各自的保守结构域。除AhC4H外，AhPAL、Ah4CL和AhCAD与已报道的其它物种相应酶的氨基酸序列相似性都较高。结论 对细辛甲基丁香酚合成相关酶基因进行克隆和生物信息学分析，为后续基因功能分析及甲基丁香酚生物合成调控机制的解析奠定基础。]]> 2019/7/25 18:00:25 686true 目的 建立不同批次金花葵的多波长HPLC指纹图谱，并结合定量分析、相似度评价、聚类分析及主成分分析对金花葵进行质量评价研究。方法 采用Phenomenex Kinetex C₁₈（250 mm×4.6 mm，5 μm）色谱柱，以乙腈-0.08%磷酸水为流动相，梯度洗脱，体积流量为1.0 mL/min，波长切换（0~8 min，260 nm，检测原儿茶酸；8~15 min，324 nm，检测咖啡酸；15~60 min，360 nm，检测芦丁、金丝桃苷、异槲皮苷、棉皮素-8-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、杨梅素、槲皮素-3'-O-葡萄糖苷、槲皮素），柱温为30℃。利用中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004A版及SPSS 19.0软件建立金花葵HPLC指纹图谱，并进行相似度评价、聚类分析及主成分分析。结果 金花葵HPLC指纹图谱确认了25个共有峰，指认9个共有峰，并对指认共有峰进行了含量测定。16批金花葵样品相似度在0.879~0.983，相似度良好；聚类分析结果将金花葵聚为2类，表明不同产地金花葵在相似中存在差异性；根据主成分综合得分对金花葵质量进行了排名。结论 该方法简便准确，可用于金花葵药材的综合质量评价。]]> 2019/7/25 18:00:25 685true 目的 采用主成分分析和判别分析对不同产地枳壳药材中12种有效化学成分的HPLC的含量测定结果进行分析比较，以鉴别区分其产地来源。方法 以异柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、水合橘皮内酯、柚皮素、橙皮素、橘皮内酯、马尔敏、川陈皮素、橘皮素及葡萄内酯为指标，用HPLC法进行含量测定，并对其含量进行主成分分析和判别分析。结果 主成分分析结果表示各产地的枳壳药材具有一定的相似性，且江西产地的枳壳药材含量较为稳定；判别分析结果表明，江西樟树、宜春，湖南沅江、怀化和浙江金华、兰溪产地的枳壳样品可以区分开来，而江西新干和浙江金华、兰溪产地的枳壳样品有重叠。结论 本方法简单、方便、可靠，可用于初步筛选出适合枳壳生长的地区，以期为进一步阐述枳壳药材的道地性奠定基础。]]> 2019/7/25 18:00:25 684true 目的 建立灯盏花药材HPLC指纹图谱，为科学评价及有效控制其质量提供依据。方法 采用Zorbax SB-C₁₈柱（150 mm×4.6 mm，5 μm），以甲醇（A）-0.1%磷酸水溶液（B）为流动相进行梯度洗脱，体积流量为1 mL/min，检测波长335 nm，柱温30℃，对19批灯盏花药材和3批近缘种进行检测。通过相似度评价，结合聚类分析（HCA）和主成分分析（PCA），对不同产地的灯盏花药材及近缘种进行质量评价。结果 通过建立灯盏花药材HPLC指纹图谱的共有模式，确定了11个色谱峰作为指纹图谱的共有峰，并根据对照品指认了5个共有峰，19批灯盏花药材的相似度为0.873~0.978，3批近缘种中一年蓬和多舌飞蓬的相似度较高；HCA和PCA均可将19批灯盏花药材分为3类，且分类结果一致。PCA将19批灯盏花药材和近缘种中相似度结果较高的一年蓬和多舌飞蓬进行综合评价，综合得分结果显示其中澄江梁王山野生的灯盏花药材质量最优，多舌飞蓬质量尚可，多舌飞蓬有代替灯盏花药材的可能性。结论 灯盏花的HPLC指纹图谱的构建和化学模式识别可为药材质量控制提供全面的参考。]]> 2019/7/25 18:00:25 683true 目的 研究镉（Cd）胁迫对灵芝菌丝生长及代谢产物积累的影响，探讨Cd胁迫影响生长和代谢产物积累的机制，为灵芝生产栽培过程中控制Cd元素提供依据。方法 在Cd质量浓度分别为0、0.5、1.0、4.0、10.0、40.0 mg/L下培养灵芝菌丝体，对其生物量积累、胞内活性氧（ROS）水平、膜氧化损伤、抗氧化酶活性及ROS调控相关酶表达量进行分析。结果 Cd质量浓度达到4.0 mg/L时，抑制菌丝生长；胞内ROS水平、H₂O₂及丙二醛（MDA）含量显著上升，分别提升了76%、46%、325%，且随着Cd质量浓度的增加呈上升趋势；NADPH氧化酶基因（NOXA）、超氧化物歧化酶基因（SOD1，SOD4）、过氧化氢酶基因（CAT）表达量显著上调。Cd质量浓度达到10.0 mg/L时抑制效果显著，菌落生长直径及发酵菌丝干质量抑制率分别为26.15%、32.78%，灵芝总三萜抑制率为33.7%，对总蛋白合成的抑制率为30.3%，对多糖抑制不显著。Cd质量浓度达到40.0 mg/L时，抗坏血酸过氧化物酶基因（APX）及谷胱甘肽过氧化物酶基因（GPX）表达量显著上调。随着Cd质量浓度的增加，SOD、CAT、APX、GPX酶活性都呈先上升后下降趋势，Cd质量浓度达到1.0 mg/L时，GPX酶活性下降，APX酶活性上升显著。外源添加diphenyleneiodonium chloride（DPI）、N-乙酰-L-半胱氨酸（NAC）、维生素C（VC）对Cd胁迫灵芝胞内清除ROS水平及降低MDA含量作用显著。结论 Cd胁迫造成灵芝菌丝产量及代谢物积累下降，可能是由于Cd离子抑制GPX酶活性下降，造成H₂O₂积累，引起ROS水平上升及膜氧化损伤，抑制菌丝生长及代谢产物积累，同时调控NOXA基因表达量上调，造成抗氧化酶活性及表达量上升来提高机体对活性氧的清除。因此在灵芝的生产过程中要控制Cd元素质量浓度小于1 mg/L。]]> 2019/7/25 18:00:25 682true 目的 克隆国产沉香基原植物白木香Aquilaria sinensis茉莉酸（JA）信号途径核心抑制蛋白基因（jasmonate-zim-domain protein，JAZ），为深入研究其在沉香倍半萜合成途径中的功能奠定基础。方法 以白木香总RNA为模板，采用RACE法和RT-PCR方法，克隆JAZ基因cDNA全长，并进行生物信息学的分析；采用实时荧光定量（qRT-PCR）方法分析经茉莉酸甲酯（MeJA）和机械伤害处理的白木香愈伤组织中JAZ基因的表达模式。结果 获得白木香JAZ基因全长cDNA，命名为AsJAZ1，GenBank登录号为KP677281。序列分析表明，该基因的序列全长为1 507 bp，包含一个990 bp的开放阅读框，编码330个氨基酸，蛋白质相对分子质量为34 280，等电点为6.89。qRT-PCR结果显示，经MeJA处理0.5 h后AsJAZ1基因相对表达量最高，约是对照组（未经MeJA处理的白木香愈伤组织）的27倍，随后显著下降；经机械处理2 h后AsJAZ1基因相对表达量最高，约是对照组（未经机械处理的白木香愈伤组织）的17倍，随后又快速降低，到24 h基本恢复正常。结论 获得AsJAZ1基因全长cDNA序列，该基因对伤害诱导极敏感，且能在伤害早期响应。]]> 2019/7/9 16:27:04 681true 目的 了解川西獐牙菜Swertia mussotii Franch甲羟戊酸途径中的关键酶甲羟戊酸激酶基因（MK）的功能，并进一步推进川西獐牙菜中的甲羟戊酸途径的研究。方法 根据川西獐牙菜的转录组信息，获得了川西獐牙菜MK（SmMK）基因的全长cDNA序列，并且设计了特异性引物，利用RT-PCR对该基因进行了克隆；利用生物信息学方法，对SmMK基因的序列进行分析；构建原核表达载体MBP-SmMK，转入大肠杆菌Rosetta（DE3）中，然后对SmMK基因进行了原核表达，并对其进行了纯化。结果 SmMK基因cDNA全长为1 164 bp，共编码387个氨基酸。SmMK与其他植物中的MK具有较高相似性。对其信号肽、跨膜区域、蛋白定位及二级结构和三维构象进行了预测分析。SDS-PAGE检测表明所纯化蛋白与预期蛋白的大小相一致，为40 970。结论 为进一步研究川西獐牙菜中MK的功能奠定了基础，并为进一步研究川西獐牙菜中的甲羟戊酸途径，提高川西獐牙菜中类异戊二烯化合物的产量提供了依据。]]> 2019/7/9 16:27:04 680true 目的 HPLC法测定不同产地多茎重楼Paris polyphylla Smith var.yunnanensis根茎中重楼皂苷VⅡ、H、VI、Ⅱ、Ⅲ、I、V的含量，建立其HPLC指纹图谱，并与滇重楼根茎对照药材HPLC指纹图谱进行比较分析。方法 采用Thermore C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相为水-乙腈，梯度洗脱，检测波长203 nm；柱温30℃；体积流量1 mL/min；进样量10μL，外标法与一测多评法同时对不同产地多茎重楼根茎中重楼皂苷VⅡ、H、VI、Ⅱ、Ⅲ、I、V的含量进行测定，采用单因素方差分析法对含量差异进行分析；建立多茎重楼根茎HPLC指纹图谱，并与滇重楼根茎对照药材HPLC指纹图谱进行比较分析。结果 不同产地多茎重楼根茎重楼皂苷VⅡ、H、VI、Ⅱ、Ⅲ、I、V的含量测定结果表明，在线性范围内线性关系良好（r>0.999 7），平均加样回收率为98.34%～99.34%，RSD≤1.00%；不同产地多茎重楼根茎中重楼皂苷VⅡ、H、VI、Ⅱ、Ⅲ、I、V的含量存在显著（P<0.05）或极显著（P<0.01）差异，重楼皂苷（I＋Ⅱ＋VI＋VⅡ）总量在1.239%～6.236%，显著高于《中国药典》规定的重楼药材质量控制标准的0.60%，且外标法与一测多评法测定结果无显著性差异。HPLC指纹图谱相似度评价结果表明，不同产地多茎重楼和滇重楼对照药材根茎中共有12个共有指纹特征峰，二者HPLC指纹图谱相似度较高。结论 该方法操作简单、准确、重复性好，可用于多茎重楼根茎中重楼皂苷VⅡ、H、VI、Ⅱ、Ⅲ、I、V的含量测定；不同产地多茎重楼根茎中重楼皂苷（I＋Ⅱ＋VI＋VⅡ）总含量较高，不同产地多茎重楼与滇重楼对照药材根茎HPLC指纹图谱相似度较高。]]> 2019/7/9 16:27:04 679true 目的 考察不同时期刺五加叶中8种有效成分含量和干质量的动态变化规律，探讨刺五加叶的适宜采收期。方法 采集不同时期刺五加叶片，用电子天平测定百叶干质量；采用HPLC对不同时期刺五加叶中L-苯丙氨酸、原儿茶酸、紫丁香苷、绿原酸、咖啡酸、芦丁、金丝桃苷和槲皮素进行测定，计算8种有效成分积累总量，并与主成分分析法相结合进行综合评价。结果 不同时期刺五加的百叶干质量在S1～S5期间整体呈上升趋势，在S1～S2增长最为迅速；不同时期刺五加叶中8种有效成分的含量呈动态变化，原儿茶酸在S1（6月3日）期含量达到最大值；其他7种成分均在S2（7月3日）期含量达到最大值，且主成分分析结果也显示于S2期采收的刺五加叶中8种有效成分含量的综合得分最高；8种有效成分在不同时期的积累总量呈先上升后下降的变化规律，在S1～S2期间总量总体呈上升趋势，S2时达到最大。结论 综合不同时期刺五加叶的干质量和8种有效成分含量的变化可知，S2期前后（6月下旬至7月上旬）为最适宜采收期。为确定刺五加叶的适宜采收期提供基础资料。]]> 2019/7/9 16:27:04 678true 目的 采用LC-MS建立绞股蓝药材的指纹图谱，鉴定其主要色谱峰，并结合变量模式识别方法判别不同产地绞股蓝药材。方法 采用Inertsil ODS-SP（250 mm×4.6 mm，5 μm）C₁₈色谱柱，以乙腈-0.1%甲酸水为流动相梯度洗脱，检测波长203 nm，使用电喷雾离子源（ESI），负离子模式下采集数据。通过聚类分析、主成分分析和对应分析对21批绞股蓝药材进行分析。结果 建立了绞股蓝药材指纹图谱，标定出9个共有峰与10个特征峰，并根据质谱信息及文献对照对其中16个色谱峰进行定性分析。并结合多变量分析区分了不同产地绞股蓝，为绞股蓝的质量控制及综合评价奠定了基础。结论 液质联用-模式识别方法可用于不同产地绞股蓝的快速鉴别，也可对其特征成分进行靶向分离。]]> 2019/7/9 16:27:04 677true 目的 结合性状指标和内在质量指标对穿心莲进行质量等级评价，建立等级评价模型，为穿心莲及其他中药材等级标准的制定提供参考。方法 采收不同批次的穿心莲药材样品，测量和描述穿心莲药材的性状，采用数量分类学的方法对其评价指标进行编码，以HPLC法测定药材的4个二萜内酯类成分的含量，将编码后的性状指标和4个内酯的总量及醇溶性浸出物含量做相关性分析，初步筛选出13个评价指标，应用主成分聚类分析法对这13个指标进行分析，划分等级；并以偏最小二乘-判别分析（PLS-DA）对所划分的等级进行判别分析；最后，通过偏最小二乘回归分析（PLS）建立穿心莲药材等级的预测模型。结果 根据主成分聚类分析法可以将穿心莲药材划分为3个等级，PLS-DA分析表明该等级划分合理；PLS回归分析所建立的穿心莲质量等级的预测模型为药材等级（Y）=3.761－0.020×叶含量－0.388×穿心莲内酯含量－1.117×新穿心莲内酯含量－0.274×去氧穿心莲内酯含量－0.287×脱水穿心莲内酯含量－0.302×4个内酯总量－0.104×醇溶性浸出物含量－0.015×茎颜色－0.008 4×叶颜色－0.003×茎基部直径＋0.020×分枝数＋0.137×茎上部直径＋0.011×株高，若Y在0.7～1.3，则预测穿心莲药材为一等品；若Y在1.7～2.3，则为二等品；若Y在2.7～3.3则为合格品。结论 主成分聚类分析法结合PLS回归建立的穿心莲等级快速评价模型评价效果较为理想，可作为穿心莲药材质量等级的快速评价模型，为穿心莲及其他中药材质量等级评价及其等级标准的制定提供新思路。]]> 2019/7/9 16:27:05 676true 目的 分析不同石杉碱甲（Hup A）含量蛇足石杉叶状体（离体培养物，分别为株系A、B、C）的蛋白差异，探究可能与Hup A积累合成的相关酶。方法 利用定量蛋白质组学串联质谱标签（tandem mass tag，TMT）技术对不同株系蛇足石杉叶状体进行定量蛋白质组学检测和鉴定，再对差异蛋白进行GO和KEGG等生物信息学分析。结果 株系B的Hup A含量最低，株系C的Hup A含量最高，是B的2倍，株系B和C两者有78个差异蛋白，且差异蛋白GO富集分析，分子功能（MF）所占比例为28.75%；通过不同株系间蛋白质差异表达的比对，分析得到这3个株系在以氨基酸为起始的生物碱代谢通路中共有2种差异蛋白（P93541、Q8RXU4）。P93541蛋白在Hup A低含量的株系B中表达下调，在相对高含量的株系A和C中均上调；而Q8RXU4蛋白在低含量的株系B中表达上调，在相对高含量的株系A和C中均表达下调。结论 Hup A含量差异与蛋白表达差异呈正相关，分析得到2种可能与Hup A积累相关的酶P93541、Q8RXU4，为Hup A生物合成生物信息学分析提供了依据。]]> 2019/6/27 15:01:01 675true 目的 探究淹水胁迫对杭菊绿原酸合成途径中的关键酶香豆酰基喹酸酯3'-单加氧酶（C3'H）和莽草酸羟基肉桂酰基转移酶（HCT）基因的表达和活性成分的影响。方法 使用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）方法基于杭菊转录组数据库克隆HCT和C3'H基因各2个，其中C3'H酶的2个基因CmC3'H1、CmC3'H2，HCT酶的2个基因CmHCT1、CmHCT2，并进行生物信息学分析；同时在杭菊花芽分化期进行淹水胁迫，以β-actin为内参基因，使用qRT-PCR检测以上4个基因的相对表达量；然后使用HPLC法测定杭菊这4个基因的下游产物及其他指标成分含量。结果 通过研究获得了4条基因的完整开放阅读框，并且预测其氨基酸序列的相对分子质量和理论等电点（pI），同时构建蛋白质三级结构模型。qRT-PCR结果显示在花芽分化期对杭菊进行持续3 d的淹水处理会导致以上4个基因在不同生长时期内的表达显著变化。HPLC结果显示淹水处理后的杭菊C3'H和HCT所催化形成的下游产物绿原酸含量显著高于对照组，同时发现其他2种指标成分木犀草苷和3，5-O-二咖啡酰基奎宁酸含量也显著高于对照组。结论 杭菊在淹水胁迫下可以通过调节4种基因的表达来调控下游产物的合成，从而对淹水胁迫做出应答，而且花芽分化期进行淹水胁迫可以显著增强杭菊活性成分的积累。]]> 2019/6/27 15:01:01 674true 目的 选用ITS2序列作为条形码来鉴定44种藏药材植物。方法 用高盐低pH法提取藏药材植物的基因组DNA，通过PCR扩增藏药材植物的ITS2序列，共得到ITS2序列145条，分属于24科，39属，44种。在GenBank数据库中通过序列比对选取了部分藏药材的同源序列。将ITS2序列在Bioedit软件中进行序列比对，在MEGA软件中计算双参数（K2P）种内和种间遗传距离，并基于邻接法构建系统进化树来分析物种的系统发育关系。结果 ITS2区域有显著的种内、种间差异，基于ITS2区域的系统进化分析与形态学结果一致，并可以反映物种之间的亲缘关系。此外，藏药材的ITS2序列二级结构各有不同，为物种鉴定提供了另一种方法。结论 ITS2序列是藏药材植物鉴定和系统发育研究的非常有效的单条形码，为藏药材植物资源的利用和保护提供了科学依据。]]> 2019/6/27 15:01:01 673true 目的 研究水杨酸（salicylic acid，SA）和茉莉酸甲酯（methyl jasmonate，MeJA）对远志愈伤组织生长和相关酶活性及化学成分的影响。方法 以远志继代愈伤组织为材料，加入SA（0、4、8、12、16、20、24、28、32 mg/L）和MeJA（0、100、200、400、600、800、1 000 μmol/L）不同浓度下暗培养30 d后，测定远志愈伤组织生长量、丙二醛（MDA）含量、抗氧化酶活性、总酚、总黄酮含量及远志（口山）酮Ⅲ、3，6'-二芥子酰基蔗糖含量。结果 MeJA对远志愈伤组织的生长具有抑制作用，12 mg/L水杨酸（SA）对远志愈伤组织的生长具有促进作用。SA和MeJA对远志愈伤组织中超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、过氧化物酶（POD）活性及丙二醛（MDA）含量均具有促进作用，且随着SA和MeJA浓度的增大，SOD、CAT、POD活性先上升后下降，MDA含量持续上升。SA质量浓度为20 mg/L时，CAT、SOD活性达到最大值，分别为248.45、4 451.06 U/mg，SA质量浓度为16 mg/L时，POD活性达到最大值，为7.22 U/mg；SA质量浓度为32 mg/L时，MDA含量达到最大值，为25.09 nmol/mg；MeJA浓度为600μmol/L时，CAT、SOD、POD活性达到最大值，分别为273.30、1 451.06、15.27 U/mg；MeJA浓度为1 000 μmol/L时，MDA含量达到最大值，为27.10 nmol/mg。SA对远志愈伤组织中总黄酮的积累具有抑制作用，对总酚无显著影响；MeJA对远志愈伤组织中总酚、总黄酮的积累具有促进作用，MeJA浓度为600 μmol/L时，总黄酮含量最高；MeJA浓度为400 μmol/L时，总酚含量最高。SA和MeJA均对远志愈伤组织中远志（口山）酮Ⅲ、3，6'-二芥子酰基蔗糖的积累具有促进作用，SA浓度为32 mg/L时，远志（口山）酮Ⅲ、3，6'-二芥子酰基蔗糖含量最高；MeJA浓度为1 000 μmol/L时远志（口山）酮Ⅲ、3，6'-二芥子酰基蔗糖含量最高。结论 MeJA对远志愈伤组织生长具有抑制作用，12 mg/L的SA对其具有促进作用。SA和MeJA对SOD、POD、CAT活性，MDA含量及远志（口山）酮Ⅲ、3，6'-二芥子酰基蔗糖的积累均具有促进作用。SA对远志愈伤组织中总黄酮的积累具有抑制作用，对总酚无显著影响，MeJA对远志愈伤组织中总酚、总黄酮的积累具有促进作用。]]> 2019/6/27 15:01:01 672true 目的 傅里叶变换红外光谱（fourier transform infrared spectroscopy，FTIR）结合化学计量学分析青叶胆及其同属近缘种的亲缘关系，为青叶胆药用植物资源的开发利用提供理论依据。方法 采集青叶胆及近缘种共39份样品的红外光谱信息，对光谱数据进行自动基线校正、自动平滑、纵坐标归一化、二阶求导等预处理，结合化学计量学分析光谱数据。结果 青叶胆及其近缘种红外光谱主要吸收区域为900~400、1 310~900、1 500~1 310、1 800~1 500、2 800~3 000、3 000~3 500 cm^-1附近。二阶导数图谱在400~1 000 cm^-1指纹区吸收峰差异明显，物种之间吸收峰的峰数、峰强、峰形差异较大。对预处理后的红外光谱数据进行主成分分析（PCA）以及偏最小二乘判别分析（PLS-DA）发现，6种獐牙菜的PCA分析优于PLS-DA分析，系统聚类分析表明青叶胆与圈纹獐牙菜、显脉獐牙菜亲缘关系较近。结论 FTIR结合化学计量学方法，能够快速鉴别不同种类獐牙菜属植物，明确青叶胆及其近缘种之间的亲缘关系，为獐牙菜属植物亲缘关系研究提供一种快速、有效的方法。]]> 2019/6/27 15:01:01 671true 目的 对比研究不同生长环境和生长年限肉桂出油率、挥发油成分和抑菌活性。方法 采用水蒸气蒸馏法提取肉桂挥发油，经气相色谱-质谱技术分离和鉴定不同生长环境和生长年限肉桂油，用归一化法测定其相对百分含量，通过滤纸片法、微量稀释法分别测定抑菌圈直径及最小抑菌浓度（MIC），比较7份肉桂油对常见的3种致病菌的抑菌活性。结果 10年生肉桂出油率最高，为6.41%；20年生肉桂出油率最低，为1.75%，15年生肉桂中疏植出油率最高，为4.48%；7份肉桂油共鉴定出44种化合物，其中相对含量≥ 1%的共有成分为反式肉桂醛（16.23%~73.08%）、α-古巴烯（7.39%~41.70%）、β-杜松烯（2.22%~12.30%）、α-依兰油烯（1.00%~9.16%）。抑菌实验显示，不同生长环境和生长年限肉桂油对供试菌株大肠杆菌、金黄色葡萄球菌均有明显的抑制作用，对绿脓杆菌抑制作用较弱，其中15年生疏植、15年生密植的抑菌活性较好。结论 肉桂出油率、肉桂挥发油成分和抑菌活性受生长环境和生长年限的影响，肉桂油中除肉桂醛、α-古巴烯外，还含有其他有效抑菌成分。]]> 2019/6/27 15:01:01 670true 目的 对白木香Aquilaria sinensis AsWRKY62转录因子进行分子克隆、原核表达，并对其进行生物信息学分析和表达特性分析，为深入研究AsWRKY62在白木香生长发育、沉香形成等方面的功能奠定基础。方法 以白木香愈伤组织总RNA反转录的cDNA为模板，采用RT-PCR及PCR技术克隆基因编码序列（CDS）全长；构建pET-21a-AsWRKY62原核表达载体，转化大肠杆菌BL21 （DE3） 感受态进行原核诱导表达；并通过生物信息学软件预测蛋白的理化性质、结构域和亚细胞定位等特性；用软件DNAMAN和MEGA 5分别进行氨基酸多序列比对和进化关系分析，通过组织特异性表达分析不同组织中的基因表达模式。结果 AsWRKY62（GenBank注册号MH925301）基因CDS全长为1 581 bp，编码一条由526个氨基酸组成的多肽，结构域分析表明其属于WRKY group I类蛋白；密码子优化后的pET-21a-AsWRKY62在大肠杆菌BL21 （DE3） 中成功诱导的较适条件为0.5 mmol/L IPTG 37℃连续培养4 h；AsWRKY62基因具有组织特异性，其在根、茎中表达量最高，其次是沉香层和花中。结论 本研究首次在白木香中克隆AsWRKY62，并进行原核表达和生物特性分析，表明其可能与沉香的形成有关，也为进一步研究其生物学功能提供了理论依据。]]> 2019/6/11 13:25:30 669true 目的 药用植物岗梅Ilex asprella含有多种活性磺化三萜类成分，克隆岗梅中的磺酸基转移酶编码（sulfotransferase，ST）基因，以了解其独特的磺化机制。方法 利用RT-PCR技术，由岗梅叶片RNA扩增获得了2个可能的磺酸基转移酶基因IaST1和IaST2，利用生物信息学工具对其进行分析，并将其转化至大肠杆菌E. coli进行原核表达。结果 序列分析显示，IaST1与IaST2各包含1个开放阅读框，分别长1 002 bp和993 bp，编码333和330个氨基酸，理论相对分子质量为55 500和54 700。二者均具有ST的5个保守结构氨基酸序列，与黄顶菊Flaveria bidentis的黄酮醇C-3磺酸基转移酶亲缘关系较近。SDS-PAGE显示在E. coli中成功表达了IaST1和IaST2蛋白。结论 首次从岗梅中克隆了ST基因，为后续阐明其功能及其在岗梅三萜磺化中的作用奠定了基础。]]> 2019/6/11 13:25:30 668true 目的 基于HPLC指纹图谱与多成分含量测定，并结合化学模式识别法，评价不同产地栀子的质量，优选最佳产地。方法 采用RP-HPLC切换波长法，流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液进行梯度洗脱，检测波长为234、440 nm，对10个不同产地的30批栀子药材进行指纹图谱及5种有效成分含量测定研究，应用聚类分析与主成分分析等化学模式识别方法对栀子质量进行评价。结果 10个不同产地30批栀子的指纹图谱相似度均在0.95以上，去乙酰车叶草酸甲酯、京尼平龙胆双糖苷、栀子苷、西红花苷I和西红花苷Ⅱ质量分数分别为0.61~4.26、1.73~12.92、51.79~82.76、5.03~12.80、0.71~2.28 mg/g；聚类分析可分为3类，第1类为产地湖南永州、湖南永安、江西丰城、江西湖口、安徽广德和福建福鼎；第2类为产地江西黎川、江苏句容和河南唐河；第3类为产地安徽六安。通过主成分分析，进一步评价不同产地间质量的差异，从而发现安徽六安、江西湖口和湖南永安等地质量较优。结论 不同产地之间栀子存在一定质量差异，同一产地不同批次间栀子质量较稳定。通过指纹图谱与含量测定相结合，应用化学模式识别方法可全面综合评价栀子质量。此方法的建立为栀子药材的质量控制及评价提供了有效的参考依据。]]> 2019/6/11 13:25:30 667true 目的 采用UPLC法建立不同年份吴茱萸指纹图谱，结合化学模式识别技术对其进行分析，并测定其中4种质量差异性标志物的含量，为吴茱萸"陈久者良"的研究提供新的思路和对其质量评价提供依据。方法 基于UPLC法建立3种不同年份共47批吴茱萸样品的指纹图谱，采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》（2012A版）计算相似度，运用主成分分析（PCA）和正交偏最小二乘法-判别分析（OPLS-DA）对样品进行模式识别。结果 建立了47批吴茱萸样品的UPLC指纹图谱（相似度均>0.997），标定了40个共有峰，指认了其中12个，运用PCA和OPLS-DA分析，有效区分了3种不同年份的吴茱萸，共筛选出22个质量差异性标志物，并对其中新绿原酸、绿原酸、吴茱萸碱和吴茱萸次碱4种成分的含量进行了测定。结论 通过吴茱萸UPLC指纹图谱与多成分化学模式识别技术相结合，能对不同年份的吴茱萸进行有效区分，为吴茱萸"陈久者良"及其质量控制提供参考依据。]]> 2019/6/11 13:25:30 666true 目的 建立金沙藤药材的HPLC特征图谱方法，并评价药材不同部位的成分差异。方法 色谱柱为Waters symmetry C₁₈（250 mm×4.6 mm，5μm）；流动相为乙腈-0.2%磷酸水溶液；体积流量为1.0 mL/min；检测波长354 nm；柱温30℃；进样量20 μL。收集广西不同产地12批金沙藤药材进行分析，建立药材的特征图谱，并对其茎和叶中芦丁、异槲皮苷和紫云英苷含量进行了测定，进而评价药材的茎和叶化学成分差异。结果 从金沙藤药材特征图谱中分析得出7个共有峰，其中1号峰为咖啡酸，2号峰为芦丁，3号峰为异槲皮苷，5号峰为紫云英苷。经分析，其中11批药材的相似度在0.900 以上，1批药材的相似度在0.900以下；金沙藤茎比叶的化学成分丰富，且测定的3种成分含量高。结论 该方法简便、准确、重复性好，可为有效控制金沙藤药材的质量提供科学依据，药材采收季节以秋冬为佳。]]> 2019/6/11 13:25:30 665true 目的 研究和比较全国7大产区不同产地酸枣仁药材中2种黄酮和2种皂苷的含量，筛选优质药材来源。方法 2016年和2017年2个年度对7大产区进行调查和样品收集，共收集样品74份，使用UPLC-UV-ELSD检测斯皮诺素和6'''-阿魏酰斯皮诺素2种黄酮，以及酸枣仁皂苷A和酸枣仁皂苷B 2种皂苷的含量。结果 2016、2017年采集样品中酸枣仁样品中斯皮诺素的质量分数分别为0.052%~0.102%和0.049%~0.144%，6'''-阿魏酰斯皮诺素质量分数分别为0.021%~0.072%和0.026%~0.088%，酸枣仁皂苷A的质量分数分别为0.016%~0.061%和0.033%~0.054%，酸枣仁皂苷B的质量分数分别为0.008%~0.046%和0.005%~0.046%。结论 经相关性分析，7个大产区间各成分含量基本上没有显著差异，斯皮诺素含量较高的产地有山西临汾（包括大宁和吉县）、河北涉县、河北迁安、甘肃庆阳、陕西眉县、陕西合阳、辽宁建昌、天津蓟县，酸枣仁皂苷A含量高的产地为山东各地，以及河北内丘和陕西渭南。综合比较山东各地2类成分含量普遍都高且变化较小。相关性分析也显示2种黄酮含量具有较好的相关性，而2种皂苷含量的相关性较差。]]> 2019/6/11 13:25:30 664true 目的 筛选适宜北柴胡Bupleurum chinense表达分析的内参基因，并分析不同部位中柴胡皂苷含量与其关键酶基因表达的关系。方法 以北柴胡根、茎、叶、果为实验材料，利用实时荧光定量PCR技术，选取Actin、α-tubublin、β-tubulin、Cyclophilin、EF-1α 5个常用的内参基因作为候选，以筛选到的最适内参基因为参考分析北柴胡基因ACAT、FPS、HMGR、IPPI、PMD、PMK、SE、SS、β-AS、UGT1、UGT3、UGT6、UGT8、UGT10、P450-7、P450-12的组织表达模式，用HPLC法检测柴胡皂苷a、柴胡皂苷c、柴胡皂苷d的含量，并用SPSS软件进行相关性分析。结果 以5个候选基因（EF-1α、Cyclophilin、Actin、β-tubulin、α-tubublin）中稳定性最好的EF-1α为内参基因，测定北柴胡16个关键酶基因表达量，表明ACAT、PMK、IPPI、SS、SE、UGT1、UGT3、UGT6、UGT8均在地上部分（茎、叶、果）表达量最高，HMGR、β-AS、P450-7、P450-12在根中表达量高于地上部分，PMD、FPS、UGT10则组织差异性不明显。以HPLC法检测柴胡皂苷含量在根中远高于地上部分（茎、叶、果）。相关性分析结果显示，16个关键酶基因间上游ACAT、HMGR、PMD、SE等多与下游P450-7、P450-12、UGT3、UGT6、UGT8等表现出了显著正相关（P<0.05），表明关键酶基因相互间密切相关，共同调控柴胡皂苷合成。16个关键酶基因与柴胡皂苷含量的相关性分析结果显示：HMGR、P450-7、P450-12与3种皂苷总和呈极显著正相关（P<0.01），β-AS与3种皂苷总和呈显著正相关（P<0.05），且HMGR、β-AS、P450-7、P450-12与单体皂苷a、c、d含量均呈显著正相关（P<0.05），这4个基因对于皂苷合成积累有重要影响。结论 柴胡皂苷合成途径中HMGR、β-AS、P450-7、P450-12基因表达与柴胡皂苷合成积累具有一致性，在调控皂苷合成方面有重要作用。]]> 2019/5/23 17:13:39 663true 目的 研究3代白木香Aquilaria sinensis离体根在盐胁迫条件下的转录因子表达模式差异，对响应盐胁迫的各代转录因子家族差异基因的变化规律进行分析。方法 以组织培养的白木香离体根为材料，采用Illumina Hiseq4000双端PE150测序方法，将所有白木香Unigene序列与植物转录因子数据库（PlantTFDB）进行比对，对盐胁迫组与对照组间的3代差异转录因子进行重点分析。结果 3代白木香离体根转录组测序片段经de novo拼接共获得48 286条Unigene序列，含有1 156个潜在的白木香转录因子，分布于54个转录因子家族。其中bHLH、ERF、NAC家族是富集最多的3个家族。在第1、2、3代盐胁迫白木香根中分别筛选出290、277、349个差异表达转录因子，NAC、MYB以及WRKY家族上调表达的差异表达基因（DEG）数量随胁迫代数增加而增多，而GRAS家族上调表达的DEG数量随胁迫代数增加而减少。3代共有的差异转录因子有70个，其中8个基因的下调表达倍数随盐胁迫代数增加而递增。结论 盐胁迫对白木香转录因子表达影响主要以下调为主。盐胁迫组与对照组的差异转录因子数量随着盐胁迫代数增加而增加。不同转录因子家族基因受盐胁迫诱导表达情况不同，一些基因可能参与了胁迫记忆的传递。该研究有助于在整体水平加深了解白木香转录因子表达特性，为进一步研究白木香胁迫记忆及白木香盐胁迫响应分子机制提供参考。]]> 2019/5/23 17:13:40 662true 目的 建立管花肉苁蓉Cistanche tubulosa组织培养体系，并考察干旱胁迫对其中苯乙醇苷类成分含量的影响。方法 通过液质联用技术分析管花肉苁蓉愈伤组织与悬浮培养体系中的主要化学成分，绘制其生长曲线，并通过渗透压调节剂（NaCl、甘露醇和PEG6000）模拟干旱胁迫环境，考察组织培养体系中松果菊苷和毛蕊花糖苷含量的变化。结果 管花肉苁蓉愈伤组织与悬浮培养细胞均能生成松果菊苷和毛蕊花糖苷；绘制管花肉苁蓉愈伤组织生长曲线，确定30 d为最佳继代时间；NaCl和甘露醇所诱导的干旱胁迫不利于愈伤组织细胞的生长及其苯乙醇苷类成分的积累，而6% PEG6000能显著促进悬浮细胞中苯乙醇苷类化合物的生成，诱导15 d后，松果菊苷和毛蕊花糖苷的生物量分别为（1.07±0.10）g/L和（0.12±0.01）g/L，分别可达细胞干质量的20.94%和2.27%，为对照组的1.29倍和1.19倍。结论 PEG6000介导的干旱胁迫对管花肉苁蓉悬浮细胞中松果菊苷和毛蕊花糖苷的积累有明显促进作用。]]> 2019/5/23 17:13:40 661true 目的 检测珍稀濒危药用植物卵叶羌活自然群体遗传变异的地理分布式样和结构。方法 利用二代简化基因组测序技术开发卵叶羌活的微卫星分子标记（SSR）引物，并对覆盖卵叶羌活整个自然地理分布范围的群体样品进行遗传多态性分析。结果 通过基因组de novo组装共获得了780条含SSR位点的基因片段序列；筛选出10对具有较高多态性的SSR标记引物，对卵叶羌活整个自然地理分布区的6个群体共105个样品进行遗传变异分析，发现每条引物的等位基因数（N_o）在1～6（平均值为3.530）；每个群体的平均观测杂合度范围在0.305～0.457，说明卵叶羌活具有中到高度水平的遗传变异。基于Bayesian的群体结构分析表明，卵叶羌活的6个地理群体可以分为2个大的遗传分组，两组之间存在着一定程度的基因交流或遗传渐渗。结论 二代高通量简化基因组测序技术极大丰富了珍稀濒危植物卵叶羌活的SSR数据库，其自然群体遗传变异式样可能与该物种较长的进化历史以及不同地理群体之间长距离的花粉扩散有关。]]> 2019/5/23 17:13:40 660true 目的 通过定性与定量分析，结合化学计量学方法，比较黄精3种基原植物中多糖的组成和含量差异，为黄精药材质量评价提供参考。方法 采用红外光谱法（FTIR）和柱前衍生化-HPLC（PMP-HPLC）法比较3种基原黄精中多糖的差异；采用紫外光谱法（UV）测定总多糖含量。结果 3种基原黄精多糖的IR平均光谱和二阶导数图谱差异明显，主成分分析（PCA）、偏最小二乘法判别分析（PLS-DA）及聚类分析（HCA）分析均可将3种基原的黄精加以区分；PMP-HPLC图谱显示3种基原黄精中多糖的单糖组成存在差异，共有成分为D-甘露糖、D-核糖、L-鼠李糖、D-半乳糖醛酸、D-葡萄糖醛酸、D-半乳糖、D-葡萄糖、D-木糖、D-阿拉伯糖和L-岩藻糖；结果表明，所测样品多糖含量符合《中国药典》2015年版的要求。结论 本研究所建立方法为黄精类药材的多糖组成研究和质量评价提供了新的参考。]]> 2019/5/23 17:13:40 659true 目的 建立夏天无HPLC指纹图谱及多指标成分测定方法，为夏天无药材质量标准提升提供科学依据。方法 采用HPLC法，Diamonsil C₁₈（250 mm×4.6 mm，5μm）色谱柱；以乙腈-0.2%冰醋酸溶液（三乙胺调pH 6.0）为流动相，梯度洗脱；体积流量1.0 mL/min；柱温35℃；进样量10 μL；检测波长280 nm；建立15批夏天无药材的指纹图谱，用中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件（2012A版）进行评价，聚类分析和主成分分析将15批药材分为2类，同时测定原阿片碱、黄藤素、荷包牡丹碱和延胡索乙素4种成分的含量。结果 建立了夏天无药材的HPLC指纹图谱，共标定了10个共有峰；原阿片碱、黄藤素、荷包牡丹碱和延胡索乙素线性关系良好，r均大于0.999 9，平均回收率分别为97.12%、100.09%、98.53%、99.71%。结论 HPLC指纹图谱结合多指标成分测定可为夏天无药材质量评价提供参考。]]> 2019/5/23 17:13:40 658true 目的 获得远志Polygala tenuifolia响应茉莉酸甲酯（methyl jasmonate，MeJA）处理的转录组学信息，挖掘远志三萜类化合物骨架生物合成的关键酶基因。方法 以生长30 d的远志组培苗为材料，分别用无菌水（CK）、50 μmol/L MeJA、100 μmol/L MeJA处理24 h，采用Illunima Hiseq^TM 2000 150PE进行转录组测序，使用Trinity软件完成Unigene的de novo拼接，基于BLAST实现Unigene的分类、功能注释、代谢通路分析、蛋白功能注释、差异基因分析和筛选等。结果 最终获得52.19 Gb数据，通过de novo拼接注释得到Unigene 54 426条，平均长度为1 604 bp，注释成功率100%。通过对MeJA处理前后基因进行差异分析，共筛选出差异基因3 390个，其中有1 287个上调，2 103个下调，且以100 μmol/L MeJA处理的差异基因总数及上调数最高。KEGG富集分析表明，差异基因主要富集于苯丙烷类生物合成、半胱氨酸与蛋氨酸代谢、淀粉蔗糖代谢、光合生物的固碳作用、萜类骨架生物合成等KEGG通路中。找到与远志三萜类骨架生物合成相关的基因59条，其中AACT、HMGS、HMGR、MK、PMK、MPD、DXS、IDI、FPPS、SQS、SE和β-AS受MeJA诱导后表达量上调。结论 对MeJA处理后的远志幼苗转录组进行分析，获得远志三萜类骨架生物合成相关的候选基因，MeJA可以诱导其三萜类骨架合成相关基因的表达，为远志的分子生物学研究提供了丰富的数据资源，也为后期开展远志三萜皂苷类化合物次生代谢途径解析奠定了基础。]]> 2020/5/1 22:01:58 657true 目的 基于线粒体cytochrome coxidase I（CO I）和16 S rRNA基因开发DNA双重条形码鉴定方法，由此验证并补充形态鉴定，以期建立一种准确、有效地鉴定地龙及混淆品原动物的方法。方法 对收集到的66份样品依据形态特征进行初步鉴定，使用优化后的引物同时扩增CO I和16 S rRNA序列。优化一步法双重PCR实验条件。用MEGA 5.1计算地龙及其混淆品的种内、种间遗传距离，基于K2P模型构建NJ树。结果 CO I和16 S rRNA双重DNA条形码鉴定与形态鉴定结合，可准确鉴别地龙及混淆品原动物。结论 形态鉴定是分子鉴定的基础，分子鉴定是形态鉴定的有力补充。二者结合可最大程度地实现地龙及其混淆品原动物的准确鉴定。DNA双重条形码鉴定方法也可为地龙药材鉴定以及其他动物药材的分子鉴定提供参考。]]> 2020/5/1 22:01:58 656true 目的 氮素是中药材有效成分积累的重要影响元素，为探讨不同氮源对丹参Salvia miltiorrhiza和藏丹参Salvia castanea毛状根生长和活性成分积累的影响。方法 分别采用硝酸铵、水解乳蛋白、蛋白胨、牛肉浸膏、酪蛋白和酵母提取物6种氮源处理对丹参和藏丹参毛状根的影响，分析毛状根生长及活性成分积累的变化。结果 硝酸铵最有利于2种丹参毛状根的生长。水解乳蛋白能够显著促进丹酚酸类成分的积累，与硝酸铵对照相比，丹参迷迭香酸和丹酚酸B含量分别提高了2.94倍和3.27倍，藏丹参二者含量分别提高了13.74倍和2.01倍。酵母提取物对2种丹参毛状根二氢丹参酮Ι和隐丹参酮积累的促进效果最为显著，水解乳蛋白能显著促进丹参根中丹参酮II_A的积累，牛肉浸膏则对藏丹参中丹参酮II_A积累的促进作用最为显著。结论 硝酸铵是2种丹参毛状根生长的最佳氮源，水解乳蛋白是丹酚酸积累的最佳氮源，不同氮源对4种丹参酮的影响不一致，丹参和藏丹参对不同氮源的响应也不一致。该研究不仅对丹参毛状根规模化培养及活性成分工业化生产具有一定指导意义，也对藏丹参资源的开发利用提供了借鉴作用。]]> 2020/5/1 22:01:58 655true 目的 通过对枳实进行多成分定性、定量分析，为不同产地酸橙枳实药材的质量控制提供依据。方法 结合指纹图谱和一测多评（QAMS）模式，采用Waters X-Brige C₁₈（250 mm×4.6 mm，5 μm）色谱柱，以乙腈（A）-0.1%甲酸水溶液（B）为流动性，梯度洗脱，检测波长为283 nm和330 nm，体积流量1 mL/min，柱温30℃，进样量10 μL。结果 建立了不同产地酸橙枳实药材的HPLC-UV指纹图谱，确定了21个共有峰，鉴别出了芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、柚皮素、橙皮素、甜橙黄酮、川陈皮素、桔皮素9种成分，且23批次枳实样品的相似度均大于0.9，聚类分析（CA）及主成分（PCA）分析结果显示的分类情况与该药材的产地分布情况相一致，以新橙皮苷为参照物的QAMS法测定结果均显示一定的差异性。结论 从成分的角度来看，不同产地间药材质量存在一定差异，实验所建的QAMS法准确、高效、可行，与标准曲线法和外标法相比具有明显的优势，可应用于酸橙枳实的质量评价，为不同产地酸橙枳实药材的质量控制奠定实验基础。]]> 2020/5/1 22:01:58 654true 目的 对3个产地紫苏叶药材特征性成分进行差异性分析。方法 采集了不同主产区20批紫苏叶药材，分别采用指纹图谱、UFLC-Q-TOF-MS定性鉴别及HPLC多指标成分定量结合聚类分析的方法对紫苏叶药材的特征性组分进行差异性分析。结果 3个产区20批次药材叶指纹图谱相似度均在0.900以上，因而无法通过相似度区分不同产地药材；进一步以UFLC-Q-TOF-MS及对照品对照鉴定了指纹图谱中21个特征峰成分；并对其中6个黄酮苷、2个酚酸及1个单萜主要特征组分含量进行了对比分析，结果显示总黄酮苷含量3个产地差异并不明显，而酚酸及紫苏醛成分产地间差异显著，其中安徽太和县产区药材中酚酸总含量明显高于广东英德和河北安国产地，广东英德产紫苏叶中紫苏醛成分含量较高，结合聚类分析可以将3个产地紫苏叶药材进行区分。结论 多指标成分定性定量能较准确地分析不同产地紫苏叶药材的质量状况，比单一含量测定或指纹图谱相似度评价方法更为客观，也为紫苏叶药材质量控制及产地优选提供了参考。]]> 2020/4/19 10:52:26 653true 目的 研究白芍药材不同加工方法与质量之间的相关性，筛选最佳的加工方法。方法 从白芍的道地产区采集芍药鲜根，针对白芍药材加工过程中去皮、蒸煮、增白等关键环节，设计了7种不同加工方法加工白芍。用测色仪测定白芍表面的颜色，用UPLC测定白芍中芍药苷、芍药内酯苷、苯甲酰芍药苷、氧化芍药苷、没食子酸、儿茶素和1，2，3，4，6-五没食子酰葡萄糖的含量。并对白芍颜色与药效成分含量之间进行相关性分析，综合评价白芍的质量和加工方法。结果 不同方法加工白芍的颜色和药效成分的含量不同。以芍药鲜根先煮八分熟、去皮，再煮透心、干燥的白芍颜色最白（L^*值为72.64）；以芍药鲜根先去皮，后蒸透心，再干燥的白芍的芍药苷质量分数最高（50.08 mg/g）；以芍药鲜根先煮透心，后去皮，再干燥的白芍药效成分的总量最高（71.49 mg/g）。结论 白芍的白色程度与药效成分含量之间略呈负相关。白芍的颜色白与药效成分含量高难于兼顾。可根据对白芍外观颜色和内在质量的要求，选用不同的加工方法。]]> 2020/4/19 10:52:27 652true 目的 建立UPLC-MS/MS方法同时测定木蝴蝶中木蝴蝶苷A、木蝴蝶苷B、黄芩苷、黄芩素、白杨素、高车前素、野黄芩素、金丝桃苷、芹菜素、槲皮素10种主要成分。方法 采用负离子多反应监测（MRM）模式，ESI离子源，Kinetex C₁₈色谱柱（100 mm×3.0 mm，2.6 μm）进行分离，流动相为乙腈-甲醇-0.5%甲酸水，梯度洗脱，分析时间为7 min。结果 所测10种主要成分在测定浓度范围内线性关系良好，相关系数均大于0.996 6；精密度、重复性和稳定性良好；平均加样回收率为94.0%～104.5%，RSD≤3.21%。结论 首次建立可同时测定木蝴蝶中10种主要成分的UPLC-MS/MS方法，该法操作简便，灵敏度高，专属性好，分析速度快，可用于中药材木蝴蝶的质量控制。]]> 2020/4/19 10:52:27 651true 目的 比较不同产地金钗石斛性状及显微特征。方法 采用性状鉴别方法、显微鉴别方法以及数理统计方法对不同产地的金钗石斛进行研究。结果 性状鉴别数理统计结果表明不同产地样品之间茎的直径存在显著性差异。云南龙陵样品最粗，西藏尼木样品最细，两者茎直径平均值相差达5 mm。显微鉴别发现云南龙陵野生样品茎的维管束最发达，其样品维管束数目最多，为（115±16）个；海南斌腾、西藏尼木样品茎较细，其维管束数目较少。粉末显微特征物定量计数结果表明6个产地金钗石斛的散在针晶以及硅质块的数量有显著性差异。贵州旺隆产金钗石斛散在草酸钙针晶定量计数值最大，为（516.2±65.1）个/mg；云南龙陵产金钗石斛硅质块定量计数值最大，为（172.0±32.9）个/mg。结论 因产地环境不同，金钗石斛的性状与显微特征存在一定的差异，可作为金钗石斛性状与显微鉴别的参考依据。]]> 2020/4/19 10:52:28 650true 目的 为研究DNA条形码技术在中成药鉴定中的应用，以三七片为研究对象，对方法的适用性、专属性与精密度进行考察。方法 收集15批次市售三七片样品，考察三七片DNA提取条件，并对“中药材DNA条形码分子鉴定法指导原则”中PCR扩增、序列获得、结果判定等方法适用性进行确认；收集三七、人参、西洋参，制作三七片及其掺伪品，考察方法的专属性和重现性。结果 三七片取样量100 mg，56 ℃水浴8 h所获得DNA的质量浓度平均值为60.7 ng/μL，PCR扩增、序列获得和结果判定均可获成功；三七、人参和西洋参的ITS2序列长度均为230 bp，三七与人参、三七与西洋参的序列间均存在7个稳定的SNP位点，自制三七片和掺伪三七片均可成功获得ITS2序列，不同比例三七与人参、三七与西洋参的测序峰图在SNP位点处呈现相应峰高比的SNP套峰具备专属性；重复性、中间精密度和重现性考察符合《中国药典》2015年版（通则9101）相关要求。结论 ITS2序列作为DNA条形码能够稳定、准确鉴定三七片的原料药材，具备良好的专属性和精密度，三七片DNA条形码分子鉴定法将为保障三七片临床用药安全提供新的技术手段，并对《中国药典》其他收载单方制剂的鉴定提供参考。]]> 2020/4/10 9:23:22 649true 目的 研究延胡索块茎内生真菌菌群结构及其与延胡索乙素含量的相关性。方法 通过形态和分子手段相结合的方法对来自8个产地（浙江磐安、浙江东阳、浙江缙云、陕西三合镇、陕西董家营、重庆开县、安徽宣城、河南信阳）的延胡索块茎，进行内生真菌的分离、鉴定及菌群结构分析。同时采用HPLC法测定各产地延胡索块茎延胡索乙素含量。通过Excel、SPSS软件分析它们的相关性，以优势属和种不同水平建立多元线性回归方程。结果 共分离得到的1 742株内生真菌划分为19个分类单元，分属于3个门5个纲10个目14个科15个属，其中14个鉴定到种水平，5个鉴定到属水平；8个产地延胡索块茎中延胡索乙素含量均高于《中国药典》2015年版标准；浙江产地延胡索块茎中内生真菌丰富度（S）、内生真菌多样性指数（H'）和延胡索乙素含量极显著或显著高于其他产地；H'值和延胡索乙素含量呈显著性正相关，木霉属内生真菌T83与延胡索乙素含量呈最大正相关（相关系数为0.793）。结论 延胡索块茎中存在丰富的内生真菌资源；木霉属内生真菌T83作为优势菌可能与延胡索乙素的积累有关。]]> 2020/4/10 9:23:22 648true 目的 建立蝉蜕Cicadae Periostracum中乙酰多巴胺二聚体A和B的定量分析方法，并用于蝉蜕药材的质量评价。方法 建立HPLC-UV方法，并进行方法学验证，同时对4个基原40批市售药材的2种乙酰多巴胺二聚体进行含量测定，并进行聚类分析。采用优化的Alltima C₁₈（250 mm×4.6 mm，5 μm）色谱柱，乙腈-水流动相，2种成分能与其他色谱峰分开，并达到基线分离，在测定浓度范围内线性关系良好，平均加样回收率在97.53%～102.75%，方法精密度和重复性的RSD均小于5%，样品在24 h内稳定；依据2种乙酰多巴胺二聚体含量进行聚类分析。结果 所建立的分析方法简便，准确度和精密度良好，能作为蝉蜕药材常规定量评价方法；40批蝉蜕药材可聚为3类，但2种乙酰多巴胺二聚体的含量没有基原特征性。黑蚱蝉基原的蝉蜕商品中乙酰多巴胺二聚体的含量差异较大，可能与不同来源的商品污染泥沙的量不同有关。结论 山蝉、华南蚱蝉和蟪蛄基原的蝉蜕含有较高的乙酰多巴胺二聚体，且整体色谱特征与黑蚱蝉基原蝉蜕相似，是蝉蜕药材的潜在资源，严控泥沙应该是保证蝉蜕药材质量稳定一致的主要措施。]]> 2020/4/10 9:23:22 647true 目的 对丹参进行转录组测序，分析丹参不同组织响应适度干旱胁迫的分子机制。方法 以栽培4个月的丹参为材料，设置适度干旱胁迫组（土壤相对含水量55%~60%）和对照组（土壤相对含水量75%~80%），应用Illumina HiSeq 2000分别对根和叶进行转录组测序，对测序后的结果进行基因功能注释、差异表达基因（differentially expressed genes，DEGs）筛选和共表达网络分析等。结果 转录组测序共获得58 085条Unigene。其中28 846条被注释，根和叶中的DEGs分别有1 853、1 457个。GO富集结果表明，丹参根和叶中的DEGs在GO功能部位中的分布基本一致，均在代谢过程、刺激响应、细胞结构、催化活性等功能中得到显著富集。KEGG途径富集分析表明，根中DEGs显著富集在DNA复制、植物激素信号转导、植物-病原菌相互作用、胡萝卜素合成等途径，叶中DEGs则主要富集在氨基酸、生物碱、苯丙烷类生物合成等途径。适度干旱胁迫能促进丹参叶中苯丙烷类、根中萜类化合物生物合成途径关键酶基因的表达，是促进丹参有效成分累积的基础。AP2/ERF、bHLH、bZIP、WRKY、MYB类转录因子在根和叶中差异表达均较显著，基因共表达网络分析预测了在适度干旱胁迫下可能参与调控萜类基因表达的转录因子。结论 通过高通量转录组测序，揭示了适度干旱胁迫对丹参不同组织基因表达的调控特征，可为深入研究丹参药效成分的生物合成机制和在栽培中的合理灌溉提供科学依据。]]> 2020/3/26 14:35:49 646true 目的 研究不同产地野生远志Polygala tenuifolia中5种主要成分的含量差异，为远志多成分质量评价体系提供基础。方法 采用HPLC法测定20个产地野生远志中远志（口山）酮III、3，6'-二芥子酰基蔗糖、远志酸、远志皂苷元和细叶远志皂苷的含量，运用SPSS 20.0和SIMCA 11.5进行差异性、聚类、相关性和主成分分析。结果 不同产地野生远志中5种主要成分的含量差异显著，聚类分析和主成分分析可将所有样品聚为2类，第I类所含3，6'-二芥子酰基蔗糖、远志��酮III、远志皂苷元和细叶远志皂苷含量较高，来自陕西渭南、陕西咸阳和山西新绛，其余样品则聚为第II类。结论 陕西渭南、陕西咸阳和山西新绛所产野生远志中主要成分含量较高，与其他产地存在极显著性差异，可为远志质量评价、优良种质及栽培基地选择等提供依据。]]> 2020/3/26 0:00:00 645true 目的 识别酒萸肉特征性成分并检测其含量。方法 应用UPLC-Q-TOF/MS检测酒萸肉及其生品化学成分谱，并基于化学计量学方法识别酒萸肉的特征成分。建立基于超高效液相色谱-光电二极管矩阵检测器（UPLC-PDA）的酒萸肉特征成分含量测定方法，对12批次酒萸肉及其生品的特征成分含量进行检测。结果 酒萸肉及其生品的化学成分谱不尽相同，共获得10个可表征酒萸肉的特征成分，包括5-羟甲基糠醛、没食子酸、原儿茶酸、莫诺苷、马钱苷酸、獐芽菜苷、山茱萸苷、二氢槲皮素、马钱苷、山茱萸新苷。建立了基于UPLC-PDA的多成分含量测定方法，方法学考察结果显示10个特征成分线性关系良好（r≥0.999 7）。与同批次生品比较，酒萸肉中的5-羟甲基糠醛、二氢槲皮素、没食子酸、马钱苷、莫诺苷、山茱萸苷和獐芽菜苷7个成分含量显著升高，原儿茶酸、马钱苷酸和山茱萸新苷3个成分含量显著降低。结论 基于化学计量学筛选获得的特征成分可以区分酒萸肉及其生品，建立的酒萸肉多成分含量测定方法，线性关系良好、快速简便、稳定可靠，可为酒萸肉质量控制提供参考。]]> 2020/3/11 16:40:29 644true 目的 建立一种准确、快速地检测三七Panax notoginseng根腐病病原真菌茄腐镰刀菌Fusarium solani的实时荧光定量PCR（qRT-PCR）方法。方法 基于茄腐镰刀菌的氨基己二酸还原酶（Lys2）基因设计了qRT-PCR的特异性引物对Fs-QF和Fs-QR，制备了该基因的重组质粒标准品，建立了茄腐镰刀菌的SYBR Green I荧光定量PCR检测方法和实时荧光环介导恒温扩增技术（LAMP）体系。从三七种植区采集到15个具有根腐病、黑斑病典型症状的三七病株及三七种植土壤样品，并提取了这些样品的总DNA，运用建立的检测方法进行检测。结果 建立的qRT-PCR检测方法和实时荧光环介导恒温扩增技术特异性强，能快速检测到携带茄腐镰刀菌的三七根腐病病株。此外，该方法灵敏度高，检测模板质量浓度可低至0.2 pg/μL。结论 建立的方法能明确三七种植土壤以及三七病株中茄腐镰刀菌数量的动态变化。可以为三七土壤处理、根腐病的早期诊断和动态监测以及为带病三七种子、种苗的快速分子检测提供技术支持。]]> 2020/3/11 16:40:29 643true 目的 研究裸花紫珠不同采收部位、不同生育期的化学成分含量变化规律，为确定裸花紫珠最佳采收部位和采收期提供理论依据。方法 采用UV法测定总黄酮、总酚酸、总皂苷含量，HPLC法测定7种单体成分含量，并运用方差分析及主成分分析法对各成分含量进行统计分析。结果 浸膏得率、总黄酮、总酚酸、总皂苷、连翘酯苷B、毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷以功能叶含量最高，咖啡酸、木犀草苷和木犀草素则在嫩叶中含量最高，且均与嫩枝呈显著性差异（P<0.05）。在10个不同生育期内，除木犀草素含量呈下降趋势外，其余成分大体呈先升高后降低的趋势。浸膏得率、总黄酮、咖啡酸与异毛蕊花糖苷在坐果前期含量最高，但与盛花期含量无显著性差异（P>0.05）。总酚酸、总皂苷、连翘酯苷B和毛蕊花糖苷在盛花期含量最高，但与坐果前期无显著性差异（P>0.05）。木犀草苷与芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷则分别在熟果前期和熟果后期含量最高，且与坐果前期均无显著性差异（P>0.05）。各化学成分在落果期含量降到最低，且均与坐果前期及盛花期呈显著性差异（P<0.05）。通过主成分分析构建的综合评价模型可知，坐果前期综合评分最高（F=3.252），其次为盛花期（F=3.011）。结论 不同采收部位、生育期的裸花紫珠主要化学成分含量差异显著，裸花紫珠主要化学成分在功能叶及嫩叶中分布较多，且在盛花期到坐果前期化学成分积累较多。]]> 2020/3/11 16:40:29 642true 目的 对产自于云南的阳春砂仁根内生真菌进行分离、纯培养、解磷功能评价及分类学鉴定。方法 通过PDA和MEA培养基分离砂仁根内生真菌，并纯化培养；利用无机磷源Pikovaskaia’s（PVK）固体和液体培养基筛选具有解磷功能的内生真菌，并通过生长圈直径、生物量、有效磷含量、pH值、磷酸酶活性来分析菌株解磷能力和解磷机制；通过核糖体18 S PCR扩增，对具有解磷效果的菌株进行分子鉴定。结果 研究发现，分离自阳春砂仁根部的24株内生真菌，有10株为深色有隔内生真菌（dark septate endophytes，DSE）。通过难溶性PVK固体培养基筛选发现，共有8株菌可形成解磷生长圈，其中JP-20和JP-23生长直径均大于9 cm，其次为JP-15，生长圈直径为6.06 cm；PVK液体培养基筛选结果显示，菌株JP-23具有较强的解磷效果，生物量显著高于可溶性磷源，液体基质中有效磷含量显著升高，pH明显下降，酸性磷酸酶活性增加。经分子鉴定，初步认定菌株JP-23为枝孢属Cladosporium sp.菌株（GenBank：MK629004）。结论 菌株JP-23可通过调节基质pH值和分泌酸性磷酸酶来分解、吸收难溶性磷源。为研究植物-微生物磷吸收作用机制及砂仁生态种植提供数据支持和理论依据。]]> 2020/3/11 16:40:30 641true 目的 以藏红花悬浮细胞为研究对象，克隆藏红花酸糖基转移酶（crocetin glycosyltransferase）UGTCs4基因，并对其进行生物信息学和表达分析。方法 采用同源克隆法和5’RACE（rapid amplification of cDNA ends）技术克隆UGTCs4基因的全长cDNA序列。运用生物信息学方法对该基因进行分析，预测其编码蛋白的结构与功能，并通过半定量RT-PCR（semi-quantitative reverse transcription and polymerase Chainreaction）方法检测不同诱导物条件下的基因表达情况。结果 UGTCs4基因的cDNA全长为1380 bp，编码459个氨基酸。分子进化树分析，该糖基转移酶基因与已知的藏红花酸糖基转移酶基因UGTCs2具有相同的糖基化藏红花酸的功能。RT-PCR的结果显示，UGTCs4基因能够响应吲哚乙酸（IAA）、脱落酸（ABA）、赤霉素（GA）、过氧化氢（H₂O₂）、茉莉酸甲酯（MeJA）多种处理，这些处理均能促使其进行转录。结论 首次从藏红花悬浮细胞中分离并报道了UGTCs4的cDNA克隆，并证实UGTCs4对不同诱导子的响应情况，为进一步研究藏红花素的生物合成及表达调控研究奠定了基础。]]> 2020/3/2 16:57:19 640true 目的 为了更好地挖掘牛樟芝Antrodia cinnamomea菌丝体三萜合成和代谢相关基因、筛选互作蛋白和牛樟芝指纹图谱分析，构建了牛樟芝菌丝体cDNA文库并分析其表达序列标签（EST）序列。方法 以牛樟芝菌丝体为材料，采用Gateway法构建其cDNA文库，对部分EST序列进行生物信息学分析、功能注释和EST-SSR分析。结果 成功构建了牛樟芝菌丝体cDNA文库，经鉴定文库重组率高达95%，文库滴度为6.1×10⁶cfu/mL，总克隆数为1.2×10⁷cfu，插入片段大小为300～2 000 bp，平均长度达1 000 bp。随机挑选单克隆进行测序获得65个有效EST序列，其中1个重叠群，64个单一序列，比对结果显示有45条序列有明确功能注释，18条为未知功能基因，GO功能注释结果表明序列涉及细胞组成、转运、催化活性、调控等功能。所有EST序列共含有271个SSR，牛樟芝核苷酸重复类型丰富，其中二核苷酸和三核苷酸重复基元占总重复基元的94.23%。结论 初步明确牛樟芝菌丝体cDNA文库及其EST序列相关生物信息，为牛樟芝菌丝体基因组学研究奠定理论基础。]]> 2020/3/2 16:57:19 639true 目的 选择合适的内参基因，用于巴戟天不同组织和不同处理的叶中目标基因表达量的分析检测。方法 以巴戟天不同组织和不同处理的叶为材料，根据巴戟天转录组数据，选择甘油醛-3-磷酸脱氢酶（GAPDH）、细胞色素P450（cytochromeP450，CYP）、微管蛋白α（tubulin alpha，TUA）和肌动蛋白（Actin）基因等10个内参基因作为候选基因。利用实时荧光定量技术，并结合geNorm、NormFinder和BestKeeper等软件分析内参基因的表达稳定性，从而筛选出巴戟天不同组织和不同处理叶中表达稳定的内参基因。选择合适的内参基因对巴戟天的1-脱氧木酮糖-5磷酸合成酶（DXS）和1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸还原异构酶（DXR）基因在不同组织和不同处理的叶中相对表达量进行分析。结果 内参基因GAPDH和泛素（UBQ）在巴戟天不同组织中表达最稳定，GAPDH＋UBQ的双内参组合能够更加准确地分析目的基因在巴戟天不同组织的相对表达量，而在不同处理的叶中GAPDH和Actin表达稳定性最好，选择GAPDH＋Actin的双内参组合可以确保目的基因相对分析表达结果的可靠性。在巴戟天不同组织中，DXS目的基因的相对表达量为根<茎<叶，DXR的相对表达量为茎<根<叶。在巴戟天不同处理的叶中，DXS和DXR基因的相对表达量相对于未处理的叶（CK）都有所提高。结论 筛选得到的稳定内参基因为后续巴戟天相关基因表达研究奠定基础，使用2个稳定内参的组合对目的基因进行均一化处理有利于提高目的基因表达分析的准确性。]]> 2020/3/2 16:57:19 638true 目的 客观评价三七内在质量，构建三七质量评价的灰色关联模型，为三七质量评价及多指标成分中药材质量评价提供参考。方法 采用HPLC法同时测定不同产地、不同商品规格三七样品中三七皂苷R₁，人参皂苷Rg₁、Re、Rb₁、Rd含量，结合灰色关联法建立整体质量评价模型。结果 所建立方法同时测定了三七皂苷R₁，人参皂苷Rg₁、Re、Rb₁、Rd成分含量，方法学考察结果良好；灰色关联法可以区分出道地产区样品、合格样品和不合格样品。结论 所建立的HPLC测定方法简单准确、稳定快速、分离效果好，可用于三七皂苷R₁及人参皂苷Rg₁、Re、Rb₁、Rd的含量测定；灰色关联法可用于多指标成分中药质量评价。]]> 2020/3/2 16:57:19 637true 目的 对姜黄属药材中萜烯缀合姜黄素类化合物（BCE）进行系统的定性、定量分析。方法 利用超高效液相色谱-飞行时间质谱法（UPLC-Q-TOF-MS/MS）建立针对BCE的定性分析，研究其在不同姜黄属药材中的分布情况；再利用UPLC法建立对姜黄、黄丝郁金及蓬莪术中的BCE及3个主要姜黄素（姜黄素、脱甲氧基姜黄素和双脱甲氧基姜黄素）的定量分析，研究BCE在不同姜黄属药材中的含量差异及其与其他姜黄素类成分的含量差异。结果 在定性研究中，通过对BCE一级、二级裂解碎片及质谱裂解规律的分析，发现只有姜黄、黄丝郁金中含有该类成分，而蓬莪术中未能检测出BCE；在定量研究中，BCE及3个主要姜黄素在线性范围内均具有良好的线性关系（r≥0.9993）；平均回收率在99.407%～113.631%，RSD<4%，测定发现姜黄中的3个姜黄素类成分明显高于另外2种药材，且BCE在3种药材中含量差异较大，姜黄中的BCE含量是黄丝郁金的4倍。结论 本研究建立的定性、定量分析方法能够为更多BCE类新颖结构化合物的发现和分析提供借鉴，并为提升姜黄属药材的质量标准提供依据。]]> 2020/3/2 16:57:19 636true 目的 基于UPLC指纹图谱、多成分定量与化学模式识别相结合的方法，评价不同产地青钱柳质量，为其进一步开发利用提供依据。方法 建立5个省20批不同产地青钱柳UPLC指纹图谱，确定共有峰，通过对照品比对指认3种化学成分并测定样品中含量；使用SPSS 22.2、SIMCA软件进行聚类分析和主成分分析。结果 选取了16个色谱峰作为指纹图谱的共有峰，通过聚类分析可将20批青钱柳分为6类，主成分分析与聚类分析结果基本一致；经主成分分析，5个主成分因子的累积方差贡献率为86.765%，通过主成分分析推测出产于湖北恩施的S14、S15药材样品的质量最好，产于江西修水的S4、S5、S8、S16次之；被指认的异槲皮苷、槲皮苷、阿福豆苷在20批样品中的质量分数分别为0.360%～0.884%、0.263%～1.097%、0.092%～0.403%，其中，S4、S8、S14、S15的主成分分析综合得分及3个成分含量总和均处在前4位，而S18、S20则均处在倒数前2位。结论 指纹图谱、结合聚类分析及主成分分析可以更全面地评价青钱柳质量，异槲皮苷、槲皮苷、阿福豆苷可以作为青钱柳质量控制的指标性成分。]]> 2020/3/2 16:57:19 635true 目的 对虎杖中1个新的R2R3-MYB转录因子基因PcMYB1进行转录活性鉴定和表达特性分析，并在转基因拟南芥中进行功能研究。方法 利用酵母单杂交实验分析PcMYB1的转录活性；荧光定量PCR（RT-PCR）技术检测虎杖中PcMYB1的表达模式；利用Wiesner染色和溴乙酰法检测PcMYB1转基因拟南芥中的木质素含量；RT-PCR技术分析PcMYB1转基因拟南芥木质素合成相关基因的表达。结果 酵母单杂实验结果表明，PcMYB1具有转录抑制活性；RT-PCR结果显示PcMYB1在虎杖根、茎、叶中均有表达，在叶中表达量最高，并且紫外照射处理可诱导叶片中PcMYB1的表达；与野生型拟南芥相比，转基因拟南芥的株高降低了24.07%，木质部的细胞染色程度浅，转基因拟南芥木质素含量降低了14.81%，参与木质素合成的AtC4H、AtC3H、AtF5H、AtCOMT、AtCAD基因表达下调。结论 PcMYB1具有转录抑制活性，对植物木质素合成具有负调控作用。]]> 2020/2/20 11:22:08 634true 目的 采用18 S rRNA基因、ITS2序列、SCAR标记等3种DNA分子标记法鉴别草珊瑚，为其分子鉴定提供依据。方法 通过PCR扩增、克隆测序后获得草珊瑚18 S rRNA基因序列，并进行Blast比对；通过PCR扩增、测序并注释后获得草珊瑚ITS2序列，从GenBank上收集混伪品和其他植物的ITS2序列，使用MEGA 5.5软件，计算种内种间遗传距离，构建系统聚类树；通过RAPD法获得草珊瑚SCAR分子标记，克隆测序后，设计特异性引物扩增草珊瑚及其混伪品。结果 获得的草珊瑚18 S rRNA基因长度为1 820 bp，Blast比对显示草珊瑚与金粟兰科同源性最高，同源性为99%，证明其为草珊瑚的18 S rRNA基因。获得的草珊瑚ITS2序列长度为500 bp，草珊瑚与其混伪品之间的遗传距离为0.190～0.219，混伪品之间的遗传距离为0～0.074，聚类分析显示草珊瑚聚为一支，混伪品聚为一支，与其他植物距离较远。获得草珊瑚的SCAR分子标记，用特异性引物扩增出现草珊瑚特异性产物，混伪品未出现特异性产物。结论 3种分子标记法联合可更有效地鉴别草珊瑚及其混伪品，从而建立一套新的鉴别草珊瑚与混伪品的方法，为其鉴别提供新的思路。]]> 2020/2/20 11:22:08 633true 目的 克隆大花胡麻草环烯醚萜合酶基因（CgIS），并进行表达分析。方法 以大花胡麻草根、茎、叶转录组中唯一的CgIS基因序列为基础，采用RT-PCR技术从大花胡麻草幼叶克隆CgIS基因，并进行组织特异性表达分析。结果 大花胡麻草CgIS基因（GenBank登录号MH794270）全长1 185 bp，编码394个氨基酸；CgIS蛋白相对相对分子质量44 670，理论pI为6.17；该蛋白属于孕酮5β-还原酶（P5β-R）家族成员，可能定位于细胞质；该蛋白无信号肽，为亲水稳定蛋白，主要由α-螺旋（40.61%）和无规则卷曲（46.70%）构成；该蛋白具有SDR（短链脱氢酶/还原酶）和P5βR蛋白保守结构域；CgIS蛋白与芝麻SiIS蛋白亲缘关系最近；CgIS基因主要在叶中表达。结论 克隆了CgIS基因，并对其进行表达分析，为进一步研究该基因的功能和环烯醚萜类的生物合成途径奠定基础。]]> 2020/2/20 11:22:08 632true 目的 研究47份不同来源、不同表型正品细辛样品的有效成分含量，评价正品细辛样品的质量，揭示有效成分形成与遗传和地域的关系，为细辛优良品种选育与开发利用提供理论依据。方法 冷凝回流法提取挥发油、乙醇热浸法提取醇溶性浸出物，HPLC法测定细辛脂素含量、气质联用（GC-MS）分析挥发油组分，组间联接法进行聚类分析。结果 47份细辛样品挥发油量0.81%～3.32%。有5份样品挥发油量超过3.0%。醇溶性浸出物量为9.87%～29.40%，含量超过20%的样品占总数的63.8%。细辛脂素质量分数为0.118%～0.424%，有26份样品细辛脂素质量分数超过0.25%；47份细辛挥发油可分离出的化合物种类48～77种，化合物种类和含量有较大差异。基于有效成分的聚类分析将不同来源地、不同表型的细辛分为10类，聚类方式基本是按照来源地为基础进行聚类，同一来源地的汉城细辛和北细辛聚在一类中。结论 在同一栽培环境和条件下，不同来源地、不同植物学表型的样品个体间有效成分含量间存在差异，新品种选育时可依照植物表型选择优良育种材料。大部分样品聚类与来源地域有关而与植物表型以及植物学分类无关。]]> 2020/2/20 11:22:08 631true 目的 研究瑶药童子益母草与益母草多指标成分含量差异，并结合含量对品质进行评价。方法 采用高效液相色谱法测定瑶药童子益母草与益母草中绿原酸、盐酸益母草碱、芦丁、金丝桃苷、异槲皮苷5种化学成分含量，利用SPSS 25.0软件进行成对样品t检验及单因素方差分析推断各样品间含量差异，主成分分析评价药材品质。结果 童子益母草与益母草成对样品t检验结果表明，绿原酸、盐酸益母草碱、芦丁、金丝桃苷、异槲皮苷5种化学成分中芦丁含量呈显著性差异，其余成分无统计学差异；单因素方差分析结果表明，不同产地童子益母草和益母草药材中5种化学成分均存在极显著性差异（P<0.01）；主成分分析结果显示，益母草得分较高的产地为南宁和玉林，上思县得分最低。结论 瑶药童子益母草与益母草含量存在显著差异，南宁和玉林的药材质量较佳，为2种益母草及不同产地益母草间含量的比较提供了数据支持。]]> 2020/2/20 11:22:08 630true 目的 对蕤仁药材Prinsepiae Nux的性状、微性状及显微鉴别特征进行系统研究，为其鉴定以及《中国药典》2020年版的制定提供科学依据。方法 采用性状鉴别法、微性状鉴别法、常规显微鉴别法及偏振光显微鉴别法，对12批蕤核Prinsepia uniflora和9批齿叶扁核木P.uniflora Batal.var.serrata Rehd.果核进行系统的生药学研究。结果 从形状、大小、颜色、表面特征、质地、断面、气、味等方面，对蕤核及齿叶扁核木果核的性状特征进行观察。针对质地坚硬、经软化处理后仍不适宜制备横切片以观察完整植物组织构造并确定组织部位的药材，采用定位取材徒手切片技术，可准确获取特定部位的植物组织显微特征；针对木化组织集成较大群束，经粉碎后难以呈现单个细胞完整形态特征的药材，采用解离组织制片技术，可获取清晰、完整无重叠的单个细胞全貌及特征信息。结论 首次获取了蕤仁显微鉴别特征（内果皮石细胞、种皮表皮细胞、中果皮纤维、内胚乳细胞、子叶细胞）及微性状鉴别特征（内果皮、子叶、种皮）的全息彩色影像数据。显微特征中内果皮石细胞可作为蕤仁的专属性显微鉴别标志物，显微和微性状鉴别研究结果填补了彩色影像信息的空白。]]> 2020/2/20 11:22:08 629true 目的 通过分析黄芪Astragali Radix药材的性状以及黄酮类化学成分与绝对生长年限的相关性，明确黄芪根的生长年限是引起黄芪药材性状和化学差异性的主要因素。方法 收集不同产地、不同等级的黄芪药材，对其外观形态定性描述，长度、直径定量测定，并采用徒手切片法观察不同等级仿野生芪的生长年限分布，观察其分布规律。采用UPLC-UV法，色谱柱为Ultimate C₁₈（250 mm×4.6 mm，5 μm），柱温30℃，体积流量为1 mL/min，检测波长230nm，进样量20 μL，乙腈-水梯度洗脱，建立了24批不同产地黄芪药材黄酮类成分HPLC-UV指纹图谱，并对不同等级仿野生芪和栽培芪5种黄酮类成分进行含量测定。结果 将不同生长方式的黄芪药材划分为仿野生芪和栽培芪2个规格。特等黄芪主要是5年以上生长年限的根段，一等主要是4～5年生的根段，二等主要是3～4年生的根段，三等主要是2～3年生的根段，四等主要是1～2年生的根段。不同产地、不同等级黄芪指纹图谱中指认出5个共有峰，采用相似度评价软件分析，以仿野生芪图谱为参照，仿野生芪样品相似度为0.892～0.994，栽培芪样品相似度为0.274～0.531，主成分分析和聚类分析均显示仿野生芪和栽培芪可以明显分成2类。仿野生芪5种黄酮类成分含量明显高于栽培芪，仿野生芪（除特等外）总黄酮含量与等级（或直径、年限）呈正相关，栽培芪与等级不相关。结论 本研究为黄芪药材商品规格等级标准的制定提供科学依据，为进一步构建黄芪药材质量等级标准奠定基础。]]> 2020/1/20 13:31:14 628true 目的 以药用植物三叶崖爬藤为材料，在利用高通量技术测定DNA序列的基础上，对叶绿体基因组进行组装和序列分析，为进一步开展群体遗传学和多样性研究奠定基础。方法 利用HiSeq X Ten测定三叶崖爬藤的DNA序列，用NOVOPlasty组装叶绿体基因组，在基因注释的基础上开展序列分析。结果 三叶崖爬藤叶绿体基因组的全长为160 189 bp，GC值37.5%，具1个典型的四分区域结构，包括1个大单拷贝区、1对反向重复区和1个小单拷贝区，序列长度分别为88 184、26 519、18 967 bp。三叶崖爬藤的叶绿体基因组共有133个基因，其中编码蛋白基因、rRNA基因与tRNA基因的数量分别为88、8、37个。位于反向重复区和小单拷贝区的ycf1基因3’端发生缺失，是1个假基因。结论 三叶崖爬藤的叶绿体基因组的组装和序列分析为后续开展群体遗传学和遗传多样性研究奠定了基础。]]> 2020/1/20 13:31:14 627true 目的 以纤维蛋白原用量为指标，建立体外定量测定川芎抗凝胶活性的方法，评价川芎及其中成药的抗血栓作用。方法 将川芎先后用乙醇和水定量提取，以总提取物为供试品，测定形成稳定纤维蛋白凝胶时的纤维蛋白原用量。以纤维蛋白原用量为抗凝胶活性的评价指标，用阿魏酸钠标定川芎的抗凝胶活性。根据《中国药典》2015年版（四部）生物检定统计法中的直接测定法，计算川芎的抗凝胶活性。测定了9份川芎药材、饮片及中成药的抗凝胶活性，评价方法的适用性。结果 阿魏酸钠和川芎提取物均具有显著的抗凝胶活性。川芎供试品重复测定抗凝胶活性的RSD值为4.00%（n=6），可信限率为7.82%。不同川芎样品的抗凝胶活性不同，5份川芎药材抗凝胶活性的效价分别为0.72～1.14U/g，川芎饮片及川芎酒炙饮片分别为0.68、1.32 U/g，通脉颗粒和血府逐瘀片分别为2.56、2.51 U/g。结论 建立的方法能准确测定川芎药材、饮片及相关中成药的抗凝胶活性，评价其杭血栓作用。]]> 2020/1/20 13:31:14 626true 目的 以根茎生物量、活性物质含量以及抗氧化能力为指标，选择适宜提高当归品质的高海拔种植区域。方法 在严格控制种质、水分和土壤养分的条件下，以不同海拔（2 100、2 500和2 900 m）2年生当归根茎为材料，分别对干质量、活性物质含量以及抗氧化能力进行测定与分析。结果 高海拔虽不能促进当归根茎生物量，却显著提高了活性物质的积累量和抗氧化能力；以单株积累量计算，2 900 m未抽薹当归根茎中阿魏酸、可溶性糖、酚和黄酮类含量分别为2 100 m植株的2.06、1.13、1.34和1.15倍；体外抗氧化能力也随海拔升高逐渐增加。综合分析表明，在2 100～2 900 m海拔内，未抽薹当归根茎中活性物质的总积累量（干质量和单株）均随海拔升高逐渐增加。结论 提升当归种植海拔高度可显著提高根茎活性物质量；活性物质生物合成与积累受到低温和光照的综合调控。该研究结果将为提高当归产量和品质以及大面积种植栽培提供理论基础与依据。]]> 2020/1/20 13:31:14 625true 目的 建立电感耦合等离子体质谱法（ICP-MS）同时测定乌梅中16种无机元素的方法，对乌梅进行分析和评价。方法 样品经微波消解后，采用ICP-MS法测定乌梅16种无机元素含量，运用SPSS 21.0对数据进行主成分分析（PCA）和相关分析。结果 乌梅间无机元素的组成大体相同，16种元素中以K、Ca、Mg、Na、Fe、B含量较为丰富。通过PCA，27批相同产地的乌梅样品均聚在一起，表明乌梅中无机元素含量的差异与产地的生态环境有一定关系，而品种间的差异并不明显。乌梅的特征元素为Cu、Zn、Ca、Mg，综合分析四川地区的无机元素得分较高。结论 本研究建立了准确高效分析评价不同产地乌梅中无机元素的方法，为乌梅的品种选育、质量控制和综合利用提供科学依据。]]> 2020/1/20 13:31:14 624true 目的 建立蟾酥原浆HPLC指纹图谱及原浆中8种成分含量测定方法，对不同产地蟾酥原浆进行成分含量差异比较，同时进行质量评价。方法 以乙腈-水为流动相，梯度洗脱，检测波长296 nm，体积流量1.2 mL/min，柱温30℃，进样量10 μL；建立蟾酥原浆指纹图谱，测定8个成分含量，对结果进行聚类分析和主成分分析。结果 18批样品指纹图谱中有12个共有峰，各样品相似度有所差异，8个成分在各自范围内线性关系良好（r²≥0.9995），精密度、重复性RSD<0.5%，在30 h内稳定性较好（RSD<0.7%），日蟾毒它灵、沙蟾毒精、远华蟾蜍精、蟾毒它灵、华蟾毒它灵、蟾毒灵、华蟾酥毒基和脂蟾毒配基回收率平均值分别为103.7%、103.0%、102.9%、103.0%、103.9%、100.3%、103.4%、103.2%，且RSD均小于1.2%，8个成分含量测定结果及聚类分析和主成分分析结果可知不同产地原浆质量有所差异。结论 该方法简便可靠，为蟾酥原浆质量把控提供一定依据及参考。]]> 2020/1/20 13:31:14 623true 目的 基于藁本属Ligusticum叶绿体基因组高频插入缺失区域开发InDel标记，同时结合通用条形码对道地川芎及其常用混伪品进行种质鉴定和系统发育研究。方法 通过8个DNA通用条形码ycf1、matK、ITS2、rpoC1、rbcL、rpoB、trnK、psbA-trnH序列片段对采集的26个川芎样品及其常用混伪品进行了扩增和测序，采用了遗传距离统计法、barcoding gap分析法和构建系统发育树法进行亲缘关系和系统发育研究。同时利用InDel分子标记，采用构建进化树法对道地川芎及其混伪品物种进行分子鉴定。结果 rbcL片段保守位点最多（97.32%），且GC含量最高（44.9%）。rbcL+rpoB片段具有最小的平均种内遗传距离（0.002 5），psbA-trnH片段具有最大的平均种间遗传距离（0.429 2）。trnK片段和rbcL+rpoB片段具有最高的种间变异，psbA-trnH片段的“barcodinggap”区重叠度最小。采用的8对DNA通用条形码无法准确地鉴定道地川芎药材与其他混伪品物种。InDel分子标记的聚类分析中，24对InDel引物中的4对引物组合能准确地鉴定出道地川芎，并将道地川芎及其混伪品物种聚类为4个分支，其中一个分支为采集的道地川产川芎药材。结论 InDel标记对道地川芎及其常用混伪品的鉴定能力高于通用条形码。对于传统的通用DNA条形码，由于遗传成分差异大，无法区分川芎及其常用混伪品。新开发出的InDel分子标记可以有效地鉴定道地川芎及其常用混伪品，从分子水平上为川芎道地性研究提供有效手段。]]> 2020/1/9 13:12:41 622true 目的 基于转录组测序数据鉴别和分析多花黄精EST-SSR位点，开发可用于多花黄精种质资源评价与利用的SSR标记。方法 利用MISA工具从多花黄精转录组126 544条Unigenes中鉴定SSR位点并进行分析；利用Primer 3.0设计SSR引物，随机选择50对SSR引物进行有效性验证。结果 从9982条Unigenes中鉴定出12 317个包含2～6个核苷酸重复类型的SSR位点，SSR的分布频率为9.73%，发生频率为1/5.91 kb；SSR位点中的主导类型是二核苷酸重复，占总SSR的53.14%，其次是三核苷酸重复，占33.31%。SSR引物的有效性筛选显示，50个SSR引物对中有29个（58%）可从多花黄精中扩增出预期大小的SSR条带。SSR荧光标记的毛细管电泳检测显示在多花黄精的7个SSR位点共鉴定出了9种基因型，进一步验证了SSR引物的有效性。结论 多花黄精转录组SSR位点出现频率高，重复类型丰富，多态性较高，这将为多花黄精遗传多样性分析和遗传图谱构建提供大量有价值的候选标记，也可为黄精属内种间物种的分子鉴别、多花黄精优良品种的分子辅助育种提供技术手段。]]> 2020/1/9 13:12:41 621true 目的 对不同基原淫羊藿药材不同部位所含的黄酮类成分进行比较，为淫羊藿质量评价及药用部位的合理选择提供依据。方法 采集13批淫羊藿植株地上部分，分为叶片、叶柄、茎3个部位，对其HPLC指纹图谱和朝藿定A、B、C及淫羊藿苷、宝藿苷I 5种黄酮类成分进行分析，进而采用方差分析和中药色谱指纹图谱相似度评价软件并结合聚类分析（HCA）对淫羊藿叶片、叶柄和茎的含量差异进行综合评价。结果 指纹图谱结果表明淫羊藿叶片中化学成分较茎及叶柄中丰富，叶柄与茎化学成分基本一致；含量测定结果表明淫羊藿叶片中5种成分含量均显著高于叶柄及茎，甚至达到数10倍。聚类分析结果也表明叶片与叶柄及茎可明显区分开来。结论 通过分析淫羊藿不同部位化学成分差异，明确了淫羊藿叶片、叶柄及茎的质量差异，为淫羊藿质量控制及药用部位的确定提供了实验依据。]]> 2020/1/9 13:12:41 620true 目的 比较不同模式识别方法结合化学指纹图谱对不同产地三叶青Tetrastigma hemsleyanum的鉴别效果，提出三叶青产地鉴别的新方法。方法 收集浙江、云南和贵州3个产区的72批三叶青样品，采集HPLC指纹图谱，标注18个共有峰，比较主成分分析、正交偏最小二乘法-判别分析和随机森林算法在处理不同产地样品复杂数据中的差异效果。结果 72批三叶青样品经主成分分析只能分为2类，正交偏最小二乘法-判别分析的结果优于主成分分析，随机森林法能将3个产区的样品完全分开。利用随机森林算法结合指纹图谱能有效地对不同产区的三叶青进行鉴别和区分。结论 本研究可作为三叶青产区和质量控制的有效方法，为多指标的复杂指纹图谱鉴别不同产地药材提供有效的参考。]]> 2020/1/9 13:12:41 619true 目的 获得鲜三七和干三七菌群结构信息。方法 以鲜三七和干三七为研究材料，利用Illumina MiSeq平台，采用高通量测序并进行数据分析。结果 鲜三七和干三七共获得637个操作分类单元（OTUs），其中15个OTU为共有，鲜三七和干三七特有的OTU数量分别为484、123个。新鲜三七中占比较大的菌门为变形菌门（Proteobacteria，59.7%）、厚壁菌门（Firmicutes，40.1%）；干三七中占比较高的菌门为厚壁菌门（Firmicutes，99.8%）。鲜三七中占比较大的菌属为肠杆菌属（Enterobacter，37.4%）、嗜碱菌属（Alkaliphilus，11.5%）；干三七中占比较大的菌属是芽孢杆菌属（Bacillus，54.6%），类芽孢杆菌（Paenibaciiius，44.9%）。KEGG功能预测表明干三七的萜类化合物和聚酮类化合物代谢功能菌群的相对丰度高于鲜三七。结论 鲜三七菌群多样性高于干三七；干三七中的萜类化合物和聚酮类化合物代谢功能菌群丰富度高于鲜三七，这为三七发酵皂苷菌株筛选提供了重要参考。]]> 2020/1/9 13:12:41 618true 目的 对不同产地薏苡仁药材中的7种甘油三酯含量及2种不饱和脂肪酸含量进行测定，评价不同产地薏苡仁药材的质量。方法 采用HPLC-ELSD法测定薏苡仁药材中7种甘油三酯含量，建立HPLC-UV法测定油酸、亚油酸含量，并结合聚类分析对薏苡仁药材质量进行评价。结果 14批薏苡仁药材中三亚油酸甘油酯、1，2-二亚油酸-3-油酸甘油酯、1，2-二亚油酸-3-棕榈酸甘油酯、1，2-二油酸-3-亚油酸甘油酯、1-棕榈酸-2油酸-3-亚油酸甘油酯、三油酸甘油酯、1，2-二油酸-3-棕榈酸甘油酯质量分数分别在0.31%～0.83%、0.81%～1.81%、0.38%～0.95%、1.19%～2.39%、0.67%～1.58%、0.71%～1.55%、0.44%～1.13%；14批薏苡仁药材中油酸、亚油酸含量分别在0.45%～0.72%、0.37%～0.53%；聚类结果可知，以甘油三酯和脂肪酸为变量可以把薏苡仁药材聚为3类。结论 不同产地薏苡仁药材甘油三酯及脂肪酸的含量存在一定的差异，聚类结果未发现其含量和产地的相关性。多组分含量测定能更全面地反映薏苡仁药材的质量。]]> 2020/1/9 13:12:41 617true 目的 克隆马蓝Baphicacanthus cusia吲哚类生物碱合成途径的色氨酸合成酶（tryptophan synthase，TSB）基因，命名为BcTSB（GenBank登录号AYM45644.1），对其生物信息学和表达进行分析。方法 基于前期马蓝转录组数据库，获得BcTSB基因开放阅读框（ORF），运用生物信息学手段对基因功能做出初步预测，构建pET32a-BcTSB原核表达载体，并转化大肠杆菌BL21（DE3），IPTG诱导表达后进行SDS-PAGE检测。通过实时荧光定量PCR（qRT-PCR）技术检测马蓝不同组织（根、茎、叶）中TSB表达水平。结果 克隆的BcTSB基因ORF长度为1 452 bp，编码483个氨基酸，生物信息学预测为亲水性蛋白，定位于叶绿体，该蛋白相对分子质量为51 665.89，pET-32a载体包含18 000的标签。SDS-PAGE分析在70 000处出现目的蛋白条带，与理论预期值大小一致。qRT-PCR分析显示BcTSB基因在马蓝不同组织中均有表达，且在茎中的表达量最高。结论 通过对BcTSB基因的克隆及表达分析，为进一步研究该基因功能及调控奠定了实验基础。]]> 2020/12/19 10:31:36 616true 目的 研究解决多花黄精Polygonatum cyrtonema组培苗移栽后成苗率低、长势差和叶部病害危害等问题。方法 以多花黄精组培苗为实验材料，采用福建地区生产上常用的2种商品基质和以泥炭土、珍珠岩、蛭石、沙、菌渣、草木灰为原料自行配制的6种基质，其中T5和T7基质中添加专用的育苗营养液。测定不同基质的理化特性，研究不同基质对多花黄精组培苗成苗率、生物学性状、生长量、壮苗指数、叶部病害发病率的影响，探索不同栽培基质理化特性与多花黄精组培苗生物学性状、生长量、壮苗指数的相关性。结果 不同的栽培基质对多花黄精组培苗的成苗率、形态指标、生长量、评价指标和叶部病害发病率影响较大，不同基质容重与多花黄精组培苗株高存在显著负相关，不同基质有机质含量同多花黄精组培苗全株鲜质量、干质量存在显著正相关。自行配制的T5基质处理的多花黄精组培苗成苗率、形态指标、壮苗指数优于其他基质，植株生长健壮，未发现叶部病害。结论 自行配制的T5基质可作为多花黄精组培苗栽培基质推广应用。]]> 2020/12/19 10:31:36 615true 目的 研究外源海藻糖对NaCl胁迫下甘草Glycyrrhiza uralensis幼苗的生长及总黄酮含量的影响。方法 研究了NaCl胁迫对甘草幼苗生理生长、酶活性、离子含量、渗透调节及总黄酮含量的影响，采用Microsoft Excel 2010对数据进行处理分析与整理，以SPSS19.0统计软件对数据进行方差分析。结果 10～20 mmol/L海藻糖能够显著降低NaCl对甘草幼苗的伤害，且外源海藻糖浓度为15 mmol/L时的作用效果最好。NaCl胁迫下施加外源海藻糖浓度为15 mmol/L时甘草幼苗的生长最旺盛其生长量增加最明显，且影响甘草幼苗渗透调节的K⁺、K⁺/Na⁺浓度增加最明显，Na⁺和Cl^-的浓度相对于无NaCl胁迫时有所降低；外源海藻糖浓度为15 mmol/L时可使NaCl胁迫下甘草幼苗内的抗氧化酶活性提高，并且可以增加NaCl胁迫下植物细胞内光和色素叶绿素的含量，外源海藻糖浓度为15 mmol/L可以降低NaCl胁迫下甘草幼苗内可溶性糖、脯氨酸以及细胞调节物质丙二醛（MDA）的含量。结论 甘草在NaCl胁迫下施加适宜浓度的外源海藻糖能够促进甘草幼苗生长和有效成分的积累，减少了盐害对甘草生长的危害，增强NaCl胁迫下甘草的生长能力。]]> 2020/12/19 10:31:36 614true 目的 综合评价不同钝化材料对镉（Cd）污染土壤栽培的涪城麦冬生长以及Cd吸收累积的影响。方法 以一年生川麦冬为供试材料，采用土壤盆栽实验方法研究了汉白玉（Ar）、秸秆生物炭（Br）、粉煤灰（Fh）、菌渣（Me）、硅藻土（Dm）5种不同钝化材料对川麦冬生长、生理生化指标以及Cd吸收累积的影响。结果 2种不同Cd污染程度土壤，不同钝化材料处理下均能显著提高麦冬生物量，以及麦冬叶绿素、可溶性糖和可溶性蛋白量；其中Ar和Me处理提升幅度最大。麦冬抗氧化酶系统活性均显著降低，丙二醛（MDA）含量无显著变化。不同钝化材料处理均极显著提高麦冬地下部黄酮含量，其中Ar和Fh处理提升幅度最大。2种Cd污染浓度土壤，不同钝化材料处理均能降低麦冬各部重金属Cd含量；麦冬地上和地下部分Cd含量较对照均极显著降低；Ar、Br和Fh处理效果更佳。结论 综合对比施加不同钝化材料处理，从提升麦冬生物量方面，Me处理效果更佳，略优于Ar、Br。从降低麦冬Cd吸收积累以及提升麦冬有效成分黄酮的作用方面，Ar和Fh效果更佳。]]> 2020/12/19 10:31:36 613true 目的 对畲药十二时辰花Clematis florida.var.plena挥发油的主要化学成分进行分析研究，为十二时辰规模化合理栽培及质量标准的制定提供参考。方法 采用水蒸气蒸馏法提取十二时辰花中的挥发油，采用GC-MS进行分析鉴定，并采用面积归一化法测定各成分的百分比含量。结果 从十二时辰花挥发油中检出32种成分，鉴定出20种挥发油化学成分，其中含量高于1%的成分有13个，占比最多的5种成分分别为棕榈酸（26.94%）、叶绿醇（10.58%）、亚油酸（6.13%）、十五烷（4.54%）和正二十三烷（3.84%），以棕榈酸含量最高。结论 采用GC-MS联用技术分析十二时辰花挥发油活性成分的主要化学组成，为推广十二时辰的种植、生产及进一步开发利用提供了科学依据。]]> 2020/12/19 10:31:36 612true 目的 基于ISSR分子标记研究地黄Rehmannia glutinosa栽培品种与野生群体遗传多样性，比较它们的遗传多样性差异，构建它们之间亲缘关系，为地黄种质资源保护及新品种选育提供参考。方法 应用ISSR分子标记技术对地黄栽培品种，野生群体及其近缘种106个样品进行分析，利用POPGEN软件分析Nei’s基因多样性指数（H）等遗传信息参数，应用NTSYS软件构建亲缘关系UPGMA聚类图。结果 7条引物在所有取样群体中，共检测到85个位点，其中多态性位点83个，多态位点百分率（PPB）为97.65%。地黄栽培品种与野生群体及其近缘种的种群间H值为0.265 9，Shannon’s多样性信息指数（I）为0.412 5。地黄栽培品种的多态性位点26个，PPB为30.59%。河南省地黄野生群体多态性位点71个，PPB为83.53%。ISSR聚类分析结果显示地黄栽培品种，野生群体及其近缘种共分成7个组。结论 ISSR分子标记揭示地黄野生群体比栽培品种具有更高的遗传多样性，河南分布的野生地黄群体的遗传多性高于其他地区，与其作为栽培地黄的道地产区，具有一定的相关性。地黄野生群体间亲缘关系与其地理分布格局并无明显相关性。]]> 2020/12/3 15:53:16 611true 目的 采用DNA条形码分子鉴定技术鉴定藏柴胡（又名窄竹叶柴胡）Bupleurum marginatum及其易混品，以确保柴胡药材质量及临床用药安全。方法 收集柴胡药材共50份，对其ITS2序列进行PCR扩增并双向测序，所得序列用CodonCode Aligner软件校对拼接后，利用MEGA 6.0对序列进行分析比对，计算种内、种间遗传距离，利用邻接法（NJ）构建系统聚类树，并应用ITS2数据库网站预测其ITS2二级结构。结果 藏柴胡种内遗传距离明显小于它与其同属的种间遗传距离，基于ITS2建立的NJ树和网站预测的ITS2二级结构，均能准确将藏柴胡药材与其易混药材区分。结论 基于ITS2序列可以科学准确地鉴别藏柴胡药材及其易混品，为确保临床用药安全提供更多先进可靠的技术手段。]]> 2020/12/3 15:53:16 610true 目的 利用稳定同位素质谱测定6个产区的竹节参Panax Japonicus中碳、氮、氢、氧4种同位素比率。方法 采用基于机器学习分类器的线性判别法（LD），高斯核支持向量机（SVM）和基于神经网络工具箱的模式识别反向传播学习算法（BPN）对竹节参的产地进行判别。结果 结果表明，稳定同位素碳（d¹³C）具有明显的地域特征，可有效地区分竹节参产地；LD法和BPN法均能区分6个产地的竹节参，判定准确率均达100%。结论 基于稳定同位素技术并结合LD和BPN法能有效进行竹节参的产地溯源。]]> 2020/12/3 15:53:16 609true 目的 分析防己根、根茎、茎、叶4个部位UPLC指纹图谱差异，初步获取不同部位之间化学成分类型及部分有效成分含量差异，为合理开发和利用防己药材提供依据。方法 采用UPLC法建立防己不同部位化学指纹图谱；采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012版）计算不同部位共有峰和相似度，并分析各部位特征峰；利用SPSS 23.0，采用成对样本t检验，对不同样本及不同成分根和根茎间含量差异进行比较。结果 根和根茎化学成分相似度为0.928，两者含化学成分类似，并均含有防己药材指标性成分粉防己碱和防己诺林碱；茎和叶化学成分相似度为0.947，茎、叶与根及根茎相似度均较低，且不含粉防己碱和防己诺林碱。成对样本t检验结果表明，根茎化学成分综合含量高于根中含量，且其差异主要来源于其他非指标性成分，其指标成分粉防己碱和防己诺林碱两者间无显著差异。结论 防己不同部位化学成分类型和含量存在显著差异，根茎中化学成分类型与根相似，且部分成分含量高于根中含量，可作为优质防己药材与根同用；茎和叶中不含防己药材指标性成分粉防己碱和防己诺林碱，不能作为防己药材代替根使用，但其含有许多其他化学成分，可作为新资源用于开发其他药用功效。]]> 2020/12/3 15:53:16 608true 目的 克隆桑黄菌丝甾醇C14还原酶（ERG24）基因全长，并进行生物信息学及表达模式的初步分析。方法 基于桑黄菌丝转录组数据设计PlERG24基因引物，采用PCR技术获得其cDNA全长序列，并通过Ex PASy等在线分析软件对其进行生物信息学分析，同时利用实时荧光定量PCR技术分析该基因的表达模式。结果 从桑黄菌丝中克隆到1 412 bp的PlERG24基因，开放阅读框长度为1 326 bp，编码441个氨基酸，理论相对分子质量为49 358.61，等电点为5.28，为不含信号肽的疏水性蛋白，推测定位于质膜，具有6个磷酸化位点；系统进化树分析表明，该序列与暴马桑黄的ERG24基因同源性最高。表达模式分析表明，在桑黄菌丝生长的一个周期内，PlERG24基因表达在25 d时达到最高6.36。结论 获得了PlERG24基因全长序列，为进一步研究该基因的功能以及利用基因工程等手段改良麦角甾醇生物合成途径奠定基础。]]> 2020/11/25 17:30:09 607true 目的 构建丹参无菌培养体系并进行无菌材料有效成分含量测定，为丹参快繁及次生代谢调控研究提供基础。方法 利用正交实验筛选丹参叶片诱导愈伤组织的激素配比，并进行芽、根的诱导，建立组织培养体系；HPLC法分析有效成分含量。结果 丹参愈伤组织诱导最佳培养基为MS＋6-BA（2.0 mg/L）＋NAA（1.0 mg/L）＋2，4-D（0.5 mg/L），最适生芽培养基为MS＋6-BA（2.0 mg/L）＋NAA（1.0 mg/L），生根培养基为1/2 MS＋NAA（0.5 mg/L）。丹参7种有效成分在无菌苗、愈伤组织和再生苗中均可检测到，含量有显著差异（P<0.05），其中迷迭香酸与丹酚酸B含量较高。结论 成功建立了丹参愈伤组织培养体系并获得生长旺盛的再生苗；3种无菌材料有效成分积累存在差异，为丹参进一步研究奠定基础。]]> 2020/11/25 17:30:09 606true 目的 探明野生与移栽滇重楼Paris polyphylla var.yunnanensis根际土壤中基本养分、土壤酶活性与根茎品质的关系，筛选影响滇重楼活性成分的主导土壤因子，为滇重楼合理施肥提供参考依据。方法 以采自云贵川33个样点的滇重楼为材料，测定了其根茎品质指标以及生长土壤基本养分含量和土壤酶活性；分析了根茎品质指标与土壤因子的相关性，并采用逐步回归分析方法筛选出影响滇重楼根茎品质的主要土壤因子。结果 滇重楼野生品和移栽品在总皂苷、总多糖、总黄酮含量上具有一定的差异，药材品质具有一定的地域性。所有滇重楼根际土壤样品的酸碱度适中，基本养分充足、含量丰富，土壤酶活性高，适宜于滇重楼的生长发育，野生地土壤肥力质量优于移栽地。野生滇重楼根茎总皂苷与多酚氧化酶活性呈现出极显著正相关，总黄酮与pH值、脲酶活性呈极显著负相关关系。移栽滇重楼根茎总皂苷与速效钾含量呈现出显著负相关，总黄酮与蔗糖酶活性呈显著正相关关系，总多糖与碱性磷酸酶活性呈显著正相关。结论 滇重楼品质主要受到土壤因子综合影响，在滇重楼野外就地保护或人工栽培过程中，注意根据实际情况增减土壤各养分的含量及其比例关系。]]> 2020/11/25 17:30:09 605true 目的 进行不同来源苗药黑骨藤抗类风湿性关节炎有效部位中新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸B，异绿原酸A、异绿原酸C 6种咖啡酰基奎宁酸类化学成分测定并结合化学计量学综合分析其质量，为合理有效评价苗药黑骨藤抗类风湿性关节炎功效提供依据。方法 采用HPLC-UV法同时测定，色谱柱为Xtimate C₁₈（250 mm×4.6 mm，5 μm），流动相为0.1%甲酸水-乙腈，梯度洗脱，进样量10 μL，体积流量1 mL/min，柱温25℃，检测波长327 nm；采用SPSS24.0及SIMCA14.1软件进行综合分析评价黑骨藤药材的质量。结果 对21批不同来源黑骨藤样品进行了含量测定；通过聚类分析，将21批样品分为Ⅲ类，其中第Ⅱ和第Ⅲ类质量较好；主成分分析和偏最小二乘判别分析结果与聚类结果一致，筛选得到绿原酸和异绿原酸C是引起不同来源黑骨藤质量差异的标志物。结论 通过对6种咖啡酰基奎宁酸类成分含量测定结合化学计量法，可以进一步针对黑骨藤抗类风湿性关节炎的功效品质进行评价，为黑骨藤质量控制提供参考依据。]]> 2020/11/25 17:30:09 604true 目的 从川续断Dipsacus asper中克隆并筛选出稳定的内参基因用于实时荧光PCR（qRT-PCR）的分析校正，为今后川续断功能基因的表达分析及调控机制研究提供基础。方法 从川续断转录组数据库中筛选并克隆肌动蛋白（Actin）、微管蛋白（Tubulin）、GAPDH基因家族内参基因的核心片段，以不同产地、不同组织部位和不同发育时期的川续断植株为材料，通过qRT-PCR获得各基因的表达信息，利用geNorm、NormFinder、BestKeeper、Delta CT、RefFinder共5个内参评价软件分析各基因的表达稳定性，综合评价并筛选出最佳的川续断内参基因。结果 克隆获得10个候选内参基因核心片段，分别属于Actin、Tubulin、GAPDH 3大基因家族，各家族基因序列间同源性较高；稳定性综合分析结果显示，DaACT103在不同产地及不同组织部位的表达稳定性较强且表达量相对较高，DaTUB5在不同发育时期的表达稳定性较强且表达量相对较低。结论 DaACT103和DaTUB5均可作为川续断的内参基因，其中，DaACT103适用于作为具有较高表达丰度基因的内参基因；DaTUB5适用于作为表达丰度较低基因的内参基因。]]> 2020/11/5 13:46:46 603true 目的 通过分析30%聚乙二醇（PEG）模拟的干旱胁迫处理下半夏茎段转录组数据，挖掘响应干旱胁迫的相关基因，探索干旱胁迫下半夏发生"倒苗"的分子机制。方法 以干旱胁迫下半夏发生"倒苗"时的茎段作为研究材料，采用Illumina Hiseq 2500平台进行转录组双向测序，并对数据进行生物信息学相关分析。结果 共获得23.00 Gb clean data，对照组与干旱胁迫处理组分别获得37 467 952和39 903 362个clean reads，经Trinity软件组装获得100 274个uingenes。通过将组装所得unigenes分别与Nr、eggNOG、Pfam、Swiss-Prot、KOG、GO、KEGG、COG等数据库进行比对分析，41 132个unigenes获得功能注释。最终筛选得到差异表达基因4 052个，其中2 080个DEGs表达上调，1 972个DEGs表达下调。KEGG通路富集分析显示，差异表达基因主要集中在核糖体、碳代谢、淀粉和蔗糖代谢、植物激素信号转导和氨基酸生物合成等过程；基因表达水平分析显示，半夏中编码植物激素代谢与信号转导、氧化还原相关酶、热激蛋白和液泡加工酶等基因在干旱胁迫处理后表达水平显著上升，多数编码水通道蛋白的DEGs表达水平下降。结论 通过对PEG模拟的干旱胁迫处理下半夏转录组测序结果进行分析，获得半夏水分代谢、激素代谢与信号转导、相关响应蛋白等候选基因，可为揭示干旱胁迫导致半夏"倒苗"的发生机制提供基因资源和理论依据。]]> 2020/11/5 13:46:46 602true 目的 克隆丹参Salvia miltiorrhiza转录因子基因SmWRKY14，分析其在不同组织及应答环境因子和植物激素过程中的表达特征。方法 以丹参转录组数据中Unigene（c50007_g1）序列为参考，利用PCR扩增获得SmWRKY14基因序列。通过生物信息软件及在线工具预测基因编码蛋白的理化性质、蛋白质结构等分子特征，采用DNAMAN和MEGA 6.0分别进行氨基酸多序列比对和进化树构建，运用实时荧光定量PCR检测该基因的表达模式。结果 克隆得到SmWRKY14基因cDNA全长1 103 bp，编码244个氨基酸，相对分子质量27 600，等电点8.19。该蛋白含有WRKY特征基序，不含信号肽及跨膜结构域，其高级结构主要由无规卷曲构成。进化树分析表明SmWRKY14蛋白与柿WRKY14蛋白的亲缘关系最近。SmWRKY14基因在丹参中各器官中为组成型表达，且该基因与丹参酮合成关键酶基因DXS、GGPPS、CPS的表达模式相似，且受茉莉酸甲酯、脱落酸、赤霉素等植物激素及机械损伤的强烈诱导。结论 获得丹参SmWRKY14基因序列、生物信息及表达特征，为研究WRKY家族成员调控丹参酮类化合物的合成、应答植物激素及参与防御反应的分子机制提供理论依据。]]> 2020/11/5 13:46:46 601true 目的 比较不同产地的蒙古黄芪多糖（APS）部分酸水解产物寡糖特征图谱及免疫活性差异，建立以寡糖混合物为指标的黄芪品质评价方法。方法 以黄芪多糖为研究对象，首先通过正交试验选择了最佳部分酸水解的条件，将多糖水解成可供分析的寡糖，建立基于部分酸水解-亲水作用色谱的黄芪寡糖特征图谱，利用SIMCA软件对数据进行多元统计分析以区分不同产地的蒙古黄芪，采用亲水作用色谱与质谱联用对黄芪多糖部分酸水解产物进行结构表征，并通过小鼠腹腔巨噬细胞吞噬中性红实验进行活性评价。结果 通过正交试验得到的最佳水解条件为温度90℃、三氟乙酸浓度1 mol/L，水解时间1 h。黄芪寡糖特征图谱的PCA结果显示，可以将3种不同的蒙古黄芪区分开。质谱解析可知3种不同的黄芪多糖均主要为1→4连接的线性葡聚糖，水解得到聚合度3~8的葡寡糖。山西浑源仿野生黄芪多糖的部分酸水解产物增强巨噬细胞吞噬活性的能力较高于移栽芪且高于未水解的总黄芪多糖。结论 表明基于部分酸水解-亲水作用色谱的黄芪寡糖特征图谱及对细胞免疫功能影响差异可为不同产地及不同种植方式的蒙古黄芪进行品质评价，也是对黄芪质量评价方法的重要补充。同时对其他中药多糖的表征具有一定的启蒙作用。]]> 2020/11/5 13:46:46 600true 目的 建立蜀葵花HPLC指纹图谱及rbcL序列DNA条形码（barcoding）分子鉴定方法。方法 色谱柱为Welchrom Column C₁₈（300 mm×4.6 mm，5 μm），以乙腈-0.1%甲酸溶液为流动相、梯度洗脱，体积流量1.0 mL/min，柱温35℃，检测波长365 nm，进样量10 μL；采用"中药色谱指纹图谱相似度评价软件（2012版A版）"进行相似度评价；同时以rbcL为引物，对11份蜀葵花进行PCR扩增并测定序列，运用DNDMAN和MEGA7.0及CodonCode Aligner17.0软件进行分析。结果 建立了11份蜀葵花的HPLC指纹图谱，得到21个共有峰，相似度均大于0.88，并标定了金丝桃苷（7号峰）、槲皮素（15号峰）、芹菜素（19号峰）、山柰素（20号峰）4个成分；rbcL序列扩增和测序成功率100%，测序到的长度500 bp，GC含量为44.10%~44.40%，种内遗传距离0~0.004 0，平均遗传距离0.001 4，变异位点数10个，相似度为99.00%。结论 建立的HPLC指纹图谱方法稳定可靠、rbcL序列DNA barcoding分子鉴定方法重复性好，可用于蜀葵花的质量控制。]]> 2020/11/5 13:46:47 599true 目的 使用MSAP技术对2种化学型广藿香Pogostemon cablin的基因组DNA进行甲基化分析。方法 使用甲基化敏感扩增多态性（methylation sensitive amplification polymorphism，MSAP）技术检测2种化学型、共计197个广藿香样本的DNA甲基化程度。结果 4类MSAP位点信息的Shannon多态性指数的最高值或较高值均在阳春、德庆、高州大垌、禄步、广宁5个产地中产生；石牌广藿香（酮型）与其余产地的广藿香（醇型）形成2个分支；广藿香居群间的变异所占百分比远大于居群内变异所占百分比，达60.66%；共筛选出10条石牌产地与其余产地的差异性片段并进行测序分析，其中一条属于丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶家族。结论 可通过MSAP技术在不同来源的样品中鉴别出石牌产地的广藿香；广藿香不同化学型的形成与其DNA甲基化水平有着密切的联系，尚需更进一步的研究。]]> 2020/10/24 8:56:17 598true 目的 挖掘与款冬萜类化合物生物合成途径相关的关键酶基因。方法 利用Illumina HiSeq2500测序平台对野生款冬花蕾和叶进行转录组测序，使用Trinity软件de novo从头组装，并通过基因功能注释、差异表达基因分析等生物信息学方法进行分析，挖掘款冬中萜类化合物生物合成途径相关的酶基因。结果 转录组测序获得39 912 371条高质量reads（SRA号：SRR9113366，SRR9113367），组装获得91 118条Unigene，55 830条Unigene在NR、Swiss-Prot、GO、COG、KEGG等数据库得到注释。鉴定出参与款冬萜类化合物生物合成相关酶基因的129个Unigene，包括91个参与三萜骨架生物合成酶基因，32个萜类合成酶基因，6个细胞色素P450基因，其中差异表达基因25个，涉及上游MVA途径的4个差异基因在花蕾中表达量高于叶，MEP途径的5个差异基因在叶中表达高于花蕾，另外还有10个基因在叶中高表达，9个基因在花蕾中高表达。根据差异基因HMGR、TPS、AS、CYP450基因在花蕾中高表达，推测可能与花蕾中萜类物质含量高有关。结论 从款冬转录组数据库中初步获得了可能参与萜类化合物生物合成途径的候选关键酶基因，为进一步阐明款冬萜类化合物生物合成的分子机制奠定基础。]]> 2020/10/24 8:56:17 597true 目的 基于不同浓度NaCl胁迫下黑果枸Lycium ruthenicum杞转录组测序结果，利用生物信息学方法对黑果枸杞bHLH转录因子家族成员进行鉴定。方法 通过对NaCl胁迫下黑果枸杞根和叶的样品进行转录组测序，筛选出bHLH家族基因，利用生物信息学方法对筛选到的基因进行理化性质、保守结构域、基因结构、细胞定位及系统进化分析。结果 黑果枸杞在NaCl胁迫下的转录组数据库中共筛选出89个bHLH转录因子家族基因；bHLH家族蛋白理化性质差异较大，71.90%的蛋白质呈弱酸性，蛋白属于亲水蛋白。黑果枸杞bHLH家族蛋白含有2个保守结构域，分别位于N端的碱性氨基酸区和C端的螺旋-环-螺旋区。亚细胞定位预测bHLH家族蛋白主要分布在细胞核内和细胞质中。进化分析显示，黑果枸杞中89个bHLH转录因子家族蛋白可分为20个亚族，其中第3亚族中包含的bHLH成员最多，为11个；第7、11、13、22亚族中的成员数量均为1个，其他亚族为2~9个。结论 NaCl胁迫下黑果枸杞bHLH转录因子家族有89个成员，bHLH家族蛋白大多数呈弱酸性，属亲水蛋白，可分为20个亚族。]]> 2020/10/24 8:56:17 596true 目的 通过文献、市场及产地调研形成新的防风Saposhnikovia divaricate商品规格等级划分表，根据防风外观性状及与品质相关的内在指标性成分，通过统计学分析，特征图谱比较，探讨新的防风药材商品规格等级划分的科学性和实用性。方法 采集黑龙江、吉林、内蒙古、河北等主产区以及主流药材市场上不同规格等级的防风药材样品，根据新的规格等级的划分表，测定样品的外观性状、浸出物、升麻素、升麻素苷、亥茅酚苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷的特征图谱，通过统计分析方法，研究规格等级与外观性状及内在指标性成分的关系。结果 依照外观性状将防风划分为野生、栽培、仿野生防风3个规格有一定科学依据，同时建议增加升麻素的含量指标作为区分野生防风和栽培防风的指标性成分。结论 不同规格的防风药材在外观性状及内在指标上均有显著差异，不同等级的防风药材是否仅以大小作为划分依据还有待讨论。]]> 2020/10/24 8:56:17 595true 目的 土壤是影响中药材活性成分形成和积累的重要生态因子，以11个省市自治区29个样地野生和栽培北柴胡Bupleurum chinense为研究材料，采用数学统计分析方法探讨柴胡皂苷积累与土壤因子的关系，为实施土壤生态调控提高北柴胡品质提供依据。方法 采用高效液相色谱法（HPLC）分析不同产地北柴胡柴胡皂苷a、c、d、e、f的含量；采用常规方法测定土壤样品的pH、有机质、电导率、全氮、碱解氮、速效磷、速效钾、有效镁、有效铁、有效铜、有效锰；通过聚类分析研究不同产地北柴胡皂苷差异；通过主成分分析解释不同产地土壤因子差异；通过Pearson相关性分析研究土壤因子与北柴胡柴胡皂苷含量的关系。结果 北柴胡的柴胡皂苷测定结果显示河南禹州的柴胡皂苷含量最高，其中柴胡皂苷a和d的含量分别为0.71%、0.80%。对不同产地进行聚类分析，根据柴胡皂苷差异29个样地分为3类。对柴胡皂苷含量与土壤因子进行Pearson相关性分析表明，土壤的有机质、有效铁与各柴胡皂苷之间呈极显著正相关（P<0.01），有效铜、有效镁与各柴胡皂苷之间呈显著负相关（P<0.05）。不同产地土壤主成分分析表明，得分较高的是样地9、10、11、14、19、28，这与不同产地北柴胡柴胡皂苷含量聚类分析的结果基本一致；通过对不同产地北柴胡主要土壤指标分析发现，在一定范围内土壤中有效铁含量与柴胡皂苷含量显著正相关，这与Pearson相关性分析结果基本一致。结论 研究结果提示在北柴胡生产实践中可以通过提高土壤有机质含量，增施铁肥等农艺措施调控北柴胡柴胡皂苷含量。]]> 2020/10/24 8:56:17 594true 目的 建立基于QuEChERS法结合气相色谱-串联质谱法（GC-MS/MS）对贝母类中药中53种农药残留量的快速检测方法，并应用于193批样品筛查。方法 根据调研选择禁限用及常用农药作为检测指标。采用QuEChERS法对样品进行前处理，在气相色谱-串联质谱多反应监测（MRM）模式下进行测定，以3个添加水平测定样品的回收率和RSD。结果 53种农药在一定含量范围内线性关系良好，r均大于0.997 8；在1倍LOD（Limit of Detection）、2倍LOD、10倍LOD 3个添加浓度水平进行回收率试验中，86.8%的农药在60%~140%，RSD均小于15%；各农药检出限均小于0.01 mg/kg。193批贝母类中药种共检出14种农药，91批样品有检出，检出率为47.2%，仅有1批超出即将执行的《中国药典》2020年版限度规定。结论 该方法检测指标具有一定针对性，且操作简便快速、灵敏可靠，适用于贝母类中药中农药残留的筛查测定。对于贝母类中药的生产种植和流通监管具有一定的参考意义。]]> 2020/10/24 8:56:17 593true 目的 克隆三萜皂苷代谢关键酶竹节参β-香树素合成酶（β-AS）基因，采用生物信息学分析其序列及其结构与功能，为竹节参合成及调控机制研究提供基础。方法 提取竹节参叶片RNA，扩增β-AS基因编码区序列，将序列连接至pMDTM18-T载体进行克隆、测序，并利用生物信息学分析比较移栽品和栽培品竹节参β-AS蛋白的特征，构建竹节参β-AS蛋白的系统进化树。结果 克隆出移栽品和栽培品竹节参的β-AS基因编码区序列，开放阅读框（ORF）均为2 286 bp，编码761个氨基酸。2个品种β-AS蛋白在细胞中的基本结构和功能是一致的，但两者之间存在8个氨基酸差异，使两者的蛋白质二级结构、三级结构磷酸化位点以及理化性质存在差异，可能会导致两者的催化活性存在差异。结论 克隆得到野生移栽品和栽培品竹节参的β-AS基因，并对2个品种β-AS蛋白进行了生物信息学分析和比较，为今后研究该酶的结构特征、功能以及其与皂苷含量的相关性提供参考，也为竹节参合成生物学研究提供了生物基因元件。]]> 2020/10/10 16:04:06 592true 目的 探究温度调控对人参皂苷积累及其合成途径关键酶基因表达量的影响。方法 以培养23 d人参愈伤组织为实验材料，置于5、10、15、20、25、30℃ 6个培养箱中恒温培养，每天取样1次连续取样8 d，测定干、鲜质量和皂苷含量，确定响应敏感温度，以GAPDH为内参基因，real-time PCR检测皂苷合成途径中9个关键酶3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶（HMGR2）、法尼基焦磷酸合成酶（FPS）、角鲨烯合成酶（SS1）、角鲨烯环氧酶（SE1）、达玛烷二醇合成酶（DS-Ⅱ）、β-香树素合成酶（PNY1）、β-香树素C-28位羟基化酶（CYP716A52v2）、原人参三醇合成酶（CYP716A53v2）、原人参二醇合成酶（CYP716A47）基因表达量。结果 20℃为人参愈伤组织干、鲜质量积累最佳温度，5、10、15℃皂苷含量2~3 d达到最大值，5℃为人参皂苷积累响应敏感温度，与对照组差异显著，人参皂苷Re、Rg₁和总皂苷分别为对照组1.93、11.93和1.54倍。HMGR2、SS1、DS-Ⅱ、SE1和CYP716A52v2基因表达量在低温2~4 d均达最大值，为对照组2.8、1.6、3.5、3.7和3.8倍。相关性分析发现SE1与人参皂苷Re、Rg₁和总皂苷呈显著正相关关系。结论 适度的低温有利于人参皂苷的快速积累，SS1、DS-Ⅱ、SE1、HMGR2、CYP716A52v2为响应低温的关键基因，在人参皂苷生物合成抵御低温的过程中发挥重要作用。]]> 2020/10/10 16:04:06 591true 目的 建立窝儿七HPLC指纹图谱，并同时测定19个批次不同产地窝儿七中苦鬼臼毒素葡萄糖二苷、苦鬼臼毒素葡萄糖苷、4'-去甲基鬼臼毒素、鬼臼毒素葡萄糖苷、山柰酚葡萄糖苷、鬼臼毒素、arabeline、鬼臼毒酮、山荷叶素葡萄糖苷、槲皮素、山柰酚和山荷叶素12种化学成分含量，为窝儿七质量控制提供科学依据。方法 采用COSMOSIL-C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），以甲醇（A）-0.4%磷酸水溶液（B）为流动相；梯度洗脱，体积流量1.0 mL/min，柱温30℃；检测波长300 nm，进样量10 μL；建立窝儿七药材指纹图谱，测定12个成分含量，对结果进行聚类分析。结果 19批窝儿七HPLC指纹图谱有16个共有峰，各相似度均在0.9以上，12个化学成分在各自范围内线性关系良好（r² ≥ 0.999 0），精密度、重复性RSD<2%，在24 h内稳定性较好（RSD<2%），加样回收率均在99.27%~100.30%，RSD均在1.03%~1.98%。19批样品中上述12个成分的含量测定结果及聚类分析结果可知不同产地窝儿七质量有所差异。结论 该方法简单、灵敏、准确，为窝儿七的鉴别及质量评价提供了全面的参考依据。]]> 2020/10/10 16:04:06 590true 目的 检测不同产地三叶青Tetrastigma hemsleyanum中重金属元素Pb、Cd、As、Hg、Cu和16种有机氯类农药残留。方法 采用ICP-MS法测定不同产地三叶青中5种重金属元素的含量，气相色谱法测定有机氯类农药残留。结果 样品中Pb ≤ 4.167 7 mg/kg，Cd ≤ 0.194 6 mg/kg，As ≤ 0.455 0 mg/kg，Hg ≤ 0.042 4 mg/kg，Cu ≤ 7.892 5 mg/kg，样品中有机氯农药残留较低。结论 三叶青药材重金属和有机氯类农药残留符合《中国药典》限量要求；该方法简便、高效，可作为三叶青的安全性评价。]]> 2020/10/10 16:04:06 589true 目的 克隆山茱萸Cornus officinalis HMGR1的cDNA序列并进行生物信息学分析。方法 以山茱萸转录组数据中unigene c100572_g1序列为参考，在其开放阅读框两端设计特异引物，经实时荧光定量PCR（RT-PCR）扩增、连接pTOPO-T载体克隆并测序，获得CoHMGR1基因的cDNA序列，并利用生物信息学方法对该基因及其编码蛋白进行相关分析。结果 CoHMGR1基因长2 116 bp，含长度为1 338 bp的完整开放阅读框（ORF），编码445个氨基酸，为疏水性蛋白。多序列比对和亲缘关系分析显示，CoHMGR1基因编码的氨基酸序列与喜树的序列相似性较高，达79.56%。结论 首次对山茱萸叶片和果实进行比较转录组测序的基础上，成功克隆并分析了CoHMGR1基因，为进一步研究CoHMGR1蛋白的功能及山茱萸萜类合成途径的分子机制奠定基础。]]> 2020/9/17 16:32:20 588true 目的 克隆地黄Rehmannia glutinosa毛蕊花糖苷合酶基因（RgAcS1），分析其亚细胞定位和表达模式。方法 在地黄的转录组数据库中通过注释和比对，获得地黄RgAcS1的cDNA序列，利用聚合酶链式反应（PCR）方法进行分子克隆。构建绿色荧光蛋白（GFP）融合表达载体，以农杆菌瞬时表达法观测RgAcS1的亚细胞定位。利用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测RgAcS1基因在地黄块根不同部位的表达模式。结果 获得地黄1个莽草酸-O-羟基肉桂酰基转移酶的全长编码序列，cDNA长度为1 659 bp，包含1个1 296 bp的开放阅读框，编码431个氨基酸残基，蛋白质相对分子质量为475 900，具有莽草酸-O-羟基肉桂酰基转移酶的典型结构域，命名为RgAcS1。亚细胞定位结果显示RgAcS1主要分布在细胞质中，在细胞核中也有分布。qRT-PCR分析表明，RgAcS1在地黄的周皮和根毛中表达量较高，在木质部和韧皮部表达量较低。RgAcS1基因在地黄品种北京1号、QH1和85-5中非菊花心中表达量均高于菊花心中的表达量，且差异达极显著水平。结论 获得地黄RgAcS1的cDNA序列，明确了RgAcS1的亚细胞定位和时空表达模式，为进一步研究RgAcS1基因在毛蕊花糖苷合成过程中的作用奠定基础。]]> 2020/9/17 16:32:20 587true 目的 从五味子中克隆木脂素生物合成途径松脂醇-落叶松脂素还原酶（Pinoresinol-lariciresinol reductases，PLR）基因及其启动子序列，并进行生物信息学与表达分析。方法 根据转录组PLR测序序列设计特异性引物，克隆ScPLR并进行生物信息学分析；采用TAIL-PCR对ScPLR启动子序列扩增，并进行序列分析；采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）分析果实不同发育时期ScPLR的表达。结果 ScPLR基因开放阅读框（ORF）全长837 bp，编码278个氨基酸；ScPLR蛋白相对分子质量31 419.85，理论等电点8.97；具有跨膜结构，无信号肽，为稳定性疏水蛋白，主要由α-螺旋和无规卷曲构成；亚细胞定位预测ScPLR主要定位于细胞质；系统进化显示ScPLR与蓖麻PLR亲缘关系较近。克隆到ScPLR基因启动子长994 bp，具有TATA-box、CAAT-box基本元件、光调控、生长素响应、厌氧诱导、防御和应激反应的多种调控元件；qRT-PCR结果显示ScPLR表达量呈现果实膨大期快速增加而进入着色期迅速降低的变化趋势。结论 获得了ScPLR基因及其启动子序列，ScPLR果实着色期之前高水平表达的趋势和木脂素的动态变化相一致，为进一步研究该基因功能及表达调控奠定了理论基础。]]> 2020/9/17 16:32:20 586true 目的 采用超高效液相色谱-光电二极管阵列检测器（UPLC-PDA）建立大黄药材指纹图谱及同时测定大黄中9个成分含量的分析方法，并对17批不同产地、不同基原、不同生长年限的大黄进行质量分析和评价。方法 采用ThermoSyncronis C₁₈色谱柱（100 mm×2.1 mm，1.7 μm），以乙腈（A）-0.1%甲酸水溶液（B）为流动相，梯度洗脱。指纹图谱数据导入SIMCA-P 14.1软件进行聚类分析和主成分分析，同时基于UPLC-PDA法对番泻苷B、大黄酸-8-O-β-D-葡萄糖苷、番泻苷A、大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷、大黄素、大黄酸、大黄酚、大黄素甲醚、芦荟大黄素共9个成分进行定量分析。结果 17批大黄药材指纹图谱共寻找共有峰20个，经对照品指认9个峰。聚类分析与主成分分析显示，唐古特大黄、掌叶大黄能够显著区分，唐古特大黄与药用大黄相似，聚为一类；4年与5年的唐古特大黄不能区分、1年与2年的掌叶大黄不能区分。指标性成分含量测定结果显示，唐古特大黄高于其他2种大黄，4年的唐古特大黄质量优于5年的，2年的掌叶大黄质量优于1年的。结论 采用UPLC-PDA技术，建立的大黄药材指纹图谱结合多成分含量测定的方法能够快速、科学、准确地区分不同基原的大黄，并对不同年限大黄质量进行初步评价，为大黄药材基原区分及质量评价提供依据。]]> 2020/9/17 16:32:20 585true 目的 探讨10种重楼药材中7种有效成分含量，并进行化学成分整合评控，为其资源评价提供了科学依据。方法 收集不同产地55批重楼药材，采用UPLC法测定重楼皂苷I、重楼皂苷Ⅱ、重楼皂苷VI、重楼皂苷VⅡ、薯蓣皂苷、重楼皂苷H、纤细薯蓣皂苷的含量，进一步采用TOPSIS数学模型对含量结果进行归一化与多指标数据集成化，获得重楼中7种指标的化学品质综合指数。结果 10种重楼药材的综合评价排名由高到低依次为长柱重楼（C_i=0.275 5） > 多叶重楼（C_i=0.273 2） > 大理重楼（C_i=0.269 8） > 滇重楼（C_i=0.244 5） > 南重楼（C_i=0.234 5） > 狭叶重楼（C_i=0.159 1） > 黑籽重楼（C_i=0.141 6） > 矮重楼（C_i=0.117 8） > 七叶一枝花（C_i=0.115 1） > 毛重楼（C_i=0.114 9），表明不同种重楼化学综合质量差异较大，其长柱重楼、多叶重楼和大理重楼的化学综合质量优于滇重楼，南重楼与滇重楼的结果较为接近，可作为滇重楼资源扩充的优势品种。结论 通过TOPSIS整合评控对重楼类中药材的质量评价有一定的参考依据。]]> 2020/9/17 16:32:20 584true 目的 通过对国槐Sophora japonica不同组织器官进行综合评价，为其资源合理利用提供依据。方法 采用高效液相色谱（HPLC）法、电感耦合等离子体发射光谱（ICP-OES）法、比色法检测样品中芦丁、水仙苷、槲皮素、异鼠李素、重金属含量以及Fe³⁺还原能力、DPPH自由基（DPPH·）、ABTS自由基（ABTS^·+）清除能力和总抗氧化能力（FRAP）。运用SPSS 20.0软件对结果进行聚类分析和主成分分析。结果 国槐不同组织器官中4种黄酮类成分总含量为花蕾 > 花 > 花轴 > 叶 > 枝条；抗氧化能力依次为花蕾 > 花 > 花轴 > 叶 > 枝条，与黄酮类成分总量呈正相关。花和花蕾中5种重金属含量均符合《药用植物及制剂进出口绿色行业标准》，部分叶、花轴和枝条中Cd超标。聚类分析将花和花蕾聚为一类，花轴、叶和枝条聚为另一类；主成分分析将8个变量提取为2个主成分（PC1和PC2），不同组织器官间PC1值有明显差异，不同批次间表现在PC2值上有差异。结论 国槐花及花蕾中重金属含量低，黄酮类成分含量高，抗氧化活性强，品质优良；花轴及叶也含有较高的黄酮类成分及较强的抗氧化能力，具有进一步开发利用的价值。]]> 2020/9/1 8:59:45 583true 目的 建立基于谱效关系的藏药材全缘叶绿绒蒿Meconopsis integrifolia全草（非花入药部位）（HMI）的质量标志物研究方法，为其质量控制提供依据。方法 测定10批次HMI提取物的UPLC指纹图谱、UPLC-ESI-Q-TOF-MS/MS法对化学成分进行指认，测定10批样品的总抗氧化能力、ABTS自由基清除能力、DPPH自由基清除能力、超氧阴离子自由基抑制能力，采用主成分分析法筛选能更大程度反映HMI提取物的抗氧化能力指标，采用灰色关联度法关联抗氧化能力指标与指纹图谱共有峰的相关性，综合分析筛选质量标志物，HSCCC法分离鉴定所筛选化学成分的结构。结果 从HMI提取物指纹图谱确定了29个共有峰，UPLC-ESI-Q-TOF-MS/MS法指认了样品中的18种化学成分，包括16种黄酮类成分和2种生物碱类成分；主成分分析法筛选出DPPH清除能力能更大程度反映HMI提取物的抗氧化能力；灰色关联度分析表明29个共有峰与DPPH清除能力的关联度均大于0.5，综合分析确认槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖基-（1→6）-β-D-葡萄糖苷和槲皮素-3-O-[2'''-O-乙酰基-β-D-半乳糖基-（1→6）-β-D-葡萄糖苷]作为HMI的质量标志物，其中槲皮素-3-O-[2'''-O-乙酰基-β-D-半乳糖基-（1→6）-β-D-葡萄糖苷]为新化合物。结论 基于谱效关系的HMI质量标志物的研究，对阐明药效物质基础、筛选与药效相关的核心质量标志物，保证药材质量的可控性和合理应用有重要意义。]]> 2020/9/1 8:59:45 582true 目的 通过对不同变种重楼内生真菌群落多样性研究及生物标记物分析，为中药材重楼多基源质量等同性及鉴别溯源技术的开发研究奠定基础。方法 采用Illmina Hiseq高通量测序技术对3个变种的重楼内生真菌群落基因进行扩增子序列测定，同时对菌群多样性、真菌群落差异进行生物信息学分析。结果 对不同变种重楼内生真菌进行多样性分析结果显示，七叶一枝花Paris polyphylla Smith var.chinensis（Franch.）Hara、长药隔重楼Paris polyphylla Sm.var.thibetica（Franch.）Hara、具柄重楼Paris fargesii Franch.var.petiolate（Baker ex C.H.Wright）Wang et Tang三者的内生真菌的α多样性存在差异，但β多样性无显著性差异，具柄重楼中特有的OTU仅为0.27%。真菌群落注释结果表明，3个变种分别注释到6个相同的门，但组成比率不同。另外，通过LEfSe分析，初步探索了3个变种的生物标记物差异，七叶一枝花中Rhizophagus irregularis与其他2变种有显著性差异。结论 3个变种重楼内生真菌群落β多样性变化不显著，但组成比率有很大的差异性。该研究结果中药材重楼多基源质量等同性及鉴别溯源技术的开发研究提供研究基础。]]> 2020/9/1 8:59:45 581true 目的 分离纯化乌拉尔甘草内生真菌，及筛选其次生代谢产物具有较好抑菌活性、抗氧化活性（DPPH·自由基清除率、总还原力测定、羟基自由基清除率）、抗α-葡萄糖苷酶活性的特异性菌株。方法 采用组织切块法对乌拉尔甘草分离纯化内生真菌；以正丁醇、醋酸乙酯和乙醇为有机相萃取菌株发酵液及菌丝体；采用滤纸片法进行抑菌活性检测；3种检测方法表征抗氧化活性；PNPG法检测抗α-糖苷酶活性。结果 从乌拉尔甘草中分离得到36株内生真菌，发酵液萃取浓缩得到108个样品。实验共分离得到7个属，其中木霉属是优势种。实验结果显示，43.52%的样品具有不同程度的抑菌作用，其中8.33%表现较好；萃取物均具有不同程度的抗氧化活性，其中4.63%~10.12%的样品分别在3种方法中表现较好；99.07%的样品具有不同程度的抗α-葡萄糖苷酶活性，其中5.56%的样品表现较好。结论 从乌拉尔甘草中分离出具备较好的抑菌活性、抗氧化活性、抗α-葡萄糖苷酶活性代谢产物的菌株，有待进一步研究深入。]]> 2020/9/1 8:59:45 580true 目的 克隆颠茄AbCYP80F1基因和启动子序列，分析启动子上与调控信号和转录因子相关的调控元件，研究AbCYP80F1基因超表达对颠茄发根中东莨菪碱积累的影响。方法 以莨菪CYP80F1为探针，在颠茄转录组中进行Blastn检索获得同源的unigene。采用RACE技术克隆AbCYP80F1全长，热不对称PCR技术克隆启动子序列，发根农杆菌浸染法获得超表达AbCYP80F1基因的颠茄发根，对培养的发根中东莨菪碱含量进行HPLC分析。结果 克隆得到1 675 bp的全长AbCYP80F1基因，其编码蛋白与铃铛子的CYP80F1亲缘关系最近。基因上游2 000 bp启动子上包含的顺式作用元件涉及光、无氧、生长素、茉莉酸、赤霉素和低温信号响应，同时包含有MYB、AP2/ERF、WRKY和bHLH转录因子的识别位点。超表达AbCYP80F1基因使颠茄发根中东莨菪碱含量平均提高了1.8倍。结论 AbCYP80F1是颠茄须根特异性表达的合成途径基因，超表达能提高终产物东莨菪碱含量，AbCYP80F1可能受到WRKY和bHLH转录因子的调控。]]> 2020/8/18 17:05:40 579true 目的 获得牛蒡Arctium lappa根功能基因数据库，分析其木质素类化合物生物合成途径及关键酶基因。方法 以牛蒡根为研究对象，利用华大基因BGISEQ-500测序平台进行转录组测序，通过从头组装获得Unigene，利用各种已有的核酸和蛋白质数据库对Unigene进行注释和分类，利用KEGG代谢途径分析木质素生物合成途径及其关键酶基因，利用三维同源建模分析苯丙氨酸解氨酶（AlPAL）的结构特点。结果 通过转录组测序共获得54 215个Unigene，其中42 003个Unigene被任一数据库注释，1 668个Unigene被注释到54个转录因子家族中；KEGG途径分析鉴定了423个Unigene参与了木质素的生物合成。AlPAL空间结构模型显示其为同型四聚体，每个单体由3个结构域组成，包括4-甲基-咪唑-5-酮（MIO）结构域、核心结构域和屏蔽结构域，其中MIO结构域包含保守的三肽ASG，构成AlPAL酶的催化活性中心。结论 对牛蒡根转录组进行分析，为牛蒡功能基因鉴定、次生代谢途径解析及其调控机制研究奠定了实验基础。]]> 2020/8/18 17:05:40 578true 目的 开发卷丹Lilium lancifolium、兰州百合L.davidii var.willmottia、岷江百合L. regale、香水百合L.casa和龙牙百合L.brownie var.viridulum的EST-SSR分子鉴别体系，分析EST-SSR分子标记技术对百合近缘种的开发效率和鉴别能力。方法 利用MISA.pl程序对NCBI公布的百合属EST基因序列进行SSR位点的识别，通过Primer3程序模块批量生成EST-SSR引物，经PCR扩增和琼脂糖凝胶电泳对引物进行初筛，用聚丙烯酰胺凝胶电泳验证初筛引物，标记并分析不同种质的特征泳带，构建鉴别体系。结果 共设计了199对SSR引物，经过26对引物的筛选，获得了2对高效鉴别引物，其中引物JZ391构建的分子鉴别体系，可有效鉴别混掺的商品百合，具有一定的实用价值。结论 基于研究材料具有极端的遗传特征，本实验鉴定标记开发非常高效，研究结果证实了物种的遗传基础是影响其EST-SSR分子标记开发效率的重要因素，同时，该案例可为其他类似百合遗传基础的中药材进行EST-SSR标记开发，提供参考尺度。]]> 2020/8/18 17:05:40 577true 目的 采用高分辨质谱分析鉴定亚香棒虫草Cordyceps hawkesii与冬虫夏草Cordyceps sinensis间差异性成分。方法 结合PeakView、SIMCA-P等软件、在线数据库（Human Metabolome Database、Pub Chem、Metlin）及二级碎片裂解规律分析鉴定区分2种虫草的显著差异性成分。结果 通过正交偏最小二乘判别分析（OPLS-DA）发现区分亚香棒虫草与冬虫夏草的显著差异性成分共12个，其中11个为氨基酸及其衍生物以及1个磷脂酰胆碱。结论 通过差异分析并未鉴定出如虫草素、腺苷等特征成分，从化学层面证明了亚香棒虫草或可作为冬虫夏草的补充资源，为亚香棒虫草深入开发应用提供科学支撑。]]> 2020/8/18 17:05:40 576true 目的 建立合理的苗药红禾麻Laportea bulbifera质量控制方法。方法 采用高效液相色谱建立以指纹图谱为特征的多指标定性定量控制方法，对红禾麻12批次的药材进行质量控制，运用指纹图谱相似度评价系统对所测定的指纹图谱进行评价。结果 建立了同时测定红禾麻药材中10个成分（新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、芦丁、异槲皮苷、木犀草苷、山柰酚-3-O-芸香糖苷、槲皮苷、表没食子儿茶素、表儿茶素）的多指标质量控制方法，该方法的线性关系、精密度、重复性和稳定性良好，加样回收率为95.89%～98.62%、RSD<3%。同时测定了12批次红禾麻药材的指纹图谱并建立了共有模式，标定共有峰20个，12批次红禾麻药材指纹图谱相似度为0.805～0.931。结论 所建立的基于指纹图谱和多指标含量测定的红禾麻质量控制方法，灵敏度高、准确度好、稳定可靠，为控制和评价红禾麻药材的内在质量提供科学依据。]]> 2020/8/18 17:05:40 575true 目的 对来自不同地域的多花黄精野生资源的核糖体内转录间隔区2（internal transcribed spacer 2，ITS2）和psbA-trnH基因间隔区序列进行系统发育分析，探索不同地理来源的多花黄精资源的遗传多样性和亲缘关系。方法 用聚合酶链式反应（polymerase chain reaction，PCR）的方法扩增获得多花黄精ITS和psbA-trnH的核酸序列，与美国国家技术信息中心（NCBI）相对应的核酸序列比对获得多花黄精ITS2和psbA-trnH核酸序列。用邻接法（Neighbor joining）构建系统发育树，用Kimura two-parameter（K2-P）模型分析遗传距离，用Mega和DNAman软件进行多重比对分析。结果 安徽青阳样品的ITS2序列为224 bp，其余24份样品的ITS2序列均为225 bp，福建泰宁的1份样品为620 bp，其余24份多花黄精样品的psbA-trnH序列均为621 bp，2个序列分别存在7个和4个变异位点。采用ITS2序列构建的系统发育树将25份资源分为2个大的类群，湖南和贵州的5份资源种群聚为一类，其他20份资源聚为一类，遗传距离显示来自贵州花溪、剑河的样品和来自福建建阳的遗传距离最大；采用psbA-trnH序列构建的系统发育树则无法将不同地域多花黄精资源区分开。结论 系统发育和变异位点分析为多花黄精资源的进化研究、道地性评价奠定了理论基础，变异位点的分析可用于相关资源的鉴定。]]> 2020/8/4 15:40:23 574true 目的 采用SCoT分子标记方法对血叶兰Ludisia discolor及其近缘属植物资源进行亲缘关系及DNA指纹图谱构建，从分子水平对血叶兰及其近缘属种质进行区分。方法 使用正交设计方法，对SCoT-PCR反应体系进行优化，筛选适合血叶兰的反应体系、最佳退火温度及SCoT引物。以供试的12份种质资源为材料，利用筛选的引物对其进行分析，用POPgene计算材料间的遗传多样性系数，NTSYS软件进行聚类分析，并构建DNA指纹图谱。结果 获得适用于血叶兰的SCoT-PCR反应体系，筛选出12条多态性好的血叶兰SCoT引物，多态性比率为98.98%。根据Nei’s遗传相似系数，在相似系数为0.45时，12份种质资源可被分为3个分支。其中，斑叶兰与7份血叶兰种质归为I类，3份金线兰种质为Ⅱ类，而绿石蚕单独聚为Ⅲ类。利用SC8引物构建的DNA指纹图谱即可将12份材料鉴别开。结论 12份血叶兰及其近缘属种质具有丰富的遗传多样性，构建的DNA指纹图谱可用于血叶兰及其近缘属品系鉴定。]]> 2020/8/4 15:40:23 573true 目的 建立现有国家药品标准收载的兔耳草基原全缘兔耳草Lagotis integra（药材名为兔耳草）及短管兔耳草L. brevituba（药材名为洪连）的HPLC指纹图谱方法，并通过所建立的方法对市场上其他3种较为常见的兔耳草（圆穗兔耳草L.ramalana、革叶兔耳草L. alutacea及短穗兔耳草L. brachystachya）进行对比研究。方法 全缘兔耳草与短管兔耳草的HPLC指纹图谱相似度低，故分别建立二者HPLC指纹图谱方法；采用Waters X-Bridge C₁₈（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相为乙腈-0.2%甲酸水溶液，梯度洗脱；体积流量1.0 mL/min；检测波长328 nm；柱温35℃（全缘兔耳草）及25℃（短管兔耳草）。结果 建立的全缘兔耳草HPLC对照指纹图谱指认了14个共有峰，并标定了大车前苷、鞭打绣球苷B、10-O-trans-p-methoxycinnamoyl-catalpol及10-O-[（E）-3，4-dimethoxycinnamoyl]catalpol峰；所建立的短管兔耳草HPLC对照指纹图谱存在13个共有峰，并标定松果菊苷、大车前苷及毛蕊花糖苷峰；建立的全缘兔耳草HPLC对照指纹图谱与所有批次全缘兔耳草及革叶兔耳草的相似度均大于0.9，与其他3种兔耳草相似度低；建立的短管兔耳草HPLC对照指纹图谱与所有批次短管兔耳草及圆穗兔耳草的相似度均大于0.9，与其他3种兔耳草相似度低。结论 已建立的方法能有效地对各基原兔耳草进行鉴别，建议革叶兔耳草与全缘兔耳草同时收载于《卫生部药品标准（藏药第一册）》，圆穗兔耳草可作为《中国药典》2015年版一部收载的“洪连”的新基原。]]> 2020/8/4 15:40:24 572true 目的 建立一种快速同时测定杏香兔耳风药材中13种成分含量的UHPLC-MS/MS方法。方法 采用超高效液相色谱-三重四级杆质谱技术检测，色谱柱为UPLC BEH C₁₈（100 mm×2.1 mm，1.7 μm），柱温为40℃，流动相为5 mmol甲酸铵和0.1%甲酸水溶液（A）-乙腈（B），梯度洗脱，体积流量0.25 mL/min，ESI负离子采集，雾化器和辅助气均为344.5 kPa，气帘气为206.7 kPa，喷雾电压为-4 500 V，离子化温度为500℃，13种成分均采用多级反应监测模式（MRM）。结果 在优化的液相-质谱条件下，原儿茶酸、咖啡酸、新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、1，3-二咖啡酰奎宁酸、1，5-二咖啡酰奎宁酸、3，4-二咖啡酰奎宁酸、3，5-二咖啡酰奎宁酸、4，5-二咖啡酰奎宁酸、木犀草素、木犀草苷、芹菜素的检测质量浓度线性范围分别为1.099～274.800、1.006～100.600、1.080～1 080.000、83.12～8 312.00、19.92～996.00、1.076～269.000、5.555～555.500、4.420～4 420.000、44.76～17 904.00、48.00～9 600.00、2.108～210.800、4.136～413.600、1.070～107.000 ng/mL，且线性关系良好（r≥0.995 8），平均加样回收率（n=6）为96.54%～99.75%，RSD为0.48%～0.96%，精密度、稳定性、重复性试验的RSD均小于3.90%。结论 该方法重复性和专属性好，稳定可控，可用于杏香兔耳风药材及其制剂的质量控制。]]> 2020/8/4 15:40:24 571true 目的 筛选赤芝三萜合成途径中法尼基焦磷酸合酶（farnesyl diphosphate synthase，FPS）基因的上游调控转录因子。方法 首先克隆了FPS基因启动子，并连接至pAbAi质粒构建诱饵载体pAbAi-FPS。将pAbAi-FPS转化Y1H酵母感受态细胞构建诱饵菌。采用SMART技术构建赤芝酵母单杂交cDNA文库，再将纯化的双链cDNA、pGADT7-Rec共转化诱饵菌株，筛选FPS上游的转录调控因子。结果 构建了含pAbAi-FPS的诱饵载体并筛选出诱饵菌株，构建了cDNA文库并转化诱饵菌株，筛选出阳性克隆37个，得到作用FPS基因上游的转录调控因子18个，包括转录因子3个、核糖体蛋白5个及其他家族蛋白10个。结论 筛选出转录因子GlSNF2、GlMHR和GlZn2Cys6为调控FPS表达的候选基因，为深入研究FPS基因的表达调控机制奠定了研究基础。]]> 2020/7/18 17:30:20 570true 目的 获得三叉苦Melicope pteleifolia转录组信息特征。方法 以三叉苦幼苗根、茎、叶混合样品为对象，采用二代高通量测序平台Illumina HiSeq^TM 2000进行转录组测序并进行系统的生物信息学分析。结果 转录组测序分析共获得47 045 040条高质量序列（clean reads），Trinity de novo组装获得67 956条unigenes，平均长度787 nt。BLAST分析显示分别有42 749（61.92%）、31 152（45.84%）、26 563（39.0 9%）、17 481（25.72%）条unigenes在NR、Swiss-port、KOG、KEGG数据库得到注释信息，参与生物过程、细胞组分和分子功能3个GO类别的47个小组，共9 807条unigenes注释到130个KEGG代谢通路中，筛选到19条次生代谢通路，KOG功能分类分析获得25个不同的KOG功能类群。预测共有高等植物转录因子56个家族；借助MISA软件发现7 748个SSRs，三碱基重复SSRs数量最丰富，有4 117个，出现频率为53.1%，五碱基重复SSRs相对较少，占2.2%。结论 利用高通量测序技术和生物信息分析获得三叉苦转录组信息特征，为后续三叉苦功能基因的挖掘、次生代谢途径解析及其调控机制研究奠定基础。]]> 2020/7/18 17:30:20 569true 目的 克隆山茱萸关键酶基因1-脱氧-D-核酮糖5-磷酸还原酶（CoDXR）的全长cDNA序列，为山茱萸的进一步研究提供依据。方法 以本实验室获得的山茱萸转录组数据中的转录本序列c147202_g1为模板，通过Primer Premier 5.0设计特异性引物，利用RT-PCR技术克隆CoDXR基因的全长cDNA序列，并通过相关的生物信息学软件对其进行相关的生物信息学分析和功能预测。结果 CoDXR基因长度为1 505 bp，ORF长度是729 bp，编码242个氨基酸。而通过SignalP4.0Server和HMMTOP对CoDXR蛋白预测分析结果可知，该蛋白不具有信号肽和跨膜区，为疏水性蛋白。系统进化树分析结果表明CoDXR蛋白与野茶树（Camellia sinensis）的DXR蛋白序列相似性最高。结论 在山茱萸果实和叶片转录组测序的基础上成功克隆了山茱萸萜类合成途径中的关键酶基因CoDXR，对其进行相关的生物信息学分析，为深入研究CoDXR基因在山茱萸萜类合成途径中的功能奠定了基础。]]> 2020/7/18 17:30:20 568true 目的 建立以HPLC法同时检测16种33批五加属植物中紫丁香苷、绿原酸、咖啡酸、对香豆酸、阿魏酸、ethylsyringin、ethylconiferin、（+）-梣皮树脂醇、（±）-松脂素、（±）-丁香脂素、taiwanin C、savinin、helioxanthin、（-）-sesamin 14种苯丙素类成分的含量。方法 采用Promosil C₁₈柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液，梯度洗脱，体积流量1 mL/min；柱温30℃；检测波长280 nm。结果 在优化的色谱条件下，14种成分在测定的质量浓度范围内线性关系良好，r均大于0.999 1，方法的精密度、稳定性、重复性以及回收率良好。结论 建立的HPLC法可用于同时检测五加属植物中14种苯丙素类化学成分的含量，该方法快速、准确，有较好的重现性和稳定性，可为该属植物的进一步研究提供参考。]]> 2020/7/18 17:30:20 567true 目的 建立HPLC法测定12个不同产地黄秋葵中槲皮素-3-O-龙胆二糖苷、槲皮素-3-O-芸香糖苷、异槲皮苷、槲皮素、5，7，4'-三羟基黄酮的含量，为其合理开发利用提供参考。方法 采用COSMOSIL色谱柱（250 mm×4.6 mm，5.4 μm）；以乙腈和0.2%的磷酸水溶液为流动性进行梯度洗脱，检测波长为353 nm，体积流量1 mL/min。结果 槲皮素-3-O-龙胆二糖苷、槲皮素-3-O-芸香糖苷、异槲皮苷、槲皮素、5，7，4'-三羟基黄酮分别在15.72～251.50 μg/mL（r=0.999 5）、15.47～247.50 μg/mL（r=0.999 6）、14.41～230.50 μg/mL（r=0.999 5）、21.88～350.00 μg/mL（r=0.999 7）、17.25～276.00 μg/mL（r=0.999 1）浓度范围内呈良好的线性关系；平均加样回收率分别为97.46%、96.74%、100.21%、95.66%、98.35%，RSD为1.97%、1.37%、1.86%、2.72%、2.23%。结论 方法简单易行、准确度高，适合于同时测定槲皮素-3-O-龙胆二糖苷、槲皮素-3-O-芸香糖苷、异槲皮苷、槲皮素、5，7，4'-三羟基黄酮的含量，可作为黄秋葵质量评价的方法之一。]]> 2020/7/18 17:30:20 566true 目的 分析夏枯草Prunella vulgaris果穗、茎、叶片转录组，挖掘夏枯草次生代谢产物生物合成的功能及调节基因。方法 利用Illumina高通量测序技术对夏枯草不同组织进行转录组测序，并从差异表达的基因中鉴定次生代谢物生物合成的相关酶基因。结果 在夏枯草的3个不同组织的转录本中，共有8 270个Unigenes在至少2个样品间差异显著。对不同组织差异表达的基因进行KEGG富集分析，结果表明，不同组织中苯丙素类生物合成的基因表达均有较大的变化。在夏枯草差异基因中分别搜索三萜类和酚酸类生物合成途径的关键酶，共鉴定到31个三萜类生物合成相关的Unigene，16个酚酸类生物合成相关的Unigenes，113个P450相关的Unigenes。结论 本研究为后续发掘夏枯草次生物质代谢合成途径相关功能基因提供依据，也为夏枯草次生代谢物的生物合成调控研究奠定基础。]]> 2020/7/3 13:59:09 565true 目的 对药食同源植物草豆蔻Alpinia katsumadai进行基因组调研分析，完善草豆蔻基因组遗传信息。方法 研究采用Illumina高通量测序技术，基于K-mer分析手段来研究草豆蔻基因组的大小及杂合度，利用MISA方法分析可能的SSR分子标记。结果 草豆蔻的基因组大小为1.60 Gb，基因组杂合度为0.44%，重复序列比例为72.72%；在基因组序列中，进行SSR分子标记分析，共鉴定出了364 395个SSR，其中，单、双、三核苷酸重复模体的比例较高，分别占比64.25%、24.05%、10.31%；从测序得到的350 bp文库中，随机取10 000条单端reads，与NT库进行BLAST比对，发现草豆蔻的近缘物种艳山姜Alpinia zerumbet和小豆蔻Elettaria cardamomum上的reads数分别占比对上NT库reads数的12.89%和12.36%。结论 通过对草豆蔻植物的基因组大小、杂合度调查及SSR分子标记分析表明，草豆蔻物种基因组属于高重复、大基因组的复杂基因组，这为草豆蔻的资源保护和遗传多样性分析及品种选育提供了遗传信息支撑。]]> 2020/7/3 13:59:09 564true 目的 研究混合丛枝菌根（AM）真菌不同接种时期对滇重楼Paris polyphylla Smith var.yunnanensis幼苗内源激素含量的影响。方法 室内盆栽法，分别将滇重楼种子、1年生苗、2年生苗接种混合AM真菌，于灭菌土壤基质中进行共生培养，采用高效液相色谱法测定内源激素玉米素核苷（ZR）、赤霉素（GA）、吲哚乙酸（IAA）和脱落酸（ABA）含量。结果 混合AM真菌对不同时期，不同种源的滇重楼根状茎和根中内源激素ZR、GA、IAA、ABA含量变化的影响不尽相同。整体上，与对照组比较，野生种源和栽培种源滇重楼根状茎和根的ZR和GA内源激素含量均呈增加趋势，ABA含量均呈减少趋势。滇重楼根状茎和根中IAA/ABA、GA/ABA、ZR/ABA增大。结论 1年生苗期接种S2、S6型混合AM真菌，对促进滇重楼幼苗根状茎和根生长的综合效果最佳。]]> 2020/7/3 13:59:09 563true 目的 优化黑果枸杞Lycium ruthenicum离体培养方法及条件，探索有效增殖方式，筛选适宜的植株再生途径，建立其人工高效繁殖技术体系。方法 以无菌实生苗带1～2个节的茎段为材料，采用MS、改良的MS₁以及改良的MS₂为基本培养基，通过单因素、完全组合及L₉（3⁴）正交试验研究不同植物激素种类及其质量浓度对愈伤组织诱导、腋芽萌发、基茎不定丛芽诱导及植株再生的影响。结果 在MS＋NAA 1.0 mg/L＋6-BA 0.1 mg/L培养基中，可诱导出大量愈伤组织，但其再分化能力较弱，培养35 d后最高增殖系数仅为4.36；而在MS＋NAA 0.1 mg/L＋6-BA 0.05 mg/L＋KT 0.5 mg/L中培养，随着腋芽萌发，茎段与培养基接触的节处开始膨大并出现不定芽点，萌发出基茎丛生芽，发生率达100%，培养45 d增殖系数最高可达到42.84；试管苗生根的适宜培养基为改良的MS₁＋NAA 1.0 mg/L，培养40 d后生根率达98.9%；试管苗经炼苗后移栽成活率90%以上。结论 研究通过基茎丛生芽这一全新的增殖途径，成功建立了黑果枸杞体外高效再生体系，不仅大大提高了试管苗的产量及品质，也为枸杞属其他植物的体外快繁提供了另一思路。]]> 2020/7/3 13:59:09 562true 目的 建立基于UPLC特征指纹图谱-化学模式识别方法研究巴戟天Morindae Officinalis Radix及根皮与木心的差异性。方法 采用UPLC技术建立巴戟天根皮与木心环烯醚萜类和寡聚糖类特征指纹图谱，结合相似度分析、方差分析、聚类分析、主成分分析（PCA）进行化学模式识别研究。结果 分别建立了巴戟天及根皮与木心环烯醚萜类和寡聚糖类UPLC特征指纹图谱，并分别确定了12个和20个共有峰，巴戟天根皮与木心UPLC特征指纹图谱差异性明显。结论 巴戟天环烯醚萜类和寡聚糖类UPLC特征指纹图谱-化学模式识别方法分析能够整体、全面、真实地反映出巴戟天根皮与木心的差异性，为巴戟天去木心必要性提供了依据。]]> 2020/7/3 13:59:09 561true 目的 采用分子生物学鉴定技术，筛选合适的DNA条形码序列，建立快速、准确鉴定鸡血藤的方法。方法 采集72份鸡血藤及其混伪品的样本，分别提取样品DNA，对ITS2、matK、psbA-trnH、ITS和rbcL序列扩增、测序；计算各序列扩增成功率和测序成功率，利用MEGA 7.0分析比对序列特征；基于Kimura-2-Parameter（K2P）双参数模型计算种内、种间的遗传距离评估Barcoding gap；利用Phylosuite软件构建ITS2、matK和psbA-trnH和多基因（I-M-P）联合系统发育树。结果 ITS2的扩增成功率和测序成功率最高，均为100%，matK和psbA-trnH的测序成功率亦有94.4%、91.7%，而rbcL和ITS仅为69.4%和61.1%；ITS2较其他条形码序列具有明显的Barcoding gap，且种内、种间重叠少；系统发育树显示，ITS2和psbA-trnH可将鸡血藤及其混伪品明显聚为不同分支，matK不能把滇鸡血藤和南五味子分开；I-M-P系统发育树同ITS2和psbA-trnH结果相同。结论 以ITS2为主、psbA-trnH序列为辅的鉴定方法能够对鸡血藤及其混伪品进行快速、准确的鉴定，为鸡血藤临床用药的安全性和合理使用的准确性提供依据。]]> 2020/6/16 15:52:16 560true 目的 对不同产地的锁阳Cynomorium songaricum药材进行产地鉴别与综合评价，为锁阳药材质量评价与产地适宜性的确定提供参考。方法 收集全国5省（区）的40批样品，测定锁阳中没食子酸、原儿茶酸、儿茶素、总多糖、总黄酮、Na、K、Ca、Mg、Fe、Zn、Mn、Co、Sr、Ni、Ag、Ba、Ti、Cu、Pb、Cr、Cd、As、Hg含量，运用正交偏最小二乘判别分析法（OPLS-DA）和熵权TOPSIS法对反映药材质量的数据进行分析。结果 锁阳中儿茶素、原儿茶酸、总黄酮、Mn、Zn、Co、Pb、Cr、Ca、Ti、Mg和Cu的含量差异可用于不同产地的区分；5个省（区）中内蒙古地区的锁阳药材质量最优，其次为甘肃、宁夏、新疆、青海。结论 OPLS-DA结合熵权TOPSIS分析法结果合理、客观、有效，可应用于锁阳药材质量的多指标综合评价。]]> 2020/6/16 15:52:16 559true 目的 克隆多穗柯Lithocarpus polystachyus的无色花青素还原酶（leucoanthocyanidin reductase，LAR）基因，并对其表达量与根皮苷含量的关系进行分析。方法 根据多穗柯转录组测序的结果（Unigene号：DN30711_c0_g1_i1），利用PCR法扩增获得多穗柯LAR基因的全长cDNA序列，进行生物信息学分析，采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）法检测LAR基因的表达量，使用UPLC法测定根皮苷的含量，应用SPSS 18.0软件分析LAR基因表达量与根皮苷含量间的相关关系。结果 多穗柯LAR基因的cDNA全长1 053 bp，包含一个完整的开放阅读框，编码350个氨基酸。该蛋白不存在跨膜区域，定位于细胞质中。多穗柯LAR蛋白属于PCBER_SDR_a家族，与栓皮栎LAR蛋白具有较高的相似性（95%），且亲缘关系最近。多穗柯的根皮苷含量与LAR基因的表达量呈正相关（P<0.05）关系。结论 首次克隆得到多穗柯LAR基因，并证实多穗柯根皮苷含量与LAR基因的表达量呈正相关，为揭示多穗柯中根皮苷的生物合成机制奠定理论和技术基础。]]> 2020/6/16 15:52:16 558true 目的 打破镰荚棘豆Oxytropis falcata种子的休眠，提高种子活力。方法 测定种子形态特征、物理特性，采用物理、化学方法，进行种子硬实破除，应用外源化学物质，改善种子活力。结果 镰荚棘豆种子千粒质量为1.239 g，种子的硬实率高达90.67%，用浓硫酸处理8 min破除种子硬实后，再用激动素（CTK）＋KNO₃组合处理进行种子引发，种子的发芽率高达82.7%，发芽势达68.0%，发芽时间比对照提前2 d。结论 用浓硫酸处理8 min后，用170 mg/L的CTK处理12 h，再在2% KNO₃中浸泡12 h，可大幅度提高种子的发芽率和整齐度。]]> 2020/6/16 15:52:16 557true 目的 研究甘肃省当归Angelica sinensis的生态适宜性，指导甘肃产当归的合理栽培。方法 通过走访和实地调查，从甘肃当归栽培县区采集不同分布地点的样品共计1 545份，使用GPS获取每个采样点的经度、纬度、海拔等相关地理信息，结合全国生态环境因子数据，利用Maxent模型和ArcGIS软件的空间分析功能进行分析。结果 当归分布适宜度较高的区域在甘肃省东南部。影响当归适宜性分布的主要生态因子为海拔高度、3月份降雨量、5月份降雨量、最湿月降雨量、12月份降雨量、土壤酸碱度。结论 研究结果与当归多生长于海拔2 000～3 000 m的高寒山区及高原平坦牧场地带，喜气候凉爽，土壤水分适中，微酸性至中性肥沃疏松棕褐沙壤土基本一致，可为甘肃省当归栽培区域的合理分布提供科学依据。]]> 2020/6/16 15:52:16 556true 目的 针对款冬花药材掺杂现象，对款冬花药材中花蕾及其杂质（花梗、根茎、主根）的化学组成进行比较，为款冬花的质量控制提供依据。方法 参照《中国药典》2015年版，采用HPLC测定款冬花蕾及其杂质中款冬酮的含量，同时建立款冬花指纹图谱，采用相似度评价和共有峰峰面积对花蕾及杂质进行比较，对药材中各成分含量与花蕾占比进行Pearson相关性分析，同时对花蕾和杂质进行主成分分析和聚类分析，并分析各类成分之间的相关性。结果 款冬花蕾中款冬酮含量以及指纹图谱中13个共有峰的峰面积均明显高于其他掺杂部位，且与花蕾占比存在正相关。主成分分析和聚类分析结果显示，款冬花蕾与花梗、根茎、主根等掺杂部位可明显区分。指纹图谱各主要成分之间的相关性分析显示，咖啡酰奎宁酸类成分之间、黄酮类成分之间存在较强的正相关，倍半萜类成分中，款冬酮和款冬素酯存在较强的正相关，不同类别的成分也具有一定的相关性。结论 款冬花药材中主要成分均主要分布于花蕾，当药材中花梗、主根、根茎等杂质较多时会严重影响款冬花药材质量。目前《中国药典》2015年版中款冬花项下尚未设置杂质检查项目，为了保证款冬花药材的质量，应增加其杂质检查。]]> 2020/6/3 16:45:31 555true 目的 建立常用乌头属藏药材榜那的指纹图谱及多指标成分含量测定方法，为多基原药材的质量标准制定和临床安全用药提供参考。方法 采用HPLC建立榜那药材的指纹图谱并进行相似度评价；测定30批榜那药材中7种生物碱成分含量，并结合主成分分析（PCA）和正交偏最小二乘判别分析（OPLS-DA）评价榜那药材的2种不同基原植物的生物碱成分的差异。结果 建立的指纹图谱确认17个共有峰，指认出12-表-欧乌头碱、雪上一枝蒿庚素、苯甲酰新乌头碱、苯甲酰乌头原碱、新乌头碱、乌头碱、3-乙酰乌头碱7个色谱峰。基于相似度分析，铁棒锤和伏毛铁棒锤种内化学指纹图谱均一，种间指纹图谱存在一定差异。PCA和OPLS-DA结果表明铁棒锤和伏毛铁棒锤2种基原物种在这7种化学成分含量上存在一定差异；且依据OPLS-DA和t检验分析结果可确定伏毛铁棒锤中主要差异成分12-表-欧乌头碱和乌头碱含量显著高于铁棒锤（P<0.01）。结论 本实验所建立的指纹图谱和多组分定量分析方法简便、易操作、信息量大，可用于榜那药材的质量和临床用药安全性控制；有必要建立和完善榜那的双酯型生物碱限度测定。]]> 2020/6/3 16:45:31 554true 目的 基于红外光谱法结合化学计量学建立美洲大蠊及其他虫类药材（全蝎、水蛭）粉末的鉴别方法，为美洲大蠊的鉴别提供一定的依据。方法 运用傅里叶变换红外光谱仪采集3种虫药药粉的红外光谱数据，对已得光谱数据二阶求导后运用纵坐标归一化法、标准化法等预处理方法对光谱进行优化，采用化学计量学，包括系统聚类分析（hierar chicalcluster analysis，HCA）、主成分分析（principal component analysis，PCA）以及偏最小二乘判别分析（partial least squares discriminant analysis，PLS-DA）进一步对光谱数据进行分析。结果 美洲大蠊与全蝎、水蛭的红外指纹图谱有差异。美洲大蠊在1 711、1 410、712 cm^-1处吸收峰明显，全蝎在1 753、1 400、1 168、717 cm^-1处吸收峰明显，水蛭在1 558、1 457、1 400、669 cm^-1处吸收峰明显，且水蛭在1 753~1 711cm^-1处明显无吸收峰。3种虫类药材在1 800~1 700 cm^-1处峰形差异明显较大。二阶导数图谱中，主要峰的位置相同，但共有峰的强度不同。运用HCA分析方法发现3种虫类药材能够被快速区分，运用PCA与PLS-DA分析方法发现3种虫类药材分布在不同区域。结论 本研究能够简便、快速的鉴别美洲大蠊与全蝎、水蛭等虫类药材，为美洲大蠊的质量控制及评价提供参考。]]> 2020/6/3 16:45:31 553true 目的 揭示多花黄精遗传多样性及地理分布特征。方法 采用ISSR分子标记技术，对来自浙江、安徽、江西、福建、湖南、湖北6省20个种源118株多花黄精进行综合分析。结果 16条引物共扩增出130条清晰条带，其中多态性条带123条，平均多态百分率（PPL）为94.62%，种源内遗传多样性在33.85%~60.00%，平均Nei's基因多样度（H_e）为0.183 8，Shannon信息指数（I）为0.267 4，遗传分化系数（G_st）为0.529 3。UPGMA聚类分析显示，同一种源的种质基本上聚在一起，说明种源间的遗传分化大于种源内不同个体间的基因遗传分化；在遗传相似系数值等于0.61时可将118份种质聚为武夷山脉、武陵山脉和罗霄山脉、大别山脉、洞宫山脉和天目山脉4类。结论 多花黄精具有丰富的遗传多样性，遗传变异与山脉密切相关，山脉之间的平原、水域隔离可能是导致群体间遗传分化的主要原因之一。研究结果对黄精种质资源保护、品种选育具有重要的理论价值与现实意义。]]> 2020/5/26 19:13:42 552true 目的 建立夏枯草药材HPLC指纹图谱，结合化学模式识别技术筛选出不同批次夏枯草质量差异性标志物，并以其为指标建立夏枯草含量测定方法，为科学全面地评价夏枯草药材质量提供参考。方法 采用HPLC法建立30批不同产地夏枯草的指纹图谱，利用中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004A进行相似度评价，确定共有峰；运用主成分分析和正交偏最小二乘判别分析，筛选出不同批次夏枯草质量差异性标志物，基于筛选出的质量差异性标志物建立含量测定方法，并对61批夏枯草药材进行含量测定。结果 建立了夏枯草HPLC指纹图谱，共标定28个共有峰，其相似度均在0.970以上，表明30批夏枯草药材的整体质量相对稳定；采用主成分分析和正交偏最小二乘判别分析筛选出了不同批次夏枯草质量差异的5个标志物，分别为咖啡酸（5号峰）、金丝桃苷（9号峰）、异槲皮苷（10号峰）、异迷迭香酸苷（11号峰）和迷迭香酸（12号峰），以5个标志物为指标，对其进行含量测定，色谱峰分离度良好，且线性关系良好，平均加样回收率为95.0%~105.0%，RSD值均低于3%。结论 该方法科学、准确、可靠，指纹图谱结合化学模式识别技术和含量测定构建了一个更加完善、合理、有效的夏枯草质量评价方法。]]> 2020/5/26 19:13:42 551true 目的 研究远志加工过程中4种黄曲霉毒素B₁、B₂、G₁、G₂（AFB₁、ATB₂、AFG₁、AFG₂）的污染情况以及污染真菌的类群及变化，分析黄曲霉毒素的主要污染途径。方法 对远志采收、加工过程的21份样品，利用免疫亲和柱-HPLC柱后光化学衍生法测定黄曲霉毒素含量，通过稀释平板法分离污染真菌，结合形态学和分子生物学特征对菌株进行鉴定。结果 有15份远志样品检出黄曲霉毒素，但均未超出《中国药典》2015年版中AFB₁、黄曲霉毒素总量的限量标准，阳性样品分布在每个生产环节。新采收的远志根上真菌总数在堆放发汗后升高，新鲜去木质心的远志筒上真菌总数达到2.0×10⁸ CFU/g以上，晾晒干燥后有所降低；直接干燥的远志棍上真菌总数在加工过程中变化不大；真菌总数与药材水活度呈显著正相关。分离鉴定的209株真菌归属到5个属，青霉属Penicillium为所有加工环节样品上的优势属，堆放发汗过程中枝孢属Cladosporium和镰刀菌属Fusarium数量明显增加，加工后的晾晒过程曲霉属Aspergillus真菌明显增加。获得的1株寄生曲霉Aspergillus parasiticus可以产AFB₁、AFB₂、AFG₁和AFG₂。结论 田间生产和采后加工都有可能造成远志黄曲霉毒素污染，青霉菌大量污染有可能带来的毒素问题需要引起重视。]]> 2020/5/26 19:13:43 550true 目的 对越南安息香Styrax tonkinensis进行转录组测序，获得其根、茎和叶的转录组信息特征。方法 以越南安息香的根、茎和叶作为研究对象，使用Illumina HiSeq^TM2000进行越南安息香根、茎和叶的转录组测序分析。结果 转录组测序根、茎和叶共获得53 835 045条高质量序列（clean reads），Trinity de novo组装获得69 151条Unigenes，平均长度778.51 nt。BLAST分析表明分别有41 412（59.89%）、31 189（45.10%）、25 539（36.93%）、16 749（24.22%）个Unigenes在Nr、Swiss-port、KOG、KEGG数据库中得到注释，可归入GO分类的细胞组分、生物过程和分子功能3大类46分支，涉及129条KEGG标准代谢通路，其中有31个次生代谢标准通路。蛋白编码框序列3 461个，涉及高等植物转录因子54个家族。使用MISA软件挖掘10 974个简单重复序列（SSRs），二碱基重复SSRs数量最为丰富，有6282个（57.24%），五碱基重复SSRs最少，占2.45%。结论 利用高通量技术和生物信息分析获得了越南安息香根、茎和叶的转录组信息特征，为后期越南安息香基因功能鉴定、次生代谢途径解析及调控机制的研究奠定基础。]]> 2021/4/22 9:12:12 549true 目的 建立大宗中药材酸枣仁的多指标含量测定方法，为准确发现酸枣仁和理枣仁中差异性质量控制成分提供参考。方法 采用UPLC-MS/MS多反应监测（multiple reaction monitoring，MRM）正、负离子切换扫描模式，ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱（150 mm×2.1 mm，1.8 μm）进行分离，流动相为0.1%甲酸水（A）-乙腈（B），进行梯度洗脱，测定16批酸枣仁和13批理枣仁中乌药碱、木兰花碱、维采宁II、斯皮诺素、当药黄素、山柰酚-3-O-芸香糖苷、6'''-阿魏酰斯皮诺素、酸枣仁皂苷A和酸枣仁皂苷B的含量，并结合主成分分析（principal component analysis，PCA）和偏最小二乘判别分析（partial least squares discrimination analysis，PLS-DA）评价酸枣仁和理枣仁中9种成分的差异。结果 9种成分在相应的浓度范围内线性关系良好，相关系数（r）>0.9991，仪器精密度RSD<4.69%，平均加样回收率为95.41%～106.25%，RSD<3.75%。含量测定结果表明酸枣仁中乌药碱、木兰花碱、当药黄素、山柰酚-3-O-芸香糖苷、酸枣仁皂苷A和B的含量显著高于理枣仁（P<0.01），而理枣仁中斯皮诺素、维采宁II和6'''-阿魏酰斯皮诺素的含量显著高于酸枣仁（P<0.01）。PCA和PLS-DA结果表明，酸枣仁和理枣仁可明显分开，两者组内样品成分具有很强的相似性，而组间差异较大。结论 建立了专属性强、灵敏度高的酸枣仁和理枣仁质量差异性评价方法，为两者质量差异性评价的指标成分选择提供依据，为阐明理枣仁可否作为酸枣仁的代用品提供实验基础。]]> 2021/4/22 9:12:12 548true 目的 对同株不同生长年限的白芍Paeonia lactiflora化学成分差异进行比较研究，为白芍药材最佳采收和质量控制提供实验数据支持。方法 基于HPLC方法建立的白芍指纹图谱，应用于同株不同生长年限白芍，并对其相似性和差异性进行分析，在此基础上对其中没食子酸、氧化芍药苷、芍药内酯苷、芍药苷、苯甲酸、1，2，3，4，6-O-五没食子酰葡萄糖、苯甲酰芍药苷7种成分进行含量测定。利用中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012A版）计算相似度，运用主成分分析（PCA）和聚类分析对样品进行模式识别研究。结果 同株不同生长年限的白芍指纹图谱相似性较高，特征峰差异性体现于有4个峰在低年限中存在，另有1个峰只在高年限中存在。有5个峰存在增加趋势，15个峰存在降低趋势。白芍生长过程中芍药内酯苷呈现降低趋势，芍药苷、1，2，3，4，6-O-五没食子酰葡萄糖呈现增加趋势。白芍随着年限的增加，其最高年限的比值始终最大，且其干质量比例增加。相似度结果显示白芍不同年限间表现出较强的一致性，相邻年限间相似性更大，聚类分析发现，白芍随着生长年限增加，含量逐渐稳定。另采用综合质量数对不同年限白芍进行评价，结果显示白芍5年生采收最佳。结论 同株不同生长年限白芍化学成分和主要成分含量上存在一定差异，建议在第5年采收。]]> 2021/4/22 9:12:12 547true 目的 建立藏药川西合耳菊Synotis solidaginea中黄酮类和酚酸类药效成分含量测定的方法，并评价不同产地、不同部位样品的质量。方法 建立HPLC测定川西合耳菊中芦丁、金丝桃苷、异槲皮苷、烟花苷、紫云英苷、绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸C 8种有效成分含量的方法。从西藏、四川和青海收集了19份川西合耳菊药材样品；将全株植物分成茎、叶、花3个部位，测定这些样品中8种成分的含量。运用主成分分析法比较不同产地药材中的药效成分，以及植物不同部位之间和同一部位不同产地样品之间差异。结果 这8种药效成分在40 min内分离良好，加样回收率为96.3%～104.9%。19份川西合耳菊样品中3种酚酸类成分的总量为5种黄酮类成分总量的2.77倍。酚酸类以绿原酸的含量最高（9.74 mg/g）；黄酮类以芦丁的含量最高（3.65 mg/g）。根据药效成分含量和主成分分析，四川道孚的样品质量更好。植物3个部位之间比较，总量以叶中含量最高，占59.15%～65.61%；其次为花，占30.52%～34.31%；茎中的含量最低，仅占3.9%～5.7%。金丝桃苷在花中的含量高，而其他7种成分在叶中的含量最高。结论 建立的方法能准确测定川西合耳菊中5种黄酮类和3种酚酸类成分的含量，评价其质量。川西合耳菊叶和花的药效成分含量高，应于开花期、叶茂盛时采集，并防止叶和花脱落，以保证质量。]]> 2021/4/22 9:12:12 546true 目的 研究半夏Pinelliae Rhizoma产地加工去皮前的处理方法及工艺参数，为保证半夏药材质量提供关键的技术参数。方法 分别采用“自然发汗”“拌石灰粉”“拌石灰水”3种方法处理，在各法处理第2、4、6、8天取样、去皮。以样品外观性状、叶绿素含量、去皮率、得率、浸出物和琥珀酸含量为指标进行综合评价。结果 以样品性状及叶绿素含量为指标评价时，半夏质量以拌石灰水法为最佳，其次为拌石灰粉；以样品去皮率、得率及浸出物和琥珀酸含量为评价指标时，以拌石灰粉处理4 d的样品较好。按总评归一法综合评分，确定拌石灰粉处理4 d为最佳处理方法。结论 半夏产地加工去皮前以拌石灰粉（每100 kg鲜半夏用石灰为10 kg）处理4 d为最佳，该方法简便，药材质量好。]]> 2021/4/22 9:12:13 545true 目的 采用超高效液相色谱法（UPLC）分别对18个产地川赤芍Paeonia veitchii的根、茎和叶中的芍药苷、氧化芍药苷、1，2，3，4，6-O-五没食子酰葡萄糖3种成分进行含量测定，并建立其指纹图谱，基于多元统计法综合分析川赤芍根、茎和叶中主要化学成分的整体分布以及在不同部位中的差异性，并对川赤芍品质进行综合评价。方法 采用UPLC法，色谱条件：C₁₈色谱柱（100 mm×2.1 mm，1.8 μm），流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液，梯度洗脱，柱温30℃，体积流量0.2 mL/min，进样量1 μL，检测波长230 nm；采用2012版《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》软件建立图谱；并采用差异分析、相似度分析、主成分分析（PCA）、TOPSIS分析和偏最小二乘法判别分析（PLS-DA）对川赤芍品质进行综合评价。结果 根据含量测定结果，川赤芍中氧化芍药苷含量大小为根>茎>叶；芍药苷、1，2，3，4，6-O-五没食子酰葡萄糖含量大小为根>叶>茎。其中，根样品中的芍药苷含量均大于1.8%，符合《中国药典》2020年版规定；茎、叶中芍药苷含量与根较为接近。并建立了根、茎、叶的UPLC指纹图谱，共标定了17个共有峰，并指认出3个共有峰（芍药苷、氧化芍药苷、1，2，3，4，6-O-五没食子酰葡萄糖）。相似度评价结果显示，不同产地川赤芍根、茎、叶的相似度均较好，质量稳定。结论 指纹图谱可有效评价不同产地川赤芍品质。川赤芍茎、叶中芍药苷含量与根中相近，基于《中国药典》2020年版以芍药苷为质量控制指标，为综合评价川赤芍的品质和开发新的入药部位等研究提供相关理论基础。]]> 2021/4/7 8:46:58 544true 目的 以2年生2种类型膜荚黄芪Astragalus membranceus（绿茎有毛膜荚黄芪、紫茎有毛膜荚黄芪）根、茎、叶为实验材料，探究其主要药效成分含量及其生物合成途径中关键酶基因表达量的差异，为药材膜荚黄芪资源合理利用及其优良品种选育选育提供科学的理论参考。方法 使用HPLC检测膜荚黄芪根、茎、叶中黄芪甲苷与毛蕊异黄酮葡萄糖苷的含量，使用紫外分光光度计检测膜荚黄芪根、茎、叶中总皂苷含量，采用实时荧光定量PCR检测其根中皂苷生物合成过程中关键酶乙酰辅酶A乙酰基转移酶（AATC）、3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A合酶（HMGS）、3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶（HMGR）、异戊二烯焦磷酸异构酶（IDI）、法尼基焦磷酸合酶（FPS）、鲨烯合酶（SS）、鲨烯环氧酶（SE）、环阿尔庭烷合酶（CAS）基因的表达量。结果 紫茎膜荚黄芪根中黄芪甲苷含量始终高于绿茎膜荚黄芪；在生殖生长期时，绿茎膜荚黄芪根中毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量高于紫茎膜荚黄芪，而枯萎期二者变化浮动较大；绿茎膜荚黄芪根中总皂苷含量普遍高于紫茎膜荚黄芪。AACT、FPS、HMGS基因表达量与绿茎膜荚黄芪总皂苷含量呈显著相关（P<0.05），IDI基因表达量与总皂苷含量呈极显著相关（P<0.01），说明这4个基因在绿茎膜荚黄芪总皂苷合成中具有重要影响；HMGR基因与紫茎膜荚黄芪总皂苷呈显著相关（P<0.05），其他基因与紫茎膜荚黄芪皂苷含量均有相关性，但未达到显著水平。结论 探究了2种类型黄芪3种主要药效成分的动态变化和皂苷类化合物关键酶基因的表达，为黄芪皂苷类化合物合成生理生态机制的明晰、膜荚黄芪资源合理利用及优良品种选育提供了科学的理论依据。]]> 2021/4/7 8:46:58 543true 目的 基于紫外（UV）和高效液相（HPLC）全息指纹图谱，化学模式识别技术与多成分定量相结合的方法，整合评价不同生长发育时期的49批夏枯草Prunella vulgaris样品化学成分的变化规律，从而阐明夏枯草由草到药的演变过程，解释夏枯草“夏枯质优”的科学内涵。方法 建立不同生长发育时期49批夏枯草样品的UV和HPLC全息指纹图谱，采用主成分分析（principal component analysis，PCA）、偏最小二乘法-判别分析（partial leastsquares-discriminant analysis，PLS-DA）对其进行评价，筛选出影响夏枯草分类的特异性吸收波段，并对主要差异性化学成分进行含量测定。结果 建立了不同生长发育时期49批夏枯草样品的UV和HPLC指纹图谱，PCA和PLS-DA分析可直观显示夏枯草样品中总的化学组分在不同生长发育时期时动态的变化趋势，其中夏枯草枯萎期可以明显的和其他4个时期区分开来，且其他4个时期有向枯萎期动态渐变的趋势。UV指纹图谱通过PLS-DA筛选出特异性吸收波段为261 nm，HPLC指纹图谱利用PLS-DA的变量因子（VIP）分布图，筛选出VIP值大于1.3的2个色谱峰，经指认为异迷迭香酸苷和迷迭香酸，确定为主要差异性化学成分。对不同生长发育时期的夏枯草差异性化学成分进行含量测定，其中迷迭香酸的含量为0.020%~0.344%；异迷迭香酸苷的含量为0.0016%~0.0988%。多成分定量结果说明，果穗枯萎期中异迷迭香酸苷和迷迭香酸的含量明显增加。含量测定结果与指纹图谱模式识别结果一致，两者可相互验证。结论 指纹图谱结合化学模式识别技术与多成分定量，多种分析方法并用，全方位整合的技术手段，实现了对夏枯草从草到药的整个生长发育过程中整体化学信息的动态监测。该方法分析全面、操作简便，为阐明“夏枯质优”，规范夏枯草药材采收及全面评价药材质量提供参考。]]> 2021/4/7 8:46:58 542true 目的 筛选出适合陕西渭北汉源地区生长的黄芩优良种质。方法 将收集河北、山西、山东、陕西、安徽、甘肃、河南、内蒙古8个省份38批样品种质种植于淳化县种植基地，通过外观指数、药典常规项、含量测定3方面指标观测，综合评价药材品质，进一步筛选出适合陕西渭北汉源地区生长的黄芩优良种质。结果 不同省份产的黄芩样品外观分布有显著性差异；样品均符合《中国药典》2020年版的规定，其中河北产黄芩种源样品醇溶性浸出物水平最高，含水量最低，总灰分符合要求；山西与河北产黄芩总成分含量最高。结论 综合评价得河北产黄芩种质种植后所得药材品质更为优良。]]> 2021/4/7 8:46:58 541true 目的 建立一测多评法（quantitative analysis single-marker，QAMS）测定红参药材中11种皂苷类成分的含量，为红参质量控制提供科学依据。方法 采用HPLC法，Agilent C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm，5μm），以乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相梯度洗脱，体积流量1.3 mL/min，柱温30℃，波长203 nm。以人参皂苷Rb₁为参照物，建立其与人参皂苷Rg₁、人参皂苷Re、人参皂苷Rf、人参皂苷Rh₁、人参皂苷Rc、人参皂苷Ro、人参皂苷Rb₂、人参皂苷Rb₃、人参皂苷Rd、人参皂苷Rg₃的相对校正因子，外标法与QAMS分别测定11个成分含量。结果 在一定线性范围内，人参皂苷Rb₁相对人参皂苷Rg₁、人参皂苷Re、人参皂苷Rf、人参皂苷Rh₁、人参皂苷Rc、人参皂苷Ro、人参皂苷Rb₂、人参皂苷Rb₃、人参皂苷Rd、人参皂苷Rg₃的相对校正因子重复性好，2种方法所得11种成分的含量无明显差异，实验得相对校正因子可供参考。结论 本研究建立的QAMS法，快速、简便、重复性好，可为红参药材的质量控制提供参考。]]> 2021/4/7 8:46:58 540true 目的 克隆地黄多药及有毒化合物外排（multidrug and toxic compound extrusion，MATE）转运蛋白基因RgMATE6，并进行亚细胞定位与时空表达分析，为深入研究其在地黄转运次生代谢产物中的分子功能奠定基础。方法 利用地黄转录组数据库候选基因序列，利用实时荧光PCR （RT-PCR）克隆RgMATE6基因；利用生物信息学软件对其编码蛋白的结构、理化性质、同源性和进化树进行分析；通过与绿色荧光蛋白（GFP）融合表达进行亚细胞定位；利用实时荧光定量PCR （quantitative real-time PCR，qRT-PCR）的方法测定该基因的时空表达模式。结果 克隆获得1892 bp的RgMATE6基因序列，RgMATE6基因编码524个氨基酸、具有2个典型的MatE结构域和12个跨膜结构；RgMATE6蛋白与越橘的VcMATE6蛋白亲缘关系最近；RgMATE6-GFP载体瞬时表达的结果发现RgMATE6蛋白定位在液泡膜上；qRT-PCR分析发现RgMATE6基因在地黄不同时期的根中表达最高，尤其是块根膨大前期。结论 RgMATE6蛋白定位在液泡膜上，在地黄块根膨大期的根中表达较高，初步表明RgMATE6可能参与地黄体内次生代谢产物向液泡转运的过程。]]> 2021/3/17 17:47:09 539true 目的 鉴定老鸦瓣Amana edulis MYB转录因子家族成员并分析其表达模式，以期发现老鸦瓣芽茎发育相关MYB基因。方法 利用老鸦瓣转录组数据经Pfam和PlnTFDB数据库鉴定含有MYB保守结构域的MYB转录因子，通过构建系统进化树并根据拟南芥MYB分组信息为老鸦瓣R2R3-MYB基因划分亚组，进行2R-MYB结构域可视化分析和GO富集分析，挑选在芽茎中特异表达的MYB基因并用实时荧光定量PCR （qRT-PCR）验证表达。结果 共鉴定出93个含有MYB保守结构域的MYB转录因子，其中53个R2R3-MYB分为15个亚组，GO注释为生物过程的子类别最多，在芽茎中特异表达的12个MYB基因中有11个基因在芽茎发育前期至中期的表达量显著下降，有4个基因在芽茎发育中期至后期的表达量显著上升。结论 获得的53个R2R3-MYB转录因子为进一步研究老鸦瓣MYB转录因子家族影响芽茎发育过程的分子机制奠定了基础。]]> 2021/3/17 17:47:09 538true 目的 以药用植物菜头肾Championella sarcorrhiza为材料，对其叶绿体基因组进行组装和序列分析，为进一步开展菜头肾遗传与鉴定学研究奠定基础。方法 采用高通量测序技术首次对菜头肾叶绿体基因组进行测序，以板蓝叶绿体基因组为参考，进行特征分析和聚类关系研究。结果 生物信息学分析表明，菜头肾叶绿体基因组总长为144 713 bp，具有典型的被子植物叶绿体基因组环状四分体结构，GC含量为38.35%；共注释得到129个基因，包括84个蛋白编码基因，37个tRNA基因和8个rRNA基因；蛋白编码基因对应的密码子偏好使用A/T碱基。系统发育研究表明，菜头肾与板蓝亲缘关系最近，提示它们在进化上具有共线性。结论 建立了适于菜头肾植物完整叶绿体基因组组装及其特征分析的方法，为菜头肾的鉴定、系统发育研究奠定了基础。]]> 2021/3/17 17:47:09 537true 目的 建立旋覆花药材的HPLC指纹图谱及同时测定绿原酸、咖啡酸、芦丁、花旗松素、1，5-O-二咖啡先奎宁酸、1-O-乙酰旋覆花内酯、槲皮素、狭叶依瓦菊素8个成分含量的方法，运用化学计量学对不同产地旋覆花药材进行质量评价。方法 采用Dubhe C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；以乙腈-0.05%磷酸水溶液为流动相进行梯度洗脱；体积流量1.0 mL/min；检测波长205 nm；进样量10 μL；柱温30℃。采用中药指纹图谱相似度评价软件进行相似度分析，结合主成分分析和偏最小二乘法判别分析寻找并分析7个产地旋覆花药材间的差异成分及其分布特点。结果 建立了旋覆花药材的HPLC指纹图谱，相似度为0.88~0.98，标定共有峰20个，通过对照品比对指认出绿原酸、咖啡酸、芦丁、花旗松素、1，5-O-二咖啡先奎宁酸、1-O-乙酰旋覆花内酯、槲皮素、狭叶依瓦菊素8个共有峰，样品一致性良好。通过主成分分析将样品聚为4类，结合偏最小二乘法判别分析发现咖啡酸、绿原酸、1-O-乙酰旋覆花内酯等7个成分是造成样品差异性的主要标记性成分。含量测定结果表明：各产地8种成分总量江苏>甘肃>河南>浙江>河北>安徽>山东。结论 首次建立了旋覆花药材HPLC指纹图谱及倍半萜类、黄酮类、酚酸类多成分含量测定的质量评价方法，操作简便、结果可靠，明确了不同产地旋覆花药材间成分的差异，为旋覆花药材的资源开发及利用提供依据。]]> 2021/3/17 17:47:09 536true 目的 建立砂蓝刺头Echinops gmelini的质量控制方法。方法 采用薄层色谱法，以三氯甲烷-醋酸乙酯-甲醇-甲酸（6：1：1：0.8）为展开剂对砂蓝刺头花中1-甲基-4-甲氧基-8-（β-D-葡萄吡喃型糖苷）-2（1H）-喹啉酮（MMQ）进行定性鉴别；建立砂蓝刺头HPLC指纹图谱，并对MMQ的含量测定方法进行研究。结果 建立的TLC方法对照品斑点清晰，分离度好；建立的指纹图谱分析方法能够区分砂蓝刺头与近源植物，标定了8个特征峰，并指认出其中4个成分。定量方法测定结果显示MMQ在2.024~151.800 μg/mL呈良好线性关系，平均加样回收率为101.54%，RSD为1.46%。7批样品中MMQ的质量分数为0.13%~0.53%。结论 建立的质量控制方法科学、可靠，可为砂蓝刺头质量标准的建立提供实验依据。]]> 2021/3/17 17:47:10 535true 目的 比较浙产麦冬Ophiopogon japonicus和川产麦冬的性状特征，为其快速鉴定提供科学依据。方法 实地考察并收集不同产地的浙产麦冬和川产麦冬药材，测量其长度、宽度和颜色等13个性状特征参数，采用Simca14.1和IBM SPSS Statistics 26软件进行数据分析。结果 浙产麦冬与川产麦冬的种植及采收加工技术有所不同；主成分分析获得了实验室加工样品8个符合变量重要性投影（VIP）值>1的条件性状变量数据，产地加工样品9个符合VIP值>1的条件性状变量数据。聚类分析结果显示，道地主产区的浙产麦冬与川产麦冬在性状上可明显区分，但实验室加工的道地主产区的浙产麦冬与道地非主产区的川产麦冬则有一定的混淆。浙产麦冬外表面颜色深、中柱明显，气味清香，具粘牙性；川产麦冬外表面颜色较浅、中柱不明显，气味淡，无黏牙性。结论 浙产麦冬和川产麦冬的性状特征存在显著的差异，其表面颜色、中柱大小、气味和黏性可为作为浙产麦冬和川产麦冬鉴别的依据。]]> 2021/3/17 17:47:10 534true 目的 GRAS转录因子在植物响应逆境胁迫和调控次生代谢方面起重要作用。为了研究GRAS转录因子在大麻素生物合成途径中的潜在功能，对大麻Cannabis sativa基因组中的GRAS基因进行全基因组鉴定、表达模式和功能分析。方法 使用NCBI、PlantTFDB、ExPASy等在线网站以及TBtools、MEGA、DNAMAN等软件对CsGRAS基因进行鉴定、可视化分析和功能预测。结果 在大麻基因组中共鉴定出44个GRAS基因，在10条染色体上不均匀分布，基因之间存在串联重复现象；CsGRAS基因编码氨基酸数目为436～757，等电点介于4.77～7.24，相对分子质量为49 164.54～85 748.52；亚细胞定位分析显示CsGRAS主要定位在细胞核中；系统发育分析将CsGRAS分为10个亚家族；CsGRAS基因启动子区含有光响应元件、GA响应元件和MeJA响应元件等；CsGRAS在不同品种不同组织中表达量差异显著，其中CsGRAS4、CsGRAS13、CsGRAS15、CsGRAS17和CsGRAS44在花中特异性高表达，推测其可能调控大麻素生物合成。结论 全面分析了大麻基因组中的GRAS家族，有助于更好地挖掘GRAS基因在大麻的大麻素生物合成调控和响应逆境胁迫中的作用。]]> 2021/3/5 17:46:35 533true 目的 对八爪金龙根进行转录组测序，挖掘次生代谢合成相关基因，探索八爪金龙次生代谢产物生物合成的分子基础。方法 采用Illumina HiSeq 4000高通量测序技术，对八爪金龙根进行转录组测序。使用Trinity软件对获得的Unigenes数据进行过滤组装，运用KEGG数据库对Unigenes进行注释。结果 共获得52 249条Unigenes，其中31 391条被公共数据库成功注释，1507条Unigenes被注释到次生代谢产物合成。通过对转录组数据深入挖掘发现，参与八爪金龙苯丙素生物合成的Unigenes共有126条，参与萜类化合物骨架生物合成的Unigenes数量为73条，参与黄酮类化合物生物合成Unigenes有58条，参与次生代谢后修饰的Unigenes共有253条。筛选出9条Unigenes编码4个与八爪金龙香豆素生物合成的关键酶，23条Unigenes编码8个与黄酮生物合成的关键酶，39条Unigenes编码19个与萜类生物合成的关键酶，140条CYP450基因和113条UGT基因可能参与次生代谢物的修饰。微卫星识别软件（microsatellite identification tool，MISA）分析发现八爪金龙转录组包含17 400个简单重复序列（simple sequence repeats，SSR）。结论 通过高通量转录组测序，初步揭示了参与八爪金龙次生代谢产物合成相关的基因，为进一步研究八爪金龙次生代谢产物合成途径关键酶的功能及其调控机制奠定了基础。]]> 2021/3/5 17:46:35 532true 目的 研究紫外光对苦荞Fagopyrum tataricum幼苗中黄酮类化合物的影响及其分子机制。方法 采用中波紫外光紫外线B（Ultraviolet Radiation B，UVB）处理苦荞幼苗，通过超高效液相色谱仪检测紫外光处理前后苦荞中芦丁等黄酮类化合物含量变化，同时采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测苦荞中黄酮类化合物合成途径中关键酶基因的表达量。结果 紫外光处理后苦荞中芦丁、儿茶素和表儿茶素3种黄酮类化合物的含量均显著增加，其中芦丁含量是黑暗处理对照组的1.5倍。同时通过qRT-PCR检测发现苦荞中黄酮类化合物合成途径中苯丙氨酸解氨酶（phenylalanine ammonia lyase，PAL）、肉桂酸-4-羟化酶（cinnamate-4-hydroxylase，C4H）、黄烷酮-3-羟化酶（flavanone-3-hydroxylase，F3H）、二氢黄酮醇-4-还原酶（dihydroflavonol-4-reductase，DFR）等11个关键酶基因的表达量均有不同程度升高。结论 UVB通过正调控多个黄酮合成关键酶基因的表达促进苦荞中黄酮类化合物的积累，为阐明UVB对苦荞中黄酮类化合物的调控机制奠定基础。]]> 2021/3/5 17:46:35 531true 目的 研究常见矿物类中药粉末的微性状鉴别法。方法 将36种矿物类中药粉末按白色、黄色、灰褐色或黑褐色、红色或紫色分为4类，利用体视显微镜的立体图像处理方法，分别对这几类矿物中药粉末进行微性状观察，比较和总结其鉴别特征，并制作矿物药粉末微性状鉴别检索表。结果 大多数矿物类中药粉末能通过体视显微镜观察到较明显的微性状特征。结论 该方法为矿物类中药粉末的鉴别提供了直观的微性状特征，可作为矿物药的鉴别参考依据。]]> 2021/3/5 17:46:36 530true 目的 调查桂林草药市场药用植物来源。方法 通过药农访谈、标本收集、文献查阅和药材鉴定等方法，对桂林草药市场药用植物资源开展调查和疑难品种进行考证。结果 桂林市草药市场共记录并鉴定植物种类446种，隶属于142科260属，并对22种疑难中草药进行了品种考证。结论 对桂林草药市场的调查研究和疑难中药的品种考证，为药用植物疑难品种开发利用研究提供理论依据。]]> 2021/3/5 17:46:36 529true 目的 获得药用植物阳春砂Amomum villosum萜类合酶基因AvBPPS（bornyl diphosphate synthase）、AvLIS（linalool synthase）和AvHUS（humulene synthase）的启动子，探究其顺式作用调控元件参与萜类合成的调控。方法 从阳春砂叶片基因组DNA（genomic DNA，gDNA）中分别克隆获得AvBPPS、AvLIS和AvHUS的gDNA序列，据此设计特异引物，再通过FPNI-PCR（fusion primer and nested integrated PCR，FPNI-PCR）方法分别克隆其启动子并进行生物信息学分析，结合转录组及对应萜类含量数据，分析其较为关键的顺式作用调控元件与萜类调控的关系。结果 获得AvBPPS、AvLIS和AvHUS的gDNA长度分别为2374、2295、2362 bp，均包含相应基因的完整编码区和7个外显子。进一步克隆获得470、934、762 bp的启动子。AvBPPS启动子含有参与胚乳表达的顺式作用调控元件GCN4-motif，结合基因表达量的分析，该顺式作用调控元件调控了AvBPPS在阳春砂药用部位种子中的特异表达，进而影响了主要药效萜类成分龙脑、乙酸龙脑酯等在种子中的积累。AvLIS和AvHUS启动子均含有参与茉莉酸甲酯（methyl jasmonate，MeJA）反应的顺式作用调控元件，转录组和萜类含量的分析显示AvLIS响应高浓度MeJA的诱导，而AvHUS没有表现出对MeJA的响应。结论 首次从药用植物阳春砂的启动子中发现了参与胚乳表达和MeJA反应的调控元件，为深入探究萜类合成关键酶的种子表达特异性和对MeJA响应的机制提供了基础，为萜类代谢的调控提供了操作元件。]]> 2021/4/23 16:59:06 528true 目的 基于传统煎药工艺建立不同产地黄芪的HPLC指纹图谱，用于黄芪药材质量的评价。方法 采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2004A版）对15批不同产地的黄芪药材的HPLC指纹图谱进行相似度评价，并使用SPSS22.0软件进行聚类分析和主成分分析。结果 选取了12个色谱峰作为指纹图谱共有峰，15批样品的相似度计算结果均大于0.990，说明各产地黄芪药材具有较好的一致性；通过聚类分析可将15批样品聚为4类；主成分分析采用3个主成分对黄芪药材进行综合评价，综合得分结果显示，甘肃民乐县所产批号为HQ-18001（S1）、HQ-18002（S2）和甘肃岷县所产批号为HQ-18007（S7）、HQ-18006（S6）的黄芪药材在所有样品中的综合得分位于前4名。结论 建立基于传统煎药工艺的黄芪药材质量评价方法操作简单，重复性好，结果可靠，可以用于黄芪药材的质量控制和评价。]]> 2021/4/23 16:59:06 527true 目的 基于“成分反映活性，活性指向功效”的中药质量控制研究思路，建立用于丹参饮片等级评价的Logistic回归模型。方法 采用超高效液相色谱法（UPLC）测定丹参质量标志物（quality marker，Q-marker）含量，以凝血酶时间（thrombin time，TT）、羟自由基抑制率、DPPH自由基清除率作为生物活性评价指标，运用Logistic回归分析法将质控指标和生物活性指标进行关联分析，最后建立Logistic回归模型。结果 Logistic模型结果显示，31批丹参饮片被分成了优、良、中、差4个等级，样本等级预测概率（P）值均大于90%，说明本研究所建立的模型其准确性和预测能力均较好。结论 基于含量测定及生物活性结果建立的Logistic回归模型可用来评价丹参饮片质量高低，为丹参整体质量控制提供参考依据。]]> 2021/4/23 16:59:07 526true 目的 采用指纹图谱并结合多种化学计量方法，筛选特征化学成分，区分不同来源的药材，综合评价中药的质量。方法 采用HPLC法建立补骨脂药材指纹图谱，相似性分析（similarity analysis，SA）、聚类分析（hierarchical cluster analysis，HCA）、主成分分析（principal component analysis，PCA）化学计量方法进行分析。色谱柱为Waters X Select HSS T3 xp（150 mm×2.1 mm，2.5 μm），流动相为乙腈（A）-水（B），梯度洗脱，0～10 min，5%～10% A；10～15 min，10%～35% A；15～25 min，35%～60% A；25～35 min，60%～85% A；35～50 min，85%～95% A；体积流量0.3 mL/min，检测波长为246 nm，柱温为30℃，进样量为1 μL。以补骨脂素为参照，绘制11批样品的HPLC图谱，采用《中药色谱指纹图谱相似度评价软件（2012年版）》进行相似性评价分析，确定共有峰，并采用SIMCA 13.0、SPSS 22.0软件进行HCA和PCA。结果 11批补骨脂样品的HPLC图谱有12个共有峰，根据相似度均在是否大于0.95，可将11批次药材分为2类；采用HCA的2种计算方法，分类结果基本一致，说明样品的一致性良好；3个主成分因子的累积方差贡献率为94.524%，以S8样品的主成分因子综合得分最高、整体质量最好。结论 所建HPLC指纹图谱的相似度分析及聚类分析和主成分分析方法结果可为补骨脂药材的质量控制提供参考。]]> 2021/4/23 16:59:07 525true 目的 对壮药红根草进行了基原调查和生药学鉴定研究。方法 查阅本草文献对红根草原植物记载及附图，野外调查红根草药材的原植物来源，通过产地药农收集红根草药材原植物标本，核对药材原植物标本，咨询分类专家，对红根草的原植物形态、药材性状、显微特征、薄层色谱等进行了研究。结果 目前产地及市场红根草药材原植物来源是唇形科植物黄埔鼠尾草S.prionitis带根的全草，采用建立的方法能够有效鉴别红根草药材。结论 为更好地制定红根草新的药材质量标准和药厂红根草药材收购提供依据。]]> 2021/4/23 16:59:07 524true 目的 地黄Rehmannia glutinosa是我国传统中药，具有较高的药用价值和经济价值。利用流式细胞技术和高通量测序技术，分析了地黄基因组大小和特征等信息，为绘制地黄全基因组精细图谱提供依据。方法 将已知基因组大小的大豆Glycine max和辣椒Capsicum annuum作为对照，用流式细胞技术估算地黄基因组大小。然后利用高通量测序技术对地黄基因组进行survey分析，通过生物信息学分析获得了地黄全基因组重复序列比例、基因组杂合度以及GC含量等信息。结果 根据流式细胞实验结果，地黄基因组大小介于大豆和辣椒之间，估算地黄基因组大小应在2.00~2.12 Gb。通过高通量测序，获得了132.79 Gb高质量的数据，总测序深度约为66.40×，估算地黄基因组大小为2.03 Gb。根据Kmer分布情况，估算地黄基因组重复序列比例为78.48%，杂合度为1.93%，GC含量为37.27%。从基因组基本结构特征上看，地黄基因组属于高重复、高杂合、大基因组的复杂基因组。结论 获得了地黄基因组大小和特征等信息，这些信息将为绘制地黄全基因组的精细图谱奠定基础，也为阐明地黄有效成分的生物合成和调控途径提供依据。]]> 2021/2/2 15:00:20 523true 目的 以箭麻（天麻Gastrodia elata的一个生长阶段）和共生天麻（白麻与蜜环菌共生的天麻）为实验材料，通过转录组测序分析初步揭示箭麻和共生天麻生长代谢特征。方法 采用Trizol Reagent（Invitrogen）提取天麻样品中的RNA，建立测序文库并利用Illumina Hiseq^TM2000进行测序，通过与基因数据库比对分析注释和发现差异表达基因。结果 箭麻与共生天麻间共获得72 244条序列，其中有26 312条得到注释。在False Discovery Rate（FDR）<0.05和|log2FC|>1筛选条件下，共有12 498条基因发生显著差异表达，其中9000条基因表达上调，3498条表达下调。京都基因和基因组百科全书（kyoto encyclopedia of genes and genomes，KEGG）功能富集分析表明，差异基因显著富集在20个代谢途径中，其中包含氮代谢，碳代谢和能量代谢等途径。差异表达基因（differentially expressed genes，DEGs）注释到蛋白相邻类的聚簇（cluster of Orthologous Groups of proteins，KOG）的25个分类中，其中差异表达基因与生长代谢过程相关过程能量的产生和转化（energy production and conversion，C）、碳水化合物转运与代谢（carbohydrate transport and metabolism，G）、次生代谢产物的合成、转运和代谢（secondary metabolites biosynthesis，transport and metabolism，Q）类别获得2218个注释结果。基于转录组数据，分析了生长代谢过程中相关基因差异表达水平，发现有利于碳、氮、能量等物质积累的谷氨酰胺合成酶（glutamine synthetase，GS）、天冬酰胺合成酶（asparagine synthetase，ASNS）、蔗糖合成酶（sucrose synthase，SuSy）、可溶性淀粉合成酶（soluble starch synthase，SSS）、ADP-葡萄糖焦磷酸化酶（ADP-glucose pyrophosphorylase，AGPase）、丙酮酸激酶（pyruvate kinase，PK）、己糖激酶（hexokinase，HK）、丙酮酸脱氢酶（pyruvate dehydrogenase，PDH），苹果酸脱氢酶（malate dehydrogenase，MDH），异柠檬酸脱氢酶（isocitrate dehydrogenase，IDH）基因呈上调表达，除分解ATP的ATP酶（adenosine-triphosphatase，ATPase）上调外，分解氮、碳物质的谷氨酸脱氢酶（glutamate dehydrogenase，GDH）、精氨酸酶（arginase，Argase）和淀粉酶（amylase，AMS）基因呈下调表达。qRT-PCR分析结果表明这些基因表达水平与转录组表达情况基本一致。相比较于箭麻，共生天麻生长代谢中物质积累比较旺盛。结论 共生天麻通过消解侵入的蜜环菌合成有机营养物质和能量，有利于其从蜜环菌和周围环境吸收营养物质供箭麻生长需要，为进一步研究天麻不同发育阶段代谢特征奠定基础，并为天麻栽培提供理论指导。]]> 2021/2/2 15:00:20 522true 目的 鲨烯合酶（squalene synthase，SQS）是三萜化合物合成途径中的关键限速酶，对其蛋白特性进行分析与预测。方法 利用生物信息学相关分析工具对20种《中国药典》2015年版收录中药基原植物SQS的理化性质、结构特征及功能特点进行分析。结果 20种中药基原植物有关各条SQS氨基酸序列，其在氨基酸长度、氨基酸组成、相对分子质量及平均亲水系数方面基本一致；所有的SQS均未发现信号肽；二级结构具有明显的一致性，并且α-螺旋和无规则卷曲是主要的结构元件；所有SQS蛋白均含有4个高度保守的结构域和在氨基酸的C端有1~2个跨膜结构；系统进化树结果与植物系统分类学结果基本一致。结论 这20种中药基原植物的SQS的特性差别不大，进化距离也比较近，显示SQS具有较高的保守性和稳定性。分析结果为SQS的功能和作用机制研究提供依据。]]> 2021/2/2 15:00:21 521true 目的 建立板蓝根Isatis indigotica中（R，S）-告依春、直铁线莲宁B、胞苷、鸟苷、尿苷、腺苷6种不同类成分的一测多评方法。方法 采用HPLC法，以（R，S）-告依春为内参物，建立了（R，S）-告依春与胞苷、鸟苷、尿苷、腺苷和直铁线莲宁B的相对校正因子，并考察相对校正因子的耐用性和重现性。比较外标法和一测多评法对新疆软紫草中6种成分的测定结果。结果 各相对校正因子重复性良好，一测多评法测定结果与外标法测定结果无显著差异。结论 建立同时测定6种成分的一测多评法控制板蓝根的质量准确、可靠。]]> 2021/2/2 15:00:21 520true 目的 建立拟草果Amomum paratsao-ko药材的质量评价方法。方法 以鼠李柠檬素为参照峰确定共有峰，建立拟草果的HPLC指纹图谱；以鼠李柠檬素为内标，确定鼠李素、3，5-二羟基-7，4'-二甲氧基黄酮的相对校正因子并计算含量，实现一测多评。同时采用外标法测定3种成分的含量，比较计算值和实测值的差异。结果 建立了拟草果的HPLC指纹图谱，10批样品相似度均在0.9以上；以鼠李柠檬素为内标建立的鼠李素、3，5-二羟基-7，4'-二甲氧基黄酮的相对校正因子分别为1.300、0.885，重现性良好，10批拟草果样品一测多评法计算值与实测值无显著差异。结论 建立的HPLC指纹图谱和一测多评法可用于拟草果的质量评价。]]> 2021/2/2 15:00:21 519true 目的 克隆荆芥1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸合成酶（1-deoxy-D-xylulose 5-phosphate synthase，StDXS）基因，并进行生物信息学分析。方法 根据荆芥转录组数据获得的StDXS基因序列设计特异性引物，通过RT-PCR技术获得StDXS基因cDNA的全长序列，并进行生物信息学分析。结果 荆芥StDXS基因全长2177 bp，包含一个长度为2157 bp的开放阅读框，编码718个氨基酸，其理论相对分子质量为77 240，等电点为6.32，定位于叶绿体，不存在跨膜区及信号肽，为非分泌蛋白。同源系统进化树分析表明，该序列与同科植物鼠尾草的DXS基因进化关系较近，均属于DXS1亚家族。密码子偏性分析表明，该基因偏好使用以A/T结尾的密码子，具有28个偏性密码子，烟草为该基因最适合的外源表达宿主。结论 成功克隆荆芥StDXS基因并进行生物信息学分析，为从分子水平调控荆芥的生长发育和改善药材产量和品质提供理论基础。]]> 2021/1/16 14:19:11 518true 目的 分析和比较5种红豆杉中6种紫杉烷类化合物含量的差异。方法 利用乙醇超声浸提后得到样品溶液；通过高效液相色谱法测定和相关性分析、回归分析和聚类分析比较紫杉醇、巴卡亭III、10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ（10-deacetylbaccatin III，10-DAB）、10-去乙酰基紫杉醇（10-deacetyltaxol，10-DAT）、三尖杉宁碱和10-去乙酰基-7-木糖基紫杉醇（10-deacetyl-7-xylosetaxol，DXT）含量。结果 不同种红豆杉紫杉烷含量存在显著性差异，陇南地区中国红豆杉中10-DAB、紫杉醇、10-DAT和三尖杉宁碱含量显著高于其他种红豆杉，曼地亚红豆杉和湖南省南方红豆杉中10-DAB含量也相对较高；相关性分析、回归分析及聚类分析均表明，10-DAT和三尖杉宁碱与紫杉醇含量显著相关，且前者比后者对紫杉醇含量的影响作用更大；聚类分析还表明温室内栽植的南方红豆杉聚为一类，大田种植的中国红豆杉、东北红豆杉、太行山地区南方红豆杉和曼地亚红豆杉聚为一类，表明环境因子对紫杉烷积累具有明显影响。结论 不同种红豆杉中紫杉烷含量具有显著差异，种类是影响红豆杉紫杉醇等紫杉烷含量的重要因素，紫杉醇含量随着10-DAT和三尖杉宁碱含量增加而增加。]]> 2021/1/16 14:19:11 517true 目的 建立中药材鹿心DNA指纹鉴定方法，研发鹿心DNA检测试剂盒。方法 以梅花鹿和马鹿mtDNA Cytb基因作为靶基因，设计小片段特异性引物，研制鹿心DNA提取及PCR检测试剂；应用分子克隆及测序技术，克隆鹿心对照药材；并对试剂的特异性、重现性、稳定性及灵敏度进行考察；对市售鹿心样品进行真伪鉴定。结果 自主研发的试剂提取鹿心的DNA浓度纯度均达到PCR的要求；在退火温度为63℃时引物的特异性最强；克隆测序后的鹿心DNA序列与鹿心mtDNA Cytb特异指纹区段序列一致；自主研发的试剂重现性、稳定性良好，灵敏度达到0.5%；对市售30个鹿心样品进行检测，伪品率为40%。结论 建立的鹿心DNA指纹鉴定方法特异、准确、可靠，研制的鹿心DNA检测试剂盒操作简便、结果稳定。]]> 2021/1/16 14:19:11 516true 目的 建立补骨脂Psoralea corylifolia药材的UPLC指纹图谱，同时对其中12种成分进行含量测定，为其质量控制提供参考。方法 采用Shim-pack GIST-HP色谱柱（100 mm×2.1 mm，1.9 μm）；以水和乙腈为流动相，梯度洗脱，建立10个产地29个批次的补骨脂药材的UPLC指纹图谱，并采用中药色谱指纹图谱相似度评价软件（2012年版）进行相似度评价。同时测定了补骨脂药材中12种成分的含量。结果 建立了补骨脂药材的UPLC指纹图谱，29批药材的相似度在0.827~0.989，共标定出21个共有峰，并指认出其中12个色谱峰。定量分析条件方法学考察结果良好，29批药材中补骨脂素、异补骨脂素、异补骨脂二氢黄酮、新补骨脂异黄酮、补骨脂甲素、欧前胡素、补骨脂宁、补骨脂定、4，5-去氢异补骨脂定、补骨脂乙素、异补骨脂色烯查耳酮、补骨脂酚的质量分数依次为1.08~6.95、0.76~5.01、0~0.62、0.40~2.54、0.32~1.75、0~0.25，0.06~0.73、0.23~1.83、0~0.27、0.86~6.86、0.08~1.59、4.20~20.76 mg/g。结论 UPLC指纹图谱结合多成分同时测定的方法，操作简便，结果准确、稳定，可为补骨脂药材的质量评价提供参考。]]> 2021/1/16 14:19:11 515true 目的 基于一测多评（QAMS）与指纹图谱的方法建立27批枳壳的质量评价方法。方法 以柚皮苷为参照，计算芸香柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷的相对校正因子，并测定其含量，比较外标法与QAMS法的差异性。采用HPLC法，建立27批枳壳饮片的指纹图谱，通过聚类分析（cluster analysis，CA）、主成分分析（principal component analysis，PCA）对指纹图谱进行评价。结果 QAMS法与外标法测量值之间无显著性差异；建立枳壳饮片指纹图谱方法，相似度均>0.95，共标定11个共有峰，通过与对照品谱图比对，确定了3号峰为芸香柚皮苷、4号峰为柚皮苷、5号峰为橙皮苷、6号峰为新橙皮苷。结论 QAMS法结合指纹图谱可为评价枳壳饮片的质量提供参考。]]> 2021/1/16 14:19:11 514true 目的 应用ITS2条形码技术，对海桐皮Erythrinae Cortex及其混伪品进行分子鉴定。方法 通过提取31份海桐皮药材基原植物刺桐E.variegata、乔木刺桐E. arborescens及其混伪品的基因组DNA，扩增ITS2序列并测序；同时从GenBank下载混伪品序列15种38条，运用MEGA 7.0软件进行序列比对，进行种间序列差异分析比较，并构建Neighbor-jioning（NJ）系统进化树，预测ITS2二级结构。结果 在海桐皮2种基原中，刺桐的ITS2序列长度为232 bp，乔木刺桐的ITS2序列长度为230 bp，均为单倍型，可以明显区分；同时与其他刺桐属及易混品之间遗传距离较远。NJ树结果显示刺桐、乔木刺桐及其他易混品均单独聚为一支，表现出良好的单系性；依据ITS2二级结构，刺桐、乔木刺桐及其混伪品在4个螺旋区的茎环数目、大小、位置以及螺旋发出时的角度均有明显差异，可以直观地将刺桐与乔木刺桐，以及其与易混品进行区分。结论 ITS2序列作为DNA条形码能稳定、准确鉴别海桐皮药材，为保障安全用药提供了新的技术手段。]]> 2021/1/5 15:48:58 513true 目的 研究粗茎秦艽Gentiana crasicaulis种子萌发的转录组信息及影响因子。方法 利用高通量测序技术测定粗茎秦艽种子萌发前、萌发中及萌发后3个阶段的转录组，并通过生物信息学技术进行分析。结果 共获得了149 463条Unigenes，平均长度为601.88 bp，其中79 412个Unigene获得注释。6943个基因差异表达，大部分表现为萌发后上调表达，其中5188个富集到GO条目中，1815个富集到KEGG通路中，大多参与光反应过程、细胞壁合成、脂质代谢及次生代谢中。单碱基到六碱基核苷酸的SSR重复类型均有检出，SSR发生频率为15.13%，出现频率为18.81%，平均每3199 bp就含有1个SSR位点，SSR重复类型丰富，数目较多。结论 粗茎秦艽种子萌发过程有大量调控基因参与，光照、激素为重要的调控因子，SSR专用标记的开发切实可靠，且为粗茎秦艽的次生代谢调控研究奠定了基础。]]> 2021/1/5 15:48:58 512true 目的 建立盾叶薯蓣Dioscorea zingiberensis的UPLC指纹图谱，分析不同产地盾叶薯蓣质量特征的共有性和差异性，为盾叶薯蓣药材的质量评价提供科学依据。方法 采用色谱柱InfinityLab Poroshell 120 EC-C₁₈（150 mm×2.1 mm，2.7 μm），以乙腈（B）-水（A）为流动相梯度洗脱，体积流量0.3 mL/min，检测波长203 nm，柱温30℃，建立65批不同产地盾叶薯蓣药材的UPLC指纹图谱；利用SPSS19.0和SIMCA14.1软件对不同产地的盾叶薯蓣药材进行质量评价及差异性分析。结果 盾叶薯蓣药材UPLC指纹图谱共标定31个共有峰，指认出的5种皂苷类成分和其他未知成分均作为主要信息参与了盾叶薯蓣的质量表达，主成分载荷值的综合得分表明不同产地盾叶薯蓣药材的综合质量差异较大，主成分分析（PCA）结果显示不同产地盾叶薯蓣的化学质量特征存在差异，且各自聚为一类，其中湖北丹江口地区盾叶薯蓣与其他产地样品均存在较大差异；偏最小二乘法分析（PLS-DA）模型筛选出的5、28、11、12、29、18、16、31、13号色谱峰所代表的成分是造成盾叶薯蓣样品间差异的主要标志性物质，其中28、29号峰分别为盾叶新苷和三角叶薯蓣皂苷。结论 本研究建立的盾叶薯蓣UPLC指纹图谱可以较为全面地表征其化学质量特征，指纹图谱的化学计量学分析结果为盾叶薯蓣质量标志物的筛选及质量标准的制定提供科学依据。]]> 2021/1/5 15:48:58 511true 目的 采用超高效液相色谱（UPLC）法建立辛夷花Magnolia biondii药材指纹图谱，并同时测定3种有效成分的含量，评价不同产地辛夷药材质量的差异。方法 采用UPLC法进行测定，色谱柱为YMC Triart C₁₈（100 mm×2.1 mm，1.9 μm）；流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液，梯度洗脱，体积流量为0.3 mL/min，波长为230 nm，柱温为30℃，进样量为1 μL；建立15批辛夷药材指纹图谱，通过对照品比对，对共有峰进行指认，并对3种有效成分的含量进行测定；对15批辛夷药材指纹图谱进行相似度评价、聚类分析（HCA）和主成分分析（PCA），并利用正交偏最小二乘法-判别分析（OPLS-DA）寻找不同产地辛夷药材的差异性成分。结果 辛夷药材指纹图谱有10个共有峰，指认出其中3个峰，分别为松脂素二甲醚、木兰脂素和木兰花碱；湖北、四川与河南产区药材的相似度为0.585～0.793；HCA和PCA分析将15批辛夷药材划分为3类，分别对应3个不同的产区，OPLS-DA法确定7个差异标志物，差异显著性排序为木兰脂素 > 峰4 > 松脂素二甲醚 > 峰3 > 峰8 > 峰9 > 峰10。河南产区辛夷木兰脂素和松脂素二甲醚含量最高，湖北产区辛夷木兰花碱含量最高。结论 该方法能有效地分析不同产地辛夷药材质量的差异性，为不同产地辛夷药材质量的评价提供参考。]]> 2021/1/5 15:48:59 510true 目的 建立测定印度獐牙菜Swertia chirayita中8个��酮类成分的一测多评测定方法。方法 采用高效液相色谱法，以芒果苷为内参物，建立与1，3，5，8-四羟基��酮、swerpunilactone A、1-羟基-3，5-二甲氧基��酮、1-羟基-3，7，8-三甲氧基��酮、雏菊叶龙胆��酮、1，8-二羟基-3，5-二甲氧基��酮和1，8-二羟基-3，7-二甲氧基��酮的相对校正因子（f_s/i），并利用f_s/i计算印度獐牙菜中各成分的含量，同时采用外标法测定该8个成分的含量，比较两者的差异，以验证一测多评法的可行性与准确性。结果 各校正因子的重复性良好，在12批印度獐牙菜中运用一测多评法和外标法得到的各成分含量无显著性差异（RSD<3%）。结论 建立的一测多评法准确性高，可应用于印度獐牙菜的含量测定和质量评价。]]> 2021/1/5 15:48:59 509true 目的 揭示甜菊糖苷糖基化关键酶SrUGT76G1的构效关系。方法 采用RT-PCR法克隆各甜叶菊Stevia rebaudiana材料中的SrUGT76G1变异序列；采用原核表达系统—大肠杆菌和体外催化反应验证各变异序列功能；采用Modeller 9.17软件对SrUGT76G1各变异序列蛋白进行同源建模，利用AutoDock Vina工具进行对接分析。结果 除变异序列N02序列和N03序列外，还分别从110和B1188材料中获取了2个变异序列110-3序列和B1188序列。各变异序列蛋白体外催化反应和催化效率比较分析结果表明，N02蛋白相较于UGT76G1（N01-1，AY345974.1）活性显著下降，特别是以甜茶苷、甜菊糖苷（stevioside，ST）和莱鲍迪苷D（rebaudioside D，RD）为糖基受体底物时，B1188、N03和110-3蛋白对糖苷的糖基化功能已丧失；同源建模和分子对接分析发现由于各变异序列蛋白中氨基酸残基的改变，导致翻译形成的蛋白三维空间结构改变，导致无法完全包裹催化底物。结论 SrUGT76G1形成的活性口袋能否较好地包裹糖基受体底物是其活性强弱和有无的关键。]]> 2021/12/18 15:32:10 508true 目的 建立野菊花Chrysanthemum indicum药材HPLC指纹图谱，并进行化学模式识别。方法 采用Hypersil ODS C₁₈（250 mm×4.6 mm，5 μm）色谱柱；流动相为乙腈-0.1%磷酸，梯度洗脱，检测波长334 nm；体积流量1 mL/min；柱温30℃；进样量10 μL，建立野菊花药材HPLC指纹图谱，结合相似度评价、聚类分析、主成分分析和正交偏最小二乘-判别分析等模式识别方法，对不同产地野菊花药材进行质量评价。结果 建立的指纹图谱方法符合方法学要求，29批野菊花药材HPLC指纹图谱有10个共有峰，相似度均在0.91以上；通过聚类分析将样品按不同产地分为2大类；主成分分析与聚类分析结果一致；最后采用正交偏最小二乘-判别分析筛选出了不同批次野菊花药材的6个差异标志物，通过对照品指认，确定了10号峰为蒙花苷、5号峰为3，4-二咖啡酰奎宁酸、3号峰为木犀草苷、1号峰为绿原酸。结论 建立的指纹图谱方法稳定、可靠、重复性好；结合化学模式识别可用于野菊花药材的质量品质评价。]]> 2021/12/18 15:32:10 507true 目的 建立闹羊花中闹羊花毒素II、III、V的定量分析方法，并测定不同产地、花期闹羊花毒素含量，用于闹羊花药材的质量评价及产地、采收期的选择。方法 采用Waters C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm，5μm）色谱柱，甲醇（A）-水（B）流动相，建立高效液相色谱联合电雾式检测器（HPLC-CAD）方法，并进行方法学验证，对17批不同产地、5批不同花期药材中3种闹羊花毒素进行含量测定，并聚类分析。结果 所建立的分析方法简便，准确度和精密度良好，能作为闹羊花药材常规定量评价方法；不同产地闹羊花药材可聚为3类，第1类（湖南永州、郴州、岳阳，湖北黄石及山东日照）闹羊花毒素V含量明显低于其他地区，第2类（江西上饶、抚州与2批购自湖北荷花池中药材市场，1批湖北随州）3种闹羊花毒素总含量低于其他2类，第3类（湖北随州和安徽岳西、霍山）3种成分含量均较高。不同花期闹羊花中闹羊花毒素II、III盛开末期达最高，闹羊花毒素V以半开期最高，3种闹羊花毒素总含量在花蕾期最低，盛开末期最高。结论 闹羊花毒素II、III、V含量与产地、花期有相关性，可为药材质量标准的完善提供依据和为产地、采收期的选择提供参考依据。]]> 2021/12/18 15:32:10 506true 目的 鉴定艾叶Artemisiae Argyi Folium中主要化学成分的结构并建立其含量测定方法。方法 利用UPLC-UV-Q/TOF进行艾叶分析条件的优化，在对21批艾叶分析的基础上，确定其中紫外和质谱上主要的色谱峰，利用精确相对分子质量和碎片离子鉴定其结构后，利用对照品比对确定结构；进一步采用Waters Acquity I-Class^TM液相色谱系统，Waters Acquity HSS T3色谱柱（100 mm×2.1 mm，1.8 μm），乙腈-0.2%磷酸水为流动相，体积流量0.5 mL/min，梯度洗脱，柱温40℃，PDA检测器，检测波长为326 nm，建立艾叶中主要化学成分的含量测定方法。结果 推测鉴定了艾叶中32个主要化合物的结构，利用对照品确定了其中15个化合物的结构，并建立了其中14个化合物（绿原酸、新绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C、咖啡酸、夏佛塔苷、芹菜素、高车前素、棕矢车菊素、异泽兰黄素、5，7，3'-三羟基-6，4'，5'-三甲氧基黄酮、蔓荆子黄素）的UPLC-UV含量测定方法。14个化合物的分离度良好，稳定性和重复性良好，且线性范围宽（0.5～800.0μg/mL）、线性较好（R²>0.999），平均回收率在94.88%～103.58%。结论 建立的艾叶中14个主要化合物的含量测定方法可以全面评价艾叶的质量。]]> 2021/12/18 15:32:10 505true 目的 通过盆栽实验，综合评价不同钝化材料对土壤镉的钝化以及对川麦冬Cd含量降解的影响。方法 以一年生川麦冬为供试材料，采用土壤盆栽实验方法研究了钝化材料汉白玉（Ar）、秸秆生物炭（Br）、粉煤灰（Fh）、菌渣（Me）、硅藻土（Dm）对土壤总Cd、有效Cd和川麦冬各部Cd吸收累积的影响。结果 2种Cd污染程度土壤，不同钝化材料处理下均能提高土壤pH值；土壤阳离子交换量均极显著高于对照组，与土壤pH值成正相关；土壤总Cd含量和土壤有效Cd、麦冬地上部和地下部Cd含量较对照均极显著降低。综合各项指标发现，Ar对重金属Cd的钝化效果最佳，Br和Fh效果其次。结论 结合盆栽实验结果来看，Ar、Br、Fh、Me和Dm能够有效降低土壤总Cd含量、有效Cd含量和麦冬各部Cd含量，还能促进麦冬的稳收增产；综合分析，Ar、Fh和Br对重金属Cd钝化效果最好，可作为涪城麦冬种植区土壤钝化修复首选材料。]]> 2021/12/18 15:32:10 504true 目的 克隆掌叶大黄Rheum palmatum转录因子基因RpNAC1，进行生物信息学、亚细胞定位及表达模式分析。方法 根据转录组中一个NAC unigene，利用RT-PCR克隆开放阅读框（open reading frame，ORF）。通过生物信息软件预测基因编码蛋白的理化性质、结构域等分子特征。采用DNAStar 6.0和MEGA 7.0分别进行氨基酸序列比对和进化分析。构建绿色荧光蛋白（GFP）融合表达载体，以农杆菌侵染烟草叶片的瞬时表达法分析亚细胞定位。运用qRT-PCR检测基因表达模式。结果 分离到RpNAC1基因，ORF（1269 bp），编码一个由422个氨基酸组成的蛋白质，相对分子质量47 070，等电点5.80，包含一个保守NAC结构域（32～181），与多种植物NAC蛋白一致性较高（62.42%～88.7%），聚在植物NAC分子进化树的NAC2分支，与甜菜NAC（XP_010694507）亲缘关系较近。RpNAC1-GFP融合蛋白定位在烟草细胞核内。RpNAC1基因在一年生植株根中表达量最高，根茎中表达量最低，相对表达量分别为叶中的5.37、0.012倍；该基因响应200 μmol/L赤霉素（gibberellin，GA3）处理后在24 h内总体上调，200 μmol/L茉莉酸甲酯（methyl jasmonate，MeJA）处理1 h和12 h基因显著上调，200 μmol/L水杨酸（salicylic acid，SA）处理12 h显著诱导基因表达，200 μmol/L脱落酸（abscisic acid，ABA）处理抑制基因表达，200 μmol/L乙烯（ethylene，ET）处理未见明显变化。结论 获得掌叶大黄RpNAC1基因序列及表达特征，为进一步研究其在蒽醌类成分合成与积累中的转录调控作用提供支撑。]]> 2021/12/4 13:56:34 503true 目的 为筛选高活性的蛇足石杉铜胺氧化酶（copper-containing amine oxidase，CAO），通过生物工程方法实现石杉碱甲（huperzine A，HupA）的合成、为加快新药创制进度提供理论依据。方法 基于蛇足石杉转录组测序得到的CAO序列片段，利用cDNA末端快速扩增技术（rapid amplification of cDNA ends，RACE）技术，扩增、拼接并验证获得该基因的全长cDNA序列，并将其命名为HsCAO2。结果 通过RACE技术得到HsCAO2的cDNA全长为2696 bp，CDS为2199 bp，编码732个氨基酸。氨基酸序列同源性比对发现，HsCAO2具有保守的氨基酸位点和Cu²⁺结合位点；进化树分析结果表明，HsCAO2与蛇足石杉中的另一个CAO（HsCAO1）同源性最高，达91.67%；蛋白质结构分析结果表明，HsCAO2也可能在生物体里以同源二聚体的形式存在。在此基础上，进一步分别构建了超表达载体pOX-HsCAO2和体外蛋白表达载体pET-28a （+）-HsCAO2。结论 HsCAO2很可能是蛇足石杉中的一个新的功能性CAO，且超表达载体和体外蛋白表达载体的成功构建为进一步研究其功能奠定了基础。]]> 2021/12/4 13:56:34 502true 目的 采用灰色关联-TOPSIS法对不同产地山楂质量进行评价。方法 建立高效液相色谱波长切换法同时测定山楂药材中绿原酸、表儿茶素、金丝桃苷、异槲皮苷、芦丁、槲皮素、牡荆素、牡荆素葡萄糖苷和牡荆素鼠李糖苷9种成分含量，并采用灰色关联-TOPSIS法进行分析，对收集的湖北、安徽、河北、山东、河南、山西、陕西7个产地山楂进行质量评价。结果 建立含量测定方法快速、灵敏、准确，通过灰色关联-TOPSIS分析表明，山东、河南、安徽产地的山楂质量较优。结论 该方法为山楂药材的质量控制和评价以及中药新药研究过程中山楂产地的选择提供依据。]]> 2021/12/4 13:56:34 501true 目的 分析评价地黄Rehmannia glutinosa根与叶中5种核苷与14种氨基酸类成分，揭示其动态积累规律，为其合理利用提供科学依据。方法 选取不同生长期的地黄根和叶以及不同产地（河南大封、河南温县、河南南召）的地黄叶为研究对象，采用超高效液相色谱-三重四极质谱联用技术（ultra-high performance liquid chromatography-triple quadrupole mass spectrometry，UPLC-TQ-MS）分析不同生长期地黄根和叶以及不同产地地黄叶中核苷类与氨基酸类成分的动态变化。结果 研究发现地黄根及地黄叶中均含有5种核苷类成分和14种氨基酸类成分，2部位中不同生长期2类成分的总含量分别为3.88～16.97 mg/g和4.27～25.32 mg/g；地黄根和叶中测得的2类成分总量分别在10月中下旬和11月上中旬显著升高，达到各自峰值，其中L-谷氨酰胺与L-赖氨酸含量最高，占总含量的60%以上；大部分生长期地黄叶中核苷类和氨基酸类成分较地黄根高，尤其在10月下旬；不同产地地黄叶中以河南南召产者核苷和氨基酸含量较高，总含量最高可达30.756 mg/g。结论 阐明了地黄中核苷类和氨基酸类成分的分布和动态积累过程，为地黄药食两用特性及合理采收期提供了科学依据，提出了地黄叶可作为新的食用新资源为机体补充核苷类和氨基酸类成分的建议，为地黄叶资源价值的发现、开发和利用提供了支撑。]]> 2021/12/4 13:56:34 500true 目的 研究叶表皮形态特征对药用植物显微鉴定的意义。方法 利用光学显微镜和显微测绘器对25科40种药用植物的叶表皮形态进行观察、分类和研究，对特征参数进行相关性分析。结果 40种药用植物气孔轴式分为不规则类、不等类、横列类、平列类和四细胞类5种类型，47.5%的种类属于不规则类；表皮细胞形态分为不规则形、多边形和矩形，其垂周壁分为平直、平滑、V-波形和U-波形4种类型；50%的药用植物气孔指数在10～20，45%药用植物气孔密度为100～200个/mm²，70%药用植物叶片气孔器长宽比为1.00～1.50，为宽椭圆形，42%的药用植物气孔面积在401～600 μm²；77.5%药用植物叶片脉岛数在1.00～10.00个/mm²；88.2%药用植物栅表比在1～10。结论 单一叶表皮特征在药用植物显微鉴定中虽有物种差异性，但不具有专属性，多个叶表皮特征的结合或基于多个叶表皮特征建立的植纹是药用植物显微鉴定的有效途径。]]> 2021/12/4 13:56:34 499true 目的 克隆温郁金Curcuma wenyujin萜类生物合成中的限速酶法呢基焦磷酸合酶（farnesyl pyrophosphate synthase，FPPS）的全长cDNA序列。方法 根据温郁金转录组数据设计特异引物，PCR扩增FPPS全长cDNA序列并对其进行生物信息分析；构建"基因-GFP"融合表达载体，利用农杆菌介导烟草叶片进行亚细胞定位分析；实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测基因在植物组织中的特异性表达。结果 温郁金CwFPPS基因全长1196 bp，包含1个长为1071 bp的开放阅读框，编码356个氨基酸，GenBank登入号为MT489462；CwFPPS编码蛋白属于类异戊二烯生物合成酶超级家族（C1）成员，包含5个保守的功能域，其中2个是富含天冬氨酸（DDXXD）的活性中心；亚细胞定位显示该蛋白位于泡质、细胞膜或细胞核上。qRT-PCR分析表明，CwFPPS基因在根茎中特异表达，相对表达水平是叶片中的13.7倍。结论 克隆获得的温郁金CwFPPS基因全长及其特异表达信息，可为后续进行基因功能鉴定及倍半萜成分的代谢工程研究提供依据。]]> 2021/11/18 17:48:50 498true 目的 揭示新疆塔里木盆地分布的野生胀果甘草Glycyrrhiza inflata的遗传多样性和种群遗传结构。方法 利用ISSR分子标记方法，对来自新疆南疆不同地理方位的胀果甘草6个种群总计167个个体进行分析。结果 对胀果甘草6个种群共筛选出46条引物，扩增获得193条多态条带，多态位点比率（PPL）为69.68%，Nei's遗传多样性指数（H）为0.272 2，Shannon多样性指数（I）为0.401 0；Nei's总种群遗传多样性指数（H_t）为0.513 0，种群间遗传分化系数（G_st）为0.530 7，基因流（N_m）为0.438 8，Mantel检验显示种群间的遗传分化与地理距离无相关性；种群间遗传变异丰度和遗传多样性水平呈现BC>KEL>PS>QM>AQS>KC的递减趋势，聚类分析将6个种群在遗传相似性系数为0.69处分为3类；6个种群内个体间PPL的变化范围为52.11%~81.87%，观测等位基因数（N_a）和有效等位基因数（N_e）的变化范围分别为1.521 1~1.818 7和1.307 9~1.498 9，H平均为0.240 8，I平均为0.357 1。结论 胀果甘草有较高的遗传多样性水平，但种群间的分化程度较种群内大，遗传多样性更多的存在于种群水平。生境片段化可能是造成其遗传多样性空间分布现状的主要原因，土壤水分含量可能是影响其种群遗传多样性的制约因素。研究结果对全面了解和掌握胀果甘草自然资源现状、物种进化潜力等，制定资源利用与保护的正确策略提供了重要的研究基础。]]> 2021/11/18 17:48:50 497true 目的 基于雷公法结合盐炙法对补骨脂进行炮制减毒并评价补骨脂炮制前后的肝毒性变化。方法 建立高效液相色谱法同时测定补骨脂中补骨脂素、异补骨脂素、新补骨脂异黄酮、补骨脂甲素、补骨脂乙素和补骨脂酚6个指标成分的含量；选取醇浓度、醇浸时间和蒸制时间为考察因素，以指标成分含量下降率的综合加权评分为指标，正交试验优化炮制工艺，并通过小鼠肝毒性实验评价补骨脂炮制前后的肝毒性。结果 补骨脂最佳炮制工艺，按《中国药典》2020年版盐炙法制备盐补骨脂，取盐补骨脂适量，加入5倍量80%乙醇浸泡24 h，倒出乙醇并用蒸馏水洗净，加入5倍量蒸馏水，浸泡12 h，倒出蒸馏水并洗净，置蒸锅内隔水蒸4 h，取出晾干；由该法炮制所得的补骨脂炮制品中毒性成分含量明显下降，小鼠肝毒性显著降低。结论 该炮制方法可明显降低补骨脂的肝毒性，为临床合理炮制补骨脂提供参考。]]> 2021/11/18 17:48:50 496true 目的 采用UPLC-QQQ-MS/MS法同时测定不同部位和不同产地加工方法知母Anemarrhenae Rhizoma中9个成分的含量，并比较其差异。方法 采用Waters ACQUITY UPLC BEH C₁₈色谱柱（100 mm×2.1 mm，1.7μm），流动相为0.01%甲酸溶液（A）-乙腈（B），梯度洗脱，体积流量0.4 mL/min，进样量2μL，柱温30℃；质谱采用电喷雾离子源、负离子模式（ESI^-），多反应监测（multiple reaction monitoring，MRM）。结果 知母中新芒果苷、芒果苷、异芒果苷、知母皂苷AII、知母皂苷AIII、知母皂苷BII、知母皂苷BIII、知母皂苷E₁、知母皂苷I 9个成分在各自范围内呈良好的线性关系，加样回收率97.23%~100.76%。知母的5个不同部位中知母须根中芒果苷、异芒果苷的含量最高；知母肉中知母皂苷E₁、知母皂苷BII、知母皂苷I含量最高；知母头与知母片、知母肉成分差异较小。比较知母的不同产地加工方法，趁鲜切片新芒果苷和知母皂苷BII的含量较高，润切片芒果苷和知母皂苷AIII的含量较高。结论 知母须根具有一定的开发利用价值，知母肉具有其存在的合理性；知母产地加工，可不切去知母头，以减少工序，提高知母根茎的综合利用率；趁鲜切片可加速干燥，降低饮片霉变风险。]]> 2021/11/18 17:48:50 495true 目的 探索不同微生境对小叶黑柴胡Bupleurum smithii var.parvifolium药材形成的影响，为其驯化栽培奠定基础。方法 通过样方调查对不同生境中小叶黑柴胡种群结构、优势物种、药用植物多样性及柴胡表观形态特征进行统计分析；采用烘干法对土壤水分含量进行测定，采用550℃烧失量法对土壤有机质含量进行测定；采用HPLC法对柴胡中代表组分柴胡皂苷成分含量进行测定。结果 哈思山地区野生小叶黑柴胡分布的典型生境有3个类型，分别为戈壁型、草甸型和灌丛型。戈壁型生境包括流石滩亚型和岩壁缝隙亚型，生境中无优势植物种群，戈壁型柴胡以匍匐型为主，地上部分生物量相对较少，地下生物量相对较多，活性成分含量相对较高；草甸型生境包括低海拔和高海拔2个亚型，低海拔草甸优势植物为地榆，高海拔草甸优势植物为珠芽蓼；灌丛型包括叉子圆柏灌丛、鲜黄小檗灌丛和峨眉蔷薇灌丛，草甸型和灌丛型柴胡以直立型为主，地上部分生物量相对较多，活性成分含量相对较低。结论 小叶黑柴胡是一种极具开发潜力且对恶劣生境适应性极强的药用植物，不同微生境条件下小叶黑柴胡的表观形态和药材品质不同，为其驯化栽培和野生资源保护奠定了一定基础。]]> 2021/11/18 17:48:50 494true 目的 利用DNA条形码技术探索喉红石斛Dendrobium christyanum的分类归属问题，并建立一种新的ITS2二级结构的信息挖掘方法。方法 提取分属5个组14种石斛的DNA，对ITS序列（ITS1-5.8 S-ITS2）进行PCR扩增，测序，获得ITS序列；基于序列信息，计算遗传距离、构建系统发育树，对ITS2的二级结构进行预测，并对其进行量化、聚类分析。结果 喉红石斛与黑毛组的矮石斛D.bellatulum、长距石斛D.longicornu的遗传距离最小，NJ系统发育树与ITS2二级结构的系统聚类图均显示喉红石斛与黑毛组石斛聚为一支，且喉红石斛与黑毛组石斛的二级结构图基本一致。结论 喉红石斛与黑毛组石斛的亲缘关系最近，应归属于黑毛组；新建立的ITS2二级结构量化分析方法可提供更多的分类信息，具有更高水平的分类潜能。这是首次运用DNA条形码进行石斛组间的分类研究，为石斛属植物系统提供了重要依据。]]> 2021/11/6 13:16:26 493true 目的 分析当归Angelica sinensis中阿魏酸和藁本内酯等主要有效成分在其根部的积累规律和转化机制。方法 采用HPLC法测定不同生长期当归根部中阿魏酸、阿魏酸松柏酯和藁本内酯等8种苯酞类挥发油成分的含量，结合体外转化研究成果进行分析。结果 阿魏酸和阿魏酸松柏酯含量从苗期到根膨大期沿着相同的方向不断增加，而从根膨大期到收获期分别逐渐降低和升高，朝2个相反的方向变化，提示在当归体内可能存在阿魏酸和松柏醇转化为阿魏酸松柏酯的过程。藁本内酯和5种转化产物含量总体随生长期呈现上升趋势，尤其从根膨大期到成药期增长速度极快，符合成药期特性；藁本内酯含量远远大于其他6种苯酞类转化产物洋川芎内酯I、洋川芎内酯H、阿魏酸松柏酯、洋川芎内酯A、正丁基苯酞、欧当归内酯的含量，提示在当归活体内藁本内酯的转化程度不高，具体转化机制有待进一步研究。结论 阿魏酸和藁本内酯在不同生长期具有不同的积累和转化规律，可为当归药材生产、炮制和质量评价提供理论支持。]]> 2021/11/6 13:16:27 492true 目的 研究不同种植方式、遮阴度及施肥对白及Bletilla striata产量和品质的影响，确定最适种植方式和栽培管理措施，为白及规范化、规模化种植提供科学依据。方法 采用3因素4水平正交设计进行田间试验，研究种植方式、遮阴度、施肥对2年生“川及1号”产量、多糖含量、1，4-二[4-（葡萄糖氧）苄基]-2-异丁基苹果酸酯含量的影响。结果 不同种植方式与栽培措施对生长指标有显著影响；种植方式、遮阴度对块茎干质量、多糖及苹果酸酯含量有显著影响，施肥量对块茎干质量、多糖与苹果酸酯含量影响不显著。当采用覆膜栽培（A2）时，块茎干质量[（1 784.51±100.01）kg/hm²]、多糖[（39.04±0.28）%]与苹果酸酯含量[（7.72±0.45）%]均达到最高；当采用25%遮阴处理（C2）时，多糖含量最高，达到（39.31±0.28）%，无遮阴处理（C1）的苹果酸酯含量最高，达到（7.61±0.83）%。结论 不同种植方式与栽培措施对白及产量与品质影响差异显著。“川及1号”适宜种植方式为覆膜栽培，采取25%的遮阴处理，高肥力土壤背景下150 kg/hm²为较适施肥量。]]> 2021/11/6 13:16:27 491true 目的 测定不同产地槐角Sophorae Fructus中槐角苷、芦丁、染料木苷含量，并建立其HPLC指纹图谱，结合化学模式识别建立槐角有效的质量评价方法，为槐角药材的质量标准制定提供依据。方法 采用Agilent Zorbax SB C₁₈色谱柱在检测波长为260 nm，体积流量为0.6 mL/min，甲醇-乙腈-0.07%磷酸水（12∶20∶68）为流动相进行等度洗脱，并运用中药色谱指纹图谱相似度评价系统结合化学模式识别技术进行数据分析，确定共有峰并筛选差异性成分。结果 10个不同产地槐角样品的指纹图谱中有9个共有峰为特征峰，与对照图谱相似度均在0.98以上。不同产地槐角的槐角苷、芦丁、染料木苷平均含量分别为8.9%、4.2%、6.45%。聚类分析将10批不同产地的槐角分为2类，主成分分析、正交偏最小二乘-判别分析结果与聚类分析一致，并筛选出不同批次的差异性成分为9、1、2、6、3号峰，其中9、6号峰分别指认为槐角苷、染料木苷。结论 建立了槐角的HPLC指纹图谱及化学模式识别下寻找不同产地槐角质量差异成分的方法，为全面评价槐角药材的质量提供有效手段。]]> 2021/11/6 13:16:27 490true 目的 建立拉曼光谱内标法快速测定煅石膏中无水硫酸钙的含量。方法 内标物为硝酸钠，波长为780 nm，激光功率为24 mW，光阑为50 μm slit，物镜为10倍，曝光时间为2 s，累积次数为2次，扫描范围为300～1700 cm^-1。结果 无水硫酸钙质量分数在5%～35%与无水硫酸钙和硝酸钠的拉曼特征峰强度比（I₁₀₁₆/I₁₀₆₈）线性关系良好；低、中、高3个质量分数的平均加样回收率分别为101.4%、100.9%、100.6%，RSD分别为1.7%、0.8%、0.9%。结论 该方法简便、快速、重复性好，可用于煅石膏药材的质量评价。]]> 2021/11/6 13:16:27 489true 目的 研究药用大黄Rheum officinale转录组编码序列的密码子使用特点及其影响因素，为蒽醌类化合物异源合成的载体选择及药用大黄分子进化研究提供理论基础。方法 利用perl程序及Codon W软件分析4733条药用大黄转录组编码序列的密码子使用偏好性。结果 药用大黄转录组编码序列的GC、GC3平均含量分别为45.6%、44.73%，GC12与GC3存在显著正相关（r＝0.215，P<0.001）；ENc-GC3中性图及偏倚性分析结果显示，大部分基因分布于远离期望曲线和平面中心点，大部分基因分布偏离期望曲线和中心点。通过基因高表达筛选密码子方法确定了29个药用大黄的最优密码子，大多数的最优密码子以U和A结尾。结论 突变压力在药用大黄转录组编码序列的密码子使用偏好性形成过程这起到主要作用。]]> 2021/10/22 17:06:58 488true 目的 建立南大青叶马蓝Baphicacanthus cusia的分子鉴别方法。方法 分析36批马蓝及其混伪品的ITS2和psbA-trnH基因序列信息，根据关键差异位点建立相应的聚合酶链式反应法-限制性片段长度多态性分析（polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism，PCR-RFLP）鉴别方法，并考察该方法的专属性和耐用性。结果 马蓝的psbA-trnH基因序列与其混伪品的无明显位点差异，ITS2基因序列具有明显的种间差异，其中1个关键差异位点可被限制性内切酶Sma I识别和酶切，以此建立的PCR-RFLP鉴别方法符合《中国药典》2020年版四部中专属性和耐用性的要求。结论 建立了有效鉴别南大青叶的PCR-RFLP方法，且该方法适用于基原物种为马蓝的其他中药材鉴别。]]> 2021/10/22 17:06:58 487true 目的 利用SCoT分子标记技术分析27份金花茶组植物种质资源的遗传多样性和亲缘关系，为金花茶组植物种质资源鉴定保护和开发利用提供理论依据。方法 从100条SCoT引物中筛选出条带重复性好、多态性高的引物对供试材料进行PCR扩增，用NTsys 2.10e计算种质间的遗传相似系数，用非加权平均距离法（UPGMA）进行聚类分析，构建系统发育进化树。结果 从100条SCoT引物中筛选出13条引物共扩增出566条条带，其中多态性条带549条，多态性比率为97%，平均每条SCoT引物扩增的总条带数和多态性条带数分别为43.54、42.23条，多态性比率为89.74%～100.00%，平均为96.82%；27份金花茶组植物种质间的遗传相似系数为0.367～0.754。聚类分析结果显示，遗传相似系数在0.480处可将27份金花茶种质划分为I、II、III、IV、V 5组，遗传相似系数在0.511处第I组被划分为a、b亚组，在0.517处第II组被划分为c、d亚组，在0.508处第IV组被划分为e、f亚组。结论 不同金花茶组植物种质间的遗传多样性丰富，SCoT分子标记多态性高，重复性好，可有效用于金花茶组植物种质资源遗传多样性分析，为金花茶组植物种质资源的鉴定保护、分子辅助育种和开发利用提供理论依据。]]> 2021/10/22 17:06:58 486true 目的 为揭示新疆啤酒花Humulus lupulus野生与栽培个体间的遗传关系、遗传结构及野生资源的遗传潜力。方法 利用SLAF-seq简化基因组测序技术，对新疆20个野生个体和18个栽培个体的SNP位点进行了开发与鉴定。利用系统发育分析、群体遗传结构分析和主成分分析（principal component analysis，PCA）等方法，从基因组水平揭示了野生种与栽培种之间的遗传结构。结果 结果表明，通过SLAF-seq测序共获得863 228个SLAF标签，其中多态性SLAF标签有443 922个，共获得2 867 140个SNP位点。系统发育分析表明，野生个体和栽培个体整体上可各自分为2个聚类簇。总的Shanon-Wiener指数平均为0.397，其中野生个体为0.455，栽培个体为0.398；总的Nei多样性指数平均为0.249，其中野生个体为0.293，栽培个体为0.250。AMOVA分析表明，啤酒花的主要遗传变异主要来源于群体间，野生个体与栽培个体之间具有较大的遗传分化。结论 新疆分布的野生啤酒花个体与栽培个体之间存在较大的遗传分化，但是野生啤酒花个体具有较高的遗传多样性，说明新疆啤酒花的野生资源具有较高的遗传育种潜力。]]> 2021/10/22 17:06:59 485true 目的 构建熵权-正态云模型，对不同产地蓬莪术Curcuma phaeocaulis的质量进行评价。方法 以不同产地的蓬莪术为研究对象，选取吉马酮、呋喃二烯、莪术醇和姜黄素含量为定量指标，建立评价体系。利用熵权法测定不同指标的信息熵，确定各评价指标权重。结合云模型，利用正向云发生器，将各指标等级的界限转化为云，计算不同产地的蓬莪术平均等级隶属度，根据隶属度矩阵和权重矩阵对不同产地蓬莪术的质量进行综合性评价。结果 产地为四川的蓬莪术综合质量评价结果较高，绝大部分分布在I级和II级，其中，又以产地为四川温江的蓬莪术评价结果最好，为I级。广西所产的蓬莪术评价以III级为主，制约因素为吉马酮含量。云南蓬莪术质量以III级和IV级为主，主要制约因素为姜黄素和莪术醇含量。结论 从数据挖掘和数理统计角度，创新引入熵权-正态云模型评价模型，建立宏观状态的数学模型与物质基础相统一的蓬莪术质量评价体系，可为蓬莪术质量综合评价提供一种新思路。]]> 2021/10/22 17:06:59 484true 目的 克隆何首乌Polygonum multiflorum糖基转移酶基因PmUGTs，并对其进行生物信息学以及差异表达分析。方法 基于何首乌转录组数据，利用PCR扩增PmUGTs全长cDNA并进行生物信息学分析；使用autodock4软件进行分子模拟对接；运用qRT-PCR检测基因在不同器官中的表达差异。结果 克隆得到4条PmUGTs，分别命名为PmUGT1、PmUGT2、PmUGT3、PmUGT4基因，开放阅读框（ORF）长度分别为1509、1506、1464和1476 bp；编码503、502、488与492个氨基酸；蛋白相对分子质量分别为56 940、54 780、54 350和54 620。PmUGTs氨基酸序列中含有UGT高度保守的PSPG盒结构域，其二级结构主要由无规则卷曲与α-螺旋组成。进化树分析表明，PmUGT1、PmUGT2、PmUGT3与拟南芥的UGT蛋白距离较近，PmUGT4则与蒺藜苜蓿UGT亲缘关系最近。根据autodock4结果可知PmUGT1、PmUGT3、PmUGT2与PmUGT4蛋白上的残基分别可以与鹰嘴豆芽素A、罗汉果醇、白藜芦醇通过氢键连接。qRT-PCR结果表明，PmUGTs表达量均在叶中最高。结论 为进一步研究何首乌糖基转移酶基因的功能及何首乌中糖苷类化合物的生物合成途径奠定基础。]]> 2021/9/30 16:25:36 483true 目的 明确草果Amomum tsao-ko叶绿体基因组结构特征及其在姜科的进化地位。方法 利用Illumina Hiseq 4000测序平台对草果叶绿体基因组进行测序，通过生物信息学分析方法进行序列组装、注释和特征分析，并以绿苞闭鞘姜为外类群，通过MEGA6软件构建ML系统发育树，分析姜科物种间系统发育关系。结果 草果叶绿体基因组全长163 648 bp，鸟嘌呤和胞嘧啶含量（guanine-cytosine content，GC）为36.0%，包括一对29 776 bp的反向重复区（IRs）、一个大单拷贝区（LSC，88 741 bp）和一个小单拷贝区（SSC，15 355 bp）；共注释得到113个基因，包括4个rRNA基因、30个tRNA基因和79个蛋白编码基因；在草果叶绿体基因组中共检测到123个SSR位点，大部分SSR均由A和T组成；豆蔻属物种叶绿体基因组大小和结构相似，IR边界高度保守；聚类分析显示草果与豆蔻属的海南砂A.longiligulare、阳春砂A.villosum、绿壳砂A.villosum var.xanthioides、爪哇白豆蔻A.compactum和白豆蔻A.kravanh亲缘关系最近；适应性进化分析发现rpl20、rps11、ccsA、clpP、ycf1和ycf2 6个基因在进化过程中被正向选择。结论 获得了完整的草果叶绿体基因组序列，明确了姜科物种间的亲缘关系，为研究豆蔻属植物的系统进化及物种鉴定提供科学依据。]]> 2021/9/30 16:25:36 482true 目的 构建川芎Ligusticum chuanxiong超高效合相色谱（UPC²）特征图谱，与HPLC特征图谱进行比较，为川芎质量评价提供新的参考。方法 采用UPC²-PDA法，以CO₂为流动相，异丙醇-甲醇（3∶7）为助溶剂，梯度洗脱，建立川芎药材化学成分特征图谱；利用主成分分析和聚类分析方法，分析川芎药材品质与产地的关联性。结果 建立了不同产区川芎药材特征图谱，以藁本内酯为参照峰，确定了8个共有特征峰，同时指认了5种特征性成分；经主成分分析4个主成分因子的累积方差贡献率为93.097%，聚类分析将20批不同产地药材分为3大类。结论 建立的川芎药材UPC²特征图谱的不仅精密度、重复性、稳定性良好，而且在分析方法上优于HPLC特征图谱，还可以对不同产地川芎药材品质进行快速、有效地评估。]]> 2021/9/30 16:25:36 481true 目的 建立一测多评法同时测定斑花黄堇Corydalis conspersa中盐酸小檗碱、比枯枯灵、原阿片碱、黄连碱4种生物碱成分的含量。方法 采用酸提碱沉法，二氯甲烷萃取斑花黄堇中的生物碱成分，以盐酸小檗碱、比枯枯灵、原阿片碱、黄连碱4种生物碱为指标成分，结合一测多评法学建立各成分与盐酸小檗碱的相对校正因子，计算各成分的相对保留时间，实现一测多评；同时测定4种生物碱成分的量。色谱柱为B18120405.25摇光Waters C₁₈（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相为乙腈（A）-0.2%的醋酸水溶液（B），梯度洗脱，0～5 min，25% A；6～10 min，25%～30% A；11～15 min，30%～35% A；16～25 min，35%～25% A。检测波长为245 nm，体积流量1.0 mL/min，柱温30℃，理论塔板数以盐酸小檗碱计算不低于4000。结果 斑花黄堇药材各组织中盐酸小檗碱、原阿片碱、黄连碱的含量较高，不同采集地区根部4种生物碱的含量比茎、叶、花中高。结论 建立的一测多评法含量测定的方法方便可行，可作为斑花黄堇药材中盐酸小檗碱、黄连碱、原阿片碱、比枯枯灵质量检测的方法。]]> 2021/9/30 16:25:36 480true 目的 克隆马蓝邻氨基苯甲酸合成酶（anthranilate synthase，AS）BcASB基因（GenBank登录号QCF61930.1），并对其进行生物信息学分析、时空表达分析以及检测马蓝有效成分靛蓝、靛玉红积累量随时间的变化。方法 通过RT-PCR和RACE技术，克隆BcASB基因全长，应用生物信息学的方法对该基因编码的蛋白进行各种理化性质测定，二级结构和三级结构预测分析以及对核苷酸和氨基酸序列进行比对；利用qRT-PCR技术检测BcASB基因在马蓝不同器官（根、茎、叶）中的表达模式以及在外源诱导子茉莉酸甲酯（methyl-jasmonate，MeJA）、脱落酸（abscisic acid，ABA）、水杨酸（salicylic acid，SA）和乙烯利（ethylene，ETH）诱导下的表达情况；同时运用HPLC测定吲哚类生物碱靛蓝、靛玉红含量的变化情况。结果 克隆获得BcASB基因，开放阅读框（open reading frame，ORF）长度为765 bp，编码256个氨基酸，生物信息学表明，该蛋白不含信号肽且无跨膜区，亚细胞结构定位于叶绿体；qRT-PCR检测结果表明，BcASB基因在马蓝叶和茎中的表达量较高，在根中表达较低；BcASB基因可响应不同外源诱导处理，而影响其转录；HPLC检测结果显示靛蓝、靛玉红含量有着明显的变化。结论 成功克隆马蓝邻氨基苯甲酸合成酶BcASB基因，为进一步阐释该基因在马蓝吲哚类生物碱合成途径的作用及表达调控研究奠定基础。]]> 2021/9/17 16:52:41 479true 目的 克隆三七Panax notoginseng的花色苷合成结构基因（anthocyanin biosynthesis structural genes，ABSG），研究ABSG的表达模式及其与相关表型的关联性。方法 利用RT-PCR技术克隆三七ABSG，进行生物信息学和表达模式分析；使用pH示差法分析三七紫根的花色苷含量，并通过qRT-PCR技术进行相关结构基因的关联性研究。结果 克隆获得6类共8个三七ABSG，其开放阅读框（open reading frame，ORF）长度在600~1500 bp，均含有花色苷生物合成相关的保守结构域。进化树分析显示，8个基因被分为5个分支，且与其他物种有较高的同源性。顺式作用元件分析表明，三七ABSG启动子序列中含有多种元件，其中光响应和转录因子类元件的数量最多。表达模式显示，8个基因主要分为在花发育前期阶段（花蕾期）高丰度表达基因和在根部高量表达基因。此外，对三七紫根的分析发现，相比于普通型黄白根，其花色苷含量提高约3倍，PnF3'H1基因和PnUFGT基因表达显著增强，表明它们可能是参与紫根三七中花色苷形成的关键结构基因。结论 克隆获得8个三七ABSG，为该类基因的功能机制研究和三七种质创新利用奠定基础。]]> 2021/9/17 16:52:41 478true 目的 克隆得到山茱萸Cornus officinalis萜类合成途径的关键酶CoHMGS基因的cDNA序列，并进行相应的生物信息学分析，为深入研究CoHMGS基因的功能奠定基础。方法 以山茱萸转录组筛选出的c102453_g2序列为参考序列设计特异引物，以山茱萸叶片总RNA，通过RT-PCR扩增获得CoHMGS基因序列，序列纯化回收后连接到pTOPO-T载体上，转化至大肠杆菌DH10B，选取阳性克隆测序。利用生物信息学软件预测CoHMGS基因及其编码蛋白质的功能。结果 克隆得到长度为1645 bp的CoHMGS序列，包含1413 bp的完整开放阅读框，编码470个氨基酸。蛋白整体带负电荷，为不稳定亲水性蛋白，定位于细胞质内，不含跨膜结构。结论 首次克隆得到山茱萸CoHMGS基因，对其编码蛋白质进行了初步的分析和预测，为深入揭示CoHMGS基因在山茱萸萜类物质合成途径中的功能奠定了基础。]]> 2021/9/17 16:52:42 477true 目的 建立虎掌南星Pinellia pedatisecta特异性DNA的闭管式超快速检测方法，实现对虎掌南星样本的快速鉴别。方法 针对虎掌南星特异性的DNA序列设计其特异性的引物和TaqMan探针，通过对扩增体系进行优化，建立虎掌南星的超快速实时荧光VPCR扩增体系，实现对虎掌南星特异性DNA的快速扩增和闭管式实时检测。同时对该方法的特异性、灵敏度和实用性进行考察。结果 可以在24 min内完成对虎掌南星特异性DNA的闭管快速扩增检测；检测限低至pg级DNA；在同科属常见近缘品种中无交叉反应；对采集的7批56个"半夏"样本进行分析，检测出2个批次共16个样本为虎掌南星，且该结果与测序结果100%符合。结论 所建方法可以作为虎掌南星的特异性检测方法，具有灵敏、快速和不易污染等优点，可以为虎掌南星和半夏药材的质量控制提供参考。]]> 2021/9/17 16:52:42 476true 目的 利用三线胶体金侧流向免疫色谱技术，针对中药特点对样品前处理和检测曲线进行研究，建立快速、准确的定量测定中药饮片中黄曲霉毒素B1、B2、G1和G2总量的方法，迅速检测中药饮片中黄曲霉毒素的污染程度。方法 利用胶体金免疫亲和法建立《中国药典》2020年版规定限度的24种中药饮片中黄曲霉毒素测定方法，进行方法学验证，并对60种中药饮片，共计195批次样品进行分类测定。同时利用液质联用（三重四级杆质谱法）对上述样品进行定量检测，并比对2种检测方法。采用配对t检验法比较2种方法的检测结果是否存在显著性差异；通过加入其他真菌毒素对试纸条的特异性进行考察。结果 通过胶体金侧流向免疫色谱技术测定中药饮片中黄曲霉毒素含量，胶体金方法和液质联用方法检测结果一致，无显著性差异，加样回收率为80.3%～119.7%，与黄曲霉毒素M1和M2、赭曲霉毒素、脱氧雪腐镰刀菌烯醇和玉米赤霉烯酮等其他真菌毒素没有交叉反应。单独研究黄曲霉毒素B1与B1、B2、G1和G2总量之间无交叉干扰，且其含量测定符合《中国药典》2020年版规定的标准检验要求。结论 胶体金检测方法可以准确、定量、快速检测中药饮片中黄曲霉毒素含量。该方法具有简单、快捷和低毒等优点。]]> 2021/9/4 9:51:11 475true 目的 评价市售吴茱萸Euodiae Fructus的质量并研究不同商品规格吴茱萸中化学成分与肝细胞毒性的相关性，为吴茱萸全面质量控制提供依据。方法 按吴茱萸药材商品规格收集小花吴茱萸7批，中花吴茱萸22批，大花吴茱萸10批，建立了UPLC法同时测定吴茱萸中柠檬苦素（limonin，LIM）、吴茱萸碱（evodiamine，EVD）、吴茱萸次碱（rutaecarpine，RUT）、1-甲基-2-壬基-4-（1H）-喹诺酮[1-methyl-2-nonyl-4（1H）-quinolone，MNQ]、1-甲基-2-十一烷基-4（1H）-喹诺酮[1-methyl-2-undecyl-4（1H）-quinolone，MUQ]和吴茱萸新碱（evocarpine，EVC）的含量；采用CCK-8法检测吴茱萸对L02肝细胞的生长抑制作用。运用SIMCA-P 14.1统计软件对吴茱萸的细胞存活率进行主成分分析（principal component analysis，PCA）。结果 有19批商品符合《中国药典》2020年版规定，不符合药典要求的20批样品中有10批为药材基原不符，有1批EVD和RUT的总量不符合药典规定，9批LIM含量不符合药典规定。7批小花吴茱萸中1批不符合药典要求，22批中花吴茱萸中10批不符合药典要求，10批大花吴茱萸中9批不符合药典要求。同时发现小花吴茱萸中LIM含量高于中花和大花吴茱萸，而生物碱含量中花和大花吴茱萸中较高。其中S33～S39样品按果实大小属于中花吴茱萸但不含LIM，将其称为中花样吴茱萸劣品。基于建立的UPLC方法同时测定吴茱萸中LIM和5种生物碱含量；PCA分析模型将小花吴茱萸、中花吴茱萸、大花吴茱萸和中花样吴茱萸劣品的毒性很好地区分为4个区域，对L02肝细胞的生长抑制作用为中花样吴茱萸劣品>大花吴茱萸>中花吴茱萸>小花吴茱萸，且LIM与5种生物碱的比值和吴茱萸对L02肝细胞的半数抑制率（IC₅₀）总体上呈正相关。结论 吴茱萸的毒性与LIM和5种生物碱比例有关，LIM与5种生物碱含量和的比值越大，吴茱萸样品毒性越小。提示大花吴茱萸不适合作为商品流通，同时吴茱萸质量控制应考虑药材中LIM和生物碱类成分含量的比例。]]> 2021/9/4 9:51:11 474true 目的 以采自11个省共27个居群的大黄Rhei Radix et Rhizoma药材的根为研究对象，测定其总蒽醌及5个游离蒽醌成分的含量，为大黄的道地性形成研究提供参考。方法 采用赛分RP-C₁₈液相色谱柱（Amethyst C₁₈-H，250 mm×4.6 mm，5 μm），以甲醇-0.1%磷酸水（85：15）溶液为流动相，体积流量1 mL/min，柱温30℃，检测波长为254 nm。利用主成分分析（principal components analysis，PCA）、偏最小二乘法判别分析（partial least squares discrimination analysis，PLS-DA）、正交偏最小二乘法判别分析（orthogonal partial least squares discrimination analysis，OPLS-DA）及聚类分析等方法对含量测定结果进行分析。结果 所选取的大黄药材均达到了《中国药典》2020年版规定的总蒽醌及5个游离蒽醌的含量标准，根据蒽醌成分含量差异可将不同居群的大黄划分为2大类，并与大黄传统的道地产区和非道地产区相吻合。芦荟大黄素、大黄素及大黄酸的含量在2组之间具有显著性差异，表现为道地产区的含量显著高于非道地产区。结论 不同产地的大黄蒽醌含量存在明显差异，蒽醌含量可作为评价大黄的道地性指标。]]> 2021/9/4 9:51:11 473true 目的 以不同栽培模式下的人参根际土壤为研究对象，分析红松下种植人参、农田土壤种植下的人参根际土壤微生物菌群落多样性及群落功能特征的变化，探讨环境土壤微生物对林下人参、大棚人参生长的影响。方法 采用第三代测序技术，对不同种植模式人参根际土壤中的优势菌群和差异微生物进行分析。结果 在林下参根际土壤中检测到α-变形杆菌-13-2-20CM-2-64-7、慢生根瘤菌属的erythrophlei、SP-URHD0069、Lablabi、硝化螺旋菌SCGC-AG-212-E16、放线菌-13-1-2CM-4-69-9为优势菌种，这些固氮菌在加强了林下人参的养分吸收，在增加森林碳汇方面起到积极作用，同时增强了林下人参的抗逆性。相同年限的大棚人参根际土壤中检测出单胞菌、荧光假单胞菌、诺卡氏菌-SP-lS0805N、诺卡氏菌terrae、γ-变形杆菌-13-2-20CM-66-19显著增多，其中氨化细菌，纤维素分解菌、硝化菌丰度较高，这与种植方式比如施肥，翻耕、农药使用有密切联系。结论 不同的栽培模式影响着人参根际土壤微生物菌群落多样性，及菌群功能特征。为后期人参绿色种植提供理论依据，为人参农林复合经营的可持续发展提供参考。]]> 2021/9/4 9:51:12 472true 目的 分析漆酶在唇形科药用植物中的异同，以期为唇形科药用植物中漆酶的后续研究提供依据。方法 通过生物信息学方法从唇形科8种药用植物的转录组数据库中发掘了31个完整漆酶基因并解析其特征，包括序列的同源性、理化特征、信号肽、导肽、跨膜结构域、糖基化与磷酸化位点、二级结构和铜离子结构域等，并对它们的进化关系以及表达模式进行了初步分析。结果 唇形科药用植物漆酶基因均具有典型的漆酶结构特征，相对分子质量在62 000左右，多数含有分泌途径的信号肽，无规则卷曲和延伸链是其二级结构的主要构成部分；通过与拟南芥Arabidopsis thaliana和丹参Salvia miltiorrhiza漆酶共同构建系统进化树，能将其分为7个亚族。结论 对唇形科药用植物漆酶基因的详细分析，可为后续该酶基因的深入研究以及通过生物技术手段对唇形科药用植物药效物质进行代谢调控以及关键酶基因的定点突变提供参考信息。]]> 2021/8/20 12:32:49 471true 目的 对广佛手Citrus medica var.sarcodactylis中参与合成UDP-鼠李糖的UDP-鼠李糖合成酶（UDP-rhamnose synthase，RHM）基因进行全长cDNA克隆、功能鉴定及差异表达分析。方法 基于广佛手转录组数据，筛选和克隆广佛手鼠李糖合成酶基因（CmRHM1）的全长cDNA，并对其进行生物信息学分析；构建原核表达载体，通过体外酶促反应鉴定CmRHM1的功能；利用实时荧光定量PCR分析广佛手不同器官中CmRHM1基因的表达特性。结果 CmRHM1基因的开放阅读框（ORF）长度为2007 bp，编码668个氨基酸。该基因编码蛋白的相对分子质量为75 330、理论等电点是6.97，为亲水蛋白，无信号肽。多重序列比对显示CmRHM1在序列的N-端和C-端均含有高度保守的2个结构域（GxxGxxG/A和YxxxK）。体外酶促反应结果表明CmRHM1蛋白具有催化UDP-Glc合成UDP-Rha的功能。实时荧光定量结果显示该基因在广佛手的茎、叶和果实中的表达水平依次为叶>果实>茎。结论 CmRHM1基因的功能鉴定为UDP-鼠李糖及鼠李糖糖苷的生物合成奠定了物质基础。]]> 2021/8/20 12:32:49 470true 目的 筛选和鉴定刺五加Eleutherococcus senticosus中的细胞色素P450基因（EsP450），分析其进化特征，探究其与刺五加总皂苷含量的相关性。方法 根据转录组测序结果，筛选得到EsP450基因，并对其进行生物信息学分析与适应性进化分析，采用qRT-PCR法检测EsP450基因的表达量，采用分光光度计测定刺五加的总皂苷含量。结果 筛选得到了18条EsP450基因。刺五加P450蛋白不存在跨膜区域，二级结构以α-螺旋和无规则卷曲结构为主。EsP450基因不存在正选择位点。各EsP450间的表达量差异显著，部分基因表达量差值在10倍以上，7条EsP450基因的表达与皂苷含量呈正相关关系（P<0.05）。结论 鉴定出与刺五加总皂苷含量存在正相关关系的EsP450基因，EsP450基因在进化中受到纯净选择。]]> 2021/8/20 12:32:49 469true 目的 基于化学模式识别法建立翼核果Ventilago leiocarpa指纹图谱与多成分含量测定，并研究其抗氧化活性，为其进一步开发利用提供依据。方法 建立15批不同产地翼核果HPLC指纹图谱，确定共有峰，通过对照品比对指认4种化学成分并测定样品中含量，使用SPSS 19.0、SIMCA 14.1软件进行聚类分析和主成分分析，DPPH法测定其抗氧化活性，并通过灰色关联度分析建立其谱效关系。结果 选取了8个色谱峰作为指纹图谱的共有峰，通过聚类分析可将15批翼核果分为3类，主成分分析与聚类分析结果基本一致；经主成分分析，3个主成分因子的累积方差贡献率为80.505%；被指认的大黄素-8-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚峰在15批样品中的质量分数分别为0.06～2.08 mg/g、3.57～17.03 mg/g、0.04～1.53 mg/g、0.10～1.59 mg/g；15批样品均具有抗氧化活性，8个共有峰与抗氧化活性存在一定的关联度，关联度在0.8259～0.6351，各特征峰所代表的化学成分对其抗氧化活性贡献的大小顺序为8号峰>3号峰>1号峰>2号峰>4号峰>5号峰>7号峰>6号峰。结论 翼核果抗氧化作用为“多成分”共同起效的结果，翼核果指纹图谱的构建和化学模式识别为其质量控制提供科学依据，大黄素-8-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚可作为翼核果质量控制的指标性成分。]]> 2021/8/20 12:32:49 468true 目的 从分子水平快速、准确鉴别壮药材滇桂艾纳香的2个常混淆基原植物假东风草Blumea riparia（小花种）和东风草B.megacephala（大花种），研究假东风草（小花种）和东风草（大花种）的亲缘关系。方法 采用SCoT分子标记研究，利用23条引物对30个植物样本进行扩增，NTSYS软件进行聚类分析，SPSS 20.0软件进行主成分分析，并构建DNA指纹图谱，利用R语言进行Mantel test分析。结果 从23条SCoT引物中筛选出多态性较好且条带清晰、重复性高的引物11条，共扩增出213条带，不同引物扩增出的多态性条带数为8～30条，平均为19.0条，多态性比率为98.12%。UPGMA聚类分析结果显示，供试品种间Dice遗传相似系数为0.373～0.849，遗传相似性（genetic similarity coefficients，GS）在0.421处可将30个样本分为3大类，其中第I类为假东风草（小花种），第II类与第III类均为东风草（大花种），主成分分析结果与聚类结果一致。SCoT引物3所构建的指纹图谱多态性好、条带清晰、种间差异明显，可用于2个品种的鉴定。Mantel test分析结果显示遗传距离与地理距离呈显著相关性（r=0.392 9，P=00.01）。结论 SCoT分子标记可以准确地区分开假东风草（小花种）和东风草（大花种） 2个物种，为壮药材滇桂艾纳香的鉴别提供了新的方法。]]> 2021/8/4 9:43:07 467true 目的 建立不同产地当归Angelicae sinensis的HPLC指纹图谱并测定其主要成分的含量，结合化学计量学分析，建立各产地当归的“识别标志”。方法 采用HPLC-DAD方法建立甘肃、四川和云南等地当归的指纹图谱，并对指标成分进行含量测定。进行相似度评价结合主成分分析（principal component analysis，PCA）、偏最小二乘法判别分析（partial leastsquares discrimination analysis，PLS-DA）、Fisher线性判别（fisher linear discrimination analysis，FLDA）等模式识别技术进行分析。结果 HPLC指纹图谱共标定了不同产地当归中的13个共有峰，指认出绿原酸、阿魏酸、洋川芎内酯I、洋川芎内酯H、阿魏酸松柏酯、E-藁本内酯、E-丁烯基苯酞、Z-藁本内酯8个色谱峰，样品相似度均在0.90以上。绿原酸、洋川芎内酯I、E-丁烯基苯酞、总阿魏酸（阿魏酸与阿魏酸松柏酯换算后总量）、Z-藁本内酯6个指标成分含量测定变化范围分别为0.10～0.52 mg/g、0.10～0.24 mg/g、0.19～0.54 mg/g、1.42～2.66 mg/g、21.75～29.15 mg/g。PCA、PLS-DA分析结果表明，Z-藁本内酯、E-藁本内酯、阿魏酸松柏酯、阿魏酸在不同产地当归的中变化显著，Z-藁本内酯、E-丁烯基苯酞、总阿魏酸分别可作为甘肃当归、四川当归、云南剑川当归的成分识别标志。逐步线性判别验证当归产地其中自身判别正确率为96.3%，交叉验证正确率为92.3%。结论 建立的HPLC指纹图谱结合含量测定、PCA、PLS-DA客观、全面、有效地对不同产区当归质量特征进行探究，确认各产地当归的标志性成分，为当归的产地溯源及质量控制提供科技支撑。]]> 2021/8/4 9:43:07 466true 目的 建立基于HPLC-UV技术的一测多评法（QAMS）同时测定尖叶假龙胆Gentianella acuta药材中雏菊叶龙胆酮、龙胆苦苷、芒果苷、当药醇苷、木犀草素和去甲基雏菊叶龙胆酮的含量。方法 采用HPLC-UV技术，以雏菊叶龙胆酮为内参物，分别测定其与龙胆苦苷、芒果苷、当药醇苷、木犀草素和去甲基雏菊叶龙胆酮的相对校正因子，并计算含量；通过外标法与QAMS法分别对6种成分含量进行比较，以检验QAMS法的适用性、准确性和可重复性。结果 QAMS法与外标法所测得的结果无显著性差异。结论 所建立的QAMS方法可满足尖叶假龙胆在缺乏对照品的情况下，完成尖叶假龙胆中多指标成分的同时测定，为尖叶假龙胆质量控制标准的建立提供依据。]]> 2021/8/4 9:43:07 465true 目的 建立桂花Osmanthus fragrans果实HPLC指纹图谱及9种化学成分的含量测定方法，为桂花果实的质量控制提供科学依据。方法 采用YMC-Pack ODS-A色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），以乙腈-水（含0.1%磷酸）溶液为流动相进行梯度洗脱，体积流量1.0 mL/min，柱温25℃，进样量10 μL，检测波长210 nm，对不同产地桂花果实样品进样分析；采用国家药典委员会“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”（2012版），建立桂花果实的指纹图谱，同时测定其中9种化学成分含量。结果 对不同产地20批桂花果实样品进行指纹图谱研究，共标定了24个峰，指认出其中9个色谱峰。含量测定结果表明，女贞苷G13、特女贞苷、新女贞苷及红景天苷为桂花果实中主要化学成分。经方法学考察，测定方法的精密度和重复性良好，样品在24 h内稳定；红景天苷、毛蕊花糖苷、新女贞苷、特女贞苷、异麦角甾苷、女贞苷G13、槲皮素、芹菜素、山柰酚在一定质量浓度范围内线性良好，加样回收率均在95%～105%。结论 建立的桂花果实HPLC指纹图谱及9种化学成分的含量分析方法稳定、可靠，可为桂花果实的质量控制及综合开发提供参考。]]> 2021/8/4 9:43:07 464true 目的 克隆天麻糖基转移酶基因（glycosyltransferase，GeGT1）的全长cDNA序列，进行序列分析和原核表达分析，并探究该基因在天麻不同器官中的表达规律。方法 在天麻转录组数据库中通过注释和比对，用Primer Premier 5.0软件设计基因特异性引物。通过反转录聚合酶链式扩增（reverse transcription-polymerase chain reaction，RT-PCR）方法从天麻块茎中克隆得到GeGT1全长cDNA序列，利用生物信息学软件预测基因编码蛋白的特征；利用ClustalW和MEGA 6.06软件构建GeGT1的系统进化树；构建原核表达载体pET-28a-GeGT1，转化至大肠杆菌Transetta（DE3）进行诱导表达；通过实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qRT-PCR）技术分析基因表达模式。结果 GeGT1基因开放阅读框（open reading frame，ORF）全长1503 bp，编码500个氨基酸，蛋白相对分子质量为55 494.33，理论等电点为5.51，为稳定的酸性蛋白。蛋白质二级结构由49%无规卷曲、28.2%α-螺旋、22.8%延伸链构成。GeGT1属于糖基转移酶GTB超家族，同时具有一个跨膜结构域，无信号肽，为非分泌蛋白。通过序列同源性分析，GeGT1与铁皮石斛具有较高的同源性。系统进化树分析证实了兰科植物糖基转移酶基因的同源性。SDS-PAGE结果显示，诱导表达蛋白为63 000，与预期蛋白大小一致。基因表达结果显示，GeGT1基因的表达水平在花中最高，其次是块茎、茎。结论 首次克隆并分析了GeGT1基因，建立了原核表达体系，为进一步研究天麻活性成分合成的分子机制奠定基础。]]> 2021/7/19 10:41:21 463true 目的 基于HPLC指纹图谱、多成分定量与化学模式识别相结合的方法，评价不同产地消瘤藤Pileostegia tomentella质量，为其进一步开发利用提供依据。方法 采用HPLC法，流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液进行梯度洗脱，检测波长为246、265、320 nm，对14批不同产地消瘤藤药材进行指纹图谱及5种有效成分含量测定研究，应用聚类分析与主成分分析等化学模式识别法对消瘤藤质量进行评价。结果 14批消瘤藤的指纹图谱相似度均在0.875以上，茵芋苷、紫丁香苷、当药苷、7-羟基香豆素和7-羟基-8-甲氧基香豆素质量分数分别为1.280 5～9.431 6、0.001 5～0.1558、0.089 8～1.863 1、0.328 9～3.382 6、0.073 9～1.112 8 mg/g；选取了12个色谱峰作为指纹图谱的共有峰，通过聚类分析可将14批消瘤藤分为3类，主成分分析与聚类分析结果基本一致。通过主成分分析，进一步评价不同产地间质量的差异，从而发现S1、S12、S14等地的质量较优。结论 广西不同产地消瘤藤存在一定质量差异。指纹图谱与含量测定相结合，应用化学模式识别法可全面评价消瘤藤质量。该法的建立为消瘤藤的质量控制及评价提供依据。]]> 2021/7/19 10:41:21 462true 目的 建立吴茱萸药材HPLC定量指纹图谱，为其基原鉴别及质量评价提供依据。方法 针对29批3种基原吴茱萸药材，建立吴茱萸HPLC定量指纹图谱，并通过HPLC-ESI-MS技术对指纹图谱中的色谱峰进行鉴定，采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》计算相似度，同时运用化学模式识别技术对3种基原吴茱萸药材进行区分，并对吴茱萸中指标性成分进行含量测定。结果 建立了吴茱萸药材的HPLC定量指纹图谱，标定13个共有峰，并通过液质联用进行了共有峰的鉴定。聚类分析和正交最小偏二乘判别分析实现了3种吴茱萸基原药材的鉴别。3种基原吴茱萸药材中吴茱萸碱、吴茱萸次碱、去氢吴茱萸碱和水仙苷4个指标性成分含量存在一定差异。结论 通过吴茱萸HPLC定量指纹图谱与化学模式识别技术相结合，可以实现对不同基原的吴茱萸药材的有效区分，为吴茱萸药材的质量控制提供参考依据。]]> 2021/7/19 10:41:21 461true 目的 建立巴戟天Morinda officinalis 6种寡糖类成分的含量测定方法，考察23批不同产地及种植年限的药材中寡糖类成分含量差异。方法 采用HPLC法进行含量分析，色谱柱为ZORBAX NH₂柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；以0.1%醋酸水（A）-乙腈（B）为流动相，梯度洗脱：0～35 min，70%～67% A；体积流量1.0 mL/min，柱温28 ℃；以蒸发光散射检测器（ELSD）检测，检测条件：漂移管温度80 ℃，雾化管温度40 ℃，氮气体积流量1.60 mL/min。结果 不同产地及种植年限的巴戟天中蔗糖、蔗果三糖、耐斯糖、蔗果五糖含量以广东产地含量最高，蔗果六糖和蔗果七糖以福建含量最高，而总含量以3年生广东高要含量最高，为（394.68±19.14）mg/g，其次是6年生福建南靖为（342.31±43.88）mg/g，且寡糖含量具有随种植时间的增加而降低的趋势。结论 不同产地及种植年限的巴戟天药材寡糖含量差异较大，可为巴戟天巴戟天药材的质量控制提供参考依据。]]> 2021/7/19 10:41:21 460true 目的 对比不同基原忍冬属药材的差异性。方法 UPLC建立忍冬属药材指纹图谱，采用Waters BEH Phenyl（100 mm×2.1 mm，1.7 mm）色谱柱，以乙腈-0.1%磷酸为流动相，梯度洗脱，体积流量0.3 mL/min，柱温30 ℃，检测波长240 nm，建立47批次不同基原忍冬属药材的指纹图谱，同时对10个指标成分进行同法测定，并采用主成分分析（principal component analysis，PCA）和正交偏最小二乘法-判别分析（partial least squares discrimination analysis，OPLS-DA）进行多变量统计分析。结果 建立了忍冬属药材UPLC指纹图谱，其中忍冬确定15个共有峰、灰毡毛忍冬确定8个共有峰、黄褐毛忍冬确定9个共有峰，淡红忍冬确定11个共有峰，聚类分析可将47个样本按基原聚为4类；通过主成分分析可将不同基原的忍冬属药材进行区别；OPLS-DA分析可用于忍冬属的基原识别，并筛选出5个差异性成分。结论 建立的方法简便、快捷、可靠，为不同基原忍冬属药材的质量控制和基原鉴别提供可靠的分析方法。]]> 2021/7/19 10:41:21 459true 目的 获取毛重楼Paris mairei叶绿体基因组信息特征并对其系统位置进行研究。方法 采用Illumination测序技术对毛重楼叶绿体基因组进行测序，对其进行组装、注释和特征分析，并构建最大似然（maximum likelihood，ML）系统发育树。结果 毛重楼叶绿体基因组大小为163 918 bp，总GC含量为37.05%，大单拷贝区（large single-copy，LSC）、小单拷贝区（small single-copy region，SSC）分别为84 173、13 054 bp，反向互补重复区（inverted repeats，IR）大小为33 296 bp，共编码113个基因，包括79个蛋白质编码基因，30个tRNA基因和4个rRNA基因。在系统进化树中，重楼属Paris L. 与藜芦科（Melanthiaceae Batsch ex Borkh. ）关系较近，与百合科（Liliaceae Juss. ）关系较远。结论 LSC区和SSC区序列变异高于IR区；相较于重楼属，毛重楼与蚤休组的亲缘关系最近，应将毛重楼归属为蚤休组；相较于百合科，毛重楼与藜芦科藜芦属亲缘关系更近，应将蚤休组从百合科中独立，归属为藜芦科。]]> 2021/7/5 10:19:58 458true 目的 通过分析多花黄精Polygonatum cyrtonema内生菌菌群结构多样性及其与主要有效成分含量之间的相关性，探讨多花黄精内生菌对其药材品质的影响。方法 收集不同产地多花黄精样品，采用高通量测序对内生菌群落结构进行分析，并测定多糖、总皂苷等有效成分含量，通过双因素关联分析探究菌群多样性及其与有效成分之间的关系。结果 5个产地15组多花黄精样品共得到1 183 635条有效序列，划分为59 474个操作分类单元（operational taxonomic units，OTU），其中细菌分19门，47纲，120目，201科，419属；属水平上，泛菌属为优势菌群，最大占比达到61.1%。真菌分7门，27纲，70目，132科，187属；属水平上，子囊菌门一未鉴定属、赤壳属为优势菌群，其中赤壳属的最大占比达到10.7%。在丰度前10的内生真菌和细菌中，共有10个菌属与有效物质含量呈显著相关，其中真菌有2个菌属呈负相关，1个菌属呈正相关；细菌2个菌属呈负相关，5个菌属呈正相关。结论 通过分析不同产地多花黄精内生菌群落结构及其多样性，掌握了多花黄精内生菌资源状况，分析发现内生菌与有效成分之间存在关联，这为深入探讨多花黄精内生菌与其品质的相关性，进而采用生物施肥策略提升品质等提供了科学依据。]]> 2021/7/5 10:19:58 457true 目的 研究不同海拔高度与蒙古黄芪Astragalus membranaceus var. mongholicus主要药效成分含量及其关键酶基因表达量之间的关系。方法 采用HPLC法检测黄芪根中黄芪甲苷与毛蕊异黄酮葡萄糖苷的含量，采用实时荧光定量PCR法检测黄芪甲苷生物合成过程中关键酶基因乙酰辅酶A乙酰基转移酶[AACT， acetoacetyl-co zyme A （CoA） thiolase]、3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A合酶（HMG-CoA synthase，HMGS）、3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶[3-hydroxy-3-methylglutaryl coenzyme A （HMG-CoA） reductase，HMGR]、异戊二烯焦磷酸异构酶（iso-pentenyl diphosphate isomerase，IDI）、法尼基焦磷酸合酶（farnesyl diphosphate synthase，FPS）、鲨烯合酶（squalene synthase，SS）、鲨烯环氧酶（squalene epoxidase，SE）、环阿尔庭烷合酶（cycloartenol synthase，CAS）基因的表达量。结果 4个样地中样地HQ-2（内蒙呼和浩特可可以力更镇）中黄芪甲苷含量、毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量及总皂苷含量普遍高于其他样地；相关性分析表明，海拔高度对黄芪总皂苷合成的影响较大，IDI、SE和SS基因在黄芪总皂苷的合成过程中起主要作用，海拔高度有利于IDI、SE和SS基因的表达，海拔高度对黄芪皂苷合成途径中关键酶基因具有一定的调控作用。结论 在处于海拔1730 m左右的地区种植蒙古黄芪有利于其药效成分的积累。]]> 2021/7/5 10:19:58 456true 目的 以射干Belamcanda chinensis为材料，在测序、组装获得叶绿体基因组的基础上，明确其结构、序列特征及系统发育关系。方法 利用PE150双末端策略进行建库测序，用NOVOPlasty组装完整的叶绿体基因组，经PCR验证边界，借助生物信息学工具进行序列分析和系统发育研究。结果 射干的叶绿体基因组全长为153 816 bp，大单拷贝区、反向重复区和小单拷贝区的长度分别为83 143、26 214、18 245 bp。射干叶绿体基因组共有133个基因，编码基因、tRNA和rRNA的数量分别为92、38和8；ycf1有2个拷贝，其中一个为假基因。系统发育分析结果表明，7种植物叶绿体基因组在发育树上可分为4组，射干与同为鸢尾科的溪荪聚为一组，支持率达100%。结论 射干叶绿体基因组的组装、序列分析和系统发育分析，为该药用植物的遗传结构和遗传多样性研究奠定了基础。]]> 2021/7/5 10:19:58 455true 目的 考察不同加工方法对延胡索Corydalis yanhusuo药材、饮片长期贮存中成分稳定性的影响，进而选择合理的加工方法，确保药材质量。方法 将新鲜延胡索分为大个延胡索（直径>1 cm）和小个延胡索（直径<1 cm），分别进行个子货烘干、晒干，切片烘干、切片晒干，水煮、水蒸、醋煮及采用最优工艺醋蒸。通过超高效液相色谱（UPLC）同时测定四氢非洲防己碱、原阿片碱、四氢黄连碱、非洲防己碱、延胡索乙素、盐酸小檗碱、盐酸巴马汀、去氢紫堇碱8种生物碱含量，结合化学计量学评价不同加工方法对延胡索成分稳定性影响。结果 延胡索药材及饮片经过18个月贮存后，所测指标性成分延胡索乙素均符合《中国药典》2015年版规定。烘干、晒干法处理药材、饮片成分在储藏过程中下降率大，稳定性差。醋制和蒸煮处理有利于增加延胡索药材贮藏的稳定性。醋蒸法样品稳定性好，干燥时间短、效率高，有利于长期贮藏。结论 制备延胡索药材时宜选用水蒸后烘干，制备醋延胡索饮片时选用鲜品切片后醋蒸法。]]> 2021/7/5 10:19:59 454true 目的 明确豆蔻属药用植物叶绿体基因组蛋白编码基因密码子使用模式及影响因素。方法 以草果Amomum tsao-ko、阳春砂Amomum villosum、白豆蔻Amomum kravanh和爪哇白豆蔻Amomum compactum叶绿体基因组50个共有蛋白编码基因为材料，利用CodonW 1.4.2软件、CUSP在线程序和Excel软件等分析基因密码子使用偏性参数和核苷酸组成。结果 4个豆蔻属物种叶绿体基因组具有相似的密码子使用模式，密码子第3位碱基GC含量为37.22%～37.31%，偏向使用NNA和NNT型密码子；4个物种的有效密码子数值（ENC）均在35以上，表明豆蔻属叶绿体基因组密码子偏性较弱。综合中性分析、有效密码子数（ENC-plot）分析、奇偶偏好性（PR2-plot）分析和对应性分析的结果显示豆蔻属叶绿体基因组密码子偏性主要受选择影响，同时突变等其它因素也对密码子的偏性产生一定的作用。在草果、阳春砂、白豆蔻和爪哇白豆蔻中分别确定了18、16、16、18个最优密码子，其中共有最优密码子13个。结论 豆蔻属植物叶绿体基因组密码子第3位碱基偏向使用A/T结尾，密码子偏性受选择影响最大，同时还受到诸如突变等其它因素的影响。]]> 2021/6/23 9:55:03 453true 目的 克隆出金线莲Anoectochilus roxburghii尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶（UDP-Glucose pyrophoshorglase，UGPase）基因全长，并对其表达量及酶活性与多糖积累量之间的相关性进行分析，以研究UGPase基因在金线莲多糖合成代谢途径中的调控作用。方法 利用实时荧光定量PCR（Quantitative Real-time PCR，qRT-PCR）技术和RACE（rapid-amplification of cDNA ends）技术克隆金线莲中UGPase基因序列；以金线莲尖叶、无纹等7个品种组培期及种植期茎段部位为材料，采用qRT-PCR、ELISA试剂盒法及苯酚-硫酸法分别测定UGPase基因表达量、酶活和多糖含量，并对其进行相关性分析。结果 克隆得到的序列全长1786 bp。开放阅读框为1425 bp，编码475个氨基酸。7个不同品种金线莲中UGPase基因表达量、酶活与多糖含量具有极显著正相关（相关系数分别为0.823、0.785）。结论 成功克隆出金线莲UGPase全长基因，初步证明UGPase基因是参与金线莲多糖合成代谢的关键基因之一。]]> 2021/6/23 9:55:03 452true 目的 基于HPLC指纹图谱、化学模式识别以及多成分含量测定相结合的方法，评价不同产区艾纳香药材的质量。方法 建立4个不同产区34批艾纳香HPLC指纹图谱，确定共有峰，根据前期提取分离出的艾纳香单体成分指认了其中5个色谱峰并测定样品中含量，结合相似度分析、聚类分析（hierarchicalcluster analysis，HCA）、主成分分析（principal component analysis，PCA）和正交偏最小二乘法-判别分析（partial least squares discrimination analysis，OPLS-DA）等化学模式识别方法以及药材综合质量评分寻找不同产区艾纳香药材中的差异。结果 化学指纹图谱共标定15个共有峰，各批艾纳香样品相似度在0.433～0.977，4个产区艾纳香样品在化学组分和含量上存在差异。4个产区的艾纳香药材基本上可以分为4类，每个产区大部分样品各自分布于不同的象限，不同产区之间有交叉样品，样品之间的离散程度较大，每个产区的样品本身质量就存在较大差异，尤其是海南和广西样品。通过变量权重重要性排序（variable importance in projection，VIP）值图确定了5个产区差异性指标成分，综合质量评分中3份海南琼中产样品评分排在前3位。测定5个黄酮类成分含量中3，3'，5，7-四羟基-4'-甲氧基二氢黄酮、圣草酚、3，3'，5-三羟基-4'，7-二甲氧基二氢黄酮和sakuranrtin均以贵州产整体含量较高，艾纳香素以海南产整体含量较高。结论 结合HPLC指纹图谱、HCA、PCA及多指标定性定量等分析方法可以更全面地评价艾纳香药材质量，为艾纳香药材质量控制和优良种质资源选育提供参考依据。]]> 2021/6/23 9:55:03 451true 目的 建立熵权和灰色关联度模型，评价安徽省不同产地黄精Polygonati Rhizoma的质量。方法 测定20批不同来源的水分、总灰分、酸不溶灰分、浸出物、无水葡萄糖含量、总皂苷含量、薯蓣皂苷元含量7个主要指标的含量，采用灰色关联度法，构建安徽省黄精药材质量评价模型。结果 20批黄精药材相对关联度介于0.464 8～0.657 7，相对关联度>0.55的样品有11批，总体上祁门县的黄精质量评价度最高。祁门县、贵池区、青阳县的样品排名靠前，品质较优；相对关联度<0.55的样本集中在石台、岳西、金寨等地，样品的排名相对靠后，品质较差。结论 基于多指标成分构建的熵权和灰色关联度模型评价安徽省不同产地黄精药材质量，方法简单客观，为黄精优质种源的筛选提供了参考依据。]]> 2021/6/23 9:55:03 450true 目的 建立基于UPLC-Q-Exactive-MS/MS法初步筛选彝药材西南委陵菜Potentilla fulgens质量标志物、指纹图谱结合多元统计分析综合评价其药材质量的研究方法，为西南委陵菜质量评价和质量控制提供依据。方法 采用UPLC-Q-Exactive-MS/MS法定性分析西南委陵菜化学成分组成，筛选质量标志物；HPLC法建立27批次西南委陵菜药材指纹图谱，定量分析质量标志物的含量；采用主成分分析和TOPSIS分析综合评价西南委陵菜药材质量。结果UPLC-Q-Exactive-MS/MS法从西南委陵菜中指认了48个化合物，包括原花青素类34个、黄酮类12个、酚类1个、鞣质类1个，筛选出含量较高、可准确测定的表儿茶素作为质量标志物，西南委陵菜指纹图谱中确定了10个共有峰，含量测定结果表明不同产地药材中表儿茶素的含量有较大差异，表儿茶素含量与海拔高度呈正相关，综合主成分分析结合TOPSIS分析，结果表明样品S11的质量最佳，S9的质量最次。结论 指纹图谱结合多元统计分析的药材质量综合评价方法，可较客观评价西南委陵菜药材质量，为其药材的质量控制提供科学依据。]]> 2021/6/23 9:55:03 449true 目的 完成红花Carthamus tinctorius PAL基因家族的生物信息学分析，克隆1条红花PAL4基因编码区序列，通过农杆菌介导的方法，实现CtPAL4在红花悬浮细胞中的过表达。方法 在红花基因组测序基础上，对红花PAL家族进行全基因组分析，利用荧光定量PCR （RT-PCR）方法克隆1条红花PAL4编码区序列，并进行生物信息学分析，利用clustalW1.83软件构建系统进化树，在CtPAL4基因序列2端引入酶切位点Bgl II和BstE II，构建含有35 S启动子的植物超表达载体pCAMBIA3301-CtPAL4，并在红花悬浮细胞中进行超表达。结果 红花基因组中注释到6个PAL基因，分析显示5个基因具有典型的苯丙氨酸解氨酶的功能结构域及活性位点，并进行启动子和进化分析。CtPAL4基因编码707个氨基酸，相对分子质量为76 820，具有典型的苯丙氨酸解氨酶（PAL）基因的功能结构域及活性位点，编码蛋白的三维结构与PAL的X射线蛋白质晶体结构类似。系统进化分析表明，CtPAL4基因编码的蛋白与拟南芥的亲缘关系最近。GUS染色结果证实，成功建立红花悬浮细胞遗传转化体系，并初步实现了CtPAL4基因在红花悬浮细胞中的过表达。结论 成功克隆1条红花PAL4编码区基因CtPAL4，并构建了植物表达载体pCAMBIA3301-CtPAL4，初步在红花悬浮细胞中实现了超表达，为研究CtPAL4基因在红花黄酮代谢途径的功能奠定基础。]]> 2021/6/7 12:50:59 448true 目的 获得东紫苏Elsholtzia bodinieri转录组数据信息，了解东紫苏挥发油单萜生物合成途径。方法 采用Illumina Hiseq 2000高通量测序获得东紫苏的转录组数据，通过对数据进行组装、拼接及注释，挖掘其单萜类化合物代谢途径相关基因。结果 东紫苏2个样品材料测序后共获得13.67 Gb数据，91 169 356条高质量序列，利用Trinity组装获得93 327条unigenes，平均长度1756 bp。将组装所得到的unigenes分别与NCBI官方的蛋白序列数据库（RefSeq non-redundant proteins，NR）、基因本体论数据库（gene ontology，GO）、真核生物蛋白质同源簇数据库（clusters of orthologous groups for eukaryotic complete genomes，KOG）、京都基因与基因组百科全书（Kyoto encyclopedia of genes and genomes，KEGG）等数据库进行BLAST比对分析。通过KEGG代谢通路分析，结果显示有2个单萜代谢相关途径，为萜类骨架生物合成（编号为ko00900）和单萜类生物合成（编号为ko00902），相关unigenes分别有11条和30条；进行实时荧光定量PCR （reverse transcription PCR，RT-PCR）和测序，成功验证6个单萜合成相关候选基因全长unigenes。结论 首次对东紫苏进行高通量转录组测序分析，获得了单萜生物合成的关键酶基因，为后续基因功能的研究奠定基础。]]> 2021/6/7 12:50:59 447true 目的 从青天葵Nervilia fordii克隆SKP1的同源基因NSKs，并对编码的蛋白进行生物信息学分析及原核表达，为了深入研究青天葵中SCF复合体的功能奠定基础。方法 从青天葵转录组中筛选得到5条SKP1同源基因序列（NSK2、NSK3、NSK5、NSK7、NSK11），构建pGEX-4T-NSKs原核表达载体于大肠杆菌Rosetta （DE3）中诱导表达GST-NSKs融合蛋白并进行纯化。结果 NSK2、NSK3、NSK5、NSK7、NSK11的开放阅读框（ORF）分别为495、483、489、498和486 bp，编码164、160、162、165和161个氨基酸，蛋白相似性达到73.65%，均属于SKP1蛋白家族，具F-box和Cullin蛋白结合位点。亚细胞定位预测NSK2、NSK3和NSK5定位于细胞核，而NSK7和NSK11定位于细胞质和细胞核。系统进化树结果表明，NSK2、NSK3和NSK5聚为一簇，与小麦和玉米等的同源性较高；NSK7和NSK11聚为一簇，与多头绒泡菌的同源性较高。通过构建原核表达载体，确定了在大肠杆菌Rosetta （DE3）中的有利诱导条件，成功诱导表达并纯化得到5个GST-NSKs重组蛋白。结论 成功克隆5个SKP1同源基因NSKs，获得NSKs蛋白，为深入研究青天葵中SCF复合体的功能提供了一定的基础。]]> 2021/6/7 12:50:59 446true 目的 研究人参属植物人参Panax ginseng、三七P.notoginseng和西洋参P.quinquefolium高温蒸制前后主要人参皂苷的含量变化，并测定高温蒸制前后样品对4株肿瘤癌细胞的细胞毒活性。方法 采用HPLC建立了测定22种皂苷含量的分析方法，测定这些皂苷在人参属植物及其高温蒸制品中的含量。用MTT法测定人参属植物及其高温蒸制品对4株人类癌细胞（人类骨髓癌HL-60细胞、肝癌SMMC-7721细胞、肺癌A-549细胞、乳腺癌SK-BR-3细胞）的细胞毒活性。结果 从人参、三七和西洋参及高温蒸制后的样品中鉴定出22个皂苷，包括人参皂苷Rg₁、Re、Rb₁、Rc、Rb₂、Rd、Rk₃、Rh₄、Rk₁、Rg₅、Rb₃、Rh₃、Rk₂，20（S）-人参皂苷Rh₁、20（R）-人参皂苷Rh₁、三七皂苷Fc、三七皂苷R₁、绞股蓝皂苷IX、20（S/R）-三七皂苷Ft₁、20（S/R）-人参皂苷Rg₃、人参皂苷Rs₃、人参皂苷Rh₂。人参皂苷Rg₁、Re、Rb₁、Rc、Rb₂和Rd为人参的主要成分；人参皂苷Rg₁、Re、Rb₁和Rd为西洋参的主要成分；人参皂苷Rg₁、Re、Rb₁、Rd和三七皂苷R₁为三七的主要成分，高温蒸制后这3种植物的主要成分全部转化为人参皂苷Rk₃、Rh₄、Rk₁、Rg₅和20（S/R）-人参皂苷Rg₃，在高温蒸制后的三七中还检测到20（S）-人参皂苷Rh₁和20（R）-人参皂苷Rh₁。三七皂苷Fc、人参皂苷Rb₃和绞股蓝皂苷IX为三七茎叶的主要成分，高温蒸制后转化为另外8个主要成分20（S/R）-三七皂苷Ft₁，20（S/R）-人参皂苷Rg₃、Rs₃、Rk₁、Rg₅，20（S/R）-人参皂苷Rh₂、Rh₃和Rk₂。细胞毒活性结果显示，高温蒸制三七的细胞毒活性比高温蒸制人参和高温蒸制西洋参强，高温蒸制三七的细胞毒活性比三七的活性强，说明高温蒸制后三七的细胞毒活性增强。结论 人参、西洋参和三七经过高温蒸制后原来的主要成分基本消失，随之转化为其他主要成分，高温蒸制三七的细胞毒活性最强。]]> 2021/6/7 12:50:59 445true 目的 建立一种基于顶空-固相微萃取-气相色谱-三重四极杆质谱联用技术的诃子药材中挥发性成分快速筛查与定量分析方法，并用于评价不同产地的诃子质量差异性。方法 采用InertCap Pure-WAX毛细管柱（30 m×0.25 mm×0.25 μm）为色谱柱；进样口温度为250℃，分流比为5：1，高压进样压力为83.5 kPa；载气为高纯氦气，载气控制方式为恒压力模式；色谱柱流量为1.43 mL/min，线速度为43.3 cm/s，吹扫流量为3.0 mL/min；程序升温：初始温度为50℃，保持5 min，以10℃/min升温至250℃，保持10 min；柱平衡时间为2.0 min。离子源为电子轰击源（EI），检测器电压0.3 kV，离子源温度为200℃，质谱传输接口温度为250℃，碰撞气为氩气；质谱监测模式为多反应监测。结果 分析结果显示，在诃子药材中共筛查出86种挥发性化合物，按化合物结构可分为酯、酮、醛、烯、酚、酸、醇、苯、醚、吡嗪、酰胺11类。测定结果表明，不同产地的诃子在挥发性成分在种类上没有差异，但是不同产地的诃子中部分挥发性成分的含量存在较大差异。主成分分析结果显示，以诃子中86种挥发性成分的含量为降维指标分析，能在一定程度上区分不同产地的诃子，但区分不明显，这初步提示不同产地的诃子中挥发性成分的累积具有一定地域特征。结论 建立的诃子中86种挥发性成分的快速筛查和定量分析方法，具有高通量、准确和简便的特点，对其它中药材的挥发性成分分析具有参考价值。]]> 2021/6/7 12:50:59 444true 目的 对广藿香青枯菌菌株PRS-84的致病相关基因RsgidA进行克隆及生物信息学分析。方法 以广藿香青枯病菌Tn5转座子插入的低致病力突变株PRS-84-4-7为材料，对广藿香进行致病性实验；以Tn5转座子序列为基础，对突变株PRS-84-4-7的基因组进行反向PCR扩增，克隆转座子插入位点的侧翼序列；根据序列的同源基因设计特异性引物，对野生菌株PRS-84的基因组进行PCR扩增，对克隆获得的目标基因序列进行生物信息学分析。结果 低致病力突变株PRS-84-4-7对广藿香的致病性不明显。成功获得了低致病力突变株转座子插入位点的侧翼序列，该序列与gidA基因的相似度最高，将插入位点基因命名为广藿香青枯病菌RsgidA基因。从野生菌株PRS-84中克隆了致病相关基因RsgidA，全长1881 bp，编码626个氨基酸。系统进化分析显示，RsgidA基因编码蛋白与植物病原中丁香假单胞菌Pseudomonas syringae的GidA蛋白亲缘关系较近。结论 从广藿香青枯病菌菌株PRS-84中成功克隆了致病相关基因RsgidA，为了解青枯病菌的致病机制、研究新的防治广藿香青枯病的方法奠定了基础。]]> 2021/5/27 13:18:09 443true 目的 筛选得到能够防治白术Atractylodes macrocephala根腐病的内生细菌。方法 采用传统分离法从白术健康组织中分离内生细菌，以白术根腐病菌尖孢镰刀菌Fusarium oxysporum，茄病镰刀菌F.solani和半裸镰刀菌F.incarnatum为指示菌，采用平板划线法和滤纸片法筛选拮抗细菌；制备拮抗菌菌悬液，采用灌根法进行盆栽白术根腐病防效试验；通过细菌形态特征、生理生化检测及16S rRNA技术对拮抗细菌进行菌种鉴定。结果 从白术组织中共分离得到246株内生细菌，平板对峙筛选得到抗根腐内生细菌18株，其中AM14对3种病原菌生长均具有显著抑制作用（P<0.05），平均抑菌率达80.68%；盆栽试验进一步表明AM14对白术根腐病具有较好的防治效果，防治效果达70.49%；经鉴定AM14为芽孢杆菌属细菌Bacillus sp.。结论 内生细菌AM14具有良好的白术根腐病生防潜力。]]> 2021/5/27 13:18:09 442true 目的 采用HPLC法建立蜜炙黄芪饮片指纹图谱，并测定异黄酮类成分和皂苷类成分含量，进行聚类分析与主成分分析（PCA-主成分分析），比较炙黄芪饮片中4种异黄酮成分（毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮和芒柄花素）和4种皂苷类成分（黄芪甲苷、黄芪皂苷I、黄芪皂苷II和黄芪皂苷III）的差异。方法 采用HPLC法对15批甘肃不同产地炙黄芪饮片8种成分进行测定，运用国家药典委员会"中药色谱指纹图谱相似度评价软件（2012版）"进行评价，并结合PCA和正交偏最小二乘判别分析（OPLS-DA-正交偏最小二乘判别分析）等化学计量学方法对15批不同产地炙黄芪饮片进行区分与比较。结果 建立了炙黄芪饮片异黄酮类成分和皂苷类成分HPLC指纹图谱，相似度均达0.90以上，确定了8个共有峰（毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素、黄芪甲苷、黄芪皂苷I、黄芪皂苷II和黄芪皂苷III）构成炙黄芪饮片的特征峰，毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、黄芪皂苷I和黄芪皂苷III是差异性化合物，可作为鉴别和区分炙黄芪饮片的质量控制指标。结论 该法所建立的炙黄芪异黄酮成分和皂苷类成分指纹图谱特征性强、方法简便，结合8种成分含量测定可更好控制其质量，对炙黄芪饮片的鉴定及质量控制具有指导意义和参考价值。]]> 2021/5/27 13:18:09 441true 目的 研究氮、磷、钾肥配施对七叶一枝花Paris polyphylla var.chinensis中皂苷类成分含量的影响，以优化七叶一枝花最佳氮、磷、钾配施方案，为其合理施肥提供科学依据。方法 以3因素5水平二次回归通用旋转组合设计安排田间试验，采用UPLC-ELSD法测定七叶一枝花中7种皂苷含量，通过方差分析建立回归方程（经F检验），利用模型分析氮、磷、钾配施对各皂苷含量的影响，使用统计频数法筛选最优施肥方案。结果 贡献率分析表明，氮肥对重楼皂苷II、V的贡献率最大，磷肥对重楼皂苷H、纤细薯蓣皂苷的贡献率最大，钾肥对重楼皂苷I、VI、VII的贡献率最大。单因素分析表明，氮、磷、钾对重楼皂苷VII、VI含量有极显著影响（P<0.01）；互作效应分析表明，不同浓度的氮肥、磷肥和钾肥的协同作用显著提高重楼皂苷VI的含量；根据回归模型分析最佳施肥范围，取交集得氮、磷、钾肥最优施肥范围分别为516.39~557.19、2771.70~2848.20、461.61~502.65 kg/hm²。结论 建立了重楼皂苷与氮、磷、钾肥配施的相关性回归方程模型，有利于七叶一枝花中皂苷类成分含量的提高，为合理施肥提供科学性依据。]]> 2021/5/27 13:18:09 440true 目的 研究不同质量浓度的生长素吲哚-3乙酸（indole-3-acetic acid，IAA）及施加方式对丹参Salvia miltiorrhiza根系形态和有效成分积累的影响。方法 IAA设置0、5、10、20、30 mg/L 5个质量浓度，分别采用叶面喷施和根部浇灌的方法处理丹参植株，测定各处理组中丹参根系形态学指标及酚酸类成分和丹参酮类成分的含量。结果 IAA处理总体上促进了丹参侧根的发育和丹参酮类成分的积累。2种施加方式相比，叶面喷施更有利于酚酸类成分含量的提高。结论 外源施加IAA对丹参根系发育和有效成分的合成积累均具有调控作用，进一步深入探究IAA对3个生理过程的作用机制具有重要的理论和实践意义。]]> 2021/5/27 13:18:10 439true 目的 采用一测多评（QAMS）法同时测定黄芪中6个异黄酮及苷类成分的含量，并验证方法在黄芪质量评价中应用的可行性与适用性。方法 采用HPLC-UV法建立丙二酰毛蕊异黄酮苷（CYM）、芒柄花苷（FMG）、丙二酰芒柄花苷（FMM）、毛蕊异黄酮（CY）及芒柄花素（FM）与内参物毛蕊异黄酮7-O-β-D糖苷（CYG）的相对校正因子（f_s/i），并在不同色谱仪和色谱柱上考察各成分相对校正因子的稳定性和耐用性，比较QAMS法和外标法测定结果的差异。结果 在优化色谱条件下，确立的f_s/i分别为f_CYM/CYG=0.96、f_FMG/CYG=0.84、f_CY/CYG=0.68、f_FMM/CYG=0.86、f_FM/CYG=0.53，f_s/i在3种HPLC色谱仪/3个品牌C₁₈柱、不同体积流量（0.9、1.0、1.1 mL/min）和不同柱温（25、30、35℃）下的RSD分别为0.88%~1.63%、0.23%~0.73%、0.15%~0.46%，表明相对校正因子的耐用性良好。分别采用外标法（ESM）和QAMS法对16批黄芪药材和3批饮片中6个异黄酮及苷类成分进行含量测定，2种方法所得结果的相对误差均<5.0%，无显著性差异，表明建立的QAMS法的准确度良好。结论 建立同时测定黄芪中6个异黄酮及苷类化学成分的QAMS方法准确可靠，能为更加全面地评价黄芪药材及饮片的质量提供参考。]]> 2021/5/27 13:18:10 438true 目的 以药用植物萹蓄Polygonum aviculare为材料，利用高通量技术测定基因组DNA序列，对叶绿体基因组进行组装和序列分析，为进一步开展药用植物萹蓄的群体遗传学和遗传多样性研究奠定基础。方法 利用华大MGISEQ-2000PE150测序平台，双末端测序策略对其全基因组DNA建库测序，测定萹蓄的基因组DNA序列，用NOVO Plasty组装叶绿体基因组，采用最大似然法（maximum likelihood，ML）构建系统进化树。结果 萹蓄叶绿体基因组全长为163 461 bp，GC值37.5%，具1个典型的四分区域结构，包括1个大单拷贝区（large single copy region，LSC）、1对反向重复区（inverted repeats，IR）和1个短单拷贝区（small single copy，SSC），序列长度分别为88 023、31 066、13 306 bp。萹蓄的叶绿体基因组共有130个基因，其中编码蛋白基因、rRNA基因与tRNA基因的数量分别为83、8、37个。系统进化分析表明，萹蓄与木蓼属的额河木蓼构成一单系分支，具有100%支持率。结论 萹蓄隶属于蓼科的蓼属，与木蓼属的额河木蓼亲缘关系较近。萹蓄叶绿体基因组的组装、序列特征、间隔区的筛选及系统进化分析为后续开展群体遗传学和遗传多样性研究奠定基础。]]> 2022/5/6 9:19:19 437true 目的 通过人参bZIP基因家族生物信息学分析，为人参功能基因开发利用提供理论依据。方法 运用PlantTFDB数据库预测人参基因组中bZIP基因；通过ExPASy网站得到人参bZIP基因家族信息和特征；使用MEME网站对PgbZIP基因家族保守基因序列进行分析；运用MEGA软件建立PgbZIP基因家族系统进化关系；利用TBtools软件进行PgbZIP表达分析。结果 人参基因组中含有157个bZIP基因家族成员，其中152个定位在细胞核，其余5个分别定位在叶绿体和内质网，相对分子质量在14 009.93～83 440.38，等电点在4.53～10.05，氨基酸数目在120～760 aa，除PgbZIP157以外，均为亲水蛋白。PgbZIP131在干旱胁迫下的表达量为83.47；PgbZIP99在根和盐胁迫条件下表达量均最高，分别为119.82和117.86；PgbZIP117在叶中表达量为48.54；花中PgbZIP106表达量最高为79.55；成熟果实中表达量最高是PgbZIP118，为119.32；PgbZIP101在未成熟果实中的表达量最高，且为65.32。结论 推测PgbZIP99与同源基因AtbZIP11功能相似，可以调控根的分生组织活性；PgbZIP131在干旱胁迫条件下表达量最高，推测PgbZIP131对干旱胁迫有重要调控作用；A亚族成员ABF2/AREB1（AtbZIP36）、ABF3（AtbZIP37）、ABF4/AREB2（AtbZIP38）参与干旱胁迫和盐胁迫调控，推测与A亚族成员具有同源关系的PgbZIP74、PgbZIP132、PgbZIP122、PgbZIP112在干旱胁迫和盐胁迫条件下具有相似调控作用。]]> 2022/5/6 9:19:19 436true 目的 使通过分子标记手段鉴定栀子Gardenia jasminoides品种成为现实，满足苗期鉴别栀子品种资源的需要。方法 采用14对多态性较好的转录组微卫星（EST-SSR）引物对栀子及10个品种进行扩增检测，分析其遗传多样性和遗传距离等参数，并进行系统聚类。结果 14对EST-SSR引物共检测到62个等位基因，平均每个位点扩增出4.4条，栀子品种Nei多样性指数（H）和Shannon指数（I）分别为0.653 3和1.226 8，表现出较高的遗传多样性水平。同一品种的不同样品能较好地聚集在一起，但品种之间并未完全按形态学性状聚类分支。构建的指纹图谱通过引物及引物组合能较好地将栀子品种进行区分。结论 利用14对EST-SSR引物成功地构建了10个栀子品种的指纹图谱，研究结果可为栀子品种鉴定、亲缘关系及品种起源提供科学依据。]]> 2022/5/6 9:19:19 435true 目的 采用多指标结合化学计量学的方法综合分析龙葵Solanum nigrum果质量及关键指标，为其质量评价提供科学依据。方法 采用HPLC法建立龙葵果特征指纹图谱及澳洲茄碱、澳洲茄边碱含量测定方法，并测定浸出物含量，使用SAS 14.0、SIMCA14.1软件对上述指标进行聚类分析（hierarchical clustering analysis，HCA）、主成分分析（principal component analysis，PCA）及偏最小二乘判别分析（discriminant analysis of partial least squares analysis，PLS-DA），通过对吉林产地25批不同产区、不同采收期药材的分析，综合评价龙葵果质量及标志性成分。结果 建立的特征指纹图谱及澳洲茄碱、澳洲茄边碱含量测定方法稳定性较好。HCA分析可将25批样品聚为2大类，分类主要与产区有关，I类药材为铁东区及梨树县的孤家子、榆树台产区；II类药材为梨树县的杏山、北夏家、泉眼沟、獾子洞产区。用3个主成分对龙葵果药材进行综合评价，结果表明I类药材综合得分及排名较高，质量较优。根据PLS-DA分析，造成两类药材质量差异的指标为醇溶性浸出物含量及指纹图谱相似度。色谱峰2、3（澳洲茄碱）、4（澳洲茄边碱）、14、15（薯蓣皂苷元）、16所代表的成分是2类龙葵果药材质量差异的标志性物质。结论 建立的龙葵果质量综合评价方法操作简便、重复性好、稳定可靠，可为龙葵果质量评价提供基础。]]> 2022/5/6 9:19:19 434true 目的 建立测定兔耳草类药材主要有效成分苯丙素苷类（毛蕊花糖苷、松果菊苷、大车前苷及鞭打绣球苷B）及环烯醚萜苷类（10-O-trans-p-methoxycinnamoyl-catalpol及10-O-[(E)-3,4-dimethoxycinnamoyl]-catalpol）的HPLC-PDA含量测定方法，并比较不同基原兔耳草的含量差异，为其质量控制方法及临床有效性提供依据。方法 采用资生堂SPOLAR C₁₈（250 mm×4.6 mm，5µm）；流动相为乙腈-0.4%甲酸溶液，梯度洗脱；体积流量1.0 mL/min；检测波长为325 nm；柱温为30 ℃；进样量为10 μL。依据测定结果使用聚类分析法和偏最小二乘法判别分析（orthogonal partial least squares discrimination analysis，OPLS-DA）法进行分析。结果 在此条件下，34批全缘兔耳草Lagotis integra、21批短筒兔耳草L. brevituba、10批圆穗兔耳草L. ramalana、6批革叶兔耳草L. alutacea、5批短穗兔耳草L. brachystachya及4批紫叶兔耳草L. praecox的6种有效成分的色谱峰分离度均良好，线性关系良好。不同基原所含的主要有效成分类型及含量均不一致，有共性也有差异性。运用SIMCA 14.1和SPSS 25.0软件分析结果显示，短筒兔耳草与圆穗兔耳草聚为一类，紫叶兔耳草与短穗兔耳草聚为一类，内在组成及含量差异小；全缘兔耳草不同产区差异大，革叶兔耳草组间差异最大。结论 建立的含量测定分析方法能有效地对多种基原兔耳草进行分析，能有效地对其进行质量控制；通过比较不同基原的兔耳草，为兔耳草资源的开发及利用提供有效依据。]]> 2022/5/6 9:19:19 433true 目的 探讨金银花Lonicerae Japonicae Flos不同发育时期挥发性成分的差异。方法 采用顶空固相微萃取-气质联用技术（HS-SPME-GC-MS），结合保留指数方法，对米蕾期（RB）、三青期（TG）、二白期（TW）、大白期（BW）、银花期（HS）、金花期（GF）6个不同时期金银花的挥发性成分进行定性定量分析，并通过主成分分析和聚类分析对6个不同生长时期的金银花挥发性物质进行判定、区分和聚集。结果 GC-MS共鉴定出260种挥发性物质，对260个物质进行主成分分析可简化为5个主成分，累积方差贡献率达86.65%，可反映样品的大部分信息；通过主成分分析和聚类分析将6个不同生长时期金银花样品分为4类：其中RB和TG归为1个集群；TW单独归为1个集群，BW和HS归为1个集群；GF单独归为1个集群。结论 聚集在一起的金银花样品挥发性物质相似，将RB与TG，TW，BW与HS，GF分为4个不同的商品等级，该研究结果可为金银花混合采摘以及后期的生产加工提供理论依据。]]> 2022/5/6 9:19:19 432true 目的 鉴定芦荟中的主要化学成分，建立UPLC特征指纹图谱，对市售15批次芦荟药材的质量进行评价。方法 应用超高效液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱（UPLC-Q-TOF/MS）采集芦荟色谱质谱数据，并进行定性分析；UPLC色谱条件为：Waters CORTECS T3（100 mm×2.1 mm，1.6 µm）色谱柱，柱温40 ℃，检测波长295 nm，乙腈（0.1%甲酸）-水（0.1%甲酸）为流动相，体积流量0.3 mL/min，梯度洗脱；Q-TOF/MS条件为采用ESI离子源，负离子扫描模式，毛细管电压2.3 kV，离子源温度100 ℃；利用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012版）》软件建立15批市售芦荟药材的UPLC特征指纹图谱。结果 从芦荟药材中共鉴定34个化学成分，主要包括蒽酮类成分10个、蒽醌类成分1个、色酮类成分16个、吡喃酮类成分5个、其他类成分2个；建立的UPLC指纹图谱精密度、稳定性、重复性良好，能够满足《中国药典》2020年版规定的指纹图谱要求，15批芦荟样品的指纹图谱相似度计算结果在0.867～0.986；对18个共有峰中的14个进行了结构指认，以共有峰峰面积为变量的主成分分析和聚类分析可明确对市售芦荟药材的基原进行分类。结论 所建立的UPLC-Q-TOF/MS方法可快速识别中药芦荟中的主要化学成分；建立的UPLC指纹图谱方法稳定可靠、专属性强，可为芦荟的质量评价提供参考；指纹图谱中的共有峰芦荟苷A、芦荟苷B、芦荟宁B、芦荟糖苷A、芦荟糖苷B还可用于区分芦荟药材的植物基原。]]> 2022/4/19 17:49:20 431true 目的 研究不同温度和聚乙二醇（PEG）模拟干旱胁迫对大黄种子萌发的影响，探讨大黄种子萌发的最适温度和对干旱胁迫的耐性。方法 用6个温度（10、15、20、25、30、35 ℃）和6个聚乙二醇（PEG-6000，以下简称PEG）浓度（0、5%、10%、15%、20%、25%）模拟温度胁迫与干旱胁迫对大黄种子进行处理，置人工培养箱培育，借助SPSS 24.0单因素方差分析法对其发芽势、发芽率、胚根、胚轴和子叶等指标统计分析。结果 温度与干旱胁迫对3种大黄种子萌发及幼苗生长有显著影响（P＜0.05）；同一温度下，3种大黄的种子萌发指标随PEG浓度的升高而降低，掌叶大黄和唐古特大黄幼苗各指标亦是随PEG浓度的升高而降低，而药用大黄幼苗各指标随着PEG浓度的升高先增加后减小，在低浓度PEG（5%）达到最大，25%PEG重度干旱时严重抑制掌叶大黄和唐古特大黄萌发（P＜0.05），完全抑制药用大黄萌发；20 ℃或25 ℃下，各PEG浓度处理的3种大黄种子萌发及幼苗生长指标均达到最大值；在低于20 ℃或者高于25 ℃时，各PEG浓度下的指标呈下降趋势，35 ℃高温下种子萌发和幼苗生长指标随着PEG浓度的升高呈直线下降。结论 掌叶大黄和唐古特大黄种子在各处理下所有指标均高于药用大黄，萌发的速度和整齐度较好，种子的活力高，表现出较强的抗旱性，轻度干旱环境有利于药用大黄幼苗生长，为大黄种质资源评价及规范种植研究与应用提供了理论依据。]]> 2022/4/19 17:49:21 430true 目的 探究近红外光谱技术应用于川贝母Fritillariae Cirrhosae Bulbus快速辨识的可行性。方法 收集80个川贝母待测样品（含炉贝、松贝、青贝及川贝母伪品等），为获取上述样品的真伪和规格信息，首先进行传统人工鉴别（M₁法）与《中国药典》法鉴别（M₂法），并以M₁法和M₂法相结合的辨识结果作为标杆信息（Y）；近红外光谱仪采集待测样品粉末的光谱信息（X），结合主成分分析-判别分析（principal component analysis-discriminant analysis，PCA-DA）、偏最小二乘-判别分析（partial least squares discriminant analysis，PLS-DA）、最小二乘支持向量机（least squares support vector machines，LS-SVM）3种化学计量学方法建立并优化真伪及商品规格辨识模型[Y＝M(X)]（M₃法）。结果 80个样品均参与真伪辨识，经留一法交互验证，结果发现3种真伪辨识模型中均无未分类样品，准确率依次为98.75%、98.75%、97.50%；80个样品中有5个因专家对规格的判定意见难以达成一致或样品本身原因等不参与建模，最终以75个样品参与规格辨识，模型准确率分别为100.00%（无未分类样品）、100.00%（有4个未分类样品）、100.00%（无未分类样品）。结论 真伪辨识均以PCA-DA、PLS-DA为最终辨识模型，商品规格分类以PCA-DA、LS-SVM为最优辨识模型。表明近红外光谱技术在川贝母真伪和规格质量快速辨识方面具有良好应用前景。]]> 2022/4/19 17:49:21 429true 目的 探讨西红花Crocus sativus根际可培养细菌菌群结构及其分布规律。方法 收集浙江建德、上海崇明、陕西澄城西红花球茎根际土，用传统涂布法分离根际细菌，分析根际细菌菌群结构、多样性及其与球茎生长性状、土壤理化因子间的相关性。结果 共分离得到西红花根际细菌2450株，划分为65个分类单元，归属到4个门，6个纲，17个科，28个属，31种；其中最优势门为厚壁菌门（Firmicutes，相对频率为66.76%），最优势属为芽孢杆菌属Bacillus（相对频率为57.71%）；产地和土壤理化因子影响西红花根际细菌多样性和菌群结构，陕西澄城2根际细菌多样性指数最高（H′＝2.590 1），土壤有效磷含量与多样性指数呈最大正相关（r＝0.910，P＜0.05）；有机质与苍白杆菌属分离频率呈最大负相关（r＝−0.956，P＜0.01）；球茎纵径与菌群多样性指数显著相关（r＝−0.806，P＜0.05）；球茎鲜质量与根际细菌菌群结构显著相关，其中球茎鲜质量与芽孢杆菌属分离频率呈最大正相关（r＝0.793，P＜0.05）。结论 西红花根际可培养细菌资源丰富，产地土壤理化因子、球茎鲜质量与西红花根际细菌菌群结构和多样性显著相关，高丰度芽孢杆菌属可能对西红花球茎生长起有益作用。]]> 2022/4/19 17:49:21 428true 目的 建立基于核糖体内部转录间隔区2（internal transcribed spacer 2，ITS2）序列的木通药材DNA条形码鉴定方法，对市售木通药材进行物种分析。方法 收集河北、安徽、贵州等地的样品总计45份，其中木通药材及其混伪品的原植物样品18份，市售木通药材样品27份。通过提取DNA、聚合酶链式反应（polymerase chain reaction，PCR）扩增、双向测序获得ITS2序列，基于邻接（neighbor joining，NJ）系统发育树和单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphisms，SNP）位点进行物种鉴定分析。结果 基于木通药材及其混伪品原植物ITS2序列构建的NJ树分析结果表明，木通药材正品及其混伪品在NJ树上聚为独立的分支，木通药材正品及其混伪品在NJ树上可明确区分；基于NJ树对27份市售木通药材的物种分析表明，市售样品中仅有4份为正品木通，2份为小木通，21份为粗齿铁线莲，正品率为14.8%。结论 基于ITS2序列的DNA条形码技术可以准确区分中药材木通及其混伪品，市售木通药材物种较混乱。]]> 2022/4/2 16:23:25 427true 目的 探究何首乌Polygonum multiflorum种质的遗传多样性和居群结构，为何首乌种质资源的保护及合理利用提供参考。方法 采用SRAP分子标记方法，利用Structure 2.3.4、NTSYSpc、Popgen 32和MEGA 7软件对数据进行统计，获得何首乌居群的多样性水平、遗传距离、遗传分化程度、聚类结果和群体分析结果。结果 何首乌野生居群遗传多样性大于栽培居群，多样性主要来自居群间。野生居群中，四川和重庆居群的遗传多样性较高，何首乌样品间遗传距离与地理距离无明显相关性；何首乌样品的邻接法（neighbor joining，NJ）聚类结果与地理分布相符，相同采集点样品可聚在一起。结果还显示农户栽培品亲缘关系近，说明品种间存在相互引种情况。居群结构分析表明，大部分何首乌样品的血缘组成较为单一，且K=16时，样品分类效果最佳，而分类结果则与NJ聚类基本一致。结论 SRAP分子标记是何首乌遗传多样性估计和种群关系的有效分析工具，而地形复杂性可能是影响何首乌遗传多样性程度的重要因素，另外，广西所产棱枝何首乌在何首乌种群中表现出特异性，与其他种源遗传距离大，支持将其列为何首乌的变种。]]> 2022/4/2 16:23:26 426true 目的 通过多类型功效物质的分析比较，为优化建立适宜的枸杞子干燥加工方法提供科学依据。方法 采用不同温度烘干、红外干燥、微波干燥、真空冷冻干燥等干燥技术对枸杞子鲜果进行干燥加工，分别采用紫外分光光度法测定总酚、总黄酮、中性多糖、酸性多糖及总色素含量，HPLC法测定玉米黄素、隐黄素、胡萝卜素、玉米黄素双棕榈酸酯含量，HPLC-ELSD法测定4种单寡糖（果糖、葡萄糖、麦芽糖、蔗糖）及甜菜碱含量，UPLC-TQ/MS法测定36种核苷类及游离氨基酸类成分的组成及含量，并分析不同干燥方法对枸杞子各功效成分含量的影响。以上述多类型功效成分为评价指标，利用TOPSIS法进行综合分析评价，以客观反映经不同干燥加工方法所得枸杞子药材的品质。结果 不同干燥方式处理后的枸杞子各种功效成分含量差异较大，其中总多糖、总酚、总黄酮、总色素、甜菜碱、总单寡糖质量分数分别为29.29～47.48、9.61～20.69、4.84～9.59、4.90～7.07、14.53～18.92、641.05～780.56 mg/g。脱蜡处理对枸杞子的影响研究结果显示，以未经脱蜡的枸杞子品质更佳；干燥温度对枸杞子中多糖、总酚、总黄酮、核苷类及氨基酸类组分含量影响较大，综合评价分析结果显示，（40＋60）℃是热风干燥的最佳温度；核苷类和氨基酸类成分总量以真空冷冻干燥处理的枸杞子最高，脱蜡后40 ℃热风干燥核苷类总量最低，（40＋80）℃热风干燥氨基酸类成分总量最低。通过对9种不同现代干燥方式获得的枸杞子样品进行综合评价分析，发现真空冷冻干燥法为枸杞子最佳干燥方式，其次为微波干燥和（40＋60）℃热风干燥。结论 真空冷冻干燥法最大限度地保留了枸杞子所含有的多类型功效成分，为该药材最佳干燥方式，其次为微波干燥和（40＋60）℃热风干燥方法。研究结果为优化建立适宜的枸杞子干燥加工方法提供了科学依据。]]> 2022/4/2 16:23:26 425true 目的 三萜类化合物是药用真菌桦褐孔菌产生的主要次生代谢产物之一，但其在实验室培养条件下积累量较少。旨在研究组蛋白去乙酰化酶（histone deacetylase，HDAC）活性抑制剂线性肟酸（suberoylanilide hydroxamic acid，SAHA）对桦褐孔菌三萜合成的调控。方法 液体摇瓶发酵法培养桦褐孔菌，并在培养液中添加SAHA。采用荧光定量PCR测定三萜合成相关基因转录水平，香草醛-高氯酸法测定细胞内和发酵液中三萜的含量。结果 SAHA的添加提高了桦褐孔菌体内编码3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A合成酶、3-羟基-3-甲基戊二单酰辅酶A还原酶、甲羟戊酸激酶、二磷酸酯脱羧酶、角鲨烯合成酶和羊毛甾醇合成酶等基因的表达水平。SAHA显著提高了桦褐孔菌菌丝体内和发酵液中三萜的积累量。SAHA诱导下桦褐孔菌菌丝体内三萜积累量达（66.4±5.24）mg/g，明显高于对照组[（22.7±3.3）mg/g]，并且胞外三萜的含量由对照组的（30.5±2.7）mg/L提高至（49.3±3.8）mg/L。此外，经SAHA处理后桦褐孔菌胞内三萜清除自由基的能力显著提高。结论 SAHA可以作为调节因子激发桦褐孔菌液体培养条件下三萜类化合物的积累。]]> 2022/4/2 16:23:26 424true 目的 基于HPLC指纹图谱与多成分含量测定，结合化学模式识别法评价胡桃楸Juglans mandshurica叶质量，为其深入研究和开发提供依据。方法 采用HPLC法建立30批不同产地胡桃楸叶指纹图谱；通过中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012版）进行相似度评价；通过对照品比对指认了3种化学成分，并测定了样品中3种成分的含量；使用SPSS 25.0软件进行聚类分析、主成分分析和相关性分析。结果 30批胡桃楸叶指纹图谱共标定了12个共有峰，指认的3个共有峰为绿原酸、金丝桃苷和异槲皮苷，指纹图谱相似度范围是0.827～0.995，具有较好的一致性；样品中绿原酸、金丝桃苷和异槲皮苷3种化学成分的质量分数分别为0.258～5.607 mg/g、0.113～3.974 mg/g和0.439～6.537 mg/g；聚类分析将样品分为3类，30批样品中28批样品聚为一类，铁岭鸡冠山乡（S3）、本溪东营坊乡（S6）的样品各自聚为一类；主成分分析用2个主成分进行综合评价，综合得分大于1的前6位分别为S3、S6、S12、S8、S24和S18；30批样品中3种成分的总含量与主成分综合得分存在明显相关性。结论 建立的胡桃楸叶质量评价方法操作简便、结果可靠，绿原酸、金丝桃苷和异槲皮苷可以作为胡桃楸叶质量评价的指标性成分。]]> 2022/4/2 16:23:27 423true 目的 应用分子生物学鉴定技术,筛选出应用于鉴定钩藤属物种的最佳DNA条形码,建立快速、准确、便捷的钩藤属植物鉴定方法。方法 从广东、广西等地收集了8个钩藤属物种的叶片、茎枝作为材料,共计44份样品。提取样品总DNA,分别对条形码ITS、matK、psbA-trnH、rbcL、trnL-trnF序列进行扩增、测序、拼接、校对;利用MEGA 7.0分析比对序列特征;基于TaxonDNA计算种内、种间的遗传距离以分析barcoding gap及Best Match、Best Close Match评估DNA条形码的鉴别能力;使用MEGA7.0、Phylosuite等软件构建单条形码及组合条形码的最大似然法(maximum likelihood,ML)、最大简约法(maximum parsimony,MP)、贝叶斯推断法(bayesian inference,BI)系统发育树。结果 条形码ITS、matK、psbA-trnH、rbcL、trnL-trnF序列均扩增成功且具有较高的测序成功率,其中psbA-trnH具有最多的变异位点,ITS次之,rbcL最少;Best Match、Best Close Match与Barcoding gap分析结果显示:5个单一条形码中,ITS鉴定钩藤属物种效果突出且具有明显的Barcoding gap,而组合条形码ITS+rbcL序列表现更为优异。基于所有单一条形码构建的系统发育树,ITS序列的物种鉴别成功率最高,能够准确鉴定8个钩藤属物种;基于组合条形码构建的系统发育树,ITS+rbcL序列具有最高的平均节点支持率,且该序列集包含的11个钩藤属物种均能单独聚为一支。结论 应用ITS+rbcL的序列组合能够实现钩藤属不同物种的准确鉴定。]]> 2022/3/22 14:50:58 422true 目的 克隆温郁金茉莉酸氨基酸合酶关键基因JAR(JA-amino acid synthetase)的全长cDNA序列,并进行生物信息学和表达分析。方法 根据温郁金转录组数据设计特异性引物。以温郁金根茎的cDNA为模板,通过RT-PCR扩增获得JAR全长cDNA序列,利用生物信息学软件预测基因编码蛋白的特征;利用ClustalW和MEGA 6.06软件构建温郁金JAR的系统进化树;构建原核表达载体PET-22B(+)-JAR,纯化重组蛋白JAR5,并进行鉴定。结果 扩增后的基因编码582个氨基酸,全长1749 bp,且具有典型的GH3特征结构域,不具跨膜域,不存在信号肽,属于不稳定蛋白;PCR扩增后得到约1 800 bp大小的片段,经凝胶过滤色谱纯化,最终得到基于蛋白印迹实验(Western blotting)验证正确的66 200大小的重组蛋白。结论 首次克隆并分析了温郁金JAR基因,纯化了JAR5蛋白,为进一步研究温郁金JAR基因蛋白功能研究提供依据。]]> 2022/3/22 14:50:58 421true 目的 基于高通量测序获得药用资源植物密花香薷Elsholtzia densa叶绿体基因组序列,分析了叶绿体基因组结构及特征,为研究密花香薷资源分类及系统进化奠定了基础。方法 以密花香薷叶片为材料,利用改良的CTAB法提取DNA;采用二代测序技术Illumina NovaSeq平台对叶绿体基因组进行测序;以广藿香叶绿体基因组为参考序列,进行序列组装和矫正,得到完整叶绿体基因组序列;利用生物信息学方法分析密花香薷叶绿体基因组特征并进行系统发育分析。结果 获得密花香薷完整叶绿体基因组序列全长149 095 bp,GC含量37.92%,注释到130个基因,其中包括85个蛋白质编码基因,8个rRNA基因和37个tRNA基因;密花香薷叶绿体基因组中共检测到28个散在重复序列,串联重复序列共检测到191个,单核苷酸重复序列最多,共114个;系统发育结果表明,密花香薷和其他唇形科植物聚合在一起形成一个分支结构,紫苏属植物和香薷属植物亲缘关系较近。结论 建立了适于香薷属植物叶绿体基因组测序及其特征分析的方法,丰富了唇形科植物遗传资源,为密花香薷分子标记开发及唇形科属种间系统发育分析研究提供了理论基础。]]> 2022/3/22 14:50:58 420true 目的 获得款冬花Farfarae Flos炮制前、后生品和蜜炙品中挥发性有机物的特征及其变化规律。方法 采用顶空-气相色谱-离子迁移质谱(HS-GC-IMS)测定款冬花生品和蜜炙品的挥发性有机物,构建HS-GC-IMS指纹图谱,VOCal软件对检测到的成分进行定性和定量分析,运用主成分分析(principal component analysis,PCA)和邻近距离法对样品进行差异性分析。结果 基于HS-GC-IMS技术从款冬花生品和蜜炙品中共获得了61种挥发性有机物,定性鉴别出53种;构建了款冬花生品和蜜炙品的HS-GC-IMS指纹图谱,通过PCA和邻近距离法分析可将款冬花生品与蜜炙品进行区分,甲硫醚(dimethyl sulfide)、2-甲基丙烯醛(2-methyl-2-propenal)等9种物质可作为款冬花生品的特征性成分;乙酸D(acetic acid D)、乙酸M(acetic acid M)等14种物质可作为款冬花蜜炙品的特征性成分。结论 HS-GC-IMS指纹图谱可用于识别与评价款冬花生品和蜜炙品挥发性有机物的种类和差异,为款冬花饮片的质量控制及临床应用提供参考。]]> 2022/3/22 14:50:58 419true 目的 纯化药用大黄Rheum officinale种质,比较传统型和不同变异类型药用大黄产量和内在品质差异,为药用大黄栽培及种质选择提供依据。方法 根据药用大黄外观形态制定不同变异类型标准,于采收期测定不同类型药用大黄产量,UPLC法测定游离蒽醌、结合蒽醌、鞣质和二蒽酮等14种功效成分含量。结果 药用大黄分为传统型和3种变异型(掌状中裂型、褐茎褐叶脉型和褐茎绿叶脉型)。3种变异型药用大黄产量均显著低于传统型(P<0.05);不同类型药用大黄的水分和水溶性浸出物差异不显著;3种变异型的总蒽醌含量和总游离蒽醌含量显著低于传统型(P<0.05),而二蒽酮含量均显著高于传统型(P<0.05),褐茎褐叶脉型的鞣质含量显著高于传统型(P<0.05)。与传统型相比,3种变异型药用大黄"泻下攻积"功效可能较强,"清热解毒"功效较弱,褐茎褐叶脉型可能更偏于"逐瘀通经"。结论 传统型药用大黄的产量和内在品质均优于3种变异型,药用大黄栽培过程中应注意种质筛选纯化;不同变异类型的功效偏性可为其"定向选育"提供参考。]]> 2022/3/22 14:50:58 418true 目的 分析干旱及盐胁迫对黄芩Scutellaria baicalensis中黄酮类成分的影响。方法 运用超高液相色谱-串联四级杆飞行时间质谱（UHPLC-QTOF-MS）技术对不同干旱及盐胁迫处理组黄芩根部位的化学成分进行分析，运用主成分分析（principal components analysis，PCA）、正交偏最小二乘法-判别分析（orthogonal partial least-squares discrimination analysis，OPLS-DA）和单变量分析（univariate analysis，UVA）的统计学方法对代谢组数据进行分析，结合文献和二级质谱数据库，依据UHPLC-QTOF-MS矩阵中的保留时间、质荷比及碎片离子对黄芩中的代谢产物进行分析鉴定，筛选差异代谢产物。结果 共分析鉴定出44个黄酮类成分，差异代谢物共筛选出18个黄酮类成分；且主要黄酮类代谢产物相对定量值随干旱及盐胁迫程度增强呈现先升高后降低的变化趋势。结论 干旱及盐胁迫会引起黄芩黄酮类成分含量和差异成分种类的改变，适度干旱胁迫促进黄芩黄酮类成分的合成积累，但促进程度是有限的。]]> 2022/3/8 10:04:40 417true 目的 建立辽藁本的HPLC指纹图谱及多成分含量测定方法。方法 采用Thermo Acclaim ^TM 120 C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm)；以乙腈（A）-0.1%甲酸水溶液（B）为流动相，梯度洗脱；体积流量1.0 mL/min；检测波长280 nm；柱温为30 ℃，同时测定15批辽藁本指纹图谱及相关成分含量，结合聚类分析、主成分分析及偏最小二乘法判别分析（partial least squares discriminant analysis，PLS-DA）对辽藁本进行全面分析。结果 15批辽藁本指纹图谱相似度大于0.958，共标定了12个共有峰，指认出绿原酸、阿魏酸、洋川芎内酯I、洋川芎内酯H、洋川芎内酯A、藁本内酯、欧当归内酯A 7个成分，对前6个成分进行定量分析，其质量分数分别为0.108%～0.524%、0.168%～0.268%、0.016%～0.029%、0.004%～0.007%、0.056%～0.033%、0.590%～1.293%。聚类分析将15批药材分为3类，主成分分析筛选出4个主成分，其累积方差贡献率为87.94%，表明这4个主成分可包含原有数据的大多数信息，PLS-DA法标记出药材中的5个差异性成分。结论 建立的指纹图谱及多成分含量测定方法适用于辽藁本的质量评价，为辽藁本质量控制及相关经典名方开发提供参考。]]> 2022/3/8 10:04:40 416true 目的 建立客观鹿茸分区方法。方法 采集3种规格的鹿茸，分别为马鹿三杈茸、梅花鹿三杈茸和二杠茸。通过纵向剖面、横断面和组织学切片对鹿茸内部组织结构、形态特征和组织类型进行分析，确定鹿茸的感官分区指标。通过测定鹿茸不同区段成分上的差异，设立数据化的分区指标。结果 建立血管形态和骨密质环2个感官分区指标，蜡片：无肉眼可见血管；粉片：血管细密，粗细均匀；蜂片：开始出现密质骨时，周围血管细密，中间粗，呈蜂窝状；骨片：密质骨连成骨密质环。利用蛋白质含量和钙含量的比值设定了不同区段鹿茸分区值（PV值）：蜡片≥65.00，粉片6.30～64.99，蜂片4.70～6.29，骨片≤4.69。结论 通过感官指标和PV值建立了鹿茸的客观分区方法，能够精确客观地对鹿茸进行分区，不仅适用于不同种鹿茸，如马鹿茸和梅花鹿茸；而且也适用于不同规格的鹿茸，如二杠茸和三杈茸；还能够适用于不同加工方式处理的鹿茸，如传统煮炸法和冷冻真空干燥法。该方法为增强鹿茸治疗的针对性和促进鹿茸深加工奠定了基础。]]> 2022/3/8 10:04:40 415true 目的 以藜芦属药用植物蒙自藜芦Veratrum mengtzeanum、大理藜芦V.taliense、狭叶藜芦V.stenophyllum和毛叶藜芦V.grandiflorum为材料，对其叶绿体基因组进行组装和序列分析。方法 采用高通量测序技术对4种植物叶绿体基因组进行测序，并且使用NOVOPlasty和Geneious R11软件分别组装和注释序列，在此基础上进行基本结构和系统发育分析。结果 藜芦属4种植物叶绿体基因组具有典型的环状四分体结构，全长151 875~153 711 bp，总GC含量37.7%~37.8%。藜芦属叶绿体基因组均注释到135个基因，其中蛋白质编码基因83~84个，rRNA基因8个和tRNA基因38个。通过比较发现，4种植物IR区边界未出现明显的扩张或收缩；毛叶藜芦叶绿体基因组序列较保守，变异位点少；蒙自藜芦、大理藜芦和狭叶藜芦序列变异较大，种间差异较小；此外，在一个大单拷贝区（large single copy region，LSC）和小单拷贝区（small single copy region，SSC）区筛选到13个高变片段。系统发育研究表明，毛叶藜芦与蒙自藜芦、大理藜芦和狭叶藜芦亲缘关系较远，后两者亲缘关系最近。结论 对藜芦属4种植物叶绿体基因组结构和系统发育关系进行了分析，为后续开展分子鉴定及群体遗传学研究提供了数据资料。]]> 2022/2/25 14:22:29 414true 目的 以不同发育阶段不同树龄的银杏叶（银杏幼树叶，多年生银杏树叶）为对象，分析次生代谢物变化规律，测定黄酮及萜内酯含量，分析萜类生物合成的通路和关键基因表达，为提高银杏萜内酯产量提供分子生药学数据。方法 采用液相色谱-质谱联用（LC-MS）技术，并进行高通量转录组学测序（RNA-seq），从差异表达基因中寻找次生代谢物生物合成的关联酶基因。结果 代谢数据表明，不同树龄，不同发育阶段的银杏叶次生代谢物明显不同，黄酮类成分，老树叶片与幼树叶4~7月含量均呈下降趋势；同发育阶段，幼树叶含量高于老树叶片含量；萜内酯类成分，老树叶片4~7月含量略微呈上升趋势，幼树叶略微呈缓降趋势；同发育阶段，幼树叶含量高于老树叶片含量。转录组分析出萌发期，老树叶片与幼树叶片生长状态相似，5~7月老树叶与幼树叶基因表达发生较大变化。筛选出49条与萜类合成有关的候选基因，分析后发现甲羟戊酸途径（mevalonate pathway，MVA）中老树叶表达高于幼树叶；甲基赤藻糖醇磷酸途径（methylerythritol 4-phosphate pathway，MEP）中幼树叶表达高于老树叶。结论 幼树叶比老树叶药用活性成分含量更高，适合作为药材。银杏叶内萜类合成途径可能主要依赖于MEP途径，且相关基因表达量与代谢成分相互证明。]]> 2022/2/25 14:22:29 413true 目的 探明半夏Pinellia ternate连作对根际土壤微生物群落的影响规律，以指导半夏连续高产栽培。方法 采用PacBio Sequel测序手段对正茬（CK）、连作一茬（A）、二茬（B）和三茬（C）半夏不同生长时期根际土壤微生物进行测序，对比分析其微生物群落结构和多样性差异。结果 随着连茬次数的增加，潜在致病细菌如果胶杆菌Pectobacterium aroidearum、真菌如子囊菌门Ascomycota菌群、镰刀菌属真菌Fusarium nematophilum和瓜亡革菌Thanatephorus cucumeris等丰度增加，球黑孢霉Nigrospora_zimmermanii随着连茬次数的增加逐渐成为优势菌群，有益真菌如球囊菌门Glomeromycota菌群丰度减少；随着连茬次数增加，半夏根际土壤中细菌和真菌多样性均降低；根际土壤pH值随着半夏生长周期的延长波动变化，可能导致根际细菌和真菌多样性和功能类群变化，从而使一些致病菌在半夏块茎膨大期和成熟期形成优势种群。结论 随着半夏连茬次数的增加，根际土壤有益微生物丰度减少、有害微生物丰度增加，根际土壤微生物群落多样性降低，根际土壤pH值波动变化，是半夏连作障碍形成的重要原因。]]> 2022/2/25 14:22:29 412true 目的 研究不同栽培模式下铁皮石斛Dendrobium officinale中类黄酮化合物积累的差异，为铁皮石斛种植方式创新提供依据。方法 运用超高效液相色谱串联质谱（UPLC-MS/MS）广泛靶向技术对3种栽培模式（大棚栽培、林下活树附生和岩壁附生栽培）下的铁皮石斛类黄酮物质进行检测，使用主成分分析（principal component analysis，PCA）和正交偏最小二乘判别分析法（orthogonal partial least squares-discriminant analysis，OPLS-DA）鉴定差异代谢物。结果 共鉴定202个类黄酮化合物，主要以黄酮（76个）和黄酮醇（60个）化合物为主，其中花青素物质矢车菊素-3-O-葡萄糖苷-7，3'-di-O-（6''-O-芥子酰葡萄糖苷）为首次在铁皮石斛中被检测到；OPLS-DA筛选43个差异化合物，其中大棚组与林下组、大棚组与岩壁组间均具有23个差异物，林下组与岩壁组则具有27个差异物，差异物质对表征不同栽培模式的样品贡献率明显。结论 林下活树附生和岩壁附生栽培明显提升黄酮、类黄酮化合物的生物合成水平，保障了药材质量，研究结果为新型栽培模式的推广提供了理论基础。]]> 2022/2/25 14:22:29 411true 目的 建立基于超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱（UPLC-QQQ-MS/MS）技术的工业大麻中6种大麻素类成分的定量分析方法，并利用该方法对9个火麻仁基原植物工业大麻植株3个不同部位（雌花、苞片、叶）中的大麻素类成分含量进行研究，为合理合法开发利用工业大麻，甄选商业化品种以及选育符合我国法规的高大麻二酚（cannabidiol，CBD）含量、低四氢大麻酚（tetrahydrocannabinol，THC）含量品种奠定基础。方法 采用液质联用技术：Agilent Eclipse Plus C₁₈色谱柱（50 mm×2.1 mm，1.8 μm），流动相为0.1%甲酸水溶液（A）-甲醇（B），梯度洗脱，体积流量0.3 mL/min，多反应监测模式。结果 以工业大麻中6种大麻素类成分大麻二酚、四氢大麻酚、大麻萜酚（cannabigerol，CBG）、大麻二醇酸（cannabidiolic acid，CBDA）、大麻萜酚酸（cannabigerolic acid，CBGA）和四氢大麻酚酸（tetrahydrocannabinolic acid，THCA）为研究对象，建立了基于UPLC-QQQ-MS/MS的定量方法。方法学验证结果显示：6种大麻素类成分线性良好，R²为0.999 1~1.000 0，准确度为0.29%~2.80%，精密度为0.84%~2.74%，加样回收率为99.36%~102.88%。样品分析结果显示：花和苞片中的6种大麻素类成分含量显著高于叶片中的含量，不同品种大麻中6种大麻素类成分在花、苞片和叶中的分布具有特异性。结论 基于UPLC-QQQ-MS/MS所建立的大麻中6种大麻素类成分的定量分析方法，灵敏度高，准确性好，方法简单，适用于工业大麻中6种大麻素类成分的含量测定。]]> 2022/2/25 14:22:30 410true 目的 了解小檗属植物叶绿体基因组成及结构特征，为小檗属的系统发育及基因组进化研究提供参考。方法 获取小檗属9个物种的叶绿体基因组，利用生物信息学方法比较叶绿体基因组间的结构特征与变异程度，并以小檗科的桃儿七属3个物种的叶绿体基因组为外类群分析了小檗属的系统发育关系。结果 小檗属9个种的叶绿体基因组均为双链环形结构，均包含1个大单拷贝区（large single-copy，LSC）、1个小单拷贝区（small single-copy，SSC）以及2个反向重复区（IRa和IRb）。叶绿体基因组大小差异较小，最大差异为1984 bp。基因排列顺序基本一致，各基因数量相对保守，其中核糖体RNA（rRNA）数量最为保守，均为8个。此外，小檗属叶绿体基因组在序列长度、基因组成以及GC含量等方面相对保守，但4个边界存在明显的多样性。小檗属叶绿体基因组中非基因编码区存在较大差异，变异程度较高，而基因编码区差异较小，具有较高的保守性。在叶绿体基因组4个部分中，SSC区的变异程度最高，IRa区的变异程度最低。小檗属叶绿体基因组中包括rps12、rps16、rpl2、rpl16、rpoC1、petB、petD、ndhB、ndhA、atpF、clpP和ycf3 12个含内含子的蛋白编码基因。大部分基因的编码区长度较为保守，但在内含子长度或编码区长度均存在少量改变。十大功劳组Berberis amurensis是最先从小檗属中分离出来，是小檗属的原始组。在十大功劳组中阿里山十大功劳B. oiwakensis和安坪十大功劳B. ganpinensis与其他小檗属物种存在较远的亲缘关系。而其余小檗属物种可分为2支，威宁小檗B. weiningensis为1支；黄芦木B. amurensis和朝鲜小檗B. koreana为1支。结论 小檗属叶绿体基因组具有较高的保守性，其基因排列顺序基本一致，未检测到大规模的倒位或基因重排，但其IR区与单拷贝区（single-copy，SC）边界存在明显的多样性。基于叶绿体基因组构建的系统发育树在一定程度上可以揭示小檗属物种的系统发育关系。]]> 2022/2/10 16:01:05 409true 目的 为了探知宁夏枸杞Lycium barbarum花药发育过程及挖掘花药发育相关基因。方法 以单双核花粉时期和成熟花粉时期的花药为研究材料，通过高通量Illumina HiSeq2500测序平台进行转录组分析。结果 组装共获得128 151条Unigene，将Unigene与NCBI的非冗余蛋白质数据库（non-redundant protein databasse，NR）、去冗余的蛋白序列数据库（Swiss prot protein database，Swiss-Prot）、基因本体数据库（gene ontology，GO）、直源同源群集数据库（clusters of orthologous groups，COG）、真核同源群数据库（euKaryotic orthologous groups，KOG）、基因功能和代谢途径数据库（Kyoto encyclopedia of genes and genomes，KEGG）数据库比对，共有40 140条得到注释。在错误发现率（false discovery rate，FDR）＜0.05且差异倍数（fold change，FC）≥2的条件下，单双核花粉时期与成熟花粉时期的差异表达基因共有46个。KEGG注释发现有4个差异表达基因参与甘油酯代谢、亚油酸代谢、苯丙氨酸代谢和苯丙烷类生物合成4个途径中。富含亮氨酸重复蛋白、细胞周期蛋白、类受体蛋白激酶、E3泛素蛋白连接酶等11个差异表达基因参与了花药发育过程。随机选取其中5个差异表达基因进行qRT-PCR验证，表达结果与转录组数据基本一致，表明其数据真实可靠。结论 为进一步解释宁夏枸杞花药发育的相关分子机制奠定了基础，也为后续研究宁夏枸杞花药发育的生物学特征提供了有益的基因资源。]]> 2022/2/10 16:01:05 408true 目的 探析并比较野生甘松Nardostachys jatamansi与仿野生栽培甘松的根际细菌与内生细菌的种群组成、丰富度、多样性及差异性。方法 以野生甘松和仿野生栽培甘松的根际土壤、根及根茎为研究样本，基于Illumina MiSeq第二代高通量测序技术对根际土壤细菌、根及根茎内生细菌的16S rDNA V4-V5区进行序列测定，并进行相关生物信息学分析。结果 各组样本基因组经16S测序，细菌群落的所有序列分别进行97%的相似水平下的物种分类单元（operational taxonomic units，OUT）分类，根际细菌共涉及22门、38纲、69目、119科、254属、268种，内生细菌共涉及16门、29纲、60目、107科、199属、145种。根际、内生细菌群落中共有的序列分别为498个、177个，主成分分析的最主要2类主成分（PC1和PC2）类群的比例综合分别接近70%、60%，其中丰度排在前4位的依次为变形菌门、放线菌门、酸杆菌门和拟杆菌门，其他类群的类别及相对丰度存在一定差异。优势细菌差异分析中，各组细菌群落组成及相对丰度差异很大。结论 野生甘松和仿野生栽培甘松的优势促生菌群可能主要集中于变形菌门、放线菌门、酸杆菌门和拟杆菌门，可从中筛选出核心功能微生物混合菌群，对改良仿野生培育甘松土壤的微生物环境具有理论指导意义。]]> 2022/2/10 16:01:05 407true 目的 利用SSR分子标记技术建立金线莲基原植物花叶开唇兰Anoectochilus roxburghii及其常见混淆品台湾银线兰A. formosanus的鉴别依据。方法 根据花叶开唇兰转录组数据进行分析筛选SSR引物，通过DNA提取、PCR扩增以及引物多态性筛选等方法鉴别花叶开唇兰及台湾银线兰，从而鉴定药用金线莲真伪。结果 基于花叶开唇兰转录组数据筛选出SSR多态性引物13对，UPGMA聚类法显示两者遗传相似系数变幅为0.38～1.00，在遗传相似系数0.38处，可将其完全分开。结论 该研究构建了花叶开唇兰与台湾银线兰的分子标记鉴定体系和指纹图谱，为金线莲的商品鉴别及质量控制提供科学依据。]]> 2022/2/10 16:01:05 406true 目的 建立不同来源竹茹药材HPLC指纹图谱，结合相似度、聚类、主成分分析等化学计量手段评价不同产地竹茹药材品质，为其质量控制研究提供技术方法借鉴和基础数据。方法 通过HPLC梯度洗脱建立23个批次竹茹药材的指纹图谱，采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012A版）对竹茹药材HPLC指纹图谱进行相似度评价，并采用SPSS24.0软件进行聚类、主成分分析。结果 选取了13个色谱共有峰，23批样品共有峰相似度在0.713～0.991；聚类分析将23批样品分为2类；主成分和因子分析筛选出累积方差达77.83%贡献率的3个主成分，能够反映23个批次竹茹药材特征性质量差异。结论 建立分析的HPLC指纹图谱结合化学计量学评价方法，简便可行，可为综合评价不同产地竹茹药材的质量提供参考。]]> 2022/2/10 16:01:06 405true 目的 考察不同储藏条件对党参Codonopsis Radix片质量的影响。方法 制备低（水分≤10%）、中（10%＜水分≤13%）、高（13%＜水分≤16%）3种不同水分的党参片，于室温、阴凉、冷藏、加速（高温高湿）、低氧气调养护条件下储藏4个月，考察其外观性状、色度、水分、灰分、浸出物、总黄酮、总皂苷及总糖含量的变化，综合评价不同储藏条件对各水分党参片质量的影响。结果 各水分党参片在储藏过程中，中、高水分（＞10%）党参片在常温储藏中发生不同程度的虫蛀，且高水分党参片在常温储藏3、4个月时灰分不符合药典规定，常温储藏的高水分党参片在储藏4个月时浸出物显著下降。同时，常温储藏的各水分党参片的总皂苷、总黄酮、总糖含量大多低于阴凉、冷藏及低氧气调养护储藏。结论 党参片储藏过程中，虫蛀程度与党参片水分、储藏温度、湿度、氧含量有关，总皂苷含量与储藏温度、湿度、氧含量有关，总黄酮含量与氧含量有关，总糖含量与储藏温度、湿度有关，故在常氧条件下应控制其储藏温度不高于20 ℃，党参片水分低于10%；在低氧条件下，储藏温度、湿度、党参片含水量相对不受限。且储藏时储藏温度、湿度、氧含量、党参片水分越低其储藏效果越好。]]> 2022/2/10 16:01:06 404true 目的 对阳春砂萜类合成关键酶龙脑基二磷酸合酶（bornyl diphosphate synthase，BPPS）催化生成龙脑基二磷酸（bornyl diphosphate，BPP）的关键氨基酸位点解析，为阳春砂BPPS的功能优化并且促进其在代谢工程中的应用奠定基础。方法 比较阳春砂、海南砂的BPPS（AvBPPS、AlBPPS）及已报道的其余3种植物的BPPS，发现AvBPPS催化产生BPP的比率较高。通过分子建模和底物对接、保守基序预测，以及与其他BPPS、单萜合酶序列多重比对的方法，筛选关键氨基酸位点，探索决定AvBPPS产生BPP及其较高比率BPP的关键活性位点，据此设计突变体，并用快速定点突变的方法获得突变体。结果 筛选出了20个可能影响AvBPPS催化的关键位点，并根据这些位点，设计了20个AvBPPS突变体及1个AlBPPS突变体，成功构建其中17个突变体，诱导表达获得了纯化蛋白。结论 综合使用多种分析方法，理性设计BPPS的突变位点，并获得了相应突变体及蛋白，为通过氨基酸定点突变探索BPPS的催化机制及功能优化提供了基础。]]> 2022/1/22 15:14:08 403true 目的 克隆温郁金Curcuma wenyujin 萜类合成酶基因（CwTPS05、CwTPS10）并进行生物信息学及表达分析，为今后利用代谢工程生产温郁金萜类成分提供依据。方法 根据前期温郁金转录组测序数据，利用PCR技术从根茎cDNA文库中克隆CwTPS05和CwTPS10序列；生物信息学分析其核苷酸和氨基酸序列特征；qRT-PCR检测基因在不同组织中的表达水平。结果 克隆获得CwTPS05（GenBank登入号：MT814867）基因，开放阅读框全长1446 bp，编码481个氨基酸，预测相对分子质量为55 990；CwTPS10（GenBank登入号：MT814863）基因，开放阅读框全长1494 bp，编码497个氨基酸，预测相对分子质量为58 550。CwTPS05和CwTPS10均属于酸性、非跨膜、无转运肽的亲水性蛋白。同源进化树分析表明，CwTPS05和CwTPS10基因被归类为植物萜类合成酶TPSa亚家族。qRT-PCR分析表明，CwTPS05在根茎中特异性表达，CwTPS10在根茎和块根中特异性表达。结论 成功克隆获得温郁金CwTPS05和CwTPS10基因并进行生物信息分析，为研究温郁金萜类成分的生物合成途径提供参考。]]> 2022/1/22 15:14:08 402true 目的 以玄参 Scrophularia ningpoensis 为研究对象，分析药材中内在化学成分与其法定指标整体间的关联性，探讨以内在成分快速辨别药材品质优劣的可行性。方法 取玄参药材按《 中国药典》 2020 年版一部玄参项下测定，采用等权比值综合评分法对玄参药材进行品质优劣排序，使用色谱指纹图谱筛选共有成分并进行主成分分析，观察药材自然聚集趋势与品质优劣间关系，提出"以成分辨品质"试验假想并进行分析验证。结果 不同来源玄参药材品质存在一定差异，等权综合比值评分法可有效表征玄参药材品质优劣，药材中内在化学成分与法定指标整体间具有一定关联性，验证试验有效。结论 以内在成分含量差异对玄参药材进行品质优劣判别具有一定的可行性，可为玄参及其他部分中药材品质研究提供新思路和参考依据。]]> 2022/1/22 15:14:08 401true 目的 对越南金花茶 Camellia insularis 化学成分及表型性状进行分析，明确其化学成分差异及基于表型性状的亲缘关系，为越南金花茶种质分类和良种选育提供依据。方法 采用超高液相色谱法建立样品化学指纹图谱，目测和直尺观测表型性状，基于液相色谱峰数量和面积，采用主成分分析、相关分析和聚类分析方法，对越南金花茶化学成分差异及亲缘关系进行评价。结果 主成分分析结果表明，以色谱峰数量为评价指标， YN3-78、YN3-77、YNX3-15、YN3-72、YN3-62 等综合评分较高；以色谱峰面积为评价指标， YN3-60、YNX3-05、YNX3-01、YNX3-14、YNX3-04 等综合评分较高。相关分析结果显示，各表型性状与化学成分间存在显著相关。聚类分析结果表明， 77 株越南金花茶可分为 4 个类群，其中，第 1 群 13 株，属大叶型，化学成分出峰时间多在 19.32 min 以前，色谱峰数量较少、峰面积较高。第 2 群 26 株，包含所有线形叶植株，属大叶型，化学成分出峰时间多在 15.21 min 之前，色谱峰数量最少。第 3 群 19 株，叶面积较小，化学成分种类少，峰面积低，综合指标最差。第 4 群 19 株，叶面积最小， 该群 23.33 min 以后有出峰，是区别于其他类群的重要特征； 该群化学成分数量最多，峰面积均较低。结论 越南金花茶表型和化学成分均具有较大差异，通过聚类分析所得 4 个类群均有各自明显的表型性状特征；表型与化学成分存在显著相关，可通过表型性状预测化学成分种类和含量。该结果可为越南金花茶亲缘关系分析和优良种质筛选提供重要依据。]]> 2022/1/22 15:14:09 400true 目的 建立虎杖 Polygonum cuspidatum 的 HPLC 指纹图谱，研究虎杖醇提物的 HPLC 指纹图谱与抗痛风性关节炎活性之间的谱效关系，初步明确虎杖抗痛风性关节炎主要活性成分。方法 采用 HPLC 法建立虎杖的指纹图谱；使用"中药色谱指纹图谱相似度指纹评价系统（2004 A 版）"进行相似度评价；以小鼠足垫厚度、血清尿酸含量为虎杖抗痛风性关节炎作用药效指标，采用灰色关联度分析法分析其谱效关系。结果 虎杖发挥抗痛风性关节炎作用是多种成分共同作用的结果，对抗痛风性关节炎作用贡献较大的特征峰有 7 号峰（虎杖苷）、9 号峰（槲皮素）、11 号峰（白藜芦醇）、12 号峰（槲皮苷）、13 号峰（大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷）、16 号峰（大黄素）、18 号峰（大黄素甲醚）。结论 虎杖发挥抗痛风性关节炎作用的药效是多种成分共同作用的结果， 可为该药材质量控制与应用开发提供参考。]]> 2022/1/22 15:14:09 399true 目的 克隆菘蓝Isatis indigotica中咖啡酸氧甲基转移酶（I. indigotica fortune caffeic acid O-methyltransferase，IiCOMT）编码基因，并进行生物信息学及表达分析。方法 采用cDNA末端快速扩增（RACE）技术克隆菘蓝IiCOMT的全长cDNA，进而通过PCR获得其基因组DNA序列。通过qRT-PCR检测IiCOMT在四倍体菘蓝和二倍体菘蓝各器官以及不同胁迫条件下的表达情况。结果 IiCOMT全长cDNA为1376 bp（GenBank登录号DQ115905），包含1个1092 bp的开放阅读框（open reading frame，ORF），编码363个氨基酸残基，其对应的DNA序列含有3个内含子，4个外显子。IiCOMT 基因在2种倍性菘蓝的根茎叶均有表达，且四倍体菘蓝中的表达均高于二倍体。胁迫因素盐处理（NaCl）、冷处理（4 ℃）、水杨酸（salicylicacid，SA）、茉莉酸甲脂（methyl jasmonate，MeJA）、赤霉素（gibberellic acid，GA3）和脱落酸（abscisic acid，ABA）均能诱导IiCOMT表达水平上调。结论 IiCOMT的克隆及表达分析，为进一步阐明与咖啡酸氧甲基转移酶相关的四倍体菘蓝优良性状形成的分子机制奠定了基础。]]> 2022/1/7 9:33:58 398true 目的 克隆细胞色素P450s（CYP450s）家族成员的2个基因，探究红花Carthamus tinctorius幼叶在逆境胁迫下CYP450s基因的表达与红花总黄酮含量变化关系。方法 以吉红1号为材料，对CYP450s家族的2个基因CYP81E8、CYP71A1进行基因克隆表达及分析。研究了茉莉酸甲酯（methyl jasmonate，MeJA）、干旱（PEG-6000）、光及暗处理4种逆境胁迫对红花总黄酮含量的影响，分析了CtCYP81E8和CtCYP71A1基因的表达与叶片总黄酮含量之间的相关性。结果 CtCYP81E8编码区序列为1014 bp，编码337个氨基酸；CtCYP71A1编码区序列为1287 bp，编码428个氨基酸。2个基因在不同胁迫条件下的表达量及总黄酮含量的变化表明：MeJA处理后，与野生型相比，叶片中的总黄酮含量均有不同程度的增加。CtCYP81E8、CtCYP71A1的表达量与总黄酮的积累量呈正相关；当采用PEG-6000处理后，CtCYP81E8处于正调控，而CtCYP71A1处于负调控状态，红花的叶片中总黄酮含量均显著增加；光胁迫下，在一定时间内总黄酮含量与CtCYP71A1基因表达量呈正相关，与CtCYP81E8基因表达量呈负相关，暗胁迫下，总黄酮含量与CtCYP81E8及CtCYP71A1基因表达趋势一致，都在一定时间内呈正相关。结论 成功克隆了红花CtCYP81E8及CtCYP71A1基因。qRT-PCR分析表明，CtCYP81E8、CtCYP71A1基因可能在红花幼叶期对逆境胁迫的适应中发挥重要作用，为红花CYP450s家族基因在红花黄酮代谢合成的功能研究提供理论依据。]]> 2022/1/7 9:33:58 397true 目的 建立白芍药材HPLC指纹图谱及多成分含量测定方法，为白芍药材质量控制及临床应用提供参考。方法KromasiL C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）为固定相，以乙腈-0.1 %磷酸水溶液为流动相进行梯度洗脱，体积流量1.0 mL/min，检测波长0～17 min和22～45 min，244 nm；17～22 min，280 nm，柱温30 ℃；对16批白芍药材进行指纹图谱构建，基于指纹图谱相似度分析结合聚类分析与主成分分析，同时测定没食子酸、氧化芍药苷、芍药内酯苷、芍药苷、苯甲酰芍药苷的含量。结果 16批白芍药材的相似度均在0.86以上，共标定了9个共有峰，指认出5个色谱峰，分别为没食子酸、氧化芍药苷、芍药内酯苷、芍药苷、苯甲酰芍药苷。聚类分析将16批白芍药材分为2类；经主成分分析，主成分1～3是影响药材样品质量评价的主要因子。16批白芍药材中没食子酸、氧化芍药苷、芍药内酯苷、芍药苷、苯甲酰芍药苷质量分数范围分别为0.09%～0.27%、0.21%～0.35%、0.22%～2.50%、2.74%～5.63%、0.06%～0.28%。经方法学考察，各成分在线性关系良好（r²≥0.999 6），平均回收率为92.07%～100.70%。结论 建立的HPLC指纹图谱及多成分含量测定方法稳定、可靠，可为白芍药材的质量评价提供依据。]]> 2022/1/7 9:33:58 396true 目的 通过HPLC多成分含量测定与指纹图谱的多模式化学识别方法对北细辛Asarum heterotropoides var. mandshuricum进行不同产地质量分析研究，为北细辛药材质量评价提供参考。方法 收集了4个产区的18批细辛样品，采集HPLC指纹图谱并进行3种有效成分的含量测定，通过聚类分析（cluster analysis，CA）、主成分分析（principal component analysis，PCA）、正交偏最小二乘法判别分析（orthogonal partial least squares discriminant analysis，OPLS-DA）分别探讨不同产区北细辛的质量。结果 建立了北细辛药材的指纹图谱，确定共有峰17个，指认了3个共有峰。甲基丁香酚、芝麻脂素、细辛脂素的质量分数分别为1.76～32.98、1.03～6.05、1.59～6.91 mg/g。CA可将4个产地北细辛药材聚为2类，PCA结果提取了2个主成分，OPLS-DA能有效地将2大产区药材明显地区分开。结论 通过北细辛HPLC含量测定与指纹图谱建立的多模式识别法全面评价了北细辛的质量，为北细辛药材质量评价提供依据，可作为北细辛质量控制的有效方法。]]> 2022/1/7 9:33:59 395true 目的 建立厚朴Magnolia officinalis、凹叶厚朴M. officinalis var. biloba 2种基原厚朴药材的超高效液相色谱（UPLC）指纹图谱，为厚朴药材的质量控制提供参考。方法 采用UPLC法，色谱柱为Waters Acquity UPLC^®BEH C₁₈（100 mm×2.1 mm，1.7 μm）；流动相为乙腈-0.4%磷酸水溶液，梯度洗脱；体积流量为0.4 mL/min；波长294 nm；柱温30℃；进样量为1 μL。通过相似度评价、聚类分析（cluster analysis，HCA）、主成分分析（principal component analysis，PCA）、正交偏最小二乘法-判别式分析（orthogonal partial least squares method-discriminant analysis，OPLS-DA）和t检验对2种基原厚朴的指纹图谱进行评价。结果 厚朴、凹叶厚朴指纹图谱均具有9个共有峰，通过与对照品比对，指认出其中2个共有峰，分别为厚朴酚、和厚朴酚。13批厚朴指纹图谱与对照指纹图谱的相似度为0.907～0.993，6批凹叶厚朴与厚朴对照指纹图谱的相似度为0.770～0.895；CA将19批厚朴归为3类，并结合PCA和OPLS-DA发现4个差异性标志物，经t检验，2种基原厚朴4种差异性标志物的含量具有显著差异（P＜0.05）；凹叶厚朴中峰2、4、7代表的化学成分含量高于厚朴，而厚朴中和厚朴酚含量要高于凹叶厚朴。结论 该方法操作简单，专属性强，为2种基原厚朴药材的区分和质量控制提供参考。]]> 2022/1/7 9:33:59 394true 目的 建立一种高效、快速、准确地同步检测侵染三七Panax notoginseng的2种病毒——三七Y病毒（Panax notoginsengvirus Y，PnVY）和中国番茄黄化曲叶病毒（tomato yellow leaf curl China virus，TYLCCNV）的双重PCR技术。方法 分别以单一感染PnVY或TYLCCNV及复合侵染了这2种病毒的染病三七植株为样品，CTAB法提取叶片总核酸作为模板，根据GenBank上已登录的PnVY和TYLCCNV这2种病毒核酸序列设计特异性检测引物。通过单一PCR技术明确染病三七样品PnVY和TYLCCNV的发生情况，筛选出可用于一步法双重PCR检测PnVY和TYLCCNV的引物组合及引物浓度，并对反应条件进行优化。对扩增产物进行克隆测序，验证一步法双重PCR检测的准确性和特异性。结果 建立的一步法双重PCR检测技术能同步有效地检测三七病样中的PnVY和TYLCCNV，检测灵敏度高，最低检测限点为核酸原液的0.01稀释倍数，特异性强。结论 所建立的一步法双重PCR检测技术可以高效、快速、准确、特异地同步检测三七样品中的PnVY、TYLCCNV2种病毒。]]> 2022/12/23 16:52:29 393true 目的 采用传统形态鉴定方法结合DNA条形码分子检测技术对黄芪及混伪品种子进行鉴定。方法 收集黄芪及混伪品种子、市售黄芪种子样品共58份，利用体视显微镜和游标卡尺进行种子外观形态特征的观察和记录，测定千粒重；提取单粒种子的基因组DNA，PCR扩增、双向测序获得ITS2及psbA-trnH序列。使用邻接法（neighbor joining，NJ）构建系统发育树，kimura二参数（kimura two-parameter，K2P）模型计算遗传距离，进行物种鉴定分析。结果 黄芪及混伪品种子在颜色、形状、长、宽、厚度及千粒重等方面存在细微差别；ITS2的测序成功率为100%，黄芪种间最小遗传距离均大于种内最大遗传距离；ITS2序列构建的NJ系统进化树将蒙古黄芪A.mongholicus var. mongholicus聚为独立一支，并将蒙古黄芪Astragalus membranaceus、紫花苜蓿Medicago sativa、锦鸡儿Caragana sinica、蜀葵Althaea rosea及黄芪属其他物种分开，可进行黄芪及其混伪品种子的鉴定。基于外观形态和ITS2条形码序列鉴定发现12份市售黄芪种子中有1份为斜茎黄芪。结论 基于种子形态鉴定和ITS2条形码相结合的方法可以准确鉴定黄芪及混伪品种子，为规范黄芪种源及种植生产，进而保障黄芪药材质量提供科学依据。]]> 2022/12/23 16:52:30 392true 目的 基于RP-HPLC-DAD指纹图谱结合化学计量学方法，评价不同品种木豆Cajanus cajan叶质量特征的共有性和差异性，为木豆叶的质量评价提供科学依据。方法 通过RP-HPLC-DAD建立13个不同品种木豆叶的RP-HPLC-DAD指纹图谱，进行相似度分析（similarity analysis，SA），结合聚类分析（hierarchical cluster analysis，HCA）、主成分分析（principalcomponent analysis，PCA）和最小二乘判别分析（partial least squares discriminant analysis，PLS-DA）对木豆叶质量进行综合评价，并对样品中6种主要成分进行含量测定。结果 木豆叶RP-HPLC-DAD指纹图谱共标定13个共有峰，13个品种木豆叶的相似度均在0.90以上，通过HCA可将这13个品种的木豆叶分为5类。PCA与HCA结果基本一致，经过PCA分析发现S8的综合得分最高，质量最好，其次是S9和S12。PLS-DA与PCA结果基本一致，不同品种木豆叶的化学成分差异主要由7、10、6、9、11号5个色谱峰引起的。S8、S9和S12的含量处于前3，与PCA分析的综合得分一致。结论 指纹图谱结合HCA、PCA和PLS-DA可以全面的评价木豆叶质量，为木豆叶的质量控制提供全面的参考。]]> 2022/12/23 16:52:30 391true 目的 建立蒲公英的HPLC指纹图谱及多成分含量测定方法，优化指纹图谱测定条件，结合化学模式识别法对不同产地蒲公英进行质量评价，为蒲公英质量控制提供参考。方法 采用Box-Behnken响应面分析法优化蒲公英主要有效成分的制备工艺。采用Mars ODS-AQ色谱柱（250mm×4.6mm，5μm）；以甲醇-0.2%磷酸水溶液（35∶65）为流动相，等梯度洗脱；体积流量为1mL/min；检测波长323nm；进样量10μL；柱温30℃；检测时间为12min；对10个不同产地的30批蒲公英建立HPLC指纹图谱，并对5个成分含量进行测定，通过相似度评价、聚类分析及主成分分析对蒲公英质量进行评价。结果 蒲公英主要有效成分的最佳制备工艺为料液比1∶55、甲醇体积分数72%、超声温度80℃、超声时间79min，在此条件下OD值为0.93。建立了蒲公英HPLC指纹图谱，30批蒲公英的相似度在0.647～0.980，标定6个共有峰，指认出5个色谱峰。单咖啡酰酒石酸、绿原酸、咖啡酸、阿魏酸、菊苣酸质量分数分别为0.426%～1.856%、0.007%～0.117%、0.023%～0.101%、0.003%～0.025%、0.311%～1.412%。聚类分析将10个产地的蒲公英分为4类，主成分分析结果表明哈尔滨和沈阳产地的质量较优，并确定单咖啡酰酒石酸、绿原酸、咖啡酸和菊苣酸可作为蒲公英质量评价的主要指标。结论 确定了蒲公英主要有效成分最佳制备工艺，提取率远高于药典方法。建立的蒲公英指纹图谱结合多成分含量测定及化学模式识别法准确、高效、全面地评价蒲公英质量，为蒲公英的质量控制提供依据。]]> 2022/12/23 16:52:31 390true 目的 建立不同产地辣木Moringa oleifera叶药材和黄酮部位UPLC-Q-Exactive Orbitrap-MS指纹图谱和多成分定量方法，并进行化学计量学分析，为辣木叶药材和黄酮部位的质量控制提供参考。方法 采用UPLC-Q-Exactive Orbitrap-MS检测并结合“中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012A版）”建立15个不同批次辣木叶药材和黄酮部位（S1～S15）指纹图谱，并进行相似度评价和共有峰指认，测定3个黄酮类成分异牡荆素、异槲皮苷、紫云英苷含量。采用聚类分析（hierarchicalclustering analysis，HCA）、主成分分析（principal component analysis，PCA）、正交偏最小二乘法-判别分析（orthogonal partialleast-squares discrimination analysis，OPLS-DA）等化学计量学分析方法对15批不同产地辣木叶药材质量和黄酮部位进行评价。结果 15批不同产地辣木叶药材标定了17个共有峰，指认出其中14个共有峰；辣木叶黄酮部位标定和指认出10个共有峰。15批不同产地辣木叶和黄酮部位的相似度和HCA分析聚为4类，且HCA结果与相似度评价结果基本相一致；PCA、OPLS-DA分析聚为3类。15批药材中异牡荆素、异槲皮苷、紫云英苷的含量分别为0.06%～0.19%、0.27%～0.79%、0.08%～0.23%；黄酮部位中含量分别为0.53%～3.53%、6.49%～14.36%、2.05%～4.66%。结论 建立了专属性强、灵敏度高的不同产地辣木叶药材和辣木叶黄酮部位的定性定量方法，为辣木叶药材和辣木叶黄酮部位综合评价提供依据。]]> 2022/12/23 16:52:31 389true 目的 通过对不同产地的麦冬类药材及其混淆品进行系统的生药学研究，为不同产地的麦冬Ophiopogonjaponicus及其混淆品的鉴定提供科学依据。方法 采用性状鉴别法、常规显微鉴别法及偏振光显微鉴别法进行对比研究，结合大型图像拼接及实时景深扩展技术获取全息彩色影像数据，对麦冬的2种道地药材川麦冬、浙麦冬；山麦冬2个基原品种短葶山麦冬Liriope muscari，湖北麦冬L.spicata var. prolifera；及其他常见麦冬类药材混淆品种阔叶山麦冬L.platyphylla、金边阔叶麦冬L.platyphylla var. variegata共32批次药材进行系统的性状及显微鉴别研究。结果 性状鉴别从麦冬类药材及其混淆品外观、质地、长度/直径比例及横断面能将基本区分6种麦冬类药材及其混淆品；横断面显微首次获取全息彩色影像数据，木化部位及草酸钙针晶在偏振光下具有清晰可辨的识别度，麦冬类药材及其混淆品中柱部分中柱比（中柱直径与横断面直径的比值）、石细胞层数、韧皮部束个数、木质部导管层数差异较大；粉末显微草酸钙结晶长度、石细胞璧厚度及内皮层直径具有微小差异。结论 该方法简便易行，能快速鉴别麦冬类药材及其混淆品种。]]> 2022/12/23 16:52:32 388true 目的 利用生信技术分析秦艽WRKY家族，为进一步研究GmWRKY转录因子对秦艽次生代谢产物生物合成的分子调控机制提供信息。方法 基于秦艽转录组注释结果挖掘WRKY家族成员，通过NCBI-tBlastx和SMART保守结构域预测进一步筛选得到41条WRKY序列并进行生信分析。基于getorf预测开放阅读框（open reading frame，ORF）区，对41条序列的ORF片段进行MEME保守基序分析和ClustalW比对，采用MEGAX构建邻接法（neighbor-joining，NJ）系统发育树。利用Omicshare GO对41个WRKY成员进行富集分析，利用String进行WRKY成员蛋白互作网络预测分析。通过转录组FPKM值对GmWRKY成员的基因表达情况进行热图分析，并对蛋白互作核心成员进行基因相对表达分析。结果 41个秦艽WRKY成员中大部分成员的保守基序为“WRKYGQK”，仅GmWRKY27保守基序发生氨基酸突变，为“WRKYGKK”。依据WRKY特征结构域将41条序列的51个结构域分为3大类和8个亚类型，第I大类为氮端（N）和碳端（C），第II大类下设5个亚类型，以及第III大类；此外，系统进化树可将51个WRKY结构域分成4大组，GroupI[I(N)]、GroupII（IIa＋IIb）、GroupIII[I(C)＋IIc]、GroupIV（IId＋IIe和III），该结果与经典的WRKY家族分类特点基本一致。GO分析发现秦艽WRKY家族成员广泛参与代谢调控过程。当茉莉酸甲酯（jasmonic acid methyl ester，MeJA）诱导秦艽后，蛋白网络互作的核心成员GmWRKY1和GmWRKY17表达显著提高，推测这些WRKY成员与秦艽次生代谢产物的调控关系密切。结论 为进一步开展秦艽WRKY转录因子功能研究奠定基础。]]> 2022/12/6 17:32:53 387true 目的 明确刺柏属圆柏Juniperus chinensis、垂枝香柏J.pingii、昆明柏J.gaussenii和铺地柏J.procumbens4种药用植物叶绿体基因组密码子的使用偏好性及影响其密码子偏好性的因素。方法 利用CodonW、CUSP、SPSS等软件对4种刺柏属药用植物叶绿体基因组密码子偏好性进行分析。结果4种刺柏属药用植物叶绿体基因组密码子的GC含量在35.8%～37.3%，有效密码子数（effective number of codon，ENC）值在47.10～47.79，表明其密码子偏好性较弱。中性绘图、ENC-plot、PR2-plot分析表明影响4种刺柏属药用植物叶绿体基因组密码子使用偏性的因素有选择和突变。同时利用相对同义密码子使用度（relative synonymous codon usage，RSCU）值和ENC值筛选出共65个最优密码子，其中有9个密码子为4种刺柏属植物共有的最优密码子。结论 4种刺柏属药用植物密码子偏好使用A/T结尾，其密码子使用偏性主要受到自然选择的影响。通过对4种刺柏属植物叶绿体基因组密码子的使用偏性进行分析及外类群聚类分析验证，揭示影响其密码子使用偏性的主要因素，为后续刺柏属叶绿体基因组外源蛋白表达载体的构建及优化提供理论依据。]]> 2022/12/6 17:32:53 386true 目的 采用近红外光谱分析技术建立干姜中多指标成分含量快速预测方法，对不同产地干姜进行快速无损的质量评价，提高干姜的质量控制水平。方法 建立同时测定干姜中6-姜酚、8-姜酚、10-姜酚和6-姜烯酚等4个主要活性成分的超高效液相色谱方法，并以其测定值为参比；采集不同产地干姜的近红外光谱，比较筛选出最优的光谱预处理方法，采用联合区间偏最小二乘法优选出最佳光谱区间，构建干姜各指标成分的最优偏最小二乘回归（partial least squares regression，PLSR）定量模型。结果建立的干姜中6-姜酚、8-姜酚、10-姜酚和6-姜烯酚最佳PLSR定量模型的校正决定系数（R_C²）分别为0.973、0.980、0.979和0.938，预测决定系数（R_P²）分别为0.926、0.920、0.883和0.781，4个定量模型的预测相对分析误差（residual predictive deviation,RPD）均大于2，表明建立的近红外光谱定量模型的预测值与测定值具有良好的线性关系，模型预测效果良好。结论 所建立近红外光谱定量模型，可以实现干姜中6-姜酚、8-姜酚、10-姜酚和6-姜烯酚等4个主要活性成分含量的快速预测，方法简便快捷，结果准确可靠，可为干姜质量的快速评价提供依据。]]> 2022/12/6 17:32:53 385true 目的 研究不同基原小檗皮药材（甘肃小檗Berberidis kansuensis Schneid.、鲜黄小檗B.diaphana Maxim.、匙叶小檗B.vernae Schneid.和刺红珠B.dictyophylla Franch.）的整体化学成分差异，筛选品种鉴别的指标性成分。方法 采用超高效液相色谱-串联四级杆静电场轨道阱质谱（UPLC-Q-Exactive Orbitrap MS）代谢组学技术，分析不同基原小檗皮药材的整体化学成分，结合主成分分析（principal component analysis，PCA）、偏最小二乘判别分析（partial least-squares discrimination analysis，PLS-DA）和方差分析筛选不同基原鉴别的化学标志物。结果 共鉴定了47个化学成分，包括24个生物碱类、12个有机酸类及其衍生物、5个糖类及其衍生物，以及6个其他类成分。筛选出药根碱、四氢巴马汀、蟾毒色胺内盐等12个化学标志物。结论 UPLC-Q-Exactive Orbitrap MS代谢组学技术结合化学计量学方法，可有效阐明小檗皮不同基原药材的化学成分差异，为其品种鉴别和质量控制提供了参考依据。]]> 2022/12/6 17:32:53 384true 目的 为艾Artemisia argyi叶及腺毛的显微鉴定和品质评价提供可靠的实验数据。方法 利用荧光显微镜和扫描电子显微镜对艾叶进行显微和组织化学研究。结果 艾叶上、下表面均分布有腺毛和非腺毛。腺毛由2列细胞构成，其头部由4或6个细胞对叠而成，柄部和基部各由2个细胞构成；非腺毛均为T形，柄由2～5个细胞构成，按照顶细胞特点将T形非腺毛分为2种：一种顶细胞呈长梭形而弯曲（I型）；另一种顶细胞呈细丝状，极长、扁平且扭曲（II型）。草酸钙簇晶直径3～40μm，多存在于叶肉细胞中；上表面气孔稀少，下表面气孔多，气孔为不定式；上、下表皮细胞的垂周壁均为波状弯曲。常见螺纹导管，偶见环纹、梯纹、网纹和孔纹导管。组织化学研究显示，腺毛有挥发油、萜类、黄酮类等成分。结论为下一版《中国药典》艾叶显微鉴定相关内容的修订和完善提供了重要参考依据。]]> 2022/12/6 17:32:53 383true 目的 以红花变豆菜Sanicula rubriflora新鲜叶片为试验材料,通过高通量测序手段,对其叶绿体基因组进行组装和序列特征分析,为进一步开展变豆菜属植物的进化和遗传发育提供指导方法。方法 实验流程按照Illumina公司提供的标准操作流程执行,包括样品质量检测、文库构建、文库质量检测和文库测序等流程,使用已报道的变豆菜Sanicula chinensis的叶绿体基因组作为参考序列,得到红花变豆菜完整的叶绿体基因组序列并对其进行组装、特征序列分析和进化分析。结果 红花变豆菜叶绿体基因组具有典型的环状四分体结构,长度155700bp,包括1个大的单拷贝区(large single copy,LSC,85979bp),1个小的单拷贝区(small single copy,SSC,17053bp),1对相反的序列(inverted repeats sequence,IR,26333bp);共注释到130个基因,其中蛋白编码的基因86个,tRNA基因36个,rRNA基因8个,AT含量占叶绿体基因组的61.83%;共检测到1个正向长重复序列(forward repeat sequence),3个回文长重复序列(palindromic repeat sequence);此外,还检测到了168个简单重复序列(simple sequence repeats,SSR)位点;与蛋白编码基因对应的密码子偏好使用A/T碱基,编码异亮氨酸的密码子(I)使用次数最高,编码半胱氨酸的密码子(C)使用次数最低;最后与7种已报道的伞形科植物叶绿体基因组和2个外类群物种通过最大似然法(maximum likelihood,ML)构建系统发育树,发现红花变豆菜与变豆菜和直刺变豆菜亲缘关系最为密切。结论 红花变豆菜的叶绿体基因组数据为伞形科植物研究提供了更为详细完善的资料,为该物种叶绿体基因工程和系统进化分析提供参考依据。]]> 2022/11/17 12:49:26 382true 目的 以洋金花Datura metel和木本曼陀罗Brugmansia arborea为材料,分析其叶绿体基因组结构和特征,基于叶绿体组数据探讨洋金花和木本曼陀罗及茄科其他物种的系统发育关系。方法 利用华大MGISEQ-2000PE150测序平台,双末端测序策略对基因组DNA建库测序,用NOVOPlasty组装叶绿体基因组,采用最大似然法(maximum likelihood,ML)构建系统进化树。结果 洋金花和木本曼陀罗的叶绿体基因组全长为155934bp和155939bp,分别包含131和130个基因,GC值32.3%,具有典型的四分区域结构,包括1个大单拷贝区(large single copy,LSC)、1对反向重复区(inverted repeats,IR)和1个小单拷贝区(small single copy,SSC),各区域序列长度分别为86354、86278、25609、25720、18362、18221bp。系统发育分析表明,洋金花与曼陀罗属的曼陀罗构成1单系分支,具有100%支持率,而木本曼陀罗属与曼陀罗属构成单系分支,具有100%支持率。结论 结果支持洋金花隶属于曼陀罗属,与曼陀罗亲缘关系较近,木本的木曼陀罗属从曼陀罗属分出,独立为一个属。洋金花和木本曼陀罗叶绿体基因组信息为后期分子鉴定和群体遗传研究奠定基础。]]> 2022/11/17 12:49:26 381true 目的 通过分析吉林产10种黄芪属植物的ITS2、matk、rbcL、psbA条形码序列,为黄芪属植物的物种分类鉴定及其亲缘关系提供理论依据。方法 共收集30份样品,以ITS2、matk、rbcL和psbA作为条形码序列,对黄芪属10种植物提取基因组DNA、PCR扩增并进行双向测序。所得序列结果经校正处理后,并对其进行聚类分析。结果 ITS2、matk、rbcL和psbA4种片段,单独的每一种片段并不能将10种植物全部鉴别出来,只能鉴别出部分植物,即蒙古黄芪A.membranceus var.mongholicus、扁茎黄芪A.complanatus、糙叶黄芪A.scaberrimus、华黄芪A.chinensis、草木樨黄芪A.melilotoides、细叶黄芪A.angustissimus、兴安黄芪A.dahuricus、新巴黄芪A.hsinbaticus;由聚类分析结果可知,以锦鸡儿Caragana sinica为外类群,10种植物中,华黄芪为单独1支,细叶黄芪与扁茎黄芪聚为1支,糙叶黄芪、斜茎黄芪与新巴黄芪聚为1支,膜荚黄芪A.membranceu、蒙古黄芪与草木樨黄芪聚为1支,并且这3者与兴安黄芪关系较近。结论 ITS2+rbcL+psbA组合可以将8种黄芪属植物鉴别出来。聚类分析结果显示10种黄芪属植物被划分为5支,该聚类分析结果与《中国植物志》中10种黄芪属植物的传统分类相一致。]]> 2022/11/17 12:49:26 380true 目的 建立4个产地21批杜仲Eucommia ulmoides雄花的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,为杜仲雄花的质量控制提供参考。方法 采用HPLC法,色谱柱为Agilent HC-C18色谱柱(250mm×4.6mm,5.0μm);流动相为乙腈-0.1%甲酸水溶液;梯度洗脱;体积流量0.8mL/min;柱温35℃;程序变化波长;进样量20μL。通过相似度评价、偏最小二乘法分析(partial least squares discriminant analysis,PLS-DA)、系统聚类分析(hierarchical cluster analysis,HCA)以及气候因子相关性分析等对杜仲雄花指纹图谱进行分析评价。结果 建立4个产地杜仲雄花HPLC指纹图谱,共标定15个共有峰,指认出其中6个色谱峰,分别为桃叶珊瑚苷、京尼平苷酸、绿原酸、京尼平苷、芦丁、槲皮素;21批杜仲雄花指纹图谱与对照图谱的相似度为0.911~0.989;PLS-DA分析表明不同产地杜仲雄花样品具有一定差异,根据变量投影重要性(variable importance in the projection,VIP)筛选出7个差异性成分;差异性成分峰面积结合气候因子的相关性分析结果<显示9号峰峰面积与3、4月平均最低气温呈显著正相关,15号峰槲皮素峰面积与3月平均降水天数呈显著负相关,其余差异性成分与气候因子未呈现出明显的相关性。结论 该方法可应用于杜仲雄花的质量评价,为杜仲雄花质量控制与资源开发提供参考。]]> 2022/11/17 12:49:26 379true 目的 建立当归Angelica sinensis和欧当归Levisticum officinal药材的指纹图谱,结合化学计量学方法寻找二者的成分差异,从而为建立欧当归掺伪当归的鉴别方法提供依据。方法 采用UPLC法建立指纹图谱,色谱柱为Waters CortecsT3柱(100mm×2.1mm,1.6μm);流动相为0.1%甲酸乙腈溶液-0.1%甲酸水溶液,梯度洗脱;体积流量为0.4mL/min;柱温35℃;检测波长为210nm。采用相似度评价、主成分分析(principal component analysis,PCA)和层次聚类分析(hierarchical cluster analysis,HCA)对2种药材的指纹图谱进行评价,寻找2者的成分差异。采用UPLC-MS/MS及NMR波谱等技术对主要差异性成分进行鉴定。结果 从当归和欧当归指纹图谱中分别识别出23个和19个共有峰,与当归指纹图谱共有模式相比,当归样品组内有3批样品相似度较低,为0.59~0.80,其余样品相似度均大于0.99,而欧当归与之相比,相似度在0.53~0.94,且组内差异较大。PCA和HCA结果显示,当归和欧当归可明显分为2组,对区分贡献较大的色谱峰有6个,鉴定为色氨酸、阿魏酸、E-藁本内酯、欧当归内酯A异构体、绿原酸和法卡林二醇,其中后2种成分在欧当归中含量较高,其余成分在当归中含量较高。结论 建立的UPLC指纹图谱结合化学计量学评价方法,简便可行,可有效区分当归和欧当归并揭示其差异性成分,为当归的质量控制及掺伪欧当归鉴别方法<建立提供依据。同时首次从欧当归中分离得到法卡林二醇,该化合物为欧当归区别于当归的主要成分。]]> 2022/11/17 12:49:26 378true 目的 从匙叶翼首草Pterocephalus hookeri转录组中挖掘参与三萜合成的鲨烯合酶（squalene synthase，SQS）并研究其作用机制。方法 以翼首草基原植物匙叶翼首草为研究对象，基于前期转录组数据筛选克隆PhSQS2基因，并进行生物信息学分析；通过烟草瞬时转化实验观察PhSQS2亚细胞定位情况，利用实时荧光定量PCR分析PhSQS2在不同器官中的表达特征；构建原核表达载体经体外酶促反应鉴定PhSQS2功能。结果 PhSQS2基因开放阅读框（open reading frame，ORF）区域全长1242 bp编码414个氨基酸，蛋白相对分子质量为47 400，理论等电点为6.57，总平均疏水性为-0.075，为不稳定蛋白。PhSQS2主要定位在细胞核和细胞质中；组织分布具有特异性，在根和叶中均有表达，叶中表达量显著高于根中。体外酶促实验证明PhSQS2催化法尼基焦磷酸生成鲨烯。结论 PhSQS2的功能鉴定为解析翼首草中萜类物质生物合成途径，提高三萜皂苷类成分含量及优质种质资源筛选培育提供了前期理论基础。]]> 2022/11/1 18:31:38 377true 目的 基于三七根转录组数据库，克隆三七皂苷合成关键酶细胞色素P450（cytochrome P450，CYP450）基因，对其进行生物信息学分析，明确其对丛枝菌根真菌（arbuscular mycorrhizal fungi，AMF）诱导的响应，为进一步研究其催化特性奠定基础。方法 基因PnCyp450_3开放阅读框（open reading frame，ORF）克隆及克隆载体构建依据相应试剂盒说明书，通过化学转化法及氨苄青霉素抗性标记筛选阳性克隆。利用各种在线工具或软件完成生物信息学分析及系统发育树构建；基因表达特性分析采用实时荧光定量（real-time fluorescence quantitative，qPCR）技术。结果 成功克隆了1个三七细胞色素P450超家族基因PnCyp450_3，其ORF全长1617 bp，编码538个氨基酸，预测蛋白相对分子质量为59 690，等电点（pI）为8.50，含有5个保守结构域。组织表达特性结果显示，在主根、须根部位，PnCyp450_3均可响应根内球囊霉（Glomus intraradices）的诱导而显著上调表达（P<0.05），其中主根相对表达量最高（1.85倍），须根次之（1.22倍）。结论 PnCyp450_3是一个编码538个氨基酸的CYP450超家族基因，在主根、须根中均可响应根内球囊霉的诱导而显著上调表达，为深入研究三七皂苷合成关键酶基因响应生物因子诱导的调控机制提供了数据支持，具有重要的参考价值。]]> 2022/11/1 18:31:38 376true 目的 利用DNA条形码内转录间隔区2（internal transcribed spacer 2，ITS2）序列针对自采及流通使用环节的不同基原兔耳草进行分析，建立一种快速鉴定常用兔耳草的方法，并分析市场流通的主流品种。方法 采用试剂盒提取101份兔耳草样品的DNA，针对其ITS2片段进行PCR扩增并双向测序，获取ITS2序列信息；并从GenBank上下载相关序列28条。运用MEGA6.0对129条ITS2序列进行比对分析，计算种内和种间K2P遗传距离，构建邻接法（neighbor-joining，NJ）系统进化树，并预测ITS2二级结构。采用BLAST法及NJ聚类分析法分析市场流通兔耳草基原。结果 除四川部分区域所产全缘兔耳草Lagotis integra与革叶兔耳草L.alutacea种间亲缘关系近外，短筒兔耳草L.brevituba、全缘兔耳草、圆穗兔耳草L.ramalana、革叶兔耳草、短穗兔耳草L.brachystachya及紫叶兔耳草L.praecox的种内最大遗传距离均小于种间最小遗传距离，具有明显的条形码间距。系统进化树显示短筒兔耳草、圆穗兔耳草、短穗兔耳草及紫叶兔耳草单独聚为一支，四川部分区域所产全缘兔耳草与革叶兔耳草聚为一支，其余全缘兔耳草聚为一支。通过ITS2二级结构发现，各基原兔耳草在茎环数目、大小及位置均有一定差异，可区分亲缘关系近的全缘兔耳草与革叶兔耳草。市场分析显示，市面上流通的兔耳草有6种基原，以全缘兔耳草使用占比最高，短筒兔耳草次之，短穗兔耳草及圆穗兔耳草较低，紫叶兔耳草及革叶兔耳草最低。结论 ITS2序列可以作为DNA条形码用来鉴别常用藏药兔耳草的基原，市场主流兔耳草品种为全缘兔耳草、短筒兔耳草及短穗兔耳草。]]> 2022/11/1 18:31:38 375true 目的 研究黄精Polygonati Rhizoma居群遗传多样性，为黄精药材资源保护和新品种培育提供依据。方法 以4个居群22个种源47份黄精种质资源为材料，选用14条ISSR和11对SRAP分子标记进行多态性检测、遗传多样性比较和聚类分析，揭示黄精种质的遗传多样性及地理分布特征。结果 ISSR引物和SRAP引物分别扩增出186和142条清晰带数，其中多态性条带数分别为185和140，多态性比率（percentage of polymorphic bands，PPB）分别为99.46%和98.59%；遗传多样性分析显示，ISSR和SRAP标记下基因分化系数（G_st）分别为0.279 9和0.231 6，即黄精遗传变异主要发生在种群内，居群间基因流（N_m）分别为1.286 4和1.659 3，遗传相似系数在0.053 3~0.948 1和0.032 8~0.967 7。聚类结果显示，相同黄精药材基原种质聚在一起，ISSR和SRAP标记分别将黄精居群分为5和3大类群，且以ISSR标记的聚类结果更符合实际地域分布。结论 黄精种质遗传多样性丰富，ISSR和SRAP标记可适用于黄精亲缘性鉴定，研究结果可为黄精资源的保护和育种提供一定参考。]]> 2022/11/1 18:31:38 374true 目的 探索外源过氧化氢（hydrogen peroxide，H₂O₂）预处理对垂盆草Sedum sarmentosum抗逆性及药材产量和品质的影响，为逆境信号物质诱导药材高产优质的栽培模式提供依据。方法 垂盆草叶面喷施不同浓度（0、1、10、100 mmol/L） H₂O₂后经历自然低温，收获时测定生长指标、生物量、多种黄酮类成分含量及多种体外抗氧化能力。结果 在低温条件下，喷施H₂O₂均显著提高垂盆草最大分枝长、叶片层数、分枝数、生物量、多种黄酮类成分含量以及体外抗氧化能力。随外源H₂O₂浓度提高，垂盆草叶片层数、分枝数、新生芽数、生物量及过氧化物酶（peroxidase，POD）酶活性呈下降趋势，而超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）、过氧化氢酶（catalase，CAT）酶活性及丙二醛（malondialdehyde，MDA）含量呈上升趋势。1、10 mmol/L H₂O₂处理的生物量分别比对照提高209.38%和87.50%。总黄酮、总酚酸含量以及槲皮素、山柰酚、异鼠李素含量均以10 mmol/L H₂O₂处理最高，比对照提高16.67%~37.84%，1 mmol/L H₂O₂处理次之。1 mmol/L H₂O₂处理垂盆草1，1-二苯基-2-三硝基苯肼（1，1-diphenyl-2-picrylhydrazyl，DPPH）和2，2'-联氮-双（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）二铵盐[2，2'-azino-bis （3-ehtylbenzothiazolin-6-sulfnic acid），ABTS]自由基清除能力最强，而羟基自由基清除能力和抗脂质过氧化能力以10 mmol/L H₂O₂处理最强。结论 在低温条件下H₂O₂预处理有利于提高垂盆草抗寒性及药材产量和品质；综合比较生物量及活性成分含量，1或10 mmol/L H₂O₂预处理利于提高垂盆草抗寒性，高产优质兼得。]]> 2022/11/1 18:31:38 373true 目的 测定槐角炮制前后的超高效液相色谱（UPLC）特征图谱和色度值，结合不同模式识别方法比较槐角炮制前后的差异性，为槐角和蜜槐角的质量控制及评价提供参考。方法 采用UPLC法对槐角炮制前后样品进行测定，按《中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012版）》对色谱图进行匹配生成槐角炮制前后的UPLC特征图谱，并对炮制前后的色度值（L、a、b）进行测定，通过相似度分析、对照品比对、方差分析、聚类分析、主成分分析（principal component analysis，PCA）和正交偏最小二乘判别分析（orthogonal partial least squares discriminant analysis，OPLS-DA）对槐角炮制前后进行多模式识别研究。结果 建立了槐角炮制前后的UPLC特征图谱，槐角和蜜槐角分别确定了23、24个共有峰，指认2、15、16、20、21号峰为没食子酸、芦丁、染料木苷、槲皮苷、槐角苷，炮制后新增成分24号峰为5-羟甲基糠醛；相似度分析结果显示槐角炮制前后相似度均大于0.98，聚类分析结果显示槐角炮制前后区分不明显，PCA可以将槐角和蜜槐角大致分为2类，OPLS-DA分析可将槐角和蜜槐角明显区分为2类，且结果显示1、2、10、22、23、24号峰是引起槐角和蜜槐角间成分差异的主要标志性成分，与方差分析结果一致；色度值ΔE范围为5~13，炮制前后色差可被肉眼识别。结论 建立的多指标特征图谱和色度值鉴别方法对槐角药材及其炮制品的质量控制及整体性评价具有重要意义。]]> 2022/11/1 18:31:38 372true 目的 龙脑基二磷酸合酶(bornyl diphosphate synthase,BPPS)是砂仁药效萜类合成途径中的关键酶,获得海南砂AlBPPS的启动子并与阳春砂AvBPPS启动子进行调控元件和瞬时表达的比较,以期解析AvBPPS在种子中高表达的分子机制。方法 通过FPNI-PCR的方法从海南砂gDNA中克隆AlBPPS的启动子,并与阳春砂AvBPPS启动子进行序列比较,对启动子相似区域进行截短,获得其相应的截短片段;对AvBPPS启动子截短片段中的GCN4-motif进行突变;构建由上述启动子驱动β-葡萄糖苷酸酶基因(β-glucuro-nidase gene,GUS)的重组表达载体,利用农杆菌介导法注射侵染本氏烟草叶片进行瞬时表达,验证启动子的活性和GCN4-motif的功能。结果 克隆获得365 bp的AlBPPS启动子序列,3'端约300 bp的序列与AvBPPS启动子的相应序列相似度高达93%,但AlBPPS启动子不含有AvBPPS启动子的GCN4-motif。构建成功与GUS报告基因融合的系列启动子重组载体——VBP∷GUS(AvBPPS启动子全长)、VBPT∷GUS(AvBPPS启动子截短至320 bp)、VBPT-GM∷GUS(截短AvBPPS启动子且突变GCN4-motif)和LBP∷GUS(AlBPPS启动子全长)、LBPT∷GUS(AlBPPS启动子截短至305 bp)。通过GUS染色发现虽然上述启动子均具有驱动GUS基因转录的活性,然而,含有GCN4-motif的启动子,包括全长或截短的AvBPPS启动子(VBP∷GUS和VBPT∷GUS)的活性均高于GCN4-motif突变(VBPT-GM∷GUS)或无GCN4-motif的启动子(LBP∷GUS和LBPT∷GUS)。结论 GCN4-motif对基因转录具有正调控作用,为进一步探究AvBPPS启动子的调控机制奠定了基础。]]> 2022/10/9 15:42:52 371true 目的 基于ITS2和rbcL序列对来自不同地理环境的缘毛紫菀Aster souliei及狭苞紫菀A. farreri进行分子鉴定。方法 以ITS2和rbcL的特异性引物,扩增缘毛紫菀及狭苞紫菀的ITS2和rbcL的序列并测定,运用MEGA7.0软件进行多重比对分析和种间种内遗传距离分析,构建邻接法(neigbor-joining,NJ)系统发育树。结果 ITS2序列在缘毛紫菀及狭苞紫菀的变异位点较rbcL序列丰富,且种间与种内的变异位点数无交叉;ITS2序列的NJ树可将缘毛紫菀及狭苞紫菀样品进行有效区分,而rbcL序列构建的系统发育树无法使缘毛紫菀及狭苞紫菀样品得到有效的区分;ITS2及rbcL序列的遗传距离结果显示缘毛紫菀之间的遗传距离很近,而狭苞紫菀之间的遗传距离较远。结论 ITS2较rbcL序列更适合用于不同产地的缘毛紫菀及狭苞紫菀样品的鉴定;狭苞紫菀的种内差异较大。]]> 2022/10/9 15:42:52 370true 目的 研究山茱萸Cornus officinalis CoHMGR基因编码蛋白质的亚细胞定位以及不同浓度的外源激素对CoHMGR基因表达和活性成分含量的影响。方法 农杆菌菌液侵染烟草叶片,激光共聚焦倒置显微镜观察CoHMGR蛋白的亚细胞定位。不同浓度的茉莉酸甲酯和乙烯利喷施山茱萸2年生幼苗,实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)测定不同时期CoHMGR基因表达水平,高效液相色谱(HPLC)检测莫诺苷、马钱苷含量。结果 激光共聚焦显微镜下观察到CoHMGR蛋白定位于内质网中。qPCR和HPLC结果显示200 μmol/L茉莉酸甲酯和250 mg/L乙烯利对目的基因表达水平和活性成分含量都有正向诱导效应。结论 CoHMGR蛋白定位于内质网,外源喷施200 μmol/L茉莉酸甲酯和250 mg/L乙烯利能显著提高CoHMGR基因表达量和莫诺苷、马钱苷含量,为深入解析CoHMGR基因功能奠定基础。]]> 2022/10/9 15:42:52 369true 目的 建立一测多评法测定半夏Pinellia ternate及其混伪品天南星Arisaema erubescens、水半夏Typhonium flagelliforme和虎掌南星Pinellia pedatisecta中尿苷、腺嘌呤、鸟苷及腺苷的含量方法。方法 利用高效液相色谱法,采用Shim-pack Scepter C₁₈-120色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相10%乙腈-水,梯度洗脱;体积流量1 mL/min;检测波长260 nm;柱温20℃。以腺苷为内标,建立尿苷、腺嘌呤和鸟苷的相对校正因子,同时采用外标法和一测多评法测定多批次药材中4种成分的含量,验证一测多评法的准确性和可行性。结果 尿苷、腺嘌呤、鸟苷及腺苷在各自线性范围内线性关系良好(r>0.999 9),平均加样回收率95.40%~104.02%,一测多评法和外标法测得的含量无显著差异(RSD<3%),不同产地的半夏中4种核苷含量显示有明显差异。除天南星外,基于核苷的含量测定结果结合化学计量分析可以很好地区分半夏、水半夏和虎掌南星。结论 该方法简便准确度高,可为半夏的质量控制和评价提供参考。]]> 2022/10/9 15:42:52 368true 目的 建立当归Angelicae sinensis的HPLC指纹图谱并测定其主要有效成分的含量,结合多种化学计量学分析,确定不同产地不同品种(岷归1号、岷归2号)当归差异成分,为当归药材质量控制提供参考。方法 采用HPLC法建立不同品种当归的指纹图谱,并对指标成分进行含量测定。采用相似度评价、聚类分析(cluster analysis,CA)、因子分析、主成分分析(principal component analysis,PCA)、正交偏最小二乘法判别分析(orthogonal partial least squares discriminant analysis,OPLS-DA)、Fisher线性判别分析进行数据分析。结果 HPLC指纹图谱共标定了不同品种当归中的16个共有峰,指认出绿原酸、阿魏酸、洋川芎内酯I、洋川芎内酯H、洋川芎内酯A、阿魏酸松柏酯、藁本内酯、丁烯基苯酞8个色谱峰。岷县产区当归的2个品种当归间存在差异的成分是绿原酸(P<0.01)、洋川芎内酯I(P<0.01)、洋川芎内酯H(P<0.01)、藁本内酯(P<0.01)和丁烯基苯酞(P<0.05),渭源产区的是洋川芎内酯I(P<0.01)、洋川芎内酯H(P<0.01)、洋川芎内酯A(P<0.01)、藁本内酯(P<0.01);临洮产区的是绿原酸(P<0.01)、阿魏酸(P<0.01)、阿魏酸松柏酯(P<0.01)、丁烯基苯酞(P<0.05);通渭产区的是阿魏酸(P<0.01)、洋川芎内酯H(P<0.05)、洋川芎内酯A(P<0.05)、藁本内酯(P<0.01)。结论 建立的HPLC指纹图谱结合含量测定、CA、因子分析、PCA、OPLS-DA分析可以客观、全面、有效地确定不同产地不同品种当归中主要有效成分的差异,可为当归品种鉴别及质量控制提供有力支撑。]]> 2022/10/9 15:42:53 367true 目的 应用ITS2和psbA-trnH条形码鉴定金线兰Anoectochilus roxburghii及其近缘种。方法 提取金线兰及其近缘种的DNA，对ITS2和psbA-trnH序列进行扩增和测序，计算物种种内、种间遗传距离，构建邻接法（neighbor-joining，NJ）系统聚类树直观反映鉴定结果。结果 经PCR扩增后测序，金线兰及其近缘种ITS2序列长度为250～254 bp，GC含量为48.2%～51.6%；psbA-trnH序列长度为636～704 bp，GC含量为31.8%～32.0%。根据K2P遗传距离计算，金线兰的种内遗传距离明显小于种间遗传距离。基于ITS2序列构建的NJ树结果显示，除长片金线兰A.longilobus外，金线兰与其余混伪品可以明显区分。基于psb A-trnH序列构建的NJ树结果显示，除长片金线兰和丽蕾金线兰A.lylei外，金线兰与其余金线兰属近缘种可以明显区分。结论 ITS2和psb A-trnH序列可以鉴别金线兰与其遗传距离较远的近缘种。]]> 2022/9/21 8:59:32 366true 目的 对杜仲TCP（teosinte branched 1/cycloidea/proliferating）基因家族进行筛选分析，以期为EuTCPs基因功能深入研究奠定基础。方法 以杜仲基因组数据库为基础，通过生物信息学系统分析TCP基因家族的理化性质、系统进化、基因结构、启动子顺式作用元件及其在杜仲叶片发育及胶形成中的表达水平。结果 从杜仲基因组中共鉴定到14个EuTCPs，氨基酸数目介于139～492，理论等电点分布在5.54～9.72，相对分子质量区域为18 880～53 620，亚细胞定位预测在细胞核中，均为亲水性蛋白。系统进化分为PCF、CIN和CYC/TB1 3个亚家族，分别包含5、6、3个EuTCPs蛋白。表达模式分析显示，EuTCPs在杜仲叶片不同发育时期存在显著差异，每个发育时期EuTCPs表达量各不相同，EuTCPs正调控杜仲胶的形成。结论 杜仲中TCP家族包含14个成员，各成员的分子特征和组织表达特异性存在差异，EuTCPs可能参与杜仲叶片发育及杜仲胶的形成。]]> 2022/9/21 8:59:33 365true 目的 以药用植物红花Carthamus tinctorius为研究对象，克隆光信号途径关键转录因子HY5基因，并对其进行生物信息学和表达模式分析，为红花HY5基因的功能研究提供参考。方法 以红花转录数据为参考，设计引物，采用PCR扩增方法从红花中克隆得到HY5的全长cDNA和DNA序列。运用生物信息学方法对该基因进行分析，预测编码蛋白的结构与功能，并通过荧光定量PCR方法检测CtHY5基因在红花不同组织及花发育不同时期的表达情况。结果 CtHY5基因的cDNA全长为462 bp，编码153个氨基酸，DNA全长为1941 bp，包含4个外显子和3个内含子。生物信息学分析表明，CtHY5为亲水性蛋白，定位于细胞核中。系统进化树及模体结构分析结果表明CtHY5与来自菊科的刺菜蓟、黄花蒿、薇甘菊、向日葵、莴苣中的HY5进化关系较近。定量分析表明，在白色红花和红色红花中，CtHY5基因均在花中表达量最高，其次为茎和苞片，在根中表达量最低。此外，除了根外，CtHY5基因在白色红花各组织中的表达量要明显高于红色红花。结论 首次从红花中克隆得到了光信号途径关键转录因子CtHY5基因，并研究了该基因在不同花色红花品系中的表达模式，为进一步研究其生物学功能奠定了基础。]]> 2022/9/21 8:59:33 364true 目的 研究NaCl胁迫下掌叶大黄Rheum palmatum、唐古特大黄R.tanguticum和药用大黄R.officinale种子萌发及幼苗生长特性及赤霉素（GA3）引发对盐胁迫下种子萌发及幼苗发育的影响。方法 设置0、100、150、200、250 mmol/L NaCl胁迫，200、250 mg/L GA3拌种或浸种实验，双层滤纸培养法分析盐胁迫下3种大黄种子萌发及幼苗生长指标。结果 3种大黄种子发芽率随NaCl浓度增加直线下降、盐相对伤害率直线上升（P＜0.05），子叶长、胚轴长、根长和苗长等受到强烈抑制（P＜0.05）。200 mmol/L NaCl下GA3拌种或浸种能显著提高掌叶大黄种子发芽率（P＜0.05），250 mmol/LNaCl下仅GA3拌种有作用（P＜0.05）；200 mmol/L NaCl下2个质量浓度GA3拌种、低质量浓度浸种提高唐古特大黄种子发芽率（P＜0.05），250 mmol/L NaCl下GA3无促进作用（P＞0.05）；GA3拌种和高质量浓度GA3浸种能提高150 mmol/L NaCl下药用大黄种子发芽率（P＜0.05），100 mmol/L NaCl下GA3无促进作用（P＞0.05）。GA3浸种能促进盐胁迫下掌叶大黄、唐古特大黄和药用大黄幼苗根和苗的生长（P＜0.05）。结论 NaCl胁迫下3种大黄种子萌发及幼苗生长均受到抑制，3种大黄种子和幼苗耐盐性有差异，药用大黄耐盐性最低，GA3拌种或浸种引发能不同程度缓解高盐胁迫下大黄种子萌发和幼苗发育。]]> 2022/9/21 8:59:33 363true 目的 研究川西高原上野生川赤芍Paeonia veitchii入药部位（根）和非入药部位（地上部分）中没食子酸、氧化芍药苷、儿茶素、芍药内酯苷、芍药苷、苯甲酸和丹皮酚7种化学成分的含量，并综合评价其品质。方法 以上述7种成分为对照品，采用高效液相色谱（HPLC）法，Agilent HC-C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），柱温30℃，体积流量1 mL/min，进样量10 μL，检测波长230 nm，乙腈-0.1%磷酸水梯度洗脱；采用2012版《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》软件构建指纹图谱；采用聚类热图分析、相似度分析、主成分分析（principal component analysis，PCA）、偏最小二乘回归分析（partial least squares discrimination analysis，PLS-DA）等方法对各产地川赤芍进行评价。结果 野生川赤芍地上部分和根中均含有7种化学成分，仅有3批次地上部分样品中芍药苷含量不符合《中国药典》2020年版的要求。建立了野生川赤芍根和地上部分的HPLC指纹图谱，二者均标定了19个相同的共有峰，并指认出其中的7个（没食子酸、氧化芍药苷、儿茶素、芍药内酯苷、芍药苷、苯甲酸、丹皮酚）。不同产地川赤芍的化学成分种类和含量存在一定差异且存在明显的区域一致性特征，但芍药苷的差异相对较小。康定市老榆林、雅江县相格宗、阿坝县查理加油站和若尔盖县巴西乡的川赤芍药材质量相对较好。结论 建立的HPLC方法可用于分析川赤芍中的主要化合物，川西高原野生川赤芍药材质量符合《中国药典》要求，川赤芍根和地上部分中化学成分的种类和含量相近，地上部分具有开发利用的潜力。]]> 2022/9/21 8:59:33 362true 目的 对药用梅Prunus mume开展群体遗传学研究，揭示其遗传变异情况、单倍型地理分布格局，推测其起源和多样化中心。方法 采用叶绿体基因片段（psbA-trnH、rps16、trnS-trnG、ycf1b）对我国23个地区的药用梅野生群体进行测序，开展群体遗传多样性、遗传结构和历史动态分析。结果 药用梅共检测出20个单倍型，单倍型多样性（H_d）为0.790，核苷酸多样性（π）为0.001 71。AMOVA分析显示，药用梅在cpDNA水平上的遗传变异主要发生在群体间，表明该物种具有明显的谱系地理结构，群体间基因流主要以花粉流为主。中性检验和失配分布分析表明药用梅群体历史是基本稳定的，没有经历明显的快速扩张事件。单倍型中H2是分布最广泛的共享单倍型，H1、H15位于单倍型网络图中心位置。结论 药用梅具有明显的谱系地理结构，群体遗传性较高，四川、福建作为药用梅主产区，也是其起源和多样化中心。]]> 2022/9/3 18:08:26 361true 目的 采用ITS2 DNA条形码技术，研究雷公藤属3种药用植物的遗传特性，揭示其地理分布格局的形成原因。方法 收集雷公藤属植物28个居群223份样本，提取基因组DNA，扩增ITS2基因序列并测序，并进行遗传多样性分析，绘制失配分布曲线检测群居历史动态变化情况，估算雷公藤属种间、种内群体间和群体内的差异及遗传分化系数。结果 雷公藤属28个居群223份样本共检测到12个碱基突变位点，构成10个单倍型。昆明山海棠Tripterygium hypoglaucum共有7个单倍型，H2～H7为特有单倍型；雷公藤Tripterygium wilfordii共有4个单倍型，H8为特有单倍型；东北雷公藤Tripterygium regelii共有3个单倍型，无特有单倍型；H1为3个物种间的共有单倍型，H9和H10为雷公藤和东北雷公藤共有单倍型。群体遗传多样性分析显示，雷公藤属具有较高的单倍型多态性（H_d＝0.615±0.024）和核苷酸多态性[P_i＝（9.47±0.58）×10⁻³]。群体遗传结构分析显示，雷公藤属的变异主要存在于物种之间（76.14%），种内群体间和群体内的变异分别为11.42%、12.44%。群体动态历史分析表明，雷公藤属、雷公藤和东北雷公藤曾经历过扩张，而昆明山海棠未经历过扩张。结论 雷公藤属及其属下的昆明山海棠和雷公藤的遗传多样性水平较高，而东北雷公藤遗传多样性水平较低。雷公藤属植物在第4纪冰期时，将中国西南、华中和华东的部分地区作为冰期避难所，冰期后以冰期避难所为中心向四周扩散，形成当前雷公藤属植物的分布格局。]]> 2022/9/3 18:08:26 360true 目的 探讨不同产地和生长年限对巴戟天Morinda officinalis中环烯醚萜苷类成分形成和积累的影响。方法 以HPLC法分析巴戟天环烯醚萜苷类成分的含量。色谱柱为艾杰尔Venusil MP C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 µm）；以0.2%磷酸＋0.01 mol/L磷酸氢二钠缓冲盐（A）-乙腈（B）为流动相，梯度洗脱；体积流量1.0 mL/min，柱温25 ℃；二极管阵列检测器（DAD）检测。结果 巴戟天中水晶兰苷、去乙酰基车叶草苷酸、车叶草苷酸和车叶草苷4个成分在各自质量浓度范围内线性关系良好，精密度、重复性、稳定性和加样回收率均符合含量测定要求。巴戟天环烯醚萜苷类成分广西产质量分数为（17.74±0.49）～（60.67±0.28）mg/g，广东产质量分数为（28.46±0.68）～（58.29±0.38）mg/g，福建产质量分数为（20.75±0.42）～（43.94±1.10）mg/g。总量以7年生广西梧州产最高，为（60.67±0.28）mg/g，其次是3年生广东高要产，为（58.29±0.38）mg/g。结论 通过23批不同产地及生长年限的巴戟天药材环烯醚萜苷类成分含量对比，发现7年生广西梧州产巴戟天环烯醚萜苷类成分含量最高，3年生广东高要次之，为巴戟天药材合理的采收时间和质量控制提供参考依据。]]> 2022/9/3 18:08:26 359true 目的 建立能有效区分黄柏Phellodendri Chinensis Cortex与其易混淆品种关黄柏Phellodendri Amurense Cortex的特征图谱及一测多评方法，促进黄柏临床用药的安全性与有效性。方法 利用HPLC对黄柏中化学成分进行分析，对色谱条件进行优化，确定最佳色谱条件，建立特征图谱，利用主成分分析（principal component analysis，PCA）和正交偏最小二乘判别分析（orthogonal partial least squares discriminant analysis，OPLS-DA）对特征图谱数据进行分析，筛选和确认差异性化合物，以盐酸小檗碱为参照物，建立一测多评方法测定黄柏主要有效成分含量。结果 所建立的特征图谱及一测多评方法能鉴别黄柏与关黄柏，以木兰花碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱以及一未知化合物（7号峰）为差异性化合物，黄柏中盐酸小檗碱含量明显高于关黄柏，黄柏中盐酸巴马汀峰面积极低而关黄柏中其峰面积较高。黄柏中木兰花碱的含量较低而未知化合物（7号峰）峰面积较高。结论 所建立的特征图谱和一测多评方法简便，可作为《中国药典》修改标准的参考，用于黄柏的质量控制。]]> 2022/9/3 18:08:26 358true 目的 采用超高效液相色谱法（UPLC）建立升麻药材指纹图谱，并同时测定3种有效成分的含量，评价不同产地升麻药材质量的差异。方法 采用UPLC法进行测定，色谱柱为Agilent SB C₁₈（100 mm×2.1 mm，1.8 μm）；流动相为乙腈-0.05%磷酸溶液，梯度洗脱，体积流量为0.3 mL/min，波长为320 nm，柱温为35 ℃，进样量为1μL；建立15批升麻药材指纹图谱，通过对照品比对并结合质谱分析，对共有峰进行鉴定，并对3种成分的含量进行测定；对15批升麻药材指纹图谱进行相似度评价及主成分分析（principal component analysis，PCA），利用正交偏最小二乘法-判别分析（orthogonal partial least squares discriminant analysis，OPLS-DA）寻找不同产地升麻药材的差异性成分。结果 升麻药材指纹图谱有16个共有峰，指认出其中3个峰，分别为咖啡酸、阿魏酸和异阿魏酸；除辽宁产区的3批样品外，其余12批相似度均大于0.95；PCA将15批升麻药材划分为2类，OPLS-DA法确定7个差异标志物，差异显著性排序，分别为峰7＞峰11＞峰9＞峰8＞峰10＞咖啡酸＞峰4。辽宁产区咖啡酸、阿魏酸和异阿魏酸总含量明显高于其它产地。结论 该方法能有效地分析不同产地升麻药材质量的差异性，为不同产地升麻药材质量的评价提供参考。]]> 2022/9/3 18:08:27 357true 目的 通过对藤茶药材的外观质量性状和内在品质指标进行分析，探索藤茶药材性状与成分指标间的关联性，构建藤茶药材的等级评价标准，为藤茶药材的品质评价和质量控制提供参考。方法 将藤茶药材外观性状指标与内在指标成分进行熵权TOPSIS法分析和灰色关联度分析，对全国8个省份19个主产区收集到的61批藤茶和藤茶的10项评测指标进行排序，依据结果合理划分藤茶药材等级并构建等级评价标准。结果 藤茶质量与二氢杨梅素、酸不溶性灰分、叶占比、杨梅苷、总灰分、浸出物、花旗松素、破碎率、杨梅素、水分指标密切度依次降低。以产地、外观性状、灰分、浸出物及二氢杨梅素、杨梅苷含量为依据将藤茶分为优级、一级、二级和统货4个等级。结论 建立的等级评价标准综合运用了外观、内在等多项指标，具有实用性、科学性、全面性等特点，可用于藤茶药材的等级评价。]]> 2022/9/3 18:08:27 356true 目的 对黄草乌Aconitum vilmorinianum的异戊烯基焦磷酸异构酶（isopentenyl diphosphate isomerase，IDI）基因进行克隆及功能研究，为黄草乌中二萜生物碱的生物合成途径解析奠定基础。方法 基于黄草乌的转录组数据筛选注释为IDI的基因，设计特异性引物克隆其编码区，利用相关软件对其进行生物信息学分析，利用实时荧光定量PCR分析其在黄草乌不同器官中的表达情况，在大肠杆菌中表达其重组蛋白，利用功能显色验证其功能。结果 从黄草乌中克隆得到1个IDI基因（AvIDI，Genbank登录号MZ814967）。生物信息学分析表明，AvIDI的开放阅读框（open reading frame，ORF）为897bp，编码298个氨基酸，分子式为C₁₅₁₆H₂₃₆₂N₄₁₄O₄₅₂S₁₁，相对分子质量为33 970，理论等电点为5.94，具有异戊烯基焦磷酸异构酶TNTCCSHPL和WGEHELDY 2个保守序列。系统进化分析显示，AvIDI与黄龙胆Gentiana lutea IDI的亲缘关系最近。表达分析表明，AvIDI基因在黄草乌根、茎、叶和花中均有表达，在茎中表达量最高。在大肠杆菌中成功表达了AvIDI重组蛋白，功能显色实验表明，AvIDI编码有功能的IDI蛋白，能促进大肠杆菌中番茄红素的积累。结论 克隆得到AvIDI基因，并通过功能显色实验证明其编码有功能的IDI蛋白，该研究为利用IDI基因调控黄草乌中二萜生物碱生物合成奠定了基础。]]> 2022/8/16 12:30:34 355true 目的 分析过路黄Lysimachia christinae MYB转录因子家族相关成员的结构和功能，挖掘与黄酮类物质生物合成相关的基因信息。方法 基于过路黄全长转录组数据库，利用ProtParam、GenStript、MEME、WebLogo、SOPMA、Swiss-Model等在线网站分析过路黄MYB转录因子家族蛋白的理化性质、亚细胞定位、保守基序和结构域、蛋白高级结构等。利用MEGA软件构建系统发育树，分析过路黄MYB转录因子家族（ LcMYB）与拟南芥Arabidopsis thaliana MYB蛋白的系统发育关系。结果 挖掘到51个LcMYB基因，预测51条具有MYB转录因子保守结构域的蛋白序列；根据结构域可分为R1-LcMYB、R2R3-LcMYB和R3-LcMYB 3个亚类，且所有LcMYB基序中都含有3个保守的色氨酸；过路黄MYB家族蛋白均为亲水性蛋白，热稳定性较高且富含碱性氨基酸，大部分蛋白以无规则卷曲为主，其中R2R3-LcMYB39、R2R3-LcMYB47、R2R3-LcMYB48与R2R3-LcMYB50蛋白是以α-螺旋为主；与拟南芥MYB转录因子家族共同构建的进化树发现，过路黄MYB家族在进化上包括3个大类。结论 在过路黄物种中获得了51个MYB转录因子家族成员的基因的结构和功能信息，其中有2个成员与黄酮类物质的生物合成有关，该研究结果为后续克隆利用黄酮类物质生物合成相关基因提供了分子基础。]]> 2022/8/16 12:30:35 354true 目的 测定尖刀唇石斛Dendrobium heterocarpum和翅梗石斛D.trigonopus叶绿体基因组，分析其序列特征并鉴定石斛属Dendrobium植物物种间亲缘关系。方法 利用Illumina Hisep 2 500测序平台对尖刀唇石斛和翅梗石斛进行二代测序，经组装、注释后得到2条完整的叶绿体全基因组序列，采用生物信息学方法分析其序列结构及石斛属的系统发育关系。结果 尖刀唇石斛的叶绿体全基因组总长为159 786 bp，总GC含量为37.2%，共注释得到131个基因，包括88个蛋白编码基因、37个tRNA基因和6个rRNA基因；翅梗石斛的叶绿体全基因组总长为159 652 bp，总GC含量为37.1%，共注释得到131个基因，包括88个蛋白编码基因、37个tRNA基因和6个rRNA基因。尖刀唇石斛和翅梗石斛分别检测到112和127个简单重复序列（SSR），二者编码亮氨酸的密码子数量最多，编码色氨酸的密码子数量最少。系统发育树显示，尖刀唇石斛、反瓣石斛D.ellipsophyllum、翅梗石斛、梳唇石斛D.strongylanthum和长距石斛D.longicornu聚为一支，翅梗石斛与梳唇石斛和长距石斛的亲缘关系十分相近，支持率达到100%。结论 对石斛属2种植物的叶绿体基因组结构和系统发育关系进行了分析，该研究结果将为石斛属药用植物的准确鉴定、开发利用及其资源保护提供科学依据。]]> 2022/8/16 12:30:35 353true 目的 建立龙葵Solanum nigrum愈伤组织最优培养体系，研究愈伤组织在不同培养时间下各生理指标变化和澳洲茄碱、澳洲茄边碱的积累，为工业化制备澳洲茄碱和澳洲茄边碱奠定基础。方法 研究不同外植体及培养基对龙葵愈伤组织诱导的影响，采用响应面试验设计方法优化愈伤组织诱导的激素配比，运用考马斯亮蓝G-250法测定可溶性蛋白含量，TTC还原法测定细胞活力，邻苯二酚法测定多酚氧化酶（polyphenol oxidase，PPO）活性，氮蓝四唑光化还原法测定超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）活性，愈创木酚比色法测定过氧化物酶（peroxidase，POD）活性，硫代巴比妥酸显色法测定丙二醛（malondialdehyde，MDA）含量，高效液相色谱法测定澳洲茄碱及澳洲茄边碱含量。结果 愈伤组织诱导最佳外植体为龙葵茎段，最适培养基为MS＋ 1.43 mg/L NAA＋ 2.15 mg/L 6-BA＋ 2.48 mg/L KT，愈伤组织增殖最适培养基为MS＋1.0 mg/L 6-BA＋0.2 mg/L NAA。愈伤组织鲜质量增长量呈“S”型趋势，20 d时细胞活力达到最高峰值，可溶性蛋白含量与POD活性均呈先升高后降低的趋势，SOD活性在20 d与30 d出现2个峰值，MDA含量呈先降低后升高的变化趋势，在培养后期PPO活性下降，可能与愈伤组织褐化有关，澳洲茄碱与澳洲茄边碱含量变化趋势一致，在第30天时达到峰值。结论 龙葵愈伤组织生长期为25 d，同时也为最适的愈伤组织鲜质量收获期，25 d后会出现不同程度褐化。其愈伤组织中的次生代谢产物积累和细胞生长过程通常是负相关的，次生代谢产物的合成大多在愈伤组织的生长后期。]]> 2022/8/16 12:30:35 352true 目的 采用HPLC法建立关黄柏及川黄柏药材指纹图谱，并同时测定5种有效成分的含量，评价关黄柏及川黄柏药材的质量差异。方法 运用HPLC法分别建立10批关黄柏药材和10批川黄柏药材指纹图谱，通过对照品比对，对共有峰进行指认，并测定5种有效成分的含量；对关黄柏及川黄柏药材指纹图谱进行相似度评价，并利用主成分分析（principal component analysis，PCA）和正交偏最小二乘法-判别分析（orthogonal partial least squares discriminant analysis，OPLS-DA）方法对关黄柏及川黄柏中差异性成分进行分析。结果 关黄柏和川黄柏药材指纹图谱有6个共有峰，指认出其中5个峰，分别是木兰花碱、盐酸药根碱、小檗红碱、巴马汀、小檗碱。通过PCA和OPLS-DA分析筛得关黄柏与川黄柏的3个差异性标志物，分别为木兰花碱、巴马汀和小檗碱，其中巴马汀的含量差异最显著。结论 该方法能有效分析关黄柏及川黄柏质量的差异性，为关黄柏及川黄柏的质量评价与控制提供参考。]]> 2022/8/16 12:30:35 351true 目的 对珍稀南药沉香基原植物白木香Aquilaria sinensis AsNAC2转录因子进行分子克隆，并对其进行生物信息学和表达模式分析。方法 以白木香茎的总RNA反转录的cDNA为模板，采用PCR技术获取基因编码序列（coding sequence，CDS）全长；利用生物信息学软件预测蛋白的理化性质、结构域和亚细胞定位等特性；运用DNAMAN8.0和MEGA6.0等软件分别进行多序列比对和进化关系分析；利用qRT-PCR技术检测AsNAC2基因在不同组织和伤害胁迫下的表达特性。结果 克隆获得AsNAC2基因（GenBank注册号MT130201），开放阅读框（open reading frame，ORF）全长864 bp，编码1条由287个氨基酸组成的弱酸性的稳定的亲水性蛋白，该蛋白定位在细胞核中，不存在跨膜结构域。序列比对和系统进化树分析显示，AsNAC2蛋白N端具有典型的NAM结构域，与锦葵目中的可可、哥伦比亚锦葵和榴莲NAC 2-like蛋白亲缘关系近，属于NAC转录因子家族中的ATAF亚组。qRT-PCR结果显示，AsNAC2基因主要在健康白木香的根和茎中表达，全断干伤害可显著诱导茎中AsNAC2基因表达量的上调，在2 h达到峰值，此后缓慢下降，至48 h基本恢复正常。结论 首次在白木香中克隆和鉴定了AsNAC2基因，该基因易受伤害诱导表达，且在伤害早期相对应。]]> 2022/8/2 19:28:13 350true 目的 克隆枸骨Ilex cornuta三萜皂苷生物合成途径中关键酶法尼基焦磷酸合酶（farnesyl diphosphate synthase，FPS）基因，对其进行组织特异性表达分析，构建原核表达载体并进行重组蛋白诱导表达，探究其参与调控三萜皂苷生物合成的功能。方法 结合枸骨转录组数据设计特异性引物，采用PCR技术从枸骨叶中扩增得到了IcFPS2基因的cDNA序列，对其进行生物信息学分析；通过实时荧光定量进一步分析其组织表达特异性，构建原核表达载体pET32a-IcFPS2 ，并转化至大肠杆菌E.coli BL21（DE3）pLysS感受态细胞，经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）诱导重组蛋白的表达。结果 IcFPS2基因长1259 bp，开放阅读框为1050 bp，编码350个氨基酸，其蛋白质相对分子质量和等电点分别为40 200、5.54。氨基酸序列比对分析表明枸骨与栀子、杜仲、甘草、绞股蓝、竹节参的FPS氨基酸序列具有较高的同源性。系统进化树分析显示，IcFPS2蛋白与西洋参、人参、竹节参FPS蛋白聚为一支，表明枸骨FPS蛋白可能与双子叶植物五加科FPS蛋白在功能上较为接近。实时荧光定量PCR分析表明，IcFPS2基因在根中的表达量最高，其次是叶，而后是雄花和茎，该基因在雌花中表达水平最低。原核表达分析结果显示，构建的IcFPS2-pET-32a载体能在大肠杆菌BL21（DE3）中成功表达，SDS-PAGE结果显示，诱导的重组表达蛋白相对分子质量在45 000左右，与预测的IcFPS2蛋白大小基本一致。结论 通过对IcFPS2基因的全长cDNA克隆与生物信息学分析、组织表达特异性分析和原核表达载体的构建，为后续进一步研究法尼基焦磷酸合酶基因在枸骨三萜皂苷生物合成途径的功能供科学依据。]]> 2022/8/2 19:28:13 349true 目的 基于质量标志物（quality marker，Q-Marker）核心理论，从网络药理学（有效性）及化学成分（特有性、可测性）角度对民族药材飞蓬治疗心脑血管疾病的Q-Marker进行分析，评价其资源品质、寻找灯盏花素的新资源。方法 采用UPLC-Q-TOF-MS分析飞蓬的主要化学成分；通过网络药理学的有效性及化学成分特有性与可测性对飞蓬治疗心脑血管疾病Q-Marker进行筛选；采用UPLC-DAD法同时测定不同产地飞蓬Q-Marker含量。结果 从飞蓬中鉴定得到灯盏乙素、灯盏花苷I、异绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸B、芹菜素、木犀草素、槲皮素等26个活性成分；初步确定绿原酸、灯盏花苷I、灯盏乙素、异绿原酸A、异绿原酸B为飞蓬治疗心血管疾病的Q-Marker；建立了基于UPLC-DAD测定飞蓬Q-Marker的方法，10批次不同产地的样品被测定，绿原酸质量分数为0.43～2.13 mg/g，灯盏花苷I质量分数0.18～1.92 mg/g，灯盏乙素质量分数为0.21～3.75 mg/g，绿原酸A质量分数为0.07～0.18 mg/g，异绿原酸B质量分数为0.56～1.76 mg/g。结论 该方法科学、可行，为飞蓬的质量控制研究提供了科学依据，同时为灯盏花素的新资源开发奠定基础。]]> 2022/8/2 19:28:13 348true 目的 建立道地产区及不同主产区金银花HPLC指纹图谱，结合化学计量学评价为金银花质评质控体系的构建及其潜在质量标志物的探索提供参考和依据。方法 采集河南、山东、河北产区的金银花样品，优化提取与检测方法，建立最佳HPLC指纹图谱条件。色谱柱：Symmetry C₁₈（250 mm×4.6 mm，5μm）；流动相为乙腈（A）-0.2%甲酸水溶液（B）；梯度洗脱条件，进样体积10 μL；检测波长245 nm；体积流量0.5 mL/min；柱温38℃。采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012.130723）对HPLC图谱数据进行共有峰确定、相似度评价。采用SIMCA-P 14.1软件进行聚类分析（cluster analysis，HCA）、主成分分析（principal component analysis，PCA）、正交偏最小二乘判别分析（orthogonal partial least squares discriminant analysis，OPLS-DA）。结果 3个产地金银花HPLC指纹图谱共匹配45个共有峰成分，标示出16个色谱峰。HCA与PCA结果可将河南产区与山东、河北产区金银花样品完全区分。OPLS-DA分析结果表明异绿原酸B、香豆酸、莫诺苷、芦丁、新绿原酸、断氧化马钱苷等物质含量在河南产金银花样品中普遍高于山东、河北产金银花；绿原酸、异绿原酸C、木犀草苷在山东产金银花样品中普遍高于河南、河北产金银花；忍冬苷在河北产金银花样品中普遍高于河南、山东产金银花。结论 所建立的金银花HPLC指纹图谱结合化学计量学的方法，可应用于金银花质量标准的研究与开发及其潜在质量标志物和道地因子的探索。]]> 2022/8/2 19:28:13 347true 目的 研究桔梗皂苷积累与土壤元素的关系，从基因表达水平明确不同产地桔梗皂苷含量差异的原因，为桔梗药材的科学种植提供理论依据。方法 利用HPLC法和香草醛-冰醋酸比色法测定不同产地桔梗韧皮部和木质部的桔梗皂苷D和桔梗总皂苷含量，实时荧光定量PCR测定6种关键酶基因的表达量，利用原子吸收法、比色法等方法测定土壤元素含量，用Pearson相关性分析法分析土壤元素与桔梗皂苷及其关键酶基因表达量的关系。结果 河南洛阳产桔梗根中的桔梗皂苷D和桔梗总皂苷含量显著高于其他产地，桔梗韧皮部和木质部的桔梗皂苷含量和关键酶基因表达量存在较大差异；相关性分析表明，土壤中Cu、Ca和Zn含量对桔梗皂苷的合成起主要作用，甲羟戊酸焦P酸脱羧酶基因、法尼基焦P酸合酶基因和异戊烯基焦P酸异构酶基因是桔梗皂苷合成过程中的主要关键酶基因，土壤元素对桔梗关键酶基因具有一定的调控作用。结论 土壤元素通过调控关键酶基因进而影响桔梗皂苷的合成，其中土壤中Zn含量起主要作用。]]> 2022/8/2 19:28:13 346true 目的 对不同干旱胁迫程度下党参Codonopsis pilosula叶、茎、根进行转录组测序，探究干旱胁迫对党参差异基因和多糖合成相关酶基因的调控。方法 利用Illumina HiSeq 2500高通量测序技术对正常水分（85%～90%）和轻度（65%～70%）、中度（50%～55%）、重度干旱胁迫（35%～40%）下生长旺盛期党参叶、茎、根组织进行测序并建立cDNA数据库，经de novo拼接后得到Unigene，并进一步开展生物信息学分析。结果 共获得Unigene 60 377条，分别有51 477、29 896、33 479、35 912、47 378、18 649、31 833条被非冗余数据库（non-redundant protein sequence database，NR）、真核生物蛋白相邻类的聚簇（clusters of orthologous group for eukaryotic complete，KOG）、基因本体（gene ontology，GO）、Swiss-Prot、eggNOG、京都基因与基因组数据库（Kyoto encyclopedia of genes and genomes，KEGG）、Pfam等数据库注释，筛选到9个差异组DEGs总和89 369条，GO富集分析发现，党参叶、茎、根中的DEGs在GO功能注释中分布基本一致，主要集中于细胞、细胞部分、细胞过程、代谢过程、结合蛋白、催化活性等功能。KEGG途径富集结果表明，干旱胁迫下叶中DEGs显著富集在不饱和脂肪酸、苯丙烷生物合成，茎中DEGs主要富集在苯丙烷、角质、琥珀和蜡、淀粉和蔗糖、单萜的生物合成，根中DEGs主要富集于黄酮、苯丙烷、二苯乙烯、二芳基庚烷和姜酚的生物合成及戊糖、葡萄糖醛酸转换。轻度干旱能引起叶中多糖合成途径关键酶基因的表达上调，是促进党参多糖成分积累的基础。结论 通过转录组测序，初步表明干旱胁迫影响党参不同组织差异基因的表达，并调控党参根中多糖合成的相关酶基因，以期为从分子基因培育优质党参提供参考和依据。]]> 2022/7/20 18:23:21 345true 目的 基于转录组数据，利用生物信息学方法鉴定藜芦Veratrum nigrumbHLH转录因子基因家族，并作初步分析。方法 通过隐马可夫模型从藜芦转录组序列中筛选bHLH基因，并使用ExPASy、MEME等在线网站及MEGA、TBtools等软件对藜芦bHLH进行理化性质、保守基序等可视化分析。结果 在藜芦转录组中共鉴定到72条bHLH转录因子，VnbHLH转录因子氨基酸数目为105～692，等电点介于4.69～11.47，相对分子质量为11 071.2～77 795.3，亚细胞定位分析显示VnbHLH均定位于细胞核中；系统发育分析将VnbHLH转录因子分为6个亚族，VnbHLH在不同组织中表达差异显著，Vn_54312、Vn_14037在根中表达较高，推测其可能参与了藜芦植物根部某些生物碱的合成。结论 根据转录组数据分析了药用植物藜芦中的bHLH转录因子基因家族，有助于下一步对藜芦bHLH转录因子家族功能预测及验证。]]> 2022/7/20 18:23:21 344true 目的 研究内生真菌Fusarium-C39生物转化提高滇重楼药材皂苷类化学成分的含量，并增强重楼对癌细胞增殖的抑制作用，初步探讨主要甾体皂苷的生物转化机制。方法 将内生真菌Fusarium-C39分别与滇重楼药材固体发酵和与重楼总皂苷提取物液体发酵，比较发酵前后重楼总皂苷和重楼皂苷I、II、VII的含量变化及对肝癌HepG2细胞、肺癌A549细胞和结肠癌HT-29细胞增殖抑制作用的差异；采用UPLC/Q-TOF-MS技术研究发酵前后重楼皂苷类化学成分的变化，并结合甾体皂苷生物合成途径推测内生真菌Fusarium-C39生物转化提高重楼皂苷含量的机制。结果 与滇重楼药材相比较，发酵物中的重楼总皂苷、重楼皂苷I、II和VII的含量显著提高，对3种癌细胞增殖的抑制作用显著增强；人参皂苷Th、pseudoproto-Pb和parisyunnanoside B为Fusarium-C39菌株生物转化提高重楼皂苷I、II和VII含量的主要前体物质，它们在Fusarium-C39菌株的作用下发生了C₂₆糖基水解和环化反应，分别生成了重楼皂苷I、II和VII。结论 内生真菌Fusarium-C39可生物转化提高重楼皂苷含量，并增强重楼的抗肿瘤作用，转化机制可能与Fusarium-C39真菌促使重楼皂苷前体物质发生糖基水解和环化反应相关。]]> 2022/7/20 18:23:21 343true 目的 通过比较性状、浸出物、生物碱和黄酮成分的含量、指纹图谱等内容来系统研究基原为酸橙Citrus aurantium和甜橙C.sinensis的枳实药材质量差异，以期建立一个多元的枳实药材质量控制体系。方法 按照《中国药典》2020年版枳实项下对酸橙和甜橙枳实药材进行质量评价和比较，通过HPLC法对枳实进行定性及定量分析，分别建立不同基原枳实药材的指纹图谱并对其9个主要的黄酮成分进行含量测定。结果 不同基原的枳实药材浸出物含量差异明显，而辛弗林含量没有显著性差异；甜橙枳实中不含新橙皮苷，而酸橙枳实中该成分含量最高；除桔皮素外，2个基原枳实的其他黄酮成分含量均存在显著性差异（P＜0.05）；通过指纹图谱的模式识别，2种枳实分类情况与其产地分布较为吻合；通过正交偏最小二乘判别分析筛选出了柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷这3个差异性成分。结论 不同基原枳实药材在浸出物含量、主要黄酮类成分的种类及含量等方面均存在一定的差异性，对其进行的质量差异研究及指纹图谱的比较，可以为枳实临床用药选择、新药开发、药材质量控制等方面提供依据。]]> 2022/7/20 18:23:21 342true 目的 对不同产地的金钱草Lysimachia chriatinae及其常见的地方习用品与混用品的HPLC指纹图谱进行研究，比较分析不同产地金钱草及其习用品与混用品的差异，为其鉴定技术的开发应用奠定基础。方法 利用80%甲醇制备金钱草及其习用品与混用品样品的提取溶液，采用HPLC法建立不同产地的金钱草及其习用品与混用品提取液的指纹图谱，明确金钱草及其地方习用品与混用品的特征鉴别峰，分析比较不同产地金钱草样品间指纹图谱的差异，利用SPSS软件对不同样品的指纹图谱进行聚类分析和主成分分析，明确HPLC指纹图谱在不同产地金钱草样品的质量评价和习用品与混用品的正伪鉴别中的作用。结果 HPLC指纹图谱共获得了区分度较好的8个特征峰数据，可用于后续的鉴别和质量评价，其中金钱草和其地方习用品浙金钱草与几种混用品的指纹图谱存在显著差异，SPSS聚类分析结果表明HPLC指纹图谱可将金钱草及其地方习用品与混用品进行准确高效区分；不同产地金钱草的指纹图谱存在一定差异，其中四川产地和贵州、云南产地的可以进行有效区分。结论 HPLC指纹图谱能有效区分不同产地金钱草及其地方习用品与混用品，鉴定结果具有快速、准确和操作简单的特点，为控制金钱草药材商品的质量提供了技术保障。]]> 2022/7/20 18:23:22 341true 目的 从广藿香Pogostemon cablin中克隆HAD（haloacid dehalogenase）超级家族蛋白水解酶基因PcHAD，验证其编码蛋白与广藿香醇合酶（patchoulol synthase，PcPTS）蛋白互作，探究其参与调控广藿香醇生物合成的作用。方法 从广藿香转录组数据中，筛选出一条具有完整编码区并且包含HAD-like结构域的HAD基因序列（PcHAD），并对该基因进行克隆和生物信息学分析。利用qRT-PCR对PcHAD的表达模式进行分析。利用酵母双杂交实验进一步验证PcHAD与广藿香PcPTS蛋白的互作情况。通过瞬时过表达PcHAD，分析其对广藿香醇甲羟戊酸合成途径（mevalonate pathway，MVA）相关基因的表达以及对广藿香醇含量的影响。结果 从广藿香中克隆得到HAD-like基因PcHAD，其开放阅读框为1149 bp，编码蛋白长度为382个氨基酸，蛋白相对分子质量为43 000，且为不稳定的亲水性蛋白，亚细胞定位结果表明该蛋白定位于叶绿体。酵母双杂交实验结果表明PcHAD完整蛋白能与PcPTS完整蛋白互作，且PcHADN与PcPTSN互作。与对照组相比，瞬时过表达PcHAD广藿香叶中的广藿香醇含量提高了30%，MVA途径基因包含PTS、FPPS和HMGR在内表达量均显著上调。结论 从广藿香中克隆得到1个与广藿香醇合酶PcPTS互作的PcHAD基因，该基因在瞬时过表达后上调PTS和MVA途径多个基因的表达量，且能够显著提高广藿香醇的含量，表明该基因可能在广藿香醇生物合成中发挥正向调控作用，为进一步揭示广藿香中HAD-PTS复合体的功能提供科学依据。]]> 2022/7/21 9:01:03 340true 目的 探讨不同肥料配施对北苍术Atractylodes chinensis(DC.) Koidz.3种倍半萜成分苍术酮、白术内酯II和β-桉叶醇含量及2种生物合成关键酶3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶（3-hydroxy-3-methylglutarate monoacylase A reductase，HMGR）和法呢基焦磷酸合酶基因（farnesyl pyrophosphate synthase，FPPS）活性及基因表达的影响。方法 在不同的肥料配施下，采用高效液相色谱法测定北苍术3种倍半萜类成分的含量，采用试剂盒法（双抗体夹心法）测定北苍术根茎中HMGR和FPPS的活性；采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）法测定北苍术HMGR和FPPS的表达量；采用SPSS软件对生物合成关键酶活性和基因表达量进行相关性分析。结果 适宜的氮磷钾配施，可促进北苍术倍半萜类成分的积累，并显著提高其生物合成关键酶活性及基因表达。该试验区所代表的土壤肥力状况下有利于倍半萜类成分积累的最优施肥方案为氮肥（N）180 kg/hm²，磷肥（P₂O₅）225 kg/hm²，钾肥（K₂O）105 kg/hm²。不同肥料配施下，关键酶基因HMGR与苍术酮、β-桉叶醇呈显著正相关（P＜0.05）；关键酶基因FPPS与白术内酯II、β-桉叶醇呈极显著正相关（P＜0.01），与苍术酮显著相关（P＜0.05）。结论 优化氮磷钾配施对北苍术倍半萜类成分苍术酮、白术内酯II和β-桉叶醇积累及生物合成关键酶HMGR和FPPS活性及基因表达作用显著，北苍术根茎中倍半萜类成分苍术酮、白术内酯II和β-桉叶醇的生物合成受到多种基因及酶的调控，其中关键酶FPPS发挥了较大的调控作用。]]> 2022/7/21 9:01:03 339true 目的 建立不同种类金花茶UPLC指纹图谱，结合其表型特征和化学成分差异分析其亲缘关系，为金花茶品种分类和应用提供依据。方法 采用UPLC法建立22种金花茶的指纹图谱，采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012版）对金花茶UPLC指纹图谱进行相似度评价，并采用SPSS24.0软件进行主成分分析、聚类分析。结果 选取了3个色谱共有峰，指认了11个已知化学成分。不同种金花茶共有峰相似度在0.247～0.740。主成分分析筛选出弄岗、柠檬黄、龙州、陇瑞、细叶、隆安、顶生、天峨、中东、毛瓣10种金花茶的化学成分含量较高。聚类分析结果显示龙州亚类单独聚为一类；凹脉、顶生、天峨、显脉、弄岗、倒卵叶、柠檬黄、薄叶、中东、东兴、防普金花茶聚为一类；陇瑞、龙州亚种、细叶金花茶为一类；淡黄、扶绥、毛瓣、四季、恩城、隆安、武鸣金花茶聚为一类。结论 金花茶种类繁多，不同种金花茶所含化学成分存在较大差异，结合表型特征，根据成分差异可基本获得种间亲缘关系。]]> 2022/7/21 9:01:04 338true 目的 比较不同产地、性别、树龄银杏Ginkgo biloba叶在同一采收期的质量，为其资源评价提供依据。方法 收集5个产地共36批的银杏单株叶样品，采用超高效液相色谱法测定芦丁、槲皮素、异鼠李素和山柰素含量。用国家药典委员会中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件处理分析，建立银杏叶药材UPLC指纹图谱。结合主成分分析及偏最小二乘判别分析探讨不同性别银杏叶的质量差异。结果 各组样品相似度均大于0.85，雌株之间相似度低于雄株；产地、性别和树龄对银杏叶的化学成分组成和比例有一定的影响，成熟植株指纹图谱相似度变化幅度大于苗期植株；HM居群与其它居群样品的物候期不同。结论 不同产地雌雄株银杏叶的性状特征存在差异。LT居群银杏叶质量较佳且更稳定；苗期植株稳定性高于成熟植株；不同性别银杏叶质量差异标志物有所差异。为控制银杏叶内在质量建立了UPLC指纹图谱快速检测方法，并进行指纹图谱相似度评价，结合主成分分析及偏最小二乘判别分析方法用于分析不同性别银杏叶的质量，为银杏叶的质量比较和资源评价提供了科学依据。]]> 2022/7/21 9:01:04 337true 目的 探究金线莲Anoectochilus roxburghii中WRKY转录因子时空表达模式并筛选调控金线莲胚胎发育的ArWRKY基因。方法 基于金线莲转录组数据库进行ArWRKY转录因子筛选，利用软件进行蛋白质结构域预测、序列比对、理化性质预测与进化树构建等分析。采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测ArWRKY基因时空表达模式。根据转录组数据Unigenes克隆ArWRKY的CDS序列。结果 筛选得到金线莲中23条WRKY转录因子，分别命名为ArWRKY1～ArWRKY23；qRT-PCR结果表明ArWRKY5与ArWRKY20基因在金线莲叶芽期、花芽期及开花期的花中表达量都显著高于根、茎、叶；克隆得到ArWRKY5的CDS为600 bp，ArWRKY20的CDS为1149 bp。结论 筛选得到23个ArWRKY转录因子并成功克隆获得ArWRKY5与ArWRKY20的CDS序列，对探究ArWRKY转录因子调控金线莲生长发育及验证ArWRKY5与ArWRKY20基因功能奠定基础。]]> 2022/6/20 9:01:02 336true 目的 对杜仲TCP（Teosinte branched 1/Cycloidea/Proliferating）基因家族进行筛选分析，以期为EuTCPs基因功能深入研究奠定基础。方法 以杜仲基因组数据库为基础，通过生物信息学系统分析TCP基因家族的理化性质、系统进化、基因结构、启动子顺式作用元件及其在杜仲叶片发育及胶形成中的表达水平。结果 从杜仲基因组中共鉴定到14个EuTCPs，氨基酸数目介于139～492，理论等电点分布在5.54～9.72，相对分子质量区域为18 880～53 620，亚细胞定位预测在细胞核中，均为亲水性蛋白。系统进化分为PCF、CIN和CYC/TB1 3个亚家族，分别包含5、6和3个EuTCPs蛋白。表达模式分析显示，EuTCPs在杜仲叶片不同发育时期存在显著差异，每个发育时期EuTCPs表达量各不相同，EuTCPs正调控杜仲胶的形成。结论 杜仲中TCP家族包含14个成员，各成员的分子特征和组织表达特异性存在一定的差异，EuTCPs可能参与杜仲叶片发育及杜仲胶的形成。]]> 2022/6/20 9:01:02 335true 目的 以药用植物单叶铁线莲Clematis henryi叶片为材料，在高通量测序、组装和序列分析的基础上，明确叶绿体因组的序列特征和系统发育关系。方法 利用CTAB法提取叶片基因组DNA，通过NovaSeq 6000平台测序，再用NovoPlasty组装叶绿体基因组，借助PhyML生成系统发育树。结果 单叶铁线莲的叶绿体基因组全长159 707 bp，GC值为38.0%，大单拷贝区、小单拷贝区和反向重复序列的长度分别为79 449、18 100、31 079 bp；单叶铁线莲的叶绿体基因组总共有基因137个，其中蛋白质编码基因、tRNA、rRNA的数量分别为91、36、8，另有2个假基因，分别为Ψycf1和ΨinfA。序列比对结果表明，单叶铁线莲与牯牛铁线莲叶绿体基因组的相似性最高，达99.6%；共检测到41个SSR，其中40个为单核苷酸重复，1个为三核苷酸重复。系统发育分析结果表明，单叶铁线莲与牯牛铁线莲和大叶铁线莲聚于一组，支持率达100%。结论 单叶铁线莲叶绿体基因组的组装、序列分析和系统发育分析，为该药用植物的遗传结构和遗传多样性研究奠定了基础。]]> 2022/6/20 9:01:02 334true 目的 利用荧光SSR分子标记对甘肃省11个当归Angelica sinensis品种（系）194 份当归样品进行遗传多样性和遗传结构分析，并构建其分子身份证，为当归新品种（系）选育提供科学依据。方法 采用课题组前期筛选出10对SSR荧光引物对供试材料进行PCR扩增，利用Popgen软件进行遗传参数的计算，利用Structure软件进行群体结构分析，利用NTSYS软件构建各居群的Nei’s遗传距离UPGMA聚类图，利用GenALEx软件进行分子方差分析；对扩增带型进行数字加字母编码，构建当归分子身份证。结果 10对SSR荧光引物共获得观测等位位点57个，平均每对引物5.7个，当归群体的观测杂合度（H_o）、期望杂合度（H_e）和Nei期望杂合度（Nei）分别为0.341 4、0.407 0和0.385 5；Structure分析将194份当归样品分成5个类群；当归品种（系）居群间的分化系数FST为0.147 7；分子方差分析显示居群内的变异百分比达到78%；最终利用10对SSR荧光引物，构建了10位字符的分子身份证，可以区分11个当归品种（系）。结论 栽培当归在物种水平上遗传多样性较高，各品种（系）间遗传分化系数较低，基因交流频繁，遗传变异主要存在于居群内；构建的分子身份证可以区分不同当归品种（系）。]]> 2022/6/20 9:01:02 333true 目的 基于干质量、活性物质含量以及抗氧化能力，对甘肃产不同居群款冬Tussilago farfara花进行综合质量评价，并分析环境因素对质量形成的影响。方法 利用分光光度计和HPLC对39个居群款冬花主要活性物质含量和抗氧化能力进行测定，采用模糊综合评价法（fuzzy comprehensive appraisal method，FCAM）对综合质量进行评价，并利用SPSS软件对综合质量与环境因子的关系进行分析。结果 甘肃省39个不同居群款冬花干质量、7个主要活性物质含量（绿原酸、芦丁、异槲皮苷、款冬酮、可溶性糖、总黄酮和总酚类）以及抗氧化能力[1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl，DPPH）抑制率和铁离子还原/氧化能力（ferric reducing/antioxidant power，FRAP）值]存在显著差异，综合质量评价值（D）范围0.10～0.61，其中，庄浪县水洛镇综合质量最高（D＝0.61），其次为积石山县吹麻滩镇（D＝0.57）和成县小川镇（D＝0.56）。相关性分析表明，活性物质含量和抗氧化能力与年平均气温和降雨量呈负相关。结论 甘肃省庄浪县、积石山县和成县等区域款冬花综合质量较佳，适宜冷凉和干旱的环境可提升其综合质量。]]> 2022/6/20 9:01:02 332true 目的 建立同时适用于芸香科柑桔属药材鉴别的HPLC特征图谱，为同属药材的鉴定及质量评价提供科学依据。方法 采用Waters Xselect HSS T3 （250 mm×4.6 mm，5 μm）色谱柱；以乙腈-0.1%磷酸溶液为流动相，梯度洗脱；体积流量为1.0 mL/min；检测波长为284 nm，采用相似度软件、SPSS软件和SIMCA-P 12.0软件对数据进行分析。结果 特征图谱研究结果显示，橙皮苷为6种药材的共有成分，特征成分为芸香柚皮苷、柚皮苷、新橙皮苷、水合橙皮内酯、川陈皮素和橘皮素；药材种内相似度均很高，种间相似度较低，种间存在明显差异；通过聚类分析和主成分分析能将橘、橙、柚3大类药材各聚为一类，并能区分橙不同成熟期的果实；通过偏最小二乘法-判别分析（orthogonal partial least squares discriminant analysis，OPLS-DA）能区分不同成熟期橘的果实和果皮。结论 建立的HPLC特征图谱较全面地反映了常用芸香科药材的化学成分，分析方法专属性强，准确可靠，为柑桔属药材及其饮片鉴定、质量评价提供参考。]]> 2022/6/20 9:01:03 331true 目的 通过分析不同干燥方式（晒干、阴干、低温烘干、蒸制杀青-烘干）对金银花Lonicerae Japonicae Flos挥发性成分的影响，发现金银花保留挥发性成分的最佳干燥方式。方法 采用气相离子迁移谱（GC-IMS）技术分析不同干燥方式下金银花中挥发性成分并对其进行差异分析。结果 4种干燥方式下，金银花中共鉴定出48个挥发性成分，包括醛类（14个）、醇类（10个）、酮类（5个）、吡嗪类（6个）、吡咯类（1个）、呋喃类（2个）、酯类（5个）、酸类（2个）、其他类（3个）。经过显著性差异检验，发现了34个差异性挥发性成分。晒干法中挥发性成分种类更为丰富，总体含量更高；蒸制杀 青-烘干法中挥发性成分种类最少，总体含量较低。阴干与低温烘干法之间差异较小，这2种方法保留挥发性成分的能力优于蒸制杀青-烘干法，但次于晒干法。结论 不同干燥方式下挥发性成分存在明显差异，综合对比后得出晒干是金银花保留挥发性成分和风味的最佳干燥方式，为金银花干燥方式的优化、芳香健康功效及风味品质的研究提供科学理论指导。]]> 2022/6/20 9:01:03 330true 目的 白木香Aquilaria sinensis是中国特有的、具有极高经济价值的珍稀濒危药用植物，由于人类对其自然资源的长期过度开发和生态破坏，白木香现仅有零星散生的野生资源，为更好地保护和利用白木香，现对其进行遗传多样性分析。方法 采集了中国14个地区的232份白木香样本，并利用ISSR标记对其进行遗传多样性评价。结果 ISSR标记具有较高的多态性（100%），表明ISSR是检测白木香遗传多样性的有效方法。对所有样本进行遗传分析，在相似系数为0.71时，可将其聚为4个类群。期望杂合度（H_e）、Shannon’s信息指数（I）在XL群体中最高，而61.84%的遗传变异发生在群体之间。种群结构分析表明，14个种群能够按照区域和来源进行严格划分，说明种群间的基因交换很少。结论 白木香种源有较好的遗传多样性，但野生资源大幅减少，需加强白木香资源的保护、繁育和利用。]]> 2022/6/1 16:28:47 329true 目的 为深入了解细胞色素P450家族CYP5150AW6基因在暴马桑黄Sanghuangporus baumii生长发育调控中的功能。方法 采用PCR技术获得目的基因的cDNA序列全长，通过生物信息学在线软件分析其编码的氨基酸序列；采用同源重组的方法构建原核表达载体；采用荧光定量PCR技术分析其不同发育阶段的表达特性。结果 暴马桑黄中克隆得到的基因开放阅读框（open reading frame，ORF）序列全长1758 bp，编码585个氨基酸，相对分子质量为66 080，经国际P450命名委员会命名为CYP5150AW6；跨膜区预测表明CYP5150AW6蛋白不具有跨膜结构；亚细胞定位显示CYP5150AW6蛋白在细胞质和线粒体中修饰合成；系统进化分析结果表明，暴马桑黄CYP5150AW6蛋白与灵芝CYP5150L8蛋白亲缘关系最近，符合物种分类原则；SDS-PAGE结果证实在75 000～100 000出现目的 蛋白条带（包含20 000的标签蛋白），说明所获得的基因能够成功表达出蛋白；从荧光定量分析结果中可以看出CYP5150AW6基因转录水平从菌丝体阶段到子实体阶段生长逐渐升高，并且在子实体阶段达到最高，说明该基因可能与暴马桑黄的生长发育相关。结论 通过对CYP5150AW6基因的鉴定与分析，为进一步研究该基因在暴马桑黄生长发育调控过程的功能提供了理论依据。]]> 2022/6/1 16:28:47 328true 目的 比较不同产地和生长年限栽培滇重楼Paris polyphylla var.yunnanensis生物量和性状差异，并对植株生物量积累和生长发育规律进行异速生长分析。方法 使用Pearson相关分析研究滇重楼根茎生物量与采集地经纬度、气候因子间的相关性；单因素方差分析（One-Way ANOVA）与独立样本T检验用于样品间植物性状的差异显著性比较；利用标准化主轴回归分析（standardized major axis regression）对滇重楼的生物量积累和生长发育规律进行异速生长研究。结果 研究表明12个不同产地的5年生滇重楼根茎生物量平均值在1.19～19.73 g，不同产地之间具有显著差异（P＜0.05），但该差异与产地经纬度、年均温度、年均降水量之间不存在显著相关性（P＞0.05）。滇重楼植株的根茎生物量均随生长年限增加而增加，种植5年后根茎生物量一直呈现快速积累趋势。相同生长年限植株中，云南省元阳县样品根茎生物量显著高于姚安县样品（P＜0.05），并且数值具有更高的变化范围。滇重楼植株的总生物量、株高、叶生物量、叶长、叶宽、叶面积均随生长年限增加而增加，比叶面积均随生长年限增加而减小。云南省元阳县滇重楼样品根茎生物量占总生物量的比例随生长年限增加而增加，云南省姚安县样品根茎生物量比例不随生长年限变化而变化。滇重楼植株总生物量和根茎生物量、株高、叶生物量、比叶面积之间均存在异速生长关系。与云南省姚安县滇重楼样品相比，云南省元阳县滇重楼样品根茎生物量积累速率高、株高较矮、叶生物量积累速率较低、比叶面积较大。结论 培育高产滇重楼，应考虑选择株高较矮、叶片较大而薄的地理种源；人工栽培滇重楼时需要注意合理控制光照等因素，从而提高滇重楼药用部位产量。]]> 2022/6/1 16:28:48 327true 目的 以茜草Rubia cordifolia为研究对象，探讨施加外源不同浓度茉莉酸甲酯（methyl jasmonate，MeJA）和赤霉素（gibberellins，GA3）对茜草幼苗生长、相关酶活性及主要活性成分含量的影响。方法 取大小一致的1月龄茜草实生苗转入霍格兰营养液中培养30 d后，分别添加不同浓度的MeJA（25、50、100、150 μmol/L）和GA3（50、100、200、400 mg/L）继续培养7 d，测定茜草的地上、地下部分长度和干鲜质量、渗透调节物质含量、抗氧化酶活性及5种主要活性成分的含量。结果 在所选择浓度范围内，MeJA对茜草幼苗生长的影响为低浓度促生，高浓度抑制；GA3的影响则表现为低浓度抑制，高浓度促生。生理活性方面，50μmol/L MeJA和400 mg/L GA3处理下，叶绿素、游离脯氨酸和总蛋白含量显著增高；过氧化物酶（peroxidase，POD）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）、过氧化氢酶（catalase，CAT）、丙二醛（malondialdehyde，MDA）活性因激素种类及浓度而呈差异性，150 μmol/L MeJA和50 mg/L GA3处理下活性较强。MeJA和GA3的浓度对茜草活性成分积累影响很大，50～150 μmol/L MeJA可以显著促进茜草幼苗中茜草素、羟基茜草素、1,8-二羟基蒽醌、甲基异茜草素和大叶茜草素的积累，且随着MeJA浓度的增加促进作用越强（P＜0.05）；200、400 mg/L GA3处理可以明显增强活性成分的积累（P＜0.05）。结论 茜草幼苗的生长发育、生理活性及主要活性成分的积累受外源MeJA和GA3浓度的影响，50 μmol/L MeJA和400 mg/L GA3诱导能够显著提高茜草幼苗生物量及促进茜草幼苗中茜草素、羟基茜草素、1,8-二羟基蒽醌、甲基异茜草素和大叶茜草素的积累。]]> 2022/6/1 16:28:48 326true 目的 采用指纹图谱、多指标成分定量与化学模式识别相结合的方法，评价不同产地草果Amomum tsaoko质量，为其进一步开发利用提供依据。方法 采用HPLC法，流动相为甲醇-0.2 mol/L磷酸水溶液进行梯度洗脱，柱温30℃，体积流量1 mL/min，检测波长270 nm，对15批不同产地草果药材建立指纹图谱及6种有效成分含量测定，运用聚类分析（hierarchical cluster analysis，HCA）、主成分分析（principal component analysis，PCA）和正交偏最小二乘法-判别分析（orthogonal partial least squares-discriminant analysis，OPLS-DA）对草果进行化学模式识别研究。结果 建立了15批草果药材的指纹图谱，相似度为0.737～0.991，共标定21个共有峰，指认了6个成分，含量测定结果表明不同产地草果中化学成分含量存在明显差异；HCA分析15批草果明显分为3类；PCA得到4个主成分的累计方差贡献率为85.941%；OPLS-DA表明原儿茶酸、原儿茶醛、对羟基苯甲酸可能是影响草果药材质量的差异标志物。结论 建立的草果HPLC指纹图谱及6个成分含量测定方法的专属性强，且准确、可靠，结合化学模式识别可用于草果的药材鉴别和质量控制。]]> 2022/6/1 16:28:48 325true 目的 建立栀子的指纹图谱，并同时建立其中6个主要成分含量的一测多评分析方法，以期对栀子药材进行整体质量控制。方法 基于高效液相色谱结合紫外变波长分段检测，在各类化合物的最大吸收波长下，建立包含环烯醚萜苷类（240 nm）及二萜类（440 nm）成分信息的栀子指纹图谱。在此基础上，分别以栀子苷和西红花苷I为内标，计算4个环烯醚萜苷类成分（山栀苷、山栀子苷B、京尼平龙胆双糖苷和栀子苷）和2个二萜类成分（西红花苷I和西红花苷II）的校正因子，通过4台高效液相色谱仪及4根不同色谱柱进行耐用性考察，并与外标法测定结果比较，验证一测多评方法的准确性。结果 19批栀子的指纹图谱共标定20个共有峰，相似度为0.981～0.999；在240 nm下，以栀子苷为内标，山栀苷、山栀苷B、京尼平龙胆双糖苷和栀子苷的校正因子分别为1.15、1.36、1.54和1.00；440 nm下，以西红花苷I为内标，西红花苷II的相对校正因子为1.11，且耐用性较好。应用一测多评法测定6个成分的含量，与外标法测定结果比较，含量准确度均值为100.14%，RSD＜3%，无明显差异。19批栀子中6个待测成分的质量分数范围分别为0.09%～0.35%、0.28%～0.82%、0.31%～1.00%、4.60%～7.78%、0.62%～1.64%和0.07%～0.26%。结论 所建立的指纹图谱结合一测多评法简便可行，可为栀子药材整体质量控制提供一定参考和依据。]]> 2022/6/1 16:28:48 324true 目的 研究余甘子Phyllanthus emblica药材表面白霜的化学组成及析霜对其生津作用的影响，以期为余甘子“析霜者佳”的传统认知提供科学依据。方法 收集余甘子药材表面形成的白霜，采用扫描电镜、能谱仪、傅里叶变换红外光谱仪和UPLC-Q-TOF-MS分析余甘子药材在贮藏过程中表面形成的白霜的化学成分；采用电子舌（E-tongue）结合志愿者的感官评定，研究药材表面析霜前后生津作用的变化；采用质谱成像技术对余甘子中化合物的含量和空间分布信息进行研究，分析其“析霜”代谢物的可能变化规律。结果 扫描电镜观察表明余甘子药材表面析出白霜主要由细小的团簇晶体结构组成，能谱仪分析表明白霜主要为有机物组成，主要含有R-COOH、C-C、C-O等官能团；UPLC-Q-TOF-MS研究发现，白霜的主要成分是小分子有机酸和多酚，如粘酸、柠檬酸、DL-(＋)-苹果酸和没食子酸等。感官评价及E-tongue研究发现，表面析霜后，余甘子药材滤液的酸味、涩味和苦味均不同程度增加，生津作用更加明显；质谱成像结果发现随着余甘子的干燥，其内部的DL-(＋)苹果酸、没食子酸等成分会发生表面迁移。结论 余甘子药材表面白霜主要是小分子有机酸及多酚类物质，“析霜”后酸味、涩味和苦味有所增强，有效成分含量增加，生津与健胃消食作用增强。]]> 2022/6/1 16:28:48 323true 目的 探讨加工工艺对细毡毛忍冬Lonicera similis花蕾品质的影响。方法 对细毡毛忍冬花蕾的杀青时间、烘干温度和干燥方式设置15种不同处理方式，测定其粉末色度，钙、镁、磷、钾、铁、锌、硼、锰、镍和钼10种营养元素含量，砷、镉、铜、铅和汞5种重金属元素含量和绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C、木犀草苷、芦丁和马钱苷7种主要化学成分含量；采用加权评分法进行多指标综合评价。结果 不同加工方法药材色泽差异大，其中不杀青直接40℃烘干和直接冷冻干燥2种方法色泽较佳，药材呈绿色，褐变指数分别为39.70%、40.00%；7个主要化学成分总量最高（144.70 mg/g）的加工方式是杀青10 min、80℃烘干，最低（48.10 mg/g）的加工方式是不杀青、60℃烘干；综合加权评分排在前3位的分别为杀青10 min、40℃烘干，杀青10 min、80℃烘干，杀青10 min、60℃烘干；加工因素对褐变指数的影响顺序为烘干温度＞干燥方式＞杀青时间，对元素含量的影响顺序为烘干温度＞杀青时间＞干燥方式，对主要化学成分的影响顺序为杀青时间＞烘干温度＞干燥方式。结论 烘干温度对细毡毛忍冬花蕾的褐变程度和元素含量有显著影响，杀青时间对其有效成分含量有显著影响。细毡毛忍冬花蕾最适宜的产地加工方法为杀青10 min、40℃烘干。]]> 2022/6/1 16:28:48 322true 目的 克隆新塔花Ziziphora bungena黄酮类化合物生物合成途径中关键酶查耳酮合成酶(chalcone synthase,CHS)基因,对其进行组织表达特异性分析,构建原核表达载体并进行重组蛋白诱导表达。方法 结合新塔花转录组数据设计特异性引物,通过RT-PCR克隆新塔花查耳酮合成酶zbCHS基因,对其进行生物信息学分析,通过RT-PCR进一步分析其组织表达特异性,构建原核表达载体pET28a-chs,并转化至BL21(DE3)感受态细胞,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导重组蛋白的表达。结果 zbCHS基因长1226 bp,包含一个长度为1176 bp的开放阅读框,编码319个氨基酸,其理论相对分子质量为42 848.37。该编码蛋白定位于细胞质中,不存在跨膜区及信号肽,为非分泌蛋白,有1个糖基化位点和31个磷酸化位点。α-螺旋是该蛋白多肽链中大量的结构元件,散布于整个肽链之中。系统进化树分析表明,新塔花zbCHS基因与丹参、藿香、紫苏等亲缘关系最为接近。RT-PCR结果显示zbCHS基因在各组织中均有所表达,在叶中表达量较高,花相对表达量次之,根、茎中表达量相对较低。原核表达载体pET28a-chs在BL21(DE3)感受态细胞表达系统中,经IPTG诱导后,有明显的重组蛋白表达,其相对分子质量为42 800,与预测相符合。结论 通过对zbCHS基因的全长cDNA克隆、组织表达特异性分析和原核表达载体的构建,为进一步研究zbCHS基因在新塔花黄酮类化合物生物合成与基因调控提供依据,最终为该药材品质的提升奠定基础。]]> 2022/5/25 14:20:17 321true 目的 通过对杜仲LBD基因家族进行全面鉴定,以期为EuLBDs基因功能深入研究提供依据。方法 以杜仲基因组数据库为基础,利用生物信息学方法,对杜仲LBD基因家族进行全面鉴定和表达模式分析。结果 从杜仲基因组中共鉴定到19个EuLBDs,分为Class I与Class II 2大类,进一步划分为6个亚家族(Ia、Ib、Ic、Id与IIa、IIb)。理化性质分析显示:EuLBDs编码152~293个氨基酸,理论等电点分布于4.62~9.91,相对分子质量区域为17 420~31 820,均为亲水性蛋白,以α-螺旋和不规则卷曲为主,亚细胞定位于细胞核中。EuLBD基因家族含有类锌指、亮氨酸拉链和甘氨酸-丙氨酸-丝氨酸(GAS)保守结构域。表达模式分析显示,EuLBDs参与杜仲叶片发育,随着叶片发育,水平逐渐降低,EuLBDs基因表达不受叶片胶含量的影响。结论 从杜仲基因组水平对LBD基因家族进行了全面鉴定和生物信息学分析,为进一步研究杜仲LBDs基因功能奠定基础。]]> 2022/5/25 14:20:17 320true 目的 建立一种同时测定金银花Lonicerae Japonicae Flos 20种黄酮类成分含量的方法,并对含量结果进行多元统计分析,探讨不同种质金银花发育过程中黄酮类成分的含量变化规律,为优良品种选育与金银花药材质量控制提供技术支撑。方法 建立基于HPLC-ESI-MS/MS同时测定金银花20种黄酮类成分含量的方法,测定5种种质金银花不同发育时期黄酮类成分含量,利用主成分分析(principal components analysis,PCA)和正交偏最小二乘判别分析(orthogonal partial least-squares discrimination analysis,OPLS-DA)研究其变化规律,并筛选差异性活性成分。结果 建立的HPLC-ESI-MS/MS方法重复性好、稳定性好,5种种质金银花总黄酮含量:华金6号>九丰一号>四季花>红白忍冬>华金3号,木犀草苷含量:华金6号>红白忍冬>九丰一号>四季花>华金3号;在各种质金银花发育过程中,木犀草苷和总黄酮含量在二白期或大白期最高;通过多元统计分析确定了不同种质间存在9个潜在差异性黄酮标志物(野漆树苷、似梨木双黄酮、忍冬苷、水仙苷、芦丁、异鼠李素-3-O-葡萄糖苷、圣草酚-7-O-葡萄糖苷、芹菜素和山柰酚-3-O-芸香糖苷),不同发育时期有7个差异性黄酮标志物(苜蓿素、野漆树苷、香叶木素、芹菜素-7-O-葡萄糖苷、金圣草黄素、紫云英苷和圣草酚-7-O-葡萄糖苷)。结论 金银花黄酮类成分组成与含量既决定于种质又受发育程度的影响,选育优良品种、确定合理采收时期是提高金银花药材黄酮类成分含量的有效途径。]]> 2022/5/25 14:20:17 319true 目的 筛选西红花Crocus sativus球茎腐烂病拮抗真菌,探讨其抑菌机制。方法 以前期分离得到的24株西红花内生真菌为材料,采用平板对峙法筛选球茎腐烂病拮抗真菌;应用ITS分子技术进行菌种鉴定,用扫描电镜观察拮抗后病原菌尖孢镰刀菌Fusarium oxysporum菌丝形态;检测拮抗菌株CS05菌丝产生β-1,3-葡聚糖酶与几丁质酶的含量及病原菌产碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AKP)的含量。结果 筛选得到对尖孢镰刀菌有显著拮抗作用的内生真菌8株,其中CS05抑制效果最好,相对抑制率为(76.53±3.82)%;将CS05鉴定为担子菌门多孔菌目栓菌属真菌变色栓菌Trametes versicolor;CS05能产生β-1,3-葡聚糖酶与几丁质酶,促使尖孢镰刀菌胞外AKP含量增加,菌丝出现稀疏紊乱、缠绕皱缩等现象。结论 西红花内生真菌CS05能较好地拮抗球茎腐烂病菌尖孢镰刀菌,为西红花球茎腐烂病的生物防治提供了参考依据。]]> 2022/5/25 14:20:18 318true 目的 建立吴茱萸生品与炮制品HPLC指纹图谱,通过计算相似度,结合化学模式识别方法,评价吴茱萸和制吴茱萸的质量,探讨炮制前后化学成分的差异,阐释吴茱萸炮制后毒性降低的机制。方法 通过高效液相色谱法建立吴茱萸及制吴茱萸的指纹图谱,运用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》(2012版)和SPSS17.0软件对相应图谱进行相似度评价、聚类分析(cluster analysis,CA)和主成分分析(principal analysis,PCA)。结果 吴茱萸和制吴茱萸的指纹图谱相似度均大于0.985,均含有12个相同的共有峰,指认出了其中的5个。以吴茱萸碱为参照峰,比较各共有峰的相对峰面积,发现吴茱萸炮制后除3号峰外,其余共有峰均有不同程度的下降,以2号峰和10号峰有显著性下降。聚CA结果显示,吴茱萸生品可分为2大类,其中来源于江西的为一类,来源于浙江和湖南的为一类;经PCA分析,前3个主成分因子的累积方差贡献率为87.405%,以2、5(绿原酸)、6(金丝桃苷)、7、8(柠檬苦素)、9(吴茱萸碱)、10(吴茱萸次碱)和12号峰对吴茱萸炮制前后化学成分差异变化的贡献较大。结论 吴茱萸HPLC指纹图谱的构建及化学模式识别可为阐释吴茱萸炮制后毒性降低机制提供科学依据。]]> 2022/5/25 14:20:18 317true 目的 比较乌天麻Gastrodia elata f. glauca、绿天麻G. elata f. viridis、红天麻G. elata f. elata和黄天麻G. elata f. flavida 4种药用天麻变型的遗传多样性、遗传结构和遗传信息差异,为天麻新品种选育提供依据。方法 从不同产地收集了40份不同天麻变型的花茎。应用简单重复序列(simple sequence repeat,SSR)分子标记与高分辨率熔解曲线(high-resolution melting,HRM)相结合技术,通过聚丙烯酰胺凝胶电泳,从80对引物中筛选出15对多态性高的SSR引物。对这些天麻花茎样品进行实时荧光定量PCR扩增,统计遗传多样性参数,分析群体遗传结构,结合40份天麻的HRM数据进行聚类分析。结果 从15对SSR引物检测到114个等位基因,平均每对引物7.6个。天麻样品的观测杂合度(observed heterozygosity,H_o)、期望杂合度(expected heterozygosity,H_e)、和Nei's多样性指数(Nei's diversity index,N_ei)的平均值分别为0.981 3、0.801 9和0.812 1,表明天麻的遗传多样性丰富。这4种天麻变型的遗传多样性不同,从高到低依次为乌天麻、绿天麻、红天麻和黄天麻。SSR-HRM分析将这40份天麻样品分为4个基因型,各天麻变型的大多数样品分布在不同的基因型中。这4种天麻变型之间的遗传距离不同,乌天麻与绿天麻遗传距离最近,与黄天麻遗传距离最远。结论 SSR-HRM技术对天麻基因分型更准确。这4种天麻变型的遗传信息不同,但存在基因交流现象。乌天麻与绿天麻亲缘关系最近,与红天麻次之,与黄天麻亲缘关系最远。可利用不同天麻变型遗传信息差异进行新品种选育。]]> 2023/4/28 14:31:27 316true 目的 探究甘草属7种植物叶绿体基因组密码子使用模式及影响因素。方法 从NCBI获取国内已有的7种甘草属植物叶绿体全基因组,筛选得到49条共有蛋白编码序列,使用codonW 1.44、EMBOSS、SPSS 26.0等分析密码子偏好性相关参数。结果 7种甘草属物种叶绿体基因组密码子不同位置的GC含量均小于50%,共得到了29个高频密码子,其中有28个密码子第3位碱基为A/U,筛选得到的17个最优密码子第3位碱基均为A/U。7种甘草属植物叶绿体蛋白编码基因的ENC值均大于35,密码子偏好性较弱。PR2-plot分析、ENC-plot分析和中性绘图分析结果显示突变压力和自然选择均为这7种甘草属物种叶绿体基因组密码子偏好性形成的重要影响因素,但自然选择对密码子偏好性形成的贡献更大。基于叶绿体编码序列构建的系统发育树与基于RSCU的聚类分析结果具有一定的相似性,叶绿体基因组密码子偏好性与物种的系统发育关系存在一定的联系。结论 7种甘草属植物叶绿体基因组密码子第3位倾向于使用A/U碱基,自然选择是密码子偏好性形成的主要影响因素。]]> 2023/4/28 0:00:00 315true 目的 研究不同栽培模式下,铁皮石斛Dendrobium officinale可培养内生真菌的菌群结构、多样性差异及分布规律。方法 采用形态学和分子生物学技术,对3种栽培模式(石壁附生、断木附生、大棚种植)铁皮石斛内生真菌进行分离、纯化与鉴定,分析其菌群结构与分布规律。结果 共分离得到内生真菌2023株,划分为152个形态型,经分子鉴定后确定为29个分类单元,归属到真菌界2个门3个纲11个目15个科18个属;不同栽培模式铁皮石斛内生真菌菌群结构和多样性存在差异,其中刺盘孢属Colletotrichum、拟盘多毛孢属Pestalotiopsis、耙齿菌属Irpex、隔孢伏革菌属Peniophora为3种栽培模式共有属;石壁附生铁皮石斛内生真菌多样性最高,断木附生次之,大棚种植最低。茎鲜质量、生物量与叶点霉属Phyllosticta sp.、刺盘孢属Colletotrichum sp.、镰刀菌属Fusarium sp.、隔孢伏革菌属Peniophora sp.之间存在显著正相关,与Hypoxylon sp.之间存在显著负相关。结论 丰富了铁皮石斛内生真菌资源,为内生真菌次生代谢产物及其活性研究提供了菌种资源,也为铁皮石斛高产栽培提供了参考依据。]]> 2023/4/28 14:31:28 314true 目的 采用便携式近红外(near infrared,NIR)光谱仪建立东阿阿胶鉴别分析模型,并优选出特征波段。方法 采用BWS903型NIR光谱仪和microPHAZIR™ RX型NIR光谱仪2款便携式光谱仪采集了47份阿胶样品的光谱,并采用软独立建模聚类分析(soft independent modeling class analog,SIMCA)和偏最小二乘判别分析(partial least squares discriminant analysis,PLS-DA)等化学计量学算法,建立了东阿阿胶的判别分析模型。结果 所建立模型能够准确区分东阿阿胶和其他品牌阿胶。在此基础上,采用相关系数法优选出BWS903光谱特征波长为1300~1380 nm和1460~1540 nm;microPHAZIR™ RX光谱特征波长为1600~1680 nm和2160~2240 nm,上述波段分别代表-NH₂和-CONHR肽键的1级倍频吸收,这些波段可作为东阿阿胶的特征波段,并可据此设计专用型、小型化的NIR光谱仪,用于东阿阿胶的品牌鉴定。结论 便携式NIR光谱携带方便,分析快速,借助化学计量学算法即可进行品牌鉴别,在名贵中药材的鉴定方面具有较好的推广应用前景。]]> 2023/4/28 0:00:00 313true 目的 建立杜仲Eucommia ulmoides叶高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,结合化学模式识别评价其质量。方法 采用Ultimate XB-C₁₈色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),以乙腈-0.1%磷酸溶液为流动相梯度洗脱,体积流量1.0 mL/min,柱温30℃,进样量20 μL,波长为207、240、277、350 nm,检测杜仲叶中12种活性成分含量并建立指纹图谱,应用SPSS 25.0和SIMCA 14.1软件进行聚类分析(clustering analysis,CA)、主成分分析(principal component analysis,PCA)和偏最小二乘法-判别分析(partial least squares discrimination analysis,PLS-DA),对不同产地杜仲叶进行质量评价。结果 不同产地杜仲叶桃叶珊瑚苷、京尼平苷酸、原儿茶素、绿原酸、儿茶素、车叶草苷、咖啡酸、京尼平苷、松脂醇二葡萄糖苷、芦丁、异槲皮素、紫云英苷差异显著,质量分数范围分别为0.053%~4.563%、0.078%~0.977%、0.018%~0.084%、2.634%~6.183%、0.010%~0.088%、0.124%~0.582%、0.001%~0.242%、0.033%~0.163%、0.065%~0.215%、0.045%~0.865%、0.199%~0.910%、0.020%~0.221%;20批杜仲叶HPLC指纹图谱确定了25个共有峰,经对照品指认11个色谱峰,相似度0.905~0.996;通过聚类分析将样品按不同产地分为2大类,最后筛选出绿原酸、桃叶珊瑚苷、车叶草苷、芦丁、松脂醇二葡萄糖苷是导致不同产地样品差异的标志性化合物。结论 建立的指纹图谱方法稳定、可靠、重复性好,结合化学模式识别可用于杜仲叶质量评价。]]> 2023/4/28 14:31:28 312true 目的 研究勾儿茶属药用植物多叶勾儿茶Berchemia polyphylla及变种光枝勾儿茶B. polyphylla var. leioclada叶绿体基因组成及结构特征，同时为勾儿茶属系统发育及进化研究提供参考。方法 基于Illumina平台对勾儿茶属药用植物多叶勾儿茶及变种光枝勾儿茶进行叶绿体基因组测序，利用生物信息学对其序列进行组装、注释和特征分析，与同科小勾儿茶属、枣属、枳椇属、鼠李属、冀核果属等的叶绿体全基因组进行比较分析，确定其在鼠李科植物中系统发育位置。结果 多叶勾儿茶和光枝勾儿茶叶绿体基因组具有典型环状四分体结构，全长分别为161 185、161 210 bp，注释得到131个基因，其中蛋白质编码基因86个，37个tRNA基因和8个rRNA基因。勾儿茶属与鼠李科其它药用植物比较基因组学分析表明，勾儿茶属叶绿体基因组具有较高的保守性，叶绿体基因组之间没有重排或倒置，IR区序列变异最低，LSC区的变异程度最高，其中ndhA、ycf1、ycf3、rpl16、clpP以及atpF等基因的编码区存在差异，这些位点为勾儿茶分子鉴定提供新位点。系统发育树表明勾儿茶属与鼠李属及翼核果属有较近的亲缘关系，且多叶勾儿茶和光枝勾儿茶互为姊妹类群。结论 解析了勾儿茶属多叶勾儿茶和光枝勾儿茶叶绿体基因组结构，探讨了勾儿茶属系统发育关系，为勾儿茶属药用植物分类鉴定、系统进化及资源开发利用等研究奠定基础。]]> 2023/4/20 18:45:46 311true 目的 对不同商品等级单枝味连Coptis chinensis的皮部/木部生物碱类成分进行比较分析，阐明生物碱类成分在不同组织部位中的分布规律。方法 以不同商品等级的单枝味连为研究对象，使用游标卡尺对其皮部和木部的占比进行量化，色差仪测定根茎及其2个组织部位的色差值，紫外分光光度计测定三者的总生物碱含量。使用一测多评法和外标法对木兰花碱、格兰地新、非洲防己碱、药根碱、表小檗碱、黄连碱、巴马汀及小檗碱8种有效成分的含量进行测定，结合方差分析、相关性分析、主成分分析、正交偏最小二乘判别分析方法对皮部/木部化学成分进行比较，寻找皮部木部差异的标志性成分。结果 不同商品等级的单枝味连，直径越大，皮部/木部比值越大，其中三等占比0.63、二等占比0.78、一等占比0.87、特等占比1.01。根茎及其皮部色差值L^*、a^*、b^*均小于木部。总生物碱在根茎及其皮部和木部的含量分别为15.96%、16.68%和13.53%，皮部显著高于木部（P＜0.001），不同商品等级之间没有显著性差异。所测定的8种成分中，大部分生物碱含量随商品等级的升高呈现降低趋势，外标法和一测多评法结果基本一致。不同商品等级单枝味连根茎生物碱含量与质量、长度和皮部/木部占比没有显著相关性，黄连碱含量与直径呈显著负相关（P＜0.05）；色差值L^*与盐酸药根碱和黄连碱含量呈显著负相关（P＜0.05），与盐酸巴马汀和小檗碱含量呈极显著负相关（P＜0.01），色差值a^*与木兰花碱含量呈极显著正相关（P＜0.01），色差值b^*与盐酸巴马汀含量呈显著负相关（P＜0.05）。不同组织部位颜色测定值L^*、a^*、b^*与生物碱含量呈极显著负相关（P＜0.01）。主成分分析筛选出累计贡献率达到81.59%的3个主成分，偏最小二乘法找出皮部木部差异的4个标志性成分，分别为黄连碱、小檗碱、非洲防己碱和巴马汀。结论 通过色差分析、紫外分光光度法、高效液相色谱法和化学计量学方法揭示了不同商品等级单枝味连不同组织部位的生物碱类成分分布规律，为黄连“辨状论质”提供了科学依据。]]> 2023/4/20 18:45:47 310true 目的 建立木香Aucklandia lappa的高效液相色谱（HPLC）指纹图谱并对特征峰进行液相色谱串联三重四级杆质谱仪（LC-MS）分析，考察木香抗氧化、抗辐射的谱效关系。方法 对12批不同产地的木香药材进行HPLC分析，建立指纹图谱。采用LC-MS技术对指纹图谱中的共有特征峰进行结构分析。以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）自由基清除率为抗氧化作用的药效指标，研究其抗氧化作用。采用MTT法检测辐射后的UC-MSC细胞活性，以细胞活力值为抗辐射作用的药效指标，研究其抗辐射作用。采用灰色关联分析法建立谱效关系，研究木香抗氧化与抗辐射的物质基础。结果 通过指纹图谱的建立，共标定了12个共有峰，其中12批药材相似度均大于0.971。通过文献比对和LC-MS数据解析，确定了3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸、东莨菪内酯、木香烃内脂和去氢木香内酯等12个特征峰成分。通过清除DPPH自由基结果发现，12批木香均有抗氧化能力，谱效分析结果显示，去氢木香内酯同分异构体和去氢木香内酯与抗氧化能力有密切关系。通过细胞活力值显示，12批木香部分批次具有抗辐射能力。根据谱效关系分析，发现木香抗辐射与诱导细胞毒性的物质基础可能均是异木香酸甲酯、木香烃内脂和去氢木香内酯。结论 为木香药材的质量控制及研究其抗氧化和抗辐射作用，提供了一种有效、快速地评价方法。]]> 2023/4/20 18:45:47 309true 目的 研究林下参Panax ginseng皂苷含量与生态因子的关系，明确影响林下参皂苷积累的主导生态因子，为林下参的生态种植提供理论依据。方法 以吉林省和龙市12个样地林下参为研究对象，采用HPLC法测定林下参7种单体皂苷含量，并测定土壤含水量、有机质、空气温湿度、透光率等14个生态因子，运用相关性分析、灰色关联度分析、逐步回归分析等统计方法，探讨人参皂苷含量与生态因子的关系。结果 不同样地林下参皂苷含量存在显著差异，其中各样地含人参皂苷Rb₁为2.93～6.13 mg/g，均超出《中国药典》2020年版标准（人参皂苷Rb₁不少于0.20%），而人参皂苷Rg₁与人参皂苷Re之和为1.23～5.61 mg/g，有5个样地未达到药典标准（人参皂苷Rg₁与人参皂苷Re之和不少于0.30%），可见不同生境条件对林下参皂苷含量积累具有较大影响；综合多项数学统计结果，土壤含水量、有机质含量、碱解氮含量、空气温度和适中的透光率等5个生态因子对林下参皂苷含量存在明显的正向影响，土壤容重存在明显的负面影响，而其他8个生态因子的影响未得到一致性支持；三醇型人参皂苷受生态因子变化的影响较大，而二醇型人参皂苷具有较高的生态稳定性，这一现象值得深入研究。结论 土壤含水量、土壤有机质、土壤碱解氮、空气温度和透光率对林下参皂苷的合成积累具有较大影响，在林下参生态种植基地选择与管理中应给予重视。]]> 2023/4/20 18:45:47 308true 目的 建立运用气相色谱-串联质谱（GC-MS/MS）法快速筛查460份中药材及其中药饮片（43份）中常用的50种农药残留。方法 通过对比《中国药典》2020版中药中农药残留的前处理方法，优选中药中50种农药残留的适配性前处理方法。中药样品经乙腈溶剂提取，以QuEChERS法处理，采用GC-MS/MS测定，内标法定量。结果 在460份检测样品中共检出农药残留66份，总检出率为14.3%，检出禁用农药6份，检出率为1.3%，43份中药饮片中农药残留检出率为11.6%，未检出禁用农药。农残的检出是季节性分布集中出现在第3、4季度，农贸市场和种植地的农残检出率明显高于医院和药店，并且存在农残超标情况。中药中根类和叶类受污染最重，中药材全草类中农药残留最多，检出率为20.4%，其次为叶类18.3%和根茎类16.3%，中药饮片中农残最高为叶类，检出率为15.4%，全草类检出率为11.1%、根茎类检出率为6.2%，全草类、根茎类和叶类存在样品中检出多种农药残留的现象。结论 该方法简单快速、灵敏度高、重现性好、准确度高，可快速筛查中药中农药残留，为保障中药质量提供参考。]]> 2023/4/20 18:45:47 307true 目的 研究掌叶大黄Rheum palmatum蒽醌合成关键基因。方法 利用RNA-seq技术对掌叶大黄根、根茎、叶进行转录组测序和生物信息学分析。结果 经Trinity软件组装后获得140 224条Unigenes，全部Unigenes能被非冗余蛋白库、核酸序列数据库、京都基因组百科全书数据库、蛋白质序列数据库、蛋白家族数据库、基因本体联合数据库、同源蛋白簇数据库等公共数据库注释。差异基因分析结果显示，掌叶大黄的根与叶相比，差异表达基因总数为4175个，根与根茎相比，差异表达基因总数为992个，叶与根茎相比，差异表达基因总数为4469个。差异表达基因代谢途径分析分析发现，苯丙烷生物合成通路在叶比根中被显著富集。蒽醌类化合物合成相关关键差异表达基因分析发现，关键差异表达基因主要涉及甲羟戊酸（mevalonic acid，MVA）途径、甲基赤藓糖醇（methylerythritol 4-phosphate，MEP）、莽草酸及聚酮途径的13个基因。结论 为进一步挖掘大黄有效成分生物合成过程中的关键基因，为解析调控其有效成分生物合成途径提供研究基础。]]> 2023/4/4 9:47:44 306true 目的 探知宁夏枸杞Lycium barbarum雄性不育发生涉及的相关基因。方法 以雄性不育品种“宁杞5号”和正常可育品种“宁杞1号”单双核花粉时期花药为材料，构建cDNA文库，Illumina HiSeq2500高通量平台进行转录组测序。结果 组装得到14 154条Unigenes序列，在错误发现率（false discovery rate，FDR）＜0.05且差异倍数（fold change，FC）≥2的条件下，获得3012个差异表达基因（differentially expressed genes，DEGs），其中，有2327个DEGs在NCBI的非冗余蛋白质数据库（non-redundant protein databasse，NR）、基因本体数据库（gene ontology，GO）、直源同源群集数据库（clusters of orthologous groups，COG）、基因功能和代谢途径数据库（Kyoto encyclopedia of genes and genomes，KEGG）、真核同源群数据库（euKaryotic orthologous Groups，KOG）、去冗余的蛋白序列数据库（swiss prot protein database，Swiss-Prot）等数据库中有注释信息。相对于“宁杞1号”，在“宁杞5号”中有1019个DEGs上调，1993个DEGs下调。GO分析表明，1116个DEGs被注释到生物学过程、细胞组分和分子功能中；此外，693个DEGs富集到KEGG数据库的50条代谢通路。结合PubMed文献库检索，筛选到细胞色素P450类蛋白（cytochrome P450 98A3-like，CYP450）、受体蛋白激酶（receptor-like protein kinase，RPK）、果胶裂解酶（pectate lyase-like，PLL）、查耳酮合酶（chalcone synthase，CHS）、花药特异蛋白（anther-specific protein，ASP）等23个参与雄性不育相关基因，选取其中9个基因进行qRT-PCR分析，结果与转录组测序基因表达趋势一致。结论 为进一步通过转基因技术验证基因功能提供了候选基因，为解析宁夏枸杞雄性不育发生的分子机制提供了研究基础。]]> 2023/4/4 9:47:44 305true 目的 建立不同生长期刺山柑Capparis spinosa果实的HPLC指纹图谱及多成分含量测定，结合化学模式识别法评价不同生长期刺山柑果的质量，为其进一步研究和开发提供依据。方法 采用Agilent ZORBAX SB-C₁₈色谱柱，以0.1%磷酸溶液（A）-乙腈（B）为流动相进行梯度洗脱，体积流量为1.0 mL/min，检测波长为310 nm，柱温为25 ℃，进样量为10 μL。采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012版）》建立18批次不同生长期刺山柑果的HPLC指纹图谱并分析相似度。使用SPSS 25.0和SIMCA-P 14.1软件进行聚类分析、主成分分析和偏最小二乘法-判别分析（partial least squares-discriminant analysis，PLS-DA）。通过对照品比对指认化学成分并进行定量测定。结果 18批次刺山柑果HPLC指纹图谱共匹配出14个共有峰，分别指认出2号峰为原儿茶酸、13号峰为芦丁、14号峰为山柰酚-3-O-芸香糖苷，指纹图谱相似度范围为0.924～0.991。聚类分析将18批次刺山柑果分为3类；主成分分析得刺山柑成熟果质量较好；经PLS-DA分析筛选出了芦丁和山柰酚-3-O-芸香糖苷等4个差异成分。样品中原儿茶酸、芦丁、山柰酚-3-O-芸香糖苷含量分别为0.032 3～0.059 4、0.115 7～0.464 0、0.062 9～0.330 7 mg/g。结论 建立的刺山柑果HPLC指纹图谱操作简便、结果可靠，原儿茶酸、芦丁和山柰酚-3-O-芸香糖苷可以作为刺山柑果质量评价的指标性成分。]]> 2023/4/4 9:47:44 304true 目的 分析不同产地白芍药材质量差异及特异性化学成分，为白芍的产地判别和质量评价提供依据。方法 采用超高效液相色谱-四极杆飞行时间串联质谱（UPLC-Q-TOF-MS^E）对不同产地白芍样品全成分分析，应用主成分分析（principal component analysis，PCA）、正交偏最小二乘法-判别分析（orthogonal partial least squares-discriminant analysis，OPLS-DA）及聚类分析（cluster analysis，CA）对安徽亳州、四川中江、浙江磐安3个产地共15批次白芍药材进行多元统计分析，根据VIP值＞1和t检验（P＜0.05）筛选不同产地白芍药材中具有显著差异的化学成分。结果 从不同产地白芍药材中共鉴定出44个化学成分，以单萜类、鞣质类、三萜类、黄酮类、挥发油类等成分为主，其中以单萜类成分含量最高。不同产地白芍的化学成分差异明显，共鉴定出16个差异化学成分，其中牡丹皮苷G为安徽亳州产地特有成分，1,2,3,6-四-O-没食子酰-β-D-葡萄糖为浙江磐安产地的特有成分，1-O-β-D-glucopyranosyl paeonisuffrone为四川中江产地特有成分；柠檬酸、1-没食子酸酰葡萄糖、去苯甲酰基芍药苷或异构体、没食子酸、氧化芍药苷、儿茶素、芍药内酯苷、芍药苷、没食子酸甲酯、没食子酰芍药苷或异构体、1,2,3,4,6-O-五没食子酰葡萄糖、白芍苷R₁、牡丹皮苷B为3个产地共有成分，但含量呈现不同的变化规律。结论 不同产地白芍质量差异明显，在共有成分基础上，安徽亳州白芍含有特异成分牡丹皮苷G，浙江磐安白芍含有特异成分1,2,3,6-四-O-没食子酰-β-D-葡萄糖，四川中江白芍的特有成分为1-O-β-D-glucopyranosylpaeonisuffrone，可作为产地鉴别的依据，共有成分及差异成分的含量可作为质量评价的依据。]]> 2023/4/4 9:47:44 303true 目的 鉴定狗脊中的化学成分并建立原儿茶酸的UPLC含量测定方法，比较狗脊药材与饮片中原儿茶酸的含量差异。方法 采用超高效液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱（UPLC-Q-TOF/MS）法，ESI电离源，负离子扫描模式采集狗脊药材质谱数据，根据质谱精确相对分子质量、二级碎片离子、紫外特征吸收光谱，并与文献数据或标准品比对鉴定狗脊药材中的主要化学成分；UPLC色谱条件为采用ACQUITY UPLC CORTECS T3（100 mm×2.1 mm，1.6 μm）色谱柱，以0.1%甲酸水溶液（A）-乙腈-甲醇（70∶30，B）为流动相进行梯度洗脱，柱温40 ℃，体积流量0.4 mL/min，进样量4 μL。结果 从狗脊药材中共鉴定出26个化学成分，主要包括糖苷类成分16个、酚酸类成分2个、皂苷类成分1个、苯丙素类成分1个、脂类成分1个、其他类成分5个；原儿茶酸在0.94～202.00 μg/mL（R²＝0.999 9）线性关系良好，平均回收率为101.90%，检测限为0.20 μg/mL，定量限为0.79 μg/mL。狗脊饮片中原儿茶酸的含量均符合药典规定标准（大于0.020%）；狗脊药材中原儿茶酸的含量（质量分数为0.003 8%～0.005 3%）显著低于饮片（0.556 0%～0.850 9%），虽然经酸水解处理后，原儿茶酸的含量显著升高（0.205 2%～0.450 1%），但仍低于饮片含量。结论 建立的UPLC-Q-TOF/MS方法可快速识别狗脊药材中的主要化学成分，可为狗脊药材的质量控制和药效物质基础研究奠定基础；建立的原儿茶酸UPLC含量测定方法灵敏度高，准确度好，具有可行性，可用于狗脊药材的质量控制。]]> 2023/4/4 9:47:45 302true 目的 克隆竹节参Panax japonicus鲨烯环氧酶基因（squalene epoxidase，PjSE）的全长cDNA序列，进行生物信息学分析和原核表达。方法 设计特异性引物，从竹节参中克隆得到PjSE序列；以PjSE基因序列作为输入数据，利用多序列同源比对等生物信息学分析工具进行序列分析；构建重组原核表达载体pCold-PjSE，转化至大肠杆菌BL21（DE3）中进行蛋白诱导表达；采用实时荧光定量PCR技术分析该基因在竹节参不同组织中的相对表达量。结果 PjSE基因开放阅读框长度为1884 bp，编码627个氨基酸，PjSE蛋白相对分子质量为68 639.49，初步预测其具有跨膜结构域，可能定位在叶绿体上；聚丙烯凝胶电泳结果显示诱导表达蛋白的相对分子质量大小与预期结果一致；该基因在竹节参叶中表达量最高，须根次之，根中表达量最低。结论 PjSE基因的克隆、生信分析及原核表达研究，不仅有助于丰富竹节参中该类功能蛋白的种类和数量，完善竹节参皂苷类成分的生物合成途径，也为后期开展竹节参皂苷的异源合成提供了可供选择的关键基因元件。]]> 2023/3/18 13:40:23 301true 目的 结合高通量测序技术和传统可培养技术对虎耳草Saxifraga stolonifera内生真菌类群及多样性进行系统分析，并对其抗氧化活性进行初筛，为虎耳草内生真菌资源的开发与利用奠定基础，也为天然抗氧剂的筛选提供了菌种资源。方法 虎耳草内生真菌多样性的分析采用Illumina Miseq高通量测序技术和组织分离法，利用化学法检测虎耳草内生真菌对1,1-二苯基-2-苦基肼自由基（2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl radical，DPPH）、羟基自由基（hydroxyl radical, OH）和2,2′-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸[2,2′-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid)，ABT] 等自由基的清除率，进而筛选出具有抗氧化活性的菌株。结果 高通量测序分析发现虎耳草内生真菌隶属于347属，其中Dactylonectria（15.68%）为根部优势菌属，茎部的优势菌属为Humicola（9.57%），而叶部优势菌属为炭疽菌属Colletotrichum（5.33%）。利用组织分离法从虎耳草分离到381株内生真菌，隶属于31个属，主要类群为炭疽菌属（19.42%）、篮状菌属Talaromyces（10.76%）和曲霉菌Aspergillus（8.66%）。基于高通量测序的和组织分离法分析的多样性指数显示虎耳草根部内生真菌的多样性明显高于茎部和叶部，而且虎耳草内生真菌总体多样性指数均高于多数已报道的其他药用植物。24株代表性菌株发酵液的抗氧化活性初筛结果显示：对DPPH、OH和ABTS自由基清除率高于50%的菌株分别占总数的91.67%、79.17%和83.33%，其中菌株Talaromyces sp. HECS10对DPPH、OH和ABTS 3种自由基的清除率均高于75%。结论 虎耳草内生真菌的类群分布具有较高的多样性，且蕴含着较高比例的抗氧化活性菌种资源，为筛选微生物来源的天然抗氧化剂提供了重要资源库。]]> 2023/3/18 13:40:23 300true 目的 建立山慈菇的HPLC指纹图谱，对其特征成分进行含量测定并结合化学计量学分析方法分析不同商品规格山慈菇（冰球子、毛慈菇）化学成分的差异，为山慈菇药材的质量控制提供参考。方法 优化山慈菇药材的提取方法，应用HPLC法分别建立冰球子和毛慈菇指纹图谱，并对特征成分进行含量测定。采用相似度评价、聚类分析（cluster analysis，CA）、主成分分析（principalcomponent analysis，PCA）、正交偏最小二乘法判别分析（orthogonal partial least squares discriminant analysis，OPLS-DA）、Fisher线性判别分析（fisher linear discrimination analysis，FLDA）对特征成分进行数据分析。结果 建立了冰球子和毛慈菇HPLC指纹图谱，分别匹配了46个和43个共有峰，共标示出17个色谱峰，指认出天麻素、loroglossin、dactylorhin A、白芨苷、山药素III、白芨联菲A、白芨联菲B、卷瓣兰蒽8个色谱峰并同时建立了上述除天麻素以外7个成分的HPLC含量测定方法。CA与PCA结果可将2种不同商品规格山慈菇样品明显区分。OPLS-DA分析结合含量测定Fisher判别分析结果表明，2种不同商品规格的山慈菇样品间存在显著性差异的5种成分是loroglossin、dactylorhin A、白芨苷、白芨联菲B、卷瓣兰蒽（P＜0.001）。结论 所建立的HPLC指纹图谱结合CA、PCA、OPLS-DA分析及多成分含量测定能客观、全面、有效地确定不同商品规格山慈菇中主要成分的差异，可为山慈菇质量评价体系的完善提供依据。]]> 2023/3/18 13:40:23 299true 目的 建立金银花和山银花指纹图谱，对河南封丘金银花与湖南不同基原山银花进行区别比较，并对封丘不同品种金银花进行质量评价。方法 利用HPLC法构建金银花和山银花药材的指纹图谱；利用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012版）”进行相似度评价、以“SIMCA13.0”软件进行主成分分析（principal component analysis，PCA）分析；通过HPLC法测定河南封丘不同品种金银花成分含量。结果 河南封丘产金银花相似度均在0.95以上，湖南各基原山银花相似度在0.97以上，金银花和山银花相似度在0.57～0.79，豫金二号与金银花及山银花药材相似度均在0.6以下，共有多成分PCA分析也能显著区分金银花和山银花。金银花各品种中北花1号酚酸类以绿原酸、异绿原酸A和异绿原酸C之和为5.1%，比其他品种高约15%；木犀草苷豫金1号含0.062%、北花1号0.064%，比四季花高约25%、比羊角花高约50%。结论 该化学指纹图谱方法能显著区分金银花和山银花，二者间的化学成分差异亦能为金银花指标性成分的选择提供参考。金银花不同栽培品种成分含量差异明显，豫金1号和北花1号药材质量较优，是具有进一步开发利用的潜在优质种质资源。]]> 2023/3/18 13:40:23 298true 目的 明确肉苁蓉属药用植物叶绿体基因组密码子使用偏性及影响因素。方法 以肉苁蓉Cistanche deserticola、盐生肉苁蓉C.salsa、沙苁蓉C.sinensis和管花肉苁蓉C.tubulosa为研究材料，利用CUSP在线软件、CodonW 1.4.2、SPSS、Microsoft Excel等软件分析其基因密码子使用偏性参数。结果 4个肉苁蓉属植物叶绿体基因组的密码子使用模式相似，密码子均以第3位碱基A/T结尾且密码子使用更偏向A/T碱基；4个物种的有效密码子数值（effective number of codon，ENC）均大于35，说明肉苁蓉属物种叶绿体基因密码子偏好性较弱。中性绘图分析、有效密码字数（ENC-plot）分析、奇偶偏好性（PR2-plot）分析和对应性分析的结果均说明自然选择是影响肉苁蓉属叶绿体基因组密码子偏好性的主要因素。利用同义密码子的相对使用频率（relative synonymous codon usage，RSCU）值筛选出肉苁蓉属4个物种共同拥有4个最优密码子。结论 对肉苁蓉属4个物种叶绿体基因组密码子使用偏性进行分析，揭示了影响其密码子偏好性的影响因素，为进一步探讨肉苁蓉属植物的系统进化、环境适应性和品种改良提供了理论基础。]]> 2023/3/4 10:43:16 297true 目的 对当归Angelica sinensis MADS-box基因家族进行筛选与生物信息学分析，并对SOC1-4基因进行克隆与表达验证。方法 基于当归全长转录组筛选MADS-box基因家族，利用在线工具进行生物信息学分析，并利用qRT-PCR检测SOC1-4基因在不同材料中的表达水平。结果 当归全长转录组中含有29个MADS-box基因家族成员，可分为10个亚家族，共含有6个保守基序，蛋白质序列长度为49～422 aa，相对分子质量为5 697.56～49 624.90，等电点为5.06～11.00，亚细胞结果显示当归MADS-box基因家族成员分别定位于叶绿体、细胞核、细胞质和线粒体，二级结构预测及3D建模显示同一亚家族结构相似；SOC1-4基因克隆片段与全长转录组测序结果一致；SOC1-4基因随种苗春化作用和植株发育时期延长呈现高表达，在抽薹植株、茎和叶中高表达，而在冷冻规避春化作用种苗中呈现低表达。结论 当归含有29个MADS-box成员，各成员理化性质和结构存在一定的差异，SOC1-4基因表达水平与当归抽薹开花生理调控一致，为当归MADS-box基因家族调控抽薹开花相关研究提供借鉴。]]> 2023/3/4 10:43:16 296true 目的 对多刺绿绒蒿Meconopsis horridula MYB转录因子家族的鉴定分析，为多刺绿绒蒿MYB转录因子的生物学功能研究提供理论依据。方法 基于转录组测序数据，利用生物信息学方法对多刺绿绒蒿MYB转录因子家族成员进行鉴定，并对其理化性质、二级结构、系统进化、保守基序和表达模式进行分析。结果 多刺绿绒蒿中共鉴定到106个MYB转录因子，包括49个1R-MYB、52个R2R3-MYB、5个3R-MYB转录因子。多刺绿绒蒿MYB转录因子氨基酸数目为72～976，蛋白相对分子质量为8750～110 680，等电点为4.720～10.452，不稳定系数为28.348～71.011。MYB转录因子均为亲水性蛋白质，亚细胞定位预测主要在细胞核中，蛋白二级结构以α-螺旋和无规则卷曲为主。系统发育分析显示多刺绿绒蒿R2R3-MYB分为24个亚组，其中有18个亚组能分别与拟南芥各亚组聚类。106个MYB转录因子中，28个转录因子的表达量随海拔升高而升高，11个转录因子表达量随海拔升高而降低。结论 首次对多刺绿绒蒿MYB转录因子家族进行了鉴定分析，为深入研究MYB转录因子在多刺绿绒蒿生长发育中的作用和应对高原极端环境的调控机制提供了基础数据和理论依据。]]> 2023/3/4 10:43:16 295true 目的 比较滇重楼Paris polyphylla var.yunnanensis不同生长年限不同产地红外光谱特征，建立产地鉴别模型。方法 收集13个产地3～8年生栽培滇重楼样品，共计841株个体；通过衰减全反射-傅里叶变换红外光谱仪（attenuated total reflection-Fourier transform infrared spectra，ATR-FTIR）采集样品红外光谱；结合多元散射校正（multiplicative scattering correction，MSC）、一阶导数（first derivative，FD）、二阶导数（second derivative，SD）和三阶导数（third derivative，TD）筛选最佳光谱预处理方式；利用偏最小二乘判别模型（partial least squares discrimination analysis，PLS-DA）鉴别相同生长年限不同产地的样品。结果 三阶导数与多元散射校正结合是对3年生和5～8年生样品进行产地鉴别的最佳光谱预处理方式；二阶导数与多元散射校正结合是鉴别4年生不同产地样品最佳光谱预处理方法。变量投影重要性（Variable importance for the projection，VIP）分析显示，3700～1800 cm^-1在不同PLS-DA判别模型中均为贡献较大的变量波段；当剔除无关信息波段之后，PLS-DA模型能够准确鉴别相同年限不同产地滇重楼根茎样品，训练集和预测集鉴别准确率均为100%；置换检验结果显示模型鲁棒性较好。结论 研究建立的方法能够快速有效鉴别不同产地栽培滇重楼，为不同栽培年限滇重楼产地溯源提供理论基础与方法依据。]]> 2023/3/4 10:43:16 294true 目的 建立HPLC测定壮药羊开口中3,3',4'-三甲氧基鞣花酸-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷的含量方法。方法 采用Welch Materials Ultimate AQ C₁₈反相色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相为乙腈-0.2%磷酸水溶液，采用梯度洗脱，体积流量为1.0 mL/min，检测波长为246 nm，柱温为35℃。结果 3,3',4'-三甲氧基鞣花酸-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷进样量在0.02～0.60μg内与峰面积线性关系良好（r＝1.000 0）；平均回收率为105.58%，RSD为2.27%。结论 该方法简便、重复性好、准确度高，可用于壮药羊开口的质量控制。]]> 2023/3/4 10:43:16 293true 目的 比较研究黄芪蜜炙后多糖、单糖、寡糖及非糖类小分子成分的整体变化。方法 结合糖组学和代谢组学，运用超高效液相-二极管阵列检测器（ultra high performance liquid-photodiode array detector，UPLC-PDA）、高效液相-蒸发光散射检测器（ultra high performance liquid-evaporative light scattering detector，HPLC-ELSD）、高效凝胶渗透色谱-蒸发光散射检测器（high performance gel permeation chromatography-evaporative light scattering detector，HPGPC-ELSD）和超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱（ultra high performance liquid chromatography-quadrupole/electrostatic field orbit-trap high resolution mass spectrometr，UHPLC-Q-Orbitrap HRMS）等对黄芪和蜜炙黄芪的多糖、单糖、寡糖以及非糖小分子组分进行分析。结果 黄芪和蜜炙黄芪中均可以找到3种相对分子质量的多糖，但3种多糖的重均相对分子质量、相对分子质量分布以及3种多糖各自的占比存在差异。黄芪和蜜炙黄芪多糖均含有甘露糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖、岩藻糖7种单糖，但两者物质的量比稍有不同（黄芪vs蜜炙黄芪＝0.70∶0.20∶0.85∶5.67∶0.44∶2.04∶0.32 vs 0.79∶0.15∶0.73∶7.10∶0.31∶1.71∶0.35）。在黄芪和蜜炙黄芪中均能检测到寡糖蔗糖，蜜炙后蔗糖含量显著下降（P＜0.01）。黄芪和蜜炙黄芪均含有游离单糖果糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖醛酸和岩藻糖，蜜炙黄芪中的果糖、甘露糖、葡萄糖含量均显著高于黄芪（P＜0.05、0.01），而半乳糖醛酸的含量显著低于黄芪（P＜0.05），岩藻糖含量在黄芪蜜炙后无显著变化。从黄芪和蜜炙黄芪中共筛选出20个差异性非糖小分子成分，主要为皂苷类和黄酮类成分。代表性成分定量分析表明，与黄芪相比，蜜炙黄芪中的黄酮类成分毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花素、芒柄花苷的含量显著降低（P＜0.05、0.01），皂苷类成分黄芪甲苷含量显著增加（P＜0.01）。呋喃醛衍生物5-羟甲基糠醛在黄芪中未检测到，在蜜炙黄芪中的含量显著升高（P＜0.001）。结论 黄芪和蜜炙黄芪的糖类组分与非糖类组分存在显著差异，这可能是造成黄芪蜜炙后补中益气功效增强的主要原因。]]> 2023/3/4 10:43:16 292true 目的 利用老鸦瓣Amana edulis各部位及芽茎不同发育时期RNA-Seq及基因表达量数据，挖掘老鸦瓣芽茎发育过程关键基因。方法 通过加权基因共表达网络分析（weighted gene co-expression network analysis，WGCNA）法构建网络，根据模块功能富集分析及基因表达模式进行共表达模块和核心基因的筛选。结果 通过基因表达量相关性进一步将网络划分为15个模块，将共表达模块与老鸦瓣芽茎3个发育时期相关联，鉴定到与芽茎发生高度相关的3个模块，即T1 MEplum1模块、T2 MEdarkturquoise模块和T3 MElightcyan模块。对3个模块内的基因进行动态基因本体（gene ontology，GO）和京都基因与基因组百科全书（Kyoto encyclopedia of genes and genomes，KEGG）功能富集分析并绘制网络关系图，挖掘出4个与芽茎发育过程相关核心基因（Te_c1647、Te_c3695、Te_c23305、Te_c52282），涉及蛋白质合成、次生代谢产物的糖基化修饰、植物激素调节等。结论 挖掘出的3个共表达模块和4个核心基因有助于进一步阐明老鸦瓣芽茎发育机制。]]> 2023/2/18 15:51:42 291true 目的 对不同产地铁皮石斛Dendrobium officinale茎中的内生真菌群落与农艺性状进行分析，为内生真菌与铁皮石斛差异农艺性状形成的相关性研究提供基础。方法 对采自安徽霍山（AHHS）、贵州独山（GZDS）、云南孟连（YNML）的112份铁皮石斛进行农艺性状测量，ITS测序分析内生真菌群落结构，R语言分析不同产地内生真菌丰度与宿主农艺性状的相关性。结果 差异性分析发现3个产地的铁皮石斛在株高、茎长、茎粗均具有显著性差异（P＜0.05）。内生真菌ITS检测共获得923条特征序列，可注释到3个门、138个属，产地间的铁皮石斛内生真菌在属水平上存在差异，其中AHHS的真菌群落多样性与其他产地具有显著性差异。相关分析表明，内生真菌Gibberella与宿主的株高、茎长、茎粗呈显著负相关（P＜0.05）。结论 不同产地铁皮石斛茎的差异农艺性状形成与共有内生真菌的丰度的改变密切相关。]]> 2023/2/18 15:51:42 290true 目的 考察摘除花蕾对林下参Panax ginseng叶片、叶柄、茎顶端、茎中部、茎基部、芦头、根皮、根心、侧根及须根主要人参皂苷和植物激素水杨酸、脱落酸含量的影响，研究人参皂苷含量变化与植物激素的相关性，为林下参的种植方式优化提供依据。方法 基于UPLC-MS/MS技术分别建立含量测定方法，对林下参10个部位主要人参皂苷和植物激素进行测定，运用单因素分析评价林下参摘蕾与否的质量差异，并采用Spearman相关性分析方法探讨植物激素与人参皂苷含量的相关性。结果 所建立的含量测定方法稳定可行；摘蕾组林下参地下部位中参皮（P＜0.05）和侧根部位（P＜0.001）中人参总皂苷含量显著增加，地上部位包括林下参叶、叶柄与茎总人参皂苷含量均显著降低（P＜0.001）；摘蕾组人参皂苷Rd在芦头（P＜0.05）、根皮（P＜0.01）中的含量显著上升。摘蕾组参皮和参心中水杨酸含量显著降低（P＜0.001）。水杨酸与人参皂苷Rb₁、人参皂苷Rg₁含量呈正相关，与人参皂苷Rg₃、人参皂苷F₁含量呈负相关。结论 摘除花蕾可显著提高林下参除须根外地下部位主要人参皂苷总含量，并使地上部位人参皂苷含量降低，提高林下参综合经济价值。摘除花蕾可引起内源性水杨酸含量变化，且该变化人参皂苷含量与人参皂苷含量变化有相关性。]]> 2023/2/18 15:51:42 289true 目的 利用熵权法结合灰色关联法-TOPSIS法建立三七Panax notoginseng质量评价模型，评价不同产地三七及其炮制品质量。方法 以水分、醇浸出物、皂苷含量、多糖得率、多糖总糖含量、糖蛋白含量及糖醛酸含量作为检测指标，以熵权法计算权重，结合灰色关联法与TOPSIS法对各项指标进行统计分析，建立三七质量评价模型，综合考察红河、文山和曲靖3个产地共15个批次的三七及其炮制品的质量。结果 检测结果表明不同产地不同批次的三七各指标水平大不相同；将三七炮制前后各项指标进行对比，发现蒸制后水分降低，浸出物含量增加，皂苷减少，多糖含量增加；15批三七及炮制品质量排序结果TOPSIS与灰色关联分析基本一致。结论 基于熵权法的灰色关联法-TOPSIS法建立的质量评价模型方便有效，可用于三七质量评价。]]> 2023/2/18 15:51:42 288true 目的 建立以2-异丁基苹果酸葡萄糖氧基苄酯类对照提取物为对照的白及质量控制方法。方法 采用ZORBAX Eclipse Plus C₁₈（100 mm×2.1 mm，1.8 μm）色谱柱，流动相为0.05%磷酸水溶液（A）-乙腈（B），梯度洗脱，柱温35℃，体积流量0.15 mL/min，进样体积为2 μL，检测波长为220 nm。分别采用对照品法和对照提取物法测定17批白及饮片中1,4-二[4-(葡萄糖氧)苄基]-2-异丁基苹果酸酯-2-葡萄糖苷（2-O-葡萄糖基白及苷）、1-[4-(葡萄糖氧)苄基]-2-异丁基苹果酸酯（手参苷Ⅰ）、1,4-二[4-(葡萄糖氧)苄基]-2-异丁基苹果酸-2-(6-O-乙酰基)葡萄糖苷（手参苷Ⅲ）、1,4-二[4-(葡萄糖氧)苄基]-2-异丁基苹果酸酯（白及苷）4个成分的含量，并进行比较。结果 2-异丁基苹果酸葡萄糖氧基苄酯类对照提取物中2-O-葡萄糖基白及苷、手参苷Ⅰ、手参苷Ⅲ、白及苷线性关系良好（r≥0.999 9），进样精密度RSD值在0.001%～0.58%，重复性RSD值在0.27%～0.53%，4种成分的加样回收率在98.42%～101.53%，样品溶液在24 h内各成分稳定性良好。两种方法测定结果进行t检验，P＞0.05，说明两种方法无显著差异，两种检测方法结果具备一致性。结论 验证了2-异丁基苹果酸葡萄糖氧基苄酯类对照提取物可代替单体对照品的可行性，可应用于白及及其制剂的质量控制研究。]]> 2023/2/18 15:51:42 287true 目的 在从全基因组层面对汉麻Cannabis sativa 聚酮合酶（polyketide synthases，PKSs）基因家族进行鉴定和功能分析，为解析汉麻次生代谢产物的合成与积累奠定理论基础。方法 基于已发布的高质量汉麻基因组，利用生物信息学工具对汉麻PKS基因家族进行鉴定并对其物化性质、基因结构、蛋白构象以及表达模式进行分析，利用Alphafold算法对关键PKS蛋白结构进行预测。结果 共鉴定出9个汉麻PKSs（CsPKS1～CsPKS9），分布在5条染色体上。通过对汉麻和其他物种PKS的系统发育分析，CsPKSs主要被分为3组：group1包括CsPKS2～CsPKS4与花药特异性CHS样酶（anther specific chalcone synthase-like，ASCL）同源；group2含有CsPKS1和CsPKS5～CsPKS8为类CHS超家族（chalcone synthase like，CHSL）与苯戊酮合酶（valerophenone synthase，VPS）和茋类合酶（stilbene synthase，STS）等关系较密切；group 3仅含有CsPKS9，为查耳酮合成酶（chalcone synthase，CHS）参与类黄酮的合成。其中，CsPKS1和CsPKS7串联重复，是汉麻中酚萜类化合物合成通路中的橄榄醇合成酶（olivetol synthases，OLS）。此外，CsPKS5和CsPKS8可能参与汉麻茋类化合物的生物合成。CsCHS的功能在进化中相对保守，而CHS-like的CsPKS的功能出现了分化。通过对汉麻不同组织部位和不同品种腺毛的RNA-seq数据分析，汉麻PKSs基因的表达存在组织特异性，尤其与酚萜类、类黄酮、茋类次生代谢产物密切相关的基因在雌花和苞片中特异性表达。结论 为深入研究汉麻PKS基因家族的功能提供了方向，为进一步阐明汉麻中萜酚类化合物的生物合成机制和CsPKSs在汉麻中的生理功能奠定基础，并对开发新聚酮化合物药用资源提供理论基础。]]> 2023/2/3 15:59:45 286true 目的 基于转录组数据筛选鉴定分析甘松Nardostachys jatamansi MADS-box转录因子家族。方法 利用生物信息学的方法全面分析甘松MADS-box基因家族成员的蛋白理化性质、亚细胞定位、基因结构、导肽、信号肽及跨膜结构域、系统进化树。结果 在甘松转录组数据中共鉴定出20个MADS-box转录因子，含有90～365个氨基酸，相对分子质量在10 179.96～41 707.68，理论等电点范围为4.87～10.43，主要在细胞核表达，均含有MADS保守结构域，均不含信号肽、导肽以及跨膜结构域。系统发育分析表明甘松MADS蛋白主要属于TypeII型。结论 利用生物信息学分析手段，鉴定了甘松MADS-box家族转录因子，为甘松深入研究甘松MADS-box蛋白的生物学功能提供参考，为甘松的药用成分合成调控机制提供研究基础，为培育优质甘松新品种提供依据。]]> 2023/2/3 15:59:46 285true 目的 利用流式细胞术和高通量测序技术，对川芎Ligusticum chuanxiong基因组大小和特征进行分析，为川芎全基因组精细测序和分子机制研究奠定基础。方法 以已知基因组大小的绿豆和陆地棉作为内标植物，用流式细胞术估算川芎基因组大小。利用高通量测序技术对川芎基因组进行survey分析，测算出川芎基因组大小、重复序列、杂合率和GC含量等，利用生物信息学对基因组进行预测、注释和基因家族鉴定。结果 估算出川芎基因组大小约为3 058.37 Mb，重复序列为79.79%，杂合率约2.16%，GC含量为36.32%，川芎基因组呈现高重复、高杂合、基因组庞大等特征。共预测到34 864个基因，有30 737个基因在功能数据库中被注释，有53个基因注释到阿魏酸合成过程中。初步鉴定到2058个特异基因家族，2001个单拷贝基因。结论 初步获得了川芎基因组大小、基因组特征、功能基因及基因家族等信息，为进一步川芎全基因组精细测序提供了参考，为阐明川芎阿魏酸等药效成分生物合成提供了基因资源。]]> 2023/2/3 15:59:46 284true 目的 探究蒙古黄芪Astragalus membranaceus三萜皂苷的合成基因及参与后加工修饰的CYP、UGT基因。方法 对两、三年生蒙古黄芪进行转录组测序和生物信息学分析。结果 Illumina HiSeq平台测序共得到42.22 Gb数据，Trinity软件拼接得到369 790条Transcripts和336 068条Unigene，与非冗余蛋白质序列（non-redundant protein sequence database，Nr）、基因本体论（gene ontology consortium，GO）、同源蛋白质簇（cluster of orthologous groups of proteins，eggNOG/COG）、京都基因与基因组百科全书（Kyoto encyclopedia of genes and genomes，KEGG）、Swiss-Prot、Pfam等数据库比对注释，结果显示蒙古黄芪与植物鹰嘴豆Cicer arietinum同源序列最多。KEGG分析表明蒙古黄芪差异基因主要富集在萜类骨架生物合成、二萜类生物合成、氨基酰基-tRNA生物合通路中，进一步从萜类骨架生物合成通路中鉴别出114条差异表达Unigene，包含15种关键酶基因，其中三年生蒙古黄芪hexPS表达均显著上调，ACAT、HMGCS、HMGCR、MVK、MVAK2、MVD、IDI、FDPS、GGPS1、FNTB、STE24、STE14、FCLY、DHDDS有上调也有下调表达的Unigene。进一步挖掘蒙古黄芪三萜皂苷生物合成后修饰基因，发现8条CYP差异表达关键酶基因，分别为acyP、PPID/CYPD、PPIH/CYPH、CYP26A、CYP51、CYP84A、CYP61A、cypD_E/CYP102A/CYP505；2条UGT差异表达关键酶基因HUGT、SUGT1。结论 两、三年生蒙古黄芪的皂苷合成基因和CYP、UGT基因表达存在显著差异，这些基因共同参与黄芪皂苷的合成、加工与修饰。]]> 2023/2/3 15:59:46 283true 目的 揭示不同分布区滇龙胆Gentiana rigescens的遗传多样性与遗传结构。方法 基于GBS（genotyping-by- sequencing）简化基因组（reduced-representation genome sequencing，RRGS）技术对采自云南、四川和贵州的19个居群147株滇龙胆进行测序；利用样本SNPs数据集结合聚类树分析、主成分分析、遗传结构分析、Mantel检验等方法，从基因组水平研究滇龙胆居群的遗传多样性与遗传结构；结果 聚类树分析、主成分分析及遗传结构分析显示，不同分布区采集的样品有明显的基因型差异；依据样品地理来源，19个居群大致可分为横断山区（分布于滇西北和川西南的居群）及云贵高原（分布于滇西、滇中、滇东南及贵州的居群）2个亚群。通过观测观测杂合度（observed heterozygosity，Ho）、期望杂合度（expected heterozygosity，He）、多态信息含量（polymorphic information，PIC）、Shannon多样性指数（shannon’s diversity index，I）、Nei’s多样性指数（Nei’s gene diversity，Nei’s）、核苷酸多样性（nucleotide diversity，π）比较，发现云贵高原的居群遗传多样性高于横断山区的居群（云贵高原居群遗传多样性参数均值：Ho＝0.052，He＝0.110，PIC＝0.088，I＝0.164，Nei’s＝0.127，π＝1.677×10⁻³；横断山区居群遗传多样性参数均值：Ho＝0.051，He＝0.098，PIC＝0.077，I＝0.144，Nei’s＝0.114，π＝1.175×10⁻³）；居群遗传分化系数（genetic differentiation index，F_ST）和基因流（gene flow，N_m）分析显示，滇龙胆居群间存在一定的遗传分化和基因流；遗传变异分析（AMOVA）显示滇龙胆种内变异主要来自居群内；基于23个环境变量的环境差异分析显示，横断山亚群与云贵高原亚群生境的热量与UV-B辐射存在差异；Mantel检验显示，居群间的遗传分化主要由环境差异导致，其中UV-B辐射与居群F_ST呈极显著正相关（P＜0.01）。结论 横断山区与云贵高原滇龙胆居群遗传结构和遗传多样性具有差异，分布区UV-B辐射变化可能是驱动滇龙胆居群遗传分化的重要因素。]]> 2023/2/3 15:59:46 282true 目的 研究茉莉酸甲酯(methyl jasmonate，MeJA)对三七叶总黄酮含量的影响，探究其在转录水平上对类黄酮生物合成以及茉莉酸(jasmonate，JA)信号通路关键酶基因的调控模式。方法 使用不同浓度(0、200、400、800 μmol/L)的MeJA喷施一年生三七叶片7 d，测定植株生物量以及叶片总黄酮含量；基于MeJA处理的一年生三七叶转录组数据，挖掘类黄酮生物合成与JA信号通路中关键酶基因，并分析它们在200 μmol/L的MeJA处理7、14 d后的表达模式；使用200 μmol/L的MeJA喷施一年生三七叶片，采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测类黄酮生物合成与JA信号通路中关键酶基因在处理0、2、4、6、10、14 h后的相对表达量。结果 不同浓度MeJA处理均显著提高一年生三七叶总黄酮的含量，但对其生物量的影响并未达到显著水平。外源MeJA诱导了三七中类黄酮生物合成和JA信号通路关键酶基因的表达。其中，类黄酮生物合成基因PAL、C4H、4CL、F3H、FLS和IFS呈现上调表达，而CHS和CHI呈下调表达；JA信号通路基因LOX、AOS、AOC、OPR、ACX、MEP、KAT、JAR1、JAZ和MYC都呈上调表达。研究发现，当三七受到外源MeJA诱导时，JAZ阻遏蛋白介导了JA信号对类黄酮生物合成基因表达模式的影响。结论 外源MeJA对一年生三七叶总黄酮含量的正向调控主要是通过增强JA信号通路基因JAZ和MYC，以及类黄酮生物合成基因PAL、C4H、4CL和IFS的表达来实现的。]]> 2023/1/31 14:20:35 281true 目的 通过分析箭叶淫羊藿Epimedium sagittatum不同生育期根际微生物群落结构及其与主要药用有效成分累积之间的相关性，探讨箭叶淫羊藿根际土壤微生物对其药材有效成分的影响，为箭叶淫羊藿的优质高产栽培提供科学依据。方法 以三年生箭叶淫羊藿的根际土为研究对象，采用高通量测序技术对根际细菌和真菌群落结构进行分析，同时测定根际土壤理化性质、酶活性及不同生育期药材总黄酮、淫羊藿苷等有效成分含量，通过皮尔逊相关性分析探究土壤生态因子与有效成分之间的关系。结果 高通量测序结果显示，箭叶淫羊藿根际细菌优势菌属包括Candidatus_Solibacter、苔藓杆菌属、嗜酸栖热菌属、芽单胞菌属等，其中，Candidatus_Solibacter属在5个生长时期的平均丰度值最高。根际真菌优势菌属中被孢霉属相对丰度占比最大，在花蕾期样品中的丰度值高达44.27%。UPGMA聚类和非度量多维标定法(NMDS)分析表明，花蕾期、盛花期、果实膨大期及盛果期的根际土壤细菌和真菌结构相似，而药材质量稳定期与前4个时期的根际微生物群落结构存在明显差异。同时，皮尔逊相关性分析结果显示：总黄酮含量与有效磷呈显著正相关，与Candidatus_Solibacter属、藓杆菌属呈极显著正相关；淫羊藿苷与有机质、苔藓杆菌属呈显著正相关，与碱解氮、有效磷、Candidatus_Solibacter属呈极显著正相关，而与过氧化氢酶、硝化螺菌属呈显著负相关；朝藿定A和朝藿定B与碱解氮、蔗糖酶显著正相关，与有效磷、Candidatus_Solibacter属、嗜酸栖热菌属、慢生根瘤菌属及显著正相关，而与脲酶、酸杆菌属显著负相关，与pH、过氧化氢酶、硝化螺菌属呈极显著负相关。朝藿定C与有机质、碱解氮、苔藓杆菌属呈正相关，与有效磷、Candidatus_Solibacter属相对丰度呈极显著正相关，与硝化螺菌属呈显著负相关。结论 通过分析箭叶淫羊藿不同生育期根际微生物群落结构及其多样性，掌握了其根际微生物资源状况，研究发现根际微生物与土壤理化性质及酶活性一起参与有效成分的合成与积累，为箭叶淫羊藿栽培过程中土壤根际微生物的群落分布提供了研究资料，并为箭叶淫羊藿根际微生物资源的挖掘及其优质高产栽培提供参考依据。]]> 2023/1/31 14:20:36 280true 目的 基于生物合成途径及网络药理学理念，从“化学成分-靶点”角度对羌活具有抗炎作用的质量标志物(qualitymarker，Q-Marker)进行预测，建立基于Q-Marker的羌活药材质量评价方法。方法 首先通过生物合成途径筛选可能的Q-Marker；其次采用中药系统药理学数据库与分析平台(traditional Chinese medicine systems pharmacology，TCMSP)预测和筛选羌活的化学成分及潜在作用靶点，然后在人类基因数据库Genecards及OMIM中检索抗炎相关靶基因，利用Cytoscape软件构建“成分-靶点”网络模型，筛选出羌活抗炎作用的Q-Marker；再次采用分子对接技术对筛选出的化合物与靶点(PTGS2)进行对接；最后采用UHPLC同时测定来自不同基原和不同产地的羌活的Q-Marker以评价其资源品质；结果 紫花前胡苷、香叶木苷、佛手柑内酯、羌活醇、异欧前胡素等化合物是羌活抗炎作用的主要活性物质，可作为Q-Marker的主要选择。分子对接结果证实紫花前胡苷、香叶木苷、佛手柑内酯、羌活醇、异欧前胡素等Q-Marker与PTGS2水解酶的结合能低，构象稳定。建立了基于UHPLC-DAD测定羌活Q-Marker的方法，15批不同基原和产地的样品，紫花前胡苷质量分数为0.05～14.84 mg/g，香叶木苷质量分数0.04～3.88 mg/g，佛手柑内酯质量分数为0.07～0.32 mg/g，羌活醇质量分数为0.10～16.76 mg/g，异欧前胡素质量分数为0.20～7.99 mg/g。结论 基于生物合成途径、网络药理、分子对接和UHPLC预测并分析羌活抗炎Q-Marker的方法科学、可行，为羌活的质量标准提升和资源品质评价提供新思路。]]> 2023/1/31 14:20:36 279true 目的 建立圆柏药材HPLC化学指纹图谱，并比较不同基原品种的差异。方法 采用HPLC法，色谱柱为WondaSil^® C₁₈-WR(250 mm×4.6 mm，5 µm)，流动相为甲醇-0.2%磷酸水溶液，梯度洗脱，体积流量为1.0 mL/min，检测波长为270 nm。对49批圆柏药材进行指纹图谱构建，采用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”软件(2012年130723版)进行相似度评价，运用主成分分析(principal component analysis，PCA)、偏最小二乘法判别分析(partial least squares discriminant analysis，PLS-DA)和方差分析研究圆柏5个主流品种的化学成分差异。结果 建立了圆柏HPLC指纹图谱，标定15个共有色谱峰，相似度0.648～0.975，仅有26批相似度大于0.9。鉴定4个峰为槲皮苷、穗花衫双黄酮、罗汉松双黄酮A和扁柏双黄酮。圆柏5个品种之间的化学成分存在差异，并发现7个种间显著差异成分。结论 建立的化学指纹图谱稳定可靠，可为其质量控制及评价提供参考。]]> 2023/1/31 14:20:36 278true 目的 基于HPLC指纹图谱与多成分含量测定，并结合主成分分析，评价半枝莲Scutellaria barbata的质量。方法 采用RP-HPLC法，流动相为乙腈-0.1%甲酸水溶液进行梯度洗脱，对19批人工栽培和市售半枝莲药材进行指纹图谱及4种黄酮类成分含量测定研究，应用主成分分析法对半枝莲质量进行评价。结果 建立了半枝莲药材的共有模式指纹图谱，共标定16个共有峰，半枝莲药材的相似度为0.817～0.989，野黄芩苷、野黄芩素、木犀草素、芹菜素的质量分数分别为0.015%～0.850%、0.010%～0.180%、0.000 34%～0.074 00%、0.001 9%～0.069 0%；主成分分析结果筛选出累计贡献率达到96.268%的4个主成分(野黄芩苷；野黄芩素；木犀草素；芹菜素)，以它们计算所有样本的综合得分，可对半枝莲药材质量进行排序。结论 通过指纹图谱与含量测定相结合，应用主成分分析可全面综合评价半枝莲质量。此方法的建立为半枝莲药材的质量控制及评价提供了了分析方法和数据支撑。]]> 2023/1/31 14:20:36 277true 目的 对当归Angelica sinensis 16个赤霉素(gibberellins，GAs)进行含量测定、GAs代谢酶基因筛选并进行生物信息学分析、关键基因克隆及表达验证，以期为调控当归抽薹开花提供理论依据。方法 利用HPLC-MS/MS对不同材料中GAs含量进行测定与分析，基于当归全长转录组筛选直接参与GAs代谢酶基因，利用在线工具进行生物信息学分析，并对关键酶基因GA2ox6和GA20ox1表达水平进行qRT-PCR检测。结果 在所测定的16个GAs中，8个GAs含量在早薹植株中高于非早薹植株，13个GAs含量随植株发育时期延长逐渐增加。当归全长转录组中含有9个直接参与GAs代谢的酶基因，可分为6个亚家族，共含有6个保守基序，亚细胞定位于细胞质。GA2ox6和GA20ox1基因克隆片段由于插入序列与全长转录组测序片段存在长度差异。GA2ox6基因在抽薹植株、随种苗春化作用和植株发育时期延长呈现低表达，而在冷冻规避春化作用种苗中呈现高表达，GA20ox1基因则相反；GA2ox6和GA20ox1基因在叶和茎中相对于根均呈现高表达。结论 当归含有9个直接参与GAs代谢的酶基因，各成员理化性质和结构存在一定的差异，GA2ox6和GA20ox1基因表达水平与当归抽薹开花生理调控一致。]]> 2023/1/5 17:44:07 276true 目的 分析4个通用植物DNA条形码序列(trnH-psbA、matK、rbcL和ITS2)及其组合对黄精属药用植物的物种鉴定分辨率，挖掘适用于黄精属种间鉴定的高分辨率分子标记。方法 以《中国药典》2020年版中收录的黄精属药用植物黄精Polygonatum sibiricum、滇黄精P. kingianum、多花黄精P. cyrtonema、玉竹P. odorati及其地方常见同属替代品、混伪品共12种79个野生个体为对象，将4个通用DNA条形码序列独立、联合分析，评估其种间、种内变异情况，并分别基于建树法(tree-based method)和PWG距离法(PWG-distance method)评估不同条形码及其组合的物种鉴定分辨率。结果 ITS2序列扩增成功率低，trnH-psbA、matK、rbcL序列的引物在黄精属植物中通用性较好；3组叶绿体序列的种间变异依次为matK＞trnH-psbA＞rbcL，种内变异差异不显著，种间、种内遗传距离无明显的Barcoding gap；各条形码独立及联合分析的物种鉴定分辨率普遍偏低，其中，组合条形码trnH-psbA＋matK＋rbcL在建树法分析中的分辨率最高，为25%，trnH-psbA＋rbcL在距离法分析中的分辨率最高，为50%。结论 4个通用DNA条形码序列及其组合都并非黄精属药用植物不同种间有效区分鉴定的理想分子标记，但多序列联合分析能在一定程度上提高物种鉴定成功率。]]> 2023/1/5 17:44:07 275true 目的 从全基因组水平挖掘茯苓Poria cocos MYB转录因子基因家族成员，并分析其在菌丝、菌核等部位及茉莉酸甲酯(methyl jasmonate，MeJA)诱导后菌丝中的表达模式，以期发现与茯苓发育及次生代谢物生物合成调控相关的MYB转录因子。方法 基于茯苓基因组数据，通过序列比对及保守结构域分析挖掘MYB转录因子基因，利用ExPASy在线工具预测分析MYB蛋白质理化性质，利用MEGA 7.0软件构建茯苓MYB蛋白进化树，利用MEME在线工具分析保守基序，利用Plant CARE进行启动子区顺式作用元件分析，通过MeJA诱导菌丝并采用qRT-PCR方法检测基因相对表达量。结果 在茯苓基因组中共鉴定到10个含有特征性保守结构域的MYB转录因子，其中4个属于1R类型，4个属于2R类型，2个属于4R类型。进化树及保守基序显示，相同进化枝的MYB蛋白所含基序类型相似。启动子区预测分析发现了多类激素及逆境响应顺式作用元件。基因表达谱分析显示有2个基因(PcMYB7和PcMYB8)在菌丝中的表达量高于菌核中的表达量，而PcMYB9则是在菌核中表达量相对较高。MeJA诱导后，有3个基因(PcMYB5、PcMYB6和PcMYB7)在诱导3 h时表达量明显上调。结论 从茯苓全基因组中系统鉴定MYB转录因子基因家族，为进一步研究MYB基因在调控茯苓发育及次生代谢物合成方面的生物学功能奠定基础。]]> 2023/1/5 17:44:07 274true 目的 克隆获得鸢尾Iris tectorum糖基转移酶基因ItUGT349和ItUGT419，并对其进行生物信息学分析、基因差异表达检测和蛋白原核表达等特性分析。方法 以鸢尾转录组中筛选到的ItUGTs基因全长开放阅读框(open reading frame，ORF)设计特异性引物，进行PCR扩增，经测序后获得基因序列并进行生物信息学分析；通过荧光定量PCR(real-time PCR，qRT-PCR)进行基因差异表达检测；最后构建pET-32a(+)原核表达载体在大肠杆菌中表达蛋白。结果 PCR扩增ItUGT349和ItUGT419的ORF长度分别为1461、1488 bp，编码蛋白相对分子质量大小分别为53 830、54 910。荧光定量PCR显示，ItUGT349的表达量在叶片中最高，而ItUGT419在花器官中表达最高。进化树表明，ItUGT419与三萜类糖基转移酶聚类在一起，ItUGT349与三萜、黄酮和木质素等多种类型的糖基转移酶聚类到一支。ItUGT349和ItUGT419在大肠杆菌中均成功的表达出可溶性蛋白。结论 通过ItUGT349和ItUGT419基因全长ORF克隆，并对其进行序列分析，基因差异表达检测及原核表达等研究，为后续进一步鉴定其催化功能奠定基础。]]> 2023/1/5 17:44:08 273true 目的 以红花Carthamus tinctorius不同花色变异类型为材料，比较分析其叶绿体基因组结构及其与近缘类群的系统发育关系，为中药材红花种质资源鉴定和群体遗传学研究奠定基础。方法 利用华大MGISEQ-2000PE150测序平台，双末端测序策略对红花不同花色类型全基因组DNA建库测序，用NOVOPlasty组装叶绿体基因组，采用最大似然法(maximum Likelihood，ML)构建系统进化树。结果 红花3种花色变异类型叶绿体基因组全长均为153 114 bp，完全一致，GC值均为37.8%，具1个典型的四分区域结构，包括1个大单拷贝区(large single copy region，LSC)、1对反向重复区(inverted repeats，IR)和1个短单拷贝区(small single copy，SSC)，4个区序列长度分别为84 128、25 194、18 598 bp。红花的叶绿体基因组均有130个基因，其中编码蛋白基因、rRNA基因与tRNA基因的数量均为84、8、38个。系统进化分析表明，红花3种花色变异类型聚在一支，与菜蓟族的铺散矢车菊构成一单系分支，具有100%支持率。结论 叶绿体基因组数据支持红花3种花色变异类型来源为同一种，药用植物红花(所在红花属)隶属于菊科菜蓟族的矢车菊亚族。]]> 2023/1/5 0:00:00 272true 目的 以细辛药材为材料，采用高通量测序和生物信息学技术组装完整的叶绿体基因组序列，明确其结构特征、系统发育位置。方法 基于Illumina测序平台对细辛叶绿体基因组序列进行结构特征分析；同时，采用最大似然法（maximum likelihood，ML）构建马兜铃科的系统发育关系。结果 华细辛和辽细辛叶绿体基因组全长为160 521～160 555 bp，表现出典型的四分体结构，且两者叶绿体基因组GC含量均为38.5%。细辛叶绿体基因组包含128个基因，其中85个蛋白质编码基因，34个tRNA基因，8个rRNA基因。此外，系统发育分析结果显示，基于完整的叶绿体基因组和蛋白编码数据集构建的拓扑树一致，细辛属物种和马蹄香属物种形成一个支持率的单系分支。结论 细辛叶绿体基因组测序、组装、结构特征分析，发现其大小介于Asarum bracteolata和A. sieboldii var. seoulense之间，IR区存在rpl16、rps19、ycf1、rpl23等基因扩张，研究结果丰富了细辛属植物遗传资源，为该属物种分子鉴定、系统发育以及野生资源保护与开发利用等研究提供理论基础。]]> 2023/12/22 0:00:00 271true 目的 研究采不同干燥方法对人参Panax ginseng果浆中原型皂苷降解和稀有皂苷生成的影响。方法 采用HPLC建立了同步检测11种人参皂苷含量的分析方法，对采用冷冻、电热、汽热3种方法干燥的人参果浆样品中原型皂苷和稀有皂苷的含量进行了测定。结果 与未干燥处理的人参果浆进行对比，冷冻干燥样品中11种人参皂苷含量变化较小；人参果浆电热干燥和汽热干燥样品中原型皂苷发生降解，稀有皂苷生成出现不同程度增加。结论 人参果浆经电热干燥和汽热干燥后原型人参皂苷Re、Rg₁、Rb₁、Rc、Rb₂、Rb₃发生降解，稀有人参皂苷F₁、Rh₁、Rg₃、Rk₁、Rh₂含量增加。]]> 2023/12/22 19:45:57 270true 目的 建立接骨草Sambucus javanica的HPLC指纹图谱，并结合化学模式识别为接骨草药材质量评价及临床应用提供参考。方法 采用HPLC-DAD法，以乙腈-0.2%磷酸溶液梯度洗脱，建立接骨草指纹图谱，同时测定新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸的含量；采用相似度评价、聚类分析（cluster analysis，CA）、主成分分析（principal component analysis，PCA）和正交偏最小二乘-判别分析（orthogonal partial least squares discriminant analysis，OPLS-DA）等化学模式识别对差异性特征成分进行筛选。结果 建立的指纹图谱方法符合方法学要求，17批接骨草药材HPLC指纹图谱共标定9个共有峰，相似度均大于0.9，通过聚类分析将不同产地接骨草分为3类，聚类分析与主成分分析结果一致；综合分析筛选绿原酸、隐绿原酸和新绿原酸作为接骨草有效成分，质量分数分别在0.060%～1.007%、0.014%～0.074%、0.004%～0.151%。结论 采用指纹图谱结合化学模式识别技术可快速、有效地筛选出接骨草的差异性特征成分，为接骨草药材质量评价及临床应用提供参考。]]> 2023/12/22 19:45:57 269true 目的 采用指纹图谱结合聚类分析（hierarchical clustering analysis，HCA）、主成分分析（principal component analysis，PCA）和偏最小二乘法-判别分析（partial least squares discriminant analysis，PLS-DA）等进行化学模式识别，对狗脊药材指纹图谱数据进行分析，筛选特征性指标成分并以此建立狗脊有效成分的定量分析，为狗脊质量控制提供科学依据。方法 采用Agilent Eclipse XDB-C₁₈柱（250 mm×4.6mm，5.0μm），以甲醇-1%醋酸水溶液为流动相进行梯度洗脱，体积流量为1.0 mL/min，柱温为30℃，检测波长为280 nm，HPLC法建立9个产地16批样品狗脊的指纹图谱，运用相似度分析、HCA、PCA和PLS-DA等化学模式识别技术筛选出不同产地狗脊化学成分的特征成分作为狗脊有效成分，并定量分析。结果 16批狗脊HPLC指纹图谱标定10个共有峰，相似度在0.695～0.954；通过HCA、PCA和PLS-DA较好的区分各产地狗脊，综合分析筛选5-羟甲基糠醛、原儿茶酸、原儿茶醛、紫云英苷4个成分作为狗脊有效成分，质量分数分别在0.022 8%～1.339 4%、0.006 2%～0.713 3%、0.020 0%～0.234 5%、0.011 2%～0.106 5%。特征图谱和含量测定结果显示广西产地狗脊药材质量较优。结论 该研究建立的狗脊药材指纹图谱及含量测定方法稳定、可靠，重现性好，可为全面评价狗脊药材质量提供参考。]]> 2023/12/22 19:45:57 268true 目的 建立葛根Pueraria lobate药材HPLC指纹图谱，并测定不同产地葛根中6种成分（3'-羟基葛根素、葛根素、3'-甲氧基葛根素、葛根素芹菜糖苷、大豆苷、大豆苷元）的含量，为葛根优质药材产地与质量控制提供参考。方法 采用HPLC法，葛根药材30%乙醇提取液的分析采用Hypersil BDS C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；0.1%甲酸水-乙腈为流动相，梯度洗脱；体积流量1.0 mL/min；检测波长250 nm；柱温25℃。建立32批葛根药材指纹图谱，并测定不同产地葛根药材6种成分的含量。结果 建立了葛根药材HPLC指纹图谱，共提取出10个共有峰，指认6个共有峰；建立了含量测定方法，并对不同产地来源的32批葛根药材中6种成分含量测定，不同产地葛根质量对比综合评分结果显示河南最高，其次为陕西。结论 建立了葛根HPLC指纹图谱方法，通过对比，各样品与对照图谱相似度均大于0.9，为葛根道地药材质量标准提供整体质量控制依据。结合产地调研信息，可将葛根优质原料药材产地优选为陕西、河南秦岭山脉。]]> 2023/12/22 19:45:57 267true 目的 研究管花肉苁蓉Cistanche tubulosa花中查耳酮合酶（chalcone synthase）CtCHS蛋白的功能和CtCHS基因在白、红、紫3种颜色花中的表达模式。方法 利用RT-PCR克隆CtCHS基因并进行生物信息学分析。将pET-28a-CtCHS质粒转入大肠杆菌通过IPTG诱导蛋白表达。将CtCHS重组蛋白与底物4-香豆酰辅酶A、丙二酰辅酶A孵育并利用HPLC和MS检测产物。将pCAMBIA1300-35S-GFP-CtCHS质粒转入拟南芥原生质体观察CtCHS蛋白亚细胞定位。利用qRT-PCR检测CtCHS基因在3种颜色管花肉苁蓉花中的表达模式。结果 克隆出1条CtCHS基因，开放阅读框（open reading frame，ORF）长度为1173 bp，编码390个氨基酸，蛋白相对分子质量为42 800，具有查耳酮合酶保守的催化残基Cys164、His303、Asn336。利用大肠杆菌外源表达CtCHS蛋白并纯化获得重组蛋白。CtCHS蛋白能够催化4-香豆酰辅酶A与丙二酰辅酶A生成柚皮素查耳酮。CtCHS蛋白主要定位于细胞质。CtCHS基因在紫、红色花中高表达，相对表达量分别为白色花中的8.44、3.21倍。结论 从管花肉苁蓉花中克隆出1条CtCHS基因并外源表达蛋白，CtCHS蛋白具有查耳酮合酶功能，CtCHS基因在颜色更深的花中表达量更高，表明CtCHS基因可能调控管花肉苁蓉花色，为进一步研究管花肉苁蓉花色调控机制奠定基础。]]> 2023/12/20 8:46:59 266true 目的 TCP基因家族在植物叶片发育、侧枝形成、花器官形成、植物激素合成与信号转导等生理过程中发挥着关键的作用。对工业大麻Cannabis sativa TCP基因进行全基因组鉴定及表达分析为工业大麻TCP基因家族的功能分析提供科学参考。方法 基于已发布的工业大麻基因组，利用生物信息学方法对工业大麻TCP基因家族成员进行鉴定并对其理化性质、基因结构、以及表达模式进行分析。结果 共鉴定出17个工业大麻TCP基因（CsTCP1～CsTCP17）分为2类3个亚科（PCF、CIN和CYC/TB1），编码的氨基酸长度在163～585 aa，蛋白质相对分子质量为18 310～64 070，蛋白等电点介于4.99～9.36，亚细胞定位大部分为细胞核。共线性进化分析发现，工业大麻与拟南芥、番茄、水稻分别存在9、20和6对同源基因。顺式元件预测结果表示光响应元件和脱落酸元件在TCP基因启动子区域分布广泛。基因表达分析结果表明，工业大麻TCP基因的表达存在组织特异性，大部分在叶和花中高表达。结论 为深入研究工业大麻TCP基因家族的功能奠定了基础，进一步阐明了TCP基因可能参与工业大麻生长发育的各个阶段，并对工业大麻的药用资源发展提供理论基础。]]> 2023/12/20 0:00:00 265true 目的 克隆北柴胡Bupleurem chinense达玛烯二醇合成酶（dammarenediol synthase，DS）基因BcDS，并进行生物信息学及表达模式分析。方法 通过搜索转录组数据库，利用RT-PCR克隆开放阅读框（open reading frame，ORF）和启动子区。通过生物信息在线工具预测基因编码蛋白的理化性质、结构域、信号肽、三级结构等分子特征，利用Jalview软件进行氨基酸多序列比对，采用MEGA 11.0软件进行分子进化分析。运用实时荧光定量PCR检测基因表达模式。结果 BcDS ORF长2115 bp，编码的蛋白包涵704个氨基酸，相对分子质量为80 770，为酸不稳定的亲水蛋白，无跨膜结构域或信号肽。BcDS与人参、西洋参等植物DS的相似性高，具有达玛烯二醇合成酶特征结构域，且BcDS与人参、西洋参、三七等DS聚为一支。BcDS启动子区域含有响应环境及植物激素的顺式作用元件。BcDS在根中的表达量最高，分别为茎、叶和花中BcDS表达量的5.81、10.44和7.86倍，并受茉莉酸甲酯（methyl jasmonate，MeJA）和水杨酸（salicylic acid，SA）的显著诱导。结论 获得北柴胡BcDS基因序列特征，明确了BcDS根中高表达且受MeJA和SA诱导表达，为进一步研究基因在柴胡皂苷合成中的分子作用奠定基础。]]> 2023/12/20 8:46:59 264true 目的 为揭示外源H₂O₂叶面预处理对不同水分条件下垂盆草Sedum sarmentosum线粒体稳态、生长和黄酮类成分积累的调控作用。方法 设置4个处理即适宜水分、适宜水分＋1 mmol/L H₂O₂、干旱、干旱＋1 mmol/L H₂O₂处理，测定不同处理垂盆草叶肉细胞超微结构及其线粒体抗氧化系统、垂盆草生长指标、生物量、指标性成分含量及多种体外抗氧化能力。结果 在干旱胁迫条件下外源喷施1 mmol/L H₂O₂可以显著提高垂盆草线粒体超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）、过氧化物酶（peroxidase，POD）和抗坏血酸过氧化物酶（ascorbate peroxidase，APX）活性，显著降低线粒体超氧阴离子产生速率及丙二醛（malondialdehyde，MDA）含量，减轻线粒体膜结构破坏。在干旱条件下叶片喷施H₂O₂处理的垂盆草鲜质量和干质量分别比干旱处理提高51.53%和38.78%，总黄酮、总酚含量分别提高13.37%和6.50%，但槲皮素和异鼠李素含量显著低于其他处理。适宜水分条件下喷施H₂O₂处理有利于提高生物量和异鼠李素含量。垂盆草ABTS、DPPH、OH·自由基清除能力与抗脂质过氧化能力均以适宜水分＋喷施H₂O₂处理最高，干旱＋喷施H₂O₂处理次之。结论 喷施1 mmol/L H₂O₂可以缓解干旱胁迫对垂盆草的氧化伤害，维持线粒体稳态，提高垂盆草药材产量和品质，从而协调干旱逆境下垂盆草产量和品质之间的矛盾；适宜水分条件下喷施H₂O₂亦有助于提升垂盆草产量和品质。]]> 2023/12/20 8:46:59 263true 目的 以完善红芪Hedysari Radix质量评价方法与内容为目的，建立红芪HPLC指纹图谱并测定4种有效成分的含量，并在建立多成分含量测定方法基础上，为其质量标志物的可测性提供依据。方法 运用HPLC法建立36批红芪的指纹图谱，通过对照品比对，对共有峰进行指认，确定并建立4种有效成分含量的测定方法，在指纹图谱相似度评价基础之上，运用聚类分析、主成分分析、判别分析对36批次红芪差异性成分进行分析。结果 36批红芪指纹图谱共有16个峰，指认了4个峰，分别是毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素；30批红芪相似度大于0.900，6批红芪的相似度在0.802～0.900；聚类分析将36批红芪分为4类；主成分因子分析提取了4个主成分，5批红芪主成分综合得分较低，与其他批次有较大差异，主成分分析依据生长类型将红芪分为2类、依据商品等级分为4类，差异性成分分别为峰7、芒柄花苷、峰10、毛蕊异黄酮苷、芒柄花素；判别分析结果与主成分分析一致；毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷以及4种有效成分的总量与主成分综合得分呈显著负相关，指认的4种有效成分在可测性方面具备成为红芪质量标志物的科学性。结论 建立的HPLC指纹图谱和多成分含量测定结合化学模式识别法的评价模式，能够有效分析红芪质量的差异性，为现有红芪质量控制与评价提供研究基础和参考依据。]]> 2023/12/20 8:46:59 262true 目的 采用HPLC指纹图谱与抗氧化活性相关联，建立谱-效关系，旨在分析筛选佛手Citrus medica var. sarcodactylis抗氧化活性的有效成分。方法 采集24批次佛手药材的指纹图谱，在对照图谱相似度评价均大于0.880的基础上，结合聚类热图及主成分分析法（PCA）对指纹图谱数据进行研究；采用DPPH自由基和ABTS自由基清除法评价佛手24批次样品的抗氧化活性；通过灰色关联度法对24批次佛手共有峰与其抗氧化能力指标进行关联性分析，综合评价筛选有效成分。结果 从24批次佛手样品指纹图谱中确定了17个共有峰，通过对照品比对法指认了其中10个化合物。聚类热图分析与抗氧化结果显示，24批次佛手大致被分为3类；且均有较好的抗氧化活性，并呈浓度依赖性，其中S16的抗氧化活性最强。综合灰色关联度分析和综合评分结果，F16（香叶木素）、F11、F12（5,7-二甲氧基香豆素）和F8（橙皮苷）化合物可能是反映佛手药效的重要特征峰，与主成分中展现的重要峰信息基本一致。结论 通过佛手24批次HPLC指纹图谱与抗氧化活性之间的相关性分析，可为挖掘佛手的有效成分以及药材质量控制提供参考。]]> 2023/12/20 8:46:59 261true 目的 探究云南重楼Paris polyphylla var.yunnanensis（滇重楼）根茎中甾体皂苷活性成分和生物量积累随生长年限的变化状况，以期为滇重楼的质量控制提供科学依据。方法 以7、8、9、11、12、13、14、15年生滇重楼为研究对象，采用HPLC法和直接称重法测定不同年限滇重楼根茎中8种甾体皂苷（重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ、Ⅲ、H、V和纤细薯蓣皂苷）含量和生物量。结果 8种甾体皂苷活性成分线性关系良好（R²≥0.999 5），精密度、重复性、稳定性和加样回收率的RSD值均小于3%，验证了该方法的可行性；随着年限的增长，滇重楼根茎生物量呈逐渐增长的趋势，其生长发育可分为增长缓慢期（第1～4年）、增长快速期（第5～10年）和增长平缓期（第11年后）3个阶段，其中7年生滇重楼根茎生物量增长最快，平均年增长量达（31.843±14.225）g；滇重楼根茎中8种甾体皂苷成分含量在不同生长年限的变化呈随机波动、无规律，《中国药典》2020版规定的3个指标成分重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅶ含量之和与8种甾体皂苷总和的变化趋势一致；用4个主成分对不同年限滇重楼药材进行综合评价，结果显示7年生样品在所有样品中的综合得分位于前7名。结论 建立了同时测定滇重楼中8种甾体皂苷活性成分含量的方法，可用于滇重楼的质量评价；滇重楼并非种植年限越长越好，建议以7年生滇重楼采收入药为最佳。]]> 2023/11/3 14:14:54 260true 目的 建立杜仲Eucommia ulmoides不同部位的高效薄层色谱（high performance thin layer chromatography，HPTLC）、高效薄层质谱鉴别方法（TLC/MS）和高效液相色谱（HPLC）指纹图谱，比较杜仲皮、叶、雄花、种子的差异，寻找差异性成分，并互相验证，用于杜仲的质量控制。方法 通过优化供试品制备、展开剂和显色剂等条件，建立杜仲皮的HPTLC，并将该方法应用于杜仲皮、叶、雄花、种子的区分，寻找差异性斑点；利用QTOF/MS对4个部位的HPTLC斑点进行鉴定，明确差异性成分；采用HPLC建立杜仲皮、叶、雄花、种子的指纹图谱，采集多批次数据，利用偏最小二乘判别分析（partial least squares discriminant analysis，PLS-DA）筛选对4个部位区分贡献较大的差异性成分，与薄层色谱和薄层质谱鉴定结果互相验证。结果 自建HPTLC鉴别方法优于各国药典，可清晰地实现4个部位的区分；利用QTOF/MS对主要斑点进行分析，共鉴定27个成分，其中10个成分通过对照品确认；基于HPLC的PLS-DA多元统计分析筛选出14个差异性成分（VIP>1）。松脂醇二葡萄糖苷在HPTLC、TLC/MS和HPLC检测技术下均鉴定为杜仲皮的特异性成分；ulmoidoside A、ulmoidoside B、ulmoidoside C、ulmoidoside D是种子中稳定的差异性标志物；对于叶和花的鉴别，3种鉴别方式所得到的差异性标志物差别较大，叶中共找到7个标志物，花中共找到9个标志物。结论 建立的高效薄层色谱、薄层质谱和HPLC指纹图谱方法均可实现杜仲皮、叶、雄花、种子的区分，联用技术寻找到的差异性成分为杜仲及其中成药质量控制指标的选择奠定基础。]]> 2023/11/3 14:14:54 259true 目的 建立薤白特征图谱分析方法，并结合化学计量学和一测多评法（quantitative analysis of multi-components with a single-marker，QAMS）开展薤白质量控制研究。方法 采用HPLC方法，Agilent Eclipse Plus C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm，5μm），以甲醇-超纯水溶液为流动相梯度洗脱，体积流量1.0 mL/min，柱温30℃，检测波长261 nm，进样量20 μL，建立薤白特征图谱，接着采用聚类分析（clustering analysis，CA）、主成分分析（principal component analysis，PCA）、正交偏最小二乘法-判别分析（orthogonal partial least square method-discriminant analysis，OPLS-DA）对不同批次薤白饮片进行化学模式识别分析，实现数据集的可视化。同时以腺苷为内参物建立QAMS法，建立内参物与胞苷、尿苷、鸟苷的相对校正因子，采用外标法（external standard method，ESM）与QAMS法分别测定12批次薤白样品中胞苷、尿苷、鸟苷、腺苷4种核苷类成分的含量，以验证QAMS法结果的可靠性。结果 建立的HPLC特征图谱方法较全面地反映了薤白药材的化学成分，分析方法专属性强，准确可靠；化学计量学分析结果基本一致；并通过OPLS-DA找出了3种可能的标志性成分；QAMS法与外标法测定结果之间无显著差异。结论 建立的薤白特征图谱分析方法、化学计量学方法、多指标成分QAMS法可为薤白和其他植物药的质量控制与评价提供参考。]]> 2023/11/3 14:14:54 258true 目的 建立牻牛儿苗Erodium stephanianum的指纹图谱，并同时建立其中4个酚酸类成分含量的一测多评分析（quantitative analysis of multi-components by singlemarker，QAMS）方法，以期对牻牛儿苗药材进行整体质量控制。方法 以没食子酸为参照峰确定共有峰，建立牻牛儿苗的高效液相色谱指纹图谱；以没食子酸为内标，确定柯里拉京、老鹳草素和鞣花酸的相对校正因子并计算含量，实现一测多评。同时采用外标法测定4个成分的含量，比较计算值和实测值的差异。结果 建立了牻牛儿苗的HPLC指纹图谱，10批样品相似度均在0.891以上；以没食子酸为内标建立的柯里拉京、老鹳草素和鞣花酸的相对校正因子分别为0.751、0.214和0.444，重现性良好，10批牻牛儿苗样品QAMS法计算值与实测值无显著差异。结论 所建立的指纹图谱结合QAMS简便可行，可为牻牛儿苗药材整体质量控制提供参考和依据。]]> 2023/11/3 14:14:54 257true 目的 对不同产地批次赤芝Ganoderma lucidum进行全面的质量评价，为灵芝药材质量标准的完善及优质赤芝原料药的筛选提供依据。方法 收集15批次各GAP基地的灵芝药材，参照《中国药典》2020年版方法及行业通用方法，考察其水分、灰分、水溶性浸出物、醇溶性浸出物，分别采用比色法、柱前衍生高效液相色谱法（PMP-HPLC）、高效凝胶渗透色谱法（HPGPC）测定多糖含量并进行比较；采用比色法测定三萜甾醇含量，HPLC法进行灵芝酸A一测多评；同时对15批赤芝的HPLC指纹图谱进行差异比较。结果 15批赤芝药材均符合《中国药典》2020年版的质量标准要求，指纹图谱聚类分析和主成分分析（principal component analysis，PCA）结果表明山东聊城产赤芝能明显区别于其他批次样品。结论 15批赤芝药材均符合《中国药典》质量标准，说明国内赤芝GAP基地种植质量良好；同时山东聊城产赤芝能显著区别于其他产地批次赤芝样品，主要体现在三萜甾醇等有效成分的含量更高。]]> 2023/11/3 14:14:54 256true 目的 以球药隔重楼Paris fargesii根茎、茎和叶为材料，探究螺甾烷型重楼皂苷的生物合成基因。方法 采用HPLC分析6个螺甾烷型重楼皂苷含量，进一步利用Illumina HiSeq X Ten平台进行转录组测序，结合定量和转录组数据进行生信分析。结果 6个螺甾烷型重楼皂苷在球药隔重楼根茎、茎和叶中的含量具有显著差异。Illumina转录组测序共获得61 755条非冗余unigenes，其中30 263条（49.0%）被成功注释。催化生成薯蓣皂苷元的31个关键基因均被成功鉴定，且基因表达模式与皂苷的积累水平总体一致，其中IDI、8，7SI-4、CYP90G4、SMO2-2、C5-SD1、CYP51G、C14-R-2、HMGCR、CPI-5、CYP94D108、CAS、HMGCS、SMO1-3、SSR1-3、SQS、ispH和DXR等基因与重楼皂苷的积累呈显著正相关。共获得了61条尿苷二磷酸糖基转移酶（UGT）基因，其中30条潜在参与重楼皂苷的糖基化修饰。结论 球药隔重楼根茎、茎和叶中皂苷合成基因表达模式与皂苷积累规律存在一致性，鉴定的基因可指导该类活性产物的生物合成途径解析。]]> 2023/10/18 16:29:53 255true 目的 分析不同来源栝楼Trichosanthes资源群体的遗传结构和自然亚群间基因漂移分析以及资源的遗传多样性，为栝楼育种奠定基础。方法 从100对相关序列扩增多态性（sequence-related amplified polymorphism，SRAP）引物中筛选出扩增效果好、稳定性高的43对引物对13个来源于3个自然亚群的栝楼资源进行扩增，进行不同亚群间和品种之间的遗传结构和多样性分析。结果 共扩增出691个位点，其中多态性位点百分率达到79.16%，整个群体的多态性信息含量（polymorphic information content，PIC）、观察等位基因数（observing the number of alleles，N_a）、有效等位基因数（effective number of alleles，N_e）、香农信息指数（Shannon information index，I）和遗传距离（genetic distance，H）依次为0.495 5、1.791 6、1.374 6、0.359 4和0.231 6，3个自然亚群中其他野生类群的遗传丰富度最高，潜山和合肥自然亚群之间的遗传相似度高，达到0.922 9。亲缘关系类群体间的群间分化系数（intergroup differentiation coefficient，Fst）平均为0.265 6，类群间基因流（gene flow，N_m）平均为1.382 6，遗传分化系数较大，不同自然亚群间具有一定的基因交流，但不同位点基因交换的差异很大。13个品种资源被分成2个亚群，2个长萼栝楼地方品种单独组成一个亚群，其他11个双边栝楼资源被聚为另一个亚类，2个亚群遗传相似性系数仅为60.94%，福建野生型与安徽育成品种相似性较低，四川野生型相似性较高，说明四川野生型已被大量应用于安徽栝楼育种。结论 栝楼种质资源之间有较大的遗传相似性，不同自然亚群的栝楼种质资源之间有一定的基因交流。]]> 2023/10/18 16:29:53 254true 目的 测定不同年限蒙古黄芪Astragalus membranaceus产出不同粗度径级黄芪饮片的比例，比较各粗度径级黄芪饮片药效成分含量的差异，为黄芪饮片质量等级的科学划分提供理论依据。方法 以4～6年生仿野生蒙古黄芪为材料，按照直径在0.5～0.8 cm（不包含0.8 cm）、0.8～1.0 cm和大于1.0 cm对样品进行划分，测定不同年限黄芪各粗度径级饮片的产出比率及药效成分含量。结果 生长年限对不同粗度径级黄芪饮片的质量占比具有极显著影响（P<0.01）。0.5～0.8 cm粗度径级的黄芪饮片在4年生黄芪中质量占比最高，而粗度大于1.0 cm的黄芪饮片在6年生黄芪中质量占比最高。生长年限、粗度径级及二者的交互作用对黄芪中黄酮类和皂苷类成分含量均有极显著影响（P<0.01）。黄酮类成分含量受年限因素的影响大于粗度径级，在6年生黄芪的0.8～1.0 cm粗度部位中达到最高；而黄芪甲苷含量受粗度径级的影响大于年限因素，在0.5～0.8 cm粗度径级的5年生黄芪中达到最高。结论 生长年限、粗度径级均会影响黄芪药效成分含量，黄芪饮片在划分质量等级时，在传统考虑粗度直径的同时，要特别注意生长年限的影响。]]> 2023/10/18 16:29:54 253true 目的 建立玄参Scrophularia ningpoensis的HPLC指纹图谱及多成分定量测定方法。方法 采用HPLC法建立浙江、湖北、四川、安徽等9个省份116批玄参指纹图谱，进行相似度评价，结合聚类分析（hierarchical cluster analysis，HCA）、正交偏最小二乘法-判别分析（orthogonal partial least squares-discriminant analysis，OPLS-DA）对玄参进行化学模式识别分析。同时对8个活性成分（桃叶珊瑚苷、哈巴苷、咖啡酸、对香豆酸、阿魏酸、类叶升麻苷、安格洛苷C、哈巴俄苷）进行含量测定，分析其与生境因子的相关性。结果 建立了116批玄参的指纹图谱，相似度为0.746～0.997，共标定34个共有峰。聚类分析将116批玄参分为4类，OPLS-DA分析能有效地将3个传统道地产区玄参与非道地产区玄参进行区分（Q²>0.5）。不同产地玄参中化学成分含量存在差异，与海拔、经纬度存在相关性。结论 建立的玄参HPLC指纹图谱及多成分含量分析方法稳定、可靠，结合化学识别模式可为玄参药材的产地判别及质量评价提供参考。]]> 2023/10/18 16:29:54 252true 目的 建立栀子Gardenia jasminoides的UPLC指纹图谱，比较栀子及其炮制品之间的差异。方法 收集2个产地10批栀子，使用不同方法炮制，采用Waters Acquity UPLC BEH C₁₈色谱柱（100 mm×2.1 mm，1.7 μm），栀子及其炮制品用甲醇超声提取制备溶液，以乙腈-0.2%磷酸水溶液为流动相，梯度洗脱，进样量1 μL，柱温30℃，体积流量0.2 mL/min，检测波长为239 nm与440 nm，建立其UPLC指纹图谱。运用总量统计矩相似度、灰色关联度、TOPSIS和主成分分析（principal component analysis，PCA）对栀子的UPLC特征指纹图谱进行数据分析。结果 栀子及其炮制品的UPLC特征指纹图谱的共有标志峰20个，其中4个鉴定为栀子苷、京尼平龙胆双糖苷、西红花苷I、西红花苷II。2产地的栀子经炮制成焦栀子后，栀子苷、西红花苷I与西红花苷II含量有所减少。湖南湘乡地区栀子经炮制后其京尼平龙单双糖苷含量有一定增加。结论 所建立的栀子不同炮制品特征指纹图谱共有20个标志峰，不同炮制品之间标志峰峰面积和含量存在差异，为栀子的不同炮制品的质量控制与评价提供了依据。]]> 2023/10/18 16:29:54 251true 目的 解析紫皮石斛Dendrobium devonianum叶绿体基因组特征，并探讨石斛属系统发育关系。方法 采用Illumina技术对紫皮石斛进行测序，对其叶绿体基因组进行组装、注释和分析，并基于共有编码基因序列构建系统发育树。结果 紫皮石斛叶绿体基因大小为146 493 bp，总GC含量为37.4%；其大单拷贝区、小单拷贝区长度分别为84 932、13 036 bp，反向互补重复区为24 263 bp；共编码118个基因，包括72个蛋白质编码基因，38个tRNA基因和8个rRNA基因。密码子偏好分析表明，亮氨酸是紫皮石斛叶绿体基因组中使用频次最高的氨基酸。系统发育分析表明，紫皮石斛未形成单系，与兜唇石斛D.aphyllum构成姊妹关系；瘦轴组的重唇石斛D.hercoglossum和钩状石斛D.aduncum与石斛组其他物种聚为一支。结论 紫皮石斛叶绿体基因组呈典型四分体结构，其与兜唇石斛亲缘关系最近；瘦轴组的重唇石斛和钩状石斛与石斛组亲缘关系更近，并入石斛组更合理。]]> 2023/9/25 15:28:55 250true 目的 探讨不同地区金钗石斛Dendrobium nobile居群间的遗传多样性及遗传分化关系。方法 基于引物结合位点间扩增（inter-primer binding site，iPBS）分子标记对广西5个县共35份金钗石斛进行遗传关系、遗传多样性和种群间遗传分化分析，并构建能区分35份金钗石斛种质的DNA指纹图谱。数据分析使用NTSYS-pc 2.10e统计软件计算遗传相似系数并构建聚类分析图谱，采用Popgene 1.32软件计算遗传多样性指数与居群遗传分化系数。结果 8条iPBS引物共扩增出158条条带，多态性条带为143条，多态条带百分率（percentage of polymorphic bands，PPB）为90.51%；在遗传距离0.70处，35份种质分为7大类群，居群在分子水平上出现明显分化；遗传相似系数（genetic similarity coefficient，G_s）变化范围为0.559 0～0.975 9，变幅为0.416 9；平均观测等位基因数（observed number of alleles，N_a）、平均有效等位基因数（effective number of alleles，N_e）、Nei’s基因多样性指数（Nei’s gene diversity index，H_e）、Shannon多样性信息指数（Shannon information index，I）分别为1.898 7、1.505 0、0.300 7、0.454 2，居群间存在丰富遗传多样性；基因多样度（total genetic diversity，H_t）、各居群基因分化系数（gene diversity within population，H_s）、居群间遗传分化系数（coefficient of gene differentiation，G_st）分别为0.299 8、0.214 9、0.283 0，居群间遗传变异占总变异的28.30%，居群内的遗传变异占总变异的71.70%，遗传变异主要来源于居群内部；基因流（gene flow，N_m）为1.266 5，居群间存在较高水平的基因交流。引物2219和2399可单独鉴别出35份种质，试验基于引物2399的“0，1”矩阵构建35份种质的指纹图谱，此图谱可为金钗石斛品种的分类与鉴定提供参考。结论 金钗石斛居群间遗传多样性较丰富，总变异主要来源于居群内变异，居群间存在较高水平的基因交流。揭示了金钗石斛种质间的遗传关系及其居群遗传多样性，为野生金钗石斛种质的保护工作的开展奠定基础。]]> 2023/9/25 15:28:55 249true 目的 探究光照、温度和干旱胁迫对藏药川西小黄菊Tanacetum tatsienense种子萌发的影响。方法 在5个不同温度（15、20、25、30、35℃）下，设置2个光照条件（光照12 h/黑暗12 h、连续黑暗24 h）和5个聚乙二醇浓度（0、5%、10%、15%、20%）对川西小黄菊种子进行萌发实验，对种子萌发率、平均萌发时间、萌发指数、幼叶长、胚轴长、胚根长等指标进行统计分析。结果 光照、温度和干旱胁迫对川西小黄菊种子萌发具有显著影响（P<0.05）；同一温度下，光照条件下的种子萌发率和萌发指数大于黑暗条件，黑暗环境下平均萌发时间增加；20、25℃下光照对种子的萌发率和平均萌发时间影响不显著；15、30和35℃时，连续黑暗环境显著抑制种子的萌发率（萌发率最低仅为6.0%）和平均萌发时间（P<0.05）；15、20、25℃时随PEG浓度升高，种子萌发率和萌发指数减小、平均萌发时间增加，最短时间仅需3.4 d，最长时间达10.6 d；30、35℃时，低浓度PEG（≤10%）胁迫下萌发率和萌发指数显著大于对照（P<0.05），最高萌发率可达85.5%；幼叶和胚轴长度在所有温度下随PEG浓度的增加而缩短，胚根长度除15℃的所有温度下随PEG浓度增加呈先增长后缩短趋势，15℃时呈缩短趋势；回收后种子最终萌发率在15、20、25℃与对照无显著差异（P>0.05），在30、35℃时显著降低（P<0.05）。结论 温度改变会影响光照和干旱胁迫川西小黄菊种子适应性，是调节种子萌发的主要因素，而光照不是必要条件；另外，川西小黄菊种子PEG干旱胁迫承受阈值为20%，在轻度胁迫（PEG浓度0～10%），温度为20～30℃时种子萌发最好，在20～25℃时幼苗生长较好，可为川西小黄菊人工育苗提供参考。]]> 2023/9/25 15:28:55 248true 目的 建立大盘龙七Bergeniae Scopulosae Rhizoma的HPLC指纹图谱及多酚类成分的含量测定方法，为大盘龙七药材质量控制及临床应用提供依据。方法 采用Agilent 5 TC-C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），以乙腈-0.1%磷酸水为流动相进行梯度洗脱，体积流量为1.0 mL/min，检测波长为275 nm，柱温25℃；对10批大盘龙七药材进行指纹图谱构建，基于指纹图谱相似度分析结合聚类分析与主成分分析，同时测定熊果苷、没食子酸、岩白菜素、儿茶素、4-O-没食子酰岩白菜素、11-O-没食子酰岩白菜素、儿茶素没食子酸酯的含量。结果 建立了大盘龙七药材的HPLC指纹图谱，其中S5的相似度为0.752，其余批次的相似度均大于0.92，共标定了14个共有峰，指认出7个色谱峰，分别为熊果苷、没食子酸、岩白菜素、儿茶素、4-O-没食子酰岩白菜素、11-O-没食子酰岩白菜素、儿茶素没食子酸酯。聚类分析将10批大盘龙七药材分为3类；经主成分分析，主成分1～4是影响药材样品质量评价的主要因子；采用正交偏最小二乘法判别分析标记了大盘龙七中6个差异性成分。含量测定结果表明10批大盘龙七药材中熊果苷、没食子酸、岩白菜素、儿茶素、4-O-没食子酰岩白菜素、11-O-没食子酰岩白菜素、儿茶素没食子酸酯的含量范围分别为7.30～63.24、0.26～2.98、15.96～78.04、1.54～11.17、0.97～2.54、2.09～7.38、0.64～12.30 mg/g。结论 建立的大盘龙七药材的HPLC指纹图谱及多酚类成分的含量测定方法操作简便、重复性好，可用于大盘龙七药材的定性定量分析，为大盘龙七药材的质量评价提供参考。]]> 2023/9/25 15:28:55 247true 目的 建立指纹图谱和多指标定量的蜜远志质量评价方法。方法 Kromasil 100-5-C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）为固定相，以乙腈（A）-0.2%磷酸水溶液（B）为流动相进行梯度洗脱，体积流量为1.0 mL/min，检测波长318 nm。对16批蜜远志建立指纹图谱，确定共有峰并进行相似度分析结合化学计量学分析。采用Waters Xbridge Shiled RP C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）进行同时测定远志（口山）酮III、3，6'-二芥子酰基蔗糖、细叶远志皂苷、远志酸、远志皂苷元的含量。结果 在指纹图谱研究中，标定了27个共有峰，结合对照品和HPLC-Q-TOF-MS共指认8个成分，分别为西伯利亚远志糖A5、西伯利亚远志糖A6、远志（口山）酮IX、远志（口山）酮III、3，6'-二芥子酰基蔗糖、细叶远志皂苷、远志酸、远志皂苷元。聚类分析将16批样品分为3类；经主成分分析，主成分1～3是影响蜜远志质量评价的主要因子。多指标含量测定中远志（口山）酮III、3，6'-二芥子酰基蔗糖、细叶远志皂苷、远志酸、远志皂苷元的质量分数分别为0.027%～0.068%、0.074%～0.798%、1.1%～1.4%、0.15%～0.36%、0.15%～0.37%。经方法学验证，线性关系良好（r≥0.999 6），平均加样回收率为97.15%～100.9%。结论 所建立的指纹图谱结合多指标含量测定方法准确、高效，特征性强，可为蜜远志饮片的质量评价和临床应用提供有效参考。]]> 2023/9/25 15:28:55 246true 目的 分析罗汉果Siraitia grosvenorii种质遗传基础，以为其资源保护、品种改良和性状遗传结构解析提供依据。方法 采用SSR荧光分子标记对325份罗汉果及其近缘物种资源进行亲缘关系鉴定，并且进一步分析罗汉果遗传多样性、群体结构和构建其核心种质。结果 优选出的15对SSR荧光引物共检测到185个等位基因（平均为12.33个），平均香农信息指数（Shannon’s information index，I）为1.67，多态性信息含量指数（polymorphism information content，PIC）≥0.54；325份种质亲缘关系聚类在遗传距离0.95附近被划分为赤瓟、翅子罗汉果和罗汉果3个亚群，其中罗汉果亚群发现大量几乎无遗传差异个体，共鉴别获得140份具遗传差异的罗汉果初级核心种质。这些初级核心种质遗传分化系数（genetic differentiation coefficient，F_ST）为0.140，群体间、群体内、个体内遗传变异分别占总变异的14.0%、19.0%和67.0%，野生、地方和栽培种平均遗传距离分别为0.802 1、0.576 8、0.422 0，I分别为1.798、1.092、0.603；Jaccard遗传距离聚类分析在遗传距离0.8处被划分为9个亚群，群体结构和主成分分析均被划分为4个亚群。通过10%～70%比例随机抽样法，构建了32份核心种质，其采集地点占原始种质的94.12 %，等位基因数与原始种质的符合率为96.13%，I值为1.944 9。结论 优选出的15对SSR荧光引物多态性高，能有效鉴别罗汉果及其近缘物种赤瓟、翅子罗汉果。罗汉果初级核心种质存在中等程度遗传分化，遗传变异主要来自群体与个体内部，野生种与地方种遗传多样性高，栽培种遗传多样性低，存在4个明显基因库。构建的32份核心种质能充分代表原始种质地理来源与遗传多样性。]]> 2023/9/11 17:17:12 245true 目的 筛选出参与连翘Forsythia suspensa苯丙烷合成途径的WRKY转录因子并进行生物信息学分析。方法 通过对从连翘转录组数据中筛选出的62条连翘WRKY基因序列进行鉴定；通过采用蛋白理化性质和基序分析、蛋白结构分析、系统进化分析、功能注释、蛋白互作分析、外源激素处理后实时荧光定量分析等方式进行相关分析。结果 最终筛选出52条具有WRKY结构域的连翘WRKY转录因子。WRKY转录因子编码蛋白的氨基酸数目在105～728，相对分子质量在12 277.95～80 321.99。蛋白基序分析显示其均有WRKY结构域，与拟南芥WRKY转录因子构建系统进化树将连翘52个WRKY转录因子进一步分为3大类；筛选出5个可能参与连翘苯丙烷合成途径的连翘WRKY转录因子，并推测其可能以被MAPK级联反应所调控的方式介导连翘中苯丙烷合成途径。结论 通过分析转录组测序结果，从52个连翘WRKY转录因子中筛选出5个可能参与连翘苯丙烷合成途径的转录因子，其表现出组织特异性表达，且对不同浓度茉莉酸甲脂表现出不同的响应，为进一步研究其作用机制提供研究方向。]]> 2023/9/11 17:17:12 244true 目的 解析卵叶远志Polygala sibirica 叶绿体因组的序列特征和系统发育关系。方法 利用CTAB法提取卵叶远志叶片基因组DNA，通过Illumina HiSeq平台测序，再用GetCellelle组装叶绿体基因组，通过MEGA11构建邻接法（neighbor-joining，NJ法）系统发育树。结果 卵叶远志的叶绿体基因组全长165 192 bp，GC含量为36.70%，共编码124个基因，其中包含8个rRNA基因、42个tRNA基因和74个蛋白编码基因；相对同义密码子使用度显示，67.29%的密码子的使用度＞1，密码子偏好A、T结尾；共检测到287个简单重复序列（simple sequence repeats，SSR），其中以单核苷酸重复次数最多，占80.61%，单核苷酸主要由A和T组成，这表明在碱基形成过程中A和T被频繁使用；边界分析显示，9种远志属植物叶绿体基因组边界较为稳定，卵叶远志、香港远志P. hongkongensis、远志P. tenuifolia、瓜子金P. japonica和合叶草P. subopposite基因结构存在相似性；变异分析显示，9种远志属植物叶绿体基因组变异幅度较小；系统发育分析结果显示，卵叶远志、香港远志、瓜子金、远志、合叶草和西南远志P. crotalarioide因较高的支持率可聚成一支。结论 构建了高质量的卵叶远志全叶绿体基因组，为卵叶远志的遗传结构和遗传多样性研究奠定了基础。]]> 2023/9/11 17:17:12 243true 目的 利用荧光标记辅助的扩增片段长度多态性（amplified fragment length polymorphism，AFLP）技术，从基因组DNA水平上分析我国6个栽培生产区域52份枸杞Lycium chinense样本的遗传多样性。方法 对提取的枸杞DNA样本进行酶切、连接、预扩增和选扩增等步骤，扩增产物经毛细管电泳系统分离和数据采集后，利用Popgene软件计算遗传多样性参数，利用GenAlex软件计算遗传距离并进行主坐标分析，利用MEGA-X软件根据遗传距离进行聚类分析，利用Structure软件进行群体遗传结构分析。结果 共筛选得到10对AFLP选择性扩增引物组合，扩增得到328条扩增片段，其中多态性片段121条，且在不同产地枸杞居群间多态性位点分布不均匀。分析显示不同栽培产区枸杞的遗传多样性较低，等位基因数（observed number of alleles，N_a）、有效等位基因数（effective number of alleles，N_e）、观测杂合度（Nei’s gene diversity，H）和香浓信息指数（Shannon information index，I）分别为1.438 0、1.231 6、0.140 7和0.215 2，Nei’s遗传相似性范围为0.835 4～0.890 2。结论 不同栽培生产区域的枸杞居群间存在较为频繁的基因交流，遗传分化程度中等。居群内部遗传变异是枸杞遗传变异的主要来源，居群间遗传变异不显著，同时遗传距离与地理距离没有明显相关性。可为枸杞的遗传背景信息积累、引种栽培、种质资源保护、核心种质库构建以及可持续开发策略的制定和管理提供科学依据。]]> 2023/9/11 17:17:12 242true 目的 以非挥发性化学成分为指标，评价不同产地艾叶Artemisia argyi质量，为其进一步开发利用提供科学依据。方法 采用高效液相色谱法（high-performance liquid chromatography，HPLC），以指纹图谱定性，绿原酸和黄酮等多指标成分定量，结合聚类分析（hierarchical cluster analysis，HCA）、主成分分析（principal component analysis，PCA）和正交偏最小二乘法-判别分析（orthogonal partial least squares-discriminant analysis，OPLS-DA）对艾叶进行化学模式识别研究。结果 建立了20批艾叶的指纹图谱，相似度为0.739～0.983，标定了28个共有峰，指认了绿原酸、木犀草苷、圣草酚、棕矢车菊素、异泽兰黄素5个成分，含量测定表明不同产地艾叶绿原酸和黄酮成分存在显著差异；HCA分析20批艾叶为3类；PCA得到7个主成分的累积方差贡献率为86.676%；OPLS-DA分析表明绿原酸、木犀草苷、圣草酚、棕矢车菊素、异泽兰黄素可能是影响艾叶药材质量的差异标志物。结论 指纹图谱定性及多非挥发性成分定量结合化学模式识别可用于艾叶药材鉴别和质量控制。]]> 2023/9/11 0:00:00 241true 目的 基于北柴胡Bupleurum chinense叶绿体基因组筛选特异性DNA条形码，并利用特异DNA条形码鉴定不同产地北柴胡种质资源。方法 利用Illumina HiSeq X Ten平台对北柴胡进行叶绿体基因组测序，利用mVISTA软件和核酸多样性分析筛选特异性片段，基于特异性片段进一步分析不同产区北柴胡样品单倍型。结果 不同产地3份北柴胡叶绿体基因组全长为155 557～155 959 bp，均呈现典型的环状四分体结构，均编码131个基因。trnV-UAC、trnC-GCA_petN、petN_psbM、ndhF_rpl32可以作为潜在的北柴胡种质资源鉴定的特异性DNA条形码。基于扩增效率，选择petN_psbM和ndhF_rpl32对来自4省7个产地177份北柴胡样品进行序列分析，结果表明petN_psbM和ndhF_rpl32分别有91和78个变异位点，分别鉴定到28、29个单倍型；两段序列联合分析形成40个单倍型（Hap1～Hap40），各单倍型的遗传距离为0～0.022。6个产地拥有特有单倍型，可以将不同产地的北柴胡种质资源进行区分。结论 利用比较叶绿体基因组学筛选的特异DNA条形码petN_psbM和ndhF_rpl32可以用于北柴胡种内种质资源鉴定，为后续鉴定北柴胡的产地来源、种质资源保护利用和育种等工作奠定基础。]]> 2023/8/30 16:05:08 240true 目的 探讨外源一氧化氮（nitric oxide，NO）对龙胆Gentiana scabra次生代谢产物环烯醚萜苷积累及其质量形成机制的影响。方法 分别用水及0.02、0.10、0.50、2.00 mmol/L硝普纳（sodium nitroprusside，SNP）溶液处理龙胆鲜根，研究活性氧、抗氧化酶活性、次生代谢产物相关酶活性及次生代谢产物积累之间的关系。结果 0.50、2.00 mmol/L SNP处理组龙胆超氧阴离子、过氧化氢（H₂O₂）、NO含量在0～2 d显著增加，第2天之后逐渐降低。丙二醛（malondialdehyde，MDA）含量呈现先升高后降低的趋势，表明SNP可模拟再现生态胁迫的生理状态。SNP处理组超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）活性在0～6 d均显著升高，0.50 mmol/L SNP处理组过氧化氢酶（catalase，CAT）和过氧化物酶（peroxidases，POD）活性分别在0～2 d和2～4 d显著升高。1,3-二磷酸甘油酸（1,3-disphosphoglycerate，1,3-DPG）含量及磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶（phosphoenolpyruvate carboxylase，PEPC）活性在0～4 d显著增加，其中0.50、2.00 mmol/L SNP处理组效果显著（P＜0.01）。0.50 mmol/L SNP处理组羟甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶（hydroxymethylglutaryl-CoA reductase，HMGR）和1-脱氧-D-木酮糖醇-5-磷酸还原异构酶（1-deoxy-D-xylulose 5-phosphate reductoisomerase，DXR）活性在0～6 d显著升高，第6天0.50 mmol/L SNP处理组龙胆中龙胆苦苷、獐芽菜苦苷、獐芽菜苷和马钱苷酸含量比第0天分别增加了34.5%、35.3%、1.8%和53.7%。结论 SNP能够再现龙胆逆境条件下的生理状态，促进龙胆中环烯醚萜类化合物的生物合成，提高龙胆药材质量。]]> 2023/8/30 16:05:08 239true 目的 建立显齿蛇葡萄Ampelopsis grossedentata以及近缘种的高效液相色谱（HPLC）指纹图谱，并对有效成分进行定量分析。方法 使用Ultimate XB-C₁₈（250 mm×4.6 mm，5 μm）色谱柱；流动相为乙腈-0.01%磷酸，检测波长为280、360 nm，体积流量为1 mL/min，进样量20 μL，柱温30 ℃下梯度洗脱，建立显齿蛇葡萄以及近缘种HPLC指纹图谱，结合相似度评价、层次聚类分析（clustering analysis，CA）、主成分分析（principal component analysis，PCA）与正交偏最小二乘法-判别分析（orthogonal partial least squares method-discriminant analysis，OPLS-DA）等化学模式识别方法，评价不同产地显齿蛇葡萄及近缘种的质量。结果 建立的HPLC指纹图谱方法符合方法学要求，18批显齿蛇葡萄属样品指纹图谱有31个共有峰，经对照品定性指认4、9、11、14、15和24号峰对应的化合物分别为没食子酸、儿茶素、二氢杨梅素、芦丁、杨梅苷和杨梅素，且相似度＞0.8；所有样品按产地经CA分为2类，PCA结果与其一致；OPLS-DA筛选出不同产地显齿蛇葡萄及近缘种的13～14个差异标志物，以二氢杨梅素和杨梅素为主要差异标志物。结论 建立的指纹图谱方法稳定、可靠、重复性好，结合化学模式识别可用于作为藤茶原料的蛇葡萄属植物的质量评价。]]> 2023/8/30 16:05:08 238true 目的 建立太子参Pseudostellaria heterophylla HPLC多成分定量检测方法，结合化学计量学和加权逼近理想解排序（TOPSIS）法对不同产地太子参药材质量进行评价。方法 以Agilent Zorbax ODS C₁₈柱为色谱柱，乙腈-0.2%磷酸水溶液为流动相，梯度洗脱，检测波长分别为254、285、203 nm，采用HPLC法同时检测尿苷、肌苷、鸟苷、川陈皮素、染料木苷、木犀草素、金合欢素、白杨素、水杨酸、阿魏酸、肉桂酸、太子参环肽B、太子参环肽A、乌苏酸和β-谷甾醇的含量。利用SIMCA 14.1和SPSS 26.0软件对上述15种成分含量检测结果进行主成分分析（principal component analysis，PCA）和正交偏最小二乘法-判别分析（orthogonal partial least squares-discriminant analysis，OPLS-DA），挖掘影响太子参产品质量的差异性标志物。运用加权TOPSIS法进行7省17批次太子参药材综合质量评价。结果 HPLC多成分定量分析方法学考察符合《中国药典》规定要求。PCA结果显示前2个主成分特征值均大于1，累积方差贡献率为87.843%，17批次太子参样品分为3类。OPLS-DA筛选出尿苷、金合欢素、肌苷、太子参环肽A、太子参环肽B、β-谷甾醇和阿魏酸为影响太子参产品质量的差异标志物。EW-TOPSIS欧氏贴近度在0.258 5～0.642 5，表明不同产地太子参质量差异较大，其中江苏、安徽地区太子参排名靠前，其次为福建、江西和湖南地区，云南、四川地区太子参排名靠后。结论 建立的太子参HPLC多成分定量检测方法操作便捷、结果准确可靠，PCA、OPLS-DA联合加权TOPSIS法可用于不同产地太子参药材的质量评价。]]> 2023/8/30 16:05:08 237true 目的 分离和鉴定能够耐受牛胆汁的牛黄转化细菌，并应用到体外培育牛黄的制备。方法 从形成牛黄的牛胆囊胆汁中分离到可在牛胆汁中长期存活且具有较强牛黄转化能力的菌株（NDZNM-01），观测其外部形态、理化性状、分类学地位、牛胆汁耐受力，以及牛黄转化活力。结果 根据对NDZNM-01菌株外部形态与生理生化特征的检测结果，判断为柠檬酸杆菌属细菌。进一步根据其16S rDNA序列的聚类分析结果，显示该菌株与其他3种柠檬酸杆菌属的细菌聚在一个分支上，但形成单系，属于新发现的菌株。应用菌株NDZNM-01发酵新鲜牛胆汁，其中的胆红素含量增加了2.35倍，胆酸含量增加了2.13倍。结论 综合对NDZNM-01菌株的形态观察、生理生化鉴定，以及分子鉴定结果，NDZNM-01属于一种能够耐受牛胆汁的柠檬酸杆菌属的肠道细菌，具有高效转化牛胆汁为牛黄的活力。该牛黄转化细菌最终命名为Citrobacter bovis NDZNM-01 Wang Houwei，菌种收藏编号为CGMCC24893。]]> 2023/8/30 16:05:08 236true 目的 分析干旱胁迫下忍冬Lonicera japonica全基因组DNA甲基化水平变化、模式以及与基因表达的关系，为进一步探究忍冬响应干旱胁迫的分子机制奠定基础。方法 采用全基因组重亚硫酸盐甲基化测序法（whole-genome bisulfite sequencing，WGBS），测定干旱胁迫下忍冬全基因组DNA甲基化水平，并联合转录组测序结果对差异甲基化基因相关的差异表达基因进行分析。结果 干旱胁迫下忍冬整体甲基化水平普遍上升；其中CG类型甲基化水平明显高于CHG或CHH甲基化类型；对不同干旱胁迫处理下的忍冬进行差异甲基化区域（differentially methylated regions，DMR）分析，发现1935、2158和1750个差异甲基化相关基因，基因组百科全书（Kyoto encyclopedia of genes and genomes，KEGG）富集分析表明，显著富集的通路主要包括亚油酸代谢，氮代谢通路和次生代谢物的生物合成通路等。通过转录组测序技术，发现差异甲基化基因相关的差异表达基因主要富集于次生代谢产物合成相关通路，同时筛选出4个在干旱胁迫下基因表达量上升显著的忍冬MYB（Lonicera japonica MYB，LjMYB）LjMYB转录因子。结论 干旱胁迫下忍冬甲基化水平上升，推测DNA甲基化调控基因表达是干旱影响金银花有效成分生物合成的作用机制之一。]]> 2023/8/18 14:36:23 235true 目的 克隆获得灰毡毛忍冬Lonicera macranthoides MADS-box家族基因SHORT VEGETATIVE PHASE（SVP），并对其进行生物信息学、时空表达特异性和蛋白原核表达等特性分析。方法 根据灰毡毛忍冬转录组数据设计特异性引物，通过PCR技术克隆LmSVP基因全长；运用生物信息学方法分析其编码蛋白的序列特征；利用实时荧光定量技术（reverse-transcription polymerase chain reaction，qRT-PCR）分别检测该基因在灰毡毛忍冬2个品种“龙花”和“金翠蕾”叶片、花早期和晚期中的表达水平；最后构建pTOPO-D1-LmSVP原核表达载体，转化至大肠杆菌BL21（DE3）中进行蛋白表达。结果 LmSVP基因全长1472 bp，开放阅读框（open reading frame，ORF）长720 bp，编码239个氨基酸，蛋白质相对分子质量为26 712.63。进化树分析表明，LmSVP蛋白与中华猕猴桃、小粒咖啡的SVP蛋白亲缘关系最近。qRT-PCR结果显示，LmSVP基因在“龙花”和“金翠蕾”品种中的表达均存在组织特异性表达，其在叶中的表达量显著高于花中；而在花发育不同时期，LmSVP基因表达量没有明显差异。LmSVP在大肠杆菌中成功表达出蛋白，蛋白表达结果显示其相对分子质量约为26 710，与预测相符合。结论 通过对LmSVP基因的全长克隆、序列分析和表达特性鉴定，为进一步研究该基因在调控花蕾型灰毡毛忍冬蕾期长及花冠不开放的功能提供实验基础。]]> 2023/8/18 14:36:24 234true 目的 解析怀玉山产三叶青Tetrastigma hemsleyanum叶绿体基因组信息序列特征和确定其在崖爬藤属的系统位置。方法 用Illumina高通量测序平台NovaSeq6000进行测序获得怀玉山产三叶青叶绿体基因组序列，借助GeSeq、tRNAscan-SE、MISA、VISTA tools、DNADnaSP6.0、JSHYCloud、CodonW1.4.2、Pasteur Galaxy、mafft 7.0、fasttree 2.1.10等生物信息学工具进行序列分析、密码子偏好分析、崖爬藤属基因组比较分析和系统发育研究。结果 怀玉山产三叶青Tetrastigma hemsleyanum叶绿体基因组为共价闭合双链环状分子，长160 165 bp，包含1个大单拷贝区（large single copy region，LSC）、1个反向重复区a（inverted repeat region a，IRa）、1个反向重复区b（inverted repeat region b，IRb）和1个小单拷贝区（small single copy region，SSC）；怀玉山产三叶青叶绿体基因组注释到光合作用基因、自我复制基因、其他基因和未知功能基因4类共133个基因，包括 88个CDS基因、37个tRNA基因和8个rRNA基因；怀玉山产三叶青叶绿体基因组检测到63个SSR位点，其中单碱基重复56个，双碱基重复7个；怀玉山产三叶青叶绿体基因组核苷酸多样性的变化范围为0～0.234 18，基因间隔区trnS-GCU-trnG-UCC、rps16-trnG-UCC以及基因ycf1变异率最高。怀玉山产三叶青叶绿体基因组密码子偏好以A或U结尾，具有较强的偏好性。突变对密码子偏好性的影响较强，而其他因素如自然选择对密码子的偏好性影响较小。怀玉山产三叶青叶绿体基因组有31个高频密码子，16个以U结尾，13个以A结尾，2个以G结尾，其中13个为最优密码子。怀玉山产三叶青与福建产三叶青（MW375708）和广西产三叶青（MW375709）亲缘关系较近，与浙江产三叶青（MT827073）、浙江产三叶青（MW375707）、浙江产三叶青KT033563（NC_029339）、四川产三叶青（MW375710）和浙江产三叶青（MW375711）亲缘关系较远。结论 三叶青之间的亲缘关系与地理位置相关性不大。首次采用生物信息学分析方法对怀玉山产三叶青叶绿体基因组进行了全面、深度解析，结果将为崖爬藤属药用植物的遗传多样性分析以及新品系的遗传育种研究等提供理论依据。]]> 2023/8/18 14:36:24 233true 目的 明确延胡索Corydalis yanhusuo不同组织器官中内生真菌菌群结构与多样性。方法 通过形态和分子手段相结合的方法对延胡索块茎、叶、茎、根中的内生真菌进行分离、鉴定及菌群结构分析。结果 共分离得到内生真菌2161株，根据菌株的形态学特征划分成106个形态型，分子鉴定为57个分类单元，归属到41个属，其中木霉属Trichoderma、毛链孢属Monilochaetes为块茎的专有属，腐霉属Pythium、白僵菌属Beauveria为叶的专有属，亚球壳属Sphaerulina、核瑚菌属Typhula为茎的专有属，小囊菌属Microascus为根的专有属；相似性分析表明，延胡索不同组织器官内生真菌组成结构上存在差异；Shannon-wiener多样性指数及Simpson指数分析显示延胡索根和茎中内生真菌多样性指数、丰度均显著高于块茎和叶。结论 延胡索组织器官中内生真菌资源丰富，为延胡索内生真菌资源的开发利用提供了基础资料和参考依据。]]> 2023/8/18 14:36:24 232true 目的 对刺五加Acanthopanax senticosus实生苗进行转录组测序，分析其响应不同光质调控的分子机制。方法 以生长60 d的刺五加实生苗为材料，设置不同光质处理组（LED-1、LED-2）和对照组[高压钠灯（high pressure sodium，HPS）]，应用Illumina HiSeq^TM对其叶片进行转录组测序，对测序后的结果进行基因功能注释、差异表达基因（differentially expressed genes，DEGs）筛选和共表达网络分析。结果 转录组测序共获得126 252条Unigene。其中92 681条被注释，3个处理组中筛选出DEGs 7664个。基因本体（gene ontology，GO）富集结果表明，DEGs在代谢过程、刺激响应、细胞结构、催化活性等功能中得到显著富集。京都基因与基因组百科全书（Kyoto encyclopedia of genes and genomes，KEGG）途径富集分析表明，DEGs显著富集在植物激素传导、糖代谢、苯丙烷类生物合成、类黄酮生物合成。适度光质胁迫可以促进刺五加实生苗中苯丙素类化合物生物合成途径关键酶基因的表达，是促进刺五加有效成分累积的基础。结论 通过高通量转录组测序，揭示了不同光质对刺五加实生苗基因表达的调控特征，可为深入研究刺五加药效成分的生物合成机制及栽培中的光环境设置提供科学依据。]]> 2023/7/28 15:32:11 231true 目的 以桔梗Platycodon grandiflorus为材料，分析其叶绿体基因组特征，探究不同地区桔梗叶绿体基因组的差异及桔梗科其他物种的系统发育关系。方法 利用Illumina NovaSeq测序平台对桔梗叶绿体全基因组进行测序，完成其组装、注释和特征分析，采用生物信息学方法对不同地区桔梗进行比较基因组分析和系统发育分析。结果 桔梗叶绿体基因组全长172 770 bp，呈现典型的环状四分体结构，总GC含量为38.10%，注释到139个基因，其中蛋白质编码基因95个，核糖体RNA 8个和转运RNA 36个。经序列分析鉴定出139个SSR位点，大部分重复由A和T组成。该叶绿体基因组密码子偏好性A/U大于G/C。边界分析表明，不同地区桔梗的JLA边界区域存在差异。对比不同地区桔梗叶绿体基因组序列发现21个变异区间，包括ycf1、psbC、rps18和rpoB等编码区以及rpl32-trnL、trnS-psbZ和trnN-ycf1等非编码区。基于最大似然法（maximum likelihood method，ML）对桔梗及其他17种桔梗科植物进行系统发育分析，发现桔梗科物种形成一个单系群，各属物种聚为一束，支持率达100%。结论 桔梗科物种聚为一支与传统相符合，不同地区桔梗叶绿体基因组序列存在显著差异，为后期开展分子鉴定及群体遗传学研究提供提供科学依据。]]> 2023/7/28 15:32:11 230true 目的 探究不同生长年限党参Codonopsis pilosula根系微生物群落结构变化及其与土壤环境因子的相关性，以提高党参品质。方法 对一、二、三年生党参土壤、根际土壤和根进行高通量测序和生物信息学分析。结果 随党参生长年限的增加，土壤和根际土壤中优势细菌Arthrobacter处于动态平衡，而根内细菌Ralstonia丰度减少。真菌Mortierella在土壤和根际土壤中丰度逐年降低，病原真菌Fusarium在党参根系中丰度逐年增加。不同生长年限的党参根系微生物群落组装更多的受随机性过程影响，且根系细菌的群落功能稳定性高于真菌。蛋白酶（protease，PRO）、全氮（total nitrogen，TN）、速效钾（available potassium，AK）、水分（water content，WC）、速效磷（available phosphorus，AP）和土壤有机质（soil organic matter，SOM）是影响不同生长年限党参根系细菌群落结构和多样性的主要影响因素，TN和全钾（TK）是影响真菌群落结构和多样性的主要影响因素。结论 党参根系微生物群落组成和多样性随生长年限改变，并对不同土壤环境因子作出差异化响应，该研究为后期深入研究党参病害防治，提高党参品质提供理论基础。]]> 2023/7/28 0:00:00 229true 目的 建立老鹳草Geranium wilfordii指纹图谱，研究老鹳草提取物的指纹图谱与抗肿瘤活性之间的谱效关系，初步明确老鹳草抗肿瘤主要活性成分。方法 运用中药色谱指纹图谱相似度评价软件，建立老鹳草抗肿瘤活性部位的HPLC指纹图谱。采用MTT法，以人乳腺癌MCF-7细胞为模型，对老鹳草样品的醋酸乙酯部位进行抗肿瘤活性测定。采用多元线性回归法，将量化共有峰面积与MTT法测得老鹳草抗肿瘤活性结果相结合，构建老鹳草抗肿瘤谱效关系。结果 通过指纹图谱的建立，共标定了16个共有峰，确定1号峰为没食子酸、7号峰为柯里拉京、8号峰为老鹳草素、12号峰为鞣花酸。其中29批药材的相似度均大于0.732，运用主成分分析和聚类分析进一步分析样品间差异，将距离较远的30号样品排除。HPLC指纹图谱中的16个共有峰中，有8个峰对MCF-7细胞有作用，得到MCF-7的谱效方程，经6批药材验证，谱效方程计算值与实际值的偏差率不超过10%。结论 该谱-效方程可用于预测老鹳草的抗乳腺癌作用物质基础。]]> 2023/7/28 15:32:11 228true 目的 对地桃花Urena lobata进行本草考证、生药学分析及有效成分测定。方法 通过查阅文献厘清地桃花的历史使用沿革及植物分布情况，野外实地调研地桃花的植物基原，采集并制作腊叶标本，通过原植物形态、药材性状、显微特征等方法进行生药学研究；采用Waters e2695型液相色谱仪，CAPCELL PAK MGⅡ C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），乙腈-0.1%甲酸溶液为流动相，体积流量1.0 mL/min，梯度洗脱，柱温30℃，PDA检测器，检测波长315 nm，建立地桃花药材中N-反式-阿魏酰酪胺和银锻苷的HPLC测定方法。结果 对地桃花药材的性状及显微特征进行了归纳，建立的测定方法稳定性和重复性良好，N-反式-阿魏酰酪胺和银锻苷线性范围0.999～79.890、1.068～85.420 μg/mL，R²>0.999，平均回收率95.3%、97.1%。10批样品N-反式-阿魏酰酪胺、银锻苷质量分数为0.003%～0.045%、0.016%～0.046%。结论 建立的方法能够有效鉴别地桃花药材，为完善地桃花药材质量标准和地桃花药材收购提供依据。]]> 2023/7/28 15:32:11 227true 目的 在中药质量标志物（quality marker，Q-Marker）“五原则”指导下，基于指纹图谱和网络药理学方法，从可测性和有效性角度分析预测秦皮潜在的Q-Marker。方法 建立15批秦皮饮片指纹图谱，进行聚类分析（hierarchical cluster analysis，HCA）、主成分分析（principal component analysis，PCA）和偏最小二乘判别分析（partial least-squares discrimination analysis，PLS-DA），运用网络药理学方法构建“成分-靶点-通路”网络图，并预测秦皮饮片的Q-Marker，同时进行定量分析。结果 建立了15批秦皮饮片指纹图谱，在21个共有峰中指认出4号峰为秦皮苷、6号峰秦皮乙素、7号峰秦皮素、9号峰秦皮甲素，HCA、PCA和PLS-DA结果大体相符，网络药理学筛选出潜在的21个活性成分、129个核心靶点、159条关键通路，整合指纹图谱、模式识别及网络药理学方法，共同辨识出可测性、有效性、特有性原则的潜在Q-Marker为秦皮苷、秦皮乙素、秦皮素、秦皮甲素，四者含量依次为0.93%～2.51%、0.98%～1.41%、0.71%～1.09%、0.66%～1.25%。结论 整合指纹图谱、模式识别和网络药理学分析预测了秦皮潜在的Q-Marker，为全面控制和评价秦皮饮片质量提供科学依据，为多基原中药质量标准的研究提供理论参考。]]> 2023/7/28 15:32:11 226true 目的 姜黄Curcuma longa主根形成中药姜黄，侧根形成药材郁金。为探知姜黄主根与侧根形成过程的差异和侧根生长膨大的分子机制，对姜黄主根与侧根进行转录组测序，挖掘促使侧根生长膨大的关键基因。方法 以姜黄主根和侧根为材料，采用Illumina HiSeq高通量测序平台进行转录组测序，组装与注释后进行差异表达基因筛选。结果 转录组测序共获得42.69 Gb clean data，共得到42 748条Unigene，其中35 456条被注释。主根和侧根中的差异表达基因（differentially expressed genes，DEGs）有1551个，基因本体（gene ontology，GO）富集结果表明，姜黄主根与侧根的DEGs主要富集于代谢过程、细胞过程、催化过程、转运过程、结合等功能，COG富集结果表明，主根与侧根中DEGs主要富集于碳水化合物代谢和信号转导机制。KEGG富集分析显示，根中DEGs主要富集在淀粉和糖代谢、植物激素信号传递等代谢通路中。通过注释信息筛选出姜黄侧根生长膨大相关的差异表达基因，关键差异表达基因与通路分析表明侧根中蔗糖合成酶基因、生长素响应基因（SAUR32、SAUR76、SAUR50）的表达上调可能是姜黄侧根生长膨大的影响因素。结论 通过对姜黄主根与侧根高通量转录组测序，揭示了姜黄侧根生长膨大的关键基因，可以为姜黄根系生长的生物学机制提供参考。]]> 2023/7/18 11:12:42 225true 目的 利用UHPLC-UV建立裸花紫珠Callicarpa nudiflora药材中9个活性成分同时定量的方法，并测定其在不同产地及不同采收期裸花紫珠中的含量，用于裸花紫珠药材的质量评价及产地、采收期的选择。方法 采用Phenomenex kintex XB-C₁₈色谱柱（150 mm×2.1 mm，1.7μm），以乙腈（A）-0.1%磷酸水溶液（B）为流动相进行梯度洗脱；体积流量0.3 mL/min；检测波长332 nm和210 nm；柱温为45 ℃；测定了83批裸花紫珠和7批同属不同种紫珠属样品中的9个活性成分含量。结合主成分分析及正交偏最小二乘法判别分析（orthogonal partial least squares discriminant analysis，OPLS-DA）对裸花紫珠进行全面分析。结果 建立了裸花紫珠中9个活性成分含量同时测定的方法。其中咖啡酸、木犀草苷、连翘酯苷B、毛蕊花糖苷、木犀草素-4'-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、木犀草素-3'-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、木犀草素、藿香黄酮醇和熊果酸分别在1.240～124.0、2.040～204.0、1.020～101.6、5.100～510.0、0.904 0～90.40、0.982 0～98.20、0.872 0～87.20、0.822 0～82.20、2.280～228.0 μg/mL内线性关系良好，精密度、重复性、稳定性RSD值均小于3.00%，平均加样回收率在95.58%～101.73%，回收率RSD值均小于2.50%。主成分分析筛选出2个主成分，其累积方差贡献率为77.33%，表明这2个主成分可包含原有数据的大多数信息；OPLS-DA法标记出裸花紫珠药材中的4个差异性成分，分别为咖啡酸、连翘酯苷B、毛蕊花糖苷和熊果酸。结论 建立的多成分含量测定方法适用于裸花紫珠的质量评价，为裸花紫珠质量控制及相关经典名方开发提供参考。]]> 2023/7/18 11:12:42 224true 目的 基于代谢组学方法研究不同加工方法下粗茎秦艽Gentiana crassicaulis药材次生代谢化合物的差异，为优化粗茎秦艽药材的加工及干燥方法提供科学依据。方法 收集云南丽江产粗茎秦艽药材，分别进行产地和药厂加工，加工方式包括切片、原个子（不切片），干燥方式包括烘干、晒干和“发汗”。采用超高效液相色谱-离子阱-静电场轨道阱质谱（UPLC-LTQ-Orbitrap-MS）技术，结合多元统计分析方法，对各样品的次生代谢产物进行分析，筛查其差异性的特征化合物。结果 共鉴定出44个化学成分。主成分分析（principal component analysis，PCA）结果表明，根与芦头（根茎）的化学成分存在较大的差异，根的切片组、原个子组有明显区分。正交偏最小二乘法判别分析（orthogonal partial least squares discriminant analysis，OPLS-DA）表明，三年生药材质量优于二年生药材，根的质量优于芦头，切片组优于原个子组，不同干燥方法中晒干组药材的质量较优，药厂加工药材质量均优于产地加工药材，并分析得到各组间主要差异化合物。结论 粗茎秦艽药材加工时，建议选用三年生药材，去除芦头部位，并进行趁鲜切片及晒干处理。可为粗茎秦艽药材初加工工艺、质量控制与合理应用提供科学资料。]]> 2023/7/18 11:12:42 223true 目的 对甘肃产1～2年生红芪（多序岩黄芪Hedysarum polybotrys）和黄芪（蒙古黄芪Astragalus membranaceus var. mongholicus或膜荚黄芪A. membranaceus）总皂苷、总多糖、黄酮类成分含量进行统计分析，综合多指标探讨红芪和黄芪的差异。方法 运用R3.3.2软件，选取总皂苷、总黄酮、总多糖、毛蕊异黄酮苷、毛蕊异黄酮、芒柄花苷、芒柄花素、4种异黄酮含量总和8个含量指标，产地、品种、采收时间、纬度、经度、海拔高度6个影响质量的因素做变量，采用相关分析、聚类分析、主成分分析方法，对甘肃产1～2年生红芪和黄芪质量差异进行综合评价。结果 聚类结果表明红芪、黄芪聚成2大类，2种药材品质相差较大；主成分分析结果表明，黄芪质量优于红芪，总体上2年生红芪、黄芪药材质量优于1年生药材，宕昌产黄芪质量较优，武都产红芪质量较优。结论 甘肃产红芪和黄芪药材质量有明显差异，从质量角度分析，二者不适合替代使用。]]> 2023/7/18 11:12:42 222true 目的 建立QuEChERs结合液相色谱-串联质谱同时测定不同产地人参Panax ginseng中147种农药残留的分析方法。方法 人参样品经0.1%冰醋酸乙腈提取，QuEChERs法净化，采用F5色谱柱（50 mm×30 mm，2.6 μm），流动相为0.5%氨水-0.1%甲酸水溶液（A）-甲醇（B）；进样口温度为250 ℃，进样量为10 µL，体积流量0.5 mL/min，电离方式ESI⁺；毛细管电压5.5 kV；源温度500 ℃；气帘气压力207 kPa：雾化器压力414 kPa；碰撞气62 kPa，多反应监测模式。结果 147种农药的线性关系良好，相关系数均不低于0.995，3个添加水平（1.0、5.0、20.0 ng/kg）下，81.2%的农药残留的回收率范围在60%～140%，相对标准偏差均小于14.02%。结论 该方法净化方式简单、提取充分、回收率较高，适用于人参中农药残留的筛查测定，为人参中农药残留量的快速筛查和质量控制提供技术支撑。]]> 2023/7/18 11:12:42 221true 目的 克隆人参Panax ginseng转录因子基因PgWRKY22，进行生物信息学、亚细胞定位及外源磷胁迫表达分析。方法 根据人参转录组数据库设计特异性引物，PCR扩增PgWRKY22全长cDNA序列，命名为PgWRKY22，并对其进行生物信息分析；构建绿色荧光融合表达载体PgWRKY22-eGFP，利用农杆菌侵染烟草叶片的瞬时表达法分析亚细胞定位；实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测PgWRKY22在人参组织中的表达特异性以及在外源磷作用下的表达模式。结果 人参转录因子基因PgWRKY22的cDNA序列为975 bp，编码324个氨基酸；PgWRKY22蛋白属于WRKY超家族蛋白，具有典型的WRKY结合域，该蛋白不稳定，属于亲水性蛋白，无规则卷曲为主要组成部分；PgWRKY22蛋白与丹参SmWRKY、葡萄VvWRKY22、长春花CrWRKY22、独脚金SaWRKY27蛋白具有较高的同源性，与西洋参PqWRKY1、PqWRKY2，人参PgWRKY1、PgWRKY3、PgWRKY4具有较近的系统发育关系；亚细胞定位显示PgWRKY22定位于细胞核上；qRT-PCR表明PgWRKY22在人参的侧根和主根中表达较高，在叶和茎中次之；在外源磷浓度为2 mmol/L下的表达显著高于其他磷浓度下的表达。结论 克隆获得PgWRKY22的cDNA序列及表达信息，可为后续进行基因功能鉴定和人参栽培的磷营养调控提供参考。]]> 2023/6/30 0:00:00 220true 目的 筛选使鱼腥草Houttuynia cordata具有不同环境适应性的候选bZIP基因，为后续繁育出具有更强环境适应性的鱼腥草品种奠定基础。方法 以鱼腥草转录组数据为基础，鉴定了HcbZIP基因家族成员，并对其理化性质、系统进化树、motif基序及在2个不同生态型鱼腥草中的表达进行分析。结果 共鉴定得到163个HcbZIP基因，编码蛋白质的氨基酸数量在115（HcbZIP48和HcbZIP149）～703 aa（HcbZIP97），超过53%的家族成员为碱性蛋白，超过84%的家族成员为不稳定蛋白，所有家族成员均为亲水性蛋白。二级结构中，161个家族成员是由α-螺旋、延伸链、β-折叠和无规则卷曲4部分构成，β-折叠所占比例最低，α-螺旋和无规则卷曲所占比例较高。系统进化树分析将163个家族成员分成了9个类别，包括C、S、G、A、I、U、H、F和D，其中被归到D类别中的HcbZIP基因数量最多共有35个，数量最少的为C类别仅有4个，没有HcbZIP基因被归类到E和B类别中。Motif基序分析发现，motif1（RLLQNRESARRSRLRKKAYVQELESSVAK）高度保守在每个家族成员中均鉴定到且构成了bZIP基因的保守结构域。不同类别下的基因其motif基序构成较为接近，且部分motif基序只存在特定类别的基因中。表达分析发现，在鱼腥草7号药材中表达的HcbZIP基因数量多于鱼腥草6号药材，同时也发现单独在7号药材中表达的HcbZIP基因数量也多于鱼腥草6号药材。共发现6个HcbZIP基因，HcbZIP156、HcbZIP153、HcbZIP147、HcbZIP149、HcbZIP48和HcbZIP127在6号和7号药材中均呈现出较高的表达量。通过比较6号和7号的差异bZIP基因发现，共有96个差异表达HcbZIP基因，并将其分成了2大类，共63个差异基因在7号药材中表达量较高，33个差异基因在6号药材中表达量较高。结论 共筛选出4个基因HcbZIP154、HcbZIP150、HcbZIP26和HcbZIP18作为鱼腥草6号和7号2种材料能够形成适应不同生态条件的候选HcbZIP基因。]]> 2023/6/30 16:37:15 219true 目的 对不同产区艾Artemisia argyi叶进行遗传多样性分析，为艾叶规范化种植及新品种选育工作奠定基础。方法 采用ISSR分子标记技术对36个不同产区的艾叶样品进行扩增，然后利用POPGENEv1.32软件进行遗传学分析，得出它们的遗传特征系数，用Ntsyspc2.1对艾叶ISSR分子标记结果进行UPGMA聚类分析。结果 筛选出16条引物，共扩增出条带402条，其中多态性条带398条，多态性百分比为99%；在对栽培种和野生种之间遗传距离分析后发现，两者之间的遗传一致度为0.989 1，遗传距离为0.011 0；对按纬度划分的4个区域艾资源进行遗传结构与遗传变异分析，4个区域间基因多样性指数（diversity index，H_t）为0.192 7、遗传多样性指数（genetic diversity index，H_s）为0.164 2、遗传变异指数（genetic variation index，G_st）为0.147 9、基因流（gene flow，N_m）为2.881 8，NTSYSpc软件对4个区域进行系统聚类分析，可将4个区位划分为2大类，且4区位相邻2个之间均具有一定的遗传相似性。结论 艾叶具有极其丰富的遗传多样性，栽培种和野生种之间亲缘关系接近、遗传背景差异较小。艾叶其遗传特性随着纬度的变化呈现出一种递进式遗传扩散，其中河南南部居群多样性最为丰富，其次为河南中西部和河南中部，北部居群遗传多样性最低。]]> 2023/6/30 16:37:16 218true 目的 建立蒙古黄芪Astragalus membranaceus茎叶UPLC指纹图谱及含量测定方法，并对不同产地多个批次蒙古黄芪茎叶样品进行比较分析，为蒙古黄芪茎叶资源的利用与质量控制提供参考。方法 采用ACQUITY^TM UPLC BEH C₁₈色谱柱（100 mm×2.1 mm，1.7 μm），以0.1%甲酸水-乙腈为流动相，梯度洗脱，检测波长为350 nm，建立蒙古黄芪茎叶指纹图谱；采用电喷雾离子源-四极杆-飞行时间质谱（ESI-Q-TOF/MS）对共有峰进行鉴定；同时建立其含量测定方法。结合聚类分析和主成分分析法，对不同批次蒙古黄芪茎叶进行质量评价。结果 建立了蒙古黄芪茎叶UPLC指纹图谱，共标定了25个共有峰，并鉴定了其中13个色谱峰，均为黄酮类成分；建立了异槲皮苷、紫云英苷、异鼠李素-3-O-葡萄糖苷的含量测定方法；17批黄芪茎叶的相似度在0.933～0.987；通过聚类分析将样品分为2大类；主成分分析与聚类分析结果一致。结论 通过UPLC指纹图谱结合化学模式识别方法，建立了一种快速、有效的蒙古黄芪茎叶品质评价方法，可为蒙古黄芪茎叶的资源化利用提供客观依据。]]> 2023/6/30 16:37:16 217true 目的 研究铁皮石斛Dendrobium officinale鲜条及其炮制品中糖类化合物，探讨铁皮石斛炮制前后对糖类化合物积累的影响，为铁皮石斛炮制工艺提供基础研究。方法 采用超高效液相色谱-串联高分辨质谱（UPLC-MS）非靶向技术对铁皮石斛鲜条及其炮制品代谢物质进行检测，使用主成分分析（principal component analysis，PCA）和正交偏最小二乘判别分析法（orthogonal partial least squares-discriminant analysis，OPLS-DA）鉴定代谢物中糖类化合物的差异代谢物。结果 共鉴定76个糖类化合物，61个糖类化合物在西枫斗中上调积累。其中麦芽五糖和麦芽六糖炮制前后差异倍数达30倍，15个糖类化合物及其团聚体下调积累，炮制前后下调的差异倍数幅度较小。结论 炮制明显提升铁皮石斛炮制品西枫斗中代谢物的积累，研究结果为西枫斗炮制的深入研究提供理论基础。]]> 2023/6/30 16:37:16 216true 目的 对老鹳草Geranium wilfordii及70%丙酮提取不同溶剂萃取物的主体成分、特定成分进行快速的分析与鉴定。方法 采用红外光谱、二阶导数光谱结合二维相关红外光谱对老鹳草及其70%丙酮提取不同溶剂萃取物进行分析鉴定。结果 红外宏观指纹分析结果发现老鹳草原药材含有1730、1618～1445、1337 cm^-1等特征谱线，主要归属于老鹳草素及其衍生物的鞣质类化合物的特征吸收。通过分析不同极性萃取物，可以快速获知老鹳草素及其衍生物的富集情况和发现亚硝酸钾的前体硝酸钾的存在和分布情况。光谱分析结果表明，醋酸乙酯层、正丁醇层萃取物与老鹳草素相关系数分别为0.944 3、0.930 2，验证大量老鹳草素及其衍生物的存在，及其主要集中在该两层；在氯仿层、醋酸乙酯层和水层提取物中有硝酸钾特征吸收峰，以水层最明显。结论 红外光谱不仅可以对主要有机成分（鞣质、黄酮和多糖类等）进行检测分析，同时可对硝酸钾为代表的无机盐进行快速检测，在中药质量与安全的分析评估中其有广阔的应用前景。]]> 2023/6/30 16:37:16 215true 目的 筛选与茯苓Poria cocos生长发育相关的细胞色素P450基因序列，进一步丰富对茯苓生长发育理解。方法 通过分子克隆到1个茯苓细胞色素P450基因PcCYP，并利用在线工具分析其序列，预测蛋白的理化性质、结构域等分子特征；利用MEGA 5.0分别对氨基酸进行多序列比对和进化关系分析，并采用qRT-PCR方法检测不同发酵培养时间6、8、10 d的相对表达量。结果 从茯苓中克隆到的PcCYP存在可变性剪切，2个选择性剪切体PcCYP1和PcCYP2CDS区长度分别为1590、1542 bp，分别编码529、513个氨基酸。氨基酸序列分析发现其均具有保守的P450结构域，且具有信号肽和多个磷酸化修饰位点，属于分泌型的不稳定亲水蛋白。氨基酸序列多重比对及系统发育树结果显示PcCYP与担子菌Coprinopsis cinerea的CYP502距离最近，推测PcCYP和CYP502具有相似功能，即参与调控茯苓子实体的发育。定量PCR结果显示，选择性剪接变体PcCYP1的表达量较PcCYP2低，因此PcCYP2是PcCYP基因的主要剪接体。结论 PcCYP与茯苓子实体的生长发育密切相关，为进一步研究PcCYP在茯苓生长发育、遗传规律及育种等方面的生物学功能奠定基础。]]> 2023/6/15 18:49:49 214true 目的 研究裸花紫珠Callicarpa nudiflora种质资源遗传多样性，为其种质资源鉴定及优异种质筛选提供依据。方法 采用SSR分子标记技术，探究103份裸花紫珠种质遗传多样性，基于遗传距离进行UPGMA聚类分析，以SSR扩增条带为基础建立供试材料扩增条带DNA指纹图谱。结果 14对引物共扩增出92个等位基因（number of alleles，N_a），有效等位基因（effective number of alleles，N_e）占比39.37%。平均多态性信息含量（polymorphism information content，PIC）为0.468 2，6对引物具有高度多态性（PIC>0.5），6对具有中度多态性（0.25H）和Shannon指数（Shannon’s information index，I）分别为1.039 0、0.505 1，表现出较高的遗传多样性水平。聚类分析将材料分为2大类：类群I包括2份种质；类群II包含101份种质，并分为2个亚类。主坐标分析将材料分为3个类群，与聚类结果基本一致。构建的指纹图谱通过引物组合能较好地将种质进行区分。结论 103份裸花紫珠种质具有丰富的遗传多样性，并成功利用14对SSR引物构建裸花紫珠种质DNA指纹图谱，可为裸花紫珠种质鉴定、亲缘关系以及分子辅助育种提供科学依据。]]> 2023/6/15 18:49:49 213true 目的 建立藏药小檗皮Berberis Cortex及藏成药中小檗皮特异性DNA的超快速荧光可视化检测方法，实现对小檗皮药材及藏成药中小檗皮的快速鉴别。方法 将小檗皮及其混淆品的ITS2序列进行比对，筛选出小檗皮药材特异性DNA序列；针对该序列设计小檗皮特异性引物，建立小檗皮药材以及藏成药中小檗皮特异性DNA的超快速VPCR扩增体系；后将该扩增体系与SYBR Green I荧光染料相结合，实现对扩增产物的荧光可视化检测；同时对该体系的特异性、灵敏度以及在真实样本中的适用性进行考察。结果 该体系可以在40 min内完成对小檗皮以及藏成药中小檗皮特异性DNA的扩增及荧光可视化检测；检测限低至10 pg/μL；对16个批次的小檗皮药材进行分析，其中15个批次的样本产生阳性信号鉴定为小檗皮，与测序结果100%一致，1个批次的样本产生阴性信号，该样本经通用引物测序鉴定为黄柏；对3种含有小檗皮的藏成药进行分析，3个样本均产生阳性信号。结论 所建方法缩短了检测时间，并且特异性良好，灵敏度高，可以对小檗皮及其藏成药中小檗皮进行快速、准确的可视化鉴别。]]> 2023/6/15 18:49:50 212true 目的 通过指纹图谱结合化学计量学方法对白及Bletilla striata与黄花白及Bletilla ochracea进行辨识研究。方法 采用Shim-pack GIST C₁₈-AQ（250 mm×4.6 mm，5mm）色谱柱，流动相为0.1%磷酸水溶液-乙腈梯度洗脱，检测波长280 nm；体积流量1.0 mL/min；柱温30℃；进样量10 mL。采用ChemPattern^TM软件对白及、黄花白及的指纹图谱数据进行分析，并对其进行相似度评价；采用SIMCA14.1软件进行主成分分析（principal component analysis，PCA）、偏最小二乘判别分析（partial least squares discriminant analysis，PLS-DA），对二者进行定性辨识研究。结果 在相似度分析中，45批白及的相似度为0.74～0.97，相似度较好，29批黄花白及的相似度为0.44～0.83，部分黄花白及与白及较为相似；聚类分析与PCA分析结果较为一致，部分样品可分为2类；PLS-DA分析分类效果显著，模型参数Q²为0.80，R²Y为0.85，完全能将两者区分开。通过PLS-DA分析结合VIP值筛选出了影响白及与黄花白及质量差异的8个共有峰，对这8个共有峰进行分析，二者之间除15号峰（militarine）峰面积没有显著性差异外（P>0.05），其余7个共有峰峰面积白及均显著小于黄花白及（P<0.01）。结论 HPLC指纹图谱结合化学计量学方法能够实现白及与黄花白及的鉴别，可为白及饮片的质量辨识提供参考。]]> 2023/6/15 18:49:50 211true 目的 基于实时景深扩展-大图影像拼接与偏振光显微鉴别技术，对柴胡2个基原品种柴胡Bupleurum chinense或狭叶柴胡B.scorzonerifolium及4种市场常见混淆品（竹叶柴胡B.marginatum、藏柴胡B.marginatum var.stenophyllum、锥叶柴胡B.bicaule、大叶柴胡B.longiradiatum）的性状、微性状及显微鉴别特征进行系统的对比研究，为柴胡的鉴别及质量控制提供科学依据。方法 性状鉴别研究采用性状及微性状鉴别法，显微鉴别研究采用普通光明场与偏振光暗场对比观察法，结合实时景深扩展成像、大图影像拼接技术，拍摄获取药材组织横切面全息彩色影像图。结果 获取了柴胡及其混淆品的性状及微性状影像数据，首次获取了该类药材横切面显微鉴别普通光及偏振光全息彩色影像数据。对柴胡2个基原品种及其4种混淆品进行了系统的生药学研究。与《中国药典》2020年版相比，性状鉴别补充研究了精细微性状鉴别特征，对柴胡药材根或根茎的上、中、下部位横切面进行对比观察，确定了柴胡药材根或根茎上部横切面组织构造最具特征性，为最佳的横切面显微研究部位。结论 可以综合应用性状、微性状、横切面及粉末显微鉴别特征鉴定柴胡及其4种混淆品，特别是药材横切面组织偏振光全息彩色影像显微特征具有显著鉴别意义。]]> 2023/6/15 18:49:50 210true 目的 对广西民族药材横经席Calophylli Herba进行基原调查和生药学研究，并对有效成分进行测定。方法 通过查阅文献厘清横经席的历史使用沿革及植物分布情况，野外实地调研横经席的植物基原，采集并制作腊叶标本，通过药材性状、显微特征等方法进行生药学研究，采用岛津液相色谱仪Nexera LC-40，岛津Shim-pack GIST C₁₈-AQ HP色谱柱（100 mm×2.1 mm，1.9μm），乙腈-0.4%甲酸水为流动相，体积流量0.3 mL/min，梯度洗脱，柱温35℃，PDA检测器，检测波长275 nm，建立横经席药材中穗花杉双黄酮和异棘苷的含量测定方法。结果 横经席的野外资源日益匮乏，市场上常见东南亚进口的红厚壳属植物与横经席混用，采用建立的方法能够有效地鉴别横经席药材。所建立的含量测定方法稳定性和重复性良好，线性范围宽（5.360～379.800μg/mL）、线性较好（R²>0.999），平均回收率在98.3%～99.0%。结论 为完善横经席药材质量标准和药合理应用提供依据。]]> 2023/6/15 18:49:50 209true 目的 筛选得到珊瑚菜Glehnia littoralis抗盐相关基因GlRTH，并进行开放阅读框（open reading frame，ORF）全长克隆以及生物信息学和表达量分析。方法 从珊瑚菜转录组数据中筛选到GlRTH基因，通过反转录聚合酶链反应（reverse transcription-polymerase chain reaction，RT-PCR）以及cDNA末端快速扩增（rapid amplification of cDNA ends，RACE）获得该基因全长ORF序列，利用生物信息学分析方法分析其所编码蛋白质的理化性质，预测该蛋白二、三级结构、保守结构域，建立系统发育进化树；利用实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qRT-PCR）方法检测该基因组织表达特异性及其在NaCl和1-氨基环丙烷羧酸（1-aminocyclopropanecarboxylic acid，ACC）处理下的表达差异。结果 GlRTH基因序列全长ORF为690 bp，共编码229个氨基酸。系统进化分析表明，珊瑚菜的RTH蛋白与黄胡萝卜Daucus carota subsp. sativus的RTH蛋白亲缘关系最近，相似度达88.65%；qRT-PCR结果显示，GlRTH基因在珊瑚菜的根、叶、花中均有表达，在花中表达量较高，叶和根中无显著差异；200 mmol/L的NaCl处理3、6、12、24、36 h，GlRTH基因表达量明显上调，且处理36 h后GlRTH基因表达量上调最为显著；100 mmol/L ACC处理，GlRTH基因的表达量呈先上升再下降的趋势，在3 h时GlRTH基因表达量显著上调，在6 h和12 h时GlRTH基因表达量下调。结论 GlRTH蛋白是乙烯响应因子，并且与珊瑚菜的耐盐性相关。为探究乙烯信号通路和药用植物抗盐反应的关系及改良珊瑚菜的耐盐能力奠定了基础。]]> 2023/6/6 12:36:32 208true 目的 从转录组层面对北柴胡Bupleurum chinense β-香树脂醇合酶（β-amyrin synthase，β-AS）基因家族成员进行鉴定，并对其表达及功能进行分析验证，以期为解析柴胡皂苷的合成和调控提供基础。方法 基于全长转录组数据挖掘北柴胡β-AS基因家族成员（BcBASs），利用在线软件对各基因进行生物信息学分析，利用大肠杆菌和烟草验证关键基因的功能。结果 从北柴胡转录组数据中挖掘到不冗余的β-AS基因6个，可分为3个亚家族，它们都具有典型保守区域DCTAE、MWCYCR和QW。进化分析表明，BcBAS1、BcBAS2、BcBAS4、BcBAS5、BcBAS6可能为单功能β-AS基因，BcBAS3可能为多功能β-AS基因，表达分析表明各基因在根和叶中的表达模式有差异。在大肠杆菌中成功表达了BcBAS1可溶性重组蛋白，相对分子质量约87 000，烟草瞬时表达表明BcBAS1编码蛋白具有β-AS功能，能促进β-香树脂醇的积累。结论 对北柴胡中6个不冗余的β-AS基因家族成员进行了鉴定和生物信息学分析，获得了BcBAS1可溶性重组蛋白，在烟草中验证了BcBAS1为有功能的β-AS，为柴胡皂苷合成调控机制和生物合成研究奠定了基础。]]> 2023/6/6 12:36:33 207true 目的 解析远志Polygala tenuifolia叶绿体基因组信息序列特征和确定其在远志属的系统位置。方法 获得远志叶绿体基因组序列，借助GeSeq、Chloroplot、MISA、REPute、Tandem repeats finder、CodonW、Geneious、IRscope、MAFFT 7和IQtree2.0.5等生物信息学工具进行序列分析、密码子偏好分析、远志属基因组比较分析和系统发育研究。结果 远志的叶绿体基因组全长165 423 bp，为典型的环状四段式结构；包括1个大单拷贝区（large single copy，LSC；83 699 bp），1个小单拷贝区（small single copy，SSC；8044 bp）和1对反向重复区（inverted repeats，IRs；36 840 bp），该基因组共注释到135个基因，包括8个rRNA基因、38个tRNA基因和89个蛋白编码基因。该基因组中共检测到161个SSR位点，223条散在重复序列，90条串联重复序列；亮氨酸（Leu）是远志叶绿体基因组中使用次数最高的氨基酸（10.21%），同义密码子相对使用频次（RSCU）＞1的密码子有35种且均以A/U结尾；序列长度、基因组成以及GC含量等方面相对保守。IR边界分析除了西南远志Polygala crotalarioides和密花远志Polygala karensium外，其余远志属边界高度保守；基于远志科9个物种的叶绿体基因组数据同时选择远志属的近缘类鸦胆子Brucea javanica和九里香Murraya exotica作为外类群，采用最大似然法和邻接法分别构建系统发育树，支持率均为100，显示远志P.tenuifolia与卵叶远志Polygala sibirica、瓜子金Polygala japonica和香港远志Polygala hongkongensis聚类到一起，能够反映远志属的亲缘关系。结论 远志与卵叶远志、瓜子金和香港远志的亲缘关系最近。首次采用生物信息学分析方法对远志叶绿体基因组进行了全面、深度解析，结果将为远志属药用植物的遗传多样性分析以及新品系的遗传育种研究等提供理论依据。]]> 2023/6/6 12:36:33 206true 目的 对广丰千金薯Dioscorea polystachya Turczaninow.cv.Guangfeng Qianjin烟草花叶病毒进行鉴定、原核蛋白表达和序列分析，为广丰千金薯脱毒苗的培育和鉴定提供理论依据。方法 通过lncRNA测序鉴定广丰千金薯烟草花叶病毒蛋白基因，利用大肠杆菌重组技术表达广丰千金薯烟草花叶病毒蛋白，并采用生物信息学方法进行序列分析。结果 广丰千金薯烟草花叶病毒蛋白基因包括复制酶1（ORF1）、复制酶2（ORF2）、RNA聚合酶、运动蛋白（movement protein，MP）、带电蛋白和外壳蛋白（coat protein，CP）；广丰千金薯烟草花叶病毒CP、MP、RNA聚合酶、带电蛋白、ORF1和ORF2基因cDNA总长度分别为480、807、1425、123、4851、3351 bp，其蛋白分别由159、268、474、40、1613和1114个氨基酸组成；广丰千金薯烟草花叶病毒蛋白除带电蛋白为疏水性蛋白质外，其余如ORF1、ORF2、RNA聚合酶、运动蛋白和外壳蛋白均为亲水性蛋白质；广丰千金薯烟草花叶病毒带电蛋白二级结构由β-片层和无规则卷曲构成，CP、MP、RNA聚合酶、ORF1和ORF2的二级结构均由α螺旋、β-片层、无规则卷曲构成；广丰千金薯烟草花叶病毒CP、MP、RNA聚合酶、带电蛋白、ORF1和ORF2三级结构均为单体；广丰千金薯烟草花叶病毒CP、MP、RNA聚合酶、带电蛋白、ORF1和ORF2的亚细胞定位分别为内质网、细胞核、细胞质、细胞核、线粒体、叶绿体；广丰千金薯烟草花叶病毒CP、MP、RNA聚合酶、带电蛋白、ORF1和ORF2与烟草花叶病毒的亲缘关系较近，同源性分别为99.79%、99.38%、99.23%、100%、99.38%、99.49%；广丰千金薯烟草花叶病毒复制酶、RNA聚合酶、MP和CP可实现大肠杆菌重组表达，表明广丰千金薯烟草花叶病毒的lncRNA测序结果准确。结论 广丰千金薯烟草花叶病毒与烟草花叶病毒同源性极高，氨基酸序列及核酸序列与烟草花叶病毒其他植物分离物相似度高，在进化上高度保守。]]> 2023/6/6 12:36:33 205true 目的 采用指纹图谱、多成分含量测定结合化学计量学方法分析和比较不同基原白芷药材（白芷Angelica dahurica和杭白芷Angelica dahurica var.formosana）的化学成分，为白芷药材的质量控制提供技术方法及数据支撑。方法 采用高效液相色谱法对白芷和杭白芷药材化学成分进行分析，建立不同基原白芷药材化学指纹图谱；在此基础上，对白芷和杭白芷药材中的花椒毒酚、水合氧化前胡内酯、白当归素、花椒毒素、佛手柑内酯、氧化前胡素、欧前胡素、珊瑚菜素和异欧前胡素9种香豆素类成分进行含量测定；进一步应用聚类分析、主成分分析及偏最小二乘判别分析等化学计量学方法对白芷与杭白芷进行区分与比较，寻找差异化合物。结果 建立了不同基原白芷药材的化学指纹图谱，共标定了11个共有峰，所建立的化学指纹图谱专属性良好，可用于白芷药材的质量评价；多成分含量测定和化学计量学结果表明，白芷和杭白芷药材中所含香豆素类成分种类无差异，但香豆素类成分含量有明显差异；佛手柑内酯、珊瑚菜素、异欧前胡素、氧化前胡素和花椒毒素为白芷和杭白芷药材间的差异性化合物，可以作为区分和鉴别二者的质量标志物。结论 基于指纹图谱、多成分含量测定和化学计量学方法，明确了白芷和杭白芷药材化学成分差异，为不同基原白芷药材的质量控制和基原鉴定提供了分析方法和科学依据。]]> 2023/6/6 12:36:33 204true 目的 以黄背草Themeda japonica 为试验材料，比较分析其与阿拉伯黄背草T. triandra、中华菅T. quadrivalvis 2种同属植物的叶绿体基因组特征及其与近缘物种的系统发育关系。方法 采用Illumina HiSeq高通量测序平台首次对黄背草叶绿体基因组进行测序，使用SPAdes和CpGAVAS2分别对其进行组装和注释，并用CodonW、DnaSP和MISA等对其与2种同属植物进行一系列比较基因组分析，利用最大似然法（maximum likelihood，ML）构建系统进化树。结果 3个叶绿体基因组全长为138 735～138 961 bp，具有典型的四分体结构，共注释出129个基因；黄背草与其同属的2个物种相比，反向重复区（inverted repeats，IR）收缩了2132 bp，大单拷贝区（large single copy region，LSC）扩张了约4000 bp，而小单拷贝区（small single copy region，SSC）变化不大。密码子偏好性分析显示，3个叶绿体基因组相对丰度最大和最小的密码子都相同，同义密码子相对使用丰度略有不同，但差异不大。核酸多态性分析显示，3个叶绿体基因组间区序列的核酸多态性值（Pi）普遍高于共有基因序列，且IR区域相比于LSC、SSC区域更为保守。3个叶绿体基因组中分别检测到38、36、37个简单重复序列（simple sequence repeat，SSR）和2种长重复序列（long sequence repeat）。系统发育分析表明，黄背草与阿拉伯黄背草亲缘关系最近。结论 对黄背草与2种菅属植物叶绿体基因组特征及其系统发育进行了比较分析，为上述3种植物的物种鉴定及菅属遗传多样性和系统进化研究奠定了基础。]]> 2023/5/20 12:43:40 203true 目的 以药用植物锈毛钝果寄生Taxillus levinei为材料，在高通量测序、组装的基础上，明确叶绿体因组的结构、序列特征和系统发育关系。方法 利用SDS法提取基因组DNA，采用Illumina HiSeq X Ten进行高通量测序，用NovoPlasty组装叶绿体基因组，借助PhyML生成系统发育树。结果 锈毛钝果寄生的叶绿体基因组全长为122 208 bp，GC值为37.3%，大单拷贝区（large single copy region，LSC）、小单拷贝区（small single copy region，SSC）和反向重复区（inverted repeat region，IR）的长度分别为70 522、6084和22 801 bp；锈毛钝果寄生的叶绿体基因组共有基因108个，其中的编码蛋白基因、tRNA与rRNA分别为66、29和8个，另有5个假基因；infA基因、所有的ndh基因及6个tRNA发生丢失。序列比对结果表明，锈毛钝果寄生与桑寄生T. sutchuenensis (Lecomte) Danser叶绿体基因组之间的相似性最高，达96.7%。系统发育分析结果表明，7种植物在发育树上分成5组，其中，锈毛钝果寄生与桑寄生和广寄生聚于一组。结论 锈毛钝果寄生叶绿体基因组的组装、序列分析和系统发育分析，为后续开展遗传结构和遗传多样性研究奠定了基础，并为桑寄生科植物的进化和系统发育研究提供了依据。]]> 2023/5/20 12:43:41 202true 目的 建立胆木不同部位的UPLC指纹图谱，结合成分定量与化学模式识别，评价胆木不同部位的差异性。方法 采用Waters Acquity BEH C₁₈色谱柱（100 mm×2.1 mm，1.7 μm）；以乙腈（A）-0.1%磷酸水溶液（B）为流动相进行梯度洗脱；检测波长240 nm；体积流量0.3 mL/min；柱温30 ℃，对胆木不同部位异长春花苷内酰胺的含量进行测定，利用化学模式识别法通过SPSS 20.0对色谱数据进行聚类分析和通过SIMCA 14.1软件对胆木9部位进行主成分分析，并将所有色谱峰化为分类数据对药材不同部位的差异性进行分析。结果 对于异长春花苷内酰胺而言，植株地下部位（根皮、去皮根茎）的累积量要高于地上部位的累积量，在地下部位，根皮部位的含量高于去皮根茎部位的含量，地上部位中叶含量最高，其次为茎干部位，最后为枝部位，茎干部位趋势从高到低大致为去皮茎干、带皮茎干、茎皮，枝部位趋势从高到低大致为枝皮、去皮枝茎、带皮小枝。3批次9部位（27份）药材UPLC图谱有9个共有峰，指认了其中獐牙菜苷、绿原酸、马钱苷酸3个色谱峰。当平方欧氏距离为10时，9部位被聚为3类：3批叶聚为一类，3批根皮、3批茎皮、3批枝皮共聚为一类，3批去皮根茎、3批带皮茎干、3批去皮茎干、3批带皮小枝、3批去皮枝茎聚为一类。所有色谱峰化为分类数据后，在皮部位中，根皮能区分于茎皮和枝皮，色谱图中根皮也存在区别于茎皮和枝皮的特征峰；在去皮部位中，去皮根茎可区分于去皮枝茎和去皮茎干，色谱图中去皮根茎也存在区别于去皮枝茎和去皮茎干的特征峰，同时去皮枝茎和去皮茎干可通过色谱图中的特征峰区分开来；在带皮部位中，带皮小枝与带皮茎干可以区分开来。结论 胆木皮部位（根皮、枝皮、茎皮）、带皮部位（带皮小枝、带皮茎干）、去皮部位（去皮茎干、去皮枝茎、去皮根茎）、叶部位存在差异，可为胆木的进一步开发利用提供依据。]]> 2023/5/20 12:43:41 201true 目的 采用指纹图谱与化学模式识别方法，以质量标志物（quality marker，Q-Marker）为指标，评价不同种质白芍Paeoniae lactiflora的质量。方法 采用HPLC法，以乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相进行梯度洗脱，柱温30 ℃，体积流量1 mL/min，检测波长230 nm；绘制40批白芍样品的指纹图谱，结合相似度分析、聚类分析（cluster analysis，HCA）、主成分分析（principal component analysis，PCA）和正交偏最小二乘法（orthogonal partial least square，OPLS-DA）等化学模式识别技术，对不同种质的白芍样品进行质量评价。结果 从质量传递与溯源，植物亲缘性及化学成分的特有性、有效性及可测性等方面对白芍Q-Marker的选择进行了分析，推测白芍中芍药苷、氧化芍药苷、苯甲酰芍药苷、芍药内酯苷、儿茶素、没食子酰芍药苷、1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖和没食子酸可作为白芍的Q-Marker。以40批白芍HPLC指纹图谱标定白芍的Q-Marker，相似度在0.892～1.000；聚类分析初步区分出了不同种质的白芍，四川中江、浙江杭州和河北安国的白芍样品质量较为相近；PCA和OPLS-DA结果显示，筛选出的Q-Marker可作为不同种质白芍的特征化学成分；对Q-Marker进行含量测定，结果不同种质样品间差异较大；TOPSIS分析结果表明山西运城的白芍质量排名最高，人工培育的杂花白芍质量排名最低。结论 通过指纹图谱结合化学模式识别技术，以白芍Q-Marker为评价指标能较为全面地反映白芍的质量，可以为白芍优质种质资源的选育和育种提供参考。]]> 2023/5/20 12:43:41 200true 目的 采用HPLC指纹图谱与化学计量学相结合、UPLC-MS/MS测定多黄酮成分含量的方法，测定不同产地陈皮质量，为其鉴别和质量控制提供依据。方法 采用HPLC-DAD指纹图谱检测并结合“中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012A版）”建立6个产区，49个不同批次陈皮药材（S1～S49）指纹图谱，并进行相似度评价和共有峰确认，结合聚类分析（hierarchical clustering analysis，HCA）、主成分分析（principal component analysis，PCA）、正交偏最小二乘法-判别分析（orthogonal partial least-squares discrimination analysis，OPLS-DA）等化学计量学综合分析。采用UPLC-MS/MS法建立了8个黄酮类成分柚皮素、柚皮苷、木犀草苷、川陈皮素、橙皮素、橙皮苷、橘皮素和芸香柚皮苷的含量测定方法对60批7个产地陈皮药材进行评价。结果 建立了49批不同产地陈皮药材的指纹图谱，相似度为0.864～0.999，共标定了11个共有峰，HCA分析49批陈皮明显分为4类；PCA得到5个主成分的累积方差贡献率为92.748%；OPLS-DA表明8、7、10和11号峰可能是影响陈皮药材质量的差异标志物；含量测定结果表明不同产地陈皮中黄酮类含量存在显著差异，广东新会以川陈皮素和橘皮素为主要标志成分，四川荷花池以木犀草苷为差异性成分，江西樟树以柚皮素和柚皮苷为差异性成分，广西玉林则以橙皮素、橙皮苷和芸香柚皮苷为主，重庆云阳以川陈皮素和橙皮苷为主。结论 建立了稳定性强的不同产地陈皮HPLC指纹图谱和8个黄酮类UPLC-MS/MS定量测定方法，结合化学计量学可用于陈皮药材综合评价和质量控制。]]> 2023/5/20 12:43:41 199true 目的 研究连翘多胺氧化酶（polyamine oxidase，PAO）基因家族在盐和干旱胁迫下的响应特征。方法 通过分析连翘转录组数据鉴定出5个连翘PAO基因家族成员，结合蛋白质理化性质和基序分析、蛋白质结构分析、系统进化分析、结构域等方式进行相关性分析，并探究了盐和干旱胁迫下PAO基因的表达水平。结果 连翘PAO基因家族氨基酸数介于235～541 aa，相对分子质量在26 069～59 328，等电点在5.27～5.86；不稳定系数为35.68～44.14，总平均亲水性皆为负值，推测连翘PAO家族蛋白均为不稳定型、酸性、亲水性蛋白，α-螺旋与无规则卷曲为蛋白主要二级结构形式。结论 鉴定出的5个连翘PAO基因家族成员均具有特异性表达模式；在盐和干旱胁迫下5个连翘PAO基因家族成员的表达均受到诱导，可能参与连翘的盐胁迫及干旱胁迫响应调控，为深入探讨连翘PAO基因家族的功能奠定了基础。]]> 2024/5/9 14:26:56 198true 目的 揭示忍冬属囊管组16种植物叶绿体基因组特征及系统发育关系。方法 以16种囊管组植物为研究材料，利用CodonW、EMBOSS、Excel等软件分析其叶绿体基因组密码子使用偏好性；利用IRscope、mVISTA、DNAsp进行叶绿体基因组比较分析；利用PhyloSuite基于最大似然法及贝叶斯法2种方法构建系统发育树。结果 结果显示ENC值为46.54～47.37，均大于35，密码子偏好性较弱。GC_all含量范围为38.92%～39.22%，均小于40%，具有明显的A/U偏好性，且GC₁＞GC₂＞GC₃，密码子第3位碱基以A/U为主。通过中性绘图、ENC-plot及PR2-plot分析，发现影响密码子使用偏好性的主要因素是自然选择。筛选出最优密码子7个，且密码子第3位均以A/U结尾。16种囊管组植物中均出现ycf1假基因。IR边界保守，差异较小。变异主要集中在非编码区，且单拷贝区域核苷酸多态性大于反向重复区域，存在更多的变异位点。系统发育分析结果显示，红花亚组与紫花亚组内物种系统发育位置与《中国植物志》存在差异。结论 揭示了影响忍冬属囊管组植物密码子偏好性的因素。结合叶绿体基因组比较分析，系统发育分析，有助于进一步理解忍冬属植物的进化和适应机制。]]> 2024/5/9 14:26:56 197true 目的 建立不同产地莲房Nelumbo nucifera的HPLC指纹图谱及多成分含量测定方法，结合化学模式识别法评价不同产地莲房药材质量。方法 采用Welch Ultimate^® Polar-RP（250 mmÍ4.6 mm，3 μm）色谱柱，以甲醇-乙腈（1∶2，A）-0.2%甲酸水溶液（B）为流动相，柱温40 ℃，体积流量0.6 mL/min，检测波长270 nm，绘制20批不同产地的莲房药材的指纹图谱，应用SPSS 26.0和SIMCA 14.1软件结合化学模式识别，聚类分析（cluster analysis，CA）、主成分分析（principal component analysis，PCA）、正交偏最小二乘法判别分析（orthogonal partial least squares discriminant analysis，OPLS-DA）、优劣解距离法（technique for order preference by similarity to ideal solution，TOPSIS）对不同产地莲房样品进行质量评价，并测定6种主要成分的含量。结果 20批HPLC指纹图谱共匹配出17个共有峰，分别指认出儿茶素、荷叶碱、N-去甲荷叶碱、金丝桃苷、异槲皮苷、槲皮素-3-O-葡萄糖醛酸苷和紫云英苷7个成分；指纹图谱相似度在0.546～0.991，CA将20批莲房分为3类；PCA、OPLS-DA与TOPSIS分析结果为产于安徽芜湖、江西赣州、山东微山湖的药材质量较好；并分析筛选出荷叶碱、N-去甲荷叶碱和儿茶素等5个成分为引起不同产地质量差异的标志性成分。莲房中6个主要成分儿茶素、荷叶碱、N-去甲荷叶碱、金丝桃苷、异槲皮苷和槲皮素-3-O-葡萄糖醛酸苷的质量分数分别为0.029%～0.958%、0.007%～0.137%、0.013%～0.104%、0.015%～0.282%、0.008%～0.110%、0.027%～0.541%。结论 建立的莲房HPLC指纹图谱操作简便、结果可靠，儿茶素、荷叶碱、N-去甲荷叶碱、金丝桃苷、异槲皮苷和槲皮素-3-O-葡萄糖醛酸苷可以作为莲房质量评价的主要指标性成分。]]> 2024/5/9 14:26:56 196true 目的 采用UPLC建立生姜Zingiber officinale在冷提、回流2种不同处理方法的指纹图谱，再利用化学计量学和灰度关联分析法对不同处理方法下的生姜进行成分差异研究，采用电子舌技术找寻与生姜风味相关的关键性成分。方法 利用UPLC建立生姜不同处理方法的指纹图谱，筛选共有峰，以Orbitrap-Exploris质谱对共有峰成分进行鉴定，再运用SIMCA、SPSS等软件进行化学计量学分析，通过层次聚类分析（hierarchical clustering analysis，HCA）、主成分分析（principal component analysis，PCA）、正交偏最小二乘-判别分析（orthogonal partial least squares-discriminant analysis，OPLS-DA）和灰度关联分析评价不同处理方法下生姜的成分差异。结果 从生姜指纹图谱中识别出10个共有峰，各批次的相似度在0.972～1.000；Orbitrap-Exploris质谱共鉴定出9个共有峰成分；HCA和PCA的结果显示，冷提法和回流法处理的生姜可以各自聚类，OPLS-DA确证了6-姜酚、8-姜酚、8-姜二酮、10-姜酚、1,4-去二氢-8-姜酚、1,4-去二氢-10-姜酚是不同处理方法下生姜差异性的关键性成分；灰度关联分析结果表明，冷提法处理生姜可以得到更多姜酚类，姜烯酚类成分；电子舌结果表明，处理方法对生姜的风味并无显著影响，而6-姜酚与生姜诸多味觉信息呈显著性相关。结论 利用UPLC指纹图谱结合化学计量学可以评估生姜的质量和风味物质的含量，可有效区分冷提法和回流法处理的生姜并筛选出差异性成分，为生姜的处理方式的选择提供了可靠的方法，并且利用电子舌技术得出6-姜酚是生姜味觉信息变化的关键性成分。]]> 2024/5/9 14:26:56 195true 目的 采用HPLC法对珠子参Panax japonicus中多指标成分进行定量检测，建立主成分分析（principal component analysis，PCA）、正交偏最小二乘判别分析（orthogonal partial least-squares discrimination analysis，OPLS-DA）及加权逼近理想解排序-灰色关联度（technique for order preference by similarity to an ideal solution-grey relation analysis，TOPSIS-GRA）融合模型对不同产地珠子参进行质量评价，以提高珠子参药材整体质量控制水平。方法 采用外标法测定珠子参中三七皂苷R₁、人参皂苷Rg₁、人参皂苷Re、人参皂苷Rb₂、人参皂苷Rd₂、竹节参皂苷V、楤木皂苷A、竹节参皂苷IVa、越南参皂苷R₄、齐墩果酸、镰叶芹醇、豆甾醇和β-谷甾醇含量，定量检测条件为Agilent Eclipse Plus C₁₈色谱柱，流动相乙腈-0.2%磷酸梯度洗脱，检测波长205 nm，柱温30 ℃。以珠子参中13种成分含量为变量，通过PCA降维获得主成分并实现对样品分组，在样品分组基础上采用OPLS-DA挖掘影响珠子参质量的差异性标志物。建立加权TOPSIS-GRA融合模型对不同产地珠子参综合质量进行评价。结果 珠子参中13种成分在各自范围内线性关系良好（r＞0.999），平均加样回收率为96.76%～100.06%（RSD＜2.0%），精密度、稳定性和重复性试验结果符合《中国药典》2020年版规定。PCA结果显示前2个主成分特征值分别为9.757和1.976，累积方差贡献率为90.255%，15批珠子参聚为3组，呈现一定产地差异；OPLS-DA结果显示竹节参皂苷IVa、竹节参皂苷V、人参皂苷Rd₂、β-谷甾醇、楤木皂苷A和人参皂苷Re是影响珠子参质量的差异性标志物。加权TOPSIS-GRA融合模型结果显示15批珠子参样品的平均相对贴近度（γ_i）为0.261 3～0.743 2，珠子参产品质量存在一定产地差异，同一产地差异较小，不同产地产品质量差异较大，同时聚类结果与PCA结果一致。结论 建立的HPLC多指标成分定量控制方法操作便捷、结果准确，可用于珠子参中13种成分的同步检测；PCA、OPLS-DA及加权TOPSIS-GRA融合模型合理可靠，可用于不同产地珠子参质量评价。]]> 2024/5/9 14:26:56 194true 目的 通过权重基因共表达网络分析(weighted gene co-expression network analysis,WGCNA)挖掘人参皂苷Rh₁生物合成相关基因。方法 以种植于吉林省人参主产区304个农家品种的转录组测序数据为基础,以人参皂苷Rh₁含量为表型进行差异表达基因的挖掘。结果 通过WGCNA获得6个与人参皂苷Rh₁含量密切相关的基因共表达模块,根据关联分析结果确定Green模块为与人参皂苷Rh₁含量显著相关的关键模块。功能注释结果显示Green模块内的基因富集到mRNA结合、蛋白修饰等多个相关途径。通过构建基因互作网络筛选获得7个核心基因,功能预测表明这些基因可能在人参皂苷Rh₁的生物合成途径中起着重要作用。对7个候选基因进行茉莉酸甲酯(methyl jasmonate,MeJA)体外调控分析。对人参不定根进行MeJA诱导处理,随MeJA的诱导,comp9517_c0_seq1、comp10896_c0_seq1、comp43180_c0_seq2、comp64014_c0_seq8的表达量与人参皂苷Rh₁的含量同时呈现显著变化,但只有comp64014_c0_seq8的表达趋势与人参皂苷Rh₁在MeJA诱导下的表达趋势相同,表明这条候选基因可能与人参皂苷Rh₁的合成密切相关。结论 为人参皂苷Rh₁生物合成途径的解析提供了理论基础。]]> 2024/4/19 0:00:00 193true 目的 探究红景天Rhodiola rosea、珠芽蓼Polygonum viviparum、瑞香狼毒Stellera chamaejasme 3种青藏高原常见药用植物根际土壤代谢物的组成、差异代谢物特性及主要代谢通路。方法 以青藏高原高寒草地的红景天、珠芽蓼、瑞香狼毒3种药用植物的根际土壤为实验材料,采用高分离度液相色谱-四极杆飞行时间质谱联用技术(UPLC-QTOF-MS)的非靶向代谢组学方法进行检测分析。结果 3种药用植物的根际土壤样本间均没有重叠,组间差异较为明显。根际土壤样本显著差异代谢物结果显示,珠芽蓼与红景天和瑞香狼毒的显著差异代谢物均比较多,而红景天和瑞香狼毒之间显著差异代谢物相对较少。ATP结合盒转运体(ABC transporters)、D-谷氨酰胺(D-glutamine)和D-谷氨酸(D-glutamate)代谢、嘌呤代谢(purine metabolism)等3种代谢通路在3种药用植物根际土壤代谢通路富集中均表现出显著性最高。结论 3种药用植物根际土壤样本的标志代谢物与其主要药效活性成分密切相关,珠芽蓼次生代谢产物的代谢合成途径比瑞香狼毒和红景天更多样化。3种药用植物根际土壤代谢途径是生物合成活性次生代谢产物、适应高寒生态环境的重要基础。]]> 2024/4/19 0:00:00 192true 目的 建立不同生长期(花前期、开花期和成熟期)毛菊苣Cichorium glandulosum地上部位药材的HPLC指纹图谱,结合化学模式识别法和薄层色谱(TLC)生物自显影技术评价毛菊苣药材质量,为其进一步研究与开发提供依据。方法 采用PolyPack C₁₈-AQ色谱柱,以甲醇(A)-乙腈(B)-0.3%磷酸溶液(C)为流动相进行梯度洗脱,检测波长为254 nm,体积流量为1.0 mL/min。采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012)》建立不同生长期毛菊苣地上部位药材的HPLC指纹图谱并分析相似度。应用聚类分析(cluster analysis,CA)、主成分分析(principal component analysis,PCA)和偏最小二乘法-判别分析(partial least squares-discriminant analysis,PLS-DA)筛选不同生长期下毛菊苣地上部位药材中具有的差异性化学成分。利用TLC-生物自显影技术对不同生长期毛菊苣药材进行体外抗氧化作用研究。结果 不同生长期下20批次药材HPLC指纹图谱共匹配出12个共有峰,指认出3号峰为秦皮乙素、6号峰为异槲皮苷、7号峰为3,5-O-二咖啡酰奎宁酸。CA将20批不同生长期下药材分为4类;PCA确定了3个主成分因子,累积方差贡献率为78.143%,PCA结果与CA结果基本一致;PLS-DA结果显示色谱峰11、2、6(异槲皮苷)、3(秦皮乙素)和5号峰可作为不同生长期毛菊苣药材质量的差异标志物。样品展开斑点和TLC-生物自显影说明花前期和开花期药材相比成熟期药材具有良好的抗氧化活性作用。结论 利用建立的指纹图谱可为毛菊苣地上部位药材规范化种植以及质量评价提供实验依据。]]> 2024/4/19 0:00:00 191true 目的 建立薏苡仁UPLC指纹图谱及多指标成分定量测定方法,并将薏苡仁UPLC指纹图谱、化学模式识别和多指标成分定量测定相结合,进而对不同产地薏苡仁药材进行综合质量评价。方法 采用Waters C₈色谱柱,以甲醇-纯水等度洗脱;体积流量0.2 mL/min;检测波长205 nm;柱温25℃;进样量0.3 μL,建立15个不同产地薏苡仁药材指纹图谱,并进行相似度评价和化学模式识别;同时对不同产地薏苡仁药材进行一般性检查、浸出物测定及多个指标性成分含量测定。结果 15个不同产地薏苡仁药材UPLC指纹图谱共标定14个共有峰,通过对照品指认了其中7个成分,包括三亚油酸甘油酯、1,2-二亚油酸-3-棕榈酸甘油酯、1,2-二亚油酸-3-油酸甘油酯、1-棕榈酸-2-油酸-3-亚油酸甘油酯、1,2-二油酸-3-亚油酸甘油酯、1,2-二油酸-3-棕榈酸甘油酯和三油酸甘油酯,上述7个成分重复性、稳定性及加样回收率结果均较好。此外,UPLC指纹图谱相似度范围为0.972~1.000;15个产地薏苡仁药材聚为3类,云南、福建样品聚为一类,贵州兴仁药材聚为一类,贵州兴义、安龙药材聚为一类;主成分综合得分表明云南、福建产地样品较优,通过筛选得出色谱峰2、5(三亚油酸甘油酯)、8和11(1,2-二油酸-3-棕榈酸甘油酯)是引起不同产地薏苡仁质量差异的主要成分;不同产地薏苡仁药材均符合《中国药典》2020年版水分、灰分和浸出物的标准;同时,多成分定量测定结果表明,7个指标性成分之间存在显著差异。结论 建立了15个不同产地薏苡仁药材UPLC指纹图谱及含量测定方法,并结合UPLC指纹图谱、化学模式识别和多指标成分含量测定进行进一步研究,可为薏苡仁药材质量的综合评价提供参考。]]> 2024/4/19 0:00:00 190true 目的 基于HPLC指纹图谱技术和统计学分析方法,比较和评价常山柚橙Citrus aurantium 'Changshan-huyou'未成熟的干燥果实(衢枳壳)与不同栽培变种酸橙间质量的一致性与差异性。方法 使用Extend XDB C₁₈色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),检测波长330 nm,以乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,体积流量1.0 mL/min,柱温为30℃。通过聚类分析(cluster analysis,CA)和主成分分析(principal component analysis,PCA)对35批样品的指纹图谱进行评价。结果 建立的酸橙枳壳的指纹图谱共有模式获得24个共有峰,并指认出12个目标化合物。13批衢枳壳样品的相似度结果范围0.920~0.947,质量一致性好,不同基原枳壳相似度结果为0.127~0.990,质量差异大。CA将衢枳壳均与酸橙枳壳聚为一类,朱栾和部分黄皮酸橙单独聚为一类,结合PCA获得区分不同基原枳壳的差异性标志物,其中9个已知化合物分别为葡萄内酯水合物、川陈皮素、柚皮苷、桔皮素、木犀草素、新橙皮苷、芸香柚皮苷、橙皮苷、柚皮素。结论 研究表明衢枳壳的化学成分与酸橙枳壳相似度高,且药材质量一致性好,药材质量优于朱栾和塘橙,推荐作为《中国药典》的枳壳植物基原之一。同时应增加区分不同基原枳壳的关键化合物作为指标成分,以全面准确的评价和控制枳壳药材质量。]]> 2024/4/19 0:00:00 189true 目的 以蒙古黄芪Astragalus membranaceus var. mongholicus为材料，解析其叶绿体基因组的序列特征，并进行系统发育分析。方法 利用Illumina NovaSeq测序平台对蒙古黄芪叶绿体全基因组进行测序，完成其组装、注释、特征分析，构建系统发育树。结果 蒙古黄芪叶绿体基因组全长为123 349 bp，GC含量为34.09%，由于缺失反向重复IR区，Circos图呈现出非典型四分体结构，属于IRLC群体。获得注释基因109个，其中蛋白编码基因76个，rRNA基因4个，tRNA基因29个。蒙古黄芪叶绿体基因组的密码子偏好性较弱，密码子偏向使用A碱基和U碱基。MISA检测出263个SSR位点，以A/T重复为主；叶绿体全基因组比较分析可知17种豆科植物叶绿体基因组的基因区间组成差异较小；但trnF-GAA～trnT-UGU、trnfM-CUA～psbC、trnE～trnD、psbM～rpoB、ycf1和ycf2等编码区存在差异性；系统发育树显示，蒙古黄芪与胶黄芪A. gummifer聚为一类，与阿纳卡黄芪A. nakaianus、膜荚黄芪A. membranaceus具有一定亲缘性。结论 可为开展黄芪属遗传多样性研究、DNA条形码构建和分子鉴定标记开发提供参考。]]> 2024/4/3 17:11:28 188true 目的 探究不同生态类型菘蓝Isatis tinctoria表型差异和特异位点扩增片段测序（specific-locus amplified fragment sequencing，SLAF-seq）分子标记。方法 以25个不同生态类型菘蓝为研究对象，利用SLAF-seq技术开发SLAF标签，再结合菘蓝叶片叶表观特征的田间观测，分析不同生态类型菘蓝植株表观差异。结果 测序后各样品所获得的读长总量各不相同，测序质量值Q30为95.66%～96.60%，GC比例为38.13%～41.37%。共开发535 105个菘蓝SLAF标签，多态性SLAF标签有34 412个，共得到63 002个群体单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphism，SNP）标记。测序分析结果与叶表观特征调查结果相结合，可以将25个不同生态类型菘蓝分为5类，分别为倒卵圆形无缺刻皱缩叶、倒卵圆形缺刻皱缩叶、倒卵圆形无缺刻平坦叶、倒卵圆形缺刻平坦叶、披针形无缺刻平坦叶。结论 为后期进一步研究不同类型菘蓝的基因来源和遗传进化提供参考，为菘蓝种质分类、品种鉴定和分子辅助育种提供借鉴。]]> 2024/4/3 17:11:28 187true 目的 分析大果沙棘Hippophae rhamnoides vat. sp L.与中华沙棘H. rhamnoides初生/次生代谢物的差异，并对其生物合成途径变化进行分析。方法 采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱（UPLC-Q-TOF-MS/MS）法对2个种属的沙棘进行初生及次生代谢产物表征，基于二水平析因-星点设计法（plackett burman-central composite design，PB-CCD）设计对沙棘UPLC-DAD指纹图谱进行研究，优化液相方法，指认共有峰；以偏最小二乘-判别分析（partial least squares discriminant analysis，PLS-DA）、聚类分析及京都基因与基因组百科全书（Kyoto encyclopedia of genes and genomes，KEGG）通路富集分析对大果沙棘、中华沙棘进行差异初生代谢物筛选及相关代谢通路富集；进一步采用质谱多反应检测（multiple reaction monitoring，MRM）对筛选得到具有差异的初生代谢物和次生代谢物进行定量分析；最后，对2个品种沙棘的差异性成分进行分析并对其进行生物合成途径的关联和阐释。结果 基于成分表征和PLS-DA初步鉴定出中华、大果沙棘含量差异较大的成分有11个，其中包括2个氨基酸类初生代谢物和9个黄酮类次生代谢物。结论 建立的方法能鉴定出中华沙棘、大果沙棘中的差异性成分。分析结果显示，总黄酮在中华沙棘中含量较高，说明中华沙棘在药用功效上可能强于大果沙棘；其次异鼠李素在大果沙棘中含量较高，说明其对临床的质控和应用可能不太适用。]]> 2024/4/3 17:11:28 186true 目的 建立多元统计分析和熵权逼近理想解排序法的绵马贯众炭Dryopteridis Crassirhizomatis Rhizoma Carbonisatum质量评价方法。方法 收集不同产地的16批次样品，以绵马贯众素ABBA为内参物，采用一测多评（QAMS）法同时检测绵马贯众炭中白绵马素AA、二去甲基伪绵马素AA、伪绵马素、白绵马素AP、绵马酸ABA、绵马贯众素ABBA、山柰素、大豆素、去甲氧基荚果蕨素、异槲皮素和圣草次苷含量；采用多元统计分析和熵权逼近理想解排序（entropy weight technique for order preferenceby similarity to ideal solution，EW-TOPSIS）法对绵马贯众炭质量进行评价。结果 外标法方法学验证符合《中国药典》2020年版规定，所建立的相对校正因子耐用性良好，QAMS法可用于绵马贯众炭中11个成分含量的同步检测；多元统计分析结果显示16批样品呈现一定的区域差异，去甲氧基荚果蕨素、绵马贯众素ABBA、伪绵马素和山柰素是引起不同批次绵马贯众炭分组的主要变量因子，EW-TOPSIS法结果显示16批绵马贯众炭质量评价贴近度（J_b）为0.137 1～0.706 7，S12～S16的排序位于前5位，表明吉林产地所得绵马贯众炭整体质量较好。结论 所建立的集HPLC-QAMS、多元统计分析及EW-TOPSIS法于一身的综合质量评价方法，省时便捷，为绵马贯众炭的品质评价和质量控制提供参考。]]> 2024/4/3 17:11:28 185true 目的 建立鸡血藤Spatholobus suberectus HPLC指纹图谱，研究鸡血藤指纹图谱与抗肿瘤活性之间的谱效关系。方法 采用HPLC法建立鸡血藤指纹图谱；以人肝癌HepG2细胞为供试细胞，采用MTT法测定鸡血藤抗肿瘤活性，运用灰色关联度和偏最小二乘法分析鸡血藤指纹图谱与抗肿瘤作用的谱效关系。结果 构建鸡血藤的HPLC图谱，标出了14个共有峰，并指认了其中6个共有峰，其中2号峰儿茶素、3号峰葛根素、9号峰大豆苷元偏最小二乘标准方程回归系数为正值，与抗肿瘤活性呈正相关，且VIP值＞1.0；同时，通过活性成分验证结果显示儿茶素、葛根素、大豆苷元均具可抑制HepG2细胞生长，且存在浓度相关性，可认为是鸡血藤抗HepG2细胞的物质基础。结论 通过鸡血藤HPLC指纹图谱与抗肿瘤活性之间的相关性分析，为挖掘鸡血藤的质量标志物以及药材质量控制提供参考。]]> 2024/4/3 17:11:29 184true 目的 克隆西伯利亚白刺Nitraria sibirica维生素C合成过程中L-半乳糖-1-磷酸磷酸酶（L-galactose-1-phosphate phosphatase，GPP）编码基因。方法 利用生物信息学方法对西伯利亚白刺三代转录组数据进行分析，共鉴定出2个GPP基因，并从西伯利亚白刺中成功克隆得到2条NsGPP基因序列，进一步利用生物信息学方法对其理化性质、蛋白结构、保守序列以及系统进化等进行分析，并结合RNA-seq数据分析其在盐胁迫下的表达模式，利用qRT-PCR实验检测其在不同组织中的表达水平。结果 从西伯利亚白刺中成功鉴定克隆出2个NsGPP基因，2个NsGPP基因所编码蛋白均含有保守的FBPase/IMPase/glpX-like（FIG）结构域，且与其他植物GPP蛋白具有较高的相似性。利用多个物种的GPP蛋白序列构建系统进化树，结果显示西伯利亚白刺与灌木或半木质化草本植物亲缘关系更近。Motif分析发现NsGPP蛋白与拟南芥等GPP蛋白较为相似，但也存在差异，并且2个NsGPP蛋白之间也存在差异。此外，NsGPP1与NsGPP2的蛋白三维结构之间也存在微小差别。RNA-seq分析表明，不同浓度NaCl处理下，NsGPP1的表达逐步升高的趋势，而NsGPP2的表达量则较低，且在盐胁迫后其表达水平逐渐降低。qRT-PCR实验结果显示，白刺GPP基因的表达存在组织表达特异性，且在同一组织中NsGPP1的表达水平显著高于NsGPP2。结论 从西伯利亚白刺中成功克隆到2个NsGPP基因，其编码蛋白均含有保守的FIG结构域，且与拟南芥等草本植物的GPP蛋白更为相似。NsGPP基因在不同组织中表达水平具有显著差异，其中NsGPP1可能参与西伯利亚白刺维生素C生物合成并参与白刺抵抗盐胁迫。为进一步解析白刺维生素C生物合成以及耐盐分子机制提供了理论依据。]]> 2024/3/20 19:06:11 183true 目的 利用COI序列对中药材蝉蜕Cicadae Periostracum及其混淆品进行DNA条形码鉴定研究，为蝉蜕药材的快速准确鉴定提供新的技术手段。方法 收集全国市售蝉蜕药材、基地自采蝉蜕及其混淆品总45份样本，同时采集江苏徐州黑蚱养殖基地不同树种中蝉卵样品5份作为对照。提取DNA，进行PCR扩增及双向测序，测序结果采用DNAMAN和SnapGene进行拼接校对，运用MEGA11.0进行比对分析，计算种内及种间Kimura 2-Parameter（K2P）遗传距离并构建邻接法（neighbor-joining，NJ）系统发育树。结果 黑蚱种内遗传距离远小于种间最小遗传距离，NJ树结果显示，黑蚱蝉蜕样品全部聚集为独立的一支，支持率为99%。混淆品样品分别聚集为单独的一支，支持率均大于90%，表明基于COI序列的DNA条形码技术可以有效鉴别蝉蜕药材真伪。结论 应用COI序列作为DNA条形码能够准确有效地鉴别蝉蜕及其混淆品。]]> 2024/3/20 19:06:11 182true 目的 对败酱草Herba Patriniae及其市场常见混伪品的显微鉴别特征和HPLC指纹图谱进行研究，明确不同品种的败酱草及其混伪品间的差异，为败酱草的准确鉴定提供技术保障。方法 收集败酱草正品药材黄花败酱和白花败酱，市场常见败酱草混用品异叶败酱、菥蓂和苣荬菜，采用显微鉴别方法对5种药材粉末的显微特征进行研究；优化败酱草总皂苷的提取工艺，比较不同品种的总皂苷含量；建立败酱草及其混伪品的HPLC指纹图谱，基于指纹图谱相似度评价、聚类分析和主成分分析，对败酱草及其混伪品进行鉴别和药材质量的综合评价。结果 败酱草及其混伪品药材粉末的显微特征存在显著差异；优化了败酱草总皂苷的提取工艺，结果表明，败酱草及其混伪品总皂苷含量存在差异；建立了败酱草及其混伪品共26批的HPLC指纹图谱，共标定了11个共有峰，明确了败酱草及其混伪品指纹图谱的差异，通过相似度分析、聚类分析和主成分分析，可将败酱草及其混伪品进行准确区分；综合评价分析结果表明，败酱草及其混伪品的得分差异较大，其中正品白花败酱和黄花败酱的得分最高。结论 获得了败酱草及其市场常见混伪品在粉末的显微特征和HPLC指纹图谱的差异，为败酱草的准确鉴别和临床用药安全提供了技术支撑。]]> 2024/3/20 19:06:11 181true 目的 分析不同产地板蓝根Isatidis Radix主要活性成分与其根际土壤理化性质的相关性，探究土壤理化性质对板蓝根质量的影响。方法 采用HPLC建立板蓝根的指纹图谱，测定板蓝根中胞苷、尿苷、腺苷、鸟苷和(R, S)-告依春5个指标成分的含量；应用Origin软件对板蓝根主要指标成分与其根际土壤理化性质进行相关性分析。结果 建立了16批板蓝根的HPLC指纹图谱，指认了5个成分，指纹图谱相似度为0.858～0.998，具有较好的相似性；含量测定结果表明，不同产地板蓝根药材中5个指标成分含量存在较大差异；板蓝根主要活性成分胞苷含量与土壤有效磷含量呈显著正相关（P＜0.05），尿苷含量与pH呈显著负相关（P＜0.05），腺苷含量与含水量和速效钾含量呈显著正相关（P＜0.05）。结论 板蓝根主要活性成分含量与其根际土壤理化性质具有一定的相关性，土壤pH、含水量、有效磷、速效钾是影响板蓝根药材质量的主控因子。为进一步探讨板蓝根适宜的土壤环境和提升其质量标准提供一定依据，为板蓝根药材的标准化种植与质量控制提供参考。]]> 2024/3/20 19:06:11 180true 目的 比较河南、河北、山东产地金银花挥发性成分、气味和味道的差异，为鉴别不同产地金银花提供参考。方法 基于顶空-气相色谱-质谱法（head space-gas chromatography-mass spectrometry，HS-GC-MS）及电子鼻和电子舌2种智能感官技术对不同产地金银花药材进行测定。以变量投影重要性（variable importance projection，VIP）＞1、P＜0.05为标准筛选出每个产地间的差异挥发性成分。对电子鼻与HS-GC-MS结果进行pearson相关分析，使用SPSS25软件建立不同产地金银花味道判别模型。结果 经HS-GC-MS分析从金银花中共鉴定出73个挥发性成分。筛选出河南与河北、河南与山东、河北与山东样品间差异挥发性成分分别为15、11、13个，其中己醛和丁香醛为3个产地的共有差异性挥发成分。电子鼻和电子舌均能较好区分不同产地的金银花样品。通过pearson相关分析确定了11种引起金银花气味差异的挥发性成分。另外，建立的味道判别函数模型可对不同产地金银花进行准确判别。结论 HS-GC-MS、电子鼻和电子舌技术结合多元统计分析可较好的区分不同产地的金银花，并阐明其挥发性成分、气味与味道的差异，对金银花的产地鉴别和质量评价具有一定指导意义。]]> 2024/3/20 19:06:11 179true 目的 对金银花Lonicera japonica TCP（LjTCP）基因家族进行鉴定分析，以期为进一步研究LjTCPs的功能机制奠定基础。方法 以金银花基因组数据为基础，通过生物信息学系统分析TCP基因家族在染色体上的分布、系统进化、基因结构、启动子元件及其表达模式。结果 共鉴定出17个LjTCPs，其中16个LjTCPs分布在9条染色体上，LjTCP17未定位到染色体上，基于系统进化树和多重序列比对，LjTCP基因家族可以分为PCF、CIN和CYC/TB1 3个亚家族，分别包含9、6、2个LjTCPs。基因组内共线性分析表明，全基因组复制和片段性复制在LjTCP基因家族进化中发挥了重要作用。LjTCP基因家族启动子包含许多与植物生长发育、激素响应，以及非生物和生物胁迫相关的调控元件。表达模式分析表明，LjTCP基因在金银花花发育初期表达量较高，随着发育进程表达量呈现下降趋势，并且LjTCP05、LjTCP13、LjTCP14、LjTCP16和LjTCP17基因在花青素含量不同的品种中表达量存在差异。对6个具有低温响应元件的LjTCPs在冷胁迫下的基因表达研究表明，大部分基因在冷处理后基因表达呈现上升趋势。结论 金银花TCP基因家族包含17个成员，各成员的分子特征和表达模式存在差异。]]> 2024/3/1 0:00:00 178true 目的 克隆三叶崖爬藤Tetrastigma hemsleyanum查耳酮异构酶（chalcone isomerase，CHI）基因，探究CHI基因对三叶崖爬藤黄酮合成途径的调控作用。方法 分析三叶崖爬藤转录组，获得三叶崖爬藤CHI基因序列，并进行生物信息学分析。采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）测定三叶崖爬藤根、茎、块茎、老叶、幼叶及吲哚-3-乙酸（3-indoleacetic acid，IAA）、茉莉酸甲酯（methyl jasmonate，MeJA）、脱落酸（abscisic acid，ABA）、水杨酸（salicylic acid，SA）和酵母提取物（yeast extract，YE）等诱导条件下CHI基因的表达量，利用分光光度法测定黄酮含量和CHI酶活性变化，并对其进行相关性分析。结果 转录组数据分析结果表明，三叶崖爬藤CHI基因全长为1 096 bp（GenBank序号：OQ588006），含有1个长为714 bp的开放阅读框，编码237个氨基酸。三叶崖爬藤CHI蛋白分子式为C₁₁₄₈H₁₈₁₉N₂₈₅O₃₄₈S₅，等电点（PI）为5.28，相对分子质量为25 340，编码的氨基酸全都在膜外，不具跨膜结构，也不存在信号肽。三维空间结构分析表明，三叶崖爬藤CHI蛋白呈明显的倒置三明治状折叠结构，属于Chalcone-3超基因家族。进化树分析结果表明，三叶崖爬藤CHI蛋白序列与葡萄科植物亲缘关系最近。qRT-PCR结果表明，三叶崖爬藤CHI基因在三叶崖爬藤根、茎、块茎、老叶和幼叶等不同组织中均表达。诱导分析结果表明，5种外源诱导物质均提高了三叶崖爬藤黄酮含量，ABA诱导后CHI基因表达水平在72 h达到最高，其余诱导处理CHI基因表达量均在96 h达到最高，CHI酶活性均在96 h达到最高。相关性分析结果表明，三叶崖爬藤黄酮含量与CHI基因表达量不存在显著相关性，与CHI酶活性存在极显著正相关（R²＝0.453）。结论 成功克隆了三叶崖爬藤CHI基因，该基因在三叶崖爬藤各组织中均表达。IAA、MeJA、ABA、SA和YE均促进CHI基因表达及酶活性的上升，在转录和翻译水平上调控三叶崖爬藤黄酮合成。]]> 2024/3/1 0:00:00 177true 目的 基于辣木Moringa oleifera叶的特征图谱并结合网络药理学，筛选辣木叶的质量标志物（quality markers，Q-Marker），建立其定量分析方法，为辣木叶的质量评价提供科学依据。方法 采用HPLC法建立辣木叶的特征图谱，条件如下：Phenomenex Luna C₁₈(2) 100A色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 µm），流动相乙腈（A）-0.5%甲酸水溶液（B）梯度洗脱，检测波长254 nm，体积流量0.8 mL/min，柱温35 ℃，进样量5 µL。应用化学计量学方法筛选不同产地的辣木叶差异标志物，基于网络药理学获取辣木叶特征成分的关键靶点及关键通路，绘制出“特征成分-关键靶点-关键通路”网络，以预测辣木叶的调血脂Q-Marker。再以15批辣木叶药材为研究对象，对质量标志物进行含量测定。以五原则为核心确定出最终的Q-Marker。结果 建立了15批辣木叶药材的特征图谱，结合高效液相色谱-四级杆飞行时间串联质谱法（high performance liquid chromatography-quadrupole time-of-flight tandem mass spectrometry，HPLC-Q-TOF-MS/MS）确认了8个共有峰，通过对照品指认出其中6个色谱峰，分别为新绿原酸、L-色氨酸、隐绿原酸、维采宁-2、异槲皮素、紫云英苷；经化学计量学分析，初步确认新绿原酸、L-色氨酸、隐绿原酸、异槲皮素、维采宁-2为不同产地的差异性标志物。经网络药理学确认新绿原酸、L-色氨酸、隐绿原酸、异槲皮素、维采宁-2为活性成分，可作用于白细胞介素6（interleukin-6，IL-6）、白细胞介素-2（interleukin-2，IL-2）、基质金属蛋白酶9（matrix metalloprotein 9，MMP9）等5个核心靶点，影响3条关键通路[细胞因子-细胞因子受体相互作用、产生免疫球蛋白A（IgA）的肠道免疫网络、磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B（phosphoinositide 3 kinase-protein kinase B，PI3K-Akt）信号通路]发挥调血脂作用。结合“五原则”初步预测新绿原酸、L-色氨酸、隐绿原酸、异槲皮素、维采宁-2为辣木叶调血脂的潜在的Q-Marker，质量分数分别为5.81、1.91、2.23、6.59、0.94 mg/g。结论 建立的质量评价方法准确可靠，在此基础上结合网络药理学所筛选出的质量标志物可为辣木叶的质量控制提供参考，为阐明其药效物质基础的作用机制奠定基础。]]> 2024/3/1 0:00:00 176true 目的 建立不同产地抹茶的HPLC指纹图谱及多成分含量测定，结合化学模式识别法评价不同产地抹茶的质量，为其进一步研究和开发提供依据。方法 Agilent Eclipse Plus C₁₈色谱柱，流动相为乙腈（A）-0.1%磷酸（B）进行梯度洗脱，体积流量为1.0 mL/min，检测波长278 nm，柱温35 ℃，进样量10 μL。采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统A版》（国家药典委员会2004版）软件建立27批不同产地抹茶的HPLC指纹图谱并分析相似度。使用IBM SPSS statistics 20和Origin 2023b软件进行聚类分析、主成分分析和偏最小二乘法-判别分析（partial least squares-discriminant analysis，PLS-DA）。通过对照品对比指认化学成分并进行定量测定。结果 27批抹茶HPLC指纹图谱共匹配出23个共有峰，分别指认出，峰4是没食子酸，峰6是表没食子儿茶素（epigallocatechin，EGC），峰8是儿茶素，峰9是咖啡碱，峰12是表儿茶素，峰13是表没食子儿茶素没食子酸酯（epigallocatechin-3-gallate，EGCG），峰14是没食子儿茶素没食子酸酯（gallocatechin gallate，GCG），峰16是芦丁，峰17是表儿茶素没食子酸酯（epicatechin gallate，ECG），峰21是槲皮素，峰22是山柰酚，指纹图谱相似度范围为0.983～1.000。聚类分析将27批抹茶分为4类。主成分分析得出江口和瓮安产地的抹茶质量较好；经PLS-DA分析筛选出了咖啡碱、EGCG、儿茶素、山柰酚、GCG、没食子酸等8个差异成分。样品中没食子酸、EGC、儿茶素、咖啡碱、表儿茶素、EGCG、GCG、芦丁、ECG、槲皮素、山柰酚11种成分含量分别为0.10～0.85、8.27～4.36、4.21～3.84、42.23～72.37、10.41～16.49、48.52～72.89、0.12～0.73、0.53～1.76、21.43～28.60、0.01～0.04、0.03～0.38 mg/g。结论 建立的抹茶HPLC指纹图谱操作简便、结果可靠，咖啡碱、EGCG、儿茶素、山柰酚、GCG、没食子酸可以作为抹茶质量评价的指标性成分。]]> 2024/3/1 0:00:00 175true 目的 建立曲花紫堇Corydalis curviflora的HPLC指纹图谱，并通过所建立的指纹图谱方法对紫堇属其他14种药材进行对比研究。方法 HPLC-DAD指纹图谱条件：Agilent ZORBAX Extend C₁₈（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相为甲醇-0.2%磷酸水溶液，梯度洗脱；体积流量1.0 mL/min；检测波长289 nm；柱温30 ℃。结合聚类分析（combine cluster analysis，HCA）、主成分分析（principal component analysis，PCA）及正交偏最小二乘法-判别分析（orthogonal partial least square discriminant analysis，OPLS-DA）区分与其极易混淆的暗绿紫堇。结果 首次建立了曲花紫堇HPLC指纹图谱，相似度为0.853～0.996，标定18个共有峰，通过对照品比对指认出新绿原酸、绿原酸、原阿片碱、紫堇灵、乙酰紫堇灵、芦丁、紫云英苷、烟花苷、槲皮素、山柰酚10个共有峰；14种同属药材与曲花紫堇对照指纹图谱相似度在0.078～0.686。通过化学模式识别可区分曲花紫堇和暗绿紫堇，二者有6个差异性标志物。结论 建立的指纹图谱方法合理、准确，结合化学计量学方法，能有效地鉴别曲花紫堇及同属药材，寻找不同紫堇质量差异成分，为紫堇属不同药材的质量控制和品质评价提供科学依据和参考。]]> 2024/3/1 0:00:00 174true 目的 以忍冬Lonicera japonica八氢番茄红素脱氢酶（phytoene desaturase，PDS）基因为标记基因，利用ZMBJ-CMV载体建立基于病毒诱导的忍冬基因沉默体系。方法 以忍冬为材料，通过选取同源性较高的片段设计PDS基因的特异性引物，克隆出片段长度为135 bp的序列作为目的基因片段，经双酶切后与黄瓜花叶病毒载体连接构建VIGS重组载体，转化根癌农杆菌后，侵染忍冬幼苗。此外，还对农杆菌吸光度（A）值和侵染方法对PDS基因沉默效率的影响进行了比较。结果 被侵染植株叶片PDS基因表达水平显著降低，叶绿素和类胡萝卜素含量显著下降，叶片出现白化表型。结论 建立了以ZMBJ-CMV载体诱导的忍冬基因沉默体系，农杆菌A值为0.8、注射后再进行真空浸润，能够提高忍冬目标基因的沉默效率，为开展忍冬关键基因的功能研究提供了技术支撑。]]> 2024/2/21 0:00:00 173true 目的 探究枸杞密码子的使用模式及影响因素。方法 基于中国枸杞Lycium chinense、黄果枸杞L. barbarum和白果枸杞L. ruthenicum的叶绿体基因组，利用CodonW 1.4.2软件、Python软件和Excel软件等分析枸杞密码子使用偏性。结果 3个枸杞叶绿体基因组具有相似的密码子使用模式，密码子第3位碱基平均GC含量为25.68%～25.77%；3个枸杞的ENC值均在35以上，表明枸杞叶绿体基因组密码子偏性较弱。ENC-plot、PR2-plot和中性分析结果显示枸杞叶绿体基因组密码子偏性主要受自然选择影响。基于相对同义密码子分析，枸杞植物中共有最优密码子13个。结论 枸杞叶绿体基因组密码子第3位碱基主要以A/T结尾，且密码子偏性主要受自然选择的影响。通过对枸杞植物的聚类分析，揭示了枸杞植物的遗传关系以及枸杞植物密码子使用模式的影响因素，为后续探究枸杞植物的系统发育提供参考。]]> 2024/2/21 0:00:00 172true 目的 建立刺五加Acanthopanax senticosus HPLC指纹图谱及原儿茶酸、松柏苷、紫丁香苷、绿原酸、刺五加苷B1、刺五加苷E、丁香树脂酚7种成分含测定方法。方法 采用Diamonsil 5 μm C₁₈（2）色谱柱（4.6 mm×250 mm，5 μm），乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相，梯度洗脱；检测波长210 nm，柱温30 ℃，体积流量0.8 mL/min，进样量10 μL。通过“中国色谱指纹图谱相似度评价系统”（2012版），建立了刺五加HPLC指纹图谱，同时测定了7种成分的含量。结合主成分分析、正交偏最小二乘法判别分析和皮尔逊相关性分析对刺五加进行了质量评价。结果 建立了刺五加HPLC指纹图谱，共确定了18个共有色谱峰；原儿茶酸、松柏苷、紫丁香苷、绿原酸、刺五加苷B1、刺五加苷E以及丁香树脂酚线性关系良好，r²均大于等于0.999 1，平均回收率分别为92.51%、97.63%、95.11%、101.08%、105.29%、98.92%、85.44%、94.89%。主成分分析提取了2个主成分，其方差累积为66.920%，表明这2个主成分可包含原有数据的大部分信息；正交偏最小二乘法判别分析筛选出刺五加样品中2个差异性成分（紫丁香苷、刺五加苷B1）；皮尔逊相关性分析显示紫丁香苷、绿原酸和刺五加苷B1与其他化学成分的相关性最强。结论 建立的刺五加HPLC指纹图谱及多成分含量测定方法简单、准确、重复性好，可用于刺五加的质量评价，为其质量控制提供依据。]]> 2024/2/21 0:00:00 171true 目的 建立多组分定量联合化学计量学及熵权TOPSIS分析对不同产地所得青钱柳Cyclocarya paliurus质量进行评价的方法，为青钱柳药材的品质评价和质量控制提供参考。方法 取不同产地所得18批青钱柳为检测样品，以熊果酸为内参物，采用一测多评（quantitative analysis of multi-components by single-marker，QAMS）法同时测定青钱柳中14个成分的含量，运用化学计量学和熵权TOPSIS分析法对不同产地青钱柳进行比较分析和综合评价。结果 含量测定方法学考察结果符合中国药典规定要求。以熊果酸为内参物的相对校正因子稳定性、耐用性良好（RSD均小于2.0%），外标法实测值与QAMS法计算结果没有显著差异。化学计量学方法显示18批青钱柳可聚为3类，呈现一定的区域差异；槲皮素-3-O-葡萄糖醛酸苷、金丝桃苷、熊果酸、阿福豆苷和异槲皮苷是影响青钱柳产品质量的主要成分；EW-TOPSIS法分析结果显示贵州和四川地区所得青钱柳质量最优，其次为湖南、江西和安徽。结论 所建方法快速灵敏、准确可靠，可用于青钱柳内在质量的综合质量评价。]]> 2024/2/21 0:00:00 170true 目的 无歧视分析白术药材的整体化学成分，探究不同产地白术药材在化学成分上的差异。方法 采用超高效液相色谱-四极杆飞行时间串联质谱（UPLC-Q-TOF-MS^E）对不同产地白术药材进行化学成分分析。应用主成分分析（principal component analysis，PCA）、正交偏最小二乘法-判别分析（orthogonal partial least squares discriminant analysis，OPLS-DA）对河北、安徽、浙江3个产区白术药材进行多元统计分析并结合方差分析筛选不同产地白术药材主要的差异化学成分。结果 共鉴定出53个化学成分，包括21个萜类、11个有机酸类、3个氨基酸类、3个糖苷类以及15个其他类成分。表征出21个差异化学成分，包括3个特有成分及18个共有差异成分，其中河北安国白术的特有成分为9,10-环氧-12(Z)-十八碳烯酸，且腺苷、6,9-二羟基-3,3a-二氢白术内酯III、furan sesquiterpene、白术内酯I、白术内酯II、双白术内酯的含量最高。安徽亳州白术的特有成分为L-异亮氨酸，且新绿原酸、7-羟基香豆素、绿原酸、咖啡酸的含量最高。浙江磐安白术的特有成分为白术内酰胺，且尿苷、L-缬氨酸、8,9-epoxy atracolactone、4,6-二羟基-3,3a-二氢白术内酯III、白术内酯III、芹子二烯酮、3β-乙酰氧基苍术酮、棕榈酸含量最高。结论 不同产地白术化学成分差异明显，各产地的特有成分可作为产地区分的依据，21个差异化学成分可为不同产地白术质量评价提供依据，同时也为白术的开发利用提供了参考。]]> 2024/2/21 0:00:00 169true 目的 旨在克隆获得远志Polygala tenuifolia 细胞色素P450（cytochrome P450，CYP450）基因CYP72A546的基因开放阅读框（open reading frame，ORF），并对其理化特性、系统进化关系、组织表达、激素与非生物胁迫下的表达等展开分析。方法 基于远志全长转录组文库筛选并克隆远志细胞色素P450家族基因PtCYP72A546，通过生物信息学在线软件分析其编码的氨基酸序列，预测蛋白理化性质、结构域等分子特征；利用MEGA11分析进化关系，并采用实时荧光定量PCR（qPCR）方法检测不同组织、激素及非生物胁迫的相对表达量。结果 从远志中成功克隆得到远志细胞色素P450家族基因PtCYP72A546，其ORF序列全长共计1 560 bp，编码519个氨基酸，相对分子质量为59 770，系疏水性稳定蛋白，含有1个保守结构域，不具有跨膜结构，二级结构主要为α-螺旋和无规卷曲，亚细胞定位分析表明PtCYP72A546-GFP融合蛋白定位于内质网。qPCR结果显示，远志根中CYP72A546表达量显著高于茎和叶片；200 μmol/L脱落酸（abscisic acid，ABA）和200 μmol/L壳聚糖（chitosan，CHT）处理下，CYP72A546均于12 h达峰值，分别为空白对照的7.45倍和5.49倍；在非生物（干旱、盐）胁迫处理下，CYP72A546的表达均先受抑制（6 h），再上调后缓慢下降。结论 通过对远志CYP72A546基因的克隆、鉴定与分析，为深入研究其在远志三萜皂苷合成途径的功能奠定基础。]]> 2024/1/27 0:00:00 168true 目的 基于赤霉素（gibberellin A₃，GA₃）处理下的南方红豆杉Taxus chinensis var. mairei转录组数据鉴定和分析SSR位点，开发可用于南方红豆杉种质资源鉴定和遗传多样性分析的SSR标记。方法 使用MISA软件对南方红豆杉转录组数据进行SSR分析，搜索SSR位点。可搜索单核苷酸、二核苷酸、三核苷酸、四核苷酸、五核苷酸和六核苷酸，最小重复数分别设置为10、6、5、5、5、5次。采用Primer 3（2.3.5版，默认参数）进行SSR引物设计。通过毛细管荧光电泳检测，最终选定多态性好，扩增成功率高的SSR引物用于后续数据分析；通过MEGA进行UPGMA聚类分析，构建聚类树。结果 转录组测序共获得202 361条Unigene，采用MISA软件搜索出12 008个SSR位点，分布在10 894条Unigenes上，发生频率为5.38%，平均距离为1/7.64 kb。单核苷酸重复类型最丰富，占总SSR位点的51.74%，其次为三核苷酸（20.92%）和二核苷酸重复类型（20.88%）。A/T、AG/CT是优势重复基序，分别占总SSR重复类型的49.60%和10.93%。随机抽选96对SSR引物，以4个地区12份南方红豆杉种质进行引物有效性和多态性验证，筛选出13对具多态性的SSR引物，多态性引物比率为13.54%。13对引物在东北红豆杉Taxus cuspidata扩增效率高达100%，但在曼地亚红豆杉Taxus × media扩增效率仅为23.08%。聚类分析表明太行山地区南方红豆杉聚为一类，浙江、福建和湖南等南方来源的南方红豆杉聚为一类，后三者彼此之间遗传距离更近。结论 南方红豆杉转录组测序产生的Unigene信息可以用来开发SSR分子标记，开发的13个标记将有助于南方红豆杉物种遗传多样性、分子育种、资源保护等方面的研究。]]> 2024/1/27 0:00:00 167true 目的 建立高效的艾纳香Blumea balsamifera特选种苗克隆技术体系并获得高质量的候选种质。方法 特选了通过初筛的3种L-龙脑不同含量（低、中、高）的种质母株，优化组培培养基配方，再比较母株和克隆苗中L-龙脑的含量。结果 确定了最佳培养基配方，GC-MS分析证实，克隆苗中L-龙脑的含量与母株呈一致趋势。结论 成功地建立了一种保持遗传稳定性的高效组织培养技术。添加适量的胺鲜酯（diethyl aminoethyl hexanoate）可显著提高再生苗的生根效率。研究还表明，所选艾纳香种质（H）中的高L-龙脑含量是由遗传因素决定的，并且高L-龙脑的特性保留在克隆苗的后代中。为艾纳香无性繁殖选育优良种苗提供了宝贵的优质候选种质，具有较好推广前景。]]> 2024/1/27 0:00:00 166true 目的 建立金银花药材超高效液相色谱（UPLC）指纹图谱，并对有效成分新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、马钱苷、当药苷、断氧化马钱子苷、芦丁、木犀草苷、异绿原酸B、异绿原酸A、异绿原酸C的含量进行测定，为不同种质金银花药材的质量评价提供参考。方法 采用超高效液相色谱仪，Thermo Accucore^TM C₁₈色谱柱（100 mm×4.6 mm，2.6 μm），流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液，体积流量为0.3 mL/min，梯度洗脱，分段检测波长324 nm（0～13.5 min）、238 nm（13.5～18 min）、354 nm（18～27 min）、324 nm（27～40 min），柱温30 ℃，进样量2 μL；通过对照品比对，对共有峰进行鉴定，采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012版）》软件构建指纹图谱，进行相似度评价；通过主成分分析（principal component analysis，PCA）、正交偏最小二乘法判别分析（orthogonal partial least-squares discrimination analysis，OPLS-DA）比较不同种质金银花药材的质量差异；并对不同种质金银花药材12种成分的含量进行测定。结果 建立10种不同种质金银花指纹图谱，标定共有峰11个，并指认了9个化学成分，分别为新绿原酸（1号峰）、绿原酸（2号峰）、隐绿原酸（3号峰）、马钱苷（4号峰）、断氧化马钱子苷（5号峰）、木犀草苷（7号峰）、异绿原酸B（8号峰）、异绿原酸A（9号峰）、异绿原酸C（11号峰）；相似度评价结果显示，10种金银花指纹图谱相似度在0.723～0.996，除S23的相似度为0.723以外，其余金银花相似度均大于0.91；运用PCA和OPLS-DA将6批金银花明显区分，OPLS-DA筛选出4个差异性标志物，根据VIP值排序，分别为断氧化马钱子苷＞新绿原酸＞马钱苷＞隐绿原酸；含量测定结果显示，不同种质金银花的各发育期成分含量变化不同。结论 通过金银花UPLC指纹图谱与多成分化学模式识别研究相结合，可有效评价不同种质金银花药材的质量差异性，为不同种质金银花药材的质量控制提供参考。]]> 2024/1/27 0:00:00 165true 目的 建立不同产地甘松Nardostachys jatamansi的HPLC指纹图谱及多成分含量测定方法，并结合化学模式识别法探究不同产地甘松化学成分差异，评价不同产地、不同批次甘松药材的质量。方法 采用HPLC法建立甘肃、青海、四川16批次甘松的指纹图谱，并对指标成分进行含量测定。进行相似度评价结合聚类分析（cluster analysis，HCA）、主成分分析（principal component analysis，PCA）和正交偏最小二乘法-判别分析（orthogonal partial least squares-discriminant analysis，OPLS-DA）等模式识别技术进行分析。结果 16批次甘松HPLC指纹图谱共匹配到60个共有峰，通过与对照品比对，指认出绿原酸、丁香酸、蒙花苷、甘松新酮、马兜铃酮5个色谱峰，指纹图谱相似度范围为0.943～0.999。16批次甘松样品中绿原酸、丁香酸、蒙花苷、甘松新酮、马兜铃酮含量测定变化范围分别为1.046 5～4.975 3、0.028 4～0.108 7、0.016 7～0.157 4、7.442 1～37.869 1、0.673 7～4.306 5 mg/g，5种成分在不同产地间均具有显著性差异。HCA将16批次甘松分为3类；PCA得不同批次甘松质量差异较大；经OPLS-DA筛选出了绿原酸、丁香酸、甘松新酮、马兜铃酮等31个差异成分。指纹图谱综合评价结果表明S4、S7、S10甘松样本质量较好。结论 确定了绿原酸、丁香酸、甘松新酮、马兜铃酮4种指标成分作为评价甘松质量差异的潜在标志性成分，建立的甘松HPLC指纹图谱及多成分含量测定方法稳定、可靠，可为甘松药材的质量控制、综合评价和临床应用的有效性提供科学依据。]]> 2024/1/27 0:00:00 164true 目的 探讨内转录间隔区（internal transcribed spacer，ITS）和内转录间隔区2（internal transcribed spacer 2，ITS2）片段作为DNA条形码鉴别我国41种药用石斛种类的可行性。方法 通过PCR扩增测序结合GenBank公共序列筛选分别获得我国41种药用石斛的核基因ITS和ITS2序列433条和410条，以Kimura-2-parameter（K2P）模型计算种间和种内遗传距离，以邻接法（neighbor-joining，NJ）构建系统发育树，并对ITS2二级结构进行预测分析。结果 基于遗传距离和NJ树分析结果均显示，ITS和ITS2作为DNA条形码可分别有效区分待测的30和31种药用石斛，物种鉴定效率分别为73.2%和75.6%。联合系统发育树和ITS2序列二级结构分析，药用石斛种类的鉴定效率可提升至87.8%。结论 ITS2作为DNA条形码对药用石斛的物种分辨率优于ITS，物种取样数量可显著影响DNA条形码对药用石斛的物种鉴定效率。结果丰富了我国石斛属植物的DNA条形码数据库，为保障药用石斛种质资源和药用安全提供了科学基础和技术支撑。]]> 2024/1/18 13:25:10 163true 目的 建立14批不同产地远志药材HPLC指纹图谱并利用化学计量学方法对其进行质量评价。采用DNA分子鉴定技术对远志药材进行物种鉴定，为远志药材质量控制提供依据。方法 选用Agilent ZORBAX SB-C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm，0.5 μm），流动相为乙腈-0.05%磷酸溶液，梯度洗脱，体积流量1.0 mL/min，柱温30℃，检测波长316 nm，进样量10 μL，运用软件"中药色谱指纹图谱相似度评价系统"（2012版）对14批远志药材进行相似度评价，确认共有峰，对测定结果进行聚类分析和主成分分析，并结合正交偏最小二乘-判别分析对样品进行模式识别。提取14批远志以及白薇、瓜子金样品的DNA进行序列分析和物种鉴定，并从NCBI数据库下载混淆品的序列，借助MEGA-X计算遗传距离并构建系统发育树。结果 建立了14批远志药材的HPLC指纹图谱，标定了20个共有峰，相似度均大于0.918，化学计量学分析将14批远志药材分为3类。经DNA分子鉴定，14批远志药材均为远志科植物远志Polygala tenuifolia，遗传距离和NJ树分析可将远志与混淆品区分开。结论 所建立的HPLC指纹图谱稳定可靠，可为远志的质量评价提供参考。rbcL序列能区分远志及其混淆品，可用于远志药材的鉴定。]]> 2024/1/18 13:25:10 162true 目的 基于成分分析探讨黑顺片和白附片的差异。方法 基于傅里叶红外光谱（fourier transforms infrared，FTIR）和HPLC，结合化学计量学方法，对黑顺片和白附片的整体化学成分进行研究，并通过独立样本t检验对其有效和毒性成分含量进行比较分析。结果 FTIR结合正交偏最小二乘法判别分析（orthogonal partial least squares-discrimination analysis，OPLS-DA）结果显示，白附片和黑顺片整体化学成分差异明显，饮片类型的差异高于产地差异；HPLC的聚类分析（hierarchical clustering analysis，HCA）、主成分分析（principal component analysis，PCA）、OPLS-DA和相似度分析（similarity analysis，SA）均能将黑顺片、白附片区分为2类，表明2种饮片的成分差异较大；含量测定结果显示，黑顺片的单酯型生物碱量显著高于白附片，具有统计学意义（P<0.01），而双酯型生物碱含量差异不显著，无统计学意义。结论 白附片和黑顺片化学成分差异较大，临床上应区分使用，古代本草"白缓黑急"理论具有一定的合理性。]]> 2024/1/18 13:25:10 161true 目的 基于气相色谱-离子迁移谱（GC-IMS）技术建立白及Bletilla striata饮片及其常见伪品饮片的挥发性有机物指纹图谱，探索用于快速鉴别白及饮片真伪的新方法。方法 以常见伪品玉竹Polygonatum odoratum饮片为例，基于GC-IMS检测白及饮片和玉竹饮片的挥发性有机物，采用直观法和指纹图谱法对比两者挥发性有机物的差异，并对其进行定性分析，再基于指纹图谱筛选的差异峰建立多种辨识模型，以评价GC-IMS技术用于白及饮片快速真伪鉴别的可行性，最后根据正交偏最小二乘判别分析（orthogonal partial leastsquares-discrimination analysis，OPLS-DA）模型的变量重要性投影（variable importance projection，VIP）和P值筛选两者的差异标志物。结果 2种饮片挥发性有机物的峰强度存在一定的差异，结合指纹图谱进一步对比两者的挥发性有机物含量差异发现白及和玉竹各有53和38个特征挥发性有机物；以筛选的差异峰峰体积作为变量建立分类模型，发现OPLS-DA、K最邻近等模型分类预测的准确率均为100%，最后根据VIP值和P值还确定了4-甲基-2-戊酮（二聚体）等21种用于快速鉴别2种饮片的差异标志物，并基于差异标志物提出了一种快速鉴别白及和玉竹的新方法。结论 基于GC-IMS技术可快速检测白及饮片与玉竹饮片的挥发性有机物，通过对比其差异，并借助化学计量学方法可实现白及饮片与玉竹饮片的快速、准确鉴别，为白及饮片的快速质量评价提供了新的思路。]]> 2024/1/18 13:25:10 160true 目的 拟用一测多评法同时测定大花龙胆Gentiana szechenyii中的环烯醚萜类成分和黄酮类成分的含量，并验证该方法在大花龙胆质量评价应用中的可行性和适用性。方法 采用HPLC，以大花龙胆药材中2个典型成分大花龙胆苷A、异荭草苷为内参物，测定其与马钱苷酸、獐牙菜苷、乌奴龙胆苷D、平龙胆酯苷、异金雀花素-2″-O-吡喃葡萄糖苷、异金雀花素的相对校正因子，并用该相对校正因子计算其他几种成分的含量，实现一测多评；采用外标法测定药材中这8种成分的含量，并比较两者差异，以验证一测多评法的准确性和可行性；同时对不同产地药材质量进行评价。结果 以大花龙胆苷A为内参物，马钱苷酸、獐芽菜苷、乌奴龙胆苷D、平龙胆酯苷的相对校正因子分别为1.901、0.994、0.974、1.398；以异荭草苷为内参物，异金雀花素-2″-O-吡喃葡萄糖苷、异金雀花素的相对校正因子分别为1.511、0.969。各相对校正因子重复性良好。一测多评法与外标法对24批大花龙胆中8个成分含量的测定结果无显著差异。结论 所建立的一测多评法结果准确、可靠、重复性好，可为大花龙胆多指标质量评价提供参考。]]> 2024/1/18 13:25:10 159true 目的 测定分别来自四川、浙江、广西3个产地的4种郁金共20批中的12种成分含量，并评价其质量。方法 采用HPLC法测定4种郁金的化学成分谱，并通过主成分分析法（principal component analysis，PCA）和正交偏最小二乘分析法（orthogonal partial least squares-discriminate analysis，OPLS-DA）进行分析，识别4种郁金的特征成分，建立综合评价模式。结果 4种郁金的化学成分谱各具特征，通过PCA得到3个新变量累计方差贡献率达90.476%，在组间差异成份的基础上采用因子得分表达式综合评价郁金质量：黄丝郁金>温郁金>绿丝郁金>桂郁金，并根据郁金主要药理作用相关的化合物评价4种郁金，验证了评价模型的有效性。通过OPLS-DA模型的变量重要性投影（variable importance projection，VIP）值确定莪术二酮、吉马酮为种间差异的关键化合物，并应用模型的回归系数识别了4种郁金各自的特征性成分。结论 建立的郁金多成分测定方法线性关系良好、稳定可靠，通过化学计量学方法可以更全面、准确地评价郁金种间的优劣，识别各自的特征性成分，为郁金资源的合理应用和质量评价提供了理论与方向。]]> 2024/1/18 13:25:10 158true 目的 人参Panax ginseng中构建烟草脆裂病毒（tobacco rattle virus，TRV）介导的基因沉默体系，为人参中基因功能的验证提供新方法。方法 通过序列比对得到人参中八氢番茄红素脱氢酶（phytoene desaturase，PDS）基因的完整序列，利用保守结构域预测工具得到核心片段，将其整合进pTRV2载体内。重组载体转化农杆菌后侵染人参叶片，观察表型并利用qPCR检测沉默效率。结果 通过序列比对得到了2条PDS基因。PgPDS1基因cDNA序列全长1 746 bp，编码581个氨基酸；PgPDS2基因cDNA序列全长1 299 bp，编码432个氨基酸。2个PgPDS蛋白均具有典型的PDS结构域。将重组载体通过农杆菌转化人参叶片，接种3周后叶片表型无变化，5周后叶片尖端以及边缘出现枯萎现象。经qPCR检测，接种后3周和5周人参内源PgPDS基因表达量分别下降至接种前的70.37%和37.35%，表明体系构建成功。结论 人参中成功构建了TRV介导的基因沉默体系。]]> 2024/1/4 0:00:00 157true 目的 通过鉴定曼地亚红豆杉Taxus×media中病程相关基因非表达子1（non-expressor of pathogenesis-related genes 1，NPR1）家族基因，分析并比较其蛋白结构以及基因表达等差异，为利用NPR1基因提高红豆杉紫杉醇含量奠定理论基础。方法 利用本地化blast对曼地亚红豆杉NPR1基因进行鉴定，通过CD-search、MEGA X、DNAMAN以及MEME在线网站等生物信息学技术进行保守结构域、进化树构建、多序列比对以及基序分析，利用blast比对转录组数据，预测所获得的NPR1基因在不同组织以及激素和低温处理后的表达模式。结果 在曼地亚红豆杉中共鉴定出3个NPR1家族基因，命名为TmNPR1～TmNPR3。研究发现，3个NPR1家族成员均含有BTB_POZ保守结构域，并分成2个亚家族。TmNPR1/2与AtNPR3/4聚在一起，TmNPR3与AtNPR5/6亲缘关系较近。TmNPR1/2与AtNPR3/4相似，均含有EAR基序（VDLNETP）。表达模式分析发现3个NPR1基因在不同组织中的表达有所差异，TmNPR1/2在针叶组织中的表达水平最高，TmNPR1响应低温胁迫，且在茉莉酸甲酯和冠菌素激素处理曼地亚红豆杉细胞系中表达量最高。结论 曼地亚红豆杉NPR1家族的3个成员在序列和结构上存在保守性，但也在红豆杉根和针叶的发育以及在低温等不同胁迫和茉莉酸甲酯信号途径中扮演了不同的角色，推测具有不同的功能，为揭示TmNPR1s基因功能和利用分子生物学技术提高红豆杉紫杉醇产量提供理论依据。]]> 2024/1/4 0:00:00 156true 目的 基于ITS1和ITS2序列，对来自四川、青海、甘肃和西藏不同地区的甘松属植物甘松Nardostachys chinensis、匙叶甘松N. jatamansi遗传多样性进行研究及分子鉴定。方法 通过PCR扩增获得甘松ITS1、ITS2序列，采用MEGA软件进行多重序列比对，用DNA EditSeq软件进行剪切、拼接和统计等分析，运用Kimura two-parameter（K2-P）模型进行遗传距离分析，运用DNASTAR软件进行同源性和差异性分析，利用邻接法（neighbor joining，NJ）构建系统发育树，采用DNAsp V5软件进行遗传多样性分析。结果 ITS1序列长度范围为687～689 bp，仅2 bp差异；ITS2序列长度高度保守，均为468 bp。ITS1与ITS2序列G/C含量均达66.00%以上。系统发育分析发现，ITS序列可将甘松属20个样本分为2支，甘松与匙叶甘松各自为一支，但二者亲缘关系很近。遗传多样性分析发现，匙叶甘松综合遗传多样性水平指标大于甘松。结论 据形态学及遗传学分析，甘松属应分为甘松与匙叶甘松2种，且遗传多样性较低，种内遗传变异相对稳定。ITS序列可用于甘松属品种的鉴定。研究结果可以为甘松属植物资源分类、评价、保护与可持续利用提供一定的理论基础。]]> 2024/1/4 0:00:00 155true 目的 挖掘蟾蜍二烯酸内酯（bufadienolides，BDs）生物合成途径的关键基因。方法 使用激光捕获显微切割技术捕获中华大蟾蜍分泌腺[耳后浆液腺（CE）、皮肤浆液腺（CK）和皮肤粘液腺（CN）]为实验材料，在DNBseq测序平台进行转录组测序，并进行生信分析及对转录组结果进行验证。结果 共得到63.01 Gb原始数据和4 550个差异基因，其中CE和CK共有上调差异基因880个，其GO和KEGG富集显示主要在甾类激素生物合成、胆汁酸合成和C₂₁类固醇生物合成等功能；CN上调差异基因主要富集在蛋白质糖基化、细胞黏结、体液免疫应答等功能。在CE、CK组上调的差异基因富集结果中发现有28种与BDs合成相关的物质的代谢、合成及运输等功能，且参与调控的基因有94个。对上述基因进行蛋白互作网络分析（protein-protein interaction network，PPI）分析，结果显示，94个基因中有34个存在互作关系，其中基因AMACR、HSD17B4、SCP2及ACOT8参与调控胆汁酸合成，基因LOC122926609参与调控石胆酸结合，结合文献分析，作者认为初级胆汁酸合成途径是BDs合成的下游途径，石胆酸可能是BDs类成分的重要前体。进一步将存在互作关系的基因关联到表达量矩阵中，结果显示大部分基因在样品CE和CK组中的表达量均大于CN组，且上述5个基因的表达趋势一致（CE、CK＞CN），认为这几个基因是调控BDs的下游合成途径的关键基因。在上述基础上选取9个与BDs合成相关的基因进行qRT-PCR分析，结果与转录组测序基因表达趋势一致，认为该结果具有准确性。结论 完成了中华大蟾蜍分泌腺的转录组研究，推测出BDs下游合成途径的关键基因，为蟾毒内酯类化合物的生物合成途径研究提供了丰富的参考数据，也为深入研究该类化合物生物合成的分子机制奠定了基础。]]> 2024/1/4 0:00:00 154true 目的 通过实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qRT-PCR）筛选当归Angelica sinensis不同材料中稳定表达的内参基因。方法 以不同生长期、春化温度、组织部位以及抽薹/未抽薹植株为材料，对转录组数据库获得的13个候选内参基因和1个已报道的肌动蛋白基因的表达水平进行qRT-PCR检测，利用geNorm、NormFinder、BestKeeper、∆C_t和RefFinder等软件分析表达水平的稳定性。结果 不同材料中14个候选内参基因的稳定性存在显著差异，ACT7、UBC32、UBC26和UBC7分别为不同发育阶段、春化温度、组织部位和抽薹/未抽薹植株中最稳定的内参基因；EEF1G为所有样品中最稳定的内参基因，其次为RPL3和UBC26。结论 为进一步检测当归产量和品质形成过程中的基因表达提供重要参考。]]> 2024/1/4 0:00:00 153true 目的 建立茯神HPLC指纹图谱及10个三萜类成分（16α-羟基松苓新酸、茯苓酸B、去氢土莫酸、茯苓酸A、多孔菌酸C、3-表去氢土莫酸、3-O-乙酰基-16α-羟基松苓新酸、去氢茯苓酸、松苓新酸、去氢齿孔酸）的含量测定方法。方法 通过HPLC建立茯神指纹图谱，对37批茯神10个成分的含量进行测定。并结合相似度评价、聚类分析（cluster analysis，CA）、主成分分析（principal component analysis，PCA）及正交偏最小二乘判别分析（orthogonal partial least squares discriminant analysis，OPLS-DA）对茯神质量进行综合评价。结果 37批茯神HPLC特征图谱共匹配10个共有峰成分，除S23、S37外，其余样品间相似度为0.791～1.000；CA将37批样品分为3类，PCA提取了2个主成分，OPLS-DA确定去氢茯苓酸、16α-羟基松苓新酸、多孔菌酸C、3-表去氢土莫酸4个质量差异标志物。结论 建立的指纹图谱及含量测定方法操作简便、专属性强、重复性好，可为茯神的质量控制提供参考。]]> 2024/1/4 0:00:00 152true 目的 研究紫苏叶Perillae Folium的化学成分，化学模式识别法建立紫苏叶HPLC指纹图谱，并研究其抗流感病毒活性，为其进一步开发利用提供依据。方法 采用超高效液相色谱-三重四级杆飞行时间质谱联用（UPLC-Q-TOF-MS/MS）技术，鉴定紫苏叶的主要化学成分，建立HPLC指纹图谱，匹配共有峰并进行归属，通过对照品比对指认6种化学成分，使用SPSS 22.0、SIMCA 14.1软件进行聚类分析和主成分分析（principal component analysis，PCA），测定其抗流感病毒生物效价，并通过灰色关联分析（gray correlation analysis，GCA）建立其谱效关系。结果 从紫苏叶中鉴定出47个化合物；选取了19个色谱峰作为指纹图谱的共有峰，通过聚类分析可将15批紫苏叶分为2类，PCA与聚类分析结果基本一致；15批不同产地的紫苏叶样品均具有抗流感病毒活性，其生物效价为6.21、5.58、4.19、8.19、6.09、5.82、6.10、5.36、5.54、10.86、4.74、5.78、3.78、7.98、5.65 U/mg。19个共有峰与抗病毒活性存在一定的关联度（0.82～0.97），各共有峰代表的化学成分对其抗病毒活性贡献的大小顺序为峰6（咖啡酸）、19（木犀草素）＞2、8、9、12（阿魏酸）＞4、5、15（芹菜素-7-O-二葡萄糖醛酸苷）＞7、13＞11＞3、10、17＞1、16（野黄芩苷）＞14＞18（迷迭香酸）。结论 构建的紫苏叶抗流感病毒活性生物效价测定方法能关联其临床功效，而UPLC-Q-TOF-MS/MS法能快速鉴定紫苏叶的成分，结合指纹图谱和化学模式识别，发现紫苏叶抗病毒作用为“多成分”共同起效的结果，这将为其质量控制提供科学依据。]]> 2024/1/4 0:00:00 151true 目的 深入研究西红花苷生物合成途径，基于西红花Crocus sativus柱头进行全长转录组测序，挖掘可能参与西红花苷生物合成调控的bZIP转录因子基因。方法 通过PacBio Sequel高通量测序技术对西红花柱头进行全长转录组测序及生物信息学分析，从中鉴定具有完整结构域的全长CsbZIPs，分析其编码蛋白的理化性质、保守基序、系统进化及互作网络，并筛选可能参与西红花苷生物合成调控的候选基因。结果 全长转录组测序共获得37 732条Isoforms序列，平均长度为2 358 bp，N50长度为3 594 bp；CsbZIPs蛋白主要为定位到细胞核中的不稳定亲水蛋白，氨基酸数目57～607 aa，相对分子质量6 696.55～65 982.04，等电点5.01～12.16；64个CsbZIPs蛋白都包含典型碱性区域和亮氨酸拉链区域，根据其与拟南芥AtbZIPs系统发育关系被分为11个亚族，其中A亚族含CsbZIPs最多；基因表达模式分析及转录组与代谢组联合分析结果表明，E、S及A亚族的CsbZIPs基因，尤其是E亚族的CsbZIP44、CsbZIP54、CsbZIP55、CsbZIP62、CsbZIP64等基因可能参与西红花苷生物合成的转录调控。结论 较为全面地揭示了可能参与西红花苷生物合成的bZIP转录因子基因，为深入研究西红花苷生物合成调控提供了丰富的数据基础。]]> 2024/12/20 9:50:11 150true 目的 探知浙贝母Fritillaria thunbergii（“浙贝1号”与“浙贝3号”）2个品种鳞茎形成与发育产生差异的分子机制，对“浙贝1号”与“浙贝3号”进行转录组测序，挖掘导致差异形成的关键基因。方法 以“浙贝1号”和“浙贝3号”成熟期鳞茎为材料，采用Illumina HiSeq高通量测序平台进行转录组测序，组装与注释后进行差异基因的富集并筛选与鳞茎发育相关的基因，对获得的候选基因进行功能验证。结果 转录组测序后共获得35 509个Unigene注释信息，其中差异表达基因共295个。对京都基因和基因组百科全书（Kyoto encyclopedia of genes and genomes，KEGG）、基因本体论（gene ontology，GO）、同源蛋白簇（clusters of orthologous groups of proteins，KOG）富集结果进行筛选，获得了132个与鳞茎形成及发育相关的候选基因，涉及淀粉合成、蛋白质合成、植物激素及信号转导。淀粉合成相关基因与鳞茎膨大相关。淀粉与蛋白质的合成可能是新鳞茎形成的物质基础。与赤霉素（gibberellin，GA）、脱落酸（abscisic acid，ABA）、细胞分裂素（cytokinin，CTK）和吲哚乙酸（indole acetic acid，IAA）相关DEGs可能是浙贝3号鳞茎繁殖系数提高的原因。通过浙贝母鳞茎内源激素与质量的相关性分析，发现“浙贝1号”与“浙贝3号”鳞茎中CTK与质量呈极显著正相关。对筛选出的CKX3和CKX9进行生物信息学分析，结果显示2个基因都符合细胞分裂素脱氢酶的基本特征。在本氏烟草上进行瞬时过表达及亚细胞定位实验，结果显示CKX3和CKX9表达量提高且能降低CTK的含量，GFP信号定位在细胞膜上。结论 通过对“浙贝1号”和“浙贝3号”转录组测序，初步揭示了导致繁殖系数及形态特征产生差异的候选基因，并对CKX3和CKX9进行了功能验证，可为浙贝母鳞茎发育研究提供科学依据。]]> 2024/12/20 9:50:11 149true 目的 对不同产地黄精属种质的遗传多样性和亲缘关系进行评价，为后续开展黄精育种和种质资源研究工作提供理论依据和技术基础。方法 搜集了来自全国各地8个省的23份黄精属资源，利用形态性状、保守DNA衍生多态性（conserved DNA-derived polymorphism，CDDP）、相关序列扩增多态性（sequence-related amplified polymorphism，SRAP）、目标起始密码子多态性（start codon targeted polymorphism，SCoT）分子标记对23份黄精属种质进行遗传多样性和聚类分析。结果 对收集的黄精属种质材料的形态性状进行差异性分析，发现8个形态性状指标变异程度较大，变异系数为24.10%～76.46%，均大于10%，依据黄精属种质叶的着生位置，23份黄精属种质被划分为轮生和互生叶系2大类群。利用正交试验优化后的CDDP、SRAP、SCoT分子标记PCR反应程序，对黄精属进行遗传多样性和聚类分析，发现CDDP标记的聚类结果更符合地理分布情况；SRAP能较好地区分基原植物；SCoT与地理分布呈现一定程度的吻合；而CDDP＋SRAP＋SCoT的结合，不但能较好地区分不同基原植物，而且呈现一定地理分布规律。结论 利用形态学及分子标记对不同产地黄精属种质的遗传多样性和亲缘关系进行评价，为开展黄精育种和种质资源研究工作提供理论依据和技术基础。]]> 2024/12/20 9:50:12 148true 目的 建立不同产地小茴香Foeniculi Fructus的HPLC指纹图谱及多成分含量测定方法，结合化学模式识别法评价不同产地小茴香的质量，为其进一步研究和开发提供依据。方法 采用Zorbax Eclipase XDB-C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相，梯度洗脱；检测波长220 nm，柱温30 ℃，体积流量0.8 mL/min，进样量10 μL。建立小茴香HPLC指纹图谱并分析相似度，同时通过对照品对比指认化学成分并进行定量测定。通过IBM SPSS Statistics 26和SIMCA 14.1软件进行聚类分析（hierarchical clustering analysis，HCA）、主成分分析（principal component analysis，PCA）及正交偏最小二乘法判别分析（orthogonal partial least squares-discriminant analysis，OPLS-DA），对小茴香饮片进行质量评价，筛选差异性标志物。结果 建立了不同产地小茴香HPLC指纹图谱，共标定了20个共有色谱峰，指认出其中5个成分；15批样品相似度均在0.952以上；聚类分析将15批小茴香分为3类；PCA提取了5个主成分，其方差累积贡献率为91.126%；PCA结果显示内蒙古产地的小茴香质量最优；OPLS-DA筛选出小茴香样品中紫丁香苷、槲皮素-3-O-葡萄糖醛酸苷、茴香醛、反式茴香脑4个质量差异标志物，其与芦丁5种成分的质量分数分别为0.605～1.036、0.239～0.861、0.186～0.479、2.870～4.784、0.172～0.724 mg/g。结论 建立的小茴香HPLC指纹图谱及多成分含量测定方法简单、准确、重复性好，可用于小茴香的质量评价，为其质量控制提供依据。]]> 2024/12/20 9:50:12 147true 目的 对高效液相色谱-串联质谱法（HPLC-MS/MS）测定枳壳中禁用农药杀虫脒残留量进行不确定度评估。方法 采用HPLC-MS/MS法对枳壳中杀虫脒残留量进行测定，通过建立数学模型，分析测定过程的主要不确定度来源，对各个分量进行评估。结果 不确定性的主要来源是标准溶液的配制、工作曲线的拟合、重复性及加样回收率引入。当杀虫脒的残留量为0.016 mg/kg时，扩展不确定度为0.002 9 mg/kg（k＝2）。结论 枳壳中禁用农药杀虫脒残留量测定结果准确且重现性好，可用于枳壳中禁用农药多残留的质量控制；建立的不确定度评定法适用于测定中药材及饮片中禁用农药残留量的不确定度分析。]]> 2024/12/20 9:50:12 146true 目的 通过分析八角Illicium verum不同组织部位的基因转录水平差异，挖掘八角果实中木脂素生物合成途径相关酶基因，为八角木脂素生物合成途径关键酶基因研究提供参考。方法 利用PacBio和Illumina测序平台对八角的茎、嫩叶、老叶、花及果实进行全长转录组测序与比较转录组学分析，通过WGCNA分析挖掘具有组织特异表达的木脂素生物合成途径关键酶基因，利用qRT-PCR对候选基因的表达情况进行验证。结果 经过纠错去除冗余后共获得32 996条高质量转录本，平均长度2 033 bp，N₅₀长度2 343 bp，其中31 248条在公共数据库获得注释。共鉴定到39条参与木脂素生物合成的转录本，涉及10个关键酶基因，其中在八角果实中高表达的有14条转录本，涉及6个酶基因。八角果实中与其他组织相比，差异表达的基因富集在苯丙烷代谢途径中。通过WGCNA分析鉴定到15个共表达模块，在果实特异表达模块（MEred）中挖掘到木脂素合成关键酶基因4CL、CCR共3条转录本。候选基因PAL（transcript11647），C4H（transcript26532），4CL（transcript12186），CCR（transcript27851）和CAD（transcript27743）在不同组织中的表达情况与转录组数据一致。结论 为八角分子生药学研究提供了可靠的转录组数据库，也为八角果实中木脂素生物合成途径关键酶基因研究提供了研究基础。]]> 2024/12/5 11:25:45 145true 目的 分析裸花紫珠Callicarpa nudiflora种质资源遗传变异情况，发掘与有效成分含量相关联的分子标记，以期为裸花紫珠新品种选育提供参考。方法 对103份裸花紫珠种质资源有效成分含量进行变异性分析，并利用14对SSR标记对供试品进行遗传结构分析及连锁不平衡分析，在此基础上采用Talssel 2.1软件的一般线性模型（GLM）和混合线性模型（MLM）进行SSR标记与有效成分含量的关联分析。结果 裸花紫珠中7种有效成分含量变异丰富，可作为关联分析的理想材料。群体遗传结构分析结果表明，K＝3时，供试品分为3个亚群，3个亚群的遗传多样性均较为丰富，AMOVA分析显示变异主要存在于个体内（61%）。在91个SSR位点成对组合中，不论共线性组合还是非共线性组合均存在一定程度的连锁不平衡（LD）。D'统计概率（P＜0.01）支持的LD成对位点有21个，占全部位点组合的23.08%。D'值主要集中在0.3～0.5和0.5～0.7，占SSR标记全部对数的84.62%，表明所选种质间基因重组概率与突变概率较低。关联分析结果表明，在GLM模型中，发现有11对标记与7种有效成分含量呈显著相关（P＜0.05）或极显著相关（P＜0.01）。在MLM模型中，6对标记与4种有效成分含量呈显著相关（P＜0.05）或极显著相关（P＜0.01）。在GLM和MLM模型中，均检测到CnH305与连翘酯苷B和木犀草苷相关联（P＜0.05），CnH155与木犀草苷和毛蕊花糖苷相关联（P＜0.01），CnH156、CnH357和CnH205与异毛蕊花糖苷相关联。结论 供试裸花紫珠种质存在丰富的遗传变异，种质间存在一定程度的连锁不平衡，5对SSR标记能够很好的关联到药效成分含量，可以为裸花紫珠分子标记辅助育种提供理论依据。]]> 2024/12/5 11:25:45 144true 目的 以南洋参Polyscias fruticose和线叶南洋参P. filicifolia的悬浮培养细胞为研究对象，研究在细胞培养过程中，丙二酰基人参皂苷（malonyl ginsenoside，M-GS）对细胞生长及皂苷合成的影响，以促进南洋参悬浮培养细胞的皂苷合成和积累。方法 以南洋参和线叶南洋参的细胞系（编号6a和VDK）为试验材料，在悬浮培养的第7天添加M-GS，分析添加M-GS对细胞生长以及细胞中多糖苷E、人参皂苷R0、多糖苷A和齐墩果酸皂苷A含量的影响。结果 M-GS对南洋参和线叶南洋参的生长均具有抑制作用，使其不能长期生存。M-GS可使南洋参6a细胞系的细胞密度以及干质量峰值提前出现，使细胞活力提前开始下降，缩短了细胞的培养周期。而线叶南洋参VDK细胞系的细胞密度、鲜质量以及干质量的峰值延迟出现，延长了细胞的培养周期。M-GS对南洋参6a细胞系的抑制作用比线叶南洋参VDK更强。在培养末期南洋参6a细胞系的细胞密度、活力、鲜质量以及干质量分别降低了25.43%、22.23%、46.56%以及45.56%。M-GS对南洋参和线叶南洋参细胞中皂苷积累的影响不同。对于南洋参6a细胞系，M-GS促进细胞中多糖苷E、多糖苷A、齐墩果酸皂苷A的合成，且对多糖苷E的促进能力最强（提高了79.67%），其次为齐墩果酸皂苷A（提高了70.67%），最后为多糖苷A（提高了19.67%），同时抑制了人参皂苷R0的含量（降低了74.00%）。对于线叶南洋参VDK细胞系，M-GS只促进了细胞中多糖苷A的合成，使其含量增加了63.29%，却抑制了细胞中多糖苷E、多糖苷A、齐墩果酸皂苷A的合成，且对多糖苷A抑制能力最强（降低了63.29%），其次为多糖苷E（减低了27.59%），最后为齐墩果酸皂苷A（减低了8.33%）。结论 添加M-GS可以促进南洋参和线叶南洋参悬浮培养细胞的部分种类皂苷积累，但不宜于细胞长期培养；且M-GS对不同物种细胞系细胞中不同皂苷的影响不同，对南洋参6a细胞系的促进能力高于线叶南洋参VDK细胞系。因此在南洋参和线叶南洋参细胞悬浮培养中可根据培养细胞系和目的产物不同选择使用M-GS以提高目的皂苷产量。]]> 2024/12/5 11:25:45 143true 目的 对不同生长期滨蒿Artemisia scoparia进行质量评价，为确定滨蒿最佳采收期和临床用药选择提供参考。方法 采用超快速液相色谱-三重四级杆飞行时间质谱（Ultra-fast liquid chromatography-quadrupole time-of-flight mass spectrometry，UFLC-Q-TOF-MS/MS），分别在负离子模式和正离子模式下测定，对春季和秋季采集的滨蒿中所含成分进行鉴定并进行成分组成比较分析。采用HPLC-DAD，在2个波长下对5～11月每月采集的滨蒿中的有机酸类成分绿原酸、新绿原酸、隐绿原酸、3,4-二咖啡酰奎宁酸、3,5-二咖啡酰奎宁酸、4,5-二咖啡酰奎宁酸，黄酮类成分金丝桃苷和芹菜素-6,8-C-二葡萄糖苷及香豆素类成分滨蒿内酯进行含量测定并对含量变化进行动态比较分析。结果 春季和秋季采集的滨蒿中共鉴定化学成分122个，包括有机酸类成分48个，黄酮类成分31个，香豆素类成分5个，木脂素类成分3个，简单苯丙素类成分13，色原酮类成分2个，氨基酸类成分2个，对羟基苯乙酮类成分3个及其他类成分15个，其中15个成分采用对照品比对确认；检测到的122个成分中，103个为春季和秋季采集的滨蒿中的共有成分，3个成分仅在春季采集的滨蒿中检测到，而另外16个成分仅在秋季采集的滨蒿中检测到。不同生长期滨蒿中香豆素类成分滨蒿内酯含量变化最大，5～8月低于定量限，9～11月含量先增后降，10月初含量最高；有机酸类成分春季和夏季含量较高，6月初总含量达到峰值；黄酮类成分含量5～9月逐渐增加，10月初达到峰值后又迅速降低。结论 春季和秋季采集的滨蒿中成分组成存在一定差异；不同生长期滨蒿中所含成分含量差异较大，春季和秋季最佳采收期分别为有机酸类成分含量最高的6月初及香豆素类成分和黄酮类成分含量最高的10月初。]]> 2024/12/5 11:25:45 142true 目的 建立鲜地黄Rehmannia glutinosa指纹图谱及多指标定性定量检测方法，为鲜地黄药材的质量评价提供科学依据。方法 采用HPLC-PDA法建立鲜地黄指纹图谱，烘干法测定水分，药材横断面图像面积比值采集测定菊花芯指数；运用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》（2012版）对指纹图谱进行相似度评价，联合SIMCA.14.1软件进行层次聚类分析（hierarchical cluster analysis，HCA）和正交偏最小二乘法-判别分析（orthogonal partial least-squares discriminant analysis，OPLS-DA）筛选鲜地黄栽培品和野生品的差异性指标成分，同时建立其中4种苷类成分的含量测定方法和2种成分的薄层色谱（TLC）法鉴别。结果 鲜地黄栽培品和野生品环烯醚萜苷部位（iridoid glycoside fraction，IGF）和苯乙醇苷部位（Phenylethanol glycoside fraction，PGF）指纹图谱均确定10个共有峰，分别以梓醇和毛蕊花糖苷为参照峰比较各共有峰的相对保留时间和相对峰面积，指纹图谱相似度评价结果均大于0.9。栽培和野生各15批次样品水分和菊花芯指数平均值分别为（75.75±0.04）%、（67.98±0.14）%和（37.87±0.19）%、（30.27±0.13）%。HCA结果显示，栽培品和野生品被分为2类，通过OPLS-DA分析，其中VIP值排名前10的指标成分分别为IGF-1、IGF-3（梓醇）、PGF-4（毛蕊花糖苷）、PGF-1、IGF-6（益母草苷）、IGF-9、IGF-8、PGF-2、IGF-10、IGF-4（地黄苷D），对区分二者的差异性贡献较大；建立了检测梓醇和毛蕊花糖苷的TLC鉴别方法，HPLC-PDA法测定其中4种苷类成分（梓醇、地黄苷D、地黄苷A、益母草苷）的含量，各成分的线性关系良好（r＞0.999 0），精密度、重复性和稳定性良好，回收率98.74%～102.51%，RSD均小于4%。结论 鲜地黄HPLC指纹图谱的构建及化学模式识别可以区分栽培品和野生品；水分和菊花芯指数栽培品大于野生品；建立的TLC鉴别法、HPLC-PDA含量测定法用于鲜地黄药材多种化学成分的定性、定量分析，简便、快速、准确，为完善鲜地黄药材质量评价体系提供参考。]]> 2024/12/5 11:25:45 141true 目的 查耳酮合成酶（chalcone synthase，CHS）是类黄酮物质合成的首个关键酶，在植物类黄酮物质积累及逆境应答过程中起着重要作用。旨在鉴定掌叶覆盆子CHS基因家族成员，明确其在不同组织器官中及果实成熟中的表达模式。方法 通过生物信息学方法鉴定掌叶覆盆子CHS家族成员，分析了它们的理化性质、染色体定位、系统进化树、保守基序、基因结构和顺式作用元件等，同时通过荧光定量PCR检测它们在果实不同发育时期及不同组织中的表达量。结果 掌叶覆盆子有15个CHS家族成员，分为7个亚族，不均匀地分布在4条染色体上。这些RcCHS蛋白的长度蛋白数介于361～541，都定位于细胞质，且存在1对串联复制基因。同一亚族成员基因结构、保守基序和蛋白质二级结构相类似。RcCHS家族基因的启动子区域存在大量生长发育、激素和环境胁迫应答相关的调控元件。RcCHS家族基因在掌叶覆盆子不同组织中均有表达，并具有明显的组织特异性，此外在掌叶覆盆子果实不同成熟阶段和100 μmol/L茉莉酸甲酯（methyl jasmonate，MeJA）处理下的表达量均存在显著差异。发现RcCHS11在果实中高丰度表达，并受到MeJA强烈诱导，与类黄酮物质在掌叶覆盆子果实中的积累规律相一致，推测是类黄酮成分合成途径上的关键酶。结论 在全基因组上鉴别出15个掌叶覆盆子RcCHS家族成员，它们的表达呈现器官特异性，并在果实不同时期呈现差异表达，RcCHS11与果实中类黄酮积累呈现正向响应。]]> 2024/11/21 10:07:20 140true 目的 基于ITS2序列对天冬Asparagus cochinchinensis及其近缘种的样品进行分子鉴定，并通过HPLC特征图谱技术对不同产地天冬样品进行质量评价，为天冬的质量控制提供参考。方法 采用CTAB法提取19批天冬样品的DNA，进行PCR扩增、测序；从GenBank公共网站获取天冬及其近缘种的序列，通过MEGA 6.0软件分析序列特征、计算遗传距离、构建系统发育树；建立天冬HPLC特征图谱，结合相似度评价、聚类分析、主成分分析、正交偏最小二乘判别分析对天冬样品进行质量评价，筛选差异标志物。结果 天冬及其近缘种样品的ITS2序列长度为244～245 bp，GC含量在64.34%～64.75%，变异位点数为12；遗传距离结果表明，天冬种内平均遗传距离小于天冬及其相近基原的种间平均遗传距离；系统发育树聚类分析结果表明，19份样品聚为3类，具有良好的单系性，能较直观地将天冬及其相近基原的样品进行区分；从12批天冬样品的特征图谱中共标定了13个共有峰，指认了2个成分，分别为原薯蓣皂苷、伪原薯蓣皂苷；聚类分析将12批天冬样品分为2类，分类主要与种植、采收加工、经纬度、环境气候等因素有关；主成分分析结果表明，四川、广西产地的天冬质量较优；正交偏最小二乘判别分析筛选出峰1、7、12（原薯蓣皂苷）这3个质量标志差异物。结论 ITS2序列分析可作为区分天冬及其相近基原样品的分子鉴定方法，以及建立的HPLC特征图谱操作简单、重复性好；可为天冬药材的质量评价和控制提供参考。]]> 2024/11/21 10:07:21 139true 目的 找到适宜桃儿七Sinopodophyllum hexandrum幼苗成活和植株生长的育苗基质和种植施肥量，为高效种植和植株生长提供技术支撑。方法 以桃儿七成熟种子和温室植株为材料，分别利用6种育苗基质（S1～S6）和施用4个水平施肥量（F1～F4），测定幼苗成活特性、植株生长特性及主要活性物质含量。结果 不同育苗基质和施肥量对桃儿七幼苗成活和生长及主要活性物质积累具有显著影响。S2育苗基质优于其他处理，幼苗成活率相对于对照增加22.90倍。F1和F2施肥量（2 400和4 200 kg/hm²）优于其他处理，根干质量相对于对照分别增加1.12和1.34倍；F1施肥量较有利于主要活性物质积累，以单株计算，根中鬼臼毒素、4'-去甲基表鬼臼毒素、异槲皮苷、槲皮素、总黄酮类和总酚类化合物含量相对于对照分别增加1.08、1.68、1.28、1.39、1.42和1.47倍。结论 适宜的育苗基质和施肥量可显著促进桃儿七幼苗成活、植株生长及主要活性物质的积累。为后续桃儿七生态种植提供科学依据和参考。]]> 2024/11/21 10:07:21 138true 目的 建立升麻饮片的高效液相色谱（HPLC）指纹图谱和分析其5种成分含量的一测多评（quantitative analysis of multicomponents by single-marker，QAMS）方法，实现对升麻饮片质量的系统评价。方法 采用HPLC法建立升麻饮片指纹图谱，运用相似度评价、聚类分析（cluster analysis，CA）、主成分分析（principal component analysis，PCA）和正交偏最小二乘-判别分析（orthogonal partial least squares discriminant analysis，OPLS-DA）等化学模式识别对指纹图谱进行分析；以异阿魏酸为内参物，建立分析咖啡酸、升麻素苷、阿魏酸、升麻素含量的QAMS法，并与外标法（external standard method，ESM）测定结果进行比较。结果 12批升麻饮片的HPLC指纹图谱中有13个共有峰，指认了该指纹图谱中的5个成分，分别为咖啡酸、升麻素苷、阿魏酸、异阿魏酸、升麻素，12批升麻饮片相似度为0.92～1.00，CA、PCA和OPLS-DA分析表明，供试升麻饮片可分为2类，差异性成分为峰2、3、4、7（阿魏酸）、8（异阿魏酸）、9（升麻素）；建立了分析所指认的5种成分含量的QAMS方法，分析结果与ESM法测定的相应成分含量无显著差异。结论 所建立的HPLC指纹图谱和QAMS法操作简便、高效、经济、可靠，可为升麻饮片及其衍生产品的质量评价提供参考和依据。]]> 2024/11/21 10:07:21 137true 目的 建立白前Cynanchum stauntonii色谱指纹图谱定性、多组分定量与化学计量学的整合分析方法，评价野生与栽培白前的质量差异。方法 采用infinity LabPoroshell 120 Aq-C₁₈（100 mm×4.6 mm，2.7 μm）色谱柱，流动相为乙腈（B）-0.1%磷酸水溶液（A），梯度洗脱，检测波长为260 nm（0～14 min）、274 nm（14～52 min）、210 nm（52～70 min），体积流量为0.5 mL/min，柱温为30 ℃，进样量为7 μL。以对照药材为参照，建立了白前的超高效液相色谱法（UPLC）指纹图谱，结合聚类分析（cluster analysis，CA），主成分分析（principal component analysis，PCA）和正交偏最小二乘法-判别分析（orthogonal partial least squares-discriminant analysis，OPLS-DA）对20批白前进行质量评价，开发并验证了6种指标成分的含量测定分析方法。结果 指纹图谱及含量测定的方法学验证均良好，20批白前与对照药材的指纹图谱相似度均大于0.737，共标定14个共有峰，并指认了对羟基苯甲酸、香草酸、丁香酸、4-羟基苯乙酮、2,4-二羟基苯乙酮、anhydrohirundigenin 3-O-α-L-diginopyranosyl-(1→4)-β-D-cymaropyranosyl-(1→4)-β-D-digitoxopy-ranosyl-(1→4)-β-D-thevetopyranoside（A-O-DCDT）6种指标成分；主成分得分结果与聚类分析结果一致，可将20批白前样品聚为2类，野生白前聚为一类，栽培白前聚为一类，OPLS-DA筛选出引起野生与栽培白前质量差异的5个差异性标志物，分别为色谱峰7、8、11、12、14；同时，多成分定量测定结果表明，野生栽培白前中6个指标成分之间存在明显差异。结论 建立的20批白前UPLC指纹图谱、多指标成分含量测定和化学计量学相结合的质量评价方法，高效、准确、特征性强、重复性和稳定性好，可为白前质量评价体系的完善提供参考。]]> 2024/11/21 10:07:21 136true 目的 生长素应答因子（auxin response factors，ARFs）基因家族参与颠茄Atropa belladonna生长发育的调控，对颠茄ARF基因（AbARF）进行全基因组鉴定及表达特征分析。方法 基于已发布的颠茄全基因组，利用生物信息学方法对AbARF基因家族成员进行鉴定并对其理化性质、染色体分布、系统进化、基因结构、顺式作用元件进行分析，利用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）分析其在不同温度、光质、组织部位的表达特征。结果 共鉴定出41个AbARF基因（AbARF1～AbARF41），分为4个亚家族，编码的氨基酸长度在603～1 116 aa，蛋白质相对分子质量为68 709.35～125 100.60，等电点介于5.27～8.25，亚细胞定位全部定位于为细胞核。基因结构分析发现所有AbARF基因均含有B3保守结构域，顺式元件预测结果表示光响应元件和脱落酸元件在AbARF基因家族启动子区域分布广泛。基因组内共线性分析表明，全基因组复制和片段性复制在AbARF基因家族进化中发挥了重要作用，复制过后经过了强烈的纯化选择。qRT-PCR表达特征分析结果表明，大部分AbARF在低温（18 ℃）胁迫下表达量显著下调，在白光调控下表达量显著高于红光和黄光，多数AbARF基因在叶中表达量普遍高于主根、侧根、茎和花。结论 从全基因组水平对颠茄ARF基因家族进行鉴定和生物信息学分析，为进一步阐明颠茄ARF基因的功能奠定基础。]]> 2024/11/5 13:12:11 135true 目的 发掘生长素信号转导途径中可能参与三岛柴胡Bupleurum. falcatum侧根发育的关键基因。方法 采用Illumina Hiseq2500高通量测序平台对三岛柴胡不同发育阶段的根组织进行转录组测序，筛选差异表达的生长素信号转导基因。通过使用外源生长素（indole-3-acetic acid，IAA）与生长素抑制剂（2,3,5-triiodobenzoic acid，TIBA）处理苗期柴胡，考察生长调节剂对三岛柴胡侧根发育及差异表达基因的影响。结果 在三岛柴胡的苗期根转录组中共鉴定到138个属于生长素信号转导通路中的差异表达基因，其中73个基因在15日龄的三岛柴胡主根（S3）中特异性高表达。相关性分析表明，BfIAA9/14/16、BfARF6/19、BfGH3.6、BfLAX3等31个差异基因表达模式高度相关，可能共同参与了三岛柴胡的侧根发育过程。外源激素诱导结果显示，低浓度的IAA和TIBA处理均可显著增加三岛柴胡侧根数目，并促进BfIAA9/14/16、BfARF19等基因的表达。进一步证实了转录组的筛选结果的准确性，其中BfIAA9/14/16、BfARF19可能是正向调控三岛柴胡侧根发育的关键基因。结论 揭示了三岛柴胡根系在不同发育阶段和组织中生长素信号转导通路基因的显著差异表达模式，其中在S3组织中高表达的基因可能与侧根发育密切相关。]]> 2024/11/5 13:12:11 134true 目的 解析广丰千金薯Dioscorea opposite叶绿体基因组信息序列特征和确定其在薯蓣属的系统位置。方法 利用高通量测序技术对广丰千金薯叶片进行核基因组重测序，并利用生物信息学相关工具对组装得到的叶绿体基因组进行注释、序列特征和系统发育分析。结果 广丰千金薯叶绿体基因组长度为153 293 bp，注释到84个CDS基因、31个tRNA基因和8个rRNA基因。广丰千金薯叶绿体基因组中共检测到45个SSR位点，多为单碱基（A/T）重复类型。广丰千金薯叶绿体基因组共鉴定到61个长重复序列，包括16个正向重复、21个回文重复、14个反向重复、10个互补重复。广丰千金薯叶绿体基因组高变区主要分布在LSC和SSC区域，基因间隔区matK-tnaQ-UUG、atpl-rps2、psbl-trnS、rpl32-ndhF、ndhD-ccsA、trnE-UUC-trnT-GGU、trnS-GCU-trnG-UCC、rps2-rpoC2以及基因ycf1变异率最高。广丰千金薯叶绿体基因组的密码子偏性较弱。广丰千金薯叶绿体基因组密码子偏好以A、U结尾。广丰千金薯叶绿体基因组密码子使用偏性很大程度上受自然选择的影响，而受突变压力的影响小。广丰千金薯叶绿体基因组的最优密码子共16个，即UUA、UCU、GAU、GGA、AAU、CAU、GUA、CAA、GAA、CCU、GUU、AUU、CGA、CUU、UUU、AGU。广丰千金薯与野脚板薯Dioscorea polystachya NC_037716聚为一小支。结论 广丰千金薯与野脚板薯NC_037716亲缘关系较近。首次采用生物信息学分析方法对广丰千金薯叶绿体基因组的序列特征及密码子使用偏好性进行了分析，结果可为薯蓣属植物的遗传多样性分析提供理论依据。]]> 2024/11/5 13:12:12 133true 目的 应用指纹图谱和化学计量学分析方法，比较沪地龙药材基原（通俗环毛蚓Pheretima vulgaris、威廉环毛蚓 P. guillelmi或栉盲环毛蚓P. pectinifera）间质量差异，筛选差异性标志物，为建立沪地龙质量标准提供参考。方法 应用高效液相色谱法建立沪地龙水溶性成分指纹图谱，运用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”（2012版）软件比较相似度；应用聚类分析、正交偏最小二乘判别分析和主成分分析法对3个基原间所测得的6种水溶性成分含量进行比较分析，并依据主成分得分对各批次样本进行综合性评价。结果 相似度评价结果，通俗环毛蚓与威廉环毛蚓的相似度为0.987；栉盲环毛蚓与通俗环毛蚓的相似度为0.697，与威廉环毛蚓的相似度为0.717。聚类分析方法不能区分3个基原。正交偏最小二乘判别分析结果显示，通俗环毛蚓和威廉环毛蚓不能区分，但二者能与栉盲环毛蚓区分，差异性成分为尿苷和鸟苷。主成分分析综合评分共有19批样本大于平均分值，其中栉盲环毛蚓11批、通俗环毛蚓6批、威廉环毛蚓2批；产地为上海市13批，江苏省2批，浙江省1批，安徽省2批。结论 沪地龙3个基原间存在差异，其中通俗环毛蚓与威廉环毛蚓在水溶性成分种类和含量方面相似度高，但二者均与栉盲环毛蚓存在差异。]]> 2024/11/5 13:12:12 132true 目的 建立一种能够对梅花鹿茸饮片质量进行综合评价的方法，为梅花鹿茸饮片质量标准的完善及优质梅花鹿茸饮片的筛选提供依据。方法 收集30批次的梅花鹿茸药材，采用柱前（PITC）衍生法检测梅花鹿茸饮片中氨基酸含量，并利用主成分分析（principal components analysis，PCA）和正交偏最小二乘判别分析（orthogonal partial least squares-discriminant analysis，OPLS-DA）等化学计量学方法对不同产地梅花鹿茸饮片的氨基酸含量进行分析；再将浸出物含量、总氮含量和氨基酸含量结果结合AHP-熵权法建立梅花鹿茸饮片综合质量评价方法。结果 建立了梅花鹿茸饮片氨基酸含量HPLC法测定方。PCA分析结果显示不同产地梅花鹿茸饮片的氨基酸含量差异显著；OPLS-DA分析结果显示甘氨酸、羟脯氨酸和脯氨酸是引起梅花鹿茸饮片质量差异的差异标志物；通过AHP-熵权法分析发现：3个产地梅花鹿茸饮片的综合评分中，吉林敦化产区综合总分为7.410，辽宁西丰产区综合总分为3.974，吉林长春产区综合总分为3.595，可知吉林敦化的梅花鹿茸饮片的质量最佳。结论 所建立的方法操作便捷、结果准确；多指标含量测定联合AHP-熵权法全面客观，可用于不同产地梅花鹿茸饮片综合品质的评价，为后续梅花鹿茸定量质量控制研究提供参考。]]> 2024/11/5 13:12:12 131true 2024/11/5 13:12:12 130true 目的 研究鉴定巴戟天Morinda officinalis AP2/ERF转录因子家族，为巴戟天次生代谢调控网络提供理论基础。方法 通过对巴戟天AP2/ERF转录因子家族的探索，利用TBtools、MEGA等生物信息分析软件对巴戟天基因组基因结构注释信息等文件进行基本分析、进化分析，得出巴戟天中AP2/ERF家族的基因，以及这些基因中内含子排列情况、共线性分析的结果，并且通过进化树的构建可视化AP2/ERF基因家族的分类。结果 初步筛选出可能调节巴戟天生长发育和代谢的转录因子。在巴戟天基因组中，鉴定到有131条基因属于AP2/ERF基因家族成员，通过基因结构注释文件，得到MoAP2/ERF在染色体定位分析、系统发育进化树、内含子外显子模式、motif、保守结构域分析和共线性分析等，最终根据MoAP2/ERF的表达量确认13条在巴戟天根部高表达的转录因子。结论 通过生物信息分析筛选出在根部特异性表达的基因13条巴戟天AP2/ERF转录因子，为增加巴戟天主要有效成分产率奠定理论基础，为后续研究提供信息。]]> 2024/10/24 13:29:03 129true 目的 通过lncRNA测序鉴定三叶青Tetrastigma hemsleyanum烟草花叶病毒蛋白基因。方法 利用大肠杆菌重组技术表达三叶青烟草花叶病毒蛋白，并采用生物信息学方法进行序列分析。结果 三叶青烟草花叶病毒蛋白基因包括复制酶、RNA聚合酶、运动蛋白、带电蛋白和外壳蛋白等基因；三叶青烟草花叶病毒RNA聚合酶、运动蛋白（MP）、带电蛋白和外壳蛋白（CP）可实现大肠杆菌重组表达，表明三叶青烟草花叶病毒的lncRNA测序结果准确；三叶青烟草花叶病毒CP、MP、RNA聚合酶和带电蛋白基因cDNA总长度分别为480、807、1 425、123 bp，三叶青烟草花叶病毒CP、MP、RNA聚合酶和带电蛋白分别由159、268、474、40个氨基酸组成；三叶青烟草花叶病毒CP、MP、RNA聚合酶为亲水性蛋白质，带电蛋白为疏水性蛋白质；三叶青烟草花叶病毒CP、MP、RNA聚合酶二级结构由α螺旋、β-片层、无规则卷曲构成，带电蛋白二级结构由β-片层和无规则卷曲构成，三级结构均为单体，分别定位于叶绿体、叶绿体、细胞质和线粒体中。三叶青烟草花叶病毒CP、MP、RNA聚合酶和带电蛋白与烟草花叶病毒亲缘关系较近，同源性达98%以上。结论 三叶青烟草花叶病毒具有烟草花叶病毒的结构特征，氨基酸序列及核酸序列与同源物种相似度高，在进化上高度保守。]]> 2024/10/24 13:29:03 128true 目的 探究不同产地蒙古黄芪Astragalus membranaceus主要药效成分的含量差异，以及不同药效成分含量与经纬度、光照、温度、水分等地理气候因子的相关性。方法 基于HPLC法测定了甘肃定西、山西大同、陕西榆林等7个产地蒙古黄芪的黄芪甲苷、黄芪皂苷Ⅰ等4种皂苷类成分和毛蕊异黄酮、芒炳花素等8种黄酮类成分的含量，通过方差分析比较各产地蒙古黄芪成分含量的差异，并采用相关性分析及通径分析探究地理气候因子与成分含量的相关性。结果 不同产地蒙古黄芪的12种药效成分含量均存在显著差异，其中山西大同产黄芪的黄芪皂苷、黄酮苷类成分含量较高，甘肃定西产黄芪的黄酮苷元类成分含量较高。相关性分析结果表明，在经度较高的地区有利于黄芪皂苷及黄酮苷类成分的积累，在经度较低地区有利于黄酮苷元类成分的积累。进一步通径分析结果表明，经度对药效成分的影响主要与降水量和光照条件有关。此外，9月较高的太阳辐射和4月较少的降水量有利于黄酮苷类成分的积累。结论 皂苷及黄酮类成分含量在不同产地的蒙古黄芪间差异显著，经度、9月太阳辐射和4月降水量对上述成分的积累影响较大。]]> 2024/10/24 13:29:03 127true 目的 分析药用植物富民枳Poncirus polyandra叶绿体基因组蛋白编码基因密码子使用模式及影响因素。方法 以富民枳叶绿体基因组53个蛋白编码基因为材料，利用CodonW软件、CUSP在线程序和R语言等整理并分析基因密码子使用偏性参数和核苷酸组成。结果 富民枳叶绿体基因组密码子各位置GC含量不同，偏好以A/U结尾；有效密码子数（effective number of codon，ENC）介于39.79～59.37，密码子偏好性较弱；密码子第3位碱基GC₃和ENC之间呈显著正相关；影响因素绘图分析结果表明自然选择对密码子使用模式有重要影响，共确定了12个最优密码子，且均偏向于A/U结尾。结论 富民枳叶绿体基因组密码子第3位碱基偏向使用A或U结尾，密码子偏性受自然选择影响最大，同时还受到突变等因素的共同影响。]]> 2024/10/24 13:29:03 126true 目的 探究土壤消毒和添加有机物料对改善三七Panax notoginseng土壤环境、提高出苗率和降低发病率的影响机制，提出克服三七连作障碍的土壤消毒和有机改良方案，为三七优质高产提供依据。方法 以一年生三七为试验对象，设置土壤蒸汽消毒机消毒（Y）、生石灰消毒（X）2个消毒条件；粉碎的玉米秸秆1 000 kg/hm²（J）、有机土壤基质15 000 kg/hm²（G）、秸秆＋有机土壤基质（JG）3种添加有机物料的方法；采用完全组合设计，共8个处理。观测处理前后及三七苗期土壤养分、微生物数量、酶活性、三七形态、出苗率和发病率。结果 蒸汽机和生石灰消毒均显著降低土壤真菌、细菌和放线菌数量，其中蒸汽机消毒效果强于生石灰消毒；添加秸秆、有机土显著提升土壤养分及三七根区土壤微生物数量和酶活性。蒸汽机消毒并添加秸秆（YJ）或同时添加秸秆和有机土（YJG）以及生石灰消毒并添加秸秆（XJ）最有利于三七苗期株高和茎粗的生长。土壤消毒联合添加秸秆、有机土处理可显著降低三七发病率（7.08%～23.84%），显著低于CK 70.30%。结论 土壤消毒和添加有机物料可改善土壤环境、促进三七生长、降低三七发病率，缓解三七连作障碍。因蒸汽消毒添加秸秆、有机土或生石灰消毒添加秸秆改善连作条件下土壤性质及提升三七健康生长的综合效益最佳，可作为三七种植管理中的优先推荐方案。]]> 2024/10/24 13:29:03 125true 目的 探究黄连Coptis chinensis转录组中简单重复序列（simple sequence repeat，SSR）位点信息，进而开发可用于黄连资源遗传多样性评价的SSR分子标记。方法 采用MISA软件对黄连叶片转录组获得的93 629条Unigene进行SSR位点数据挖掘，利用Primer 3.0软件进行引物设计，以64株不同形态的黄连作为分析样本，通过聚丙烯酰胺凝胶电泳筛选多态性引物。结果 黄连转录组中的12 848个SSR位点分布于10 016条Unigene序列中，SSR位点的出现频率为13.72%。单核苷酸和三核苷酸重复是SSR序列中最主要的重复类型，分别占SSR总数的53.81%和25.01%。SSR序列中共包含115种重复基元，优势重复基元为A/T、AG/CT、AAG/CTT。随机筛选的180对引物中，94对可扩增出清晰条带，其中的7对引物具有明显多态性，能够将64份黄连样本分成4个类群，其生物性状与遗传多样性聚类结果基本吻合。结论 黄连转录组中SSR位点出现频率较高，重复类型丰富，多态性较高，可为黄连资源研究提供候选分子标记。开发的7个SSR标记可用于黄连资源遗传多样性评价、种质鉴定、分子辅助育种等研究。]]> 2024/10/9 9:21:43 124true 目的 分析苹婆Sterculia monosperma的叶绿体基因组结构信息，以及苹婆属的种间亲缘关系，为苹婆属的系统发育和物种鉴定研究提供参考。方法 基于DNBSEQ测序平台，对苹婆叶绿体基因组进行测序，利用生物信息学手段进行组装、注释和结构分析，并与从NCBI下载的假苹婆S. lanceolata、西蜀苹婆S. lanceifolia、小花苹婆S. micrantha、粉苹婆S. euosma和短柄苹婆S. brevissima 5种苹婆属植物的叶绿体基因组进行多序列比对和系统发育等相关分析。结果 苹婆叶绿体基因组具有典型的四分体结构，全长为160 178 bp，总GC含量为37.0%，编码130个基因，得到109条SSR序列，显示30条序列的RSCU大于1。6种苹婆属相关比对分析可知苹婆属叶绿体基因组序列具有一定相似性，大单拷贝区（large single-copy region，LSC）存在9个不同程度差异片段，Pi值显示有4个片段有高变异性，系统发育树表明假苹婆和粉苹婆、西蜀苹婆和小花苹婆亲缘关系更近，短柄苹婆和苹婆相对独立。结论 解析了苹婆的叶绿体基因组结构和特征，探究了苹婆属植物种间亲缘关系，为苹婆属物种鉴定、资源保护和开发及系统进化提供理论依据。]]> 2024/10/9 9:21:43 123true 目的 采用指纹图谱、多指标成分定量与化学计量法相结合的方法，评价不同产地延胡索Corydalis yanhusuo的质量，为其进一步开发利用提供依据。方法 采用HPLC法，流动相为乙腈-0.1 mol/L磷酸水溶液进行梯度洗脱，柱温30 ℃，体积流量0.8 mL/min，检测波长280 nm，对14批不同产地延胡索药材建立指纹图谱及原阿片碱、延胡索乙素、盐酸药根碱、盐酸巴马汀、脱氢紫堇碱5种有效成分含量测定，运用聚类分析（hierarchical cluster analysis，HCA）、主成分分析（principal component analysis，PCA）和正交偏最小二乘法-判别分析（orthogonal partial least squares-discriminant analysis，OPLS-DA）对延胡索进行化学计量分析。结果 建立了14批延胡索药材的指纹图谱，相似度为0.739～0.991，共标定16个共有峰，指认了5个成分，含量测定结果表明不同产地延胡索中化学成分含量存在明显差异；HCA分析14批延胡索明显分为2类；PCA得到4个主成分的累积方差贡献率为86.751%；OPLS-DA表明延胡索乙素和脱氢紫堇碱可能是影响延胡索药材质量的差异标志物。结论 建立的延胡索HPLC指纹图谱及5个成分含量测定方法的专属性强，且准确、可靠，结合化学计量法可用于延胡索的药材鉴别和质量控制。]]> 2024/10/9 9:21:43 122true 目的 建立一测多评结合化学模式识别法及加权TOPSIS与灰色关联度融合模型评价不同产地凤尾草Pteris multifida质量差异的方法，以提高和完善凤尾草质控水平。方法 对18批不同产地的凤尾草用70%甲醇提取后，以木犀草素为内参物，采用QAMS法同时测定凤尾草中蕨素B、蕨素Z、蕨素C 3-O-β-D-葡萄糖苷、新西兰牡荆苷、忍冬苷、木犀草素-7-O-葡萄糖苷、野漆树苷、木犀草素、芹菜素、胡萝卜苷、β-谷甾醇含量，参照《中国药典》2020年版检测方法对其醇溶性浸出物、总灰分和酸不溶性灰分进行测定。检测结果利用SIMCA 14.1软件进行化学模式识别分析，在此基础上运用加权TOPSIS与灰色关联度融合模型对18批凤尾草进行质量差异评价。结果 外标法与QAMS法结果较接近，18批不同产地凤尾草的70%甲醇提取液中蕨素B、蕨素Z、蕨素C 3-O-β-D-葡萄糖苷、新西兰牡荆苷、忍冬苷、木犀草素-7-O-葡萄糖苷、野漆树苷、木犀草素、芹菜素、胡萝卜苷、β-谷甾醇含量差异较大，质量分数分别为0.214～0.342、0.255～0.458、0.119～0.332、0.556～1.096、0.048～0.146、0.701～1.197、1.460～2.553、0.940～1.609、0.085～0.217、0.034～0.079和0.084～0.163 mg/g。化学模式识别法将18批样品分为3类，木犀草素-7-O-葡萄糖苷、野漆树苷、蕨素C 3-O-β-D-葡萄糖苷、忍冬苷、木犀草素和芹菜素是影响凤尾草质量的主要差异性成分。18批样品的综合相对贴近度为0.310 1～0.657 7，证明了不同产地凤尾草存在地域差异。结论 通过多指标定量、化学模式识别结合加权TOPSIS与GRA融合模型方法，评价了不同产地凤尾草的质量差异性，为其质控水平的提高和资源开发提供了依据。]]> 2024/10/9 9:21:43 121true 目的 建立砂茴香Ferula bungeana的化学指纹图谱及定量分析方法，并比较其不同部位化学成分差异性，为其不同部位的功效和主治提供化学基础数据。方法 采用HPLC法建立15批砂茴香不同部位的化学指纹图谱，采用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”软件（2012年130723版），确定砂茴香不同部位各自的共有峰及其不同部位之间交叉共有峰。同时，采用对照品法指认砂茴香不同部位之间交叉共有峰，并进行主成分分析（principal component analysis，PCA）、偏最小二乘法判别分析（partial least squares discriminant analysis，PLS-DA）和方差分析，确认其潜在差异成分。采用HPLC法测定15批砂茴香不同部位中宽叶阿魏醇和伞形戊烯内酯的含量。结果 建立了15批砂茴香不同部位的化学指纹图谱，标定砂茴香全草共有峰为18个，而其地上部位和根中标定了共有峰各为16个。其各自共有峰相似度均大于0.9以上，说明砂茴香同一部位之间化学成分差异性较小。砂茴香不同部位之间交叉共有峰有7个，鉴定了其中1号峰为砂茴香碱A、8号峰为砂茴香酮A、15号峰为砂茴香素A、16号峰为宽叶阿魏醇和18号峰为伞形戊醇内酯。PCA、PLS-DA和方差分析结果显示，砂茴香不同部位之间的差异成分主要有3个，分别为砂茴香酮A、宽叶阿魏醇和伞形戊醇内酯，其VIP值分别为1.364、1.119和1.015。含量测定结果显示，宽叶阿魏醇和伞形戊醇内酯在15批砂茴香不同部位中含量变化分别为（2.235±0.025）～（9.481±0.133）mg/g和（6.670±0.067）～（28.820±0.346）mg/g，（0.694±0.010）～（1.958±0.025）mg/g和（0.138±0.002）～（1.784±0.020）mg/g，（5.113±0.077）～（13.550±0.176）mg/g和（9.2460±0.102）～（32.760±0.524）mg/g，说明不同来源砂茴香不同部位中宽叶阿魏醇和伞形戊醇内酯相对含量差异性较大。结论 从化学成分比较结果看，砂茴香不同部位之间存在一定的差异性，因此砂茴香不同部位药用价值各异具有合理性。]]> 2024/10/9 9:21:43 120true 目的 克隆蛇足石杉Huperzia serrata中石杉碱甲合成相关基因HsPKS1，解析其功能，为揭示石杉碱甲生物合成机制奠定基础。方法 基于蛇足石杉转录组及qRT-PCR，筛选并克隆HsPKS1基因，利用生物学信息分析预测其功能；采用同源重组方法构建基因表达载体，遗传转化至烟草中进行亚细胞定位和表达分析，利用广泛靶向代谢组分析HsPKS1基因参与的生物合成通路的作用机制。结果 qRT-PCR和HPLC结果表明不同组织间HsPKS1基因相对表达量与其石杉碱甲含量呈正相关。基因克隆、测序及生物信息学分析表明，HsPKS1基因开放阅读框为1 200 bp，编码399个氨基酸，编码蛋白具有酰基转移酶活性区域及多个辅酶A的结合位点。系统进化树分析表明，HsPKS1蛋白与25个物种的聚酮合酶均具有较高的同源性，其中与江南卷柏的亲缘关系最近。亚细胞定位结果表明HsPKS1蛋白在细胞核和细胞质均有表达。广泛靶向代谢组分析发现，HsPKS1基因可以显著影响烟草次生代谢产物的积累，并引起合成黄酮类的前体化合物和异喹啉类生物碱化合物的物质变化。结论 成功克隆并获得HsPKS1基因序列，分析了基因表达模式、生物学功能及亚细胞定位，揭示了该基因在类黄酮和生物碱合成等方面起重要作用，为研究和揭示HupA合成代谢通路的分子机制提供科学依据。]]> 2024/9/21 8:47:35 119true 目的 通过分析药用植物长春花Cathranthus roseus萜类吲哚生物碱（terpenoid indole alkaloids，TIAs）合成途径上的抑制转录因子CrZCT1、CrZCT2和CrZCT3间的功能差异，为有效地调控TIAs合成提供必要的理论依据。方法 利用病毒诱导的基因沉默（virus induced gene silencing，VIGS）技术，采用不同的CrZCTs基因沉默组合方式，对CrZCTs进行沉默，分析CrZCTs和TIAs生物合成途径中关键酶基因的表达量以及文多灵和长春质碱的积累量变化。结果 当对CrZCTs进行单个或任意2个沉默时，其他未沉默处理的基因相对表达水平也均会随之下调，且CrZCT1和CrZCT2有相似的表达水平变化。对于7种不同组合的沉默处理下，5个关键酶基因（CrTDC、CrSTR、CrG10H、CrT16H和CrDAT）的相对表达量较对照均有不同程度的上调，为对照的1.43～14.65倍；而文多灵和长春质碱的积累量也均显著提升，分别比对照增加15.27%～128.24%和12.24%～96.35%。结论 由于CrZCTs三者间的同源性和功能的冗余性，基因表达和生物碱的合成均表现出同时沉默3个基因的效果大于任意2个的组合大于1个，且CrZCT1和CrZCT2的作用和能力相似，而CrZCT3促进和调控能力更大。]]> 2024/9/21 8:47:35 118true 目的 建立蜜款冬Tussilago farfara花HPLC指纹图谱和多成分含量测定分析方法，结合化学模式识别法综合评价蜜款冬花质量。方法 采用HPLC和中药指纹图谱相似度评价系统（2004 A）建立53批蜜款冬花的指纹图谱，同时测定款冬酮等14个有效成分含量，结合化学模式识别对不同批次蜜款冬花的质量进行评价。结果 蜜款冬花指纹图谱共标定了24个共有峰，指认了其中14个成分，相似度为0.763～0.997；聚类分析（cluster analysis，HCA）、主成分分析（principal component analysis，PCA）和正交偏最小二乘法（orthogonal partial least squares-discriminant analysis，OPLS-DA）均将53批样品分为2类，PCA得到6个主成分的累积贡献率为82.457%，OPLS-DA筛选了异绿原酸B、异绿原酸A、异绿原酸C、绿原酸、芦丁、10号峰（未知）6个影响蜜款冬花质量的差异性成分；含量测定结果表明不同批次蜜款冬花中14个有效成分含量存在明显差异，聚类热图将53批样品分为2类，第1类样品中的异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C、槲皮素、芦丁、绿原酸、隐绿原酸含量高于第2类，其中异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C、芦丁、绿原酸均来OPLS-DA筛选的差异性成分。结论 建立的蜜款冬花HPLC指纹图谱和多成分定量方法稳定性好、灵敏度高，结合化学模式识别法可为综合评价蜜款冬花质量提供参考。]]> 2024/9/21 8:47:35 117true 目的 对不同产地的紫苏Perilla frutescens叶进行研究，建立紫苏叶的指纹图谱并测定野黄芩苷、迷迭香酸含量，为紫苏叶的质量控制提供参考。方法 收集9个产地共36批紫苏叶药材，以乙腈-0.2%甲酸溶液为流动相，建立紫苏叶中野黄芩苷、迷迭香酸的HPLC含量测定方法，对36批紫苏叶进行含量测定，同时建立紫苏叶指纹图谱并进行相似度评价；采用微科盟生科云、SIMCA 14.1等工具进行聚类分析（cluster analysis，CA）、主成分分析（principal component analysis，PCA）、偏最小二乘法判别分析（partial least squares discriminant analysis，PLS-DA）。结果 以野黄芩苷为参照峰建立了紫苏叶的指纹图谱，共标定了9个共有峰。36批紫苏叶与对照图谱相比较，相似度均大于0.900，聚类分析可将同一产地样品聚为一类；样品的9个共有峰变量投影重要性（VIP）值显示，其中7个成分可作为评价紫苏叶差异的指标。样品中野黄芩苷、迷迭香酸的含量测定方法学验证结果良好，36批紫苏叶中野黄芩苷、迷迭香酸质量分数分别为1.911%～4.968%、2.278%～10.257%，不同产地的样品含量差异较大。结论 建立的指纹图谱和含量测定方法稳定性较高，分离度良好，含量测定结果结合指纹图谱化学模式识别分析结果表明不同产地的紫苏叶中主要成分差异较明显，可为紫苏叶的质量评价提供依据。]]> 2024/9/21 8:47:35 116true 目的 获得远志Polygala Radix及其炮制品中挥发性有机物的特征及其变化规律。方法 采用顶空-气相色谱-离子迁移质谱（headspace-gas-chromatographyion-mobility spectrometry，HS-GC-IMS）测定远志根、远志筒、蜜远志、制远志的挥发性有机物，构建HS-GC-IMS指纹图谱，VOCal软件对检测到的成分进行定性和定量分析，运用主成分分析（application of principal component analysis，PCA）、偏最小二乘判别分析（partial least squares-discriminant analysis，PLS-DA）和聚类热图对样品进行识别和差异性分析。结果 基于HS-GC-IMS技术从远志及其炮制品中共获得了45种挥发性有机物，定性鉴别出41种；构建了远志及其炮制品的HS-GC-IMS指纹图谱，4组样品的指纹图谱整体轮廓类似，组内相对含量基本一致，但组间相对含量差异显著；聚类热图分析将4组样本聚为2类，远志根单独一类，远志筒、蜜远志和甘草炙远志聚为一类；PCA和PLS-DA可将远志根、远志筒、蜜远志、制远志明显区分开来，庚醛M、庚醛D等16个成分可作为品种识别和区分质量的关键因子。结论 HS-GC-IMS指纹图谱可用于识别与评价远志及其炮制品挥发性有机物的种类和差异，为远志饮片的质量评价及临床应用提供参考。]]> 2024/9/21 8:47:35 115true 目的 研究角蒿属Incarvillea Juss.药用植物叶绿体基因组特征、变异程度及系统发育关系，为角蒿属物种分子鉴定、系统发育及药用植物资源保护等研究提供参考。方法 以5种角蒿属药用植物为研究对象，通过高通量测序获取密生波罗花叶绿体基因组，并结合同属4种药用植物的叶绿体基因组序列，利用生物信息学方法比较5种角蒿属药用植物叶绿体基因组之间的结构特征及变异程度，同时以凌霄为外类群分析了角蒿属的系统发育关系。结果 5种角蒿属药用植物的叶绿体基因组为典型的四分体结构，均包含一个大单拷贝区、一个小单拷贝区及2个反向重复区。密生波罗花Incarvillea compacta的叶绿体基因组序列长度为150 144 bp，GC含量为40%，共注释到基因119个，其中76个蛋白质编码基因、35个转运RNA（transfer RNA，tRNA）基因、8个核糖体RNA（ribosomal RNA，rRNA）基因。重复序列分析发现两头毛I. arguta叶绿体基因组重复序列数量最少，且只有两头毛同时含有4种类型的重复序列，其余4种药用植物的重复序列总数及重复类型相同。密生波罗花有44个简单重复序列（simple sequence repeats，SSRs），且以单核苷酸（A/T）重复为主。叶绿体基因组比较分析发现角蒿属内5种药用植物的叶绿体基因组中非编码区比基因编码区的变异程度大，黄波罗花I. lutea与其他4种药用植物相比，具有较高的序列变异，而两头毛在进化上最为保守，同时发现藏波罗花I. younghusbandii和密生波罗花的序列相似性较高；共线性结果表明，角蒿I. sinensis、密生波罗花及藏波罗花中存在程度不一的基因重排。选择压力分析结果表明在角蒿属5种药用植物中rps2、rps7、psbN蛋白编码基因均受到正选择。系统发育分析结果显示，密生波罗花与藏波罗花亲缘关系最近，与两头毛的亲缘关系最远。结论 5种角蒿属植物在叶绿体基因组结构特征方面较为保守，但其变异程度存在差异。其中，两头毛的变异程度最低，进化上最保守。就亲缘关系而言，密生波罗花和藏波罗花的亲缘关系最近。基于叶绿体基因组构建的系统发育树在一定程度上可以揭示角蒿属物种的系统发育关系。]]> 2024/9/5 13:31:51 114true 目的 调研市售菟丝子Cuscutae Semen混杂情况，为菟丝子药材质量的提升和安全应用提供依据。方法 收集市售菟丝子25份，对样品进行ITS2基因扩增并双向测序，利用HMMer注释方法获得ITS2序列，使用MEGA6.0进行遗传距离计算并构建邻接法（neighbor-joining，NJ）系统发育树；运用DNAsp5.0进行功能域检测和单倍型分析；比较菟丝子及杂质的二级结构差异；用R语言将所得序列转换成彩色条形码图片及二维码。结果 通过序列分析、遗传距离分析、构建系统发育树、二级结构分析、功能域分析及单倍型分析可将菟丝子药材中不同科属及同一属的杂质准确区分；成功检测出25份菟丝子中分别含有藜种子、绿穗苋种子、虫实种子、铁苋菜种子、稗子、酸模叶蓼种子、大豆碎粒等1种或多种杂质。结论 首次调研了市售菟丝子的混杂情况，表明其混杂种类多，且部分混杂种子有毒，为菟丝子相关标准制定提供了依据。此外，ITS2序列可准确鉴定菟丝子及其混伪品，为微小种子类药材鉴别提供了理论依据；与二维码技术结合可实现菟丝子监管的标准化和信息化。]]> 2024/9/5 13:31:51 113true 目的 开发SSR分子标记，分析不同产地瓜蒌Trichosanthis Fructus药材的遗传结构和进化及不同种质资源的遗传多样性。方法 提取瓜蒌RNA，反转录获得cDNA，PCR富集得到cDNA文库，经高通量测序，组装后，获得高质量Unigene后，用MISA（MicroSatellite identification tool）鉴定简单重复序列（simple sequence repeat，SSR），设计两端引物，从中选取64对引物对13个来源于3个地理居群的瓜蒌资源进行群体结构和遗传多样性分析。结果 所开发的SSR标记具有良好的功效，在选用的整个群体中，其多态性信息含量（polymorphic information content，PIC）、观察等位基因数（number of observed alleles，N_a）、有效等位基因数（number of effective alleles，N_e）、香农信息指数（Shannon information index，I）和Nei遗传距离（Nei genetic distance，GD）依次为0.758 7、3.531 2、2.588 3、1.000 6和0.559 2，3个自然群体之间，合肥和潜山自然群体的遗传相似性高，达到0.941 7，与其他野生资源之间存在较大的遗传差异。经聚类分析，将13个品种资源分成2个亚群，其中2个长萼瓜蒌资源单独组成1个亚群，其余11个双边瓜蒌Trichosanthes rosthornii资源被分为另外1个亚群，而双边瓜蒌又被分为2个亚群，并且4个合肥育成品种分别在不同的亚群中，表明合肥育成品种来源较丰富。其他地区瓜蒌种质资源与安徽原产地瓜蒌遗传差异较大，能够为安徽瓜蒌育种拓宽种质资源基础。]]> 2024/9/5 13:31:51 112true 目的 采用指纹图谱结合化学模式识别评价不同产地香附Cyperus rotundus及其炮制品的质量并进行化学成分含量测定。方法 采用Venusil C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；甲醇-0.1%磷酸水溶液为流动相，进行梯度洗脱。结合聚类分析（hierarchical cluster analysis，HCA）、主成分分析（principal component analysis，PCA）及正交偏最小二乘法-判别分析（orthogonal partial least squares-discriminant analysis，OPLS-DA）进行评价。对样品中5-羟甲基糠醛（5-HMF）、对香豆酸、阿魏酸、木犀草素、香附烯酮、α-香附酮6个成分进行定量分析。结果 建立不同产地香附、醋香附、酒香附、四制香附的高效液相指纹图谱，60批样品共标定17个共有峰，指认出6个成分，3号峰为5-HMF，7号峰为对香豆酸，8号峰为阿魏酸，14号峰为木犀草素，19号峰为香附烯酮，21号峰为α-香附酮。PCA分析结果、OPLS-DA分析结果与聚类分析结果显示，香附、醋炙香附、醋煮香附、醋蒸香附、醋煮蒸香附存在一定差异。以VIP＞1为标准筛选贡献较大的差异性成分，筛选出6、5、7（对香豆酸）、15、14（木犀草素）、8、1号峰为差异标志物，提示在香附及其炮制品质量分析中应重点关注以上成分，含量测定结果表明不同产地香附及其炮制品之间存在一定差异。结论 建立的香附HPLC指纹图谱操作简便、结果可靠，5-HMF、对香豆酸、阿魏酸、木犀草素、香附烯酮、α-香附酮可以作为香附质量评价的指标性成分。]]> 2024/9/5 13:31:51 111true 目的 建立断血流的HPLC指纹图谱与含量测定方法，结合化学计量学分析断血流的质量。方法 采用HPLC法建立15批断血流药材的指纹图谱，通过对照品比对，指认共有峰，并测定其中4种有效成分（木犀草苷、橙皮苷、槲皮素、醉鱼草皂苷IVb）的含量，使用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012版）》、IBM SPSS Statistics 23和Simca软件进行相似度评价、聚类分析（cluster analysis，CA）、主成分分析（principal component analysis，PCA）及正交偏最小二乘判别分析（orthogonal partial least squares discriminant analysis，OPLS-DA），对不同产地断血流的差异进行分析。结果 建立的15批断血流指纹图谱共匹配出21个共有峰，通过与对照品比对，指认出木犀草苷、橙皮苷、迷迭香酸、蒙花苷、槲皮素、醉鱼草皂苷IVb 6个色谱峰，指纹图谱相似度为0.660～1.000；15批次断血流药材中木犀草苷、橙皮苷、槲皮素、醉鱼草皂苷IVb的质量分数分别为0.202 9～2.772 8、4.719 0～16.957 0、0.252 0～1.045 3、0.022 8～0.170 8mg/g；CA分析将样品分为3类；PCA提取出1个主成分；OPLS-DA分析确定木犀草苷、槲皮素2个差异标志物。结论 建立的断血流HPLC指纹图谱与含量测定并结合化学计量学分析方法稳定可靠，可用于断血流药材的质量评价。]]> 2024/9/5 13:31:51 110true 目的 基于灵芝Ganoderma lucidum的基因组和转录组数据，挖掘灵芝C₂H₂型锌指转录因子（C₂H₂-ZFPs）基因家族成员，并分析其菌丝在茉莉酸甲酯（methyl jasmonate，MeJA）诱导后的表达模式，以期发现在灵芝的生长发育、胁迫应对及次生代谢等方面起作用的C₂H₂-ZFPs。方法 通过隐马尔可夫模型搜索和保守结构域分析，对灵芝中的C₂H₂转录因子进行全基因组鉴定，利用Peptides软件包分析C₂H₂-ZFPs的理化性质，利用IQtree构建C₂H₂锌指蛋白系统发育树，利用MEME和GSDS 2.0在线工具分析保守基序和基因结构，利用qRT-PCR测定MeJA诱导后菌丝中C₂H₂基因的相对表达量。结果 灵芝中含有20个C₂H₂型基因家族成员（GlC₂H₂.01～GlC₂H₂.20），可分为5个亚群，分布在灵芝的10条染色体上。系统发育和保守基序显示灵芝中C₂H₂转录因子具有进化上的保守性，且至少含有1个zf-C₂H₂，启动子区预测分析发现了多类激素及逆境响应顺式作用元件。转录组分析结果表明C₂H₂基因在灵芝原基期表达最高，在孢子粉中几乎不表达。MeJA诱导9 h后，菌丝中GlC₂H₂.11和GlC₂H₂.20表达显著下降，其他GlC₂H₂在处理后3～9 h呈下降趋势，12 h后恢复至正常表达水平。结论 从灵芝全基因组中系统鉴定了C₂H₂转录因子家族基因，为进一步研究C₂H₂转录因子在调控灵芝发育及次生代谢方面的生物学功能提供理论参考。]]> 2024/8/16 13:21:21 109true 目的 沪地龙3个基原药材（通俗环毛蚓Pheretima vulgaris、威廉环毛蚓P. guillelmi、栉盲环毛蚓P. pectinifera）在外观性状方面相似度高，传统鉴定方法难以有效区分，通过建立多重位点特异性PCR方法同时鉴别沪地龙3个基原。方法 通过比对沪地龙和其他7个蚯蚓品种线粒体全基因序列的多态性位点差异，分别设计通俗环毛蚓、威廉环毛蚓及栉盲环毛蚓的特异性鉴别引物，建立单基原反应体系，并对耐受性和适用性进行考察和验证；而后优化特异性引物组合，构建多重位点特异性PCR鉴别体系；反应体系为25 μL：2×Rapid Taq Master Mix 12.5 μL，引物1.5 μL（通俗环毛蚓∶威廉环毛蚓∶栉盲环毛蚓＝1∶1.2∶0.8），DNA模板0.5 μL（50 ng/μL），灭菌水补足至25 μL。PCR扩增条件：95 ℃预变性4 min；95 ℃变性15 s，60 ℃退火15 s，72 ℃延伸20 s，循环33次；产物末端72 ℃延伸7 min。结果 通俗环毛蚓可得到535 bp条带，威廉环毛蚓可得到219 bp条带，栉盲环毛蚓可得到435 bp条带，其他品种蚯蚓样品均无条带。结论 多重位点特异性PCR鉴别体系可根据条带位置同时鉴别沪地龙3个基原。该方法可用于沪地龙基原和真伪鉴别，并为地龙的质量控制和研究提供参考。]]> 2024/8/16 13:21:21 108true 目的 建立HPLC指纹图谱与一测多评（quantitative analysis of multi-components with a single-marker，QAMS）结合的方法同时检测顶羽菊Rhaponticum repens药材中新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、1,5-二咖啡酰奎宁酸、异绿原酸C、芹菜素、高车前素的含量，并建立不同产地顶羽菊药材的综合质量评价模型，为顶羽菊药材的整体质量评价提供参考。方法 采用HPLC法建立不同产地16批顶羽菊药材的指纹图谱，利用化学计量学模式聚类分析（cluster analysis，CA）和正交偏最小二乘判别分析（orthogonal partial least squares-discrimination analysis，OPLS-DA）对采集的指纹图谱信息进行分析，同时运用加权逼近理想解排序法（technique for order preference by similarity to ideal solution，TOPSIS）、加权秩和比法（rank sum ratio，RSR）及两者模糊联合的方法构建评价模型；以绿原酸为内标，确定新绿原酸、隐绿原酸、1,5-二咖啡酰奎宁酸、异绿原酸C、芹菜素、高车前素的相对校正因子并计算其含量，建立QAMS法。结果 建立的顶羽菊药材指纹图谱共标定23个共有峰，指认出其中7个峰。化学计量学模式研究显示不同产地顶羽菊存在明显差异。通过OPLS-DA法筛选出10个主要的差异性成分。构建的熵权TOPSIS法、RSR法以及两者模糊联合的综合质量评价模型，对不同产地顶羽菊药材的质量评价排序结果较为一致。以绿原酸为内标建立的QAMS和外标法含量测定结果无显著性差异（P＞0.05）。结论 所建立的HPLC指纹图谱结合QAMS法简便可靠，重复性好；建立的综合质量评价模型的分析结果全面客观，可用于顶羽菊药材整体质量的综合评价。]]> 2024/8/16 13:21:21 107true 目的 建立不同产地川牛膝Cyathula officinalis UPLC指纹图谱，并与不同部位川牛膝及混淆品进行对比分析。方法 采用Waters acquity UPLC HSS T₃色谱柱（100 mm×2.1 mm，1.8 µm），流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液，梯度洗脱，体积流量为0.3 mL/min，波长为210 nm，柱温为30 ℃，进样量为4 μL。结合相似度评价、聚类分析（cluster analysis，CA）、主成分分析（principal component analysis，PCA）、正交偏最小二乘法-判别式分析（orthogonal partial least squares method-discriminant analysis，OPLS-DA）比较不同产地、不同部位川牛膝及其混淆品的差异。结果 UPLC指纹图谱共标定了川牛膝19个特征峰，并指认了2-羟基-3-[(4-羟基-3-甲氧基苯甲酰)氧基]琥珀酸、杯苋甾酮、滨蒿内酯、2-(苯甲酰基)-3-[(4-羟基-3-甲氧基苯甲酰)氧基]琥珀酸4个特征峰。通过相似度分析发现，川牛膝的不同产地、不同部位及混淆品样品均存在一定的差异，CA、PCA、OPLS-DA可将62批样品根据主产地、部位、基原进行区分，通过OPLS-DA项下的投影中的变量重要性投影（variable importance in projection，VIP）各筛选出9个差异性标志物。结论 建立的指纹图谱方法能准确有效区分川牛膝的不同产地、不同部位及其混淆品，为川牛膝的质量评价及鉴别提供参考。]]> 2024/8/16 13:21:21 106true 目的 通过HPLC多成分含量测定与指纹图谱的多模式化学识别方法对地榆Sanguisorba officinalis进行不同产地质量分析研究，为地榆质评质控体系的构建及其潜在质量标志物的探索提供参考和依据。方法 采用HPLC法建立10批不同产地地榆指纹图谱，测定地榆中的7个有效成分含量；使用SPSS 21.0软件对地榆进行聚类分析（hierarchical cluster analysis，HCA）、主成分分析（principal component analysis，PCA），使用SIMCA 14.0软件对地榆进行正交偏最小二乘法-判别分析（orthogonal partial least squares-discriminant analysis，OPLS-DA）。结果 建立了10批不同产地地榆药材的指纹图谱，相似度为0.816～0.976，共标定20个共有峰，指认了7个成分（没食子酸、儿茶素、表儿茶素、没食子酸乙酯、金丝桃苷、鞣花酸、槲皮素），含量测定结果表明不同产地地榆中化学成分含量存在显著差异。HCA分析结果显示，当欧氏距离为4时，将10批地榆分为3类；PCA提取了3个主成分，累积方差贡献率为91.98%，说明3个主成分在反映不同产地地榆样品共有成分关系中起主导作用。OPLS-DA结果表明，金丝桃苷、没食子酸、儿茶素可能是影响不同产地地榆药材质量的差异标志物。结论 通过建立地榆HPLC指纹图谱及7个成分含量测定，结合化学模式识别法评价了不同产地地榆药材质量，为地榆质量标准的研究及其潜在质量标志物的研究提供依据。]]> 2024/8/16 13:21:21 105true 目的 克隆地涌金莲Musella lasiocarpa中O-甲基转移酶（O-methyltransferase，OMT）基因，并对其进行生物信息学及表达模式分析。方法 基于地涌金莲转录组数据，筛选并原核表达了3条MlOMTs酶基因（MlOMT1、MlOMT2和MlOMT3）。利用软件对其进行生物信息学分析，利用MEGA11构建系统发育树，采用实时荧光定量PCR检测基因表达模式。结果 PCR扩增得到3条MlOMTs基因；3个MlOMT蛋白长度为289～400个氨基酸，相对分子质量在3 147 360～4 526 756，3个蛋白均为不稳定的亲水性蛋白，其中MlOMT1和MlOMT2不含跨膜区，MlOMT3存在2个跨膜螺旋，其N端位于胞质内。3个蛋白主要定位于叶绿体，不含有信号肽，主要由α-螺旋和无规则卷曲构成，含有SAM依赖的甲基转移酶超家族的保守结构域，属于SAM依赖的甲基转移酶超级家族。系统进化分析表明，MlOMT1与来源于大麦Hordeum vulgare的Hv7OMT和粳稻Oryza sativa subsp. japonica的OsOMT17聚为一支，MlOMT2与冰叶日中花Mesembryanthemum crystallinum的McPFOMT聚为一支，而MlOMT3与拟南芥Arabidopsis thaliana的AtCCoAOMT1聚为一支，表明它们亲缘关系较近，推测它们具有类似的生物学功能。通过对表达条件的初步优化，重组工程菌pMal-c4X-MlOMT1和pMal-c4X-MlOMT2在大肠杆菌BL21（DE3）中实现蛋白可溶性表达。组织特异性表达分析结果显示，MlOMT1在地涌金莲不同组织相对表达量为：叶片＞苞片＞种子，MlOMT2和MlOMT3相对表达量为：苞片＞种子＞叶片。结论 成功克隆获得地涌金莲3条MlOMTs基因并进行生物信息学分析和原核表达，为后续酶的功能表征奠定基础。]]> 2024/8/2 15:50:29 104true 目的 筛选参与调控甘松Nardostachys jatamansi主要活性倍半萜类化合物积累的bHLH、bZIP、MYB家族转录因子。方法 利用甘松全长转录组数据库注释信息获取bHLH、bZIP、MYB家族转录因子，利用WGCNA分析潜在能正向调控主要倍半萜类化合物积累的转录因子，利用实时荧光定量PCR（quantitative real-time polymeras chain reaction，qRT-PCR）进一步确认候选转录因子是否影响甘松主要活性倍半萜类化合物的积累，利用MEME在线网站分析候选bHLH、bZIP、MYB基因家族成员的保守基序。结果 在甘松全长转录组数据中分别筛选出bHLH家族893个、bZIP家族416个、MYB家族436个，WGCNA分析筛选能正向调控萜类化合物生物合成的转录因子共458个，qRT-PCR确认候选转录因子的表达水平与甘松主要活性倍半萜化合物的积累水平高度正相关。结论 甘松主要倍半萜类化合物的积累可能受到本研究筛选的458个转录因子的正向调控作用，可作为甘松主要药效物质生物合成调控机制研究的潜在靶基因。]]> 2024/8/2 15:50:29 103true 目的 针对炙黄芪中主要指标成分及经蜜炙转化的特征乙酰基成分，建立HPLC-PDA-ELSD测定炙黄芪中6种异黄酮及2种三萜皂苷的分析方法以及6种异黄酮的一测多评（quantitative determination analysis multi-component by a single-marker，QAMS）法。方法 选取毛蕊异黄酮7-O-β-D-葡萄糖苷（CYG）、黄芪皂苷I（AGI）分别为异黄酮和三萜皂苷类成分的内参物，并计算CYG与乙酰毛蕊异黄酮苷（CYA）、芒柄花苷（FMG）、毛蕊异黄酮（CY）、乙酰芒柄花苷（FMA）、芒柄花素（FM）及AGI与乙酰黄芪皂苷I（ATI）的相对校正因子（f_k/s），在不同仪器、色谱柱、柱温、体积流量上考察各成分相对校正因子的稳定性与耐用性，比较QAMS法与外标法（ESM）结果差异。结果 对来自8个厂家共18批炙黄芪进行检测，PDA检测的6种异黄酮的QAMS法与ESM的结果相近，相对误差绝对值均在5%以内，表明针对异黄酮类成分建立的QAMS法准确性良好，可选用QAMS法与ESM进行质量控制；ELSD检测的2种三萜皂苷的QAMS法与ESM的结果差异明显，相对误差绝对值为0.40%～22.69%，显示针对三萜皂苷类成分建立的QAMS法不适用，应选用ESM进行质量控制。结论 建立的炙黄芪中6种异黄酮及2种三萜皂苷的分析方法及6种异黄酮的QAMS法准确可靠，操作简便，可反映黄芪的蜜炙程度，为更加全面地评价炙黄芪质量提供参考，以期提升炙黄芪饮片质量。]]> 2024/8/2 15:50:29 102true 目的 采用HPLC法对不同年限人参Panax ginseng（林下参）茎、叶中10种人参皂苷类成分含量进行测定，结合化学模式识别比较含量差异。方法 采用HPLC法对10、15、20、25年林下参茎、叶中人参皂苷Rg₁、Re、Rf、Rg₂、Ro、Rb₁、Rc、Rb₂、Rb₃、Rd含量进行测定，采用化学计量学方法对结果进行分析。结果 HPLC结果显示，在林下参茎中未检测到人参皂苷Rb₂、Rb₃，林下参叶中10种皂苷含量远高于林下参茎中。在4种年限林下参叶中，10种人参皂苷总量在60～100 mg/g，20年时含量最高；在4种年限林下参茎中，除人参皂苷Rb₂、Rb₃外的8种人参皂苷总量在20年最高；原人参二醇型皂苷在20年林下参叶中最高。原人参三醇型皂苷在15年林下参叶中皂苷含量最高；4种年限林下参茎、叶中差异性成分为人参皂苷Re、Rd、Rg₁和Rc。结论 不同生长年限的林下参茎、叶中皂苷含量存在差异，为林下参非药用部位资源的开发与利用提供理论依据。]]> 2024/8/2 15:50:29 101true 目的 采用指纹图谱与化学模式识别方法，以香豆素为指标，探讨不同种质白芷药材Angelicae Dahuricae Radix发育过程中有效成分的含量变化规律，评价不同种质白芷的质量，为白芷药材合理采收和质量控制提供参考和依据。方法 采用HPLC法测定5个种质白芷不同发育时期香豆素类成分含量，建立不同种质白芷药材化学指纹图谱，结合相似度分析、聚类分析、主成分分析对不同种质白芷进行比较和质量评价。结果 建立了不同种质白芷药材的化学指纹图谱，共标定了19个共有峰，35批白芷相似度均在0.871～0.995；在各种质白芷发育过程中，总香豆素含量呈现先增加后降低的趋势，在7月中旬达到最高；5个种质白芷不同采收期样本的主成分分析结果显示：5个种质白芷的综合评分均在7月中旬最高；5个种质白芷7月中旬样本的主成分分析的综合评分结果：川白芷＞南川白芷＞禹白芷＞祁白芷＞亳白芷，且川白芷的总香豆素含量及欧前胡素含量显著高于其余种质。结论 白芷香豆素类成分组成与含量既取决于种质又受发育程度的影响，各种质白芷最佳采收期为7月中旬，以川白芷质量最佳。]]> 2024/8/2 15:50:29 100true 目的 建立实时直接分析质谱（direct analysis in real-time-mass spectrometer，DART-MS）法检测姜黄属中药中姜黄素类化合物的分析方法，并探究该方法在中药领域应用的可行性。方法 利用DART-MS技术，通过单因素实验，优化进样速度、格栅电压、提取溶剂等实验参数条件，获得最佳检测限。与采用超高效液相色谱-电喷雾串联质谱（ultra performance liquid chromatography-electric spray ion source-mass spectrometer，UPLC-ESI-MS）技术检测的结果作比较，并进行方法学验证，以此评价采用DART-MS技术进行快速检测姜黄素类化合物的可行性。结果 优化后的DART检测条件：电离源气体温度300 ℃，格栅电压（grid voltage，GV）100 V，进样速度0.2 mm/s，并以60%丙酮水溶液作为提取剂，以获得最佳信号强度。结果表明，在负离子模式下，姜黄素（curcumin，CUR）、去甲氧基姜黄素（demethoxycurcumin，DMC）、双去甲氧基姜黄素（bisdemethoxycurcumin，BDMC）的标准曲线呈现良好线性关系，检测限分别为0.08、0.10、0.07 ng/mL，定量限分别为0.22、0.34、0.19 ng/mL，3种化合物的平均回收率处于98.75%～100.61%，相对标准偏差（relative standard deviation，RSD）均小于5%。采用DART-MS和UPLC-ESI-MS对3种姜黄素检测的结果一致。结论 该方法精确度高、准确度高、重复性好，能快速、准确、有效地检测姜黄属中药中姜黄素类化合物，在中药等领域具有潜在的应用价值。]]> 2024/8/2 15:50:29 99true 目的 对当归Angelica sinensis中的AP2/ERF转录因子基因进行鉴定以及生物信息学分析，并分析其在干旱胁迫下的表达差异，以期筛选出与响应干旱胁迫相关的AsAP2/ERF基因，为后续深入研究2品种当归抗逆性差异及抗性育种提供参考依据。方法 基于全长转录组测序数据，利用生物信息学方法对AsAP2/ERF转录因子家族成员进行鉴定，并分析该家族特征。基于干旱胁迫转录组数据分析AsAP2/ERF基因的表达模式，并利用qRT-PCR技术进行验证。结果 从当归中共鉴定到53个AP2/ERF转录因子，包括28个ERF、18个DREB、5个RAV、2个AP2亚家族成员。AsAP2/ERF转录因子的氨基酸数量是142～440 aa，均为亲水性蛋白，亚细胞定位预测结果显示多数成员定位于细胞核。基因表达模式的分析结果表明，在响应干旱胁迫条件下，“岷归2号”（M2）中表达上调的基因数量多于“岷归1号”（M1），其中8个基因在2品种当归D2组表达差异显著，这可能与2品种当归的抗旱性相关。qRT-PCR分析结果表明，6个基因与干旱胁迫转录组数据基本一致。结论 鉴定了当归中的AP2/ERF转录因子家族，探究了不同基因在干旱胁迫下的表达模式，最终获得了6个响应干旱胁迫的AsAP2/ERF候选基因，为后期开展当归抗旱功能基因的研究奠定基础。]]> 2024/7/19 14:28:38 98true 目的 探索草珊瑚Sarcandra glabra叶片活性成分生物合成分子基础，合理的开发利用草珊瑚资源。方法 采用BGISEQ-500测序平台测定草珊瑚叶片的转录组，对经过滤和Trinity组装得到的unigene进行生物信息学分析。结果 共获得了75 862个unigenes，平均长度980 bp，其中42 369个unigenes在7大公共数据库中得到成功注释，占总基因数的55.85%。21 801个unigenes被注释于细胞组分、分子功能和生物学过程3大类共55个GO条目京都基因与基因组百科全书（Kyoto encyclopedia of genes and genomes，KEGG）富集到2条可能与药效物质形成密切相关的通路，分别是萜类和聚酮化合物的代谢和其他次生代谢物生物合成。通过进一步挖掘发现，其中47个unigenes可能参与萜类化合物骨架生物合成，14个unigenes可能参与倍半萜类化合物生物合成，62个unigenes可能参与黄酮类化合物生物合成。另外，转录组序列中共检测到19 690个SSR位点，其中二核苷酸重复类型所占比例最高，达到了46.63%；针对所有的SSR位点，共设计出11 209对引物。结论 很好地扩展了草珊瑚的转录组信息，为进一步解析草珊瑚活性成分生物合成途径提供了基因资源，促进草珊瑚分子育种的研究。]]> 2024/7/19 14:28:38 97true 目的 建立曼地亚红豆杉Taxus × media曲指纹图谱，对曼地亚红豆杉曲质量控制和资源开发提供科学依据。方法 采用HPLC法建立45批曼地亚红豆杉曲的指纹图谱，通过对照品比对，对共有峰进行指认，确定并建立7种有效成分含量的测定方法。在指纹图谱基础上，结合聚类分析、主成分分析及正交偏最小二乘法-判别分析等筛选出不同发酵程度曼地亚红豆杉曲间差异性标志物。结果 45批曼地亚红豆杉共有32个共有峰，指认了18种成分，相似度均大于0.9。通过聚类分析将不同发酵程度曼地亚红豆杉曲分为5类，主成分分析提取了4个主成分；综合分析筛选10-脱乙酰基巴卡亭Ⅲ、巴卡亭Ⅲ、三尖杉宁碱、紫杉醇、7-表紫杉醇、银杏双黄酮、金松双黄酮作为曼地亚红豆杉曲的质控成分，质量分数范围分别为0.071 5～0.123 7、0.124 5～0.117 1、0.113 5～0.126 1、0.122 5～0.162 7、0.071 0～0.089 3、0.809 1～1.110 2、1.003 1～1.994 8 mg/g。结论 建立的指纹图谱及多成分含量测定方法专属性强，稳定，可靠，为曼地亚红豆杉曲的质量控制及资源开发提供参考。]]> 2024/7/19 14:28:38 96true 目的 基于颜色-特征成分关联分析及网络药理学探讨金银花Lonicerae Japonicae Flos中潜在的质量标志物（quality markers，Q-Marker）。方法 收集山东、河南和河北3个产地共30批金银花样品，建立金银花HPLC特征图谱方法，得到金银花中的非挥发性特征成分，将其与实验室前期得到的含量较高、具有产地特异性的挥发性成分相结合，作为金银花潜在的Q-Marker候选物；采用色彩分析仪测定金银花的颜色与Q-Marker进行相关性分析，筛选出与颜色相关的成分；结合网络药理学方法，从金银花的适应证和功效2个层面对Q-Marker候选物的药理活性进行预测，进一步确定潜在Q-Marker。结果 建立了金银花非挥发性成分HPLC特征图谱，指认了9个特征峰，结合实验室前期对挥发性成分研究结果，最终从金银花中得到了16种特征性成分；相关性分析结果表明，与金银花颜色具有显著相关性的成分有10个，包括绿原酸、当药苷、断氧马钱子苷、芦丁、(Z)-二聚断马钱苷烯醛、异绿原酸B、异绿原酸C、α-亚麻酸甲酯、正己醛、(E, E)-2,4-癸二烯醛；网络药理学研究得到11种与疾病和药效关联的Q-Marker，分别为当药苷、断氧马钱子苷、芦丁、(Z)-二聚断马钱苷烯醛、异绿原酸B、异绿原酸A、芳樟醇、肉豆蔻酸、α-亚麻酸甲酯、α-橙花醇、月桂醛。通路富集分析结果显示，这些成分主要通过丝裂原活化蛋白激酶1（mitogen-activated protein kinase 1，MAPK1）、丝裂原活化蛋白激酶激酶1（recombinant mitogen activated protein kinase kinase 1，MAP2K1）、丝裂原活化蛋白激酶14（mitogen-activated protein kinase 14，MAPK14）、肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor，TNF）等62个关键靶点作用于细胞凋亡（apoptosis）、表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor，EGFR）、松弛素（relaxin）、C型凝集素（C-type lectin receptor）、白细胞介素17（interleukin 17，IL-17）、结合免疫球蛋白E的Fc受体（Fc epsilon RI）、T细胞抗原受体（T cell receptor）等多种信号通路。将颜色和药理活性成分取交集，最终得到6种与颜色关联的Q-Marker，包括当药苷、断氧马钱子苷、芦丁、异绿原酸B、(Z)-二聚断马钱苷烯醛、α-亚麻酸甲酯。因此，为提高金银花的质量标准，可以考虑在《中国药典》标准基础上，将芦丁、异绿原酸B、α-亚麻酸甲酯、芳樟醇和肉豆蔻酸纳入金银花的质量评价体系。结论 从理论层面出发，筛选出能够体现其质量的Q-Marker，为全面控制金银花的质量提供依据，为进一步研究金银花的活性物质及其作用机制提供参考。]]> 2024/7/19 14:28:39 95true 目的 基于近红外光谱（near-infrared spectroscopy，NIRS）结合机器学习算法模型，建立山里红Crataegus pinnatifida var. major的产地溯源技术。方法 收集6个省份的91份山里红样本，采集其NIRS，应用多种机器学习算法，包括主成分分析（principal component analysis，PCA）、正交偏最小二乘法判别分析（orthogonal pmjartial least squares-discriminant analysis，OPLS-DA）、K-最近邻（K-nearest neighbor，KNN）、决策回归树（classification and regression tree，CART）、随机森林（random forest，RF）、朴素贝叶斯（naive bayes，NB）、线性判别分析（linear discriminant analysis，LDA）和神经网络（artificial neural network，ANN）算法，探讨适合山里红产地溯源的模型。结果 ANN模型的准确率和模型稳定性最优，可作为山里红产地识别的首选模型。结论 NIRS结合ANN模型是山里红产地溯源的有效手段，为山里红的产地溯源提供了科学参考。]]> 2024/7/19 14:28:39 94true 目的 建立一测多评（quantitative analysis of multi-components by single-marker，QAMS）结合化学计量学及加权逼近理想解排序（technique for order preference by similarity to ideal solution，TOPSIS）在不同产地葎草Humulus scandens药材多指标定量检测及质量差异评价中的应用方法。方法 对7省18个批次葎草样品进行回流提取，以木犀草苷、白桦脂酸为内参物，采用QAMS同时测定提取物中10种有效成分（芦丁、牡荆素、木犀草苷、大波斯菊苷、木犀草素、芹菜素、齐墩果酸、白桦脂酸、β-谷甾醇和豆甾醇），并与外标法进行比较；按《中国药典》2020年版四部方法检测浸出物、总灰分和酸不溶性灰分。采用化学识别模式和加权TOPSIS法对QAMS法计算数据和浸出物、总灰分、酸不溶性灰分检测数据进行分析，建立葎草质量差异评价模型。结果 建立了多成分QAMS定量方法，方法学验证结果良好，以木犀草苷、白桦脂酸为内参物时相对校正因子的均值可用于定量分析，同时耐用性良好，2种方法所得含量结果无明显差异。浸出物、总灰分和酸不溶性灰分检测结果稳定。18批样品聚为3类，相邻产地聚为一组；木犀草苷、豆甾醇、大波斯菊苷和齐墩果酸可能是影响葎草产品质量主要潜在标志物；加权TOPSIS法分析结果显示18批葎草质量评价贴近度（J_b）在0.244 8～0.688 4，其中S15最大（0.688 4）。结论 建立的QAMS、化学计量学及加权TOPSIS法可用于不同产地葎草中多指标定量检测及质量差异评价。]]> 2024/7/19 14:28:39 93true 目的 克隆获得丹参SmCYP76S7基因序列，并对其进行生物信息学和表达特性分析。方法 克隆获得SmCYP76S7 的cDNA及基因组DNA序列，运用生物信息学软件对该基因及其编码蛋白进行结构和理化性质分析。构建融合表达载体pEGAD-SmCYP76S7-eGFP，转化烟草后分析SmCYP76S7蛋白的亚细胞定位。利用qRT-PCR测定SmCYP76S7基因在各器官中的表达量，同时分别利用不同光质和茉莉酸甲酯（methyl jasmonate，MeJA）处理丹参幼苗和丹参毛状根，探究SmCYP76S7基因对光质和MeJA的响应。结果 SmCYP76S7基因包含2个外显子和1个1 506 bp的开放阅读框，编码501个氨基酸。该基因在根、茎、叶和花中均有表达，其中花中表达量最低。SmCYP76S7蛋白除定位于内质网外，还分布于多个细胞结构。SmCYP76S7基因的表达在红光处理和MeJA处理样品中显著上调，是典型的光和MeJA诱导基因。结论 SmCYP76S7基因是CYP76家族成员，结合其表达特性和同家族其他成员的催化活性，该蛋白很可能参与丹参酮类成分的生物合成，其具体的生物学作用值得进一步深入挖掘。]]> 2024/7/5 16:29:22 92true 目的 克隆粉防己Stephania tetrandra苄基异喹啉类生物碱生物合成途径中的细胞色素P450基因StCYP80G，进行生物信息学分析、表达载体构建和组织特异性表达分析。方法 设计特异性引物，从粉防己cDNA中克隆得到StCYP80G编码蛋白的基因序列；利用生物信息学在线工具预测StCYP80G蛋白的结构域、理化性质和跨膜区等分子特征；利用MEGA11.0对氨基酸进行多序列比对和系统进化关系分析；通过同源重组法构建含有StCYP80G基因的重组质粒；采用实时荧光定量PCR技术分析该基因在粉防己不同组织中的相对表达量。结果 StCYP80G基因开放阅读框长度为1 458 bp，编码485个氨基酸，蛋白质相对分子质量为54 770，预测其具有CYP450的保守结构域，含有跨膜结构域，可能定位在内质网上。氨基酸序列比对与系统进化树分析显示，StCYP80G与莲NnCYP80G、智利桂LsCYP80G的序列具有同源性且一致度较高，推测StCYP80G与这2条序列具有相似的功能。StCYP80G基因在粉防己叶中表达量显著高于根中。质粒序列分析结果表明，重组质粒pESC-Leu-StCYP80G构建成功。结论 StCYP80G基因的克隆、生物信息学分析、重组质粒的构建、以及组织表达特异性的研究结果，为进一步探究其在苄基异喹啉类生物碱生物合成途径中的功能奠定了基础。]]> 2024/7/5 16:29:22 91true 目的 采用多指标成分定量结合化学计量学方法对不同产地和不同采收期的桔梗Platycodon grandiflorum进行质量评价。方法 采用热浸法测定其醇溶性浸出物含量，应用超高效液相-电喷雾检测器（UPLC-CAD）法同时测定桔梗皂苷D、桔梗皂苷D₃、去芹糖桔梗皂苷D、桔梗皂苷E、去芹糖桔梗皂苷E 5个活性成分含量，揭示不同采收期桔梗化学成分含量动态积累规律。运用主成分分析法分别对不同生长年限、不同产地桔梗进行综合评价，单因素方差分析比较不同产地桔梗各指标成分含量。结果 以春季4月、秋季9～10月、三年生为桔梗的最佳采收期。主成分分析、方差分析表明不同产地桔梗中指标含量存在显著性差异，同一产地不同批次间也有区别；根据主成分分析对不同产地桔梗进行综合评分，排名靠前的产地为甘肃陇南及河南省地区，陕西商洛、安徽亳州、内蒙古赤峰产地次之，山东淄博和山西太原产地排名较后。结论 以多指标成分定量结合化学计量学建立的评价方法明确了桔梗最佳采收期，评价了不同产地桔梗的质量，为桔梗药材质量控制研究提供依据。]]> 2024/7/5 16:29:22 90true 目的 建立腺毛菊苣Cichorium glandulosum种子（菊苣子药材）和混伪品菊苣Cichorium intybus种子HPLC指纹图谱及多成分含量测定，并结合化学模式识别法对二者进行分析比较，为其资源利用开发和进一步的质量控制研究提供参考。方法 采用YMC-PACK ODS-A色谱柱，以0.2%磷酸溶液（A）-甲醇（B）为流动相梯度洗脱，体积流量为1.0 mL/min，检测波长为254 nm，柱温为40 ℃，进样量为5 μL。利用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012版）》建立19批腺毛菊苣种子和4批菊苣种子样品的HPLC指纹叠加图谱并分析相似度，通过对照品比对指认，确定化学成分并进行含量测定，使用SPSS 20.0和SIMCA-P 14.1软件进行聚类分析、主成分分析（principal component analysis，PCA）分析和正交偏最小二乘判别分析（orthogonal partial least squares discriminant analysis，OPLS-DA）分析，对不同批次样品进行质量评价。结果 建立了19批腺毛菊苣种子和4批菊苣种子HPLC指纹叠加图谱，并确定19个共有峰，通过对照品比对指认了其中8个色谱峰；建立了绿原酸、秦皮乙素、1,4-二咖啡酰奎宁酸、异绿原酸A、1,5-二咖啡酰奎宁酸含量测定方法；指纹图谱相似度在0.915～0.998；OPLS-DA分析与PCA分析结果一致，可将样品分为3组，并筛选出1,5-二咖啡酰奎宁酸、槲皮素、绿原酸、菊苣酸4个差异性成分。结论 通过HPLC指纹图谱结合化学模式识别方法，建立了一种简单可靠的菊苣子药材质量评价方法，为菊苣子药材的质量评价和资源化利用提供依据。]]> 2024/7/5 16:29:22 89true 目的 揭示远志属中6种药用植物的挥发性成分种类和差异，为远志属药用植物的快速、准确鉴别提供参考。方法 采用顶空-气相色谱-离子迁移谱（HS-GC-IMS）对远志属6种药用植物远志Polygala tenuifolia，卵叶远志P. sibirica，瓜子金P. japonica，黄花倒水莲P. fallax，小花远志P. arvensis和华南远志P. glomerata干燥根中的挥发性成分进行分析，结合主成分分析（principal component analysis，PCA）、偏最小二乘法-判别分析（partial least squares-discriminant analysis，PLS-DA）和聚类分析等化学模式识别方法，以数据可视化的形式解析远志属6种药用植物中挥发性有机物的差异性。结果 HS-GC-IMS共获得远志属6种药用植物中90个特征信号，定性鉴别出76种，包括38种醛类、10种醇类、10种酯类、9种酮类以及呋喃类等其他成分9种。其中，醇类和酮类成分数目最多的为华南远志，分别为8种和6种；醛类和酯类成分数目最多的为小花远志，分别为36种和9种。PCA、PLS-DA和聚类分析均能将远志属6种药用植物区分开来。聚类热图结果表明，筛选出的2-甲基丁酸丁酯、水杨酸甲酯等14种特征挥发性成分可作为鉴别远志属6种药用植物的标志物。结论 HS-GC-IMS技术结合化学模式识别能够鉴定及可视化远志属6种药用植物中的挥发性成分及其差异，为远志属不同药用植物的区分和鉴定提供参考。]]> 2024/7/5 16:29:22 88true 目的 建立重楼及其混伪品的近红外光谱（near-infrared spectroscopy，NIRS）快速鉴别方法。方法 采用NIRS仪获取样品光谱数据，结合主成分分析（principal component analysis，PCA）、正交偏最小二乘判别分析（orthogonal partial least squares discriminant analysis，OPLS-DA）、线性判别分析（linear discriminant analysis，LDA）、人工神经网络机器学习算法（artificial neural network，ANN）和二维红外光谱（2D-IR），探讨NIRS技术在重楼及其混伪品快速鉴别的可行性。结果 重楼及其混伪品的NIRS光谱吸收峰的峰形整体相似，但在峰数和峰强方面均存在一定差异。PCA和OPLS-DA判别模型可将重楼及其混伪品区分，但模型预测能力差（Q²＜0.5）；LDA模型可将滇重楼与其他物种进行区分，但无法区分七叶一枝花的部分样本；ANN模型识别准确率达100.0%，不同物种的2D-IR图谱在5 897～5 600 cm⁻¹和4 497～4 200 cm⁻¹差异显著。结论 重楼及其混伪品的化学信息差异明显，不可混用。NIRS结合ANN模型或2D-IR方法可用于重楼及其混伪品的快速鉴别。]]> 2024/7/5 16:29:22 87true 目的 鉴定远志Polygala tenuifolia bZIP基因，为远志抗逆性改良及次生代谢调控研究提供参考。方法 基于远志三代全长转录组数据库，采用生物信息学方法对远志bZIP基因家族成员进行鉴定和分析，并利用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）技术分析其在不同组织及处理中的表达特性。结果 共鉴定得到27个含有特征性保守结构域的PtbZIP基因，编码蛋白质的氨基酸数量为143 aa（PtbZIP24）～846 aa（PtbZIP9），相对分子质量范围为16201.52～92932.30，等电点（pI）介于4.59～9.69，其中25个家族成员为不稳定蛋白，所有家族成员均为亲水性蛋白。蛋白二级结构主要由α螺旋和无规卷曲构成，均无信号肽，存在多种互作现象。进化树分析将27个PtbZIP蛋白分为A、B、C、D、F、G、I、S 8个亚组，其中G亚组含有PtbZIP家族成员数量最多（共有8个），占总数的29.63%，没有PtbZIP基因被归类到E和K组。PtbZIP家族基因的密码子偏好性较弱，适应性较弱。表达模式分析显示，PtbZIP4/15在叶中的表达量最高，茎和根次之；PtbZIP8/24在茎中的表达量最高，叶和根次之；PtbZIP1/17的表达量为根＞叶＞茎；其余21个的表达模式均为根＞茎＞叶。qPCR结果表明，PtbZIP26基因受脱落酸、壳聚糖的诱导，且能显著应答干旱和盐胁迫。结论 鉴定了远志bZIP家族基因及其分子特征，为进一步研究PtbZIP基因在调控远志发育及次生代谢物合成方面的生物学功能奠定基础。]]> 2024/6/21 14:53:13 86true 目的 以牛茄子Solanum capsicoides新鲜叶片为材料，对叶绿体基因组序列进行组装、注释和分析，探究牛茄子的序列特征和同属其他物种的系统发育关系。方法 基于Illumina HiSeq高通量测序，获得牛茄子完整叶绿体基因组序列，利用生物信息学方法进一步对其功能及特征、密码子偏好性、IR区域边界、核苷酸多样性、系统发育关系进行分析。结果 牛茄子叶绿体基因组全长为155 465 bp，为典型的四分体结构，总GC含量为37.85%，其中大单拷贝区、小单拷贝区和反向重复序列的长度分别为88 265、18 462、24 369 bp；共编码131个基因，包括86个蛋白编码基因、37个tRNA基因、8个rRNA基因。简单重复序列检测表明，叶绿体基因组包括51个SSR位点，其中以A和T组成的单核苷酸重复次数最多，占45.1%。密码子偏好性分析表明，亮氨酸是使用频率最高的氨基酸，AUU是使用次数最多的密码子，密码子偏向使用A/U结尾。属内叶绿体基因组比较分析显示，IR边界区域相对保守，但仍存在部分基因扩张和收缩等现象；核苷酸多样性分析获得了4个高突变热点：trnQ-psbK、psbF-psbE、clpP、ycf1，可作为物种鉴定和遗传多样性研究的潜在特征。系统发育分析显示牛茄子和喀西茄的亲缘关系更近，存在姐妹关系。结论 牛茄子叶绿体基因组的组装和系统发育分析，为茄属植物的分类和群体间遗传多样性的研究提供理论依据。]]> 2024/6/21 14:53:13 85true 目的 研究药食同源植物丝瓜Luffa cylindrica MYB（LcMYB）基因转录因子家族成员的结构和功能，鉴定参与抗褐化作用的主要成员及其作用机制。方法 基于Pfam数据库及NCBI保守结构域分析，对丝瓜全基因组水平MYB转录因子进行鉴定。通过Expasy、MEME等在线工具分析LcMYB转录因子家族蛋白理化性质、顺式作用元件及保守结构域。然后利用MEGA软件构建系统发育树，分析丝瓜与拟南芥、苹果、番茄、茄子及马铃薯等植物MYB蛋白的系统发育关系。结合2个褐化敏感程度不同的丝瓜转录组，筛选了丝瓜褐化相关的关键MYB转录因子及其靶基因。结果 全基因组水平共鉴定到449个具有相似基因结构及保守基序的MYB基因，可聚类为4个亚家族（R1_MYB、R2R3_MYB、R3_MYB和R4_MYB），并在正反链均存在可能的顺式调控元件。靶基因及基因表达分析结果显示多个MYB及其靶基因尤其是多铜氧化酶相关基因可能在鲜切丝瓜的不同褐化阶段起重要的作用，是丝瓜褐化的关键调节因子。结论 系统鉴定了LcMYB家族基因，并鉴定了可能参与丝瓜褐化的MYB基因及其靶基因，有助于进一步了解和丰富LcMYB基因家族的生理功能，并为进一步解析果实褐化调控机制，提高果实品质提供了候选基因。]]> 2024/6/21 14:53:13 84true 目的 基于遗传、环境因子与丹参Salvia miltiorrhiza品质性状之间的相关性，探究影响丹参品质的主导因子。方法 收集不同产区22个丹参居群（每个居群3个单株）、种植土壤以及气候因子数据。基于简单重复序列间区（inter-simple sequence repeat，ISSR）和目标起始密码子多态性（start codon targeted polymorphism，SCoT）标记分析了丹参不同居群遗传多样性和亲缘关系，利用高效液相色谱法（HPLC）测定了不同产区丹参中隐丹参酮、丹参酮Ⅰ、丹参酮Ⅱ_A、丹酚酸B含量。利用原子吸收分光光度法、火焰光度计测定法、电感耦合等离子体原子发射光谱法（ICP-OES）等技术测定了土壤的理化指标及矿质含量。结果 ISSR和SCoT标记分析结果表明，四川丹参居群单独聚为一类，山东丹参居群分布在不同的聚类组中。经相关性分析，气压、风速与丹参酮类物质的含量呈显著正相关，日降水量≥0.1 mm日数与丹参酮Ⅰ含量以及等位基因数（number of alleles，N_a）、有效等位基因数（effective number of alleles，N_e）、Nei氏基因多样性指数（Nei’s gene diversity index，H）、香农信息指数（Shannon information index，I）等遗传指数呈显著负相关；水汽压、相对湿度、日降水量≥0.1 mm日数等与丹酚酸B含量呈显著正相关，与N_a、N_e、H、I显著负相关；日照时数与丹酚酸B含量呈显著负相关，与N_a、N_e、H、I显著正相关。隐丹参酮含量与土壤质地、矿质元素Cu、Mg含量显著相关；丹酚酸B含量与土壤有机质、K、碱解N、速效K含量显著相关。结论 遗传与环境因子互相作用影响了丹参的品质。四川丹参居群间遗传变异小，山东丹参遗传变异大，降水、湿度、日照是影响丹参遗传变异以及丹参酮和丹酚酸B积累的主要气候因子。土壤质地能影响隐丹参酮的积累，N肥能促进丹酚酸B积累。]]> 2024/6/21 14:53:13 83true 目的 基于性状电子检测技术，结合多元分析算法，建立不同产地薏苡仁的快速鉴别方法。方法 使用CM-5分光测色仪测定薏苡仁的色度值，建立决策树（decision tree，DT）模型、k最邻近算法（k-nearest neighbor，KNN）模型和贝叶斯（Bayes）判别模型。其次，根据超快速气相电子鼻检测气味成分，建立不同产地薏苡仁的判别因子分析（discriminant factor analysis，DFA）模型及热图，探究不同产地薏苡仁的气味信息差异。同时，采用偏最小二乘法判别分析（partial least squares discrimination analysis，PLS-DA）模型探究不同产地的差异标志物。最后，将薏苡仁表面颜色与内在气味成分进行相关性分析。结果 2-丙烯酸、2-甲基丁醛、甲苯、丙醛可以作为区分不同产地薏苡仁的主要气味标志物，丁二酮、2,3-乙酰基丙酮、3-己醇等多种气味成分与L^*、a^*、b^*值存在显著相关性。结论 电子眼联合超快速气相电子鼻技术能够快速、准确鉴别不同产地的薏苡仁，该方法对于多产地中药的鉴别和质量控制具有借鉴意义。]]> 2024/6/21 14:53:13 82true 目的 建立不同产地白屈菜Chelidonium majus的HPLC指纹图谱及多指标含量测定方法，综合评价不同产地白屈菜药材质量，为其进一步研究和开发提供依据。方法 采用Agilent Extend C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），流动相为0.1%磷酸水溶液（A）-乙腈（B），梯度洗脱，体积流量1.0 mL/min，检测波长284 nm，柱温25 ℃，进样量10 μL。采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012版）》建立4个主产地19批次白屈菜药材的HPLC指纹图谱并分析相似度。使用Origin2022软件进行聚类分析（hierarchical cluster analysis，HCA）、SIMCA-14.1软件进行主成分分析（principal component analysis，PCA）和偏最小二乘法-判别分析（partial least squares-discriminant analysis，PLS-DA）。通过对照品比对指认指标成分并定量测定，结果采用化学模式识别、箱线图以及熵权TOPSIS法进行综合评价。结果 19批次白屈菜HPLC指纹图谱共匹配出16个共有峰，指认出白屈菜碱、盐酸黄连碱、紫堇碱、盐酸血根碱和白屈菜红碱。指纹图谱相似度范围为0.745～0.983。HCA将19批白屈菜分为4类；PCA得到5个主成分的累积方差贡献率为84.758%；PLS-DA表明盐酸血根碱和白屈菜红碱等5个成分是不同产地白屈菜药材质量差异的标志性成分。白屈菜碱、盐酸黄连碱、紫堇碱、盐酸血根碱、白屈菜红碱质量分数分别为0.658～1.547、0.718～2.577、0.029～0.108、0.095～0.527、0.069～0.253 mg/g。箱线图与熵权TOPSIS法评价均表明辽宁和陕西产地的白屈菜药材综合质量较优。结论 所建立的白屈菜药材HPLC指纹图谱方法分离度好，操作简单；含量测定方法具有较好的稳定性和重复性，可为白屈菜药材质量控制与进一步研究提供参考依据。]]> 2024/6/21 14:53:13 81true 目的 提高黄檀属的物种鉴别成功率，并将机器学习方法与传统的基于距离/系统发育树的方法进行比较，筛选最优的ITS条形码分析方法。方法 所使用的黄檀属物种ITS序列来自实验获得的3条以及从NCBI下载的399条共96个物种。以条形码ITS作为分子标记，对比距离法、系统发育树法及机器学习方法在黄檀属物种的鉴别成功率。结果 在基于机器学习方法的分析中，黄檀属物种的平均鉴别成功率为39.59%，其中BLOG能识别出42个黄檀属物种，其正确序列分类占比为95.75%。另外，SMO、Naïve Bayes、JRip、J48能够识别出34个物种，分别获得了79.10%、58.71%、72.64%、76.37%的正确序列分类占比。基于系统发育树法与距离法的分析分别获得28.13%和36.46%的鉴别成功率。结论 基于机器学习的黄檀属ITS条形码基原识别比距离法/系统发育树法拥有更高的鉴别成功率和社会经济效率。建议优先利用基于ITS条形码的机器学习方法对黄檀属物种进行基原识别。]]> 2024/6/5 18:49:08 80true 目的 探究百合属Lilium药用植物叶绿体基因组密码子使用偏性及影响因素，为百合属药用植物育种提供理论参考。方法 使用CodonW1.4.2、CUSP、SPSS等软件分析9种百合属药用植物的密码子偏好性。结果 9种百合属植物密码子不同位点的GC含量均小于0.5，且GC1＞GC2＞GC3；其有效密码子数值均大于45。共筛选到21个最优密码子，其中有20个以A/U碱基结尾。PR2-plot分析、ENC-plot分析和中性绘图分析显示，百合属叶绿体基因组密码子偏好性主要受自然选择影响，同时也受突变因素影响。叶绿体蛋白编码序列的系统发育树和相对同义密码子使用度值的聚类分析结果，均支持渥丹Lilium concolor从钟花组独立归并到卷瓣组。结论 9种百合属植物叶绿体基因组密码子偏好性较弱，自然选择是影响密码子偏好性形成的主要因素，渥丹归入卷瓣组更合理。]]> 2024/6/5 18:49:08 79true 目的 研究不同生长年限巴戟天Morinda officinalis根部蒽醌类化合物的含量差异及生物合成相关基因。方法 采用HPLC测定1年生和6年生巴戟天根中蒽醌类化合物成分，并进行比较转录组分析，采用qRT-PCR验证基因表达结果。结果 HPLC检测结果显示在6年生根中蒽醌类物质显著增加，通过比较转录组分析，从1年生和6年生巴戟天的根中筛选到8 619条差异表达基因，KEGG分析表明差异基因主要富集在各种次生代谢物的生物合成、苯丙素生物合成、泛醌和其他萜类醌生物合成等通路中。此外，共鉴定到13条蒽醌生物合成途径相关的差异表达Unigenes，其中ICS、SK、CS、DHNA-CoA synthase均在6年生根中上调表达，而DXS、DXR、DAHPS、IDH均下调表达，DHQD/SDH既有上调表达的又有下调表达的Unigenes。进一步选择6个候选基因进行qRT-PCR验证，验证结果与转录组数据一致。结论 为鉴别参与巴戟天蒽醌生物合成的相关基因提供参考，为后期进一步深入研究蒽醌类生物合成的累积规律分子机制提供基础数据。]]> 2024/6/5 18:49:09 78true 目的 建立18个品种苦荞麦Fagopyrum tataricum指纹图谱，并以芦丁为内标物，采用一测多评法（quantitative analysis of multi-components by single-marker，QAMS）同时检测苦荞麦中葫芦巴碱、表儿茶素、山柰酚-3-O-芸香糖苷、槲皮素、山柰酚和大黄素含量，以期对不同产地苦荞麦进行质量控制。方法 采用超高效液相-三重四级杆液质联用技术（UPLC-QQQ-MS/MS），首次以一级全扫（Full-MS）和多反应监测（multiple reaction monitoring，MRM）2种采集模式相结合的方式建立UPLC-QQQ-MS/MS指纹图谱共有模式，采用夹角余弦法进行相似度评价。以ThermoFisher Accucore^TM C₁₈色谱柱（100 mm×3.0 mm，2.6 μm）；流动相为乙腈-0.1%甲酸水溶液，体积流量0.3 mL/min，柱温30 ℃，梯度洗脱。以芦丁作为内标物，建立苦荞中其他6种指标成分的相对校正因子（f_s/x），从而计算各待测成分的量，并将QAMS计算值与外标法（external standard method，ESM）实测值进行比较，以验证QAMS的准确性和方法适宜性。运用聚类分析、主成分分析、加权分析等化学计量学分析手段建立苦荞麦综合质量优劣评价方法。结果 建立了苦荞麦的UPLC-QQQ-MS/MS指纹图谱，在Full-MS扫描模式下标定了15个共有峰，各品种间相似度在0.399～0.973；同时以MRM扫描模式结合对照品对其中芦丁等7种指标成分进行了峰指认。以芦丁为内标物，与葫芦巴碱、表儿茶素、山柰酚-3-O-芸香糖苷、槲皮素、山柰酚和大黄素6种有效成分的建立的f_s/x重现性良好，分别为0.283、1.338、0.654、1.162、8.509、0.709。且采用QAMS测定的18个品种苦荞麦中7种指标成分含量与ESM的实测值之间无显著性差异（P＞0.05）。化学计量学分析结果表明，芦丁、山柰酚-3-O-芸香糖苷和山柰酚是影响苦荞麦质量的主要潜在标志物，质量排序相对靠前的苦荞麦产区主要集中在海拔高、光照强、昼夜温差大的中国西南地区，而指纹图谱相似度差异较明显的荞杂2号、综甜2号和通荞1号排在后3位。结论 所建立的指纹图谱结合QAMS简便可行，结果准确，化学计量学分析方法全面客观，可为苦荞麦品质评价和质量控制提供参考和依据。]]> 2024/6/5 18:49:09 77true 目的 综合评价乌拉尔甘草Glycyrrhiza uralensis和光果甘草G. glabra的质量，通过化学计量学寻找质量差异标志物并建立快速判别乌拉尔甘草和光果甘草模型。方法 建立甘草药材液相指纹图谱，确立共有峰，共有峰数据结合模糊物元模型与偏最小二乘法判别分析（partial least squares discriminant analysis，PLS-DA）化学计量学方法进行质量综合评价及质量差异标志物筛选。基于近红外光谱建立不同的快速判别模型，通过对比筛选出最佳的快速判别模型。结果 模糊物元分析表明乌拉尔甘草与光果甘草存在显著差异；经PLS-DA，结果表明甘草酸铵、甘草素、甘草苷为乌拉尔甘草和光果甘草的差异标志物；光谱经SG预处理，iPLS波段筛选所建立的决策树判别模型，精确率为0.88、准确率为0.88、F1（精确率和准确率的调和平均值）为0.88。结论 乌拉尔甘草与光果甘草之间存在显著差异。通过近红外光谱技术建立的判别模型，为快速区分这2种基原甘草提供了有效手段，有助于提升甘草药材质量控制水平。]]> 2024/6/5 18:49:09 76true 目的 分析地黄Rehmannia glutinosa中的次生代谢产物在地黄根际土壤中的分布特征及其对根际土壤细菌群落特征的影响，为揭示地黄连作土壤形成过程中根系分泌物与根际微生物之间互作机制的研究提供理论参考。方法 以7、8、10月金九地黄根际土壤为研究对象，采用HPLC分析3个时期地黄根际土壤中苯乙醇苷类、环烯醚萜苷类及酚酸类次生代谢产物的分布；通过llumina MiSeq高通量测序法分析根际土壤中细菌群落的结构特征；利用SIMCA 14.1、SPSS 27等软件分析3个生长时期根际土壤中次生代谢产物及细菌群落结构的差异性，筛选出引起两者差异性的主要次生代谢产物和标志性菌群，并结合Canoco 5.0软件分析两者之间的相关性。结果 地黄3个生长时期根际土壤中均检测到6种苯乙醇苷类成分、3种环烯醚萜苷类成分及5种酚酸类成分，各单体成分的含量变化差异较大，其中香豆酸、异类叶升麻苷、红景天苷、香草酸为主要差异物质；地黄根际土壤中优势细菌的相对丰度随生育进程而发生变化，门水平及属水平上的放线菌门、厚壁菌门、绿弯菌门、不明蓝藻菌属、Gaiella的相对丰度逐渐降低，酸杆菌门、拟杆菌门、浮霉菌门、疣微菌门、热酸菌属、不明酸杆菌属的相对丰度则逐渐增加；相关性分析及冗余分析表明根际土壤中次生代谢产物与细菌群落结构之间存在着一定相关性，其中香豆酸、对羟基苯甲酸对根际细菌群落结构的影响较大。结论 地黄中的主要次生代谢产物在地黄根际土壤中均可以检测到，而且对根际土壤细菌群落的结构特征产生了一定影响。]]> 2024/5/20 15:19:51 75true 目的 研究梅Prunus mume的花色及花中黄酮类成分特征，揭示其遗传多样性及亲缘关系，为梅种质资源鉴定和新品种培育提供依据。方法 以52份梅花样品为材料，分别采用红绿蓝（red green blue，RGB）色值法和化学法调查花色特征，采用高效液相色谱法（HPLC）评估梅花的6种黄酮类成分特征，利用ISSR分子标记技术探究梅的遗传多样性。结果 RGB色值和亮度指数表明“乌梅帝”花色最暗，种质资源圃花色最亮。“乌梅帝”植株和“乌梅后”植株花均含有6种黄酮，部分“乌梅帝”和“乌梅后”区域梅花则未检测出金丝桃苷、山柰酚及异鼠李素。尽管主成分及相关分析结果表明梅花色与其黄酮的含量无内在关系，但其成分间存在相关性，梅花的异槲皮素与芦丁和金丝桃苷含量呈显著正相关，异槲皮素与槲皮素呈显著正相关。槲皮素与山柰酚和异鼠李素呈显著正相关，山柰酚与异鼠李素呈显著正相关。ISSR标记结果表明3个调查区域间存在着亲缘关系，资源圃部分植株可能源自“乌梅帝”和“乌梅后”区，“乌梅后”和“乌梅帝”区存在相互移栽的情况。结论 基于RGB色值法和化学法预测梅花黄酮含量仍有待优化，但进化树可将“乌梅帝”及“乌梅后”准确聚类。ISSR分子标记结果证实“乌梅帝”“乌梅后”及资源圃植株的亲缘关系，梅在群体水平上遗传多样性较高，且各调查区域间存在频繁遗传交流。]]> 2024/5/20 15:19:51 74true 目的 对喜马拉雅紫茉莉不同居群进行形态学研究，揭示其表型变异特征，为其种质收集、利用和保护、品种选育等提供依据，并探讨其种下分类问题。方法 采用野外调查取样，对28个野生居群叶、花的18个性状进行测量和统计分析。结果 18个性状的变异系数在12.06%～51.01%，花梗长变异最大，雄蕊数目变异最小。各性状在不同居群间、不同省区间差异均极显著；主成分分析显示，叶长宽比、叶形、花梗长、叶长、总苞裂片宽、叶柄长、花梗及总苞腺毛黏性7个性状是造成居群间表型差异的主要因素；相关性分析表明，喜马拉雅紫茉莉多个性状之间存在显著的相关性。经度和海拔对性状的影响较大；聚类结果显示，28个居群可分为3个类群，聚类结果与各居群的地域分布和地理距离并无关联。结论 喜马拉雅紫茉莉在叶和花的形态上具有丰富的表型变异，种质资源的保存要依据变异规律进行广泛的采样。目前用于喜马拉雅紫茉莉种下等级分类鉴定的性状并不可靠。]]> 2024/5/20 15:19:51 73true 目的 基于关键氨基酸的含量差异，通过近红外技术实现淡水与海水珍珠的快速检测。方法 采用氨基酸分析仪考察108批次海水珍珠与淡水珍珠氨基酸种类与含量差异，依据氨基酸比较分析筛选关键氨基酸。针对关键氨基酸优化近红外定量模型，确立近红外光谱技术珍珠快速检测模型。结果 研究发现天冬氨酸（Asp）和甘氨酸（Gly）含量在淡水珍珠与海水珍珠有显著差异，且两者含量范围无交集。通过珍珠近红外光谱与Asp、Gly含量化学计量学拟合对珍珠样品进行检测，所得结果与传统的氨基酸分析技术测定结果一致。结论 基于化学计量学手段对珍珠的定量分析，结果准确可靠，结合近红外光谱技术对不同基原珍珠进行快速检测，为珍珠的质量控制提供方法依据。]]> 2024/5/20 15:19:51 72true 目的 探索不同采收期黄芩Scutellaria baicalensis外观性状与内在成分含量之间的关联性，为黄芩的“辨状论质”提供理论依据。方法 通过分光测色仪及游标卡尺测定黄芩外观性状指标（药材粉末颜色、根长、根粗），采用HPLC测定黄芩12种黄酮类成分（野黄芩苷、野黄芩素、黄芩苷、木犀草素、白杨素-7-O-葡萄糖醛酸苷、汉黄芩苷、芹菜素、去甲汉黄芩素、黄芩素、汉黄芩素、白杨素、千层纸素A）含量。运用皮尔逊相关性分析和线性回归分析黄芩外观性状与有效成分含量之间的关系。并对黄芩“外观性状指标-成分含量-产量”进行主成分分析。结果 黄芩外观性状与有效成分含量有相关性，但无显著性回归关系。黄芩色黄明者，黄酮苷类成分含量相对较高；色暗、根长、根粗者，黄酮苷元类成分含量相对较高。陕西省淳化地区黄芩药材秋季较适宜采收期为“寒露”节气前后。结论 黄芩饮片的色泽是其内在质量的具体体现，黄芩外观性状在一定程度上可作为快速评价黄芩药材质量的方法，为黄芩“辨状论质”提供理论依据，以指导黄芩的采收与药材优劣辨别。]]> 2024/5/20 15:19:51 71true 目的 探讨毛花猕猴桃Actinidia eriantha可培养内生真菌的菌群结构、多样性、分布规律及其活性，为内生真菌资源利用提供依据。方法 对毛花猕猴桃3个部位（根、茎、叶）内生真菌进行分离、纯化与ITS分子鉴定，分析其菌群结构、多样性与分布规律；采用拟南芥共培养、病原菌平板对峙的方法，对内生真菌进行促生与病原菌拮抗活性筛选。结果 共分离得到2 446株内生真菌，分为156个形态型，ITS分子鉴定为49个分类单位，归属于真菌界3门5纲10目14科18属，其中子囊菌门真菌数量最多，占比94.89%；根、茎、叶共有菌30种，其中Trichoderma spirale是根的特有种，Bionectria ochroleuca是茎的特有种；Shannon-Wiener（H’）以茎多样性指数最高，Simpson指数（D）以叶多样性指数最高；筛选得到显著促拟南芥生长活性的内生真菌AE16，鉴定为Clonostachys sp.，其共生拟南芥鲜质量增长率为（37.13±10.35）%；具有显著抑菌活性的内生真菌11株（木霉属10株，白僵菌属1株），其中AE175（Trichodermasp.）抑制效果最好，相对抑菌率为（87.59±9.36）%。结论 畲药毛花猕猴桃内生真菌资源丰富，筛选得到的活性菌株为毛花猕猴桃内生真菌资源开发和利用提供依据。]]> 2024/5/20 15:19:51 70true 目的 克隆粗茎秦艽Gentiana crassicaulis的裂环马钱苷合酶（secologanin synthase，SLS）基因GcSLS，分析其理化性质、系统进化关系、组织表达特性，为进一步研究植物萜类化合物生物合成通路中的关键酶及其作用机制提供基础资料。方法 依据粗茎秦艽转录组数据，注释、筛选并克隆GcSLS基因；使用生物信息学工具分析其编码的氨基酸序列、结构域等，预测其编码蛋白的理化性质；使用MEGA11软件分析进化关系，并利用荧光定量PCR检测GcSLS基因在不同组织中的相对表达水平。结果 从粗茎秦艽中成功克隆获得GcSLS基因，其开放阅读框（open reading frame，ORF）序列全长共计1 566 bp，编码521个氨基酸，蛋白质相对分子质量为59 590，为碱性亲水稳定蛋白，具有细胞色素P450的保守域并含有1处跨膜结构。荧光定量PCR结果显示，GcSLS在粗茎秦艽根和花中的表达量显著高于在叶和茎中的表达量；且该基因受茉莉酸甲酯（methyl jasmonate，MeJA）诱导后表达水平显著上调。结论 获得粗茎秦艽GcSLS序列基础信息，分析序列特征及表达模式，可为深入探究GcSLS在萜类化合物合成通路中的功能提供科学资料。]]> 2025/5/7 20:27:36 69true 目的 克隆茅苍术Atractylodes lancea细胞分裂素羟化酶基因（AlCYP735A，GenBank：PP839072.1），对其进行生物信息学分析、组织特异性表达分析以及构建原核表达载体对该蛋白进行重组表达。方法 从茅苍术cDNA中克隆AlCYP735A序列全长，利用生物信息学方法分析其编码蛋白的理化性质，qRT-PCR检测其组织特异性表达情况，连接pET28a-mbp表达载体转入大肠杆菌BL21进行重组蛋白的表达，并在烟草叶片中对其进行了亚细胞定位。结果 AlCYP735A基因的开放阅读框（open reading frame，ORF）长度为1 566 bp，编码521个氨基酸；拥有1个P450基因保守域，相对分子质量为59 328.6，等电点为9.13，有信号肽，属于分泌蛋白。qRT-PCR结果表明其根茎中表达量最高，与其他组织器官具有较明显差异。重组蛋白mbp-AlCYP735A获得可溶性表达，大小符合106 700的预期。烟草亚细胞定位显示其定位在叶绿体。结论 成功克隆AlCYP735A的基因，完成生物信息学分析、探明组织特异性表达情况和在烟草中的亚细胞定位，重组蛋白在原核表达系统中获得了可溶性表达，为后续该基因的功能验证提供了条件。]]> 2025/5/7 20:27:36 68true 目的 研究秃叶黄檗Phellodendron chinense var. glabriusculum不同组织部位异喹啉类生物碱成分含量差异及生物合成相关基因。方法 采用高效液相色谱法对秃叶黄檗根皮、茎皮、叶进行含量测定，结合转录组测序筛选关键基因，探讨秃叶黄檗异喹啉生物碱合成机制。结果 秃叶黄檗中异喹啉类生物碱在根皮、茎皮与叶中含量差异显著。转录组测序组装获得85 908条单基因（Unigenes），其中49 114（57.17%）条被成功注释，参与异喹啉类生物碱成分合成的38个差异表达基因被成功鉴定，并与小檗碱等异喹啉类成分进行相关性分析，显示8个基因与小檗碱含量高度正相关，其中主要包括CNMT、NCS、TDC、BBE、TYNA等基因，这些基因可能对于小檗碱基因的合成积累具有重要影响作用，对差异表达基因进行qRT-PCR，结果与转录组数据表达模式具有一致性。结论 揭示了秃叶黄檗不同组织部位异喹啉生物碱合成通路相关基因的显著差异表达模式，为进一步研究异喹啉生物碱生物合成调控分子机制提供线索。]]> 2025/5/7 20:27:36 67true 目的 采用多指标成分定量结合化学计量学对不同产地野生白鲜Dictamnus dasycarpus皮样品进行综合质量评价并建立产地识别模型。方法 采用高效液相色谱法同时测定野生白鲜皮中汉黄芩素、柠檬苦素、白鲜碱、黄柏酮、梣酮5种活性成分的含量。结合相关性分析、差异性分析及主成分分析对不同产地野生白鲜皮进行质量评价；利用系统聚类、正交偏最小二乘法-判别分析及Fisher线性判别建立野生白鲜皮的产地识别模型。结果 不同产地野生白鲜皮化学成分含量测定结果存在差异，可通过5种成分含量进行区分。其中内蒙古的样品质量较好，辽宁的样品其次，吉林的样品质量稍差。利用系统聚类可初步对产地进行识别，但辽宁仍有部分样品无法准确识别；正交偏最小二乘法-判别分析可准确将样品产地进行分类，Fisher线性判别模型结果可准确判别未知产地的野生白鲜皮样品，准确率为100%。结论 以多指标成分定量结合化学计量学建立的评价方法明确了野生白鲜皮质量较好的产地，评价了不同产地野生白鲜皮的质量，建立的野生白鲜皮产地识别模型准确可靠，为野生白鲜皮质量控制及产地快速鉴别提供依据。]]> 2025/5/7 20:27:36 66true 目的 筛选得到能够有效防治玄参Scrophularia ningpoensis叶斑病的内生真菌，并探讨其作用机制。方法 以前期分离得到的玄参内生真菌为候选菌株，玄参叶斑病病原菌草茎点霉（Phoma herbarum，PH）为指示菌，采用平板对峙法筛选内生真菌拮抗菌株；采用活体叶片接种试验，考察内生真菌对玄参叶斑病的活体防治效果，测定玄参过氧化氢酶（catalase，CAT）防御酶、活性氧、水杨酸（salicylic acid，SA）等生理指标。采用ITS分子序列扩增对生防菌株进行菌种鉴定。结果 72株受试内生真菌中，共有28株对草茎点霉菌存在显著抑制作用，其中抑菌率最高的菌株为D90，抑菌率为（83.30±3.00）%。共有4株内生真菌对玄参活体叶斑病具有显著防治效果，分别为D1、D3、D18和D90，其病斑面积占比分别为（20.53±0.32）%、（2.07±0.05）%、（5.15±0.12）%和（1.92±0.08）%，其中D90的防治效果最好，防效为54.70%；ITS分子鉴定D90为果生刺盘孢菌Colletotrichum fructicola。接种D90后，玄参CAT酶活性得到显著提升，在接种第4、6天，PH＋D90处理组CAT酶活性显著高于叶斑病模型组，同时，D90显著提升玄参超氧阴离子自由基、木质素含量水平积累，但降低了玄参SA、NO的含量。结论 内生真菌D90能有效防治玄参叶斑病，该作用可能与诱导玄参CAT酶活性提升、活性氧的迸发及木质素含量积累有关。]]> 2025/5/7 20:27:36 65true 目的 研究三七Panax notoginsengDOG（PnDOG）基因家族结构特征和表达模式及其在三七种子后熟休眠和萌发的作用机制。方法 基于三七的全基因组和转录组数据，利用生物信息手段分析PnDOG家族的理化性质、基因结构、系统发育关系、保守结构域、顺式作用元件和表达模式；探讨了外施赤霉素（gibberellins，GA）和脱落酸（abscisic acid，ABA）激素对三七种子的影响，以及PnDOG基因家族对这些外源激素的响应机制。结果 PnDOG基因家族包含16个成员，不均匀地分布在8条染色体上。PnDOG基因都含有外显子，编码216～514个氨基酸，均为亲水性蛋白，亚细胞定位预测显示均位于细胞核中。系统进化将PnDOG基因分为3个亚组，不同亚组成员的基因结构存在差异。共线性分析显示，串联重复是PnDOG基因扩增的主要驱动因素。启动子顺式作用元件分析显示，PnDOG基因的启动子区含有大量激素响应、胁迫响应以及少量胚发育响应等元件。基因本体（gene ontology，GO）和京都基因与基因组百科全书（Kyoto encyclopedia of genes and genomes，KEGG）分析显示，PnDOG基因可能在非生物应激和激素诱导中起作用。基因表达分析和qRT-PCR分析显示，PnDOG基因在三七不同组织中均有表达，并具有明显的组织特异性。部分PnDOG基因在三七种子不同后熟阶段和激素处理下的表达量均存在显著差异。发现PnDOG1和PnDOG14在种子中高表达且受激素强烈诱导，其表达量随后熟时间的增加逐渐下降，推测PnDOG1和PnDOG14是调控三七种子后熟休眠的关键基因。结论 大多数PnDOG基因的高表达可能与三七种子的后熟休眠形成有关，在后熟过程中通过响应激素信号调控种子休眠解除。]]> 2025/4/17 8:59:16 64true 目的 建立UPLC多指标成分定量测定与指纹图谱结合化学模式识别法对不同基原十大功劳木Mahoniae Caulis药材进行质量评价，为十大功劳木质评质控体系的构建及其基原鉴别提供参考和依据。方法 采用UPLC法，色谱柱为Agilent Zorbax SB-Aq（150 mm×2.1 mm，1.8μm），流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液，梯度洗脱；体积流量0.3 mL/min，指纹图谱和含量测定检测波长分别为220 nm和345 nm，柱温15 ℃，进样量为2 μL。通过建立不同基原十大功劳木指纹图谱，同时测定十大功劳木中的4个指标成分，结合聚类分析（hierarchical cluster analysis，HCA）、主成分分析（principal component analysis，PCA）、正交偏最小二乘法-判别分析（orthogonal partial least squares-discriminant analysis，OPLS-DA）和方差分析对不同基原十大功劳木作差异性鉴别研究。结果 建立了4种基原十大功劳木药材UPLC指纹图谱，同一基原的十大功劳木相似度均大于0.968，4种基原十大功劳木相似度为0.864～0.964。其中宽苞十大功劳木M. eurybracteata、小果十大功劳木M. bodinieri、安平十大功劳木M. ganpinensie和长柱十大功劳木M. duclouxiana分别确定了17、15、14、9个共有峰，并指认了4种基原十大功劳木共有峰中的4个成分，分别是非洲防己碱、盐酸药根碱、盐酸巴马汀和盐酸小檗碱；运用HCA、PCA和OPLS-DA能将4种基原明显区分，OPLS-DA筛选得到7个差异性标志物。定量测定结果得出不同基原的4指标成分差异明显，安平十大功劳木基原质量较好。结论 建立的指纹图谱和定量测定方法合理、可靠，能准确有效地鉴别十大功劳木不同基原药材，为十大功劳木药材的质量控制和基原鉴别提供科学依据和参考。]]> 2025/4/17 8:59:16 63true 目的 建立肉豆蔻Myristicae Semen多指标成分定量检测方法，构建化学计量学及加权逼近理想排序（TOPSIS）模型，对不同产地肉豆蔻进行药材质量评价。方法 收集5省16批次肉豆蔻样品，以去氢二异丁香酚和β-谷甾醇为内参物，采用一测多评（quantitative analysis of multi-components by single marker，QAMS）法同步测定肉豆蔻中安五脂素、肉豆蔻木脂素、去氢二异丁香酚、利卡灵-B、丁香酚、异丁香酚、肉豆蔻醚、榄香脂素、β-谷甾醇和豆甾醇含量，同时对其醇溶性浸出物、总灰分和酸不溶性灰分进行定量检测。采用主成分分析对不同产地肉豆蔻进行聚类分组，以因子分析主成分综合得分高低对样品质量优劣进行排序，通过正交偏最小二乘法-判别分析挖掘影响肉豆蔻产品质量的主要潜在标志物，同时构建加权TOPSIS质量优劣评价模型，对肉豆蔻质量差异性进行综合评价。结果 安五脂素、肉豆蔻木脂素、去氢二异丁香酚、利卡灵-B、丁香酚、异丁香酚、肉豆蔻醚、榄香脂素、β-谷甾醇、豆甾醇分别在8.55～427.50、7.17～358.50、4.85～242.50、0.14～7.00、0.53～26.50、3.55～177.50、2.97～148.50、6.45～322.50、0.36～18.00和0.22～11.00 µg/mL线性关系良好（r＞0.999），平均加样回收率96.92%～100.11%（RSD＜2.0%）；建立的相对校正因子耐用性良好，外标法与QAMS法所得含量结果无明显差异。16批样品聚为3类，产地相近的聚为一组；安五脂素、榄香脂素、肉豆蔻木脂素、肉豆蔻醚、去氢二异丁香酚、β-谷甾醇和异丁香酚可能是影响肉豆蔻产品质量主要潜在标志物；因子分析与加权TOPSIS模型样品质量优劣排序结果基本一致。结论 QAMS多指标成分定量方法操作简便、结果准确，化学计量学及加权TOPSIS模型结果科学直观，可用于不同产地肉豆蔻药材质量评价。]]> 2025/4/17 8:59:16 62true 目的 揭示道地产区宝鸡西山产柴胡Bupleurum chinense植物根际土壤细菌的群落结构和多样性，为解析西山产柴胡的道地性和生态种植提供一定理论基础。方法 采用16S rDNA微生物扩增子测序初步确定根际细菌的群落组成，利用稀释分离法对根际土进行分离纯化并提取细菌DNA进行分子鉴定。结果 16S rDNA微生物扩增子测序结果显示样品质量总体良好。属水平上丰度前10的分别是盖亚女神菌属Gaiella、未命名蓝细菌属unidentified_Cyanobacteria、海无柄孢囊黏细菌属Haliangium、土壤红杆菌属Solirubrobacter、假节杆菌属Pseudarthrobacter、出芽菌属Gemmata、芽生球菌属Blastococcus、类诺卡氏菌属Nocardioides、鞘氨醇单胞菌属Sphingomonas、芽单苞菌属Gemmatimonas，除土壤红杆菌属外其余均属于有益菌。代谢通路预测结果显示分布于6大类：Cellular Processes、Environmental Information Processes、Genetic information processe、Human disease、Metabolism、Organismal-system。共分离到16株根际细菌，鉴定后发现均属于芽孢杆菌属，可鉴定到种水平的有漳州芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、沙福芽孢杆菌和嗜气芽胞杆菌4种。结论 阐明了西山产柴胡根际细菌群落的组成情况，物种丰富度较高且个体分布也相对均匀。在属水平上丰度排名前10的多数为有益菌，并且成功分离得到16株芽孢杆菌属细菌，可为西山柴胡的生态种植提供理论基础。]]> 2025/4/17 8:59:16 61true 目的 对白蜡树Fraxinus chinensis WRKY基因家族进行鉴定、生物信息学和密码子偏好性分析。方法 基于白蜡树全长转录组数据，利用生物信息学方法对其WRKY基因家族进行鉴定，并对其理化性质、系统发育、保守基序进行分析；基于白蜡树叶片和枝皮的二代转录组数据，对白蜡树WRKY基因家族的表达模式进行分析，并采用实时荧光定量PCR方法进行验证；利用CodonW、EMBOSS等程序对密码子偏好性进行分析，并进行最优密码子分析、中性绘图、ENC-plot和PR2偏倚分析。结果 共鉴定得到49个WRKY转录因子，均为酸性、亲水蛋白，编码氨基酸数目为426～2 175，相对分子质量33 933.48～179 137.94，理论等电点4.91～5.27，不稳定蛋白占比65.31%，预测均定位到细胞核；系统进化表明FcWRKY基因家族成员归为Ⅰ（11个）、Ⅱ（30个）、Ⅲ（7个）大类以及2个特殊成员（FcWRKY23和FcWRKY37），其中第Ⅱ类分为Ⅱa（5个）、Ⅱb（5个）、Ⅱc（8个）、Ⅱd（7个）、Ⅱe（7个）5个亚类；Motif 1和Motif 2存在于所有的WRKY转录因子中，是其保守序列；二代转录组数据筛选到16个WRKY基因在叶片和枝皮中具有显著差异表达，其中仅有FcWRKY11在枝皮中的表达量高于叶片。白蜡树FcWRKYs偏好使用以A/U结尾的密码子，并且偏好性较弱；确定了3个最优密码子，分别是CUU、AGG、和UAU；中性绘图分析和ENC-plot分析均表明自然选择是影响其密码子偏好性的主要因素，PR2偏倚分析结果表明突变压力亦影响其密码子偏好性。结论 鉴定了白蜡树WRKY基因，其中8个WRKY基因表达量与转录组学测序结果趋势一致，为研究白蜡树WRKY的基因功能奠定基础。]]> 2025/4/3 20:52:09 60true 目的 通过全基因组数据开发栀子Gardenia jasminoides全基因组SSR分子标记。方法 基于栀子全基因组序列，利用MISA软件搜索SSR位点，从染色体长度、SSR数量、不同重复类型、不同重复频次以及不同核苷酸类型的特征进行了分析。结果 栀子基因组共鉴定到117 037个SSR，长度在12～817 bp，平均长度为24.68 bp。栀子基因组全长为534.90 Mb，最长的为Chr09，长达110.58 Mb；最短的为Chr10，仅有30.74 Mb；SSR出现频率为444.23 bp/个。完全型核苷酸共计102 001个，以二核苷酸数量最多，六核苷酸最少，其中长度大于15 bp的SSR共有64 283个，占比为67.61%；混合型核苷酸14 464个，占比12.36%。各染色体组上SSR位点的频数密度在157～280个Mb，且SSR位点数量和染色体组长度呈高度相关。SSR在栀子的11组染色体中以Chr09最多为31 012个，Chr10最少为5 360个。不同SSR类型重复频次范围在4～81，重复频次主要集中在4～20，占比高达96.30%。完全型核苷酸不同重复类型种类和不同重复基序类型分别有2 429、1 112种，其优势重复单元依次为T、AT、AAT、AAAT、AAAAG、AAAAAT，栀子SSR序列在一定程度上偏好于A、T所构成的碱基。结论 丰富了栀子的SSR分子标记数据库，可为后续栀子的核心种质构建、遗传多样性分析、品种鉴定及分子标记辅助育种等研究奠定基础。]]> 2025/4/3 20:52:09 59true 目的 建立不同生长年限实生芍药Paeonia lactiflora指纹图谱，同时测定6种差异标志物成分含量及15种农艺性状，筛选实生芍药与生长年限关联的关键化学成分和主要农艺性状特征属性，以了解不同生长年限实生芍药的生长发育规律。方法 5组实生芍药材料，每组随机取样10株，共建立50株不同生长年限的实生芍药HPLC指纹图谱，并测定没食子酸、氧化芍药苷、芍药内酯苷、芍药苷、五没食子酰葡萄糖、苯甲酰芍药苷6种差异标志物含量；同时测定15种农艺性状（株高、冠幅、分枝数、叶片数、叶面积、地上鲜质量、开花数、主根长、主根粗、主根数、须根长、须根数、地下鲜质量、主根鲜质量、须根鲜质量）。利用层次聚类分析（hierarchical cluster analysis，HCA）、主成分分析（principal component analysis，PCA）、正交偏最小二乘法-判别分析（orthogonal partial least squares-discriminant analysis，OPLS-DA）和Spearman相关性分析，筛选与生长年限关联的关键化学成分和主要农艺性状。结果 50株实生芍药共有27个共有峰，其中S0、S1、S2、S3、S4分别标定出10、10、13、16、19个特征峰；通过PCA和OPLS-DA分析，筛选出7个差异性化学成分标志物，其变量重要性投影（variable importance in projection，VIP）值依次为峰12（芍药苷）＞峰10（芍药内酯苷）＞峰24＞峰3（没食子酸）＞峰23＞峰19（五没食子酰葡萄糖）＞峰22（VIP＞1）。含量测定结果表明，芍药苷、氧化芍药苷、五没食子酰葡萄糖含量随生长年限呈显著增加趋势；芍药内酯苷含量先降低后升高，苯甲酰芍药苷缓慢升高但差异不显著，趋于稳定；没食子酸含量在第1年显著增加，之后均趋于稳定；其中VIP值为芍药苷＞芍药内酯苷（VIP＞1）。实生芍药的农艺性状分析表明，PCA和OPLS-DA筛选出3个差异标志性农艺性状，其VIP值依次为须根长＞开花数＞主根粗（VIP＞1）。结论 随着生长年限的增加，实生芍药根部药材的共有峰数量增多，相似度提高，化学组成的稳定性和一致性增强；农艺性状方面，地上部分体积增大，地下部分根系生长、分枝、扩展，芍药总生物量快速积累。芍药苷可作为区分不同生长年限实生芍药的关键差异性化学成分标志物；须根长、开花数、主根粗可作为区分不同生长年限实生芍药的重要农艺性状标志物。]]> 2025/4/3 20:52:09 58true 目的 建立甘草Glycyrrhiza uralensis超高效液相色谱（UPLC）指纹图谱及多成分定量分析方法，并结合化学计量学进行不同产地甘草的质量分析和评价。方法 采用UPLC法建立30批不同产地甘草的指纹图谱，使用OriginPro 2024及SIMCA14.1软件进行Pearson相关性分析、聚类分析（cluster analysis，CA）、主成分分析（principal component analysis，PCA）、正交偏最小二乘判别分析（orthogonal partial least squares discriminant analysis，OPLS-DA）和接受者操作特征曲线分析，并对甘草中6种成分进行定量测定。结果 建立的UPLC指纹图谱共标定了23个共有峰，Pearson相关性分析表明各共有峰之间具有复杂的相关性，CA和PCA均表明，8个产地样本分布较为独立集中，部分甘肃样本与其它省份样本间有一定相似性，但样本整体被分为甘肃、内蒙古、新疆3大类，23个共有峰被分为5组；OPLS-DA则可实现对3省产地样本的有效区分，并筛选了10个差异性标志物；3省甘草样本中6个定量成分间的差异情况与OPLS-DA分析结果相近。结论 建立的甘草UPLC指纹图谱及多指标定量分析方法稳定、可靠，结合化学计量学分析可用于为甘草药材的产地质量评价和产地选择提供参考。]]> 2025/4/3 20:52:09 57true 目的 建立甘松Nardostachys jatamansi挥发油GC-MS指纹图谱，结合化学模式识别筛选其差异标志物，并进行抑菌活性研究，为甘松挥发油质量评价及应用提供参考。方法 采用GC-MS鉴定甘松挥发油的化学成分并建立指纹图谱；通过相似度评价、聚类分析、主成分分析和正交偏最小二乘-判别分析对差异标志物进行筛选；并用牛津杯法评价其抑菌活性。结果 甘松挥发油中鉴定出33个化学成分，建立了甘松挥发油指纹图谱，共标定15个共有峰，相似度为0.936～0.994；通过聚类分析将不同产地甘松挥发油分为4类，主成分分析结果与聚类分析结果基本相同，综合分析筛选白菖烯、百秋李醇、β-马里烯、马兜铃酮、马榄醇及马兜铃烯可作为甘松挥发油差异标志物；甘松挥发油对红色毛癣菌、须癣毛癣菌、牙龈卟啉单胞菌、幽门螺旋杆菌、肺炎链球菌有明显抑菌效果，最小抑菌浓度分别为0.4%、0.8%、3.1%、1.6%、6.25%。结论 采用指纹图谱结合化学模式识别技术可快速、有效地筛选甘松挥发油差异标志物，且甘松挥发油具有较好抑菌活性，可为甘松资源的综合开发利用及挥发油质量标准的建立奠定基础。]]> 2025/4/3 20:52:10 56true 目的 为探知天冬Asparagus cochinchinensis块根生长膨大的分子机制，对不同膨大期的天冬进行转录组测序，挖掘促使块根生长膨大的关键基因。方法 以不同膨大期的天冬为材料，采用Illumina HiSeq高通量测序平台进行转录组测序，组装与注释后进行差异表达基因（differential gene，DEGs）筛选。结果 转录组测序共获得59.20 Gb clean data，Q₃₀均不小于94.23%，共得到99 930条Unigene，其中47 857条被注释。3种不同膨大状态的天冬中的DEGs有1 429个，GO富集结果表明，3种不同膨大期天冬的DEGs主要富集于细胞过程、代谢过程、结合力与催化活性等功能，同源蛋白簇（clusters of orthologous groups，COG）富集结果表明，3种不同膨大期的天冬中DEGs主要富集于信号转导机制、碳水化合物转运代谢以及细胞壁/膜/被膜的生物合成。京都基因与基因组百科全书（Kyoto encyclopedia of genes and genomes，KEGG）富集分析显示，与根膨大相关的通路[植物激素信号传导、丝裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinases，MAPK）信号通路、淀粉与蔗糖代谢以及苯丙烷生物合成]为DEGs代表性富集通路。结合差异基因的注释信息以及表达量情况分析表明，多种酶类（SAUR、XTH、LRR-RLPK、SPP、EG、BGLU、TPP、AMY、BAMY、PAL、PER）参与天冬块根膨大，其中XTH可能是影响天冬块根的膨大发育过程的最主要的酶类。结论 通过对不同膨大状态天冬的高通量转录组测序，揭示了天冬块根生长膨大的关键酶基因，可为天冬根系生长膨大的生物学机制提供参考。]]> 2025/3/25 8:51:04 55true 目的 对甲基磺酸乙酯（ethyl methanesulfonate，EMS）诱变下蒲公英Taraxacum mongolicum胚性细胞进行转录组测序，探究EMS诱变对蒲公英基因表达的影响。方法 利用Illumina HiSeq 2500高通量测序技术对对照（CK）、0.15% EMS处理8 h后的蒲公英胚性细胞进行测序并建立cDNA数据库，经拼接后得到Unigene，并进一步开展生物信息学分析。结果 共获得Unigene 45 551条，分别有32 954、12 923、21 752、28 115、9 764条被非冗余数据库（non-redundant protein sequence database，NR）、基因本体（gene ontology，GO）、Swiss-Prot、eggNOG、京都基因与基因组数据库（Kyoto encyclopedia of genes and genomes，KEGG）等数据库注释，GO富集分析发现，蒲公英胚性细胞的DEGs在GO功能注释中主要集中于细胞过程、代谢过程、结合蛋白、氧化还原、催化活性等功能。KEGG途径富集结果表明，EMS诱变下DEGs显著富集在植物激素信号转导、光合作用、光合生物的固碳作用及光合作用-天线蛋白、胡萝卜素合成、不饱和脂肪酸代谢以及淀粉和糖代谢途径。EMS诱变能引起蒲公英胚性细胞植物激素信号转导途径关键酶基因的表达上调，响应胁迫。结论 通过转录组测序，初步表明EMS诱变下蒲公英胚性细胞差异基因的表达，并调控蒲公英胚性细胞中植物激素信号转导途径的相关酶基因，以期为从分子基因方面培育优质蒲公英提供参考和依据。]]> 2025/3/25 8:51:04 54true 目的 基于指纹图谱和网络药理学方法，分析预测树参Dendropanax dentiger的差异活性成分，并建立其定量分析方法，为树参的质量控制提供参考。方法 采用HPLC法建立树参的指纹图谱并结合化学计量学筛选不同产地树参的主要差异成分。通过网络药理学方法，确定树参特征成分治疗类风湿关节炎（rheumatoid arthritis，RA）的核心靶点和关键通路，绘制“成分-核心靶点-通路”网络图，以预测树参抗RA的差异活性成分。以28批树参药材为研究对象，对其差异活性成分进行含量测定，确定出树参的差异活性成分。结果 建立了28批树参药材的指纹图谱，标定了13个共有峰，并指认出5个共有峰，分别为原儿茶酸、紫丁香苷、绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸C。通过化学计量学分析，初步筛选出紫丁香苷、绿原酸、异绿原酸A和异绿原酸C为主要差异性成分。网络药理学分析显示，紫丁香苷、绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸C可能通过前列腺素内过氧化物合酶2（prostaglandin-endoperoxide synthase 2，PTGS2）、半胱天冬酶-3（Caspase-3，CASP3）、表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor，EGFR）、基质金属蛋白酶-2 （matrix metalloproteinase-2，MMP2）、基质金属蛋白酶-3（matrix metalloproteinase-3，MMP3）、E-选择素（E-selectin，SELE）、P-选择素（P-selectin，SELP）、前列腺素内过氧化物合酶1 （prostaglandin-endoperoxide synthase 1，PTGS1）8个核心靶点，影响脂质与动脉粥样硬化、肾素-血管紧张素系统、白细胞介素-17（interleukin-17，IL-17）和肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor，TNF）等信号通路，从而发挥治疗RA的作用。最终确定紫丁香苷、绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸C可作为树参治疗RA的差异活性成分。结论 建立的质量评价方法准确可靠，结合网络药理学筛选出的差异活性成分可为树参质量控制提供依据，并为其治疗RA的作用机制提供参考。]]> 2025/3/25 8:51:04 53true 目的 对甘肃引种栽培的不同品种金银花Lonicerae Japonicae Flos进行品质分析，为金银花品种选育和产业化开发提供新思路。方法 采用ITS2条形码序列分析11个不同品种金银花的种间差异；采用HPLC建立金银花特征图谱，并对13个样品的指标成分进行含量测定；采用超高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱（UPLC-QTOF-MS/MS）进行非靶向代谢组学分析。结果 通过ITS2序列对比分析发现，金花3号、豫金2号、豫花1号和华金6号不同品种间核苷酸序列位点碱基发生较大突变，其中华金6号有24处碱基差异。根据HPLC特征图谱，指认了特征成分绿原酸、异绿原酸A和异绿原酸C。不同品种金银花绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸C和木犀草苷的含量存在差异，其中北花1号、华金6号、封花1号、金花3号与豫金1号金银花的酚酸类成分及木犀草苷含量均显著高于《中国药典》2020年版的规定。不同品种金银花代谢组学分析共筛选出21个差异代谢物，包括异绿原酸、山柰酚-O-芸香糖苷等。结论 北花1号、华金6号、封花1号、金花3号与豫金1号金银花作为重点品种，可结合生产实践进行推广示范研究。系统分析了不同品种金银花中主要有效成分的异同，为金银花品种鉴定、质量控制和生产利用提供了科学依据。]]> 2025/3/25 8:51:04 52true 目的 建立不同产地批次大青叶Isatidis Folium的HPLC指纹图谱及指标成分含量测定方法，结合化学模式识别法评价不同产地大青叶质量。方法 建立大青叶HPLC指纹图谱，应用中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012.130723版本）、IBM SPSS Statistics 27.0、SIMCA14.1软件，结合聚类分析（hierarchical cluster analysis，HCA）、主成分分析（principal component analysis，PCA）、正交偏最小二乘法-判别分析（orthogonal partial least squares discrimination analysis，OPLS-DA）对不同产地大青叶质量进行评价，根据变量重要性投影（variable importance for projection，VIP）值，对差异性成分异牡荆素、靛玉红进行定量分析，基于含量测定结果建立熵权逼近理想排序法（technique for order preference by similarity to ideal solution，TOPSIS）-灰色关联度（grey relation analysis，GRA）融合模型进一步分析评价。结果 建立的大青叶HPLC指纹图谱中，识别共有峰19个，指认峰6个，分别为峰4（丁香酸）、峰9（阿魏酸）、峰12（异牡荆素）、峰16（色胺酮）、峰18（靛蓝）、峰19（靛玉红）。指纹图谱相似度在0.871～0.989；HCA将15批大青叶分为2类；PCA共提取4个成分，累积方差贡献率为91.745%；OPLS-DA筛选出异牡荆素、靛玉红等6个差异性成分。大青叶中异牡荆素、靛玉红的质量分数在0.781～4.385 mg/g、0.134～0.921 mg/g，熵权TOPSIS-GRA融合模型结果显示15批不同产地大青叶样品含量存在差异，编号为S1、S2、S3的样品质量较优。结论 建立的HPLC指纹图谱和含量测定结果可为大青叶的质量控制和整体性评价提供参考。]]> 2025/3/25 8:51:05 51true 目的 以药用植物宽叶十万错Asystasia gangetica为研究对象，解析其叶绿体基因组结构特征，探究宽叶十万错在爵床族中的系统发育关系；方法 利用Illumina NovaSeq 6000测序平台对宽叶十万错叶绿体基因组进行测序，对其进行组装、注释和特征序列分析，并基于34种爵床族物种构建系统发育树。结果 宽叶十万错叶绿体基因组为典型的四分体结构，总序列长度为150 307 bp，包括一个大单拷贝区（LSC，82 332 bp），一个小单拷贝区（SSC，17 425 bp）和一对反向重复区（IRs，25 275 bp）；宽叶十万错叶绿体基因组共注释到光合作用基因、自我复制基因、其他基因和未知功能基因4类共133个基因，包括88个蛋白编码基因，37个tRNA基因和8个rRNA基因；宽叶十万错叶绿体基因组共检测到34个SSR位点，SSR类型以A/T为主，通过REPuter软件共检测到33个长重复序列；IR区边界分析表明，宽叶十万错比其他属物种保守，边界区域变异小；基于8个属8个物种全叶绿体基因组比较分析可知，基因间隔区atpH-atpI、petN-trnD-GUC、rps4-trnT-UGU、trnF-GAA-ndhJ等的变异大于编码区；宽叶十万错密码子偏好性分析表明，甘氨酸是宽叶十万错使用频次最高的氨基酸，以A或U结尾的密码子是宽叶十万错叶绿体基因组的偏好性密码子；ENC、PR2和中性绘图分析表明，自然选择是影响宽叶十万错密码子偏好性的主要原因；选择压力分析表明，有9个基因受到正选择，对宽叶十万错及其近缘属物种适应性进化具有重要作用；系统发育分析表明，宽叶十万错所在的十万错属和钩粉草属形成姊妹类群，亲缘关系最近，并具有较高的支持率，共同归为彩叶木亚族。结论 对宽叶十万错叶绿体基因组结构进行了解析，并探讨了爵床族物种系统发育关系，丰富了爵床族药用植物遗传资源，为爵床族的物种分类提供了参考。]]> 2025/3/6 11:26:42 50true 目的 建立不同生态型天麻Gastrodia elata 叶绿体SSR（chloroplast SSR，cpSSR）分子标记鉴定方法，为天麻分子标记辅助育种提供理论依据。方法 利用天麻叶绿体基因组序列获取cpSSR位点，分析比较位点特征并筛选多态性cpSSR，通过聚类分析、主成分分析和遗传结构分析对不同生态型天麻遗传多样性进行分析与鉴定。结果 天麻叶绿体基因组中筛选到166个cpSSR位点，其中单核苷酸为主要类型，A/T重复基序占比最高。筛选得到6对cpSSR，共扩增出18个条带，等位基因平均数（number of allele，N_a）、有效等位基因数目（effective number of alleles，N_e）、Shannon多样性指数（Shannon index，I）、多态性信息含量指数（polymorphism information content，PIC）分别为3、2.084 5、0.511 0、0.511 0，表明cpSSR多态性较高。通过聚类分析、主成分分析和遗传结构分析均可将不同生态型天麻分为2个类群，其中乌天麻、绿天麻和血红天麻为一类，红天麻和黄天麻为一类。进一步根据CH15和CH20 2对cpSSR的电泳特异性条带，可以将血红天麻、乌天麻、绿天麻、红天麻和黄天麻进行准确的鉴定。结论 利用CH15和CH20两对cpSSR鉴定不同生态型天麻具有效率高、适应性广的优点，对天麻种质鉴定具有重要意义。]]> 2025/3/6 11:26:42 49true 目的 为了解牛果藤属种间叶性状的多样性差异，提高牛果藤属优异种质资源的选育和利用。方法 以5种牛果藤属植物为研究对象，采用智能叶面积测量系统、紫外可见分光光度计和高效液相色谱（HPLC）测定形态和活性成分指标，并对数据进行描述性统计、方差分析和多重比较分析。结果 形态特征表明5种牛果藤属植物种间（内）差异明显，大齿牛果藤Nekemias grossedentata与牛果藤N. cantoniensis具有一回或两回羽状复叶，其他物种均为一回羽状复叶，叶缘锯齿以大齿牛果藤最明显；该属植物叶性状除复叶叶柄长和小叶叶面积发生中等变异外，其余性状均为弱变异，除小叶厚度外，其他性状均存在显著的种间差异，5个物种大齿牛果藤叶性状最稳定；叶活性成分以黄酮类化合物为主，种间差异显著（P＜0.001），总黄酮含量在13.81%～38.67%，大齿牛果藤最高，是含量最低的牛果藤的78倍；二氢杨梅素、杨梅苷和杨梅素是该属植物的主要成分。结论 牛果藤属植物种间和种内呈现明显的性状多样性，黄酮类化合物是该属植物的主要成分，种类和含量因物种而异，研究结果为牛果藤属植物资源的综合利用提供理论依据。]]> 2025/3/6 11:26:43 48true 目的 基于“辨色论质”理论对箭叶淫羊藿Epimedium sagittatum叶片色泽与其淫羊藿苷类有效成分进行关联分析，为箭叶淫羊藿“辨色论质”质量评价体系的建立提供理论参考。方法 使用色差法测定103批箭叶淫羊藿叶片表观色泽指标（明度值L^*、红绿度值a^*、黄蓝度值b^*、总色差E^*）；HPLC法测定叶片中朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、淫羊藿苷、宝藿苷I含量；紫外分光光度法测定叶片中总黄酮含量；运用SPSS软件进行差异分析、K-聚类分析、相关性分析、回归分析。结果 103批箭叶淫羊藿叶片L^*为33.38～48.22、a^*为−7.56～−3.50、b^*为9.17～28.68、E^*为36.82～56.38，可见其表观色泽有显著差异；其有效成分定量分析显示，淫羊藿叶片中朝藿定A质量分数为0.28～3.55 mg/g、朝藿定B为0.20～3.60 mg/g、朝藿定C为11.10～124.51 mg/g、淫羊藿苷为0.28～30.55 mg/g、宝藿苷I为0.28～7.32 mg/g、总黄酮为26.72～169.12 mg/g；经K-聚类分析将箭叶淫羊藿叶片分为Ⅰ～Ⅴ类，其中第Ⅲ类叶片整体色差均一，呈现亮黄绿色稀黄色斑点，有效成分含量相较于其他4类处于最高水平；经相关性分析表明总黄酮和其他5种有效成分含量与L^*、b^*、E^*呈显著正相关（P＜0.05），与a^*呈显著负相关（P＜0.05）；经回归分析得淫羊藿苷与色泽指标的回归方程为Y＝0.009 269＋0.000 236L^*＋0.000 881a^*＋0.000 214b^*。结论 箭叶淫羊藿叶片色泽与有效成分含量高度关联，可为箭叶淫羊藿叶片有效成分含量快速预测及“辨色论质”评价体系的构建提供参考依据。]]> 2025/3/6 11:26:43 47true 目的 阐明番泻叶Sennae Folium的化学成分，并对主要化合物进行定量分析，为番泻叶质量评价提供依据。方法 采用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱（UHPLC-Q-exactive-orbitrap-MS）负离子模式对番泻叶中主要化学成分进行快速鉴定；采用UPLC-PDA法对6个主要化合物进行定量分析，并应用于多批次样品测定。结果 番泻叶鉴定了29个化合物，其中蒽醌类化合物12个、黄酮类化合物11个、二苯甲酮类化合物2个及萘类化合物4个；测定了20批番泻叶样品中6个主要成分（新西兰牡荆苷、芦荟大黄素-8-O-葡萄糖苷、番泻苷A、番泻苷B、番泻苷C、丁内未利葡萄糖苷）的含量，不同批次中各化合物含量存在差异。结论 对番泻叶中化学成分进行快速鉴定和主要成分定量分析，为番泻叶的质量评价提供依据。]]> 2025/3/6 11:26:43 46true 目的 以金银花Lonicerae Japonicae Flos中糖基转移酶为研究对象，进行糖基转移酶LjUGT73C1基因的生物信息学分析、基因合成与亚克隆、表达分析和纯化。方法 利用前期盐胁迫金银花组学研究构建的金银花转录组数据库注释信息，筛选得到金银花中关键糖基转移酶LjUGT73C1，进行基因合成和亚克隆；利用基因重组技术构建了原核表达载体Pet-30a-LjUGT73C1，遗传转化大肠杆菌BL21（DE3）感受态；应用SDS-PAGE凝胶电泳和Western blotting检测蛋白的表达量、检测不同诱导条件下基因的表达情况，最后经亲和色谱进行纯化。结果 通过基因合成与亚克隆得到糖基转移酶LjUGT73C1的全长序列，理论编码氨基酸数目为493，等电点（PI）预测为6.27，理论相对分子质量为55 530。构建了LjUGT73C1基因的原核表达载体并且在大肠杆菌中诱导表达得到重组蛋白，应用His亲和色谱柱进行蛋白纯化并经SDS-PAGE凝胶电泳检测，确定为金银花LjUGT73C1蛋白。结论 首次报道了盐胁迫金银花中糖基转移酶基因LjUGT73C1，并进行表达分析和纯化，为进一步研究金银花中苯丙素的生物合成及表达调控研究奠定了基础。]]> 2025/2/19 10:39:38 45true 目的 基于转录组数据筛选鉴定分析甘松Nardostachys jatamansi CONSTANS（CO）转录因子家族。方法 运用生物信息学技术对甘松植物的CO转录因子家族成员展开综合分析，深入探究其蛋白的理化特性、基因序列结构、亚细胞位置、导肽和信号肽的预测，以及跨膜结构域的识别。此外，通过构建系统进化树，进一步揭示这些基因家族成员间的进化关系。结果 在甘松的数据库中经过筛选、鉴定，最终得到10个CO转录因子，氨基酸长度为316～440 aa，相对分子质量在35 561.67～48 171.96，理论等电点范围为5.11～8.63，主要在细胞核中表达，均含有B-box和CCT结构域，均不含跨膜结构域和信号肽。构建系统进化树明确了各亚族的成员分布：第Ⅰ亚族包含2个成员，第Ⅱ亚族增至3个成员，而第Ⅲ亚族则有5个成员，这一发现为进一步探讨各亚族间的进化关系及特性差异提供了重要基础。结论 利用了生物信息学的手段，全面鉴定并分析了甘松CO转录因子家族的理化性质、蛋白结构、系统发育关系等，对甘松CO转录因子家族功能的详尽研究，为后续的深入探索提供了宝贵的参考。此外，也为理解甘松药用成分合成的调控机制提供了基础，并为未来培育出更高品质的甘松品种提供了科学依据。]]> 2025/2/19 10:39:38 44true 目的 研究点地梅属Androsace L.物种叶绿体基因组蛋白编码基因密码子的偏好性及其影响因素。方法 测序了点地梅属1个物种（西藏点地梅）的叶绿体基因组，其他9物种的序列从NCBI下载。根据序列筛选条件，共得到41条共有序列。用CodonW 1.4.2计算相关参数，Python整理数据，R做相关性分析并绘图。结果 点地梅属各物种密码子第1、2、3位置碱基组成GC含量表现为GC₁＞GC₂＞GC₃，其中第3位GC含量最小。各位点GC含量相关性为GC₁、GC₂极显著，而两者与GC₃相关性都不显著，说明3个位置GC含量变化机制不同。3个位置GC含量都小于50%，表明密码子倾向于使用A/U碱基，尤其是第3位。从10个物种中共鉴定到13～17个最优密码子。所有基因的有效密码子数（effective number of codons，ENC）均大于35，说明密码子使用整体偏性较弱。中性绘图、ENC-plot及PR2-plot分析显示，造成密码子使用偏性的主要因素是自然选择，但突变压对大部分基因的密码子偏性也有重要影响。系统发育及聚类分析显示密码子偏性在物种间是保守的。结论 点地梅属叶绿体基因组蛋白编码基因倾向于使用A/U碱基编码的密码子，自然选择是影响密码子偏好性的主要因素。研究结果能为点地梅属的分子进化、系统发育及叶绿体基因工程提供基础。]]> 2025/2/19 10:39:38 43true 目的 对金果榄Tinospora sagittata外观性状与其主要化学成分间的相关性进行研究，探究“辨状论质”理论在金果榄药材鉴别中的科学性。方法 观察并测量金果榄的形状、颜色等9种性状指标；采用HPLC法检测40批次金果榄中木兰花碱、蜕皮激素、非洲防己碱、药根碱、巴马汀和古伦宾含量；比较金果榄的9种外观性状指标、6种化学成分之间的联系，并对金果榄“状-质”数据进行相关性分析和回归分析。结果 金果榄药材的皱缩程度、药材长宽比、表面颜色、断面颜色、L^*、a^*值各与6种主要化学成分含量具有显著相关性，而b^*值与除蜕皮激素外的5种化学成分均呈极显著相关。结论 金果榄药材表面皱缩程度、表面颜色、断面颜色、短径、长宽比、质量以及L^*、a^*、b^*值均可用于快速判断金果榄药材的品质，其中b^*值最为关键且全面，结果可为快速全面评价金果榄药材的质量提供参考。]]> 2025/2/19 10:39:38 42true 目的 建立蒲黄Typhae Pollen的特征图谱分析方法，结合熵权-优劣解距离（TOPSIS）法评价2种基原蒲黄质量，采用化学模式识别分析方法进一步明确2种基原蒲黄的质量差异标志物。方法 采用HPLC法建立24批蒲黄不同基原药材的特征图谱，采用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”软件（2012版）确定2种基原蒲黄各自的共有峰及其基原之间交叉共有峰，均采用对照品进行色谱峰的指认。以峰面积为依据，采用熵权TOPSIS法计算相对贴近程度，得到2种基原蒲黄的综合质量排名及各特征峰的权重；同时，采用主成分分析（principal component analysis，PCA）、偏最小二乘法判别分析（partial least square discriminate analysis，PLS-DA）筛选并确认2种基原蒲黄的质量差异标志物。结果 水烛香蒲、东方香蒲特征图谱分别指认并确定了13个特征峰和16个特征峰，其中峰8、9、12是东方香蒲的特有峰，峰7、11与峰13之间的相对峰高可直观区分2种基原蒲黄。特征图谱对比分析发现，东方香蒲的含量测定指标选择峰13（水仙苷）更为合理。熵权TOPSIS法结果表明，各基原蒲黄样品批次间的特征峰均可稳定传递，东方香蒲的相对贴近程度（C_i）均高于水烛香蒲，说明2种基原蒲黄质量有差异。PCA提取出4个主成分，累积方差贡献率可达89.008%。PLS-DA筛选出山柰酚-3-O-芸香糖苷等9个质量差异标志物，其中山柰酚-3-O-芸香糖苷、异槲皮苷、异鼠李素-3-O-葡萄糖苷等7个质量差异标志物为首次提出。结论 建立的分析方法可对2种基原蒲黄进行区分，并特异性识别两者的差异性成分，为蒲黄不同基原之间的区分鉴别及其质量控制提供依据。]]> 2025/2/19 10:39:38 41true 目的 探讨黄精属Polygonatum Mill.6个产区3个种质的遗传多样性及亲缘关系。方法 以34份黄精属种质资源为供试材料，采用正交设计方法，优化黄精属目标起始密码子多态性-PCR（start codon targeted polymorphism-PCR，SCoT-PCR）反应体系并筛选引物；并基于筛选出的引物对其进行遗传多样性分析、遗传结构以及遗传分化研究。结果 得到黄精属SCoT-PCR最佳反应体系，筛选出15条多态性较好的引物，多态性条带比率为94.45%；在物种水平上，3个种质的平均观测等位基因数（observed number of alleles，N_a）、平均有效等位基因数（effective number of alleles，N_e）、平均Nei’s基因多样性指数（Nei’s gene diversity index，H）、平均香农指数（Shannon information index，I）分别为1.678 3、1.268 6、0.174 0、0.278 6，揭示群体间存在丰富的遗传多样性；聚类分析结果显示，多花黄精与长梗黄精聚成一类，表明亲缘关系较近；卷叶黄精作为单独分枝，其与另外2个种质的亲缘关系也较远；基因多样度（total genetic diversity，H_t）、基因分化系数（gene diversity within population，H_s）、遗传分化系数（coefficient of gene differentiation，G_st）、基因流（gene flow，N_m）分别为0.210 4、0.174 0、0.173 3、2.386 0，表明群体间存在较高水平的基因交流，AMOVA结果显示84%遗传差异来自于群体内，16%遗传差异来自于群体间；群体结构分析表明，当分析群体数（true number of clusters，K）为3时，34份材料可分为3个类群，且与聚类分析结果基本一致。结论 SCoT分子标记可有效用于黄精属不同种质之间的亲缘关系及遗传多样性分析，为黄精属植物种质资源的鉴定保护、开发利用提供科学依据。]]> 2025/1/25 16:22:26 40true 目的 探讨近红外光谱（near infrared spectroscopy，NIRS）技术在天麻Gastrodia elata质量评价中的应用，通过对不同蒸制程度的天麻进行判别分析，进一步构建天麻有效成分含量预测模型，为天麻质量评价提供新方法。方法 建立天麻中天麻素（gastrodin，GAS）、对羟基苯甲醇（p-hydroxybenzyl alcohol，HBA）、巴利森苷B（parishin B，PB）、巴利森苷C（parishin C，PC）、巴利森苷A（parishin A，PA）含量测定的高效液相色谱法，并以其测定值为参比。采集天麻样品的NIRS，结合线性判别分析（linear discriminant analysis，LDA）算法，建立不同蒸制时间的天麻定性判别模型。选择偏最小二乘法（partial least squares，PLS）等化学计量学方法建立有效成分的测定值与NIRS的定量校正模型，对建模过程的各个阶段进行优化，构建天麻各有效成分的最优PLS定量模型。结果 基于LDA算法建立的天麻蒸制程度的定性判别模型准确度达到96.2%，混淆矩阵图与接收器工作特性（receiver operating characteristic，ROC）曲线评价模型的预测性能良好；天麻近红外原始光谱经标准正态变换（standard normal variate，SNV）或平滑法（savitzky-golay，SG）预处理后，以竞争性自适应重加权抽样-偏最小二乘法（competitive adaptive eeweighted sampling-partial least squares，CARS-PLS）构建的定量模型准确度较高，建立的GAS、HBA、PB、PC、PA最佳PLS定量模型的校正决定系数（R²c）分别为0.975 3、0.986 4、0.970 0、0.963 6、0.965 9，预测决定系数（R²p）分别为0.970 4、0.984 0、0.977 9、0.978 6、0.985 5，5个定量模型的预测偏差（residual prediction deviation，RPD）均大于6。表明NIRS定量模型预测值与测定值具有良好的线性关系，模型预测效果良好。结论 所建立的天麻近红外LDA定性和CARS-PLS定量模型准确、可靠，可实现天麻蒸制程度的定性鉴别以及GAS、HBA、PB、PC、PA 5个有效成分含量的快速定量分析，为天麻的质量评价与控制提供新的参考。]]> 2025/1/25 16:22:26 39true 目的 研究不同根际促生菌（plant growth-promoting rhizobacteria，PGPR）对白花前胡Peucedanum praeruptorum根际土壤中磷、钾元素含量、形态转变、元素有效性及其根部药用成分含量的影响，为白花前胡的品质培优提供参考。方法 通过盆栽接种实验，将9种不同类型PGPR菌株接种于白花前胡根际土壤，试验设为空白对照（CK）、接种Bacillus thuringiensis（S1）、Paenibacillus amylolyticus（S2）、B. polymyxa（S3）、B. aryabhattai（S4）、B. aryabhattai（S5）、B. cereus（S6）、B. mycoides（S7）、B. proteolyticu（S8）和B. wiedmannii（S9）10个处理组；共生培养9个月后，测定根际土壤中不同形态磷、钾元素及根部中白花前胡甲素、白花前胡乙素含量，分析接种PGPR后白花前胡根部药用成分与根际土壤磷、钾形态含量的变化，并通过相关性与通径分析探讨白花前胡有效成分与根际土壤磷、钾形态的相关性。结果 与CK组相比，接种PGPR的9个处理组的白花前胡甲素、白花前胡乙素含量均显著提高，且以S2组效果最为显著，分别较CK组增长了0.513%、0.649%；接种不同PGPR均不同程度增加了白花前胡根际土壤有机磷、有效磷、全磷以及各形态无机磷含量，其中以S5组效果最为显著；接种PGPR可以提高白花前胡根际土壤全钾以及各形态钾素含量，且以S1组效果最为显著；相关性分析表明，各形态无机磷呈极显著正相关，Fe-P、全磷与有效磷呈显著性正相关；全钾、矿物钾、水溶钾均与速效钾呈极显著正相关，缓效钾与速效钾呈显著性正相关，各钾素形态之间呈极显著正相关。通径分析表明，Fe-P、缓效钾对白花前胡甲素呈正效应，有机磷、Ca₈-P、有效磷、速效钾、交换钾对白花前胡乙素呈正效应。结论 接种不同PGPR能够有效提高白花前胡根际土壤各形态磷、钾素含量，以及白花前胡品质和药用价值，其中以Paenibacillus amylolyticus菌株接种效果最佳。]]> 2025/1/25 16:22:26 38true 目的 建立金钱草Lysimachia christinae HPLC指纹图谱及山柰酚-3-O-芸香糖苷、咖啡酸、芦丁、夏佛塔苷、迷迭香酸、碟豆素、异槲皮苷、槲皮苷、槲皮素、山柰酚10种成分含量测定方法，并结合化学模式识别和熵权TOPSIS对其质量进行评价。方法 采用ZORBAX Eclipse Plus C₁₈（250 mm×4.6 mm，5 μm）色谱柱；以乙腈-0.1%磷酸溶液为流动相，梯度洗脱；体积流量为0.9 mL/min；检测波长为360 nm，柱温为30 ℃；进样量为10 μL的HPLC对不同产地金钱草药材进行检测，通过“中国色谱指纹图谱相似度评价系统（2012版）”软件进行相似度评价，使用SIMCA-14.1和SPSS27.0软件进行主成分分析（principal component analysis，PCA）和正交偏最小二乘判别分析（orthogonal partial least squares discriminant analysis，OPLS-DA）和聚类分析（hierarchical cluster analysis，HCA）；通过与对照品进行比对指认10种指标成分并进行含量测定，采用化学模式识别和熵权TOPSIS对结果进行综合评价。结果 15批金钱草HPLC指纹图谱匹配出19个共有峰，指认了山柰酚-3-O-芸香糖苷、咖啡酸、芦丁、夏佛塔苷、迷迭香酸、碟豆素、异槲皮苷、槲皮苷、槲皮素、山柰酚，指纹图谱的相似度0.703～0.965；HCA将15批金钱草聚为4类；PCA分析得到6个主成分的累积方差贡献率为88.149%；OPLS-DA分析表明有11种成分可作为区分金钱草质量的差异标志物；15批金钱草中山柰酚-3-O-芸香糖苷、咖啡酸、芦丁、夏佛塔苷、迷迭香酸、碟豆素、异槲皮苷、山柰酚、槲皮苷、槲皮素的质量分数分别为0.056～0.611、0.006～0.086、0.165～1.008、0.091～0.521、0.016～0.581、0.146～0.797、0.045～0.450、0.026～0.100、0.052～0.483、0.026～0.088 mg/g；熵权TOPSIS分析表明四川和江西产地的金钱草质量较优。结论 建立的金钱草HPLC指纹图谱及多成分含量测定方法准确、稳定、分离度和重复性好，为其质量控制提供依据。]]> 2025/1/25 16:22:26 37true 目的 基于药材粉末颜色数字化分析建立一种不同生长方式黄芩Scutellaria baicalensis的快速鉴别方法，同时建立一种黄芩主要药效成分含量的准确预测模型。方法 采用分光测色仪测定黄芩样品粉末颜色亮度值（L^*）、红绿色值（a^*）、黄蓝色值（b^*），并计算总色值（E^*）；采用HPLC测定黄芩样品中4个主要药效成分（黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素）的含量，基于色度值并结合多元统计分析及机器学习算法，建立可区分不同生长方式黄芩的定性判别模型、主要药效成分的定量预测模型。结果 不同生长方式黄芩的黄芩素和汉黄芩素含量具有显著差异（P＜0.05）；黄芩药材粉末色度值与有效成分含量具有相关性（除a^*与黄芩苷、汉黄芩苷含量无显著相关性外，其他因素之间P＜0.05）；基于色度值并结合机器学习算法构建的黄芩生长方式判别模型中，随机森林分类器结合十倍交叉验证法的分类准确率最高，为100%；并在基于色度值构建的主要药效成分含量预测模型中，4种成分的预测值与实测值的相关系数均大于0.97。结论 通过药材粉末的色度值建立的定性判别及定量预测分析方法具有快速、准确、可及的优点，为揭示黄芩“辨色论质”的科学内涵提供理论依据。]]> 2025/1/25 16:22:26 36true 目的 基于全长转录组测序挖掘掌叶大黄Rheum palmatum GRAS基因（RpGRASs）家族成员，并分析其在掌叶大黄叶、根和根茎中的表达及茉莉酸甲酯（methyl jasmonate，MeJA）处理下的表达模式。方法 利用生物信息学对掌叶大黄GRAS成员进行系统发育、保守结构域、蛋白理化性质和亚细胞定位分析；基于转录组数据对RpGRASs基因的组织表达模式进行转录组测序（RNA sequencing，RNA-seq）分析，使用实时定量逆转录聚合酶链式反应（real-time quantitative reverse transcription PCR，RT-qPCR）对筛选到的3个RpGRASs进行MeJA处理下的表达模式检测。结果 在掌叶大黄全长转录组数据中共鉴定得到39个RpGRASs成员。RpGRASs蛋白主要为不稳定亲水蛋白，定位于细胞核、叶绿体和细胞质；各蛋白二级结构主要为无规则卷曲和α螺旋；系统发育将该家族分为PAT1、DELLA、HAM、SHR、SCR和SCL4/7 6个亚族；GRAS蛋白C端均含有典型的LHRI、VHIID、LHRII、PFYRE和SAW基序。RpGRASs基因表达具有组织特异性，在药用部位根及根茎中高表达的RpGRAS17、RpGRAS18、RpGRAS20受MeJA显著诱导。结论 掌叶大黄GRAS转录因子基因家族的系统鉴定及组织和MeJA诱导下的基因表达特征，为深入研究GRAS基因的功能奠定基础。]]> 2025/1/17 9:47:02 35true 目的 紫芝Ganoderma sinense次生代谢产物含量较低，筛选一种可以显著提高紫芝次生代谢物产量的方法。方法 基于紫芝基因组数据库筛选出编码芳樟醇合酶的基因GsSTS50，通过改善融合酶、共表达基因和引入异源甲羟戊酸（mevalonate pathway，MVA）代谢途径等方法使GsSTS50基因在大肠杆菌中高效表达，利用顶空固相微萃取-气相色谱-质谱联用（HS-SPME-GC-MS）检测大肠杆菌培养物中芳樟醇的含量。结果 优化融合酶的策略，使大肠杆菌中芳樟醇产量提高了约4.9倍；通过引入异源MVA途径，改造后菌株芳樟醇产量比初始培养提高了约49倍；将多个基因共表达的同时引入异源途径，优化菌株芳樟醇产量比原始菌株提高了42倍。结论 经过改造的重组菌株生产产物的量均有显著提高，为后续灵芝等担子菌中萜类化合物以及其他萜类物质产量的提升提供了参考。]]> 2025/1/17 9:47:02 34true 目的 为筛选川贝母Fritillaria cirrhosa优质种质资源，开展新品种和良种选育，通过性状变异进行表型调查。方法 采用隶属函数和偏最小二乘-回归分析（partial least square-regression analysis，PLS-R）、相关性分析（correlation analysis，CA）、聚类分析、主成分分析（principal component analysis，PCA）等方法，对23份种质资源的10个农艺性状、5个生理和9个品质性状进行综合评价。结果 农艺性状的多样性指数为1.808～2.337，其中鳞茎鲜质量和果质量的多样性指数最高，均为2.30。24个数量性状的变异系数为6.63%～102.36%，其中农艺性状的变异主要来源于果质量、花朵数目和鳞茎鲜质量；品质指标的变异主要来源于鸟苷、腺苷和胸苷的差异。相关性分析显示生物碱含量和鳞茎鲜质量与茎粗、叶长、果长、果直径以及果质量等都表现出了正相关关系。聚类分析将收集的种质分成3大类群，第Ⅰ类群具有鳞茎鲜质量、生物碱含量和果实质量较高的特点，第Ⅲ类群中核苷类物质含量较高。PCA将24个性状简化为6个主成分，累积贡献率为78.746%。PLS-R与偏最小二乘-判别分析（partial least square-discriminant analysis，PLS-DA）揭示果直径、叶宽和脱氧腺苷、鸟嘌呤对D值的贡献较大，可作为筛选优良种源的关键指标。结论 综合排名前3位的种质为ZA、HG、GH表型，具有品质优，含量丰富的特点，可作为潜在的良种进行培育。川贝母农艺性状中的叶宽、茎粗和鳞茎鲜质量，以及品质性状中的脱氧腺苷、鸟嘌呤和尿嘧啶，是区分川贝母优劣的关键性状。对川贝母表型进行了较为全面的分类并开展资源系统评价，可为川贝母遗传资源挖掘和良种选育奠定基础。]]> 2025/1/17 9:47:02 33true 目的 建立紫菀Aster tataricus的UPLC指纹图谱及多成分含量测定方法，并结合化学计量学方法寻找不同产地紫菀药材质量差异成分，为其质量控制研究提供技术方法和基础数据。方法 采用菲罗门Titank C₁₈色谱柱（150 mm×2.1 mm，1.8μm），以0.2%甲酸水（A）-乙腈（B）溶液为流动相，梯度洗脱（0～3 min，5%～9% B；3～13 min，9%～10% B；13～15 min，10%～16% B；15～20 min，16% B；20～50 min，16%～28% B；50～54 min，28%～51% B；54～64 min，51%～100% B；64～74 min，100% B；74～76 min，100%～5% B），体积流量为0.3 mL/min，柱温为40℃，进样量为2 μL，检测波长采用定时波长（0～50 min，325 nm；50～70 min，260 nm；70～76 min，203 nm）。采用中药指纹图谱相似度评价软件进行相似度评价，结合化学计量学分析，同时对绿原酸、咖啡酸、阿魏酸、槲皮素、山柰酚、紫菀酮的含量进行测定。结果 建立了紫菀药材的指纹图谱，共标记了17个共有峰，基于对照品比对法及质谱鉴定指认9个色谱峰，分别为峰1（绿原酸）、峰3（咖啡酸）、峰5（阿魏酸）、峰10（槲皮素）、峰11（asterin）、峰12（山柰酚）、峰13（甘草素）、峰16（豆甾醇葡萄糖苷）、峰17（紫菀酮）。聚类分析（cluster analysis，CA‌）将18批紫菀样品分为河北产地和安徽产地。主成分分析（principal component analysis，PCA）表明，不同产地的紫菀样品间存在差异。通过正交偏最小二乘法-判别分析（orthogonal partial least squares-discriminant analysis，OPLS-DA）项下的VIP分析筛选出峰11（asterin）、12（山柰酚）、1（绿原酸）、14、10（槲皮素）、9、13（甘草素）、17（紫菀酮）可能是影响不同产地、不同加工方式紫菀质量差异的标志物。绿原酸、咖啡酸、阿魏酸、槲皮素、山柰酚、紫菀酮的质量分数分别为5.941 6～18.745 1、0.477 2～1.046 6、0.177 4～0.265 6、1.135 8～1.720 7、0.574 9～2.755 7、148.340 8～252.163 9 μg/g，经方法学考察，各成分呈现良好的线性关系。含量测定结果表明，熏硫对紫菀酮含量影响较大，经熏硫后的紫苑中紫菀酮含量显著降低。结论 以多指标成分定量结合化学计量学建立的评价方法区分了不同产地的紫菀，评价了不同加工方式的紫菀中化学成分的含量差异，可为紫菀药材的质量评价与控制提供科学依据及参考。]]> 2025/1/17 9:47:02 32true 目的 通过检测白前Cynanchi Stauntonii Rhizoma et Radix中主要药效成分含量及醇溶性浸出物、总灰分和酸不溶性灰分，建立用于白前质量等级预测的化学计量学及Logistic回归分析方法。方法 对12省36批白前样品进行回流提取，以熊果酸为内参物，采用一测多评（quantitative analysis of multi-components by single-marker，QAMS）法检测提取物中白薇苷A、白薇苷B、白前苷B、熊果酸、胡萝卜苷、β-谷甾醇含量，并与外标法测得结果进行比较，同时对醇溶性浸出物、总灰分和酸不溶性灰分进行检测；采用化学识别模式、因子分析法及Logistic回归分析建立白前质量优劣评价模型，对其质量差异性进行综合评价。结果 熊果酸为内参物时，相对校正因子耐用性良好，相对保留时间值法可用于色谱峰定位，外标法与QAMS法所得含量结果无明显差异；白薇苷A、白薇苷B、白前苷B、熊果酸、胡萝卜苷、β-谷甾醇6个成分线性范围分别为0.37～9.25、1.56～39.00、1.85～46.25、0.29～7.25、0.58～14.50和1.15～28.75µg/mL，平均加样回收率为97.66%～100.12%，RSD为0.69%～1.51%；主成分分析（principal component analysis，PCA）和正交偏最小二乘判别分析法（orthogonal partial least squares-discriminant analysis，OPLS-DA）能明确区分不同产地的白前药材，提取了2个主成分，3个质量差异因子；因子分析法结果显示36批白前的综合得分在−1.225～0.966，其中S25综合得分最高。Logistic回归模型结果与因子分析法分析结果一致。结论 PCA、OPLS-DA、因子分析和Logistic回归模型可以用于评价不同产地白前的质量差异，为白前质量控制提供参考。]]> 2025/1/17 9:47:02 31true 目的 基于简化基因组，建立一种准确鉴定药用芍药Paeonia lactiflora栽培品种的单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphism，SNP）分子标记方法。方法 利用特异位点扩增片段测序（specific-locus smplified fragment sequencing，SLAF-seq）技术对浙江、安徽、四川和湖南的13个药用芍药栽培品种进行SNP标记开发。通过多个指标如杂合率、缺失率和多态性来筛选候选标记，并通过遗传多样性、群体结构和主成分分析等方法进一步评估候选标记。最后采用能够区分药用芍药栽培品种的最简SNP组合绘制指纹图谱。结果 通过SLAF-seq测序共获得3 703 329个SLAF标签，其中多态性标签有60 749个，共获得412 873个群体SNP标记，最后筛选的47个核心SNP标记位点表现出高多态性，可以很好地区分药用芍药栽培品种。结论 基于简化基因组，建立了主要药用芍药栽培品种的SNP标记开发和指纹图谱绘制的方法，为药用芍药的品种鉴定和白芍药材的临床应用提供借鉴。]]> 2025/1/4 14:16:12 30true 目的 筛选刺五加Eleutherococcus senticosus中的PsbP基因（EsPsbP基因），分析其进化特征，研究EsPsbP蛋白与PsbQ蛋白的结合方式，探究其在不同光照下的表达量。方法 根据刺五加基因组数据筛选得到EsPsbP基因，并对其进行生物信息学、适应性进化分析和分子动力学模拟，根据转录组测序结果探究EsPsbP在不同光照下的表达量。结果 共筛选得到了16个EsPsbP基因并将其分为了A～I共9组。在刺五加种内与刺五加和龙牙楤木Aralia elata间共得到了21对共线性基因对，并且基因对的K_a/K_s均小于1。EsPsbP基因没有正选择位点。EsPsbP基因启动子中存在大量光响应元件、激素响应元件和干旱响应元件。分子动力学模拟发现PsbQ蛋白优先与A组的EsPsbP蛋白进行结合。转录组数据显示，不同光质照射后，有9个EsPsbP产生了差异表达。结论 刺五加的16条EsPsbP基因在进化中主要受到纯净选择，这有助于维持基因的稳定性。基因结构特征的分化可能导致EsPsbP与PsbQ蛋白结合能力及对光质变化反应的差异，这些特性可能与刺五加的生理适应及药材品质形成相关，为进一步研究其功能奠定了基础。]]> 2025/1/4 14:16:12 29true 目的 对铁皮石斛Dendrobium officinale中糖基转移酶基因DoUGT83A1进行克隆，并对其进行生物信息学及表达模式分析。方法 从铁皮石斛“雁荡山1号”叶组织中获得DoUGT83A1基因，利用软件进行生物信息学分析，利用MEGA 11构建系统发育树，采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测基因表达模式。结果 通过PCR扩增得到1个DoUGT83A1基因（GI：1622023669），该基因的CDS序列为1 347 bp，编码448个氨基酸。DoUGT83A1蛋白相对分子质量为54 330，理论等电点为5.75，为亲水性不稳定蛋白，无信号肽和跨膜区域，含有41个磷酸化位点，具有UDPGT和PSPG 2个保守结构域。氨基酸序列分析表明DoUGT83A1蛋白与金钗石斛Dendrobium nobile的UGT83A1蛋白的同源性最高，相似度为96.36%。分子对接结果证明DoUGT83A1蛋白对山柰酚具有较好的催化活性。组织特异性表达分析结果显示，DoUGT83A1在“雁荡山1号”不同组织相对表达量为：叶＞茎＞花＞根（白根、绿根尖）。顺式作用元件分析结果表明，DoUGT83A1基因启动子序列含有多个与非生物胁迫响应相关的元件，且在低温、缺磷和菌根共生诱导下显著上调表达，推测该基因可能参与调控铁皮石斛菌根共生及非生物胁迫响应过程。结论 成功克隆获得铁皮石斛DoUGT83A1基因，并进行生物信息学分析和基因表达模式分析。为进一步探究DoUGT83A1基因功能及其在菌根共生和非生物胁迫响应中的作用机制提供理论依据。]]> 2025/1/4 14:16:12 28true 目的 为探究黄芩属药用植物叶绿体基因组密码子的使用偏好性及其影响因素，为黄芩属药用植物遗传育种、资源保护等研究提供理论依据。方法 从美国国家生物技术信息中心（NCBI）数据库中下载了16种黄芩属药用植物的叶绿体基因组，使用Codon W 1.4.2及CUSP和SPSS 27等软件对16种黄芩属药用植物叶绿体基因的编码区（CDS）序列密码子偏好性进行分析。结果 16种黄芩属药用植物的叶绿体基因组编码区的同义密码子和最优密码子使用偏好性一致，都是以A/U结尾，高频密码子有UUA、AGA。PR2-plot、中性图和ENC-plot的结果显示16种黄芩属药用植物叶绿体基因组的密码子使用偏好性同时受到自然选择和内部碱基突变的影响，但自然选择是叶绿体基因组密码子偏好性形成的主导因素。结论 16种黄芩属药用植物的叶绿体基因组密码子偏好A/U结尾，与其他因素相比自然选择是其密码子偏好形成的主导因素。]]> 2025/1/4 14:16:12 27true 目的 建立不同来源茵陈Artemisiae Scopariae Herba药材的UPLC多成分含量测定和指纹图谱方法，对28个产地绵茵陈和22个产地花茵陈药材进行含量测定、指纹图谱分析和化学模式分析。方法 以Waters ACQUITY UPLC BEH C₁₈（100 mm×2.1 mm，1.7 µm）色谱柱为固定相，0.1%甲酸水（A）­乙腈（B）为流动相进行梯度洗脱，体积流量0.25 mL/min，检测波长310 nm，结合对照品比对进行色谱峰确认，对共50份不同来源茵陈药材进行14个化合物的含量测定，指纹图谱分析共有峰和进行相似度评价，采用聚类分析（hierarchical cluster analysis，HCA）和正交偏最小二乘法判别分析（orthogonal partial least squares discrimination analysis，OPLS-DA）筛选茵陈药材的特征成分。结果 建立了茵陈药材UPLC多成分含量测定和指纹图谱方法；结果表明，不同产地来源茵陈化学成分含量存在差异；指纹图谱法标定了绵茵陈、花茵陈各18、32个共有峰，化学模式分析表明化合物3,4-二咖啡酰奎宁酸、3,5-二咖啡酰奎宁酸和4,5-二咖啡酰奎宁酸可作为药材质量评价的标志性成分。结论 建立的UPLC多成分含量测定方法和指纹图谱法适用于不同来源茵陈的质量评价；不同产地的含量测定结果、指纹图谱和化学模式分析结果可为茵陈药材产地选择、质量控制提供有益参考。]]> 2025/1/4 14:16:12 26true 目的 探究棘豆属Oxytropis物种密码子使用模式及影响因素。方法 基于棘豆属9个代表物种的叶绿体基因组数据，采用CodonW1.4.2、SPSS23等软件分析密码子偏好性。结果 棘豆属9个代表物种密码子的不同位点GC含量差异较大，均小于50%，GC₁＞GC₂＞GC₃；碱基组成与密码子适应指数（codon adaptation index，CAI）、密码子偏好指数（codon bias index，CBI）、密码子使用频率（frequency of optional codons，FOP）等密码子参数存在显著正相关；棘豆属9个代表物种有效密码子数大于35，偏好性较弱；ENC-plot、PR2-plot和中性绘图分析显示，自然选择是影响棘豆属物种密码子偏好性的主要因素；9个代表物种鉴定到23个最优密码子，均以A/U结尾；系统发育和聚类分析表明，棘豆属物种具有明显的属内分化，黄花棘豆和甘肃棘豆的亲缘关系较近。结论 棘豆属9个代表物种的密码子偏好性较弱，自然选择是影响棘豆属物种密码子偏好性的主要因素，为棘豆属物种遗传进化研究提供了重要参考数据。]]> 2025/7/23 13:28:36 25true 目的 基于转录组和代谢组联合挖掘佛手Citrus medica中关键黄酮类物质生物合成关键基因，为进一步探究佛手中黄酮类物质的合成调控机制提供基础。方法 采用Illumina HiSeqTM 4 000高通量测序平台对佛手不同发育时期的果实组织进行转录组测序，借助LC-MS/MS技术，对其黄酮类物质进行表征，通过KEGG数据库和关联分析，充分挖掘佛手黄酮类物质生物合成关键基因。结果 通过代谢组学和转录组学分析共获得21个差异黄酮类物质和25个差异表达基因，均存在明显差异。佛手黄酮类物质生物合成途径中，香橙素-7-O-葡萄糖苷、圣草次苷、柚皮苷、芸香柚皮苷、橙皮素-3-O-葡萄糖苷等随果实的发育逐渐降低，芹菜素-5-O-葡萄糖苷、木犀草素-4-O-葡萄糖苷等物质随果实的发育逐渐升高；在佛手黄酮类物质代谢途径中，成功鉴定到苯丙氨酸解氨酶（phenylalanine ammonialyase，PAL）、4-香豆酸辅酶a连接酶（4-comarate coenzyme a ligase，4CL）、查耳酮合成酶（chalcone synthase，CHS）、查耳酮异构酶（chalcone isomerase，CHI）、黄酮3-羟化酶（flavonol-3-dehydrogenase，F3H）、黄酮3’-羟化酶（flavonol-3’-dehydrogenase，F3’H）、黄酮合酶（flavone synthase，FNS）、花青素合成酶（anthocyanidin synthase，ANS）、糖基转移酶（UDP-glyotransferases，UGTs）等关键酶基因。关键酶基因PAL、4CL、CHS、F3H、FNS等负向调控下游代谢物，CHI、UGTs等正向调控下游代谢物，均与下游代谢物显著相关。结论 揭示了佛手在不同发育阶段黄酮类代谢物和相关基因的差异表达模式，为阐明佛手黄酮类物质生物合成调控机制奠定理论基础。]]> 2025/7/23 13:28:36 24true 目的 克隆山豆根Sophora tonkinensis StNAC46基因，并对其进行生物信息学、亚细胞定位及功能验证分析，探究StNAC46基因在山豆根中的作用。方法 以山豆根总RNA反转录得到的cDNA作为模板，通过PCR技术克隆StNAC46基因。利用生物信息学分析、融合报告基因定位、实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qRT-PCR）、农杆菌介导的遗传转化以及高效液相色谱电喷雾串联质谱法（ESI-HPLC-MS/MS）等方法，分析StNAC46蛋白的结构特性、启动子序列、亚细胞定位以及转基因功能。结果 StNAC46基因全长1 083 bp，编码360个氨基酸，其蛋白质相对分子质量为39 800，等电点为8.67，属于亲水性蛋白，含有32个丝氨酸磷酸化位点。StNAC46包含1个NAM结构域，与毒羊豆、相思子以及密花豆等多种植物中的NAC（NAM、ATAF1/2、CUC1/2）蛋白显示出较高的同源性。StNAC46基因启动子包含核心元件（CAAT-box和TATA-box）以及响应植物激素—脱落酸（abscisic acid，ABA）、赤霉素（gibberellic acid，GA）和茉莉酸甲酯（methyl jasmonate，MeJA）的特定反应元件。亚细胞定位结果显示，StNAC46蛋白定位于细胞核与细胞质中。酵母单杂交验证发现，StNAC46与StCAO基因启动子区域存在相互作用。与野生型（wide type，WT）相比，StNAC46转基因烟草中苦参碱和氧化苦参碱含量增加。结论 山豆根StNAC46基因能够促进植物的生物碱合成，为山豆根的品种选育以及深入解析山豆根生物碱生物合成途径的分子机制奠定了重要基础。]]> 2025/7/23 13:28:36 23true 目的 基于数字化指纹图谱、多指标成分含量测定整合策略，对不同产地板蓝根Isatidis Radix品质进行评价。方法 采用UPLC方法建立不同产地板蓝根数字化指纹图谱，通过N强峰、共有峰等筛选及模糊化处理，提取得到板蓝根特征指纹谱。测定各产地板蓝根中尿苷、鸟苷、(R,S)-告依春、腺苷等指标成分含量。在此基础上，以板蓝根特征指纹参数与各指标成分含量占比进行整合分析，探究板蓝根特征指纹总差异率影响因素。结果 以(R,S)-告依春为内参计算各样本色谱峰相对保留时间和相对峰面积，建立了21个产地板蓝根UPLC数字化指纹图谱。通过各样本色谱峰峰面积占比和（＞70%），筛选得到各样本13个N强峰，并在共有峰频次（＞15）基础上，得到含有34个特征峰的板蓝根特征指纹谱；不同产地板蓝根特征指纹重叠率、检出率多在80%～90%，相比之下，板蓝根特征指纹总差异率变化更为显著（33%～111%）。含量测定结果表明，不同产地板蓝根中尿苷、鸟苷、(R,S)-告依春、腺苷等指标成分含量存在较大差异。将不同产地板蓝根特征指纹参数与其指标成分含量占比组成进行整合可视化分析，结果表明，尿苷、鸟苷、腺苷与各样本特征指纹总差异率呈现二级聚类相关性，与(R,S)-告依春占比及指标成分总含量呈现三级聚类相关性，上述指标成分占比过高或过低均会导致板蓝根样本总差异率升高。结论 建立的基于数字化指纹图谱整合多指标含量测定方法，能够有效地发现不同产地板蓝根特征指纹差异率原因，为不同产地板蓝根品质评价提供了方法参考。]]> 2025/7/23 13:28:36 22true 目的 比较分析云南不同产区根茎类药用植物三年生三七Panax notoginseng的品质，并为高海拔产区三七的质量评价提供科学依据。方法 通过测定比较分析云南9个产区（红河建水、保山施甸、玉溪红塔、版纳勐海、文山砚山、楚雄禄丰、曲靖沾益、昆明寻甸、大理宾川，海拔跨度1 475～2 615 m）三年生三七的农药残留、重金属含量、灰分含量、浸出物含量、皂苷含量等指标，并进行综合评价。结果 所有产区三七中均未检测出《中国药典》2020年版规定的33项农药残留物，三七在部分中海拔产区（版纳勐海、保山施甸）中检测出苯醚甲环唑、腈菌唑、肟菌酯、戊唑醇、烯唑醇等农药残留，但未超过《GB 23200.113-2018食品安全国家标准》规定的限定量。所有产区三七重金属（镉、汞、铅、铜、砷）含量都远低于《中国药典》2020年版规定的限定量，且楚雄禄丰、曲靖沾益、大理宾川等高海拔产区三七中镉和铅含量较低。所有产区三七灰分含量都低于《中国药典》2020年规定的6%，且产区海拔与三七灰分含量呈正相关。所有产区三七浸出物含量都超过《中国药典》2020年版规定的16%，其中传统道地产区（文山）三七浸出物含量最高，中海拔产区（玉溪红塔、版纳勐海）三七浸出物含量最低。楚雄禄丰、曲靖沾益、昆明寻甸等高海拔产区的三七单体皂苷及总皂苷含量显著高于红河建水、保山施甸、玉溪红塔和版纳勐海等中海拔产区，所有产区三七中三七皂苷R₁＋人参皂苷Rg₁＋人参皂苷Rb₁皂苷含量均高于《中国药典》2020年版规定的5%，且高海拔产区三七高于中海拔产区三七。结论 高海拔产区三七的农药残留量低，灰分与浸出物含量高，有效成分皂苷的积累高，因此高海拔种植三七有利于提高药材品质。]]> 2025/7/23 13:28:36 21true 目的 研究芍药属4种药用植物叶绿体基因组特征、变异程度及芍药属和毛茛科植物的系统发育关系，为芍药属药用植物的分类地位和系统发育提供参考。方法 应用二代高通量测序技术测定芍药Paeonia lactiflora叶绿体基因组，利用比较基因组学方法分析了芍药与川赤芍P. Veitchii、牡丹P. suffruticosa及杨山牡丹P. ostii等芍药属药用植物叶绿体基因组之间的结构特征及变异程度，以山地虎耳草Saxifraga sinomontana等植物为外类群，分析了芍药属植物与毛茛科植物的系统发育关系。结果 芍药属4种药用植物的叶绿体基因组均为典型的四分结构，包含1个大单拷贝区（large single copy，LSC）、1个小单拷贝区（small single copy，SSC）和2个反向重复区（inverted repeats，IRa和IRb）。芍药叶绿体基因组序列长度为152 731 bp，GC含量为38.43%，共注释到基因126个，其中82个蛋白质编码基因、36个tRNA基因和8个核糖体rRNA基因。重复序列分析发现芍药叶绿体基因组重复序列数量最多为48个，杨山牡丹最少为39个；只有芍药同时含有4种类型的重复序列。芍药含有最多的SSR序列达52个，4种植物SSR序列中单核苷酸重复占比达81%～86%，绝大多数为A/T重复。密码子偏好性分析表明芍药属4种药用植物中氨基酸出现频率均以亮氨酸最高，半胱氨酸最低；31种密码子具偏好性，且密码子偏好性与密码子第3位碱基具显著相关性。LSC/IRb、IRb/SSC、SSC/IRa和IRa/LSC边界附近的基因类型相同，相对保守，但牡丹组和芍药组之间仍具有差异。选择压力分析结果表明，绝大多数基因K_a/K_s值均小于1，受纯化选择，matK、ndhB和rpoA受到正选择。叶绿体基因组比较分析发现芍药属内4种药用植物的叶绿体基因组中非编码区比基因编码区的变异程度大，筛选出了6个基因间区和2个基因编码区的高变异区。系统发育分析结果显示，芍药与美丽芍药亲缘关系最近，所有芍药属植物被聚为一个分支，外类群把芍药属和毛茛科植物分隔开来，芍药属植物与毛茛科植物亲缘关系较远。结论 芍药属4种植物在叶绿体基因组结构特征方面较为保守，但其变异程度存在一定差异；筛选出的8个高变异区可为芍药属药用植物的条形码开发、物种鉴定及药用植物质量控制提供候选片段；系统发育分析表明芍药属植物与外类群植物亲缘关系较近，而与毛茛科植物亲缘关系较远，为芍药属植物系统进化、芍药属药用植物的物种鉴定、质量控制及保护开发等研究奠定基础。]]> 2025/7/2 18:14:31 20true 目的 在全基因组水平鉴定蒙古黄芪生物调控因子（Growth-regulating factors，GRF）转录因子家族成员，开展系统的生物信息学分析，并探究该家族基因在黄芪不同生长期的表达模式，为研究GRF转录因子调控黄芪次生代谢的分子机制提供基础。方法 通过生物信息学方法鉴定黄芪GRF转录因子家族，对其编码蛋白的理化特性、保守结构域组成、潜在亚细胞定位、系统发育关系及启动子区顺式调控元件进行预测分析，利用转录组数据研究GRF基因在黄芪不同生长期的表达模式，并与黄芪根中黄酮皂苷含量数据进行基因表达与代谢物积累的相关性评估。结果 蒙古黄芪基因组共鉴定获得9个GRF转录因子家族成员，分别定位在7条染色体，聚类为5个亚家族。AmGRF蛋白氨基酸残基数目在320～642 aa，均表现为亲水性特征，不存在跨膜结构域及信号肽序列，亚细胞定位均在细胞核。系统进化分析显示，AmGRF转录因子与大豆GRF亲缘关系较近。AmGRF基因启动子区存在大量与光信号响应、激素信号转导、生长发育及逆境胁迫应答相关的顺势作用元件。转录组数据表明，AmGRF基因各成员在不同生长期根部组织的表达模式存在较大差异，表明各家族成员可能在黄芪不同生长阶段中发挥特异的调控作用。基因表达与黄芪黄酮皂苷含量相关性分析显示，AmGRF3和AmGRF4与黄芪根中黄酮代谢调控相关，AmGRF5、AmGRF6和AmGRF8与黄芪根中皂苷代谢调控相关。结论 在全基因组水平对蒙古黄芪GRF基因家族进行鉴定和生信分析，通过黄芪不同生长期根中皂苷黄酮含量测定和GRF基因表达数据，鉴定出与黄芪黄酮皂苷代谢相关的GRF转录因子，为深入解析该家族调控蒙古黄芪生长发育及次生代谢的生物学功能提供关键靶点。]]> 2025/7/2 18:14:31 19true 目的 基于ITS序列进行分子鉴定，采用指纹图谱、重金属元素定量与化学计量法相结合的方法，评价不同产地忍冬茶藨子叶状层菌Phylloporia lonicerae的质量，为其进一步开发利用提供依据。方法 分别提取采自4个不同产地的忍冬茶藨子叶状层菌的基因组DNA，扩增ITS序列后测序，并构建系统发育树；采用HPLC法，流动相为0.1%冰乙酸-乙腈进行梯度洗脱，柱温30 ℃，体积流量0.8 mL/min，检测波长280 nm，对12批忍冬茶藨子叶状层菌建立指纹图谱及铜、砷、镉、汞、铅5种重金属元素含量测定，运用聚类分析（hierarchical cluster analysis，HCA）、主成分分析（principal component analysis，PCA）和正交偏最小二乘法-判别分析（orthogonal partial least squares-discriminant analysis，OPLS-DA）对忍冬茶藨子叶状层菌进行化学计量分析。结果 构建了基于ITS序列的系统发育树，12批忍冬茶藨子叶状层菌属于同一个种；建立了12批忍冬茶藨子叶状层菌的指纹图谱，相似度为0.829～0.992，共标定15个共有峰，指认了5个成分，ICP-MS测定结果表明不同产地忍冬茶藨子叶状层菌中重金属元素含量存在明显差异；HCA分析12批忍冬茶藨子叶状层菌明显分为2类；PCA得到4个主成分的累积方差贡献率为86.751%；OPLS-DA表明铜、砷可作为忍冬茶藨子叶状层菌的特征元素。忍冬茶藨子叶状层菌中共有峰2、3和13（原儿茶醛）可能是影响药材质量的差异标志物。结论 建立的忍冬茶藨子叶状层菌HPLC指纹图谱及5个重金属元素含量测定方法的专属性强，且准确、可靠，结合化学计量法可用于忍冬茶藨子叶状层菌的药材鉴别和质量控制。]]> 2025/7/2 18:14:31 18true 目的 建立楮实子Broussonetiae Fructus中槲皮素、木犀草素、芹菜素、大黄素、大黄素甲醚、鹅掌楸碱、白屈菜红碱、氯化两面针碱、岩藻甾醇、胡萝卜苷、β-谷甾醇11种成分定量检测方法，同时检测其醇溶性浸出物、总灰分和酸不溶性灰分含量，并结合化学模式识别和Logistic回归分析对不同产地楮实子进行等级预测。方法 采用Synergi Max-RP色谱柱；以乙腈-0.3%磷酸溶液为流动相，梯度洗脱；检测波长360 nm（槲皮素、木犀草素和芹菜素）、271 nm（大黄素、大黄素甲醚、鹅掌楸碱、白屈菜红碱和氯化两面针碱）和210 nm（岩藻甾醇、胡萝卜苷和β-谷甾醇）；采用外标法检测楮实子中11种成分含量。按《中国药典》2020年版四部检测楮实子中醇溶性浸出物、总灰分和酸不溶性灰分含量。利用SPSS 26.0和SIMCA 14.1软件对14个定量检测指标结果进行化学模式识别分析，采用Logistic回归分析建立不同产地楮实子的等级预测模型，并进行验证。结果 11种成分在各自质量浓度范围内线性关系良好（r＞0.999）；平均加样回收率为96.98%～100.08%，RSD为0.71%～1.84%；精密度、重复性和稳定性良好（RSD均＜2.0%）。45批楮实子中槲皮素、木犀草素、芹菜素、大黄素、大黄素甲醚、鹅掌楸碱、白屈菜红碱、氯化两面针碱、岩藻甾醇、胡萝卜苷和β-谷甾醇质量分数分别为（2.319±0.377）、（1.957±0.342）、（4.818±0.779）、（0.301±0.054）、（0.701±0.158）、（0.936±0.158）、（1.771±0.295）、（0.431±0.085）、（0.123±0.037）、（0.088±0.023）、（0.409±0.084）mg/g；醇溶性浸出物、总灰分和酸不溶性灰分含量分别为（18.1±2.6）%、（6.8±0.6）%和（0.9±0.4）%。主成分分析结果显示有2个主成分的特征值大于1，45批楮实子聚为3类；因子分析显示S17～S31排序靠前、S1～S16排序靠中、S32～S45排序靠后；正交偏最小二乘判别分析显示芹菜素、大黄素甲醚、槲皮素、木犀草素、白屈菜红碱和β-谷甾醇是不同产地楮实子质量差异因子。Logistic回归分析显示45批楮实子所对应的预测归属等级明确，拟合概率P值均大于98.0%。结论 HPLC多成分定量检测、化学模式识别及Logistic回归分析模型操作便捷、结果准确，可用于不同产地楮实子的等级预测，为中药楮实子的质量评价标准制定提供数据参考。]]> 2025/7/2 18:14:31 17true 目的 系统评估汉白玉（Ar）、秸秆生物炭（Br）、粉煤灰（Fh）及菌渣（Me）对镉（Cd）污染土壤的钝化效果及其对艾蒿Artemisia argyi Cd吸收的影响。方法 以湖南省花垣县和岳阳市铅矿区Cd污染土壤为对象，开展盆栽试验，测定4种钝化材料对土壤总Cd、有效态Cd含量及1年生艾蒿地上与地下部位Cd富集的影响，分析其与土壤pH值、阳离子交换量（cation exchange capacity，CEC）的关联性。结果 艾蒿地上部分Cd富集量显著高于地下部分（P＜0.05）。钝化材料施用显著提升土壤pH和CEC，并降低土壤总Cd及有效态Cd含量。材料效果排序为Ar＞Br＞Fh＞Me。结论 艾蒿对Cd的转运富集能力集中于地上部分，可作为植物修复的靶向部位。钝化材料通过提升土壤pH和CEC显著抑制Cd生物有效性，其中Ar对Cd的固定效果最优，推荐为湖南铅矿区艾蒿种植土壤修复的首选材料。]]> 2025/7/2 18:14:31 16true 目的 为了解类萌发素蛋白（germin-like protein，GLP）在人参Panax ginseng中的功能，对人参GLP基因(PgGLPs)家族进行了鉴定，明确其在不同类型组织材料的表达模式。方法 利用生物信息学分析了PgGLPs的染色体定位、基因结构、保守基序、进化关系、表达模式和顺式作用元件等。同时基于以上分析结果选取4条PgGLP基因研究其在人参种胚、愈伤组织、实生苗根、叶柄、叶不同组织材料中的表达情况。结果 在人参转录组数据库中鉴定得到28条PgGLP转录本，染色体定位结果表明PgGLPs不均匀地分布在人参12条染色体上。系统发育分析将PgGLPs分为3个亚型，分别包含3、10、15个成员，其中亚型Ⅱ中只包含PgGLPs。顺式作用元件预测结果显示，PgGLPs启动子区域存在多种与植物激素、生长发育、逆境胁迫相关响应元件。PgGLP成员在人参不同组织部位中的表达水平差异较大，4条PgGLPs在人参种胚的表达普遍高于其他组织部位，具有组织特异性，其中PgGLP16-01在不同组织部位中的表达量高于其他3条基因。结论 鉴别出28个人参PgGLP家族成员，其表达呈现组织特异性，PgGLP基因家族的系统鉴定及表达分析为人参生长发育相关基因家族的研究奠定理论基础，为进一步研究植物类萌发素蛋白提供参考。]]> 2025/6/19 14:11:39 15true 目的 研究移栽和仿野生种植模式下土壤理化性质、根际微生物及对黄芪活性成分的影响，阐明种植模式对黄芪品质的影响。方法 采用高通量测序技术分析甘肃2年生育苗移栽黄芪、2年生和3年生仿野生黄芪根际土壤微生物群落结构。采用高效液相色谱法测定黄芪中4个黄酮类成分和4个皂苷类成分，紫外分光光度法检测总黄酮、总皂苷和总多糖含量。采用常规方法测定黄芪土壤理化性质。采用多变量相关分析，考察根际细菌和真菌、土壤性质及黄芪活性成分之间的相关性。结果 育苗移栽黄芪土壤有机质、全氮、氨氮、总磷、速效钾、有效硼含量显著高于仿野生黄芪。育苗移栽黄芪根际细菌和真菌菌落丰富性指标Sobs和Chao1显著高于仿野生黄芪，细菌菌落的多样性指标Shannon显著高于仿野生黄芪。维什尼亚科齐马菌属Vishniacozyma是育苗移栽黄芪根际真菌菌落的优势菌属，菌镰孢属Fusarium是仿野生黄芪根际真菌菌落的优势菌属。育苗移栽黄芪芒柄花素、毛蕊异黄酮和总多糖含量显著高于仿野生黄芪。相关性分析显示黄芪中总黄酮、毛蕊异黄酮、芒柄花苷、芒柄花素、黄芪皂苷I、黄芪甲苷、总多糖与土壤理化因子较为相关。土壤氨氮、有机质、全氮、总磷、有效硅、有效磷、有效钾、有效硼和锰是影响不同种植模式黄芪根系细菌和真菌群落结构和多样性的主要影响因素。细菌菌落Sobs、Chao1和Shannon与芒柄花素呈显著正相关，Sobs和Chao1与总黄酮、毛蕊异黄酮呈显著正相关，真菌菌落Chao1与毛蕊异黄酮苷呈显著负相关。结论 黄芪活性成分受土壤理化因子和根际微生物群落的综合影响，通过分析土壤-微生物-药用植物相互作用机制，可为提高不同种植模式下黄芪产量和质量提供科学依据。]]> 2025/6/19 14:11:39 14true 目的 建立神农架产红豆杉Taxus wallichiana var. chinensis种子的HPLC指纹图谱及多成分含量测定方法。应用该方法对其他4种红豆杉属植物种子（分别为东北红豆杉T. cuspidata、西藏红豆杉T. wallichiana、南方红豆杉T. wallichiana var. mairei、曼地亚红豆杉T. media）进行对比分析，并进一步结合化学模式识别方法、对红豆杉和同种近源植物南方红豆杉的种子进行比较分析。方法 红豆杉的标准指纹图谱及含量测定方法用HPLC方法建立，采用《中药色谱指纹图谱相似度评价软件（2012年版）》分析各样品的相似度；并采用聚类分析（cluster analysis，CA）、主成分分析（principal component analysis，PCA）与正交偏最小二乘法-判别分析（orthogonal partial least squares discriminant analysis，OPLS-DA）等方法对红豆杉和南方红豆杉种子的指纹图谱进行分析评价。结果 建立了14批红豆杉种子样品的HPLC对照指纹图谱（R）和26批红豆杉属5种植物种子样品的指纹叠加图谱，并标定了16个共有峰。通过对照品指认出10-去乙酰巴卡亭Ⅲ、巴卡亭Ⅲ、7-木糖基-10-脱乙酰基紫杉醇、10-脱乙酰紫杉醇、三尖杉宁碱和紫杉醇等6个含量较高的紫杉烷类化合物，并建立了同时测定这6种主要紫杉烷类成分含量的方法。红豆杉和同属4种植物种子的指纹图谱与标准对照指纹图谱（R）的相似度为0.885～0.995，它们所含的主要紫杉烷类活性成分有极高的相似性。化学模式识别可区分红豆杉和南方红豆杉种子，并筛选出5种差异性成分。结论 红豆杉等5种同属植物的种子所含的主要活性紫杉烷类化合物有极高的相似性，这些种子可考虑作为同一类型的药材资源进行开发利用。通过建立的指纹图谱结合化学模式识别，能够鉴别红豆杉种子及其近源植物南方红豆杉的种子。]]> 2025/6/19 14:11:40 13true 目的 建立山慈菇Pleiones Pseudobulbus（冰球子）及其潜在代用品的HPLC指纹图谱，并结合化学模式识别寻找山慈菇（冰球子）及其潜在代用品的差异性成分，筛选山慈菇（冰球子）最佳代用品。方法 使用乙腈-0.1%磷酸水溶液作流动相进行梯度洗脱, Agilent ZORBAX SB-C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），检测波长224 nm，进样量25 μL，柱温为30 ℃，体积流量为0.8 mL/min，建立40批样品HPLC指纹图谱，结合相似度评价、特征图谱、聚类热图分析、主成分分析（principalcomponent analysis，PCA）、正交偏最小二乘法判别分析（orthogonal partial least squares discriminant analysis，OPLS-DA）对特征成分进行数据分析。结果 40批样品共有5个共有峰，经对照品比对指认出了5个成分，分别为天麻素、对羟基苯甲醇、dactylorhin A、militarine、山药素III。聚类热图和PCA分析结果可将山慈菇（冰球子）及其潜在代用品进行区分，并结合相似度评价，初步判断带唇兰Tainia dunnii为山慈菇（冰球子）最佳代用品。不同基原样品的HPLC典型特征图谱结合OPLS-DA分析与PCA分析，筛选出山慈菇（冰球子）正品基原与其潜在代用品的主要差异性指标成分为loroglossin、dactylorhin A和militarine。结论 建立的指纹图谱结合化学模式识别方法可用于山慈菇（冰球子）及其潜在代用品的区分及山慈菇（冰球子）最佳代用品的筛选。]]> 2025/6/19 14:11:40 12true 目的 建立HPLC指纹图谱，区分白头翁Pulsatilla chinensis与其常见混伪品；建立正品白头翁HPLC指纹图谱和抗氧化活性间的谱效关系，辨识并验证白头翁潜在抗氧化质量标志物（quality markers，Q-Marker）。方法 分别建立18批正品白头翁及其常见混伪品的HPLC指纹图谱，通过相似度计算区分正品及其混伪品；采用UPLC-QTOF-MS/MS技术表征正品白头翁化学成分；建立正品白头翁HPLC指纹图谱和清除1,1-二苯基-2-苦肼自由基（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl，DPPH）间的谱效关系模型，筛选出潜在的抗氧化Q-Marker，测定含量；以脂多糖促RAW264.7细胞氧化应激损伤模型，评估潜在Q-Marker的生物效应。结果 正品白头翁与其常见混伪品指纹图谱差异明显，相似度为0.667～0.321；18批正品白头翁的HPLC指纹图谱，相似度为0.994～0.959，共有峰21个；经质谱表征解析了正品白头翁中的21个化学成分；药效学实验表明各组正品白头翁均具有良好的抗氧化能力，谱效相关性分析结果显示17号和21号峰与抗氧化活性关系密切；经对照品比对确定17号和21号峰分别为白头翁皂苷B4和白头翁皂苷D，质量分数分别为15.99%～8.86%和2.55%～0.97%；抗氧化活性验证结果表明，白头翁皂苷B4和白头翁皂苷D显著降低脂多糖诱导的RAW264.7 细胞NO和ROS水平（P＜0.001），且二者配伍时不同程度的优于单一成分。结论 所建立的HPLC指纹图谱方法能够准确鉴定正品白头翁药材，整合药效学实验，能够科学辨识白头翁Q-Marker用于白头翁的质量控制。建立了一套系统的评价白头翁质量的方法，为有效成分含量较低、难于质控的中药材的品质评价提供参考。]]> 2025/6/19 14:11:40 11true 目的 发掘植物激素信号通路中与北柴胡Bupleurum chinense侧根发育紧密关联的基因。方法 以自组拼接的北柴胡基因组为模板，对北柴胡推广品种川北柴1号苗期根系进行有参考基因组的转录组分析，筛选参与植物激素信号转导的关键基因，利用实时荧光定量聚合酶链式反应（real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction，qRT-PCR）技术验证关键基因对外源生长素处理的表达应答。结果 有参转录组分析得到32 259个基因，681个基因在有侧根成熟区（RO）样本中特异表达。加权基因共表达网络分析将基因分为56个模块，2个模块与主根长度和侧根数目显著相关。与侧根形成高度相关的生长素信号转导与运输通路上共发掘到88个差异基因，其中26个基因表达模式高度相关。转录组差异基因表达相关性与外源生长素处理后的基因表达结果联合分析表明，BcIAA13、BcARF19、BcSAUR55和BcSAUR72基因可能是侧根生长发育的关键基因。结论 进一步揭示了在RO样本中表达量高的基因可能与侧根发育密切相关，并筛选到转录因子BcARF19与BcIAA13密切相关，其可能调控下游基因的表达，进而影响侧根的生长发育。]]> 2025/6/9 9:43:57 10true 目的 探索忍冬Lonicera japonica基因（LjMLO14）抗白粉病机制。方法 应用病毒诱导的基因沉默技术（virus induced gene silencing，VIGS）抑制忍冬LjMLO14基因的表达，通过接种白粉菌进行抗性鉴定。结果 研究发现，在VIGS载体转化忍冬15 d后，LjMLO14基因的相对表达量显著下降了80%～90%，沉默效果显著。对基因沉默后的忍冬叶片进行白粉病抗性鉴定，菌丝体的生长较野生型显著减弱，抗性水平较野生型显著提高。结论 为初步鉴定LjMLO14基因对忍冬白粉病的调控功能，培育忍冬抗白粉病新品种提供理论依据。]]> 2025/6/9 9:43:57 9true 目的 克隆山茱萸Cornus officinalis G10H1基因（CoG10H1），并进行相关的生物信息学分析、表达分析和亚细胞定位研究。方法 基于山茱萸转录组数据筛选并克隆CoG10H1基因，并对其CoG10H1及其编码蛋白的理化性质、二级结构、三级结构等进行分析。利用实时荧光定量聚合酶链式反应PCR（real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction，qRT-PCR）对CoG10H1进行组织特异性表达分析。构建pCAMBIA1300-CoG10H1-GFP融合表达载体并侵染烟草叶片，激光共聚焦显微镜观察CoG10H1蛋白的亚细胞定位。结果 CoG10H1的cDNA长度为1 497 bp，编码499个氨基酸，有1个信号肽，在茎中表达量稍高，果实和叶片中次之，激光共聚焦显微镜下观察到CoG10H1蛋白定位于内质网中。结论 CoG10H1蛋白属于细胞色素P450蛋白家族，可能在马钱苷合成通路中的发挥关键作用，为后续研究CoG10H1基因在马钱苷合成通路调控中的作用研究提供参考。]]> 2025/6/9 9:43:57 8true 目的 阐明不同有机肥处理对暗紫贝母Fritillaria unibracteata出苗率、产量和核苷类活性成分的影响，并初步揭示其作用机制。方法 通过对三年生的暗紫贝母施加不同浓度的猪粪肥和鸡粪肥，比较有机肥添加对暗紫贝母出苗率、产量和品质的差异，并对其根际微生物进行高通量测序分析，解析不同施肥处理下暗紫贝母根际土壤微生物群落组成差异与品质和产量间的内在关系。结果 猪粪肥（1.35 kg/m²）和鸡粪肥（1.35 kg/m²）的施用显著改善了土壤酸化情况，增加了土壤中有效磷和总磷的含量，使暗紫贝母的出苗率分别提升至（95.06±4.58）%和（95.86±0.94）%，产量分别提升58.71%和20.07%，核苷类活性成分明显增加，如胞苷分别提升17.33%和19.56%、鸟苷分别提升140.09%和11.28%。微生物组学结果显示施加有机肥后不会影响川贝母根际微生物群落多样性，Pirellula、Pyrinomonas和Stenotrophobacter等有益微生物丰度显著提升；共线性网络分析证明施肥后川贝母根际微生物群落之间的模块化程度明显加强；鲁棒性分析表明鸡粪肥的施加使细菌和真菌群落结构更加稳定；冗余分析和结构方程建模表明有效磷含量与土壤微生物群落多样性、暗紫贝母产量和质量之间存在显著关联。结论 施加适度的猪粪肥和鸡粪肥能改善暗紫贝母土壤生长环境，优化土壤环境因子，并增强根际土壤微生物结构稳定性和紧密性，进而使暗紫贝母产量和品质得到显著提升。可为暗紫贝母的品质提升从营养调控角度提供新的策略，并为其规范化栽培奠定基础。]]> 2025/6/9 9:43:57 7true 目的 筛选适宜黄芪生长、活性物质积累和土壤养分吸收的微生物菌肥。方法 对大田栽培黄芪施用6种微生物菌肥（T1～T6），以不施微生物菌肥为对照，测定生长期白粉病发病率以及收获期成药根生长特性、主要活性物质和土壤养分含量。结果 不同微生物菌肥对黄芪生长、活性物质积累和土壤养分吸收具有显著影响；其中，T5（溶磷菌）白粉病发病率最低（22.90%），T4（枯草芽孢杆菌）较有利于根产量形成，T3（链霉菌）较有利于多糖、总黄酮和总酚化合物的积累，4个黄酮类化合物（毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮和芒柄花素）总含量以T6（溶磷、固氮菌）最高（744.36 μg/g）、4个皂苷类化合物（黄芪甲苷Ⅰ、黄芪甲苷Ⅱ、黄芪甲苷Ⅲ和黄芪甲苷Ⅳ）总含量以T1（产酶溶杆菌）最高（104.62 μg/g），T4处理1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl，DPPH）清除率最大（61.00%）、T6处理铁离子还原/氧化能力（ferric reducing/antioxidant power，FRAP）值最高（946.10 μmol/L）；综合质量评价值（D值）显示T4（0.74）、T3（0.64）和T6（0.58）较有利于黄芪综合质量形成。种植黄芪可导致土壤pH值和全盐量升高以及全钾含量降低，通过施用微生物菌肥和适量化肥，可在一定程度上缓解pH值和全盐量升高、提高土壤养分含量；其中，T6较有利于有机质、全氮和速效磷吸收，T4有利于全钾和碱解氮吸收，T3有利于全氮和碱解氮吸收。结论 施用微生物菌肥可显著促进黄芪质量形成和土壤养分吸收，其中T4（枯草芽孢杆菌）、T6（溶磷、固氮菌）和T3（链霉菌）较为显著，将为黄芪微生物菌肥研发和应用提供重要参考。]]> 2025/6/9 9:43:57 6true 目的 解析各5个产地的小构树Broussonetia monoica和藤构Broussonetia kaempferi的叶绿体基因组序列特征与系统进化关系。方法 基于深圳华大BGISEQ-500测序平台，对各5个产地的小构树和藤构个体进行高通量基因组重测序。采用GetOrganelle、Geneious Prime、CpGAVAS2、MISA、REPuter、IRscope、DnaSP、CodonW、IQ-tree等生物信息学工具，进行叶绿体基因组组装与注释、比较基因组分析、密码子偏好分析和系统发育分析。结果 小构树和藤构的各5个体完整叶绿体基因组均呈现典型的环状四分体结构，序列全长分别为160 799～160 877 bp和160 414～160 622 bp，均注释得到135个基因，包括87个蛋白质编码基因、37个tRNA基因、8个rRNA基因和3个假基因。10个叶绿体基因组序列边界基因较为保守，扩张收缩现象不明显。从它们的叶绿体基因组中分别鉴定出98～101个和108～115个SSR位点，以及42～48个和43～54个长重复序列。小构树中的psbC（8 bp）＋psbC_trnS-UGA区域以及atpF、ndhF、ndhI基因和藤构中的ccsA（35 bp）＋ccsA_ndhD区域以及rps16、psbI、petG基因变异度最大。两者叶绿体基因组中均发现30个高频密码子，并筛选出7个相同的最优密码子。系统发育分析显示，小构树与藤构的亲缘关系较构树更近，种内小构树和藤构个体之间的亲缘关系与地理位置有关。结论 小构树和藤构的叶绿体基因组结构、基因数量和密码子使用偏好保守性高，但在重复序列和基因间隔区上存在较大变异；以叶绿体基因数据构建的系统发育树指示了2个物种种内的亲缘关系与样本取样地地理位置有关。]]> 2025/5/23 15:34:45 5true 目的 探究不同地区黄芪根系细菌群落组成和多样性差异及其与土壤环境因子的相关性，以指导黄芪高产栽培。方法 采用高通量测序对陇西、渭源、岷县和漳县地区黄芪根际土壤和根内生细菌进行测序，对比分析其群落结构和多样性差异，并探究土壤理化因素与根系细菌群落的相关性。结果 黄芪根内生样本共获得1 769个OTU，其中541个OTU为共有，根际土壤样本共获得1 676个OTU，其中1 224个OTU为共有。黄芪的根内生样本中丰度最高的细菌门为Proteobacteria，细菌属为Pseudomonas，根际土壤样本中丰度最高的细菌门为Acidobacteria，细菌属为Sphingomonas。根内细菌群落的网络复杂度和稳定性高于根际网络，但根际细菌的生态位宽度高于根内。根内细菌群落的形成更容易受随机过程的影响。总氮、速效氮、有机质、脲酶和过氧化氢酶是影响根系细菌群落组成和多样性的主要因素。结论 不同地区黄芪根系细菌群落组成和多样性存在差异，且土壤理化对细菌群落影响较大，为黄芪根系细菌资源挖掘和品质的提高提供一定的理论基础。]]> 2025/5/23 15:34:45 4true 目的 对蒲公英Taraxacum mongolicum的颜色、气味和滋味进行数字化表征，并对蒲公英进行产地区分。方法 通过分光测色计、电子鼻和电子舌对30批次蒲公英粉末的颜色、气味和滋味数据进行雷达图、变异系数及主成分分析（principal components analysis，PCA），从中提取对产地区分有意义的特征传感信号指标，对其进行数据融合，做PCA及聚类分析。结果 对分光测色仪传感信号做变异系数分析，色度系统变异系数a^*＞b^*＞L^*，且a^*的变异系数远大于其余2个传感信号值，选择a^*作为色度特征指标；选择电子鼻传感信号前2个主成分进行建模，PC1贡献率73.6%，PC2贡献率10.9%，累积贡献率为84.5%，结合雷达图进行分析，选择对前2个主成分贡献最大且响应最高的W1W及W5S作为影响不同样品的气味特征指标；对电子舌传感信号做雷达图，选择苦味（Bitterness）、咸味（Saltiness）和鲜味（Umami）对不同样品的响应值较高且差异较大的传感器作为滋味特征指标。以苦、咸、鲜、W1W、W5S和a^*特征指标融合数据分析蒲公英整体性状，选择前2个主成分进行建模，累积贡献率为78.6%，能较好地对蒲公英的产地进行区分。聚类分析欧氏距离＝25时，样品划分为1、2两类，欧氏距离为21时，可划分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ 3类。通过偏最小二乘判别分析（partial least squares discriminant analysis，PLS-DA）筛选得到W5S、a^*和苦味为蒲公英产地区分的差异特征指标。结论 对“色”“气”“味”特征进行PCA和聚类分析可对蒲公英进行产地区分，为其质量评价提供参考。]]> 2025/5/23 15:34:45 3true 目的 建立阿胶UHPLC特征图谱及游离氨基酸含量测定方法，并结合指纹图谱相似度评价、化学计量学对不同批次的阿胶进行质量评价。方法 采用Waters BEH C₁₈（100 mm×2.1 mm，1.7 µm）柱，以0.1%甲酸水（A）-乙腈（B）为流动相，梯度洗脱，体积流量为0.3 mL/min，检测波长254 nm，柱温40 ℃，进样量2 μL。对14批阿胶进行特征图谱建立，确定共有峰并进行相似度评价；基于特征图谱共有峰面积测定结果，结合化学计量学手段对14批阿胶进行质量评价；并对甘氨酸（Gly）、L-脯氨酸（Pro）、L-丙氨酸（Ala）、L-甲硫氨酸（Met）、L-缬氨酸（Val）、L-亮氨酸（Leu）、L-苯丙氨酸（Phe）进行含量测定。结果 指纹图谱相似度评价结果表明，14批阿胶样品的相似度均≥0.927，说明各批次之间相似度良好，质量较稳定，共标定了9个共有峰，并指认了Gly、Pro、Ala、Met、Val、Leu、Phe 7个共有峰；化学计量学结果将14批阿胶划分为3类并筛选出导致不同批次间差异的差异性标志物为Met、Leu和Gly；Gly、Pro、Ala、Met、Val、Leu、Phe 7个成分的质量分数分别在319.8～1 227.27 µg/g、100.85～352.44 µg/g、113.92～531.06 µg/g、50.57～182.8 µg/g、47.5～116.53 µg/g、48.64～182.37 µg/g、45.65～124.69 µg/g。结论 建立的方法快捷，准确可靠，可为阿胶质量控制进一步提升提供实验参考。]]> 2025/5/23 15:34:45 2true 目的 收集来自云南及周边地区的附子（乌头Aconitum carmichaelii的子根）种质资源，从遗传多样性、农艺性状、品质成分3个方面进行综合鉴定，初步鉴选出育种和开发利用潜力较高的核心种质材料，为附子在我国西南地区的产业发展提供支撑。方法 采用SSR分子标记技术，研究了收集到的25份附子种质资源的遗传多样性，同时系统观测了其在田间生长中的重要农艺性状差异，并通过HPLC等技术分析了成熟附子内的初生（粗蛋白、可溶性糖、多糖、淀粉）和次生（总生物碱、乌头碱、次乌头碱、新乌头碱、苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱）代谢产物含量差异。结果 25份附子材料在遗传系数0.75和0.86处可被划分为5个大类群和13个小亚群，表现出了较丰富的遗传多样性，种质间遗传差异明显。附子的总产量与株高、功能叶数量、单株结实率呈显著的正相关关系，却与茎的粗细无明显关系。主成分分析（principal component analysis，PCA）进一步表明来自云南迪庆的材料与其他材料表型差异较明显。在品质特性上，附子的初生代谢成分含量差异总体十分显著，其中蛋白质和可溶性糖的含量变化幅度较高、多糖和淀粉次之；附子药用次生代谢成分含量亦表现出了明显的差异，其中总生物碱含量和乌头碱含量在不同编号中的差异较大。结论 最终从25份材料中鉴选出了5份来自云南的附子，编号为D3、L4、D8、D12、D10，可初步作为核心种质资源加以保存和开发利用，为后续低毒、高产、高品质和高适应性的附子良种繁育奠定基础。]]> 2025/5/23 15:34:45 1true