2018/5/9 10:21:37 6true 2018/5/9 10:21:37 5true 2018/5/9 10:21:37 4true 目的 使用Ames波动试验和GADD45a-GFP GreenScreen两种快速筛选方法，对有毒中药芫花和了哥王的主要单体成分大黄素和芫花素的遗传毒性进行评价。方法 （1）Ames波动试验：在非代谢活化（-S9）和代谢活化（+S9）条件下使用鼠伤寒沙门菌TA100开展基于96孔液态培养法的细菌回复性突变试验，大黄素和芫花素（终质量浓度范围均为0.1~10 μg/mL）与菌液充分混合后在37℃下培养72 h。（2）GADD45a GreenScreen高通量筛选试验：在非代谢活化（-S9）和代谢活化条件下（+S9）将表达GADD45a基因的TK细胞（GenM-T01和GenM-C01）与大黄素（0.13~32.0 μg/mL）和芫花素（0.07~16.0 μg/mL）分别作用48 h（-S9）和3 h（+S9），之后通过酶标仪和流式细胞仪检测绿色荧光蛋白（enhanced green fluorescent protein，EGFP）的荧光强度。结果 有无代谢活化条件下，10 μg/mL大黄素均可诱导TA100的回复性突变率显著性升高（P<0.05、P<0.001）；代谢活化条件下，10 μg/mL芫花素可诱导TA100的回复性突变率显著性升高（P<0.001），16.0 μg/mL芫花素诱导TK6细胞表达的GADD45a-EGFP荧光强度也超过了遗传毒性阈值（1.3倍）。结论 当前研究提示大黄素和芫花素为可疑遗传毒性，需要开展深入研究明确其遗传毒性及机制。Ames波动试验和GADD45a GreenScreen是良好的高通量筛选备选试验，可极大优化浩繁的药物的毒性筛选工作，尤其适宜诸如中药等成分和配伍复杂的药物。]]> 2018/5/9 10:21:37 3true 目的 探讨朱砂、含朱砂制剂（柏子养心片）及甲基汞对大鼠的体内外毒性，为其临床安全用药提供科学依据。方法 ①对比甲基汞、朱砂及柏子养心片体外对人肝HL-7702细胞和人肾近曲小管上皮HK2细胞的毒性，计算半数抑制浓度（IC₅₀）。②SD大鼠随机分为对照组，朱砂组0.1 g/kg，柏子养心片0.2、0.4、0.8 g/kg组，甲基汞组0.001 g/kg，每天ig 1次，连续给药90 d后，取血及肝、肾组织；试剂盒法检测血清中丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）、肌酐（CREA）、尿素氮（BUN）水平，测汞仪固体直接进样法检测肝、肾组织中汞蓄积量，并对大鼠肝脏和肾脏做组织病理学检查。结果 体外试验表明，朱砂、柏子养心片及甲基汞对HL-7702细胞的IC₅₀分别为7.852、6.035、0.009 5 g/L；对HK2细胞的IC₅₀分别为6.297、4.484、0.008 9 g/L。亚慢性毒性试验表明，甲基汞组大鼠肝、肾组织中汞蓄积量及血清中ALT、AST、CREA、BUN值均显著高于对照组，而朱砂及柏子养心片（高、中、低剂量）组与对照组比较均没有显著性差异；甲基汞组大鼠肝脏呈现肝细胞变性，肾脏可见明显肾小管损伤，而朱砂及柏子养心片（高、中、低剂量）组与对照比较没有明显差异。结论 朱砂及柏子养心片的体内外毒性均显著低于甲基汞，在目前药典规定的临床用量下使用安全性较好。]]> 2018/5/9 10:21:37 2true 2018/5/9 10:21:37 1true