2013/12/10 14:32:44 14true 2013/12/10 14:32:44 13true 2014/3/11 17:01:31 12true 2014/3/11 17:01:31 11true 2014/3/11 17:01:31 10true 2014/3/11 17:15:36 9true 2014/3/11 17:15:37 8true 2014/3/11 17:15:37 7true 2021/1/4 0:00:00 6true 2021/1/4 0:00:00 5true 目的 研究花椒毒素及其同分异构体对药物代谢酶细胞色素P450（CYPs）的抑制差异。方法 采用计算机虚拟技术研究花椒毒素及其同分异构体香柑内酯、异佛手柑内酯与6种CYPs酶（CYP1A2、CYP2D6、CYP3A4、CYP2C19、CYP2C9、CYP2A6）的相互作用；采用Amber（ff99SB）软件进行花椒毒素、香柑内酯、异佛手柑内酯与CYP2A6的动力学模拟研究；采用“Cocktail”药物探针法进行验证，分别测定这3种同分异构体对人肝微粒CYPs酶活性的影响，以及对CYP2A6与CYP1A2的半数抑制浓度（IC₅₀）。结果 计算机模拟技术结果显示，花椒毒素、香柑内酯、异佛手柑内酯对6种CYPs结合能力不同，对CYP2A6的结合能力差异明显。分子对接、分子动力学结果表明，花椒毒素与CYP2A6形成的氢键ASN297：HD22-M：O4是花椒毒素与CYP2A6结合过程中最重要的且稳定的氢键，香柑内酯与ASN297产生的分子间氢键稳定性低于花椒毒素体系，异佛手柑内酯在动力学中所产生的氢键均不稳定；受体活性口袋中疏水性氨基酸与口袋形状互补是促成配体受体结合的重要因素。“Cocktail”药物探针法表明，花椒毒素、香柑内酯、异佛手柑内酯对CYPs均具有不同程度的抑制作用，其中对CYP1A2具有显著抑制作用，相对剩余酶活力分别为2.67%、4.64%、13.58%，其IC₅₀分别为1.42、2.29、5.12 μmol/L；对CYP2A6的抑制作用存在差异，相对剩余酶活力分别为8.10%、38.91%、74.98%，其IC₅₀值分别为3.89、44.03、103.30 μmol/L。结论 花椒毒素、香柑内酯、异佛手柑内酯对CYP1A2具有明显的抑制作用，对CYP2A6的抑制效果存在明显差异。甲氧基的取代位置与呋喃环骈合的位置对3种化合物与CYP2A6结合影响较大，其中CYP2A6活性口袋中ASN297是蛋白受体与配体结合的关键氨基酸残基。]]> 2021/1/4 0:00:00 4true 目的 通过分子动力学模拟黄酮醇糖苷（DF3G）在十二烷基硫酸钠（sodium dodecyl sulfate，SDS）水溶液中的增溶行为，通过HPLC-MS/MS法比较DF3G及DF3G的5% SDS水溶液（SDS-DF3G）的药动学差异。方法 通过GROMACS软件与GROM OS 54A7联合原子力场进行分子动力学模拟。健康SD大鼠随机分为DF3G（60 mg/kg）和SDSDF3G（DF3G 60 mg/kg）2组，ig给药1次，于给药后0.25、0.50、0.75、1.00、1.50、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00、24.00、30.00 h从SD大鼠眼眶后静脉丛取血，样品处理后，采用HPLC-MS/MS法测定血浆中DF3G的血药浓度。通过DAS2.0软件拟合计算药动学参数。结果 分子动力学模拟结果显示，DF3G分子中苯环部分可以自发地增溶到胶束的疏水栅栏层，而其糖环中的羟基分别与2个SDS的硫酸基中的氧原子形成2个氢键，从而增加DF3G在水中的溶解性。与DF3G组比较，SDS-DF3G组AUC_（0-t）、AUC_（0-∞）增大，且具有显著性差异（P<0.05）；CL_z/F显著降低（P<0.05）；C_max升高，t_max、MRT延长，t_1/2缩短。结论 从理论上证实了添加表面活性剂可以对药物分子在胶束溶液中增溶，以期为该类体系的实验研究提供理论依据。从实验角度证实了加入SDS可以提高DF3G体内生物利用度。]]> 2021/1/4 17:10:06 3true 目的 研究木兰花碱在大鼠体内外的主要代谢产物及代谢途径。方法 SD大鼠ig木兰花碱（50 mg/kg），收集0~24 h尿液和粪便，0~6 h胆汁以及1、2、4、6、8 h血浆；体外代谢采用肝微粒体温孵系统和肠菌培养液。利用LC-MS/MS对生物样品中的原型药及代谢产物进行鉴定。采用Agilent TC-C₁₈色谱柱（150 mm×4.6 mm，5 μm），以乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相梯度洗脱，体积流量1.0 mL/min，柱温30℃。质谱采用电喷雾电离源（ESI），正离子采集模式；扫描范围m/z100~1 000。根据药物体内代谢规则，结合木兰花碱的色谱保留时间和多级质谱碎片离子特征，推测其代谢产物的结构。结果 给药后生物样品中共鉴定出12个代谢产物，其中Ⅰ相代谢产物8个，Ⅱ相代谢产物4个。主要的代谢途径为羟基化、去甲基化、脱氢作用、酮基化、葡萄糖化、葡萄糖醛酸化及硫酸酯化。结论 木兰花碱在体内可发生Ⅰ相和Ⅱ相代谢，肠道菌群和肝药酶可催化木兰花碱发生Ⅰ相代谢转化，Ⅱ相代谢存在于肠道以外部位，最有可能的部位是肝脏。]]> 2021/1/4 17:10:06 2true 目的 使用原代培养的人肝细胞研究人参皂苷Rb₁和Rg₁、丹参素钠、冰片对细胞色素P450酶（CYP450）的诱导作用。方法 分别将3批次的冷冻原代人肝贴壁细胞进行接种培养，使用人参皂苷Rb₁和Rg₁、丹参素钠、冰片（30 μmol/L）对CYP1A2、CYP2B6和CYP3A4进行诱导，实时荧光定量PCR（qRT-PCR）法测定CYP450酶mRNA表达水平，评价4种单体成分对P450酶的诱导作用。阳性对照为20 μmol/L利福平（CYP3A4诱导剂）、50 μmol/L奥美拉唑钠（CYP1A2诱导剂）和1 mmol/L苯巴比妥钠（CYP2B6诱导剂）；阴性对照组为10 μmol/L红霉素。冰片（30 μmol/L）与利福平联合给药，观察冰片对利福平的CYP1A2、CYP2B6和CYP3A4诱导作用的影响。结果 3批次人肝细胞的诱导结果显示，阳性诱导剂奥美拉唑、苯巴比妥、利福平分别显著诱导CYP1A2、CYP2B6、CYP3A4的表达，阴性对照红霉素对CYP1A2、CYP2B6及CYP3A4的mRNA表达水平未见明显影响，人参皂苷Rb₁和Rg₁、丹参素钠、冰片在30 μmol/L浓度给药时，对3批次人肝细胞的CYP1A2、CYP2B6和CYP3A4 mRNA表达水平未见明显影响；30 μmol/L冰片与利福平联合给药，与利福平单独给药比较，3批次肝细胞的CYP2B6、CYP3A4 mRNA表达水平均减少，对CYP3A4的mRNA表达水平影响尤为显著。结论 人参皂苷Rb₁和Rg₁、丹参素钠、冰片在30 μmol/L浓度给药时，对3批次人肝细胞的CYP1A2、CYP2B6和CYP3A4均没有诱导作用。冰片与利福平联合用药时，可以阻断利福平对CYP2B6和CYP3A4的诱导作用，对CYP3A4的影响尤为显著。]]> 2021/1/4 17:10:06 1true