目的 在细胞水平评价血必净注射液（简称血必净）对水疱性口炎病毒（VSV）、甲型流感病毒（H1N1）、Ⅰ型单纯疱疹病毒（HSV-1）等多种病毒复制的影响，并探讨其与免疫系统相关的作用机制。方法 通过CCK-8法检测血必净对A549细胞活力的影响；采用流式细胞术及实时荧光定量PCR（qRT-PCR）技术检测血必净对VSV-eGFP、H1N1、HSV-1复制的影响；利用碘化丙啶（PI）染色检测血必净对病毒引起的细胞死亡的影响；qRT-PCR检测血必净对干扰素（IFN）及干扰素刺激基因（ISGs）mRNA水平的影响，以及其对病毒引起的促炎细胞因子基因表达的影响。结果 血必净以剂量相关方式抑制VSV、H1N1及HSV-1等病毒的复制（P＜0.001），并显著减少病毒诱发的细胞死亡（P＜0.05）；血必净能有效降低病毒感染诱导的IL1Β、IL6、TNFΑ基因的表达（P＜0.05），并抑制IFIT1、IFIT2等ISGs的表达（P＜0.05）。结论 血必净能在体外抑制多种病毒的复制，降低病毒诱导的细胞死亡和炎症反应，其抗病毒的机制可能独立于Ⅰ型IFN信号通路。]]> 2022/9/7 8:51:56 4true 目的 探索隐丹参酮在细胞水平的抗病毒作用，从药物调控宿主抗病毒免疫角度，阐释隐丹参酮抑制病毒复制的分子机制。方法 通过流式细胞术、实时荧光定量PCR（qRT-PCR）、免疫印迹实验（Western blotting）等方法检测隐丹参酮对水疱性口炎病毒（VSV）、甲型流感病毒（H1N1）、脑心肌炎病毒（EMCV）、Ⅰ型单纯疱疹病毒（HSV-1）复制的影响。基于基因集富集分析（GSEA），结合qRT-PCR、流式细胞术，分析隐丹参酮抗病毒的作用机制。在干扰素受体IFNAR1敲除A549细胞（Ifnar1^-/-A549）中，检测I型干扰素（IFN-I）通路对隐丹参酮抗病毒功能的影响。结果 隐丹参酮显著抑制VSV、H1N1、EMCV和HSV-1病毒的复制，在病毒进入前期和进入后阶段发挥抗病毒作用，对病毒吸附过程无影响；通过GSEA分析结合qRT-PCR验证，证明隐丹参酮促进IFN-I信号通路的激活；在Ifnar1^-/-A549细胞中，隐丹参酮的抗病毒功能受到抑制。结论 隐丹参酮通过促进IFN-I信号通路激活抑制多种病毒复制。]]> 2022/9/7 8:51:56 3true 目的 在巨噬细胞中确定四逆散中具有I型干扰素（IFN-I）调控作用的中药，并探究其具体作用靶点及主要作用成分。方法 通过实时荧光定量PCR（qRT-PCR）技术检测四逆散组方药材柴胡、枳实、白芍、甘草水提物对IFN-I通路相关基因表达的影响；通过CCK-8法检测甘草水提物对巨噬细胞RAW264.7细胞活力的影响；qRT-PCR法检测甘草水提物对IFNα2诱导的干扰素诱导基因（ISGs）mRNA表达水平的影响；蛋白免疫印迹（Western blotting）法检测甘草水提物对IFNα2诱导的JAK1、TYK2、STAT1、STAT2蛋白磷酸化水平的影响；qRT-PCR法检测甘草水提物中单体成分甘草酸、甘草苷、异甘草素、甘草素、18β甘草次酸对IFNα2诱导的ISGs的mRNA表达水平的影响。结果 四逆散组方药材柴胡、枳实、白芍各水提物对IFNα2诱导的Isg15和Ifit1表达水平无显著影响，而甘草水提物显著增加了IFNα2诱导的Isg15和Ifit1的基因表达水平（P＜0.01、0.001）；甘草水提物显著增加了IFNα2诱导的JAK1、TYK2、STAT1、STAT2蛋白磷酸化（P＜0.05、0.01、0.001）；甘草水提物中18β-甘草次酸能够显著增强IFNα2诱导的Isg15和Ifit1的mRNA表达（P＜0.001）。结论 甘草水提物能够显著激活JAK-STAT信号通路并诱导IFN-I下游ISGs的表达，具有较强的固有免疫激活作用。18β-甘草次酸可能是甘草水提物发挥激活IFN-I通路的主要有效成分之一。]]> 2022/9/7 8:51:56 2true 2022/9/7 8:51:56 1true